JP2008169172A - 炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンｂ誘導体、それからなる食品製剤、化粧品、抗炎症剤 - Google Patents

Abstract

【課題】 副作用が弱く、優れた炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体、それからなる食品製剤、化粧品、抗炎症剤を提供する。
【解決手段】 炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体は、ノルセファラジオンＢとカプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸のいずれかと結合してなる誘導体であり、ドクダミの葉の粉砕物とエステル交換用リパーゼを添加し加温、又は、魚類、大豆と納豆菌により発酵し、植物油で抽出して得られる。食品製剤又は化粧品は、ノルセファラジオンＢ誘導体、菊の花エキス含有植物油、松の葉エキス含有植物油からなるものである。抗炎症剤はノルセファラジオンＢ誘導体からなる。
【選択図】 なし

Description

この発明は、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体に関するものである。また、前記のノルセファラジオンＢ誘導体、菊の花エキス含有植物油、松の葉エキス含有植物油を含有する組成物からなる食品製剤、化粧品及び抗炎症剤に関するものである。

炎症性サイトカインとは、炎症時に、マクロファージ、リンパ球や単球などの炎症細胞により産生される数種のたんぱく質である。

また、炎症性サイトカインは炎症性プロスタグランジンを誘導し、これらが組織細胞に障害を与え、発熱、腫脹、赤み、痛みを全身に及ぼす。

炎症性サイトカインとしては、インターロイキン−１アルファ、インターロイキン−１ベータ、インターロイキン−６、インターロイキン−８、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）があり、これらは分子量１万〜３万程度のたんぱく質である。

このうち、インターロイキン−１アルファ及びインターロイキン−１ベータは、炎症性細胞である単球やリンパ球から放出され、インターロイキン−６、インターロイキン−８やＴＮＦアルファの分泌を促し、このうちインターロイキン−６は発熱や組織の障害にも関与している。ＴＮＦアルファは、カケクチンとも言われ、癌などに伴う悪液質の際に放出され、全身症状の悪化をもたらす（例えば、非特許文献１参照。）。

これらの炎症性サイトカインは細菌やウイルス感染時により細胞内でそれらの生成が誘導される。その経路にはプロテインキナーゼＣ系やカルシウムを介した細胞内情報伝達系が存在している。さらに、核内で転写因子である転写因子カッパＢ（ＮＦ−カッパＢ）やＮＦ−ＩＬ６が炎症性サイトカインのメッセンジャーＲＮＡの転写を促進すると報告されている（例えば、非特許文献２参照。）。

炎症性サイトカインの産生を抑制する物質としてステロイドホルモン製剤が開発され、このステロイドホルモン製剤は炎症細胞の中で、プロテインキナーゼＣ系や炎症性サイトカインの転写因子を抑制し、炎症性サイトカインの産生を抑制する（例えば、非特許文献３参照。）。

しかし、プロピオン酸クロベタゾール、酢酸ジフロラゾン、プレゾニドロン、コルチゾンなどのステロイドホルモン製剤には、免疫機能低下、日和見感染、副腎の機能低下、ステロイド紫斑などが副作用として知られており、副作用による障害も多数報告されている（例えば、非特許文献４参照。）。

これらの副作用がある結果、ステロイドホルモン製剤は、大量に、また、継続して使用できないという欠点がある。

一方、天然の抗炎症剤としては甘草やハーブが知られている。甘草にはグリチルリチン酸が含有され、その働きにはステロイド様作用が関与していると報告されている（例えば、非特許文献５参照。）。しかし、その働きは軽度であり、水溶性であるために、作用が持続しないという欠点がある。

天然由来植物素材は、医薬品、食品、化粧品などとして利用されており、このうち、ドクダミは大和本草には十薬と言われ、その学名はＨｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａで、成分のイソクエルシトリンには血圧降下作用、デカノイルアセトアルデヒドには殺菌作用及び利尿作用、フラボン成分には血液循環改善作用があると報告されている（例えば、非特許文献６参照。）。しかし、それらのアルカロイド系成分の特定及びその抗炎症作用の特徴についての報告は少ない。

炎症性サイトカインの産生を抑制する物質又は抗炎症剤の発明としては、薬物結合タンパク質のアミノ酸配列を有するサイトカイン抑制抗炎症薬結合タンパク質をコードする単離された核酸分子またはその相補鎖分子に関するものがある（例えば、特許文献１参照。）。

また、ヒトＴＮＦアルファに結合するヒト抗体の発明があり、これは炎症性サイトカインに対して抑制作用を発揮する抗体に関するものである（例えば、特許文献２参照。）。

さらに、蛋白質複合体形成剤の発明では、ポリフェノールが有効成分であり、遺伝子複合体、細胞接着抑制剤又は免疫寛容剤として有効な蛋白質複合体形成剤に関するものがある（例えば、特許文献３参照。）。しかし、炎症性サイトカイン産生を抑制するノルセファラジオンＢに関する発明は見当たらない。
特許第３３７７５２９号公報 特開平５−９６公報 特開２００２−２５５８１１公報 Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ、Ｊ．ら、Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ、４３、２９４−３０１、２００４。 Ｄｅｖａｒａｊ、Ｓ．ら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ、５４、８５−９１、２００５。 Ｗａｌｓｈ、Ｇ．Ｍ．ら、Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、１７８、３７−４３、２００３。 Ｂｒｕｎｅｒ、Ｃ．Ｒ．ら、Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｏｎｌｉｎｅ Ｊ、９、２、２００３。 Ｓａｓａｋｉ、Ｈ．ら、Ｐａｔｈｏｂｉｏｌｏｇｙ、７０、２２９−２３６、２００２−２００３。 Ｌｉ、Ｇ．Ｚ．ら、Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ、２８、１８６４−１８６８、２００５。

従来、炎症性サイトカインを抑制する物質としてステロイド剤があるものの、副腎肥大や日和見感染、皮膚炎などの副作用が認められるという問題点があった。また、天然由来の物質はその作用が軽度であり、かつ、水溶性物質であることが多いため、作用に持続性がないという問題点があった。

さらに、ノルセファラジオンＢを含む天然のアルカロイド類やポリフェノール類は種々の酸化刺激や酸化物質によってそれらの活性を消失しやすいという安定性の問題点があった。

この発明は上記のような従来技術に存在する問題点に着目してなされたものである。その目的とするところは、副作用が弱く、優れた炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体を提供することにある。

また、ドクダミの葉の粉砕物にカプリル酸、ラウリル酸、エイコサペンタエン酸又はドコサヘキサエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる副作用が弱く、優れた炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体を提供することにある。

食用魚類、ドクダミの葉及び大豆に納豆菌を添加して発酵させた発酵物を植物油で抽出して得られる副作用が弱く、優れた炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体を提供することにある。

さらに、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０１〜０．５重量、松の葉エキス含有植物油０．０１〜０．５重量を含有する組成物からなる副作用が弱く、優れた食品製剤を提供することにある。

加えて、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０５〜０．８重量、松の葉エキス含有植物油０．０５〜０．８重量を含有する組成物からなる副作用が弱く、優れた化粧品を提供することにある。

また、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる副作用が弱く、優れた抗炎症剤を提供することにある。

上記の目的を達成するために、請求項１に記載の発明は、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（１）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体に関するものである。

Ｘは、カプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つ。

請求項２に記載の発明は、ドクダミの葉の粉砕物にカプリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがカプリル酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（２）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体に関するものである。

請求項３に記載の発明は、ドクダミの葉の粉砕物にラウリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがラウリル酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（３）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体に関するものである。

請求項４に記載の発明は、ドクダミの葉の粉砕物にエイコサペンタエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがエイコサペンタエン酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（４）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体に関するものである。

請求項５に記載の発明は、ドクダミの葉の粉砕物にドコサヘキサエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがドコサヘキサエン酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（５）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体に関するものである。

請求項６に記載の発明は、食用魚類、ドクダミの葉及び大豆に納豆菌を添加して発酵させた発酵物を植物油で抽出して得られる請求項１に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体に関するものである。

請求項７に記載の発明は、請求項１又は請求項２又は請求項３又は請求項４又は請求項５又は請求項６に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０１〜０．５重量、松の葉エキス含有植物油０．０１〜０．５重量を含有する組成物からなる食品製剤に関するものである。

請求項８に記載の発明は、請求項１又は請求項２又は請求項３又は請求項４又は請求項５又は請求項６に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０５〜０．８重量、松の葉エキス含有植物油０．０５〜０．８重量を含有する組成物からなる化粧品に関するものである。

請求項９に記載の発明は、請求項１又は請求項２又は請求項３又は請求項４又は請求項５又は請求項６に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる抗炎症剤に関するものである。

この発明は、以上のように構成されているため、次のような効果を奏する。

請求項１に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

請求項２に記載のドクダミの葉の粉砕物にカプリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

請求項３に記載のドクダミの葉の粉砕物にラウリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

請求項４に記載のドクダミの葉の粉砕物にエイコサペンタエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

請求項５に記載のドクダミの葉の粉砕物にドコサヘキサエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

請求項６に記載の食用魚類、ドクダミの葉及び大豆に納豆菌を添加して発酵させた発酵物を植物油で抽出して得られる炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

請求項７に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０１〜０．５重量、松の葉エキス含有植物油０．０１〜０．５重量を含有する組成物からなる食品製剤によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

請求項８に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０５〜０．８重量、松の葉エキス含有植物油０．０５〜０．８重量を含有する組成物からなる化粧品によれば、副作用が弱く、優れたしわ改善作用が発揮される。

請求項９に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる抗炎症剤によれば、副作用が弱く、優れた抗炎症作用が発揮される。

以下、この発明を実施するための最良の形態について詳細に説明する。

まず、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（１）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体について説明する。

Ｘは、カプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つ。

そもそも、ノルセファラジオンＢとは植物や微生物により生合成される自然界に存在するアルカロイド系化合物であり、その安全性が確認されている。その分子量は３０７．３で、その化学式の原子組成としてはＣが１８、Ｈが１３、Ｎが１およびＯが４である。

ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体とはノルセファラジオンＢに、カプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つが結合した誘導体である。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は、カプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸のいずれかの物質のカルボン酸基から最も離れた炭素部分が共有結合している。

そもそもノルセファラジオンＢはドクダミの茎や葉に広く分布しているものの、ノルセファラジオンＢの構造が不安定であるという欠点があるが、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体は構造的に安定であり、作用の持続性と安全性に優れている。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は、カプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸のうち、いずれか一つが結合することにより、その脂溶性が高まる結果、ノルセファラジオンＢ誘導体の構造が安定化され、ノルセファラジオンＢに比して抗炎症作用の持続性に優れている。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、炎症のシグナルの中心を担っているプロテインキナーゼＣの発現を抑制することにより、炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は脂溶性の高い特徴を有するカプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つが結合していることからノルセファラジオンＢに比して小腸や皮膚の細胞膜に馴染みやすく、吸収されやすい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は過剰に摂取され、吸収された場合、その過剰量は血中のエステラーゼにより分解されてノルセファラジオンＢと構成成分であるカプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸のいずれかに分解される。ノルセファラジオンＢとそれぞれの脂肪酸類は安全性が確認されていることから、結果として前記のノルセファラジオンＢ誘導体も安全性が高い。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがカプリル酸の場合、カプリル酸の中鎖飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがラウリル酸の場合、ラウリル酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘが１４−メチルパルミチン酸の場合、１４−メチルパルミチン酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがエイコサペンタエン酸の場合、エイコサペンタエン酸の不飽和脂肪酸残基が炎症性プロスタグランジン産生抑制作用を呈することから、アラキドン酸から生じる炎症性プロスタグランジンの量を減少させ、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがドコサヘキサエン酸の場合、ドコサヘキサエン酸の不飽和脂肪酸残基が血小板凝集抑制及び動脈拡張の作用を呈することから、血流が改善され、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがドコサペンタエン酸の場合、ドコサペンタエン酸の不飽和脂肪酸残基が毛細血管拡張の作用を呈することから、炎症局所の血流が改善され、炎症物質が排泄されて抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがガンマ−リノレン酸の場合、ガンマ−リノレン酸の不飽和脂肪酸残基が炎症性プロスタグランジンの反応を抑制させ、抗炎症作用が増加されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがアルファ−リポ酸の場合、アルファ−リポ酸のＳＨ基が抗酸化作用を呈し、酸化ストレスに対する組織の障害が抑制されて、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがステアリン酸の場合、ステアリン酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがメチルステアリン酸の場合、メチルステアリン酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

