JP4555981B2 - 高い安定性を有する膵臓酵素の極小球体とその製造方法 - Google Patents

Description

【０００１】
（発明の分野）
本発明は医薬用極小球体（microspheres、マイクロスフィア）の製造方法に関する。膵臓酵素を含み安定した形態をとる極小球体が、高い生体利用性及び高い酵素活性を持つものとして、記述されている。更には、溶媒の不存在下に、高エネルギー造粒と球状化プロセスを経て前記極小球体を製造する方法が記述されている。
【０００２】
（従来の技術）
膵臓腺による酵素の不完全な外因性製造は種々の病理的条件に起因することがある。特に消化酵素の製造における失敗又は不十分さは、粘液粘着性（mucoviscidosis）（包嚢線維症（cystic fibrosis））、一般の胆汁管の閉鎖、膵臓癌及び膵臓炎症状態（慢性膵臓炎）に起因するはずである。結果として、これらの病理の影響を受ける人々は、食物を胃腸道により吸収されうる分子にまで分解することにより該食物を消化することができなくなっている。
【０００３】
この病気により体重の減少が起こり、命取りの結末を迎えることがある。その治療法は動物に由来する膵臓酵素の代用経口投与（ここでは簡略化して“パンクレアチン”と呼ばれる）から構成される。該パンクレアチンはその大部分がリパーゼ、アミラーゼ及びプロテアーゼから形成される。リパーゼは主として脂肪の加水分解を触媒作用して脂肪酸とグリセロールに変え、アミラーゼはデンプンを代謝・転換してデキストリンと糖にし、プロテアーゼは蛋白質を分解してペプチドとアミノ酸にする（G.J.Peschke、膵臓酵素（パンクレアチン）、薬理化学のトピックスにおいて、D.D.Breimer、D.J.A.Crommelin、K.K.Midha、Federation Internationale Pharmaceutique（ＦＩＰ）、ザ・ハーグ、１９８９）。
【０００４】
該パンクレアチンは好ましくは豚の膵臓から抽出されるが、しかしこれに限定されるわけではない。
【０００５】
パンクレアチンにとって医薬として最も適正であって効果的な形態は球又は小粒又は微小錠剤の形態である。経口投与の場合、これらの処方には胃に耐える皮膜が付与される。膵臓酵素が胃の酸性ｐＨにより不活性化され、十二指腸のｐＨになったときだけ放出されるという事実にとって、このことは必要である。
【０００６】
口径の小さい多元粒子形態のものの投与は、胃を通過する際の食物における酵素の適正な分布と極小球体が十二指腸のｐＨになるときの驚くべき放出速度を保証するために、特に重要である。食物の消化を改善するためには、特に重要なことは極小球体の口径が小さいことであり、その結果として、酵素が広い表面積に放出され、胃における通過速度が速くなる。この目的のためにマイヤー（Meyer）が示したことは、口径１ｍｍの球は口径２又は３ｍｍの球よりも極めて短い時間内に胃を通過したことである（Ｊ．Ｈ．マイヤー、J.Elashoff、Ｖ．ポーター−フィンク、Ｊ．ドレスマン、Ｇ．Ｌ．アミドン、胃腸病学、９４、１３１５、１９８８）。
【０００７】
パンクレアチンは特別な安定性の問題を伴う酵素である。実際には、長期にわたって水分環境に晒されたとき又は高温で加熱されたとき、又は高温で簡易貯蔵されたときに、そのものの部分的な若しくは全体的な不活性化が注目を浴びた（G.J. Pescke膵臓酵素（パンクレアチン） ｃｈ． １０，１３３頁）。膵臓酵素の中で最も不安定なものはリパーゼであることが判明する。そのものは代用療法の中で最重要な酵素である。本出願人が行った実験では、パンクレアチンを、４０℃、相対湿度７５％で７日間保存したところ、酵素活性（リパーゼ）の４５％〜６０％が失われる。
【０００８】
パンクレアチンが不安定であるという問題は前記酵素の微小粒子の製造プロセス全体に影響を及ぼし、本生成物に適用可能な微小化プロセスの範囲を狭める。
【０００９】
