HUP0402421A2

HUP0402421A2 - Mátrix-metalloproteinázokat gátló készítmény neopláziás betegségek kezelésére

Info

Publication number: HUP0402421A2
Application number: HU0402421A
Authority: HU
Inventors: Matthias Rath; Shrirang Netke; Vadim Ivanov; Waheed Roomi; Aleksandra Niedzwiecki
Original assignee: Matthias Rath
Priority date: 2002-01-08
Filing date: 2002-01-31
Publication date: 2005-07-28
Also published as: US6939860B2; TR200401669T1; LT2004074A; SK2772004A3; IL162384A0; EP1463498A1; HRP20040705A2; JP2005513166A; BR0208052A; UA78979C2; MXPA04006627A; SI21871A; US20030130201A1; KR20050005408A; ATE439833T1; US20050032715A1; EE200400031A; AU2008203157A1; PL371205A1; NO20033949L

Abstract

A találmány tárgya egy katechinvegyületet, aszkorbinsavat, prolint éslizint tartalmazó kompozíció. A találmány tárgyát képezi továbbá azemlített kompozíció alkalmazása fokozott mátrix metalloproteinázaktivitással kapcsolatos betegségek, valamint az extracellulárismátrix túlzott mértékű degradációjával kapcsolatos neopláziásbetegségek kezelésére szánt gyógyászati készítmény előállítására. Ó

Description

P04 02 42 1

100679-8776/KT/LZs

8776/KT/LZs ^Ο·^

MÁTRIX-METALLOPROTEINÁZOKAT GÁTLÓ KÉSZÍTMÉNY NEOPLÁZIÁS

BETEGSÉGEK KEZELÉSÉRE

KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY

A találmány katechinvegyületek és más táplálék-összetevők kombinációjának alkalmazására vonatkozik mátrix metalloproteinázok gátlására. A találmány közelebbről katechint, aszkorbinsavat, lizint és prolint tartalmazó készítmények alkalmazására vonatkozik neopláziás betegségek kezelésére.

A polifenolos vegyületek, amelyek katechinekként is ismer10 tek, megtalálhatók a zöld teában, és már felmerült, hogy védelmet nyújtanak különféle betegségekkel szemben, többek között rák ellen [Mukhtar H., Ahmed N. : Am. J. Clin. Nutr. 71:1698S-1702S (2000)]. Sadzuka és munkatársai bemutatták, hogy zöld tea orális beadása fokozta a doxorubicin daganatgátló hatásait egerekben.

^{15 A} katechinek rákellenes aktivitása összefügghet a rákos sej- tek proliterációjában és ezek áttételeiben szerepet játszó különféle tényezőkre gyakorolt hatásukkal. A katechinek ismerten a sejtciklus leállását okozzák humán karcinómasejtekben [Ahmad N., Feyes D. K. , Nieminen A. L., Agarwal R., Mukhtar H. J. : Natl.

Cancer Inst. 89:1881-1886 (1997)]. A zöld teából kinyert polifenolos frakcióról bemutatták, hogy védelmet nyújt gyulladás és daganatok által indukált citokinek ellen.

A polifenolos vegyületek a zöld tea száraztömegének 30%-át teszik ki. Ide tartoznak flavonolok, flavondiolok, flavonoidok 25 és fenolsavak. A falvonolok a legnagyobb mennyiségben előforduló polifenolok a zöld teában, és ezeket általában katechinekként ismerik. A zöld teában négy fő katechin található meg: 1) (-)-epikatecnin, 2) (-)-epikatechin-3-gallát, 3) (-)-epigallokatechin és 4) (-)-epigallokatechin-3-gallát (EGCG). A katechinek 30 közül az EGCG a zöld teában jelenlévő fő polifenolos összetevő.

Az EGCG egy hatékony antioxidáns vegyület [ J. Cell.