また、ノルセファラジオンＢ誘導体をドクダミの葉を原料として加工し、製造し、抽出することは原料の入手が容易で、かつ、経済的であることから、好ましい。この誘導体を抽出する場合、エタノール、ヘキサン、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、エーテルなどの有機溶媒や液化炭酸ガスによる超臨界抽出が利用される。特に、食用加工に用いられるエタノール又は含水エタノールを用いることは、食品としての利用範囲が高まることから好ましい。

さらに、ノルセファラジオンＢ誘導体に利用される脂肪酸を植物、豆類、食用魚類より精製し、または、精製油脂を用いることは、好ましい。たとえば、これらの脂肪酸を不二製油、日清製油、ニッスイ製薬、日水漁業、東洋漁業より入手し、その後、リパーゼやエステル結合酵素などの結合酵素を用いた生合成により、又は、化学的に合成することができる。

また、化学的合成反応による場合には、マグネシウム、アルミニウムなどの金属触媒とともに、加温される。これらの原料は、反応槽に入れられ、前記の有機溶媒とともに反応が行われる。この反応物は、溶媒を除去されて粗生成物として得ることは、精製に要するコストを削減できることから、好ましい。また、生成された誘導体を植物油で抽出することは、脂溶性の高い誘導体を効率的に得られることから、さらに好ましい。

これらの原料から生化学的な酵素反応によりノルセファラジオンＢ誘導体を得る場合には、エステル結合反応を生じる酵素、たとえば、アマノエンザイム製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇ、リパーゼＧ「アマノ」５０、リパーゼＦ−ＡＰ１５、ニューラーゼＦ３Ｇなどが用いられる。

目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を天然の素材から抽出し、あるいは、精製することにより得ることができる。天然の素材として、ドクダミの葉などの植物、海藻、キノコ、食用動物、食用魚類、軟体動物、昆虫、甲殻類などがある。特に、ドクダミの葉、食用魚類の頭部やウナギの頭部は、含量が高いことから、抽出しやすいという特徴がある。

生成されたノルセファラジオンＢ誘導体は前記の有機溶媒や以下の植物油で抽出される。植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられ、また、松の葉エキス、クコシエキス、緑茶エキス、菊エキスや柿の葉エキスを含有した植物油などを用いることにより、目的とする誘導体が安定に維持されることからさらに好ましい。

産業上、食用魚類の頭部は食用魚類の加工時に除去され、廃棄物として廃棄されており、利用されていない。この食用魚類の頭部やウナギの頭部を原料として抽出、又は、精製することは廃棄物を有効に利用し、廃棄物の量を軽減することから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体を微生物や酵母を用いた発酵により得ることは食用として安全性が確認されており、食経験も豊富であることから好ましく、この場合、用いる微生物としては納豆菌、乳酸菌、紅麹、枯草菌があり、酵母としてはビール酵母や酒精酵母があり、特に、納豆菌はエステル交換作用に優れていることから好ましい。

前記の発酵は発酵タンクにドクダミの葉、食用魚類、食用魚類の頭部や内臓、大豆や牛乳などの発酵材料と前記の微生物又は酵母を添加して実施される。この発酵後、微生物又は酵母と発酵液の混合物から前記の有機溶媒や植物油による抽出によって目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を得ることができる。

このうち、ドクダミの葉や茎は食経験も豊富であり、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を安定的に供給できることから好ましい。さらに、前記の発酵物から目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を分離する場合、前記の有機溶媒や植物油が用いられる。また、松の葉エキス、クコシエキス、菊エキスを含有した有機溶媒や植物油を用いて抽出して分離される油溶性部分を採取して得ることは、優れた抗酸化力により物質が安定化され、品質の高い誘導体が分離されることから好ましい。

植物から抽出する場合、学名Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａであるドクダミの葉や茎、緑茶、ギョウジャニンニク、タマネギ、ニンニク、大豆、ギジギシ、カンゾウ、ツリフネソウ、ハナイカダ、大麦若葉、葛の花、トウガラシ、カキ、梨、栗、タラ、ワサビ、ワラビ、稲、小麦、トウモロコシ、ダイコン、菜の花、サクラ、マツ、アオキ、アカネ、アカメガシワ、アケビ、アマチャズル、アマドコロ、アロエ、イカリソウ、イタドリ、イノコズチ、イブキジャコウソウ、ウコギ、ウツボグサ、ウド、ウメ、ウラジロガシ、エビスグサ、オウレン、オオバコ、オケラ、オクラ、オトギリソウ、オナモミ、オミナエシ、カキドオシ、カラスウリ、カラスビシャク、カワラケツメイ、カワラナデシコ、カンアオイ、キクイモ、キキョウ、キササゲ、キハダ、キランソウ、キンミズヒキ、クガイソウ、クサボケ、クズ、クチナシ、コウホネ、コブシ、サイカチ、サボンソウ、サルトリイバラバッケツ、サンシュユ、ジャノヒゲ、シラン、スイカズラ、セリ、センブリ、タムシバ、タラノキ、タンポポ、チガヤ、ツリガネニンジン、ツワブキ、トチノキ、トチバニンジン、ナンテン、ノイバラ、ハコベ、ハトムギ、ハハコグサ、ヒキオコシ、ヒシ、ヒトツバ、ビワ、フキ、フクジュソウ、フジ、マタタビ、メハジキ、ヤマノイモ、ユキノシタ、ヨモギ、リンドウ、レンギョウ、ロウバイ、ワレモコウなどの葉、茎、花又は根は、入手しやすいことから好ましい。

このうち、用いるドクタミはドクダミ属の植物であり、学名はＨｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａであり、日本各地、中国大陸から東南アジアに広く分布する多年生草本である。ここで用いるドクダミはいずれの産地でも良く、ドクダミの葉は心形で暗緑色の葉でも良く、赤味を帯びて斑紋ができた葉も用いられる。また、花や地下茎を持つものは、花や地下茎でも用いられる。

ドクダミの葉、花や茎は、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を抽出しやすことから好ましい。

さらに、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を緑茶から抽出する場合、日本産の緑茶、粉茶、中国産のアッサム系の緑茶の葉部、茎又は根は、入手しやすいことから好ましい。ここでいう緑茶とは、代表的には学名Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓであり、Ｃａｍｅｌｌｉａ属の全ての緑茶を含む。

植物体から目的とするノルセファラジオンＢ誘導体の分離には、分離用の樹脂などの精製操作を利用することが好ましい。生成されたノルセファラジオンＢ誘導体を前記の有機溶媒や植物油で抽出することはさらに、好ましい。

前記の反応物や組成物から、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を精製することは純度の高い物質として摂取した場合にその摂取量を減少させることができる点から好ましい。高度に精製される場合、分離用担体又は樹脂が利用され、精製される。分離用担体又は樹脂としては、表面が後述のようにコーティングされた、多孔性の多糖類、酸化珪素化合物、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリプロピレン、スチレン−ビニルベンゼン共重合体等が用いられる。０．１〜３００マイクロｍの粒度を有するものが好ましく、粒度が細かい程、精度の高い分離が行なわれるが、分離時間が長い欠点がある。

例えば、逆相担体又は樹脂として表面が疎水性化合物でコーティングされたものは、疎水性の高い物質の分離に利用される。陽イオン物質でコーティングされたものは陰イオン性に荷電した物質の分離に適している。

また、陰イオン物質でコーティングされたものは陽イオン性に荷電した物質の分離に適している。特異的な抗体をコーティングした場合には、特異的な物質のみを分離するアフィニティ担体又は樹脂として利用される。

アフィニティ担体又は樹脂は、抗原抗体反応を利用して抗原の特異的な調製に利用される。分配性担体又は樹脂は、シリカゲル（メルク社製）等のように、物質と分離用溶媒の間の分配係数に差異がある場合、それらの物質の単離に利用される。

これらのうち、製造コストを低減することができる点から、吸着性担体又は樹脂、分配性担体又は樹脂、分子篩用担体又は樹脂及びイオン交換担体又は樹脂が好ましい。さらに、分離用溶媒に対して分配係数の差異が大きい点から、逆相担体又は樹脂及び分配性担体又は樹脂はより好ましい。

分離用溶媒として有機溶媒を用いる場合には、有機溶媒に耐性を有する担体又は樹脂が用いられる。また、医薬品製造又は食品製造に利用される担体又は樹脂は好ましい。

これらの点から吸着性担体としてダイヤイオン（三菱化学（株）社製）及びＸＡＤ−２又はＸＡＤ−４（ロームアンドハース社製）、分子篩用担体としてセファデックスＬＨ−２０（アマシャムファルマシア社製）、分配用担体としてシリカゲル、イオン交換担体としてＩＲＡ−４１０（ロームアンドハース社製）、逆相担体としてＤＭ１０２０Ｔ（富士シリシア社製）がより好ましい。これらのうち、ダイヤイオン、セファデックスＬＨ−２０及びＤＭ１０２０Ｔはさらに好ましい。

得られた抽出物は、分離前に分離用担体又は樹脂を膨潤化させるための溶媒に懸濁される。その量は、分離効率の点から抽出物の重量に対して１〜５０倍量が好ましく、３〜２０倍量がより好ましい。分離の温度としては物質の安定性の点から４〜３７℃が好ましく、１０〜２５℃がより好ましい。

分離用溶媒には、水、又は、水を含有する低級アルコール、親水性溶媒、親油性溶媒が用いられる。低級アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールが用いられ、このうちエタノールは食用加工時にも利用されることから好ましい。

セファデックスＬＨ−２０を用いる場合、分離用溶媒には低級アルコールが好ましい。シリカゲルを用いる場合、分離用溶媒にはクロロホルム、メタノール、酢酸又はそれらの混合液が好ましい。ダイヤイオン及びＤＭ１０２０Ｔを用いる場合、分離用溶媒はメタノール、エタノール等の低級アルコール又は低級アルコールと水の混合液が好ましい。

分離された分画を採取後、乾燥又は真空乾燥により溶媒を除去し、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を粉末又は濃縮液として得ることは溶媒による影響を除外できることから、好ましい。前記のノルセファラジオンＢ誘導体は、液体又は粉末として得られる。得られたノルセファラジオンＢ誘導体は医薬品、食品製剤、化粧品、衛生用具、浸漬した繊維、プラスチック、衣類、汚染物質による炎症に対する抗炎症剤などに利用される。

医薬品としては、皮膚、全身又は局所の抗炎症剤、抗アレルギー剤、花粉症改善剤、抗肥満剤、脂肪分解剤、しわ除去剤、脂肪肝抑制剤、高脂血症改善剤、抗動脈硬化剤などに利用される。また、魚類や家畜などの獣医用医薬品又はペット用の抗炎症剤としても利用され、用いる素材が天然由来であることから安全性が高く、より好ましい。さらに、炎症に起因した癌や変異の発症に対しても予防や抑制作用を呈することから、発癌予防又は癌抑制剤としても利用される。

