JP2009148275A - 特定保健用食品 - Google Patents

Abstract

【目的】 コラ−ゲンは、生体各組織に分布し多様な機能を示している。コラ−ゲンの由来組織や型を特定して用いることで、所属組織の強化、障害を予防及び改善する機能を有する健康食品等の飲食物・医薬品を提供しょうとするものである。
【構成】 骨由来の特定のコラ−ゲンを用いることで、骨強化の健康食品等の飲食物・医薬品に、基底膜の主成分であるタイプＩＶコラ−ゲンを用いることで、癌の予防、改善の健康食品等の飲食物・医薬品とする。

Description

発明の詳細な説明

産業上の利用分野

本発明は特定のコラ−ゲン（これを含む生体成分）より成る健康食品等の飲食物及び医薬品に関する。更に本発明はタイプＩＶコラ−ゲンより及び又はその分画やペプタイドより成るもしくはこれらを認識する抗体より成る抗癌剤に関する。
更に骨由来コラ−ゲン（これを含む生体成分）及び又はタイプＩコラ−ゲン及び又はタイプＩＩＩコラ−ゲン（これらを含む生体成分）より成る骨粗鬆症予防及び改善治療剤又は健康食品等の飮食物に関する。

「医食同源」とは病気を治すこと（薬物療法）も食事をするのも命を養い健康を保つためで、その本質は同じであるということである。この考えに立てば、日常摂取している飲食物には病気予防や治療の本質物質が存在する事になる。それ故、日常飲食している物から、有効成分を見出だして濃縮や精製し、日常的に疾患を予防し抑制することが健康食品や医薬品として望ましいと発明者は考える。飲食物として摂取する時には、人体成分に近い構成物のものが望ましく、例えば動物成分が、特に望ましいと考える。
しかし実際には、関節疾患患者に、関節成分のコンドロイチン硫酸やタイプＩＩコラ−ゲン（特に断らない限りコラ−ゲンとゼラチンは同義に用いる）を直接摂取するか又はこれらを主に含む生体成分や抽出ス−プとして摂取しているのみであり、治療改善に有効量が摂取されているか不明である。
又、従来の癌治療、特に固形癌の治療は、化学療法やホルモン療法などの全身的な方法と、手術や放射線療法などの局所療法が行われている。しかし、癌は治らないという諦観から、いずれも延命などの緩やかな治療を目指すようにようになっている。実際、転移し易い癌、例えば肝細胞癌は、脈管内に浸潤する傾向が強く、特に門脈へ浸潤する傾向が強く、治療に苦慮している。この場合、局所的な治療（肝臓動脈塞栓術、経皮的エタノ−ル注入療法・マイクロ波凝固療法・ラジオ波焼灼療法）では、対処困難である。又、化学療法は、いずれの薬剤の単独投与でも有効率が１０％程度と低く、副作用も強く、有効な治療方法とは言えない。

発明が解決しょうとする問題点

本発明の目的は前記「医食同源」の考えに応え、食品中より、動物由来の有効物質、特に特定のコラ−ゲンを用いて健康食品等の飲食物及び医薬品として提供することにある。
更に本発明の目的は、新しいバイオ利用の抗癌剤で特に増殖性や転移性の強い癌を抑制する抗癌剤の開発にある。
又、近年多く見られる骨粗鬆症では、骨由来物や生体由来の有効物質の投与が望まれるが、実際の治療や予防には、カルシュウムや骨粉が適用されそれ以外ではビタミンＫ、Ｄ群が適用されているにすぎず、めぼしい生体由来の有効成分がない。この現状を打破すべく発明者は鋭意研究し、特定のコラ−ゲンを特定量用いて解決することを見出だした。
一方、癌細胞は活動が活発になると基底膜を破壊して拡大するが、有効な生体由来の薬剤はなかった。又、従来、癌疾患の治療剤は、長期投与では副作用が強いという欠点があった。長期の治療で副作用がなく安心して投与できる癌疾患の治療薬が望まれていた。本発明は有効物質として基底膜の主成分であるタイプＩＶコラ−ゲン及びその抗体を利用して、癌の転移と増殖を抑制することにある。

