ITRM980238A1 - Composizione comprendente l -carnitina o un'alcanoil l-carnitina e nadh e/o nadph - Google Patents

Description

La presente invenzione riguarda una composizione attiva sia sul metabolismo e rendimento energetico della muscolatura scheletrica che sulla regolazione del movimento e del coordinamento muscolare a livello centrale attraverso il potenziamento di effetti sia a livello periferico muscolare che a livello nervoso centrale. Corrispondentemente, la composizione può assumere la forma e svolgere l’attività di un integratore alimentare oppure di un vero e proprio medicamento, in funzione dell’azione di supporto o preventiva oppure propriamente terapeutica che si intende che la composizione esplichi a seconda dei particolari individui cui è destinata.

In particolare, quale integratore alimentare o mezzo preventivo, la composizione secondo l'invenzione è particolarmente idonea sia a facilitare l’adattamento della muscolatura scheletrica in individui che si sottopongono ad una intensa e prolungata attività fisica sia a contrastare la sensazione di affaticamento muscolare e di esaurimento presentata da soggetti astenici anche in totale assenza di qualsiasi tipo di attività fisica più o meno intensa.

Chiunque si dedichi a delle attività sportive, sia a livello professionistico che amatoriale, desidera conseguire in tempi brevi e poi mantenere per il maggior tempo possibile il massimo grado di adattamento dei muscoli scheletrici alla capacità di sopportare perìodi prolungati di intensa attività fisica. La ricerca di tale condizione fisica ottimale può favorire l’uso inappropriato di farmaci, particolarmente di steroidi. E’ noto che tali farmaci possono esaltare la sintesi proteica e conseguentemente potenziare l’accrescimento delle masse muscolari in maniera ben maggiore di quanto non si consegua con rallenamento e la dieta. L’uso di tali farmaci è tuttavia senz’altro nocivo oltreché illegale quando praticato nello sport professionistico.

E’ perciò evidente che runico modo di conseguire correttamente l’obbiettivo sopraindicato consiste nel sottoporsi a degli appropriati programmi di allenamento in combinazione a delle opportune diete, potenziate da adatti integratori alimentari.

Con il termine di astenia si vuole qui intendere quella diffusa sintomatologia aspecifica, tipica delle stressanti attuali condizioni di vita prevalenti in particolare nei grandi agglomerati urbani e interessante una vastissima popolazione, largamente indipendente da fattori legati all’età ed alle condizioni sociali, caratterizzata dalla mancanza o perdita della forza muscolare, con facile affaticabilità e insufficiente reazione agli stimoli.

Quando utilizzato quale mezzo propriamente terapeutico, la composizione secondo l’invenzione trova particolare applicazione nel trattamento della sindrome da fatica cronica e del morbo di Parkinson e di una sindrome simile al parkinsonismo idiopatico, indotta dalla somministrazione di sostanze stupefacenti illecite.

La sindrome da stanchezza cronica, o Chronic Fatigue Syndrome (CFS) descritta ufficialmente per la prima volta soltanto nel 1988 in Annals of Internai Medicine, è una malattia caratterizzata da una stanchezza non spiegata da alcuna causa nota, spesso molto più intensa di quella che si riscontra in malattie molto gravi, quali tumori ed AIDS, debilitante al punto da provocare una riduzione dell’attività lavorativa e delle normali relazioni sociali di oltre il 50%, di durata superiore ai 6 mesi.

Secondo i criteri esposti in Annals of Internai Medicine (dicembre 1994) per formulare una diagnosi di CFS, il paziente deve presentare persistentemente per sei mesi almeno quattro dei seguenti otto sintomi:

1. disturbi neuropsicologici quali perdita della memoria, eccessiva irritabilità, confusione mentale, difficoltà nel pensare e concentrarsi;

2. faringite;

3. linfoghiandole cervicali od ascellari palpabili e dolenti;

4. dolori muscolari;

5. artralgia migratoria senza però gonfiore alle articolazioni;

6. cefalea generalizzata di tipo, caratteristiche e gravità differenti dalle cefalee che il paziente poteva avere sperimentato prima della malattia;

7. disturbi del sonno, caratterizzati da insonnia o da ipersonnia o sonnolenza;

8. affaticabilità e malessere generalizzati perduranti per 24 ore o più dopo attività fisiche condotte a livelli che erano facilmente tollerati in precedenza.

