JP4116431B2

JP4116431B2 - ラクタム化合物

Info

Publication number: JP4116431B2
Application number: JP2002542779A
Authority: JP
Inventors: トーマス・ミッチェル・コーニグ; ジェイムズ・エドモンド・オーディア; デイビッド・ミッチェル; ステイシー・リー・マクダニエル; リン・アン・ブッチッリ; ゲイリー・ローウェル・エンゲル; ジェイムズ・エイブラハム・エイキンズ
Original assignee: イーライリリーアンドカンパニー
Priority date: 2000-11-17
Filing date: 2001-11-02
Publication date: 2008-07-09
Anticipated expiration: 2021-11-02
Also published as: PT1353910E; UA77165C2; EP1353910B1; DK1353910T3; HRP20030385A2; ZA200303411B; PE20020798A1; ES2286162T3; PL211018B1; ATE362919T1; BR0115424A; JP2004521084A; AU2002224321B2; CA2425497C; KR20030045194A; CN1575282A; EP1353910A2; MY141607A; SV2003000741A; EA200300579A1

Description

発明の詳細な説明

発明の分野
本発明は、薬化学および有機化学の分野に関し、β−アミロイドペプチド放出および／またはその合成を阻害する化合物に関する。

発明の背景
β−アミロイドペプチド放出および／またはその合成を阻害し、アルツハイマー病の処置に有用である、ある種のラクタム類は、ＰＣＴ出願第PCT/US97/22986号に記載されている。

本発明は、新規の（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶、その組成物、それらを使用する方法、それらの製造方法およびそれらの中間体の製造方法を提供する。本発明の二水和物結晶は、β−アミロイドペプチド放出および／またはその合成の阻害に有用であり、したがってアルツハイマー病の処置に有用である。

（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンは、アルツハイマー病の処置に有用であるので、存在する薬学的な必要性および仕様を満たすために、純粋で、安定な結晶型として製造する必要がある。

本発明のこの新規な二水和物結晶は、例えば経口投与のための錠剤の商業的規模での製剤化に適した特性を有している。また、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを製造する製造方法は、工場規模で行うのに便利なものである必要がある。さらに、生成物は容易に濾過され、容易に乾燥され、そして保存に便利な形態である必要がある。さらに、本二水和物結晶は、適した加工特性と保存特性を有している。

（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを有利な特性を有する二水和物の形態で製造することができること、および新しい形態のための製造方法が上記の望ましい特徴を満たすことを記載した。

発明の要旨
本発明は、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物を提供する。

別の態様では、本発明は（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物および製薬的に許容し得る希釈剤を含有する医薬組成物を提供する。

方法の一態様では、本発明はβ−アミロイドペプチド放出および／またはその合成を阻害するための方法であって、それを必要とする患者に、有効量の（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物を投与することを含む方法に関する。具体的な方法の態様では、本発明は、アルツハイマー病を処置するための方法であって、それを必要とする患者に有効量の（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物を投与することを含む方法を提供する。本発明はさらに、アルツハイマー病の進行を阻止または阻害するための方法であって、それを必要とする患者に有効量の（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物を投与することを含む方法を提供する。

即ち、本発明は（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物の、アルツハイマー病の処置を含む、β−アミロイドペプチド放出および／またはその合成を阻害するための医薬の製造のための使用を提供する。

別の態様では、本発明は、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物の製造方法を提供する。

さらに別の態様では、本発明は、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを含むラクタム類の製造方法およびそのための中間体の製造方法を提供する。

発明の詳細な記載
本明細書中で使用する場合、以下の用語は以下に示した意味を有する。

用語「ｅｅ」または「エナンチオマー過剰（率）」は、両方のエナンチオマーの混合物（Ｅ₁＋Ｅ₂）において、一方のエナンチオマーＥ₁が過剰である百分率を意味し、式：
（（Ｅ₁−Ｅ₂）＋（Ｅ₁+Ｅ₂））×１００％＝ｅｅ
により計算される。当分野において周知のように、エナンチオマー過剰率は、化合物またはその誘導体のキャピラリー電気泳動およびキラルHPLCにより決定することができる。

本明細書中、グリセルアルデヒドの異性体について、(R)-および(S)-のCahn-Prelog-Ingold規則および立体化学のL-およびD-規則を用い、具体的な異性体に言及することにする。

本発明は、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物、および具体的には、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶を提供する。

有機化合物の結晶型を特徴付けるために、様々な方法が可能である。例えば、示差走査熱量測定法, 固体ＮＭＲ分光法, 赤外線分光法, およびＸ線粉末回折が挙げられる。なかでも、これらＸ線粉末回折および固体ＮＭＲ分光法が結晶型の間の同定と区別に非常に有用である。

Ｘ線粉末回折分析は、以下のとおりに行った。瑪瑙乳鉢および乳棒で試料を軽く粉砕しまたはせずに、Ｘ線粉末回折測定のため試料を試料ホルダに充填する。Ｘ線粉末回折パターンは、ＣｕＫ_α源 (λ＝1.54056Å)を取り付けたシーメンスD5000Ｘ線粉末粉末回折装置を用い、発散スリットサイズ１ｍｍ、１ｍｍの受光スリット、および０．１ｍｍの検出スリットを用い、50ｋＶ、４０ｍＡにて測定した。各試料を０．０２°のステップサイズ、最大スキャン速度３秒／ステップで４°と３５°の間でスキャンした。Kevex 固体シリコンリチウム検出器を用いてデータを集めた。最適には、シリコン標準を常套的に用いて装置を作動させ、機器の調整をチェックした。

結晶学の分野でよく知られているように、与えられた結晶型に関して、回折ピークの相対強度およびピーク幅は、選択方位および／または粒径の効果を含む多くの因子によって変化し得る。選択方位および／または粒径の効果が存在するとき、ピーク強度は変化し得るが、多型の特徴的なピークの位置は変わらない。例えば、The United States Pharmacopoeia #24, National Formulary #19, pages 1843-1844, 2000参照。

本明細書に開示されたいくつかの回折のピーク強度に関する強度の分散を最小限にするために、粉砕を用いた。但し、粉砕によって回折が有意に変わる場合、あるいは試料の結晶状態が変わる場合、未粉砕のものを用いるべきである。粉砕は小さな瑪瑙乳鉢と乳棒にて行った。粉砕の間、乳鉢を支え、乳棒に軽く圧力を加えた。ピーク位置を2θ値で求め、double-derivative peak picking 法を用いて最も顕著な特徴（相対強度２０％を超える）についてピーク強度を測定した。

したがって、本発明は、ＣｕＫ_α照射を用い上記の方法を用いて、未粉砕の試料および５分および１０分の粉砕後の試料について測定された、２θ値および２０％を越える相対強度（Ｉ_o／Ｉ₁₀₀）を示した表１のＸ線粉末回折パターンによって特徴づけられる、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶に関する。

選択方向および／または粒径の効果を最小限にすることを目的とする場合、５分および１０分間粉砕した試料の強度はより典型的な回折パターンである。また、コンピュータで求められた四捨五入していない（unrounded）数値をこの表に記載した。

したがって、好ましく調製された（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶の試料は、表１に記載された、ＣｕＫ_α照射を用いた２θ値でのＸ線回折パターンによって特徴付けることができ、８.３６、１２.４３、１５.３４、１９.２２、２０.５０または２０.６３；より具体的には８.３６、１２.４３、または１５.３４にピークを有する；８.３６および１２.４３；８.３６および１５.３４；８.３６、１２.４３、および１５.３４;または８.３６、１２.４３、１５.３４、１９.２２、２０.５０、および２０.６３にピークを有する。

（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶は、固体ＮＭＲ分光法によって特徴付けることもできる。固体の¹³Ｃ化学シフトは、分子構造を反映するだけでなく、結晶内の分子の電子の状態も反映する。

固体ＮＭＲ(¹³Ｃ)解析は、¹³Ｃ交差分極／マジック角試料回転(CP/MAS)を用いて行うことができる。ＮＭＲ(固体ＮＭＲまたはＳＳＮＭＲ)スペクトルは、完全固体アクセサリーおよびVarian 7ｍＭＶＴ CP/MASプローブを取りつけた、Varian Unity 400 MHz分光計を用い、100.580 MHzの炭素周波数で作動させて求めた。

取得パラメータは以下のとおりである： 90°プロトンr.f. パルス幅4.0μｓ、摂食時間1.0ｍｓ、パルス繰返し時間５秒、MAS周波数7.0 kHz、スペクトル幅50 kHz、および収集時間50ｍｓ。化学シフトは、外部標準のヘキサメチルベンゼンのメチル基を参照した（λ＝17.3 ppm）。即ち、試料をヘキサメチルベンゼンで置き換えた。

（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物に関する化学シフトデータを表２に示す（以下、ピーク割り当てに基づく)。

アスタリスク(*)は中断されたデカップリング（interrupted decoupling）スペクトルにみられるピークを示す。

このように、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶は、以下の化学シフト (ppm)を有する、固体¹³Ｃ核磁気共鳴によって特徴付けることができる：１６.６；１７６.７、１７４.１、１６９.９、１３６.９、１３４.８、１３２.１、１２７.９、１２８.９、１２４.０、７５.６、５１.３、４６.９、３５.３、３１.１、２１.４、または１６.６；より具体的には、７５.６、３５.３、２１.４、または１６.６；次のいずれか２つ７５.６、３５.３、２１.４、および１６.６；７５.６、３５.３、２１.４および１６.６；または１７６.７、１７４.１、１６９.９、１３６.９、１３４.８、１３２.１、１２７.９、１２８.９、１２４.０、７５.６、５１.３、４６.９、３５.３、３１.１、２１.４、および１６.６。

別の態様では、本発明は、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物が得られる条件下で水性溶媒から結晶化することを含む、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物の製造方法を提供する。

（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物が形成し得る正確な条件は実験により決定され、単に、実際に適当であると分かっている数多くの方法を提供することが可能である。

このように、例えば,（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物は、管理された条件下で結晶化により調製することができる。溶液からの結晶化およびスラリー化の方法は、本製造方法の範囲内であると解釈される。特に、本発明の二水和物は、水性溶媒からの結晶化により製造することができる。適当な溶媒は、使用する濃度で本二水和物を形成するのに十分な水を含むことが可能なものである。好ましい溶媒は、例えばアセトン、低級アルコール類(メタノール, エタノール,およびイソプロパノール等)、酢酸およびアセトニトリルなどの、水と混和する溶媒である。実際には水性アセトンが好ましい。所定の水性溶媒について、使用する水の量は、水と比較した、溶媒中の（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの相対的な溶解度、および結晶化またはスラリー化のどちらを用いるかに依存し得る。

結晶化は、一般的に、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを水性溶媒に溶解した後、さらに水を追加するまたはしないで、溶液を冷却して固体を得ることにより行う。典型的には、結晶化を初発温度約４０℃〜選択した水性溶媒の還流温度で行う。次いで、混合物を冷却して二水和物結晶を得る。種結晶添加（seeding）を行うのが有効である。結晶化溶液をゆっくりと冷却するのが好ましい。結晶化は、室温〜−２０℃の温度に冷却して行うのが最も都合が良い。

さらに別の態様では、本発明は、（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを含むラクタム類の製造方法、およびそのための中間体の製造方法を提供する。

