ES2960063T3

ES2960063T3 - Compuestos antitumorales

Info

Publication number: ES2960063T3
Application number: ES22187664T
Authority: ES
Inventors: Maria Del Carmen Cuevas Marchante; Andrés Francesch Solloso; Valentin Martinez Barrasa
Original assignee: Pharmamar SA
Current assignee: Pharmamar SA
Priority date: 2017-04-27
Filing date: 2018-04-27
Publication date: 2024-02-29
Anticipated expiration: 2038-04-27
Also published as: DK3395821T3; EP4047002B1; HUE045641T2; IL289963B1; HUE046109T2; HUE062032T2; MY198004A; KR20200012846A; JP2022130682A; AU2022200250B1; CY1126061T1; US20210246146A1; TN2019000210A1; EP4101855B1; IL270153A; TWI742273B; IL289963B2; PL3395821T3; CN110621678A; KR20210126791A

Abstract

Un compuesto de fórmula general ID, en la que X, R1-R4 tienen diversos significados, para uso en el tratamiento del cáncer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos antitumorales

Campo de la invención

La presente invención se refiere a análogos sintéticos de las ecteinascidinas, en particular, de la ecteinascidina 736 (ET-736), a composiciones farmacéuticas que los contienen, a métodos para su fabricación y a dichos compuestos para su uso como agentes antitumorales.

Antecedentes de la invención

Las ecteinascidinas son agentes antitumorales sumamente fuertes que se aíslan del tunicado marinoEcteinascidia turbinata.Uno de estos compuestos, ET-743, de fórmula:

se está empleando como medicamento antineoplásico, con la denominación común internacional (INN) trabectedina, para el tratamiento de pacientes con sarcoma de tejidos blandos (STS) avanzado y metastásico, después de que las antraciclinas y la ifosfamida hayan fallado o que no sea apto para recibir dichos agentes, y para el tratamiento de cáncer de ovario sensible a platino recidivante en combinación con doxorrubicina liposomal pegilada.

La ecteinascidina 736 (ET-736) fue descubierta por primera vez por Rinehart y presenta una unidad tetrahidro-pcarbolina en lugar de la unidad tetrahidroisoquinolina que se encuentra más normalmente en los compuestos de ecteinascidina aislados de fuentes naturales; véase, por ejemplo, Sakaiet al.,Proc. Natl. Acad. Sci. EE. UU. 1992, vol. 89, 11456-11460.

La patente de Estados Unidos n.° 5.149.804 describe la ecteinascidina 736 (ET-736), aislada del tunicado caribeñoEcteinascidia turbinata,y su estructura. La ET-736 protege a ratonesin vivoa concentraciones muy bajas contra el linfoma P388, el melanoma B16 y carcinoma de pulmón de Lewis.

El documento WO03014127 describe varios análogos sintéticos de ET-736 y su actividad citotóxica contra células tumorales. En particular, el documento WO03014127 describe los compuestosAaDjunto con su actividad citotóxica contra un conjunto de estirpes celulares de cáncer.

El documento WO2011/147828 describe procesos de síntesis para la fabricación de compuestos de ecteinascidina. Otro compuesto descrito en esta solicitud de patente,PM01183,se encuentra en la actualidad en ensayos clínicos para el tratamiento del cáncer.PM01183tiene la siguiente estructura química:

PM01183ha demostrado tener una actividadin vitromuy fuerte contra estirpes celulares de tumores sólidos y no sólidos, así como una actividadin vivosignificativa en varias estirpes celulares de tumores humanos xenoinjertados en ratones, tales como las de cáncer de mama, riñón y ovarios.PM01183ejerce sus efectos antineoplásicos a través de la modificación covalente de las guaninas en el surco menor del ADN que finalmente da lugar a la rotura de la doble cadena de ADN, a la detención de la fase S y a la apoptosis de las células cancerosas.

A pesar de los resultados obtenidos en las aplicaciones clínicas en quimioterapia, la búsqueda en el campo de los compuestos de ecteinascidina aún está abierta a la identificación de nuevos compuestos con características óptimas de actividad, selectividad hacia el tumor, con una toxicidad sistémica reducida y/o propiedades farmacocinéticas mejoradas.

Sumario de la invención

La invención se define mediante las reivindicaciones. El tema que va más allá del alcance de las reivindicaciones se divulga solo por razones ilustrativas y no forma parte de la invención. En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmulaIDo una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable:

en donde:

X es -O-;

Ri es -OH o -CN;

R2 es un grupo -C(=O)Ra;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb;

R4 se selecciona entre hidrógeno, -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc;

Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir;

Rb se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; y

Rc se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir.

En un aspecto más de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la presente invención y un transportador farmacéuticamente aceptable.

En un aspecto más de la presente invención, se proporciona una forma farmacéutica que comprende una composición farmacéutica según la presente invención.

En un aspecto más de la presente invención, se proporciona un compuesto, composición farmacéutica o forma de dosificación según la presente invención para su uso como un medicamento.

En un aspecto más de la presente invención, se proporciona un compuesto, composición farmacéutica o forma de dosificación según la presente invención para su uso en el tratamiento de cáncer.

En un aspecto más de la presente invención, se proporciona un kit que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según la presente invención y un transportador farmacéuticamente aceptable. El kit es para su uso en el tratamiento del cáncer.

En un aspecto más de la presente invención, se proporciona un proceso para obtener compuestos de fórmula ID o una sal o un éster de los mismos farmacéuticamente aceptables; que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula II con un compuesto de fórmula III para dar un compuesto de fórmula IV:

en donde (en la medida en que lo permitan los grupos sustituyentes posibles):

X es -O-;

R2 es un grupo -C(=O)Ra;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb;

R4 se selecciona entre hidrógeno, -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc;

El proceso puede incluir la etapa adicional de reemplazar el grupo ciano en el compuesto de fórmula IV con un grupo hidroxi para dar un compuesto de fórmula ID donde R1 es OH.

Breve descripción de las figuras

Figura 1.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, compuestoC, 4-Sy12-S.

Figura 2.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuestoC, 4-Sy12-S.

Figura 3.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo, compuestoC, 4-Sy12-S.

Figura 4.Evaluación del volumen tumoral de tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuestoC, 4-Sy12-S.

Figura 5.Evaluación del volumen tumoral de tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuestoC, 4-Sy12-S.

Figura 6.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuestoC, 4-Sy12-S.

Figura 7.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC-27 en ratones tratados con placebo, compuestoC, 4-Sy12-S.

Figura 8.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo,PM01183y4-R.

Figura 9.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo,PM01183y compuestoD.

Figura 10.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo,PM01183y4-R.

Figura 11.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo,PM01183y compuestoD.

Figura 12.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo,PM01183y4-R. Figura 13.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo,PM01183y compuestoD.

Figura 14.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo,PM01183y4-R. Figura 15.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo,PM01183y compuestoD.

Figura 16.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC-27 en ratones tratados con placebo,PM01183y4-R.

Figura 17.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC-27 en ratones tratados con placebo,PM01183y compuestoD.

Figura 18.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, compuestoDy12-R.

Figura 19.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuestoDy12-R.

Figura 20.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo, compuestoDy12-R.

Figura 21.Evaluación del volumen tumoral de tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuestoDy12-R.

Figura 22.Evaluación del volumen tumoral de tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuestoDy12-R.

Figura 23.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuestoDy12-R.

Figura 24.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC-27 en ratones tratados con placebo, compuestoDy12-R.

Figura 25.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-S.

Figura 26.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-S.

Figura 27.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-S. Figura 28.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-S. Figura 29.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-S.

Figura 30.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-R.

Figura 31.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-R.

Figura 32.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-R. Figura 33.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-R. Figura 34.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC-27 en ratones tratados con placebo,PM01183y19-R.

Figura 35.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, compuestoCy39-S.

Figura 36.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuestoCy39-S.

Figura 37.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo, compuestoC y 39-S.

Figura 38.Evaluación del volumen tumoral de tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuestoCy39-S.

Figura 39.Evaluación del volumen tumoral de tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuestoCy39-S.

Figura 40.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuestoCy39-S.

Figura 41.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, compuestoCy39-S.

Figura 42.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, compuestoDy47-R.

Figura 43.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuestoDy47-R.

Figura 44.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo, compuestoDy47 R.

Figura 45.Evaluación del volumen tumoral de tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuestoDy47 R.

Figura 46.Evaluación del volumen tumoral de tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuestoDy47-R.

Figura 47.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuestoDy47-R.

Figura 48.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, compuestoDy47-R.

Figura 49.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo,ET-736y32.

Figura 50.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo,ET-736y32.

Figura 51.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo,ET-736y32. Figura 52.Evaluación del volumen tumoral de tumores H526 en ratones tratados con placebo,ET-736y32. Figura 53.Evaluación del volumen tumoral de tumores H82 en ratones tratados con placebo,ET-736y32. Figura 54.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo,ET-736y32. Figura 55.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo,ET-736y32. Figura 56.Evaluación del diámetro total del tumor de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo,PM01183y35.

Figura 57.Evaluación del volumen tumoral de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo,PM01183y35.

Figura 58.Evaluación del volumen tumoral de tumores H460 en ratones tratados con placebo,PM01183y35. Figura 59.Evaluación del volumen tumoral de tumores A2780 en ratones tratados con placebo,PM01183y35. Figura 60.Evaluación del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo,PM01183y35. Figura 61.Evaluación del volumen tumoral de tumores PC-3 en ratones tratados con placebo,12-Sy12-R. Figura 62.Evaluación del volumen tumoral de tumores PC-3 en ratones tratados con placebo y4-S.

Figura 63.Evaluación del volumen tumoral de tumores DU-145 en ratones tratados con placebo y4-S.

Figura 64.Evaluación del volumen tumoral de tumores 22Rv1 en ratones tratados con placebo y4-S.

Figura 65.Evaluación del volumen tumoral de tumores PC-3 en ratones tratados con placebo y39-S.

Figura 66.Evaluación del volumen tumoral de tumores DU-145 en ratones tratados con placebo y39-S.

Figura 67.Evaluación del volumen tumoral de tumores 22Rv1 en ratones tratados con placebo y39-S.

Descripción detallada de las realizaciones preferidas

Lo siguiente se aplica a todos los aspectos de la presente invención:

En los compuestos de la presente invención, los grupos alquilo pueden ser ramificados o no ramificados y, preferentemente, tener de 1 a aproximadamente 12 átomos de carbono. Una clase más preferida de grupos alquilo tiene de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono. Aún más preferidos son los grupos alquilo que tienen 1,2, 3 o 4 átomos de carbono. Metilo, etilo, n-propilo, isopropilo y butilo, incluyendo n-butilo, isobutilo, sec-butilo y ferc-butilo, son los grupos alquilo particularmente preferidos en los compuestos de la presente invención.

En los compuestos de la presente invención, los grupos alquenilo pueden ser ramificados o no ramificados, tener uno o más dobles enlaces de 2 a aproximadamente 12 átomos de carbono. Una clase más preferida de grupos alquenilo tiene de 2 a aproximadamente 6 átomos de carbono. Son aún más preferidos los grupos alquenilo que tienen 2, 3 o 4 átomos de carbono. Etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 1-metiletenilo, 1 -butenilo, 2-butenilo y 3-butenilo son los grupos particularmente preferidos en los compuestos de la presente invención.

En los compuestos de la presente invención, los grupos alquinilo pueden ser ramificados o no ramificados, tienen uno o más triples enlaces y de 2 a aproximadamente 12 átomos de carbono. Una o más clases preferidas de grupos alquinilo tienen de 2 a aproximadamente 6 átomos de carbono. Aún más preferidos son los grupos alquinilo que tienen 2, 3 o 4 átomos de carbono.

Los grupos arilo adecuados en los compuestos de la presente invención incluyen compuestos anulares sencillos y múltiples, que incluyen compuestos con múltiples anillos que contienen grupos arilo separados y/o condensados. Los grupos arilo habituales contienen de 1 a 3 anillos separados y/o condensados y de 6 a aproximadamente 18 átomos de carbono en el anillo. Preferentemente los grupos arilo contienen de 6 a aproximadamente 10 átomos de carbono en el anillo. Los grupos arilo especialmente preferidos incluyen fenilo sustituido o sin sustituir, naftilo sustituido o sin sustituir, bifenilo sustituido o sin sustituir, fenantrilo sustituido o sin sustituir y antrilo sustituido o sin sustituir.

Los grupos heterocíclicos adecuados incluyen grupos heteroaromáticos y heteroalicíclicos que contienen de 1 a 3 anillos separados y/o condensados y de 5 a aproximadamente 18 átomos en el anillo. Preferentemente los grupos heteroaromáticos y heteroalicíclicos contienen de 5 a aproximadamente 10 átomos en el anillo, lo más preferentemente 5, 6 o 7 átomos en el anillo. Los grupos heteroaromáticos adecuados en los compuestos de la presente invención contienen uno, dos o tres heteroátomos seleccionados entre átomos de N, O o S e incluyen, p. ej., coumarinilo, que incluye 8-coumarinilo, quinolilo, que incluye 8-quinolilo, isoquinolilo, piridilo, pirazinilo, pirazolilo, pirimidinilo, furilo, pirrolilo, tienilo, tiazolilo, isotiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, imidazolilo, indolilo, isoindolilo, indazolilo, indolizinilo, ftalazinilo, pteridilo, purinilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, furazanilo, piridazinilo, triazinilo, cinolinilo, benzoimidazolilo, benzofuranilo, benzofurazanilo, benzotiofenilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, naftiridinilo y furopiridilo. Los grupos heteroalicíclicos adecuados en los compuestos de la presente invención contienen uno, dos o tres heteroátomos seleccionados entre N, O o S e incluyen, p. ej., pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidrotiopiranilo, piperidilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tioxanilo, piperazinilo, azetidinilo, oxetanilo, tietanilo, homopiperidilo, oxepanilo, tiepanilo, oxazepinilo, diazepinilo, tiazepinilo, 1,2,3,6-tetrahidropiridilo, 2-pirrolinilo, 3-pirrolinilo, indolinilo, 2H-piranilo, 4H-piranilo, dioxanilo, 1,3-dioxolanilo, pirazolinilo, ditianilo, ditiolanilo, dihidropiranilo, dihidrotienilo, dihidrofuranilo, pirazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, 3-azabiciclo[3.1.0]hexilo, 3-azabiciclo[4.1.0]heptilo, 3H-indolilo y quinolizinilo.

Los grupos anteriormente mencionados pueden estar sustituidos en una o más posiciones disponibles por uno o más grupos adecuados tales como OR', =O, SR', SOR', SO2R', NOz, NHR', NR'R', =N-R', NHCOR', N(COR')2, NHSO2R', NR'C(=NR')NR'R', CN, halógeno, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCONR'R', CONHR', CONR'R', OH protegido, amino protegido, SH protegido, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir, alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir y grupo heterocíclico sustituido o sin sustituir, donde cada uno de los grupos R' se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, OH, NOz, NH2, SH, CN, halógeno, COH, COalquilo, COzH, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir, alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir y grupo heterocíclico sustituido o sin sustituir. Donde dichos grupos están a su vez sustituidos, los sustituyentes se pueden seleccionar entre la lista anterior. Además, cuando hay más de un grupo R' en un sustituyente, cada R' puede ser igual o diferente.

En los compuestos para la presente invención, los sustituyentes halógeno incluyen F, Cl, Br e I.

Las expresiones "sal farmacéuticamente aceptable" y "éster" se refiere a cualquier sal farmacéuticamente aceptable o éster que, tras su administración al paciente es capaz de proporcionar (directa o indirectamente) un compuesto como se describe en el presente documento. Sin embargo, se apreciará que las sales no farmacéuticamente aceptables también se divulgan puesto que estas pueden ser útiles en la preparación de sales farmacéuticamente aceptables. La preparación de las sales puede llevarse a cabo por métodos conocidos en la materia.

Por ejemplo, las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos proporcionados en el presente documento se sintetizan a partir de los compuestos precursores, que contienen un resto básico o ácido, mediante métodos químicos convencionales. En general, dichas sales se preparan, por ejemplo, haciendo reaccionar el ácido o la base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o el ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de ambos. En general, se prefieren medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, prefiriéndose 2-propanol o acetonitrilo. Los ejemplos de sales de adición de ácidos incluyen las sales de adición de ácidos minerales tales como, por ejemplo, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, sulfato, nitrato, fosfato y las sales de adición de ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, acetato, trifluoroacetato, maleato, fumarato, citrato, oxalato, succinato, tartrato, malato, mandelato, metanosulfonato y p-toluenosulfonato. Los ejemplos de las sales de adición de álcalis incluyen sales inorgánicas tales como, por ejemplo, sodio, potasio, sales de calcio y amonio, y sales alcalinas orgánicas, tales como, por ejemplo, etilendiamina, etanolamina, N,N-dialquilenetanolamina, trietanolamina y sales de aminoácidos básicas.

Los compuestos de la invención pueden estar en forma cristalina o amorfa, tanto en forma de compuestos libres como de solvatos (por ejemplo, hidratos) y se pretende que todas las formas estén dentro del alcance de la presente invención. Los métodos de solvatación generalmente son conocidos en la técnica.

Es posible el estereoisomerismo sobre los carbonos asimétricos con estereoquímica sin especificar, por lo tanto, en dichos casos los carbonos asimétricos pueden tener configuración(R)o (S). Todos los diastereómeros generados por una configuración específica de dichos carbonos asimétricos junto con los otros carbonos asimétricos presentes en la molécula y las mezclas de los mismos, se consideran dentro del alcance de la presente invención. También es posible el estereoisomerismo sobre el doble enlace (isomerismo geométrico), por lo tanto en algunos casos la molécula puede existir como isómero (E) o isómero(Z).Si la molécula contiene varios dobles enlaces, cada doble enlace tendrá su propio estereoisomerismo, que podría ser el mismo o diferente del estereoisomerismo de los otros dobles enlaces de la molécula. Además, los compuestos mencionados en el presente documento pueden existir en forma de atropisómeros. Los estereoisómeros individuales incluyendo los diaestereoisómeros, isómeros geométricos y atropisómeros de los compuestos mencionados en el presente documento y sus mezclas están dentro del alcance de la presente invención.

Además, los compuestos mencionados en el presente documento pueden existir en formas marcadas isotópicamente. Todas las sales farmacéuticamente aceptables, los ésteres y las formas marcadas isotópicamente de los compuestos mencionados en el presente documento y sus mezclas, se consideran dentro del alcance de la presente invención.

Las formas protegidas de los compuestos divulgados en el presente documento se consideran dentro del alcance de la presente invención. El experto en la materia conoce bien los grupos protectores adecuados. Se proporciona una revisión general de los grupos protectores en química orgánica en Wuts, PGM y Greene TW en Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a ed. Wiley-Interscience y por Kocienski PJ en Protecting Groups, 3a ed. Georg Thieme Verlag. Estas referencias proporcionan secciones sobre los grupos protectores para los grupos OH, amino y SH.

Dentro del alcance de la presente invención, se define que un grupo protector de OH es el resto unido aOresultante de la protección del OH a través de la formación de un grupo OH protegido adecuado. Los ejemplos de dichos grupos OH protegidos incluyen éteres, éteres de sililo, ésteres, sulfonatos, sulfenatos y sulfinatos, carbonatos y carbamatos. En el caso de éteres, el grupo protector para el OH se puede seleccionar entre metilo, metoximetilo, metiltiometilo, (fenildimetilsilil)metoximetilo, benciloximetilo, p-metoxibenciloximetilo, [(3,4-dimetoxibencil)oxi]metilo, pnitrobenciloximetilo, o-nitrobenciloximetilo, [(R)-1-(2-nitrofenil)etoxi]metilo, (4-metoxifenoxi)metilo, guaiacolmetilo, [(pfenilfenil)oxi]metilo, t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo, siloximetilo, 2-metoxietoximetilo, 2-cianoetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2,2,2-tricloroetoximetilo, 2-(trimetilsilil)etoximetilo, mentoximetilo, O-bis(2-acetoxi-etoxi)metilo, tetrahidropiranilo, fluorotetrahidropiranilo, 3-bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-metoxiciclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranilo, S,S-dióxido de 4-metoxitetrahidrotiopiranilo, 1-[(2-cloro-4-metil)-fenil]-4-metoxipiperidin-4-ilo, 1-(2-fluorofenil)-4-metoxipiperidin-4-ilo, 1-(4-clorofenil)-4-metoxipiperidin-4-ilo, 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1-etoxietilo, 1-(2-cloroetoxi)etilo, 2-hidroxietilo, 2-bromoetilo, 1-[2-(trimetilsilil)etoxi]etilo, 1-metil-1-metoxietilo, 1-metil-1-benciloxietilo, 1-metil-1-benciloxi-2-fluoroetilo, 1-metil-1-fenoxietilo, 2 ,2 ,2-tricloroetilo, 1,1-dianisil-2 ,2 ,2-tricloroetilo, 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-fenilisopropilo, 1-(2-cianoetoxi)etilo, 2-trimetilsililetilo, 2-(benciltio)etilo, 2-(fenilselenil)etilo, t-butilo, ciclohexilo, 1 -metil-l'-ciclopropilmetilo, alilo, prenilo, cinnamilo, 2-fenalilo, propargilo, pclorofenilo, p-metoxifenilo, p-nitrofenilo, 2,4-dinitrofenilo, 2,3,5,6-tetrafluoro-4-(trifluorometil)fenilo, bencilo, pmetoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2,6-dimetoxibencilo,o-nitrobencilo,p-nitrobencilo, pentadienilnitrobencilo, pentadienilnitropiperonilo, halobencilo, 2,6-diclorobencilo, 2,4-diclorobencilo, 2,6-difluorobencilo,p-cianobencilo, fluorobencilo, 4-fluoroalcoxibencilo, trimetilsililxililo, p-fenilbencilo, 2-fenil-2-propilo, p-acilaminobencilo, p-azidobencilo, 4-azido-3-clorobencilo, 2-trifluorometilbencilo, 4-trifluorometilbencilo, p-(metilsulfinil)bencilo, p-siletanilbencilo, 4-acetoxibencilo, 4-(2-trimetilsilil)etoximetoxibencilo, 2-naftilmetilo, 2-picolilo, 4-picolilo, N-óxido de 3-metil-2-picolilo, 2-quinolinilmetilo, 6-metoxi-2-(4-metilfenil)-4-quinolinametilo, 1 -pirenilmetilo, difenilmetilo, 4-metoxidifenilmetilo, 4-fenildifenilmetilo, pp-dinitrobencihidrilo, 5-dibenzosuberilo, trifenilmetilo, tris(4-t-butilfenil)metilo, a-naftildifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenil)fenilmetilo, tri(p-metoxifenil)metilo, 4-(4'-bromofenaciloxi)fenildifenilmetilo, 4,4',4"-tris(4,5-dicloroftalimidofenil)metilo, 4,4',4"-tris(levulinoiloxifenil)metilo, 4,4',4"-tris(benzoíloxifenil)metilo, 4,4'-dimetoxi-3"-[N-(imidazolilmetil)]tritilo, 4,4'-dimetoxi-3"-[N-(imidazoliletil)carbamoil]tritilo, bis(4-metoxifenil)-1'-pirenilmetilo, 4-(17-tetrabenzo[a,c,g,/]fluorenilmetil)-4,4"-dimetoxitritilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9-feniltioxantilo, 9-(9-fenil-10-oxo)antrilo, 1,3-benzoditiolan-2-ilo, 4,5-bis(etoxicarbonil)-[1,3]-dioxolan-2-ilo, S,S-dióxido de benzoisotiazolilo. En el caso de los éteres de sililo el grupo protector para el OH se pueden seleccionar entre trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, dimetilisopropilsililo, dietilisopropilsililo, dimetilhexililsililo, 2-norbornildimetilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo, tribencilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, di-t-butilmetilsililo, bis(tbutil)-1 -pirenilmetoxisililo, tris(trimetilsilil)sililo, (2-hidroxiestiril)dimetilsililo, (2-hidroxistiril)diisopropilsililo,t-butilmetoxifenilsililo, t-butoxidifenilsililo, 1,1,3,3-tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi)etoxi]disiloxan-1-ilo y fluorosililo. En el caso de los ésteres, el grupo protector para el OH junto con el átomo de oxígeno del OH sin proteger al cual está unido forman un éster que se puede seleccionar entre formiato, benzoilformiato, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, tricloroacetamidato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, pclorofenoxiacetato, fenilacetato, difenilacetato, 3-fenilpropionato, propanoílo de tipo cadena bisfluorada, 4-pentenoato, 4-oxopentanoato, 4,4-(etilenditio)pentanoato, 5 [3-bis(4-metoxifenil)hidroximetilfenoxi]levulinato, pivaloato, 1-adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato, 4-bromobenzoato, 2,5-difluorobenzoato,p-nitrobenzoato, picolinato, nicotinato, 2-(azidometil)benzoato, 4-azido-butirato, (2-azidometil)fenilacetato, 2-{[(tritiltio)oxi]metil}benzoato, 2-{[(4-metoxitritiltio)oxi]metil}benzoato, 2-{[metil(tritiltio)amino]metil}benzoato, 2-{ {[(4-metoxitritil)tio]metilamino}metil}benzoato, 2-(aliloxi)fenilacetato, 2-(preniloximetil)benzoato, 6-(levuliniloximetil)-3-metoxi-2-nitrobenzoato, 6-(levuliniloximetil)-3-metoxi-4-nitrobenzoato, 4-benciloxibutirato, 4-trialquilsililoxi-butirato, 4-acetoxi-2,2-dimetilbutirato, 2,2-dimetil-4-pentenoato, 2-yodobenzoato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-(dibromometil)benzoato, 2-formilbencenosulfonato, 4-(metiltio-metoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benzoato, 2-(cloroacetoximetil)benzoato, 2-[(2-cloroacetoxi)etil]benzoato, 2-[2-(benciloxi)etil]benzoato, 2-[2-(4-metoxibencil-oxi)etil]benzoato, 2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-dimetilpropil)fenoxiacetato, clorodifenil-acetato, isobutirato, monosuccinoato, (£)-2-metil-2-butenoato, o-(metoxicarbonil)benzoato, a-naftoato, nitrato, alquil NNN'N'-tetrametilfosforodiamidato y 2- clorobenzoato. En el caso de sulfonatos, sulfenatos y sulfinatos, el grupo protector para el OH junto con el átomo de oxígeno del OH sin proteger al cual se une forman un sulfonato, sulfenato o sulfinatos que se pueden seleccionar entre sulfato, alilsulfonato, metanosulfonato, bencilsulfonato, tosilato, 2-[(4-nitrofenil)etil]sulfonato, 2-trifluorometilbencensulfonato, 4-monometoxitritilsulfenato, 2,4-dinitrofenilsulfenato de alquilo, 2,2,5,5-tetrametilpirrolidin-3-ona-1-sulfinato, y dimetilfosfinotioilo. En el caso de los carbonatos, el grupo protector para el OH junto con el átomo de oxígeno del OH sin proteger al cual se une forman un carbonato que se puede seleccionar entre carbonato de metilo, carbonato de metoximetilo, carbonato de 9-fluorenilmetilo, carbonato de etilo, carbonato de bromoetilo, carbonato de 2-(metiltiometoxi)etilo, carbonato de 2 ,2 ,2-tricloroetilo, carbonato de 1,1 -dimetil-2 ,2 ,2-tricloroetilo, carbonato de 2-(trimetilsilil)etilo, carbonato de 2-[dimetil(2-naftilmetil)silil]etilo, carbonato de 2-(fenilsulfonil)etilo, carbonato de 2-(trifenilfosfonio)etilo, cis-[4-[[(metoxitritil)sulfenil]oxi]tetrahidrofuran-3-il]oxicarbonato, carbonato de isobutilo, carbonato de f-butilo, carbonato de vinilo, carbonato de alilo, carbonato de cinamilo, carbonato de propargilo, carbonato de p-clorofenilo, carbonato de p-nitrofenilo, carbonato de 4-etoxi-1-naftilo, carbonato de 6-bromo-7-hidroxicoumarin-4-ilmetilo, carbonato de bencilo, carbonato de o-nitrobencilo, carbonato de p-nitrobencilo, carbonato de p-metoxibencilo, carbonato de 3,4-dimetoxibencilo, carbonato de antraquinon-2-ilmetilo, carbonato de 2-dansiletilo, carbonato de 2-(4-nitrofenil)etilo, carbonato de 2-(2,4-dinitrofenil)etilo, carbonato de 2-(2-nitrofenil)propilo, carbonato de 2-(3,4-metilenodioxi-6-nitrofenil)propilo, carbonato de 2-ciano-1 -feniletilo, carbonato de 2-(2-piridil)amino-1 -feniletilo, carbonato de 2-[N-metil-N-(2-piridil)]amino-1 -feniletilo, carbonato de fenacilo, carbonato de 3',5'-dimetoxibenzoína, ditiocarbonato de metilo y S-tiocarbonato de bencilo. Y en el caso de los carbamatos el grupo protector para OH junto con el átomo de oxígeno del OH sin proteger al cual se une forman un carbamato que se puede seleccionar entre tiocarbamato de dimetilo, N-fenil carbamato y N-metil-N-(o-nitrofenil) carbamato.