Ｍ．ブー（Buu）の記述（特許ＴＷ−Ａ−３１０２７７）によれば、水造粒、乾燥、再造粒、押出し成形及び後続する選別を経て排出生成物が調製される。ＪＰ−Ａ−０８１０９１２６で特許請求している製造方法は、パンクレアチン粉末の流動床の中で、糖分の球上に、配位子（ヒドロキシプロピルセルロース）を含む水溶液を同時噴霧することに基づくものである。類似した方法はＥＰ−Ａ−２７７７４１に記述されている。そこでは、水溶液中のＬＨＰＣ（低粘度ヒドロキシプロピルセルロース）を使用して不活性な核（ノンパレイル種（Nonpareil seeds））上に粉末状パンクレアチンを噴霧している。これらの全ての方法には、粒子混合という動的条件の下で、パンクレアチンと水及び／又は他の溶媒との接触が含まれる。本願の実験の部分でのハイライトとして、湿式造粒によりパンクレアチンの部分的な変質が起こり、本来の酵素よりも活性の低い粒子が形成されている。
【００１０】
溶媒を使用することなくパンクレアチンの小粒を製造する例は、ファッセン（Faassen）とフロマンス（Vromans）の手でＷＯ−Ａ−９６３８１６９に記述されている。パンクレアチンはロールコンパクターを用いて圧縮され、次いで殻から取り出され、形が不ぞろいの小粒として得られる。ベーデッカー（Boedecker）らは押出しと後続の球状化により形がそろった小粒を得た。彼らのＥＰ−Ａ−５８３７２６に記述されているものは口径が０．７〜１．４ｍｍの範囲にある小粒の製造方法である。押出し法は特許ＪＰ−Ａ−０４１８７０８５でも使用され、口径が１．５〜３ｍｍの小粒が得られている。押出し溶媒として水又は水とエチルアルコールの混合物が使用される。アッツル（Atzl）ら（ＷＯ−Ａ−９１０７９４８）は湿式造粒に類似した方法を用いて口径が０．３〜４ｍｍの球状粒子を得ている。ＤＥ−Ａ−Ａ３４２２６１９では、適当な変形ポンチ（punches）を用いる圧縮法により、直径が１〜２．５ｍｍで高さが１〜２．５ｍｍである微小錠剤を得ている。フィッシャーらに付与されたＤＥ−Ａ−２９２３２７９では、パンクレアチンがイソプロピルアルコール又はアセトンの存在下に押出され、球状化され最後に乾燥される。前記した押出し法により表面が不ぞろいである粒子が得られ、その粒子は更に大きさを均一化するプロセスを必要としている。結果として生産時間が長くなり、酵素が不活性化する危険性は高くなる。このことから酵素安定性が損なわれ、工業上のコストは上昇する。更に言えば、実験部分で示されるように、溶媒存在下における押出し法は酵素活性を失うという深刻な問題を呈する。従来の技術という観点から見れば、その方法は効率の良い方法ではなく、つまり、産業上のコストが低く、変質や酵素活性の喪失を引き起こすことなく、極めて微細な粒子サイズを可能にするという方法ではない。更には、サイズが小さく高い酵素活性を有するパンクレアチン極小球体はいまだに利用できないでいる。
【００１１】
（発明の概要）
本発明は膵臓酵素を含む新規な極小球体、その極小球体を含む医薬組成物、及びそれらを作る製造方法に関する。ここで記述される方法には溶媒の使用が含まれず、従来の技術の方法よりも期間が極めて短く且つ効率が良いことが証明される。得られた極小球体には少なくとも一つの膵臓酵素、少なくとも一つの親水性低融点高分子及び終局の（eventual）賦形剤が含まれ、その極小球体は高い酵素活性、生体利用性及び安定性を有する。
【００１２】
（発明の詳細な記述）
本発明の目的は、極めて微小な寸法と高くしかも安定した酵素活性を有する膵臓酵素の極小球体を得ることができる方法である。
【００１３】
該方法の特徴は、少なくとも一つの膵臓酵素、少なくとも一つの親水性低融点高分子及び終局の賦形剤を含む固体状混合物が、攪拌下に、前記親水性低融点高分子の融点以上の温度で加熱されることにある。
【００１４】
該方法で使用される該混合物の成分を以下に詳細に記述する。
【００１５】
“膵臓酵素”とは、アミラーゼ、リパーゼ、プロテアーゼ、又はいずれかの割合を有するこれらの混合物のごとき、膵臓分泌物に含まれる酵素のいずれか一つ、又はパンクレアチンのごとき、酵素活性を有する膵臓起源のいずれかの抽出物を意味する。
【００１６】
前記酵素は、通常、膵臓からの抽出法により得られるか、又は、例えば、合成法若しくは遺伝子組換え法により人工的に生産することができる。本方法においては好ましくは粉末の形態で使用される。
【００１７】
