JP3260329B2

JP3260329B2 - マイタケ由来の活性酸素消去剤

Info

Publication number: JP3260329B2
Application number: JP29778198A
Authority: JP
Inventors: 賢次田澤; 安夫大平
Original assignee: Yukiguni Maitake Co Ltd
Current assignee: Yukiguni Maitake Co Ltd
Priority date: 1998-10-20
Filing date: 1998-10-20
Publication date: 2002-02-25
Anticipated expiration: 2018-10-20
Also published as: JP2000119650A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は活性酸素による生体
内酸化的傷害を防御することのできる活性酸素消去剤の
開発に関する。

【０００２】

【従来の技術】酸素は地球上の殆どの動植物にとって必
須不可欠の物質であるが、一方では過剰な酸素の存在に
より引き起こされる酸素毒は生体に傷害を与え、老化の
促進やガンをはじめとする様々な成人病等の原因の一つ
として最近注目されるようになってきた。

【０００３】即ち大気中に存在する酸素は、三重項酸素
と呼ばれる安定した物質であるが、生体内では酸素の一
部が「活性酸素」とよばれる反応性の高い物質に変化す
る。この活性酸素は、生体内に侵入した有害なウイルス
や細菌を殺すのに必要で、生体防御の立場から極めて重
要な役割を果たす反面、必要以上に生じた活性酸素は、
タンパク質、脂質さらには核酸等に作用して多種多様な
生体に対する損傷を引き起こし、老化の促進、ガンをは
じめ動脈硬化、糖尿病、さらにはアルツハイマー病、ク
ローン病等様々な疾病の原因の一つになっていることが
明らかにされつつある。

【０００４】生体内で生成する狭義の活性酸素としては
スーパーオキシドアニオンラジカル（Ｏ₂ ^-）、過酸化
水素（Ｈ₂Ｏ₂）、ヒドロキシラジカル（・ＯＨ）及び一
重項酸素（¹Ｏ₂）の4種が、これらに加えてアルコキシ
ラジカル（ＬＯ・）、脂質ペルオキシラジカル（ＬＯＯ
・）、一酸化窒素（ＮＯ）或いは一酸化窒素とスーパー
オキシドとの反応産物であるペルオキシナイトライト
（ＯＮＯＯ^-）などを含め広義の活性酸素と呼ぶ場合も
ある。

【０００５】これらに対する消去物質（スカベンジャ
ー）としては、 1）スーパーオキシドアニオンラジカルに対してはス
ーパーオキシドデイスムターゼ（ＳＯＤ）2）過酸化水
素にたいしてはカタラーゼ、グルタチオンペルオキシダ
ーゼ、アスコルビン酸ペルオキシダーゼ等 3）一重項酸素にたいしてはカロチノイド、トコフェロ
ール等 4）アルコキシラジカル、脂質ペルオキシラジカルに対
してはトコフェロール、フラボノイド、アスコルビン
酸、グルタチオン、カロチノイド、等が知られている。

【０００６】しかし、上記スーパーオキシドディスム
ターゼ（ＳＯＤ）は、タンパク質であるため、細胞や動
植物を用いる実験への応用は難しく、また過酸化酸素に
対するカタラーゼ等の酵素もＳＯＤと同様の理由で使い
難く、一重項酸素に対するカロチノイド、トコフェロー
ル等は、選択性が低い等の欠点を有している。

【０００７】そして、ヒドロキシラジカル（・ＯＨ）は
多彩な生体成分と拡散律速で反応するため、特異的な消
去物質は知られていない。マンニトール、ジメチルスル
フォキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、チオウレア等が
知られているが、１種類の消去剤の実験では、不十分で
あり複数の効果を検討する必要がある。従って、現時点
では必ずしも満足すべき消去物質は開発されていない。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、活性酸素、
特にヒドロキシラジカル若しくは/及びスーパーオキシ
ドアニオンラジカルを消去できる物質の開発に関す
る。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者等は日常食品と
して摂取されされている物の中で、活性酸素、特にヒド
ロキシラジカルを消去するような物はないか広範囲に亙
って検索した結果、マイタケ由来の物にすぐれた作用が
あることを見い出し、加えてスーパーオキシドアニオン
ラジカルの消去活性、スーパーオキシドディスムター
ゼ(ＳＯＤ)活性もあることを見い出し本発明をなすに到
った。