発明の構成

本発明は、生体各部の中心的成分の特定のコラ−ゲンを抽出し、これを健康食品等の飲食物及び医薬品とすることに関する。更に、本発明はタイプＩＶコラ−ゲン及び又はその分画やペプタイド自身より成る加えてこれらを認識する抗体より成る抗癌剤に関する。
抗癌剤とするコラ−ゲンの種類は、各タイプの混合でも単独でも良いが単独では特にタイプＩＶコラ−ゲンが望ましい。抗癌剤とするコラ−ゲンの用いる部分はコラ−ゲン全体でも良く、又その部分を構成する分画やペプタイドでも良く、又、これらの混合物でも良い。通常、タイプＩＶコラ−ゲンは、ＮＣ１（Ｃ末端非螺旋部）、中央三本鎖螺旋部（内部に乱れ有り）、７Ｓ（Ｎ末端三本鎖螺旋部）の三領域に分けられ、更に、それぞれが、アルファ１から６まで分画されるが、抗癌剤とする時これらを単独又は組み合わせて使用して良く、望ましくは三本鎖螺旋部（中央及び又はＮ末端、以下三本鎖）を、更に望ましくは三本鎖のアルファ１及び又はアルファ２であり、そのペプタイドである。タイプＩＶコラ−ゲンの三本鎖は、由来臓器（胎盤、腎糸球体、眼レンズカプセル、各種組織基底膜）、抽出条件及び精製条件で得られる分子量は異なるが、いずれでも良く、特に望ましくは、電気泳動した時、約１８０Ｋから約１６０Ｋに属するものや約３０Ｋよりも、約５０Ｋから約１００Ｋに属するものである。

コラ−ゲンは生体内に存在し、各種の型があり、安全な成分である。
コラ−ゲンは、体蛋白の約３０％を占めるので、健常者は、日常の食事で動物蛋白源としてコラ−ゲンを常時取り込んでいる。例えば、動物を生食（例えば生卵、ステ−キレア、馬刺、魚類の刺身、鮭頭軟骨の酢の物）し、又動物を加熱調理し、干物を食べ、抽出（例えば軟骨を含むス−プ類）して食することで生体内に取り込んでいる。コラ−ゲンは、菓子類（通称グミ）や健康食品としても広く利用され、安全に経口摂取できる。又、コラ−ゲンは、動物細胞の培養時に、足場として安全に細胞を増殖するのに用いられている。更に、変性コラ−ゲン（ゼラチン）が、ワクチン、内服薬や注射薬に、賦形剤、安定剤等として添加されている。

本発明者は、長年の研究の結果、正常で組織特有なコラ−ゲンを含む結合組織の強化は、その組織の疾患の進展を抑制することを見出だした。更にその強化の為には、正常で組織特有なコラ−ゲンの投与が良いとすることを見出だした。

コラ−ゲンは、手に入りやすい組織のもの、例えば、真皮由来のタイプＩ、ＩＩＩコラ−ゲンや、胎盤由来のタイプＩＶコラ−ゲンでも良いが、治療対象組織に含まれる型のコラ−ゲンと同一型が好ましく、最も好ましいのは改善や治療対象もしくは強化対象の組織由来のものであるがこれに限定されない。

コラ−ゲンは通常テロペプチドを含んでいるもの及びこれを除去したものが知られており、本発明においては両者のものを単独、もしくは混合して使用可能であるが、抗原性の面からテロペプチドを除去したものの方が好ましい。
更に本発明に於いてコラ−ゲンは、変性、修飾、低分子化したものでも、ペプタイド合成機で製したものでもこれらを組み合わせたものでも良い。つまり変性させてゼラチンにしても良く、サクシニル化などの修飾をしたものでも、低分子化したものでも良い。

本発明に於いてコラ−ゲンの由来は哺乳類、鳥類、魚類、甲殻類、爬虫類、昆虫類、菌類等、例えば、ヒト、サル、牛、豚、鯨、ラット、マウス、馬、家兎、山羊、ニワトリ、魚、カニ、えび、カエル、蚕、昆虫、大腸菌等のいづれの生物でもよく、これらを混合して用いてもよい。