より好ましくは、１つの製造方法の態様では、本発明は、式Ｉ：

［式中、
Ｒ₁はアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたアルキル、置換されたアルケニル、置換されたアルキニル、置換されたシクロアルキル、置換されたシクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環であり;
Ｒ₂は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環であり；
Ｒ₃はアルキルであり、
Ｘ₁は水素、ヒドロキシまたはフルオロであり、
Ｘ₂は水素、ヒドロキシまたはフルオロであるか、または
Ｘ₁およびＸ₂が共にオキソ基を形成し;および
Ｖは、水素、ヒドロキシ、アシル、アシルオキシ、アルキル、置換されたアルキル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アミノ、アミノアシル、アルカリール、アリール、アリールオキシ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、およびトリハロメチルからなる群から独立に選択される１〜３個の基である］
で示される化合物の製造方法であって、
（ａ１）式（４）

［式中、Ｒ₃およびＶは、式Ｉの化合物について記載したものと同意義である］
で示される化合物を溶解し、そのジベンゾイル酒石酸塩、(Ｒ)−(−)−１０−カンファースルホン酸および(Ｄ)−(−)−マンデル酸塩の分別結晶化により式(１０)：

で示される化合物を得、
（ｂ）式ＰｇＮＨ−ＣＨＲ₂−Ｃ（Ｏ）−Ａ（ここでＲ₂は、式Ｉについての定義と同意義であり、Ａは活性化基、例えばＯＨ、−Ｂｒ、またはＣｌであり、Ｐｇはアミン保護基である）で示される、適当なアミノ保護したアミノ酸とカップリングして、式（１１）：

で示される化合物を得、
(ｃ)式(１１)で示される化合物を脱保護して式(１２)

で示される化合物を得;および
(ｄ)式(１２)で示される化合物を式Ｒ₁ＣＸ₁Ｘ₂−Ｃ（Ｏ）Ａ₁（ここでＲ₁、Ｘ₁、およびＸ₂は、式Ｉで示される化合物についての記載と同意義であり、Ａ₁は活性化基、例えばＯＨ、−Ｂｒ、またはＣｌである）で示される適当な化合物とカップリングするか；または
(ａ２)式(１０)で示される化合物を式Ｒ₁ＣＸ₁Ｘ₂−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＣＨＲ₂−Ｃ（Ｏ）−Ａ（ここで、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｘ₁、およびＸ₂は、式Ｉの化合物についての定義と同意義であり、Ａは活性化基、例えばＯＨ、−Ｂｒ、またはＣｌである）で示される化合物とカップリングする
ことを含む方法を提供する。

本明細書において用いられる用語は以下に示した意味を有する：

「アルキル」は、１〜１０の炭素原子およびより好ましくは１〜６の炭素原子を有する１価のアルキル基を意味する。この用語はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｎ−ヘキシルなどに例示される。

用語「Ｃ₁−Ｃ₄アルキル」は、好ましくは１〜４炭素原子の炭素原子を有する１価のアルキル基を意味する。
.この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、およびｔｅｒｔ−ブチルなどの基に例示される。

「置換されたアルキル」は、好ましくは、アルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、ケト、チオケト、カルボキシルアルキル、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ₂−アルキル、−ＳＯ₂−置換アルキル、−ＳＯ₂−アリール、−ＳＯ₂−ヘテロアリール、およびモノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換されたアルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−複素環アミノ、およびアルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環から選択される異なる置換基を有する非対称ジ−置換アミンからなる群から選択される１〜５の置換基を有するおよび好ましくは１〜３の置換基を有する１〜１０の炭素原子アルキル基を意味する。

「アルキレン」は、好ましくは１〜１０炭素原子およびより好ましくは１〜６炭素原子を有する２価のアルキルレン基を意味する。この用語は、メチレン（−ＣＨ₂−）、エチレン（−ＣＨ₂ＣＨ₂−）、ｔｈｅプロピレン異性体ｓ（例えば、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−および−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂−）などの基に例示される。

「置換されたアルキレン」は、好ましくは、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、ケト、チオケト、カルボキシルアルキル、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、複素環の、ニトロ、およびモノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換されたアルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−複素環のアミノ、およびアルキル、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環から選択される異なる置換基を有する非対称ジ−置換アミンからなる群から選択される１〜３の置換基を有する１〜１０炭素原子のアルキレン基を意味する。さらに、そのような置換されたアルキレン基としては、アルキレン基の２個の置換基が縮合して、アルキレン基縮合した１またはそれ以上のシクロアルキル、アリール、複素環またはヘテロアリール基を形成するものが含まれる。好ましくはそのような縮合したシクロアルキル基には、１〜３の縮合環構造が含まれる。

「アルケニレン」とは、好ましくは２〜１０の炭素原子、およびより好ましくは２〜６の炭素原子を有する２価のアルケニレン基を意味する。この用語は、エチニレン（−ＣＨ=ＣＨ−）、プロペニレン異性体（例えば、−ＣＨ₂ＣＨ=ＣＨ−および−Ｃ（ＣＨ₃）=ＣＨ−）などの基に例示される。

「置換されたアルケニレン」とは、好ましくは、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、ケト、チオケト、カルボキシルアルキル、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、複素環、ニトロ、およびモノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換されたアルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−複素環アミノ、およびアルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環からなる群から選択される異なる置換基を有する非対称ジ−置換アミンからなる群から選択される１〜３の置換基を有する２〜１０の炭素原子のアルケニレン基を意味する。さらに、そのような置換されたアルキレン基としては、アルキレン基の２個の置換基が縮合して、アルキレン基縮合した１またはそれ以上のシクロアルキル、アリール、複素環またはヘテロアリール基を形成するものが含まれる。

「アルカリール」とは、好ましくはアルキレン部分に１〜８の炭素原子を有し、アリール部分に６〜１０の炭素原子を有する、−アルキレン−アリール基を意味する。そのようなアルカリール基は、ベンジル、フェネチル等に例示される。

「アルコキシ」とは、「アルキル−Ｏ−」で示される基を意味する。好ましいアルコキシとしては、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキソキシ、１、２−ジメチルブトキシなどが挙げられる。

「置換されたアルコキシ」は、置換されたアルキルが前記と同意義である「置換されたアルキル−Ｏ−」で示される基を意味する。

「アルキルアルコキシ」とは、「−アルキレン−Ｏ−アルキル」で示される基を意味し、例えば、メチレンメトキシ（−ＣＨ₂ＯＣＨ₃）、エチレンメトキシ（−ＣＨ₂ＣＨ₂ＯＣＨ₃）、ｎ−プロピレン−イソ−プロポキシ（−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＯＣＨ（ＣＨ₃）２）、メチレン−ｔ−ブトキシ、（−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（ＣＨ₃）３）などが挙げられる。

「アルキルチオアルコキシ」とは、「−アルキレン−Ｓ−アルキル」で示される基を意味し、例えばメチレンチオメトキシ（−ＣＨ₂ＳＣＨ₃）、エチレンチオメトキシ、（−ＣＨ₂ＣＨ₂ＳＣＨ₃）、ｎ−プロピレン−チオ−イソ−プロポキシ、（−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＳＣＨ（ＣＨ₃）２）、メチレンチオ−ｔ−ブトキシ（−ＣＨ₂ＳＣ（ＣＨ₃）３）などが挙げられる。

「アルケニル」とは、好ましくは２〜１０の炭素原子およびより好ましくは２〜６の炭素原子を有し、および少なくとも１および好ましくは１〜２の場所でアルケニル不飽和を有するアルケニル基を意味する。好ましいアルケニル基としては、エチニル（−ＣＨ=ＣＨ₂）、ｎ−プロペニル（−ＣＨ₂ＣＨ=ＣＨ₂）、イソ−プロペニル（−Ｃ（ＣＨ₃）=ＣＨ₂）などが挙げられる。

「置換されたアルケニル」は、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、ケト、チオケト、カルボキシルアルキル、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、複素環の、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ₂−アルキル、−ＳＯ₂−置換アルキル、−ＳＯ₂−アリール、−ＳＯ₂−ヘテロアリール、およびモノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換されたアルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−複素環のアミノ、およびアルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環からなる群から選択される異なる置換基を有する非対称ジ−置換アミンからなる群から選択される１〜３の置換基を有する前記と同意義のアルケニル基を意味する。

「アルキニル」は、好ましくは、２〜１０の炭素原子およびより好ましくは２〜６炭素原子を有し、少なくとも１および好ましくは１〜２の場所でアルキニル不飽和を有するアルキニル基を意味する。好ましいアルキニルとしては、エチニル（−ＣＨ≡ＣＨ₂）、プロパルギル（−ＣＨ₂Ｃ≡ＣＨ）などが挙げられる。

「置換されたアルキニル」は、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、ケト、チオケト、カルボキシルアルキル、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、複素環の、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ₂−アルキル、−ＳＯ₂−置換アルキル、−ＳＯ₂−アリール、−ＳＯ₂−ヘテロアリール、およびモノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換されたアルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−複素環のアミノ、およびアルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環からなる群から選択される異なる置換基を有する非対称ジ−置換アミンからなる群から選択される１〜３の置換基を有する前記と同意義のアルキル基を意味する。

「アシル」とは、アルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換されたアルキル−Ｃ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換されたシクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、アリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−および複素環−Ｃ（Ｏ）−（ここで、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環は前記と同意義である）で表される基を意味する。

「アシルアミノ」は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ［ここで、各Ｒは、独立に水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリール、または複素環（ここで、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環波前記と同意義である）である］で表される基を意味する。

「アミノアシル」は、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ［ここで、各Ｒは、独立に水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリール、または複素環（ここで、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環波前記と同意義である）である］で表される基を意味する。

「アミノアシルオキシ」とは、−ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ［ここで、各Ｒは、独立に水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリール、または複素環（ここで、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環波前記と同意義である）である］で表される基を意味する。

「アシルオキシ」とは、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換されたアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、および複素環−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（ここで、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、および複素環は前記と同意義である）で表される基を意味する。

「アリール」とは、単環（例えば、フェニル）または複数の縮合した（融合した）環（例えば、ナフチルまたはアントリル）を有する６〜１４の炭素原子の不飽和芳香族炭素環基を意味する。好ましいアリールとしては、フェニル、ナフチルなどが挙げられる。

アリール置換基についての定義に特に制約されることがないかぎり、そのようなアリール基は、場合により、アシルオキシからなる群から選択される１〜５の置換基、ヒドロキシ、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、置換されたアルキル、置換されたアルコキシ、置換されたアルケニル、置換されたアルキニル、アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、複素環、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ₂−アルキル、−ＳＯ₂−置換アルキル、−ＳＯ₂−アリール、−ＳＯ₂−ヘテロアリール、トリハロメチル、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換されたアルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−複素環のアミノ、およびアルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環からなる群から選択される異なる置換基を有する非対称ジ−置換アミンからなる群から選択される１〜５および好ましくは１〜３置換基で置換されていてもよい。好ましい置換基としては、アルキル、アルコキシ、ハロ、シアノ、ニトロ、トリハロメチル、およびチオアルコキシが挙げられる。

「アリールオキシ」とは、アリール−Ｏ−（ここで、アリール基は、前記と同意義である場合により置換されたアリール基も含め、前記と同意義である）で示される基を意味する。

「カルボキシアルキル」とは、「−Ｃ（Ｏ）Ｏアルキル」（ここで、アルキルは前記と同意義である）で示される基を意味する。

「シクロアルキル」とは、３〜１２の炭素原子の単環または複数の縮合した環を有する環状のアルキル基を意味し、融合した、架橋したおよびスピロ二環系または多環系化合物が含まれる。そのようなシクロアルキル基としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどの単環構造、またはアダマンチル等の多環構造などが含まれる。

