JPH07103041B2 - 悪性腫瘍治療補助剤 - Google Patents
悪性腫瘍治療補助剤Info
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- JPH07103041B2 JPH07103041B2 JP1085612A JP8561289A JPH07103041B2 JP H07103041 B2 JPH07103041 B2 JP H07103041B2 JP 1085612 A JP1085612 A JP 1085612A JP 8561289 A JP8561289 A JP 8561289A JP H07103041 B2 JPH07103041 B2 JP H07103041B2
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Description
【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、白金錯体抗悪性腫瘍剤投与後の副作用を抑制
・軽減させる治療補助剤に関する。
・軽減させる治療補助剤に関する。
［技術の背景及び先行技術］ 悪性腫瘍の治療には、外科療法、化学療法及び放射線療
法等がある。近年、化学療法に使用される薬剤の開発及
び外科的技術等の進歩により、その治療効果は向上して
いる。しかし、抗悪性腫瘍剤の中で、顕著な治療効果を
示し、かつ副作用の少ないものはほとんどなく、その投
与量に限界があるため、完全に悪性腫瘍を排除するまで
には至つていない場合もあり、再発症もしばしば見られ
る。そして、副作用の中には、造血器及び各種臓器に対
する著しい毒性を示し臓器障害又は重篤な感染症を引き
起すものがある。
法等がある。近年、化学療法に使用される薬剤の開発及
び外科的技術等の進歩により、その治療効果は向上して
いる。しかし、抗悪性腫瘍剤の中で、顕著な治療効果を
示し、かつ副作用の少ないものはほとんどなく、その投
与量に限界があるため、完全に悪性腫瘍を排除するまで
には至つていない場合もあり、再発症もしばしば見られ
る。そして、副作用の中には、造血器及び各種臓器に対
する著しい毒性を示し臓器障害又は重篤な感染症を引き
起すものがある。
白金錯体抗悪性腫瘍剤が優れた抗腫瘍活性を持ち、（B.
Rosenbergら、Nature、205、698（1965））、その中で
最も高い抗腫瘍活性を持つシスジアミンジクロロプラチ
ウム（シスプラチン、CDDP）は、それまでの化学療法の
治療が困難であつた尿路悪性腫瘍、膀胱腫瘍及び婦人科
の腫瘍に対して極めて高い治療効果を発揮することが報
告されている（Merrin.C.E.Cancer Treat.Rep.,63,1579
（1979））。しかし、腎臓及び造血器に対する毒性が著
しく強く、腎不全、血小板減少、白血球減少、貧血など
の重篤に副作用を惹起し、臨床上の大きな問題となつて
いる。
Rosenbergら、Nature、205、698（1965））、その中で
最も高い抗腫瘍活性を持つシスジアミンジクロロプラチ
ウム（シスプラチン、CDDP）は、それまでの化学療法の
治療が困難であつた尿路悪性腫瘍、膀胱腫瘍及び婦人科
の腫瘍に対して極めて高い治療効果を発揮することが報
告されている（Merrin.C.E.Cancer Treat.Rep.,63,1579
（1979））。しかし、腎臓及び造血器に対する毒性が著
しく強く、腎不全、血小板減少、白血球減少、貧血など
の重篤に副作用を惹起し、臨床上の大きな問題となつて
いる。
一方、コロニー刺激因子は、哺乳動物の造血幹細胞の分
化・増殖を刺激する因子であり、現在までに単球−マク
ロフアージコロニー刺激因子（Ｍ−CSF）、顆粒球−単
球系幹細胞に作用する因子（GM−CSF）、顆粒球系幹細
胞に作用する因子（Ｇ−CSF）、多能性幹細胞に作用す
る因子（Multi−CSF）の４種が知られている。ヒトマク
ロフアージコロニー刺激因子は純化され、その蛋白質及
び遺伝子構造についても明らかにされており（特開昭64
−22899号公報）、また顆粒球減少症に対する有用性が
明らかにされ、医薬として大きく期待されており（Moto
yoshi Ket al,Experimental Hematology,vol 14、1069
−1075（1986））、既に臨床試験が行われておりその安
全性が確認され副作用がほとんどないことが明らかにさ
れている （Motoyoshi K et al,Immuno−biology,vol 172、205−
212（1986））。
化・増殖を刺激する因子であり、現在までに単球−マク
ロフアージコロニー刺激因子（Ｍ−CSF）、顆粒球−単
球系幹細胞に作用する因子（GM−CSF）、顆粒球系幹細