前記の食品製剤としては、抗炎症、鼻炎防止、花粉症防止、皮膚炎の予防、筋肉痛や筋肉疲労の予防、メタボリックシンドロームの予防、疲労回復、滋養強壮、肝臓機能の維持の目的などで使用される。また、この食品製剤はペット用や魚類や家畜などの成育のためにも、天然由来であることから安全性が高く、より好ましい。

この化粧品としては、炎症性サイトカインの産生を抑制することにより抗炎症作用を呈し、また、皮膚局所の血管拡張作用やリンパ管の拡張作用を呈することから、日焼けなどの炎症により発生したしわやたるみの抑制又は生成の予防に効果的である。特に、日焼けによる炎症に対して抗炎症作用を発揮し、しわやたるみの原因を取り除く。また、この化粧品は炎症性サイトカインが多量に産生されるアトピー性皮膚炎に対して優れた治療または予防的な働きを呈する。

衛生用具としてはガーゼ、マスク、花粉対策用のマスク、炎症を抑制するための生理用品やアトピー患者に対する衣類に用いられる。また、炎症を誘発する室内の空気改善剤、トイレに用いられるプラスチック素材や衣類、消臭剤やシックハウス症に対する改善剤や繊維、衣類などに利用される。さらに、炎症を起因させる環境物質からの防御、たとえば、ダイオキシン、アスベスト、ＰＣＢ、硫化水素、窒素酸化物などの有害物質から身体を防御するためのマスク、フィルターや燃料添加剤としても利用される。特に、喫煙やタバコに含まれる有害物質に対して抑制作用を呈することから、タバコのフィルターにも利用される。

次に、ドクダミの葉の粉砕物にカプリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる前記の式（１）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがカプリル酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（２）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体について説明する。

ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体とは、前記のノルセファラジオンＢ誘導体であり、ノルセファラジオンＢにカプリル酸のカルボキシル酸から最も離れた炭素が共有結合した誘導体である。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、核内に移動してＮＦ−カッパＢやＮＦ−ＩＬ６などの転写因子に作用し、転写因子が炎症性サイトカインの遺伝子レベルの発現を抑制して炎症性サイトカインの産生を抑制する。また、前記のノルセファラジオンＢ誘導体において、カプリル酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はドクダミの葉の粉砕物にカプリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる。

ドクダミの葉としてドクダミの植物体に生える全ての葉が用いられる。ドクダミはドクダミ属の食用植物であり、学名Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａである日本、アジア、世界各地に自生する。大和本草にも記載され、民間薬や薬膳料理に古くから利用され、食経験が豊富であり、安全性が確認されている。

また、化粧品原料としてもドクダミエキスとして利用されている。ここで用いるドクダミは日本、韓国、中国、台湾などのアジア、北アメリカ、南アメリカ、オセアニア、アフリカに自然に繁殖したもの、または、栽培されたいずれのドクダミでも、用いられ、このうち、日本、中国産のものは、農薬の使用履歴が追跡でき、品質が安定し、安価であることから、好ましい。

ドクダミの葉は新鮮なもの、乾燥されたもののいずれでも良い。

採取されたドクダミの葉は水道水で洗浄されることは好ましい。

ドクダミの葉は粉砕される。粉砕には粉砕機が用いられ、たとえば株式会社奈良機械製作所製の自由ミル、スーパー自由ミル、サンプルミル、ゴブリン、スーパークリーンミル、マイクロス、減圧乾燥機として東洋理工製の小型減圧乾燥機、株式会社マツイ製の小型減圧伝熱式乾燥機ＤＰＴＨ−４０、エーキューエム九州テクノス株式会社製のクリーンドライＶＤ−７、ＶＤ−２０などが用いられる。

ここで用いられるカプリル酸は、ヤシ油、大豆油、なたね油、綿実油、とうもろこし油、ベニバナ油、ゴマ油、コメ油、ヒマワリ油、オリーブ油などから得られ、リョーショク、日清製油や不二製油株式会社などのヤシや大豆などの植物より抽出され、精製されたものが、不純物の少ないことから好ましい。

ここで用いるエステル交換用リパーゼは、エステル交換反応用リパーゼとしては、たとえば、ノボザイム社製のリポザイムやノボザイム４３５、名糖産業社製のリパーゼＰＬやリパーゼＱＬＭ、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇ、リパーゼＧ「アマノ」５０、リパーゼＦ−ＡＰ１５、ニューラーゼＦ３Ｇなどの品質が高いものが用いられ、これらは安全性が確認されていることから、好ましい。

清浄なステンレス製寸胴などに前記のドクダミの葉の粉砕物、カプリル酸及びエステル交換用リパーゼが添加され、加温される。ここに、溶媒として水道水を添加することは、反応を円滑にすることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、カプリル酸は０．０２〜０．５重量が好ましく、エステル交換用リパーゼは０．０００１〜０．０４重量が好ましい。

前記の加温の温度として、１０〜３７℃が好ましく、１３〜３３℃がより好ましい。

前記の加温の時間として、１〜３６時間が好ましく、３〜２４時間がより好ましい。

前記の加温は、攪拌されながら、行うことが好ましく、１分間当たり４０〜１４０回の速度が好ましい。

加温された後に、冷却される。冷却方法は、自然冷却又は水冷が好ましい。

前記の反応物は植物油により分離される。前記の反応物は、油溶性が高いことから植物油に溶解する。植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられ、また、松の葉エキス、クコシエキス、緑茶エキス、菊エキスや柿の葉エキスを含有した植物油などを用いることにより、目的とする誘導体が安定に維持されることからさらに好ましい。

特に、前記の松の葉エキス含有植物油は、松の葉の粉砕物に植物油を添加して抽出される油溶性ポリフェノールを含有する抗酸化作用に優れた植物油であり、目的とする誘導体を安定的に分離できる。

松の葉エキス含有植物油に用いる松の葉は、日本産、中国産、台湾産のいずれでも用いられる。

農薬を使用せずに栽培された松の葉が農薬による危険性を回避できることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、添加する植物油は０．４〜３重量が好ましい。

分離されたノルセファラジオンＢ誘導体は、体内に吸収された後、過剰量は、エステラーゼにより分解され、さらに、肝臓において代謝されることから、安全性も高く、副作用も少ない。

前記の反応物から、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を分離し、精製することは純度の高い物質が得られる点から好ましい。この精製の方法としては、分離用の有機溶媒や樹脂などの精製操作を利用することが好ましい。有機溶媒としては、エタノール、ヘキサン、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、エーテルなどが用いられ、このうち、食品加工用のエタノール又は含水エタノールは扱いやすいことからより好ましい。

分離用担体又は樹脂としては、表面がコーティングされた、多孔性の多糖類、酸化珪素化合物、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリプロピレン、スチレン−ビニルベンゼン共重合体等が用いられる。適切な分離用溶媒により分離し、精製され、溶媒を除去して目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を得ることは好ましい。

このようにして得られたノルセファラジオンＢ誘導体は、液体又は粉末として得られる。得られたノルセファラジオンＢ誘導体は医薬品、食品製剤又は化粧品に利用される。医薬品としては、抗炎症剤、抗肥満剤、脂肪分解剤、しわ除去剤、脂肪肝抑制剤、高脂血症改善剤、抗動脈硬化剤、抗アレルギー剤などに利用される。

前記の食品製剤は、抗炎症、鼻炎防止、花粉症防止、皮膚炎の予防、筋肉痛や筋肉疲労の予防、メタボリックシンドロームの改善、疲労回復、滋養強壮、肝臓機能の維持の目的などで使用される。

この化粧品は炎症性サイトカインの産生を抑制することにより抗炎症作用を呈し、また、皮膚局所の血管拡張作用やリンバ管の拡張作用を呈することから、日焼けなどの炎症により発生したしわやたるみの抑制又は生成の予防に効果的である。特に、日焼けによる炎症に対して抗炎症作用を発揮し、しわやたるみの原因を取り除く。さらに、この化粧品は炎症性サイトカインが多量に産生されるアトピー性皮膚炎に対して優れた治療または予防的な働きを呈する。

次に、ドクダミの葉の粉砕物にラウリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる前記の式（１）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがラウリル酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（３）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体について説明する。

ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体とは、前記のノルセファラジオンＢ誘導体であり、ノルセファラジオンＢに、ラウリル酸のカルボキシル酸から最も離れた炭素が共有結合した誘導体である。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、核内に移動してＮＦ−カッパＢやＮＦ−ＩＬ６などの転写因子に作用し、転写因子が炎症性サイトカインの遺伝子レベルの発現を抑制して炎症性サイトカインの産生を抑制する。

また、前記のノルセファラジオンＢ誘導体において、ラウリル酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はドクダミの葉の粉砕物にラウリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる。

ドクダミの葉としてドクダミの植物体に生える全ての葉が用いられる。ドクダミはドクダミ属の食用植物であり、学名Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａである日本、アジア、世界各地に自生する。大和本草にも記載され、民間薬や薬膳料理に古くから利用され、食経験が豊富であり、安全性が確認されている。

また、化粧品原料としてもドクダミエキスとして利用されている。ここで用いるドクダミは日本、韓国、中国、台湾などのアジア、北アメリカ、南アメリカ、オセアニア、アフリカに自然に繁殖したもの、または、栽培されたいずれのドクダミでも、用いられ、このうち、日本、中国産のものは、農薬の使用履歴が追跡でき、品質が安定し、安価であることから、好ましい。

ドクダミの葉は新鮮なもの、乾燥されたもののいずれでも良い。

採取されたドクダミの葉は水道水で洗浄されることは好ましい。

ドクダミの葉は粉砕される。粉砕には、粉砕機が用いられ、たとえば粉砕機として株式会社奈良機械製作所製の自由ミル、スーパー自由ミル、サンプルミル、ゴブリン、スーパークリーンミル、マイクロス、減圧乾燥機として東洋理工製の小型減圧乾燥機、株式会社マツイ製の小型減圧伝熱式乾燥機ＤＰＴＨ−４０、エーキューエム九州テクノス株式会社製のクリーンドライＶＤ−７、ＶＤ−２０などが用いられる。

ここで用いられるラウリル酸は、ヤシ油、大豆油、なたね油、綿実油、とうもろこし油、ベニバナ油、ゴマ油、コメ油、ヒマワリ油、オリーブ油などから得られ、リョーショク、日清製油や不二製油株式会社などのヤシや大豆などの植物より抽出され、精製されたものが、不純物の少ないことから好ましい。

ここで用いるエステル交換用リパーゼは、エステル交換反応用リパーゼとしては、たとえば、ノボザイム社製のリポザイムやノボザイム４３５、名糖産業社製のリパーゼＰＬやリパーゼＱＬＭ、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇ、リパーゼＧ「アマノ」５０、リパーゼＦ−ＡＰ１５、ニューラーゼＦ３Ｇなどの品質が高いものが用いられ、これらは安全性が確認されていることから、好ましい。

清浄なステンレス製寸胴などに前記のドクダミの葉の粉砕物、ラウリル酸及びエステル交換用リパーゼが添加され、加温される。ここに、溶媒として水道水を添加することは、反応を円滑にすることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、ラウリル酸は０．０２〜０．５重量が好ましく、エステル交換用リパーゼは０．０００１〜０．０４重量が好ましい。

前記の加温の温度として、１０〜３０℃が好ましく、１３〜２７℃がより好ましい。

前記の加温の時間として、１〜２４時間が好ましく、２〜１４時間がより好ましい。

前記の加温は、攪拌されながら、行うことが好ましく、１分間当たり８〜１２０回の速度が好ましい。

加温された後に、冷却される。冷却方法は、自然冷却又は水冷が好ましい。

前記の反応物は植物油により分離される。前記の反応物は、油溶性が高いことから植物油に溶解する。植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられ、また、松の葉エキス、クコシエキス、緑茶エキス、菊エキスや柿の葉エキスを含有した植物油などを用いることにより、目的とする誘導体が安定に維持されることから好ましい。