「置換されたシクロアルキル」とは、ヒドロキシ、アシル、アシルオキシ、アルキル、置換されたアルキル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アミノ、アミノアシル、アルカリール、アリール、アリールオキシ、ケト、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、トリハロメチルなどからなる群から選択される１〜５（好ましくは１〜３）の置換基を有するシクロアルキル基を意味する。

「シクロアルケニル」とは、単環で少なくとも１つの位置で内部不飽和を有する４〜８の炭素原子の環状のアルケニル基を意味する。適当なシクロアルケニル基の例としては、例えば、シクロブタン−２−エニル、シクロペンタン−３−エニル、シクロオクタン−３−エニルなどが挙げられる。

「置換されたシクロアルケニル」とは、ヒドロキシ、アシル、アシルオキシ、アルキル、置換されたアルキル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アミノ、アミノアシル、アルカリール、アリール、アリールオキシ、カルボキシル、ケト、チオケト、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、トリハロメチルなどからなる群から選択される１〜５置換基を有するシクロアルケニル基を意味する。

「ハロ」または「ハロゲン」とは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味し、好ましくはフルオロまたはクロロである。

「ヘテロアリール」とは、１〜１５の炭素原子、および少なくとも１つの環中（１を越える環が存在する場合）に酸素、窒素および硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する芳香族炭素環基を意味する。

ヘテロアリール置換基についての定義に特に制約されることがないかぎり、そのようなヘテロアリール基は、場合により、アルキル、置換されたアルキル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、チオアリールオキシ、トリハロメチルなどからなる群から選択される１〜５の置換基で置換されていてもよい。そのようなヘテロアリール基は、単環（例えば、ピリジルまたはフリル）、または融合した、架橋したおよびスピロ二環系または多環系化合物を含む複数の縮合環（例えば、インドリジニルまたはベンゾチエニル）を有していてもよい。好ましいヘテロアリールとしては、ピリジル、ピロリルおよびフリルが含まれる。

「複素環」または「複素環の」とは、単環または融合した、架橋したおよびスピロ二環系または多環系化合物を含む複数の縮合した環を有し、１〜１５の炭素原子、および環中に窒素、硫黄または酸素から選択される１〜４のヘテロ原子を有する、１価の飽和または不飽和の基を意味する。

複素環置換基についての定義に特に制約されることがないかぎり、そのような複素環基は、アルキル、置換されたアルキル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、チオアリールオキシ、トリハロメチルなどからなる群から選択される
１〜５置換基で場合により置換されていてもよい。そのような複素環基は、単環または複数の縮合した環を有していてもよい。好ましい複素環としては、モルホリノ、ピペリジニルなどが挙げられる。

窒素複素環およびヘテロアリールの例としては、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタルアジン、ナフチルピリジン、キニキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、モルホリノ、ピペリジニル、テトラヒドロフラニルなど、並びにＮ−アルコキシ−窒素含有複素環が挙げられるがこれらに限定されない。

「オキシアシルアミノ」とは、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ［ここで、各Ｒは独立に水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリール、または複素環（ここで、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環は前記と同意義である）である］で表される基を意味する。

「チオール」は、−ＳＨで表される基を意味する。

「チオアルコキシ」は、−Ｓ−アルキルで表される基を意味する。

「置換されたチオアルコキシ」は、−Ｓ−置換アルキルで表される基を意味する。

「チオアリールオキシ」とは、アリール−Ｓ−（ここで、前記と同意義の場合により置換されたアリール基を含め、アリール基は前記と同意義である）で表される基を意味する。

「ヘテロアリールオキシ」とは、ヘテロアリール−ｏ−（ここで、前記と同意義の場合により置換されたアリール基も含め、ヘテロアリール基は前記と同意義である）で表される基を意味する。

具体的な製造方法の態様では、本発明は、反応式１および２に記載するように式（４）の化合物の製造方法を提供する。以下の反応式において、置換基はすべて、特記しないかぎり前記と同意義であり、試薬はすべて、当分野において周知であり認識されているものである。
反応式１

反応式１、工程１では、適当な式（１）のＮ−アルキルフェネチルアミンを適当なビスアルコキシカルボニルアセテート転移試薬でアシル化し、式（２）の化合物を得る。適当な式（１）のＮ−アルキルフェネチルアミンは、式中、ＶおよびＲ₃が式（Ｉ）の最終生成物において要求される基である化合物である。そのようなＮ−アルキルフェネチルアミンは、２−ブロモまたは２−クロロエチルベンゼンを、当分野において周知であり理解されている条件下でＨ₂Ｎ−Ｒ₃で示されるアミンと反応させることにより簡単に製造される。適当なビスアルコキシカルボニルアセテート転移試薬は、Ｒ₄がＣ₁−Ｃ₄アルキルであるものであり、ビスアルコキシカルボニルアセチル基を式（１）の化合物に転移させる（例えば、ビスアルコキシカルボニル酢酸およびビスアルコキシカルボニルアセチルクロリド)(Ben-Ishai, Tetrahedron, 43,439-450 (1987)を参照のこと）。

例えば、適当な式（１）のＮ−アルキルフェネチルアミンを適当なビスアルコキシカルボニル酢酸と接触させて式（２）の化合物を得る。このようなカップリング反応はペプチド合成において一般的であり、本明細書中で用いる合成法を使用することができる。例えば、周知のカップリング試薬（例えば、カルボジイミド）を、周知の添加剤（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールなど）を用いて、または用いることなくこのアシル化を促進することができる。このようなカップリング反応では、反応中に生じた酸を取り除くために、しばしば適当な塩基を用いる。例として、適当な塩基には、トリエチルアミン、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンなどが挙げられる。通常、不活性な非プロトン性極性希釈剤（例えば、ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、テトラヒドロフランなど）中で反応を行う。典型的には、反応を約０℃〜約６０℃の温度で行ない、典型的には約１〜約２４時間を要する。反応が完了したら、式（２）の生成物を、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション（trituration）、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

あるいは、例えば、適当な式（１）のＮ−アルキルフェネチルアミンを適当なビスアルコキシカルボニルアセチルクロリドと接触させて式（２）の化合物を得る。このような酸クロリドは、当分野において周知の方法により、対応する酸から容易に製造する（例えば、三塩化リン、オキシ塩化リン、五塩化リン、塩化チオニル、または塩化オキサリルの作用により、少量のジメチルホルムアミドを用いてまたは用いることなく、不活性溶媒（例えば、トルエン、塩化メチレンまたはクロロホルム）中、約０〜８０℃の温度にて）。典型的には、反応は１〜２４時間の範囲の時間行なう。酸クロリドは、単離および精製するか、またはしばしば直接使用することもできる（すなわち、単離および／または精製有りでまたは無しで）。一般的に、このようなアシル化反応では、適当な塩基を用いて反応の間に生じた酸を取り除く。適当な塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンなどが挙げられる。通常、反応は不活性な非プロトン性極性希釈剤（例えば、塩化メチレン、クロロホルム、テトラヒドロフランなど）中で行う。典型的には、反応は約−２０℃〜約８０℃の温度で行い、約１〜約２４時間を要する。反応が完了したら、式（２）の生成物を、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

反応式１、工程２では、式（２）の化合物を環化させて式（３）の化合物を得る。

例えば、式（２）の化合物を、酸（例えば、トリフルオロメタンスルホン酸または硫酸）と接触させる。典型的には選択した酸を溶媒として用いて反応を行う。典型的には、最初に反応物を約−２０℃〜約０℃で混合し、ついでおよそ室温〜約６０℃までの温度に昇温させる。典型的には、環化反応は約１２〜７２時間を要する。反応が完了したら、式（２）の生成物を、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

反応式１、工程３では、式（３）の化合物を脱保護し、式（４）の化合物を得る。

このようなアルコキシカルボニルアミン保護基の脱離は当分野において周知であり、理解されている。例えば、Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora Greene (第１および第２版、Wiley-Interscience) ならびにBen-Ishai, Tetrahedron, 43, 439-450 (1987)。
反応式２

反応式２、工程１では、適当な式（５）のフェニル酢酸誘導体を適当な式（６）のアセタールとカップリングさせて式（７）の化合物を得る。適当な式（５）のフェニル酢酸誘導体は、Ｖが式Ｉの最終生成物において要求される基であり、Ａ₂が活性化基（activated group）（例えば、−ＯＨ、−Ｃｌまたは−Ｂｒ）であるものである。適当な式（６）のアセタールは、Ｒ₃が式Ｉの最終生成物において要求される基であり、Ｒ₅がＣ₁−Ｃ₄アルキルであるものである。このようなカップリング反応はペプチド合成において一般的なものであり、本明細書中で用いる合成方法は反応式１、工程１に記載されるように用いることができる。

さらに、反応式２、工程２に記載のカップリングは、混合溶媒（例えば、メチルｔ−ブチルエーテル、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、アセトンまたはジエチルエーテルおよび水）中、適当な式（５）のフェニル酢酸の酸ハライドおよび適当な式（６）のアセタールを用いて、Ｓｃｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ条件下で行うことができる。このような反応は、適当な塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウムまたは炭酸水素カリウム）を用いて行う。典型的には、反応物を攪拌するか、または激しく攪拌して、約−２０℃〜約８０℃の温度で行い、典型的には約１〜約２４時間を要する。反応が完了したら、式（７）の生成物を、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

反応式２、工程２では、式（７）の化合物を環化して式（８）の化合物を得る。このような環化反応は、酸（例えば、硫酸）中で行う。典型的には、酸を溶媒として用いる。一般的には、反応は約−２０℃〜約１５０℃で行い、典型的には約１〜約２４時間を要する。反応が完了したら、式（８）の生成物を、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

反応式２、工程３では、式（８）の化合物がアミノ転移反応を受けて式（９）の化合物が得られる。反応式２にオキシム化（oximation）を記載する。このようなオキシム化は、式（８）の化合物のエノラートをオキシム転移試薬（例えば、亜硝酸アルキルエステル）と接触させることにより達成される。式（８）の化合物のエノラートは、式（８）の化合物を適当な塩基（例えば、t-ブトキシドカリウム、ジイソプロピルアミドリチウム、ヘキサメチルシラジドリチウム、ヘキサメチルシラジドナトリウム、ヘキサメチルシラジドカリウムなど）と反応させることにより製造することができる。このようなオキシム化（oximination）は、Wheelerら、Organic Syntheses, Coll. Vol. VI, p. 840に例示されており、亜硝酸イソアミルをケトンと反応させて所望のオキシムを製造することが記載されている。典型的には、反応は溶媒（例えば、テトラヒドロフラン）中で行う。一般的に、反応は約−２０℃〜約５０℃の温度で行い、典型的には１〜約２４時間を要する。反応が完了したら、式（８）の生成物は、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

あるいは、このようなアミン転移反応はアジドを介して達成され得る。アジドは式（８）の化合物のエノラートをアジド転移試薬（例えば、トルエンスルホニルアジドおよびトリイソプロピルベンゼンスルホニルアジド）と反応させることにより形成させることができる。このような反応は、Evansら、J. Am. Chem. Soc., 112：4011-4030 (1990) 41に例示されている。典型的には、反応は溶媒（例えば、テトラヒドロフラン）中で行う。一般的に、反応は約−２０℃〜約５０℃の温度で行い、典型的には１〜約２４時間を要する。反応が完了したら、オキシムの代わりにアジドを有する式（８）の生成物を、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