胞に作用する因子（Ｇ−CSF）、多能性幹細胞に作用す
る因子（Multi−CSF）の４種が知られている。ヒトマク
ロフアージコロニー刺激因子は純化され、その蛋白質及
び遺伝子構造についても明らかにされており（特開昭64
−22899号公報）、また顆粒球減少症に対する有用性が
明らかにされ、医薬として大きく期待されており（Moto
yoshi Ket al,Experimental Hematology,vol 14、1069
−1075（1986））、既に臨床試験が行われておりその安
全性が確認され副作用がほとんどないことが明らかにさ
れている （Motoyoshi K et al,Immuno−biology,vol 172、205−
212（1986））。
しかし、抗悪性腫瘍剤の上記副作用に対するヒト単球−
マクロフアージコロニー刺激因子の利用可能性について
は未検討のままであつた。
マクロフアージコロニー刺激因子の利用可能性について
は未検討のままであつた。
［発明の目的及び要約］ 白金錯体抗悪性腫瘍剤において最も抗悪性腫瘍活性の高
いCDDPの副作用の抑制・軽減剤について、研究した結
果、ヒト単球−マクロフアージコロニー刺激因子が白金
錯体抗悪性腫瘍剤によつて惹起される腎障害及び造血器
障害を極めて軽減すること、並びに白金錯体抗悪性腫瘍
剤の急性毒性試験における死亡率を低下させることを見
い出し本発明を完成した。
いCDDPの副作用の抑制・軽減剤について、研究した結
果、ヒト単球−マクロフアージコロニー刺激因子が白金
錯体抗悪性腫瘍剤によつて惹起される腎障害及び造血器
障害を極めて軽減すること、並びに白金錯体抗悪性腫瘍
剤の急性毒性試験における死亡率を低下させることを見
い出し本発明を完成した。
本発明は、ヒト単球−マクロフアージコロニー刺激因子
を有効成分とする。白金錯体抗悪性腫瘍剤投与による悪
性腫瘍治療の治療補助剤である。また、本発明は、ヒト
単球−マクロフアージコロニー刺激因子を有効成分とす
る白金錯体抗悪性腫瘍剤の副作用抑制剤である。更にま
た、本発明は、ヒト単球−マクロフアージコロニー刺激
因子を有効成分とする白金錯体抗悪性腫瘍投与に起因す
る腎臓障害及び又は造血器障害の抑制剤である。
を有効成分とする。白金錯体抗悪性腫瘍剤投与による悪
性腫瘍治療の治療補助剤である。また、本発明は、ヒト
単球−マクロフアージコロニー刺激因子を有効成分とす
る白金錯体抗悪性腫瘍剤の副作用抑制剤である。更にま
た、本発明は、ヒト単球−マクロフアージコロニー刺激
因子を有効成分とする白金錯体抗悪性腫瘍投与に起因す
る腎臓障害及び又は造血器障害の抑制剤である。
［発明の技術構成］ 本発明で用いるヒト単球−マクロフアージコロニー刺激
因子（以下、ヒトＭ−CSFという。）は、公知の方法 （特開昭63−198700号公報、特開昭63−250400号公報、
特開昭64−22899号公報）によつて精製したものを凍結
乾燥して調製した。例えば特開昭63−250400号公報記載
の方法でヒト尿由来のヒトＭ−CSFを次のとおり調製し
た。すなわち純化したヒトＭ−CSFをウザギに免疫して
得た抗ヒトＭ−CSF抗体を0.1Mリン酸緩衝液（pH7.0）中
で透析し、20mg/ml濃度に調製した。該抗体溶液200ml
を、あらかじめ蒸留水及び0.1Mリン酸緩衝液で洗浄した
100gのフオルミル−セルロフアインへ加え、室温で２時
間攪拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム700mgを
加えて、更に16時間攪拌し、フオルミル−セルロフアイ
ンと抗ヒトＭ−CSF抗体を結合させ抗体結合支持体を調
製した。結合後、0.2Mトリス−塩酸緩衝液で洗浄し、更
に水素化シアノホウ素ナトリウム500mgを含むトリス緩
衝液200mlを加え、室温で４時間攪拌して、未反応基を
不活化した。次いで抗体結合支持体を0.5MNaClを含有す
る0.02Mリン酸緩衝液で十分洗浄した。抗体結合支持体
は支持体1g当り29.5mgの抗CSF抗体を結合していた。次
に、健常人尿1,000Lを限外濾過濃縮機で濃縮し、脱塩し
た後、DEAE−セルロースに吸着させ、非吸着の夾雑物質
を除去し、0.3MNaCl溶液で溶出し、該溶出液に0.5M濃度
になるように塩化ナトリウムを加えてヒトＭ−CSFを溶
出し、該溶出液に0.5Mになるように塩化ナトリウムを加
えてヒトＭ−CSFを含有する溶液を調製した。このヒト
Ｍ−CSFの比活性は、２×105単位/mgであった。上記抗
体結合支持体100gに対し、このヒトＭ−CSFを含有する
溶液（全量500ml）を加え、10℃以下で一夜攪拌しバツ
チ式クロマトグラフイー処理を行った。攪拌後、ガラス
