JP2001348338A

JP2001348338A - コラーゲン産生促進剤、及びこれを含有する老化防止用皮膚外用剤

Info

Publication number: JP2001348338A
Application number: JP2000169218A
Authority: JP
Inventors: Hideji Mori; 秀司森
Original assignee: Noevir Co Ltd
Current assignee: Noevir Co Ltd
Priority date: 2000-06-06
Filing date: 2000-06-06
Publication date: 2001-12-18

Abstract

(57)【要約】【課題】真皮線維芽細胞の代謝機能を活性
化し、新たなコラーゲンの産生を促進して、コラーゲン
繊維の変化を改善し得る安定且つ安全なコラーゲン産生
促進剤を得、さらに、加齢やストレスによる皮膚の老化
を有効に防止及び改善し得る皮膚外用剤を提供する。【解決手段】カッコン（Puerariae Radix）の
抽出物及び抽出分画物より選択した１種又は２種以上
を、担体に含有させる。前記抽出物等としては、4',7-
ジヒドロキシイソフラボン含有量の高いものが好まし
い。また、4',7-ジヒドロキシイソフラボンを主成分と
して担体に含有させてもよい。さらに、前記により得た
コラーゲン産生促進剤より１種又は２種以上を選択し
て、皮膚外用剤基剤に含有させ、老化防止用皮膚外用剤
とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、真皮線維芽細胞に
よるＩ型コラーゲンの産生を促進する効果を有するコラ
ーゲン産生促進剤、及びこれを含有して成り、皮膚の老
化防止に有効な皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】加齢や紫外線等種々のストレスにより皮
膚の老化が進行する。皮膚の老化により、表皮における
しわの増加といった形態学的変化や、表皮水分量の減
少，皮膚弾性の低下といった生理学的・機能的変化が見
られ、これら変化の生じるメカニズムもかなり詳細に解
明されてきている。これまで皮膚外用剤の分野では、か
かる皮膚の老化を防止するべく、多くの検討がなされて
きた。最近では、真皮線維芽細胞を賦活して、加齢やス
トレスにより低下した真皮マトリックス成分の産生を促
進したり、或いは亢進した真皮マトリックスの分解を抑
制するような成分の検索が盛んに行われている。

【０００３】特に、コラーゲンは真皮マトリックスを構
成する主要成分の一つで、特徴的な三重螺旋構造を形成
する。真皮マトリックスにおいては、主にＩ型コラーゲ
ンが存在することが知られている。加齢等により、真皮
線維芽細胞によるコラーゲンの代謝機能が低下し、また
コラーゲン分子内外における架橋形成等さまざまな修飾
や変性が生じ、コラーゲン繊維の弾力性低下等の変化が
生じると考えられている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明において
は、真皮線維芽細胞の代謝機能を活性化し、新たなコラ
ーゲンの産生を促進して、コラーゲン繊維の変化を改善
し得る安定且つ安全なコラーゲン産生促進剤を得、さら
にそれを用いることにより、加齢やストレスによる皮膚
の老化を有効に防止及び改善できる皮膚外用剤を提供す
ることを目的とした。

【０００５】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するた
め種々検討した結果、カッコン（Puerariae Radix）の
抽出物及び抽出分画物が、線維芽細胞によるコラーゲン
産生に対し、高い促進作用を有することを見いだし、こ
れらより選択した１種又は２種以上を担体に含有させる
ことにより、安定性且つ安全性が良好で、非常に有効な
コラーゲン産生促進剤を得て、本発明を完成するに至っ
た。

【０００６】なお本発明において、カッコン抽出物及び
抽出分画物として、4',7-ジヒドロキシイソフラボン
（ダイゼイン）含有量の高いものを用いると、特に高い
コラーゲン産生促進作用が得られた。