該親水性低融点高分子の融点は２０℃〜９０℃の範囲内にあり、好ましくは３０℃〜７０℃の範囲内にある。親水性低融点高分子を例示すれば、ポリエチレングリコール（ルトロール（Lutrol） Ｅ（登録商標）、セントリー（Sentry）（登録商標） カーボンワックス（Carbonwax）（登録商標））、ポリオキシエチレン（セントリー（登録商標） ポリオックス（Polyox）（登録商標） ＷＳＲ）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンの共重合体（ルトロール Ｆ（登録商標））である。球状化混合物には、医薬技術において普通に用いられる他の賦形剤と同様に、例えば、減摩剤（lubricants）、滑り剤（glidants）、着色剤、希釈剤が含まれることがある。これらの最後のもの、つまり賦形剤の中で、ラクトース（無水物又は水和物）、微細結晶セロルース（アヴィセル（Avicel）（登録商標）、エムコセル（Emcocel）（登録商標））、燐酸カルシウム（ジ カフォス（Di Cafos）（登録商標））に言及する。一般に球状化を改善し又は更に効率の良いものにする賦形剤はすべて該組成物に添加することができる。
【００１８】
本発明の目的である製造方法で処理される混合物の組成物には、４０％〜９９％、好ましくは６０％〜８５％、の範囲内の重量比の膵臓酵素、及び、１％〜６０％、好ましくは１５％〜４０％、の範囲内の親水性高分子が含まれる。
【００１９】
開始混合物における酵素と親水性低融点高分子の比率は、好ましくは４：１〜１：１の範囲にある。
【００２０】
本発明の目的である製造方法において、上記の混合物がまとまって微細粒子（micropellets）になり、該微細粒子は同時に表面を均一化する粒状化法で処理される。問題になっている該方法には特に以下の段階が含まれる。
ａ． 前記固体状混合物又は該混合物の各成分であって固体の形態をとるものを適正な反応容器に装填する段階；
ｂ． 高エネルギー条件で該混合物を攪拌し、且つ、前記親水性高分子の融点以上の温度で該混合物を加熱する段階；
ｃ． 攪拌中に該混合物を冷却する段階；
ｄ． 該固体化した極小球体を回収する段階。
【００２１】
該混合物により多くの親水性低融点高分子が含まれる場合には、該混合物は、最も高い融点を持つ高分子の融点に対応するか又はそれよりも高い温度で加熱される。
【００２２】
ここで記述された特徴を有する極小球体を得るための基本的な特徴は、該固体状マスにいずれかの液体を直に添加することを回避することにある。次いで該方法は、水溶媒又は有機溶媒の完全な不存在下に、且つ、溶融状態にある高分子の固体状マスにいずれのものをも添加することなく、実施される。次いで、該混合物成分は、すべて固体状態で、いずれかの加熱開始前に、該反応容器に導入される。
【００２３】
該方法は造粒混合機又は流動床の中で有利に遂行される。該方法を遂行するために好ましい装置は、例えば、ザンチェタ ロータ（Zanchetta Roto）、デオスナ Ｐ（Diosna Ｐ）、ニトロ ペルミックス（Nitro Plellmix）、ヘンシェル（Henschel）、ロボット クーペ型 ＲＳＩ（Robot Coupe ＲＳＩ）、グラット ＶＧ（Glatt ＶＧ）のごとき高エネルギー造粒混合機、又はロータ挿入を伴うグラット流動床、回転円盤付きの流動床、回転円盤付きのエーロマチック（Aeromatic）流動床、“接線噴霧（tangential spray）”挿入を伴うＩＣＯ ＰａＧ流動床及びヴィクタ（Victor）一系列ＦＬ“回転円盤”のごとき、回転円盤付きの流動床である。
【００２４】
これらの装置では、通常、該混合物が高エネルギー混合操作に晒され、同時に使用される親水性高分子の融点以上の温度で加熱される。
【００２５】
該攪拌と加熱操作は、所望の球状化度を得るのに十分な時間だけ（例えば３０分（′）〜７５分（′））遂行される。次いで該温度が下がり、該極小球体は固化する。該混合は固化段階の間（例えば、１０分間〜５０分間）はおそらくは低エネルギーで進行しよう。該方法は該混合の停止及び該極小球体の回収を伴って終了する。通常その方法全体は１５分間〜１５０分間、好ましくは５０分間〜１００分間かかる。
【００２６】