フイルターで濾過して、抗体結合支持体を集め、0.5MNa
Clを含有する0.02Mリン酸緩衝液で該抗体結合支持体を
十分に洗浄した。洗浄後、0.2M酢緩衝液（pH2.5）500ml
を加え、10℃、１時間攪拌して、ヒトＭ−CSFを溶出し
た。溶出液のpH7.0にした後、限外濾過膜で濃縮・脱塩
して、精製ヒトＭ−CSF約10mgを得た。精製ヒトＭ−CSF
の比活性は5.2×107単位/mg、SDS−PAGE法による純度は
90％以上であつた。得られたヒトＭ−CSFの理化学的性
質は次の通りである。
因子（以下、ヒトＭ−CSFという。）は、公知の方法 （特開昭63−198700号公報、特開昭63−250400号公報、
特開昭64−22899号公報）によつて精製したものを凍結
乾燥して調製した。例えば特開昭63−250400号公報記載
の方法でヒト尿由来のヒトＭ−CSFを次のとおり調製し
た。すなわち純化したヒトＭ−CSFをウザギに免疫して
得た抗ヒトＭ−CSF抗体を0.1Mリン酸緩衝液（pH7.0）中
で透析し、20mg/ml濃度に調製した。該抗体溶液200ml
を、あらかじめ蒸留水及び0.1Mリン酸緩衝液で洗浄した
100gのフオルミル−セルロフアインへ加え、室温で２時
間攪拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム700mgを
加えて、更に16時間攪拌し、フオルミル−セルロフアイ
ンと抗ヒトＭ−CSF抗体を結合させ抗体結合支持体を調
製した。結合後、0.2Mトリス−塩酸緩衝液で洗浄し、更
に水素化シアノホウ素ナトリウム500mgを含むトリス緩
衝液200mlを加え、室温で４時間攪拌して、未反応基を
不活化した。次いで抗体結合支持体を0.5MNaClを含有す
る0.02Mリン酸緩衝液で十分洗浄した。抗体結合支持体
は支持体1g当り29.5mgの抗CSF抗体を結合していた。次
に、健常人尿1,000Lを限外濾過濃縮機で濃縮し、脱塩し
た後、DEAE−セルロースに吸着させ、非吸着の夾雑物質
を除去し、0.3MNaCl溶液で溶出し、該溶出液に0.5M濃度
になるように塩化ナトリウムを加えてヒトＭ−CSFを溶
出し、該溶出液に0.5Mになるように塩化ナトリウムを加
えてヒトＭ−CSFを含有する溶液を調製した。このヒト
Ｍ−CSFの比活性は、２×105単位/mgであった。上記抗
体結合支持体100gに対し、このヒトＭ−CSFを含有する
溶液（全量500ml）を加え、10℃以下で一夜攪拌しバツ
チ式クロマトグラフイー処理を行った。攪拌後、ガラス
フイルターで濾過して、抗体結合支持体を集め、0.5MNa
Clを含有する0.02Mリン酸緩衝液で該抗体結合支持体を
十分に洗浄した。洗浄後、0.2M酢緩衝液（pH2.5）500ml
を加え、10℃、１時間攪拌して、ヒトＭ−CSFを溶出し
た。溶出液のpH7.0にした後、限外濾過膜で濃縮・脱塩
して、精製ヒトＭ−CSF約10mgを得た。精製ヒトＭ−CSF
の比活性は5.2×107単位/mg、SDS−PAGE法による純度は
90％以上であつた。得られたヒトＭ−CSFの理化学的性
質は次の通りである。
ａ）分子量 同一のサブユニツトから成るホモ２量体であつて、ドデ
シル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動で
測定した分子量が70,000〜90,000ダルトンであり、還元
剤で解離させて生物活性を消失させたサブユニツトにつ
いてドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電
気泳動で測定した分子量は35,000〜45,000ダルトンであ
る。
シル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動で
測定した分子量が70,000〜90,000ダルトンであり、還元
剤で解離させて生物活性を消失させたサブユニツトにつ
いてドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電
気泳動で測定した分子量は35,000〜45,000ダルトンであ
る。
ｂ）サブユニツトのアミノ酸配列 ホモ２量体を構成するサブユニツト蛋白質は、次に示す
214乃至238個のアミノ酸配列を有し、122番目及び140番
目のアスパラギンはそれぞれアスパラギン（Asn）−ｘ
−スレオニン（Thr）／セリン（Ser）で表される典型的
なＮ−グリコシド結合部位を有する。ここでｘは任意の
アミノ酸を示す。
214乃至238個のアミノ酸配列を有し、122番目及び140番
目のアスパラギンはそれぞれアスパラギン（Asn）−ｘ
−スレオニン（Thr）／セリン（Ser）で表される典型的