Dentro del alcance de la presente invención, se define que un grupo protector de amino es el resto unido aNresultante de la protección del grupo amino a través de la formación de un grupo amino protegido adecuado. Los ejemplos de grupos amino protegidos incluyen carbamatos, ureas, amidas, sistemas heterocíclicos, N-alquil aminas, N-alquenil aminas, N-alquinil aminas, N-aril aminas, iminas, enaminas, derivados de N-metal, derivados de N-N, derivados de N-P, derivados de N-Si y derivados de N-S. En el caso de los carbamatos, el grupo protector para el grupo amino junto con el grupo amino al cual está unido forman un carbamato que se puede seleccionar entre carbamato de metilo, carbamato de etilo, carbamato de 9-fluorenilmetilo, carbamato de 2,6-di-f-butil-9-fluorenilmetilo, carbamato de 2,7-bis(trimetilsilil)fluorenilmetilo, carbamato de 9-(2-sulfo)fluorenilmetilo, carbamato de 9-(2,7-dibromo)fluorenilmetilo, carbamato de 17-tetrabenzo[a,c,g,/]fluorenilmetilo, carbamato de 2-cloro-3-indenilmetilo, carbamato de benz[f]inden-3- ilmetilo, carbamato de 1,1-dioxobenzo[6]-tiofen-2-ilmetilo, carbamato de 2-metilsulfonil-3-fenil-1 -prop-2-enilo, carbamato de 2,7-di-f-butil-[9,(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetrahidrotioxantil)]metilo, carbamato de 2,2,2-tricloroetilo, carbamato de 2-trimetilsililetilo, carbamato de (2-fenil-2-trimetilsilil)etilo, carbamato de 2-feniletilo, carbamato de 2-cloroetilo, carbamato de 1,1-dimetil-2-haloetilo, carbamato de 1,1-dimetil-2 ,2-dibromoetilo, carbamato de 1,1 -dimetil-2,2,2-tricloroetilo, carbamato de 2-(2'-piridil)etilo, carbamato de 2-(4'-piridil)etilo, carbamato de 2,2-bis(4'-nitrofenil)etilo, carbamato de 2-[(2-nitrofenil)ditio]-1-feniletilo, carbamato de 2-(N,N-diciclohexilcarboxamido)etilo, carbamato de fbutilo, carbamato BOC fluorado, carbamato de 1-adamantilo, carbamato de 2-adamantilo, carbamato de 1-(1-adamantil)-1-metiletilo, carbamato de 1-metil-1-(4-bifenilil)etilo, carbamato de 1 -(3,5-di-f-butilfenil)-1 -metiletilo, triisopropilsililoxi carbamato, carbamato de vinilo, carbamato de alilo, carbamato de prenilo, carbamato de 1-isopropilalilo, carbamato de cinamilo, carbamato de 4-nitrocinamilo, carbamato de 3-(3'-piridil)prop-2-enilo, carbamato de hexadienilo, carbamato de propargilo, biscarbamato de 1,4-but-2-inilo, carbamato de 8-quinolilo, carbamato de N-hidroxipiperidinilo, ditiocarbamato de alquilo, carbamato de bencilo, carbamato de 3,5-di-f-butilbencilo, carbamato de p-metoxibencilo, carbamato de p-nitrobencilo, carbamato de p-bromobencilo, carbamato de p-clorobencilo, carbamato de 2,4-diclorobencilo, carbamato de 4-metilsulfinilbencilo, carbamato de 4-trifluorometilbencilo, carbamato de bencilo fluorado, carbamato de 2-naftilmetilo, carbamato de 9-antrilmetilo, carbamato de difenilmetilo, carbamato de 4-fenilacetoxibencilo, carbamato de 4-azidobencilo, carbamato de 4-azido-metoxibencilo, carbamato de m-cloro-paciloxibencilo, carbamato dep-(dihidroxiboril)-bencilo, carbamato de 5-benzoisoxazolilmetilo, carbamato de 2-(trifluorometil)-6-cromonilmetilo, carbamato de 2-metiltioetilo, carbamato de 2-metilsulfoniletilo, carbamato de 2-(p-toluenosulfonil)etilo, carbamato de 2-(4-nitrofenilsulfonil)etilo, carbamato de 2-(2,4-dinitrofenilsulfonil)etilo, carbamato de 2-(4-trifluorometilfenilsulfonil)etilo, carbamato de [2-(1,3-ditianil)]metilo, carbamato de 2-fosfonioetilo, carbamato de 2-[fenil(metil)sulfonio]etilo, carbamato de 1-metil-1-(trifenilfosfonio)etilo, carbamato de 1,1-dimetil-2-cianoetilo, carbamato de 2-dansiletilo, carbamato de 2-(4-nitrofenil)etilo, carbamato de 4-metiltiofenilo, carbamato de 2,4dimetiltiofenilo, carbamato de m-nitrofenilo, carbamato de 3,5-dimetoxibencilo, carbamato de 1-metil-1-(3,5-dimetoxifenil)etilo, carbamato de Gf-metilnitropiperonilo, carbamato de o-nitrobencilo, carbamato de 3,4-dimetoxi-6-nitrobencilo, carbamato de fenil(o-nitrofenil)metilo, carbamato de 2-nitrofeniletilo, carbamato de 6-nitroveratrilo, carbamato de 4-metoxifenacilo, carbamato de 3',5'-dimetoxibenzoína, carbamato de 9-xantenilmetilo, carbamato de N-metil-N-(o-nitrofenilo), carbamato de f-amilo, carbamato de 1 -metilciclobutilo, carbamato de 1-metilciclohexilo, carbamato de 1 -metil-1-ciclopropilmetilo, carbamato de ciclobutilo, carbamato de ciclopentilo, carbamato de ciclohexilo, carbamato de isobutilo, carbamato de isobornilo, carbamato de ciclopropilmetilo, carbamato de pdeciloxibencilo, carbamato de diisopropilmetilo, carbamato de 2,2-dimetoxi-carbonilvinilo, carbamato deo-(N,N-dimetilcarboxamido)bencilo, carbamato de 1,1-dimetil-3-(N,N-dimetil-carboxamido)propilo, carbamato de butinilo, carbamato de 1,1-dimetilpropinilo, carbamato de 2-yodoetilo, carbamato de 1-metil-1-(4'-piridil)etilo, carbamato de 1-metil-1 -(p-fenilazofenil)etilo, carbamato de p-(p'-metoxifenilazo)bencilo, carbamato de p-(fenilazo)bencilo, carbamato de 2,4,6-trimetilbencilo, carbamato de isonicotinilo, carbamato de 4-(trimetil-amonio)bencilo, carbamato dep-cianobencilo, carbamato de di(2-piridil)metilo, carbamato de 2-furanilmetilo, carbamato de fenilo, carbamato de 2,4,6-tri-f-butilfenilo, carbamato de 1-metil-1-feniletilo y tiocarbamato de S-bencilo. En el caso de las ureas, los grupos protectores para el grupo amino se pueden seleccionar entre fenotiazinil-(10)-carbonilo,N'-p-toluenosulfonilaminocarbonilo,N'-fenilaminotiocarbonilo, 4-hidroxifenilaminocarbonilo, 3-hidroxitriptaminocarbonilo y N'-fenilaminotiocarbonilo. En el caso de las amidas, el grupo protector para el amino junto con el grupo amino al que está unido forman una amida que se puede seleccionar entre formamida, acetamida, cloroacetamida, tricloroacetamida, trifluoroacetamida, fenilacetamida, 3-fenilpropanamida, pent-4-enamida, picolinamida, 3-piridilcarboxamida, N-benzoilfenilalanil amida, benzamida, p-fenilbenzamida, o-nitrofenilacetamida, 2,2-dimetil-2-(onitrofenil)acetamida, o-nitrofenoxiacetamida, 3-(o-nitrofenil)propanamida, 2-metil-2-(o-nitrofenoxi)propanamida, 3-metil-3-nitrobutanamida, o-nitrocinnamida, o-nitrobenzamida, 3-(4-t-butil-2,6-dinitrofenil)-2,2-dimetilpropanamida, o-(benzoiloximetil)benzamida, 2-(acetoximetil)benzamida, 2-[(f-butildifenilsiloxi)metil]benzamida, 3-(3',6'-dioxo-2',4',5'-trimetilciclohexa-1',4'-dieno)-3,3-dimetilpropionamida, o-hidroxi-frans-cinamida, 2-metil-2-(ofenilazofenoxi)propanamida, 4-clorobutanamida, acetoacetamida, 3-(p-hidroxifenil)propanamida, (N'-ditiobenciloxicarbonilamino)acetamida yN-acetilmetionina amida. En el caso de sistemas heterocíclicos, el grupo protector para el grupo amino junto con el grupo amino al que está unido forman un sistema heterocíclico que se puede seleccionar entre 4,5-difenil-3-oxazolin-2-ona, N-ftalimida, N-dicloroftalimida, N-tetracloroftalimida, N-4-nitroftalimida, N-tiodiglicoloílo, N-ditiasuccinimida, N-2,3-difenilmaleimida, N-2,3-dimetilmaleimida, N-2,5-dimetilpirrol, N-2,5-bis(triisopropilsiloxi)pirrol, aducto de N-1,1,4,4-tetrametildisililazaciclopentano, N-1,1,3,3-tetrametil-1,3-disilaisoindolina, N-difenilsilildietileno, N-5-sustituida-1,3-dimetil-1,3,5-triazaciclohexan-2-ona, N-5-sustituida-1,3-benzil-1,3,5-triazaciclohexan-2-ona, 3,5-dinitro-4-piridona 1 -sustituida y 1,3,5-dioxazina. En el caso de N-alquil, N-alquenil, N-alquinil o N-aril aminas, el grupo protector para el grupo amino se puede seleccionar entre N-metilo,N-f-butilo, N-alilo, N-prenilo, N-cinamilo, N-fenilalilo, N-propargilo, N-metoximetilo, N-[2-(trimetilsilil)etoxi]metilo, N-3-acetoxipropilo, N-cianometilo, N-2-azanorbornenos, N-bencilo, N-4-metoxibencilo, N-2,4-dimetoxibencilo, N-2-hidroxibencilo, N-ferrocenilmetilo, N-2,4-dinitrofenilo, o-metoxifenilo, p-metoxifenilo, N-9-fenilfluorenilo, N-fluorenilo, N-2-picolamina N'-oxido, N-7-metoxicoumar-4-ilmetilo, N-difenilmetilo, N-bis(4-metoxifenil)metilo, N-5-dibenzosuberilo, N-trifenilmetilo, N-(4-metilfenil)difenilmetilo y N-(4-metoxifenil)difenilmetilo. En el caso de las iminas, el grupo protector para el grupo amino se puede seleccionar entre N-1,1-dimetiltiometileno, N-bencilideno, N-p-metoxibencilideno, N-difenilmetileno, N-[2-piridil)mesitil]metileno, N-(N',N'-dimetilaminometileno), N-(N',N'-dibencilaminometileno), N-(N'-fbutilaminometileno), N,N’-isopropilideno, N-p-nitrobencilideno, N-salicilideno, N-5-clorosalicilideno, N-(5-cloro-2-hidroxifenil)fenilmetileno, N-ciclohexilideno y N-f-butilideno. En el caso de las enaminas, el grupo protector para el grupo amino se puede seleccionar entre N-(5,5-dimetil-3-oxo-1-ciclohexenilo), N-2,7-dicloro-9-fluorenilmetileno, N-1-(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexilideno)etilo, N-(1,3-dimetil-2,4,6-(1H,3H,5H)-trioxopirimidin-5-ilideno)-metilo, N-4,4,4-trifluoro-3-oxo-1-butenilo y N-(1-isopropil-4-nitro-2-oxo-3-pirrolin-3-ilo). En el caso de los derivados de N-metal, el grupo protector para el grupo amino se puede seleccionar entre N-borano, éster N-difenilborínico, éster N-dietilborínico, N-9-borabiciclononano, éster N-difluoroborínico y ácido 3,5-bis(trifluorometil)fenilborónico; y también incluyeN-fenil(pentacarbonilcromio)carbenilo,N-fenil(pentacarbonil-tungsteno)carbenilo,N-metil(pentacarbonilcromio)carbenilo,N-metil(pentacarboniltungsteno)carbenilo, quelado deN-cobre, quelado deN-cinc y un 18-corona-6-derivado. En el caso de los derivados de N-N, el grupo protector para el grupo amino junto con el grupo amino al que están unidos forman un derivado de N-N que se puede seleccionar entre N-nitroamino, N-nitrosoamino, N-óxido de amina, azida, derivado de triazeno y N-trimetilsililmetil-N-bencilhidrazina. En el caso de derivados de N-P, el grupo protector grupo amino junto con el grupo amino al que están unidos forman un derivado de N-P que se puede seleccionar entre difenilfosfinamida, dimetiltiofosfinamida, difeniltiofosfinamida, dialquil fosforamidato, dibencil fosforamidato, difenil fosforamidato e iminotrifenilfosforano. En el caso de derivados de N-Si, el grupo protector para el NH2 se puede seleccionar entre f-butildifenilsililo y trifenilsililo. En el caso de los derivados de N-S, el grupo amino protegido se puede seleccionar entre derivados de N-sulfenilo o N-sulfonilo. Los derivados de N-sulfenilo se pueden seleccionar entre bencenosulfenamida, 2-nitrobencenosulfenamida, 2,4-dinitrobencenosulfenamida, pentaclorobencenosulfenamida, 2-nitro-4-metoxibencenosulfenamida, trifenilmetilsulfenamida, 1-(2,2,2-trifluoro-1,1-difenil)etilsulfenamida y N-3-nitro-2-piridinsulfenamida. Los derivados de N-sulfonilo se puede seleccionar entre metanosulfonamida, trifluorometanosulfonamida, t-butilsulfonamida, bencilsulfonamida, 2-(trimetilsilil) etanosulfonamida, p-toluenosulfonamida, bencenosulfonamida, o-anisilsulfonamida, 2-nitrobencenosulfonamida, 4-nitrobencenosulfonamida, 2,4-dinitrobencenosulfonamida, 2-naftalenosulfonamida, 4-(4',8'-dimetoxinaftilmetil)bencenosulfonamida, 2-(4-metilfenil)-6-metoxi-4-metilsulfonamida, 9-antracensulfonamida, piridin-2-sulfonamida, benzotiazol-2-sulfonamida, fenacilsulfonamida, 2,3,6-trimetil-4-trimetoxibencenosulfonamida, 2,4,6-trimetoxibencenosulfonamida, 2,6-dimetil-4-metoxibencenosulfonamida, pentametilbencenosulfonamida, 2.3.5.6- tetrametil-4-metoxibencenosulfonamida, 4-metoxibencenosulfonamida, 2,4,6-trimetilbencenosulfonamida, 2,6-dimetoxi-4-metilbencenosulfonamida, 3-metoxi-4-t-butilbencenosulfonamida y 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonamida.

Dentro del alcance de la presente invención, se define que un grupo protector para SH es el resto unido a S resultante de la protección del grupo SH a través de la formación de un grupo SH protegido adecuado. Los ejemplos de dichos grupos SH protegidos incluyen tioéteres, disulfuros, tioéteres de sililo, tioésteres, tiocarbonatos y tiocarbamatos. En el caso de los tioéteres, el grupo protector para el SH se puede seleccionar entre S-alquilo, S-bencilo, S-p-metoxibencilo, S-o-hidroxibencilo, S-p-hidroxibencilo, S-o-acetoxibencilo, S-p-acetoxibencilo, S-p-nitrobencilo, S-o-nitrobencilo, S-2.4.6- trimetilbencilo, S-2,4,6,-trimetoxibencilo, S-4-picolilo, S-2-picolil-N-óxido, S-2-quinolinilmetilo, S-9-antrilmetilo, S-9-fluorenilmetilo, S-xantenilo, S-ferrocenilmetilo, S-difenilmetilo, S-bis(4-metoxifenil)metilo, S-5-dibenzosuberilo, S-trifenilmetilo, 4-metoxitritilo, S-difenil-4-piridilmetilo, S-fenilo, S-2,4-dinitrofenilo, S-2-quinolilo, S-í-butilo, S-1-adamantilo, S-metoximetilo, S-isobutoximetilo, S-benciloximetilo, S-1-etoxietilo, S-2-tetrahidropiranilo, S-benciltiometilo, S-feniltiometilo, S-acetamidometilo (Acm), S-trimetilacetamidometilo, S-benzamidometilo, S-aliloxicarbonilaminometilo, S-N-[2,3,5,6-tetrafluoro-4-(N’-piperidin)-fenil-N-aliloxicarbonilaminometilo, S-ftalimidometilo, S-fenilacetamidometilo, S-acetilmetilo, S-carboximetilo, S-cianometilo, S-(2-nitro-1-fenil)etilo, S-2-(2,4-dinitrofenil)etilo, S-2-(4’-piridil)etilo, S-2-cianoetilo, S-2-(trimetilsilil)etilo, S-2,2-bis(carboetoxi)etilo, S-(1-m-nitrofenil-2-benzoil)etilo, S-2-fenilsulfoniletilo, S-1-(4-metilfenilsulfonil)-2-metilprop-2-ilo y S-p-hidroxifenacilo. En el caso de los disulfuros, el grupo SH protegido se puede seleccionar entre disulfuro de S-etilo, disulfuro de S-í-butilo, disulfuro de S-2-nitrofenilo, disulfuro de S-2,4-dinitrofenilo, disulfuro de S-2-fenilazofenilo, disulfuro de S-2-carboxifenilo y disulfuro deS-3-nitro-2-piridilo. En el caso de los tioéteres de sililo, el grupo protector para el SH se puede seleccionar entre la lista de grupos que se enumeró anteriormente para la protección de OH con los éteres de sililo. En el caso de los tioésteres, el grupo protector para el SH se puede seleccionar entre S-acetilo, S-benzoílo, S-2-metoxiisobutirilo, S-trifluoroacetilo, S-N-[[p-bifenilil)-isopropiloxi]carbonil]-N-metil-y-aminotiobutirato, y S-N-(í-butoxicarbonil)-N-metil-Y-aminotiobutirato. En el caso del tiocarbonato, el grupo protector para el SH se puede seleccionar entre S-2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, S-í-butoxicarbonilo, S-benciloxicarbonilo, S-p-metoxibenciloxicarbonilo y S-fluorenilmetilcarbonilo. En el caso del tiocarbamato, el grupo SH protegido se puede seleccionar entre S-(N-etilcarbamato) y S-(N-metoximetilcarbamato).

La mención de estos grupos no debe interpretarse como una limitación del alcance de la invención, dado que se han mencionados como una mera ilustración de los grupos protectores para los grupos OH, amino y SH, pero el experto en la materia puede conocer otros grupos que tienen dicha función y se debe entender que estos también deben estar incluidos en la presente invención.

Para proporcionar una descripción más concisa, algunas de las expresiones cuantitativas dadas en el presente documento no están calificadas con el término "aproximadamente". Se entiende que, se use o no explícitamente el término "aproximadamente", cada cantidad dada en el presente documento pretende referirse al valor real dado y también pretende referirse a la aproximación a dicho valor dado que se podría decidir de forma razonable basándose en la habilidad ordinaria en la materia, incluyendo equivalentes y aproximaciones debidas a las condiciones experimentales y/o de medición para dicho valor dado.

El compuesto de la invención es un compuesto de fórmulaIDo una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable:

en donde:

X es -O-;

Ri es -OH o -CN;

R2 es un grupo -C(=O)Ra;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb;

R4 se selecciona entre hidrógeno, -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc;

Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C i2 sustituido o sin sustituir;

Los compuestos preferidos de los compuestos de fórmulaIDson los que tienen la formula generalIDaoIDb,o una sal o un éster de los mismos farmacéuticamente aceptables:

Obsérvese que los compuestos que tienen la fórmula general IDa o IDb, R4 puede no ser hidrógeno.

Los compuestos preferidos de los compuestos de fórmulaIDpueden ser los que tienen la fórmulaIDco una sal o un éster de los mismos farmacéuticamente aceptables:

en donde:

R1 es -OH o -CN;

R2 es un grupo -C(=O)Ra;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb;

Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; y

Rb se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir.

Otros compuestos preferidos incluyen los compuestos de fórmula generalID, IDaeIDb,en donde:

R1 es -OH;

y X; R2; R3; R4; Ra; Rb; y Rc son como se han definido anteriormente.

R2 es un grupo -C(=O)Ra donde Ra es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Ra particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y ferc-butilo sustituido o sin sustituir. El R2 más preferido es acetilo;

y X; R1; R3; R4; Rb; y Rc son como se han definido anteriormente.

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Rb es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rb particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y ferc-butilo sustituido o sin sustituir. Los R3 más preferidos son hidrógeno y metoxi, siendo el hidrógeno el grupo R3 más preferido;

y X; R1; R2; R4; Ra; y Rc; son como se han definido anteriormente.

R4 se selecciona entre -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc para compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Rc es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rc particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y ferc-butilo sustituido o sin sustituir. El Rc más preferido es metilo. El R4 más preferido es - CH2OH;

y X; R1; R2; R3; Ra; y Rb son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R1 es -OH;

y R2; R3; R4; Ra; Rb; y Rc; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Ra es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Ra particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y ferc-butilo sustituido o sin sustituir. El R2 más preferido es acetilo;

y R1; R3; R4; Rb; y Rc; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Rb es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rb particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y ferc-butilo sustituido o sin sustituir. El R3 más preferido es hidrógeno y metoxi, siendo el hidrógeno el grupo R3 más preferido;

y R1; R2; R4; Ra; y Rc; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

y R1; R2; R3; Ra; y Rb son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R1 es -OH;

y R3; R4; Rb; y Rc; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R1 es -OH;

y R2; R4; Ra; y Rc; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R1 es -OH;

y R2; R3; Ra; y Rb son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

y R1; R4; y Rc; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

y R1; R3; y Rb son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

y R1; R2; y Ra; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R1 es -OH;

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Ra es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Ra particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. El R2 más preferido es acetilo;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Rb es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rb particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. Los R3 más preferidos son hidrógeno y metoxi, siendo el hidrógeno el grupo R3 más preferido;

y R4; y Rc; son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

R1 es -OH;

R4 se selecciona entre -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc para compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Rc es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rc particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. El Rc más preferido es metilo. El R4 más preferido es - CH2OH;

y R3; y Rb son como se han definido anteriormente.