反応式２,工程４に記載のように、オキシムを式（４）の化合物に還元する。このような還元は、水素および適当な触媒（例えば、ラネー−ニッケル）またはパラジウム触媒（例えば、パラジウム担持炭素）を用いて処理することにより達成される。典型的には、反応は溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、酢酸エチルまたはメタノール、エタノールおよびイソプロパノールのような低級アルコール）、酢酸、水、水性アンモニアなど、およびそれらの混合物中で行う。一般的に、反応は大気圧〜約６００ｐｓｉ（４１３７ｋＰａ）の範囲の水素圧で行う。一般的に、反応は約２０℃〜約１００℃の温度で行い、典型的には１〜約２４時間を要する。反応が完了したら、式（４）の生成物は、抽出、析出、クロマトグラフィー、ろ過、トリチュレーション、結晶化などを含む慣用的な方法により回収する。

あるいは、アミンをアジドを介して変換する場合は、アジド基を還元する。このような還元は上記の水素化により行う。

更なる態様では、本発明は、ラクトン類の製造のための立体特異的な製造方法を提供する。（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを含む式Ｉの化合物、およびそのキラル中間体の製造方法を提供する。そのような製造方法を反応式Ａに記載する。
反応式Ａ

反応式Ａ、工程１は、式（１０）のラクタムを得るための、適当な式（４）のラクタムの立体化学分割を記載する。当業者には理解されるように、本製造方法は、単一の異性体の製造に必ずしも限定される必要はない。むしろ、本製造方法は、ラクタムの特定のエナンチオマーのいずれか一方を製造することが可能であり、特に１−アミノ−３−アルキル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの異性体を製造するのに特に適している。

４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン部分の（Ｓ）−異性体に関して生物学的活性がより高いために、本発明は、実質的に純粋な（Ｓ）−異性体の製造として最も有用である。本明細書中で用いる場合、用語「実質的に純粋な」とは、（Ｒ）−または（Ｓ）−ラクタム、および具体的には（Ｒ）−および（Ｓ）−ｌ−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンのエナンチオマー的な純度を意味する。本発明に従い、実質的に純粋な（Ｓ）−１−アミノ−３−アルキル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを製造することができ、これは（Ｓ）−エナンチオマーを８０％より多く、好ましくは９０％より多く、より好ましくは９５％より多く、最も好ましくは９７％より多く含む。

例えば、式（４）の化合物の個々の異性体を、ジベンゾイル酒石酸、（Ｒ）−（−）−１０−カンファースルホン酸および（Ｄ）−（−）−マンデル酸塩の分別結晶により分割することができる。様々なジベンゾイル酒石酸塩がこの目的に適していると考えられる。特に、水素、ハロゲン、Ｃ₁−Ｃ₄アルキルおよびＣ₁−Ｃ₄アルコキシからなる群から選択されるパラ置換基を有するジベンゾイルエステルが好ましく、ジ−ｐ−トルオイル−タータレートが最も好ましい。ジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−タータレートを用いて（Ｓ）−異性体を得る。

反応式Ａ、工程１の好ましい態様では、式（４）の化合物は、式中Ｖが水素であり、Ｒ₃がメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、およびｓｅｃ−ブチルを含むＣ₁−Ｃ₄アルキルである化合物であり；最も好ましいのは、式中Ｖが水素でありＲ₃がメチルである化合物の使用である。

本発明の方法に従い、式（４）の化合物を選択した酸と接触させる。一般的に、約０.４モル当量〜大過剰の選択した酸を用いることができ、約０.４〜１.５モル当量が好ましく、約０.５〜１.１モル当量がより好ましい。

典型的には、製造方法は酸付加塩を溶液から結晶化することにより行う。特に、溶媒（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、イソブタノール、ｔ−ブタノール、アミルアルコール、イソアミルアルコール、ｔ−アミルアルコール、ヘキサノール、シクロペンタノールおよびシクロヘキサノールを含む低級アルコール）が適しており、メタノール、エタノールおよびイソプロパノールが好ましい。貧溶媒（anti-solvent）の使用が有効であるかもしれない。本明細書中で用いる場合、用語「貧溶媒」とは、溶媒と比較して塩が有意に溶解性が低い溶媒を意味する。好ましくは、貧溶媒を用いる場合、選択した溶媒と混和性である。適当な貧溶媒としては、エーテル（例えば、ジエチルエーテル、メチルｔ−ブチルエーテルなど）、および低級アルキルアセテート（例えば、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸プロピル、酢酸イソブチル、酢酸ｓｅｃ−ブチル、酢酸ブチル、酢酸アミル、酢酸イソアミルなど）およびアルカン（例えば、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサンなど）が挙げられる。ラセミ混合物からの酸付加塩の結晶化により本発明の製造方法を行う場合、貧溶媒を用いる際には望ましくないジアステレオマー塩の結晶化を避けるために注意を払わなければならない。

典型的には、初発の温度が約４０℃〜選択した溶媒の還流温度で、約０.０５モル濃度〜約０.２５モル濃度の初発濃度で行う。次いで、混合物を冷却して塩を得る。種結晶添加が有利であり得る。最初の析出には約４〜４８時間の攪拌が有効であろう。好ましくは、結晶化溶液をゆっくりと冷却する。結晶化は、室温〜約−２０℃の温度まで冷却するのが最も便利である。当分野において公知の技術（ろ過、傾斜、遠心分離、留去、乾燥などを含む）を用いて塩を回収することができる。式（１０）の化合物を選択した酸の酸付加塩として直接用いることができる。あるいは、使用する前に、式（１０）の化合物を酸交換後別の酸付加塩として単離するか、または当分野において周知であり理解されている塩基性条件下での抽出により塩基として単離することができる。

本発明の好ましい態様では、１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンを、芳香族アルデヒドの存在下での動的過程（dynamic process）として、ジ−ｐ−トリル−１−酒石酸、（Ｒ）−（−）−１０−カンファースルホン酸および（Ｄ）−（−）−マンデル酸からなる群から選択される酸のその酸付加塩として結晶化することを含んでなる、実質的にエナンチオマー純粋な（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンの動的分割（dynamic resolution）が提供される。この動的過程は、１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンが結晶化の間に単一な異性体へ変換され、その結果、収率が改善され、望ましくない異性体を含む廃棄分が回避される点で有用である。

様々なアルデヒドが、この方法に適当であると思われ、我々は、数多くのアルデヒドが実際に特に適当であることを見いだした。具体的には、我々は、本動的分割法において、サリチル酸が好ましく、サリチルアルデヒド、５−ニトロサリチルアルデヒドおよび３,５−ジクロロサリチルアルデヒドがより好ましいことを見いだした。

したがって、本方法を動的分割として行う場合、１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンを、アルデヒドの存在下、選択された酸と接触させる。一般的に、動的分割については、約０．９〜１．２モル当量、好ましくは約１モル当量の酸を使用する。アルデヒドは、一般に触媒量で使用する。典型的には、約０．５〜０．００１モル当量、好ましくは約０．１〜０．０１モル当量のアルデヒドを使用する。

本動的法は、典型的には、溶媒中または上記の貧溶媒なしの溶媒中で行う。１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オン、選択された酸およびアルデヒドの混合物を攪拌して所望の異性体に変換する。一般的に、この変換は室温〜その溶媒の還流温度で行う。一般に、変換には６〜４８時間を要する。

当業者に認識されているように、本方法を動的分割として行う場合、（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンの酸付加塩の使用は、単離された生成物中に少量のアルデヒドが存在するため、面倒になる。したがって、動的変換後に、（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３ベンゾアゼピン２−オンを、好ましくはその使用または塩基の形成の前に、塩交換によって、好ましくは塩酸塩として、単離することが好ましい。

当業者に認識されるように、式（１０）の化合物は、アルツハイマー病の処置に有用な化合物の様々な製造方法に使用することができる。これらの製造方法は、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ９７／２２９８６（１９９７年１２月２２日出願）および以下に記載されている。本発明の製造方法は、反応式Ａ、工程１に示す分割の利点を利用して式Ｉで示される化合物を製造することで特徴付けられる。

反応式Ａ、工程２は、ＰｇＮＨ−ＣＨＲ₂−Ｃ（Ｏ）−Ａで示される適当なアミノ保護されたアミノ酸と式（１０）の適当なラクタムとのカップリング反応を示す。適当なアミノ保護されたアミノ酸は、Ｐｇがアミン保護基であり、Ｒ₂は式Ｉの最終生成物における所望の基であり、Ａは、式（１０）の化合物のアミノ基とカップリングすることが可能な活性化基（例えば−ＯＨまたは−Ｃｌ）であるものである。そのようなアミノ保護されたアミノ酸は、当業者が容易に入手できる。

ＰｇＮＨ−ＣＨＲ₂−Ｃ（Ｏ）−Ａで示される好ましいアミノ保護されたアミノ酸は、Ｐｇがｔ−ブトキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルであり、Ｒ₂がメチルであるアミノ酸およびL−アミノ酸の立体構造を有するアミノ酸である。

反応式Ａ、工程２に示すカップリング反応は、ペプチド合成に慣用的に行われる反応が関係し、ここで用いられる合成方法も用いることができる。そのような方法は反応式１、工程１に詳細に記載されている。

反応式Ａ、工程３は、式（１２）で示される化合物を得るための、式（１１）で示される化合物の脱保護を示す。アミノ保護基のそのような脱保護は、当業者に周知であり認識されている。

反応式Ａ、工程４は、式Ｉで示される化合物を得るための、式（１３）Ｒ₁ＣＸ₁Ｘ₂−Ｃ（Ｏ）Ａ￥1で示される適当な化合物と、式（１２）で示される化合物のカップリング反応を示す。式（１３）の適当な化合物は、Ｒ₁、Ｘ₁およびＸ₂が式Ｉの最終生成物において望ましい基である化合物であり、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ９７／２２９８６（１９９７年１２月２２日出願）および本明細書に記載されているように当分野で周知である。式（１３）の適当な化合物は、式Ｉの最終化合物において所望の立体構造を有する。工程３に示すカップリング反応は、式（１３）の酸（Ａ₁が−ＯＨである化合物）またはその化合物から誘導される酸ハライド（Ａ₁が−Ｃｌまたは−Ｂｒである化合物）を用いて、反応式１、工程１に教示される方法と同様に行う。

式Ｉで示される化合物を製造するための別の方法は、式Ｉの化合物を直接得るための、式（１０）で示される適当な化合物と式（１４）Ｒ₁ＣＸ₁Ｘ₂−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＲ₂−Ｃ（Ｏ）Ａ￥2で示される適当な化合物のカップリング反応を示す、反応式Ａ、工程５で示される。式（１０）の適当な化合物は、工程２に示す通りである。式（１４）の適当な化合物は、Ｒ₁、Ｘ₁、Ｘ₂およびＲ₂が式Ｉの最終生成物における所望の基である化合物である。式（１４）の適当な化合物はまた、式Ｉの最終生成物に記載した立体構造の化合物でもある。