なＮ−グリコシド結合部位を有する。ここでｘは任意の
アミノ酸を示す。
Glu−Glu−Val−Ser−Glu−Tyr−Cys−Ser−His−Met−
lle−Gly−Ser−Gly−His−Leu−Gln−Ser−Leu−Gln−
Arg−Leu−lle−Asp−Ser−Gln−Met−Glu−Thr−Ser−
Cys−Gln−lle−Thr−Phe−Glu−Phe−Val−Asp−Grn−
Gru−Gln−Leu−Lys−Asp−Pro−Val−Cys−Tyr−Leu−
Lys−Lys−Ala−Phe−Leu−Leu−Val−Gln−Asp−lle−
Met−Glu−Asp−Thr−Met−Arg−Phe−Arg−Asp−Asn−
Thr−Pro−Asn−Ala−lle−Ala−lle−Val−Gln−Leu−
Gln−Glu−Leu−Ser−leu−Arg−Leu−Lys−Ser−Cys−
Phe−Thr−Lys−Asp−Tyr−Glu−Glu−His−Asp−Lys−
Ala−Cys−Val−Arg−Thr−Phe−Tyr−Glu−Thr−Pro−
Leu−Gln−Leu−Leu−Glu−Lys−Val−Lys−Asn−Val−
Phe−Asn−Glu−Thr−Lys−Asn−leu−Leu−Asp−Lys−
Asp−Trp−Asn−lle−Phe−Ser−Lys−Asn−Cys−Asn−
Asn−Ser−Phe−Ala−Glu−Cys−Ser−Ser−Gln−Asp−
Val−Val−Thr−Lys−Pro−Asp−Cys−Asn−Cys−Leu−
Tyr−Pro−Lys−Ala−lle−Pro−Ser−Ser−Asp−Pro−
Ala−Ser−Val−Ser−Pro−His−Gln−Pro−Leu−Ala−
Pro−Ser−Met−Ala−Pro−Val−Ala−Gly−Leu−Thr−
Trp−Glu−Asp−Ser−Glu−Gly−Thr−Glu−Gly−Ser−
Ser−Leu−Leu−Pro−Gly−Glu−Gln−Pro−Leu−His−
Thr−Val−Asp−Pro−Gly−Ser−Ala−Lys−Gln−Arg−
Pro−Pro−Arg−Ser−Thr−Cys−Gln−Ser−Phe−Glu−
Pro−Pro−Glu−Thr−Pro−Val−Val−Lys− ｃ）等電点 ポリアクリルアミドゲル等電点電気泳動法及びシユクロ
ース密度勾配等電点泳動法で測定した等電点（pI）は3.
1〜3.7である。
lle−Gly−Ser−Gly−His−Leu−Gln−Ser−Leu−Gln−
Arg−Leu−lle−Asp−Ser−Gln−Met−Glu−Thr−Ser−
Cys−Gln−lle−Thr−Phe−Glu−Phe−Val−Asp−Grn−
Gru−Gln−Leu−Lys−Asp−Pro−Val−Cys−Tyr−Leu−
Lys−Lys−Ala−Phe−Leu−Leu−Val−Gln−Asp−lle−
Met−Glu−Asp−Thr−Met−Arg−Phe−Arg−Asp−Asn−
Thr−Pro−Asn−Ala−lle−Ala−lle−Val−Gln−Leu−
Gln−Glu−Leu−Ser−leu−Arg−Leu−Lys−Ser−Cys−
Phe−Thr−Lys−Asp−Tyr−Glu−Glu−His−Asp−Lys−
Ala−Cys−Val−Arg−Thr−Phe−Tyr−Glu−Thr−Pro−
Leu−Gln−Leu−Leu−Glu−Lys−Val−Lys−Asn−Val−
Phe−Asn−Glu−Thr−Lys−Asn−leu−Leu−Asp−Lys−
Asp−Trp−Asn−lle−Phe−Ser−Lys−Asn−Cys−Asn−
Asn−Ser−Phe−Ala−Glu−Cys−Ser−Ser−Gln−Asp−
Val−Val−Thr−Lys−Pro−Asp−Cys−Asn−Cys−Leu−
Tyr−Pro−Lys−Ala−lle−Pro−Ser−Ser−Asp−Pro−
Ala−Ser−Val−Ser−Pro−His−Gln−Pro−Leu−Ala−
Pro−Ser−Met−Ala−Pro−Val−Ala−Gly−Leu−Thr−
Trp−Glu−Asp−Ser−Glu−Gly−Thr−Glu−Gly−Ser−
Ser−Leu−Leu−Pro−Gly−Glu−Gln−Pro−Leu−His−
Thr−Val−Asp−Pro−Gly−Ser−Ala−Lys−Gln−Arg−
Pro−Pro−Arg−Ser−Thr−Cys−Gln−Ser−Phe−Glu−
Pro−Pro−Glu−Thr−Pro−Val−Val−Lys− ｃ）等電点 ポリアクリルアミドゲル等電点電気泳動法及びシユクロ
ース密度勾配等電点泳動法で測定した等電点（pI）は3.