X es -O-;

y R1 es como se ha definido anteriormente.

X es -O-;

R1 es -OH;

R4 se selecciona entre -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc para compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Rc es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rc particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. El Rc más preferido es metilo. El R4 más preferido es - CH2OH.

Otros compuestos preferidos incluyen los compuestos de fórmula generalIDcen donde:

Ri es -OH;

y R2; R3; Ra y Rb son como se han definido anteriormente.

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula IDc; donde Ra es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Ra particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, npropilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. El R2 más preferido es acetilo;

y R1; R3; Rb son como se han definido anteriormente.

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula IDc; donde Rb es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rb particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. Los R3 más preferidos son hidrógeno y metoxi, siendo el hidrógeno el grupo R3 más preferido;

y R1; R2; y Ra son como se han definido anteriormente.

Ri es -OH;

y R3; y Rb son como se han definido anteriormente.

Ri es -OH;

y R2; y Ra son como se han definido anteriormente.

Otros compuestos preferidos incluyen los compuestos de fórmula general IDc en donde:

y R1 es como se ha definido anteriormente.

Ri es -OH;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula IDc; donde Rb es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rb particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. Los R3 más preferidos son hidrógeno y metoxi, siendo el hidrógeno el grupo R3 más preferido.

Los sustituyentes preferidos siguientes (donde lo permitan los grupos sustituyentes posibles) se aplican a los compuestos de fórmulaID, IDa, IDbeIDc:

En los compuestos de la presente invención, el R1 particularmente preferido es -OH.

En los compuestos de la presente invención, el R2 particularmente preferido es un grupo -C(=O)Ra donde Ra es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Ra particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. El R2 más preferido es acetilo.

En los compuestos de la presente invención, el R3 particularmente preferido es hidrógeno o un grupo -ORb donde Rb es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rb particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. Los R3 más preferidos son hidrógeno y metoxi, siendo el hidrógeno el grupo R3 más preferido.

En los compuestos de la presente invención, el R4 particularmente preferido se selecciona entre H, - CH2OH y -CH2OC(=O)Rc donde Rc es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rc particularmente preferido se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir,n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir,sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. El Rc más preferido es metilo. El R4 más preferido es -CH2OH.

En los compuestos de fórmula generalID, IDaeIDbel R4 particularmente preferido se selecciona entre -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc para compuestos de fórmula ID, IDa e IDb; donde Rc es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Rc particularmente preferido es un metilo sustituido o no sustituido, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, secbutilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir. El Rc más preferido es metilo. El R4 más preferido es -CH2OH.

Siendo particularmente preferidos los compuestos de fórmulaIDacuando R4 es -CH2OH o -CH2OC(=O)Rc.

En los compuestos de la presente invención, X es -O-.

Los compuestos preferidos según la presente invención incluyen:

• Compuestos de fórmulaID, IDa,eIDben donde:

R4 se selecciona entre -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc;

Siendo particularmente más preferidos los compuestos de fórmulaIDay/o los compuestos donde R4 es -CH2OH.

• Compuestos de fórmulaIDcen donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula IDc;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula IDc;

Ra se selecciona entre hidrógeno y alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir; y

Rb es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.

Los compuestos particularmente preferidos según la presente invención incluyen:

• Compuestos de fórmulaID, IDaeIDben donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de ID, IDa e IDb;

R4 se selecciona entre -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc;

Ra se selecciona entre hidrógeno y alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir;

Rb es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir; y

Rc es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.

Siendo más preferidos los compuestos de fórmulaIDay/o los compuestos donde R4 es - CH2OH.

• Compuestos de fórmulaIDcen donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula IDc;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula IDc;

Ra es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir; y

Rb es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.

Los compuestos más preferidos según la presente invención incluyen

• Compuestos de fórmulaID, IDaeIDben donde

X es -O-;

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R4 es CH2OH;

Ra se selecciona entre hidrógeno y alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir; y

Rb es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.

Siendo particularmente más preferidos los compuestos de fórmulaIDa.

• Compuestos de fórmulaID, IDaeIDben donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R4 es CH2OH;

Ra es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir; y

Rb es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.

Siendo particularmente más preferidos los compuestos de fórmulaIDa.

• Compuestos de fórmulaIDcen donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula IDc;

R3 es hidrógeno o metoxi para los compuestos de fórmula IDc; y

Ra es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.

Los compuestos particularmente más preferidos según la presente invención incluyen:

• Compuestos de fórmulaID, IDaeIDben donde

X es -O-;

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R3 es hidrógeno o metoxi para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R4 es CH2OH; y

Ra es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.

Siendo aún más preferidos los compuestos de fórmulaIDa.

• Compuestos de fórmulaID, IDaeIDben donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R3 es hidrógeno o metoxi para los compuestos de fórmula ID, IDa e IDb;

R4 es CH2OH; y

Ra se selecciona entre metilo, etilo, n-propilo, isopropilo y butilo, incluyendo n-butilo, sec-butilo, isobutilo yterc-butilo.

Siendo aún más preferidos los compuestos de fórmulaIDa.

• Compuestos de fórmula IDc en donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula IDc;

R3 es hidrógeno; y

• Compuestos de fórmulaIDcen donde

R2 es un grupo -C(=O)Ra para los compuestos de fórmula IDc;

R3 es metoxi; y

Los compuestos incluso más preferidos según la presente invención incluyen:

• Compuestos de fórmulaID, IDaeIDben donde

R2 es acetilo;

R3 es hidrógeno; y

R4 es -CH2OH.

Siendo los más preferidos los compuestos de fórmulaIDa.

• Compuestos de fórmulaID, IDaeIDben donde

R1 es -OH;

R2 es acetilo;

R3 es hidrógeno; y

R4 es -CH2OH.

Siendo los más preferidos los compuestos de fórmulaIDa.

• Compuestos de fórmulaIDcen donde

R2 es acetilo; y

R3 es hidrógeno.

• Compuestos de fórmulaIDcen donde

R2 es acetilo; y

R3 es metoxi.

• Un compuesto según la presente invención de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.

Siendo particularmente preferido un compuesto de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.

• Un compuesto según la presente invención de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.

Siendo particularmente preferido un compuesto de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.

Siendo más preferido un compuesto de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.

En otras realizaciones preferidas, las preferencias descritas anteriormente para los diferentes sustituyentes se combinan. La presente invención también se refiere a dichas combinaciones de las sustituciones preferidas (donde lo permitan los grupos sustituyentes posibles) en los compuestos de fórmulaID, IDa, IDbeIDcsegún la presente invención.

Una característica importante de los compuestos descritos anteriormente es su bioactividad, en particular su actividad citotóxica. En este sentido, sorprendentemente, los inventores han descubierto que los compuestos de la presente invención muestran una actividad antineoplásica mejorada, como se muestra en los ejemplos 27 y del 29 al 40.

Composiciones que comprenden un compuesto de fórmula ID, IDa, IDb e IDc de la invención y usos de las mismas

En una realización más de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la presente invención y un transportador farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos de la forma de administración incluyen, sin limitación, oral, tópica, parenteral, sublingual, rectal, vaginal, ocular e intranasal. La administración parenteral incluye inyecciones subcutánea, intravenosa, intramuscular, inyección intraesternal o técnicas de perfusión. Preferentemente, las composiciones se administran por vía parenteral. Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden formular de modo que permitan que un compuesto según la presente invención sea biodisponible después de la administración de la composición a un animal, preferentemente un ser humano. Las composiciones pueden tener la forma de una o más dosis unitarias, donde, por ejemplo, un comprimido puede ser una unidad de dosificación individual y un recipiente de un compuesto según la presente invención puede contener el compuesto en forma líquida o de aerosol y puede contener una única o una pluralidad de unidades de dosificación.

El transportador o vehículo farmacéuticamente aceptable puede estar en forma de partículas, de modo que las composiciones están, por ejemplo, en forma de comprimidos o polvo. El o los transportadores pueden ser un líquido, siendo las composiciones, por ejemplo, un jarabe oral o un líquido inyectable. Además, el transportador o transportadores pueden ser gaseosos o líquidos para proporcionar una composición en aerosol útil en, por ejemplo, la administración por inhalación. Los polvos también se pueden usar en las formas de dosificación por inhalación. El término "transportados" se refiere a un diluyente, adyuvante o excipiente, con el que se administra el compuesto según la presente invención. Dichos transportadores farmacéuticos pueden ser líquidos, tales como agua y aceites, incluyendo los derivados del petróleo, animales, vegetales o sintéticos, tales como aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite mineral, aceite de sésamo y similares. Los portadores pueden ser suero salino, goma arábiga, gelatina, pasta de almidón, talco, queratina, sílice coloidal, urea, disacáridos y similares. Además, se pueden usar agentes auxiliares, estabilizantes, espesantes, lubricantes y colorantes. En una realización, cuando se administra a un animal, los compuestos y composiciones según la presente invención y los transportadores farmacéuticamente aceptables son estériles. Cuando los compuestos según la presente invención se administran por vía intravenosa, el agua es un transportador preferido. También se pueden emplear soluciones salinas y soluciones acuosas de dextrosa y glicerol como transportadores líquidos, en particular para soluciones inyectables. Los transportadores farmacéuticos adecuados también incluyen excipientes, tales como almidón, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, malta, arroz, harina, tiza, gel de sílice, estearato sódico, monoestearato de glicerol, talco, cloruro de sodio, leche desnatada en polvo, glicerol, propilenglicol, agua, etanol y similares. Las presentes composiciones, si se desea, también pueden contener cantidades menores de agentes humectantes o emulsionantes o agentes tamponadores del pH.

Cuando está destinada a administración oral, la composición está preferentemente en forma sólida o líquida, donde las formas semisólidas, semilíquidas, en suspensión y gel están incluidas dentro de las formas consideradas en el presente documento como sólido o líquido.

Como composición sólida para administración oral, la composición puede formularse en forma de polvo, gránulo, comprimido formado por compresión, píldora, cápsula, goma de mascar, oblea o formas similares. Dicha composición sólida contiene normalmente uno o más diluyentes inertes. Además, puede estar presente uno o más de los presentes: aglutinantes tales como carboximetilcelulosa, etilcelulosa, celulosa microcristalina o gelatina; excipientes tales como almidón, lactosa o dextrinas, agentes disgregantes tales como ácido algínico, alginato de sodio, almidón de maíz y similares; lubricantes tales como estearato de magnesio; emolientes tales como dióxido de silicio coloidal; agentes edulcorantes tales como sacarosa o sacarina; un agente aromatizante tal como menta, salicilato de metilo o aromatizante de naranja; y un agente colorante.

Cuando la composición está en forma de una cápsula (por ejemplo, una cápsula de gelatina), esta puede contener, además de los materiales del tipo anterior, un transportador líquido tal como polietilenglicol, ciclodextrinas o un ácido graso.

La composición puede estar en forma de un líquido, por ejemplo, un elixir, jarabe, solución, emulsión o suspensión. El líquido puede ser útil para la administración oral o para la administración mediante inyección. Cuando está destinada a administración oral, una composición puede comprender uno o más de un agente edulcorante, conservantes, tinte/colorante y un potenciador del sabor. En una composición para su administración mediante inyección, también se puede incluir uno o más de un tensioactivo, conservante, agente humectante, agente de dispersión, agente de suspensión, tampón, estabilizante y agente isotónico.

La vía de administración preferida es la administración parenteral que incluye, pero no se limita a, intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, subcutánea, intranasal, epidural, intracerebral, intraventricular, intratecal, intravaginal o transdérmica. El modo de administración preferido se deja a criterio del médico y dependerá en parte del lugar de la afección médica (tal como el lugar del cáncer). En una realización más preferida, los compuestos según la presente invención se administran por vía intravenosa. Se prefiere usar tiempos de perfusión de hasta 24 horas, más preferentemente de 1 a 12 horas, siendo lo más preferido de 1 a 6 horas. Los tiempos de perfusión cortos, que permiten realizar el tratamiento sin pasar la noche en el hospital, son especialmente deseables. Sin embargo, la perfusión puede ser de 12 a 24 horas o incluso mayor si se necesita. La perfusión se puede realizar a intervalos adecuados de, por ejemplo, de 1 a 4 semanas.

Las composiciones líquidas de la invención, ya sean soluciones, suspensiones u otra forma similar, pueden incluir también uno o más de los siguientes: diluyentes estériles tales como agua para inyección, solución salina, preferentemente solución salina fisiológica, solución de Ringer, cloruro de sodio isotónico, aceites no volátiles tales como mono o diglicéridos sintéticos, polietilenglicoles, glicerina u otros disolventes; agentes antibacterianos tales como alcohol bencílico o metil parabeno; y agentes para el ajuste de la tonicidad tales como cloruro de sodio o dextrosa. Una composición parenteral se puede introducir en una ampolla, una jeringuilla desechable o un vial multidosis fabricado con vidrio, plástico u otro material. La solución salina fisiológica es un adyuvante preferido.

La cantidad del compuesto según la presente invención que es eficaz en el tratamiento de un trastorno o afección particular dependerá de la naturaleza del trastorno o afección y se puede determinar por técnicas clínicas convencionales. Además, se pueden utilizar de manera opcional ensayosin vitrooin vivopara ayudar a identificar los intervalos de dosificación óptimos. La dosis exacta a emplear en las composiciones también dependerá de la vía de administración y de la gravedad de la enfermedad o del trastorno y debe decidirse según el criterio del médico y las circunstancias de cada paciente.

Las composiciones comprenden una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención tal que se obtendrá una dosis adecuada. La dosis correcta de los compuestos variará de acuerdo con la formulación particular, el modo de aplicación y su lugar particular, hospedador y la enfermedad que se está tratando, p. ej., cáncer y, si es así, del tipo de tumor. Otros factores como la edad, peso corporal, sexo, dieta, tiempo de administración, tasa de excreción, estado de salud del hospedador, combinaciones de fármacos, reacciones de sensibilidad y gravedad de la enfermedad deben tenerse en cuenta. La administración se puede realizar de forma continua o periódica dentro de la dosis máxima tolerada.

Normalmente, la cantidad es de al menos aproximadamente el 0,01 % de un compuesto de la presente invención y puede comprender al menos el 80 % en peso de la composición. Cuando está destinada a administración oral, esta cantidad puede variar en el intervalo de aproximadamente el 0,1 % a aproximadamente el 80% en peso de la composición. Las composiciones orales preferidas pueden comprender de aproximadamente el 4 % a aproximadamente el 50 % del compuesto de la presente invención en peso de la composición.

Las composiciones preferidas de la presente invención se preparan de modo que la unidad de dosificación parenteral contiene de aproximadamente el 0,01 % a aproximadamente el 10 % en peso del compuesto de la presente invención. La unidad de dosificación parenteral más preferida contiene aproximadamente del 0,5 % a aproximadamente el 5 % en peso del compuesto de la presente invención.

Para administración intravenosa, la composición es adecuada para dosis de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 250 mg/kg del peso corporal del animal, preferentemente de aproximadamente 0,1 mg/kg y aproximadamente 20 mg/kg del peso corporal del animal y más preferentemente de aproximadamente 1 mg/kg a aproximadamente 10 mg/kg del peso corporal del animal.

El compuesto de la presente invención, se puede administrar por cualquier vía conveniente, por ejemplo, por perfusión o inyección en embolada, por absorción a través de los revestimientos epiteliales o mucocutáneos.

En realizaciones específicas, puede ser deseable administrar uno o más compuestos o composiciones de la presente invención de manera local al área que necesita dicho tratamiento. En una realización, la administración puede ser mediante inyección directa en el sitio (o sitio anterior) de un cáncer, tumor o tejido neoplásico o preneoplásico.

También se puede emplear la administración pulmonar, por ejemplo mediante el uso de un inhalador o nebulizador y una formulación con un agente aerosolizante, o mediante perfusión en un tensioactivo pulmonar de fluorocarbono o sintético. En ciertas realizaciones, el compuesto de la presente invención se puede formular en forma de supositorio, con aglutinantes y transportadores convencionales, tales como triglicéridos.

Las presentes composiciones pueden tener la forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, comprimidos, pastillas, microesferas, cápsulas, cápsulas que contienen líquidos, polvos, formulaciones de liberación sostenida, supositorios, emulsiones, aerosoles, pulverizadores, suspensiones o cualquier otra forma de uso adecuada. Otros ejemplos de transportadores farmacéuticos adecuados se describen en "Remington's Pharmaceutical Sciences" de E. W. Martin.

Las composiciones farmacéuticas se pueden preparar usando metodología bien conocida en la técnica farmacéutica. Por ejemplo, una composición que se pretende administrar mediante inyección se puede preparar combinando un compuesto de la presente invención con agua u otro diluyente fisiológicamente adecuado, tal como solución salina tamponada con fosfato, para formar una solución. Se puede añadir un tensioactivo para facilitar la formación de una solución o suspensión homogénea.

Las composiciones preferidas según la presente invención incluyen:

• Composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la presente invención y un disacárido. Los disacáridos particularmente preferidos se seleccionan entre lactosa, trehalosa, sacarosa, maltosa, isomaltosa, celobiosa, isosacarosa, isotrehalosa, turanosa, melibiosa, gentiobiosa y sus mezclas.

• Composiciones farmacéuticas liofilizadas que comprenden un compuesto de la presente invención y un disacárido. Los disacáridos particularmente preferidos se seleccionan entre lactosa, trehalosa, sacarosa, maltosa, isomaltosa, celobiosa, isosacarosa, isotrehalosa, turanosa, melibiosa, gentiobiosa y sus mezclas.

La proporción del principio activo al disacárido en las realizaciones de la presente invención se determina según la solubilidad del disacárido y, cuando la formulación esté liofilizada, también según la capacidad de liofilización del disacárido. Se prevé que, en algunas realizaciones, esta proporción de sustancia activa: disacárido (p/p) pueda ser de aproximadamente 1:10, aproximadamente 1:20 en otras realizaciones, aproximadamente 1:50 en aún otras realizaciones. Se prevé que otras realizaciones tienen dichas proporciones en el intervalo de aproximadamente 1:5 a aproximadamente 1:500 y en otras realizaciones más tiene proporciones en el intervalo de aproximadamente 1:10 a aproximadamente 1:500.

La composición que comprende un compuesto de la presente invención puede estar liofilizada. La composición que comprende un compuesto de la presente invención normalmente se presenta en un vial que contiene una cantidad específica de dicho compuesto.

Los inventores han descubierto que los compuestos y las composiciones de la presente invención son particularmente eficaces en el tratamiento del cáncer.

Por tanto, como se ha descrito anteriormente, la presente invención proporciona un compuesto o composición para su uso en el tratamiento de cáncer y, más preferentemente, un cáncer seleccionado entre cáncer de pulmón, que incluye cáncer de pulmón no microcítico y cáncer de pulmón microcítico, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de páncreas, sarcoma, cáncer de ovario, cáncer de próstata y cáncer gástrico.

Por tanto, los compuestos y composiciones según la presente invención son útiles para inhibir la multiplicación o proliferación, de una célula tumoral o cancerosa, o para tratar el cáncer en un animal.

Los compuestos y composiciones según la presente invención muestran una actividad excelente en el tratamiento de cánceres tales como cáncer de pulmón, que incluye cáncer de pulmón no microcítico y cáncer pulmón microcítico, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de páncreas, sarcoma, cáncer de ovario, cáncer de próstata y cáncer gástrico. Los cánceres más preferidos se seleccionan entre cáncer de pulmón que incluye el cáncer de pulmón no microcítico y cáncer de pulmón microcítico, cáncer de mama, cáncer de páncreas y cáncer colorrectal.

En la presente solicitud, con "cáncer" se pretende incluir tumores, neoplasias y cualquier otra enfermedad maligna que tiene como causa tejidos o células malignas.

El término "tratar", como se usa en el presente documento, a menos que se indique de otro modo, significa revertir, atenuar, aliviar o inhibir el progreso de la enfermedad o afección para la cual se aplica dicho término o uno o más síntomas de dicho trastorno o afección. El término "tratamiento", como se usa en el presente documento, a menos que se indique de otro modo, se refiere al acto de tratar, tal como se ha definido "tratar" inmediatamente antes.

Los compuestos y composiciones según la presente invención se pueden administrar a un animal que se ha sometido a cirugía como tratamiento para el cáncer. En una realización de la presente invención, el otro tratamiento es terapia de radiación.

En una realización específica de la presente invención, el compuesto o composición según la presente invención se administra simultáneamente con radioterapia. En otra realización específica, la terapia de radiación se administra antes o después de la administración del compuesto o composición de la presente invención, preferentemente al menos una hora, tres horas, cinco horas, 12 horas, un día, una semana, un mes, más preferentemente varios meses (por ejemplo, hasta tres meses) antes o después de la administración de un compuesto o composición de la presente invención. Se puede usar cualquier protocolo de terapia de radiación, dependiendo del tipo de cáncer a tratar. Por ejemplo, pero no a modo de limitación, se puede administrar radiación de rayos x; en particular, se pueden usar megatensiones de alta energía (radiación de más de 1 MeV de energía) para los tumores profundos y se pueden usar haces de electrones y ortotensiones de radiación de rayos x para los cánceres de piel. También pueden administrarse radioisótopos emisores de rayos gamma, como isótopos radiactivos de radio, cobalto y otros elementos.

En una realización más de la presente invención, se proporciona un kit que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según la presente invención y un transportador farmacéuticamente aceptable.

En una realización, el kit según esta realización es para su uso en el tratamiento de cáncer y, más preferentemente, un cáncer seleccionado entre cáncer de pulmón, que incluye cáncer de pulmón no microcítico y cáncer de pulmón microcítico, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de páncreas, sarcoma, cáncer de ovario, cáncer de próstata y cáncer gástrico.

En una realización más de la presente invención, se proporciona un proceso para obtener un compuesto de fórmula ID, IDa e IDb, o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable, que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula II con un compuesto de fórmula III para dar un compuesto de fórmula IV:

en donde (donde lo permitan los grupos sustituyentes posibles):

X es -O-;

R2 es un grupo -C(=O)Ra;

R3 es hidrógeno o un grupo -ORb;

R4 se selecciona entre hidrógeno, -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc;

Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir, alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir;

Los procesos preferidos según la presente invención incluyen:

• Un proceso que emplea un compuesto de fórmula II en donde:

• R2 es un grupo -C(=O)Ra donde Ra es un alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir. El Ra particularmente preferido es un alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. El Ra más preferido es un grupo alquilo sustituido o sin sustituir seleccionado entre metilo, etilo, n-propilo, isopropilo y butilo, incluyendo n-butilo, sec-butilo, isobutilo y tere-butilo, siendo metilo el grupo Ra más preferido.

• Un proceso en donde el compuesto de fórmula III se selecciona entre un compuesto de fórmula IIIa, IIIb y IIIc:

en donde

X es -O-;

R3 se selecciona entre hidrógeno y ORb donde Rb es alquilo C i-C i2 sustituido o sin sustituir. El Rb particularmente preferido es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir. Un Rb más preferido es un grupo alquilo sustituido o sin sustituir seleccionado entre metilo, etilo, n-propilo, isopropilo y butilo, incluyendo n-butilo,sec-butilo, isobutilo y ferc-butilo. Un R3 más preferido es hidrógeno o metoxi. El R3 más preferido es hidrógeno; R4 es -CH2OH.

En particular se prefiere que el compuesto de fórmulaIIIsea un compuesto de fórmulaIllaoIlIb.

• Un proceso que emplea un compuesto de fórmulaIII, IllaoIlIben donde R4 es - CH2OH.

Prefiriéndose un proceso que emplea un compuesto de fórmulaIllaoIlIben donde R4 es como se ha definido anteriormente.

Prefiriéndose más un proceso que emplea un compuesto de fórmulaIlIben donde R4 es como se ha definido anteriormente.

Ejemplos

El compuesto1se preparó como se describe en el ejemplo 20 del documento WO 01/87895.

Los compuestos de referenciaA, B, C, D, E, F, ET-736yPM01183se prepararon como se describe en el documento WO 03/014127 (Compuestos19, 18, 44, 43, 2, 1, 26y27respectivamente).

Ejemplo de referencia 1.

A una solución de 1 (0,5 g, 0,80 mmol) en ácido acético (20 ml, 0,04 M) se le añadió L-triptófano(2-S)(533 mg, 3,0 mmol, Sigma-Aldrich). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 16 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Ch. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio los compuestos3-S(616 mg, 97 %) y3a-S(12 mg, 2 %).

3-S

Fr = 0,50 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (300 MHz, CDCl3): 57,71 (s, 1H), 7,36 (dd,J= 7,9, 1,0 Hz, 1H), 7,27 (dd,J= 8,2, 0,9 Hz, 1H), 7,13 (ddd,J =8,3, 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,03 (ddd,J =8,0, 7,0, 1,0 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,26 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,04 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,14 (dd,J =11,7, 1,2 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,41 (s, 1H), 4,36-4,24 (m, 2H), 4,21 (d,J= 2,7 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,52 (s, 1H), 3,50-3,47 (m, 1H), 3,45 (dc,J =8,4, 2,2 Hz, 1H), 3,35 (t,J= 10,1 Hz, 1H), 3,01-2,78 (m, 5H), 2,62 (dd,J= 15,3, 4,7 Hz, 1H), 2,41 (s, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,37-2,31 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,06 (s, 3H). ESI-MSm/z:794,2 (M+H)+.

