HRP980077A2

HRP980077A2 - Phenyl xanthine esters and amides

Info

Publication number: HRP980077A2
Application number: HR9703044.9A
Authority: HR
Inventors: Douglas Alan Livingston
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1997-02-14
Filing date: 1998-02-13
Publication date: 1998-12-31
Also published as: AP9901622A0; HU225962B1; AR011441A1; GB9703044D0; PL188018B1; NZ336923A; HUP0000894A3; CA2280730A1; UA57767C2; BR9807682B1; US7002012B2; JP2001511792A; ID22770A; IL131179A; CZ288799A3; CZ298764B6; DE69831559T2; ES2249822T3; AU754456B2; US20030181471A1

Description

Ovaj izum se odnosi na kompleksne estere i amide fenil ksantin derivate, postupke za njihovo dobivanje, farmaceutske formulacije koje ih sadrže, i na njihovu primjenu u medicini, naročito u profilaksi i tretmanu septičkog šoka, upalnih stanja, kao i imunoloških oboljenja.

Septički udar je izazvan pomoću kompleksnog niza događaja, uključujući mnoge različite putanje u posrednike odaziva oboljenja (vidjeti na primjer "The Lancet", svezak 338, str. 732-739, (1991.); i "Annals Of International Medicine", svezak 115, str. 457-469, (1991.) uključujući, inter alia, proizvode metabolizma arakidonske kiseline i nagomilavanje krvnih pločica.

Adhezija cilrkulirajućih leukocita na vaskularni endotelium je odlučan događaj u patogenezi upalnih reakcija. Upalni i imunološki posrednici mogu stimulirati proces adhezije povećavanjem adhezivnosti leukocita ili endotelialne stanice preko aktiviranja, regulacije, ili izazivanja raznih adhezijskih molekula na površini stanice.

Do sada raspoloživi anti-upalni lijekovi imaju ograničenu efikasnost, često sa sporednim efektima. Korištena eksperimentalno monoklonalna antitijela za anti-adhezijske terapije imaju teoretske nedostatke za tretman kroničnih oboljenja. Zato je otkriće i razvoj malih molekula koji specifično blokiraju ili inhibiraju adhezivne interakcije leukocita i endoteliuma atraktivno područje terapeutske intervencije.

PCT patentna prijava br. GB 950108 opisuje spojeve formule:

[image]

gdje

m i n su neovisno cijeli brojevi od 0 do 10;

X i Y su neovisno kisik ili sumpor;

(-Q-) je (-CH2-)p ili (-CH=CH-)p, gdje p je cijeli broj od 1 do 4; i

A i B su neovisno metil, razgranati C3-6 alkil, C3-8 cikloalkil ili C3-8 cikloalkenil;

i njihove soli, solvate i farmaceutski prihvatljive estere i amide; i njihovu primjenu u tretmanu septičkog šoka, alergijskih, i upalnih stanja. Nađeno je da spojevi inhibiraju jedan ili više enzima 5-lipoksigenaze, cikloksigenaze, i lizo-PAF; acetil-CoA acetiltransferaze.

Mi smo iznenađujuće otkrili niz kompleksnih estera i amida od odabranih derivata fenil ksantina koji inhibiraju izražavanje adhezijskih molekula u monoslojevima ljudske endotelijalne stanice pupčane vene (HUVEC) u vrlo malim koncentracijama, koje su zato indicirane za tretman upalnih stanja i imunoloških oboljenja.

Prema tome ovaj izum osigurava spoj formule (I):

[image]

ili njegov solvat gdje:

X je -O- ili -;

Q je (-CH2-)p, (-CH=CH-)p, (-C≡C-)p, gdje p je cijeli broj od 0 do 4;

R1 je vodik ili metil;

R2 i R3 neovisno su O ili S;

n je cijeli broj od 1 do 50; i

R je vodik ili metil.

Prema daljnjem gledištu, ovaj izum osigurava spoj formule (I), kako je gore definirano, gdje X je -O- ili -NH- i R1 je H; spojevi gdje n je cijeli broj od 8 do 20 su poželjni, a oni gdje n je cijeli broj od 8 do 15 su najpoželjniji.

Pogodno R3 predstavlja O, a R2 predstavlja O ili S, ali poželjnije R3 i R2 su oba O.

Prema daljnjem gledištu izuma, p poželjno predstavlja 0 ili 1.

Prema daljnjem gledištu, ovaj izum osigurava spoj formule (I), kako je gore definirano, gdje Q je (-CH=CH-)p.

Poželjno

[image]

supstituent je vezan na fenil prsten u para položaju.

Izum također uključuje smjese spojeva formule (I) u bilo kojem odnosu, na primjer gdje n varira unutar istog uzorka.

Posebna podgrupa spojeva je formula 1a:

[image]

ili njegov solvat gdje:

X je -O- ili -;

Q je (-CH2-)p ili (-CH=CH-)p gdje

p je cijeli broj od 1 do 4;

R1 je vodik ili metil;

n je cijeli broj od 1 do 50; i

R je vodik ili metil.

Naročito poželjni spojevi iz izuma uključuju:

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina dekaetilen glikol metil eter ester;

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester;

(E)-3-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester;

(E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8il]cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter amid;

(E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester;

ili njihov solvat.

Spojevi iz ovog izuma mogu postojati kao geometrijski i optički izomeri. Svi takvi izomeri, pojedinačno i kao smjese, uključeni su unutar područja ovog izuma. Gdje Q sadrži dvostruku vezu, poželjni su spojevi u obliku E-geometrijskih izomera.

Kako je spomenuto ranije, spojevi formule (I) i njihovi solvati, imaju primjenu u profilaksi i tretmanu upalnih stanja i imunoloških oboljenja, kako je kasnije pokazano, u biološkim ispitivanjima u kojima je pokazano da su reprezentativni spojevi iz ovog izuma bili aktivni.

Primjeri upalnih stanja ili imunoloških oboljenja su oni od pluća, zglobova, očiju, crijeva, kože i srca; naročito oni sa infiltriranjem leukocita u upalno tkivo. Stanja pluća uključuju astmu, sindrom respiratornog bola odraslih, bronhitis, cističnu fibrozu (koja može alternativno uključivati crijeva i druga tkiva). Stanja zgloba uključuju reumatski artritis, reumatsku spondilozu, osteoartritis, gihtični artritis i druga stanja artritisa. Upalna stanja oka uključuju uveitis (uključujući iritis) i konjuktivitis. Upalna stanja crijeva uključuju Crohn-ovo oboljenje, ulcerativni kolitis i distalni proktitis. Oboljenja koja uključuju ona udružena sa proliferacijom stanica, takvim kao što je psorijaza, ekcem i dermatitis (alergijskog ili nealergijskog porijekla). Stanja srca uključuju oštećenje koronarnog infarkta. Druga upalna stanja i imunološka oboljenja uključuju nekrozu tkiva kod kronične upale, endotoksični šok, oboljenja proliferacije glatkog mišića (na primjer restenoza koja prati anglioplastiu), i odbacivanje tkiva koje prati kirurški transplant.

Prema tome, ovaj izum osigurava postupak za profilaksu ili tretman upalnog stanja ili imunološkog oboljenja kod sisavaca, uključujući i čovjeka, koji obuhvaća unošenje terapeutski efikasne količine spoja formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog solvata. Ovaj izum dalje osigurava postupak za profilaksu ili tretman septičkog šoka kod sisavaca, kao što je čovjek, koji obuhvaća unošenje terapeutski efikasne količine spoja formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog solvata.

Alternativno, također je osiguran spoj formule (I), ili njegov farmaceutski prihvatljiv solvat za primjenu u medicinskoj terapiji; posebno za primjenu u profilaksi ili tretmanu upalnog stanja ili imunološkog oboljenja kod sisavaca, kao što je čovjek. Ovaj izum dalje osigurava spoj formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog solvata za primjenu u profilaksi ili tretmanu septičkog šoka.

Količina spoja formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog solvata, koje je potrebno da se postigne željeni biološki efekt ovisiti će od više faktora kao što je primjena za koju je namijenjen, način unošenja, i primalaca. Tipična doza za tretman septičkog šoka, na primjer, može biti očekivana u opsegu od 0,005 mg/kg - 100 mg/kg, poželjno 0,5 - 100 mg/kg, i najpoželjnije 0,5-20 mg/kg. Ova doza može se unositi kao pojedinačna dozna jedinica ili kao više posebnih jediničnih doza ili kao stalna infuzija. Intravenozna doza očekivano je u opsegu od 0,0025 mg/kg do 200 mg/kg, a mogla bi se tipično unositi kao infuzija. Slična doziranja mogla bi se primijeniti za tretman drugih bolesnih stanja. Za unošenje u pluća subjekta aerosolom treba se koristiti količina spoja koja je dovoljna da se postignu koncentracije tekućine na površini zračnog puta subjekta od 2 do 1000 µmola.

Tako u daljnjem gledištu ovog izuma, osigurani su farmaceutski preparati koji sadrže, kao aktivni sastojak, spoj formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvate, zajedno sa bar jednim farmaceutskim nosačem ili primaocem. Ovi farmaceutski preparati mogu se koristiti u profilaksi i tretmanu stanja takvih kao što su septički šok, upalna stanja, i imunološka oboljenja. Nosač mora biti farmaceutski prihvatljiv za primalaca i mora biti kompatibilan sa, tj. da nema štetan efekt prema, drugim sastojcima u preparatu. Nosač može biti čvrsti ili tekući i poželjno se formulira kao jedinična dozna formulacija, na primjer tableta koja može sadržavati od 0,05 do 95 % težine aktivnih sastojaka. Ako se želi mogu se također uključiti i drugi fiziološki aktivni sastojci u farmaceutske preparate iz izuma.

Moguće formulacije uključuju one prikladne za oralno, podjezično, usno, parenteralno (na primjer potkožno, intramuskularno, ili intravenozno), rektalno i mjesno, uključujući transdermalno, intranazalno i unošenje inhalacijom. Najprikladniji način unošenja za određenog pacijenta ovisiti će od prirode i ozbiljnosti stanja koje se tretira i od prirode aktivnog spoja, ali gdje je moguće, intravenozno unošenje je poželjno za tretman septičkog šoka. Za tretman stanja kao što je astma, međutim, oralno ili inhalacija, mogao bi biti poželjni put unošenja.

Formulacije prikladne za oralno unošenje mogu se osigurati kao zasebne jedinice, kao što su tablete, kapsule, pastile, od kojih svaka sadrži predodređenu količinu aktivnog spoja; kao praškovi ili granule; kao otopine ili suspenzije u vodenim ili nevodenim tekućinama; ili kao emulzije ulje-u-vodi ili voda-u-ulju.

Formulacije prikladne za podjezično ili usno unošenje uključuju pastile koje sadrže aktivni spoj i, tipično mirisnu bazu, takvu kao što je šećer ili akacija ili tragakant i pastile koje sadrže aktivni spoj u inertnoj bazi, kao što je želatin i glicerin ili sukroza akacije.

Formulacije prikladne za parenteralno unošenje tipično sadrže sterilne vodene otopine koji sadrže predodređene koncentracije aktivnog spoja; otopina je poželjno izotonska sa krvlju određenog primalaca. Mada se takve otopine poželjno unose intravenozno, oni se također mogu unositi potkožnom ili intramuskularnom injekcijom.

Formulacije prikladne za rektalno unošenje poželjno su osigurane kao supozitoriji (čepići) jedinične doze koji sadrže aktivni sastojak i jedan ili više čvrstih nosača koji formiraju bazu supozitorija na primjer maslac kokosovog oraha.

Formulacije prikladne za mjesnu ili intranazalnu primjenu uključuju masti, kreme, losione, paste , gelove, sprejeve, aerosole i ulja. Prikladni nosači za takve formulacije uključuju petrolej žele, lanolin, polietilenglikole, alkohole, i njihove kombinacije. Aktivni sastojak tipično je prisutan u takvim formulacijama u koncentracijama od 0,1 do 15 % m/m.

Formulacije iz izuma mogu se dobiti bilo kojim prikladnim postupkom, tipično jednoličnim i prisnim miješanjem aktivnog spoja sa tekućinama ili vješto podijeljenim čvrstim nosačima ili sa oba, u traženim odnosima i zatim, ako je potrebno, oblikovanjem rezultirajuće smjese u željeni oblik.