【０００７】カッコン抽出物については、ムコ多糖断片
化抑制，活性酸素消去，抗酸化作用（特開平６−２４９
３７）、脂肪合成促進作用（特開平１１−１９９４９
９）、毛乳頭活性化作用（特開平１１−２４０８２３）
が開示され、ヒアルロン酸産生促進作用も報告されてい
る（日本薬学会第１２０年会講演要旨集２，第５８ペー
ジ，２０００年）が、Ｉ型コラーゲンの産生促進作用に
ついては全く知られていない。さらに、7-イソプロポキ
シイソフラボンの代謝物についてＩ型コラーゲンの合成
促進作用が報告されている（Calcified Tissue Interna
tional 55(5) 356-362 (1994)）が、カッコン抽出物中
の4',7-ジヒドロキシイソフラボンについては抗アセチ
ルコリン作用を有することは周知であるものの、かかる
報告はこれまでなされていない。

【０００８】

【発明の実施の形態】本発明において用いるカッコン
（Puerariae Radix）は、マメ科（Leguminosae）に属す
る落葉藤本であるクズ（Pueraria lobata Ohwi）の周皮
を除いた根であり、日本産，韓国産及び中国産の角カッ
コン，板カッコン及び粉カッコンを用いることができ
る。

【０００９】カッコン（Puerariae Radix）は生のまま
抽出に供してもよいが、抽出効率を考えると、細切，乾
燥，粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好まし
い。抽出は、抽出溶媒に浸漬して行う。抽出効率を上げ
るため撹拌を行ったり、抽出溶媒中でホモジナイズして
もよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸
点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶
媒の種類や抽出温度によっても異なるが、４時間〜１４
日間程度とするのが適切である。

【００１０】抽出溶媒としては、水の他、メタノール，
エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級
アルコール、1,3-ブチレングリコール，プロピレングリ
コール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価
アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエ
ーテル類、酢酸エチル，酢酸ブチル等のエステル類、ア
セトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの極性有
機溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以
上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝
液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。

【００１１】カッコン（Puerariae Radix）の上記溶媒
による抽出物はそのまま用いることもできるが、濃縮，
乾固したものを水や極性溶媒に再度溶解したり、或いは
コラーゲン産生促進作用を損なわない範囲で脱色，脱
臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラ
フィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。特
に、カッコン（Puerariae Radix）抽出物を合成吸着樹
脂に吸着させた後、水・エタノール混合溶媒にて順次溶
出した際、５０％〜９９．５％エタノール水溶液により
溶出される画分が4',7-ジヒドロキシイソフラボンを最
も多く含有し、コラーゲン産生促進作用の点から最も好
ましく用いられる。合成吸着樹脂としては、スチレンポ
リマー製の吸着樹脂であるＤＩＡＩＯＮＭＣＩゲル
ＨＰ-20（三菱化学株式会社製）等が好ましく用いられ
る。前記抽出物やその処理物及び分画物は、各処理及び
分画の後凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いること
もできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカ
プセル等に内包させて用いることもできる。

【００１２】上記のカッコン（Puerariae Radix）抽出
物及び抽出分画物はそのままでもコラーゲン産生促進剤
とすることができるが、前記抽出物及び抽出分画物より
１種又は２種以上を選択し、精製水や低級アルコール水
溶液，緩衝液等の水性担体、乳濁状担体、ゲル状担体、
クリーム等のペースト状担体、粉末状担体等に含有させ
て、コラーゲン産生促進剤とすることもできる。

【００１３】また本発明においては、精製した4',7-ジ
ヒドロキシイソフラボンを主成分として、上記した水
性，乳濁状，ゲル状，ペースト状，粉末状等の各種担体
に含有させてもよい。或いは、リポソームやマイクロカ
プセルに内包させることもできる。

【００１４】さらに本発明においては、上記コラーゲン
産生促進剤の１種又は２種以上を皮膚外用剤基剤に含有
させて、老化防止用の皮膚外用剤を得る。本発明に係る
皮膚外用剤は、ローション剤，乳剤，ゲル剤，クリーム
剤，軟膏剤，粉末剤，顆粒剤等、種々の剤型で提供する
ことができる。また、化粧水，乳液，クリーム，美容
液，パック等の皮膚化粧料、メイクアップベースローシ
ョン，メイクアップベースクリーム等の下地化粧料、乳
液状，油性，固形状等の各剤型のファンデーション，ア
イカラー，チークカラー等のメイクアップ化粧料等とし
て提供することができる。

