JP2016034269A - 外皮系の改善のためのアンチエイジング抗酸化栄養補助食品 - Google Patents

Abstract

【課題】外皮系の酸化的損傷を中和するのに特に好適な、栄養補助食品の提供。【解決手段】０．５〜１０ｇ／５０ｍｌ量のコラーゲン、１０〜２５０ｍｇ／５０ｍｌ量カルノシン、５〜２５０ｍｇ／５０ｍｌ量のコエンザイムＱ１０、及び０．２〜４５０ｍｇ／５０ｍｌ量のレスベラトロルを含み、更にボラージシードオイル及びサクラソウオイルのエマルジョンをその上、含み、ヒアルロン酸、リコピン又ブラックペッパー抽出物から選択される少なくとも１つの成分を、更に、含む、栄養補助食品、及び酸化的損傷を減少させるための非治療のために前記栄養補助食品の使用。前記補助食品に更に、アサイーベリー、ザクロ、複数のビタミン、好ましくはビタミンＣ及びＡから選択される少なくとも１つの成分を含み、その上、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ６、Ｂ１２、Ｄ又はビオチンが選択される複数のビタミンを含む補助食品。【選択図】図１

Description

本開示は、外皮系の酸化的損傷を中和するのに特に好適な、栄養補助食品に関する。

酸化的ストレスは、活性酸素種（ＲＯＳ）の生成と、複数の抗酸化防御との間のバランスにおける障害として定義される（ＦｉｎｋｅｌおよびＨｏｌｂｒｏｏｋ、２０００）、(Ｋｕｎｗａｒおよびその他、２０１１)。

ＲＯＳは、分子を含有する複数の分子であり、ＲＯＳの複数の例としては、複数のフリーラジカル、複数の酸素イオンおよび複数の過酸化物が含まれる。

ＲＯＳは、酸素の正常な新陳代謝に係る天然の副産物として形成され、細胞シグナリングおよびホメオスタシスにおいて複数の重要な役割を有する。

ＲＯＳはまた、がん、心臓病および糖尿病等の様々な病状において複数の重要な役割を果たす、数種の分子経路を進むことによって、作用し得る。

複数の過酸化物および複数のフリーラジカルの過剰生成は、複数のタンパク質、脂質およびＤＮＡを含む、細胞の複数の要素におけるダメージにつながる。さらに、一部のＲＯＳは、複数の細胞間の還元シグナル伝達／酸化シグナリング（ｒｅｄｏｘ）における、複数の細胞メッセンジャーとして作用し得る。よって、酸化的ストレスは、細胞シグナリングの複数の正常メカニズムにおける複数の混乱を生じさせ得る。

従って、複数の好気性生物の複数の細胞による酸素の使用は、複数の有害な反応性酸素代謝産物を潜在的に生成する。

酸化的損傷の量は、有機体の年齢に伴い増大し得、老化を生じさせ得る主要な要因となり得る（ＳｏｈａｌおよびＷｅｉｎｄｒｕｃｈ、１９９６）。

複数の調査研究から出てくる重要なポイントは、老化過程の分子の酸化的損傷は、遍在的および顕著であり、年齢とともに飛躍的に増大することである。

酸化的ストレス量における年齢に関連する増大に関する、複数の主要な原因は、複数の反応性酸素代謝産物（ＲＯＭ）の生成速度の増大、複数の抗酸化防御の低下、損傷された複数の分子の修復若しくは除去効率の低下に関連付けられ得る。

ミトコンドリアによる過酸化水素生成はまた、酸化的ストレスの複数の主要な原因の１つであり、複数の哺乳類において、数種の異なる器官で年齢と共に増大する（ＴｕｒｒｅｎｓおよびＭｃＣｏｒｄ、１９９０）。