E' ben noto che, sebbene il morbo di Parkinson sia una condizione generalmente considerata idiopatica, i sintomi del parkinsonismo possono risultare dall’abuso di farmaci quali le fenotiazine, i butirrofenoni e la reserpina. Più recentemente è stato studiato il parkinsonismo in tossicomani che si erano iniettati composti simili alla meperidina la cui sintesi abusiva aveva prodotto MPTP e MPPP.

Infatti, la 1 -metil-4-fenil-l ,2,3,6-tetraidropiridina (MPTP o NMPTP) e la 1 -metil-4-fenil-propossi-piperidina (MPPP) distruggono selettivamente i neuroni dopamincrgici nella suhstantia nigra e inducono sia nell’uomo che nei primati diversi dall’uomo una sindrome che è in tutto simile al morbo di Parkinson idiopatico per quanto riguarda i suoi aspetti clinici, patologici, biochimici e le risposte farmacologiche.

La somiglianza fra il morbo di Parkinson idiopatico e il parkinsonismo indotto da MPTP è così elevata che è stato postulato (Burns et al: The neurotoxicity of l-methyL4-phenyl* 1,2-3, 6-tetrahydropyridine in thè monkey and man, Can. J. Neur. Sci., ϋ, n. 1 (supplement), 166-168, February 1984) che tale parkinsonismo indotto “possa rappresentare più di un modello. II parkinsonismo indotto dalla MPTP induce a postulare una causa tossica per il morbo di Parkinson”.

Per curare il parkinsonismo la terapia di scelta è attualmente quella basata sulla somministrazione di levo-dopa (L-dopa), il precursore metabolico della dopamina, che di per sé non è capace di attraversare la barriera emato-encefalica.

Poiché la levo-dopa viene ampiamente metabolizzata prima di poter raggiungere i siti d’azione nel cervello, essa va somministrata a dosi molto elevate. La L-dopa viene quindi somministrata in associazione con la carbidopa, un inibitore della dopa decarbossilasi che impedisce il metabolismo sistemico della levo-dopa prima che questa raggiunga il cervello.

Quando la levo-dopa è somministrata da sola, si possono avere effetti collaterali quali anoressia, nausea e vomito ed ipotensione ortostatica, che si attenuano tuttavia notevolmente non appena viene somministrata anche la carbidopa.

Dopo qualche mese di terapia con L-dopa, anche in associazione con Tinibitore della decarbossilazione, sono tuttavia possibili e frequenti altri effetti collaterali molto fastidiosi: movimenti discinetici del volto, del tronco e degli arti. La comparsa di tali movimenti indica, nel migliore dei casi, che il dosaggio del farmaco ha raggiunto una soglia critica che non deve essere superata.

E’ pertanto sentita la necessità di disporre di un mezzo di supporto/preventivo/terapeutico al quale, a causa della sua efficacia, sostanziale atossicità e mancanza di effetti collaterali, una cosi ampia gamma di utilizzatori possa ricorrere con sicurezza sia nel caso si necessiti semplicemente di un appropriato integratore alimentare che al primo manifestarsi dei sintomi nel caso dei sopramenzionati stati patologici.

Tali molteplici obbiettivi, di supporto, preventivo e propriamente terapeutico, vengono realizzati dalla composizione secondo l’invenzione che, come verrà dettagliatamente descritto in seguito, è costituita da una nuova associazione comprendente quali ingredienti di base L-carnitina o una alcanoil-L-carnitina inferiore C2-C6 o i loro sali farmacologicamente accettabili e il nicotinammide adenin dinucleotidc, forma ridotta (NADH) e/o il nicotinammide adenin dinucleotide fosfato, forma ridotta (NADPH).