Biochem., 265: 236-257 (1996)] és elképzelhető, hogy hozzájárul a zöld tea rákellenes aktivitásához. A katechinvegyületekről bemutatták, hogy az áttételek elleni aktivitását azáltal fejtik 35 ki, hogy megakadályozzák az angiogenezis folyamatát [Cao Y., Cao R. : Nature 398:381 (1999)]. Az EGCG-ről azt is bemutatták, hogy zavarja az urokináz (u-plazminogén aktivátor) aktivitását, amely a leggyakrabban expresszálódó enzim humán daganatokban [Jankun

100679-8776/KT/LZs '.· ρέ.Έ/ΕΡ03/(ί10ί)5

- 2 J., Selman S. H., Swiercz R., Skrzypczak J. E.: Nature: 387:567 (1997)] .

Azonban megállapították, hogy a polifenolok biológiai hozzáférhetősége emberekben különösen alacsony [Chen L., Lee M. J. , Yang C. S.: Drug Metab. Dispos. 25: 1045-1050 (1997); Yang C. S., Chen L., Lee M. J. , Balentine D. A., Kuo M. C., Schantz S.: Cancer Epidemol. Biomark. Prev. Ί: 351-35 (1998)] Bell J. R. , Donovan J. L., Wong R., Waterhouse H., German J. B., Walzem R. L., Kasim K.: Am. J. Clin. Nutr. 71: 103-108 (2000); Sherry Chow Η. H., Cai Y., Alberts D. S., Hakim I., Dorr R. , Shahi F., Crowell J. A., Yang S. C., Hara H. : Cancer Epidemol. Biomark. Prev. 10: 53-58 (2001)]. A hivatkozott szakirodalmak tartalmát teljes terjedelmében a kitanítás részének tekintjük. Az alacsony szövetbeli koncentrációjuk nagymértékben csökkentik a polifenolok, így az EGCG terápiás értékét is. Folyamatosan szükség van polifenolokat tartalmazó jobb készítmények kidolgozására, amelyek hatásosak neopláziás betegségek kezelésében. Meglepő módon találtunk egy kompozíciót, amely katechineket, aszkorbinsavat, prolint és lizint tartalmaz és hatékony antiproliferatív metasztázis elleni aktivitást fejt ki neopláziás betegségekben.

A találmány biokémiai vegyületek kompozíciójára vonatkozik, amely egy katechint, egy antioxidánst, prolint és lizint tartalmaz, és amely hatásos humán betegségek kezelésében.

A találmány biokémiai vegyületek kompozíciójára vonatkozik, amely egy katechint, egy antioxidánst, prolint és lizint tartalmaz, és amely hatásos mátrix metalloproteináz gátlásában.

A találmány továbbá eljárásra vonatkozik extracelluláris mátrix túlzott mértékű degradálódásával összefüggő neopláziás betegségek kezelésére, melynek értelmében hatásos mennyiségben egy katechinvegyületet, egy antioxidánst, prolint és lizint tartalmazó kompozíciót adunk be.

Az alábbiakban ismertetjük a leíráshoz tartozó ábrákat.

Az 1. ábrán EGCG emlőráksejtek (MDA-MB 231) sejtproliferációjára gyakorolt gátló hatását mutatjuk be.

A 2. ábrán az EGCG, aszkorbinsav, prolin és lizin kombinációjának emlőráksejtek (MDA-MB 231) proliferációjára gyakorolt szinergikus gátló hatását mutatjuk be.

10067 9-877 6/KT/LZs

- 3 A 3. ábrán az EGCG, aszkorbinsav, prolin és lizin kombinációjának vastagbélráksejtek (HCT 116) proliferációjára gyakorolt szinergikus gátló hatását mutatjuk be.

A 4. ábrán bemutatjuk, hogy az EGCG (20 pg/ml) mintegy 25%5 -kai gátolja a Matrigel emlőráksejtek általi invázióját. Aszkorbinsav, prolin és lizin kombinációja mintegy 65%-os gátlást fejt ki. Aszkorbinsav, prolin és lizin EGCG-vei (20 pg/ml) alkotott kombinációja teljesen gátolja (szinte 100% arányban) a Matrigel inváziót.