特に、前記の松の葉エキス含有植物油は、松の葉の粉砕物に植物油を添加して抽出される油溶性ポリフェノールを含有する抗酸化作用に優れた植物油であり、目的とする誘導体を安定的に分離できる。

松の葉エキス含有植物油に用いる松の葉は、日本産、中国産、台湾産のいずれでも用いられる。

農薬を使用せずに栽培された松の葉が農薬による危険性を回避できることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、添加する植物油は０．４〜３重量が好ましい。

分離されたノルセファラジオンＢ誘導体は、体内に吸収された後、過剰量は、エステラーゼにより分解され、さらに、肝臓において代謝されることから、安全性も高く、副作用も少ない。

前記の反応物から、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を分離し、精製することは純度の高い物質として摂取量を減少させることができる点から好ましい。この精製の方法としては、分離用の有機溶媒や樹脂などの精製操作を利用することが好ましい。有機溶媒としては、エタノール、ヘキサン、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、エーテルなどが用いられ、このうち、食品加工用のエタノール又は含水エタノールは扱いやすいことからより好ましい。

分離用樹脂としては、表面がコーティングされた、多孔性の多糖類、酸化珪素化合物、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリプロピレン、スチレン−ビニルベンゼン共重合体等が用いられる。適切な分離用溶媒により分離し、精製され、溶媒を除去して目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を得ることは好ましい。

このようにして得られたノルセファラジオンＢ誘導体は、液体又は粉末として得られる。得られたノルセファラジオンＢ誘導体は医薬品、食品製剤又は化粧品に利用される。医薬品としては、抗炎症剤、抗肥満剤、脂肪分解剤、しわ除去剤、脂肪肝抑制剤、高脂血症改善剤、抗動脈硬化剤、抗アレルギー剤などに利用される。

前記の食品製剤は、抗炎症、鼻炎防止、花粉症防止、皮膚炎の予防、筋肉痛や筋肉疲労の予防、メタボリックシンドロームの改善、疲労回復、滋養強壮、肝臓機能の維持の目的などで使用される。

この化粧品は炎症性サイトカインの産生を抑制することにより抗炎症作用を呈し、また、皮膚局所の血管拡張作用やリンバ管の拡張作用を呈することから、日焼けなどの炎症により発生したしわやたるみの抑制又は生成の予防に効果的である。特に、日焼けによる炎症に対して抗炎症作用を発揮し、しわやたるみの原因を取り除く。

さらに、この化粧品は炎症性サイトカインが多量に産生されるアトピー性皮膚炎に対して優れた治療または予防的な働きを呈する。

次に、ドクダミの葉の粉砕物にエイコサペンタエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる前記の式（１）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがエイコサペンタエン酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（４）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体について説明する。

ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体とは、前記のノルセファラジオンＢ誘導体であり、ノルセファラジオンＢに、エイコサペンタエン酸のカルボキシル酸から最も離れた炭素が共有結合した誘導体である。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、核内に移動してＮＦ−カッパＢやＮＦ−ＩＬ６などの転写因子に作用し、転写因子が炎症性サイトカインの遺伝子レベルの発現を抑制して炎症性サイトカインの産生を抑制する。また、前記のノルセファラジオンＢ誘導体において、エイコサペンタエン酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はドクダミの葉の粉砕物にエイコサペンタエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる。

ドクダミの葉としてドクダミの植物体に生える全ての葉が用いられる。ドクダミはドクダミ属の食用植物であり、学名Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａである日本、アジア、世界各地に自生する。大和本草にも記載され、民間薬や薬膳料理に古くから利用され、食経験が豊富であり、安全性が確認されている。

また、化粧品原料としてもドクダミエキスとして利用されている。ここで用いるドクダミは日本、韓国、中国、台湾などのアジア、北アメリカ、南アメリカ、オセアニア、アフリカに自然に繁殖したもの、または、栽培されたいずれのドクダミでも、用いられ、このうち、日本、中国産のものは、農薬の使用履歴が追跡でき、品質が安定し、安価であることから、好ましい。

ドクダミの葉は新鮮なもの、乾燥されたもののいずれでも良い。

採取されたドクダミの葉は水道水で洗浄されることは好ましい。

ドクダミの葉は粉砕される。粉砕は、粉砕機として株式会社奈良機械製作所製の自由ミル、スーパー自由ミル、サンプルミル、ゴブリン、スーパークリーンミル、マイクロス、減圧乾燥機として東洋理工製の小型減圧乾燥機、株式会社マツイ製の小型減圧伝熱式乾燥機ＤＰＴＨ−４０、エーキューエム九州テクノス株式会社製のクリーンドライＶＤ−７、ＶＤ−２０などが用いられる。

ここで用いられるエイコサペンタエン酸は、魚類由来で魚油より抽出され、精製されたものが、不純物の少ないことから好ましい。日本水産製のエイコサペンタエン酸は品質も安定していることから、好ましい。

ここで用いるエステル交換用リパーゼは、エステル交換反応用リパーゼとしては、たとえば、ノボザイム社製のリポザイムやノボザイム４３５、名糖産業社製のリパーゼＰＬやリパーゼＱＬＭ、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇ、リパーゼＧ「アマノ」５０、リパーゼＦ−ＡＰ１５、ニューラーゼＦ３Ｇなどの品質が高いものが用いられ、これらは安全性が確認されていることから、好ましい。

清浄なステンレス製寸胴などに前記のドクダミの葉の粉砕物、エイコサペンタエン酸及びエステル交換用リパーゼが添加され、加温される。ここに、溶媒として水道水を添加することは、反応を円滑にすることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、エイコサペンタエン酸は０．０２〜０．５重量が好ましく、エステル交換用リパーゼは０．０００１〜０．０４重量が好ましい。

前記の加温の温度として、１０〜３０℃が好ましく、１３〜２７℃がより好ましい。

前記の加温の時間として、１〜２４時間が好ましく、２〜１４時間がより好ましい。

前記の加温は、攪拌されながら、行うことが好ましく、１分間当たり８〜１２０回の速度が好ましい。

加温された後に、冷却される。冷却方法は、自然冷却又は水冷が好ましい。

前記の反応物は植物油により分離される。前記の反応物は、油溶性が高いことから植物油に溶解する。植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられ、また、松の葉エキス、クコシエキス、緑茶エキス、菊エキスや柿の葉エキスを含有した植物油などを用いることにより、目的とする誘導体が安定に維持されることからさらに好ましい。

特に、前記の松の葉エキス含有植物油は、松の葉の粉砕物に植物油を添加して抽出される油溶性ポリフェノールを含有する抗酸化作用に優れた植物油であり、目的とする誘導体を安定的に分離できる。

松の葉エキス含有植物油に用いる松の葉は、日本産、中国産、台湾産のいずれでも用いられる。

農薬を使用せずに栽培された松の葉が農薬による危険性を回避できることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、添加する植物油は０．４〜３重量が好ましい。

分離されたノルセファラジオンＢ誘導体は、体内に吸収された後、過剰量は、エステラーゼにより分解され、さらに、肝臓において代謝されることから、安全性も高く、副作用も少ない。

前記の反応物から、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を分離し、精製することは純度の高い物質として摂取量を減少させることができる点から好ましい。この精製の方法としては、分離用の有機溶媒や樹脂などの精製操作を利用することが好ましい。有機溶媒としては、エタノール、ヘキサン、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、エーテルなどが用いられ、このうち、食品加工用のエタノール又は含水エタノールは扱いやすいことからより好ましい。

分離用樹脂としては、表面がコーティングされた、多孔性の多糖類、酸化珪素化合物、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリプロピレン、スチレン−ビニルベンゼン共重合体等が用いられる。適切な分離用溶媒により分離し、精製され、溶媒を除去して目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を得ることは好ましい。

このようにして得られたノルセファラジオンＢ誘導体は、液体又は粉末として得られる。得られたノルセファラジオンＢ誘導体は医薬品、食品製剤又は化粧品に利用される。医薬品としては、抗炎症剤、抗肥満剤、脂肪分解剤、しわ除去剤、脂肪肝抑制剤、高脂血症改善剤、抗動脈硬化剤、抗アレルギー剤などに利用される。

前記の食品製剤は、抗炎症、鼻炎防止、花粉症防止、皮膚炎の予防、筋肉痛や筋肉疲労の予防、メタボリックシンドロームの改善、疲労回復、滋養強壮、肝臓機能の維持の目的などで使用される。

この化粧品は炎症性サイトカインの産生を抑制することにより抗炎症作用を呈し、また、皮膚局所の血管拡張作用やリンバ管の拡張作用を呈することから、日焼けなどの炎症により発生したしわやたるみの抑制又は生成の予防に効果的である。特に、日焼けによる炎症に対して抗炎症作用を発揮し、しわやたるみの原因を取り除く。

さらに、この化粧品は炎症性サイトカインが多量に産生されるアトピー性皮膚炎に対して優れた治療または予防的な働きを呈する。

次に、ドクダミの葉の粉砕物にドコサヘキサエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる前記の式（１）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがドコサヘキサエン酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（５）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体について説明する。

ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体とは、前記のノルセファラジオンＢ誘導体であり、ノルセファラジオンＢに、ドコサヘキサエン酸のカルボキシル酸から最も離れた炭素が共有結合した誘導体である。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、核内に移動してＮＦ−カッパＢやＮＦ−ＩＬ６などの転写因子に作用し、転写因子が炎症性サイトカインの遺伝子レベルの発現を抑制して炎症性サイトカインの産生を抑制する。また、前記のノルセファラジオンＢ誘導体において、ドコサヘキサエン酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はドクダミの葉の粉砕物にドコサヘキサエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られる。

ドクダミの葉としてドクダミの植物体に生える全ての葉が用いられる。ドクダミはドクダミ属の食用植物であり、学名Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａである日本、アジア、世界各地に自生する。大和本草にも記載され、民間薬や薬膳料理に古くから利用され、食経験が豊富であり、安全性が確認されている。

また、化粧品原料としてもドクダミエキスとして利用されている。ここで用いるドクダミは日本、韓国、中国、台湾などのアジア、北アメリカ、南アメリカ、オセアニア、アフリカに自然に繁殖したもの、または、栽培されたいずれのドクダミでも、用いられ、このうち、日本、中国産のものは、農薬の使用履歴が追跡でき、品質が安定し、安価であることから、好ましい。

ドクダミの葉は新鮮なもの、乾燥されたもののいずれでも良い。

採取されたドクダミの葉は水道水で洗浄されることは好ましい。

ドクダミの葉は粉砕される。粉砕には、粉砕機が用いられ、たとえば株式会社奈良機械製作所製の自由ミル、スーパー自由ミル、サンプルミル、ゴブリン、スーパークリーンミル、マイクロス、減圧乾燥機として東洋理工製の小型減圧乾燥機、株式会社マツイ製の小型減圧伝熱式乾燥機ＤＰＴＨ−４０、エーキューエム九州テクノス株式会社製のクリーンドライＶＤ−７、ＶＤ−２０などが用いられる。

ここで用いられるドコサヘキサエン酸は、魚類由来で魚油より抽出され、精製されたものが、不純物の少ないことから好ましい。日本水産製のドコサヘキサエン酸は品質も安定していることから好ましい。

ここで用いるエステル交換用リパーゼは、エステル交換反応用リパーゼとしては、たとえば、ノボザイム社製のリポザイムやノボザイム４３５、名糖産業社製のリパーゼＰＬやリパーゼＱＬＭ、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇ、リパーゼＧ「アマノ」５０、リパーゼＦ−ＡＰ１５、ニューラーゼＦ３Ｇなどの品質が高いものが用いられ、これらは安全性が確認されていることから、好ましい。