【００１５】なお本発明に係るコラーゲン産生促進剤に
は、カッコン（Puerariae Radix）抽出物或いは抽出分
画物、もしくは4',7-ジヒドロキシイソフラボンの他
に、油性成分，界面活性剤，保湿剤，抗酸化剤，防菌防
黴剤等を含有させることができ、本発明に係る皮膚外用
剤にも、カッコン（Puerariae Radix）抽出物等の他
に、油性成分，界面活性剤，保湿剤，顔料，紫外線吸収
剤，抗酸化剤，香料，防菌防黴剤等の一般的な医薬品及
び化粧料用原料や、皮膚細胞賦活剤，抗炎症剤，美白剤
等の生理活性成分をも含有させることができる。

【００１６】

【実施例】さらに本発明の特徴について、実施例により
詳細に説明する。

【００１７】まず、本発明に係るコラーゲン産生促進剤
についての実施例を示す。

【００１８】［実施例１〜実施例４］カッコン（Puerar
iae Radix）５００ｇを乾燥，粉砕し、５０容量％エタ
ノール水溶液２リットル中に浸漬して、室温で７日間静
置して抽出した後、ろ過してろ液を回収し、次いで濃
縮，乾固して凍結乾燥する。この乾燥粉末３６．０ｇを
エタノール５００ｍｌに溶解し、さらに精製水１５００
ｍｌを加え、６００ｍｌのＤＩＡＩＯＮＭＣＩゲル
ＨＰ-20（三菱化学株式会社製）を添加して１時間撹拌
した後、ろ過して前記樹脂を回収してカラムに充填し、
水・エタノールの混合溶媒にて順次段階的に溶出した。
その際、５０容量％エタノール，７０容量％エタノー
ル，９０％エタノール及び９９．５容量％エタノールの
各水溶液にて溶出される画分を回収し、それぞれ凍結乾
燥して、実施例１〜実施例４とした。

【００１９】［実施例５］試薬級の4',7-ジヒドロキシ
イソフラボン（Ｌａｎｃａｓｔｅｒ社製）２５．４ｍｇ
をエタノール１００ｍｌに溶解した後、精製水にて希釈
し、５００ｍｌとして、実施例５とした。

【００２０】上記の実施例１〜実施例５について、線維
芽細胞によるコラーゲン産生促進作用を評価した。評価
は、５容量％の牛胎仔血清を含有するダルベッコ修正基
礎培地（ＤＭＥＭ）にて維持した正常ヒト真皮線維芽細
胞を、９６穴プレートに２．０×１０⁴個／ウェルとな
るように播種し、各濃度の試料を含む０．５容量％の牛
胎仔血清を含有するＤＭＥＭにて、３７℃で２４時間培
養した後、培養上清のコラーゲン量をEnzyme-linked im
munosorbent assay（ＥＬＩＳＡ）により定量した。そ
の際、試料を添加しない０．５容量％牛胎仔血清含有Ｄ
ＭＥＭにて培養した系を対照とし、５０μＭのアスコル
ビン酸リン酸エステルマグネシウム塩を含有する前記Ｄ
ＭＥＭにて培養した系を陽性対照とした。コラーゲン量
の定量と同時に細胞数を測定して１細胞当たりのコラー
ゲン量を算出し、対照における１細胞当たりのコラーゲ
ン量を１００とした場合のコラーゲン産生インデックス
（％）により、表１〜表５に示した。

【００２１】

【表１】

【００２２】

【表２】

【００２３】

【表３】

【００２４】

【表４】

【００２５】

【表５】

【００２６】表１〜表５より、本発明の実施例１〜実施
例５はいずれも、ヒト真皮線維芽細胞によるコラーゲン
産生を濃度依存的に促進することが示された。

【００２７】すなわち実施例１については、３１．２５
ｎｇ／ｍｌの濃度でコラーゲン産生の促進が見られ、
０．５μｇ／ｍｌの濃度では、対照のほぼ１．９倍のコ
ラーゲン産生を示していた。実施例２については、１
２．５μｇ／ｍｌ〜５０μｇ／ｍｌの濃度で約１．２倍
〜１．３倍のコラーゲン産生を示した。実施例３につい
ては、３．１２μｇ／ｍｌで約１．３倍、６．２５μｇ
／ｍｌで約１．５倍、１２．５μｇ／ｍｌで約１．７倍
までコラーゲン産生が上昇していた。実施例４について
は、３．１２５μｇ／ｍｌ〜１２．５μｇ／ｍｌにおい
て約１．２倍〜１．３倍のコラーゲン産生が見られてい
た。実施例５については、4',7-ジヒドロキシイソフラ
ボン濃度にして、０．１２５μＭで約１．２倍、０．５
μＭ〜２μＭで約１．８倍のコラーゲン産生を示した。