コラ−ゲンの製法は、生体抽出、組織・細胞培養、遺伝子工学的製法等すでに知られている方法（「細胞外マトリックス研究法」コラ−ゲン技術研修会刊行）、又、ペプタイド合成機で製してのいずれでも良い。
コラ−ゲンを生体から製するには、一般的には塩酸や酢酸等の酸抽出とペプシン等の酵素抽出があり、両者を組合わせても良い。更にＤＥＡＥカラムクロマトグラフィ−や分画分子量の透析で、微量ならＨＰＬＣで精製しても良い。
１）胎盤よりタイプＩＶコラ−ゲンを製する一例を示す。
以下、できる限り４Ｃで行う。ヒト胎盤を細裁断し洗浄（精製水−蛋白分解酵素阻害剤含有０．０５Ｍトリス緩衝液ｐＨ７．５−精製水）−凍乾し粉砕−ペプシン含有０．５Ｍ酢酸（酢酸のみでも良い）で可溶化し遠心で上清を採取（沈殿は再可溶化、約５回繰り返す）−終濃度０．７Ｍ塩化ナトリウムを添加−遠心で上清を採取−終濃度１．２Ｍ塩化ナトリウム添加−遠心で沈殿採取−１Ｍ塩化ナトリウム含有０．０５Ｍトリス緩衝液ｐＨ７．５に溶解透析−４．５Ｍ塩化ナトリウムを添加−遠心で沈殿採取−１．０Ｍ塩化ナトリウム含有０．０５Ｍトリス緩衝液ｐＨ７．５に溶解透析−遠心で上清採取−４．５Ｍ塩化ナトリウム添加−沈殿（タイプＩＶコラ−ゲン）−カラムクロマトグラフィ−で精製。
なお公開特許公報（昭和６２−５３９２７）にも製する例がある。
２）胎盤よりタイプＩ及びＩＩＩコラ−ゲンを製する一例を示す。
以下、できる限り４Ｃで行う。ヒト胎盤を細裁断−洗浄（蛋白分解酵素阻害剤含有ＰＢＳ）と遠心で沈殿を採取（この操作を約６回繰り返す）−凍乾し粉砕−ペプシン含有０．５Ｍ酢酸（酢酸のみでも良い）で可溶化し遠心で上清を採取（沈殿は再可溶化、約５回繰り返す）−終濃度２Ｍ塩化ナトリウムを添加−遠心で沈殿を採取−０．０５Ｍ酢酸に溶解−遠心で上清採取−終濃度１Ｍ塩化ナトリウムを添加−遠心で沈殿を採取−０．０５Ｍ酢酸に溶解−透析し遠心分離−上清（タイプＩ）、沈殿（タイプＩＩＩ）−更に透析し精製。
なお、真皮よりタイプＩ及びＩＩＩコラ−ゲンを製する時、例えば、ウシ胎児、子ウシの真皮を用いる時は、皮膚の除毛、脂肪の除去を充分に行う。脱脂には、ジエチルエ−テルとエタノ−ルの混合液（１：１）を用いる。

更に抗癌剤として使用する場合は、本発明に於けるコラ−ゲンのみでなく、これに対する抗体を用いることも可能である。抗体を用いる場合は、ポリクロ−ナルよりもモノクロ−ナルが望ましく、より望ましくは、ヒト型モノクロ−ナル抗体である。
マウスやラットのモノクロ−ナル抗体をヒトに投与した時、長期では中和抗体ができ効果が弱まるが、ヒト型ではこのような事が起きにくい。抗体としてのイムノグロブリンは、ＩｇＧ１やＧ２ａなどのＩｇＧやＩｇＭ及び他の型でも，各型混合したものでも良く、更に小さくしたもの、例えばＨ鎖、Ｌ鎖、Ｆｃ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ′）_２、その他などでも抗原と反応性を持つ限り良い。

本発明として使用する健康食品等の飲食物とは、いわゆる健康食品のみならず、特定保健用食品、医薬部外品、一般飲食物等、任意の食品形態を含む。

本発明のコラ−ゲンとしての１日量は通常、健康食品等の飲食物としては、０．１ｇ以上であればよく、好ましい範囲として１ｇ〜１００ｇ、特に好ましい範囲として５〜１０ｇをあげることができる。
骨粗鬆症薬としての本発明のコラ−ゲンは、１日１〜３０ｇが良く、好ましくは１日５〜１５ｇが良い。
抗癌剤としての本発明のコラ−ゲン量は、１日０．００１ｍｇ以上３０ｇ以下で、好ましくは１日０．０１ｍｇ〜１０ｇで、抗体量としては１日０．００１ｍｇ以上３０ｇ以下で、好ましくは１日０．０１ｍｇ〜１０ｇである。数値は目安であり、疾患の重傷度、服用者の状態により増減されるべきで、これに限定されない。