1〜3.7である。
ｄ）円二色スペクトル 円二色性分散計による遠紫外部CDスペクトルは波長208n
m及び222nmにそれぞれ極小ピークがありα−ヘリツクス
構造を含んでいる。
m及び222nmにそれぞれ極小ピークがありα−ヘリツクス
構造を含んでいる。
ｅ）熱安定性 60±0.5℃で60分間加熱しても生物活性は失なわれな
い。
い。
ｆ）赤外線吸収スペクトル 波数1680cm-1、1200cm-1及び1130cm-1に強度吸収、波数
1540cm-1、1430cm-1および1070cm-1に中度吸収を示す赤
外線吸収スペクトラムを有する。
1540cm-1、1430cm-1および1070cm-1に中度吸収を示す赤
外線吸収スペクトラムを有する。
以上の如き、ヒト尿由来のヒトＭ−CSFは、白金錯体抗
悪性腫瘍剤の投与による種々の障害即ち腎臓障害、造血
器障害、毒性等の服作用の発現を待つことなく、予めそ
の発現を抑止すべく抗悪性腫瘍剤投与直後から又は併用
しながら投与することができる。またヒト尿由来のヒト
Ｍ−CSF以外にも、ヒトの各種細胞の培養液から精製し
たヒトＭ−CSFを用いてもよい。
悪性腫瘍剤の投与による種々の障害即ち腎臓障害、造血
器障害、毒性等の服作用の発現を待つことなく、予めそ
の発現を抑止すべく抗悪性腫瘍剤投与直後から又は併用
しながら投与することができる。またヒト尿由来のヒト
Ｍ−CSF以外にも、ヒトの各種細胞の培養液から精製し
たヒトＭ−CSFを用いてもよい。
ヒトＭ−CSFは通常、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下、
腹腔内などの非経口投与により投与するこどできる。投
与用の製剤としては、注射剤、注入剤などが挙げられ、
これら製剤はそれ自体公知の方法によつて調製すること
ができる。例えば、ヒトＭ−CSFを適当な緩衝液に加え
て、無菌濾過し、ガラスバイアル中に無菌的に充填して
密封し、必要に応じて凍結乾燥して製剤を調製すること
ができる。
腹腔内などの非経口投与により投与するこどできる。投
与用の製剤としては、注射剤、注入剤などが挙げられ、
これら製剤はそれ自体公知の方法によつて調製すること
ができる。例えば、ヒトＭ−CSFを適当な緩衝液に加え
て、無菌濾過し、ガラスバイアル中に無菌的に充填して
密封し、必要に応じて凍結乾燥して製剤を調製すること
ができる。
ヒトＭ−CSFは特にヒト血清アルブミン及び／又はゼラ
チンと共に製剤化することによりその安定性が著しく向
上する。ヒト血清アルブミン、ゼラチンの使用量は、ヒ
トＭ−CSFに対して100重量倍以上が望ましい。
チンと共に製剤化することによりその安定性が著しく向
上する。ヒト血清アルブミン、ゼラチンの使用量は、ヒ
トＭ−CSFに対して100重量倍以上が望ましい。
本発明で対象とする白金錯体抗悪性腫瘍剤としては、シ
スプラチン（CDDP）が代表的なものしとして挙げられる
が、これに以外にもカルボプラチン（CBDA）、254−
Ｓ、スピロプラチン（DACCP）などの白金錯体抗悪性腫
瘍剤の場合にも本発明の治療補助剤を適用することがで
きる。白金錯体抗悪性腫瘍剤の投与量は患者の年齢、症
状によつて変動し得るが、通常15〜35mg/mm2（体表面
積）である。これに対するヒトＭ−CSFの投与量は、患
者の年齢症状によつて変動し得るが，通常４×104〜160
×104単位/Kg体重／日、好ましくは16×104〜80×104単
位/Kg体重／日である。
スプラチン（CDDP）が代表的なものしとして挙げられる
が、これに以外にもカルボプラチン（CBDA）、254−
Ｓ、スピロプラチン（DACCP）などの白金錯体抗悪性腫
瘍剤の場合にも本発明の治療補助剤を適用することがで
きる。白金錯体抗悪性腫瘍剤の投与量は患者の年齢、症
状によつて変動し得るが、通常15〜35mg/mm2（体表面
積）である。これに対するヒトＭ−CSFの投与量は、患
者の年齢症状によつて変動し得るが，通常４×104〜160
×104単位/Kg体重／日、好ましくは16×104〜80×104単
位/Kg体重／日である。
［実施例］ 以下に、ヒトＭ−CSFを使用した本発明の実施例を次に
示す。
示す。
実施例１ 白金錯体抗悪性腫瘍剤の急性毒性を軽減する
ヒトＭ−CSFの効果 （１）本発明の治療補助剤（以下、本剤という）の調製 pH7.2の20mMリン酸緩衝液に、ヒト尿由来のヒトＭ−CSF
及び表１の各蛋白質を添加し、ヒトＭ−CSF濃度10μg/m
lの調製液とし、ニトロセルロース系無菌濾過膜にて無
菌濾過しガラスバイアル中に無菌的に1ml充填・密封し
て本剤を調製した。
ヒトＭ−CSFの効果 （１）本発明の治療補助剤（以下、本剤という）の調製 pH7.2の20mMリン酸緩衝液に、ヒト尿由来のヒトＭ−CSF
及び表１の各蛋白質を添加し、ヒトＭ−CSF濃度10μg/m
lの調製液とし、ニトロセルロース系無菌濾過膜にて無