Na primjer tableta se može dobiti zbijanjem fine smjese koja sadrži prah ili granule aktivnog i jednog ili više opcionalnih sastojaka, kao što su vezivno sredstvo, sredstvo za podmazivanje, inertni razblaživač, ili sredstvo raspršivanja aktivne površine, ili oblikovanjem fine smjese praškastog aktivnog sastojka i inertnog tekućeg razblaživača.

Vodene otopine se tipično dobivaju otapanjem aktivnog sastojka u otopini vode i soli u koju je dodan ciklodekstrin.

Prikladne formulacije za unošenje inhalacijom uključuju fine čestice praha ili pare koje se mogu generirati raznim tipovima prešanih aerosola mjerene doze, zamagljivača, ili insuflatora.

Za plućno unošenje preko usta, veličina čestica praha ili kapljica je tipično u opsegu 0,5 - 10 µm, radi osiguravanja isporuke u bronhijalnu granu. Za nazalno unošenje, veličina čestice u opsegu 10-500 µm je poželjna da se osigura zadržavanje u nazalnoj šupljini.

Inhalatori mjerene doze su prešani aerosolni dispenseri, koji tipično sadrže formulaciju suspenzije ili otopine aktivnog sastojka u istopljenom sredstvu za guranje. Tokom primjene, ovi uređaji prazne formulaciju preko ventila podešenog da oslobađa mjereni volumen, tipično od 10 do 150 µl, radi dobivanja spreja finih čestica koji sadrži aktivni sastojak. Prikladna sredstva za guranje uključuju neke spojeve klorofluorougljika, na primjer diklorodifluorometan, triklorofluorometan, diklorotetrafluoroetan i njihove smjese. Formulacija može dodatno sadržavati jedan ili više ko-otapala, na primjer, etanol surfaktante, kao što su oleinska kiselina ili sorbitan trioleat, anti-oksidante i prikladna mirisna sredstva.

Zamaglivači su komercijalno raspoloživi uređaji koji transformiraju otopine ili suspenzije aktivnog sastojka u terapeutsku aerosolnu maglu pomoću sredstva za ubrzavanje kompresiranog plina, obično zraka ili kisika, preko uske venturijeve cijevi, ili pomoću ultrasoničnog tresnja. Prikladne formulacije za primjenu u zamaglivačima sastoje se od aktivnog sastojka u tekućem nosaču i sadrže do 40 % m/m formulacije, poželjno manje od 20 % m/m. Nosač je tipično voda ili razblažena vodena alkoholna otopina, poželjno napravljena izotonski sa tjelesnim tekućinama dodavanjem, na primjer natrij klorida. Opcionalni aditivi uključuju konzervans ako formulacija nije napravljena sterilna, na primjer metil hidroksi-benzoat, anti-oksidante, mirisne agense, isparljiva ulja, sredstva puferiranja i surfaktante.

Prikladne formulacije za unošenje insuflacijom uključuju fino usitnjene praškove koji se mogu oslobađati pomoću insuflatora ili se uzimaju u nazalnu šupljinu na način šmrkanja. U insuflatoru, prah je sadržan u kapsulama ili nabojima, tipično napravljenim od želatine ili plastike, koji se ili probijaju ili otvaraju in situ i prah se oslobađa pomoću zraka guranog kroz uređaj po inhalaciji ili pomoću ručno-operativne pumpe. Upotrijebljeni prah u insuflatoru sadrži ili sam aktivni sastojak ili smjesu praha koja sadrži aktivni sastojak, prikladni razblaživač praha, kao što je laktoza, i opcionalni surfaktant. Aktivni sastojak tipično sadrži od 0,1 do 100 m/m formulacije.

Zato, prema daljnjem gledištu ovog izuma, osigurana je primjena spoja formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog solvata u dobivanju lijeka za profilaksu ili tretman upalnog stanja ili imunološkog oboljenja.

Spojevi prema izumu mogu se napraviti prema bilo kojem prikladnom postupku organske kemije. Zato prema daljnjem gledištu izuma, osiguran je postupak za dobivanje spoja formule (I), ili njegovih solvata koji obuhvaća reagiranje spoja formule (II):

[image]

ili njegovog aktivnog derivata sa spojem formule (III):

[image]

gdje Q, X, R1, R, R2 i R3 i n su kako je ranije definirano,

i opcionalno konvertiranje spoja formule (I) tako formiranog u različiti spoj formule (I) ili odgovarajući solvat.

Kada X je kisik, esterifikacija se može izvršiti standardnim postupcima, na primjer korištenjem kiseline katalizatora i, opcionalno, inertnog otapala kao što je toluen, benzen, ili ksilen. Prikladne kiseline katalizatori uključuju neorganske kiseline; na primjer sumporna kiselina, klorovodična kiselina, i fosforna kiselina; i organske kiseline, na primjer metansulfonska kiselina ili toluensulfonska kiselina. Esterifikacija se tipično vrši na povišenoj temperaturi, na primjer 50-150 °C, poželjno sa uklanjanjem vode formirane destilacijom.

Gdje X je kisik ili -NH-, reakcija se može vršiti prvim dobivanjem aktivnog derivata spoja formule (II). Prikladni aktivni derivati uključuju aktivne estere ili halide kiseline i mogu ili biti izolirani prije reakcije sa spojem formule (III) ili dobiveni in situ. Naročito korisni aktivni esteri spoja formule (II) su acilimidazoli koji se lako dobivaju reakcijom spoja formule (II) sa N,N1-karbonildiimidazolom.

Konverzija aktivnog derivata spoja formule (II) u spoj formule (I) može se vršiti u inertnom otapalu, optimalno u prisustvu ne-nukleofilne baze kao što su kalij t-butoksid, natrij hidrid, ili ne-nukleofilna organska baza, kao što je 1,8-diazabiciklo[5,4,0]undek-7-en.

Spoj formule (II) može se dobiti kako je opisano u PCT patentnoj prijavi br. GB 9501808.

Spojevi formule (III) komercijalno su raspoloživi ili se mogu dobiti postupcima iz literature. Na primjer R. A. Bartsch i dr.: "J. Org. Chem." 54, str. 857-860, (1989.); J. M. Harris, Macromol. J.: "Sci. Rev. Polymer Phys. Chem.", C 25 (3): str. 325-373, (1985.); i S .Zalosky: "Bioconjugate Chem." 6, str. 150-165, (1995.).

Alternativno, spojevi formule (I) mogu se dobiti kondenzacijom spoja formule (IV):

[image]

ili njegovog acetal derivata,

gdje

Q, X, R1, n i R su kako je ranije definirano,

sa 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracilom (koji se može dobiti kako je opisano u primjerima). Kondenzacija se prikladno vrši u polarnom otpalu na ne-ekstremnoj temperaturi kako je opisano u PCT prijavi No. GB9501808.

Spojevi formule (IV) mogu se dobiti spajanjem spoja formule (III) sa prikladnom karboksilnom kiselinom. Postupci za izvršavanje ovog spajanja i za dobivanje karboksilne kiseline opisani su u PCT patentnoj prijavi br. GB9501808.

Konverzija spoja fomule (I) u njegov solvat može se vršiti standardnim postupcima koji su poznati stručnjaku.

Izum će sada biti opisan samo kao ilustracija, slijedećim primjerima:

REFERENTNI PRIMJER

Primjer 1

(E)-4-[1,3 bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina

(a) 1,3-bis(cikloheksilmetil)urea

Smjesa cikloheksanmetilamina (Aldrich, 68,66 g) i 5N natrij hidroksida (Fisher, 200 ml) jako je miješana sa hlađenjem (-10 °C) dok je brzo dodana otopina fosgena (30,0 g) u toluenu (600 ml). Nakon miješanja tokom 20 minuta, rezultirajuća smjesa je filtrirana i staloženi čvrsti materijal je ispran sa vodom ( ~1500 ml) i osušen (0,5 Torr) radi dobivanja 1,3—bis(cikloheksilmetil)urea kao bijeli prah (72,72 g, 95 %), t.t. = 150-152 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) d: 5,74 (br t, J=5,8 Hz, 2, 2 NH); 2,81 (t, J=6,3 Hz, 4, 2 NCH2); 1,62, 1,25, i 0,85 (sve m, 22, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C15H28N2O: C, 71,38; H, 11,18; N, 11,10.

Nađeno: C, 71,22; H, 11,17; N, 11,15.

(b) 6-amino-1,3-bis(cikloheksilmetil)uracil

Ciano octena kiselina (Aldrich, 21,0 g) otopljena je u octenom anhidridu (260 ml). Ova otopina je dodana u 1,3-bis(cikloheksilmetil)urea (iz faze (a), 54,5 g) i otopina je održavana na 80 °C tokom 2 sata pod dušikom. Isparljive materije su uklonjene u vakuumu i preostalo ulje je osušeno isparavanjem dijelova od 10 % voda-etanol (3 × 400 ml). Preostale čvrste materije su otopljene u etanolu (600 ml)-vodi (300 ml) na 80 °C sa podešavanjem pH na 10 dodavanjem 10% vodenog natrij karbonata. Vruća otopina je razblažena sa vodom (75 ml) i ohlađena na sobnu temperaturu. Bezbojni kristali koji su formirani su filtrirani, isprani sa vodom (3 × 500 ml) i osušeni na 0,5 Torr radi dobivanja 6-amino-1,3-bis(cikloheksilmetil)uracil (64,98 g, 94 %), t.t. = 138-141 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 6,73 (br s, 2, NH2); 4,63 (s, 1, H-5); 3,67 (d, J=7,3 Hz, 2, NCH2); 3,57 (d, J=7,3 Hz, 2, NCH2); 1,55 i 1,09 (oba m, 22, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C18H29N3O2 H2O: C, 64,07; H, 9,26; N, 12,45.

Nađeno: C, 63,98; H, 9,27; N, 12,48.

(c) 6-amino-1,3-bis(cikloheksilmetil)-5-nitrosuracil

6-amino-1,3-bis(cikloheksilmetil)uracil (iz faze (b), 25,0 g) otopljen je u ledeno hladnoj octenoj kiselini (440 ml), vodi (440 ml) i etanolu (440 ml) na refluksu. U ovu otopinu dodan je natrij nitrit (5,65 g). Rezultirajuća smjesa je miješana kako je polako hlađena na sobnu temperaturu. Blijedi ljubičasto plavi talog je filtriran, ispran sa 1:1 voda-etanolom i osušen radi dobivanja 6-amino-1,3-bis(cikloheksilmetil)-5-nitrosuracil kao svijetlo ljubičasti kristali (23,46 g, 86 %), t.t. = 240-243 °C dec sa vrenjem.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 13.23 (br s, 1, =NOH); 9,00 (br s, 1,=NH); 3,73 (br t, J=6,86, 4, 2 NCH2); 2,0-1,6 i 1,7-1,1 (oba m, ukupno 22, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C18H28N4O3: C, 62,05; H, 8,10; N, 16,08.

Nađeno: C, 62,13; H, 8,12; N, 16,03.

(d) (E)-4-[1,3 bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina

Spoj iz naslova je dobiven od 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracila postupkom od J. Perutmattam: "Syn. Commun.", 19, str. 3367-3370, (1989.). 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracil je svježe dobiven sa tresenom smjesom 6-amino 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5-nitrosuracil (iz faze (c), 5,00 g) u metanolu (250 ml)-vodi (25 ml) sa 10 % paladijem na ugljiku (0,50 g) pod vodikom (344,75 KPa, 50 psi) u Parr-ovom tresaču tokom 2 sata. Katalizator je filtriran (Celite) i bezbojni filtrat je koncentriran na 25 ml. 4-formilcinaminska kiselina (Aldrich, 2,53 g, 14,35 mmola) dodana je u ovu otopinu 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracila i rezultirajuća žuta smjesa je koncentrirana, a preostali žuti čvrsti materijal je osušen isparavanjem pojedinih dijelova apsolutnog etanola. Rezultirajući žuti prah (Schiff-ova posredna baza) je miješan u dimetoksietanu (115 ml) sa jodom (4,0 g) na 60 °C (kada sa uljem) tokom 20 sati. Dodana je zasićena vodena otopina natrij tiosulfata u vruću reakcijsku smjesu dok se potpuno ne izgubi boja joda. Blijedo žuti talog je filtriran, ispran sa vodom, i osušen na 0,5 Torr radi dobivanja (E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminske kiseline kao blijedo žuti prah (6,73 g, 91 %), t.t. > 300 °C. Takvi uzorci su dalje pročišćeni njihovim otapanjem u 1N vodenom natrij hidroksidu, filtriranjem rezultirajuće zamaglene otopine preko Celite, i zakiseljavanjem bistrog filtrata sa klorovodičnom kiselinom. Rezultirajući talog je filtriran i ispran sa vodom radi dobivanja spoja iz naslova kao blijedo žuti prah, t.t. > 300 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 13,80 i 12,40 (oba br m, 1 svaki, CO2H i NH); 8,12 (d, J=8,3 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,84 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,64 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,64 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 3,93 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,79 (d, J=6,8 Hz, 2, CH2N); 2,0-1,4 i 1,3-0,85 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C28H34N4O4: C, 68,55; H, 6,99; N, 11,42.