本発明の投与方法は、経口投与、注射、生体内留置等、通常、医療現場や食品として利用されている方法なら特に限定されない。投与時期は、食後、食間、就寝前のいずれでも、又これらを組み合わせても良く、１日の投与回数も特に限定しない。
例えば、抗癌剤としてタイプＩＶコラ−ゲンを用い、転移性肝癌に局所的な治療を行う時である。タイプＩＶコラ−ゲン０．０１ｍｇ〜１ｇを単独又はこれを含む微粒子を肝臓動脈へカテ−テルから注入し血管造影で確認しながら塞栓を形成させることで、抗癌剤の転移と増殖を抑制する。

本発明の摂取（投与）形態は、末、錠、液、カプセル等既存の健康食品や医薬品の形態で良い。内服の形態の時の賦形剤には、内服の形態に必要とし通常用いられるものが適応できる。例えば、増量剤としては澱粉、乳糖などである。必要に応じ、香味料、甘味料、着色料、賦形剤などを添加しても良い。

更に既存医薬品の様に注射剤にしても、内服剤にしても、外用剤としても、局所投与形態にしても良い。
又主剤はコラ−ゲン単独や抗体単独でも、他の薬物と混合して内服薬、注射剤にしても良い。他の薬物は特に限定されず、通常医薬品として使用可能な薬物、例えば消化剤、整腸剤、抗潰瘍剤、抗生物質、ホルモン、酵素、ステロイド、内分泌系用薬、循環器系剤、抗リウマチ剤、抗炎症剤、鎮痛剤、解熱剤、抗アレルギ−剤、抗腫瘍剤、更にはインタ−フェロン、インタ−ロイキン、腫瘍壊死因子等のペプチド等をあげることができる。

本発明の健康食品等の飲食物や内服薬、注射剤等の医薬品に於いて溶液として用いる時、溶液は、滅菌精製水、水溶性溶剤（例えば、グリセリン）、油性溶剤（例えば、精製オリ−ブ油）等を単独又は組み合わせて使用することができる。又、本発明の健康食品等の飲食物や内服薬、注射剤等の医薬品に於いては、添加剤として等張化剤、緩衝剤、溶解補助剤、界面活性剤、安定化剤、防腐剤、油脂類、水溶性高分子、局所麻酔剤等を添加してもよい。その等張化剤としては塩化ナトリウム等の無機塩を、緩衝剤としてはリン酸等の無機酸、及びクエン酸の有機酸を、界面活性剤としてはゼラチン、ポリソルベ−ト８０、油脂類としては植物油等を、水溶性高分子としてはカルボキシメチルセルロ−スナトリウム等をあげることができる。
更に、本発明の健康食品等の飲食物、内服溶液剤、注射剤において、このように製された溶液、もしくは懸濁液に等張化剤、緩衝剤以外の前記添加物を、溶解もしくは懸濁させてもよい。
このように製された溶液、もしくは懸濁液をミリポアフィルタ−等を用いて無菌化し、次いで瓶、バイアルもしくは、アンプルに充てんさせることにより本発明の健康食品液、内服液、注射剤を製することができる。又本発明の液においては製された瓶、バイアルもしくはアンプルを凍結乾燥し、用時溶解液とすることも可能である。

発明の効果

医食同源の発想から、日常の飲食物から、特に動物成分から、必要な有効成分を得て、これを健康食品あるいは医薬品の形態とし、生体内で効率良く摂取可能とし、疾病の予防及び治療に提供するものである。又、その抗体についても同様である。特にコラ−ゲンは２か月以上の長期に渡って使用しても自他覚の副作用を認めない安全な健康食品等の飲食物及び薬剤である。
以下、本発明を更に実施例で説明するが本発明はこれらにより限定されるものではない。

