CZ288799A3

CZ288799A3 - Substituované purin-8-ylfenylové deriváty

Info

Publication number: CZ288799A3
Application number: CZ19992887A
Authority: CZ
Inventors: Susan Mary Daluge; Douglas Alan Livingstone; Gerald Wolberg
Original assignee: Glaxo Group Limited
Priority date: 1997-02-14
Filing date: 1998-02-12
Publication date: 2000-04-12
Also published as: EA199900648A1; IL131179A0; HUP0000894A2; PE58899A1; BG103722A; DE69831559D1; ZA981175B; TW520371B; US20030181471A1; NO993915L; WO1998035966A1; ES2249822T3; EP0970081A1; HU225962B1; US7002012B2; CO4940444A1; DK0970081T3; EP0970081B1; ATE304542T1; NZ336923A

Description

Oblast techniky

Vynález se týká komplexních esterů a amidů fenylxanthinových derivátů, způsobu výroby těchto látek, jakož i farmaceutického prostředku, který tyto látky obsahuje a je určen zejména k léčení septického šoku, zánětlivých stavů a poruch imunitního systému.

Dosavadní stav techniky

Septický šok je vyvolán kombinací příčin, vzniku tohoto chorobného stavu se účastní řada různých mediátorů, jak je popsáno například v The Lancet, sv.338 (1991) str.732-739 a Annals of Internal Medicine sv.115 (1991) str.457-469, a to včetně produktů metabolismu kyseliny arachidonové a zhlukování destiček.

Přilnutí bílých krvinek z oběhu na endothel cév je základním jevem při vzniku zánětlivé odpovědi. Mediátory zánětu a imunitní reakce mohou podporovat toto přilnutí zvýšením schopnosti leukocytů přilnout k příslušným buňkám jejich aktivací nebo indukcí různých adhezivních molekul na povrchu buněk.

Protizánětlivé látky, které jsou v současné době dostupné, mají omezenou účinnost a často také nežádoucí vedlejší účinky. Monoklonální protilátky, pokusně užité k léčení svrchu uvedeného jevu mají při léčení chronických onemocnění teoretické nevýhody. Je tedy zřejmé, že by bylo výhodné mít k dispozici malé molekuly, schopné specificky vyvolat blokování nebo inhibici adhezivních interakcí leukocytů a endothelu cév.

V mezinárodní patentové přihlášce PCT GB 9501808 se popisují sloučeniny obecného vzorce

1«

kde man jsou nezávisle celá čísla 0 až 10, (-Q-) znamená (CH₂-)_p nebo (-CH=CH-)_p kde p je celé číslo 1 až 4 a

A a B nezávisle znamenají methyl, alkyl o 3 až 6 atomech uhlíku s rozvětveným řetězcem nebo cykloalkyl nebo cykloalkenyl vždy o 3 až 8 atomech uhlíku, jakož i soli, solváty a farmaceuticky přijatelné estery a amidy těchto látek a jejich použití při léčení septických šoků, alergií a zánětlivých stavů. Bylo prokázáno, že uvedené látky inhibují jeden nebo větší počet enzymů ze skupiny 5-lipoxygenáza, cyklooxygenáza a lyso-PAF:acetyl-CoA acetyltransferáza.

Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že skupina komplexních esterů a amidů určitých fenylxanthinových derivátů vyvolává inhibici exprese adhezivních molekul na endotheliálních buňkách pupeční žíly člověka při pěstování v buněčné kultuře (HUVEC), a to při velmi.nízkých koncentracích, takže tyto látky jsou vhodné pro léčení zánětlivých stavů a poruch imunitního systému.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří substituované purin-8-ylfenylové deriváty obecného vzorce I

kde

X znamená -O- nebo -NH-,

Q znamená (-CH₂-) _p, . (-CH=CH-) _p, (-C=C-)_p, kde p znamená celé číslo 0 až 4,

R¹ znamená atom vodíku nebo methyl,

R² a R³ znamená nezávisle O nebo S, n je. celé číslo 1 až 50 a R znamená atom vodíku nebo methyl, jakož i .solváty těchto sloučenin.

Vynález zahrnuje například sloučeniny obecného vzorce I, v nichž X znamená -O- nebo -NH- a R¹ znamená atom vodíku.

Z těchto látek jsou výhodné zejména ty sloučeniny, v nichž n znamená celé číslo 8 až 20 a zvláště takové, v nichž n znamená celé číslo 8 až 15.

Vhodným významem pro R³ je atom kyslíku, R² znamená atom kyslíku nebo síry, s výhodou však znamenají oba uvedené symboly atomy kyslíku.

Ve sloučeninách podle vynálezu znamená p s výhodou číslo 0 nebo 1.

Podle dalšího provedení se vynález týká sloučenin obecného vzorce I, v nichž Q znamená (-CH=CH-)_p.

Substituent obecného vzorce — (Q)

je na fenylový kruh s výhodou vázán v poloze para. Vynález zahrnuje také směsi sloučenin obecného vzorce

I v jakémkoliv poměru, může jit například o směs sloučenin s různým významem symbolu n.

Zvláštní podskupinu sloučenin podle vynálezu tvoří sloučeniny obecného vzorce la

Q znamená (-CH₂-)_p nebo (-CH=CH-)_p, kde p je celé číslo 1 až 4,

R¹ znamená atom vodíku nebo methyl, n znamená celé číslo 1 až 50 a

R znamená atom vodíku nebo methyl, a také solváty těchto sloučenin.

Zvláště výhodné .jsou následující sloučeniny:

Dekaethylenglykolmethyletherester kyseliny (E)-4-(l,3

-bis(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin8-yl)skořicové

Nonaethylenglykolmethyletherester kyseliny (E)-4(1,3-bis(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo -9H-purin-8-yl)skořicové,

Nonaethylenglykolmethyletherester kyseliny (E)-3-/1,3 -bis(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin8-yl/skořicové,

Nonaethylenglykolmethyletheramid kyseliny (E)-4-/1,3bis(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8 -yl/skořicové a

Nonaethylenglyko.lmethyletherester kyseliny (E)-4-/1, 3 -bis(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin8-yl/benzoové, jakož i solváty těchto sloučenin.

Sloučeniny podle vynálezu mohou existovat ve formě geometrických a optických isomerů. Všechny tyto isomery jednotlivě i ve formě směsí spadají do rozsahu vynálezu. V případě, že Q obsahuje dvojnou vazbu, jsou výhodnější sloučeniny s E-geometrií.

Jak již bylo uvedeno, je možno sloučeniny obecného vzorce I a jejich solváty použít při prevenci a léčení zánětlivých stavů a poruch imunitního systému, jak bude dále prokázáno výsledky biologických pokusů, při nichž byla prokázána účinnost sloučenin podle vynálezu.

Jako příklady zánětlivých stavů nebo poruch imunitního systému je možno uvést poruchy plic, kloubů, očí, tlustého střeva, pokožky a srdce, zvláště takové, při nichž dochází k infiltraci leukocytů do zánětlivé tkáně. V případě plic jde například o astma, syndrom nedostatečnosti dýchacího ústrojí u dospělých, zánět průdušek a cystickou fibrozu, která může také napadat tlusté střevo nebo jiné tkáně. V případě kloubů

jde například o reumatoidní arthritis nebo spondylitis, osteoarthritis nebo záněty kloubů při dně a obdobné stavy. V případě očního poškození může jít o uveitidu včetně iritis a zánětu spojivek.

Ze zánětlivých stavů tlustého střeva může jít o Crohnovu nemoc, ulcerativní colitis a distální zánět konečníku. Z kožních onemocnění běží zejména o onemocnění, spojená s bujením buněk, jako jsou lupénka, ekzémy a kožní záněty včetně alergických. Ze srdečních onemocnění jde zejména o poškození infarktem. Z dalších zánětlivých stavů a poruch imunitního systému může jít například o nekrozy tkání při chronických zánětech, endotoxinový šok a poruchy proliferace hladkých svalů, například opětné zúžení po provedené angiplastice, může jít také o odmítnutí transplantované tkáně.

Sloučeniny podle vynálezu je tedy možno použít vúčinných dávkách sloučeniny obecného vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného solvátu k léčení svrchu uvedených onemocnění, zejména zánětlivých onemocnění a septického šoku.

Množství sloučeniny obecného vzorce.I nebo jejího farmaceuticky přijatelného solvátu bude záviset na řadě faktorů, například na účelu použití, způsobu podání a stavu nemocného. Typická denní dávka při léčení septického šoku se napřík-lad může pohybovat v rozmezí 0,005 až 100, s výhodou 0,5 až. 100 a zvláště 0,5 až 20 mg/kg. Tuto dávku je možno podat najednou nebo ve formě několika dílčích dávek v průběhu dne nebo ve formě infuze. Podobné dávky budou užity i pro léčení jiných chorobných stavů. V případě léčení plicních onemocnění může být podáván aerosol v koncentracích, které zajistí koncentraci účinné látky v kapalině na povrchu průdušek v rozmezí 2 až 1000 mikromol.

Součást podstaty vynálezu tvoří také farmaceutický prostředek, který jako svou účinnou složku obsahuje sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo solvát spolu s nejméně jedním farmaceutickým nosičem nebo nosným prostředím. Farmaceutický prostředek může být použit k léčení a prevenci svrchu uvedených stavů,, například septického šoku, zánětlivých stavů a poruch imunitního systému. Nosič musí být farmaceuticky přijatelný pro příjemce a musí být kompatibilní, to znamená, že nesmí mít nepříznivý účinek na ostatní složky prostředku. Nosič může být pevný nebo kapalný, prostředek je s výhodou zpracován na lékovou formu s obsahem jednotlivé dávky, může jít například o tabletu, která může obsahovat 0,05 až 95 % hmotnostních účinné složky. V případě potřeby je do farmaceutického prostředku možno zařadit ještě další- fyziologicky účinné látky.

Uvedené prostředky mohou být vhodné pro perorální podání, podání .pod jazyk nebo ústní sliznicí, parenterální podání, například podkožní, nitrosvalové nebo nitrožilní podání, rektální nebo místní podání včetně transdermálního podání a také pro podání nosní sliznicí nebo inhalací. Nej výhodnější způsob podání bude záviset na povaze a závažnosti léčeného stavu a na zvolené účinné látce, avšak nitrožilní podání je například výhodné při léčení septického šoku. Pro léčení astmatu může naopak být výhodné perorální podání nebo podání inhalací.

Prostředky, určené pro perorální podání mohou být rozdělené na samostatné jednotky, jako tablety, kapsle nebo prášky, tyto jednotky obsahují předem stanovené množství účinné látky. Může rovněž jít o prášky nebo granuláty, roztoky nebo suspenze ve vodné nebo nevodné kapalině nebo emulze typu olej ve vodě nebo voda v oleji.

Prostředky, vhodné pro podání pod jazyk nebo ústní sliznicí jsou například kosočtverečné tablety, obsahující účinnou složku, typicky v ochuceného základu, například s obsahem cukru, akácie nebo tragakantu a pastilky, obsahující, účinnou složku v inertním základu, například ve směsi želatiny a glycerolu nebo sacharozy a akácie.

Prostředky, určené pro parenterální podání typicky 10 zahrnují sterilní vodné roztoky s obsahem předem určeného množství účinné látky. Roztok je s výhodou izotonický s krví příjemce. I když jsou takové roztoky s výhodou podávány nitrožilně, je možno je podávat také podkožně nebo nitrosvalově.

Prostředky pro rektální podání mají obvykle formu 15 čípků s obsahem jednotlivé dávky účinné látky v pevném nosiči, tvořícím základ čípků, například v kakaovém másle.

Prostředky pro místní podání nebo pro podání nosní sliznicí zahrnují mazání, krémy, emulze, pasty, gely, spreje, aerosoly a oleje. Vhodným nosičem je vazelína, lanolin, poly20 ethylenglykoly, alkoholy a kombinace těchto látek. Tyto prostředky obvykle obsahují účinnou látku v koncentraci v rozmezí 0,1 až 15 % hmotnostních.

Prostředky podle vynálezu je možno připravit jakýmkoliv vhodným způsobem, typicky tak, že se homogenně promísí účinná složka s kapalinou nebo jemně rozptýleným pevným nosičem nebo oběma těmito složkami v předem určeném poměru, načež se v případě potřeby výsledná směs zpracuje na požadovaný tvar.

Například tablety je možno získat lisováním homogenní směsi, obsahujících prášek nebo granulát účinné složky a • ft • · • · popřípadě další složky, jako pojivá, kluzné látky, inertní ředidla nebo povrchově aktivní dispergační činidla nebo je možno tablety odlévat z homogenní směsi práškové účinné látky a inertního kapalného ředidla.

Vodné roztoky se typicky připravují rozpuštěním účinné složky ve fyziologickém roztoku chloridu sodného s obsahem cyklodextrinu.

Vhodné prostředky pro podání inhalací zahrnují jemné prášky nebo prostředky, určené k rozprašování, které mohou být vytvořeny různými pomůckami pro výrobu aerosolů, zvláště takových, které jsou opatřeny odměrným ventilem.

Pro podání do plic inhalací ústy má být průměr částic prášku nebo průměr kapiček typicky v rozmezí 0,5 až 10, s výhodou 1 až 5 mikrometrů, aby materiál byl zanesen až do drobných průdušek. Pro podání nosní sliznicí se užívá průměru částic 10 až 500 mikrometrů.

Inhalační přístroje pro aplikaci odměřených dávek jsou obvykle pod tlakem a typicky obsahují suspenzi nebo roztok účinné látky ve zkapalněném hnacím prostředku. Při používání těchto přístrojů se odměrným ventilem aplikuje odměřený objem prostředku, typicky 10 až 150 mikrolitrů k vytvoření aerosolu s obsahem účinné složky. Vhodnými hnacími prostředky jsou některé chlorované a fluorované uhlovodíky, například dichlordífluormethan, trichlorfluormethan, dichlortetrafluorethan a směsi těchto látek. Prostředek může navíc obsahovat jedno nebo větší počet pomocných rozpouštědel, například smáčedel, jako jsou kyselina olejová nebo sorbitantrioleát, antioxidační látky a látky pro úpravu chuti.

Nebulizátory jsou běžně dodávaná zařízení pro přeměnu roztoku nebo suspenze účinné látky na aerosol při použití stlačeného plynu, například vzduchu nebo kyslíku, který protlačí prostředek úzkým otvorem trysky, je také možno použít míchání pomocí ultrazvuku. Vhodnými prostředky pro toto použití jsou prostředky, obsahující účinnou látku v kapalném nosiči v množství až 40, s výhodou však méně než 20 % hmotnostních. Nosičem je obvykle voda nebo zředěné vodné alkoholové roztoky, s výhodou po úpravě například chloridem sodným tak, aby prostředek byl izotonický. Dalšími přísadami mohou být konzervační činidla v případě, že prostředek není připravován za sterilních podmínek, může jít například o methylhydroxybenzoát, dále je možno přidat antioxidační činidla, látky pro úpravu chuti, těkavé oleje, puřry a smáčedla.

Vhodné prostředky pro podání insuflací zahrnují jemně rozptýlené prášky, které mohou být podávány pomocí insuflačního zařízení nebo mohou být upraveny jako šňupavé prášky. V insuflátoru se prášek nachází v kapslích, typicky z želatiny nebo z plastické hmoty, které jsou proraženy nebo otevřeny přímo v přístroji a prášek je pak strhován vzduchem, který proudí zařízením nebo je vypuzován ručně ovládaným čerpadlem. Prášek může obsahovat pouze účinnou složku nebo může jít o směs, obsahující, účinnou složku, ředidlo, například laktozu a popřípadě smáčedlo. Účinná složka typicky tvoří 0,1 až 100 % hmotnostních prostředku.

Sloučeniny podle vynálezu je možno připravit postupy, které jsou v organické chemii běžné. Součást podstaty vynálezu proto tvoří také způsob výroby sloučenin obecného vzorce I nebo jejich solvátů, který spočívá v tom, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II

R³

· ·· ·· *

nebo její aktivovaný derivát, * se sloučeninou obecného vzorce III

kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, a popřípadě se takto získaná sloučenina vzorce I pře vede na jinou sloučeninu obecného vzorce I nebo na odpovídající solvát.

V případě, že X znamená atom kyslíku, je možno esterifikaci uskutečnit běžnými postupy, například při použití kyselého katalyzátoru a popřípadě v inertním rozpouštědle, jako toluenu, benzenu nebo xylenu. Vhodnými kyselými katalyzátory jsou anorganické kyseliny, jako kyselina sírová, chlo rovodíková nebo fosforečná a také organické kyseliny, například kyselina methansulfonová nebo toluensulfonová. Esterifi kace se obvykle provádí při vyšší teplotě, například 50 až 150 °C, s výhodou za odstraňování vody, vytvořené při reakci například destilací.

V.případě, že X znamená atom kyslíku nebo -NH-, je možno reakci uskutečnit tak, že se nejprve připraví aktivova ný derivát sloučeniny obecného vzorce II. Vhodnými aktivovanými deriváty jsou například aktivované estery nebo halogenů dy kyselin, které mohou být izolovány před reakcí se sloučeninou vzorce III nebo mohou být připraveny přímo v reakční ·· ··►» ·· « • · · 9 9 99 • · ♦ · 9 · • · ΦΦΦΦ φ • · 9 9 9 9 9 ·· ·· ΦΦ »φ

ΦΦ

Φ * · 9

Φ Φ Φ Φ

Φ 9 9 9 Φ • Φ Φ Φ

9 9 9 směsi. Zvláště vhodnými aktivovanými estery sloučenin obecného vzorce II jsou acylimidazoly, které je možno snadno připravit reakcí sloučeniny vzorce II s N,

N¹-karbonyldiimidazolem.

Přeměnu aktivovaného derivátu sloučeniny vzorce II na sloučeninu vzorce I je možno uskutečnit v inertním rozpouštědle, optimálně v přítomnosti nenukleofilní baze, například terč.butoxidu draslíku, hydridu sodíku nebo nenukleofilní organické baze, jako 1,8-diazabicyklo/5.4.0/undec-7-enu.

Sloučeniny obecného vzorce II je možno připravit způsobem, popsaným v PCT GB 9501808.

Sloučeniny obecného vzorce III se běžně dodávají nebo je možno je připravit postupy, uvedenými v literatuře, například v R.A.Bartsch a další, J.Org. Chem. 1989, 54:857-860 a

J.M.Harris, Macromol. J. Sci.Rev. Polymer Phys.Chem., 1985,

C25(3):325-373 a také v S.Zalopsky, Bioconjugate Chem.1995, 6:150-165.