最近の研究は、Ｄ‐ガラクトース（ｄ‐ｇａｌ）によって誘発される脳の酸化的ストレスおよび複数の空間記憶障害に対する、性別、年齢および治療期間の効果について、複数のマウスで調査した。複数の雌のマウスは、脳の活性酸素種（ＲＯＳ）の量の増大があるにもかかわらず、空間記憶機能障害を示さなかった。対照的に、同一量のＤ‐ガラクトースを受ける複数の雄のマウスは、複数の空間記憶障害および複数の酸化的ストレスマーカーにおける顕著な増大を示した（Ｈａｏおよびその他、２０１４）。

興味深いことには、２０１４年に発表された別の最近の研究では、コークス炉工場から合計４７８人の労働者（男性２７２人、女性２０６人）が採用された。当該研究では、女性の方が男性よりも、複数の多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）によって誘発される酸化的ストレスおよび染色体損傷の影響を受けやすいことがわかった。これは、ＰＡＨ暴露量に関連される肺がん発症における性別による複数の差異を基礎付ける潜在的な証拠を追加する（Ｇｕｏおよびその他、２０１４）。

髪および爪とともに肌は、外皮系の主要な器官であり、外部環境に対する第１および主要なバリアを呈する。

肌において、フリーラジカルダメージは、支持結合組織の劣化を生じさせる可能性があり、結果的に弾力性および復元力の減少をもたらす。さらに、酸化的ストレスは、毛包機能を害する可能性があり、複数の男性および女性に、アンドロゲン性脱毛症（禿頭）を引き起こす。

太陽の紫外線への皮膚暴露は、ＲＯＳ形成につながる複数の光化学反応を引き起こし、それらの生成が制御不能になったとき、酸化的ストレスが発生する。これが起こると、ＲＯＳ（複数の白血球内の複数の微小体から放出される複数の酵素とともに）は、複数の細胞を傷つけ、あるいは殺すことまであり、ＤＮＡを傷つけ、複数の酵素および他の複数の合成物を攻撃する。

肌は、複数の毒生物と相互作用し、それらの有害効果を中和する複数の防御メカニズムを有する（強力な複数の抗酸化物質として機能する、非酵素分子および酵素分子等）。

これらの防御は非常に有効であるものの、能力の限界を有し、それを超えると、複数のＲＯＳレベルの増大および複数の皮膚病の進行へとつながる可能性がある。

加齢と酸化的に損傷された複数のタンパク質、脂質、および核酸の蓄積との間に相関関係があることが、一般的に認められている（ＬｅｖｉｎｅおよびＳｔａｄｔｍａｎ、２００１）。

最近の研究により、多数の化学的および物理的な環境要因に対する皮膚暴露は、抗酸化物質および薬物代謝酵素の複数のレベルにおける付随的な変調を伴う皮膚の脂質過酸化の誘発につながる、酸化的ストレスを誘発することを示している。

これらのＲＯＳが介在される障害を予防若しくは治療するための１つのアプローチは、異なる抗酸化物質の投与に基づくものであり、ここにおいて、抗酸化という用語は、複数のフリーラジカルが複数の健康な細胞にダメージを引き起こす前に、当該フリーラジカルを安定化または非活性化できる任意の分子を指す。

本詳細な説明の目的は、複数の活性成分によって発揮される複数の相乗作用効果を通して、体内の複数のフリーラジカルの形成を中和することにより、自然なエイジングプロセスを遅らせることができる高い抗酸化力を持った栄養補助食品を提供することにある。

本発明によると、上記目的は、以降の特許請求の範囲で明確に再現された主題により実現される。特許請求の範囲は、本開示の欠くことのできない部分を形成するものとして理解される。

本詳細な説明の一実施形態は、コラーゲン、カルノシン、コエンザイムＱ１０およびレスベラトロルを含む、栄養補助食品を提供する。

別の実施形態において、当該栄養補助食品は更に、ボラージシードオイルおよびサクラソウオイルを含む、エマルジョンを含む。

別の実施形態において、当該栄養補助食品は、ヒアルロン酸、ブラックペッパー抽出物、リコピンから選択される、少なくとも１つの更なる成分を含む。

更なる実施形態において、本明細書に記載された当該栄養補助食品はまた、アサイーベリー、ザクロ、複数のビタミン、好ましくはビタミンＣおよびビタミンＡの少なくとも１つを含む。