式（１４）の化合物は、上に記載したように、カルボキシ保護されたアミノ酸Ｈ₂Ｎ−ＣＨＲ₂−Ｃ（Ｏ）ＯＰｇ₁、と式（１３）の化合物とのカップリング反応により容易に製造される。このようなカップリング反応は当分野で周知であり、脱保護した後、式（１４）の化合物を与える生成物が得られる。

以下の実施例および製造例により、本発明をさらに説明する。これらの実施例および製造例は単なる説明であって、本発明の限定を何ら意図しない。

実施例および製造例において用いられる用語は、特に記載しない限り、通常の意味を有する。例えば、「℃」は摂氏温度を意味し；「ｍｍｏｌ」はミリモルを意味し；「ｇ」はグラムを意味し、「ｍＬ」はミリリットルを意味し、「ブライン」は塩化ナトリウムの飽和水溶液を意味し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを意味し、「ＨＰＬＣ」は高速液体クロマトグラフィーを意味する、等。

実施例１
１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−ベンゾアゼピン２−オンの合成
１５ｍＬの乾燥ＤＭＦ中の水素化ナトリウム（１．１当量）のスラリーに４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オン（０．００４２モル）を１０ｍＬのＤＭＦ中の溶液として加えた。次いで、ヨウ化メチル（約２当量）を加えた。ＴＬＣにより完了したら、反応混合物を氷上に注ぎ、酢酸エチルに抽出した。有機層を水で、次いでブラインで洗浄した。次いで、有機層をＮａ₂ＳO₄で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をＨＰＬＣにより精製し（ＬＣ２０００）、酢酸エチル／へキサン系で溶出して３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンを得た。

３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オン（１当量）をＴＨＦに溶解し、イソアミールニトリル（１．２当量）を加えた。混合物を氷浴にて０℃に冷却した。ＮａＨＭＤＳ（１．１当量、ＴＨＦ中１Ｍ）を滴加した。１時間後または反応が完結するまで攪拌した後、混合物を濃縮し、次いで１Ｎ塩酸水溶液で酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機部分を乾燥し、濃縮して粗製物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して１−ヒドロキシイミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンを得た。質量分析（Ｍ＋Ｈ）^＋，２０５．１。

１−ヒドロキシイミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン２−オンをＥｔＯＨ／ＮＨ₃（２０：１）に溶解し、高圧容器中、Raney ニッケルおよび水素（500 psi/3447kPa）を用いて１００℃にて１０時間水素化した。得られた混合物を濾過して濃縮し、油状物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して表題化合物を得た。

実施例２
１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの合成
モルトン（Morton）フラスコ（２０Ｌ）に、ＭＴＢＥ（５.５２Ｌ、７容量）および（Ｎ−メチルアミノ）アセトアルデヒドジメチルアセタール（６１４ｇ、５ｍｏｌ）を加えて室温で溶液を調製した。炭酸水素ナトリウム（５４６ｇ、６.５ｍｏｌ）と水（６.３１Ｌ、８容量）とを加えて調製した炭酸水素ナトリウム溶液を、モルトン反応フラスコに加えた。混合物を１０℃未満に冷却し、塩化フェニルアセチル（７８９ｇ、５ｍｏｌ）のＭＴＢＥ（７８９ｍＬ）溶液を、冷却した反応混合物に１時間かけて滴加した。添加後、反応混合物を室温で１時間攪拌した。この段階で、ＨＰＬＣ分析は反応が完了したことを示した。ＭＴＢＥ（４容量）での抽出処理、無水硫酸マグネシウム乾燥、続いてロータリーエバポレーターでの濃縮により、Ｎ−メチル−Ｎ−（２、２−ジメトキシエチル）フェニルアセトアミドを液体として得た。（Ｍ+Ｈ）⁺＝２３７.９。強窒素（strong nitrogen）雰囲気下でモルトンフラスコ（５Ｌ）にＨ₂ＳＯ₄（１.４２Ｌ）を滴加し、Ｎ−メチル−Ｎ−（２、２−ジメトキシエチル）フェニルアセトアミド（７１２ｇ、３ｍｏｌ）を反応フラスコに滴加すると発熱した（２２〜７８℃）。次いで、得られた反応物を３時間１１０℃まで加熱し、次いで室温まで冷却してモルトンフラスコ（２０Ｌ）に移した。１０℃未満で、反応混合物を水性水酸化ナトリウム（９.１８Ｌ、５Ｎ）でクエンチした。酢酸エチルでの抽出処理（２×２.８５Ｌ）、硫酸ナトリウムでの乾燥、続いて固体になるまで濃縮して、３−メチル−６、７−ジヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを固体として得た（５２０ｇ、７３.５％）。さらに純度を高めるために、この物質をＭＴＢＥから再結晶させて固体を得た。ｍｐ＝８１〜８２℃；（Ｍ+Ｈ）⁺＝１７４.２。

３−メチル−６、７−ジヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（１１３.８ｇ、０.６５７ｍｏｌ）のＴＨＦ（０.５Ｌ）溶液を０℃まで冷却し、亜硝酸イソアミル（１００.７５ｇ、０.８６ｍｏｌ）を滴加した。得られた混合物にＬｉＨＭＤＳ（１ＮＴＨＦ溶液、８５４ｍＬ、０.８５４ｍｏｌ）を、温度が１０℃未満に保たれるような速度で加えた。添加後、反応物を室温で２〜３時間攪拌しながら、ＨＰＬＣにより反応の進行をモニターした。反応が完了したら、混合物を０℃まで冷却し、ＨＣｌ水溶液（２Ｎ）を用いてｐＨを１２から２〜３へと調節した。得られた沈殿を１２〜１６時間攪拌した後、ろ過により単離し、乾燥して１−ヒドロキシイミノ−３−メチル−６、７−ジヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを得た（８６.３ｇ、６４.９％）。ｍｐ＝２２５〜２２６℃；（Ｍ+Ｈ）⁺＝２０３.０。

１−ヒドロキシイミノ−３−メチル−６、７−ジヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（３５ｇ、０.１７３ｍｏｌ）のエタノール溶液（５２５ｍＬ）を希ＨＣｌ（水１７ｍＬ中、濃縮水溶液１７.５ｇ）スラリーとしてのパラジウム担持炭素（１０％、３.５ｇ）とともにオートクレーブに入れた。得られた混合物を、反応が完了するまで５０℃、２５０ｐｓｉ（１７２３ｋＰａ）で水素化した。溶媒としてエタノールを用い、反応混合物をセライトのパッドでろ過し、濾液を９０ｍＬまで濃縮した。水（３５０ｍＬ）を濃縮液に加え、得られた溶液を、約２００ｍＬまでさらに濃縮した。ジクロロメタン（３５０ｍＬ）を水溶液に加えた後、水性水酸化ナトリウム（１Ｎ）を用いてｐＨを１１〜１１.５に調整した。有機部分を分離し、水性部分をジクロロメタン（１７５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を濃縮して残留物を得、放置すると結晶を生じ、標題化合物を得た。ｍｐ＝６９〜８１℃；（Ｍ+Ｈ）⁺＝１９１.０。

実施例３
１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの合成
モルトンフラスコ（２２Ｌ）にジクロロメタン（４.７３Ｌ、８容量）、Ｎ−メチルフェネチルアミン（５９１ｇ、４.３３ｍｏｌ）および水性炭酸水素ナトリウム（水４.７３Ｌ中、４３６.７ｇ、５.２ｍｏｌ）を加えた。混合物を５℃未満に冷却し、塩化クロロアセチル（５１３.７ｇ、４.５５ｍｏｌ）のジクロロメタン（８８７ｍＬ）溶液を、冷却した反応混合物に７０分間かけて滴加した。滴加の後、ＨＰＬＣ分析は反応が完了していることを示した。層を分離し、水層をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ロータリーエバポレーターで濃縮してＮ−メチル−Ｎ−（２−フェニルエチル）−１−クロロアセトアミドを得た（９１５.７ｇ、９９.８％）：（Ｍ+Ｈ）＝２１２.１。

窒素雰囲気下でフラスコ（１２Ｌ）にＮ−メチル−Ｎ−（２−フェニルエチル）−１−クロロアセトアミド（８８３.３ｇ、４.１７ｍｏｌ）およびオルト−ジクロロベンゼン（６.１８Ｌ）を加えた。塩化アルミニウム（１３１９ｇ、１０.１３ｍｏｌ）を加えると発熱した（２２〜５０℃）。次いで、得られた反応物を２.５時間１６５℃まで加熱した後、約１４時間かけて室温まで冷却した。反応混合物を約０℃まで冷却し、４回に分けて冷水を加え（８.８６Ｌ、約５℃）発熱を約４０℃に保った。層を分離し、水層をジクロロメタン（７.０７Ｌ）で抽出し、層を分離した。有機層を合わせ、塩酸水溶液（８.８３Ｌ、１Ｎ）、次いで、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（７.０７Ｌ）で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、シリカゲル（８８３ｇ）と一緒にして、シリカゲルのカラム（燒結ガラス漏斗中３.５３ｋｇ、ジクロロメタン中のスラリーとして充填した）にかけた。カラムをジクロロメタンで溶離して２５Ｌを集めた後、酢酸エチルで溶離して生成物を得た。生成物を含む画分を留去して３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを黄褐色の固体として得た（６０８ｇ、８３％）。

フラスコ（２２Ｌ）に、窒素下で、３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（６０６ｇ、３.４６ｍｏｌ）および亜硝酸イソアミル（５４３ｇ、４.５ｍｏｌ）を加えた（ＴＨＦ、７.８８Ｌ中）。混合物を約０℃まで冷却した後、ＬｉＨＭＤＳ（１ＮＴＨＦ溶液、４.５Ｌ、０４.５ｍｏｌ）を、温度が約７℃未満に保つような速度で加えた。添加後、反応物を室温で約２時間攪拌しながら、ＨＰＬＣにより反応の進行をモニターした。反応が完了したら、混合物を約０℃まで冷却し、ＨＣｌ水溶液（２Ｎ）を用いてｐＨを１２から約２〜１まで調整した。得られた沈殿を約６時間攪拌した後、ろ過により単離し、乾燥させて１−ヒドロキシイミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを得た（６０４.７ｇ、８５.６％）。

１−ヒドロキシイミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（６２５ｇ、３.０６ｍｏｌ）および３Ａエタノール（１５.６Ｌ）、希塩酸（水３２０ｍＬ中の濃塩酸水溶液３１２ｇ）、スラリーをパラジウム担持炭素（１０％、１２０ｇ）とともにオートクレーブに加えた。得られた混合物を、５０℃、２５０ｐｓｉ（１７２３ｋＰａ）で、反応が完了するまで（約４時間）激しく攪拌しながら水素化した。溶媒としてエタノールを用いて反応混合物をセライトのパッドでろ過し、ろ液を濃縮して固体を得た。固体をジクロロメタン（６Ｌ）で処理し、水層のｐＨが１１〜１１.５の間になるまで１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えた。混合物を攪拌し、層を分離し、水層をジクロロメタンで抽出した（２Ｌ）。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、ロータリーエバポレーターで留去して標題化合物を得た（４７７ｇ、８１.９％）。