Nei decenni ormai trascorsi dalla fondamentale scoperta (Fritz I. B.: The metabolic consequences of thè effeets of carnitine on long-chain fatty acid oxidation. In Cellular Compartmentalization and Control of Fatty Acid Metabolism. Edited by F. C. Gran, New York, Academic Press, 1968, pp. 39-63) che la L-carnitina è unica nello svolgere il vitale ruolo fisiologico di vettore degli acidi grassi a lunga catena attraverso la membrana interna del mitocondrio nella matrice di questo, sede della loro ossidazione, e dal primo riconoscimento (Engel e Angelini, Science, 1973, 179: 899-902) di una deficienza primaria di L-carnitina quale causa di una grave, talvolta fatale ancorché rara, forma di miopatia (lipid Storage myopathy), le conoscenze sulle conseguenze patologiche dei deficit primari e secondari di L-carnitina e, per contro, sul valore terapeutico e nutrizionale dell’apporto esogeno di questa si sono enormemente sviluppate.

La carnitina è presente in tutti i tessuti biologici in concentrazioni relativamente elevate come carnitina libera e in minori concentrazioni sotto forma di acil cernitine che sono prodotti metabolici della reazione reversibile:

acil CoA carnitina acil carnìtina CoASH catalizzata da tre gruppi di enzimi, le transferasi, che si distinguono principalmente per la loro specificità nei riguardi dei substrati reagenti: il gruppo delle carnitine acetil transferasi (CAT) che ha per substrato i gruppi acilici a catena corta (quali acetile e propionile), il gruppo delle carnitine ottanoiltransferasi (COT) con substrato i gruppi acilici a catena media e il gruppo delle palmitoiltransferasi (CPT) con substrato i gruppi acilici a catena lunga.

L’importante ruolo della carnitina nel metabolismo intermedio, con particolare riguardo alla sua limitata biosintesi, serve a spiegare come un deficit di carnitina possa verificarsi quale evento secondario in diverse funzioni patalogiche coinvolgendo organi ed apparati differenti. All’allargamento dello spettro clinico ha fatto eco un crescente numero di opportunità terapeutiche legate all’efficacia di questo composto naturale: efficacia che si è rivelata in tutta la sua portata con la constatazione che la terapia sostitutiva con L-carnitina inverte il drammatico quadro clinico nei pazienti affetti da lipid Storage myopathy. La Food and Drug Administration (FDA) non solo ha riconosciuto alla L-carnitina lo status di “orphan drug", ma la ha anche inclusa nella lista dei farmaci “salva-vita". Parallelamente all’approfondimento delle implicazioni patologiche legate alla deficienza primaria e secondaria di carnitina si è andata sviluppando una imponente mole di pubblicazioni scientifiche e brevettuali centrate in maniera preponderante sulla L-carnitina e, in misura considerevolmente minore, su alcune acil carnitine.

Limitandosi ad un parziale quadro brevettale, l’uso della L-carnitina è stato proposto in campo cardiovascolare per il trattamento di aritmie cardiache e insufficienza cardiaca congestizia (US 4,656,191), dell’ischemia miocardica e dellanossia miocardica (US 4,649,159); nel campo delle alterazioni del metabolismo lipidico, per il trattamento di iperlipidemie ed iperlipoproteinemie (US 4,315,944) e per normalizzare un alterato rapporto fra HDL e LDL VLDL (US 4,255,449); nel campo della nutrizione parenterale totale (US 4,254,147 e 4,320,145); in nefrologia, per contrastare in uremici cronici sottoposti a regolare trattamento emodialitico la miastenia e l’insorgenza di crampi muscolari provocati dalla perdita di carnitina nel liquido di dialisi (US 4,272,549); per contrastare gli effetti tossici indotti da antitumorali quali Tadriamicina (US 4,400,371 e US 4,713,370) e da anestetici alogenati quali l’alotano (US 4,780,308); nel trattamento della stasi venosa (US 4,415,589); nel contrastare il peggioramento di alcuni parametri biochimici e comportamentali in soggetti anziani (US 4,474,812); per normalizzare i livelli di trigliceridi e di Tumor Necrosis Factor (TNF-α) in pazienti affetti da AIDS e in pazienti asintomatici HIV-sieropositivi (US 5,631,288).