菌濾過しガラスバイアル中に無菌的に1ml充填・密封し
て本剤を調製した。
（２）本剤の安定性 本剤の安定性は、Ｍ−CSF活性をマウス骨髄細胞を用い
た軟寒天法を用いて測定した。その結果は表１に示す如
く、ヒト血清アルブミン又はゼラチン1mg/ml以上添加し
た本剤の生物活性は、試験開始時（製造直後）の70％以
上維持されており安定とされる。
た軟寒天法を用いて測定した。その結果は表１に示す如
く、ヒト血清アルブミン又はゼラチン1mg/ml以上添加し
た本剤の生物活性は、試験開始時（製造直後）の70％以
上維持されており安定とされる。
（３）本剤の急性毒性軽減効果 一群10匹のC3H/HeNマウスに白金錯体抗悪性腫瘍剤CDDP1
9mg/Kg・体重 （LD50相当量）を腹腔内投与した。翌日よりヒト血清ア
ルブミン添加量5.0mg/mlの本剤を100×104単位/Kg・体
重、500×104単位/Kg・体重、1000×104単位/Kg・体重
の投与量にて５日間連続静脈内投与し、７日後のマウス
の死亡率を測定した。
9mg/Kg・体重 （LD50相当量）を腹腔内投与した。翌日よりヒト血清ア
ルブミン添加量5.0mg/mlの本剤を100×104単位/Kg・体
重、500×104単位/Kg・体重、1000×104単位/Kg・体重
の投与量にて５日間連続静脈内投与し、７日後のマウス
の死亡率を測定した。
その結果表２に示される如く、本剤投与により死亡率は
顕著に減少し、本剤による白金錯体抗悪性腫瘍剤による
毒性は顕著に軽減された。この死亡率の減少は本剤の投
与量の増加に依存していた。
顕著に減少し、本剤による白金錯体抗悪性腫瘍剤による
毒性は顕著に軽減された。この死亡率の減少は本剤の投
与量の増加に依存していた。
本実施例から、本剤は、白金錯体抗悪性腫瘍剤の投与と
併用することにより、その毒性を軽減させる治療補助剤
として有効であることが知れる。
併用することにより、その毒性を軽減させる治療補助剤
として有効であることが知れる。
実施例２ 白金錯体抗悪性腫瘍剤投与に起因する造血器
障害及び腎臓障害に対する本剤の効果 実施例１と同様にして得た本剤のうち、ゼラチン5mg添
加のものを用い、実施した。
障害及び腎臓障害に対する本剤の効果 実施例１と同様にして得た本剤のうち、ゼラチン5mg添
加のものを用い、実施した。
白金錯体抗悪性腫瘍剤による造血器障害及び腎臓障害に
対する本剤の作用は下記の方法にて検討した。一群５匹
からなるC3H/HeNに白金錯体抗悪性腫瘍剤シスプラチン
を4mg/Kg・体重／日の投与量で２日間連続腹腔内投与し
た。シスプラチンを投与翌日よりゼラチン5mg添加の本
剤320×104単位/kg・体重を１日１回５日間連続腹腔内
に投与した。シスプラチン投与後１日、３日、５日、７
日、９日、11日及び14日目に末梢血の白血球数、血小板
数および血清BUN（尿素窒素）量、クレアチニン量を測
定した造血器障害及び腎臓障害に対する作用を検討し
た。その結果を第１図、第２図及び第３図に示す。
対する本剤の作用は下記の方法にて検討した。一群５匹
からなるC3H/HeNに白金錯体抗悪性腫瘍剤シスプラチン
を4mg/Kg・体重／日の投与量で２日間連続腹腔内投与し
た。シスプラチンを投与翌日よりゼラチン5mg添加の本
剤320×104単位/kg・体重を１日１回５日間連続腹腔内
に投与した。シスプラチン投与後１日、３日、５日、７
日、９日、11日及び14日目に末梢血の白血球数、血小板
数および血清BUN（尿素窒素）量、クレアチニン量を測
定した造血器障害及び腎臓障害に対する作用を検討し
た。その結果を第１図、第２図及び第３図に示す。
第１図において、横軸は、CDDP投与後の日数を、縦軸は
白血球数（×102／mm3）を示し、 は本剤投与群を、 は対照群を示す。
白血球数（×102／mm3）を示し、 は本剤投与群を、 は対照群を示す。
第２図において、横軸は、CDDP投与後の日数を、縦軸は
血小板数（×104／mm3）を示し、 は本剤投与群を、 は対照群を示す。
血小板数（×104／mm3）を示し、 は本剤投与群を、 は対照群を示す。
両図において＊印は危険率５％で有意差が有ることを示
す。
す。
本剤を投与したマウスの末梢血白血球数及び血小板数は
非投与群に比較しその減少抑制及び回復の促進が認めら
れ、本剤の白金錯体抗悪性腫瘍剤の造血器障害に対する
効果が認められた。又血清BUN量、クレアチン量の増加
は非投与群に比較し軽度であり、本剤が腎臓障害に対し
ても、効果があることが明らかとなつた。
非投与群に比較しその減少抑制及び回復の促進が認めら
れ、本剤の白金錯体抗悪性腫瘍剤の造血器障害に対する
効果が認められた。又血清BUN量、クレアチン量の増加
は非投与群に比較し軽度であり、本剤が腎臓障害に対し
ても、効果があることが明らかとなつた。
［発明の効果］ （１）本発明は、白金錯体抗悪性腫瘍剤の副作用を軽減
し、その抗悪性腫瘍効果を有効に利用し得るようにする
治療補助剤を提供する。