清浄なステンレス製寸胴などに前記のドクダミの葉の粉砕物、ドコサヘキサエン酸及びエステル交換用リパーゼが添加され、加温される。ここに、溶媒として水道水を添加することは、反応を円滑にすることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、ドコサヘキサエン酸は０．０２〜０．５重量が好ましく、エステル交換用リパーゼは０．０００１〜０．０４重量が好ましい。

前記の加温の温度として、１０〜３０℃が好ましく、１３〜２７℃がより好ましい。

前記の加温の時間として、１〜２４時間が好ましく、２〜１４時間がより好ましい。

前記の加温は、攪拌されながら、行うことが好ましく、１分間当たり８〜１２０回の速度が好ましい。

加温された後に、冷却される。冷却方法は、自然冷却又は水冷が好ましい。

前記の反応物は、油溶性が高いことから植物油に溶解し、その性質を利用して植物油で分離される。植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられ、また、松の葉エキス、クコシエキス、緑茶エキス、菊エキスや柿の葉エキスを含有した植物油などを用いることにより、目的とする誘導体が安定に維持されることからさらに好ましい。

特に、前記の松の葉エキス含有植物油は、松の葉の粉砕物に植物油を添加して抽出される油溶性ポリフェノールを含有する抗酸化作用に優れた植物油であり、目的とする誘導体を安定的に分離できる。

松の葉エキス含有植物油に用いる松の葉は、日本産、中国産、台湾産のいずれでも用いられる。

農薬を使用せずに栽培された松の葉が農薬による危険性を回避できることから好ましい。

添加するドクダミの葉の粉砕物１重量に対し、添加する植物油は０．４〜３重量が好ましい。

分離されたノルセファラジオンＢ誘導体は、体内に吸収された後、過剰量は、エステラーゼにより分解され、さらに、肝臓において代謝されることから、安全性も高く、副作用も少ない。

前記の反応物から、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を分離し、精製することは純度の高い物質として摂取量を減少させることができる点から好ましい。この精製の方法としては、分離用の有機溶媒や樹脂などの精製操作を利用することが好ましい。有機溶媒としては、エタノール、ヘキサン、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、エーテルなどが用いられ、このうち、食品加工用のエタノール又は含水エタノールは扱いやすいことからより好ましい。

分離用担体又は樹脂としては、表面がコーティングされた、多孔性の多糖類、酸化珪素化合物、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリプロピレン、スチレン−ビニルベンゼン共重合体等が用いられる。適切な分離用溶媒により分離し、精製され、溶媒を除去して目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を得ることは好ましい。

このようにして得られたノルセファラジオンＢ誘導体は、液体又は粉末として得られる。得られたノルセファラジオンＢ誘導体は医薬品、食品製剤又は化粧品に利用される。医薬品としては、抗炎症剤、抗肥満剤、脂肪分解剤、しわ除去剤、脂肪肝抑制剤、高脂血症改善剤、抗動脈硬化剤、抗アレルギー剤などに利用される。

前記の食品製剤は、抗炎症、鼻炎防止、花粉症防止、皮膚炎の予防、筋肉痛や筋肉疲労の予防、メタボリックシンドロームの改善、疲労回復、滋養強壮、肝臓機能の維持の目的などで使用される。

この化粧品は炎症性サイトカインの産生を抑制することにより抗炎症作用を呈し、また、皮膚局所の血管拡張作用やリンバ管の拡張作用を呈することから、日焼けなどの炎症により発生したしわやたるみの抑制又は生成の予防に効果的である。特に、日焼けによる炎症に対して抗炎症作用を発揮し、しわやたるみの原因を取り除く。

さらに、この化粧品は炎症性サイトカインが多量に産生されるアトピー性皮膚炎に対して優れた治療または予防的な働きを呈する。

次に、食用魚類、ドクダミの葉及び大豆に納豆菌を添加して発酵させた発酵物を植物油で抽出して得られる炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体について説明する。

ここでいう炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体とは、前記のノルセファラジオンＢ誘導体である。

すなわち、ノルセファラジオンＢに、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つが結合した誘導体である。

このノルセファラジオンＢ誘導体は、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸のいずれかの物質のカルボン酸基から最も離れた炭素部分が共有結合している。

ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体は、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸が結合することにより、ノルセファラジオンＢの構造が安定化される特長を有する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、炎症のシグナルの中心を担っているプロテインキナーゼＣの発現を抑制することにより、炎症性サイトカインの産生を抑制する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は脂溶性の高い特徴を有するカプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つが結合していることから小腸や皮膚の細胞膜に馴染みやすく、吸収されやすい特長を有する。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は過剰に摂取され、吸収された場合、その過剰量は血中のエステラーゼにより分解されてノルセファラジオンＢとそれぞれのカプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸のいずれかに分解され、それぞれは安全性が確認されていることから、前記のノルセファラジオンＢ誘導体も安全性が高い。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがカプリル酸の場合、カプリル酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがラウリル酸の場合、ラウリル酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがエイコサペンタエン酸の場合、エイコサペンタエン酸の不飽和脂肪酸残基が炎症性プロスタグランジン産生抑制作用を呈することから、アラキドン酸より生じる炎症性プロスタグランジンの量を減少させ、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがドコサヘキサエン酸の場合、ドコサヘキサエン酸の不飽和脂肪酸残基が血小板凝集抑制及び動脈拡張の作用を呈することから、血流が改善され、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがドコサペンタエン酸の場合、ドコサペンタエン酸の不飽和脂肪酸残基が毛細血管拡張の作用を呈することから、炎症局所の血流が改善され、炎症物が排泄されて抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがガンマ−リノレン酸の場合、ガンマ−リノレン酸の不飽和脂肪酸残基が炎症性プロスタグランジンの反応を抑制させ、抗炎症作用が増加されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがアルファ−リポ酸の場合、アルファ−リポ酸のＳＨ基が抗酸化作用を呈し、酸化ストレスに対する組織の障害が防御されて、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがステアリン酸の場合、ステアリン酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体のうち、Ｘがメチルステアリン酸の場合、メチルステアリン酸の飽和脂肪酸残基が細胞膜に浸透し、細胞内に吸収されやすく、標的となるプロテインキナーゼＣに働きやすく、抗炎症作用が増強されることから好ましい。

前記のノルセファラジオンＢ誘導体は、食用魚類、ドクダミの葉及び大豆に納豆菌を添加して発酵させた発酵物を植物油で抽出して得られるものである。ここでいう食用魚類としては、食用に用いる魚類のことであり、このうち、ウナギは食経験が豊富である。

ウナギの頭部や内臓は食経験もあり、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸を含んでいることから好ましい。

また、 漁業では加工過程においてウナギの頭部や内臓は廃棄されることから、廃棄物の有用利用ができることから好ましい。

このうち、浜名湖湖畔で養殖されて成長したウナギは、好ましい。また、解体場で屠殺後解体し、頭部及び内臓を切断し、採取することは好ましい。

集められたウナギの頭部及び内臓を包丁により裁断し、中山技術研究所製ＤＭ−６にて粉砕することは好ましい。

ここでいうドクダミの葉とは、ドクダミに生える全ての葉のことであり、日本産、アジア産、その他の各国で自生又は栽培されたドクダミの葉である。

このうち、ドクダミの葉は、目的とするノルセファラジオンＢを多く含有し、抽出しやすことから好ましく、かつ、自然廃棄物として廃棄されており、廃棄物を減らし、環境汚染を防ぐことができることから好ましい。

ドクダミの葉は中山技術研究所製ＤＭ−６などの粉砕機で粉砕されることは好ましい。

ここでいう大豆は、日本産、中国産、アメリカ産、ロシア産などいずれの産地のものも、利用でき、使用に際して中山技術研究所製ＤＭ−６などの粉砕機で粉砕されることが好ましい。

ここでいう納豆菌とは、納豆や食品の加工用に用いられる枯草菌の一種である。納豆素本舗製の納豆菌は発酵に適していることから、好ましい。

前記の発酵に関するそれぞれの添加量は、食用魚類１重量に対し、ドクダミの葉は０．０３〜０．３重量が好ましく、大豆は０．１〜３重量が好ましく、納豆菌は０．００１〜０．０３重量が好ましい。

前記の発酵は清浄な培養用タンクで実施され、水道水により前記の材料を混合することは好ましい。

また、この発酵は、３０〜４０℃に加温され、発酵は、２４〜９６時間行われる。発酵後に、抽出を効率良く実施するために、水道水で希釈される。

前記の発酵物は、油溶性が高いことから植物油に溶解する性質があることから、植物油により分離される。植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられ、また、松の葉エキス、クコシエキス、緑茶エキス、菊エキスや柿の葉エキスを含有した植物油などを用いることにより、目的とする誘導体が安定に維持されることからさらに好ましい。

特に、前記の松の葉エキス含有植物油は、松の葉の粉砕物に植物油を添加して抽出される油溶性ポリフェノールを含有する抗酸化作用に優れた植物油であり、目的とする誘導体を安定的に分離できる。

松の葉エキス含有植物油に用いる松の葉は、日本産、中国産、台湾産のいずれでも用いられる。

農薬を使用せずに栽培された松の葉が農薬による危険性を回避できることから好ましい。

前記の発酵物１重量に対して植物油の添加量は、０．０２〜２重量である。この場合、攪拌による抽出が好ましく、攪拌温度は１０〜３０℃が好ましく、攪拌時間は０．５〜３時間が好ましい。

前記の攪拌後、上層に分離した松の葉エキス含有植物油を採取し、水分を除去することは好ましい。水分を除去するために、東洋技研製ＴＧＤ−２５０ＬＦ２などの乾燥機が用いられる。

分離されたノルセファラジオンＢ誘導体は、体内に吸収された後、過剰量は、エステラーゼなどの消化酵素により分解され、さらに、肝臓において代謝されることから、安全性も高く、副作用も少ない。

前記の反応物から、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を分離し、精製することは純度の高い物質として摂取量を減少させることができる点から好ましい。この精製の方法としては、分離用の有機溶媒や樹脂などの精製操作を利用することが好ましい。有機溶媒としては、エタノール、ヘキサン、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、エーテルなどが用いられ、このうち、食品加工用のエタノール又は含水エタノールは扱いやすいことからより好ましい。

分離用担体又は樹脂としては、表面がコーティングされた、多孔性の多糖類、酸化珪素化合物、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリプロピレン、スチレン−ビニルベンゼン共重合体等が用いられる。適切な分離用溶媒により分離し、精製され、溶媒を除去して目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を得ることは好ましい。

このようにして得られたノルセファラジオンＢ誘導体は、液体又は粉末として得られる。得られたノルセファラジオンＢ誘導体は医薬品、食品製剤又は化粧品に利用される。医薬品としては、抗炎症剤、抗肥満剤、脂肪分解剤、しわ除去剤、脂肪肝抑制剤、高脂血症改善剤、抗動脈硬化剤、抗アレルギー剤などに利用される。

前記の食品製剤は、抗炎症、鼻炎防止、花粉症防止、皮膚炎の予防、筋肉痛や筋肉疲労の予防、メタボリックシンドロームの改善、疲労回復、滋養強壮、肝臓機能の維持の目的などで使用される。

この化粧品は炎症性サイトカインの産生を抑制することにより抗炎症作用を呈し、また、皮膚局所の血管拡張作用やリンバ管の拡張作用を呈することから、日焼けなどの炎症により発生したしわやたるみの抑制又は生成の予防に効果的である。特に、日焼けによる炎症に対して抗炎症作用を発揮し、しわやたるみの原因を取り除く。