L’uso della L-carnitina è stato anche proposto in associazione ad altri principi attivi, come neirassociazione L-carnitina/coenzima Q10 ad ampio spettro di attività metabolica/antiaterosclerotica (US 4,599,232).

Per quanto riguarda le alcanoil L-carnitine, è noto l’uso della acetil L-carnitina per il trattamento di patologie del sistema nervoso centrale, in particolare nella demenza di Alzheimer (US 4,346,107) e per il trattamento della neuropatia diabetica (US 4,751,242), mentre la propionil L-carnitina è stata proposta per il trattamento di vasculopatie periferiche (US 4,343,816) e dell’insufficienza cardiaca congestizia (US 4,194,006).

Ugualmente complessa è l’attività svolta dal coenzima nicotinammide adenin dinuleotide (NADH) di cui è ben noto il ruolo svolto a livello energetico.

La sua funzione nella catena respiratoria è essenziale per il trasporto di elettroni nel sistema mitocondriale e nella formazione di ATP. Sono state isolate dalla matrice interna dei mitocondri due NADH deidrogenasi. Quella a peso molecolare più basso (P.M.

78.000) che è probabilmente una subunità del complesso più grande (P.M. oltre 300.000) viene considerata la forma nativa e funzionale del sistema.

I vari complessi localizzati nella membrane interna del mitocondrio costituiscono una catena di sistemi ossidativi che va sotto il nome di catena dei citocromi e del Coenzima QI0 permettendo agli elettroni di portarsi da un sistema a più basso potenziale ad uno più alto potenziale con utilizzazione di ossigeno e formazione di ATP. E’ infatti dalla catena respiratoria che avviene la fosforilazione ossidativa che da NADH porta alla produzione di ATP.

II NADH assieme al complessi dei citocromi ed al Coenzima Q10 sono gli elementi necessari per la trasformazione energetica in ATP ed il NADH trovandosi allinizio di questa catena ne è il principale elemento condizionante.

La funzione enzimatica del NADH non si evidenzia solamente nella reazione di tipo energetico per la formazione di ATP ma di recente è stato pure evidenziato come il NADH possa fungere quale coenzima necessario della chinodiidrossì-pteridin reduttasi (DHPR) per procedere alla biosintesi della H4-biopterina.

La possibilità di stimolare la biosintesi di H4-biopterina e di aumentarne la sua concentrazione cerebrale, è stata di recente proposta come una via per incrementare la L-dopa e quindi la dopamina che in malattie quali il Parkinsonismo sono carenti, carenza ritenuta alla base della patologia nervosa parkinsoniana. Mentre la L-dopa può fungere da precursore della dopamina e quindi trasformarsi metabolicamente in questa ultima sostanza, lo stesso non avviene per la tirosina che pure può essere considerata un precursore che può portare alla formazione di L-dopa, senza la presenza di tirosinidrossilasi. Una riduzione di questo enzima è stato infatti ritrovato a livello della substantia nigra dei soggetti parkinsoniani. La diminuzione di idrossitirosina sarebbe inoltre accompagnata da una forte riduzione di H4-biopterina, coenzima necessario alla sintesi deiridrossitirosina. Poiché la H4-biopterina non passa la barriera ematoencefalica e non è quindi utile la diretta somministrazione di H4-bioptcrina è sembrato invece utile ricorrere alla stimolazione della formazione di H4-biopterina attraverso la somministrazione del coenzima necessario alla attività della chinodiidrossi-pteridin reduttasi (DHPR) per la formazione di H4biopterina, funzione che come è noto è svolta dal NADH. Attraverso la somministrazione di NADH si rende perciò attiva la DHPR che porta alla formazione di H4-biopterina necessaria all’attivazione della tirosinidrossilasi per arrivare alla neosintesi di DOPA.