し、その抗悪性腫瘍効果を有効に利用し得るようにする
治療補助剤を提供する。
（２）本発明は、白金錯体抗悪性腫瘍剤投与に起因する
腎臓障害及び造血器障害を抑制し、その抗悪性腫瘍効果
を有効に利用し得るようにする治療補助剤を提供する。
腎臓障害及び造血器障害を抑制し、その抗悪性腫瘍効果
を有効に利用し得るようにする治療補助剤を提供する。
（３）本剤は、白金錯体抗悪性腫瘍剤と同時又はその投
与直後に投与することにより、該腫瘍剤の副作用を予め
抑止し得る。
与直後に投与することにより、該腫瘍剤の副作用を予め
抑止し得る。
第１図は、CDDPを投与されたマウスの白血球回復促進作
用を示すグラフであり、第２図は、CDDPを投与されたマ
ウスの血小板回復促進作用を示すグラフである。
用を示すグラフであり、第２図は、CDDPを投与されたマ
ウスの血小板回復促進作用を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 横田 肇 東京都港区白金２―５―１―406 (72)発明者 ▲吉▼田 賀津雄 東京都東大和市南街１―37―15 (56)参考文献 特開 平１−207244（ＪＰ，Ａ) 国際公開87／06954（ＷＯ，Ａ)
Claims (4)
- 【請求項１】ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因
子を有効成分とする、白金錯体抗悪性腫瘍剤投与に起因
する腎臓障害抑制剤。 - 【請求項２】ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因
子を有効成分とする、白金錯体抗悪性腫瘍剤投与に起因
する急性毒性軽減剤。 - 【請求項３】ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因
子が、以下に示す物理化学的性質を有する人尿由来のヒ
ト単球−マクロファージコロニー刺激因子である、請求
項１または２記載の腎臓障害抑制剤または急性毒性軽減
剤： ａ）分子量 同一のサブユニットから成るホモ２量体であって、ドデ
シル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動で
測定した分子量が70,000〜90,000ダルトンであり、還元
剤で解離させて生物活性を消失させたサブユニットにつ
いてドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電
気泳動で測定した分子量は35,000〜45,000ダルトンであ
る； ｂ）サブユニットのアミノ酸配列 ホモ２量体を構成するサブユニット蛋白質は、次に示す
214個のアミノ酸配列を有し、122番目及び140番目のア
スパラギンはそれぞれアスパラギン（Asn）−ｘ−スレ
オニン（Thr）／セリン（Ser）で表されるＮ−グリコシ
ド結合部位を有し、ｘは任意のアミノ酸を示す； Glu−Glu−Val−Ser−Glu−Tyr−Cys−Ser−His−Met−
lle−Gly−Ser−Gly−His−Leu−Gln−Ser−Leu−Gln−
Arg−Leu−lle−Asp−Ser−Gln−Met−Glu−Thr−Ser−
Cys−Gln−lle−Thr−Phe−Glu−Phe−Val−Asp−Grn−
Gru−Gln−Leu−Lys−Asp−Pro−Val−Cys−Tyr−Leu−
Lys−Lys−Ala−Phe−Leu−Leu−Val−Gln−Asp−lle−
Met−Glu−Asp−Thr−Met−Arg−Phe−Arg−Asp−Asn−
Thr−Pro−Asn−Ala−lle−Ala−lle−Val−Gln−Leu−
Gln−Glu−Leu−Ser−leu−Arg−Leu−Lys−Ser−Cys−
Phe−Thr−Lys−Asp−Tyr−Glu−Glu−His−Asp−Lys−
Ala−Cys−Val−Arg−Thr−Phe−Tyr−Glu−Thr−Pro−
Leu−Gln−Leu−Leu−Glu−Lys−Val−Lys−Asn−Val−
Phe−Asn−Glu−Thr−Lys−Asn−leu−Leu−Asp−Lys−
Asp−Trp−Asn−lle−Phe−Ser−Lys−Asn−Cys−Asn−
Asn−Ser−Phe−Ala−Glu−Cys−Ser−Ser−Gln−Asp−
Val−Val−Thr−Lys−Pro−Asp−Cys−Asn−Cys−Leu−
Tyr−Pro−Lys−Ala−lle−Pro−Ser−Ser−Asp−Pro−
Ala−Ser−Val−Ser−Pro−His−Gln−Pro−Leu−Ala−
Pro−Ser−Met−Ala−Pro−Val−Ala−Gly−Leu−Thr−
Trp−Glu−Asp−Ser−Glu−Gly−Thr−Glu−Gly−Ser−
Ser−Leu−Leu−Pro−Gly−Glu−Gln−Pro−Leu−His−