Nađeno: C, 68,45; H, 6,98; N, 11,48.

SINTETIČKI PRIMJERI

Primjer 2

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina trietilen glikol metil eter ester

Trietilen glikol monometil eter (Aldrich, 80,0 g) osušen je isparavanjem dijelova ksilena (3 × 50 ml) pod strujom N2 na 125 °C. (E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina (iz faze (d) primjera 1, 4,00 g) je zatim dodana u glikol, i smjesa je dalje osušena isparavanjem ksilena (40 ml). Sumporna kiselina (0,41 g) je dodana u reakcijsku smjesu, koja je zatim zagrijavana do 190 °C. Ksileni su dodani u 50 ml dijelovima da zamjene ono što je izdestilizirano. Nakon 2 sata reakcijska smjesa je tretirana sa dodatnom sumpornom kiselinom (0,2 g). Nakon dodatna 3 sata na 140 °C, tokom kojeg vremena su ksileni trajno zamijenjeni, reakcijska smjesa je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu, što je izazvalo da se veliki dio čvrste tvari istaloži iz smeđe otopine. Smjesa je razblažena sa kloroformom (200 ml), i isprana sa vodom (4 × 50 ml). Organski sloj je osušen (natrij sulfat) i koncentriran radi dobivanja žutog čvrstog proizvoda, koji je kromatografiran na silikagelu. Spoj iz naslova je elutirao sa 1-4 % metanola u etil acetatu, i ponovno je kristaliziran iz etil acetata dodavanjem heksana radi dobivanja spoja iz naslova kao bijeli prah (3,2 g, 62 %), t.t. = 189-192 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,16 (d, J=8,0 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,88 (d, J=8,3 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,70 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 6,77 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,28 (m, 2, CO2CH2); 3,92 (d, J=6,8 Hz, 2, CH2N); 3,78 (d, J=6,8 Hz, 2, CH2N); 3,68 (m, 2, CH2O); 3,6-3,5 (m, 6, 3 CH2O); 3,40 (2, CH2O); 3,23 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C35H48N4O7: C, 66,02; H, 7,60; N, 8,80.

Nađeno: C, 65,91; H, 7,58; N, 8,76.

Primjer 3

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=7,2) metil eter ester

Suspenzija (E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminske kiseline (iz faze (d) primjera 1, 0,50 g) u poli(etilenglikol) monometil eteru (Aldrich, srednja molekularna težina 350,21 g, osušen isparavanjem toluena prije primjene) koja sadrži sumpornu kiselinu (51 mg) miješana je na 1 Torr tokom 15 minuta. Žuta reakcijska smjesa je zatim miješana na 190 °C (kada sa uljem) i 1 Torr tokom 3 sata, tokom kojeg vremena su čvrsti dijelovi otopljeni, ostavljajući smeđu otopinu. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, tamna otopina je sipana u vodu (100 ml). Vodena smjesa je miješana tokom 105 minuta prije ekstrakcije sa diklorometanom (3 × 30 ml). Kombinirani ekstrakti su zatim osušeni (natrij sulfat), i koncentrirani u voštani čvrsti materijal, koji je kromatografiran na C-18 obrnutoj fazi silikagela (EM Separations LiChroprep RP-18). Kolona je elucirana sa gradijentom od 10 % voda-metanola do čistog metanola; sirovi proizvod je eluciran u čisti metanol kao žuti voštani čvrsti materijal, koji je preveden u suspenziju u vodi (25 ml). Voda je zatim isparena pod vakuumom radi dobivanja spoja iz naslova kao žuti voštani čvrsti proizvod (620 mg, 61 %), t.t. = 147-154 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,15 (d, J=8,1 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,88 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,70 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,77 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 4,28 (m, 2, CO2CH2); 3,91 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,78 (d, J=7,1 Hz, CH2N); 3,68 (m, 2, CH2O); 3,6-3,38 (m, oko 25, oko 12,5 CH2O); 3,22 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)7,2 0,6 H2O: C, 62,56; H, 8,00; N, 6,69.

Nađeno: C, 62,62; H 8,01; N, 6,69.

Primjer 4

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina tetraetilen glikol metil eter ester

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=7,2) metil eter ester (iz primjera 3, 2,0 g) izdvojen je u njegove komponente preko ponovljene kromatografije korištenjem Chromatotron-a (Harrison Research). Dijelovi smjese estera (250-350 mg) u etil acetatu su primijenjeni na ploče od silicija debljine 1 mm koje su prethodno uravnotežene sa heksanima. Ploče su zatim elucirane sa gradijentom od 5-20 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže zasebne oligomere su izdvojene odvojeno, a identične frakcije iz raznih ploča su izvučene i koncentrirane. Sve izmiješane frakcije su kombinirane i ponovo kromatografirane. Na ovaj način je dobiven (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina tetraetilen glikol metil eter ester kao bijeli prah (43 mg), t.t. = 171-174 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,4 Hz, 2, .2 fenil CH); 7,72 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 6,80 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,94 (d, J=7,1 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,1 Hz, 2, CH2N); 3,71 (m, 2, CH2O); 3,58-3,42 (m, 12, 6 CH2O); 3,24 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)4 0,6 H2O: C, 64,25; H, 7,75; N, 8,10.

Nađeno: C, 64,11; H, 7,56; N, 8,07.

Primjer 5

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina pentaetilen glikol metil eter ester

Kromatografsko izdvajanje (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=7,2) metil eter estera (iz primjera 3, 2,0 g) u njegove komponente kako je opisano u primjeru 4 dalo je spoj iz naslova kao voštani čvrsti proizvod (92 mg), t.t. = 166-167 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,72 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,79 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,94 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,60-3,40 (m, 16,8 CH2O); 3,24 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)5 0,15 H2O: C, 64,38; H, 7,80; N, 7,70.

Nađeno: C, 64,44; H, 7,90; N, 7,57.

Primjer 6

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina heksaetilen glikol metil eter ester

Kromatografsko izdvajanje (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=7,2) metil eter estera (iz primjera 3, 2,0 g) u njegove komponente kako je opisano u primjeru 4 dalo je spoj iz naslova kao žuti voštani čvrsti proizvod (170 mg), t.t. = 160-162 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,74 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,79 (d, J=16,1 Hz, CH=); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,93 (d, J=6,8 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,2 Hz, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,60-3,40 (m, 20,10 CH2O); 3,24 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)6 0,20 H2O: C, 63,74; H, 7,88; N, 7,25.

Nađeno: C, 63,69; H, 7,92; N, 7,34.

Primjer 7

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina heptaetilen glikol metil eter ester

Kromatografsko izdvajanje (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=7,2) metil eter estera (iz primjera 3, 2,0 g) u njegove komponente kako je opisano u primjeru 4 dalo je spoj iz naslova kao žuti voštani čvrsti proizvod (105 mg), t.t. = 154-156 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,73 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,79 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,94 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,2 Hz, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,60-3,40 (m, 24, 12 CH2O); 3,24 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)7 0,25 H2O: C, 63,18; H, 7,95; N, 6,85.

Nađeno: C, 63,15; H, 7,97; N, 6,93.

Primjer 8

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina oktaetilen glikol metil eter ester

Kromatografsko izdvajanje (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=7,2) metil eter estera (iz primjera 3, 2,0 g) u njegove komponente kako je opisano u primjeru 4 dalo je spoj iz naslova kao žuti voštani čvrsti proizvod (120 mg), t.t. = 150-151 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,6 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,73 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,79 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,94 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,2 Hz, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,60-3,40 (m, 28, 14 CH2O); 3,24 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)8 0,25 H2O: C, 62,73; H, 8,01; N, 6,50.

Nađeno: C, 62,65; H, 8,10; N, 6,56.

Primjer 9

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina dekaetilen glikol metil eter ester

(a) dekaetilen glikol monometil eter

Kalij t-butoksid (Aldrich, 95 %, 239,24 g) je dodan u dijelovima tokom perioda od 75 minuta u otopinu trietilen glikol monometil etera (Aldrich, 300 ml, 1,9 mola) i 1,2-bis(2-kloroetoksi)etana (Aldrich, 500 g). Reakcijska temperatura održavana je na 16-20 °C za vrijeme dodavanja (kada sa ledom). Nakon uklanjanja kade za hlađenje reakcijska temperatura je dostigla 30 °C prije hlađenja na sobnu temperaturu. Reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, što je praćeno sa 18 sati na 110 °C, prije uklanjanja isparljivih tvari (19 Torr, 110-125 °C). Viskozni ostatak je zatim razblažen sa toluenom (1,7 l), i filtriran preko Celita. Toluen je destiliran tako da temperatura lonca nikad ne prijeđe 165 °C, i metil heksaetilen glikol klorid je zatim izoliran preko frakcijske destilacije svijetlo smeđeg ostatka (0,6 Torr, 155-190 °C, 95,78 g, 16%).

Kalij t-butoksid (Aldrich, 95 %, 39,0 g ) je dodan u otopinu tetraetilen glikola (Aldrich, 412,7 g) i metil heksaetilen glikol klorida od gornjeg (95,8 g) na 18 °C tokom perioda od 25 min (kada led/aceton). Reakcijska smjesa je zatim miješana na 120 °C preko noći. pH je podešen na 7 dodavanjem klorovodične kiseline (12N, 11,7 ml), i isparljive tvari su uklonjene (0,48 Torr, do 185 °C). Preostalo tamno ulje je razblaženo sa toluenom (250 ml), i tretirano sa kalcij kloridom (38,1 g). Nakon miješanja tokom 18 sati, smjesa je filtrirana preko Celita i koncentrirana u tamno ulje (102 g), koje je frakcijski destilirano radi dobivanja dekaetilen glikol monometil etera kao ulje boje jantara (64,4 g, 45 %).

Analitički uzorak je dobiven preko kromatografije na silikagelu, elutirajući sa 4 % metanola u kloroformu radi dobivanja bezbojnog ulja.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 4,58 (t, J=5,5 Hz, 1, OH); 3,58-3,38 (m, 40, 20 OCH2); 3,24 (s, 3, OCH3).

Analitički izračunato za C21H44O11: C, 53,37; H, 9,38.

Nađeno: C, 53,09; H, 9,47.

(b) (E)-metil 4-(dimetoksimetil)cinamat

4-formilcinaminska kiselina dimetil acetal (Cleeland, Jr., i dr. US patent 3.969.373) (20,00 g) i anhidrirani kalij karbonat (12,44 g) miješani su u anhidriranom N,N-dimetilformamidu (189 ml) tokom 5 minuta. Metil jodid (12,8 g) je dodan i rezultirajuća smjesa je jako miješana sa blagim zagrijavanjem (kada sa uljem na 40 °C) tokom 18 sati. Isparljive tvari su isparene u vakuumu i ostatak je podijeljen između heksana (400 ml) i vode (100 ml). Sloj heksana je osušen (magnezij sulfat) i isparen radi dobivanja (E)-metil 4-(dimetoksimetil)cinamata kao blijedo žuto ulje (18,98 g, 89%).

1H-NMR (DMSO-d6) skladan sa strukturom.

Analitički izračunato za C13H16O4: C, 66,09; H, 6,83.

Nađeno: C, 65,96; H, 6,86.