3a-S

Fr = 0,70 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (500 MHz, CDCl3): 57,83 (s, 1H), 7,38 (dt,J=7,9, 0,9 Hz, 1H), 7,25 (dt,J=8,3, 0,9 Hz, 1H), 7,11 (ddd,J =8,2, 7,1, 1,2 Hz, 1H), 7,02 (ddd,J =8,0, 7,0, 1,0 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,24 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,03 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,13 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,39 (s, 1H), 4,36-4,22 (m, 3H), 4,17-4,09 (m, 1H), 3,91 (dd,J =10,5, 8,6 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,51-3,41 (m, 2H), 3,04-2,92 (m, 3H), 2,72 (dd,J= 15,1,4,0 Hz, 1H), 2,54-2,41 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,35-2,30 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,21-2,16 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,12 (s, 3H); 2,05 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CDCla): 5 171,2, 170,7, 168,6, 147,5, 145,8, 143,0, 141,1, 140,4, 135,6, 130,1, 129,5, 126,7, 122,2, 121,2, 120,9, 119,4, 118,4, 118,2, 118,2, 113,6, 113,5, 110,9, 110,0, 109,1, 102,1,91,4, 67,2, 63,4, 61,3, 60,4, 59,7, 59,1,54,8, 54,6, 47,7, 42,0, 41,6, 31,6, 24,0, 22,6, 21,0, 15,9, 14,2, 9,7.

ESI-MSm/z:836,2 (M+H)+.

A una solución de3-S(616 mg, 0,77 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 51 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (3,40 g, 23,3 mmol). Después de 3 h a 23 °C, la mezcla de reacción se inactivó con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar4-S(471 mg, 78 %).

Fr = 0,50 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CDCl3): 57,71 (s, 1H), 7,36 (dd,J= 7,8, 1,1 Hz, 1H), 7,26 (dd,J= 7,8, 1,1 Hz, 1H), 7,12 (ddd,J =8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,03 (ddd,J =8,0, 7,1, 1,0 Hz, 1H), 6,64 (s, 1H), 6,23 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 6,01 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,25 (d,J= 11,4 Hz, 1H), 4,92 (s, 1H), 4,52 (s a, 3H), 4,22 (dd,J =11,4, 2,2 Hz, 1H), 4,19 (s, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,54 (s a, 2H), 3,35 (t,J =10,2 Hz, 1H), 3,26 (s, 1H), 3,01-2,93 (m, 3H), 2,88 (s a, 3H), 2,63 (dd,J= 15,2, 4,8 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,36-2,31 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CDCl3): 5 171,9, 168,6, 147,5, 145,4, 142,9, 141,2, 140,7, 135,5, 130,4, 126,8, 122,3, 122,0, 121,3, 119,4, 118,4, 115,2, 112,8, 111,0, 110,0, 109,6, 101,8, 81,9, 76,8, 65,2, 62,8, 62,5, 60,4, 58,1,57,9, 55,9, 55,1, 53,4, 51,6, 41,8, 41,3, 39,6, 24,1,23,8, 20,5, 15,8, 9,7.

ESI-MSm/z:767,3 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MSm/z767,2788 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H43N4O9S: 767,2745).

A una solución de3a-S(30 mg, 0,035 mmol) en CH3CN:H2O (1,39: 1,2,4 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (180 mg, 1,07 mmol). Después de 3 h a 23 °C, la mezcla de reacción se inactivó con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar4a-S(24 mg, 83 %).

Fr = 0,60 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,81 (s, 1H), 7,37 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,30-7,21 (m, 1H), 7,06 (dddt,J= 34,7, 8,0, 7,1, 1,1 Hz, 2H), 6,63 (s, 1H), 6,22 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 6,02 (dd,J =12,9, 1,4 Hz, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,25-5,21 (m, 1H), 4,89 (d,J= 8,7 Hz, 1H), 4,55-4,45 (m, 2H), 4,30-4,18 (m, 1H), 4,14 (dd,J= 10,5, 4,2 Hz, 1H), 4,00-3,88 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,56-3,44 (m, 2H), 3,23 (d,J =9,0 Hz, 1H), 2,95 (d,J =15,7 Hz, 2H), 2,87-2,78 (m, 2H), 2,71 (dd,J =15,0, 3,9 Hz, 1H), 2,48 (dd,J =15,1,9,6 Hz, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,35-2,29 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,22-2,16 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,03 (s, 3H).

ESI-MSm/z:809,2 (M-H2O+H)+.

Ejemplo de referencia 2

A una solución de 1 (0,5 g, 0,80 mmol) en ácido acético (20 ml, 0,04 M) se le añadió D-triptofanol(2-R)(533 mg, 3,0 mmol, Sigma-Aldrich). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 16 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio el compuesto3-R(479 mg, 75 %).

Fr = 0,44 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,61 (s, 1H), 7,39 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,29 (d,J= 9,6 Hz, 1H), 7,12 (t,J= 7,3 Hz, 1H), 7,03 (t,J= 7,3 Hz, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,25 (s, 1H), 6,03 (s, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,04 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,32-4,25 (m, 1H), 4,22 (d,J= 2,7 Hz, 1H), 4,19-4,09 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,77 (s, 1H), 3,64 (d,J= 9,0 Hz, 1H), 3,49-3,41 (m, 2H), 3,02-2,90 (m, 2H), 2,60-2,52 (m, 2H), 2,45 (d,J= 14,7 Hz, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,22-2,14 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (m, 3H).

ESI-MSm/z:794,3 (M+H)+.

A una solución de3-R(479 mg, 0,60 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 40 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (3,03 g, 18,1 mmol). Después de 3 h a 23 °C, la mezcla de reacción se inactivó con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar4-R(428 mg, 91 %).

Fr = 0,45 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,62 (s, 1H), 7,39 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,28 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,11 (ddd,J= 8,2, 7,0, I , 2 Hz, 1H), 7,02 (ddd,J =7,9, 7,1, 1,0 Hz, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,22 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,99 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,73 (s, 1H), 5,17 (dd,J= 11,5, 1,2 Hz, 1H), 4,86 (s, 1H), 4,56-4,47 (m, 2H), 4,17 (dd,J =5,1, 1,6 Hz, 1H), 4,08 (dd,J= I I , 5, 2,1 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,78 (d,J= 3,8 Hz, 1H), 3,64 (dd,J =10,8, 3,8 Hz, 2H), 3,51 (d,J= 5,1 Hz, 1H), 3,48 3,43 (m, 2H), 3,24 (d,J= 8,6 Hz, 1H), 3,00-2,80 (m, 2H), 2,57 (s, 1H), 2,55-2,43 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,19-2,12 (m, 1H), 2,16 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CDCl3): 5 171,8, 168,6, 147,6, 145,4, 143,0, 141,3, 140,7, 136,0, 131,1, 130,0, 129,6, 126,6, 122,1, 121,6, 121,2, 119,4, 118,4, 115,6, 112,9, 111,1, 110,6, 101,8, 81,7, 65,8, 62,7, 61,8, 60,4, 60,3, 57,9, 57,8, 56,1, 55,0, 52,1, 42,2, 41,3, 41,1,23,8, 23,4, 20,5, 15,7, 9,8.

ESI-MSm/z:767,6 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767,2799 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H43N4O9S: 767,2745).

Ejemplo de referencia 3.Síntesis de A/-[(R)-(2-am¡no-3-(7H-¡ndol-3-¡l)propil)]carbamato de alilo(9-R)

2-R 5-R

A una solución de D-triptofanol (2-R) (2,0 g, 10,4 mmol) en CH3CN (42 ml, 4 ml/mmol) se le añadió dicarbonato de diferc-butilo (4,6 g, 20,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 3 h y se concentró al vacío. Cromatografía ultrarrápida (CH2Ch:CH3OH de 99:1 a 85:15) para proporcionar5-R(2,2 g, 73 %).

Fr = 0,5 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 68,13 (s, 1H), 7,67 (dd,J= 7,8, 1,1 Hz, 1H), 7,38 (dd,J= 8,1, 1,3 Hz, 1H), 7,29-7,10 (m, 2H), 7,06 (s, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,00 (s, 1H), 3,71 (dd,J =11,0, 3,8 Hz, 1H), 3,62 (dd,J= 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,01 (d,J= 6,7 Hz, 2H), 2,14 (s, 1H), 1,44 (s, 9H).

A una solución de5-R(2,4 g, 8,2 mmol) en CH2Ch (50 ml, 6 ml/mmol) se le añadió ftalimida (2,7 g, 18,2 mmol), trifenilfosfina (4,8 g, 18,2 mmol) y la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadió una solución de azodicarboxilato de dietilo en CH2Cl2 (25 ml, 3 ml/mmol) durante 15 min. La reacción se agitó a 23 °C durante 16 h, se concentró al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Ch:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar6-R(3,3 g, 96 %).

Fr = 0,7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 68,50 (s, 1H), 7,81 (dd,J= 5,5, 3,1 Hz, 2H), 7,66 (dd,J= 5,6, 3,2 Hz, 2H), 7,60 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,35 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,19-7,04 (m, 3H), 4,81 (s, 1H), 4,40 (s, 1H), 3,83 (dd,J =13,9, 3,7 Hz, 1H), 3,72 (dd,J =13,9, 9,9 Hz, 1H), 3,08-3,01 (m, 2H), 1,23 (s, 9H).

A una solución de6-R(3,25 g, 7,74 mmol) en etanol (231 ml, 30 ml/mmol) se le añadió monohidrato de hidrazina (37 ml, 774 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un tubo cerrado herméticamente durante 2,25 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (EtOAc:CH3OH, de 100:1 a 50:50) proporcionó7-R(2,15 g, 96 %). Fr = 0,2 (EtOAc:CHsOH, 6:4).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,60 (d,J =7,9 Hz, 1H), 7,33 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,13-7,04 (m, 2H), 7,05-6,96 (m, 1H), 4,02-3,94 (m, 1H), 2,99-2,87 (m, 3H), 2,78 (dd,J= 13,1,9,7 Hz, 1H), 1,39 (s, 9H).

ESI-MSm/z:290,2 (M+H)+.

A una solución de7-R(2,15 g, 7,4 mmol) en CH3CN (74 ml, 10 ml/mmol) y DMF (7,4 ml, 1 ml/mmol) se le añadióN,N-diisopropiletilamina (1,06 ml, 5,9 mmol) y cloroformiato de alilo (7,9 ml, 74 mmol). La reacción se agitó a 23 °C durante 16 h. La mezcla se diluyó con EtOAc, se añadió NH4Cl y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100) para proporcionar8-R(1,69 g, 61 %).

Fr = 0,4 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 58,25 (s, 1H), 7,62 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,35 (dd,J= 8,1,0,9 Hz, 1H), 7,16 (dddd, J = 27,8, 8,0, 7,0, 1,1 Hz, 2H), 7,04 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 5,90 (ddt,J= 17,3, 10,7, 5,6 Hz, 1H), 5,34-5,22 (m, 1H), 5,20 (dt,J=10,5, 1,4 Hz, 1H), 5,12 (s, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,55 (dc,J= 5,4, 1,7 Hz, 2H), 4,02 (s, 1H), 3,35 (dt, J = 10,0, 4,7 Hz, 1H), 3,21 (s, 1H), 2,95 (ddd,J= 21,6, 15,4, 9,1 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H).

ESI-MSm/z:274,3 (M-Boc+H)+.

A una solución de8-R(1,30 g, 3,50 mmol) en CH2Cl2 (58 ml, 16,6 ml/mmol) se añadió ácido trifluoroacético (30 ml, 8,3 ml/mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 1,5 h, se concentró al vacío para dar9-Ren bruto, que se usó en las etapas siguientes sin más purificación.

Fr = 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,95 (s, 1H), 7,53 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,36 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,09 (t,J= 7,5 Hz, 1H), 7,03 (t,J= 7,5 Hz, 1H), 5,87 (ddt,J= 16,4, 10,8, 5,6 Hz, 1H), 5,34-5,13 (m, 2H), 4,50 (d,J= 5,5 Hz, 2H), 3,62 (sa, 1H), 3,42 (dd,J= 14,9, 3,9 Hz, 1H), 3,36-3,20 (m, 1H), 3,11-3,00 (m, 2H).

ESI-MSm/z:274,3 (M+H)+.

Ejemplo de referencia 4.Síntesis de N-[(S)-(2-amino-3-(fH-indol-3-il)propil)]carbamato de alilo(9-S)

A una solución de L-triptofanol (2-S) (2,0 g, 10,4 mmol) en CH3CN (42 ml, 4 ml/mmol) se le añadió dicarbonato de diferc-butilo (4,6 g, 20,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 3 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (C ^ C ^ C ^ O H , de 99:1 a 85:15) para proporcionar5-S(2,24 g, 73 %).

Fr = 0,5 (C^C^CHaOH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 88,10 (s, 1H), 7,65 (dd,J= 7,8, 1,1 Hz, 1H), 7,37 (dd,J= 8,1, 1,3 Hz, 1H), 7,23-7,11 (m, 2H), 7,06 (s, 1H), 4,81 (s, 1H), 3,99 (s, 1H), 3,70 (dd,J= 11,0, 3,8 Hz, 1H), 3,61 (dd,J= 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,00 (d,J= 6,7 Hz, 2H), 2,01 (s, 1H), 1,42 (s, 9H).

A una solución de5-S(1,2 g, 4,13 mmol) en CH2Ch (24,8 ml, 6 ml/mmol) se le añadió ftalimida (1,33 g, 9,1 mmol), trifenilfosfina (2,4 g, 9,1 mmol) y la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadió una solución de azodicarboxilato de dietilo (3 ml, 10,32 mmol) en CH2Ch (12,4 ml, 3 ml/mmol) durante 15 min. La reacción se agitó a 23 °C durante 16 h, se concentró al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Ch:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar6-S(2,8 g, >100 %).

Fr = 0,7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 88,49 (s, 1H), 7,80 (dd,J= 5,4, 3,1 Hz, 2H), 7,66 (dd,J= 5,6, 3,2 Hz, 2H), 7,60 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,34 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,21-7,04 (m, 3H), 4,74 (s, 1H), 4,42 (s, 1H), 3,83 (dd,J= 13,9, 3,7 Hz, 1H), 3,72 (dd,J= 13,9, 9,9 Hz, 1H), 3,10-3,01 (m, 2H), 1,23 (s, 9H).

A una solución de 6-S(0,86 g, 2,07 mmol) en etanol (72 ml, 36 ml/mmol) se le añadió monohidrato de hidrazina (10 ml, 207 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un tubo cerrado herméticamente durante 2,25 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (EtOAc:CH3OH, de 100:1 a 50:50) para proporcionar7-S(1,0 g, 84 %).

Fr = 0,2 (EtOAc:CH3OH, 6:4).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,61 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,35 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,13-6,97 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 4,06 3,96 (m, 1H), 3,01-2,76 (m, 4H), 1,38 (s, 9H).

ESI-MSm/z:290,3 (M+H)+.

A una solución de7-S(0,95 g, 3,3 mmol) en CH3CN (33 ml, 10 ml/mmol) y DMF (3,3 ml, 1 ml/mmol) se le añadióN,N-diisopropiletilamina (0,5 ml, 2,6 mmol) y cloroformiato de alilo (3,5 ml, 33 mmol). La reacción se agitó a 23 °C durante 20 h. La mezcla se diluyó con EtoAc, se añadió NH4Cl y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100) para proporcionar 8-S(0,88 g, 73 %).

Fr = 0,5 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 58,17 (s, 1H), 7,63 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,20 (dd,J= 8,1,0,9 Hz, 1H), 7,13 (dddd,J= 27,8, 8,0, 7,0, 1,1 Hz, 2H), 7,06 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 5,90 (ddt,J= 17,3, 10,7, 5,6 Hz, 1H), 5,31-5,18 (m, 2H), 5,09 (s, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,59-4,52 (m, 2H), 4,03 (s, 1H), 3,37 (dt,J= 10,0, 4,7 Hz, 1H), 3,21 (s, 1H), 3,05-2,87 (m, 2H), 1,42 (s, 9H).

ESI-MSm/z:274,3 (M-Boc+H)+.

E)

A una solución de 8-S(0,875 g, 2,3 mmol) en CH2Cl2 (38 ml, 16,6 ml/mmol) se añadió ácido trifluoroacético (19 ml, 8,3 ml/mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 2 h, se concentró al vacío para dar9-Sen bruto, que se usó en las etapas siguientes sin más purificación.

Fr = 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,56 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,37 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,13 (t,J= 7,5 Hz, 1H), 7,05 (t,J= 7,5 Hz, 1H), 5,94 (ddt,J= 16,4, 10,8, 5,6 Hz, 1H), 5,34-5,16 (m, 2H), 4,56 (d,J= 5,5 Hz, 2H), 3,60 (sa, 1H), 3,43 (dd,J= 14,9, 3,9 Hz, 1H), 3,37-3,31 (m, 1H), 3,14-2,99 (m, 2H).

ESI-MSm/z:274,3 (M+H)+.

Ejemplo de referencia 5

A una solución de1(1,45 g, 2,33 mmol) en ácido acético (58 ml, 0,08 M) se le añadió9-R(0,95 g, 3,50 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 18 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con C<h>2CI2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio el compuesto10-R(1,3 g, 64 %).

Fr = 0,5 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,66 (s, 1H), 7,36 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,27 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,10 (ddd,J= 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1H), 7,01 (td,J= 7,5, 7,0, 1,0 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,23 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,01 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 5,99-5,89 (m, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,44-5,21 (m, 2H), 5,14-4,99 (m, 2H), 4,63 (ddd,J= 7,3, 4,4, 1,5 Hz, 2H), 4,36 (s, 1H), 4,33-4,24 (m, 1H), 4,29-4,26 (m, 1H), 4,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,19-4,13 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,56 (s, 1H), 3,48-3,43 (m, 3H), 327 (dt,J= 13,2, 4,0 Hz, 1H), 3,04-2,88 (m, 2H), 2,56 (dd,J= 15,2, 3,8 Hz, 1H), 2,49-2,35 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

ESI-MSm/z:877,3 (M+H)+.

A una solución de10-R(600 mg, 0,68 mmol) en CH2Cl2 (12 ml, 18ml/mmol) se le añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (77 mg, 0,1 mmol) y ácido acético (0,4 ml, 6,8 mmol). Se añadió hidruro de tributilestaño (1,1 ml, 4,08 mmol) a 0 °C, la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 0,5 h y se concentró al vacío. El producto en bruto obtenido se diluyó con EtOAc, se añadió solución acuosa saturada de<n>H4CI y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100 y EtOAc:CH3OH, de 100:1 a 1:100) para proporcionar11 -R(440 mg, 82%).

Fr = 0,5 (CH2Ch:CH3OH, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,64 (s, 1H), 7,38 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,29 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,11 (ddt,J= 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1H), 7,03 (ddt, J = 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,24 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 6,02 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 5,02 (d,J= 11,8 Hz, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,36 (s, 1H), 4,28 (d,J= 5,1 Hz, 1H), 4,21 (d,J= 2,2 Hz, 1H), 4,16 (s, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,51-3,39 (m, 4H), 3,32-3,13 (m, 3H), 2,95 (d,J= 8,9 Hz, 2H), 2,89-2,76 (m, 2H), 2,73-2,57 (m, 1H), 2,42 (d,J= 14,8 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).

ESI-MSm/z:793,2 (M+H)+.

A una solución de 11-R (850 mg, 1,07 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 70 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (3,64 g, 21,4 mmol). Después de 17 h a 23 °C, la reacción se interrumpió con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2CI2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar 12-R (553 mg, 66 %). Fr = 0,3 (CH2Ch:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CDCl3): 57,60 (s, 1H), 7,38 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,28 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,11 (ddt,J= 8,3, 7,1, 1,2 Hz, 1H), 7,02 (ddt,J= 8,3, 7,1, 1,2 Hz, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,22 (s, 1H), 6,00 (s, 1H), 5,16 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,87 (s, 1H), 4,54 (s, 1H), 4,51 (d,J= 3,3 Hz, 1H), 4,17 (d,J= 5,4 Hz, 1H), 4,07 (dd,J= 11,3, 2,2 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,52 (d,J= 5,1 Hz, 1H), 3,24 (d,J= 8,8 Hz, 2H), 2,99-2,78 (m, 4H), 2,66 (dd,J= 14,9, 3,5 Hz, 1H), 2,49-2,39 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,28 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,21-2,16 (m, 2H), 2,15 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CD3OD): 5 171,7, 169,4, 148,7, 145,9, 143,7, 141,4, 140,9, 136,9, 130,8, 130,0, 129,7, 126,0, 121,4, 121,0, 119,7, 119,1, 118,4, 117,5, 114,9, 110,8, 107,5, 106,4, 102,1, 91,3, 63,2, 60,0, 59,0, 58,6, 55,3, 54,6, 52,7, 52,4, 48,4, 45,8, 42,5, 40,2, 24,5, 23,2, 19,2, 15,0, 8,2.

ESI-MSm/z:766,2 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 766,2972 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H44N5O8S+: 766,2905).

A una solución de 10-R (700 mg, 0,8 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 87,5 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (2,66 g, 16 mmol). Después de 20 h a 23 °C, la mezcla de reacción se inactivó con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2CI2: CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar 13-R (438 mg, 63 %).

Fr = 0,40 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,64 (s, 1H), 7,37 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,32-7,20 (m, 1H), 7,11 (t,J= 7,7 Hz, 1H), 7,01 (t,J= 7,4 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 6,05-5,90 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 5,75 (d,J= 6,0 Hz, 1H), 5,40-5,07 (m, 4H), 4,88 (d,J= 14,7 Hz, 1H), 4,68-4,50 (m, 3H), 4,28-4,13 (m, 1H), 4,08 (dt,J= 11,4, 2,4 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,68-3,40 (m, 4H), 3,37-3,19 (m, 2H), 2,98-2,79 (m, 2H), 2,59-2,36 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10-2,16 (m, 1H), 2,08 (s, 3H).

ESI-MSm/z:850,3 (M-H2O+H)+.

Ejemplo de referencia 6

A una solución de 1 (955 mg, 1,5 mmol) en ácido acético (37,5 ml, 0,08 M) se le añadió 9-S (627 mg, 2,29 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 18 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con C<h>2CI2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio el compuesto 10-S (756 mg, 58 %).

F r= 0,4 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 57,78 (s, 1H), 7,36 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,24 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,10 (ddd,J= 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1H), 7,01 (td,J= 7,5, 7,0, 1,0 Hz, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,23 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,01 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,07-5,93 (m, 1H), 5,82 (s, 1H), 5,41-5,19 (m, 2H), 5,1 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,66 (dt,J= 5,9, 1,3 Hz, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,33-4,20 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,46 (d,J= 4,2 Hz, 2H), 3,22-3,13 (m, 1H), 3,11-2,88 (m, 4H), 2,66 (dd,J= 15,2, 4,2 Hz, 1H), 2,51 (dd,J= 15,3, 6,0 Hz, 1H), 2,43-2,32 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ESI-MSm/z:877,3 (M+H)+.

A una solución de 10-S (650 mg, 0,72 mmol) en CH2Ch (13,3 ml, 18ml/mmol) se le añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(M) (83 mg, 0,11 mmol) y ácido acético (0,42 ml, 7,4 mmol). Se añadió hidruro de tributilestaño (1,2 ml, 4,4 mmol) a 0 °C, la mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 0,5 h y se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100 y EtOAc:CH3OH, de 100:1 a 1:100) para proporcionar 11-S (445 mg, 78%).

Fr = 0,5 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 57,74 (s, 1H), 7,36 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,26 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 7,12 (ddt,J= 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1H), 7,02 (ddt,J= 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,26 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 6,04 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 5,12 (d,J= 11,8 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,42 (s, 1H), 4,36-4,17 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,51-3,39 (m, 3H), 2,98-2,75 (m, 4H), 2,69 2,60 (m, 2H), 2,47 (d,J= 16,1 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,35-2,17 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

ESI-MSm/z:793,3 (M+H)+.

A una solución de 11-S (435 mg, 0,55 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1,38,5 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (1,84 g, 11 mmol). Después de 24 h a 23 °C, la reacción se interrumpió con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar 12-S (152 mg, 35 %). Fr = 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 57,34 (dd,J= 7,7, 1,5 Hz, 1H), 7,28 (dd,J= 7,7, 1,5 Hz, 1H), 7,04 (ddt,J= 8,2, 7,0, 1,1 Hz, 1H), 6,95 (ddt,J= 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,31-6,25 (m, 1H), 6,15-6,05 (m, 1H), 5,31 (d,J= 11,4 Hz, 1H), 4,91 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 4,40-4,19 (m, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,64 (d,J= 5,2 Hz, 1H), 3,44 (d,J= 9,0 Hz, 1H), 3,03 2,85 (m, 4H), 2,85-2,65 (m, 2H), 2,59 (d,J= 15,6 Hz, 1H), 2,52-2,39 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 2,00 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CD3OD): 5 171,4, 169,3, 148,6, 145,8, 143,5, 141,2, 140,8, 136,5, 131,2, 130,3, 129,5, 126,3, 121,6, 121,2, 119,8, 119,4, 118,6, 117,5, 114,9, 111,0, 107,5, 107,4, 102,2, 91,1, 63,5, 60,5, 59,2, 58,5, 55,3, 54,7, 53,4, 52,7, 48,6, 44,7, 42,7, 39,9, 24,3, 23,4, 19,2, 15,1,8,2.

ESI-MSm/z:766,2 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 766,2958 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H44N5O8S: 766,2905).

A una solución de 10-S (5 mg, 0,006 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 0,5 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (29 mg, 0,17 mmol). Después de 20 h a 23 °C, la mezcla de reacción se inactivó con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2CI2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar 13-S (5 mg, 100%).