実施例４
（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの合成
１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（１.５４４ｇ、８.１２ｍｍｏｌ）をメタノール（１５ｍＬ）中で穏やかに加熱して溶液にした。別のフラスコ中で、ジ−ｐ−トルオイル−１−酒石酸（３.１２ｇ、８.０８ｍｍｏｌ）をメタノール（１５ｍＬ）中に溶解し、ピペットを介して温アミン溶液に添加した。固体が析出するので混合物を加熱した。さらに３０ｍＬのメタノールを加えて溶液にし、これを３０〜４０分間還流し、次いでゆっくりと室温まで冷却して固体を得た。約１８時間攪拌した後に、ろ過により固体を集め、少量の冷メタノールでリンスして、（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸塩（９６％収率、９４.７％ｅｅ）を得た。

（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸塩（１１.８３ｇ、２０.５ｍｍｏｌ）を１.０Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（４５ｍＬ）に溶解し、塩化メチレン（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた塩化メチレン層を１.０Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３５ｍＬ）、次いでブライン溶液で洗浄し、無水ＭｇＳ０₄で乾燥させた。減圧下で溶媒を留去し、標題化合物を無色の油状物として得た（３.３８ｇ、８７％収率、９３.２％ｅｅ）。

実施例５
（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの合成
１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（６.０ｇ、３１.５ｍｍｏｌ）を、メタノール（７５ｍＬ）中で穏やかに加熱して溶液を形成し、温メタノール（７５ｍＬ）中のジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸（１２.２ｇ、３１.５ｍｍｏｌ）を合わせた。液体に種結晶を添加すると固体が生じた。メタノールをさらに１００ｍＬ加え、混合物を攪拌した。約１８時間攪拌した後、ろ過により固体を集め、少量の冷却メタノールによりリンスして固体を得た（６.７ｇ）。固体をメタノール（２００ｍＬ）と合わせ、攪拌した。１８時間後、固体を集め、（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸塩を得た（４.４ｇ）。実施例４に記載の方法により塩基を単離して標題化合物を得た（９６％ｅｅ）。

実施例６
（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン
２２Ｌの容器中、窒素下で１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（４３８ｇ、２.３ｍｏｌ）を加熱（約４０℃）してメタノール（４.３８ｍＬ）溶液を形成した。別のフラスコに、ジ−ｐ−トルオイル−１−酒石酸（８８９.７ｇ、２.３ｍｏｌ）をメタノール（４.３８Ｌ）中に溶解し、約４０℃まで加熱した後、１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを加えた。加熱を継続し、追加のメタノール（６.１３Ｌ）を加えた後、混合物を約４５分間還流し、次いでゆっくりと室温まで冷却して固体を得た。約１８時間攪拌した後、ろ過により固体を集め、少量の母液でリンスし、風乾させた後、酢酸エチル（約２Ｌ）を用いて、（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸塩を得た（５６１.６ｇ）。（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸塩、ジクロロメタン（６.５７Ｌ）および１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（６.５７Ｌ）を合わせ、攪拌した。層を分離し、有機層を１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３.２８Ｌ）で２回、ブライン（２.４６Ｌ）で１回抽出した後、硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、ロータリーエバポレーターで留去して標題化合物を得た（２５０ｇ、５７.４％、９４.１％ｅｅ）。

実施例７
（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン塩酸塩の合成
１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（３１.９ｇ、１６８ｍｍｏｌ）を、酢酸イソプロピル（約３００ｍＬ）中でスラリー化し、４５℃に加熱した。別のフラスコ中で、（Ｒ）−（−）−Ｄ−マンデル酸（２５.０ｇ、１６４ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（１３０ｍＬ）中で溶液になるまで加熱し、上記で得られた１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン／酢酸イソプロピルのスラリーに加えて溶液を得、この溶液から沈殿が急速に形成した。混合物を約４５℃で、約３時間攪拌した。５−ニトロサリチルアルデヒド（２−ヒドロキシ−５−ニトロベンズアルデヒド）（１.４０ｇ、８.３８ｍｍｏｌ、５ｍｏｌ％）をこの温溶液に加え、混合物を４５℃で攪拌した。約１４時間後、スラリーを室温まで冷却し、２時間攪拌した後、固体をろ過により集め、冷酢酸イソプロピル（７０ｍＬ）でリンスし、減圧オーブン中で４０℃にて乾燥させて（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（Ｒ）−マンデル酸塩４６．６２ｇを得た（８２.９％収率、９８.４％ｅｅ）。

（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（Ｒ）−マンデル酸塩（２.４２ｇ、７.０６ｍｍｏｌ、９８.４％ｅｅ）を、室温で、酢酸エチル（２５ｍＬ）中でスラリー化した。濃塩酸水溶液（１.１ｍＬ、約１１.２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を激しく攪拌しながら３.５時間５０℃に加熱した。スラリーを室温まで冷却し、ろ過し、メチルｔ−ブチルエーテル（約１０ｍＬ）でリンスして標題化合物を得た（１.４８ｇ、９２.５％収率、９７.９％ｅｅ）。

実施例８
（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの合成
丸底フラスコに、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニン（１.０当量）、ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（約１.１当量）および（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン-2-オン（１.０当量）（ＴＨＦ中）を窒素雰囲気下で入れた。ヒューニッヒ塩基（Hunig's base）（Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、１.１当量）をよく攪拌した混合物に加え、続いてＥＤＣ（１.１当量）を加えた。４〜１７時間室温で攪拌した後、減圧下で溶媒を留去し、残留物を酢酸エチルおよび水に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、１ＮＨＣｌ水溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で溶媒を留去して、１−（Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニニル）アミノ３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを得た：質量分析（Ｍ+Ｈ）⁺、３６２.３。

１,４−ジオキサン中の１−（Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニニル）アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの攪拌溶液（０.０３〜０.０９Ｍ）に無水ＨＣｌ気流を通し、Ｎ₂下、氷浴中で１０〜１５分約１０℃に冷やした。溶液に栓をした後、冷却浴を取り外し、溶液を２〜８時間攪拌しながら室温まで昇温させ、出発物質の消費をＴＬＣによりモニターした。この溶液を濃縮して１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを得、これをさらに精製することなく用いた。

窒素下、ＴＨＦ中１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−３−メチル−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（１.０当量）、ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１.１当量）および（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−酪酸（１.０当量）。ヒューニッヒ塩基（Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、１.１当量）をよく攪拌した混合物に加え、続いてＥＤＣ（１.１当量）を加えた。室温で４〜１７時間攪拌した後、減圧下で溶液を留去し、残留物を酢酸エチル（または同様の溶媒）および水に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、１ＮＨＣｌ、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去して標題化合物を得た。

実施例９
（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの合成
丸底フラスコに、窒素下でＴＨＦ（３.７６Ｌ）中、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニン（２４９.５ｇ、１.３２ｍｏｌ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（２３２.２ｇ、１.５２ｍｏｌ）および（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（２５０.８ｇ、１.３２ｍｏｌ）を入れた。混合物を５℃未満に冷却した後、ヒューニッヒ塩基（Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、１８８.４ｇ、１.４５ｍｏｌ）、続いてＥＤＣ（２８３.７ｇ、１.４５ｍｏｌ）を添加した。６時間攪拌した後、反応混合物を室温まで加温し、約１４時間攪拌した。溶媒を減圧下で取り除き、残留物を酢酸エチル（３.７６Ｌ）および水（１.７６Ｌ）中に溶解し、層を分離し、有機層を水（１.７６Ｌ）で抽出し、水層を合わせ、酢酸エチル（１.７６Ｌ）で抽出した。有機層を合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１.７６Ｌ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ロータリーエバポレーターで留去して１−（Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニニル）アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを得た（４６３ｇ、９７.２％）。

表面下拡散チューブ（subsurface dispersion tube）を用いて約０℃に冷却した酢酸エチル（１.７６Ｌ）に無水ＨＣｌガスを通すことにより、ＨＣｌの酢酸エチル溶液を製造した。上記で製造したＨＣｌの酢酸エチル溶液を、激しく攪拌した１−（Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニニル）アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（４６２ｇ、１.２８ｍｏｌ）の酢酸エチル（３.７Ｌ）中のスラリーに加えた。酢酸エチル（１Ｌ）をさらに加え、反応混合物を室温まで昇温させ、２２時間攪拌した。反応混合物をろ過して固体を得た。固体をアセトニトリル（５Ｌ）でスラリー化し、還流温度に加熱し、次いで約６０℃まで冷却した後、ろ過し、乾燥させて１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンを得た（３８９.８ｇ、９４.７％）。

ＴＨＦ（４.８Ｌ）中の、１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−３−メチル−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン（３６９.５ｇ、１.１８ｍｏｌ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（２０７.６ｇ、１.３６ｍｏｌ）、ヒューニッヒ塩基（Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、３５２.２ｇ、２.７１ｍｏｌ）および（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−酪酸（１４０.６ｇ、１.１８ｍｏｌ）を窒素雰囲気下で合わせ、５℃未満に冷却した。ＥＤＣ（２５３.７ｇ、１.３ｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温まで加温し、攪拌した。約２５時間後、反応混合物をジクロロメタン（５.５４Ｌ）で希釈し、水（２.２２Ｌ）で抽出した。有機層を水（２.２２Ｌ）で抽出し、水層を合わせ、ジクロロメタン（５.５４Ｌ）で抽出した。有機層を合わせ、水（２.２２Ｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２.２２Ｌ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ロータリーエバポレーターで留去して標題の化合物４２８ｇ（１００％）を得た。

実施例１０
（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−ｌ−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物の合成
（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−ｌ−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの固体を、アセトン（３.４２Ｌ）および水（０.８５６Ｌ）中に攪拌しながら溶解した（４０℃）。この溶液を約２Ｌずつに分け、濁った溶液を５０℃に温めながらそれぞれに水（７.１９Ｌ）を加えた。水を完全に加えたら、その濁った溶液を室温に冷却して固体を得、室温でのスラリーとして約１４時間攪拌した後、濾過し、乾燥して標題の化合物３１０.６ｇ（６６.２％）を得た。

医薬として用いる場合、通常、本発明は医薬組成物の形態で投与される。したがって、別の実施態様では、本発明は有効量のＮ−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶および製薬上許容される希釈剤を含有する医薬組成物を提供する。このような組成物は、β−アミロイドペプチドの放出および／またはその合成を阻害するために使用され、これはアルツハイマー病の治療を含む。したがって、本発明は、β−アミロイドペプチドの放出および／またはその合成を阻害する、特にアルツハイマー病の治療を含む医薬の製造のための（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶の使用を包含する。

（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶は様々な経路により投与することができる。本発明の化合物は、経口および非経口経路を含む、有効量で生物学的に利用可能な化合物をもたらす任意の形態または様態で投与することができる。例えば、本発明の化合物は、経口、吸入、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、鼻内、経直腸、眼内（occularly）、局所的、舌下、口腔内などにより投与することができる。

本発明の組成物の製造に際しては、通常、活性成分を賦形剤と混合するか、賦形剤で希釈するか、またはカプセル、サシェ（sachet）、紙もしくは他の容器の形態であり得る担体内に封入する。本発明の化合物は単独で投与するか、または医薬組成物の形態、すなわち、製薬上許容される希釈剤（例えば、担体または賦形剤）と組み合わせて投与することができ、その割合および性質は、本発明の化合物の溶解性および化学的特性、選択した投与経路および標準的な製薬的手順により決定する（Remington's Pharmaceutical Sciences,第18版, Mack Publishing Co. (1990)）。

本発明の医薬組成物は、製薬分野において周知の方法で製造される。担体または賦形剤は、固体、半固体または液体の材料であってよく、活性成分のビヒクルまたは媒体として供する。適当な担体または賦形剤は当分野において周知である。医薬組成物は経口用、吸入用、非経口用または局所用の使用に適合させ、錠剤、カプセル剤、エアロゾル、吸入剤、坐剤、液剤、懸濁剤などの形態で患者に投与することができる。