(c) 4-formilcinaminska kiselina dekaetilen glikol metil eter ester

Otopina metil 4-(dimetoksimetil)cinamata (iz faze (b), 4,96 g), dekaetilen glikol monometil etera (iz faze (a), 14,87 g), i titan (IV) izopropoksida (Aldrich, 1,05 ml) miješan je na 110 °C pod visokim vakuumom tokom 18 sati. Rezultirajuće crno ulje je zatim ohlađeno na 35 °C, tretirano sa klorovodičnom kiselinom (1N, 24,5 ml), i ekstrahirano sa toluenom (3 × 100 ml). Kombinirani ekstrakti koncentrirani su u tamno ulje, koje je kromatografirano na silikagelu. Spoj iz naslova je elucirano sa metanolom u kloroformu kao žuto ulje (4,60 g, 34 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 10,54 (s, 1, CHO); 7,98 (m, 4, 4 fenil CH); 7,76 (d, J=16 Hz, 1, CH=); 6,88 (d, J=16 Hz, 1, CH=); 4,31 (m, 2, CO2CH2); 3,70 (m, 2, OCH2); 3,51 (m, 36, 18 OCH2); 3,25 (s, 3, OCH3).

Analitički izračunato za C31H50O13 0,65 H2O: C 537,96; H, 8,05.

Nađeno: C, 57,95; H, 7,95.

(d) (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina dekaetilen glikol metil eter ester

Spoj iz naslova je dobiven od 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracila postupkom od J. Perutmattam: "Sys. Commun.", 19, str. 3367-3370, (1989.). Na način iz faze (d) iz primjera 1, 6-amino 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5-nitrosuracil (iz faze (c) primjera 1, 2,00 g) konvertiran je u 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracil, koji je zatim kombiniran sa 4-formilcinaminska kiselina dekaetilen glikol monometil eter esterom (iz faze (c), 3,62 g) u etanolu (50 ml). Rezultirajuća žuta smjesa je koncentrirana, i rezultirajući žuti polučvrsti materijal je osušen isparavanjem nekih dijelova apsolutnog etanola. Rezultirajući žuti polučvrsti materijal (Schiff-ova posredna baza) je zatim miješan u dimetoksietanu (60 ml) sa jodom (1,60 g, 6,31 mmola) na 50 °C (kada sa uljem) tokom 18 sati. Dodana je dovoljno zasićena vodena otopina natrij tiosulfata u vruću reakcijsku smjesu radi dobivanja potpunog nestanka boje joda. Vodena smjesa je koncentrirana na volumen od 20 ml, razblažena sa vodom (50 ml), i ekstrahirana sa kloroformom (4 × 50 ml). Kombinirani organski slojevi su zatim osušeni (magnezij sulfat) i koncentrirani radi dobivanja uljnog čvrstog materijala, koji je kromatografiran na silikagelu. Spoj iz naslova je eluciran u 6 % metanolu u kloroformu kao žuto ulje (3,6 g), koje je podijeljeno između kloroforma (150 ml) i vode (50 ml). Organski sloj je koncentriran, i rezultirajuće ulje je istaloženo iz diklorometana dodavanjem heksana radi dobivanja žutog praha, koji je zatim ispran sa heksanima i osušen pod vakuumom na 56 °C (2,57 g, 47 %), t.t. = 143-145 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,16 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,88 (d, J=8,5 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,70 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,78 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 4,29 (m, 2, CO2CH2); 3,92 (d, J=7,1 Hz, 2, CH2N); 3,78 (d, J=7,1 Hz, 2, CH2N); 3,69 (t, J=4,6 Hz, 2, CH2O); 3,60-3,35 (m, 36, 18 CH2O); 3,23 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C49H76N4O14: C, 62,28; H, 8,10; N, 5,93.

Nađeno: C, 62,14; H, 8,06; N, 6,02.

Primjer 10

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(a) Nonaetilen glikol monometil eter

Smjesa heksaetilen glikola (Aldrich, 100 g) i benzil bromida (Aldrich, 12 g) u vodenom natrij hidroksidu (50%(m/m), 80 ml) miješana je na 100 °C (kada sa uljem) pod dušikom tokom 2 sata. Reakcijska smjesa je zatim ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa vodom na ukupni volumen od 500 ml, i ekstrahirana je sa dietil eterom (200 ml) radi uklanjanja dibenziliranog proizvoda. Natrij klorid (100 g) je dodan u vodeni sloj, koji je ekstrahiran dalje sa dietil eterom (6 × 100 ml). Ovi ekstrakti etera su kombinirani, osušeni (natrij sulfat), i koncentrirani radi dobivanja heksaetilen glikol monobenzil etera kao ulje (25 g, 20 % bazirano na glikolu).

1H-NMR (CDCl3) �:7,30 (m, 5, 5 fenil CH); 4,53 (s, 2, benzil CH2); 3,69-3,54 (m, 22, 11 OCH2); 3,06 (br s, 3, OH i CH2O).

Otopina toluen sulfonil klorida (Aldrich, 38 g) i trietilen glikol monometil etera (Aldrich, 16,4 g) u suhom piridinu (150 ml) miješana je na 0 °C (kada s ledom) tokom 4 sata, što je praćeno sa 18 sati na sobnoj temperaturi. Otopina je zatim sipana u ledeno hladnu vodu (500 ml) i ekstrahirana sa dietil eterom (3 × 300 ml). Ekstrakti etera su kombinirani, isprani sa klorovodičnom kiselinom (3N) i vodom, osušeni (natrij sulfat), i koncentrirani radi dobivanja trietilen glikol metil tozil etera kao bezbojno ulje (20,0 g, 62 % bazirano na glikolu).

1H-NMR (CDCl3) �: 7,75 (d, J=8,0 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,30 (d, J=8,1 Hz, 2, 2 fenil CH); 4,11 (t, J=4,8 Hz, 2, CH2OS); 3,65-3,41 (m, 10, 5 CH2O); 3,32 (s, 3, CH3O) i 2,40 (s, 3, benzilni CH3).

Otopina heksaetilen glikol monobenzil etera od gore (22,3 g) u anhidriranom THF (100 ml) dodana je u suspenziju 50 % NaH (3,5 g) u anhidriranom THF (100 ml). Suspenzija je miješana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta i zatim je dodana ukapavanjem otopina trietilen glikol metil tozil etera od gore (22,0 g) u THF (100 ml). Smjesa je refluksirana pod dušikom preko noći, ohlađena na sobnu temperaturu, ugašena sa vodom (500 ml), i ekstrahirana sa dietil eterom (3 × 300 ml). Ekstrakti etera su kombinirani, osušeni (natrij sulfat), i koncentrirani u vakuumu radi dobivanja nonaetilen glikol benzil metil estera kao ulje (27 g, 88 %).

1H-NMR (CDCl3) �: 7,31 (m, 5, 5 fenil CH); 4,54 (s, 2, benzil CH2); 3,62-3,52 (m, 36, 18 CH2O); 3,35 (s, 3, CH3).

Otopina nonaetilen glikol benzil metil etera od gore (38 g) u metanolu (200 ml) tresana je sa 10 % paladija na aktiviranom ugljiku (Aldrich, 1,0 g) pod vodikom (344,75 KPa, 50 psi) u Parr-ovom aparatu preko noći. Katalizator je filtriran (Celite), i filtrat je koncentriran u vakuumu radi dobivanja nonaetilen glikol monometil etera kao ulje (23 g, 74 %).

1H-NMR (CDCl3) �: 3,67-3,47 (m, 36, 18 OCH2); 3,32 (s, 3, CH3).

Analitički izračunato za C19H40O10: C, 53,26; H, 9,41.

Nađeno: C, 53,25; H, 9,41.

(b) (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol monometil eter ester

Smjesa 4-formilcinaminske kiseline (Aldrich, 22,0 g), nonaetilen glikol monometil etera (iz faze (a), 60,0 g), i toluen sulfonske kiseline (Aldrich, 10 g) u suhim ksilenima (600 ml) refluksirana je tokom 4 sata (kada sa uljem) dok se ne sakupi oko 2,0 ml (110 mmola) vode u Dean Stark posudi. Reakcijska smjesa je koncentrirana na oko 100 ml, ohlađena na sobnu temperaturu, i propuštena kroz kolonu silikagela. 4-formilcinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester elutirana je sa kloroform:acetonom (60:40) kao ulje (72 g, 97 %).

1H-NMR (CDCl3) �: 10,01 (s, 1, CHO); 7,89 (d, J=8,1 Hz, 2, 2 fenil CH);7,71 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 7,66 (d,J=8,0 Hz, 2, 2 fenil CH); 6,57 (d, J=16,1 Hx, 1, CH=); 4,37 (m, 2, CO2CH2); 3,77 (m, 2, CH2O); 3,67-3,52 (m, 32, 16 CH2O); 3,35 (s, 3, CH3).

Spoj iz naslova je dobiven od 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracila postupkom od J. Perutmattam: "Syn. Commun.", 19, str. 3367-3370, (1989.). Na način iz faze (d) primjera 9, 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracil (iz faze (d) primjera 1, 10,4 g) kondenziran je sa 4-formilcinaminska kiselina nonaetilen glikol monometil eterom od gore (18,0 g) radi dobivanja spoja iz naslova kao svijetlo žuti čvrsti proizvod (20,0 g, 74 %), t.t. = 143-145 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,28 (d, J=8,3 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,74 (d, J=16,2 Hz, 1, CH=); 7,67 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 6,55 (d, J=15,9 Hz, 1, CH=); 4,40 (m, 2, CO2CH2); 4,08 (d, J=6,9 Hz, 2, CH2N); 4,00 (d, J=7,3 Hz, 2, CH2N); 3,80 (m, 2, CH2O); 3,72-3,52 (m, 32, 16 CH2O); 3,35 (s, 3, CH3); 2,05-1,03 (m, 22, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C47H72N4O13: C, 62,65; H, 8,05; N, 6,32.

Nađeno: C, 62,40; H, 7,92; N, 6,42.

Primjer 11

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=11,7) metil eter ester

Suspenzija (E)-4-[1,3 bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminske kiseline (iz faze (d) primjera 1, 5,50 g) u poli(etilenglikol)monometil eteru (Aldrich, srednja molekularna težina 550, 365 g, osušen isparavanjem toluena prije primjene) koja sadrži sumpornu kiselinu (0,57 g) miješana je na 1 Torr tokom 15 minuta. Žuta reakcijska smjesa je zatim miješana na 190 °C (kada sa uljem) i 1 Torr tokom 3 sata, za koje vrijeme su čvrsti dijelovi otopljeni, prelazeći u smeđu otopinu. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, tamna otopina je sipana u vodu (150 ml). Vodena smjesa je miješana tokom 90 minuta prije ekstrakcije sa diklorometanom (3 × 120 ml). Kombinirani ekstrakti su isprani sa vodom (150 ml) i pH vodenog sloja je podešen na vrijednost 6,5 dodavanjem koncentriranog amonij hidroksida. Nakon sušenja (natrij sulfat), ekstrakti su koncentrirani i rezultirajuće ulje je kromatografirano na C-18 povratnoj fazi silikagela (EM Separations LiChroprep RP-18). Kolona je elucirana sa gradijentom od 30 % voda-metanol do čistog metanola; sirovi proizvod je eluciran u čistom metanolu. Ovaj narančasti voštani čvrsti materijal je dalje kromatografiran na silikagelu. Spoj iz naslova je eluciran u 1-5 % metanolu u kloroformu kao žuti voštani čvrsti materijal, koji je zatim otopljen u kloroformu i staložen preko dodavanja heksana radi dobivanja spoja iz naslova kao svijetlo-žuti voštani čvrsti proizvod (6,34 g, 56 %), t.t. = 140-143 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,15 (d, J=8,5 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,88 (d, J=8,5 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,70 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,77 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,28 (m, 2, CO2CH2); 3,92 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,78 (d, J=17,2 Hz, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,6-3,35 (m, ca 42, ca 10,5 CH2CH2O); 3,23 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)11,6 0,4 H2O: C, 61,30; H, 8,20; N, 5,48.

Nađeno: C, 61,24; H, 8,26; N, 5,54.