Fr = 0,40 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,75 (s, 1H), 7,37 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,32-7,20 (m, 1H), 7,12 (t,J= 7,7 Hz, 1H), 7,02 (t,J= 7,4 Hz, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,24 (s, 1H), 6,08-5,97 (m, 1H), 6,01 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 5,42-5,19 (m, 4H), 4,88 (s, 1H), 4,69-4,65 (m, 2H), 4,58 (s, 1H), 4,28-4,13 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,68-3,40 (m, 2H), 3,24-3,15 (m, 2H), 3,08-2,90 (m, 2H), 2,73-2,57 (m, 2H), 2,53-2,37 (m, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10-2,16 (m, 1H), 2,03 (s, 3H). ESI-MSm/z:850,3 (M-H2O+H)+.

Ejemplo de referencia 7. Síntesis de los compuestos de referencia 14-S y 15-S

A una solución de 1 (50 mg, 0,08 mmol) en ácido acético (1 ml, 0,08 M) se añadió L-triptófano (50 mg, 0,24 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 17 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con C<h>2CI2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 80:20) dio el compuesto 14-S (58 mg, 90 %).

Fr = 0,20 (CH2Cl2:CH3OH, 10:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,77 (s, 1H), 7,39 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,25 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 7,13 (ddd,J= 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,04 (td,J= 7,5, 7,1, 1,0 Hz, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,24 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 6,03 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,15 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,43 (s, 1H), 4,35 (dd,J= 11,7, 2,1 Hz, 1H), 4,28 (dd,J= 5,2, 1,6 Hz, 1H), 4,20 (s, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,52-3,41 (m, 4H), 3,07-2,88 (m, 2H), 2,91-2,80 (m, 2H), 2,42-2,21 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

ESI-MSm/z:808,6 (M+H)+.

A una solución de 14-S (52 mg, 0,066 mmol) en CH3CN:H2O (2:1, 4,5 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (164 mg, 1,45 mmol). Después de 20 h a 23 °C, se añadió una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 30 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 70:30) para proporcionar 15-S (18 mg, 35 %).

Fr = 0,15 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,76 (s, 1H), 7,40 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,25 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,14 (t,J= 7,4 Hz, 1H), 7,04 (t,J= 7,4 Hz, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,23 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 6,01 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,28 (d,J= 12,7 Hz, 1H), 4,95 (s, 1H), 4,53 (s, 1H), 4,28 (dd,J= 11,4, 2,0 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,58 (s, 1H), 3,52-3,47 (m, 2H), 3,28 (s, 1H), 3,03 (dd,J= 15,8, 5,2 Hz, 1H), 2,91-2,82 (m, 3H), 2,44 (d,J= 15,4 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,35-2,31 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CDCls): 5 173,7, 171,2, 168,7, 147,5, 145,7, 142,8, 141,2, 140,8, 135,6, 129,8, 126,3, 122,8, 121,5, 121,2, 119,9, 118,6, 117,7, 115,0, 111,1, 101,9, 81,5, 66 ,8 , 62,9, 60,4, 57,9, 55,8, 55,1,52,3, 42,3, 41,3, 38,3, 31,9, 29,4, 28,9, 24,5, 24,0, 23,8, 22,7, 20,5, 16,0, 9,7.

ESI-MSm/z:781,6 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 781,2610 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H41N4O10S: 781,2538).

Ejemplo de referencia 8.

A) Síntesis de (S)-5-metoxi-triptofanol (17-S)

A una solución de LiAlH4 (23,4 ml, 1,0 M en THF, 23,4 mmol) a -40 °C se le añadió cuidadosamente H2SO4 (0,31 ml, 5,57 mmol) y una suspensión de 5-metoxi-L-triptófano (16-S) (1,0 g, 4,26 mmol, Chem-Impex) en THF (13,4 ml, 0,3 M). La mezcla de reacción se dejó evolucionar a 23 °C, se calentó durante 3 h a 80 °C y 18 h a 23 °C. La mezcla de reacción enfriada a -21 °C se inactivó cuidadosamente con NaOH 2 N hasta pH básico. Se añadió EtOAc y la mezcla se filtró a través de Celite® y se lavó con CH3OH. El producto en bruto se concentró al vacío para dar 17-S en forma de un producto en bruto que se usó en la etapa siguiente sin más purificación.

Fr = 0,2 (CH2Cl2:CHsOH, 4:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,19 (dt,J= 8 ,8 , 0,7 Hz, 1H), 7,06-7,00 (m, 2H), 6,72 (dd,J= 8,8 , 2,4 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,63-3,48 (m, 1H), 3,42-3,33 (m, 1H), 3,17-3,06 (m, 1H), 2,86 (ddt,J= 14,3, 6,1, 0,8 Hz, 1H), 2,66 (dd,J= 14,3, 7,5 Hz, 1H).

ESI-MSm/z:221,4 (M+H)+.

B) Síntesis de (R)-5-metoxi-triptofanol (17-R)

A una solución de LiAlH4 (11,7 ml, 1,0 M en THF, 11,7 mmol) a -40 °C se le añadió cuidadosamente H2SO4 (0,31 ml, 5,75 mmol) y una suspensión de 5-metoxi-D-triptófano (16-R) (0,5 g, 2,13 mmol, Aldrich) en THF (6,7 ml, 0,3 M). La mezcla de reacción se dejó evolucionar a 23 °C, se calentó durante 3,5 h a 80 °C y 18 h a 23 °C. La mezcla de reacción enfriada a -21 °C se inactivó cuidadosamente con NaOH 2 N hasta pH básico. Se añadió EtOAc y la mezcla se filtró a través de Celite® y se lavó con CH3OH. El producto en bruto se concentró al vacío para dar 17-R en forma de un producto en bruto que se usó en la etapa siguiente sin más purificación.

Fr = 0,2 (CH2Cl2:CHsOH, 4:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,20 (d,J= 8,9 Hz, 1H), 7,06-6,96 (m, 2H), 6,71 (dd,J= 8 ,8 , 2,5 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,62-3,52 (m, 1H), 3,37 (dd,J= 10,8, 7,0 Hz, 1H), 3,09 (s a, 1H), 2,82 (dd,J= 14,3, 5,9 Hz, 1H), 2,62 (dd,J= 14,4, 7,6 Hz, 1H).

ESI-MSm/z:221,6 (M+H)+.

Ejemplo de referencia 9

A una solución de 1 (530 mg, 0,85 mmol) en ácido acético (10,6 ml, 0,08 M) se le añadió 17-S (469 mg, 2,13 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 18 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con cH 2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio el compuesto 18-S (420 mg, 60 %).

Fr = 0,3 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,13 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 6,80 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 6,66 (dd,J= 8 ,8 , 2,5 Hz, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,21 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,67 (s, 1H), 4,49-4,29 (m, 4H), 3,75 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,47 (t,J= 5,8 Hz, 3H), 3,37 (d,J= 5,1 Hz, 1H), 3,01-2,81 (m, 2H), 2,75 (d,J= 7,4 Hz, 1H), 2,66 (dd,J= 15,1,4,1 Hz, 1H), 2,55-2,35 (m, 4H), 2,34 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,99 (s, 3H).

ESI-MSm/z:824,3 (M+H)+.

A una solución de 18-S (420 mg, 0,519 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 36 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (2,60 g, 15,3 mmol). Después de 3 h a 23 °C, la mezcla de reacción se inactivó con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15))para obtener 19-S (250 mg, 60 %).

Fr = 0,45 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 57,15 (dd,J= 8,9, 0,6 Hz, 1H), 6,82 (dd,J= 2,4, 0,6 Hz, 1H), 6,68 (dd,J= 8 ,8 , 2,5 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,27 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 6,08 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,30 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,34 (dd,J= 11,4, 2,0 Hz, 1H), 4,31-4,27 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,66-3,58 (m, 1H), 3,55-3,45 (m, 2H), 3,42 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 2,93-2,73 (m, 3H), 2,68 (dd,J= 15,1,4,2 Hz, 1H), 2,54 (d,J= 15,4 Hz, 1H), 2,42 (dd,J= 15,1, 10,1 Hz, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 2,00 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CD3OD): 5 172,7, 170,8, 155,1, 149,9, 147,2, 145,0, 142,6, 142,2, 133,1, 132,4, 132,1, 131,3, 128,1, 122,5, 121,6, 120,3, 116,4, 113,0, 112,9, 111,4, 109,0, 103,6, 100,8, 92,5, 66 ,6 , 65,0, 61,7, 60,4, 59,9, 56,7, 56,1,54,8, 54,1,51,7, 44,1,41,3, 30,7, 25,4, 24,7, 20,6, 16,3, 9,5.

ESI-MSm/z:798,1 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MSm/z:797,2899 [M-H2O+H]+ (Calc. para C42H45N4O10S 797,2851).

Ejemplo de referencia 10

A una solución de 1 (311 mg, 0,50 mmol) en ácido acético (6,25 ml, 0,08 M) se le añadió 17-R (220 mg, 1,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 18 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio el compuesto 18-R (280 mg, 68 %).

Fr= 0,3 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,53 (s, 1H), 7,18 (d,J= 8,7 Hz, 1H), 6,82 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 6,78 (dd,J= 8 ,6 , 2,3 Hz, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,23 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 5,76 (s, 1H), 5,04 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,36 (s, 1H), 4,28 (d,J= 5,0 Hz, 1H), 4,24-4,09 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,64 (s, 1H), 3,47-3,40 (m, 3H), 3,01-2,90 (m, 2H), 2,53 (d,J= 6,9 Hz, 2H), 2,45-2,41 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,22-2,14 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,06 (s, 3H). ESI-MSm/z:824,3 (M+H)+.

A una solución de 18-R (330 mg, 0,40 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 28 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (2,04 g, 12,0 mmol). Después de 3 h a 23 °C, la reacción se interrumpió con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para obtener 19-R (224 mg, 69 %).

Fr = 0,44 (CH2Ch:CHaOH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 57,14 (dd,J =8 ,8 , 0,5 Hz, 1H), 6,83 (d,J = 2,5 Hz,1H), 6,68 (dd,J =8 ,8 , 2,5 Hz, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,26 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,07 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,21 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,68-4,55 (m, 1H), 4,32-4,25 (m, 2H), 4,12 (dd,J= 11,5, 2,1 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,60 (d,J= 5,2 Hz, 1H), 3,57-3,45 (m, 3H), 3,41 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 2,97-2,83 (m, 3H), 2,73 (dd,J= 15,0, 3,4 Hz, 1H), 2,69 (d,J= 14,9 Hz, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,20 (dd,J= 15,1, 10,4 Hz, 1H), 2,12 (s, 3H), 2,11-2,08 (m, 1H), 2,05 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CD3OD): 5 173,0, 170,8, 155,0, 149,8, 147,3, 145,0, 142,8, 142,3, 133,5, 133,1, 132,2, 132,1, 131,1, 130,5, 127,8, 122,5, 121,7, 120,0, 116,4, 113,5, 112,9, 111,4, 110,2, 103,5, 100,9, 92,6, 66 ,8 , 64,5, 61,3, 60,4, 60,0, 56,8, 56,1, 55,9, 54,1, 44,1,41,3, 25,6, 24,5, 20,6, 16,2, 9,6.

ESI-MSm/z:797,4 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MSm/z:797,2896 [M-H2O+H]+ (Calc. para C42H45N4O10S 797,2851).

Ejemplo de referencia 11. Síntesis de A/-[(S)-(2-am¡no-3-(5-metox¡-7H-¡ndol-3-¡l)propil)]carbamato de alilo (24-S)

A una solución de 17-S (6,9 g, 31,4 mmol) en CH3CN (126 ml, 4 ml/mmol) se le añadió dicarbonato de di-ferc-butilo (13,7 g, 62,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 5,5 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (C ^ C ^ C ^ O H , de 99:1 a 85:15) da 20-S (4,5 g, 45 %).

Fr = 0,6 (CH2Cl2:CHaOH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 58,04 (s, 1H), 7,25 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,10 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,87 (dd,J= 8 ,8 , 2,5 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 3,98 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,73-3,58 (m, 2H), 2,96 (d,J= 6,6 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H).

A una solución de 20-S (4,5 g, 14 mmol) en CH2Ch (84 ml, 6 ml/mmol) se le añadió ftalimida (4,5 g, 30,9 mmol), trifenilfosfina (8,1 g, 30,9 mmol) y la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadió una solución del 40 % de azodicarboxilato de dietilo en CH2Cl2 (10,4 ml, 35 mmol) durante 15 min. La reacción se agitó a 23 °C durante 18 h, se concentró al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 99:1 a 85:15) para producir 21-S (5,8 g, 92 %).

Fr = 0,55 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 58,48 (s, 1H), 7,78 (dd,J= 5,5, 3,1 Hz, 2H), 7,69-7,61 (m, 2H), 7,21 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd,J =18,5, 2,4 Hz, 2H), 6,81 (dd,J =8 ,8 , 2,4 Hz, 1H), 4,87 (s, 1H); 4,39 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,83-3,66 (m, 2H), 2,98 (d,J= 6,1 Hz, 2H), 1,20 (s, 9H).

A una solución de 21-S (6,29 g, 14 mmol) en etanol (420 ml, 30 ml/mmol) se le añadió monohidrato de hidrazina (61,1 ml, 1260 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un tubo cerrado herméticamente durante 2 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 100:1 a 50:50) proporciona 22-S (4,2 g, 95 %). Fr = 0,1 (CH2Cl2:CHsOH, 8 :2).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,22 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 7,12 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 6,76 (dd,J= 8 ,8 , 2,4 Hz, 1H), 4,06-3,97 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,06-2,82 (m, 4H), 1,37 (s, 9H).

A una solución de 22-S (4,0 g, 12,52 mmol) en CH3CN (125 ml, 10 ml/mmol) y DMF (12 ml, 1 ml/mmol) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (1,8 ml, 10 mmol) y cloroformiato de alilo (13,3 ml, 125 mmol). La reacción se agitó a 23 °C durante 5 h. La mezcla se diluyó con EtoAc y se añadió NH4Cl y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100) para obtener 23-S (2,65 g, 52 %).

Fr = 0,5 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 58,11 (s, 1H), 7,28-7,20 (m, 1H), 7,04 (d,J= 13,1 Hz, 2H), 6,85 (dd,J= 8,9, 2,4 Hz, 1H), 5,97-5,82 (m, 1H), 5,33-5,24 (m, 1H), 5,19 (dt,J= 10,4, 1,3 Hz, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,55 (d,J= 5,6 Hz, 2H), 4,01 (s, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,37 (d,J= 13,7 Hz, 1H), 3,21 (s, 1H), 2,89 (dd,J= 14,5, 7,0 Hz, 1H), 1,41 (s, 9H).

A una solución de 23-S (2,60 g, 6,44 mmol) en CH2Cl2 (106 ml, 16,6 ml/mmol) se añadió ácido trifluoroacético (54 ml, 8,3 ml/mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 1,5 h, se concentró al vacío para proporcionar 24-S (3,9 g, 100%).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 58,27 (s, 1H), 7,25 (dd,J =9,0, 2,4 Hz, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,96 (d,J= 2,3 Hz, 1H), 6,87 (dd,J= 9,0, 2,4 Hz, 1H), 5,81 (ddt,J= 16,3, 10,9, 5,7 Hz, 1H), 5,23 (dd,J= 19,3, 13,6 Hz, 2H), 4,49 (d,J= 5,9 Hz, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,81-3,55 (m, 1H), 3,62-3,39 (m, 2H), 3,08 (cd,J= 15,1,7,3 Hz, 2H).

Ejemplo de referencia 12

A una solución de 1 (120 mg, 0,19 mmol) en ácido acético (6 ml, 0,08 M) se le añadió 24-S (117 mg, 0,35 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 18 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con C<h>2CI2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio el compuesto 25-S (95 mg, 54 %).

Fr = 0,4 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,64 (s, 1H), 7,14 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,77 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,24 (s, 1H), 6,03 (s, 1H), 6,02-5,93 (m, 1H), 5,76 (s, 1H), 5,38 (d,J= 10,5 Hz, 1H), 5,26 (d,J= 10,5 Hz, 1H), 5,11 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,66 (d,J= 5,6 Hz, 2H), 4,57 (s, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,33-4,19 (m, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,46 (s, 2H), 3,17 (s, 1H), 3,10-2,90 (m, 3H), 2,68-2,45 (m, 2H), 2,38-2,33 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,04 (s, 2H).

ESI-MSm/z:907,1 (M+H)+.

A una solución de 25-S (90 mg, 0,1 mmol) en CH2Cl2 (2 ml, 18ml/mmol) se le añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (12 mg, 0,1 mmol) y ácido acético (0,056 ml, 0,99 mmol). Se añadió hidruro de tributilestaño (0,16 ml, 0,60 mmol) a 0 °C, la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 0,5 h y se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100 y EtOAc:CH3OH, de 100:1 a 1:100) para proporcionar 26-S (75 mg, 92 %).

Fr = 0,25 (CH2Ch:CH3OH, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,62 (s, 1H), 7,15 (d,J= 9,3 Hz, 1H), 6,81-6,76 (m, 2H), 6,72 (s, 1H), 6,25 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 6,03 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 5,12 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,41 (s, 1H), 4,36-4,24 (m, 2H), 4,20 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,44 (dd,J= 22,0, 7,1 Hz, 2H), 3,08-2,78 (m, 4H), 2,73-2,64 (m, 2H), 2,41 2,22 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,25-2,15 (m, 1H), 2,14 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

ESI-MSm/z:823,3 (M+H)+.

A una solución de 26-S (70 mg, 0,085 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 6 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (335 mg, 1,7 mmol). Después de 18 h a 23 °C, la reacción se interrumpió con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar 27-S (23 mg, 33 %). Fr = 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,62 (s, 1H), 7,15 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,75 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 6,21 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 6,01 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 5,78 (s, 1H), 5,22 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,58-4,42 (m, 3H), 4,29-4,10 (m, 2H), 3,84-3,80 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,53-3,48 (m, 2H), 3,22 (d,J= 8,7 Hz, 1H), 3,12 (s, 1H), 3,02 (d,J= 12,8 Hz, 1H), 2,89-2,64 (m, 3H), 2,46 (s, 3H), 2,42-2,34 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). RMN 13C (126 MHz, CDCl3): 5172,1, 168,7, 154,0, 147,6, 145,6, 143,0, 141,2, 140,8, 131,6, 130,6, 129,6, 127,1, 121,8, 120,9, 118,4, 115,2, 112,5, 111,8, 101,8, 100,2, 81,5, 62,6, 60,6, 58,0, 57,8, 56,0, 55,8, 55,0, 42,3, 41,4, 31,9, 29,7, 27,8, 26,9, 25,6, 24,0, 22,7, 20,5, 16,0, 14,1, 13,6, 9,7.

ESI-MSm/z:796,3 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 796,3062 [M-H2O+H]+ (Calc. para C42H46N5O9S 796,3011).

Ejemplo de referencia 13. Síntesis de N-[(R)-(2-amino-3-(5-metoxi-fH-¡ndol-3-¡l)prop¡l)]carbamato de alilo (24-R)

A una solución de 17-R (2,35 g, 10,7 mmol) en CH3CN (43 ml, 4 ml/mmol) se le añadió dicarbonato de di-ferc-butilo (4,67 g, 21,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 2,5 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) proporcionó 20-R (1,7 g, 50 %).

Fr = 0,6 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 58,05 (s, 1H), 7,25 (d,J= 8,9 Hz, 1H), 7,09 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 7,02 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 6,86 (dd,J= 8 ,8 , 2,4 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 3,98 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,69 (td,J= 9,2, 7,5, 5,3 Hz, 1H), 3,61 (dd,J= 10,9, 5,6 Hz, 1H), 2,95 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H).

A una solución de 20-R (1,7 g, 5,3 mmol) en CH2Cl2 (32 ml, 6 ml/mmol) se le añadió ftalimida (1,72 g, 11,7 mmol), trifenilfosfina (3,06 g, 11,7 mmol) y la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadió una solución del 40 % de azodicarboxilato de dietilo en CH2Cl2 (4,0 ml, 13,2 mmol) durante 15 min. La reacción se agitó a 23 °C durante 16 h, se concentró al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 99:1 a 85:15) para proporcionar 21-R (2,0 g, 84 %).

Fr = 0,45 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 58,31 (s, 1H), 7,80 (dd,J= 5,4, 3,0 Hz, 2H), 7,67 (dd,J= 5,4, 3,0 Hz, 2H), 7,30-7,12 (m, 2H), 7,08 (dd,J= 15,2, 2,4 Hz, 1H), 6,84 (dd,J= 8 ,8 , 2,4 Hz, 1H), 4,85 (d,J= 9,2 Hz, 1H), 4,43 (c,J= 5,3 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,83-3,68 (m, 2H), 3,01 (d,J= 5,4 Hz, 2H), 1,22 (s, 9H).

A una solución de 21-R (2,0 g, 4,45 mmol) en etanol (133 ml, 30 ml/mmol) se le añadió monohidrato de hidrazina (21,6 ml, 445 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un tubo cerrado herméticamente durante 2 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (C ^ C ^ C ^ O H , de 100:1 a 50:50) para proporcionar 22-R (1,15 g, 81 %).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CHsOH, 8 :2).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,21 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 7,12 (s, 1H), 7,05 (s, 1H), 6,75 (dd,J= 8 ,8 , 2,4 Hz, 1H), 3,95 (ddd,J= 10,7, 8,7, 5,4 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 2,98-2,79 (m, 3H), 2,75 (dd,J= 13,1,9,4 Hz, 1H), 1,37 (s, 9H).

A una solución de 22-R (1,1 g, 3,4 mmol) en CH3CN (34 ml, 10 ml/mmol) y DMF (3,4 ml, 1 ml/mmol) se le añadióN,N-diisopropiletilamina (0,5 ml, 2,7 mmol) y cloroformiato de alilo (3,7 ml, 34 mmol). La reacción se agitó a 23 °C durante 19 h. La mezcla se diluyó con EtOAc y se añadió NH4Cl y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100) para proporcionar 23-R (0,95 g, 69 %).

Fr = 0,5 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 58,55 (s, 1H), 7,20 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 7,05 (s, 1H), 6,98-6,87 (m, 1H), 6,82 (dt,J= 8 ,8 , 1,8 Hz, 1H), 5,96-5,81 (m, 1H), 5,37-5,22 (m, 2H), 5,22-5,14 (m, 1H), 5,02-4,97 (m, 1H), 4,60-4,47 (m, 2H), 4,00 (s, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,31 (s, 1H), 3,19 (s, 1H), 2,88 (td,J= 14,5, 13,3, 5,9 Hz, 2H), 1,40 (s, 9H).

A una solución de 23-R (0,94 g, 2,3 mmol) en CH2Cl2 (39 ml, 16,6 ml/mmol) se añadió ácido trifluoroacético (19 ml, 8,3 ml/mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 1,5 h, se concentró al vacío para proporcionar 24-R (0,72 g, 100%).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 5 7,27 (d,J= 8 ,8 , 1H), 7,18 (s, 1H), 7,04 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 6,80 (ddd,J= 8 ,8 , 2,4, 0,9 Hz, 1H), 5,95 (ddt,J= 16,4, 10,8, 5,5 Hz, 1H), 5,32 (d,J= 17,1 Hz, 1H), 5,20 (d,J= 10,5 Hz, 1H), 4,60-4,53 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,59 (dt,J= 11,4, 5,5 Hz, 1H), 3,47-3,30 (m, 2H), 3,13-2,94 (m, 2H).

Ejemplo de referencia 14

A una solución de 1 (0,71 g, 1,14 mmol) en ácido acético (45 ml, 0,08 M) se le añadió 24-R (0,54 mg, 1,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 7 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) dio el compuesto 25-R (670 mg, 65 %).

Fr= 0,4 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,52 (s, 1H), 7,17 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 6,83-6,73 (m, 2H), 6,61 (s, 1H), 6,23 (d,J= 1,0 Hz, 1H), 6,02 (d,J= 1,0 Hz, 1H), 6,05-5,89 (m, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,44-5,30 (m, 1H), 5,25 (d,J= 10,4 Hz, 1H), 5,13-4,99 (m, 2H), 4,71-4,59 (m, 2H), 4,36 (s, 1H), 4,30-4,07 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,61-3,53 (m, 1H); 3,48-3,41 (m, 3H), 3,26 (dt,J= 13,3, 3,8 Hz, 1H), 3,04-2,88 (m, 2H), 2,52 (dd,J= 14,9, 3,7 Hz, 1H), 2,46-2,35 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,12-2,02 (m, 1H), 2,09 (s, 3H).

ESI-MSm/z:907,3 (M+H)+.

A una solución de 25-R (745 mg, 0,82 mmol) en CH2Cl2 (15 ml, 18ml/mmol) se le añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (92 mg, 0,1 mmol) y ácido acético (0,47 ml, 8,2 mmol). Se añadió hidruro de tributilestaño (1,33 ml, 4,9 mmol) a 0 °C, la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 0,75 h y se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100 y EtOAc:CH3OH, de 100:1 a 1:100) para proporcionar 26-R (680 mg, >100%).

Fr = 0,25 (CH2Cl2:CHsOH, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,57 (s, 1H), 7,16 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 6,85-6,72 (m, 2H), 6,57 (s, 1H), 6,21 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,00 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,05-4,97 (m, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,35 (s, 1H), 4,31-4,09 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,50-3,40 (m, 3H), 3,24 (dc,J= 9,9, 5,3 Hz, 1H), 2,95 (s, 1H), 2,91-2,75 (m, 2H), 2,62 (dd,J= 14,8, 3,6 Hz, 1H), 2,43-2,28 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,22-2,14 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

ESI-MSm/z:823,3 (M+H)+.