さらに、この化粧品は炎症性サイトカインが多量に産生されるアトピー性皮膚炎に対して優れた治療または予防的な働きを呈する。

次に、前記の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０１〜０．５重量、松の葉エキス含有植物油０．０１〜０．５重量を含有する組成物からなる食品製剤について説明する。

ここでいう炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体とは、粗生成物、発酵物、混合物、合成された物、抽出して精製された純度の高い物質のいずれでもよく、前記のノルセファラジオンＢ誘導体とは、ノルセファラジオンＢのＸの位置に、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つが共有結合した誘導体である。

また、ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する誘導体である。

さらに、ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、核内に移動してＮＦ−カッパＢやＮＦ−ＩＬ６などの転写因子に作用し、転写因子が炎症性サイトカインの遺伝子レベルの発現を抑制して炎症性サイトカインの産生を抑制する誘導体である。

ここでいう菊の花エキス含有植物油とはポリフェノール類を含有する菊の花エキスからなる植物油であり、菊の花又は菊の花の発酵物を植物油で抽出して得られる。

菊の花エキス含有植物油に用いられる植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられる。

株式会社東洋発酵製の菊の花エキス含有植物油は品質が高く、不純物が少ないことから、好ましい。

松の葉エキス含有植物油は、日本、中国、アジア産の松、アカマツ、クロマツなどの松、フランス海岸松の葉を粉砕機により粉砕され、植物油により抽出して得られる。

松の葉の粉砕された原料を、ヤクルト薬品工業株式会社製のオノズカＲ−１０、Ｙ−ＮＣ、アマノエンザイム株式会社製のセルラーゼ Ａ「アマノ」３、セルラーゼ Ｔ「アマノ」４などのセルラーゼにより処理することは、抽出効率が向上することから好ましい。株式会社東洋発酵製の松の葉エキス含有植物油は品質が高く、不純物が少ないことから、好ましい。

前記の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、添加される菊の花エキス含有植物油は０．０１〜０．５重量であり、松の葉エキス含有植物油は０．０１〜０．５重量であり、これにより組成物が得られる。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、菊の花エキス含有植物油の重量が０．０１重量を下回る場合、目的とする組成物が十分に得られないおそれがある。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、菊の花エキス含有植物油の重量が０．５重量を上回る場合、ノルセファラジオンＢ誘導体の溶解性が低下し、析出するおそれがある。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、松の葉エキス含有植物油の重量が０．０１重量を下回る場合、目的とする組成物が十分に得られないおそれがある。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、松の葉エキス含有植物油の重量が０．５重量を上回る場合、ノルセファラジオンＢ誘導体の溶解性が低下し、析出するおそれがある。

前記の組成物を得るために、混合後も加温されることは好ましい。加温条件として温度は３０〜４５℃であり、加温時間は６〜４０時間である。

加温温度が３０℃を下回る場合、十分な混合が生じないおそれがある。加温温度が４５℃を上回る場合、酸化により生成された反応物が褐色に変色するおそれがある。加温時間が６時間を下回る場合、十分な生成物が得られないおそれがある。加温時間が４０時間を上回る場合、酸化により生成された生成物が褐色に変色するおそれがある。

この組成物は、前記のノルセファラジオンＢ誘導体を少しずつ、持続的に放出させて、持続性組成物となることから、好ましい。

また、このように構成することにより、ノルセファラジオンＢ誘導体が菊の花エキス含有植物油の抗酸化力により安定に維持されて酸化による分解が抑制される。特に、不飽和脂肪酸の二重結合が酸化から守られて構造を維持する。

さらに、前記の組成物が他の原料とともに加工され、食品製剤になる。この場合、種々の食品素材又は飲料品素材に添加することによって、例えば、粉末状、錠剤状、液状（ドリンク剤等）、カプセル状等の形状の食品製剤にすることができる。また、基材、賦形剤、添加剤、副素材、増量剤等を適宜添加してもよい。

前記の食品製剤は、１日数回に分けて経口摂取される。１日の摂取量は０．２〜１０ｇが好ましく、０．３〜６ｇがより好ましく、０．５〜４ｇがさらに好ましい。１日の摂取量が、０．２ｇを下回る場合、十分な抗炎症作用が発揮されないおそれがある。１日の摂取量が、１０ｇを越える場合、コストが高くなるおそれがある。上記の他に、飴、せんべい、クッキー、飲料等の形態で使用することができる。

ここでいう食品製剤とは、人間が食する保健機能食品、健康補助食品、一般食品、病院で用いる病院用食品、また、動物用の飼料又はペット用サプリメント、ペットフードである。

この食品製剤は、抗炎症、鼻炎防止、花粉症防止、皮膚炎の予防、筋肉痛や筋肉疲労の予防、メタボリックシンドロームの改善、疲労回復、滋養強壮、肝臓機能の維持の目的などで使用される。

次に、前記の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０５〜０．８重量、松の葉エキス含有植物油０．０５〜０．８重量を含有する組成物からなる化粧品について説明する。

ここでいう炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体とは、粗生成物、発酵物、混合物、合成された物、抽出して精製された純度の高い物質のいずれでもよく、前記のノルセファラジオンＢ誘導体とは、ノルセファラジオンＢに、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つが共有結合した誘導体である。

また、ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する誘導体である。

さらに、ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、核内に移動してＮＦ−カッパＢやＮＦ−ＩＬ６などの転写因子に作用し、転写因子が炎症性サイトカインの遺伝子レベルの発現を抑制して炎症性サイトカインの産生を抑制する誘導体である。

ここでいう菊の花エキス含有植物油とはポリフェノール類を含有する菊の花エキスからなる植物油であり、菊の花又は菊の花の発酵物を植物油で抽出して得られる。

菊の花エキス含有植物油に用いられる植物油としては、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ナタネ油、コメ油、胚芽油、コーン油、ベニバナ油、アマニ油、アーモンド油、ゴマ油、カカオ油、キャノーラ油、グレープシード油、エゴマ油、小麦胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シソ油、茶油、ツキミソウ油、パンプキンシード油、ピーナッツ油、ブドウ油、ヘーゼルナッツ油、綿実油、落花生油などの食用又は化粧品に用いられる油が用いられる。

株式会社東洋発酵製の菊の花エキス含有植物油は品質が高く、不純物が少ないことから、好ましい。

松の葉エキス含有植物油は、日本、中国、アジア産の松、アカマツ、クロマツなどの松、フランス海岸松の葉を粉砕機により粉砕され、植物油により抽出して得られる。

松の葉の粉砕された原料を、ヤクルト薬品工業株式会社製のオノズカＲ−１０、Ｙ−ＮＣ、アマノエンザイム株式会社製のセルラーゼ Ａ「アマノ」３、セルラーゼ Ｔ「アマノ」４などのセルラーゼにより処理することは、抽出効率が向上することから好ましい。株式会社東洋発酵製の松の葉エキス含有植物油は品質が高く、不純物が少ないことから、好ましい。

前記の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、添加される菊の花エキス含有植物油は０．０５〜０．８重量であり、松の葉エキス含有植物油は０．０５〜０．８重量であり、これにより組成物が得られる。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、菊の花エキス含有植物油の重量が０．０５重量を下回る場合、目的とする組成物が十分に得られないおそれがある。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、菊の花エキス含有植物油の重量が０．８重量を上回る場合、ノルセファラジオンＢ誘導体の溶解性が低下し、析出するおそれがある。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、松の葉エキス含有植物油の重量が０．０５重量を下回る場合、目的とする組成物が十分に得られないおそれがある。

ノルセファラジオンＢ誘導体１重量に対し、松の葉エキス含有植物油の重量が０．８重量を上回る場合、ノルセファラジオンＢ誘導体の溶解性が低下し、析出するおそれがある。

前記の組成物を得るために、混合後も加温されることは好ましい。加温条件として温度は３０〜４５℃であり、加温時間は６〜４０時間である。

加温温度が３０℃を下回る場合、十分な反応が生じないおそれがある。加温温度が４５℃を上回る場合、酸化により生成された反応物が褐色に変色するおそれがある。加温時間が６時間を下回る場合、十分な生成物が得られないおそれがある。

加温時間が４０時間を上回る場合、酸化により生成された生成物が褐色に変色するおそれがある。

この組成物は、前記のノルセファラジオンＢ誘導体を少しずつ、持続的に放出させて、持続性組成物となることから、好ましい。

また、このように構成することにより、ノルセファラジオンＢ誘導体が菊の花エキス含有植物油の抗酸化力により安定に維持されて酸化による分解が抑制される。特に、不飽和脂肪酸の二重結合が酸化から守られて構造を維持する。

さらに、化粧品として前記の組成物が他の原料とともに加工される。その後、常法に従って油分、界面活性化剤、ビタミン剤、紫外線吸収剤、増粘剤、保湿剤、副素材等とともに用いることができる。

化粧水、クリーム、軟膏、ローション、乳液、パック、オイル、石鹸、洗顔料、香料、オーディコロン、浴用剤、シャンプー、リンス等の形態とすることができる。化粧品製剤の形態は任意であり、溶液状、クリーム状、ペースト状、ゲル状、ジェル状、固形状又は粉末状として用いることができる。

化粧品として皮膚に１日数回に分けて塗布される。１日の塗布量は０．０１〜１０ｇが好ましく、０．０５〜３ｇがより好ましく、０．１〜２ｇがさらに好ましい。１日の塗布量が、０．０１ｇを下回る場合、しわやたるみの治療または防止効果が発揮されないおそれがある。１日の塗布量が、１０ｇを越える場合、コストが高くなるおそれがある。

ここでいう化粧品とは、人間に用いる化粧品である基礎化粧品、美白化粧品、毛髪洗浄剤、トリートメント剤、染め剤、育毛剤、養毛剤、ボディウォッシュ、医薬部外品である。その他に、動物に用いる皮膚改善剤又はペット用シャンプー、ボディウォッシュである。

この化粧品は炎症性サイトカインの産生を抑制することにより抗炎症作用を呈し、また、皮膚局所の血管拡張作用やリンバ管の拡張作用を呈することから、日焼けなどの炎症により発生したしわやたるみの抑制又は生成の予防に効果的である。

特に、日焼けによる炎症に対して抗炎症作用を発揮し、しわやたるみの原因を取り除く。

さらに、この化粧品は炎症性サイトカインが多量に産生されるアトピー性皮膚炎に対して優れた治療または予防的な働きを呈する。

次に、前記の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる抗炎症剤について説明する。

ここでいう炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体とは、粗生成物、発酵物、混合物、合成された物、抽出して精製された純度の高い物質のいずれでもよく、前記のノルセファラジオンＢ誘導体とは、ノルセファラジオンＢに、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つが共有結合した誘導体である。

また、ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体はインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−８やＴＮＦアルファなどの炎症性サイトカインの産生を抑制する誘導体である。

さらに、ここでいうノルセファラジオンＢ誘導体は単球、マクロファージ、好中球などの炎症性細胞の細胞膜を通過し、核内に移動してＮＦ−カッパＢやＮＦ−ＩＬ６などの転写因子に作用し、転写因子が炎症性サイトカインの遺伝子レベルの発現を抑制して炎症性サイトカインの産生を抑制する誘導体である。

医薬品として用いる場合には、不純物による影響を除去することが必要となるために、酵素反応により合成され、溶媒の残留の少ない前記の構造のノルセファラジオンＢ誘導体を用いることが好ましい。

医薬品として経口剤又は非経口剤として利用され、医薬部外品としては、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、石鹸、歯磨き粉等に配合されて利用される。

経口剤としては、錠剤、カプセル剤、散剤、シロップ剤、ドリンク剤等が挙げられる。前記の錠剤及びカプセル剤に混和される場合には、結合剤、賦形剤、膨化剤、滑沢剤、甘味剤、香味剤等とともに用いることができる。前記の錠剤は、シェラック又は砂糖で被覆することもできる。