Primjer 12

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina heksaetilen glikol ester

(a) 4-formilcinaminska kiselina heksaetilen glikol ester

(E)-metil 4-(dimetoksimetil)cinamat (iz faze (b) primjera 9, 16,1 g, 68,1 mmola), i titanij izopropoksid (Aldrich, 6,34) miješani su u višku sirovog heksaetilen glikol mono(tetrahidropiranil) etera (J. W. Cornforth, E. D. Morgan, K. T. Potts, R. J .W. Rees: "Tetrahedron" 29, str. 1659-1667, (1973.), 52,76 g) na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Otopina je zatim miješana pod vakuumom (2 Torr) na 120 °C tokom 4 sata. Nakon hlađenja otopine na 32 °C, dodana je klorovodična kiselina (1N, 80 ml, 80 mmola). Rezultirajuća vodena otopina je miješana tokom 90 minuta na 32-40 °C prije razblaživanja sa vodom (10 ml). Otopina je miješana dodatnih 30 minuta prije dodavanja drugog dijela od 10 ml vode. Nakon 2,5 sata, otopina je ohlađena na sobnu temperaturu i ekstrahirana sa toluenom (3 × 100 ml). Toluen ekstrakti su kombinirani, osušeni (natrij sulfat), i koncentrirani u ulje (33,81 g), koje je kromatografirano na silikagelu. Spoj je eluciran u 10 % metanolu u etil acetatu, i osušeno je isparavanjem etanola radi dobivanja spoja iz naslova kao voštani čvrsti proizvod (8,80 g, 29 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 10,06 (s, 1, CHO); 7,98 (m, 4, 4 fenil CH); 7,77 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,88 (d, J=16,0 Hz, CH=); 4,60 (m, 1, OH); 4,31 (m, 2, CO2CH2); 3,71 (m, 2, CH2O); 3,51 (m, 20, 10 CH2O).

Analitički izračunato za C22H32O9 0,35 H2O 0,25 C2H6O: C, 58,97; H, 7,52.

Nađeno: C, 58,43; H, 7,40.

(b) (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina heksaetilen glikol ester

Spoj iz naslova je dobiven od 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracila postupkom od J. Perutmattam: "Syn. Commun.", 19, str. 3367-3370, (1989.). Na način faze (d) primjera 9, 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracila (iz faze (d) primjera 1, 7,68 g) kondenziran je sa 4-formilcinaminska kiselina heksaetilen glikol esterom (iz faze (a), 10,52 g) radi dobivanja spoja iz naslova kao svijetlo žuti čvrsti proizvod (8,0 g, 45 %), t.t. = 165-168 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,17 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,90 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,78 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,80 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 4,60 (m, 1, OH); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,93 (d, J=6,9 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,2 Hz, 2, CH2N); 3,71 (m, 2, CH2O); 3,65-3,40 (m, 20, 10 CH2O); 2,1-1,5 i 1,6-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C40H58N4O10 0,9 H2O: C, 62,30; H, 7,82; N, 7,27.

Nađeno: C, 62,33; H, 7,80; N, 7,26.

Primjer 13

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=23,9) metil eter ester

(a) (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6-(1H,3H)-dion

Suspenzija (E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminske kiseline (iz faze (d) primjera 1, 2,97 g ) u anhidriranom N,N-dimetilformamidu (50 ml) grijana je kratko do blizu refluksa pod dušikom. N,N'-karbonildiimidazol (Lancaster Synthesis, 1,17 g) dodan je zatim u blijedo žutu suspenziju, koja se prorijedila i postala narančasta kada se razvio plin. Unutar nekoliko minuta suspenzija je postala svijetlo žuta i zgusnula se kako se formirao žuti čvrsti materijal. Smjesa je miješana tokom 18 sati, razblažena sa diklorometanom (30 ml), i filtrirana. Umetak svijetlo žutog filtera ispran je sa diklorometanom (30 ml), i djelomično je osušen sa zrakom. Vlažni čvrsti materijal je zatim osušen na 0,1 Torr i 40 °C radi dobivanja (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-diona kao žuti prah (3,25 g, 96 %), t.t. = 310 °C (dec).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,74 (s, 1, imidazol CH); 8,20 (d, J=8,9 Hz, 2, 2 fenil CH); 8,06 (d, J=7,7 Hz, 2,2 fenil CH); 8,03 (d, J=14,8 Hz, 1, CH=); 7,93 (s, 1, imidazol CH); 7,72 (d, J=15,7 Hz, 1, CH=); 7,14 (s, 1, imidazol CH); 3,92 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,77 (d, J=7,4 Hz, 2, CH2N); 2,00-1,50 i 1,25-0,90 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C31H36N6O3 0,35 C3H7NO: C, 67,98; H, 6,84; N, 15.71.

Nađeno: C, 67,93; H 6,67; N, 15,92.

(b) (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=23,9) metil eter ester

Suspenzija (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-diona (iz faze (a), 2,25 g) u anhidriranom N,N-dimetil formamidu (50 ml) zagrijana je na 60 °C (kada sa uljem) pod dušikom. Dodan je poli(etilenglikol) monometil eter (Shearwater Polymers, srednja molekularna težina 1100, 4,80 g, osušen isparavanjem toluena prije primjene) u žarko žutu suspenziju, što je praćeno 1,8-diazabiciklo[5,4,0] undek-7-enom (Aldrich, 658 ml). Dodavanje baze dalo je duboko crvenu reakcijsku smjesu i izazvalo je skoro kompletno otapanje acil imidazola. Crvena smjesa je miješana na 60 °C tokom 2,5 dana, za koje vrijeme su otopljeni svi čvrsti dijelovi. pH svijetlo crvene otopine je zatim podešen na vrijednost od 5 dodavanjem sumporne kiseline. Isparljive tvari su uklonjene iz rezultirajuće svijetlo žute otopine na 0,24 Torr i 47 °C radi dobivanja žutog ulja (11,37 g) koje je kromatografirano na C-18 povratnoj fazi silikagela (EM Separations LiChroprep RP-18). Kolona je elucirana sa gradijentom od 40 % voda-metanola do čistog metanola; sirovi proizvod je eluciran u čistom metanolu radi dobivanja žutog čvrstog materijala (10,25 g), koji je dalje kromatografiran na silikagelu. Spoj iz naslova je elucirao sa 4-10 % metanola u diklorometanu kao blijedo žuto staklo (5,73 g, 92 %), koje je triturirano sa heksanima radi dobivanja voštanog žutog čvrstog proizvoda, t.t. = 97-98 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,6 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,72 (d, J=15,8 Hz, 1, CH=); 6,79 (d, J=15,9 Hz, 1, CH=); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,94 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,8 Hz, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,57-3,41 (m, ca 88, ca 44 CH2O); 3,25 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)23,4 0,30 H2O: C, 59,02; H, 8,53; N, 3,58.

Nađeno: C, 59,05; H, 8,57; N, 3,62.

Primjer 14

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=41,5) metil eter ester

Na način iz primjera 13, (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-dion (iz faze (a) primjera 13, 2,16 g) spojen je sa poli(etilenglikol) monometil eterom (Aldrich, srednja molekularna težina 2000, 9,60 g) radi dobivanja spoja iz naslova kao žuti prah (6,80 g, 76 %), t.t. = 56-64 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,72 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,80 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,70-4,00 (m, 6, 2 CH2N, i CH2O); 3,70-3,40 (m, ca 160, ca 80 CH2O); 3,25 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)41,5: C, 57,67; H, 8,73; N, 2,40.

Nađeno: C, 57,51; H, 8,51; N, 2,31.

Primjer 15

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=15) metil eter ester

Na način iz primjera 13, (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-dion (iz faze (a) primjera 13, 2,16 g, 3,84 mmola) spojen je sa poli(etilenglikol) monometil eterom (Aldrich, srednja molekularna težina 750, 3,30 g, 4,40 mmola) radi dobivanja spoja iz naslova kao žuti voštani čvrsti proizvod (3,30 g, 74 %); t.t. = 124-125 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,2 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,91 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,72 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,80 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 4,31 (m, 2, CO2CH2); 3,94 (m, 2, CH2N); 3,80 (m, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,6-3,4 (m, ca 58, ca 29 CH2O); 3,25 (s, 3, CH3); 1,8-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C29H36N4O4 (C2H4O)15 0,5 H2O: C, 57,67; H, 8,73; N, 2,40.

Nađeno: C, 57,51; H, 8,51; N, 2,31.

Primjer 16

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=32,2) ester

(E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-dion (iz faze (a) primjer 13, 1,69 g) dodan je u istopljeni poli(etilenglikol) (Aldrich, srednja molekularna težina 1500, 90,0 g, 60,0 mmola, osušen isparavanjem toluena prije primjene) pod dušikom. Žuta suspenzija je razblažena sa anhidriranim N,N-dimetil formamidom (40 ml), i zagrijavana na 60 °C (kada sa uljem). 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (Aldrich, 494 ml) je zatim dodan, dajući tamno crvenu reakcijsku smjesu i izazivajući skoro kompletno otapanje acil imidazola. Smjesa je miješana na 60 °C tokom 16,5 sati, za koje vrijeme su otopljeni svi čvrsti dijelovi. pH narančaste otopine je zatim podešen na 5 preko dodavanja sumporne kiseline. Isparljive tvari su uklonjene iz rezultirajuće žute otopine na 0,7 Torr i 50 °C, i preostalo narančasto ulje je kromatografirano na C-18 povratnoj fazi silikagela (EM Separations LiChroprep RP-18). Kolona je elucirana sa gradijentom od 40 % voda-metanola do čistog metanola; sirovi proizvod je eluciran u čistom metanolu radi dobivanja žutog filma (8,50 g), koji je dalje kromatografiran na silikagelu. Spoj iz naslova je eluciran sa 6-15 % metanolom u diklorometanu kao blijedo žuto staklo 95,83 g), koje je triturirano sa heksanima radi dobivanja voštanog žutog čvrstog proizvoda (4,773 g, 83 %); t.t. = 83-84 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 13,92 (s, 1 NH); 8,14 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,87 (d, J=8,5 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,68 (d, J=15,7 Hz, CH=); 6,76 (d, J=16,1 Hz, CH=); 4,56 (t, J=5,5 Hz, 1, OH); 4,26 (m, 2, CO2CH2); 3,90 (d, J=7,3 Hz, 2, CH2N); 3,76 (d, J=6,9 Hz, 2, CH2N); 3,66 (m, CH2O); 3,6-3,2 (m, ca 120, ca 60 CH2O); 2,0-1,5 i 1,3-0,8 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C28H34N4O4 (C2H4O)32,2 0,2 H2O: C, 58,02; H, 8,60; N, 2,93.

Nađeno: C, 58,01; H, 8,59; N, 2,92.

Primjer 17

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=18,9) ester

Na način iz primjera 16, (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-dion (iz faze (a) primjera 13, 1,69 g) spojen je sa poli(etilenglikolom) (Aldrich, srednja molekularna težina 1000, 60,0 g,) radi dobivanja spoja iz naslova kao žuti voštani čvrsti proizvod (2,747 g, 85 %), t.t. < 40 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 13,88 (s, 1, NH); 8,11 (d, J=8,0 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,83 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,66 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 6,73 (d, J=16,1 Hz, 1, CH=); 4,55 (t, J=5,5 Hz, OH); 4,26 (m, 2, CO2CH2); 3,87 (d, J=6,9 Hz, 2, CH2N); 3,74 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,66 (m, 2, CH2O); 3,6-3,3 (m, ca 88, ca 40 CH2O, preklapanje H2O); 2,1-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 cikloheksil).

Analitički izračunato za C28H34N4O4 (C2H4O)18,9 1,2 H2O: C, 58,77; H, 8,39; N, 4,17.

Nađeno: C, 58,77; H, 8,28; N, 4,10.

Primjer 18

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina polietilen glikol (n=13) ester

Na način iz primjera 16, (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-dion (iz faze (a) primjera 13, 5,553 g) spojen je sa poli(etilenglikolom) (Dow, srednja molekularna težina 600, 121,0 g) radi dobivanja spoja iz naslova kao žuti voštani čvrsti proizvod (6,94 g, 64 %), t.t. = 142-143 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,18 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,90 (d, J=8,4 Hz, 2, 2 fenil CH); 7,72 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 6,79 (d, J=16,0 Hz, 1, CH=); 4,58 (t, J=5,3 Hz, OH); 4,30 (m, 2, CO2CH2); 3,94 (d, J=7,2 Hz, 2, CH2N); 3,80 (d, J=7,0 Hz, 2, CH2N); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,61-3,42 (m, ca 48, ca 24 CH2O); 2,01-1,5 i 1,3-0,9 (oba br m, 22 ukupno, 2 ciklo heksil).