Le esperienze cliniche eseguite somministrando per via venosa il NADH in soggetti sofferenti di Parkinson hanno confermato i presupposti teorici formulati mostrando nei soggetti così trattati un significativo miglioramento della sintomatologia parkinsoniana.

Pressoché sovrapponibili risultati si sono anche ottenuti con la somministrazione di NADH per via orale avendo Γ avvertenza di somministrarlo mediante capsule gastrointestinali così da evitare l’ambiente acido dello stomaco che porterebbe ad una rapida riduzione del NADH.

Con la somministrazione di NADH sono stati pure segnalati miglioramenti clinici nella malattia di Alzheimer e nella sindrome di stanchezza cronica (CFS), (Birkmayer J. G., Annals Clin. Lab. Sci., 26, 1, 1996).

In base alle caratteristiche dei composti sopra descritti, è stata valutata la possibilità di interazione fra di essi mediante una serie di test eseguiti su delle associazioni di L-carnitina o suoi alcanoil derivati e il NADH e/o NADPH. Mediante le prove eseguite su queste nuove associazione è stata osservata una inaspettata e sorprendente interazione sinergica fra i componenti delle associazioni affatto prevedibile sulla base delle conoscenze farmacologiche riguardanti la L-carnitina o i suoi alcanoil derivati c il NADH e il NADPH.

La composizione secondo l’invenzione comprende in associazione i seguenti componenti:

(a) L-carnitina oppure una alcanoil-L-carnitina in cui il gruppo alcanoile, a catena diritta o ramificata, ha 2-8, preferibilmente 2-6 atomi di carbonio, oppure un loro sale farmacologicamente accettabile;

(b) NADH e/o NADPH; e

(c) un eccipiente farmacologicamente accettabile.

II rapporto ponderale fra (a) e (b) varia generalemente da 1:0.01 a 1 :1, preferibilmente da 1 :0.05 a 1 :0.5; ad esempio tale rapporto ponderale è 1 :0.1.

La alcanoil-L-carnitina è preferibilmente scelta nel gruppo comprendente acetil-L-carnitina, propionil-L-carnitina, butirril-L-carnitina, valeril-L-carnitina e isovaleril-L-carnitina. L'acetil-L-camitina e la propionil-L-carnitina sono particolarmente preferite.

Agli effetti della presente invenzione, per L-carnitina, acetil L-carnitina, propionil L-carnitina e isovaleril L-carnitina si intendono questi composti sotto forma di sali interni.

Per sale farmacologicamente accettabile della L-carnitina, alcanoil-L-carnitina si intende qualsiasi sale di queste con un acido che non dia origine ad indesiderati effetti tossici o collaterali. Tali acidi sono ben noti ai farmacologi ed agli esperti di tecnologia farmaceutica.

Esempi non limitativi di tali sali sono: cloruro; bromuro; ioduro; aspartato, aspartato acido; citrato, citrato acido; tartrato; fosfato, fosfato acido; fumarato, fumarato acido; glicerofosfato; glucosio-fosfato; lattato; maleato, maleato acido; orotato; ossalato, ossalato acido; solfato, solfato acido; tricloroacetato; trifluoroacetato e metansolfonato.

Un elenco di sali farmacologicamente accettabili approvati dalla FDA è riportato in Int. J. of Pharm. 33, (1986), 201-217, pubblicazione che è incorporata per riferimento nella presente descrizione.

La composizione secondo l'invenzione può comprendere ulteriormente vitamine, co-enzimi, sostanze minerali e antiossidanti.

Sotto forma di dosaggio unitario, le composizioni secondo l’invenzione comprendono ad esempio 100-500 mg di (a) L-camitina o alcanoil L-carnitina o una quantità equivalente di un loro sale farmacologicamente accettabile e una quantità in peso di (b) NADH o NADPH tale che il rapporto ponderale (a):(b) vari da 1 :0.01 a 1: 1, preferibilmente da 1:0.02 a 1:0.2.