別の実施形態において、本明細書に記載された当該食品サプリメントはまた、複数のミネラル、複数の添加物および複数の香味物質を含む。

以下に本発明を、例示目的としてのみ、添付図面を参照しながら説明する。

本詳細な説明で開示された栄養補助食品の一実施形態に係る製造プロセス図を示す。 ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）によるＭＭＰ‐１合成に対する、栄養補助食品の複数の主要成分の効果を示す。ＭＭＰ‐１は、複数の２４ウェルプレートで成長されたＮＨＤＦの複数の浮遊物において測定され、培地（０）に、栄養補助食品の複数の主要成分の様々な組み合わせを追加して、４８時間培養された（複数の追加物の詳細については、表５と６を参照）。データは、培地コントロールの％として表され、各実験で１００％に正規化されており、３つの独立実験の平均±標準誤差として提示される。＊はＰ＜０．０５を、＊＊＊＊はＰ＜０．０００１を示す。培地は５．６±１．７ｎｇ／ｍＬである。 ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）によるＭＭＰ‐３合成に対する、栄養補助食品の複数の主要成分の効果を示す。ＭＭＰ‐３は、複数の２４ウェルプレートで成長されたＮＨＤＦの複数の浮遊物において測定され、培地（０）に、栄養補助食品の複数の主要成分の様々な組み合わせを追加して、４８時間培養された（複数の追加物の詳細については、表５と６を参照）。データは、培地コントロールの％として表され、各実験で１００％に正規化されており、３つの独立実験の平均±標準誤差として提示される。＊はＰ＜０．０５を、＊＊はＰ＜０．０１を、＊＊＊はＰ＜０．００１を、＊＊＊＊はＰ＜０．０００１を示す。培地コントロールは０．６±０．３ｎｇ／ｍＬである。

以下の詳細な説明において、複数の実施形態の完全な理解を提供すべく、多くの具体的な詳細が記載される。これらの実施形態は、１又は複数の具体的な詳細を用いることなく実施でき、あるいは他の複数の方法、構成要素、材料等を用いて実施できる。他の複数の例において、複数の実施形態に係る複数の態様が不明確になるのを回避すべく、周知の複数の構造、材料、または操作は詳細に示されず、若しくは記載されない。

本明細書を通して、「一実施形態」または「ある実施形態」という言及は、当該実施形態に関連して記載された特定の特徴、構造、または特性が少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。従って、本明細書にわたる、様々な箇所における「一実施形態で」または「ある実施形態で」という表現は、必ずしもすべてが同一の実施形態について言及していない。更に、複数の特定の特徴、構造、または特性は、１又は複数の実施形態において、任意の好適な様式で組み合わされ得る。

本明細書におけるセクションタイトルは、便宜上に過ぎず、複数の実施形態の範囲または意味を解釈するためのものではない。

本開示の一実施形態は、コラーゲン、カルノシン（好ましくはＬ‐カルノシン）、コエンザイムＱ１０およびレスベラトロル（好ましくはＴ‐レスベラトロル）を含む栄養補助食品を提供する。

本明細書に記載された栄養補助食品は、高い抗酸化力が付与されており、酸化的損傷を減少し、かつ、外皮系を改善できる。

特に、当該栄養補助食品は、潤いおよび弾力性を増大させ、複数のリンクルの深さと全表面を減少させ、健康な肌、髪および複数の爪を維持することによって、肌のコンディションの改善を発揮する。