Analitički izračunato za C28H34N4O4 (C2H4O)13 1 H2O: C, 59,98; H, 8,20; N, 5,18.

Nađeno: C, 59,96; H, 8,18; N, 5,13.

Primjer 19

3-{4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]fenil}propionska kiselina

nonaetilen glikol monometil eter ester

Otopina (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol monometil eter estera (iz faze (b) primjer 10, 200 mg) u izopropanolu (50 ml) miješana je pod H2 (0,02 bara) u prisustvu 10 % paladija na aktiviranom ugljiku (Aldrich, 40 mg) u Büchi Pressflow Hydrogenator tokom 23 sata. Katalizator je filtriran (Celite), i isparljive tvari su isparene pod vakuumom. Kloroform (5 × 10 ml) je isparen iz uljnog ostataka, koji je, nakon sušenja (0,2 mm Hg, 50 °C) dao spoj iz naslova kao voštani žuti čvrsti proizvod (165 mg, 83 %), t.t. = 85-86 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) u skladu sa strukturom.

Analitički izračunato za C47H74N4O13: C, 62,51; H, 8,26; N, 6,21.

Nađeno: C, 62,39; H, 8,27; N, 6,27.

Primjer 20

3-{[4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]fenil}propionska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(a) 3-{4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]fenil}-2,3-dibromo propionska kiselina etil ester

Otopina 0,64 g (4,0 mmola) broma u 10 ml kloroforma dodana je u izmiješanu otopinu 1,90 g (3,66 mmola) (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina eter estera u 25 ml kloroforma. Smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, zatim je otapalo je ispareno radi prinosa spoja iz naslova kao bijeli čvrsti proizvod. (2,5 g, 100 %).

1H-NMR (CDCl3) �: 8,31 (d, J=8,4 Hz, fenil CH, 2H); 7,56 (d, J=8,4 Hz, fenil CH, 2H); 5,40 (d, J=11,7 Hz, CHBr, 1H); 4,83 (d, J=11,7 Hz, CHBr, 1H); 4,38 (q, J=7,3 Hz, CO2CH2, 2H); 4,08 (d, J=7,2 Hz, CH2N, 2H); 4,03 (d, J=7,3 Hz, CH2N, 2H); 2,04 (m, c-heksil CH, 1H); 1,89 (m, c-heksil CH, 1H); 1,5-1,8 (m, c-heksil CH2, 10 H); 1,39 (t, J=7,3 Hz, terminal-CH3, 3H); 1,0-1,3 (m, c-heksil CH2, 10 H).

(b) 3-{4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]fenil}propionska kiselina

2,8 g (4,1 mmola) 3-{4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]fenil}-2,3-dibromo-propionska kiselina etil estera (dio ovog primjera) dodano je u 56 ml 1M kalij t-butoksida u t-butanolu (Aldrich) na sobnoj temperaturi. Smjesa je miješana na sobnoj temperaturi tokom 2,5 sata, zatim 0,10 ml vode je dodano. Otopina je dodatno miješana tokom 1 sata, a zatim je dodano 1 g ugljika u 250 ml vode. Smjesa je miješana tokom 30 minuta zatim je filtrirana. Filtrat je zakiseljen sa koncentriranom klorovodičnom kiselinom (pH = 1), zatim je rezultirajuća suspenzija miješana tokom 15 minuta, i filtrirana, a zatim isprana sa 3 × 50 ml vode. Čvrsti materijal je osušen pod sniženim tlakom radi dobivanja 1,63 g (81 %) spoja iz naslova.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,15 (d, J=8,0 Hz, fenil CH, 2H); 7,73 (d, J=8,0 Hz, fenil CH, 2H); 3,87 (d, J=6,6 Hz, CH2N, 2H); 3,74 (d, J=6,8 Hz, CH2N, 2H); 1,88 (br s, c-heksil CH, 1H); 1,4-1,8 (m, c-heksil CH, CH2, 11H); 0,8-1,2 (m, c-heksil CH2, 10H); MS (ES-): 487 (M-1); 443 (M-1-CO2).

(c) 3-{4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]fenil}propionska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

Otopina 324 mg (2.0 mmola) 1,1'-karbonildiimidazola u 10 ml acetonitrila dodana je u izmiješanu otopinu 650 mg (1,33 mmola) 3-{4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]fenil}propionske kiseline u 40 ml anhidriranog tetrahidrofurana. Smjesa je miješana tokom 4 sata, zatim je dodano 40 ml acetonitrila, i suspenzija je miješana tokom dodatnih 30 minuta i filtrirana. Čvrsti proizvod je ispran sa 2 × 10 ml acetonitrila i osušen preko noći pod sniženim tlakom, zatim je pomiješan sa 10 ml anhidriranog dimetil formamida. Nonaetilen glikol monometil eter (857 mg) je dodan u suspenziju i smjesa je miješana pod dušikom. 1,8-diazabiciklo[5,4,0]undek-7-en (300 µl) je dodan ukapavanjem i crvena otopina je miješana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, pa zatim dodatno na 40 °C tokom 1 sata. Otopina je ohlađena na 20 °C, dodano je 100 ml metilen klorida, i pH je podešen na 5 sa 1M kalij vodik sulfatom. Faze su izdvojene i vodena faza je isprana sa 2 × 20 ml metilen klorida. Kombinirane organske faze su osušene sa anhidriranim magnezij sulfatom, zatim su filtrirane. Filtrat je koncentriran pod sniženim tlakom, i ostatak je pročišćen kromatografijom na silikagelu koristeći etil acetat/etanol (9:1) kao eluenta, radi dobivanja 105 mg (9%) spoja iz naslova.

1H-NMR (CDCl3) �: 8,27 (d, J=8,3 Hz, fenil CH, 2H); 7,71 (d, J=8,3 Hz, fenil CH, 2H); 4,41 (t, J=4,6 Hz, CO2CH2, 2H); 4,06 (d, J=7,3 Hz, CH2N, 2H); 3,97 (d, J=7,2 hz, CH2N, 2H); 3,78 (t, J=4,8 Hz, CH2O, 2H); 3,6-3,7(m, 15 CH2, 30 H); 3,52 (m, CH2O, 2H); 3,34 (s, OCH3, 3H); 2,04 (m, c-heksil CH, 1H); 1,85 (m, c-heksil CH, 1H); 1,6-1,8 (m, c-heksil CH, CH2, 10H); 1,0-1,2 (m, c-heksil CH2, 10 H); MS (FAB+): 899 (M+1); 921 (M+Na).

Primjer 21

(E)-3-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(a) (E)-3-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina

Kao dio (d) primjera 1, 6-amino 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5-nitrosuracil (iz faze (c) primjera 1, 2,79 g, 8,00 mmola) je reduciran na 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracil, i kondenziran je sa 3-formilcinaminskom kiselinom (T. Higa, A. J .Krubsack: "J. Org. Chem.", 40, str. 3037-3045, (1975.), 1,424 g) radi dobivanja (E)-3-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminske kiseline kao potpuno bijeli čvrsti proizvod (1,947 g, 49%), t.t. > 350 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) u skladu sa strukturom.

Analitički izračunato za C28H34N4O4 0,10 H2O: C, 68,30; H, 7,00; N, 11,38.

Nađeno: C, 68,33; H, 6,93; N, 11,34.

(b) (E)-3-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina neetilen glikol metil eter ester

Suspenzija (E)-3-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminske kiseline (iz faze (a), 0,50 g) u anhidriranom N,N-dimetilformamidu (10 ml) grijana je kratko do blizu refluksa pod dušikom. N,N'-karbonildiimidazol (Aldrich, 0,202 g, 1,22 mmola) je zatim dodan u blijedo žutu suspenziju, koja se prorijedila i postala narančasta kako se plin razvijao. Unutar 1 minute suspenzija je postala sjajno žuta i zgusnula se dok se formirao čvrsti materijal. Smjesa je miješana tokom 18 sati, razblažena sa diklorometanom (30 ml), i filtrirana. Sjajno žuti čvrsti materijal je ispran sa diklorometanom (30 ml), i osušen na 40 °C radi dobivanja (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(3-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-diona kao žuti prah (0,403 g). U smjesu ovog spoja (0,40 g, 0,74 mmola) i nonaetilen glikol monometil etera, (dio (a) primjera 10, 0,350 g) u N,N-dimetil formamidu (10 ml) dodan je 1,8-diazabiciklo[5,4,0]undek-7-en (Aldrich, 0,112 g). Rezultirajuća otopina je miješana na 55 °C tokom 20 sati. Otopina je ohlađena na sobnu temperaturu i podešena na pH = 7 dodavanjem 1N HCl. Kloroform (50 ml) je dodan i otopina je isprana sa vodom (2 × 20 ml). Kombinirani organski slojevi su isprani sa slanom vodom, osušeni (magnezij sulfat) i koncentrirani pod sniženim tlakom. Preostali voštani čvrsti materijal je kromatografiran na silikagelu elucijom sa 10% metanol/kloroformom radi dobivanja (E)-3-[1,3-bis(cikloheksil)metil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter estera kao bijeli voštani čvrsti proizvod (0,421 g, 63 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,53 (s, 1, aril CH); 8,13 (d, J=7,7, 1, aril CH); i 7,80 (d, J=8,5, 1, aril CH); 7,71 (d, J=16, 1, 1, CH=) 7,58; (m,1, aril CH); 6,78; (d,J=15,9, 1, CH=) 4,28 (m, 2, CH2O); 3,91, (d, J=7,2, 2, CH2N); 3,77 (d, J=7,2, CH2N); 3,68 (m, 2, CH2O); 3,70-3,40 (m, 32, 16 CH2); 3,21 (s, 3, CH3); 2,1-1,6 i 1,4-1,0 (m, 22, cikloheksil CH2 i CH).

Analitički izračunato za C47H72N4O13: C, 62,65; H, 8,05; N, 6,22.

Nađeno: C, 62,57; H, 7,83; N, 6,50.

Primjer 22

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter amid

(a) 2,5,8,11,14,17,20,23,26-nonaokso-oktakozil-28-amin

Natrij hidrid (8,6 g, 344 mmola kao 95 %) dodan je u otopinu heksaetilen glikola (Aldrich, 100 g) u anhidriranom tetrahidrofuranu (1000 ml) na 15 °C. Rezultirajuća smjesa je miješana uz dolaženje na sobnu temperaturu tokom 1 sata. Benzil bromid (Aldrich, 59,9 g) je dodan ukapavanjem tokom 1 sata i rezultirajuća smjesa je miješana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Ohlađena smjesa je razblažena sa vodom (200 ml) i ekstrahirana sa dietil eterom (3 × 350 ml). Kombinirani dietil eter ekstrakti su isprani sa vodom (2 × 100 ml). Kombinirani vodeni slojevi su zasićeni sa natrij kloridom i ekstrahirani sa metilen kloridom (4 × 400 ml). Kombinirani slojevi metilen klorida su isprani sa zasićenim natrij kloridom (200 ml) i osušeni (magnezij sulfat). Uklanjanje isparljivih tvari pod sniženim tlakom ostavilo je heksaetilen glikol monobenzil eter (80,5 g, 64 %).

1H-NMR identičan sa onim opisanim u dijelu (a) primjera 10.

Otopina heksaetilen glikol monobenzil etera (80,0 g) u anhidriranom THF (750 ml) dodana je u suspenziju natrij hidrida (95 %, 5,4 g) u tetrahidrofuranu. Rezultirajuća smjesa je miješana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta, i zatim je dodana ukapavanjem otopina trietilen glikol metil tozil etera (dobiven kako je opisano u dijelu (a) primjera 1, 68,4 g) u THF (100 ml). Smjesa je refluksirana pod dušikom preko noći. Dodatni natrij hidrid (2,5 g) je dodan i refluks je nastavljen dodatna 24 sata. Smjesa je ohlađena (kada sa ledom), ugašena sa vodom (2 l), i ekstrahirana sa dietil eterom (2 × 200 ml). Organski sloj je ispran sa metilen kloridom (2 × 250 ml). Kombinirani organski slojevi su osušeni (magnezij sulfat) i koncentrirani u smeđe ulje koje je filtrirano preko umetka silikagela sa metilen kloridom. Metilen klorid je isparen radi ostavljanja nonaetilen glikol benzil metil etera kao ulje (63,1 g, 57 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 7,23 (m, 5, 5 fenil CH); 4,38 (s, 2 benzil CH2); 3,50-3,30 (m, 36, 18 CH2O); 3,13 (s, 3, CH3).