Sloučeniny obecného vzorce I je také možno připravit kondenzací sloučenin· obecného vzorce IV

CHO

kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, nebo kondenzací acetalového derivátu této látky, s

1,3-bis(cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouracilem, jehož příprava ·· ···«

9 9 « ·

9 9 9 · ·

9 9 9 · · ·· ·· ··

99

9 9 9 ·· 9

9 · 9 ' ♦ • 9 9 9

99 je uvedena v příkladové části přihlášky. Kondenzace se s výhodou provádí v polárním rozpouštědle při neextrémních teplotách, jak je popsáno v PCT GB 9501808.

Sloučeniny obecného vzorce IV je možno připravit re5 akcí sloučeniny obecného vzorce III s příslušnou karboxylovou kyselinou. Způsoby provedení této reakce a příprava karboxylové kyseliny je rovněž popsána v přihlášce PCT GB 9501808.

Přeměnu sloučeniny obecného vzorce I na solvát je možno uskutečnit standardními postupy, které jsou v oboru běžně známy.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

P_£_í_k_l_a_d_y___E_r_o_y_e_d_e_n_í___v_y_n_á_l_e_z_u

Referenční příklad

Pří k led 1 )

Příprava (E)-4-/1,3-bis-(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6- tetrahydro

2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-3-fenyl-2-propenové kyseliny

Stupeň a)

Příprava 1,3-bis-( cyklohexyImethyl)- močoviny

Ku směsi, připravené smícháním 68,66 g* cyklohexanmethy1aminuj ( dodavatel firma Aldrich); a 200,0 mi; 5N roztoku hydroxidu sodnéhoj ( dodavatel firma Fischer); byl za intenzivního míchání; a chlazení na teplotu minus 10,0^uc; rychle přidán roztok 30,0 gj fosgenu; ve 600,0 mi; toluenu.

Poté, co byla vzniklá reakční směs míchána po dobu 20,0 minut; byla zfiltrována; 8 sraženina, ve formě pevné látky; by la promyta s cca 1,500 ml vody; a poté byla vysušena za vskua při 67 Pa.

Bylo získáno 72,72 gj žádané 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)močoviny; ve formě bíle zbarvené, práškovíté látky; ve výtěžku 95,_;O%...

Teplota tání i 150,0 - 152,0°c;

¹H-NMR;( DMSO-dg): ( spektra nukleární magnetické rezonance) .

delta; 5,74/, ( š.t.; J = 5,80 Hz ); 2,20 NH ); 2,81; ( t.; J = 6,30 Hz; 4,2 NCH₂); 1,62; 1,25; a 0,85; ( vše m.' 22,20 cyklohexyl).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce C^H^gN^O

Vypočteno

Nalezeno

C 71,38; c 71,22;

H 11,.18;

N 11,10; %

H 11,17; N, 11,15; %

S t u p e ň b)

Příprava 6-amino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-uracilu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 21,0 g kyseliny kyanoctovéj ( dodavatel firma Aldrich); ve 260,0 mi; acetanhydriduj bylo přidáno 54,50 gj 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-močoviny;(získané v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a); a vzniklá reakční směs byla zahřívána v atmosféře dusíku; při teplotě 80,0°c; po dobu 2,0 hodin.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byly těkavé složky z reakční směsi za vakua odstraněny; a vzniklý zbytek; ve formě látky olejovíté konzistence, byl postupně vysušen odpařením; a trojnásobným použitím 400,0 mi;směsi; obsahující 10% vody? v ethanolu.

Zbylé pevné složky byly rozpuštěny ve směsi, připravené smícháním 600,0 mi; ethanolu; a 300,0 mi; vody; při teplotě 80,0°C; a následnou úpravou pH na hodnotu 10, OJ pomocí I0%ního vodného roztoku uhličitanu sodného. Ještě horký roztok byl zředěn přidáním 75,0 mi; vodyj a poté byl vytemperován na teplotu místnosti

Vzniklá bezbarvá, krystalická látkg, která se vytvořila, byla odfiltrována; 8 po trojnásobném promytí; vždy s 500,0 ml vody; byla za vakua 67 Pa vysušena.

Bylo získáno 64,98 g* žádaného 6-8mino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-ur8cilu; ve výtěžku 94,0%.

Teplota tání : 134,0 - 141,0°c;

¹H-NMR; ( DMS0-d₆) delta; 6,73;, ( š.s.J 2J NH^); 4,63; ( s.J 1J H-5 )J 3,67; ( d.J j = 7,30 H_Z; 2; nch₂); 3,57; ( a.; J = 7,30 h_z; 2; nch₂); 1,55; a 1,09; ( oba m.J 22J 2-cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce Ο^Η^Ν^Ο^Η,^Ο :

Vypočteno

Nalezeno

C 64,07; H 9,26; N 12,45; 0 63,98; H 9,27; N 12,48;

Stupeň c)

Příprava 6-smino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5-nitrosouracilu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 25,0 gj 6-amino-1,3bis-( cyklohexylmethyl)-ur8cilu; ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b); ve 440,0 mi; ledové kyseliny octové; dále 400,0 mlj vody; 8 440,0 mlj ethanolu; za současného zahřívání k refluxu pod zpětným chladičem; bylo přidáno 5,65 gj dusitanu sodného; a vzniklá reakční směs byla míchána za pomalého, postupného temperování reakční smési ns teplotu místnosti

Po skončení výše popsané, předcházející operace, byla vznik lé, modročerveně zbarvená sraženina odfiltrována; a po promytí se směsí vody a methanolu;, v poměru 1,0 : 1byla vysušena.

Bylo získáno 23,46 g*. žádaného 6-amino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5-nitrosouracilu; ve formě slabě červěně zbarvené, krystalické látky; ve výtěžku 86,0%.

JP β» i

Teplota tání :: 240,0 - 243,0°C* ( rozklad za pěnění ); ¹H-NMR; ( DMSO-dg):

delta; 13,23; ( š.3.; 1; =noh ); 9,00; ( š.s.; 1; =NH ); 3,73; ( š.t.; J = 6,86; 4; 2 NCH₂); 2,00 - 1„60; a 1,70 - 1,10; (oba m.J celkem 22,0 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle

Vypočteno : Nalezeno :

62,05; H 8,10; 0 62,13; H 8,12;

vzorce Ο^θΗ^Ν^Ο^

N 16,08; %

N 16,03; %

Stupeň d)

Příprava (E)-4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro2,.6-dioxo-9H-purin-8-yl/-3-fenyl-6-propenové kyseliny

V nadpise uvedená, žádaná sloučenina, byla připravena z

1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouracilu; postupem, popsaným v odborném časopise Syn.Commun.; 19J 3367 - 3370; /1989/J autor J.Perutm8ttam.

Serstvě připravený 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5,,6-diemiv nourecii; byl získán třepáním směsi, získané smícháním 5,00 gj

6-amino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5-bitrosouracilu; ( připraveného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně c); ve smě si 250,0 mlj. methanoluj a 25,0 mi; vody; s přídavkem 0,50 gj 10%ního palladia na aktivním uhlíj za tlaku vodíku 344,70 KPaJ ve Parrově třepací aparatuře; po dobu 2,0 hodin;»

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byl kata/ ρ λ lyzátor odfiltrován přes oxid křemičitý; ( Celíte )J s ku získanému, bezbarvému filtrátu; zahuštěnému na objem 25,0 mi; a obsahujícímu 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouracii; bylo přidáno 2,53 gj ( 14,35 mmolu); kyseliny 4-formyl-3-fenyl2-propenovéJ ( dodavatel firma Aldrich); a výsledná, žlutě zbar vená reakční směs,, byl8 zahuštěnaJ a zbytek, ve formě žlutě zbarvené pevné látky, byl vysušen opakovaným, několikanásobným zpracováním; s absolutním ethanolem.

Výsledná, žlutě zbarvená, práškovítá látka; ( meziprodukz ve formě Schiffovy báze); byla míchána ve 115,0 mlj dimethoxyethanuj obsahujícícho 4,0 gj joduj při teplotě 60,0°CJ ( olejová lázeň)J po dobu 20,0 hodin.

Poté byl k ještě horké reakční směsi přidáván nasycený vod ný roztok thiosíranu sodného tak dlouho, dokud nebylo docíleno úplného odbarvení jodu. Zbytek, ve formě žlutě zbarvené sraženiny, byl odfiltrovány a po promytí s vodou byl vysušen za vakua 67 Pa.

Bylo získáno 6,73 gj žádané (E)-4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl )-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-di oxo-9H-purin-8-y1)-3-feny1-2-pro pěnové kyselinýj^řve formě slabě žlutě zbarvené;, práškovíté látky f ve výtěžku 91,0%.

Teplota tání :: _>·3ΟΟ,,Ο^ο0;

Takto získané vzorky byly dále přečištěny rozpuštěním v 1N vodném roztoku hydroxidu sodnéhoJ a následným zfiltrováním získaného, zakaleného roztoku přes oxid křemičitý;(Celite)J a poté okyselením čirého filtrátu s kyselinou chlorovodíkovou.

Výsledná,, vzniklá sraženina, byla odfiltrována; a promyta s vodou.

Byla získána žádaná, v nadpise uvedená sloučenina; ve formě slabě žlutě zbarvené; práškoví té látky.· )-300, o°c;

Teplota tání ::

¹H-NMR;í DMSO-d₆):

delta; 13,80 a 12,40; ( oba š.m.; 1 každý; C0₂H a NH ); 8,12*, ( d.; J = 8,30 Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,84*, ( d.J J = 8,40 Hz ;

2; 2 fenyl CH ); 7,64*, ( d.J J = 16,00 H_Z; T, CH= ); 6,64; (d.J j = 16,00 h_z; 1; ch= ); 3,93; ( d.; J = 7,00 h_z; 2; ch₂n ); 3,79; ( d.; j = 6,80 H_Z;2; ch₂n ); 2,00 - 1,40; _s 1,30 - 0,85;

( oba š.m.; 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C28^H34^N4°4 ^:

Vypočteno :: C 68,55; H6,99*, N 11,42; %

Nalezeno r C 68,45; H 6,98; N 11,48; %

Příklady synthetizováných sloučenin

Příklad; 2)

Příprava triethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Ku 80,0 gj triethylen glykol monome thy le the ru; ( dodávka od firmy Aldrich); a vysušeného postupným, trojnásobným odpařením se 50,0 mi; xylenu ; v atmosféře dusíku; při teplotě 125,0°c; byly přidány 4,0 gj (E)-4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové kyseliny; ( získané v rámci předcházejícího, výše popsaného ^říkladu

1)· Stupeň d); a vzniklá reakční směs byla dále sušena odpařením se 40,0 mi; xylenů.

• ·

Po skončení předcházející, výše popsané operace; byla reakční směs po předchozím přidání 0,41 gj kyseliny sírové; za hřátá,' na teplotu 190,0°C. Poté byly přidávány v dávkách 50,0 ml; xyleny tak,- aby se nahradily ztráty vzniklé oddestilováním.

Po uplynutí 2,0 hodin, bylo ku reakční směsi přidáno dalších 0,20 gj kyseliny sírové; a reakční směs byla zahřívána při teplotě 140,0°C po dobu dalších 3,0 hodinj přičemž byly průběžně nahrazovány ztráty vzniklé oddestilováním xylenů.Poté, při chlazení reakční směsi na teplotu místnosti; se z hnědě zbarvené směsi vysrážel velký podíl sraženiny; ve formě pevné látky.

Směs byla po přidání 200,0 mlj, chloroformu následně promyta 4x,*, vždy s 50,0 mlj vody. Organická vrstva byla poté vysušena se síranem sodným; a po zahuštění byla získána žlutě zbarvená,, pevná látk^·, která byla chromatograf ována na silikagelu.

V nadpise uvedená sloučenina byla eluována za použití směsi 1,0 až 4,0%ního rnethanolu v ethylacetátu; 8 poté byla, za přídavku hexanů, překrystalizována z ethylacetátu.

Bylo získáno 3,20 gj žádané, v nadpise uvedené sloučeniny;, ve formě bíle zbarvené, práškovité látky; ve výtěžku 62,0%, Teplota tání s 189,0 - 192,0°c;

¹H-NMR;( DMSO-d₆):

delta; 8,16; ( d.J J = 8,00 HzJ 2J 2 fenyl Gh ); 7,88; ( d.;

J = 8,30 Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,70; ( d.J J = 16,10 H_z; 1; ch= ); 6,77; ( d.; j =16,10 h_z; 1; ch= ); 4,,28; ( m.; 2; co₂ch₂); 3,92; ( d.; j = 6,80 h_z; 2; ch₂n ); 3,78; ( d.; J =

6,80 h_z; 2; ch₂n ); 3,68; ( m.; 2; ch₂o ); 3,60 - 3,50; ( m.; ó; 3 ch₂o ); 3,40; ( 2; ch₂o ); 3,23; ( s.; 3; ch₃); 2,00 1,50; a 1,30 - 0,90; ( oba š.m.; 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Ahalytické hodnocení sloučeniny dle vzorce . Ο^Η^θΝ^Ο.,? ::

Vypočteno : C 66,02; H 7,60; N 8,80; %

Nalezeno : C 65,91; H 7,58; N. 8,76; %

Přiklaď 3)

Příprava palyethylenglykol (n = 7,2 ); methylether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cyklohexyImethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2- propenové

Reakční směs,, ve formě kaše, připravená rozmícháním 0,50 gj kyseliny (E)-4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; ( získané v rámci výše popsaného Příkladu 1.); Stupeň d); ve 21,0 g* póly(ethylenglykol)-monomethyletheru; ( dodaného firmou Aldrich); (σ průměrné molekulové hmot^nosti 350 ); a vysušeného před použitím odpařením s toluenem} a obsahujícího 51,0 mg; kyseliny sírové; byla míchána při tlaku 133 PaJ po dobu 15 minut»

Po skončení předcházející, výše popsané operace; byla žlutě zbarvená reakční směs míchána při teplotě 190,0°c; ( olejová lázeň); a tlaku 133,0 PaJ po dobu 3,0 hodin. Během této operece se pevné složky ve směsi rozpustily; a zbylý, hnědě zbarvený roztok byl po ochlazení na teplotu místnosti nalit do 100,0 ml vody. Vodná reakční směs byla poté míchána po dobu 1,75 hodiny; a poté byla extrahována 3x vždy se 30,0 mi; dichlorethanu.

Spojené extrakty byly po vysušení se síranem sodným zahuštěny až na pevnou látku voskovítého charakteru, která byla chromatograf ována na C-18 reverzní fázi silikagelu; za použití systému EM Separation EdiChroprep RP-18; přičemž sloupec byl postupně eluován směsí 10%ní vody v methanolu, až samotným methanolem; a byl získán eluát surového produktu v samotném methanolu, ve formě žlutě zbarvené, pevné látky voskovítého charakteru , která byla rozmíchána na kaši ve 25,θ ml vody.

Poté byla voda za vakua odpařena; a bylo získáno 620,0 mg; v nadpise uvedené, žádané sloučeniny; ve formě žlutě zbarvené látky, voskovitého charakteru; ve výtěžku 61,0%.

Teplota tání t

147,0 - 154„0°c;, • ·

( DMSO dg)::

delta * 8,,15¼ ( d.;, J = 8,10Hz; 2*, 2 fenyl CH ); 7,.88; ( d.J J = 8,,20; Hz;. 2; 2 fenyl CH ); 7,70; ( d.;, J = 16,0$ Hz*, i;

CH= );, 6,77; ( d.; d; = 16,00) Hz; 1; CH= ); 4_r28;, ( m.;, 2; co₂ch₂ ); 3_r9i; ( d.; j = 7,00 h_z; 2; ch₂ni );, 3_r78; ( d.;. j = 7,40^ Hz y_r 2;, esy® ); 3,68;, ( m.; 2; CHyi );. 3,60 - 3,38; (m.;, cca 25; cca 12,50 CH₂O ); 3_r22J ( s.J, 3'_r CH^); 2,0$ - 1 ,50J a 1 ,30 - 0,90; ( oba š.m. J 22 celkem;, 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^SivW4· ‘ W ’τ,ί·⁰-⁶ V

Vypočteno : C 62,,56;, tt 8,00’ 13. 6,69;, %

Nelezeno t C 62„62; H' 8„01 ; N 6„69; %

Příklad A)

Příprava tetraethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)—

4-( 1 ,,3-bis-( cyklohexylmethyl)-! ,.2,.3_r6-tetrahydro~2,6-dioxo9H-purinr-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Celkem 2 „O gj, v rámci předcházejícího,, výše popsaného Příkladu 3)J:. získaného polyethylen glykol ( n = 7,2)-methylether esteru kyseliny (E)-4-( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,

3,6-te trahydro-2,.6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-f enyl-2-propenové; bylo rozděleno na své složky opakovanou chromatografií, za použití systému GhromatotronJ ( Harrison Research ).

Části směsi esteruj, ( 250 - 350.,,0 mg )J v ethylacetátu; byly P° částech naneseny na destičky, opatřené s 1,0 mm vrstvou oxidu křemičitého;(a s předem ošetřených s hexany;) a poté byly postupně eluovány se směsí 5,0 až 20%ního ethylacetátu v hexanech.

• · · · · · • · · • · · • · ·

Frakce, obsahující nespojité oligomery, byly izolovány odděleně;, a identické frakce z různých destiček: byly spojeny, a zahuštěny. Všechny smíšené frakce byly spojeny, ^znovu přechromatografovány.

Tímto způsobem bylo získáno 43,0 mgj žádaného tetraethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4-( 1,3-bis-( cyklohexyl· me thyl)-1,2,3,6-te trahydro-2 ,,6-dioxo-9H-purin-8-yl )-3-f eny 1-2propenovéj ve formě bíle zbarvené;, práškovité látky.

Teplota tání :: 171,0 - 174,,0°C;

¹H-NMR; ( DMSO-dg):

deltaj 8,,18; ( d.; J = 8,40 Hz; 2*, 2 fenyl CH 7,91 J ( d.J J = 8,40 Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,72; ( d.; J = 16,10 Hz; 1; ch= ); 6,80; ( d.;, j = 16,10 h_z; 1; ch= ); 4,30; ( m.; 2; co₂ch₂);. 3,94; ( d.;_: j - 7,10 h_z; 2; ch₂n. ); 3,80 ; d.; j = 7,10 h_z; 2; ch₂n ); 3,71; ( m.; 2; ch₂o ); 3,58 - 3,42; ( m.; 12; 6 ch₂o ); 3,24; ( s.; 3; CH₃); 2,00 - 1,50; 8 1,30 - 0,90; « oba Š.m.;

celkemj 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle ^C29^H36^N4°4*⁽Vypočteno : Nalezeno :· ^C2^H4⁰⁾4^{e 0,6 H}2° ^:

C 64,25; H 7,75; C 64,11; H 7,56;

vzorce

N. 8,1 o; N 8,07;

Příklad 5)

Příprava pentaethylen glykol-methylether esteru kyseliny (E)4-(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1_r2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

(·

Chromátografickým dělením polyethylenglykol (n = 7,2 ); methylether esteru kyseliny (E)-4-( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)1 ,2*3,,6-te trahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-y1)-3-feny1-2-propenové; ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 3);( 2,0 g); na jednotlivé složky postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 4)J bylo získáno 92,0 mg; žádané, v nadpise uvedené sloučeniny;, ve formě žlutě zbarvené,, pevné látky; voskovítého charakteru.