本明細書に記載された栄養補助食品は、液体状または固体状の両方、すなわち、固体状の複数の成分を混合すること、または液体製剤を凍結乾燥することによって実現され得る。

本明細書に記載された栄養補助食品は、０．５〜ら１０ｇ／５０ｍｌの量、好ましくは、１．７５〜７．５ｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは、３〜５ｇ／５０ｍｌの量のコラーゲンを含む。

液体栄養補助食品で使用されるコラーゲンは、加水分解コラーゲンであってよく、好ましくは魚醤に由来するものである。

カルノシン、好ましくはＬ‐カルノシンは、１０〜２５０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは２０〜１６０ｍｇ／５０ｍの量、より好ましくは４０〜８０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在する。

コエンザイムＱ１０は、５〜２５０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは９〜２００ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは１５〜１５０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在する。

レスベラトロル、好ましくはＴ‐レスベラトロルは、０．２〜４５０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは１〜２００ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは２〜８０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在する。

コラーゲンは、エラスチンおよびヒアルロン酸とともに肌の主要な要素であり、完全性と弾力性を提供するにあたり重要な役割を有する。

しかしながら、コラーゲンは年齢とともに降下し、肌の弾力性の損失および複数の小皺および複数のリンクルの形成につながる。

本明細書に開示された栄養補助食品に存在する加水分解コラーゲンは、新しいコラーゲン（タイプＩおよびＩＩＩ）、ヒアルロン酸およびエラスチン（皮膚の複数の細胞外成分）を生成するための複数の線維芽細胞を刺激するのに役立つ。

Ｌ‐カルノシンは体内で自然に生成されるタンパク質構成要素である。Ｌ‐カルノシンは、筋肉、脳、心臓、および体の他の多くの部分に非常に集中する。

コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）は、体全体に見つかるビタミンのような物質であるが、とりわけ心臓、肝臓、腎臓および膵臓に存在する。

Ｔ‐レスベラトロルは、イタドリ（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ）の複数の根に加え、複数の赤ブドウの皮および他の複数の果物において見つかる抗酸化ポリフェノールである。

その複数の主要成分、すなわち、コラーゲン、Ｌ‐カルノシン、コエンザイムＱ１０およびＴ‐レスベラトロル、によって発揮される複数の相乗作用効果により、本明細書に記載された栄養補助食品は、高い抗酸化力が付与され、外皮系に対する酸化的損傷を減少することが可能である。

特に、複数のフリーラジカルの形成を中和することによって、当該栄養補助食品は、肌の弾力性および張りを増大させ、乾燥、複数のリンクルの深さと全表面を減少させて、肌のコンディションの改善を発揮する。当該栄養補助食品はまた、健康な肌、髪、複数の爪も維持する。

別の実施形態において、当該栄養補助食品は更に、ボラージシードオイルおよびサクラソウオイルを含む、エマルジョンを含む。

ボラージシードオイルおよびサクラソウオイルを含むエマルジョンが、０．５〜２５０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは２〜２００ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは５〜１５０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在し得る。

ボラージシードオイルおよびサクラソウオイルを含むエマルジョンを追加することで、本明細書に記載された栄養補助食品は驚くことに、肌の滑らかさおよび潤いに増強効果を示す。

特に、ボラージシードオイルおよびサクラソウオイルを含むエマルジョンは、オメガ６脂肪酸とも呼ばれる、ガンマリノレン酸（ＧＬＡ）を含み、これは肌の滑らかさおよび潤いを改善できる。

別の実施形態において、当該栄養補助食品は、ヒアルロン酸、リコピンおよびブラックペッパー抽出物から選択される、少なくとも１つの更なる成分を含む。

ヒアルロン酸は、０．５〜１００ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは１〜７５ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは２〜４０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在し得る。

リコピンは、０．０１〜４０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは０．０５〜１０ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは０．１〜５ｍｇ／５０ｍｌの量で存在し得る。

数種の物質の消化管吸収を増大させることで、それらの生物学的利用可能性を拡大させるとして知られるブラックペッパー抽出物は、０．２〜３．５ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは０．５〜２．５ｍｇ／５０ｍｌ、より好ましくは１〜２ｍｇ／５０ｍｌの量で存在し得る。