【００１０】即ち、（１）マイタケの乾燥粉末若しくは
/及びマイタケ抽出エキスを含有することを特徴とする
活性酸素消去剤、（２）マイタケ抽出エキスが、生マイ
タケ、乾燥マイタケ若しくは/及び乾燥マイタケ粉末を
水乃至熱水で抽出したものであることを特徴とする
（１）記載の活性酸素消去剤、（３）マイタケ抽出エキ
スが、生マイタケ、乾燥マイタケ若しくは/及び乾燥マ
イタケ粉末を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、
アルコールを加え放置後液面若しくは液中に浮遊又は壁
面に付着する物質を取り除いたものであることを特徴と
する（１）記載の活性酸素消去剤、（４）マイタケ抽出
エキスが、生マイタケ、乾燥マイタケ若しくは/及び乾
燥マイタケ粉末を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液
に、アルコールを加え放置後液面若しくは液中に浮遊又
は壁面に付着する物質を取り除き、該溶液よりアルコー
ルを除いた後乾燥したものであることを特徴とする
（１）記載の活性酸素消去剤。

【００１１】（５）活性酸素がヒドロキシラジカル若し
くは/及びスーパーオキシドアニオンラジカルである
ことを特徴とする（１）乃至（４）のいずれかに記載の
活性酸素消去剤、（６）生マイタケ、乾燥マイタケ若し
くは/及び乾燥マイタケ粉末を水乃至熱水で抽出して得
られる抽出液に、アルコールを加え放置後液面若しくは
液中に浮遊又は壁面に付着する物質を取り除いて製造す
ることを特徴とする活性酸素消去剤の製造方法、（７）
生マイタケ、乾燥マイタケ若しくは/及び乾燥マイタケ
粉末を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、アルコ
ールを加え放置後液面若しくは液中に浮遊又は壁面に付
着する物質を取り除き、該溶液よりアルコールを除いた
後乾燥して製造することを特徴とする活性酸素消去剤の
製造方法、（８）（６）又は（７）においてアルコール
を、その最終容量濃度が20〜70容量％になるように加え
ることを特徴とする活性酸素消去剤の製造方法、（９）
活性酸素がヒドロキシラジカル若しくは/及びスーパー
オキシドアニオンラジカルであることを特徴とする
（６）、（７）又は（８）の何れかに記載の活性酸素消
去剤の製造方法に関する。

【００１２】本発明において、マイタケはマイタケ（Ｇ
rifola frondosa ) 、白マイタケ（Grifola albican
s)チョレイマイタケ（Dendropolyporus umbellatus)、
トンビマイタケ（Grifola gigantea）等いずれも用いる
ことが出来る。又これらマイタケ類の子実体及び菌糸体
いずれも用いる事が出来るが、最近ではマイタケ（Ｇri
fola frondosa)の子実体の人工栽培が可能となり、安
定した原料確保の面から該マイタケの子実体を使用する
のが好ましい。

【００１３】乾燥マイタケとしては、天日、熱風乾燥、
或いは凍結乾燥したものいずれも用いることが出来る。
乾燥マイタケ粉末は製粉機で乾燥品を粉末にする。乾燥
マイタケ粉末を直接用いる場合は大体100メッシュ以上
の粒度にして用いるのが好ましい。

【００１４】抽出の方法は常温〜135℃で15分〜3時間行
う。短時間で行うには圧力下、100℃以上、例えば圧力
釜を用いて1〜2気圧下120℃前後で30分〜1時間前後で抽
出を行う。水としては蒸留水、精製水、イオン交換水、
水道水、天然水等いずれも使用出来る。乾燥マイタケ若
しくは乾燥マイタケ粉1重量に対して水を4〜20倍容量程
度を使用する。生マイタケを使用する場合は1重量に対
して2〜10倍容量程度の水を使用する。

【００１５】アルコールとしてはメタノール、エタノー
ル等が使用しうる。抽出液にアルコールを最終容量濃度
が20〜70％になるように添加する。水分含量0〜50％ア
ルコールが使用出来る。添加後は1〜25℃の温度で1〜20
時間放置すると液面若しくは液中に浮遊または容器の壁
面に付着する物質が現れるので濾過、ピペッテイング或
いは網状のもので掬う等により採取除去する。

【００１６】上記の様にして得られた抽出液はそのまま
直接に、濃縮した流動エキス或いは濃縮乾燥、噴霧乾
燥、真空乾燥若しくは凍結乾燥等常套の乾燥手段により
乾燥抽出エキス末として用いることが出来る。また抽出
液中にはβ-グルカン等の多糖体或いは多糖体とタンパ
ク質との複合体が含まれており、精製物を得るに当たっ
て沈殿法或いはクロマトグラフ法等、通常実施されてい
る精製法を用いうる事は言うまでもない。