該極小球体を振動ふるいでふるい分けし、所望の寸法水準から外れた終局の(eventual)粒子を排除する。
【００２７】
このようにして得られた極小球体、特に経口投与用の極小球体には、胃耐性皮膜（gastroresistant coating）（好ましくは５．５より低いｐＨで溶解しないもの）が付与され、ちょうど十二指腸に到達したときに、活性成分が放出されるようにし、この方法により胃酸のｐＨから十二指腸を保護する。前記皮膜用高分子の適用は従来の技術に従って流動床内で又は噴霧鍋での噴霧により遂行される。極小球体の表面が球状であり均一であるために塗布は容易である。適用し得る胃耐性高分子を例示すれば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタル酸塩（例えばＨＰ−５０又はＨＰ−５５）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース アセテート 琥珀酸塩（アコート（Aqoat）（登録商標））、アクリル酸塩（例えば、ユードラジット（Eudragit（登録商標） Ｌ３０Ｄ））ポリビニルアセトフタル酸塩（Sureteric（登録商標））である。これらの高分子が形成する高分子膜の適用可能性及び安定性を改善するために、例えば、トリエチルクエン酸塩又はジブチルフタル酸塩のような可塑剤を該皮膜に添加し混合することができる。更に言えば、タルクのような滑り剤は塗布する間の該小粒の粘着を減少するのに役立つ。
【００２８】
前記親水性低融点高分子の水媒受粉のお陰で、仮に胃耐性皮膜が溶解しても、十二指腸環境の中において生体利用できる酵素を素早く得ることができる。
【００２９】
本発明の別の目的は高度に生体利用できる膵臓酵素の極小球体であり、それは上記の方法に従って生産される。
【００３０】
実際に膵臓酵素の新規な極小球体を得ることができる本方法には以下の特徴がある：（ａ）１０μｍ〜１５００μｍの範囲内、好ましくは１００μｍ〜８００μｍの範囲内の直径を有する微小寸法（reduced size）、これにより投与された酵素の高い生体利用性を伴うもの；（ｂ）高い酵素力価（タイター、titre）；高い酵素力価とは該極小球体の酵素力価（単位ＦＩＰ／ｍｇで測定されたもの）を意味する。その力価とは、生産される（初期量での酵素、親水性高分子及び賦形剤といった）固体状混合物の力価の９０％以上、好ましくは９５％以上のものである。該混合物は“それらの成分の物理的混合物”として以下に示される。換言すれば、本極小球体に含まれる膵臓酵素の活性は、天然の未処理酵素の活性の９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。
【００３１】
少なくとも一つの膵臓酵素が該極小球体に含まれる場合には、前記酵素力価はとりわけ最も熱的に不安定なものの活性を参酌して測定すべきである。例えば、（リパーゼ、アミラーゼ及びプロテアーゼを含有する）パンクレアチンの場合には、その力価が測定される酵素はリパーゼである。
【００３２】
本発明の方法に従った極小球体には高度な表面均一性及び酵素力価の長期間にわたる安定性がある。
【００３３】
本発明に従って得られる極小球体には、重量比が４０％〜９９％の範囲、好ましくは６０％〜８５％の範囲の、少なくとも一つの膵臓酵素；量において１％〜６０％の範囲、好ましくは１５％〜４０％の範囲の、少なくとも一つの親水性高分子、及び医薬として摂取可能な賦形剤が含まれる。
【００３４】
本発明の他の目的は医薬組成物であり、上記の極小球体（終局の塗布用高分子で被覆されたもの）及び、例えば、減摩剤、滑り剤、着色剤、希釈剤、等の医薬用に好適な他の賦形剤がそのものに含まれる。前記組成物はヒト又は動物投与に好適な形態、例えば、使用に際して、水中に希釈される袋入りの（in sachets）粉末又は小粒，懸濁液、硬いゼラチンカプセル又は柔らかいゼラチンカプセル、錠剤又は微小錠剤の形態で処方される。
【００３５】