Teplota tni : 166,0 - 167,0°c;

¹H-NMR;( DMSQ-d₆):

delta; 8,18* ( d.;_: J = 8,20 HzJ 2J 2 fenyl CH ); 7,91 ; ( d.;

J = 8,20 Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,,72; ( d.J J = 16,00 Hz ); 1; ch= ); 6,79;, ( d.;. j = 16,,10 h_z; 1; ch= ); 4,30; ( m.; 2; co₂gh₂ )· 3,94; ( d.; J = 7,00 Hz; 2; ch₂n ); 3,80; ( d.; J = 7,00 h_z; 2; ch₂n ); 3,70; ( m.2; ch₂g );, 3,60 - 3,40; ( m.;

16,80 ch₂o. ); 3,24; ( s.; 3; ch₃ ); 2,00 - 1,50; _s.; 1,300,90; ( oba š.m.; 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

«V·¹

Analytické hodnocení sloučeniny dle ^C29^H36^NÁ°4,· ( ^C2^H4° S*

Vypočteno r Nalezeno ::

0,15 H₂o;

C 64,38; H 7,88; C 64,44; H 7,90;

vzorce

N 7,70; N. 7,57;

Příklad 6)

Příprava hexaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl)-3-feny1-2-propenové ·· ····

Chromát©grafickým dělením polyethylen glykol (n = 7,2 ) J methylether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)1 ,2,3,6-tetrahydro-2,,6-dioxo-9.H-purin-8-yl)-3-íenyl-2-propenové ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 3);( 2,0 g)J na jednotlivé složky postupem;, popsaným výše v rámci Příkladu 4); by lo získáno 170,0 mg; žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě žlutě zbarvené, pevné látky; voskovitého charakteru»

Teplccta tání s 160,0 - 162,,0°C;

Wm®;, ( DMSO-dg ):

delta; 8,18; ( d.; J = 8,20 Hz;. 2; 2 fenyl CH ); 7,91; ( d.;

J = 8,20 Hz; 2J 2 fenyl CH ) * 7,74; ( d.; J = 16,00* 1J CH= );

6,79; ( a.;, j = 16,10 h_z; 1; ch= ); 4,30; ( m.; 2; co₂ch₂ ) ;

3,93; (a.; J = 6,80 Hz; 2; ch₂n; ); 3,80; ( a.; J = 7,20 Hz ;

2; ch₂® ); 3,70; ( m.; 2; ch₂o ); 3,60 - 3,40; ( m.; 20; 10, CH₂0j ); 3,24; ( s.; 3; CH₃ )J 2,00 - 1,50 a 1,30 - 0,90·; ( oba š.m»; 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce θ29^36^4θ4*' ( θ' ^β^’^θ ·

Vypočteno r. C 63,74; H 7,88; H 7,25; %

Nalezeno : C· 63,69; ff 7,92; H 7,34; %

Příklad 7)

Příprava heptaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4 ( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové ·· ····

Ohromatogrsfickým dělením polyethylen glykol ( n = 7,2 ); methylether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-feny1-2 propenovéJ ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 3);( 2,0 g)J na jednotlivé složky postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4); bylo získáno 105,.0 mg;, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené J pevné látky, voskovítého charakteru..

Teplota tání :: 154,0 - 156,O°c;

¹H-N¥íR; ( DMSO-dg) :

delta; 8,18; ( d.J J = 8,40 Hz; 2j 2 fenyl CH ); 7,91; ( d.; J =

8,40 Hz; 2J 2 fenyl CH )J 7,73J ( d.J J = 16,00 Hz; 1; CH= );

6,79; ( d.; j = 16,10 h_z; 1; ch= ); 4,30; ( m.; 2; co₂ch₂);

3,94; ( d.; j = 7,00 Hz:; 2; ch₂ní ); 3,80; ( a.; j = 7,20 h_z;

2; ch₂ní );, 3,70; ( m.; 2; ch₂o ); 3,60 - 3,40; ( m.; 24; 12

CHgO. ); 3,24; ( s.; 3; CH₃·.); 2,00 - 1,50 a 1,30 - 0,90;.. ( oba š.m.; 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C£5^H3A^e4- ^{( C}2^H4^Ql ’γ· °>^{25 H}2° Vypočteno Nalezeno ::

063,18; H 7,95; N 6,85; 3 C 63,15; H 7,97; N 6,93; %

Přiklad 8)

Příprava oktaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4( 1 ,,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,.6-dioxo-9Hpurin-8 yl)- 3-fenyl-2-propenové

• 4	4444	• 4 4	4 4	«4
•	4	4 4	4 4	• 4	4
• ·	•	4 4	4	4 ·	•4
4	4	4 · 4	4	4 4 4	4
•	4 ·	4 4	4	4 «	4

Chromatografickým dělením polyethylen glykol ( n = 7,2 )J methylether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)1 ,2,3 ,.6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 3);( 2,0 g); na jednotlivé složky postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 4); bylo získáno 120,0 mgj žádané, v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě žlutě zbarvené, pevné látky, voskovitého charakteru·

Teplocta tání :: 150,0 - 151,0?C;

¹H-NMR;( DMSO-dg):

delta; 8,18;_: ( d.; J = 8,40 Hz; 2J 2 fenyl CH ); 7,91 J ( d.J J = 8,60 Hz; 2J 2 fenyl CH ); 7,73J ( d.; J = 16,00 HzJ 1; CH=);

6,79; ( d.;. j= 16,10 Hz; 1; ch= ); 4,30; ( m.; 2; co₂ch₂);

3,94; ( d.; j = 7,00 h_z; 2; ch₂& ); 3,80; ( d.; j = 7,20 h_z; 2;

ch₂m ); 3,70; ( m.; 2; ch₂o ); 3,60 - 3,40; ( m.; 28; 14 ch₂o );

3,,24; ( s.; 3; CH₃ ); 2,00 - 1,50 a 1,30 - 0,90; ( oba š.m.J 22 celkem;, 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle ^29^36¾¾ * ^2^4θ^8* ^0- :

Vypočteno :: C 62,73; H 8,01;

Nalezeno : C 62,65; H 8,10J vzorce

N. 6,50; N, 6,56;

Příklad 9) řříprava dekaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)_1,2,3,6-tetΓahydΓo-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl )-3-f enyl-2-propenové ·» ·»»« ♦·· * _ · 9 9.9 9 99

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

9·· · · ·

99 99 999

99 • β • · e e

99

Stupeň a)

Příprava dekaethylen glykol monomethyletheru

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 300,0 mi;( 1,90 molu) J triethylen glykol monomethyletheru;( dodaného firmou Ald?rich); a 500,0 gj 1,2-bis-( 2-chlorethoxy)-ethanu; ( dodaného firmou Aldrich );. bylo přidáno po částech; během 1,25 hodiny, 239,24 gj t-butoxidu draselného J ( 95%ní); přičemž teplota reakční směsi byla při uvedené operaci udržována v rozmezí 16 až 20,0°CJ ( ledem chlazená lázeň ).

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla chladící lázěň odstavena; a teplota reakční směsi dosáhls 30,θ°0 ještě předtím, než byla vytemperována na teplotu místnosti. Poté byla reákóní směs míchána nejprve při teplotě místnosti po dobu 2,0 hodinj a poté ještě po dobu 18,0 hodin; při teplotě 110,0°c; když ještě předtím byly těkavé složky odstraněny při vakuu 2,50-KPaJ a při teplotě 110,0 - 125,O°C.

Vzniklý zbytek viskózního charakteru byl poté naředěn s

1,70 litry toluenu; a poté přefiltrován přes oxid křemičitý;

( Celitě^(R)).

Poté byl toluen z filtrátu oddestilován tak, aby teplota lázně nikdy nepřekročila 165,0^oC.; a methyl hexaethylen glykol chlorid byl izolován pomocí frakční destilace; při vakuu 80 Pa; a teplotě 155,0. t- 19O,O°C.

Bylo získáno 95,78 gj methyl hexaethylen glykol chloridu; ve formě slabě hnědě zbarveného zbytka; ve výtěžku 16,0%.

Ku roztoku,, připravenému rozpuštěním 412,70 g* tetraethy· lenglykoluj( dodaného firmou Aldrich); a 95,80 gj methyl hexa ethylen glykol chloridu; získaného v rámci předcházející, výše popsané operace, bylo při teplotě 18,0°C; přidáno během 25 minut; ( chladící lázeň), obsahující směs ledu a acetonu) ; 39,0 g t-butoxidu draselného; (95%ní); dodaného firmou Aldrich, ·· ···· *r • · ·»

ΦΦ ΦΦ • · « · • · · · • 9 φ β φ • 9 9 9 ·· ··

Vzniklá reakční směs byla poté míchána při teplotě 1 20°C přes nocj a po následné úpravě pH přidáním 11,70 mi; 12N; roztoku kyseliny chlorovodíkoW^vLý4.y těkavé složky ze směsi odstraněny při vakuu 64 PaJ 8 zahřátím až na teplotu 185,0°C..

Po skončení výše popsané, předcházející operace, byla zbylá,, temně zbarvená látka; olejovíté konzistence, naředěna se 250,0 ml toluenuj a poté, po přidání 38,10 g chloridu vápenátéhoi byla směs míchána po dobu 18,0 hodinv Po následné filtraci směsi přes oxid křemičitý^ Celite ')J bylo po zahuštění získáno 102,0 gj temně zbarvené látky olejovité konzistence, kte rá byla frakční destilací zpracována; a bylo získáno 64,40 g*_tžádaného dekaethylen glykol monomethyl etheru,’ ve formě jantarově žlutě zbarvené látky, olejovité konzistence;, ve výtěžku 45%

Analytický vzorek výše zmíněné sloučeniny byl získán za použití chromatografie na silikagelu;,(za použití směsi 4%ního methanolu v chloroformu; jako elučního činidlave formě bezbarvé látky; olejovité konzistence.

¹H-N®r; ( DMSO-dg):

delta; 4,58; ( t.j J = 5,50 H_Z; 1J OH )J 3,58 - 3,38; ( m.J 40’, 20 och₂); 3,24; ( s.; 3; och₃).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^£1^44^11 ::

Vypočteno : G 53,37;. H 9,38; % ítelezeno :: C. 53,09; H 9_r47J, %

S t u p e ň b)

Příprava (E)-methy1-4-( dimethoxymethyl)-3-fenyl-2-propenátu

Směs,, připravená smícháním 20,Og /dimethylacetálu kyseliny 4-formyl-3-fenyl-2-propenové; ( Cleeland* dr se sp.J US Patent číslo 3*969.373 a 12,,44 gj bezvodého uhličitanu draselného ve 189,-0 mlj bezvodého Ν,Ν-diemthylformamidu; byla míchána po dobu 5,0 minut»

Po skončení předcházející, výše popsané operace, bylo ku směsi přidáno 12,80 gj me thyl jodiduj. 8 výsledná reakční směs byla intenzivně míchána; za současného mírného zahřívání; ( teplota olejové lázně 40,0°G )* po dobu 18,0 hodin.Poté byly těkavé složky ze směsi za vakua odpařeny* a vzniklý zbytek byl vy třepán mezi 400^,0 mlj hexanů; a 100*0 ml* vody. Oddělená vrstva s hexany byla vysušena se síranem hořečnatým; a odpařena.

Bylo získáno 18,98 gj žádaného (E)-methy1-4-( dimethoxymethyl)-3-fenyl-2-propenátuJ ve formě slabě žlutě zbarvené látky, olejovíté konzistence; ve výtěžku 89,0%.

¹H-NMR; ( DMSO-dg) :

Zjištěné hodnoty odpovídají struktuře.

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce t

Vypočteno :: C 66,09* H 6,83; %

Nalezeno t 0 65,96; H 6,86; %

-V

Stupeň c)

Příprava dekaethylen glykol methylether esteru kyseliny 4-formyl-3-fenyl-2-propenové

Roztok,, připravený rozpuštěním 4,96 gj methyl-4-( dimethoxymethyl)-3-fenyl-2-propenátuJ ( získaného v rámci předcházejícího,, výše popsaného Stupně b); dále 14,87 gj dekaethylen glykol monome thyletheruj ( získaného v rámci výše popsaného Stupně a); a 1,05 mlj titanium(IV) isopropoxidu ( dodaného firmou Aldrich); byl míchán při teplotě 110,0°CJ. za vysokého vakua; po dobu 18,0 hodin»

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla vzniklá, černě zbarvená látky, olejovíté konzistence; ochlazena na teplotu 35,O°c; a po okyselení s 24,50 gj 1N roztoku kyseliny chlorovodíkové, byla extrahována 3x vždy se 100,0 ml; toluenu. Spojené toluenové extrakty byly zahuštěny až na temně zbarvenou látku olejovité konzistence, která byla chromá togcsaf ována na silikagelu, přičemž žádaná sloučenina, byla eluována se směsí 1.0%ního methanolu v chloroformu.

Bylo získáno 4,60 g žádané, v nadpise uvedené sloučeniny; ve fornrě žlutě zbarvené látky, olejovité konzistence; ve výtěžku 34,0%.

¹H-NMR;_; ( DMSO-d₆):

delta; 10,54; ( s.*, 1; CHO ); 7,98; ( m.; 4; 4 fenyl CH ); 7,76;. ( d.;_: J = 16,00 h_z; 1; ch= ); 6,88; ( d.; j = i6,oo h_z; 1 ;ch=); 4,31; ( m.; 2; CO₂GH₂); 3,70; ( m.; 2; och₂); 3,51; ( m.; 36;

0CH₂); 3,_;25; ( s.; 3; OCH₃).

Analytické hodnocení sloučeniny dle £31^50^13* θ»·65 H^Q X

Vypočteno

Nalezeno

C 53,79; H 8,,05; 057,95; 7,95;

vzorce %

%

Stupeň d.)

Příprava dekaethylen glvkol methylether esteru kyseliny (E)-4( 1 ,,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetΓahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-9-yl )-3-fenyl-2-propenové

V nadpise uvedená,, žádaná sloučenina, byla připravena z

1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5,,6-diaminouracilu} postupem, popsaným v odborném časopise Syn.Commun.}19} 3367 - 337Ο| /1989/} autor J. Perutmattem.

Postupem,, popsaným výše v rámci Příkladu 1} Stupeň d)} byly konvertovány 2,0 g} 6-amino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)5-nitrosouracilu} ( získaného v rámci Příkladu 1} Stupeň c)} konvertovány na 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouÉacil} který byl následně smíchán s dekaethylen glykoi monomethylether esterem kyseliny 4-formyl-3-fenyl-2-propenové} ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně c)} (3,62 g); v 50 mL ethanolu» Po zahuštění vzniklé reakční směsi; byl zbytek ve formě žlutě zbarvené, polotuhé látky vysušen několikanásobným odpařením s absolutním ethanolem.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla výsledná,, žlutě zbarvená,, polotuhá látka}( meziprodukt Schiffovy base )} míchána—spolu se 60,0 ml} dimethoxyethanu} a 1,60 g} ( 6,31 mmolu)} jodu} při teplotě 50,0°C} ( olejová lázeň )} po dobu 18,0 hodin» Poté bylo k ještě horké reakční směsi přidáno takové dostatečné množství nasyceného vodného roztoku thiosíranu sodného, aby se docílilo úplného odbarvení jodu.

Vodná směs byla poté zahuštěna na objem 20,0 ml}, a po zředění s 50,0 ml} vody, byla extrahována 4x vždy s 50,0 ml} chloroformu. Spojené organické vrstvy byly poté vysušeny se síranem hořečnatým; a zahuštěny. Výsledná látka olejovíté konzistence byla chromatografována na silikagelu; za použití směsi 6%ního methanolu v chloroformu} a získaná, žlutě zbarvená látka olejovité konzistence}( 3,60 g)} byla vytřepána mezi 150,0 ml chloroformu; a 50,0 ml} vody.

Poté byla oddělená oragnická vrstva zahuštěna; a získaná látkj. olejovité konzistence, byla vysrážena z dichlormethanu, přidáním hexanů; a získaná žlutě zbarvená látky práškovitého charakteru, byla promyta s hexany; a za vakua byla při teplotě 56,O°C vysušena.

fíylo získáno 2,57 gj, žádané, v nadpise uvedené sloučeninyJ, ve výtěžku 47,0%.

Teplota tání : 143,0 - 145,O°c;

¹ H-NMR;,(DMSO-d₆):

delta; 8,16; ( d.; J = 8,.40 Hz;_: 2J 2 fenyl CH ); 7,88; ( d.;

J = 8,50 Hz; 2*2 fenyl CH ); 7,50; ( d.; J = 16,00 H_Z; 1*, ch= ); 6,78; ( d.; j = 16,00 h_z;, 1; ch= ); 4„29; ( m.; 2; co₂ch₂ ); 3,92; ( d.; j = 7,10 h_z; 2; ch₂n ); 3,78; ( d.; j = 7,,10 Hz; 2; ch₂> );; 3,^9; ( t.; j = 4,60 h_z; 2; ch₂o );.

3,60 - 3„35;, ( m.; 36; 18 GH₂0 ) *_t 3,23í ( s.J 3J. 0Η_β); 2,00 1,50,, a 1,30 - 0,90;. ( oba š.m.J 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C49^H76^N4°14^:Vypočteno z 0 62,28; Η 8_r10; N 5,93;. %

Nalezeno .·: -!C 62,,14^ H 8,06; N. 6,02; %

Přikladlo.)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4( 1 ,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Stupeň a)

Příprava nonaethylen glykol monomethyletheru

Směs, připravená smícháním 100,0 gj hexaethylenglykolu;

( dodavetal firma Aldrich); a 12,0 g; benzylbromiduj ( dodavatel firma Aldrich )J_; v 80,0 ml; 50%ního vodného roztoku hydroxidu sodného; ( hmotnostní poměry); byla míchána při teplotě 100,0°C;( olejová lázeň); v atmosféře dusíku; po dobu 2,0 hodin.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla reakční směs ochlazena na teplotu místnosti;, a po naředění na cel kový objem^s vodou)500,0 ml; byla za účelem odstranění dibenzylátového produkty}extrahována s 200,0 mi; diethyletheru. Ku oddělené vodné vrstvě, bylo přidáno 100,0 gj chloridu sodného, a tato směs byla 6x extrahována vždy se 100,0 mi; diethyletheru. Získané extrakty byly spojeny; a po vysušení se síranem sodným byly zahuštěny.