【００１７】

【発明の実施の形態】〔実施例１〕製造方法（1）乾燥マイタケ粉末（Ａ）人工栽培で作った生マイタケの枝部、傘部を棚型乾燥室
の棚にならべ約60℃〜約80℃の熱風を送り乾燥した。最
初は60℃から段階的に温度を上げ最終的には80℃でほぼ
1日かけて乾燥した。ついで乾燥マイタケを製粉機で粉
砕し、微粉末を得た。

【００１８】（2）マイタケ抽出エキス（Ｂ）生マイタケ２.５ｋｇを厚さ２〜３ｃｍにスライスし、
１０ｌの湯浴中（９５〜１００℃）に浸漬して抽出を行
った後、濾過してＢｒｉｘ値1％の黒茶褐色の抽出液を
得た。この抽出液を減圧エバポレーター減圧下、75〜80
℃で濃縮してＢｒｉｘ値5％の濃縮液を得、ついでスプ
レードライ装置を用いて噴霧乾燥し、灰茶褐色を呈する
マイタケ熱水抽出エキス乾燥粉末60ｇを得た。

【００１９】（3）精製マイタケ抽出エキス（Ｃ）マイタケ子実体乾燥粉末100ｇをイオン交換水1000ｍｌ
で、2気圧の加圧下120℃で30分間処理して後、濾過して
黒褐色の抽出液600ｍｌを得た。該液を減圧下200ｍｌま
で濃縮して室温で95％エタノール210ｍｌを加え約18時
間放置すると、液面、液中に浮遊又は壁面に付着する茶
褐色の物質が生成した。これらの物質を金網で掬って除
去し、褐色の溶液を得た。該溶液を減圧下にアルコール
を除き、更に減圧下（24〜42ｋＰａ）70〜80℃で該液の
Ｂｒｉｘ値30％になるまで濃縮して黒褐色の濃厚な液を
得た。該溶液をスプレードライ装置を用いて噴霧乾燥
し、マイタケ特有の甘い香りの微細な褐色粉末19ｇを得
た。

【００２０】〔実施例２〕活性の測定（1）ヒドロキシラジカル消去活性前記マイタケ由来（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）の水溶液各々
濃度０.２ｍｇ/ｍｌ、２.０ｍｇ/ｍｌ、２０.０ｍｇ/ｍ
ｌを調製し、ヒドロキシラジカル消去活性を測定した。
Fenton反応は上記調製した各群の0.2ｍｇ/ｍｌ、2.0ｍ
ｇ/ｍｌ，20ｍｇ/ｍｌの水溶液 50μｌに1ｍＭの FeSO₄
-DTAPAC溶液 75μｌを加え、次いで10倍希釈したDMPO 2
0μｌと0.1ｍＭＨ₂Ｏ₂75μｌを追加した。その後2秒間
撹拌し扁平セルにとり、日本電子社製 ESR(JES-FR30)
によりヒドロキシラジカルの発生量をDMPO-OHとして測
定した。掃引はＨ₂Ｏ₂を加えてから60秒後に開始した。

【００２１】尚、ESR装置によるスペクトル解析は以下
の条件でおこなった。磁場掃引幅：335.6ｍＴ、磁場変調：0.1ｍＴ、増幅率：
125、掃引時間：2min.、応答時間：0.1sec.、測定温
度：室温測定の結果は図１の通りである。即ち、ヒドロキシラジ
カル消去活性は（Ａ）及び（Ｃ）では２０ｍｇ／ｍｌ、
（Ｂ）では２ｍｇ／ｍｌで７０％以上の活性を示すが、
最も高率であるのは、（Ｃ）の２０ｍｇ／ｍｌであるこ
とが分かった。

【００２２】（2）スーパーオキシドアニオンラジカ
ル消去活性、スーパーオキシドディスムターゼ(ＳＯ
Ｄ)活性日本電子社製ＥＲＳ装置（ＪＥＳ−ＦＲ30）を用いてマ
イタケ由来の前記（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）の各水溶液の
スーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）活性の測
定をスピントラップ法により行った。即ち0.2ｍＭの燐
酸緩衝液を溶媒として、ヒポキサンチン（ＨＰＸ）溶液
2ｍＭ，Diethylenetriamine pentaacetic acid(DETAP
AC)溶液5.5ｍＭ、SOD溶液 0.1〜50Ｕ/ｍｌ、Xanthine
oxidase(XOD)溶液0.4Ｕ/ｍｌを調製し、HPX、DETAPAC、
SOD溶液50、35、50μｌにトラップ剤として5,5-dimethy
l-1-pyrroline-N-oxide(DMPO)を15μｌ（9.2Ｍ）を加
え、XOD溶液50μｌと混和後120mmの石英セル内で発生す
るＯ₂ ^--adduct のスペクトルを計測した。