本発明により幾つかの利点が得られる：直接球状化法は迅速であり安価である。環境中において排出された場合、高価で潜在的に危険な有機溶媒を使用する必要性がないからである。長期間の乾燥時間と該酵素を不活性化する水も使用する必要性がないからである。すべての予想に反して、酵素の活性を減少させることなく、酵素の変質温度よりも高い温度でさえ、この方法を効率よく遂行することができる。このようにして生産された極小球体は極めて微小な直径、平均して７００μｍよりも小さい直径を有し、これにより高い生体利用性が可能になる。該極小球体の均一化された表面のお陰で少量の皮膜高分子を用いて医薬用被覆物が得られる。これにより塗布剤の量を減少させ、塗布時間を短縮することができる。その結果として製造コスト及び酵素不活性化の危険性は減少する。実験部分で強調されているように、該極小球体は天然酵素と実質的に変わらない酵素力価及び貯蔵時における高い活性持続性を有する。その結果として高い活性と安定性を有する膵臓酵素という医薬組成物を生産することができる。
【００３６】
本発明は、下記の非限定的な実施例を用いて記述される。
【００３７】
（実験部分）
本発明と対比して使用される膵臓酵素を含む極小球体の生産技術は：不活性な種にパンクレアチンを被覆すること（ｅｘ．１）；押出し及び球状化（ｅｘ．２）である。本発明（直接球状化）に従った方法は、回転円盤付き流動床（ｅｘ．３）、又は高エネルギー造粒混合機付きの流動床（ｅｘ．４）中で遂行される。該酵素活性はリパーゼ活性として測定される。この酵素は膵臓酵素の中で最も変質しやすいものであるために、比較用に選択された。該活性は欧米薬局方（European and American Pharmacopoeia）に記述された生物学的薬剤型の分析法に従って測定され、Ｕｎｉｔ／ｍｇ（使用される分析法（assay）によればＵｎｉｔ ＦＩＰ又はＵｎｉｔ ＵＳＰ）で表される。該欧州薬局方によれば、パンクレアチン１ｍｇには１Ｕ−ＦＩＰの蛋白質分解活性より小さいもの、１５Ｕ−ＦＩＰの脂肪分解活性より小さいもの、及び１２Ｕ−ＦＩＰのアミロ分解活性（amilolitic activity）より小さいものが含まれるはずである。
【００３８】
実験例１（対照）
不活性な種に粉末を被覆することによるパンクレアチン小粒の調製
ロータ（回転円盤）が挿入されたグラット（Glatt）ＧＰＣＧ−１型の流動床のバスケットの中に中性の小粒７９８．０ｇを置く。該小粒（“ノンパレイル種”型であり、蔗糖ととうもろこしの澱粉から形成されるもの）は寸法が２５０μｍ〜３５０μｍの範囲のものである。該小粒は、２８℃の温風を吹付けて２３℃まで加熱される。該方法の全時間にわたり流入する空気速度は１ｍ／ｓｅｃである。これとは別に粉末状パンクレアチンを２．０重量％のコロイド性シリカ（アエロジル（登録商標）Ｖ２００）と混合し、その流動性を改善する。流動床に流入する空気温度は５４℃まで上昇し、結果として小粒温度は２７〜２８℃になり、前記混合物４９０．０ｇは２６ｇ／ｍｉｎの速度で按分装置（proportioning device）ヒートン・フィーダー（Heton Feeder）を介して供給される。一方、同時に、脱塩水は０．８ｍｍの孔付きのノズルを介して約５〜６ｇ／ｍｉｎの流速で噴霧される。濾過ホースを該方法の初期に１２秒毎に５秒間だけ振る。２５分後に該ホースを６秒毎に５秒間だけ振る必要である。５０℃の空気を吹付けて該小粒を乾燥させ、結果として、残留水分を痕跡程度まで除去し、最後に３０℃の空気で１０分間冷却する。該方法の全時間は１２０分である。多量の活性素が該空気流により濾過ホースの内部に取り込まれるので、この技術では処理時間が長くなる。該極小球体の寸法の管理は困難である。該小粒（リパーゼ）の理論力価は組成物から計算され、１８．２７Ｕ−ＵＳＰ／ｍｇであった。これに対して、得られたリパーゼ力価は８．３９Ｕ−ＵＳＰ／ｍｇであった。この技術では酵素活性の損失は５４％になる。
【００３９】
実験例２（対照）
押出し−球状化によるパンクレアチン小粒の調製