Az 5. ábrán bemutatjuk, hogy aszkorbinsav, prolin és lizin

EGCG-vel (20 pg/ml) alkotott kombinációja szinergikusan 100% arányban gátolja a Matrigel melanomasejtek (A2058) általi invázió j át.

A 6. ábra egy zimogram, amely azt mutatja, hogy az EGCG 15 csökkenti az emlőráksejtek által elválasztott MMP2 aktivitását.

A 7. ábrán melanomasejtek normális morfológiáját mutatjuk be Matrigel invázió kísérlet után.

A 8. ábrán az aszkorbinsav, prolin és lizin kombinációja által indukált változást mutatjuk be a melanomasejtek morfológiá20 jában.

A 9. ábrán aszkorbinsav, prolin és lizin EGCG-vel alkotott kombinációjának appoptózisos hatását mutatjuk be.

A találmány egy másik megvalósítási módja egy olyan kompozícióra vonatkozik, amely tea extraktumokban, vörösborban megta25 lálható katechinek más táplálék-összetevőkkel alkotott kombinációjára vonatkozik, és szinergikus hatással rendelkezik neopláziás betegségekkel szemben és különféle más betegségekkel szemben. A találmány körébe tartozó táplálék-összetevők közé tartoznak többek között, de nem kizárólag a leírásban részletesen is30 mertetettek.

A katechinvegyületeket használhatjuk kombinációban más antioxidánsokkal, így például E-vitaminnal, glutationnal, más flavonoidokkal, elősegítőszerekkel, így például folsavval és fémekkel, így például szelénnel együtt, amelyet ismerten alkalmasan 35 módosítják a mátrix metalloproteinázok aktivitását, és ezáltal lehetővé válik, hogy csökkentsük azt a hatékony koncentrációt, amelyél az EGCG kifejtheti a daganat elleni aktivitását.

100679 8776/KT/LZs .:λ^θί7&ρ'θ2·/01£?05

- 4 .

A találmány egy másik megvalósítási módja katechineket tartalmazó kompozícióra vonatkozik, amely hatásos normális test sejtek rákos sejtekké való átalakulásának csökkentésében.

A találmány egy másik megvalósítási módja katechinekeket tartalmazó kompozícióra vonatkozik, amely hatásos rákos sejtek sejtproliferációjának megakadályozására és az extracelluláris mátrixot (ECM) emésztő különféle mátrix metalloproteinázok szintézisének, szekréciójának és/vagy aktivitásának csökkentésére.

A találmány egy másik megvalósítási módja eljárás neopláziás állapotok megelőzésére és kezelésére azáltal, hogy katechineket, aszkorbinsavat, prolint és lizint tartalmazó készítményt aduk be orálisan vagy topikálisan.

A találmányt az alábbiakban példák segítségével ismertetjük részletesebben anélkül, hogy ezzel az oltalmi kört korlátoznánk.

Általános kísérleti körülmények (a) Sejtvonalak vizsgálatokban az alábbi, az ATCC—tői beszerzett rákos sejtvonalakat használtuk:

i) humán emlőráksejtek MDA-MB231 ii) humán vastagbélráksejtek HCT 116 iii) humán melanomasejtek A 2058 (b) Sejtproliferációs vizsgálatok

A katechinek és táplálék-összetevők humán rákos sejtek ^sejtproliferációjára gyakorolt hatásainak vizsgálatához a különféle humán rákos sejtvonalakat 24 mérőhelyes lemezeken tenyésztettük az ATCC (a sejtvonalak szállítója) által megadott tenyésztési körülmények között. A sejteket általában 3-4 napig inkubáltuk (mielőtt konfluenciát értünk el). A tenyészetben levő sejtek össz-számát életképességi festékkel (MTT) való festéssel határoztuk meg, majd meghatároztuk a festékoldat OD értékét. Az MTT csak az elpusztult sejteket festi meg, és az elhasználódott festék mennyisége összefüggésben áll a tenyészetben lévő elpusztult sejtek számával. A %-os gátlást a kezelt csoportokra kapott OD értékek és a kontroll csoportra kapott OD értékek összehasonlításával számoltuk ki.