【００２８】次に、コラーゲンｍＲＮＡ発現に対し、本
発明に係るコラーゲン産生促進剤が及ぼす影響につい
て、実施例５を用いて検討した。まず、正常ヒト真皮線
維芽細胞を直径３５ｍｍのディッシュに１．０×１０⁶
個／ディッシュの密度で播種し、実施例５を２μＭとな
るように添加した０．５容量％のウシ胎仔血清を含有す
るＤＭＥＭにて２４時間培養した。次いでＲＮＡを抽出
し、ＧＩＢＣＯ社製の逆転写キットを用いてｃＤＮＡを
作成し、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）に供した。コ
ラーゲンｍＲＮＡは、Schwartz,E.らにより報告された
プライマー（Arch.Dermatol. Res. 290 137-144 (199
8)）を用いてＰＣＲにより検出した。対照として、グリ
セルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素（Ｇ３ＰＤＨ）の
ｍＲＮＡを用い、得られたバンド密度を画像解析により
定量化して、ｍＲＮＡ発現量を比較した。

【００２９】その結果、対照を１００とした場合におい
て、実施例５の添加によりコラーゲンｍＲＮＡ発現は２
０８．３％まで上昇しており、実施例５によるコラーゲ
ン産生促進は、遺伝子発現レベルで誘導されていること
が示唆された。

【００３０】続いて、本発明に係る老化防止用皮膚外用
剤についての実施例を示す。

【００３１】［実施例６］ローション剤（１）エタノール２０．００（重量％）（２）ポリオキシエチレン(60E.O.)硬化ヒマシ油１．００（３）コラーゲン産生促進剤（実施例１）０．０１（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（５）ジプロピレングリコール５．００（６）1,3-ブチレングリコール１０．００（７）精製水６３．８９製法：(1)に(2)〜(4)を添加して溶解し、アルコール相
とする。一方、(7)に(5)，(6)を順次溶解して水相とす
る。水相にアルコール相を添加し、撹拌，混合する。

【００３２】［実施例７］乳剤（１）セタノール１．００（重量％）（２）ミツロウ０．５０（３）ワセリン２．００（４）スクワラン６．００（５）ジメチルポリシロキサン２．００（６）ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン１．００モノステアリン酸エステル（７）グリセリルモノステアリン酸エステル１．００（８）グリセリン４．００（９）1,3-ブチレングリコール４．００（10）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（11）精製水６３．２８（12）カルボキシビニルポリマー１０．００（１．０重量％水溶液）（13）水酸化カリウム０．１０（14）エタノール５．００（15）コラーゲン産生促進剤（実施例２）０．０２製法：(1)〜(7)の油相成分を混合し、加熱溶解して７５
℃とする。一方、(8)〜(11)の水相成分を混合，溶解し
て７５℃とする。これに前記油相を加えて予備乳化した
後、(12)を添加してホモミキサーにて均一に乳化し、次
いで(13)を加えて増粘させた後冷却し、４０℃で(15)を
(14)に溶解して添加，混合する。

【００３３】［実施例８］水中油型クリーム剤（１）ミツロウ６．００（重量％）（２）セタノール５．００（３）還元ラノリン８．００（４）スクワラン２７．５０（５）グリセリル脂肪酸エステル４．００（６）親油型グリセリルモノステアリン酸エステル２．００（７）ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン５．００モノラウリン酸エステル（８）プロピレングリコール５．００（９）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（10）精製水３７．３５（11）コラーゲン産生促進剤（実施例５）０．０５製法：(1)〜(7)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(8)〜(10)の水相成分を混合，溶解して７５
℃に加熱する。次いで、この水相成分に前記油相成分を
添加して予備乳化した後ホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(11)を添加，混合する。