ヒアルロン酸（ＨＡ）は、複数の結合組織の細胞外基質、主に複数の軟結合組織、特に肌に局在する、高分子量多糖類（１０−１０４ ＫＤａ）である。ＨＡは、グルクロン酸およびＮ‐アセチルグルコサミンの単位を置き換えることで、形成される。

リコピンは、複数のカロテノイド族に属し、多くの果物および野菜に存在する。

本発明者たちは、当該栄養補助食品に、ヒアルロン酸、リコピン、およびブラックペッパー抽出物の少なくとも１つを追加することによって、肌の潤い、数種の物質の抗酸化活性および生物学的利用可能性の見地から、更なる増強効果が得られることを見いだした。

本開示の更なる実施形態において、栄養補助食品はまた、アサイーベリー、ザクロ、ビタミン、好ましくはビタミンＣおよびビタミンＡから選択される少なくとも１つの成分を含む。

当該栄養補助食品に存在してよい他の複数のビタミンは、複数の消費者に健康効果を有するものとして知られている任意の複数のビタミンである。

好ましくは、更なる複数のビタミンは、ビタミンＢ_１、ビタミンＢ_２、ビタミンＢ_３、ビタミンＢ_６、ビタミンＢ_１２、ビタミンＤ，ビオチンおよび他の複数の水溶性ビタミンからなる群より選択される。

本開示の更なる実施形態において、本明細書に記載された栄養補助食品は、複数のミネラル、複数の添加物および複数の香味物質も含む。

ミネラルは、亜鉛および銅から選択されてよい。

添加物は好ましくは、無水クエン酸、リン酸、乳酸、酒石酸、ＤＬ‐リンゴ酸およびスクラロースから選択される。

複数の香味物質は、桃の精油とライチの精油から選択されてよい。

香料ベースを調合するのに、複数のラクトン、エステル、脂肪族高級アルコール類、ケトン、芳香族アルデヒド、芳香族アルコール、チオエーテル、脂肪酸、プロピレングリコール、エタノール、グリセロール（グリセリン）が使用された。

表１は、上記した水性の栄養補助食品に含まれ得る複数の成分の含有量を報告する。

以下に、本記載に係る栄養補助食品の目的の、異なる複数の実施形態に係るいくつかの非限定的な実施例が提供される。

図１に示される製造プロセス図に従い、下の表２に報告された、複数の成分を含む、液体状の栄養補助食品が調整された。まず、水、ヒアルロン酸、加水分解された魚のコラーゲン、Ｌ‐カルノシン、Ｎ‐アセチルグルコサミン、無水クエン酸、ＤＬ‐リンゴ酸、ブラックペッパー抽出物、亜鉛、銅、Ｄ‐ビオチン、ステビア、塩酸ピリドキシン、大豆多糖類、ビタミンＤ３、ザクロ濃縮果汁、アサイーベリー抽出物、コエンザイムＱ１０、リコピン等の複数の成分を追加し、混合タンク（Ａ）で温度６０±５℃にて溶解させた。次に、温度４５℃未満に冷却後、当該混合物にビタミンＣ（Ｌ‐アスコルビン酸）が追加された。次に、水とＴ‐レスベラトロルとが、混合タンク（Ｂ）に温度６０±５℃にて追加された。次の段階で、複数の香味物質とともに、混合タンク（Ａ）および（Ｂ）に存在する複数の成分が、メインバッチタンクに追加された。次に、水、ボラージオイルおよびサクラソウオイルエマルジョン（２０％）、ｄ‐α‐トコフェロールとβカロチンエマルジョンが、混合タンク（Ｂ）に追加され、温度２５±５℃に冷却された後、メインバッチタンクに追加された。すべての成分を混合した後、容積を５０ｍｌに調整すべく、水が追加された。適正なｐＨ、酸性度、風味および色を保証すべく、品質管理チェックが実施された。製造手順の複数の最終段階において、製品はろ過および９８±２℃での低温殺菌の段階を経て、３０秒間保持された後、瓶詰め処理のために８５±２℃に冷却された。低温殺菌の第２段階は、８０±２℃で行われ、最終梱包の前に、３０秒間保持された。