(c) Matrigel inváziós vizsgálatok

A Matrigel inváziós vizsgálatokat Matrigel (Becton Dickinson) inszertek alkalmazásával, kompatibilis 24 mérőhelyes

100679-8776/KT/LZs .: * 2 4$ i Ohs lemezeken végeztük. Ez a vizsgálat a daganatos áttételek meghatározásának egy megbízható vizsgálata.

A 24 mérőhelyes lemezeken humán fibroblaszt sejteket osztottunk szét és tenyésztettünk mintegy 10% szérumot tartalmazó tenyésztőközegben. Amikor a fibroblasztok konfluens állapotba kerültek, a szérumos tenyésztőközeget eltávolítottuk és új, szérum nélküli közeggel helyettesítettük. A szérum nélküli közeghez katechinvegyületek és táplálék-összetevők kombinációját adtuk, és humán rákos sejteket oltottunk a Matrigel inszertek felső felületére .

óra elteltével a közeget eltávolítottuk. A közeg egy részét félretettük zimogram vizsgálatokhoz. Az inszertek felső felszínén levő sejteket óvatosan ledörzsöltük egy vattacsomó segítségével. A Matrigel membránon áthatolt és a Matrigel mélyebb rétegeibe vándorolt sejteket Quick Stain festékkel festettük és mikroszkóp alatt számláltuk.

(d) Zimogram vizsgálatok

A Matrigel inváziós vizsgálatokból származó közeget (25-30 μΐ) Novex zimogram gélekre (Invitrogen) vittük fel. A géllemezeket előhívtuk, és a gyártó ajánlása szerint festettük. A mátrix metalloproteinázok (MMP-k) sávjait az ismert molekulatömegük alapján azonosítottuk.

(e) Morfológiai vizsgálatok

A Matrigel membrán mélyebb rétegeibe vándorolt humán rákos sejtek morfológiáját Quick Stain festékkel festettük és mikroszkóp alatt lefényképeztük (100-szoros nagyítás).

1. példa

Epigallokatechin-gallát (EGCG) gátló hatása humán emlőráksejtek (MDA MB 231) sejtproliferációjára

Ezekben a vizsgálatokban egy 24 mérőhelyes lemez mindegyik mérőhelyébe 5 x 10⁴ emlőráksejtet (MDA MB 231) oltottunk. A kontroll csoportban az emlőráksejteket 10% magzati borjúszérummal (FBS) kiegészített Liebovitz-féle közegben tenyésztettük. A kezelési csoportokban az emlőráksejteket 10 % magzati borjúszérummal (FBS) plusz 0, 10, 20, 50, 100 vagy 200 mg/ml EGCG-vel kiegészített Liebovitz-féle közegben tenyésztettük. A lemezeket normál levegőben (CO₂-kiegészítés nélkül) inkubáltuk 4 napig.

100679-8776/KT/LZs ρέΰ/ s 1/04(.41 Q&5

Az időperiódus elteltével a tenyésztőközeget leszívtuk és az egyes mérőhelyekben levő sejteket MTT-vel festettük. Az MTT festék feleslegét lemostuk. Az MTT-vel festődött rákos sejteket feloldottuk 1 ml DMSO oldatban. Az oldat optikai denszitását (OD) minden mérőhely esetében meghatároztuk. A mérőhelyhez tartozó OD érték közvetlen arányban állt az elpusztult sejtek számával. Referenciaként a korábban EGCGT távollétében tenyésztett, MTT-vel festett rákos sejtek OD értékét vettük, és ezt 100-nak tekintettük. A %-os gátlást az alábbi képlet alkalmazásával számoltuk ki: % gátlás = (referencia OD értéke — a kísérleti kezeléses minta OD értéke) / referencia OD értéke x 100%.