また、前記のカプセル剤の場合には、上記の材料にさらに油脂等の液体担体を含有させることができる。前記のシロップ剤及びドリンク剤の場合には、甘味剤、防腐剤、色素香味剤等を含有させることができる。

非経口剤としては、軟膏剤、クリーム剤、水剤等の外用剤の他に、注射剤が挙げられる。ここで用いる外用剤の基材としては、ワセリン、パラフィン、油脂類、ラノリン、マクロゴールド等が用いられ、通常の方法によって軟膏剤やクリーム剤等とすることができる。

注射剤には、液剤があり、その他、凍結乾燥剤がある。これは使用時、注射用蒸留水や生理食塩液等に無菌的に溶解して用いられる。

ここでいう抗炎症剤は、皮膚や全身又は局所の炎症に対して治療又は予防効果を目的とした医薬品又は医薬部外品製剤である。

全身の炎症には、発熱、発赤、浮腫などがあり、臓器ごとの炎症として、肺炎、脳炎、咽頭炎、気管支炎、角膜炎、腸炎、胃炎、十二指腸炎、大腸炎、肝炎、腎炎、膀胱炎、膵炎、神経炎、筋肉炎、動脈炎、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、日焼けによる皮膚炎などであり、特に、日焼けによる皮膚炎に対しては外用剤として利用される。

これらの全身及び局所の各臓器の炎症に対して炎症性サイトカインの産生を抑制する作用機序により効果を発揮する。

加えて、家畜、ペットの炎症や皮膚炎治療を目的とした獣医用医薬品としても利用できる。

以下、前記実施形態を実施例及び試験例を用いて具体的に説明する。なお、以下の説明は例であり、形態を変化させて実施することができる。

まず、発酵により得られるノルセファラジオンＢ誘導体について説明する。

浜名湖湖畔で養殖されて成長したウナギ（学名Ａｎｇｕｉｌｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ）７０匹を原料として用いた。成長したウナギを解体場で屠殺後解体し、頭部及び内臓を切断し、採取した。体部は、食用に供し、頭部及び内臓を集めた。

集められた頭部及び内臓１．３ｋｇを包丁により裁断し、中山技術研究所製ＤＭ−６にて粉砕した。

これを清浄な培養用タンクに入れ、水道水３．２Ｌを添加した。これに無農薬で栽培された静岡県で採取されたドクダミの葉１．６ｋｇを水道水で洗浄後、乾燥機（西村機械製、ＧＺＱ３型）により乾燥し、ハサミで裁断し、中山技術研究所製ＤＭ−６にて粉砕した。この粉砕物１５０ｇを前記の寸胴に添加した。これに、中国産大豆を水洗後、３６分間３６℃に加温し、さらに大豆粉砕物１．５ｋｇを添加した。

これに、納豆素本舗製の納豆菌１５ｇを添加した。３５℃の温度で、攪拌しながら、４６時間発酵した。

発酵が終了したタンクに、水道水３．３Ｌを添加した。これを発酵物とした。

前記の発酵物に、味の素製の大豆油の０．９ｋｇを添加して１時間攪拌し、混合した。

これを静置して上層に分離した大豆油により分離される油溶性部分を液体として採取した。水分を除去するために、東洋技研製ＴＧＤ−２５０ＬＦ２に供し、油状物質として、目的とするノルセファラジオンＢ誘導体を得た。これを実施例１の検体とした。

以下に、カプリル酸を共有結合させたノルセファラジオンＢ誘導体の調製について記載する。

無農薬で栽培された静岡産のドクダミの葉１ｋｇを購入し、水道水により十分に洗浄し、乾燥機により乾燥させた。

このドクダミの葉１ｋｇを粉砕機（三力製作所製、三力式万能粉砕機）に供し、粉砕して緑茶の粉砕物とした。

清浄な寸胴にドクダミの葉の粉砕物１ｋｇを入れ、水道水を９Ｌ添加した。これに、リョーショクより購入したカプリル酸２５０ｇを添加して攪拌した。

これに、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇを１０ｇ添加し、２８℃に加温して、７０回／分の速度で１３時間攪拌し、これを加温液とした。

前記の加温液の入った寸胴を水道水により冷却後、味の素製大豆油０．９ｋｇを添加し、油部分を採取した。

この油部分を真空乾燥機（エーキューエム九州テクノス製、クリーンドライ）により乾燥してカプリル酸を結合させたノルセファラジオンＢ誘導体を油状の液体として得た。また、これを実施例２の検体とした。

以下に、ラウリル酸を結合させたノルセファラジオンＢ誘導体の調製について記載する。

無農薬で栽培された静岡産のドクダミの葉３ｋｇを採取し、水道水により十分に洗浄し、乾燥機（西村機械製、ＧＺＱ３型）により乾燥させた。これを原料のドクダミの葉とした。

このドクダミの葉２ｋｇを粉砕機（三力製作所製、三力式万能粉砕機）に供し、粉砕してドクダミの葉の粉砕物とした。

清浄な寸胴にドクダミの葉の粉砕物１ｋｇを入れ、水道水を１０Ｌ添加した。これに、リョーショクより購入したラウリル酸２００ｇを添加して攪拌した。

これに、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇを１７ｇ添加し、２９℃に加温して、６６回／分の速度で１４時間攪拌し、これを加温液とした。

前記の加温液の入った寸胴を水道水により冷却後、理研ビタミン製のヤシ油１ｋｇを添加し、油部分を採取した。

これを真空乾燥機（エーキューエム九州テクノス製、クリーンドライ）により乾燥してラウリル酸を結合させたノルセファラジオンＢ誘導体を油状の液体として得た。また、これを実施例３の検体とした。

以下に、エイコサペンタエン酸を結合させたノルセファラジオンＢ誘導体の調製について記載する。

無農薬で栽培された中国産のドクダミの葉３ｋｇを採取し、水道水により十分に洗浄し、乾燥機により乾燥させた。これを原料のドクダミの葉とした。このドクダミの葉２．２ｋｇを粉砕機（三力製作所製、三力式万能粉砕機）に供し、粉砕してドクダミの葉の粉砕物とした。

清浄な寸胴にドクダミの葉の粉砕物１．２ｋｇを入れ、水道水を１２Ｌ添加した。これに、日本水産製のエイコサペンタエン酸３３０ｇを添加して攪拌した。

これに、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇを１２ｇ添加し、２５℃に加温して、６４回／分の速度で１３時間攪拌し、これを加温液とした。

前記の加温液の入った寸胴を水道水により冷却後、理研ビタミン製のヤシ油１ｋｇを添加し、油部分を採取した。

これを真空乾燥機（エーキューエム九州テクノス製、クリーンドライ）により乾燥してエイコサペンタエン酸を結合させたノルセファラジオンＢ誘導体を油状の液体として得た。また、これを実施例４の検体とした。

以下に、ドコサヘキサエン酸を結合させたノルセファラジオンＢ誘導体の調製について記載する。

無農薬で栽培された中国産のドクダミの葉３ｋｇを採取し、水道水により十分に洗浄し、乾燥機（西村機械製、ＧＺＱ３型）により乾燥させた。これを原料のドクダミの葉とした。

このドクダミの葉２．５ｋｇを粉砕機（三力製作所製、三力式万能粉砕機）に供し、粉砕してドクダミの葉の粉砕物とした。

清浄な寸胴にドクダミの葉の粉砕物１．１ｋｇを入れ、水道水を１０Ｌ添加した。これに、日水製薬製のドコサヘキサエン酸３５０ｇを添加して攪拌した。

これに、アマノエンザイム社製のリパーゼＡＹ「アマノ」３０Ｇを１１ｇ添加し、２５℃に加温して、６９回／分の速度で１２時間攪拌し、これを加温液とした。

前記の加温液の入った寸胴を水道水により冷却後、株式会社東洋発酵製の松の葉エキス含有ヤシ油１ｋｇを添加し、油部分を採取した。

これを真空乾燥機（エーキューエム九州テクノス製、クリーンドライ）により乾燥してドコサヘキサエン酸を結合させたノルセファラジオンＢ誘導体を油状の液体として得た。また、これを実施例５の検体とした。

以下に、ノルセファラジオンＢ誘導体の精製物について説明する。

実施例４で得られたノルセファラジオンＢ誘導体２０ｇをエタノール５００ｍＬに懸濁し、三菱化学製ダイヤイオンの７５０ｇを充填したカラムに供した。これを１０％エタノール含有水９００ｍＬで洗浄した。さらに３０％エタノール含有水９００ｍＬで洗浄後、７５％エタノール含有水９００ｍＬで溶出して、９０％エタノール含有水の分画を採取した。

これを減圧乾燥機に供してエタノールと水を留去した後、日本エフディ製の凍結乾燥機によりノルセファラジオンＢ誘導体の油状の精製物８ｇを得た。これを実施例６の検体とした。

以下に、ノルセファラジオンＢ誘導体の同定試験について説明する。
（試験例１）

上記のように得られた実施例１、実施例２、実施例３、実施例４、実施例５及び実施例６で得られたそれぞれのノルセファラジオンＢ誘導体を精製エタノールに溶解し、質量分析器付き高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ、島津製作所）で分析し、さらに、核磁気共鳴装置（ＮＭＲ、ブルカー製、ＡＣ−２５０）で解析した。

その結果、実施例１の検体からは、ノルセファラジオンＢ誘導体としてノルセファラジオンＢに、カプリル酸、ラウリル酸、パルミチン酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸が結合したノルセファラジオンＢ誘導体が同定された。

また、実施例２の検体からは、ノルセファラジオンＢに、カプリル酸が結合したノルセファラジオンＢ誘導体が同定された。カプリル酸のカルボン酸から最も離れた炭素が共有結合していた。

また、実施例３の検体からは、ノルセファラジオンＢに、ラウリル酸が結合したノルセファラジオンＢ誘導体が同定された。ラウリル酸のカルボン酸から最も離れた炭素が共有結合していた。

また、実施例４及び実施例６の検体からは、ノルセファラジオンＢに、エイコサペンタエン酸が結合したノルセファラジオンＢ誘導体が同定された。エイコサペンタエン酸のカルボン酸から最も離れた炭素が共有結合していた。

また、実施例５の検体からは、ノルセファラジオンＢに、ドコサヘキサエン酸が結合したノルセファラジオンＢ誘導体が同定された。ドコサヘキサエン酸のカルボン酸から最も離れた炭素が共有結合していた。

以下に、ノルセファラジオンＢ誘導体の炎症性サイトカイン産生の抑制試験について説明する。

（試験例２）
試験にはスキ花粉症に感染した年齢２８歳〜６６歳の男性５名及び年齢２１歳〜７７歳の女性７名よりヘパリン加血液を採取し、ＭＥＭ（日水製薬）により単球を培養した。

この単球１０００個を３５ｍｍ径の培養シャーレに播種し、５％炭酸ガス下、３７℃で２４時間培養した。

これに、スギ花粉（フナミシ製）１０ｎｇ及び実施例１〜６で得られた検体をジメチルスルホキシドに溶解してそれぞれ１ｎｇを添加し、添加後、４８時間した。培養上清を採取し、炎症性サイトカインとしてインターロイキン−１アルファ、インターロイキン−６及びＴＮＦアルファ量をＥＬＩＳＡキット（アムジェン製）を用いて吸光度法により定量した。

なお、溶媒対照として検体の代わりに、ジメチルスルホキシドを用いた。

また、陽性対照としてステロイド剤であるプロピオン酸クロベタゾールを用いた。

その結果、インターロイキン−１アルファ量の場合、溶媒対照の量を１００％とした場合、それぞれ１ｎｇの添加量により実施例１では５５％、実施例２では５３％、実施例３では５１％、実施例４では４９％、実施例５では３３％及び実施例６では２２％となった。なお、プロピオン酸クロベタゾールは６０％であった。