【００３４】［実施例９］ゲル剤（１）ジプロピレングリコール１０．００（重量％）（２）カルボキシビニルポリマー０．５０（３）水酸化カリウム０．１０（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（５）コラーゲン産生促進剤（実施例３）０．０５（６）精製水８９．２５製法：(6)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)，(5)を
溶解して添加し、次いで(3)を加えて増粘させる。

【００３５】［実施例１０］水中油型乳剤型軟膏（１）白色ワセリン２５．００（重量％）（２）ステアリルアルコール２５．００（３）グリセリン１２．００（４）ラウリル硫酸ナトリウム１．００（５）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（６）精製水３６．７５（７）コラーゲン産生促進剤（実施例４）０．１５１．０(w/v)％エタノール溶液製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃とする。一方、(5)，(6)の水相成分を混合，
加熱して７５℃とする。この水相成分に前記油相成分を
撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷却した後、４０
℃にて(7)を添加，混合する。

【００３６】［実施例１１］リポソーム剤（１）グリセリン２．０（重量％）（２）1,3-ブチレングリコール３．０（３）ポリオキシエチレン(25E.O.)オレイルエーテル０．２（４）エタノール１０．０（５）パラオキシ安息香酸メチル０．１（６）精製水７９．７（７）コラーゲン産生促進剤（実施例１，実施例３）５．０内包リポソーム製法：(5)を(4)に溶解し、(1)〜(3)とともに(6)に添加
して均一に混合し、これに(7)を加えて分散する。な
お、(7)のコラーゲン産生促進剤内包リポソームは、実
施例１及び実施例３に係るコラーゲン産生促進剤各２．
５(w/v)％を含有する５０容量％エタノール水溶液１０
０ｍｌに、大豆レシチン８０ｇを添加して５５℃で懸濁
し、次いで超音波処理してリポソームを調製し、遠心分
離により回収して得た。

【００３７】［実施例１２］油中水型エモリエントクリーム（１）流動パラフィン３０．００（重量％）（２）マイクロクリスタリンワックス２．００（３）ワセリン５．００（４）ジグリセリルジオレイン酸エステル５．００（５）L-グルタミン酸ナトリウム１．６０（６）L-セリン０．４０（７）プロピレングリコール３．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）コラーゲン産生促進剤（カッコン抽出物１）０．０２（10）精製水５２．７８（11）香料０．１０製法：(5)，(6)を(10)の一部に溶解して５０℃とし、あ
らかじめ５０℃に加温した(4)に撹拌しながら徐々に添
加する。これをあらかじめ混合し、７０℃に加熱溶解し
た(1)〜(3)に均一に分散する。これに、(8)，(9)を(7)
に溶解して(10)の残部に添加し、７０℃に加熱したもの
を撹拌しながら加え、ホモミキサーにて乳化する。冷却
後、４０℃にて(11)を添加，混合する。なお、(9)のカ
ッコン抽出物１は、カッコンの乾燥粉末２００ｇをエタ
ノール１リットル中に浸漬し、２０℃で７日間静置して
抽出し、抽出液をろ過して回収した後濃縮，乾固し、凍
結乾燥して得た。

【００３８】［実施例１３］メイクアップベースクリーム（１）ステアリン酸１２．０（重量％）（２）セタノール２．０（３）グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル２．５（４）自己乳化型グリセリルモノステアリン酸２．０エステル（５）プロピレングリコール１０．０（６）水酸化カリウム０．３（７）パラオキシ安息香酸メチル０．１（８）コラーゲン産生促進剤（カッコン抽出物２）０．１（９）精製水６８．４（10）酸化チタン２．０（11）ベンガラ０．４（12）黄酸化鉄０．１（13）香料０．１製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(5)〜(9)の水相成分を混合，加熱溶解し、こ
れに(10)〜(12)の顔料成分を添加してホモミキサーにて
均一に分散して７５℃とする。次いで、この水相成分に
前記油相成分を添加してホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(13)を添加，混合する。なお、
(8)のカッコン抽出物２は、カッコン５００ｇを細切
し、エタノール２リットル中にて２０℃で３日間撹拌抽
出し、抽出液をろ過して回収した後濃縮，乾固し、グリ
セリン１リットルに溶解して得た。