＊ＮＲＶ＝栄養素等表示基準値（Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｖａｌｕｅ）。

下の表３は、本明細書に開示されたサプリメントの栄養情報を示す。

複数の炭水化物をほぼ含まない栄養補助食品は、複数の糖尿病による影響を受ける人々によっても、有益に考えられる可能性がある。

図１に示される製造プロセス図に従い、下の表４に報告された、複数の成分を含む、液体状の栄養補助食品が調整された。まず、水、ヒアルロン酸、加水分解された魚のコラーゲン、Ｌ‐カルノシン、Ｎ‐アセチルグルコサミン、無水クエン酸、ＤＬ‐リンゴ酸、ブラックペッパー抽出物、亜鉛、銅、Ｄ‐ビオチン、ステビア、塩酸ピリドキシン、大豆多糖類、ビタミンＤ３、ザクロ濃縮果汁、アサイーベリー抽出物、コエンザイムＱ１０、リコピン等の複数の成分を追加し、混合タンク（Ａ）で温度６０±５℃にて溶解させた。次に、温度４５℃未満に冷却後、当該混合物にビタミンＣ（Ｌ‐アスコルビン酸）が追加された。次に、水とＴ‐レスベラトロルとが、混合タンク（Ｂ）に温度６０±５℃にて追加された。次の段階で、複数の香味物質とともに、混合タンク（Ａ）および（Ｂ）に存在する複数の成分が、メインバッチタンクに追加された。次に、水、ボラージオイルおよびサクラソウオイルエマルジョン（２０％）、ｄ‐α‐トコフェロールとβカロチンエマルジョンが、混合タンク（Ｂ）に追加され、温度２５±５℃に冷却された後、メインバッチタンクに追加された。すべての成分を混合した後、容積を３０ｍｌに調整すべく、水が追加された。適正なｐＨ、酸性度、風味および色を保証すべく、品質管理チェックが実施された。製造手順の最終段階において、製品はろ過および９８±２℃での低温殺菌の段階を経て、３０秒間保持された後、瓶詰め処理のために８５±２℃に冷却された。最終梱包の前に、低温殺菌の第２段階が８０±２℃で行われ、３０秒間保持された。

＊ＮＲＶ＝栄養素等表示基準値（Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｖａｌｕｅ）。

上記のように実現される液体栄養補助食品は、複数の人間に対し投与され、外皮系に対する酸化的損傷の減少をもたらした。

特に、複数のフリーラジカルの形成を中和することによって、液体栄養補助食品の摂取により、肌の乾燥を低減し、肌の張りと弾力性を改善し、複数のリンクルの深さと全表面とを減少させることにより、アンチエイジング効果を発揮する。

また、脱毛を減少させ、健康な複数の爪を維持する卵胞機能にも作用する。

栄養補助食品の実現は、これらの例に限定されず、記載された特許請求の範囲を超えない、複数の変形例を有し得る。

以下に、本開示の栄養補助食品の目的に含まれる複数の主要成分の様々な組み合わせが、複数のメタロプロテアーゼ活動に対する、それらの相乗作用効果を調査すべく、テストされた。