【００２３】Ｏ₂ ^--adductの信号強度は内部標準Mnの信
号強度に対する相対強度として算出し、各種濃度のSOD
に対する検量線を作製する。ついで同様の方法で上記マ
イタケの3種の水溶液50μｌに対するＯ₂ ^--adductのスペ
クトルを計測し、コントロールである蒸留水に対する抑
制率（％）を求め、次いでScavenging rate（消去活性
率）を、作製した検量線から検体のスーパーオキシド
ディスムターゼ（ＳＯＤ）活性に相当するスーパーオキ
シドディスムターゼ（ＳＯＤ）濃度として算出した。

【００２４】結果は図２及び図３の通りである。即ち、
（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）いずれも２０ｍｇ／ｍｌにおい
て、スーパーオキシドアニオンラジカル消去活性及び
スーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）活性が高
いが、中でも（Ｃ）が最も高い活性を示した。以上の結
果から、乾燥マイタケ粉末、マイタケ抽出エキス、精製
マイタケ抽出エキスは、いずれもヒドロキシラジカル消
去活性及びスーパーオキシドアニオンラジカル消去活
性、スーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）活性
を有していることが明らかである。

【００２５】

【発明の効果】マイタケ乾燥粉末、マイタケ抽出エキス
等マイタケ由来の物質により、活性酸素による生体内で
の傷害を防御することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ヒドロキシラジカル消去活性を示す図。

【図２】スーパーオキシドアニオンラジカル消去活性
を示す図。

【図３】スーパーオキシドディスムターゼ(ＳＯＤ)活
性を示す図。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献特開平６−65575（ＪＰ，Ａ) 特開平５−317016（ＪＰ，Ａ) 特開平９−238697（ＪＰ，Ａ) 特開昭62−209091（ＪＰ，Ａ) 特開昭59−210901（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C09K 15/34 A61K 35/84 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＪＯＩＳ

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】マイタケの乾燥粉末若しくは/及びマイ
タケ抽出エキスを含有することを特徴とする活性酸素消
去剤。
【請求項２】マイタケ抽出エキスが、生マイタケ、乾
燥マイタケ若しくは/及び乾燥マイタケ粉末を水乃至熱
水で抽出したものであることを特徴とする請求項１記載
の活性酸素消去剤。
【請求項３】マイタケ抽出エキスが、生マイタケ、乾
燥マイタケ若しくは/及び乾燥マイタケ粉末を水乃至熱
水で抽出して得られる抽出液に、アルコールを加え放置
後液面若しくは液中に浮遊又は壁面に付着する物質を取
り除いたものであることを特徴とする請求項１記載の活
性酸素消去剤。
【請求項４】マイタケ抽出エキスが、生マイタケ、乾
燥マイタケ若しくは/及び乾燥マイタケ粉末を水乃至熱
水で抽出して得られる抽出液に、アルコールを加え放置
後液面若しくは液中に浮遊又は壁面に付着する物質を取
り除き、該溶液よりアルコールを除いた後乾燥したもの
であることを特徴とする請求項１記載の活性酸素消去
剤。
【請求項５】活性酸素がヒドロキシラジカル若しくは
/及びスーパーオキシドアニオンラジカルであること
を特徴とする請求項１乃至４のいずれかに記載の活性酸
素消去剤。
【請求項６】生マイタケ、乾燥マイタケ若しくは/及
び乾燥マイタケ粉末を水乃至熱水で抽出して得られる抽
出液に、アルコールを加え放置後液面若しくは液中に浮
遊又は壁面に付着する物質を取り除いて製造することを
特徴とする活性酸素消去剤の製造方法。
【請求項７】生マイタケ、乾燥マイタケ若しくは/及
び乾燥マイタケ粉末を水乃至熱水で抽出して得られる抽
出液に、アルコールを加え放置後液面若しくは液中に浮
遊又は壁面に付着する物質を取り除き、該溶液よりアル
コールを除いた後乾燥して製造することを特徴とする活
性酸素消去剤の製造方法。
【請求項８】請求項６又は７においてアルコールを、
その最終容量濃度が20〜70容量％になるように加えるこ
とを特徴とする活性酸素消去剤の製造方法。
【請求項９】活性酸素がヒドロキシラジカル若しくは
/及びスーパーオキシドアニオンラジカルであること
を特徴とする請求項６、７又は８の何れかに記載の活性
酸素消去剤の製造方法。