【００３９】［実施例１４］乳液状ファンデーション（１）ステアリン酸２．００（重量％）（２）スクワラン５．００（３）ミリスチン酸オクチルドデシル５．００（４）セタノール１．００（５）デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル９．００（６）1,3-ブチレンクリコール６．００（７）水酸化カリウム０．０８（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）コラーゲン産生促進剤（カッコン抽出物３）０．０２（10）精製水５３．５５（11）酸化チタン９．００（12）タルク７．４０（13）ベンガラ０．５０（14）黄酸化鉄１．１０（15）黒酸化鉄０．１０（16）香料０．１５製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(6)〜(10)の水相成分を混合，加熱溶解し、
これに(11)〜(15)の顔料成分を添加してホモミキサーに
て均一に分散して７５℃とする。次いで、この水相成分
に前記油相成分を添加してホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(16)を添加，混合する。なお(9)
のカッコン抽出物３は、カッコン２５０ｇを乾燥，粉砕
し、５０容量％エタノール水溶液２リットル中にて２０
℃で７日間浸漬した後、ろ過してろ液を回収して得た。

【００４０】［実施例１５］ハンドクリーム（１）セタノール４．００（重量％）（２）ワセリン２．００（３）流動パラフィン１０．００（４）グリセリルモノステアリン酸エステル１．５０（５）ポリオキシエチレン(60E.O.)グリセリル２．５０イソステアリン酸エステル（６）酢酸トコフェロール０．２５（７）グリセリン２０．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）コラーゲン産生促進剤（実施例２）０．０２（10）グリチルリチン酸ジカリウム０．１０（11）精製水５９．５３製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(7)〜(11)の水相成分を混合，加熱溶解して
７５℃とする。次いで、この水相成分に前記油相成分を
添加してホモミキサーにて均一に乳化する。

【００４１】上記した本発明に係る皮膚外用剤について
の実施例のうち、実施例６〜実施例１１について、中波
長紫外線（ＵＶＢ）による皮膚のしわ形成に対する抑制
効果を評価した。その際実施例６〜実施例９において、
それぞれ配合した実施例１〜実施例３及び実施例５のコ
ラーゲン産生促進剤を精製水に代替して比較例１〜比較
例４とし、実施例１０において、実施例４のコラーゲン
産生促進剤のエタノール溶液をエタノールに代替したも
のを比較例５、実施例１１において実施例１及び実施例
３のコラーゲン産生促進剤を内包するリポソームを、
２．５重量％のアスコルビン酸リン酸エステルマグネシ
ウム塩水溶液を内包するリポソームに代替したものを比
較例６とし、同時に評価を行った。評価は、ヘアレスマ
ウス５匹を１群とし、各群について実施例及び比較例を
それぞれ１日１回背部に塗布し、１００ｍＪ／ｃｍ²／
回のＵＶＢを１週間に３回、２０週間照射し、ヘアレス
マウス皮膚におけるしわの形成状況を観察し、表６に示
す判定基準に従って点数化して評価した。この際、精製
水のみを塗布した群を対照とした。結果は各群の平均値
を算出し、ＵＶＢ照射日数との関係により表７に示し
た。

【００４２】

【表６】

【００４３】

【表７】

【００４４】表７より明らかなように、対照において
は、ＵＶＢ照射日数が１０週を越える頃には皮膚に形成
されたしわの深さは中程度にまで達し、２０週後には深
いしわの形成が認められていた。これに対し本発明の実
施例塗布群では、いずれにおいても２０週後に微小ない
し軽微なしわの形成を認めた程度で、しわの形成は顕著
に抑制されており、その抑制効果は、アスコルビン酸リ
ン酸エステルマグネシウム塩内包リポソームを含有する
比較例６塗布群において見られた効果をも凌ぐものであ
った。これは、本発明に係るコラーゲン産生促進剤が、
アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム塩に比べは
るかに安定性に優れることに起因すると思われる。一
方、本発明に係るコラーゲン産生促進剤を含有しない比
較例１〜比較例５塗布群では、対照に比べ有意なしわ形
成抑制効果は認められなかった。