Bylo získáno 25,0 gj, žádaného hexaethylen glykol monobenzyletheruj ve formě látky olejovíté konzistence;, ve výtěžku 20,0%;, ( vztaženo na glykol )· ¹h-nmr;. ( CDCl^):

delta; 7,30; ( m.j 5*, 5 fenyi CH); 4,53*, ( s.J 2* benzyl 3,69 - 3_r54;_; ( m.; 22} 11 QEH^; 3,06; ( š.s.J 3J OH; a 0Η_?0 ).

Stupeň a)·)

Příprava triethylen glykol methyl tosyletheru

Toluenový roztok sulfonylchloridu;( 38,0 g); ( dodaného firmou Aldrich); a triethylenglykol monomethyletheruj(16,40: g); ( dodaného firmou Aldrich); ve 150,0 mlj- vysušeného pyridinu; byl míchán; nejdríve při teplotě 0°c; ( ledem chlazená lázeň); po dobu 4,0 hodin·; a poté ještě po dobu 18,0 hodin při teplptě • ·

místnosti.

Po skončení předcházející, výše popsané operace; byla reakční směs nalita do 500^0 ml; ledové vody; a poté byla extra; hována 3x vždy se 300,0 ml; diethyletheru. Etherové extrakty byly spojeny;, a po promytí s 3N roztokem kyseliny chlorovodíkové; byly vysušeny se síranem sodným· ; a zahuštěny. .

Bylo získáno 20,0 gj₇ žádaného triethylen glykol methyltosyletheruj ve formě bezbarvé látky, olejovíté konzistence;, ve výtěžku 62%;, ( vztaženo na glykol ).

¹h-nmr;, ( CDC1₃):

delta; 7,75;, ( a,;. J = S,0O Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,30; ( d.;.

J = 8,,10 Hz;, 2;, 2 fenyl CH ); 4,11* ( t.; J = 4,80 HzJ 2J oh₂os ); 3,65 - 3,41;, ( m.; 10; 5 ch₂o ); 3,32; ( s.; 3; ch₃o3; a 2,,40;, ( s.; 3; benzylový GH₃).

S t u p e ň a)₉

Příprava nonaethylen glykal benzyl methyletheru

Ku suspenzi, připravené smícháním 3,50 gj 5O%ního hydridu sodného; se 100,0 ml; bežvodého tetrahydrofuranu; byl přidán roztok, získaný rozpuštěním 22,30 gj hexaethylen glykol monobenzyletheru; ( připraveného v rámci výše popsaných operací); ve 100,0 mi; tetrahydrofuranu; a výsledná suspenze byla míchána při teplotě místnosti po dobu 30,0 minut.

Po skončení předcházející,, výše popsané operace, byl ku reakční směsi přidán po kapkách, roztok., získaný rozpuštěním 22,0 gj triethylen glykol methyltodyletheru; ( připraveného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a)^ ve 100,0 mi; tetrahydrofuranu.

Vzniklá reakční směs byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem; v atmosféře dusíku; přes noc. Po následném ochla zení na teplotu místhosti, byla směs smíchána s 500,0 ml vody; a následně byla 3x extrahována vždy se 300,0 mi; diethyletheru. Poté, co byly spojené etherové extrakty spojeny, byly vysušeny se síranem sodným; a za vakua byly zahuštěny.

Bylo získáno 27,0 gj žádaného nonaethylen glykol benzylmethyletheru; ve formě látky olejovité konzistence;, ve výtěžku 88,0%..

¹h-nmr;( GLC1₃):

delta; 7,31; .( m.;, 5J 5 fenyl CH ); 4,54; ( s.J 2J benzyl ΟΉ^); 3,62 - 3,52; ( m.; 36; 18 CH₂0 ); 3,35; ( s.J 3J CH^).

Stupeň a )₃

Příprava nonaethylen glykol monomethyletheru

Roztok,, připravený rozpuštěním 38,0 gj nonaethylen glykol benzyl methyletheru; ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně aígjve 200,0 mi; rnethanolu; byl třepán za přítomnosti 1O%ního palladia na aktivním uhlí (1,0 g*_t dodavatel firma Áldrich); v Parrově aparatuře; v atmosféře vodíku; při tlaku 344,70 KPa; přes noc..

Po skončení předcházející, výše popsané operace: byl katalyzátor odfiltrován přes oxid křemičitý;( Celite )* a získaný filtrát byl za vakua zahuštěn.

Bylo získáno 23,0 gj, žádaného nonaethylen glykol monome thyletheru;, ve formě látky olejovité konzistence;, ve výtěžku 74„0%.

¹h-nmr; ( cdci^):

delta; 3,67 - 3,47;, ( m.; 36; 18; och₂); 3,32; ( s.; 3; CH₃)·

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce

Vvpočteno :: C 53,26’ H 9,41; %

Nalezeno :: C 53,25; H 9,41; %

S t u p e ň b)

Příprava nonaethylen glykol monomethylether esteru kyseliny (E)-4-( 1 ,,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6dioxo-9H-purin-8-yl )-3-fenyl-2-propenové

Směs,, připravená smícháním 22,0 g;, kyseliny 4-formyl3-fenyl-2-propenové; ( dodané od firmy Aldrich); dále 60,0 g’ nonaethylen glykol monomethyletheru; (získanéKb v rámci výše popsaného Stupně β); a 10,0 g\. kyseliny toluensulfonové;(dodané od firmy Aldrich); v 600,0 nri; vysušených xylenů; byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem;( olejová lázeň ); tak dlouho, dokud nebyly v Dean Stárkově jímači shromážděny 2,0 mi; ( 110,0 mmolu); vody.

Po skončení předcházející, výše popsané operace; byla reakční směs zahuštěna na objem cca 100,0 mi; a po ochlazení na teplotu místnosti byla zpracována na sloupci se silikagelem; za použití směsi chloroformu a acetonu; v poměru 60 : 40; jako elučního činidla.

Bylo získáno 72,0 g*_t nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny 4-formyl-3-fenyl-2-propenové; ve formě látky olejovíté konzistence,* ve výtěžku 9T,_;Q%.

¹h-nmr; ( CDCl^):

7,89; ( a.; j = 8,10 h_z; 2; 2 ,10 Hz; 1; CH= ); 7,66; ( d.*,

6,57; ( a.; j = 16,10 h_z; 1 ;

3,77; ( m.; 2; ch₂o ); 3,67 ; (a.; 3; ch₃).

V nadpise uvedená sloučenina, byla připravena z 1,3-bis( cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouracilu postupem, popsaným v odborném časopise Syn.Commun.; 19J 3367 - 3370; / 1989/J sutor J. Perutmattam.

Postupem,, popsaným výše v rámci Příkladu 9); Stupeň d); bylo kondenzováno 10,40 gj 1 ,,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouraeilu; ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1 );· Stupeň d); se 18,0 gj nonaethylen glykol monomethylether\ést;eru ky seliny 4-formyl-3-fenyl-2-propenové; (získaného v rámci výše popsané operace ); a bylo získáno 20,0 gj žádané, v nadpise uvedené sloučeniny;, ve formě slabě žlutě zbarvené pevné látky; ve výtěžku 74,0%.

Teplota tání :

143,0 - 145,O°C

cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C47^H72^N4°13 ^:

Vypočteno : C 62,65; H 8^05; N. 6,32; %

Nalezeno : C 62,40;. H 7,92; NI 6,42‘„ %

Přikladli)

Příprava polyethylen glykol (n = 11,7 )-methylether esteru ky? seliny (E)-4-( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové •

Reakční směs, ve formě kaše,, připravená rozmícháním 5,50' gj. kyseliny (E )-4-/1 „3;-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9íT-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; ( získané v rámci výše popsaného Příkladu 1 );, Stupeň d); ve 365,0 g* póly ( ethylenglykol)-monomethyletheruj( dodaného firmou Aldrich);

o průměrné molekulové hmotnosti 550; a vysušeného před použitím odpařením s toluenem); obsahující 0,57 gj kyseliny sírové; byla míchána při tlaku 133 PaJ po dobu 15 minut.. Vzniklá reakční směs; ( žlutě zbarvená); byla poté míchána při teplotě 190,0°c; a tlaku 133 Pa;( olejová lázeň); po dobu 3,0 hodin; •Během této doby se všechny pevné složky ve směsi rozpustily; a byl získán hnědě zbarvený roztok.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla reakční směs ochlazena na teplotu místnosti; a temně zbarvený roztok byl nalit do 150,0 ml vody. Tato vodná směs byla nejdříve míchána po dobu 1,50 hodiny; a poté byla 3x extrahována vždy se 120,0 mlj, dichlorethanu. Spojené extrakty byly poté promyty se 150,0.mi; vody; a pH vodné fáze bylo upraven© pomocí koncentrovaného hydroxidu amonného na hodnotu 6,50.

Po následném vysušení se síranem sodným byly extrakty zahuštěny; a výsledná látkjí olejovité konzistence byla chromáto-λ grafován8 na reverzní C-18 fázi silikagelu; ( systém EM-Separations LiChroprep RP-18); přičemž byl sloupec eluován postupně se. směsí 30%ní vody v methanoluj až samotným methanolem. Surový produkt byl eluován samotným methanolem.

Získaná, oranžově zbarvená látka, voskovitého charakteru;

byla dále chromatografována na silikagelu, přičemž v nadpise uvedená sloučenina byla eluována se směsí 1,0 až 5%ního methanolu v chloroformu; a získaná,, žlutě zbarvená pevná látka;

voskovitého charakteru, byla následně rozpuštěna v chloroformu; a vysrážena přídavkem hexanů..

Byla získána žádaná, v nadpise uvedená sloučenina;, ve for mě slěbě žlutě zbarvené,, pevné látky; voskovitého charakteru;

( 6,34 g )Jye výtěžku 56,0%.,

Teplota tání x 140,0 - 143,O°C;

¹H-NMR;_;( DMSO-d^):

delta; 8,15; ( d.J, J = 8,50 HzJ 2J 2 fenyl CH ); 7,88; ( d.;

J = 8,50 Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,70; ( d.;, J = 16,00 Hz; 1; ch= ); 6,77; ( d.; j = 16,10 h_z; 1; ch= ); 4,28; ( m.; 2; co₂ch₂ ); 3,92; ( d.; j = 7,00 h_z; 2; ch₂n. ); 3,78; ( d.; j =

17,,20 h_z; 2; ch₂n ); 3,70; ( m.; 2; ch₂o ); 3,60 - 3,35·;( m.; cca 42; cca 10,50 CH^^O );, 3,23J ( s.; 3; CH-j); 2,Ο^υ - 1,50, a 1,30 - 0,90; ( oba š.m.J 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce °29^Η36^Ν4^α4· ⁽ °2^H4°’l-r,6· °>^{40 H}2°' ' Vypočteno ::

Nalezeno ::

c 61,30; H 8,20; N 5,48; % G. 61,24J H 8,26; N 5,54; %

Příklad 12)

Příprava hexaethylen glykol esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis( cyklohexylmethy1)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H>purin-8yl)- 3-fenyl-2-propenové

Stupeň a) ··

Příprava hexaethylen glykol esteru kyseliny 4-formyl-3-fenyl2-propenové

Směs, připravená smícháním 16,10 gj (68,10 mmolu); (E)methyl-4-( dimethoxymethyl)-3-fenyl-2-propenátu; ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 9)J Stupeň b); a 6,34 gj titanium isopropoxiduj( dodaného firmou Aldrich); byla míchána při teplotě místnosti; v přebytku surového hexaethylen glykol mono-( tetrahydropyranyl)-etherů;’( viz publikace v odborném časopise Tetrahedron; 29J 1659 - 1667; /1973/J autoři J.W.Cornforthj, E.D.Morgan; K.T.PottsJ R.J»W.Rees ); ( 52,76 g); po dobu 3 dnů®.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla reakční směs míchána za vakua 267 PaJ při teplotě 120>oPc;. po dobu 4,0 hodin» Poté, co byla reakční směs ochlazena na teplotu 32,O°C; bylo k ní přidáno 80,0 mi; ( 80,0 mmolu); 1N^: roztoku kyseliny chlorovodíkové; a výsledný vodný roztok byl míchán při teplotě 32,0 - 40,0°C; po dobu 1,50 hodiny; a poté byl neředěn s 10,0 mi; vody. Po následném dalším míchání směsi po dobu 30,,0 minut; byla směs nsředěna dalšími 10,0 ml vody.

Po uplynutí 2,50 hodiny; byla reakční směs ochlazena na teplotu míístnosti; a poté byla extrahována 3^‘, vždy se 100,0 mlj toluenu» Toluenové extrakty byiy spojeny; a po: vysušení se síranem sodným byl§ zahuštěny na látku olejovité konzistence; ( 33,81 g); která byla chromatografována na silikagelu; a za použití směsi 10%ního methanolu v ethylene tátu jako elttčního činidlaj a následným odpařením v ethanolu.

Bylo získáno 8,80 gj žádané, v nadpise uvedené sloučeniny·, ve formě voskovité, žlutě zbarvené, pevné .látky; ve výtěžku 29%.

¹H-NMR;,( DMS0-d₆):

delta; 10,06; ( s.J 1J CHO ); 7,98; ( m.J 4; 4 fenyl CH ); 7,77 ( d.; j = 16,00 Hz; 1; ch= ); 6,ss; ( d.; j = 16,00 Hz; 1; ch=); 4,60; ( m.; 1; OH ); 4,31; ( m.; 2; co₂ch₂); 3,71; ( m.; 2; ch₂o ); 3,51; ( m.; 20; 10 ch₂o )» ·· 9999 *« 4 99 99

9 9 9 9 99 · · · · · 9 9· 9 9 9 9 9 9 « • · · · · · 9 9 9 9 9

9 9 9 99 . 9 99 9 9 9 9

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^G22^H32^Q9- ^{0,35 H}2°· °»^{25 G}2^H6°

Vypočteno r. C 58,97; H 7„52; %

Nalezeno C 58,43;. H 7,40* %

Stupeň b)

Příprava hexsethylen glykol esteru kyseliny (E)-4-( 1,3-bis( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H~purin-8yl)-3-feny1-2-propenové

V nadpise uvedená sloučenina, byla připravena z 1,3-bis( cyklohexylmethyl)-5,6-disminourseilu; postupem.;, popsaným v odborném Časopise Syn.Commun.J 19; 3367 - 3370;/1989/J autor

J. Pe r u tma 11 am .·

Postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 9); Stupeň d); bylo kondenzováno 7,68 g; 1,3—bis—( cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouracilu; (získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1); Stupeň d)J s 10,,52 gj hexsethylen glykol esteru kyseliny 4formyl-3-feny1-2-propenové; ( získaného v rámci předcházející ho, výše popsaného Stupně a); a bylo získáno 8,0 g; v nadpise uvedené sloučeniny*, ve formě slabě žlutě zbarvené’, pevné látky; ve výtěžku 45,0%.

Teplota tání 165,0 - 168,0°C;

¹H-NMR;( DMSO-dg):

delta; 8,17; ( d.J J = 8,40 Hz; 2*, 2 fenyl CH); 7,9O*,( d.J J

8,40 Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,78; ( d.; J = 16,00 Hz; 1; CH=); 6,80; ( d.; j = 16,00 h_z; 1; ch= ); 4,6o;_; ( m.; 1; oh ); 4,30 • ·· ·· ·· · ♦ · · • · · · ® • · · · · « • · · · · ·· ···· *· • · · · · ( m.; 2; co₂ch₂ ); 3,93; ( a.; j = 6,90 h_z;.2; ch₂n ); 3,80;

( d.; J = 7,20 h_z; 2; ch₂n ); 3,71; ( m.; 2; ch₂o .); 3,65;

- 3,40; ( m.j 20; 10 CH₂0 ); 2,10 - 1,50; a 1,60 -0,90; ( oba š.m.; 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle ^C40^H58^N4^Qj1 O* ^H2° ^:

Vypočteno C 62,30; H 7,82;_?Nalezeno :: 0 62,33J H 7,80;

vzorce

N 7,27; N 7,26;

Příklad 13)

Příprave polyethylen glykol (n = 23,9 )J methylether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro

2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Stupeň a)

Příprava (E)-1 ,3-bis-( cy klohexylme thy l)-8r-_;t 4-(2-( 1H-imidazol1-yl-karbonyl)-vinyl)-fenyl)-9H-purin-2,6-( ÍH,3H)- dionu

Reakční směs, připravená ve formě kaše;smícháním 2,97 gj kyseliny (E)-4-/1,3-bis-( cyklohexyImethyl)-1,2,3,6-tetrahydro2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; ( získané v rám~ . v . bez voděno.

ci výše popsaného Příkladu 1); Stupen d); s 50,0 mlJVNjN-dimethylformamidu, byla zahřívána krátce v atmosféře dusíku,p^g zpětným chlaičem; až téměř ku refluxní teplotě.

• ·<

Po skončení předcházející,, výše popsané operace, bylo ku reakční směsi, ve formě slabě žlutě zbarvené kaše} přidáno 1,17 g> Ν,Ν-karbonyldiimidazolu}( dodaného firmou Lancaster Synthesis)} přičemž reakční směs zřídla a zabarvila se do oranžova tak, jak ise vyvíjel plynu Během několika minut se reakční směs zbarvila jasně žlutě; a zhoustla tak, jak se tvořila žlutě zbarvená;, pevná látka.

Poté, co byla reakční směs míchána po dobu 18,0 hodin* byla zředěna se 30,0.ml} dichlormethanu; a zfiltrována. Vzniklý, jasně žlutě zbarvený, filtrační koláč, byl prorayt se 30,0 ml} dichlormethanu, a částečně byl na vzduchu vysušenu Ještě mokrá, pevná látka; byla poté sušena zá vakua 13 Pa} a teplotě 40,0°C.

Bylo získáno 3,25 g} žádaného (E)-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-8-( 4-(2-(1H-imidažol-1-y1-karbony1)-vinyl)-fenyl)-9H-purin-2,6-(1H,3H)-dionu; ve formě žlutě zbarvené; práškovité látky; ve výtěžku 96,0%.

Teplota tání :: 310,0°c;( rozklad )} ¹ H-NMR}, ( DMSO-d₆):

deltaj 8,74J ( 3.} 1; imidazol CH )} 8,20} ( d.} J

2J 2 fenyl CH )} 8,06; ( d.} J = 7,70 Hz ( d.; j = 14,80 Hzj, 1; CH= ); 7,93; ( s. ( d.; j = 15,70 Hz; 1; ch= ); 7,14; ( s. ( d.; J = 7,oo h_z; 2; ch₂ní ); 3,77; ( d.