したがって、実施例１〜６の検体は、いずれも、スギ花粉に対してインターロイキン−１アルファの産生を抑制すると結論された。

また、インターロイキン−６量の場合、溶媒対照の量を１００％とした場合、それぞれ１ｎｇの添加量で実施例１では７２％、実施例２では７１％、実施例３では７３％、実施例４では６６％、実施例５では６３％及び実施例６では６１％となった。なお、プロピオン酸クロベタゾールは７５％であった。

したがって、実施例１〜６の検体は、いずれも、スギ花粉に対してインターロイキン−６の産生を抑制すると結論された。

また、ＴＮＦアルファ量の場合、溶媒対照の量を１００％とした場合、それぞれ１ｎｇの添加量で実施例１では６０％、実施例２では６３％、実施例３では５２％、実施例４では４６％、実施例５では５１％及び実施例６では３２％となった。なお、プロピオン酸クロベタゾールは７８％であった。

したがって、実施例１〜６の検体は、いずれも、スギ花粉に対してＴＮＦアルファの産生を抑制すると結論された。

以上の結果、実施例１〜６の検体は、炎症性サイトカインの産生をプロピオン酸クロベタゾールと同程度又はそれ以上に抑制するものと考えられた。

以下に、ノルセファラジオンＢ誘導体を含有する食品製剤の製造について記載する。

前記の実施例１で得られたノルセファラジオンＢ誘導体１００ｇを食品加工用混合器（ツカサ製、パウミキサー、シングルタイプ）に入れ、株式会社東洋発酵製の菊の花エキス含有植物油４０ｇを添加した。これに、株式会社東洋発酵製の松の葉エキス含有大豆油４０ｇを添加し、攪拌しながらこれを３７℃で２４時間加温して冷却後、組成物約１７６ｇを得た。

この組成物１３０ｇに、食用セルロース３３０ｇ、アスコルビン酸１．２ｇ及び食用香料１０ｇを食品加工用ミキサー（ツカサ製、パウミキサー、Ｗタイプ）に添加し、混合した。これを常法により粉末化し、乾燥後、ブタ由来ゼラチン製ハードカプセルに、１粒２５０ｍｇとして充填し、食品製剤を得た。これを実施例７の検体とした。

以下に、食品製剤を用いた抗炎症作用について述べる。
（試験例３）

年齢２２〜７２歳のイエダニによりクシャミやハナミズを呈する男性９例に、前記の実施例７で得られた食品製剤を１日１回１０カプセルずつ、すなわち、１日２．５ｇずつ、２８日間毎日摂食させた。摂食前及び摂食２８日目に、イエダニによる反応性を観察した。さらに、摂食前及び摂食２８日目に、血液を採取し、ＩｇＥ量を免疫抗体法により測定した。

その結果、摂食後には、イエダニによるクシャミやハナミズの発現数は、摂食前に比し、平均で３１％となり、明らかな反応性の減少が認められた。

さらに、血液ＩｇＥ量は、摂食前に比して平均値で４５％となり、ＩｇＥ量の減少が認められた。また、摂食後に、体調や健康状態に異常は、認められなかった。

前記の実施例２で得られたノルセファラジオンＢ誘導体１００ｇを化粧品加工用混合器（寿工業製、ポーレコンテナミキサー）に入れ、株式会社東洋発酵製の菊の花エキス含有植物油５０ｇを添加した。これに、株式会社東洋発酵製の松の葉エキス含有大豆油５０ｇを添加し、攪拌しながらこれを３７℃で３０時間加温して冷却後、組成物約１９０ｇを得た。

この組成物を前記の混合器に入れ、ミツロウ（アピ製）１００ｇ、ワセリン３００ｇ及びスクワラン（日本水産製）１ｇを添加し、混合して、化粧品製剤としてクリームを得た。これを実施例８の検体とした。同時に、実施例２で得られたノルセファラジオンＢ誘導体を除いた基材のみのクリームを調製した。

（試験例４）
実施例８で得られたクリームを使用して、２０〜６６才の女性１２例を対象に、紫外線に対するしわ改善試験を行なった。すなわち、１２例を２群に分け、前記の実施例８のノルセファラジオンＢ誘導体を含有するクリームを１日当たり１ｇずつ、１４日間、顔面部に塗布させた。同時に、基材のみを含有するクリームを使用する群を設定した。

前記の女性に、日焼け用紫外線照射装置（エムロック製、ネオタン８８８）により毎日１時間、紫外線を浴びさせた。使用前及び使用１４日後に、顔面の肌温度、皮表角層水分量測定装置（ＩＢＳ社製、ＳＫＩＣＯＮ２００）を用いて角質水分量、弾力計（クトメーター）を用いて肌弾性及び単位面積当たりのしわの長さを計測した。

さらに、汗と皮脂を採取し、含有される炎症性サイトカインであるＴＮＦアルファ量を免疫酵素法（アムジェン製）により測定した。

その結果、基材のみのクリーム使用に比してノルセファラジオンＢ誘導体を含有するクリームの使用例では、平均値として０．３３℃の肌温度の低下が認められた。また、皮表角層水分量は、基材のみのクリーム使用に比してノルセファラジオンＢ誘導体を含有するクリームの使用例では、１６８％に増加した。さらに、弾力計による弾力は、基材のみのクリーム使用に比してノルセファラジオンＢ誘導体を含有するクリームの使用例では、１８８％に増加した。

しわの長さは、基材のみのクリーム使用に比してノルセファラジオンＢ誘導体を含有するクリームの使用例では、４８％となり、明らかに、しわの減少が認められた。

加えて、汗と皮脂中のＴＮＦアルファ量は、基材のみのクリーム使用に比してノルセファラジオンＢ誘導体を含有するクリームの使用例では、平均値として５６％に減少した。

さらに、ノルセファラジオンＢ誘導体を含有するクリームでは副作用は認められず、使用感も良好であった。

したがって、実施例８のクリームには紫外線によるサイトカイン産生を抑制し、しわを改善する作用が確認され、安全性も高かった。

以下に、ノルセファラジオンＢ誘導体からなる抗炎症剤について述べる。

清浄なステンレス製溶解槽に、前記の実施例２で得られたノルセファラジオンＢ誘導体５０ｇ、ラノリン１５０ｇ、マクロゴールド１２０ｇ、ミツロウ２０ｇ、オゾケライト３０ｇを添加し、３８℃で１時間溶解した。これを混練機に供し、混合した。これを再度、溶解槽で溶解して、過熱し、脱気装置により脱気させて、目的とする抗炎症剤を軟膏剤として得た。

なお、対照として前記の実施例２で得られたノルセファラジオンＢ誘導体の代わりとしてラノリンを用いた対照となる検体を作製し、対照検体として試験に用いた。
（試験例５）

２２〜６４歳のイエダニによりクシャミやハナミズを呈する男性１０例に、前記の実施例９で得られた抗炎症剤を１日１回１ｇずつ、１４日間に鼻腔外部、鼻腔周囲や口腔周囲部分に塗布した。

塗布前及び塗布１４日目に、イエダニによる反応性を観察した。さらに、塗布前及び塗布１４日目に、血液を採取し、ＴＮＦアルファ量及びＩｇＥ量を免疫抗体法により測定した。

その結果、塗布後、イエダニによるクシャミやハナミズの発現数は、塗布前に比して平均で、３５％となり、いずれも花粉に対する反応性の減少が認められた。血中のＴＮＦアルファ量は、塗布前に比して平均値で３９％となり、炎症性サイトカインであるＴＮＦアルファ量の減少が認められた。

血中ＩｇＥ量は、塗布前の値に比して４１％となり、ＩｇＥ量の減少が認められた。また、塗布後に、体調や健康状態、臨床検査値に異常は、認められなかった。

したがって、実施例９のノルセファラジオンＢ誘導体からなる抗炎症剤は花粉症に対して炎症性サイトカインとＩｇＥ量を低下させ、抗炎症効果を呈し、かつ、安全性も確認された。

一方、ノルセファラジオンＢ誘導体の代わりとしてラノリンを用いた対照検体を用いた場合には、スギ花粉によるクシャミやハナミズの発現数は、塗布前に比して平均値で１０１％となり、花粉に対する反応性に変化はなかった。

また、ラノリンを用いた対照検体使用後の血中のＴＮＦアルファ量は、塗布前に比して平均値で９９％となり、炎症性サイトカインであるＴＮＦアルファ量に使用前に比して変化はなかった。

さらに、ラノリンを用いた対照検体使用後の血中ＩｇＥ量も平均値で１０３％となり、使用前に比して変化は認められなかった。

本発明である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体は、全身及び局所の炎症の防止及び改善を目的とした副作用の弱い、優れた働きを示し、皮膚炎、肺炎、気管支炎、肝炎など種々の炎症に苦しむ患者又は半健康人の生活の質を改善し、医療分野に応用できるものである。

また、本発明である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる食品製剤は、花粉症、イエダニによる炎症、シックハウス症候群、風邪、アレルギー、皮膚炎などの炎症の改善又はその発症を予防し、国民生活の質的向上に寄与するものである。

さらに、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる化粧品は、日焼けによるしわやくすみ、皮膚の炎症やアトピーなどの炎症に対して改善又は予防効果を示し、国民の生活の質を向上させるものである。

加えて、炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる抗炎症剤によれば、皮膚炎、肝炎、脳炎、肺炎、風邪、膵炎、花粉症、アレルギーなどの炎症の改善又は予防に貢献し、国民生活を向上させる。この抗炎症剤は副作用が少なく、優れた抗炎症作用を発揮することにより、医療及び医薬品業界の活性化に寄与するものである。

ドクダミや食用魚類の頭部や内臓は、廃棄物として処理されている。本発明は、これらの廃棄物を有効に利用する点から廃棄物を減少させ、廃棄物による土壌や海洋の富栄養による環境破壊を予防でき、かつ、漁業や農業資源の有効活用が期待され、さらに、漁業や農業の発展に寄与するものである。

Claims (9)

1. 炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（１）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体。
   

   

   Ｘは、カプリル酸、ラウリル酸、１４−メチルパルミチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、アルファ−リポ酸、ガンマーリノレン酸、ステアリン酸、メチルステアリン酸から選択されるいずれか一つ。
2. ドクダミの葉の粉砕物にカプリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがカプリル酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（２）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体。
   

   
3. ドクダミの葉の粉砕物にラウリル酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがラウリル酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（３）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体。
   

   
4. ドクダミの葉の粉砕物にエイコサペンタエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがエイコサペンタエン酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（４）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体。
   

   
5. ドクダミの葉の粉砕物にドコサヘキサエン酸及びエステル交換用リパーゼを添加し、加温し、植物油で抽出して得られ、請求項１に記載のノルセファラジオンＢ誘導体のうちＸがドコサヘキサエン酸である炎症性サイトカイン産生抑制作用を有する下記の式（５）で示されるノルセファラジオンＢ誘導体。
   

   
6. 食用魚類、ドクダミの葉及び大豆に納豆菌を添加して発酵させた発酵物を植物油で抽出して得られる請求項１に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体。
7. 請求項１又は請求項２又は請求項３又は請求項４又は請求項５又は請求項６に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０１〜０．５重量、松の葉エキス含有植物油０．０１〜０．５重量を含有する組成物からなる食品製剤。
8. 請求項１又は請求項２又は請求項３又は請求項４又は請求項５又は請求項６に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体１重量に、菊の花エキス含有植物油０．０５〜０．８重量、松の葉エキス含有植物油０．０５〜０．８重量を含有する組成物からなる化粧品。
9. 請求項１又は請求項２又は請求項３又は請求項４又は請求項５又は請求項６に記載の炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するノルセファラジオンＢ誘導体からなる抗炎症剤。