Otopina nonaetilen glikol benzil metil eter (10 g, 19,3 mmola) u etanolu (200 ml) tresana je sa 10 % paladija na aktiviranom ugljiku (Aldrich, 1,0 g) pod vodikom (344,75 KPa, 50 psi) u Parr-ovom aparatu tokom 3 sata. Katalizator je filtriran (Celite), i filtrat je koncentriran u vakuumu i osušen isparavanjem toluena radi dobivanja nonaetilen glikol monometil etera kao ulje (8,17 g, 99 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 4,56 (t, 1 OH); 3,60-3,35 (m,36, 18 OCH2); 3,22 (s, 3, CH3).

U otopinu nonaetilen glikol monometil etera (2,0 g, 4,7 mmola) u piridinu (15 ml) na 0 °C dodan je toluensulfonil klorid (1,35 g). Nakon miješanja na sobnoj temperaturi preko noći, smjesa je ohlađena na 0 °C i podešena na pH = 2 dodavanjem 12N HCl. Voda (200 ml) je dodana i otopina je isprana sa metilen kloridom (3 × 50 ml). Kombinirani organski slojevi su isprani sa slanom vodom, osušeni (magnezij sulfat) i ispareni radi dobivanja nonaetilen glikol metil tozil etera kao bezbojno ulje (2,7 g).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 7,85 i 7,55 (2d, 4, C6H4); 4,18 (m, 2, CH2OTos); 3,7-3,45 (m 34, 17 CH2); 3,2 (s, 3, OCH3)2,40 (s, 3, CH3).

U otopinu nonaetilen glikol metil tozil etera (2,6 g, 4,42 mmola) u N,N-dimetilformamidu (10 ml), dodan je natrij azid (Aldrich, 0,35 g) i natrij jodid (Aldrich, 20 mg). Otopina je refluksirana tokom 18 sati, ohlađena na sobnu temperaturu, i razblažena sa kloroformom (50 ml). Otopina je isprana sa vodom (2 × 10 ml) i organski sloj je osušen (magnezij sulfat) i koncentriran u bezbojno ulje (2,25 g). Ulje je otopljeno u etanolu (100 ml), i miješano sa 10 % paladija na ugljiku (Aldrich, 200 mg) pod vodikom (103,425 KPa, 15 psi) tokom 48 sati na Buchi-jevom aparatu za hidrogenaciju. Katalizator je uklonjen filtriranjem (Celite) i otapalo je ispareno radi ostavljanja 2,5,8,11,14,17,20,23,26-nonaokso-oktakozil-28-amina kao bezbojno ulje (1,59 g, 77 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 3,60-3,40 (m, 36, 18 CH2 i NH2); 3,20 (3, CH3); MS (CI) 428 (100 %, M+1).

(b) (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter amid

U smjesu (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6(1H,3H)-diona (dio (a) primjera 13), (0,5 g, 0,92 mmola) i 2,5,8,11,14,17,20,23,26-nonaokso-oktakozil-28-amina (dio (a) ovog primjera, 0,43 g, 1,0 mmola) u N,N-dimetil formamidu (10 ml) dodan je 1,8-diazabiciklo[5,4,0]undek-7-en (Aldrich, 0,168 g). Rezultirajuća crvena otopina je miješana na 55 °C tokom 18 sati. Dodatni amin (0,43 g) je dodan i grijanje je nastavljeno tokom dodatnih 20 sati. Rezultirajuća otopina je ohlađena na sobnu temperaturu i podešena na pH = 7,0 dodavanjem 1N klorovodične kiseline. Voda (25 ml) je dodana i otopina je isprana sa etil acetatom (50 ml). Organski sloj je ispran sa slanom vodom, osušen (magnezij sulfat) i koncentriran pod sniženim tlakom. Kromatografija na silikagelu elucirala je spoj iz naslova sa 10 % metanol-kloroforma. Isparavanje otapala dalo je spoj iz naslova kao žuti čvrsti proizvod (64 mg, 8 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,24 (t, 1, NH); 8,15 (d, J=8,4, 2, 2 aril CH); 7,69 (d, J=8,3, 2, 2 aril CH); 7,47 (d, J=15,5, 1, CH=); 6,75 (d, J=15,8, 1, CH=); 3,92 (d, J=7,1, 2, CH2N); 3,78 (d, J=7,2, 2,CH2N); 3,6-3,3 (m, 36, 18 CH2); 3,23 (s, 3, CH3); 2,0-1,5 i 1,25-0,95 (oba m, 22, cikloheksil CH2 i CH).

Analitički izračunato za C47H73N5O12 0,85 H2O: C, 61,67; H, 8,22; N, 7,65.

Nađeno: C, 61,66; H, 8,07; N, 7,67.

Primjer 23

(E)-3-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(a) (E)-3-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina

1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracil je dobiven kao dio (d) primjera 1 redukcijom 1,6-amino 1,3-bis (cikloheksilmetil)-5-nitrosuracil (2,00 g) i neposredno je kondenziran sa 3-formilbenzoevom kiselinom (Aldrich, 1,424 g) sa postupkom J. Perumattam: "Synthetic Commun.", 19, str. 3367-3370, (1989.) radi dobivanja spoja iz naslova kao potpuno bijeli čvrsti proizvod (2,27 g, 85 %), t.t. > 250 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) u skladu sa strukturom.

Analitički izračunato za C26H32N4O4: C, 67,22; H, 6,94; N, 12,06.

Nađeno: C, 67,10; H, 6,97; N, 12,04.

(b) (E)-3-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

Suspenzija (E)-3-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeve kiseline (iz dijela (a) ovog primjera, 0,500 g) u anhidriranom N,N-dimetilformamidu (10 ml) grijana je kratko do blizu refluksa pod dušikom. N,N'-karbonildiimidazol (Aldrich, 0,213 g) je dodan u blijedo žutu suspenziju, koja je razrijeđena i postala narančaste boje kako se plin razvijao. Unutar minuta suspenzija je postala sjajno žuta i istaložio se žuti čvrsti materijal. Smjesa je miješana tokom 18 sati, razblažena sa diklorometanom (30 ml), i filtrirana. Čvrsti materijal je ispran sa diklorometanom (30 ml) i osušen na 40 °C radi dobivanja (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-[3-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil]-9H-purin-2,6(1H, 3H)-diona kao žuti prah (0,46 g). Smjesa ovog čvrstog materijala (0,45 g), nonaetilen glikol monometil etera, (iz dijela (a) primjera 10, 0,393 g ) i anhidriranog kalij karbonata (0,242 g) u acetonitrilu (10 ml) miješana je na refluksu tokom 20 sati. Dodan je kloroform (50 ml) i otopina je isprana sa 1N HCl (20 ml). Organski sloj je ispran sa slanom vodom, osušen (magnezij sulfat), i kromatografiran na silikagelu. Elucija sa isparavanjem otapala 10 % metanol-kloroforma dala je (E)-3-[1,3-bis(ciklohesilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetil glikol metil eter estera kao voštani čvrsti proizvod (0,262 g, 38 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,79 (s) i 8,43 (d, J=7,9); 8,11 (d, J=8,0); i 7,57 (m, svaki 1, C6H4); 4,50 (m, 2, CH2O); 3,99 (d, J=7,1, 2, CH2N); 3,83 (m, 4, CH2N i CH2O); 3,70-3,40 (m, 32, 16 CH2); 3,28 (s, 3,CH3); 2,1-1,6 i 1,4-1,0 (oba m, 22, cikloheksil CH2 i CH).

Analitički izračunato za C45H70N4O13 0,52 H2O: C, 61,05; H, 8,10; N, 6,33.

Nađeno: C, 61,05; H, 8,09; N, 6,25.

Primjer 24

(E)-4-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(a) (E)-4-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina

1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracil je dobiven kao dio (d) primjera 1 sa redukcijom 1,6-amino 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5-nitrosuracila (1,00 g) i neposrednim kondenziranjem sa 4-formilbenzoevom kiselinom (Aldrich, 1,424 g) postupkom od J. Perumattam: "Synthetic Commun.", 19, str. 3367-3370, (1989.) radi dobivanja spoja iz naslova kao potpuno bijeli čvrsti proizvod (720 mg, 54 %), t.t. > 300 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) u skladu sa strukturom.

Analitički izračunato za C26H32N4O4: C, 67,23; H, 6,94; N, 12,06.

Nađeno: C, 67,29; H, 6,98; N, 12,02.

(b) (E)-4-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonatilen glikol metil eter ester

Suspenzija (E)-4-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeve kiseline (iz dijela (a) ovog primjera, 0,50 g) u anhidriranom N,N-dimetilformamidu (10 ml) grijana je kratko prije refluksa pod dušikom. N,N'-karbonildiimidazol (Aldrich, 0,211 g) je zatim dodan u blijedo žutu suspenziju, koja je razrijeđena i postala narančaste boje uz razvoj plina. Unutar minuta suspenzija je postala sjajno žuta i zgusnula se kako se formirao žuti čvrsti materijal. Smjesa je miješana tokom 18 sati, razblažena sa diklorometanom (30 ml), i filtrirana. Sjajno žuti čvrsti materijal je ispran sa diklorometanom (30 ml), i osušen na 40 °C radi dobivanja (E)-1,3-bis(cikloheksilmetil)-8-[3-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil]-9H-purin-2,6-(1H,3H)-diona kao žuti prah (0,32 g). Smjesa ovog uzorka (0,32 g), nonaetilen glikol monometil etera (iz dijela (a) primjera 10, 0,277 g) i anhidriranog kalij karbonata (0,170 g) u acetonitrilu (10 ml) je refluksirana tokom 20 sati. Dodan je kloroform (50 ml) i otopina je isprana sa 1N HCl (20 ml). Organski sloj je ispran sa slanom vodom, osušen (magnezij sulfat), i eluciran iz kolone silikagela sa 10 % metanol-kloroformom. Isparavanje otapala dalo je žuti voštani čvrsti materijal koji je ponovno istaložen iz etil acetat-heksana. Žuti voštani čvrsti talog je filtriran i osušen do (E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester (0,355 g, 65 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,24 (d, J=8,4, 2, 2 CH); 8,06 (d, I=8,6, 2, 2 CH); 4,40 (m, 2, CH2O); 3,90 (d, J=7,3, 2, CH2N); 3,75 (m, 4, CH2N i CH2O); 3,70-3,40 (m, 32, 16 CH2); 3,19 (s, 3, CH3); 2,1-1,6 i 1,4-1,0 (m, 22, cikloheksil CH2 i CH).

Analitički izračunato za C45H70N4O13: C, 61,77; H, 8,06; N, 6,40.

Nađeno: C, 61,55; H, 7,99; N, 6,52.

Primjer 25

(E)-2-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(a) (E)-2-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina

1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracil je dobiven kao u dijelu (d) primjera 1 redukcijom 1,6-amino 1,3-bis (cikloheksilmetil)-5-nitrosuracila (2,00 g) i odmah kondenziran sa 2-formilbenzoevom kiselinom (Aldrich, 1,424 g) postupkom od J. Perumattam: "Synthetic Commun.", 19, str. 3367-3370, (1989.) radi dobivanja spoja iz naslova kao potpuno bijeli čvrsti proizvod (1,22 g, 46 %), t.t. = 271-274 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) u skladu sa strukturom.

Analitički izračunato za C26H32N4O4: C, 67,22; H, 6,94; N, 12,06.

Nađeno: C, 67,25; H, 6,99; N, 12,11.

(b) (E)-2-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(E)-2-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina (iz dijela (a) ovog primjera, 0,100 g) konvertirana je postupkom (b) iz primjera 24 u (E)-2-[(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester (0,892 g, 43 %), kao ulje boje jantara.

1H-NMR (DMSO-d6) �: 7,80-7,50 (m, 4, 4 aromatični CH); 4,20 (m, 2, CH2O); 3,80-3,60 (m, 4, 2CH2N); 3,50-3,20 (m, 34, 17 CH2); 3,20, (s, 3, CH3); 1,9-1,4 i 1,2-0,8 (m, 22 cikloheksil).

Analitički izračunato za C45H70N4O13 0,85 EtOAc 0,64 H2O: C, 60,50; H, 8,18; N, 5,83.