複数の材料および方法。 細胞培養 大人のヒト皮膚線維芽細胞ＮＨＤＦ−ａｄ（Ｌｏｎｚａ）が、線維芽細胞増殖培地（ＦＧＭ）（Ｌｏｎｚａ）で、２％の牛胎児血清（ＦＢＳ）を用いて、成長された。複数の２４ウェル培養プレートが、５０、０００細胞／ウェルの密度で、シードされ、３７℃および５％のＣＯ_２にて培養された。２５０μｌの新鮮な培地が、各ウェル（血清飢餓および分子クラウディングを誘発すべく、ＦＢＳ０．３％のＦＧＭ、アスコルビン酸１００μＭおよびデキストラン硫酸１００μｇ／ｍｌ ５００ｋＤａ）に複数のテスト成分とともに追加される前に、複数の細胞は２４時間付着することを許容され、もう一度繰り返し４８時間となる。本研究のために考慮される正の制御は、混雑した培地において、組み換えヒトＴＧＦβ１（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）５ｎｇ／ｍｌであり、負の制御は混雑した培地単独であった。

テストされた複数の成分が、表５に記載されている。

テストされた複数の成分の様々な組み合わせが、表６に提供されている。

様々な成分の複数の組み合わせで４８時間培養した後、メタロプロテアーゼＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３の発現の評価のために、浮遊物（複数の細胞が除去された）が収集された。

［サンプルの作成］
１６８．７５μｌのＨＢＳＳ‐Ｃａ／Ｍｇおよび１８．７５μｌ（１０Ｘ）のｔｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ（Ｓｉｇｍａ）を各ウェルに追加することで、複数の細胞が複数のウェルからリフトされ、振とうしながら２０分間３７℃で培養され、次に、複数のサンプルが６２．５μｌ、１Ｍのシュウ酸を含む複数の管に移動し、サンプルが混合されることを確実にした。酸中の複数のサンプルは、１時間９５〜１００℃で加熱された。

複数のＥＬＩＳＡ測定。 関連する構築ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）によって記載される複数の方法を使用して、全ＭＭＰ‐１および全ＭＭＰ‐３が測定された。

［複数の結果］
本明細書に開示された栄養補助食品の複数の成分の追加による、複数のＮＨＤＦ細胞によるＭＭＰ‐１およびＭＭＰ‐３合成に対する効果が評価された。

ＮＨＤＦ細胞が４８時間、培地単独（０）、あるいは様々な主要成分の複数の組み合わせを追加したものとともに処理された（１〜４、詳細については、複数の材料および方法のセクションの表５および６を参照）。

表５と６とに記載された複数の成分がテストされ、培地単独（０、１００％）の効果と比較された。

［ＭＭＰ‐１、ＭＭＰ‐３合成］
ＭＭＰ‐１合成およびＭＭＰ‐３合成が、それらが最も豊富な浮遊物単独において測定された。

［ＭＭＰ‐１］
本記載の栄養補助食品の目的に係る他の複数の主成分の追加に応答して、浮遊物ＭＭＰ‐１タンパク質の複数のレベル（図２）における非常に顕著な低下がみられた（培地コントロールに対して、１；６５．３±１３．２％、２；８３．３±１３．２％、３；６４．６±１２．５％、４；４７．２±９％）。

［ＭＭＰ‐３］
同様に、本記載の栄養補助食品の目的に係る他の複数の主成分の追加に応答して、ＭＭＰ‐３が複数の浮遊物において顕著に減少した（図３）（培地コントロールに対して、１；７６．９±１３．７％、２；７６．４±１９％、３；６２．１±１２％、４；４７±９．６％）。