Az EGCG 20, 50, 100, illetve 200 μg/ml koncentrációban a humán rákos sejtek sejtproliferációját 3, 34, 66 és 70%-ban gátolta (lásd 1. ábra). Az EGCG 10 μg/ml koncentrációban nem gátolta a sejtproliferációt.

2. példa

Aszkorbinsav, prolin és lizin különféle koncentrációjú EGCG-vei alkotott kombinációjának gátló hatása humán emlőráksejtek (MDA MB 231) sejtproliferációjára

Ezekben a vizsgálatokban az általános eljárás ugyanaz, mint az 1. példában.

Ezekben a vizsgálatokban az alap tenyésztőközeget az alábbiakkal egészítettük ki:

(i) 100 μΜ aszkorbinsav + 140 μΜ prolin;

(ii) 100 μΜ aszkorbinsav + 140 μΜ prolin + 400 μΜ lizin (iii) 100 μΜ aszkorbinsav + 140 μΜ prolin + 400 μΜ lizin + 20 mg/ml EGCG, (iv) 100 μΜ aszkorbinsav + 140 μΜ prolin + 400 μΜ lizin + 20 mg/ml EGCG + 50 mg/ml EGGG; vagy (v) 100 μΜ aszkorbinsav + 140 μΜ prolin + 400 μΜ Lizin + 100 mg/ml EGCG.

Az aszkorbinsav + prolin nem gátolta a sejtproliferációt. Az aszkorbinsav + prolin + lizin a sejtproliferációt mintegy 14%-kal gátolta (2. ábra) . Aszkorbinsav + prolin + lizin és 20 μg/ml EGCG kombinációja 20%-os gátlást okozott (2. ábra). Az önmagában vett 20 μg/ml EGCG csak 3%-os gátlást okozott (lásd 1. példa). Tehát az aszkorbinsav, prolin és lizin kombinációja az

100679-8776/KT/LZs pH/Βρ'ο?4σι eks

- 7 EGCG-vel szinergikus hatást fej ki a rákos sejtek proliferációjának gátlásában.

3. példa

Aszkorbinsav, prolin és lizin különféle koncentrációjú EGCG-vel alkotott kombinációjának gátló hatása humán vastagbélráksejtek (HCT 116) sejtproliferációjára

Ebben a vizsgálatban humán vastagbélráksejteket 10% magzati borjúszérummal kiegészített McCoy 5A tápoldatban tenyésztettünk 5% szén-dioxidot tartalmazó atmoszférában. Az általános eljárás és a vizsgált kezelések megegyeztek a 2. példában ismertetettel.

Az aszkorbinsav, prolin és lizin EGCG-vel alkotott kombinációja szinergikusan növelte a sejtproliferációra gyakorolt gátló hatást 0%-ról 31%-ra 20 μg/ml EGCG esetén, és mintegy 95%-ra 50 μg/ml EGCG esetén (lásd 3. ábra).

EGCG, VALAMINT ASZKORBINSAV, PROLIN ÉS LIZIN KOMBINÁCIÓJÁNAK GÁTLÓ HATÁSA MATRIGEL RÁKOS SEJTEK ÁLTALI INVÁZIÓJÁRA

4. példa

Különböző koncentrációjú EGCG, valamint aszkorbinsav, prolin és lizin különböző koncentrációjú EGCG-vel alkotott kombinációjának gátló hatása Matrigel humán emlőráksejtek (MDA MB 231) általi inváziójára

A Matrigel inváziós vizsgálat általános menetét a fentiekben ismertettük. Ebben a vizsgálatban 5 x 10⁴ humán emlőráksejtet oltottunk be mindegyik inszertre. A Leibovitz-féle közeghez különféle kiegészítéseket adtunk. A lemezeket inkubátorban szén-dioxiddal ki nem egészített levegőben inkubáltuk.