Nel seguito, per semplicità di esposizione, si farà riferimento solo all’associazione di L-carnitina e NADH, restando tuttavia inteso che le associazioni di L-carnitina e NADPH o delle citate alcanoil-L-carnitine con il NADH e/o NADPH sono altrettanto efficaci, realizzando pienamente gli scopi della presente invenzione.

Prove tossicologiche

Sia la carnitina che il NADH posseggono come è noto una scarsa tossicità ed una buona tollerabilità; Queste favorevoli caratteristiche vennero confermate somministrando sia nel ratto che nel topo per via venosa tra loro associati sino a 100 mg/kg di L-carnitina e 5 mg/kg di NADH. Anche nelle prove di tossicità prolungate (trenta giorni) la somministrazione per via orale di 250 mg/kg di L-carnitina. e 10 mg di NADH tra loro associati risultò ben tollerata e non portò ad evidenziare l’insorgenza di mortalità negli animali trattati o la comparsa di segni tossici o d'intolleranza. Anche gli esami ematochimici ed istologici a livello dei vari organi eseguiti alla fine del trattamento non dimostrarono alcuna alterazione rispetto agli animali di controllo confermando così la scarsa tossicità e la buona tollerabilità dell 'associazione in esame.

Prove sull’incremento enzimatico, muscolare dopo esercizio

Per valutare l ’effetto della carnitina e del NADH così come della loro associazione sulla concentrazione degli enzimi mitocondriali coinvolti nell’esercizio muscolare, si osservò se l’attività di questi enzimi mitocondriali nel muscolo gastrocnemio di ratti sottoposti ad esercizio muscolare prolungato e trattati con carnitina o con NADH o con la loro associazione, potesse venir aumentata rispetto ad animali di controllo in risposta al maggior fabbisogno energetico richiesto dallo sforzo muscolare prolungato. A questo scopo un gruppo di ratti del ceppo Wistar venne sottoposto ad allenamento muscolare ponendoli su dì un nastro rotante (rotaroid apparatus Basìle-Como-Italy) a 20 m/minuto per 120 minuti ogni giorno (Benzi G., J, Appi. Physiol., 38, 565, 1975). L’attività enzimatica muscolare venne valutata dopo sette oppure dopo trenta giorni di allenamento dopo isolamento ed omogeneizzazione del muscolo gastrocnemio di ciascun ratto (Oscai L. B., J. Biol. Med., 246, 6968, 1971). Gli enzimi valutati furono la citrato sintetasi, l’isocitrato deidrogenasi e la succinato deidrogenasi.

I risultati ottenuti in questa prova dimostrarono come l’associazione di carnitina c NADH fosse in grado di aumentare in maniera assai significativa l’attività enzimatica già dopo sette giorni di allenamento mentre a questo tempo di osservazione non apparvero variazioni rispetto ai controlli, indotte dalla sola carnitina o dal solo NADH.

Un forte effetto sinergico fra questi due prodotti risultò ancora più evidente dopo trenta giorni di allenamento.

Prove sull'incremento delle concentrazioni di ATP del muscolo papillare di conigli dopo ipossia

Con queste prove venne valutato se la L-carnitina e il NADH o la loro associazione fossero in grado di preservare le concentrazioni di ATP del muscolo papillare del cuore di coniglio sottoposto ad ipossia, che com’è noto porta ad un’esaurimento di questo composto energetico. Le esperienze vennero eseguite su conigli New Zealand che vennero iniettati per via endovenosa ogni giorno per tre giorni consecutivi sia con la L-carnitina (100 mg/kg) sia con NADH (10 mg/kg) sia con le due sostanze tra loro associate.