治療用経口投与の目的のために、化合物を賦形剤とともに組み込んで、錠剤、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、カシェ剤（wafers）、チューイングガムなどの形態で使用することができる。これらの製剤は、本発明の化合物（活性成分）を少なくとも４％含有するべきであるが、具体的な剤型に依存して変更することができ、通常、投与単位の重量の２％〜約９０％の間がよいであろう。組成物中に存在する化合物の量は、適当な用量が得られる量である。本発明の好ましい組成物および製剤を当業者が決定することもできる。

また、錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤などは以下の添加物を１種以上含有し得る。微晶性セルロース、トラガカントガムまたはゼラチンなどの結合剤、デンプンまたはラクトースのような賦形剤、アルギン酸、Primogel、コーンスターチなどの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、シリコーンオイルまたはSterotexなどの滑沢剤、コロイド状二酸化ケイ素のような流動促進剤（glidants）、ならびにスクロースまたはサッカリンなどの甘味料が添加されても良く、またはペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ香料などの矯味矯臭剤が添加されてもよい。投薬単位形態がカプセルである場合、上記のタイプの材料に加えて、ポリエチレングリコールまたは脂肪油などの液体担体を含有してもよい。他の投薬単位形態は、投薬単位の物理的形状を修飾する他の様々な材料を含有し得る（例えば、コーティング）。従って、錠剤または丸剤を糖、セラックまたは他のコーティング剤を用いてコーティングすることができる。シロップ剤は、本発明の化合物に加えて甘味料としてスクロース、ならびに特定の保存剤、染料および着色料および香料を含有し得る。組成物の製造の際に用いるこれらの様々な物質は、製薬上純粋であり、使用する量では非毒性でなければならない。

非経口投与の目的のために、本発明の化合物を液剤または懸濁剤に含有させることができる。典型的には、これらの製剤は、本発明の化合物を少なくとも０.１重量％含有するが、これは０.１重量％〜約９０重量％の範囲で変更することができる。このような組成物中に存在する化合物の量は、適切な用量が得られる量である。また、本液剤または懸濁剤は、以下の添加剤を１種以上含有していてもよい：注射用水、生理食塩水、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの滅菌希釈剤、ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤、エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝化剤、ならびに塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの浸透圧（ｔｏｎｉｃｉｔｙ）調節のための試薬。非経口製剤は、アンプル、使い捨て注射器またはガラス製もしくはプラスチック製の複数回投与用バイアル中に封入することができる。好ましい組成物および製剤を当業者が決定することもできる。

また、本発明の化合物は局所的に投与することもでき、そのような場合には、担体に溶液、軟膏またはゲルの基剤を含むのが適当であり得る。基剤は、例えば、以下のものを１種以上を含有していてもよい：ペトロラタム、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜蝋、鉱油、水およびアルコールなどの希釈剤、ならびに乳化剤および安定化剤。局所用製剤は、ある濃度の式Ｉの化合物またはその製薬的な塩を、約０.１〜約１０％ｗ／ｖ（単位体積あたりの重量）で含有し得る。

本発明の別の好ましい製剤は、経皮送達デバイス（パッチ）を用いたものである。このような経皮パッチを使用して、本発明の化合物の、制御された量での連続的または不連続的な投薬をもたらすことができる。薬剤の送達のための経皮パッチの構築および使用は、当分野において周知である。例えば、米国特許第５、０２３、２５２号（１９９１年６月１１日発行）を参照のこと（参照して本明細書中に組み込む）。このようなパッチは、薬剤の連続的、脈動的または必要時（on demand）送達のために構築され得る。

本発明の実施をより十分に説明するために、典型的な医薬組成物を以下に記載する。この例示は単なる説明であり、本発明の範囲を限定することはなんら意図しない。

製剤例１
以下の成分を含有するゼラチン硬カプセルを製造する。
成分量（mg／カプセル）
活性成分３０.０
デンプン３０５.０
ステアリン酸マグネシウム５.０
上記の成分を混合し、３４０mgの量でゼラチン硬カプセル剤に充填する。

製剤例２
以下の成分を使用して錠剤製剤を製造する。
成分量（mg／錠剤）
活性成分２５.０
微晶性セルロース２００.０
コロイド状二酸化ケイ素１０.０
ステアリン酸５.０
成分を混合し、圧縮して各々重量２４０mgの錠剤を形成する。

製剤例３
以下の成分を含有する乾燥粉末吸入製剤を製造する。
成分重量％
活性成分５
ラクトース９５
活性成分をラクトースと混合し、混合物を乾燥粉末吸入器に加える。

製剤例４
活性成分３０mgを各々含有する錠剤を以下のようにして製造する。
成分量（mg／錠剤）
活性成分３０.０ mg
デンプン４５.０ mg
微晶性セルロース３５.０ mg
ポリビニルピロリドン（滅菌水中１０％溶液として）４.０ mg
カルボキシメチル化デンプンナトリウム４.５ mg
ステアリン酸マグネシウム０.５ mg
タルク１.０ mg
計１２０ mg
活性成分、デンプン及びセルロースをNo.２０メッシュU.S.ふるいにかけ、十分に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を得られた粉末と混合し、次いで、これを１６メッシュU.S.ふるいに通す。そのように製造した顆粒を５０〜６０℃で乾燥させ、１６メッシュU.S.ふるいにかける。次いで、予めNo.３０メッシュU.S.ふるいに通したカルボキシメチル化デンプンナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを顆粒に加え、混合後、錠剤機で圧縮して各々重量１５０mgの錠剤を得る。

製剤例５
各々４０mgの医薬を含むカプセル剤を以下のように製造する。
成分量（mg／カプセル）
活性成分４０.０ mg
デンプン１０９.０ mg
ステアリン酸マグネシウム１.０ mg
計１５０.０ mg
活性成分、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、No.２０メッシュU.S.ふるいに通し、１５０mgの量で硬ゼラチンカプセルに充填する。

製剤例６
活性成分を各々２５mg含有する坐剤を以下のようにして製造する。
成分量
活性成分２５mg
飽和脂肪酸グリセリド２,０００mgになるまで
活性成分をNo.６０メッシュU.S.ふるいに通し、必要最小限の熱を用いて予め溶融した飽和脂肪酸グリセリドに懸濁する。次いで、混合物を公称２.０g容量の坐剤型に注ぎ、冷却させる。

製剤例７
投薬量５.０ｍL あたり医薬を５０mg各々含有する懸濁剤を以下のようにして製造する。
成分量
活性成分５０.０ mg
キサンタンガム４.０ mg
カルボキシメチルセルロースナトリウム（１１％）
微晶性セルロース（８９％）５０.０ mg
スクロース１.７５ g
安息香酸ナトリウム１０.０ mg
香料および着色料適宜
精製水５.０ｍL になるまで
活性成分、スクロースおよびキサンタンガムを混合し、No.１０メッシュU.S.ふるいにかけ、次いで予め調製した微晶性セルロースおよびカルボキシメチルセルロースの水溶液と混合する。安息香酸ナトリウム、香料および着色料を少量の水で希釈し、攪拌しながら加える。次いで、十分量の水を添加して必要な体積にする。

製剤例８
１５mgの医薬を各々含むカプセル剤を以下のように製造する。
成分量（mg／カプセル）
活性成分１５.０ mg
デンプン４０７.０ mg
ステアリン酸マグネシウム３.０ mg
計４２５.０ mg
活性成分、セルロース、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、No.２０メッシュU.S.ふるいに通し、５６０mgの量で硬ゼラチンカプセルに充填する。

製剤例９
皮下用製剤は以下のように製造することができる。
成分量
活性成分１.０ mg
コーン油１ｍL
コーン油中の活性成分の溶解度に依存して、活性成分の約５.０mgまで、または所望であればそれ以上をこの製剤中に用いてよい。

製剤例１０
局所用製剤は以下のように製造し得る。
成分量
活性成分１−１０ g
乳化ワックス３０ g
流動パラフィン２０ g
白色軟パラフィン１００ gになるまで
白色軟パラフィンを加熱して溶かす。流動パラフィンおよび乳化ワックスを入れ、溶解するまで攪拌する。活性成分を加え、分散するまで攪拌を続ける。次いで、混合物を固体になるまで冷却する。

方法の一態様において、本発明は、β−アミロイドペプチドの放出および／またはその合成を阻害する方法に関し、この方法は、そのような阻害を必要とする患者に有効量の（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶を投与することを含む。具体的な方法の態様において、本発明はアルツハイマー病を処置する方法を提供し、この方法は、そのような治療を必要とする患者に有効量の（Ｎ）−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶を投与することを含む。

現在アルツハイマー病に罹患している患者を処置することにより、またはその疾患を発症する危険性のある患者を予防的に処置することにより、当業者がアルツハイマー病に影響を及ぼすことができることも理解される。即ち、「処置」および「処置する」なる語句にはアルツハイマー病の進行を遅延させること（slowing）、妨げること（interrupting）、抑止すること（arresting）、制御すること（controlling）、または停止させること（stopping）であり得る、全てのプロセスを意味することが意図されるが、必ずしも全ての症状の全体的な排除を意味する必要はない。したがって、本発明の方法は、アルツハイマー病を発症する危険性のある患者におけるアルツハイマー病の発症の予防、アルツハイマー病の進行の阻害、および進行したアルツハイマー病の処置を含む。

本明細書において用いられる「患者」なる語句は、βアミロイドペプチドの放出および／またはその合成の増大に関連する障害（アルツハイマー病を含む）を患った温血動物（例えば、哺乳動物）を意味する。モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウマ、ウシ、ヒツジおよびヒトが、この用語の意味の範囲内に含まれる動物の例である。このような処置を必要とする患者は容易に診断される。

本明細書において用いられる、式Ｉの化合物の「有効量」なる語句は、β−アミロイドペプチドの放出および／またはその合成の阻害、特にアルツハイマー病の治療、において有効な量を意味する。

有効量は、当業者としての担当医師が、慣用的技術を使用することによって、および同様の状況下で得られた結果を観察することによって、容易に決定することができる。有効量、即ちＮ−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶の用量、を決定する際には、Ｎ−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オンの効力および特性、患者の種、大きさ、年齢および一般的健康状態、疾患が関与する程度および重篤度、個々の患者の応答、投与の形態、投与した製剤のバイオアベイラビリティ特性、選択した投薬レジメ、他の薬の併用、およびその他関連する状況、を含む（しかし、これらに限定されるわけではない）数多くの因子が担当医師により考慮される。

Ｎ−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物の有効量は、約０.１ｍｇ／ｋｇ体重／日（ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）〜約１００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの間で変動すると考えられる。好ましい量は、当業者が決定することができる。

本発明のＮ−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−４、５、６、７−テトラヒドロ−２Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物は、以下に記載のものを含む様々な生物系において試験することができる。