8,90 Hz;

2; 2 fenyl CH )} 8,03} 1; imidazol CH )}7,72} 1; imidazol CH )}3,92} j = 7,40 h_z; 2; ch₂n);

2,00 - 1,50; a 1,25 - 0,90; ( ob8 š.m.; 22 celkem} 2 cyklohexyl).

Í.V

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C31^H36^N6°3· ^{0,35 G}3^H7^{N0 :}Vypočteno : C 67,98}

Nalezeno :: G. 67,93}

H 6,84}, N 15,71} % H 6,67} Ní 15,92} % • ·

S t u p e ň b) řříprava polyethylen glykol ( n = 23,9)-methylether esteru kyseliny (E)-4-( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetr8hydro 2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Ku směsi, připravené ve formě kaše,smícháním 2,25 gj (E)1,3-bi s-( cyklohexylme thyl)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-y1-karbony1)vinyl)-fenyl)-9H-purin-2,6-( 1H,3H)-dionuJ ( získsného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a)j s 50,0 mlj bezvodého Ν,Ν-dimethylformamiduj a -žahřátě^.v^atmosfeře dusfku na teplotu 60,0°C J( olejová lázeň); bylo přidáno 4,80 gj poly-( ethylenglykol ) -monome thy letheru; ( dodaného firmou Shearwater Polymere); průměrná molekulová hmotnost- 1100J a vysušeného před použitím odpařením s toluenem;) a poté ještě ku jasné žlutě zbarvené reakční směsi;, ve formě·, kaše; byló· přidáno 658,0 mlj 1,8— diazabicyklo-/5.4.0/-undeč:-7-enu;. ( dodaného od firmy Aldrich),

Po přidáijí base se reakční směs zabarvils silně červeně*, a také došlo k téměř úplnému rozpuštění acylimidazolu. Červeně zbarvená reakční směs byle poté míchána při teplotě 60,0°© ještě po dobu 2,50 hodin; a během této doby se všechny pevné složky reakční směsi rozpustily.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, bylo pH slabě červeně zbarvené směsi upraveno pomocí kyseliny sírové na hodnotu 5,0J a po následném odtranění těkavých složek z z výsledné, slabě žlutě zbarvené reakční směsi; při vakuu 32 PaJ 8 teplotě 47,0°c;, bylo získáno 11,37 gj žlutě zbarvené látky, olejovité konzistence,, která byla chromatograf ována na C-18 reverzní fázi silikagelu;/ systém EM Separtions LiChroprep RP•v 18); přičemž byl sloupec eluován postupně se směsí 40%ní vody v methanolu; až samotným methanolem;, a elucí surového produktu samotným methanolem bylo získáno 10,25 gj žlutě zbarvené, pevné látky; která byla dále chromatografována na silikagelu.

V nadpise uvedená, žádaná sloučenina byla eluováne se 4 až 10%ní směsí methanolu v dichlormethanu.

H Wi II ♦ A A • · to to to to to · to » · ··· · · · to to to · • · · · · · · toto·· • · · · · · · · · toto to·

1,30 - 0,90, (-oba s.m.J 22 celkem;

Analytické hodnocení sloučeniny dle °29^Η36^ΝΛ· ^<e2^H4^0,23,4: °>³° ^H2°

Bylo získáno 5,73 gj žádané sloučeniny,, ve formě slabě žlutě sklovité látkyJ ve výtěžku 92,0%; a která, po mechanickém zpracovní a vyjmutí s hexany, poskytla voskovitou, žlutě zbarvenou pevnou látku.

Teplota tání :: 97,0 - 98,09c;, ¹H-NMi?;, ( DMSO-dg):

delta; 8,18; ( d.J J =8,20 HzJ 2J 2 fenyl CH ); 7,91; ( d.J J = 8,60 HzJ 2*, 2 fenyl CH ); 7,72; ( d.J J = 15,80 HzJ 1J ch= ); 6,79; ( d.; j = 15,90 Hz; 1; ch= ); 4,30; ( m.; .2; co₂ch₂ ); 3,94; ( a.; j = 7,00 h_z; 2; ch₂n ); 3,80; ( d.; j =

7,80 H_Z; 2;. ch ); 3,70; ( m.; 2; ch₂o ); 3,57 - 3,4i;( m.; cca 88; cca 44 CH₂0 ); 3,25; ( a.; 3J CH₃); 2,00-1,50; a 2 cyklohexyl ).

vzorce

N 3,58; %

N 3,62; %

Vypočteno

Nalezeno

C 59,02; H 8,53; G. 59,051 H 8,57;

Příklad 14)

Příprava polyethylen glykol (n = 41,5 )-methylether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,3,3,6-tetrahydro2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 13);

bylo zkuplováno 2,16 gj (E)-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-8-(4(2-(1H-imidazol-1-yl-karbonvl)-vinyl)-fenyl-9H-purin-2,6-(1H,3H) dionuj ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 13)J Stupeň a)J s 9,60 g; poly-( ethylenglykol)-monomethyletheruj(dodaného firmou Aldrich); průměrná molekulová hmotri/oet‘2000; a bylo získáno 6,80 gj žádané, v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě žlutě zbarvené, práškoví té látky’, ve výtěžku 76,0%»

Teplota tání : 56„O - 64,Q°c;

¹H-NMp; ( DMSO-d₆):

delta; 8,18; ( d.J J = 8,20 Hz; 2J 2 fenyl CH ); 7,91J ( d.J,

J = 8,20 Hz; 2J 2 fenyl CH ); 7,72; ( d.J J = 16,00 H_z; i; ch= ); 6,80; ( d.; j = 16,10 Hz; 1; ch= ); 4,30; ( m.; 2;;

co₂ch₂ .); 3,,70 - 4,00; ( m.; 6; 2 ch_?n; a oh₂o ); 3,70 - 3,40 ( m.;, cca 160; cca 80 CH₂O ); 3,25; (“s.; 3J CH₃); 2,00 - 1,50 a 1,30 - 0,90; ( oba š.m.;* 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce °29^Η3Λ°4· (g₂h^o)

Vypočteno : Nalezeno :

41,5’ 57,67;, 57,51;

H 8,73; H 8,51;

N; 2,40; N: 2,31;

Příklad 15)

Příprava polyethylen glykol (n = 15) methylether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cvklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahvdr0-2,6 dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Pdstupem, popsaným výše v rámci Příkladu 13); bylo zkuplováno 2,16 g; ( 3,84mmolu); (E)-1,3-bis-( c,yklohexy Imethyl )8—( 4-(2-(1H-imidazol-1-yl-karbonyl)-vinyl5- fenyl)-9H-purin·· · · · «

-2,6-(1H,3H)-dionu; ( získaného v rámci Příkladu 13); Stupeň a); ); s 3,30 g*, ( 4,4O mmolu); poly-( ethylenglykol)-monomethyletherují dodaného firmou Aldrich); o průměrné molekulové hmotnosti 75OJ a bylo získáno 3,30 g; žádané, v,nadpise uvedené sloučeniny; ve formě žlutě zbarvené látky_f voskovitého charakteru; ve výtěžku 74,0%.

Teplo-ta tání x 124,0 - 125,0°c;

¹H-NMP; (DMSO-dg):

delta*, 8,,18; ( d.‘, J = 8,20 HzJ 2; 2 fenyl CH ); 7,91 ; ( d.J J 8,.40 Hz; 2; 2 fenyl SH. ); 7,72; ( d.J J = 16,00 Hz; 1J CH= )· 6,80; ( d.; J = i6,_:oo h_z; 1; ch= ); 4,31; ( m.; 2; co₂ch₂,) ; 3,94;, ( rn.;, 2; ch₂& ); 3,8o;_: ( m.; 2; ch₂n ); 3,70; ( m.; 2; CH₂0) ); 3,60 - 3,40; ( m.; cca 58; cca 29 CH O ); 3,25; ( s.; 3J CH-j ); 1,80 - 1,50 a 1 ,30 - 0,90; ( oba š.m,; 22 celkem; 2 cyklohexyl )» vzorce

N 2,40; %

N 2,31; %

Analytické hodnocení sloučeniny dle ^e29^H36^N'4°4* Vypočteno x izenc x <W )₁₅

0,5 K₂C

G. 57j67; H 8,73; G 57,,51; H 8,51;

Příklad 16)

Příprava polyethylen glykol ( n =32,2)- esteru kyseliny (E)4-0 1,3—bis—( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo9H-purin-8-yl)-3-feny1-2-propenové ·

Ku 90,0 gj ( 60,00 mmolu); roztaveného poly( ethylenglykolu)J ( dodaného firmou Aldrich); o průměrné molekulová hmotnosti 150Q; a vysušeného před použitím odpařením s toluenem; bylo v atmosféře dusíku přidáno 1,69 gj (E)-1,3-bis-( cyklohexy lmethy 1)-8-(4-(2-( 1H-imidazol- 1-yl-karbonyl)-vinyl)-fenyi )9H-purin-2„6-(1H,3H)-dionu; ( získaného v rámci Příkladu 13)J Stupeň a)J, popsaného výše )J a vzniklá reakční směs,, ve formě žlutě zbarvené kaše,, byla naředěna se 40,0 mi; bezvodého N,Ndimethylformamidu; a poté byla zahřáta na olejové lázni na teplotu 60,0°C.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, bylo ku reakční směsi přidáno 494,0 mi; 1,8-diazabicyklo-/5*4.0/-undec7—enuj ( dodaného firmou Aldrich); přičemž se reskční směs zabarvila temně červeněJ a došlo k téměř úplnému rozpuštění acylimidazolu. Reakční směs byla poté míchána při teplotě 60,0°C; po dobu 16,50 hodiny; přičemž došlo během této doby k úplnému rozpuštění všech pevných složek.

Poté bylo pH oranžově zbarvené reakční směsi, ve formě roztoku,, upraveno pomocí kyseliny sírové na pH 5,0Ja těkavé složky byly ze eměsi, ve formě žlutě zbarveného roztoku; odstraněny při vakuu 93 PaJ a teplotě 5θ,0°0.

Zbylá,, oranžově zbarvená látk$, olejovíté konzistence, byla chromátografována na C-18 reverzní fázi silikagelu; (systém EM Separation3 LiChroprep RP-18); a sloupec byl postupně promyt se směsí 40%ní vody v methanoluj až samotným methanolemj a surový produkt,gluovaný samotným methanolemj ve formě žlutě zbarve látky o tenké vrstvě; ( 8,50 g ); byl dále chromátogrsfován na silikagelu..

V nadpise uvedená sloučenina byla eluováns se směsí 6,0 až 15%ního methanolu v dichlormethanu; ve formě slabě žlutě zbarvené látky sklovitého charakteru;( 5,83 g)J která byla nakonec mechamicky zpracována a vyjmuta s hexany.

fiylo získáno 4,773 gj žádané, v nadpise uvedené sloučeniny,, ve formě žlutě zbarvené látky, voskovitého charakteru^ ve výtěž83,0%.

-inwr π i • · · · » ·· · » ♦ v

Γ ··.· · · · ' · · · ® 6 6 © e e e 6 © © © e

- Teplota tání :: 83,0 - 84,0°c;

¹ Η-NMR; (DMSO-dg ):

delta; 13,92; ( s.; 1 BH ); 8,14; ( d.J J = 8,40 H_Z; 2; 2 fenyl CH ); 7,87; ( d.; J = 8,50 ^*,2; 2 fenyl OH ); 7,68; ( d.; J =

15,70 Hz; 1; gh= ); 6,76; ( d.; j = 16,10 Hz; 1; ch= ); 4,56;

( t.; j = 5,50 Hz; 1; OH ); 4,26; ( m.; 2; co₂oh₂); 3,90;. ( d.; j = 7,30 Hz; 2; ch₂hj ); 3,76; ( d.; j = 6,90 h_z; 2; ch₂ní );

3,66; ( m.; 2; CH₂Q; ); 3,60 - 3,.2Q; ( m.; cca 120; cca 60 CH₂O)

2,00- 1,50; a 1,30 - 0,80; ( oba š.m»; 22 celkem; 2 cyklohexyl).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C28^H34^N4°4*^C2^H4°^32,2 ‘°’^{2 H}2° * _

Vypočteno :: 0 58,,02; H 8,60*,, N 2,93;

Nalezeno x C 58,0)1; H 8,59; Ní 2,92;

příklad 17)

Příprava polyethylen glykol ( n = 18,9) esteru kyseliny (E)-4( 1,.3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Analogickým postupem,, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 16); bylo zkuplováno 1,69 gj (E)-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-8-( 4-(2-(1H-imidazol-1-yl-karbonyl)-vinyl)-fenyl )9H-purin-2,6-( 1H,3H)-dionu;, ( získaného v rámci výše popsaného ? Příkladu 13)J Stupeň a); se 60,0 gj poly( ethylenglykolu);(dodaného firmou Aldrich); o průměrné molekulové hmotnosti 1000; a bylo získáno 2,,747 gj žádané; v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě žůutě zbarvené látkyJ voskovítého charakteru; ve výtěžku 85,0%..

• · »· W Φ · 9 9 V V • » ···· ·····« » · · · · » · 9 9 · 9

9 ee *· ··· 6· ··

Teplata tání í -0O,O°c;

¹H-NMR; ( DMSO-dg):

delta; 13,88; ( s.‘, i; NH ); 8,11· ( d.; J = 8,00 Hz; 2; 2 fenyl GH 7,83; ( d.J J = 8,40 H_z; 2; 2 fenyl CH ); 7,66;

( d.;_; j = 16,,10 Hz; 1; ch= ); 6,73; ( d.; j - i6,io;h_z; 1 ; ch= ); 4,55;, ( t.; j = 5,50 Hz;, oh ); 4,26; ( _m.; 2; co₂ch₂); 3,87* ( d.;, J = 6,90 Hz; 2J CH^ ); 3,74; ( d.; J = 7,00. Hz;, 2* 0H₂NI ); 3,66; ( m.; 2; CH₂O ); 3,6O - 3,30; ( m.; cca 88; cca 40 CH₂O;, překrývající H₂0 ); 2,10 - 1 ,50; a 1,30 - 0,90** ^G'28^H34V4· ^^C2' 4^U? 18,9* ' ’²Vypočteno s ' C 58,77;

Nalezeno :: C 58,77;

oba š.m.„ 22 celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^H2° ^:

H 8,3S; N4,17; H 8,28;. řT 4,10;

Příklad 18)

Příprava polyethylen glykol (n = 13)-esteru kyseliny (E)-4( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo9H-purin-8-yl)-3-feny1-2-propenové

Analogickým postupem,, popsaným výše v rámci Příkladu 16); bylo zkuplováno 5,553 gj (E )-1 ,,3-bis-( cyklohexylmethyl)-8-(4(2-(1 H-imida a ol-1-y1-karbony1)-vinyl(-fenyl)-9H-purin-2,6 (1Η,3H) dionu* ( získaného v rámci Příkladu 13)J Stupeň β); se 121,0 gj, poly( ethylenglykolu)J( dodaného firmou Dow ); o průměrné molekulové hmostnosti 600; a bylo získáno 6,94 gj. žádané; v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě žlutě zbarvené* pevné látl^y; ve výtěžku 64,0%.

l

Φ Φ

Teplota tání :

142,0 - 143,0°c;

. . .·' . .·

Φ β β β .€ β¹' ¹Η-ΝΜΕ;( DMSO-dg):

deltaj 8,,18 8,40 Hz; 2; 6,79; ( a.; OH. ); 4,30; 3,so; ( d.; 3,42; ( m.;„ ( oba š.m.;

; ( d.; J = 8,40 Hz; 2; 2 fenyl CH ); 7,90; ( d.; J = fenyl CH ); 7,72; ( d.J J = 16,00 Hz; 1 ;. CH= ); j = i6,oo Hz; i; ch= ); 4,58; ( t.; j = 5,30 h_z;

( m.; 2; co₂ch₂); 3,94; ( d.; j = 7,,20 h_z; 2; ch i* ); j = 7,00 Hz; 2; ch₂® ); 3,70; ( m.; 2; ch₂o );. 3,61 cca 48; cca 24 CHgO )J 2,00 - 1,50; a 1,30 - 0,90?

celkem; 2 cyklohexyl ).

Analytické ^σ28^Η34®4°4

Vypočteno

Nalezeno hodnocení sloučeniny dle . ( C₂H₄O )₁₃. 1 H₂0 :

:: C. 59,98;. H 8,20;

z C 59,96; Η 8,18;

vzorce

N.'5,_;18; %

N, 5,13; %

P r í k 1, a d.

19)

Příprava nonaethylen glykol monomethylether esteru kyseliny 3£ 4-/1 ,,3-bis-( cyklohexylme thyl )-1 ,2,3,6-tetrahydro-2,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-fenylJ - propionové

Roztok,, připravený rozpuštěním nonaethylen; glykol monomethyl ether esteru kyseliny (E)-4-(1,3-bis-( cyklahexylmethyl)-1,2,3,6tetrahydro-2,6-dioxo-9H-p-arin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; (získaného v rámci Příkladu 10); Stupeň b)J popsaného výše ); (200,0 mg ); ve 50,0 mi; isopropanolu; byl míchán v atmosféře vodíku? při tlakw 2,0 KPa; za přítomnosti 10%ního palladia na aktivním uhlíj ( 40,0 mg); ( dodaného firmou Aldrich); v Btichiho tlakovém průtokovém autoklávuj po dobu 23,0 hodin.

β,

1« 4 4

Po skončení předcházející, výše popsané operace,, bvl katalyzátor odfiltrován přes oxid křemičitý; ( Celite^); a těkavé složky byly z filtrátu za vakua odpařeny. Zbytek,, ve formě látky olejovité konzistence,, byl po pětinásobném odpaření vždy s 10,0 mlj. chloroformuj vysušen při teplotě 50,0°C; a vakuu 25,33 Pa.

Bylo získáno 165,0 mgj žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené, pevné látky, voskovitého charakteru; ve výtěžku 83,0%.

Teplota tání :: 85,0 - 86,0^oCJ ¹H-NWt,( DMSO-d_ó):

Hodnoty odpovídají příslušné struktuře.