パンクレアチン６６０．０ｇ、アヴィセル（Avicel）（登録商標）ＰＨ１０１（微細結晶セルロース）２４６５．１ｇ、コリドン（Kollidon）（登録商標）Ｋ３０（ポリビニルピロリドン）１６５．０ｇ及びシロイド（Syloid）（登録商標）２４４（コロイド性シリカ）９．９ｇを、１８リットル混合箱（cube）の中において１８ｒｐｍで１５分間混合する。該混合物は共回転二重スクリュー押出し機ＴＳＡ ＥＦ ２６−２０を介して供給する。供給ホッパーの蝸牛（cochlea）は位置IIIにあり、その際に該押出し機の蝸牛は１２５ｒｐｍで回転する。同時に脱塩水とイソプロピルアルコールを比率４：１ ｗ／ｗで含有する溶液が蠕動ポンプワトソン−マルロー（Watson-Marlow）により約２０ｇ／ｍｉｎで供給される。該生成物は０．４ｍｍ軸ダイで押出される。全押出し時間は１０２分である。押出し直後に、球状化機グラット（Glatt）Ｐ−５０を用いて回転速度７５０ｒｐｍで該生成物を３分間球状化処理する。得られた小粒をサーモスタット炉内において３５℃で１５時間乾燥する。該小粒の理論力価は該組成物により計算され、１６．２５Ｕ−ＦＩＰ／ｍｇであった。これに対して得られたリパーゼ力価は０Ｕ−ＦＩＰ／ｍｇであった。該方法の条件（生成物の過剰加熱及び／又は該押出しマス内における水の存在）により該リパーゼは分解している（活性損失１００％）と推測される。
【００４０】
本出願人が行った追加の対照実験によりより良い結果が際立つことはなかった。湿式造粒により不ぞろいの表面を持ち、且つ、極めて多量の胃耐性皮膜高分子を必要とする小粒が生産される。パンクレアチンのパンクレアチン小粒への被覆（挿入ロータを具備した回転円盤グラットＧＰＣＧ−１付きの流動床内において“傾斜噴霧”）は長期間にわたる方法であり、濾過ホースの頻繁な停止及び極小球体寸法の制御上の困難さを伴う。
【００４１】
実験例３
流動床内における直接球状化によるパンクレアチン小粒の調製
パンクレアチン６８０．０ｇ及びＰＥＧ４００（ポリエチレングリコール）３２０．０ｇをロータが挿入された流動床グラットＧＰＣＧ−１のバスケット内に置く。該円盤は縁・表面にぎざぎざのある型式であり、１２００ｒｐｍで回転する。一方、同時に空気を７０℃で約１〜２ｍ／ｓｅｃで吹付ける。該濾過ホースは６秒毎に５秒間振られる。６０分間の乾燥後、流入する空気温度は２０℃まで低下し、該小粒は硬化する。その際に該円盤の回転は７００ｒｐｍで維持される。この段階では該フィルターは１２秒毎に５秒間振動する。約３０分間の冷却後、該生成物は該流動床のバスケットから取り出される。該方法の全時間は９０分である。該小粒の理論力価は該組成物から計算され、４０．１２Ｕ−ＦＩＰ／ｍｇであった。得られた酵素力価（リパーゼ）は３８．１２Ｕ−ＦＩＰ／ｍｇであり、活性損失は５％より少ない。
【００４２】
すべての試験において、寸法が１５０μｍ〜７００μｍの範囲内にある小粒の重量収率を測定した（表１）。同一の百分率組成物を用いて、該円盤の回転速度を増すことにより、球状化時間を短縮することができた。しかしながら該極小球体の直径は著しく変化することがなかった（表２）。
【００４３】
実験例４
混合−造粒機内における直接球状化によるパンクレアチン小粒の調製
パンクレアチン７１７．８ｇ及びＰＥＧ４０００（ポリエチレングリコール）１９０．８ｇを、高エネルギー混合−造粒機ザンチェタ ロトラボ（Zanchetta Rotolab）のタンク内に置く。該機械の刃は９００ｒｐｍで回転し、加熱用ジャケットは７５℃に設定される。４５分間の乾燥後、加熱のスイッチを切る。該刃の速度は１２０ｒｐｍまで低下し、該ジャケットは管水流で冷却される。１５分間の冷却後、該小粒は取り出される。該方法の全時間は６０分である。該小粒の理論力価は該組成物から計算され、６５．８７Ｕ−ＦＩＰ／ｍｇであった。得られた酵素力価（リパーゼ）は６７．８０Ｕ−ＦＩＰ／ｍｇであった。
【００４４】
所望の方法により混合−造粒機ザンチェタ ロトラボ（Zanchetta Rotolab）Ｐ−５０を用いて球状小粒が得られる。該小粒は、その後、ＨＰ−５５、トリエチルクエン酸塩及びタルクで形成される胃耐性皮膜で被覆される。被覆された小粒は熱シール袋（三層の紙、アルミニウム及びポリエチレンで形成されるもの）で包装され、次いで２５℃＋６０％ＵＲ及び３０℃＋６０％ＵＲの安定性試験を受ける。本方法に従って作られた２ロット分の安定性試験結果は残留リパーゼ活性百分率で示され、図１で報告されている。留意すべき点は、極小球体酵素活性は、全試験時間（６ヶ月間）にわたって（初期値の９０〜１１０％の範囲内で変動しつつも）本質的に不変であるということである。