実施例１−１

基底膜の主要成分であるタイプＩＶコラ−ゲンのＮＣ１（ウシ由来、ここでは腎臓由来を使用）、タイプＩＶコラ−ゲン（ヒト由来、ここでは胎盤由来でペプシン処理を使用、以下３本鎖）及び抗体（ウサギ由来、ここでは抗ＮＣ１抗血清）の抗癌作用につき検討した。
癌細胞（ＨＥＰＧ２）の培養液にＮＣ１、３本鎖及びその抗血清を加えて比較した。
結果は、３本鎖が最も癌細胞の増殖を抑制した。抗血清（ウサギ由来）も抑制効果があった。ＮＣ１（ウシ由来）も濃度を上げると抑制した。

＊各６穴の平均細胞数
＊培養条件 ＢＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ、５％ＣＯ_２濃度、３７Ｃ

実施例１−２

細胞「Ｂ１６ マウスメラノ−マ（黒色腫）」を用い、「実施例１−１」に準じて培養実験をした。Ｔｙｐｅ Ｉ ｃｏｌｌａｇｅｎ（ヒト胎盤由来、以下の実験も同様）。

実施例１−３

細胞「ＦＢＪＬＬ マウスＯｓｔｅｏｃａｒｃｕｎｏｍａ」を用い、「実施例１−１」に準じて培養実験をした。

実施例１−４

細胞「ＯＶＣＡＲ４ ヒトＯｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ」を用い、「実施例１−１」に準じて培養実験をした。

実施例１−５

細胞「ＨＴ１０８０ ヒトＦｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ」を用い、「実施例１−１」に準じて培養実験をした。

実施例１−６

細胞「ヒトＨｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ」を用い、「実施例１−１」に準じて培養実験をした。

安全性
コラ−ゲンの健常者への影響について確認した。健常者ボランテア２名が、豚骨由来コラ−ゲン（タイプＩコラ−ゲン８０％以上 コラ−ゲン技術研修会）約１０％を含有する市販スポ−ツドリンク（大塚製薬）液を暖め、１日２回食後に約１００ｍｌ（コラ−ゲン含量約１０ｇ）を１か月服用したが、使用中、使用直後も更に服薬休止１か月後も特段の自覚変化は見られなかった。

有効性
毎日の散歩を１時間以上行う骨粗鬆症患者３名が充分な同意の上で豚骨由来コラ−ゲン（タイプＩコラ−ゲン８０％以上 コラ−ゲン技術研修会）を市販スポ−ツドリンク（大塚製薬）液に暖めて溶解し内服した。内服量は、１日３回食後にコラ−ゲン各５ｇに相当する。
その結果、１名は最短１か月より骨密度が３％上昇し、２ヵ月後には８％の上昇であった。他の２名は変化が見られなかった。

有効性
骨折経験のある骨粗鬆症患者（７０才、女子）が事前の充分な同意の上で、豚真皮由来コラ−ゲン（タイプＩ及びタイプＩＩＩコラ−ゲン コラ−ゲン技術研修会）を毎日１回就寝前に、約１０ｇをオレンジジュ−ス４０ｍｌ（ビタミンＣ約１０ｍｇ相当含有）に懸濁させて４０日間内服した。その結果、骨密度が５％上昇した（ＤＥＸＡ法による測定誤差は２％以内）。

Claims (3)

1. タイプＩコラーゲンを主成分とする、
   又は、骨由来コラーゲン及び／又はタイプＩコラーゲン及び／又はタイプＩＩＩコラーゲンよりなる，
   又は、タイプＩＶコラーゲン及び／又はその分画やペプチドよりなる、特定保健用食品、医薬部外品、一般食品等を含む健康食品等の飲食物
2. 請求項１の健康食品等の飲食物が骨粗鬆症予防及び改善治療剤である請求項１のタイプＩコラーゲン及び／又はタイプＩＩＩコラーゲン及び／又は骨由来コラーゲン
3. 請求項１のタイプＩコラーゲンを主成分とする、
   又は、骨由来コラーゲン及び／又はタイプＩコラーゲン及び／又はタイプＩＩＩコラーゲンよりなる、特定保健用食品、医薬部外品、一般食品等を含む健康食品等の飲食物が、骨粗鬆症に有効とすることを明示又は暗示することを特徴とする請求項１の健康食品等の飲食物