Un altro gruppo di animali servì come controllo e non ricevette alcun trattamento. Alto scadere dil terzo giorno di trattamento tutti gli animali vennero uccisi, il loro cuore venne prelevato e vennero isolate sezioni del muscolo papillare del diametro di 1 mm e di 4-5 mm di spessore. I tessuti cosi isolati vennero perfusi in un bagno termostatico con una soluzione satura di 02 al 100%. L’ipossia sperimentale venne poi realizzata introducendo nel bagno il 100% di N2 in luogo dell'02. Il contenuto di ATP del muscolo papillare venne analizzato seguendo il metodo descritto da Strehler B. L. (Strehler B. L., Methods in anzymology III-N-Y- Acad. Press, 871 , 1957). L’analisi venne eseguita su campioni di tessuti tenuti in perfusione normale per un periodo di 90 min e dopo un periodo di ipossia della durata di 90 min.

Da queste prove risultò come le concentrazioni di ATP fossero notevolmente diminuite sia negli animali controllo che negli animali trattati con sola carnitina o con solo NADH. Negli animali trattati invece con l’associazione di carnitina e NADH si potè evidenziare una completa protezione dalla diminuzione di ATP indotta daH’anossia.

In queste prove si potè perciò mettere in evidenza la capacità dell’associazione di L-carnitina e di NADH di proteggere lΑΤΡ presente nel muscolo papillare dal suo abbassamento indotto dall’ipossia in una misura non conseguibile né con la sola L-camitina né con il solo NADH ma che è sorprendentemente realizzabile con la lóro associazione.

Prove slula capacità della carnitina e del NADH di stimolare produzione di do pamin a

Queste prove vennero eseguite su colture di cellule di neuroblastoma con una concentrazione di cellule varianti da 15-30 e 60 milioni che furono messe ad incubare con 200 mcg di NADH/mL oppure con 2 mg/mL di L-carnitina o con i due composti tra loro associati.

La produzione di dopamina causata dal NADH e dalla L-carnitina venne dosata per mezzo di HPLC secondo il metodo di Mayer (Mayer G. S., Shong R. F., Current separation 4, 44, 1982) modifi-cato da Jonsson e Keller (Jonsson G., Holman H., Adams R. N., Central adrenaline neurones. Ed. De Fuxe-Pergamon Press, 59, 1980 - Keller R., Oke A., Mefford I., Life Sciences, 19, 995, 1976). I risultati di queste prove dimostrano come effettivamente raggiunta di NADH alla coltura cellulare provoca un incremento nella produzione di dopamina correlato al numero delle cellule presenti.

Un significativo maggior incremento è ottenibile però quando alla soluzione di NADH viene aggiunta la L-carnitina che da sola non provoca invece che una scarso effetto. L’effetto sinergico anche in queste prove è perciò evidente.

Aumento percentuale delle sintesi di dopamlna in cultura di cellule di neuroblastoma incubate con NADH o con carnitina in funzione del numero delle cellula incubate (milioni)

L’impiego dell’MPTP come neurotossina prevalentemente attiva a livello del sistema neurostriato può rappresentare un significativo modello sperimentale per lo studio del Parkinsonismo e della sua patogenesi biochimica e clinica.

Sia nella scimmia che nel topo, alte dosi di MPTP (40 mg/kg) inducono la tipica sintomatologia ipokinesica e bradikmesica del Parkinson accompagnata da una rilevante diminuzione di DOPA e suoi metaboliti. In queste prove venne studiato se i danni comportamentali e della motilità indotti dal MPTP sul topo, cosi come le concentrazioni di dopamina potessero venir modificate e corrette dalla somministrazione di NADH o di L-carnitìna o dalle due sostanze associate tra loro.

Per queste prove vennero impiegati topi neri del ceppo C57 BE/6 del peso medio di 20 g di cui un gruppo venne tenuto come controllo mentre gli altri gruppi vennero iniettati con due iniezioni di 40 mg/kg di MPTP per via sottocutanea a distanza di 24 ore. Tre settimane dopo l’ìniezione dì MPTP venne valutata la motilità di tutti gli animali trattati cosi come degli animali di controllo. Anche il dosaggio dello DOPA venne effettuato dopo tre settimane dal trattamento. Il trattamento sia con NADH che con L-carnitina venne eseguito immediatamente prima dell ’inizio del test della motilità che venne valutata usando una camera di plexiglas attraversata a differente altezza da due raggi infrarossi secondo la procedura descritta da Archer (Archer T., Fredrikson A., Psychopharmacology, 88, 141, 1986).