20, illetve 50 μg/ml EGCG-t tartalmazó kompozíciók a közegben az emlőráksejtek invázióját mintegy 26%-kal, illetve 100%-kal gátolták. Eközben az aszkorbinsav (100 μΜ) + prolin (140 μΜ) + lizin (400 μΜ) a közegben 65%-os gátlást okozott, aszkorbinsav (100 μΜ) + prolin (140 μΜ) + lizin (400 μΜ) + 20 μg/ml EGCG kombinációja teljesen gátolta (100% gátlás) a rákos sejtek általi inváziót (lásd 4. ábra).

5. példa

Különböző koncentrációjú EGCG, valamint aszkorbinsav, prolin és lizin különböző koncentrációjú EGCG-vel alkotott kombináció100679-8776/KT/LZs

- 8 jának gátló hatása Matrigel humán melanomasejtek (A 2058) általi inváziójára

A Matrigel inváziós vizsgálat általános menetét a fentiekben ismertettük. 5 x 10⁴ humán melanomasejtét (A2058) oltottunk mindegyik inszertre. A DMEM-hez különféle kiegészítéseket adtunk. A lemezeket inkubátorban 5% szén-dioxidot tartalmazó atmoszférában inkubáltuk.

Míg aszkorbinsav (100 μΜ) + prolin (140 μΜ) + lizin (400 μΜ) kombinációja csak 13% gátlást okozott, az aszkorbinsav (100 μΜ) + prolin (140 μΜ) + lizin (400 μΜ) + 20 μg/ml EGCG kombinációja teljesen megakadályozta a melanomasejtek invázióját a Matrigelen keresztül (5. ábra).

ZIMOGRAM VIZSGÁLATOK

6. példa

Különböző koncentrációjú EGCG hatása humán emlőráksejtek (MDA MB 231) MMP2 termelésére

A Matrigel inváziós vizsgálatból (4. példa) a különféle kezelésekhez tartozó közegeket vittük fel Novex zimogram gélre (Invitrogen). A lemezeket előhívtuk és a gyártó ajánlása szerint festettük. A mátrix metalloproteinázok (MMP-k) sávjait az ismert molekulatömegük alapján azonosítottuk (6. ábra).

A Magrigel inváziós vizsgálatokból származó tenyésztőközegek zimogramja azt mutatta, hogy 20 μg/ml EGCG a közegben csökkentette az MMP2 termelést és teljesen gátolja az MMP9 termelést (6. ábra). 50 μg/ml, illetve 100 μg/ml koncentrációban az EGCG teljesen gátolta mind az MMP2, mind az MMP9 aktivitást (6. ábra) .

SEJTMORFOLÓGIA

7. példa

EGCG, valamint aszkorbinsav, prolin és lizin kombinációjának hatása humán melanomasejtek (A2058) sejtmorfológiájára

A rákos sejtek alapközegben felvett, a Matrigelen keresztüli migrációt mutató mikrográfiáját a 7. ábrán mutatjuk be. Aszkorbinsav (100 μΜ), prolin (140 μΜ) + lizin (400 μΜ) kombinációjának az alapközeghez való hozzáadása megváltoztatta a sejtek morfológiáját (8. ábra). A sejtek felfúvódása a sejtmag határozott megnagyobbodásával együtt nyilvánvaló. Az aszkorbinsav (100 μΜ)

100679-8776/KT/LZs ^pÍ.TÍ/HPW^I Cl®,5 + prolin (140 μΜ) + lizin (400 μΜ) kombinációjához 20 μς/ml EGCG-t adva a tápközegben nagymértékű apoptózisos változásokat okozott (9. ábra).