A una solución de 26-R (660 mg, 0,80 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 56 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (2,70 g, 16,0 mmol). Después de 16,5 h a 23 °C, la reacción se interrumpió con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Ch, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Ch:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar 27-R (271 mg, 42 %).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 57,46 (s, 1H), 7,16 (d,J= 8,9 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,72 (d,J= 8,9 Hz, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,20 (d,J= 1,8 Hz, 1H), 5,99 (d,J= 1,8 Hz, 1H), 5,76 (s, 1H), 5,15 (d,J= 11,4 Hz, 1H), 4,86 (s, 1H), 4,52 (m, 2H), 4,17 (d,J= 5,3 Hz, 1H), 4,07 (d,J= 11,4 Hz, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,55-3,43 (m, 2H), 3,32-3,20 (m, 2H), 3,01-2,82 (m, 4H), 2,68-2,59 (m, 1H), 2,44-2,31 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,30-2,19 (m, 1H), 2,26 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CD3OD): 5 171,7, 171,3, 153,8, 153,3, 148,0, 147,6, 145,4, 145,4, 143,1, 141,3, 140,7, 131,6, 131,4, 131,2, 129,3, 126,8, 121,6, 120,9, 118,3, 115,6, 112,2, 111,8, 101,8, 100,2, 81,7, 63,5, 63,1,61,7, 58,0, 57,8, 56,1,55,8, 55,0, 42,2, 42,1,41,4, 41,0, 25,1,23,8, 20,5, 16,0, 9,7.

ESI-MSm/z:796,3 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 796,3045 [M-H2O+H]+ (Calc. para C42H46N5O9S 796,3011).

Ejemplo de referencia 15. Síntesis de los compuestos de referencia 28-S y 29-S.

A una solución de 1 (450 mg, 0,72 mmol) en ácido acético (9 ml, 0,08 M) se le añadió 16-S (675 mg, 2,88 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 52 °C durante 3 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Ch:CH3OH, de 99:1 a 80:20) dio el compuesto 28-S (400 mg, 66 %).

Fr = 0,35 (CH2Cl2:CH3OH, 10:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 57,65 (s, 1H), 7,15 (d,J= 8,7 Hz, 1H), 6,85-6,76 (m, 2H), 6,57 (s, 1H), 6,25 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,04 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,16 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,44 (s, 1H), 4,35 (dd,J= 11,7, 2,0 Hz, 1H), 4,29 (dd,J= 5,2, 1,6 Hz, 1H), 4,22 (d,J= 2,7 Hz, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,52-3,43 (m, 3H), 3,02-2,81 (m, 4H), 2,41 2,31 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

E S I-M Sm /z :838 ,6 (M H )+ .

A una solución de 28-S (400 mg, 0,48 mmol) en CH3CN:H2O (2:1, 33 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (1,20 g, 7,16 mmol). Después de 16 h a 23 °C, se añadió una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 30 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 70:30) para proporcionar 29-S (179 mg, 45 %).

Fr = 0,25 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 57,17 (d,J= 8,9 Hz, 1H), 6,83 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 6,70 (dd,J= 8,9, 2,4 Hz, 1H), 6,66 (s, 1H), 6,29 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 6,10 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,32 (d,J= 11,6 Hz, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,48 (s, 1H), 4,38 (dd,J= 11,7, 2,1 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,41-3,35 (m, 1H), 3,16-2,91 (m, 5H), 2,71 (dd,J= 15,3, 11,4 Hz, 2H), 2,54 (s, 1H), 2,42-2,36 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,99 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CDCls): d 171,3, 170,6, 155,2, 149,8, 147,5, 145,4, 142,8, 142,4, 133,0, 131,8, 130,0, 128,0, 122,2, 121,8, 115,5, 113,9, 113,3, 113,2, 111,4, 109,1, 103,8, 100,9, 91,6, 65,4, 61,9, 60,3, 59,4, 57,1,56,4, 56,2, 55,2, 53,4, 43,7, 40,8, 38,3, 30,7, 26,4, 24,7, 20,4, 16,5, 9,6.

ESI-MSm/z:811,3 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 811,2682 [M-H2O+H]+ (Calc. para C42H43N4O11S 811,2644).

Ejemplo de referencia 16. Síntesis de los compuestos de referencia 28-R y 29-R

A una solución de 1 (50 mg, 0,08 mmol) en ácido acético (1 ml, 0,08 M) se le añadió 16-R (66 mg, 0,3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 6 h y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 80:20) dio el compuesto 28-R (50 mg, 75 %).

Fr = 0,20 (CH2Cl2:CHsOH, 10:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 7,63 (s, 1H), 7,16 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 6,81 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 6,77 (dd,J= 8 ,8 , 2,3 Hz, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,21 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 6,00 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 5,77 (s, 1H), 5,00 (d,J= 11,8 Hz, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,35 (s, 1H), 4,27 (d,J= 5,0 Hz, 1H), 4,22-4,04 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,48-3,40 (m, 2H), 3,00 (dd,J= 15,3, 4,8 Hz, 1H), 2,92 (d,J= 5,4 Hz, 2H), 2,71 (dd,J= 15,3, 10,1 Hz, 1H), 2,46 (d,J= 14,9 Hz, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,21 (d,J= 15,0 Hz, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

E S I-M Sm /z :838 ,8 (M H )+ .

A una solución de 28-R (50 mg, 0,06 mmol) en CH3CN:H2O (2:1, 4,2 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (304 mg, 1,80 mmol). Después de 3 h a 23 °C, se añadió una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 30 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH de 99:1 a 70:30) para proporcionar 29-R (30 mg, 60 %).

Fr = 0,15 (CH2Cl2:CHsOH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 7,68 (s, 1H), 7,14 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 6,80 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 6,76 (dd,J= 8 ,8 , 2,4 Hz, 1H), 6,57 (s, 1H), 6,17 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,95 (d,J= 1,3 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,12 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,56-4,46 (m, 2H), 4,17 (s, 1H), 4,10 (dd,J= 9,9, 4,9 Hz, 1H), 4,05 (dd,J= 11,4, 2,0 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,51 (s, 1H), 3,48-3,42 (m, 2H), 3,23 (s, 1H), 3,00 (dd,J= 15,3, 4,9 Hz, 1H), 2,90-2,77 (m, 2H), 2,71 (dd,J= 15,2, 9,9 Hz, 1H), 2,48 (d,J= 14,6 Hz, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (d,J= 14,6 Hz, 1H), 2,14 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CDCls): 175,6, 171,0, 168,7, 154,1, 147,3, 145,6, 143,1, 141,3, 140,8, 131,1, 130,4, 126,5, 121,9, 121.5, 121,3, 115,5, 112,9, 112,7, 112,0, 109,1, 101,9, 100,2, 81,5, 62,8, 61,7, 60,4, 57,9, 57,8, 56,0, 55,8, 54,8, 53,4, 42.5, 41,2, 40,3, 29,7, 24,6, 23,8, 20,5, 15,9, 9,8.

ESI-MSm/z:811,6 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 811,2687 [M-H2O+H]+ (Calc. para C42H43N4O11S 811,2644).

Ejemplo 17.

A una solución del compuesto 1 (2,0 g, 3,21 mmol) en acetonitrilo (200 ml, 0,01 M) se le añadió clorhidrato de 2-benzofuran-3-il-etilamina (30) (1,90 g, 9,65 mmol, Sigma Aldrich) y cloruro cianúrico (T<c>T) (200 mg, 10 %). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 24 h y después se añadió solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 9:1 a 1:9) da el compuesto 31 (1,95 g, 79 %).

Fr = 0,5 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 57,38-7,36 (m, 2H), 7,19-7,10 (m, 2H), 6,64 (s, 1H), 6,20 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 6,05 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 5,76 (s, 1H), 5,05 (d,J= 11,7 Hz, 1H), 4,54 (s, 1H), 4,33-4,24 (m, 2H), 4,23-4,16 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,49-3,38 (m, 2H), 3,28-3,21 (m, 1H), 3,06-2,78 (m, 5H), 2,57-2,50 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,21 (m, 3H), 2,08 (s, 3H).

E S I-M Sm /z :765 ,3 (M H )+ .

A una solución del compuesto 31 (380 mg, 0,49 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 25 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (1,30 g, 7,45 mmol). Después de 5 h a 23 °C, se añadió una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar el compuesto 32 (175 mg, 47%).

Fr = 0,40 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,35 (ddd,J= 10,7, 7,6, 1,1 Hz, 2H), 7,14 (dtd,J= 19,7, 7,3, 1,3 Hz, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,16 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 6,01 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,15 (dd,J= 11,5, 1,2 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,48 (d,J= 3,2 Hz, 1H), 4,44 (s, 1H), 4,20-4,06 (m, 2H), 3,81 (s, 1H), 3,50 (d,J= 18,8 Hz, 1H), 3,30 (ddd,J =12,6, 7,9, 5,1 Hz, 1H), 3,22 (d,J= 9,1 Hz, 1H), 2,99 (d,J= 17,9 Hz, 1H), 2,84 (dd,J =19,2, 12,0 Hz, 3H), 2,59-2,49 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,21-2,14 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,06 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CDCl3): 5 171,2, 168,7, 154,4, 150,0, 147,9, 145,5, 142,9, 140,9, 140,8, 131,3, 129,0, 127,7, 123,7, 122,2, 121,2, 120,8, 118,9, 118,3, 115,5, 113,5, 111,7, 101,7, 82,1,62,7, 61,7, 60,3, 57,8, 57,4, 55,9, 55,0, 42,2, 41,3, 39,7, 38,2, 29,7, 23,7, 21,3, 20,6, 15,9, 9,7. ESI-MSm/z:738,6 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 756,2654 [M+H]+ (Calc. para C40H42N3O10S 756,2585).

Ejemplo 18.

A una solución de 1 (500 mg, 0,80 mmol) en ácido acético (10 ml, 0,08 M) se le añadió clorhidrato de 2-(5-metoxibenzofuran-3-il)-etilamina (33) (Diverchim, ref: DW04590) (444 mg, 1,60 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 6 días y después se evaporó el ácido acético. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, 1:1) proporciona 34 (270 mg, 43 %).

Fr = 0,3 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,25 (d,J= 9,1 Hz, 1H), 6,80-6,73 (m, 2H), 6,63 (s, 1H), 6,18 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,03 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,78 (s, 1H), 5,03 (dd,J= 11,5, 1,3 Hz, 1H), 4,52 (s, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,26 (dd,J= 4,7, 1,5 Hz, 1H), 4,23-4,16 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,46-3,43 (m, 1H), 3,43-3,37 (m, 1H), 3,24 (s, 1H), 3,03 (d,J= 18,0 Hz, 1H), 2,91 (dd,J= 17,9, 9,2 Hz, 1H), 2,87-2,72 (m, 2H), 2,53-2,47 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,06 (s, 3H).

E S I-M Sm /z :795 ,8 (M H )+ .

A una solución de 34 (345 mg, 0,43 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1, 30 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (2,20 g, 13,0 mmol). Después de 3 h a 23 °C, se añadió una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para obtener 35 (175 mg, 51 %).

Fr = 0,35 (CH2Ch:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CD3OD): 57,27 (d,J= 9,0 Hz, 1H), 6,90 (d,J= 2,6 Hz, 1H), 6,80 (dd,J= 9,0, 2,6 Hz, 1H), 6,57 (s, 1H), 6,23 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 6,05 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 5,23 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,27-4,08 (m, 4H), 3,77 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,63 (d,J= 14,1 Hz, 2H), 3,40-3,34 (m, 2H), 2,93-2,87 (m, 5H), 2,80 (d,J= 15,5 Hz, 1H), 2,57-2,54 (m, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CD3OD): 5 171,9, 170,6, 157,5, 147,0, 145,0, 142,3, 141,0, 132,2, 131,1, 129,1, 122,2, 120,9, 120,2, 116,3, 115,1, 114,0, 112,7, 111,4, 103,5, 102,7, 92,9, 62,0, 60,3, 59,8, 59,4, 56,5, 56,2, 56,0, 54,0, 43,8, 41,2, 40,7, 30,8, 30,3, 28,7, 24,5, 21,6, 20,6, 16,2, 9,6. ESI-MSm/z:768,6 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 768,2630 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H42N3O10S 768,2585).

Ejemplo 19

A una solución de LiAlH4 (148 ml, 1,0 M en THF, 148 mmol) a -40 °C se le añadió cuidadosamente H2SO4 (7,14 ml, 72,9 mmol) y una suspensión de ácido (S)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propanoico (36-S) (preparado como se describe en Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (5,54 g, 26,9 mmol) en THF (85 ml, 0,003 M). La mezcla de reacción se dejó evolucionar a 23 °C, se calentó a 80 °C durante 3 h y 18 h a 23 °C. La mezcla de reacción enfriada a -21 °C se inactivó cuidadosamente con NaOH 2 N hasta pH básico. Se añadió EtOAc y la mezcla se filtró a través de Celite® y se lavó con CH3OH. El producto en bruto se concentró al vacío para proporcionar el compuesto 37-S (3,93 g, >100%).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 4:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,67-7,62 (m, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,51-7,41 (m, 1H), 7,34-7,18 (m, 2H), 3,69-3,48 (m, 1H), 3,44 (dd,J= 10,8, 6,6 Hz, 1H), 3,18 (dtd,J= 7,4, 6,4, 4,6 Hz, 1H), 2,88 (ddd,J= 14,4, 6,1, 1,0 Hz, 1H), 2,68 (ddd,J= 14,4, 7,5, 0,9 Hz, 1H).

Ejemplo 20

A una solución de LiAlH4 (118 ml, 1,0 M en THF, 118 mmol) a -40 °C se le añadió cuidadosamente H2SO4 (3,1 ml, 57,8 mmol) y una suspensión de ácido (R)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propanoico (36-R) (preparado como se describe en Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (4,4 g, 21,4 mmol) en THF (67,4 ml, 0,003 M). La mezcla de reacción se dejó evolucionar a 23 °C, se calentó a 80 °C durante 3 h y 18 h a 23 °C. La mezcla de reacción enfriada a -21 °C se inactivó cuidadosamente con NaOH 2 N hasta pH básico. Se añadió EtOAc y la mezcla se filtró a través de Celite® y se lavó con CH3OH. El producto en bruto se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15, amina de sílice) para proporcionar el compuesto 37-R (2,77 g, 68 %).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 4:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,63-7,52 (m, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,46-7,33 (m, 1H), 7,21 (dtd,J= 19,9, 7,3, 1,3 Hz, 2H), 3,57 (dd,J= 10,7, 4,6 Hz, 1H), 3,42 (dd,J= 10,8, 6,6 Hz, 1H), 3,15 (dtd,J= 7,6, 6,3, 4,6 Hz, 1H), 2,84 (ddd,J= 14,4, 6,0, 1,0 Hz, 1H), 2,64 (ddd,J= 14,4, 7,5, 0,9 Hz, 1H).

Ejemplo 21

A una solución del compuesto 1 (850 mg, 1,36 mmol) en CH3CN (136 ml, 0,01 M) se le añadió (S)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propan-1-ol (37-S) (1,30 g, 6,83 mmol y cloruro cianúrico (TCT) (170 mg, 20%). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 24 h y después se añadió solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 9:1 a 1:9) da el compuesto 38-S (750 mg, 69 %).

Fr = 0,25 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,39-7,33 (m, 1H), 7,33-7,29 (m, 1H), 7,20 (ddd,J= 8,3, 7,2, 1,4 Hz, 1H), 7,14 (td,J= 7,4, 1,0 Hz, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,21 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,06 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,08 (d,J= 11,2 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,32-4,23 (m, 2H), 4,19 (d,J= 2,7 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,52-3,41 (m, 3H), 3,36-3,29 (m, 1H), 3,13 (d,J= 9,8 Hz, 1H), 3,00-2,81 (m, 3H), 2,57 (dd,J= 15,7, 4,9 Hz, 1H), 2,50 (d,J= 15,2 Hz, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,31-2,25 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (d,J= 7,2 Hz, 1H), 2,05 (s, 3H).

ESI-MSm/z:795,2 (M)+.

A una solución del compuesto 38-S (890 mg, 1,12 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1,75 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (4,70 g, 28,0 mmol). Después de 18 h a 23 °C, se añadió una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar el compuesto 39-S (500 mg, 57 %).

Fr = 0,30 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,38-7,33 (m, 1H), 7,33-7,28 (m, 1H), 7,23-7,16 (m, 1H), 7,16-7,09 (m, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,18 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,03 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,19 (d,J= 11,2 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,49 (s, 2H), 4,24-4,10 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,54 (d,J =4,9 Hz, 1H), 3,49 (d,J = 2,3 Hz,3H), 3,33 (t,J =10,1 Hz, 2H), 3,22 (s, 1H), 2,98 (s, 1H), 2,84 (d,J= 7,6 Hz, 2H), 2,62-2,53 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,30-2,24 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CDCla): 5 172,0, 170,7, 156,1, 150,6, 149,9, 147,1, 145,0, 142,4, 142,2, 132,0, 131,4, 128,7, 125,5, 123,8, 122,6, 121,6, 120,1, 116,5, 114,4, 112,3, 103,5, 92,6, 66,0, 65,1,62,2, 60,4, 59,7, 56,6, 56,1,54,8, 54,1, 51,6, 44,0, 41,3, 38,3, 30,8, 24,8, 20,6, 16,3, 9,6. ESI-MSm/z:768,2 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 768,2652 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H42N3O10S 768,2585)

Ejemplo 22.

A una solución del compuesto 1 (100 mg, 0,16 mmol) en CH3CN (16 ml, 0,01 M) se le añadió (R)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propan-1-ol (37-R) (307 mg, 1,6 mmol) y cloruro cianúrico (TCT) (40 mg, 40%). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 44 h y después se añadió solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 9:1 a 1:9) da el compuesto 38-R (95 mg, 75 %).

Fr = 0,3 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 57,42-7,27 (m, 2H), 7,28-7,09 (m, 2H), 6,58 (s, 1H), 6,20 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,05 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,00 (d,J= 11,4 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,34 (s, 1H), 4,31-4,16 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 3,79 3,76 (m, 1H), 3,63 (s, 1H), 3,54-3,40 (m, 4H), 2,99-2,87 (m, 2H), 2,68 (d,J= 15,0 Hz, 1H), 2,56-2,47 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

ESI-MSm/z:795,2 (M+H)+.

A una solución del compuesto 38-R (95 mg, 0,11 mmol) en CH3CN:H2O (1,39: 1, 11 ml, 0,015 M) se añadió AgNO3 (601 mg, 3,58 mmol). Después de 18 h a 23 °C, se añadió una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar el compuesto 39-R (66 mg, 70 %).

Fr = 0,3 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 57,39-7,31 (m, 2H), 7,23-7,07 (m, 2H), 6,59 (s, 1H), 6,17 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,01 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,12 (dd,J= 11,3, 1,2 Hz, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,56-4,43 (m, 2H), 4,19-4,07 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,83-3,74 (m, 1H), 3,66-3,51 (m, 3H), 3,24 (s, 1H), 2,99-2,79 (m, 2H), 2,75-2,64 (m, 1H), 2,59-2,43 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CD3OD): 5 170,5, 169,1, 154,9, 148,9, 148,5, 145,7, 143,6, 141,1, 140,8, 130,6, 129,9, 127,1, 124,1, 122,4, 122,4, 121,2, 120,3, 118,7, 118,2, 115,1, 113,6, 110,9, 102,1, 91,1, 65,0, 63,3, 60,2, 59,0, 58,4, 55,4, 54,5, 52,7, 52,3, 42,5, 38,7, 29,4, 23,5, 23,2, 19,1, 14,8, 8,3.

ESI-MSm/z:768,2 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MSm/z:767,2628 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H42N3O10S 768,2585).

Ejemplo de referencia 23. Síntesis de al¡l-W-[(S)-2-am¡no-3-(benzofuran-3-¡l)propil]carbamato (44-S).

37-S 40-S

A una solución del compuesto 37-S (1,0 g, 5,22 mmol) en CH3CN (21 ml, 4 ml/mmol) se le añadió dicarbonato de diferc-butilo (2,28 g, 10,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 2 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Ch:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar el compuesto 40-S (0,5 g, 33 %). Fr = 0,7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 87,64 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,46 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 7,36-7,19 (m, 2H), 4,94 (s, 1H), 3,98 (s, 1H), 3,71-3,56 (m, 2H), 2,93 (d,J= 6,9 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H).

A una solución del compuesto 40-S (0,5 g, 1,71 mmol) en CH2Ch (11 ml, 6 ml/mmol) se le añadió ftalimida (0,55 g, 3,77 mmol), trifenilfosfina (0,99 g, 3,77 mmol) y la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadió una solución del 40 % de azodicarboxilato de dietilo en CH2Ch (1,26 ml, 4,29 mmol) durante 15 min. La reacción se agitó a 23 °C durante 18 h, se concentró al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 99:1 a 40:60) para proporcionar el compuesto 41-S (0,68 g, 94 %).

Fr = 0,8 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCh): 87,89-7,79 (m, 2H), 7,83-7,62 (m, 2H), 7,65-7,55 (m, 2H), 7,49-7,42 (m, 1H), 7,33-7,20 (m, 2H), 4,83 (d,J= 9,0 Hz, 1H), 4,39 (ddt,J= 12,1,6,3, 2,9 Hz, 1H), 3,88-3,70 (m, 2H), 2,96 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H).

A una solución del compuesto 41-S (345 mg, 0,82 mmol) en etanol (25 ml, 30 ml/mmol) se le añadió monohidrato de hidrazina (3,6 ml, 73,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un tubo cerrado herméticamente durante 2 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 100:1 a 50:50) para proporcionar el compuesto 42-S (233 mg, 98 %).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 8 :2).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,62 (d,J= 7,5 Hz, 1H), 7,49-7,42 (m, 2H), 7,33-7,18 (m, 2H), 4,85 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 3,91 (s, 1H), 2,91-2,76 (m, 3H), 2,67 (dd,J= 13,1,6,8 Hz, 1H), 1,25 (s, 9H).

A una solución del compuesto 42-S (280 mg, 0,96 mmol) en CH3CN (10 ml, 10 ml/mmol) y DMF (16 ml, 1 ml/mmol) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,14 ml, 0,77 mmol) y cloroformiato de alilo (1,02 ml, 9,64 mmol). La reacción se agitó a 23 °C durante 2 h. La mezcla se diluyó con EtOAc y se añadió NH4Cl y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100) para proporcionar el compuesto 43-S (445 mg, >100%).

Fr = 0,5 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 57,60 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 7,52-7,43 (m, 2H), 7,34-7,20 (m, 2H), 5,90 (ddt,J= 16,4, 10,8, 5,6 Hz, 1H), 5,32-5,17 (m, 2H), 4,93-4,86 (m, 1H), 4,56 (d,J= 5,6 Hz, 2H), 4,08-3,98 (m, 1H), 3,40-3,21 (m, 2H), 2,88 (m, 2H), 1,25 (s, 9H).

A una solución del compuesto 43-S (160 mg, 0,43 mmol) en CH2Cl2 (8 ml, 16,6 ml/mmol) se le añadió ácido trifluoroacético (4 ml, 8,3 ml/mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 1,5 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 100:1 a 50:50) para proporcionar el compuesto 44-S (175 mg, >100 %). Fr = 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 57,72 (s, 1H), 7,64 (dt,J= 8,4, 0,9 Hz, 1H), 7,49 (dt,J= 8,4, 0,9 Hz, 1H), 7,37-7,22 (m, 2H), 5,94 (ddt,J= 16,3, 10,7, 5,5 Hz, 1H), 5,32 (dc,J= 17,3, 1,7 Hz, 1H), 5,19 (dc,J= 10,6, 1,5 Hz, 1H), 4,56 (dt,J= 5,7, 1,5 Hz, 2H), 3,56 (cd,J= 7,0, 4,4 Hz, 1H), 3,46-3,32 (m, 1H), 3,32-3,24 (m, 1H), 3,03 (dd,J= 14,8, 6,9 Hz, 1H), 2,91 (ddd,J= 14,8, 7,1, 0,9 Hz, 1H).

Ejemplo de referencia 24. Síntesis de alil-N-[(R)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propil]carbamato (44-R).

A una solución del compuesto 37-R (2,75 g, 14,4 mmol) en CH3CN (58 ml, 4 ml/mmol) se le añadió dicarbonato de diferc-butilo (6,27 g, 28,76 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 2,5 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar el compuesto 40-R (3,7 g, 88 %). Fr = 0,6 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,64 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 7,52-7,43 (m, 2H), 7,35-7,20 (m, 2H), 4,85 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 4,00 (sa, 1H), 3,69 (dd,J= 11,0, 4,0 Hz, 1H), 3,62 (dd,J= 10,9, 5,1 Hz, 1H), 2,94 (d,J= 6,9 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H).

A una solución del compuesto 40-R (3,7 g, 12,7 mmol) en CH2Cl2 (76 ml, 6 ml/mmol) se le añadió ftalimida (4,1 g, 28 mmol), trifenilfosfina (7,3 g, 28 mmol) y la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadió una solución del 40 % de azodicarboxilato de dietilo en CH2Cl2 (9,4 ml, 31,7 mmol) durante 15 min. La reacción se agitó a 23 °C durante 16 h, se concentró al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para proporcionar el compuesto 41-R (4,05 g, 76 %).

Fr = 0,8 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,67-7,68 (m, 4H), 7,61 (d,J= 7,5 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,46 (d,J= 7,5 Hz, 1H), 7,27 (dtd,J= 17,2, 7,3, 1,4 Hz, 2H), 4,84 (d,J= 9,0 Hz, 1H), 4,46-4,30 (m, 1H), 3,89-3,66 (m, 2H), 2,97 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H).