【００４５】続いて、本発明の実施例６〜実施例１５に
ついて使用試験を行い、皮膚の老化症状の改善効果を評
価した。その際、実施例１２〜実施例１５において、配
合したコラーゲン産生促進剤を精製水，グリセリン，５
０容量％エタノール水溶液及び精製水にそれぞれ代替し
て、比較例７〜比較例１０とした。

【００４６】皮膚の老化症状の改善効果は、小じわ形成
及び皮膚弾性の低下が顕著に認められる４０才代〜６０
才代の女性パネラー２０名を１群とし、各群に実施例及
び比較例のそれぞれをブラインドにて１日２回、２カ月
間連続して使用させて評価した。小じわの程度について
は肉眼観察及び写真撮影により評価し、皮膚弾性につい
てはキュートメーターにより測定して、それぞれ使用試
験開始前及び終了後の状態を比較し、「改善」，「やや
改善」，「変化なし」の３段階で評価した。結果は、各
評価を得たパネラー数にて表８に示した。

【００４７】

【表８】

【００４８】表８より明らかなように、本発明の実施例
使用群では、全群において小じわ及び皮膚弾性の改善が
認められ、これら症状の改善の見られないパネラーは存
在しなかった。特に実施例６〜実施例１１及び実施例１
５使用群では、小じわについては４５％以上、皮膚弾性
については５０％以上のパネラーにおいて明確な改善を
認めていた。これに対し比較例使用群では、アスコルビ
ン酸リン酸エステルマグネシウム塩内包リポソームを含
有する比較例６使用群を除き、小じわについて４０％以
下、皮膚弾性について６０％以下のパネラーにおいて改
善傾向が見られたに過ぎず、小じわについて明確な改善
を認めたパネラーは存在せず、皮膚弾性についても明確
な改善を認めたのは１名のみであった。また比較例６使
用群においても、小じわ及び皮膚弾性の改善の程度は、
対応する実施例１１使用群に比べて明らかに小さいもの
であった。

【００４９】なお、本発明に係る実施例１〜実施例５に
ついては、２５℃で６カ月間保存した後にもコラーゲン
産生促進効果の低下は認められず、急性毒性，亜急性毒
性，慢性毒性及び催奇形性は認められなかった。また実
施例６〜実施例１５についても、２５℃で６カ月間保存
した場合において状態の変化は全く認められず、男性パ
ネラー３０名による４８時間の背部閉塞貼付試験におい
ても、問題となる皮膚刺激性反応は認められなかった。

【００５０】

【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、真
皮線維芽細胞の代謝機能を活性化し、新たなコラーゲン
の産生を促進して、コラーゲン繊維の変化を改善し得る
安定且つ安全なコラーゲン産生促進剤を得ることがで
き、さらにそれを用いることにより、加齢やストレスに
よる皮膚の老化を有効に防止及び改善できる皮膚外用剤
を提供することができた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 17/00 Ａ６１Ｐ 17/00 Ｆターム(参考） 4C083 AA111 AA112 AC841 AC842 CC02 CC03 CC04 CC05 DD31 DD32 DD33 DD41 EE06 EE12 4C086 AA01 AA02 BA08 MA01 MA04 NA14 ZA89 ZB22 4C088 AB59 BA08 BA14 CA05 CA06 CA07 CA11 CA14 MA07 MA17 MA24 MA28 MA63 ZA89 ZB22

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】カッコン（Puerariae Radix）の抽出物
及び抽出分画物より選択した１種又は２種以上を含有し
て成る、コラーゲン産生促進剤。
【請求項２】カッコン（Puerariae Radix）の抽出分
画物が、抽出物を合成吸着樹脂に吸着させた後、水・エ
タノール混合溶媒にて順次溶出した際、５０％〜９９．
５％エタノール水溶液により溶出される画分であること
を特徴とする、請求項１に記載のコラーゲン産生促進
剤。
【請求項３】 4',7-ジヒドロキシイソフラボンを主成
分として含有して成る、コラーゲン産生促進剤。
【請求項４】請求項１〜請求項３に記載されるコラー
ゲン産生促進剤より選択した１種又は２種以上を含有し
て成る、老化防止用皮膚外用剤。