Ezek az 1-7. példákban leírt megfigyelések azt jelzik, hogy az EGCG erőteljes szinergikus hatást fejt ki, ha EGCG-t aszkorbinsav + prolin + lizin kombinációjával együtt használjuk. Ezért ezek a vizsgálatok az EGCG és az aszkorbinsav + prolin + lizin meglepő szinergikus hatását mutatják, ami lehetővé teszi, hogy teljesen kihasználjuk az EGCG antiproliferatív és metasztázis elleni aktivitását viszonylag alacsony szövetbeli koncentrációknál .

így ezek a megállapítások nagyon fontosak, mivel a katechinek hatásos szintjét közelebb hozzák ahhoz, amelyet el lehet érni a szövetekben.

Felmerült, hogy a rákos sejtek proliierációját, valamint az enzimjeik serkentő szabályozását reaktív oxigén specieszek (ROS) koncentrációjának növekedése okozza. Ebben a helyzetben különféle biológiai antioxidánsok, így például tokoferolok, karotinoidok más serkentő szerekkel, így ubikinolokkal, biflavonoidokkal, lipoikus savakkal, karnitinnal alkotott kombinációi még hatásosabb szinergikus keveréket biztosítanak a fent említett betegségek kezelésére.

A találmány lényege az a meglepő felismerés, hogy egy katechinvegyületeket tartalmazó kombináció szinergikus aktivitást fejt ki, ezáltal lehetővé teszi hatásos rákellenes aktivitás elérését a katechinek alacsonyabb szövetbeli koncentrációi mellett. A fenti megfigyelések lehetővé teszik különféle összetevők alkalmazását más összetevőkkel kombinációban, hatékony koncentrációban, neopláziás betegségek megelőzésére vagy kezelésére .

Szakember számára nyilvánvaló, hogy a prolin és a lizin nem korlátozódik csupán a prolinra és a lizinre. A találmány oltalmi körébe tartozónak értjük a lizin származékait és prekurzorait, valamint a prolin származékait és prekurzorait is.

Szakember számára nyilvánvaló, hogy az antioxidáns az aszkorbinsav körébe tartoznak az aszkorbinsav származékai és prekurzorai is.

100679-8776/KT/LZs .:^^:/05^2^10.(55

- 10 Más biológiai antioxidánsok közé tartoznak a tokoferolok és rokon vegyületek, a transzretinsav és rokon vegyületek, a karotinoidok és rokon vegyületek, a glutation és rokon vegyületek, az ubikinolok és rokon vegyületek, a folátok és rokon vegyületek, a biflavonoidok és rokon vegyületek, valamint a szelénvegyületek.

Klinikai alkalmazások

A találmány középpontjában egy katechin antioxidánssal, prolinnal és lizinnel alkotott kombinációjának megelőző és terápiás alkalmazása áll. A katechin antioxidánssal, prolinnal és lizinnel való kombinált alkalmazása megnöveli a katechinvegyület hatékonyságát humán betegségek kezelésében.

A humán betegségek közé tartoznak többek között, de nem kizárólag a neopláziás betegségek, a gyulladásos állapotok, a fertőző betegségek, a szív- és érrendszeri betegségek, valamint más kóros állapotok, amelyek az extracelluláris mátrix degradációjával járnak. Az ilyen állapotok közé tartozik a rendellenes angiongenezis, a kóros behatolás az érbe (intravasatio), reumatoid és oszteoartritisz, ateroszklerózis, dilatatív kardiomiopátia, emfizéma és más krónikus állapotok.

A találmány lehetővé teszi az extracelluláris mátrix degradációjával járó humán betegségek kezelését és megelőzését, mint például:

i) neopláziás betegségek;

ii) gyulladásos állapotok (többek között, de nem kizárólag allergiák, emfizéma, reumatoid artritisz, oszteoartritisz, periodontitisz, neurodermatitisz);

iii) fertőző betegségek (többek között, de nem kizárólag vírusos fertőzések, így például közönséges megfázás, influenza, hepatitisz, herpesz, HÍV; bakteriális fertőzések, így például tüdőgyulladás, tuberkolózis, agyhártyagyulladás (meningitisz), gonorrhoea, szifilisz és gombás betegségek) ;