La diminuzione della motilità indotta da MPTP risultò supcriore deir80% nei ratti controllo, e ridotta invece al 60% e al 70% con il trattamento con NADH e L-carnitina, mentre con l’associazione delle due sostanze la motilità venne riportata a livelli pressoché normali (riduzione 20%). Pure interessanti furono i risultati riguardanti le concentrazioni di DOPA nello striato che risultarono ridotte del 90% nei topi di controllo a cui era stata somministrata ΜΡΤΡ e invece a livelli quasi normali nei topi trattati. Anche in queste esperienze, mentre l’effetto della L-carnitina da sola apparve quasi trascurabile e quella del NADH pari al 40%, nel caso della loro associazione i livelli di DOPA vennero riportati vicini alle concentrazioni normalmente presenti in questo tessuto.

Vengono di seguito forniti alcuni esempi di composizioni secondo la presente invenzione:

Claims (6)

1. RIVENDICAZIONI 1. Composizione comprendente: (a) L-carnitina oppure una alcanoil-L-carnitina in cui il gruppo alcanoile, a catena diritta o ramificata, ha 2-8, preferibilmente 2-6 atomi di carbonio, oppure un loro sale farmacologicamente accettabile; (b) il nicotinammide adenin dinucleotide, forma ridotta (NADH) e/o il nicotinammide adenin dinucleotide fosfato, forma ridotta (NADPH); e (c) un eccipiente farmacologicamente accettabile.
2. 2. Composizione secondo la rivendicazione 2, in cui il rapporto ponderale fra (a) e (b) varia da a 1 :0.01 a 1: 1.
3. 3. Composizione secondo la rivendicazione 1, in cui il rapporto ponderale fra (a) e (b) varia da a 1 :0.02 a 1 :0.2.
4. 4. Composizione secondo la rivendicazione 3, in cui il rapporto ponderale fra (a) e (b) è 1 :0.1.
5. 5. Composizione secondo le rivendicazioni 1-4, in cui la alcanoil-L-carnitina è scelta nel gruppo comprendente acetil-L-camitina, propionil-L-carnitina, butirril-L-carnitina, Valeri 1-L-carnitina e isovaleril-L-carnìtina.
6. 6. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti in cui il sale farmacologicamente accettabile è scelto nel gruppo comprendente cloruro; bromuro; ioduro; aspartato, aspartato acido; citrato, citrato acido; tartrato; fosfato, fosfato acido; fumarato, fumarato acido; glicerofosfato; glucosiofosfato; lattato; maleato, maleato acido; orotato; ossalato, ossalato acido; solfato, solfato acido; tricloroacetato; trifluoroacetato e metansolfonato, 7. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti comprendente ulteriormente vitamine, co-enzimi, sostanze minerali, e antiossidanti. 8. Composizione secondo la rivendicazione 2, sotto forma di dosaggio unitario, comprendente 100-500 mg di (a) L-carnitina o alcanoil L-carnitina o una quantità equivalente di un loro sale farmacologicamente accettabile e una quantità in peso di (b) NADH o NADPH tale che il rapporto ponderale (a):(b) vari da 1:0.01 a 1 : 1. 9. Composizione secondo la rivendicazione 3, sotto forma di dosaggio unitario, comprendente 100-500 mg di (a) L-carnitina o alcanoil L-carnitina o una quantità equivalente di un loro sale farmacologicamente accettabile e una quantità in peso di (b) NADH o NADPH tale che il rapporto ponderale (a):(b) vari da 1:0.02 a 1 :0.2. 10. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, somministrabile per via orale, sotto forma di integratore alimentare. 1 1. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, somministrabile per via orale o parenterale sotto forma di medicamento.