本明細書で確認された複数の結果は、外皮系の改善における、本明細書に開示された栄養補助食品のアンチエイジング、抗酸化効果を示す。

複数の成分が、ヒト皮膚線維芽細胞でテストされた。

複数の細胞ＭＭＰのレベルが、テストされた複数の成分の抗酸化活性により、減少されているかどうかを確認すべく、複数の細胞ＭＭＰの発現が評価された。

複数の結果は、本記載の栄養補助食品の目的に関し、浮遊物内のＭＭＰ‐１およびＭＭＰ‐３合成における顕著な低下を示している。

これらのデータは、細胞外基質のホメオスタシスを修復における、栄養補助食品の恩恵を示唆する。

メタロプロテアーゼで観測された効果は、栄養補助食品の複数の抗酸化特性が、肌のコラーゲン／エラスチンの劣化を減少することを示唆する。

必然的に、本発明の原理は同一のままであるが、構成の詳細および複数の実施形態は、記載内容および例示目的としてのみの図示内容に関し、本発明の範囲から逸脱することなく、大きく異なってよい。
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「Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｉｎ ｓｋｉｎ ａｇｉｎｇ」Ａｄｖ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ ２５（２）： ２１７−２２２。
Ｋｕｎｗａｒ，ＡおよびＫ．Ｉ．Ｐｒｉｄａｓｈｉｎｉ（２０１１）。
「Ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ， ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｈｅａｌｔｈ」
Ｊ Ｍｅｄ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉ １（２）：３−６０。
Ｌｅｖｉｎｅ，Ｒ．ＬおよびＥ．Ｒ．Ｓｔａｄｔｍａｎ（２００１）。
「Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｄｕｒｉｎｇ ａｇｉｎｇ）」Ｅｘｐ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ ３６（９）： １４９５−１５０２。
Ｓｏｈａｌ，Ｒ．ＡおよびＲ．Ｗｅｉｎｄｒｕｃｈ（１９９６）。
「Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ，ｃａｌｏｒｉｃ ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ， ａｎｄ ａｇｉｎｇ」Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７３（５２７１）：５９−６３。
Ｔｕｒｒｅｎｓ，Ｊ．Ｆ．およびＪ．Ｍ．ＭｃＣｏｒｄ（１９９０）。
「Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃａｌｓ， Ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ， ａｎｄ Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ｌｉｐｉｄｓ」。Ｐａｕｌｅｔ， Ａ．Ｃ．； Ｄｏｕｓｔｅ−Ｂｌａｚｙ， Ｌ．； Ｐａｏｌｅｔｔｉ， Ｒ．， ｅｄｉｔｏｒｓ． Ｐｌｅｎｕｍ； Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ： ２０３−２１２。

Claims (10)

1. コラーゲン、カルノシン、コエンザイムＱ１０およびレスベラトロルを含む栄養補助食品。
2. 前記コラーゲンは、０．５〜１０ｇ／５０ｍｌの量、好ましくは１．７５〜７．５ｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは３〜５ｇ／５０ｍｌの量で存在する、請求項１に記載の栄養補助食品。
3. 前記カルノシンは、１０〜２５０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは２０〜１６０ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは４０〜８０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在する、請求項１または２に記載の栄養補助食品。
4. 前記コエンザイムＱ１０は、５〜２５０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは９〜２００ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは１５〜１５０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在する、請求項１から３のいずれか一項に記載の栄養補助食品。
5. 前記レスベラトロルは、０．２〜４５０ｍｇ／５０ｍｌの量、好ましくは１．０〜２００ｍｇ／５０ｍｌの量、より好ましくは２．０〜８０ｍｇ／５０ｍｌの量で存在する、請求項１から４のいずれか一項に記載の栄養補助食品。
6. 更に
   ボラージシードオイルおよびサクラソウオイルを含む、エマルジョンを含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の栄養補助食品。
7. 更に、
   ヒアルロン酸、リコピンおよびブラックペッパー抽出物から選択される少なくとも１つの成分を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の栄養補助食品。
8. 前記栄養補助食品が更に、アサイーベリー、ザクロ、複数のビタミン、好ましくはビタミンＣおよびビタミンＡから選択される少なくとも１つの成分を含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の栄養補助食品。
9. 前記栄養補助食品が更に、ビタミンＢ_１、ビタミンＢ_２、ビタミンＢ_６、ビタミンＢ_１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビオチンから選択される複数のビタミンを含む、請求項８に記載の栄養補助食品。
10. 外皮系に対する酸化的損傷を減少させるための、請求項１から９のいずれか一項に記載の栄養補助食品の非治療のための使用。

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