Nađeno: C, 60,50; H, 8,19; N, 5,83.

Primjer 26

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-6-okso-2-tioxo-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester

(E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-6-okso-2-tioxo-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina (WO 96/04280, 500 mg, 0,99 mmola) esterificirana je sa nonaetilen glikol metil eterom postupkom iz dijela (b) primjera 24. Spoj iz naslova je izoliran kao žuti voštani čvrsti proizvod (0,145 g, 20 %).

1H-NMR (DMSO-d6) �: 8,17 (d,J=8,4, 2, 2 aril CH); 7,90 (d, J=8,4, 2, 2 aril CH); 7,69 (d, J=15,9, 1, CH=); 6,77 (d, J=16,1, 1, CH=); 4,53 (d, J=7,0, 2, CH2N); 4,40 (d, J=7,0, 2, CH2N); 4,25 (m, 2, CH2O); 3,70 (m, 2, CH2O); 3,6-3,3 (m, 32, 16 CH2); 3,23 (s, 3, CH3); 2,4-2,0 (2m, 2, 2CH od cikloheksila); 1,80-1,60 i 1,20-1,0 (oba m, 20, cikloheksil CH2).

Analitički izračunato za C47H73N4O12S 0,89 H2O: C, 60,49; H, 7,97; N, 6,00; S, 3,44.

Nađeno: C, 60,49; H, 7,70; N, 6,31; S, 3,55.

Primjer 27

U smjesu (E)-1,3-bis-(cikloheksilmetil)-8-(3-(2-(1H-imidazol-1-ilkarbonil)vinil)fenil)-9H-purin-2,6-(1H,3H)-diona (60,75 g, 0,112 mola) i kalij karbonata (31,0 g, 0,225 mola) u acetinitrilu (650 ml) dodan je nonaetilen glikol monometil eter, (dio (a) primjera 10, 57,8 g, 135 mmola). Smjesa je refluksirana tokom 18 sati, ohlađena je na sobnu temperaturu, i razblažena sa kloroformom (1200 ml). Otopina kloroforma je isprana sa 1N klorovodičnom kiselinom (800 ml), vodom (500 ml), i slanom vodom (2 × 200 ml) i osušena je (magnezij sulfat). Isparavanje kloroforma dalo je sirovi spoj iz naslova kao žuti voštani čvrsti materijal. Ovaj čvrst materijal je kromatografiran dva puta na silikagelu, prvo koristeći 10 % metanol-kloroforma i zatim koristeći 10 % metanol-etil acetata kao eluenta, radi dobivanja spoja iz naslova kao žuti voštani čvrsti materijal. Ponovno taloženje iz kloroform-heksana i sušenje u vakuumu dali su spoj iz naslova kao žuti čvrsti voštani proizvod (64,5 g, 65 %).

1H-NMR identičan uzorku opisanom u primjeru 10, dio (b).

Analitički izračunato za C47H72N4O13: C, 62,65; H, 8,05; N, 6,22.

Nađeno: C, 62,33; H, 7,94; N, 6,25.

PRIMJERI FARMACEUTSKE FORMULACIJE

U slijedećim primjerima, "aktivni sastojak" može biti bilo koji spoj formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol ili solvat, poželjno spoj iz primjera 2 do 26.

(1) Formulacije tablete

(i) Oralno

[image]

(ii) Podjezično

[image]

Formulacije A do E mogu se dobiti vlažnom granulacijom prvih šest sastojaka sa povidonom, što je praćeno dodavanjem magnezij stearata i kompresijom.

(iii) Usno

[image]

Formulacija se može dobiti direktnom kompresijom izmiješanih sastojaka.

(2) Formulacije kapsule

(i) Prah

[image]

Formulacije F i G mogu se dobiti miješanjem sastojaka i punjenjem dvodjelnih čvrstih želatinskih kapsula sa rezultirajućom smjesom.

(ii) Tekuće punjenje

[image]

Formulacija H može se dobiti topljenjem makrogola 4000 BP, raspršivanjem aktivnog sastojka u istopinu i punjenjem dvodjelnih čvrstih želatinskih kapsula sa ovim materijalom. Formulacija I može se dobiti raspršivanjem aktivnog sastojka u lecitin i arachis ulje i punjenjem mekih, elastičnih želatinskih kapsula sa disperzijom.

(iii) Kontrolirano oslobađanje

[image]

Formulacija se može dobiti miješanjem i izbacivanjem prva 4 sastojka i oblikovanjem u sferu i sušenjem onog što je izbačeno. Suhe pilule se presvlače sa etil celulozom kao membranom kontroliranog oslobađanja i pune se u dvodjelne, čvrste želatinske kapsule.

(3) Formulacija intravenozne injekcije

(i) % maseni

aktivni sastojak 2 %

natrij hidroksid q.s na pH 7

voda za injekcije na 100 %

Aktivni sastojak se uzima u citrat puferu i dovoljno klorovodične kiseline se doda da se utječe na otopinu i da se podesi pH na 7. Rezultirajuća otopina je napravljena sadržinski i filtrira se preko filtera sa mikroporama u sterilne staklene vijale i hermetički se zatvaraju.

Primjer G: Kapsule praha za inhalaciju

aktivni sastojak (0,5-7,0 µm praha) 1,0 mg

laktoza (30-90 µm praha) 49,0 mg

Praškovi se miješaju dok se ne homogeniziraju i pune se u tvrde želatinske kapsule prikladne veličine (50 mg po kapsuli).

Primjer H: Aerosol za inhalaciju

aktivni sastojak (0,5-7,0 µm praha) 50,0 mg

sorbitan trioleat 100,00 mg

natrij saharin (0,5-7 µm praha) 5,0 mg

metanol 2,0 mg

triklorofluorometan 4,2 g

diklorodifluorometan do 10,0 ml

Sorbitan trioleat i metanol se otope u trikloro-fluorometanu. Natrij saharin i aktivni sastojak se rasprše u smjesu koja se zatim prenese u prikladni aerosolni kanister i diklorofluorometan se ubrizga preko sistema ventila. Ovaj preparat daje 0,5 mg aktivnog sastojka u svakoj dozi od 100 µl.

BIOLOŠKA AKTIVNOST

1) Pokus Carrageenan Pleurisy

Anti upalna aktivnost spojeva iz izuma određena je postupkom od Vinegar, R, i dr.: "Proc,. Soc. Exp. Biol. Med.", 168, str. 24-32, (1981.) koristeći mužjake Lewis štakora od 150 ± ±}20 grama. Carrageenan doza je bila 0,075 mg/štakor. Pleuralno znojenje je sakupljeno 4 sata nakon injekcije carrageenena. Akutna antiupalna aktivnost je određena inhibicijom pleuralnog edema i upalnih stanica (neutrofili) od negativne (nosač) kontrolne grupe.

2) Pokus kolitisa octene kiseline

Anti-upalna aktivnost spojeva iz izuma je određena u modelu štakora kolitisa octene kiseline koristeći postupak od Fretland, D., i dr.: 255, str. 572-576, (1990.) kod mužjaka Lewis štakora od 275 +25 grama. Spojevi su unošeni ili oralno ili rektalno 24, 16 i 4 sata prije 40-sekundnog kapanja 3 % otopine octene kiseline u proksimalno 6 cm debelog crijeva pod blagom anestezijom. Debelo crijevo je odmah isprano sa 5 cc slane vode. 24 sata kasnije štakori su žrtvovani, a 6 cm proksimalno debelog crijeva je izvađeno odmjereno za edem. Neutrofilna upala je određena mjerenjem MPO nivoa u ostruganoj sluzi ovih štakora. Anti-upalna aktivnost je određena inhibicijom formiranja edema i sluzavih MPO nivoa uspoređenih sa negativnom kontrolnom grupom (nosač).

Rezultati

[image]

NT = nije testirano

ic = unošenje preko debelog crijeva

po = oralno unošenje

Matična kiselina, tj. spoj iz referentnog primjera 1 je neaktivno u oba ogleda.

3) In vivo model septičkog šoka: C Parvum/LPS Shock

Mužjaci CD-1 miševa, 25-30 g (Charles River: , ), intravenozno se injektiraju (i.v.) sa 100 µµ}g neutraliziranih C. Parvum (Coparvax; Burroughs Welcome, ). Deset dana kasnije miševima se uštrca i.v. 20 µµ}g E. Coli 026:B6 lipopolisaharida (LPS; Difco Labs, ) u prisustvu analgetskog butorfenola (150 µµ}g po mišu).

Testirani spojevi su otopljeni u dimetil sulfoksidu i razblaženi u 0,5 % metil celulozu i zatim su dozirana oralno 2 sata prije LPS i u isto vrijeme kao LPS.

Rezultati

[image]

Claims

1. Spoj formule (I) [image] ili njegov solvat, naznačen time što: X je -O- ili -; Q je (-CH2-)p, (-CH=CH-)p, -(C≡C-)p, gdje je p cijeli broj od 0 do 4; R1 je vodik ili metil; R2 i R3 neovisno predstavljaju O ili S; n je cijeli broj od 1 do 50; i R je vodik ili metil. R2 i R3 neovisno predstavljaju =O ili =S.

2. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time što X je -O- ili -NH- i R1 je H.

3. Spoj prema zahtjevu 1 ili 2, naznačen time što je n cijeli broj od 8 do 20.

4. Spoj prema zahtjevu 3, naznačen time što je n cijeli broj od 8-15.

5. Spoj prema bilo kojem zahtjevu 1-4, naznačen time što R3 predstavlja O, i R2 predstavlja O ili S.

6. Spoj prema zahtjevu 5, naznačen time što R2 i R3 predstavljaju O.

7. Spoj prema bilo kojem zahtjevu 1-6, naznačen time što p predstavlja 0 ili 1.

8. Spoj prema bilo kojem zahtjevu 1-7, naznačen time što Q predstavlja (-CH=CH-)p.

9. Spoj prema bilo kojem prijašnjem zahtjevu, naznačen time što [image] supstituent je vezan na fenil prsten u para položaju.

10. Spoj formule (Ia) [image] ili njegov solvat, naznačen time što: X je -O- ili -; Q je (-CH2-)p, (-CH=CH-)p, -(C≡C-)p gdje p je cijeli broj od 1 do 4; R1 je vodik ili metil; n je cijeli broj od 1 do 50; i R je vodik ili metil.

11. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time što se odnosi na spojeve: (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina dekaetilen glikol metil eter ester; (E)-4-(1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il)cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester; (E)-3-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter ester; (E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]cinaminska kiselina nonaetilen glikol metil eter amid; i (E)-4-[1,3-bis(cikloheksilmetil)-1,2,3,6-tetrahidro-2,6-diokso-9H-purin-8-il]benzoeva kiselina nonaetilen glikol metil eter ester.

12. Spoj prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 11 ili njegov farmaceutski prihvatljivi solvat, naznačen time što se primjenjuje u terapiji.

13. Farmaceutski preparat, naznačen time što sadrži spoj ili njegov farmaceutski prihvatljiv solvat prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 11 zajedno sa farmaceutski prihvatljivim razblaživačem ili nosačem.

14. Spoj prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 11 ili njegov farmaceutski prihvatljivi solvat, naznačen time što se primjenjuje za proizvodnju lijeka za tretman upalnih stanja i imunoloških bolesti.

15. Postupak tretiranja upalnih stanja i imunoloških bolesti kod subjekta u njegovoj potrebi, naznačen time što obuhvaća unošenje u spomenuti subjekt terapeutski efikasne količine spoja prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 11 ili njegovog farmaceutski prihvatljivog solvata.

16. Postupak za dobivanje spoja prema zahtjevima 1-11 ili njegovih solvata, naznačen time što obuhvaća reagiranje spoja formule (II) [image] ili njegovog aktivnog derivata sa spojem formule (III) [image] gdje Q, X, R1, R i n su kako je definirano u zahtjevu 1 i opcionalno konvertiranje spoja formule (I) tako formiranog sa različitim spojem formule (I) ili sa odgovarajućim solvatom.

17. Postupak za dobivanje spoja formule (I), naznačen time što obuhvaća kondenziranje spoja formule (IV): [image] ili njegovog acetal derivata, gdje Q, X, R1, n i R su kako je prije definirano, sa 1,3-bis(cikloheksilmetil)-5,6-diaminouracilom.