ív) kardiovaszkuláris betegségek (többek között, de nem kizárólag ateroszklerózis, kardiomiopátia, és érlpasztika utáni resztenózis);

v) degeneratív betegségek (többek között, de nem kizárólag csontritkulás és artritisz);

100679-8776/KT/LZs .:^^^274)10^5 vi) neurológiai betegségek (többek között, de nem kizárólag Alzheimer-kór, szklerózis multiplex); és vii) autoimmun betegségek (többek között, de nem kizárólag artritisz), ahol az eljárás értelmében a leírásban ismertetett 5 készítmények hatásos mennyiségét adjuk be.

Claims

10 Ο 67 9-8 7 7 6/KT/LZs

Szabadalmi igénypontok

1. Biokémiai vegyületek, így katechinvegyület, antioxidáns, prolin és lizin kompozíciója, amely hatásos mátrix metallopro5 teináz gátlására.

2. Az 1. igénypont szerinti kompozíció, amelyben a mátrix-metalloproteináz az alábbiak bármelyike: mátrix-metalloproteináz 1, mátrix-metalloproteináz 2, mátrix-metalloproteináz 3, mátrix-metalloproteináz 4, mátrix-metalloproteináz 5, mátrix10 -metalloproteináz 6, mátrix-metalloproteináz 7, mátrix-metalloproteináz 8, mátrix-metalloproteináz 9, mátrix-metalloproteináz 10, mátrix-metalloproteináz 12 és mátrix-metalloproteináz 14.

3. Az 1. igénypont szerinti kompozíció alkalmazása fokozott mátrix metalloproteináz aktivitással járó humán betegségek keze15 lésére szánt gyógyászati készítmény előállítására.

4. A3, igénypont szerinti alkalmazás, ahol a humán betegség neopláziás betegségek, gyulladásos betegségek, fertőző betegségek, kardiovaszkuláris betegségek, degeneratív betegségek, neurológiai betegségek és autoimmun betegségek közül választott be20 tegség.

5. Az 1. igénypont szerinti kompozíció alkalmazása az extracelluláris mátrix túlzott mértékű degradációjával kapcsolatos neopláziás betegségek kezelésére szánt gyógyászati készítmény előállítására.

25

6. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti kompozíció vagy a 3-5.

igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a katechin epikatechinek, epigallokatechin, epikatechin-gallát és epigallokatechin-gallát közül választott vegyület.

7. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti kompozíció, vagy a 3-5. 30 igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az antioxidáns aszkorbinsav, tokoferolok, tokotrienolok, karotionidok, glutation, alfa-lipoikus sav, ubikinolok, bioflavonoidok és karnitin közül választott vegyület.

8. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti kompozíció, vagy a 3-5. 35 igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az antioxidáns aszkorbinsav.

100679-8776/KT/LZs

0J35

9. A 8. igénypont szerinti kompozíció vagy alkalmazás, ahol az aszkorbinsav aszkorbát prekurzorok, aszkorbát metabolitok és aszkorbát sók közül választott vegyület.

10. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti kompozíció, vagy a 3-5. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az antioxidáns továbbá folsavat tartalmaz.

11. A 10. igénypont szerinti kompozíció vagy alkalmazás, ahol a folsav folát.

12. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti kompozíció vagy a 3-5. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a kompozíció továbbá szelént tartalmaz.

13. A 12. igénypont szerinti kompozíció vagy alkalmazás, ahol a szelén szelenit és metil-szelenát közül választott vegyület .

14. Gyógyászati készítmény, amely az 1. igénypont szerinti kompozíciót tartalmazza.

15. A 14. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, ahol a gyógyászati készítményt orális beadásra, parenterális beadásra vagy topikális beadásra szánjuk.

RATH Matthias helyett a meghatalmazott:

DANUBIA

Szabadalmi és Védjegy Iroda Kft.

Kmethy Boglárka szabadalmi ügyvivő

K L^; r