実施例Ａ
β−アミロイド産生の阻害の検出のための細胞性スクリーニング
スウェーデン（Swedish）変異を有する細胞系においてβ-アミロイド産生を阻害する能力について、上記式Ｉの数多くの化合物をアッセイした。このスクリーニングアッセイは、Lys₆₅₁Met₆₅₂からAsn₆₅₁Leu₆₅₂（APP751ナンバリング）の二重変異を含むアミロイド前駆体タンパク質７５１（ＡＰＰ７５１）の遺伝子で安定にトランスフェクトした細胞（Ｋ２９３＝ヒト腎臓細胞系）を、国際特許出願公報第９４／１０５６９⁸およびＣｉｔｒｏｎら¹²に記載の方法で用いた。この変異は、一般にスウェーデン変異と称され、「２９３７５１ＳＷＥ」と表される細胞を、ダルベッコ最小必須培地（Sigma, St. Louis, MO）＋１０％ウシ胎仔血清中、１ウェルあたり２〜４×１０⁴細胞でコーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）９６ウェルプレートにプレーティングした。β−アミロイドのＥＬＩＳＡ結果がアッセイのリニアな範囲内になるようにするためには、細胞数が重要である（約０.２〜２.５ｎｇ／ｍＬ）。

１０％二酸化炭素中で平衡化したインキュベーター内３７℃で一晩インキュベーションした後培地を取り除き、２時間の前処置期間のために、式Ｉの化合物（薬物）を含有する培地（１ウェルあたり２００μＬ）で置き換え、細胞を上記のようにインキュベーションした。薬物ストックを１００％ジメチルスルホキシド中、処置に用いる最終薬物濃度でジメチルスルホキシドの濃度が０.５％を超えないように調製した（実際には、通常０.１％に等しい）。

前処置期間の最後に、再度培地を取り除いて新しい薬物含有倍地（上記）に置き換え、さらに２時間細胞をインキュベーションした。処置した後、プレートをＢｅｃｋｍａｎＧＰＲで室温にて１２００ｒｐｍで５分間遠心分離し、順化培地から細胞細片をペレット化した。各ウェルから、順化培地またはその適当な希釈液１００μＬを、国際特許出願公報第９４／１０５６９⁸号に記載されているように、予めβ−アミロイドのアミノ酸１３〜２８に対する抗体２６６[P. Seubert, Nature (1992) 359: 325〜327］でプレコーティングしたＥＬＩＳＡプレートに移し、４℃で一晩保存した。翌日、β-アミロイドペプチドのアミノ酸１〜５に対する標識抗体3D6[P. Seubert, Nature (1992) 359：325〜327］を用いるＥＬＩＳＡアッセイを行ない、産生したβ-アミロイドペプチドの量を測定した。

化合物の細胞毒性の影響を、Hansenらの改変法を用いて測定した。組織培養プレートに維持した細胞に、３−（４,５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２,５−ジフェニルテトラゾリウム臭化物(MTT) (Sigma, St. Louis, MO) ストック溶液（５ｍｇ／ｍＬ）を加え、最終濃度を１ｍｇ／ｍＬにした。細胞を３７℃で１時間インキュベーションし、同体積のＭＴＴ溶解緩衝液（５０％ジメチルホルムアミド中２０％ｗ／ｖドデシル硫酸ナトリウム、ｐＨ４.７）の添加により細胞活性を止めた。室温で一晩振盪することにより完全な抽出を達成した。Molecular Device's UV_maxマイクロプレートリーダーで細胞生存率の指標としてＯＤ₅₆₂とＯＤ₆₅₀との差異を測定した。

β−アミロイドペプチドＥＬＩＳＡの結果を標準曲線に当てはめ、β−アミロイドペプチドのｎｇ／ｍＬ数として示した。細胞毒性を標準化するために、これらの結果をＭＴＴの結果で割り、薬物不含対照の結果に対する百分率として表す。結果はすべて、少なくとも６回のアッセイの平均および標準偏差である。

実施例Ｂ
β−アミロイドの放出および／または合成のインビボ抑制
本実施例は、β−アミロイドの放出および／または合成のインビボでの抑制について、本発明の化合物をどのように試験し得るかを説明する。これらの実験に３〜４月齢のＰＤＡＰＰマウスを用いる [Gamesら（1995）Nature 373：523-527]。試験する化合物に依存して、化合物を通常１〜１０ｍｇ／ｍＬで処方する。化合物の溶解係数が低いため、種々のビヒクル、例えばコーン油（Safeway, South San Francisco, CA）；コーン油中のエタノール；２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（Research Biochemicals International, Natick MA）およびカルボキシ-メチル-セルロース（Sigma Chemical Co., St. Louis MO）とともに処方しても良い。

２６ゲージ針を用いてマウスに皮下投与し、３時間後、動物をＣＯ₂で安楽死させ、０.５ＭＥＤＴＡ（ｐＨ８.０）の溶液でコーティングした１ｃｃの２５Ｇ５／８”ツベルクリン注射器／針を用い、心臓穿刺により血液を採取する。血液を、ＥＤＴＡを含むBecton Dickinson vacutainerチューブに入れ、５℃にて１５００×ｇで１５分間遠沈する。次いで、マウスの脳を取り出し、皮質および海馬を切除して、氷上に置く。

１．脳アッセイ
酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）用の海馬および皮質組織を調製するために、脳の各領域を、１０倍量の氷冷グアニジン緩衝液（５.０Ｍグアニジン−ＨＣｌ、５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８.０）中、Kontes電動乳棒（Fisher, Pittsburgh PA）を用いてホモジナイズする。ホモジネートを、ロータリープラットフォーム上で室温にて３〜４時間穏やかに振盪し、β−アミロイドの定量前に−２０℃で保存する。

脳ホモジネートを氷冷カゼイン緩衝液［０.２５％カゼイン、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）、０.０５％アジ化ナトリウム、２０μｇ／ｍL アプロチニン／５ｍＭＥＤＴＡ、ｐＨ８.０、１０μｇ／ｍL ロイペプチン］で１：１０に希釈し、グアニジンの最終濃度を０.５Ｍまで低下させた後、４℃にて、１６、０００×ｇで２０分間遠心分離する。必要であれば、０.５Ｍグアニジン塩酸塩を添加たカゼイン緩衝液を添加することにより、サンプルをさらに希釈してＥＬＩＳＡ測定に最適な範囲にする。β−アミロイド標準（１〜４０または１〜４２アミノ酸）は、最終組成が０.１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）存在下、０.５Ｍグアニジンに等しくなるように調製する。

β−アミロイド（アミノ酸１〜４０）およびβ−アミロイド（アミノ酸１〜４２）の両方を定量する全β−アミロイドサンドウィッチＥＬＩＳＡは、β−アミロイドに対する２種のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）から構成される。補足抗体２６６[P. Seubert, Nature (1992) 359：325-327]は、β−アミロイドのアミノ酸１３〜２８に特異的である。β−アミロイドのアミノ酸１〜５に特異的な抗体３Ｄ６[Johnson-Woodら、PNAS USA (1997) 94：1550-1555]をビオチン化し、アッセイにおいてレポーター抗体として用いる。３Ｄ６のビオチン化の方法は、１００ｍＭ炭酸水素ナトリウムのｐＨ８.５緩衝液を用いることを以外は、免疫グロブリンのＮＨＳ−ビオチン標識に関する製造業者（Pierce, Rockford IL）のプロトコルを利用する。３Ｄ６抗体は分泌型アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）または全長ＡＰＰは認識せず、アミノ末端のアスパラギン酸を有するβ−アミロイド種のみを検出する。アッセイの感度の下限は、約５０ｐｇ／ｍL （１１ｐＭ）であり、１ｎｇ／ｍL までの濃度では内因性マウスβ−アミロイドペプチドに対して交差反応を示さない。

β−アミロイド（アミノ酸１〜４２）のレベルを定量するサンドウィッチＥＬＩＳＡの構成は、補足抗体として、β−アミロイドのアミノ酸３３〜４２を認識するｍＡｂ２１Ｆ１２[Johnson-Woodら、PNAS USA (1997) 94：1550-1555]を利用する。ビオチン化３Ｄ６はまた、このアッセイのおけるレポーター抗体であり、約１２５ｐｇ／ｍL （２８ｐＭ）の感度の下限を有する。

２６６および２１Ｆ１２補足ｍＡｂｓを、９６ウェルイムノアッセイプレート(Costar, Cambidge MA)中、１０ｇ／ｍL で一晩室温にてコーティングする。次いで、プレートを吸引し、室温にて０.２５％ヒト血清アルブミン（ＰＢＳ緩衝液中）で少なくとも１時間ブロックした後、乾燥状態で４℃にて使用するまで保存する。使用前に、プレートを洗浄緩衝液（Ｔｒｉｓ緩衝化生理食塩水、０.０５％Ｔｗｅｅｎ２０）を用いてもどす。サンプルおよび標準をプレートに加え、４℃にて一晩インキュベーションする。アッセイの各工程の間、プレートを洗浄緩衝液を用いて３回洗浄する。ビオチン化３Ｄ６を、カゼインインキュベーション緩衝液（０.２５％カゼイン、ＰＢＳ、０.０５％Ｔｗｅｅｎ２０、ｐＨ７.４）で０.５μｇ／ｍL まで希釈し、ウェル中で室温にて１時間インキュベーションする。カゼインインキュベーション緩衝液中で１：４０００に希釈したアビジン−ＨＲＰ(Vector, Burlingame CA）を、室温にて１時間かけてウェルに加える。比色（colormetric）基質ＳｌｏｗＴＭＢ−ＥＬＩＳＡ (Pierce, Cambridge MA）を加え、１５分間反応させた後、２ＮＨ₂ＳＯ₄を添加して酵素反応を停止する。反応生成物を、Molecular Devices Vmax (Molecular Devices, Menlo Park CA)を用いて定量し、４５０ｎｍおよび６５０ｎｍでの吸光度の差を測定する。

２．血液アッセイ
ＥＤＴＡ血漿を、標本希釈液（０.２ｇｍ／Lリン酸ナトリウム・Ｈ₂Ｏ（１塩基）、２.１６ｇｍ／Lリン酸ナトリウム・７Ｈ₂Ｏ（２塩基）、０.５ｇｍ／Lチメロサール、８.５ｇｍ／L 塩化ナトリウム、０.５ｍL ＴｒｉｔｏｎＸ−４０５、６.０ｇ／Lグロブリン不含ウシ血清アルブミンおよび水）中で１：１に希釈する。標本希釈液中のサンプルおよび標準を、記載したカゼイン希釈液の代わりに標本希釈液を用いることを以外は、上記のとおり、全β−アミロイドアッセイ（２６６補足／３Ｄ４レポーター）を用いてアッセイする。

前記の説明から、当業者によって組成物および方法における様々な改変および変更が行われるであろう。添付した特許請求の範囲内にあるそのような改変はすべて、特許請求の範囲に含まれることを意図する。

Claims

次式：

で示され、以下の少なくとも１つ：
ａ）８.３６、１２.４３、１５.３４、１９.２２、２０.５０または２０.６３（２θ±０.２°）のピークを含むＸ線粉末回折パターン；
ｂ）８.３６および１５.３４（２θ±０.２°）、８.３６および１２.４３（２θ±０.２°）、または８.３６、１２.４３および１５.３４（２θ±０.２°）のピークを含むＸ線粉末回折パターン；
ｃ）７５.６、３５.３、２１.４または１６.６（２θ±０.２°）の化学シフト（ｐｐｍ）を有する固体¹³Ｃ核磁気共鳴
によって特徴付けられる、Ｎ−（（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブチリル）−１−（Ｌ−アラニニル）−（Ｓ）−１−アミノ−３−メチル−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−３−ベンゾアゼピン−２−オン二水和物結晶。