Analytické hodnocení sloučeniny dle

Vypočteno :: C 62,51 J, H 8,,26;

Nalezeno :: 0 62,39J H 8,27J vzorce 0₄γΗγ₄Ν^0·| ₃

Ν'6,21; %

N, 6,27; %

P ř í k: 1 a d 20)

Příprava nonatehylen glykol. methyl ether esteru kyseliny 3-^4/1,3-bis-( cyklohexylmethvl)-1,2,3>6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H; purinr-8-yl/-fenyl í - propionové

Stupeň a)

• · ¢. · · · · · ♦ » « · ·« '«· ·«···» • · · . · · · · · « ¢9 «β es eec a*, «·

Příprava ethylesteru kyseliny 3-^ 4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)1 , 2,3t 6-te trahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-f eny 1^ -2,.3-dibrom propionová

Ku roztoku,, připravenému rozpuštěním 1,90 gj ( 3,66 mmolu); etheresteru kyseliny (E)-4-( 1 ,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6tetrahydro-2,,6-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; ve 25,0 ml chloroformu; byl přidán za stálého míchání roztok, získaný rozpuštěním 0,64 gj.( 4,00 mmolu); bromu v 10,0 mi; chloroformuj a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti.

Po;- skončení předcházející, výše popsané operace, bylo rozpouštědlo z reakční směsi odpařeno; a bylo získáno 2,50 gj’ žádané,. v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě bíle zbarvené; pevné látky; ve výtěžku 100,0%.

¹h-nmr;_: ( cd.ci₃):

deltsj 8,31;, ( d.J, J = 8,40 HzJ fenyl CH; 2H )J. 7,56;.. ( d.J J =

8,40 Hz; fenyl CH; 2Η ) J. 5 ,_:40; ( d.J, J = 11,70 HzJ CHBrJ 1H )J 4,83; ( d.; j = 11,70 Hz; οηβγ; ih ); 4,38;. ( k.; j = 7,30 h_z; co₂ch₂; 2h ); 4,os; ( d.; j = 7,20 h_z; ch₂n; 2H ); 4,03; ( d.;

J = 7,30 HzJ, CH₂N; 2H ); 2,04; ( m.; c-hexyl CHJ 1H)J. 1,89J( m.; c-hexyl GHJ, 1H )J 1,50 - 1 ,80J ( m.; c-hexyl CH₂; 10H )J 1 ,39J ( t.j, J = 7,30 HzJ terminal-CH₃; 3H )J 1 ,00 - 1 ,30; ( m.J c-hexyl ^CH2J 1ΌΉ ).

Stupeň b?)

Příprava 3-^4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-fenylJ, -2-propionové kyseliny

Ku 2,80 gj ethylesteru kyseliny 3-S 4-/1,3-bis-( cyklohexyl55 φ ·' •4 · · methyl)-1,2,3,6-tetr8hydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-fenylJ 2,,3-dibrom-propionové kyselinyj ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a); bylo přidáno 56,0 mlj 1ΒΓ roztoku t-butoxidu draselného v t-butanoluj( dšaaného firmou Aldrich); při teplotě místnosti; a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti^ po dobu 2,50 hodiny.

Po skončení předcházející,, výše popsané operace,, bylo ku reakční směsi- přidáno*, 0-_r1'O; vody·;®' byis^íchána další 1 ,0 hodinu; a poté byla přidána směs, získaná smícháním 1,0 g; aktiv ního uhlíj ve 250,0 nri; vody. Tato reakční směs byla míchána po dobu 30 minut; a poté byla zfiltrována. Získaný filtrát byl okyselen pomocí koncentrované kyseliny chlorovodíkové na pH 1,0; a výsledná suspenze byla míchána po dobu 15,0 minut.

Po následném zfiltrování, byla pevná látky promyta 3x vždy s 50,0 mlj vodyj a poté byla za sníženého tlaku vysušena.

Bylo získáno 1,63 gj žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny; ve výtěžku 81,0%.

( DMSO-dg):

deltaj Q, 15; ( d.J_? J = 8,00 HzJ, fenyl CHJ 2H ); 7,73; ( d.; J = 8,00 Hz; fenyl OH; 2H ); 3,87*, ( d.J, J = 6,60 Hz‘_r CH NJ 2H ); 3,74; ( d.;, J = 6,80 Hz; CH₂N; 2H ); 1 ,88; ( š.s.J c-hexyl ch;

1H );_; 1,40 - 1,80; ( m.j c-hexyl CH; CH₂; 11H ); 0,80 - 1,20;

( m.;, c-hexyl CH₂; 10 H ).

Hmotnostní spektrometrie,(ES): 487;.(M-1); 443J(M-1-C0₂).

Stupeň c)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny 3£4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo 9H-purin-8-yl/-fenylr -2-propioňové • fr · · * · · · · · * ♦ © ·'· 'fit ' <>♦, ' <·,

Ku roztoku,, připravenému rozpuštěním 650,0 mg; ( 1,33 mmolu); kyseliny 3-£ 4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-fenylJ -2-propionové; ( získané v rámci předcházejícího,., výše popsaného Stupně b); ve 40,0 mlj bezvodého tetrahydrofuranu;, byl přidán za stálého míchání roztok,, získaný rozpuštěním 324,0 mg;, ( 2,,00 mmolu); 1,1-karbony 1diimidazolu; v 10,0 mi; acetonitrilu; a vzniklá reakční směs byla míchána po dobu 4,0 hodin.

Po skončení předcházející, výše popsané operace,, bylo ku reakční směsi přidáno 40,0 mi;, acetonitrilu; a vzniklá suspenze byla poté, co byla míchána po dobu dalších 30,0 minut,’ zfiltrována.. Pevná látka byla promyta 2x vždy se 10,0 ml, acetonitrilu; a po celonočním sušení za sníženého tlaku, byla smíchána s 10,0 mlj bezvodého dimethylforinamidu.

Ku vzniklé suspenzi bylo přidáno 857,,0 mg;, nonaethylen glykol monomethyletheruj a tato reakční směs byla míchána v atmosféře dusíku·, Póté bylo ku směsi přidáno po kapkách 300,0 _zul 1,8diazabicyklo-/5.4.0/-undec-7-enu; a vzniklý;, červeně zabarvený roztok byl míchán při teplotě místnosti nejprve po dobu 1,0 hodiny, a poté ještě další 1,0 hodinu při teplotě 40,0°C. Po ochlazení roztoku na teplotu 20,0°c; bylo přidáno ku směsi 100,0 mlj dichlormethanu; a pH bylo upraveno pomocí 5MF roztoku hydrogensíranu draselného;_: na hodnotu 5,0»

Po oddělení organické a vodné fáze,, byla vodná vrstva promyta 2x se 20,0 mlj, dichlormethanu; a spojené organické fáze byly nejprve vysušeny s bezvodým síranem hořečnatým’, a poté byly zfiltrovány. Filtrát byl za sníženého tlaku zahuštěn; a výsledný zbytek byl přečištěn chromatografii na silikagelu; za použití směsi ethyia&etát ; ethanolj ( v poměru 9,0 r 1,0)’, jako leučního činidla.

Bylo získáno 105,0 mg;, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny;, ve výtěžku 9,0%.

¹h-nmr;( goci₃.):

· , · Ψ 0^ ▼ W 0 » · » β · * 0 » · · * · » # * · · «····» delta; 8„27; ( d.J, J = 8,30 Hz; fenyl CH;. 2H ); 7,71; ( d.J J = 8,30 Hz; fenyl GHJ 2H ); 4,41J ( t.J J = 4,60 HzJ CO CH J 2H ); 4,06; ( d.; j = 7,30 hz; ch₂n; 2H ); 3,97; ( d.; J = 7,2a Hz; ch₂n.; 2H ); 3,78; ( t.; <1 = 4,80 hž; ch₂o; 2H ); 3,30 -3,70; ( m.; 15 oh₂; 30H ); 3,52; ( m.; ch₂o; 2H ); 3,34; ( a.; oo^;

3H ); 2,04; ( m.; c-hexyl CH; 1H ); 1 ,85; ( m.J c-hexyl CH; 1H);

1,60 — i,8o; ( m.; c-hexyi gh; ch₃; 10H ); 1,00 - 1,20; ( m.; c-hexyl GH^J 1 OHI ),

Hmotnostní spektrometrie; (EAB⁺):: 899J(M+1)J921J(Μ+Νβ);

Příklad 21 )

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-3/1,3-bis-( cyklohexylme thyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Stupeň a)

Příprava (E)-3-/(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrshydro2,6-dioxo-9H-purin-8-y1)-3-feny1-2-propenové

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1); Stupeň d); bylo redukováno 2,79 gj ( 8,00 mmolu); 1,6-amino1„3-bis-( cyklohexyImethyl)-5-nitrosouracil0; (získaného v rámci Příkladu IJStupeíhc); popsaného výše )J na 1,3-bis-( cykloljexylmethyl)-5,,6-diaminouracii; který kondenzací s 1 ,424 gj kyseliny 3-formyl-3-fenyl-2-propenové; ( viz také odborná pu• * * * *

blikače «$iOrg.Chem.; 40J 3037 - 3045;/1975/; autoři T.HigaJ a A. J.,Kruhsack )J poskytl 1,947 gj (E )-3-/1 ,3-bis-( cyklohexylmethyl)-! , 2„3,,6-tetrahydro-2,,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-3-fenyl-2propenové kyseliny; ve -bělávě _ zbarvené _r pevné látky.; ve výtěžku 49,0%.

Teplota tání :: ^35O,O°g; ‘ ¹H-OTR; ( DMSO-dg)::

Hodnoty odpovídají příslušné struktuře.

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce

^28^34¾¾* Vypočteno :: C 68,,30;	H 7,oo; NI 1 1 ,.38;	%
Nalezeno ::	C 68,33;,	H 6,93; NI 11,34;	%
Stupeň:	b)
Příprava nonaethylen glykol	methylether esteru	kyseliny

/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H purin-8-yl/-3-fenyl-2-propenové

Reakční směs; připravená ve formě kaše smícháním 0,50 gj (E)-3-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-te trahydro-2,,6-dioxo 9H-purin-8-yl/-3-fenyl-2-propenové kyseliny; ( získané v rámci předcházejícího, výše popseného Stupně 8); s 10,0 mi;' bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu; byla zahřáta v atmosféře dusíku; pod zpětným chladičem; téměř až ku refluxu.

Po skončení předcházející,, výše popsané operace, bylo ku reakční směsi ve formě žlutě zbarvené kašej přidáno 0,202 gj ( 1,22 mmolu);., N,N-karbonyldiimidazolu;_; ( získaného od firmy Aldrich); přičemž reakční směs seřídla; a za vývoje plynu se zbarvila oranžově.· Sáhem několika minut se kašovitá reakční směs zabarvila jasně žlutě; a při tvorbě žlutě zbarvené, pevné látky; zhoustle» Poté, co byla reakční směs míchána po dobu 18,0 hodin, byla nareděna se 30,0 mi; dichlormethanu, a následně byla zfiltrována.. Získaná,, jasně žlutě zbarvená pevná látkji byla promyta se 30,0 mi; dichlormethanu;a poté byla při teplotě 40,0°C vysušena»

Bylo získáno 0,403 gj (E )-1 ,,3-bis-( cyklohexylmethyl)-8(3-(2-(1H-imidazol-1-yl-karbonyl)-vinyl)-fenyl)-9H-purin-2,6(1H,3H)-dionuJ ve formě žlutě zbarvené látky; práškovitého charakteru»

Ku směsi, připravené smícháním 0,40 gj( 0,74 mmolu); (E)1,3-bis-( cyklohexylme thyl)-8-(3-(2-(1H-imidazol-1-yl-karbonyl)vinyl)-fenyl)-9H-purin-2,6-(1H,3H)-dionu; (získaného v rámci před cházející operace, popsané výše ); a 0,350 gj nonaethylen glykol monomethyletheruj ( získaného v rámci Příkladu 10); Stupeň a); popsaného výše )J v 10,0 mi; Ν,Ν-dimethylformamidu; bylo přidáno 0,112 g; 1 ,8-diazabicyklo-/5.4.0/-undec-7-enu;( dodaného firmou Aldrich); a výsledná reakční směs; ve formě roztoku, byla míchána při teplotě 55,0®C; po dobu 20,0 hodiifc»

Po skončení předcházející,, výše popsané operace,, byla reakční směs ochlazena na teplotu místnosti; a bylo upraveno pH pomocí 1N roztoku kyseliny chlorovodíkové; na hodnotu 7,0. Po následném přidání 50,0 mlj chloroformu;, byla směs vy třepána i :£x se 20,,0 mlj- vodyj a po oddělení vodných a organických fází,, byspojené organické vrstvy promyty se solenkou,* a po vysušení se sítanem hořečnatým;.byly za sníženého tlaku zahuštěny»

Zbytek,, ve formě voskoví té, pevné látky;, byl chromá tografován na silikagelu^ za použití směsi 10%ního methanolu v chloroformu; jako elučního činidla»

Bylo získáno 0,421 gj, žádaného nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-3-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3_r

6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-3-fenyl-2-propenové; ve formě bíle zbarvené, pevné látkyJ, voskovitého charakteru; ve výtěžku 63,0%»

Η-NMR; ( DMSO-d^ );.

, ......_; . . . d.;

I

,_:60; a 1,40 - 1,oo; ( m»; 22;, cyklohexyl CH₂;. a CH' )»

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^^47^72¾^ 3’^:

Vypočteno :: C 62,65>; H. 8,.05*, N. 6,22;. %

Nalezeno ϊ 0 62,57*, H 7,83.*, N. 6,50; %

Přiklaď 22)

Příprava nonaethylen glykol methylether amidu kyseliny (E)-4( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6- tetrahydro-2,6.-dioxo9H-purin-9-yl )-3-feny1—2-propenové

Stupeň. a)

Příprava 2,5,8,1 1-,,14,17,20,23,26-nonaoxo-oktakosyl-28~8minu

Stupeň a)| • · ·

Příprava hexaethylen glykol monobenzyletheru

Ku roztoku* připravenému rozpuštěním 100,0 g}. hexaethylengylkolu} ( dodaného firmou Aldrich )} v 1.000 ml} bezvodého tetrahydrofuranu} při teplotě 15,0°C} bylo po míchání po dobu 1,0 hodiny,, kdy teplota roztoku byla vy temperována ha teplotu místnosti} přidáno po kapkách* během 1,0 hodiny} 59,90 g} benzylbromiidu}, ( dodaného firmou Aldrich )} a výsledná reakční směs byla míchána při teplotě místnosti} po dobu 16,0 hodinu

Po skončení předcházející,, výše popsané operace, byls poté reakční směs po' ochlazení naředěna s 200,0 ml} vody} a následně byla extrahována 3x vždy s 50,0 ml} diethyletheru. Spojené diethyletherové extrakty byly poté 2x promyty vždy se 100,0 ml} vody* a spojené vodné vrstvy byly nasyceny s chloridem sodným* a poté byly extrahovány 4x vždy se 400·,.0 ml}, dichlormethanu.

Spojené dichlormethanové výtřepky byly promyty s 200>*Q ml} nasyceného vodného roztoku chloridu sodného} a následně byly vysušeny se síranem hořečnatým} a těkavé složky byly za sníženého tlaku odstraněny.

Bylo získáno 80,50 g} žádaného hexaethylen glykol monobenzyletheru} ve výtěžku 64,0%.

H-NMR spektra byla dhodná s údaji* uvedenými výše v rámci Příkladu 10)} Stupeň a).

Stupeň; a)^,

Příprava nonaethylen glykol benzyl methyletheru'

Roztok,, připravený rozpuštěním 80*0 g} hexaethylen glykol monobenzyletheru}( získaného v rámci předcházejícího} výše po* · « « · t · « « « « · 9 · » • « »* 9 · _ · ·'· « > 9 * 9,+ - * · psaného Stupně a)p; v 750,0 mlj bezvodého tetrahydrofuranu;. byl přidán ku suspenzi_r připravené smícháním 5,40 gj hydridu sodného;, ( 95%ní produkt); v tetrahydrofuranu; a výsledná reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3Q^; minut.

Po skončení předcházející,, výše popsané operace, byl ku reakční směsi přidán po kapkách roztok,, získaný rozpuštěními

68,40 gj triethylen glykoi methyl todyletheruj. ( připraveného postupem popsaným výše v rámci Příkladu 1)J, Stupeň a); ve 100,0; mlj, tetrahydrofuranu; a takto připravená reakční směs byla zahřívána v atmosféře dusíku; za refluxu pod zpětným chladičem; přes noc.

Poté bylo ku reakční směsi přidáno dalších 2,50 gj hydridu sodnéhoj, a směs byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu dalších 24 hodin. Po následném ochlazení směsi v lázni;, chlazené ledem, byla směs smíchána se 2,0 litry vody;, a poté byla extrahována 2x se 200,,0 mlj, diethyletheru. Po oddělení vodné; a organické fáze,, byla vodná vrstva 2x promyta vždy se 250,0 mlj; dichlormethanu;, a spojené organické vrstvy byly vysušeny se síranem hořečnatým; a zahuštěny.

Zbylá, hnědě zbarvená látk£ olejovité konzistence, byla ; zfiltrována přes vrstvu silikagelu;, a promyta s dichlormethanem. Dichlormethan byl poté odpařena.

Bylo získáno 63,10 gj. žádaného nonaethylen glykol benzyl methyletheruj, ve formě látky olejovité konzistence; ve výtěžku 57,0$·· ¹H-NMR;, ( DMSO-dg) :

3,50 - 3,30; ( m.j, 36J 18 CH^O );. 3,13; ( s.; 3; ck₃ ).

Stupeň a)^, .♦·*

- · *>

Příprava nonaethylen glykol monomethyletheru

Roztok,, připravený rozpuštěním 10,0 gj; ( 19,30? mmolu); nonaethylen glykol benzyl methyletheruj. ( získaného v rámci předcházejícího,, výše popsaného Stupně a)₂); ve 200,0 mi; ethanolu; byl třepán za přítomnosti 1,0 g; 10%ního palladia na aktivním uhlí; ( dodaného firmou Aldrich); v atmosféře vodíku; při tlaku 344,70 KPaJ v Parrově aparatuře;, po dobu 3,0 hodin.

Po: skončení předcházející,, výše popsané operace., byl katalyzátor odfiltrován přes oxid křemičitý;/ Celite^ )*, a získaný filtrát byl za vakua zahuštěn;, a odpařen z toluenem.

Bylo získáno 8,17 g; žádaného nonaethylen glykol monomethyletheruj, ve formě látky olejovité konzistence;, ve výtěžku 99,0%.

¹H-NMR;, (DMSO-d₆):

delta; 4,56;, ( t.j, 1 OH ); 3,60 - 3,35; ( m.; 36 J, 18 OCH^ ;

3„22;, ( s.;, 3;, gh₃ ).

S t u p e ň. a

Příprava nonaethylen glykol methyl tosyletheru

Ku roztokuj připravenému při teploiě 0°c; rozpuštěním 2,00 g; ( 4,70 mraolu),; nonaethylen glykol monomethyletheruj ( získaného v rámci předcházejícího,, výše popsaného Stupně a)₃J ve 15,0 mi; pyridinu; bylo přidáno 1,35'gj, toluensulfonylchloriduj a vzniklá reakční směs byl míchána při teplotě místnosti přes noc..