A una solución del compuesto 41-R (4,0 g, 9,5 mmol) en etanol (285 ml, 30 ml/mmol) se le añadió monohidrato de hidrazina (41,5 ml, 856 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C en un tubo cerrado herméticamente durante 2 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 100:1 a 50:50) para proporcionar el compuesto 42-R (2,2 g, 80 %).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 8 :2).

RMN 1H (400 MHz, CDCI3): 57,60 (d,J= 7,5 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,44 (d,J= 7,1 Hz, 1H), 7,25 (dtd,J= 18,8, 7,3, 1,3 Hz, 2H), 4,94 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 3,98-3,78 (m, 1H), 2,90-2,77 (m, 2H), 2,65 (dd,J= 13,1, 7,0 Hz, 1H), 1,40 (s, 9H).

A una solución del compuesto 42-R (2,2 g, 7,6 mmol) en CH3CN (76 ml, 10 ml/mmol) y DMF (7,6 ml, 1 ml/mmol) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (1,1 ml, 6,08 mmol) y cloroformiato de alilo (8,05 ml, 76 mmol). La reacción se agitó a 23 °C durante 7 h. La mezcla se diluyó con EtOAc y se añadió NH4Cl y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100) para proporcionar el compuesto 43-R (2,3 g, 81 %).

Fr = 0,7 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,60 (d,J= 7,5 Hz, 1H), 7,52-7,43 (m, 2H), 7,34-7,20 (m, 2H), 5,90 (ddt,J= 17,3, 10,8, 5,6 Hz, 1H), 5,29 (d,J= 17,2, 1H), 5,20 (d,J= 10,4, 1H), 5,10 (t,J= 6,2 Hz, 1H), 4,86 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 4,56 (d,J= 5,4, 2H), 4,08-3,97 (m, 1H), 3,36 (dt,J= 10,7, 4,7 Hz, 1H), 3,30-3,23 (m, 1H), 2,87 (td,J= 14,8, 6,5 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H).

A una solución del compuesto 43-R (1,32 g, 3,52 mmol) en CH2Cl2 (60 ml, 16,6 ml/mmol) se le añadió ácido trifluoroacético (30 ml, 8,3 ml/mmol). La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 1,5 h, se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 100:1 a 50:50) para proporcionar el compuesto 44-R (0,90 g, 94 %). Fr = 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,75 (s, 1H), 7,69-7,61 (m, 1H), 7,54-7,46 (m, 1H), 7,39-7,24 (m, 2H), 5,95 (ddt,J= 16,3, 10,8, 5,5 Hz, 1H), 5,32 (dd,J= 17,3, 1,8 Hz, 1H), 5,24-5,16 (m, 1H), 4,57 (dt,J= 5,7, 1,5 Hz, 2H), 3,68 (cd,J= 7,1, 4,2 Hz, 1H), 3,48 (dd,J= 14,8, 4,2 Hz, 1H), 3,42-3,30 (m, 1H), 3,14-2,95 (m, 2H).

Ejemplo de referencia 25

A una solución del compuesto 1 (750 mg, 1,2 mmol) en CH3CN (120 ml, 0,01 M) se le añadió el compuesto 44-S (1370 mg, 6 mmol) y cloruro cianúrico (TCT) (184 mg, 20 %). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 23 h y después se añadió solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 9:1 a 1:9) da el compuesto 45-S (755 mg, 72 %).

Fr = 0,36 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 57,38-7,28 (m, 2H), 7,23-7,08 (m, 2H), 6,67 (s, 1H), 6,19 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,09-5,95 (m, 1H), 6,04 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 5,92 (s, 1H), 5,80 (s, 1H), 5,44-5,34 (m, 1H), 5,26 (dc,J= 10,4, 1,3 Hz, 1H), 5,08 (dd,J= 11,4, 1,1 Hz, 1H), 4,70-4,63 (m, 2H), 4,56 (s, 1H), 4,34 (s, 1H), 4,31-4,18 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,50-3,39 (m, 2H), 3,24-3,15 (m, 1H), 3,00 (dt,J= 12,2, 6,0 Hz, 2H), 2,95 (d,J= 5,2 Hz, 2H), 2,60 (dd,J= 15,4, 4,5 Hz, 2H), 2,44 (dd,J= 15,6, 5,2 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,25-2,20 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,12 (s, 1H), 2,04 (s, 3H).

ESI-MSm/z:878,2 (M+H)+.

A una solución del compuesto 45-S (750 mg, 0,85 mmol) en CH2Cl2 (15,3 ml, 18 ml/mmol) se le añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(N) (96 mg, 0,14 mmol) y ácido acético (0,5 ml, 8,5 mmol). Se añadió hidruro de tributilestaño (1,4 ml, 5,1 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 minutos y se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100 y CH2Cl2:CH3OH, de 100:1 a 1:100) para proporcionar el compuesto 46-S (430 mg, 64 %).

Fr = 0,3 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 57,37-7,29 (m, 2H), 7,22-7,11 (m, 2H), 6,57 (s, 1H), 6,21 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 6,06 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 5,07 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,29-4,23 (m, 2H), 4,14 (s, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,50 3,47 (m, 2H), 3,38 (d,J= 8,7 Hz, 1H), 2,95-2,71 (m, 4H), 2,68-2,52 (m, 2H), 2,51-2,38 (m, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,33-2,26 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,17-2,08 (m, 1H), 2,10 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

ESI-MSm/z:794,3 (M+H)+.

A una solución del compuesto 46-S (550 mg, 0,7 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1,49 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (2,4 g, 14 mmol). Después de 16 h a 23 °C, la reacción se interrumpió con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con CH2Cl2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar el compuesto 47-S (53 mg, 10%).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CDCh): 57,36 (d, 7,9 Hz, 1H), 7,33 (d, 7,4 Hz, 1H), 7,23 (t,J= 7,4 Hz, 1H), 7,16 (t,J= 7,4 Hz, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,20 (s, 1H), 6,04 (s, 1H), 5,92 (s, 1H), 5,20 (d,J= 11,1 Hz, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,50 (s, 1H), 4,46-4,39 (m, 1H), 4,25 (d,J= 11,1 Hz, 1H), 4,20 (s, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,81 (d,J= 4,2 Hz, 1H), 3,58 (s, 1H), 3,40-3,14 (m, 3H), 2,90 (t,J= 13,0 Hz, 1H), 2,76 (m, 3H), 2,50 (s, 3H), 2,46-2,37 (m, 1H), 2,32-2,26 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).

RMN 13C (126 MHz, CD3OD): 5 170,5, 169,2, 154,6, 149,1, 148,7, 145,7, 143,5, 141,0, 140,9, 131,2, 129,6, 126,9, 124,4, 122,5, 121,4, 119,7, 118,7, 115,0, 112,7, 111,0, 110,7, 102,1,91,2, 63,5, 61,2, 59,2, 58,5, 55,3, 54,7, 53,4, 52,7, 43,3, 42,5, 39,9, 36,9, 29,3, 24,1,23,6, 19,1, 15,0, 8,2.

ESI-MSm/z:767,2 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767,2794 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H43N4O9S 767,2745).

Ejemplo de referencia 26.

A una solución del compuesto 1 (621 mg, 1 mmol) en CH3CN (100 ml, 0,01 M) se le añadió el compuesto 44-R (825 mg, 3 mmol) y cloruro cianúrico (TCT) (248 mg, 40 %). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 66 h y después se añadió solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 9:1 a 1:9) da el compuesto 45-R (530 mg, 58 %).

Fr = 0,4 (Hexano:EtOAc, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,42-7,28 (m, 2H), 7,23-7,08 (m, 2H), 6,60 (s, 1H), 6,20 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,04 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,01-5,92 (m, 1H), 5,77 (s, 1H), 5,44-5,20 (m, 2H), 5,09 (s, 1H), 5,04-4,96 (m, 1H), 4,71-4,55 (m, 2H), 4,34 (s, 1H), 4,30-4,18 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,53 (dd,J= 10,2, 4,4 Hz, 1H), 3,46 (m, 2H), 3,50-3,40 (m, 1H), 3,03-2,87 (m, 2H), 2,67 (d,J= 15,0 Hz, 1H), 2,47 (dd,J= 15,6, 3,7 Hz, 1H), 2,40-2,32 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,19-2,12 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).

ESI-MSm/z:878,3 (M+H)+.

A una solución del compuesto 45-R (552 mg, 0,63 mmol) en CH2Cl2 (11,3 ml, 18 ml/mmol) se le añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (70,7 mg, 0,1 mmol) y ácido acético (0,36 ml, 6,3 mmol). Se añadió hidruro de tributilestaño (1,02 ml, 3,8 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 0,5 h y se concentró al vacío. El producto en bruto se diluyó con EtOAc, se añadió solución acuosa saturada de NH4Cl y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La cromatografía ultrarrápida (Hexano:EtOAc, de 100:1 a 1:100 y EtOAc:CH3OH, de 100:1 a 1:100) para proporcionar el compuesto 46-R (423 mg, 85 %).

Fr = 0,3 (CH2Ch:CH3OH, 1:1).

RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 57,45-7,28 (m, 2H), 7,23-7,08 (m, 2H), 6,56 (s, 1H), 6,19 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 6,05 (d,J= 1,4 Hz, 1H), 4,98 (d,J= 11,5 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,34 (s, 1H), 4,27 (dd,J= 5,1, 1,7 Hz, 1H), 4,22-4,16 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,49-3,39 (m, 2H), 3,31 (dc,J= 9,8, 5,5, 4,5 Hz, 2H), 2,95 (s, 1H), 2,83 (d,J= 5,6 Hz, 2H), 2,74-2,51 (m, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,32-2,21 (m, 2H), 2,26 (s, 3H); 2,16 (s, 3H), 2,06 (s, 3H).

ESI-MSm/z:794,3 (M+H)+.

A una solución del compuesto 46-R (412 mg, 0,52 mmol) en CH3CN:H2O (1,39:1,36 ml, 0,015 M) se le añadió AgNO3 (1,76 g, 10,4 mmol). Después de 22 h a 23 °C, la reacción se interrumpió con una mezcla 1:1 de soluciones acuosas saturadas de NaCl y NaHCO3, se agitó durante 15 min, se diluyó con C<h>2CI2, se agitó durante 5 min y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2:CH3OH, de 99:1 a 85:15) para dar el compuesto 47-R (175 mg, 43%).

Fr = 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).

RMN 1H (500 MHz, CDCl3): 57,34 (dd,J= 11,1,7,9 Hz, 2H), 7,22-7,07 (m, 2H), 6,57 (s, 1H), 6,17 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 6,01 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 5,11 (d,J= 11,2 Hz, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,53-4,47 (m, 2H), 4,21-4,07 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,56 (d,J= 5,1 Hz, 1H), 3,43 (s, 1H), 3,24 (d,J= 9,1 Hz, 1H), 2,98-2,78 (m, 4H), 2,72-2,58 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,35-2,27 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

RMN 13C (101 MHz, CD3OD): 5 170,6, 169,1, 155,0, 148,8, 145,6, 143,7, 141,1, 140,8, 130,9, 129,7, 126,9, 124,2, 122,4, 121,1, 119,6, 118,9, 118,7, 115,0, 113,2, 112,5, 111,0, 102,1,91,3, 63,3, 60,4, 59,0, 58,4, 55,3, 54,6, 52,6, 51,1, 44,9, 42,4, 39,8, 38,7, 29,4, 24,0, 23,2, 19,1, 15,0, 8,3.

ESI-MSm/z:767,2 (M-H2O+H)+.

(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767,2806 [M-H2O+H]+ (Calc. para C41H43N4O9S 767,2745).

Ejemplo 27. Bioensayosin v itropara la detección de actividad antitumoral

El objetivo de este ensayo es evaluar la actividad citostática (capacidad para retrasar o detener el crecimiento de células tumorales) o citotóxica (capacidad para destruir células tumorales)in vitrode las muestras que se están analizando.

ESTIRPES CELULARES

EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD CITOTÓXICA UTILIZANDO LOS ENSAYOS COLORIMÉTRICOS SBR Y MTT

Un ensayo colorimétrico, utilizando la reacción de sulforodamina B (SRB) se ha adaptado para proporcionar una medición cuantitativa del crecimiento y la viabilidad celular (siguiendo la técnica descrita por Skehanet al.J. Natl. Cancer Inst. 1990, 82, 1107-1112). También se ha utilizado otro ensayo colorimétrico basado en la reducción de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT) a un formazán púrpura para evaluar la actividad antiproliferativa (siguiendo la técnica descrita por Mosmannet al.J. Immunol. Meth. 1983, 65 , 55-63).

En estas formas de ensayos se emplean microplacas de cultivo celular de 96 pocillos siguiendo las normas del American National Standards Institute and the Society for Laboratory Automation and Screening (ANSI SLAS 1-2004 (R2012) 10/12/2011. Todas las estirpes celulares utilizadas en este estudio se obtuvieron en la American Type Culture Collection (ATCC) y proceden de diferentes tipos de cáncer humano.

Las células A549, HT29, MDA-MB-231 y PSN1 se mantuvieron en medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM), mientras que las células PC-3 y 22Rv1 se mantuvieron en medio Roswell Park Memorial Institute (RPMI). Todas las estirpes celulares se complementaron con suero bovino fetal (FBS) al 10 %, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina y 100 U/ml de estreptomicina a 37 °C, con CO2 al 5 % y humedad al 98 %. Para los experimentos, las células se recogieron de cultivos subconfluentes usando tripsinización y se resuspendieron en medio reciente antes de su recuento y siembra en placas.

Las célula A549, HT29, MDA-MB-231 y PSN1 se sembraron en placas de microtitulación de 96 pocillos, a 5000 células por pocillo en alícuotas de 150 pl, y se dejaron adherir a la superficie de la placa durante 18 horas (toda la noche) en un medio exento de fármaco. Después de eso, se fijó una placa de control (sin tratar) de cada estirpe celular (como se describe a continuación) y se utilizó como valor de referencia de tiempo cero. Después, las placas de cultivo se trataron con los compuestos de ensayo (alícuotas de 50 pl de soluciones madre 4X en medio de cultivo completo más DMSO al 4 %) utilizando diez diluciones en serie 2/5 (concentraciones que varían entre 10 y 0,003 pg/ml) y cultivos por triplicado (concentración final en DMSO al 1 %). Después de 72 horas de tratamiento, se midió el efecto antitumoral utilizando la metodología SRB: Resumiendo, las células se lavaron dos veces con PBS, se fijaron durante 15 min en una solución de glutaraldehído al 1 % a temperatura ambiente, se aclararon dos veces en PBS y se tiñeron en una solución de SRB al 0,4 % durante 30 min a temperatura ambiente. Después, las células se aclararon varias veces con una solución de ácido acético al 1 % y se secaron al aire a temperatura ambiente. A continuación, se extrajo SRB en solución de base trizma 10 mM y en un lector de placas espectrofotométrico automatizado se midió la absorbancia a 490 nm.

Un número apropiado de células PC-3 y 22Rv1, para alcanzar una densidad celular final en el ensayo que variaba entre 5.000 y 15.000 células por pocillo dependiendo de la estirpe celular, se sembró en placas de 96 pocillos y se dejó reposar en medio de cultivo durante 24 h a 37 °C con CO2 al 5 % y humedad al 98 %. Después, se añadieron compuestos o DMSO en medio de cultivo hasta alcanzar un volumen final de 200 pl y la concentración prevista del compuesto en un intervalo que cubría diez diluciones en serie 2/5 comenzando a partir de 0,1 pg/ml en DMSO al 1 % (v/v). En este punto, un conjunto de "placas de control de tiempo cero" tratadas con DMSO al 1 % (v/v) se procesaron con MTT como se describe a continuación. El resto de las placas se incubaron durante 72 h en las condiciones ambientales mencionadas anteriormente. Posteriormente, se añadieron a los pocillos 50 pl de una solución de MTT de 1 mg/ml en medio de cultivo y se incubaron durante 6-8 horas a 37 °C para permitir la generación de cristales de formazán. A continuación, se retiró el medio de cultivo y se añadieron 100 pl de DMSO puro a cada pocillo para disolver el producto de formazán en una solución coloreada cuya absorbancia a 540 nm se midió finalmente en un lector de microplacas multietiqueta PolarStar Omega (BMG Labtech, Ortenberg, Alemania).

Los efectos sobre el crecimiento y la supervivencia celular se estimaron aplicando el algoritmo NCI (Boyd MR y Paull KD. Drug Dev. Res. 1995, 34, 91-104). Los valores obtenidos en cultivos por triplicado se ajustaron mediante regresión no lineal a una curva logística de cuatro parámetros mediante análisis de regresión no lineal. Se calcularon tres parámetros de referencia (según el algoritmo NCI mencionado anteriormente) por interpolación automática de las curvas obtenidas mediante dicho ajuste: GI50 = concentración del compuesto que produce una inhibición del crecimiento celular del 50 %, en comparación con los cultivos de control; TGI = inhibición total del crecimiento celular (efecto citostático), en comparación con los cultivos de control y LC50 = concentración del compuesto que produce un efecto citotóxico de destrucción celular neto del 50 %).

Las Tablas 1-9 ilustran datos sobre la actividad biológica de los compuestos de la presente invención junto con la actividad biológica de los compuestos de referencia. Solo compuestos 31, 32, 34, 35, 38-S, 38-R, 39-S y 39-R son compuestos según la presente invención en las tablas 1-9; otros compuestos tales como A, B, E, F, ET-736, PM01183, 14-S, 15-S, 28-S, 28-R, 29-S y 29-R, no forman parte de la presente invención.

Tabla 4. Actividad bioló ica Molar

��

�� Se ha demostrado que los compuestos de la presente invención tienen una alta potenciain vitro,cuando se compara con los compuestos de referencia. Esto demuestra que los compuestos según la presente invención muestran presentan una elavada citotoxicidad hacia las células cancerosas y son útiles en el tratamiento del cáncer.

Ejemplo 28. Determinación de la DMT y de la DMMT

En todos los experimentos se utilizaron ratones hembra nu/nu atímicos, lampiños Fox1 o CD-1 (Envigo). Los animales (N=10/jaula) se alojaron en jaulas con ventilación individual (Sealsafe Plus®, Techniplast S.P.A.), en un ciclo de luz y oscuridad de 12 horas a 21-23 °C y humedad al 40-60 %. Los ratones tuvieron libre acceso a una dieta irradiada estándar para roedores (Tecklad 2914C) y a agua esterilizada. Los animales se aclimataron durante cinco días antes de identificarlos individualmente con tatuajes. Los protocolos relativos a los animales se revisaron y aprobaron de acuerdo con los comités institucionales regionales para el cuidado y uso de animales.

Los ratones se distribuyeron de manera aleatoria en los grupos experimentales y recibieron una administración intravenosa, una vez para la determinación de la DMT (Dosis Máxima Tolerada) o una administración a la semana durante tres semanas consecutivas, para el estudio de la determinación de la DMMT (Dosis Múltiple Máxima Tolerada). A los animales se les administró la formulación blanca o el compuesto disuelto en la formulación experimental a diferentes concentraciones. El volumen administrado fue siempre de 10 ml/kg. Una vez recibida la administración, se supervisó a los animales para detectar signos clínicos de toxicidad sistémica, cambios en el peso corporal y mortalidad hasta 14 días después de la administración.

Los resultados de la DMT se resumen en la Tabla 10

Tabla 10

Los resultados de la DMMT se resumen en la Tabla 11

Tabla 11

continuación

Ejemplos 29-40. Xenoinjertosin vivo

En todos los experimentos se utilizaron ratones nu/nu atímicos hembra (modelos de Harlan Laboratories, S.L. Barcelona, España o Envigo, España). Los animales se alojaron en jaulas con ventilación individual Sealsafe® Más, Techniplast S.P.A.), hasta diez por jaula en un ciclo de luz y oscuridad de 12 horas a 21-23 °C y humedad al 40-60 %. Los ratones tuvieron libre acceso a una dieta irradiada estándar para roedores (Tecklad 2914C) y a agua esterilizada. Los animales se aclimataron durante al menos 5 días antes de la implantación del tumor con una suspensión de células tumorales.

ESTIRPES CELULARES

Las células HT1080 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en Mínimo Esencial Mínimo de Eagle (MEME) (Sigma-Aldrich, Co). A las 4-6 semanas de vida, utilizando una aguja de 26G y una jeringa de 1 cm3, a cada animal se le implantó ortotópicamente en el músculo gastroecnemio una inyección intramuscular, con 10*10® células HT1080, suspendidas en medio asérico, sin antibióticos.

Las células MDA-MB-231 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en medio de Eagle modificado por Dulbecco (Sigma-Aldrich, Co). Cada 3 a 5 días se efectuaron pases de las células de cultivo al alcanzar la confluencia. A las 4 6 semanas de vida, a cada animal se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 7,5*10® células MDA-MB-231 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

Las células H460 se mantuvieronin vitro a 37°C con CO2 al 5%en medio de Eagle modificado por Dulbecco (Sigma-Aldrich, Co). Cada 3 a 5 días se efectuaron pases de las células de cultivo al alcanzar la confluencia. A las 4-6 semanas de vida, a cada animal se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 5*10® células H460 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

Las células A2780 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Cada 3 a 5 días se efectuaron pases de las células de cultivo al alcanzar la confluencia. A las 4-6 semanas de vida, a cada animal se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 10*10® células A2780 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

Las células HGC27 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en medio de Dulbecco modificado por Iscove (Sigma Aldrich, Co). Cada 3 a 5 días se efectuaron pases de las células de cultivo al alcanzar la confluencia. A las 4 6 semanas de vida, a cada animal se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 5*10® células HGC-27 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 %, medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

Las células H52® se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en medio RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Las células H52® se cultivaron como una suspensión y se mantuvieron mediante la adición de medio reciente, a medida que aumentaba la densidad celular, cada 2 a 3 días. Cada semana, el cultivo se restableció mediante centrifugación de la suspensión con posterior resuspensión en medio reciente a una concentración de 1*105células/ml. A las 4-6 semanas de vida, a cada animal se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 5*106 células H526 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

Las células H82 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en medio RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Las células H82 se cultivaron como una suspensión y se mantuvieron mediante la adición de medio reciente, a medida que aumentaba la densidad celular, cada 2 a 3 días. Cada semana, el cultivo se restableció mediante centrifugación de la suspensión con posterior resuspensión en medio reciente a una concentración de 1*105células/ml. A las 4-6 semanas de vida, a los animales se les implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 5*106células H82, suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

Las células PC3 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en medio RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Cada 3 a 5 días se efectuaron pases de las células de cultivo al alcanzar la confluencia. A las 4-6 semanas de vida, a cada ratón atímico hembra se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja de 26G y una jeringa de 1 cm3) 3*106 células PC3 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en matriz de Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %. En este modelo, en lugar de hembras se utilizaron machos porque el crecimiento de PC-3 no depende de hormonas.

Las células DU-145 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en medio RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Cada 3 a 5 días se realizaron pases de las células del cultivo hasta alcanzar la confluencia. A las 4-6 semanas de vida, a cada ratón atímico macho se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 5*106 células DU-145 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en matriz de Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

Las células 22Rv1 se mantuvieronin vitroa 37 °C con CO2 al 5 % en medio RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Cada 3 a 5 días se efectuaron pases de las células de cultivo al alcanzar la confluencia. A las 4-6 semanas de vida, a cada ratón atímico macho se le implantó por vía subcutánea (en el costado derecho, utilizando una aguja 26G y una jeringa de 1 cm3) 5*106 células 22Rv1 suspendidas en 0,05 ml de una solución que consistía en matriz de Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) al 50 % y medio sin suero ni antibióticos al 50 %.

La tolerabilidad del tratamiento se evaluó supervisando la evolución del peso corporal, los signos clínicos de toxicidad sistémica, así como pruebas de daño local en el lugar de la inyección.

En estudios de xenoinjertos con la estirpe celular HT1080:

- Las medidas del diámetro total (tumor pata) se determinaron utilizando un calibrador digital (Fowler Sylvac, S235PAT). Este diámetro total y los pesos corporales de los animales, se midieron 2-3 veces por semana a partir del primer día de tratamiento (día 0).

- Cuando el diámetro total alcanzó una longitud de aproximadamente 7,0-8,0 mm, los ratones se distribuyeron de manera aleatoria en los grupos de tratamiento y de control (N = 8-10/grupo) en función del peso corporal y de las medidas del tumor utilizando el programa informático NewLab Oncology (versión 2.25.06.00).

- Para evaluar la eficacia antitumoral se utilizó la comparación del diámetro total medio (tumor pata) de los grupos de tratamiento con el diámetro total medio (tumor pata) del grupo de control.

- Los animales se sacrificaron cuando el diámetro total de sus patas alcanzó aprox. 18 mm.

En estudios de xenoinjerto con otras estirpes celulares:

- El volumen del tumor se calculó usando la ecuación (a b 2)/2, donde a: la longitud (diámetro más largo) y b: la anchura (diámetro más corto), se midieron en mm utilizando un calibrador digital (Fowler Sylvac, S235PAT). El tamaño de los tumores y los pesos corporales, se registraron 2-3 veces por semana a partir del primer día de tratamiento.

- Cuando los tumores alcanzaron aprox. 150-250 mm3, los animales portadores de tumor (N = 8-10/grupo) se distribuyeron de manera aleatoria en los grupos de tratamiento, en función del peso corporal y de las medidas del tumor utilizando el programa informático NewLab Oncology (versión 2.25.06.00).

- Para evaluar la eficacia antitumoral se utilizó la comparación entre el volumen tumoral medio de los grupos tratados y del grupo de control.