【００４５】
要するに、上記のとおり報告された実験例のデータが示すものは、公知の方法（対照実験例１〜２）は酵素活性の本質的な減少をもたらし、一方、本発明の目的である方法（実験例３〜４）では極めて小さい寸法（＜７００μｍ）及び天然酵素の９５％から１００％を越える酵素力価を有する極小球体を得ることができる。結果として本質的に本発明の極小球体は不変である。これらの数値が時間の経過にかかわらず安定していることは図１のデータで確認される。次いで前記結果は本発明の方法の予期しない効率及び得られる極小球体のより良いパフォーマンスを際立たせる。追加の試験は親水性低融点高分子濃度及び円盤回転速度を変えながら実験例３の条件で行われた。該表１及び２は該プロセス収率を示す。ＰＥＧ濃度は該開始混合物に対するＰＥＧの重量比として測定される。該プロセス収率は１５０μｍと７００μｍの範囲に含まれる寸法を有する極小球体フラクションの（該開始混合物に対する）重量比として計算される。
【００４６】
【表１】

【００４７】
円盤の回転速度を１２００ｒｐｍまで増加させても（表２）該収率は酵素安定性上著しく変化することがなく、一方、該方法の全時間を１０〜１５％だけ低減しうることを立証した。
【００４８】
【表２】

【図面の簡単な説明】
【図１】 ６ヶ月の期間内に、本発明に従って製造された極小球体の酵素力価（リパーゼ）の推移である。
【図２】 ６ヶ月の期間内に、本発明に従って製造された極小球体の酵素力価（リパーゼ）の推移である。

Claims (8)

1. 膵臓リパーゼ、又は該膵臓リパーゼと別の膵臓酵素との混合物、少なくとも一つの親水性低融点高分子、及び必要に応じて添加される医薬用賦形剤を含む極小球体であって、該極小球体は１０μｍ〜１５００μｍの範囲の直径を有し、且つ、その酵素力価が極小球体成分の固体状混合物の力価の９０％以上を占める極小球体の製造方法であって、
   膵臓リパーゼ、又は該膵臓リパーゼと別の膵臓酵素との混合物、少なくとも一つの親水性低融点高分子、及び必要に応じて添加される賦形剤により形成される固体状混合物は、攪拌条件下において、前記親水性低融点高分子の融点以上の温度まで加熱されることを特徴とする極小球体の製造方法。
2. ａ． 前記固体状混合物又は該混合物の各成分であって固体の形態をとるものを適正な反応容器に装填する段階；
   ｂ． 高エネルギー条件で該混合物を攪拌し、且つ、前記親水性高分子の融点以上の温度で該混合物を加熱する段階；
   ｃ． 攪拌中に該混合物を冷却する段階；
   ｄ． 該固体化した極小球体を回収する段階
   を含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記親水性高分子が２０℃〜９０℃の範囲の融点を有する、請求項１〜２のいずれかに記載の方法。
4. 前記親水性高分子が３０℃〜７０℃の範囲の融点を有する、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
5. 前記固体状混合物が、該必要に応じて添加される賦形剤の他に、１５％〜４０％ｗ／ｗの範囲にある前記親水性高分子及び６０％〜８５％ｗ／ｗの範囲にある前記膵臓酵素を含有する、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
6. 前記親水性高分子が、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシエチレンとポリオキシプロピレンの共重合体又はこれらの混合物の中から選択される、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
7. 高エネルギー混合造粒機又は回転円盤を具備した流動床内で実施される、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
8. 該得られた極小球体が更に高分子膜で被覆される、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。

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