Po skončení předcházející, výše popsané operace*, byl8 reakční směs vychlazena na teplotu O°CJ a poté bylo upraveno pH ' w'

pomocí 121V roztoku kyseliny chlorovodíkové;, na hodnotu 2,00.

Po přidání 200,0 mlj, vody ku směsi, byla směs 3x vy třepána vždy s 50,0 mi;, dichlormethanu; a po oddělení organické a vodné fáze, byly organické vrstvy spojeny; a po promytí se solankou, byly vysušeny se síranem horečnatým; a odpařeny.

Bylo získáno 2,70 g; žádaného nonaethylen glykol methyl tosyletheru; ve formě bezbarvé látky;, olejovité konzistence.

^-NMS;, (DMSO-dg):

delta; 7,85 a 7,55;, ( 2d.;

3,70 - 3,45;_; ( m.;, 34J 17 0 ( _a.;, 3; ch₃).

Stupeň a

Příprava 2,5,8,11„14,17,20,23,26-nonaox0-oktakosyl-28-aminu

Ku roztoku,, připravenému rozpuštěním 2,60 gj ( 4,42 mmolu); nonaethylen glykol methyl tosyletheruj ( získanému v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a)^J v 10,0 mlj, Ν,Ν-dimethylformamidu,, bylo přidáno 0,35 gj, natriumazidu;( sodná sůl 8zoimidu );( dodaného firmou Aldrich); a 20,0 mgj jodidu sodnéhoj(dodaného firmou Aldrich ); a vzniklá reakční směs byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem;, po dobu 18,0 hodin.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla reakční směs ochlazena na teplotu místnosti; a po.neředění se 50,0 mi;, chloroformuj byla vytřepána 2x vždy s 10,0 ml vody,.

Po oddělení organické 8 vodné fáze,, byla organická vrstva vysušena se síranem hořečnatým; a zahuštěna.

Bylo získáno 2,25 gj, bezbarvé látky olejovité konzistence, která byla rozpuštěna ve 100,0 mlj ethanolu; a poté byla míτ-» *—rw-·—r-β· • i » · » · chána za přítomnosti 200,0 mg; 10%ního palladia na aktivním uhlí v atmosféře vodíkuj za tlaku 103,,40 KPaJ v Btichiho hydrogenačním autoklávuj po dobu 48,0 hodin.·

Po následném odstranění katalyzátoru filtrací na oxidu f B křemičitém;( Celite ); bylo rozpouštědlo odstraněno.

Bylo získáno 1,59 gj žádaného 2,5,8,.11 ,14,47,20,23,26nonaoxo-oktakosyl-28-aminu; ve formě bezbarvé látky; olejovité konzistence; ve výtěžku 77,,0%.

¹H-NMP;,( DMSO-d₆):

deltaj, 3,60 - 3,4OJ ( m, J 36J 18 Ciy a NH?); 3,20; ( 3J 0Η_β); Hmotnostní spektrometrie;(Cl)428„00;(100%,M+1).

Stupeň· b)

Příprava nonaethylen glykol methylether amidu kyseliny (E)-4( 1,_;3—bis—( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Ku směsi, připravené smícháním 0,50 gj (E)-1,3-bis-( cyklohexy lmethy1)-8-(4-(2-(1H-imidazol-1-yl-k8rbonyl)-vinyl)-fenyl)9H-purin-2,6-(1H,3H)-dionu; ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 13); Stupeň a); 8 0,43 gj 2,5,8,11,14,17,20,23,26-nona•v oxo-oktakosyl-28-aminu; ( 1,00 mmol )J ( získeného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně θ)^; v 10,0 mlj N,N-dimethylformamidu; bylo přidáno 0,168 gj 1 ,8-diazabicyklD-/5.4.0/-undec7-enuJ ( dodaného firmou Aldrich); a vzniklá, červeně zbarvená reakční směs; ve formě roztoku,, byla míchána při teplotě 55,O°c; po dobu 18,0 hodin.Po skončení předcházející, výše popsané operace, bylo ku reakční směsi přidáno dalších 0,43 gj aminuj a směs byla dále zahřívána po dobu 20,0 hodin. Výsledná reakční směs byla poté ochlazena na teplotu místnosti,, a pomocí 1N roztoku kyseliny chlorovodíkové,, bylo pH upraveno na hodnotu 7„0. následném přidání 25_řO'mi; vody,, byla reakční směs ve formě roztoku iřytřepána s s 50,0 mlj ethylacetátu. Po oddělení organické a vodné ráze, byla organická vrstva promyta se solankou; a po vysušení se síranem horečnatým,. byla za sníženého tlaku zahuštěna.

Chromatografii na silikagelu, za použití směsi 10%ního methanolu v chloroformu,, byla eluována v nadpise uvedená sloučenina Po odpaření rozpouštědla byla získána žádaná,, v nadpise uvedená sloučenina; t.j. 64,0 mg; nonaethylen glykol methylether amidu kyseliny (E)-4-( 1_ř3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3_rb-tetrahydra2,b-dioxo-9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; ve formě žlutě zbar vené,. pevné látky;, ve výtěžku 8,,Q%.

^TH-NME; ( DMSO-dg):

delta; 8,24; ( t.; i; NH );, 8,15; ( d.; J = 8,4O;2,sryl CH ); 7,69;· (( a.;. J = 8,30; 2$ 2 aryl CH ); 7,47; ( d.*,. J = 15,50J 1; .ch- ); 6,75; ca.; j = 15,.80;, 1; ch= ); 3,92; ( d.;, j = 7,10;

2; ch₂n, ); 3,78; ( a.; j = 7,2o;.2; CHyjr ); 3,60 - 3,30; ( m.; 36J, 18 ch₂); 3,23; ( s.; 3; ch₃ ); 2,00 - 1,50; a 1,25 - 0,96;

( oba m.J 11 cyklohexyl CH^; a CH ).

Λ·'

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C47^H73^°12- °’⁸⁵ ®2° ^:'

Vypočteno :: C 61,67; H 8,,22; N 7,-65; %

Nalezeno x C 61,66; H 8,,07; N< 7,67; % •ř

Příklad 23)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-3/(1,3-bis-( c.yklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrehydro-1,6-dioxo-9Hpurin-S-yl/-be nz oové • 9 • · » · · • · · ♦ « * ♦ · · · ·

-Stupeň a)

Příprava (E)-3-/(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-benzoové kyseliny

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1)J Stupeň d)J bylo redukcí 2,0 g} 1,6-emino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5-nitrosouracilu; a bezprostřední kondensací s 1 ,424 g'_tkyseliny 3-formylbenzoové; ( dodaného firmou Aldrich); postupem popsaným v odborném časopise Synthetic Coramun.; 19;3367 337OJ, /1989/; autor J.Perumattam; připraveno 2,27 g} zadané} v nadpise uvedené sloučeniny’, ve formě bělavě zbarvené’ pevné látkyj, ve výtěžku 85,0%.

Teplota tání :: ^25O„Q°C} ¹H-NMB; (DMSO-d₆.)r. .

Hodnoty odpovídají příslušné struktuře.

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce C^H^N^O^ r

Vypočteno :: C 67,22*, řf 12,06} B 6.,94} %

Nalezeno- : 067,10} N 12,04} H 6,97*, %

Stup e ň b)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)3-/(1 ,3—bis—í cykl.ohexylmethyl)-1 ,.2„3,6-tetrahydro-2,6-dioxo9H-purin-8-yl)-benzoové

Reakční směs, připravený ve formě kaše smícháním 0,500 g} (E)-3_/(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6—tetrahydro-2,6-dioxo68

9H-purin-8-yl/-benzoové kyseliny; ( získané v rámci předcházejícího,, výše popsaného Stupně a); s 10,0 mi; bezvodého N,N-dimethylformamiduj byla krátce zahřáté v atmosféře dusíku; téměř ku refluxu.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, bylo ku reakční směsi,, ve formě žlutě zbarvené kaše, přidáno 0,213 gj Ν,Ν-karbonyldiimidazolu; ( dodaného fitmou Aldrich); přičemž reakční směs seřídla; a za vývoje plynu se zabarvila oranžově. Během několika minut se reakční směs zabarvila jasně žlutěJ a z reakční kaše se vysrážela žlutě zbarvená sraženina. Směs byla poté, co byla míchána po dobu 18,0 hodin,, zředěna se 30,0 mi; dichlormethanu; a zfiltrována. Získaná pevná látka byla promyta se 30,0 mi; dichlormethanu;. a následně byla vysušena při teplotě 40,0°C.

Bylo získáno 0,46 gj (E)-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-8-/3(2-( 1H-imidazol-1-yl-karbonyl)-vinyl)-fenyl/-9H-purin-2,6-(1H; 3H ); dionu;. ve formě žlutě zbarvené látky, práškovítého charakteru.

Ku směsi, připravené smícháním 0,45 g*, (E)-1,3-bis-( cyklohexylmethy1)-8-(2-(ÍH-imidazol-1-yl-karbonyl)-vinyl)-fenyl/-9Hpurin-2,6-(1H,3H )-dionuJ ( získaného v rámci předcházející, výše popsané operace ); dále 0,393 gj nonaethylen glykol monomethyletheruj ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 10); Stupeň a); a 0,242 gj bezvodého uhličitanu draselného; ve 10,0 ml acetonitrilu; a míchané při zahřívání k refluxu pod zpětným chladičem po dobu 20,0 hodin, bylo přidáno 50,0 mi; chloroformu.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla reakční směs vytřepána s 20,0 mi; 1N roztoku kyseliny chlorovodíkové;, a po oddělení organické a vodné fáze,, byla organická vrstva promyta se solankou;, vysušena se síranem hořečnstým; a chromatograf ována na silikagelu,, za použití směsi 1O%ního methanolu v chloroformu, jako elučního činidla; a nakonec byla rozpouštědla odpařena..

Bylo získáno 0,262 g; žádané, v nadpise uvedené sloučeniny;, ve formě bíle zbarvené,· pevné látky; voskovitého cha69 ft Φ · 9 · 9 · » 9 9 9 9 * 9 9 » · 9 9 9 9 9 ··· *· ·· rakterui ve výtěžku 38,_;Q%., ¹ Η-M ; (DffiSO-d^):

delta; 8_ř79; ( s.;, ); a 8„43; ( d.;, J = 7„9O; ); 8,11; ( d.;

J = 8,.00 ); a 7,-57; ( TB.; každý 1; CgH );. 4,50; ( m.; 2; ch₂o. )·. 3,99;, ( d.;, ď = 7,10; 2; ch₂n; ); 3,83; ( m.; 4; ch₂n; a GH o ); 3,70 - 3,40;. ( m.;. 32; 16 ch₂) ; 3_r28;_: ( s.; 3; ch₃ ); 2„10 - 1,60; a 1,40 - 1,00; ( oba m.J 22J cyklohexyl CH₂; a CH)

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C45^H7OJ^N4^OÍ3'^{0,52 H}2° c 61 ,.05; h 8„1 o;, n. 6,33; C 61,05; H 8 „09; N. 6 ,.25;

Vypočteno N&lezeno

Příklad 24)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4/(1 _t.3—bis-( c.yklohexylTnethyl)-1 , 2,,3 ,,6-tetrehydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl/-benzoové

Stupeň a)

Příprava (E)-4-/(1 ,.3-bis—( cyklohexylmethyl)-1, 2,3,.6-tetrahydro

2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-benzoové kyseliny

Analogickým postupem,, popsaným výše v rámci Příkladu 1 )J Stupeň d);, bylo redukcí 1,00 gj 1 „6-emino-1 ,.3-bis-( cyklohexylmethyl)-5-ni tr os oursc i lůj a bezprostřední kondensací 1,424 g;

• · · · · · • · · · · ·«· ·· ·♦ kyseliny 4-formylbenzoové;( dodané firmou Aldrich); postupem popsaným v odborném časopise Synthetic Commun.; 19J 3367 337O*/1989./; autor J· Perumettam; připraveno 720,0 mg; žádané; v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě bělavě zbarvené;, pevné látky’,, ve výtěžku 54,0%.

Teplota tání x >300,0°c;

¹H-NMR;( DMSO-dg):

Hodnoty odpovídají příslušné struktuře.

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce θ26^Η32^Ν4θ'4

Vypočteno x 0 67,,23; H 6,94;. N; 12,06; %

Nalezeno :: 0 67,29; H6,98; N 12,02; %

Stupeňb)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4/( 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl/-benzoové

HeakČní směs, ve formě kaše, připravená smícháním 0,50) g; (E)-4-/(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-!,2,3,6-tetrahydro-2,6-aioxo-

popsaného Stupně a); s 10,0 ml; bezvodého N,N-diemethylfořmemiduj, byle krátce zahřáté v atmosféře dusíku; téměř k refluxu.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, bylo ku reakční směsi, ve formě slabě žlutě zbarvené kaše; přidáno 0,211 gj, Ν,Ν-karbonyldiimidazolu; ( dodaného firmou Aldrichlj přičemž reakční směs seřídlaj. a za vývoje plynu se zabarvila oranžově.

Poté se během několika minut reakční směs zabarvila jasně žlutě*, • · · · φ · · · φ φ φ · ·· ·· ·· ·· • · • · ·· φφφ a při tvorbě žlutě zbarvené, pevné látky;, zhoustla. Směs byla poté míchána po dobu 18,0 hodin; a po následném neředění se 30,0 mi; dichlormethanu; byla zfiltrována.

dásně žlutě zbarvená, pevná látka, získaná filtrací; byla promyta se 30,0 mlj dichlormethanu sušena při teplotě 40,Q?C

Bylo získáno 0,32 gj (E)—1 „3-bis-( cyklohexylmethyl)-8/3-(2-(1H-imidazol-1-yl-karbonvl)-vinyl)-fenyl/-9H-purin-2,6( 1H,3H:)-dionu; ve formě žlutě zbarvené látky; práškovítého charakteru.

Směs,, připravená smícháním 0,32 St- (E)-1,3-bis-( cyklohexyl methyl)-8-/3-(2-(1H-imidazol-1-yl-karbpny1)-vinyl)-fenyl/-9Hpurin—2,,6.-’ (1 Η„3Η;)-dionu; ( získaného v rámci předcházející, výše popsané operace); dále 0,277 gj, nonaethylen glykol monomethyl etheru; ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 10); Stupeň a)J a 0*170 g; bezvodého uhličitanu draselného; v 10,0 mi; acetonitrilu,* byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem) po dobu 20,0 hodin.

Po skončení předcházející, výše popsané operace,l?ylo ku reakční směsi přidáno 50,0 mi; chloroformu; a směs byla vytřepána se 20,0 mi; 1N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Po oddělení organické a vodné fáze, byla organická vVstva promyta se solankou; a po vysušení se síranem hořečnatým, byla chromatografována na sloupci se silikagelem; za použití směsi 10%ního methanolu v chloroformu; jako elučního činidla*, s nakonec byla rozpouštědla odpařena.

Získaná, žlutě zbarvená, pevná látkjjí voskovitého charakteru* byla přesrážena ze směsi ethylacetát - hexany; a žlutě zbarvená; pevná sraženina; byla zfiltrována; a vysušena.

Bylo získáno 0,355 gj. žádaného nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-4-/1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,3* 6-tetrahydro-2*6-dioxo-9H^-purin-8-yl/-benzoové; ve výtěžku 65,0%

(

Ί2.

2; 2 ch ); 4,4ο; ( m.; 2; ch₂© ); 3,.90; ( a.;, j = 7,30; 2; ch₂n. ); 3,75; ( m.;. 4; ch₂n., _a ch₂o ); 3,70 - 3,40; ( m.;

32; 16 ch₂ ); 3,19; ( s.; 3; ch₃ ); 2,10 - 1,60; a 1,40 1,00; ( m.;, 22; cyklohexyl CH₂; a CH ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce C^^H^qN^O^s

Vypočteno :: O 61 „77;, H 8,,06; N. 6,40; %

Nalezeno :: 061,55; Η 7,99; Ni 6,,52; %

P ř i k 1 8 d 25)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-2/(1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2„3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9Hpurin-8-yl/-benzoové

S t u p e ň a)

Příprava (E)-2-/(1 „3-bis-( cyklohexylmethyl)-1,2,,3,-6-tetrahydro2,6-dioxo-9H-purin-8-yl/-benzoové

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1); Stupeň d); byl redukcí 2,0 gj 1,6-amino-1,3-bis-( cyklohexylmethyl)-5-nitrosouracilu; připraven 1,3-bis-( cyklohexylmethyl)diaminouracii; který byl bezprostředně kondenzován s 1,424 g; kyseliny 2-formylbenzoové; ( dodané firmou Aldrich ); postupem popsaným v odborném časopise Svnthetic Commun.; 19; 3367-337OJ /1989/; autor J.PerumattamJ a bylo získáno 1,22 gj žádané; v nadpise uvedené sloucniny, ve formě bělavě zbarvené, pevné látky*.

ve výtěžku 46,0%.

Teplota tání 271,2 - 274,0°c;

¹ H-NMRJÍDMSO-dg) :'·

Hodnoty odpovídají příslušné struktuře.

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorné C^H-^N^O^ r.

Vypočteno :: 0 67,22; H 6,,9A; NT 12,06* %

Nalezeno :: 0 67,25;. H 6,.99/, M 1211 * %

S t u p e ή b)

Příprava nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E)-2/2-/(1 ,3-bis-C cyklohexylme thyl )-1 ,2,,.3 ,.6-tetrahydro-2,6~dioxo-: 9H-purin«-8-yl/-benzoové

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 24); Stupeň b); bylo 0,,100 g*. (E )-2-/(1 ,,3-bis-( c-klohexylmethyl)-1’,

2,3,6-tetrahydro-2,.6-dioxo-9H-purinr*8-yl/-benzoové kyseliny;

( získané v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a )J konvertováno na žádaný nonaethylen glykol methylether ester; kyseliny (E )-2-/2-/( T,,3-bis-( cyklohexylme thyl )-1 ,2,3 ,6.-tetr8hydno 2,_;6-dioxo-9H-purín-8-yl/-benzoové; (' 0,082 gj,); ve výtěžku 43% ve formě jantárove žlutě zbarvené, látky olejovíté konzistence.