Thr−Val−Asp−Pro ｃ）等電点 ポリアクリルアミドゲル等電点電気泳動法及びシユクロ
ース密度勾配等電点泳動法で測定した等電点（pI）は3.
1〜3.7である； ｄ）円二色スペクトル 円二色性分散計による遠紫外部CDスペクトルは波長208n
m及び222nmにそれぞれ極小ピークがありα−ヘリックス
構造を含んでいる； ｅ）熱安定性 60±0.5℃で60分間加熱しても生物活性は失われない； ｆ）赤外線吸収スペクトル 波数1680cm-1、1200cm-1及び1130cm-1に強度吸収、波数
1540cm-1、1430cm-1および1070cm-1に中度吸収を示す赤
外線吸収スペクトラムを有する。 - 【請求項４】ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因
子を、16×104〜80×104単位/kg体重／日の投与量で投
与する請求項１から３のいずれか記載の腎臓障害抑制剤
または急性毒性軽減剤。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1085612A JPH07103041B2 (ja) | 1989-04-04 | 1989-04-04 | 悪性腫瘍治療補助剤 |
| CA002011050A CA2011050C (en) | 1989-02-28 | 1990-02-27 | Human monocyte-machrophage-csf preparations |
| DE69022606T DE69022606T2 (de) | 1989-02-28 | 1990-02-27 | Menschlichen Monozyt-Makrophagen-Koloniestimulierungsfaktor enthaltende Zusammensetzung. |
| AU50504/90A AU625081B2 (en) | 1989-02-28 | 1990-02-27 | Human monocyte-macrophage-csf preparations |
| EP90103771A EP0385385B1 (en) | 1989-02-28 | 1990-02-27 | Human monocyte-machrophage-CSF preparations |
| US07/789,431 US5288487A (en) | 1989-02-28 | 1991-11-06 | Human monocyte-macrophage-CSF preparations |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1085612A JPH07103041B2 (ja) | 1989-04-04 | 1989-04-04 | 悪性腫瘍治療補助剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02264729A JPH02264729A (ja) | 1990-10-29 |
| JPH07103041B2 true JPH07103041B2 (ja) | 1995-11-08 |
Family
ID=13863665
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1085612A Expired - Fee Related JPH07103041B2 (ja) | 1989-02-28 | 1989-04-04 | 悪性腫瘍治療補助剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07103041B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998040095A1 (fr) * | 1997-03-12 | 1998-09-17 | Meiji Milk Products Co., Ltd. | Compositions preventives et therapeutiques pour nephropathies et hepatites d'origine medicamenteuse |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0611705B2 (ja) * | 1988-02-10 | 1994-02-16 | 新技術事業団 | 血小板減少症治療剤 |
-
1989
- 1989-04-04 JP JP1085612A patent/JPH07103041B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH02264729A (ja) | 1990-10-29 |
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