¹ H-NME; ( DMSO-dg )::

delta; 7,8θ - 7,50; ( m.; 4J 4 aromatický Cff ); 4,20; ( m.; 2J

17;Ch₂ ); 3,2o; ( s.; 3; ch₃); 1,9a- 1,40; _s 1,20-0,80; (m.;

22; cyklohexyl ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C4Oj3* 0,85. EtOAc. 0,64 H^O ::

Vypočteno z C 60,50} H 8*18} N 5*83} %

Olezeno : 0 60,50} ÍT. 8*19} N 5*83} %

Příklad 26)

Příprava nonaethylen; glykol methylether esteru kyseliny (E)-4( 1*3—bis—( cyklohexylmethyl)-1,2*3,6-tetrshydro-6-oxo-2-thioxo9H-purin»-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Analogickým postupem,.popsaným výše v rámci Příkladu 24)} Stupeň b)} bylo esterifikováno 500,0 mg}. (E )-4-( 1,3-bis-C eyklo hexylmethyl)-1,2*3 ,.6-tetrahydro-6-oxo-2-thioxo-9Hi-purin-8-yl)3-fěnyl-2-propenové kyseliny} (0,99 mmolu)} ( Mezinárodní patentová přihláška (WO;) 96/04-280. )}, s nonaethylen glykol methyletherem..

Bylo získáno 0,.145 g} žádané,, v nadpise uvedené sloučeniny} ve formě žlutě zbarvené* pevné látky, voskoví tého charakteru;, ve výtěžku 20,0%.

¹H-NMR} ( DMSO-dg):.

delta} 6,17} ( d.} J = 8,40} 2} 2 aryl CH )}. 7,90} ( d.} J = 8*40} 2} 2 aryl CH )} 7*69} ( d.} J = 15,90} 1} CH= )} 6,77} ( d.}, J = 16*10} 1 } CH= )} 4,53} ( d. } J = 7*00} 2} CH^ )} 4,40}, C d.} J = 7,00} 2} CH₂N )} 4*25} ( m.} 2} CH^ )} 3,70} ( m..} 2} CH₂Q )} 3,60 - 3,30} ( m.} 32} 16 CH^} 3,23.} ( s.}

3} CH^, )} 2,40 — 2,00} ( 2m} 2} 2GH cyklohexylu )}. 1,80 - 1,60} a 1*20: - 1,00}, ( oba m.} 20} cyklohexyl CH )»

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce ^C47^H73^N4⁰,2^S· °’^{89 H}2° ^:

Vypočteno O 60,.49; H 7,97; N; 6,00;. S 3,44ζ %

Nalezeno ; C 6O_r49*„ H 7,70J N.6,31; S 3,55; %

P ř í k 1 a d 27)

Příprava nonaethylen glykol nrethylether esteru kyseliny (E)4-(1 ,.3-bis-( cyklohexy Ime thyl )-1, 2,.3,,6-tetrah.ydro-2,6-dioxo 9H-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové

Ku směsi,, připravené smícháním 60,75 gj, (0,112 molu); (E)1,3-bis-( cyklohexyIme thyl)-8- (3-(2-0 H-imida zol-1 -y 1-karbony 1)vinyl)-fenyl)-9H-purin-2,8-OH,3íi)-dionu; a 31,0 g* ( 0,225 molu); uhličitanu draselného;, ve 650,0 mi; ecetonitrilu; bylo přidáno 57,80 g*, ( 135,0 mmolu); nonaethylen glykol monomethyletheruj ( získaného v rámci Příkladu 10); Stupeň a); popsaného výše) a vzniklá reakční směs byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem;, po dobu 18,.0 hodin.

Po skončení předcházející, výše popsané operace, byla vznik lá reakční směs ochlazena na teplotu místnosti; a poté byla zředěna se 1.200 mlj chloroformu. Chloroformový roztok byl poté promyt s 800,0 mlj, 1 Ni roztoku kyseliny chlorovodíkové; poté s 500,0 mi; vody;, a nakonec 2x se 200,0 mi; solanky. Po vysušení se síranem, hořečnatým; byl chloroform odpařen,; a byla získána surová forma v nadpise uvedené sloučeniny; ve formě žlutě zbarvené,, pevné látky, voskovitého charakteru,, která byla chromatograf ována 2x na silikagelu; za použití nejprve směsi 10%ního^ methanolu v chloroformu; a poté za použití směsi 10%ního methanolu v ethylacetátu; jako elučních činidel.

Pp. .následné® pře srážení ze směsi chloroform - hexany;

a vysušení za vakua;, bylo ze žlutě zDarvené_ř pevné látky; voskoví tého charakteru, získáno 64,50 g*_T nonaethylen glykol methylether esteru kyseliny (E )-4--( 1 ,3-bis-( cyklohexylmethyl)-1 , 2,3,6 te trahydro-3 ,6-dioxo-9H?-purin-8-yl)-3-fenyl-2-propenové; ve výtěžku 65,0%» ¹ H-m;

Hodnoty v nadpise uvedené, žádané sloučeniny, jsou identické se vzorkem látky, získané v rámci Příkladu 10); Stupeň b).

Analytické hodnocení sloučeniny dle vzorce

Vypočteno r C 62,65; H 8,05; Ni 6„22; %

Nalezeno :: 0 62,-33; H 7,-94; N< 6,,25; % • 4

Farmaceutické prostředky

V následujících příkladech může být	účinnou složkou
	jakákoliv sloučenina obecného vzorce I	nebo	její farmaceuti
	ky přijatelná sůl nebo soivát, s	výhodou jde	o sloučeniny z
5	příkladů 2 až 26.
	1. Tablety
	i) pro perorální podání
			mg/tableta
		A	B	C
10	Účinná složka	25	25	25
	Avicel	13	-	7
	Laktoza	78	47	- .
	Škrob kukuřičný	-	9	-
	Škrob NF15,gelatinizovaný	-	-	32 .
15	Sodná sůl glykolátu škrobu	5	-	-
	Pólyvinylpyrolidon	3	3	-
	Stearan hořečnatý	1	1	1
	ii) pro podání pod jazyk
20			mg/tableta
		D		E
	Účinná složka ^z	25		25
	Avicel	10		-
	Laktoza	-		36
25	Mannitol	51		57
	Sacharoza	-		3
	Akácie	-		3
	Polyvinylpyrolidon	3		-
	Stearan hořečnatý	1		1
30		90		125

• ·	• · ·	•	• ·	•	• ·			• ·
• ·			- « '·	• ·	0	•	e	•
• ·	•		• 0	0	0	0	•	•
								•
• ·	•	•	• ·	0	•	•	•	•
• ·	• ·		• 0	• 00	0 ·			• 0

Prostředky A až E je možno připravit granulací prvních šesti složek za vlhka při použití polyvinylpyrolidonu s následným přidáním stearanu hořečnatého a pak lisováním na tablety.

iii) pro podání ústní sliznicí mg/tableta

Účinná složka 25 Hydroxypropylmethylceluloza HPMC 25 Polycarbophil 39 Stearan hořečnatý 1

Tento prostředek je možno připravit přímýma slisováním směsi uvedených složek.

2. Kapsle

i) s práškovou náplní

Účinná složka

Avicel

Laktoza

Škrob (1500NF)

Sodná sůl glykolátu škrobu Stearan hořečnatý mg/kapsle F G

25

153

117

2

225 150

Prostředky F a G se připraví smísením složek a plněním směsi do dvoudílných kapslí z tvrdé želatiny.

ii) s kapalnou náplní ’ 25

Účinná složka	mg/kapsle Η I 25 25
Macrogol 4000BP	200
Lecithin	100
Arašídový olej	100
	225 225

Prostředek H je možno připravit roztavením Macrogolu 4000BP, dispergováním účinné složky v tavenině a plněním směsi do dvoudílných kapslí z tvrdé želatiny. Prostředek I se připraví tak, že se účinná složka disperguje ve směsi lecithinu a arašídového oleje a výsledná disperze se plní do měkkých, elastických kapslí z měkké želatiny. iii) s řízeným uvolněním

Účinná složka	mg/tableta 25
Avicel	123
Laktoza ;	62
Triethylcitr.át	3
Ethylceluloza	12
	225

Prostředek je možno připravit tak, že se první čtyři složky smísí.a vytlačuji a vytlačený materiál se sferonizuje a suší. Sušený materiál se. povléká ethylcelulozou jako membránou pro řízené uvolnění účinné složky a pak se plní do dvoudílných kapslí z tvrdé želatiny.

3. Prostředky pro nitrožilní podání

% hmotnostní

Účinná složka 2

Hydroxid sodný do pH 7

Voda pro injekční podání do 100

Účinná složka se rozpustí v citrátovém pufru a dostatečném množství kyseliny chlorovodíkové k úpravě roztoku na pH 7. Výsledný roztok se doplní na požadovaný objem a sfiltruje přes filtr s mikropory do sterilních skleněných nádobek, které se uzavřou.

Příklad G: kapsle s obsahem prášku k inhalaci Účinná složka (průměr 0,5-7,Omikrometru) 1,0 mg

Laktoza (průměr 30-90 mikrometru) 49,0 mg

Práškové materiály se smísí na homogenní směs, která se plní v množství 50 mg na jednu kapsli do kapslí z tvrdé želatiny.

Příklad H: aerosol pro inhalaci Účinná složka (průměr 0,5-7,Omikrometru) . 50,0 mg

Sorbitantrioleát 100,0 mg

Sodná sůl.sacharínu (průměr 0,5-7 , Omikrometru 5,0 mg Methanol 2,0 mg

Trichlorfluormethan 4,2 g ' Dichlordifluormethan do 10,0 ml

Sorbitan trioleát a methanol se rozpustí v trichlorfluormethanu.·, Sodná sůl sacharínu a účinná složka se v této. směsi dispergují a směs s uloží do vhodné nádobky pro aerosol a ventilem se vstříkne dichlorfluormethan.. Prostředek obsahuje 0,5 mg účinné, složky ve 100 mikrolitrech.

Biologická účinnost

1. Zkouška se zánětem pohrudnice po karagenanu. Protizánětlivá účinnost sloučenin podle vynálezu byla prokázána způsobem, popsaným v publikaci Vinegar, R, a další, Proč. Soc. Exp. Biol. Med.., 1981, 168,24-32 při použití krysích samců kmene Lewis s hmotností 150 +/- 20 g. Dávka karagenanu byla 0,075 mg/krysa. Pohrudniční výpotek byl odebrán 4 hodiny po injekci karagenanu. Protizánětlivý účinek byl hodnocen podle inhibice otoku pohrudnice a výskytu zánětlivých neutrofilnch buněk ve srovnání s negativní kontrolní skupinou, jíž bylo podáno pouze rozpoštědlo.

2. Kolitis, vyvolaná kyselinou octovou.

Protizánětlivá účinnost sloučenin podle vynálezu byla .stanovena také na krysím modelu u zánětu střev podle publikace Fretland, D., a další, 1990, 255:572-576 na krysích samcích kmene Lewis s hmotností 275 +/- 25 g. Sloučeniny byly podávány perorálně nebo rektálně 24, 16 a 4 hodiny před 40sec. trvající instilaci 3% roztoku kyseliny octové do proximálních 6 cm tlustého střeva v lehké anestezii. Střevo bylo -okamžitě promyto 5 ml fyziologického roztoku chloridu sodného. Po 24 hodinách byly krysy usmrceny a proximálních 6 cm tlustého střeva bylo po vynětí zváženo ke zjištění otoku. Zánětlivá infiltrace neutrofilními buňkami byla stanovena měřením MPO ve sliznici tlustého střeva těchto krys. Protizánětlivý účinek zkoumaných látek byl vyjádřen kvantitativně inhibici tvorby otoku, a hodnoty MPO ve sliznici ve srovnání s negativními kontrolami, jimž bylo podáno pouze rozpouštědlo.

Získané výsledky jsou shrnuty v následující tabulce:

v 25

colitis po kyselině octové (24 h)	účinná dávka mg/kg (způs ob p o dán í)	hmotnost tkáně	0.17 (ic)	θ T V> O	o c LT> C-	neúčinná (50, po)	NT	H Z	NT	NT	ic = podání do tlustého střeva po = perorálně renčního příkladu 1 je ve všech případech neúčinná
MPO	0.03 (ic)	5.0 (ic)	O S lo o.	o o tn e_	NT	NT	NT	NT
T? o v CL'-' 05 3 Ό C ’ •H 05 P c •H <D Lt bO 3 oj <1) SL a 05 a	OJ tn >> bO E >o c -P O tn tn 'P o E W	otok	0.015 i	0.2	0.5	0.2	0.5	ó	ro	0.2
buňky 1	0.02 i i	0.02	0.5	0.4	0.5	ó	o	0.2
	n (nebo průměr)		o	C\	15 or 16	41.5	CO	18.9	32.2
o w CL,		rn K o	m > 1 ( o	X o	m K o	OH	Z O	HO	o o ÍH N O «3 C C '05 ·Η > C O <D
Sloučenina	Dexamethason ..	Příklad 9	Příklad 10	Příklad 15	Příklad 14	Příklad 18	Příklad 17	Příklad 16	NT = nebylo test Referenční slouc

Původní kyselina, tzn. sloučenina z referenčního příkladu 1 je neúčinná při obou uvedených testech.

3. Septický šok in vivo:C.Parvum/LPS

Myším samcům kmene CD-I s hmotností 25-30 g (Charles

River:Raleigh, NC) bylo nitrožilně i.v. vstříknuto 100 mikrogramů usmrceného C.parvum (Coparvax, Burroughs Wellcome, RTP, NC) . Po 10 dnech se myším vstříkne i.v. 20 mikrogramů lipopolysacharidu E.Coli 026:B6 (LPS, Difco Labs, Detroit, MI) v přítomnosti analgetika butorfenolu 150 mikrogramu/myš. Zkoumané látky se rozpustí v dimethylsulfoxidu a zředí v 0,5% methylceluloze, načež se podávají 2 hodiny před LPS a současně s LPS. Výsledky .jsou uvedeny v následující tabulce:

Ošetření perorálně' Přežívající myši Přežití v %

Kontroly 0/8 0

Příklad 9 75mg/kg 4/8 50

Příklad 1 75mg/kg 2/8 25

Zastupuje η

• 4	4 4 4 4	4·	4	4·		• 4
4	4	4 4	• 4	.. 4	4	4
4	4	4 4	4	4	4	4
•	4	• · ·		• ·	•	•
4	• 4	4 4	4	•	4	•

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Substituované purin-8-ylfenylové deriváty obecného vzorce I, kde

X znamená -O- nebo -NH-,

Q znamená (-CH₂-)_p, (-CH=CH-)_p, (-C=C-)_p, kde p znamená celé číslo 0 až 4,

R¹ znamená atom vodíku nebo methyl,

R² a - R^J znamená nezávisle O nebo S, •n je celé číslo 1 až 50 a R znamená atom vodíku nebo methyl, jakož i solváty těchto sloučenin.
2. Deriváty podle nároku 1, v nichž X znamená -O- nebo -NH- a R¹ znamená, atom vodíku.
3. Deriváty podle nároku 1 nebo 2, v nichž n znamená celé číslo 8 až 20.

2t 4. Deriváty podle nároku 3, v nichž n znamená- celé-číslo 8 až 15.

5. Deriváty podle některého z nároků 1 až 4, v nichž R³znamená atom kyslíku-a R² znamená atom kyslíku nebo siry.

• · i ·· · 4· • · · · · · • · · · · • · · · · · • · · · · · ·· ··

9. 9 9 · .

9 9 9 9

6. Deriváty podle nároku 5, v nichž R² a R³ znamenají atomy kyslíku.

7. Deriváty podle některého z nároků 1- až 6, v nichž p znamená 0 nebo 1.

8. Deriváty podle některého z nároků 1 až 7, v nichž Q znamená (-CH=CH-)_p.

9. Deriváty podle některého~z.nároků 1 až 8, v nichž substituent — (Q) — je vázán na fenylový kruh v poloze para.

10. Deriváty obecného vzorce la

O (Q) — c kde

X znamená -O- nebo -NH-,

Q znamená (-CH₂-)_p nebo (-CH=CH-)_p, kde p je· cele číslo 1'až' 4,

R¹ znamená atom vodíku nebo methyl, n znamená celé číslo 1 až . 50 a R znamená atom vodíku.nebo methyl, a také solváty těchto sloučenin.

_4i R (^!a * 25

44 ···· 4« • · · · • 44 · • 4 · · 4
4 44 ·· ·

44 44 44

11. Derivát podle nároku 1, kterým je dekaethylenglykolmethyletherester kyseliny (E)-4-(1,3-bis(cyklohexylmethyl)1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)skořicové,
5 nonaethylenglykolmethyletherester kyseliny (E)-4-(1,3-bis(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl) skořicové, nonaethylenglykolmethyletherester kyseliny (E) -3-/1,3-bis (cyklohexylmethyl) -1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-yl)
10 skořicové, nonaethylenglykolmethyletheramid kyseliny (E)-4-/1,3-bis(cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8-ylj skořicové, nonaethylenglykolmethyletherester kyseliny (E)-4-/1,3,-bis 15 (cyklohexylmethyl)-1,2,3,6-tetrahydro-2,6-dioxo-9H-purin-8

-yl/ benzoové.
12. Derivát podle některého z nároků 1 až 11 nebo jeho farmaceuticky přijatelný solvát pro použitá, k léčebným účelům.

-i
13. Farmaceutický -prostředek,, v yznačující se 20 tím, že. jako jsou. účinnou složku obsahuje derivát podle některého' z. nároků 1 až 11 nebo. jeho farmaceuticky přijatelný solvát spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.
14. Použití derivátu podle některého z nároků 1 až 11 nebo

25 farmaceuticky..‘přijatelného solvátu tohoto derivátu pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení zánětlivých stavů a poruch imunitního systému.
15. Způsob léčení zánětlivých stavů a poruch imunitníhosystému, vyznačující se tím, že se podává ú30 činné množství derivátu podle některého z nároků 1 až 11 nebo • 0 ... 0 0 0 0

0 0 β

00 0« jeho farmaceuticky přijatelného solvátu.
16. Způsob výroby derivátu podle některého z nároků 1 až 11 nebo jeho solvátu, vyznačující se t 1 m, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II nebo její aktivovaný derivát še sloučeninou obecného vzorce III .

15 kde.. obecné. .symboly- mají význam, uvedený- v hlavním nároku, apopřípadě, se. takto -získaný derivát vzorce' I převede na jiný derivát vzorce--1 nebo na odpovídající solvát. .
17.- Způsob-výroby derivátů obecného. vzorce- I, v y z n. a č u20 jící se t 1 m, že se kondenzuje-sloučenina -obecného vzorce IV

CHO

00 ···· ·* • · · · · l » 0 · ·

Φ0 00 0 0 0 0

0 ·0 β • · · · · 00 00

0 ·’ nebo acetalový derivát této látky, kde jednotlivé obecné symboly mají význam, uvedený v hlavním nároku, s 1,3-bis(cyklohexylmethyl)-5,6-diaminouracilem.

Zastupuje :

JUDr