- Los animales se sacrificaron cuando sus tumores alcanzaron aprox. 2.000 mm3 y/o cuando se observó una fuerte necrosis.

Se consideró que los tratamientos que producían una letalidad > del 20 % y/o una pérdida neta de peso corporal del 20 %, eran tóxicos.

En las tablas y figuras se resumen los datos obtenidos de los grupos experimentales completos, es decir, de aquellos grupos que conservan el número inicial de animales, n = 8-10. Sin embargo, una vez sacrificado el primer animal debido a una longitud tumoral > 18 mm o a un tamaño tumoral > 2.000 mm3, el grupo experimental se considerará que es incompleto. Por lo tanto, los datos generados posteriormente al día del sacrificio y en adelante, no se presentarán (es decir, ni en las tablas ni en las figuras).

Ejemplo de referencia 29. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-S y 12-S en varios modelos de xenoinjerto Los compuestos 4-S, 12-S y C se proporcionaron en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. Las dosis administradas de los compuestos 4-S, 12-S y C fueron de 1,25 mg/kg, 0,25 mg/kg y 3,0 mg/kg, respectivamente. El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5. En estos experimentos, los compuestos 4-S, 12-S y C, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

Ejemplo de referencia 29a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-S y 12-S en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-S y 12-S con la actividad antitumoral del compuesto C utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT1080.

La Tabla 12 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, y con los compuestos C, 4-S y 12-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 1.

Tabla 12

continuación

Ejemplo de referencia 29b. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 4-S y 12-S en xenoinjertos de mama humana.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-S y 12-S con la actividad antitumoral del compuesto C utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 13 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuesto C, 4-S y 12-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 2.

Tabla 13

Ejemplo de referencia 29c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-S y 12-S en xenoinjertos de tumor de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-S y 12-S con la actividad antitumoral del compuesto C utilizando tres modelos diferentes de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano. Estos modelos corresponden a cáncer de pulmón no microcítico (estirpe celular H-460) y a cáncer de pulmón microcítico (estirpes celulares H526 y H82).

La Tabla 14 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H460 en ratones tratados con placebo, compuesto C, 4-S y 12-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 3.

Tabla 14

continuación

La Tabla 15 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuesto C, 4-S y 12-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 4.

Tabla 15

La Tabla 16 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuesto C, 4-S y 12-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 5.

Tabla 16

Ejemplo de referencia 29d. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-S y 12-S en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-S y 12-S con la actividad antitumoral del compuesto C utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 17 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuesto C, 4-S y 12-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 6.

Tabla 17

Ejemplo de referencia 29e. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 4-S y 12-S en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-S y 12-S con la actividad antitumoral del compuesto C utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 18 informa sobre el crecimiento del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, compuesto C, 4-S y 12-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 7.

Tabla 18

Ejemplo de referencia 30. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-R en varios modelos de xenoinjerto

4-R se proporcionó en forma de viales liofilizados. La torta de 4-R se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,5 mg/ml. La solución madre de 4-R se diluyó adicionalmente en una solución de dextrosa para inyección al 5 % hasta la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 4-R fue de 0,30 mg/kg.

El compuesto D se proporcionó en forma de viales de fármacos. Cada vial se reconstituyó primero mediante disolución total en DMSO y después añadiendo Kolliphor ELP (BASF)/etanol absoluto (1:1, v/v) a una concentración de 0,8 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con una solución tampón de lactato (pH = 4,0) hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada del compuesto D fue de 0,5 mg/kg.

PM01183 se proporcionó en forma de viales de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,2 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de glucosa al 5 % o de cloruro de sodio al 0,9 % para inyección hasta alcanzar las concentraciones de la formulación de dosificación. La dosis administrada fue de 0,18 mg/kg.

El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5.

En estos experimentos, 4-R, el compuesto D y PM01183, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

Ejemplo de referencia 30a. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 4-R en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-R y del compuesto D con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT1080.

La Tabla 19 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 4-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 8.

Tabla 19

La Tabla 20 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, PM01183 y compuesto D. Estos resultados también se muestran en la Figura 9.

Tabla 20

Ejemplo de referencia 30b. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-R en xenoinjertos de mama humana. El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-R y de compuesto D con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 21 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 4-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 10.

Tabla 21

continuación

La Tabla 22 informa sobre la evaluación del volumen de tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, PM01183 y compuesto D. Estos resultados también se muestran en la Figura 11.

Tabla 22

Ejemplo de referencia 30c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-R en xenoinjertos de tumor de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-R y del compuesto D con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular H-460.

La Tabla 23 informa sobre la evaluación del volumen de tumores H460 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 4-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 12.

Tabla 23

La Tabla 24 informa sobre la evaluación del volumen de tumores H460 en ratones tratados con placebo, PM01183 y compuesto D. Estos resultados también se muestran en la Figura 13.

Tabla 24

Ejemplo de referencia 30d. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 4-R en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-R y del compuesto D con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 25 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 4-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 14.

Tabla 25

La Tabla 26 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, PM01183 y compuesto D. Estos resultados también se muestran en la Figura 15.

Tabla 26

Ejemplo de referencia 30e. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-R en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-R y del compuesto D con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 27 informa sobre el crecimiento del volumen tumoral de los tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 4-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 16.

Tabla 27

La Tabla 28 informa sobre el crecimiento del volumen tumoral de los tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, PM01183 y compuesto D. Estos resultados también se muestran en la Figura 17.

Tabla 28

Ejemplo de referencia 31. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 12-R en varios modelos de xenoinjerto. 12-R se proporcionó en forma de viales liofilizados. La torta de 12-R se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,5 mg/ml. La solución madre de 12-R se diluyó adicionalmente en una solución de dextrosa para inyección al 5 % hasta la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 12-R fue de 0,05 mg/kg.

El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5. En estos experimentos, 12-R, el compuesto D, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

Ejemplo de referencia 31a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 12-R en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 12-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT1080.

La Tabla 29 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 12-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 18.

Tabla 29

continuación

Ejemplo de referencia 31b. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 12-R en xenoinjertos de mama humana. El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 12-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 30 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 12-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 19.

Tabla 30

Ejemplo de referencia 31c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 12-R en xenoinjertos de tumor de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 12-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando tres modelos diferentes de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano. Estos modelos corresponden a cáncer de pulmón no microcítico (estirpe celular H460) y a cáncer de pulmón microcítico (estirpes celulares H526 y H82).

La Tabla 31 informa sobre la evaluación del volumen de tumores H460 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 12-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 20.

Tabla 31

continuación

La Tabla 32 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 12-R. Los resultados también se muestran en la Figura 21.

Tabla 32

La Tabla 33 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 12-R. Los resultados también se muestran en la Figura 22.

Tabla 33

Ejemplo de referencia 31d. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 12-R en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 12-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 34 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 12-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 23.

Tabla 34

continuación

Ejemplo de referencia 31e. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 12-R en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 12-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 35 informa sobre el crecimiento del volumen tumoral de los tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 12-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 24.

Tabla 35

Ejemplo de referencia 32. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 19-S en varios modelos de xenoinjerto 19-S se proporcionó en forma de viales liofilizados. La torta de 19-S se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,5 mg/ml. La solución madre de 19-S se diluyó adicionalmente en una solución de dextrosa para inyección al 5 % hasta la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 19-S fue de 0,75 mg/kg.

PM01183 se proporcionó en forma de viales de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,2 mg/ml. La solución madre de PM01183 se diluyó adicionalmente en una solución de glucosa para inyección al 5 % hasta las concentraciones de la formulación de dosificación. La dosis administrada fue de 0,18 mg/kg.

El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5. En estos experimentos, 19-S y PM01183, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

Ejemplo de referencia 32a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 19-S en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 19-S y PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT1080.

<L a>Tabla 36<in fo rm a s o b re la e v a lu a c ió n d e l d iá m e tro to ta l ( tu m o r p a ta ) d e tu m o re s H T 1080 en ra to n e s t ra ta d o s co n p la c e b o ,>PM01183<y>19-S.<E s to s re s u lta d o s ta m b ié n s e m u e s tra n e n la F ig u ra 25.>

Tabla 36

Ejemplo de referencia 32b. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 19-S en xenoinjertos de adenocarcinoma de mama humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 19-S y PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 37 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 26.

Tabla 37

Ejemplo de referencia 32c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 19-S en xenoinjertos de cáncer de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 19-S y PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular H-460.

<L a>Tabla 38<in fo rm a s o b re la e v a lu a c ió n d e l v o lu m e n tu m o ra l m e d io d e lo s tu m o re s H -460 e n ra to n e s t ra ta d o s co n p la c e b o ,>PM01183<y>19-S.<E s to s re s u lta d o s ta m b ié n s e m u e s tra n e n la F ig u ra 27.>

Tabla 38

Ejemplo de referencia 32d. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 19-S en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 19-S y PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 39 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores A2780 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 28.

Tabla 39

Ejemplo de referencia 32e. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 19-S en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 19-S y PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 40 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 29.

Tabla 40

Ejemplo de referencia 33. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 19-R en varios modelos de xenoinjerto 19-R se proporcionó en forma de viales liofilizados. La torta de 19-R se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,5 mg/ml. La solución madre de 19-R se diluyó adicionalmente en una solución de dextrosa para inyección al 5 % hasta la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 19-R fue de 0,15 mg/kg.

El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5. En estos experimentos, 19-R y PM01183, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

Ejemplo de referencia 33a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 19-R en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 19-R con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT1080.

La Tabla 41 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT-1080 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 30.

Tabla 41

Ejemplo de referencia 33b. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 19-R en xenoinjertos de adenocarcinoma de mama humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 19-R con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 42 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 31.

Tabla 42

continuación

Ejemplo de referencia 33c. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 19-R en xenoinjertos de tumor de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 19-R con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular H-460.

La Tabla 43 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H460 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 32.

Tabla 43

Ejemplo de referencia 33d. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 19-R en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 19-R con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 44 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores A2780 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 33.

Tabla 44

Ejemplo de referencia 33e. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 19-R en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 19-R con la actividad antitumoral de PM01183 utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 45 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores HGC-27 en ratones tratados con placebo, PM01183 y 19-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 34.

Tabla 45

Ejemplo 34. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 39-S en varios modelos de xenoinjerto.

Los compuestos 39-S y C (referencia) se proporcionaron en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. Las dosis administradas de 39-S y C (referencia) fueron 1,25 y 3 mg/kg, respectivamente.

El placebo se proporcionó en forma de viales de producto liofilizado. Cada vial (200 mg de sacarosa 13,6 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. para un pH de 3,8-4,5) se reconstituyó con agua estéril para inyección (2 ml). Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección.

En estos experimentos, 39-S y el compuesto C (referencia), así como el placebo, se administraron por vía intravenosa siguiendo una pauta semanal a un volumen de 10 ml/kg.

Ejemplo 34a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 39-S en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antitumoral del compuesto 39-S en comparación con la actividad antitumoral del compuesto C (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT1080.

La Tabla 46 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, compuesto C (referencia) y 39-S. Estos resultados también se muestran en Figura 35.

Tabla 46

continuación

Ejemplo 34b. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 39-S en xenoinjertos de adenocarcinoma de mama humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 39-S y del compuesto C (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 47 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuesto C (referencia) y 39-S. Estos resultados también se muestran en Figura 36.

Tabla 47.

Ejemplo 34c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 39-S en xenoinjertos de cáncer de pulmón humano. El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 39-S con la actividad antitumoral del compuesto C (referencia) utilizando tres modelos diferentes de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano. Estos modelos corresponden a cáncer de pulmón no microcítico (estirpe celular H-460) y a cáncer de pulmón microcítico (estirpes celulares H526 y H82).

<L a>Tabla 48<in fo rm a s o b re la e v a lu a c ió n d e l v o lu m e n tu m o ra l m e d io d e lo s tu m o re s H 460 en ra to n e s t ra ta d o s co n p la c e b o , c o m p u e s to>C<( re fe re n c ia ) y>39-S.<E s to s re s u lta d o s ta m b ié n se m u e s tra n e n>Figura 37.

Tabla 48

La Tabla 49 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuesto C (referencia) y 39-S. Estos resultados también se muestran en Figura 38.

Tabla 49

La Tabla 50 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuesto C (referencia) y 39-S. Estos resultados también se muestran en Figura 39.

Tabla 50.

continuación

Ejemplo 34d. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 39-S en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 39-S con la actividad antitumoral del compuesto C (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 51 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuesto C (referencia) y 39-S. Estos resultados también se muestran en Figura 40.

Tabla 51

Ejemplo 34e. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 39-S en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 39-S con la actividad antitumoral del compuesto C (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 52 informa sobre el crecimiento del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, compuesto C (referencia), y 39-S. Estos resultados también se muestran en Figura 41.

Tabla 52

continuación

Ejemplo de referencia 35. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 47-R en varios modelos de xenoinjerto. El compuesto 47-R se proporcionó en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 47-R fue de 0,1 mg/kg.

El compuesto D se proporcionó en forma de fármaco en polvo. Cada vial se reconstituyó primero mediante disolución total en DMSO (Fisher) y después añadiendo Kolliphor ELP (Basf)/etanol absoluto (Merk) (1:1, v/v) a una concentración de 0,8 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con una solución tampón de lactato (pH = 4,0) hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada del compuesto D fue de 0,5 mg/kg.

En estos experimentos, 47-R y el compuesto D, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa siguiendo una pauta semanal a un volumen de 10 ml/kg.

Ejemplo de referencia 35a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 47-R en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era evaluar la actividad antitumoral del compuesto 47-R en comparación con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT1080.

La Tabla 53 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 47-R. Estos resultados también se muestran en Figura 42.

Tabla 53

Ejemplo de referencia 35b. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 47-R en xenoinjertos de adenocarcinoma de mama humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 47-R y del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 54 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 47-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 43.

Tabla 54

Ejemplo de referencia 35c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 47-R en xenoinjertos de cáncer de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 47-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando tres modelos diferentes de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano. Estos modelos corresponden a cáncer de pulmón no microcítico (estirpe celular H-460) y a cáncer de pulmón microcítico (estirpes celulares H526 y H82).

La Tabla 55 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H460 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 47-R. Estos resultados también se muestran en Figura 44.

Tabla 55

continuación

La Tabla 56 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H526 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 47-R. Estos resultados también se muestran en Figura 45.

Tabla 56

La Tabla 57 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H82 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 47-R. Estos resultados también se muestran en Figura 46.

Tabla 57.

Ejemplo de referencia 35d. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 47-R en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 47-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 58 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, compuesto D y 47-R. Estos resultados también se muestran en Figura 47.

Tabla 58

Ejemplo de referencia 35e. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 47-R en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 47-R con la actividad antitumoral del compuesto D utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 59 informa sobre el crecimiento del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, compuesto D, y 47-R. Estos resultados también se muestran en Figura 48.

Tabla 59

Ejemplo 36. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 32 en varios modelos de xenoinjerto.

Los compuestos 32 y ET-736 (referencia) se proporcionaron en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 32 y ET-736 (referencia) fue de 0,5 mg/kg.

El placebo se proporcionó en forma de producto liofilizado. Cada vial (200 mg de sacarosa 13,6 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. para un pH de 3,8-4,5) se reconstituyó con agua estéril para inyección (2 ml). Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección.

En estos experimentos, 32 y ET-736 (referencia), así como el placebo, se administraron por vía intravenosa siguiendo una pauta semanal a un volumen de 10 ml/kg.

Ejemplo 36a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 32 en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era evaluar la actividad antitumoral del compuesto 32 en comparación con la actividad antitumoral de ET-736 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT-1080.

La Tabla 60 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, ET-736 (referencia) y 32. Estos resultados también se muestran en la Figura 49.

Tabla 60

Ejemplo 36b. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 32 en xenoinjertos de adenocarcinoma de mama humano. El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 32 y ET-736 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 61 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, ET-736 (referencia) y 32. Estos resultados también se muestran en la Figura 50.

Tabla 61

Ejemplo 36c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 32 en xenoinjertos de cáncer de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 32 y ET-736 (referencia) utilizando tres modelos diferentes de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano. Estos modelos corresponden a cáncer de pulmón no microcítico (estirpe celular H-460) y a cáncer de pulmón microcítico (estirpes celulares H526 y H82).

La Tabla 62 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H460 en ratones tratados con placebo, ET-736 (referencia) y 32. Estos resultados también se muestran en la Figura 51.

Tabla 62

La Tabla 63 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H526 en ratones tratados con placebo, ET-736 (referencia) y 32. Estos resultados también se muestran en la Figura 52.

Tabla 63

La Tabla 64 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H82 en ratones tratados con placebo, ET-736 (referencia) y 32. Estos resultados también se muestran en la Figura 53.

Tabla 64

Ejemplo 36d. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 32 en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 32 y ET-736 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 65 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, ET-736 (referencia) y 32. Estos resultados también se muestran en la Figura 54.

Tabla 65

Ejemplo 36e. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 32 en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 32 y ET-736 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

La Tabla 66 informa sobre el crecimiento del volumen tumoral de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, ET-736 (referencia) y 32. Estos resultados también se muestran en la Figura 55.

Tabla 66

Ejemplo 37. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 35 en varios modelos de xenoinjerto.

El compuesto 35 se proporcionó en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 35 fue de 0,25 mg/kg.

PM01183 (referencia) se proporcionó en forma de viales de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de glucosa al 5 % o de cloruro de sodio al 0,9 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de PM01183 (referencia) fue de 0,18 mg/kg.

El placebo, que se reconstituyó con agua estéril para inyección (2 ml), se proporcionó en forma de viales de producto liofilizado en cada vial (200 mg de sacarosa 13,6 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. para un pH de 3,8-4,5). Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección.

En este experimento, el compuesto 35 y PM01183 (referencia), así como el placebo, se administraron por vía intravenosa siguiendo una pauta semanal a un volumen de 10 ml/kg.

Ejemplo 37a. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 35 en xenoinjertos de fibrosarcoma humano.

El objetivo de este estudio era evaluar las actividades antitumorales del compuesto 35 y PM01183 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de sarcoma humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular HT-1080.

La Tabla 67 informa sobre la evaluación del diámetro total (tumor pata) de tumores HT1080 en ratones tratados con placebo, PM01183 (referencia) y 35. Estos resultados también se muestran en la Figura 56.

Tabla 67

Ejemplo 37b. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 35 en xenoinjertos de adenocarcinoma de mama humano. El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 35 y PM01183 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular MDA-MB-231.

La Tabla 68 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores MDA-MB-231 en ratones tratados con placebo, PM01183 (referencia) y 35. Estos resultados también se muestran en la Figura 57.

Tabla 68

Ejemplo 37c. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 35 en xenoinjertos de cáncer de pulmón humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 35 y PM01183 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de pulmón humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular H460.

La Tabla 69 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores H460 en ratones tratados con placebo, PM01183 (referencia) y 35. Estos resultados también se muestran en la Figura 58.

Tabla 69

Ejemplo 37d. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 35 en xenoinjertos de tumor de ovario humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 35 y PM01183 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el A2780.

La Tabla 70 informa sobre la evaluación del volumen de tumores A2780 en ratones tratados con placebo, PM01183 (referencia) y 35. Estos resultados también se muestran en la Figura 59.

Tabla 70

Ejemplo 37e. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 35 en xenoinjertos de tumor gástrico humano.

El objetivo de este estudio era comparar las actividades antitumorales de 35 y PM01183 (referencia) utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue el HGC27.

Tabla 71 informa sobre el crecimiento del volumen de tumores HGC27 en ratones tratados con placebo, PM01183 (referencia) y 35. Estos resultados también se muestran en la Figura 60.

Tabla 71

Ejemplo de referencia 38. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 12-S y 12-R en xenoinjertos de próstata humana.

12-S y 12-R se proporcionaron en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua para perfusión a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. Las dosis administradas de 12-S y 12-R fueron 0,25 mg/kg y 0,05 mg/kg respectivamente.

El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5. En estos experimentos, 12-S y 12-R, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 12-S y 12-R utilizando un modelo de xenoinjerto de cáncer de próstata humano.

El modelo tumoral utilizado en este estudio fue la estirpe celular PC-3.

La Tabla 72 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores PC-3 en ratones tratados con placebo, 12-S y 12-R. Estos resultados también se muestran en la Figura 61.

Tabla 72

Ejemplo de referencia 39. Estudiosin vivopara determinar el efecto de 4-S en xenoinjertos de próstata humana. El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 4-S utilizando tres modelos diferentes de xenoinjerto de cáncer de próstata humano. Estos modelos corresponden a las estirpes celulares PC-3, DU-145 y 22Rv1.

El compuesto 4-S se proporcionó en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 4-S varía según el estudio, siendo 1,25 mg/kg cuando el modelo tumoral era PC-3, 1,00 mg/kg cuando el modelo tumoral era DU-145 y 0,75 mg/kg cuando el modelo tumoral era 22Rv1, respectivamente.

El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5. En estos experimentos, 4-S, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

La Tabla 73 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores PC-3 en ratones tratados con placebo y 4-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 62.

Tabla 73

La Tabla 74 informa de la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores DU-145 en ratones tratados con placebo y 4-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 63.

Tabla 74

La Tabla 75 informa de la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores 22Rv1 en ratones tratados con placebo y 4-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 64.

Tabla 75

continuación

Ejemplo 40. Estudiosin vivo paradeterminar el efecto de 39-S en xenoinjertos de próstata humana.

El objetivo de este estudio era comparar la actividad antitumoral de 39-S utilizando tres modelos diferentes de xenoinjerto de cáncer de próstata humano. Estos modelos corresponden a las estirpes celulares PC-3, DU-145 y 22Rv1.

El compuesto 39-S se proporcionó en forma de viales liofilizados de producto liofilizado. Cada vial se reconstituyó con agua estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg/ml. Se realizaron diluciones adicionales con solución de dextrosa al 5 % para inyección hasta alcanzar la concentración de la formulación de dosificación. La dosis administrada de 39-S varía según el estudio, siendo 1,25 mg/kg cuando el modelo tumoral era PC-3, 1,00 mg/kg cuando el modelo tumoral era DU-145 y 0,75 mg/kg cuando el modelo tumoral era 22Rv1, respectivamente.

El placebo, que se reconstituyó con agua para perfusión, se proporcionó en forma de torta liofilizada que contenía 100 mg de sacarosa 6,8 mg de dihidrogenofosfato de potasio ácido fosfórico en c.s. hasta un pH de 3,8-4,5. En estos experimentos, 39-S, así como el placebo, se administraron por vía intravenosa una vez a la semana durante 3 semanas consecutivas, los días 0, 7 y 14, siempre que fue posible.

La Tabla 76 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores PC-3 en ratones tratados con placebo y 39-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 65.

Tabla 76

La Tabla 77 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores DU-145 en ratones tratados con placebo y 39-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 66.

Tabla 77

continuación

La Tabla 78 informa sobre la evaluación del volumen tumoral medio de los tumores 22Rv1 en ratones tratados con placebo y 39-S. Estos resultados también se muestran en la Figura 67.

Tabla 78

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula ID o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable:

en donde: X es -O-; R1 es -OH o -CN; R2 es un grupo -C(=O)Ra; R3 es hidrógeno o un grupo -ORb; R4 se selecciona entre hidrógeno, -CH2OH y -CH2O-(C=O)Rc; Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; Rb se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; y Rc se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir.
2. El compuesto según la reivindicación 1, seleccionado entre las fórmulas IDa o IDb, o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptables:

en donde: X es -O-; R1 es -OH o -CN; R2 es un grupo -C(=O)Ra; R3 es hidrógeno o un grupo -ORb; R4 se selecciona entre -CH2OH y -CH2OC(=O)Rc; Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; Rb se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; y Rc se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir.
3. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en donde R4 se selecciona entre -CH2OH y -CH2O(C=O)Rc en donde Rc es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir.
4. El compuesto según la reivindicación 3, en donde Rc se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir; preferentemente en donde Rc es metilo.
5. El compuesto según la reivindicación 3, en donde R4 es -CH2OH.
6. El compuesto según la reivindicación 1 de fórmula IDc o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable

en donde: R1 es -OH o -CN; R2 es un grupo -C(=O)Ra; R3 es hidrógeno o un grupo -ORb; Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; y Rb se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir.
7. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 , en donde R1 es -OH.
8. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde R2 es un grupo -C(=O)Ra donde Ra es alquilo Ci-C6 sustituido o sin sustituir; preferentemente en donde Ra se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y tere-butilo sustituido o sin sustituir.
9. El compuesto según la reivindicación 8 , en donde R2 es acetilo.
10. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde R3 es hidrógeno u -ORb en donde Rb es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir; preferentemente en donde Rb se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y terc-butilo sustituido o sin sustituir.
11. El compuesto según la reivindicación 10, en donde R3 es hidrógeno.
12. El compuesto según la reivindicación 10, en donde R3 es -ORb en donde Rb es alquilo C1-C6 sustituido o sin sustituir; preferentemente en donde Rb se selecciona entre metilo sustituido o sin sustituir, etilo sustituido o sin sustituir, n-propilo sustituido o sin sustituir, isopropilo sustituido o sin sustituir, n-butilo sustituido o sin sustituir, isobutilo sustituido o sin sustituir, sec-butilo sustituido o sin sustituir y terc-butilo sustituido o sin sustituir.
13. El compuesto según la reivindicación 12, en donde R3 es metoxi.
14. El compuesto según la reivindicación 1 de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.
15. El compuesto según la reivindicación 1 de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.
16. El compuesto según la reivindicación 1 de fórmula:

o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptable.
17. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16, en donde la sal se selecciona entre clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, sulfato, nitrato, fosfato, acetato, trifluoroacetato, maleato, fumarato, citrato, oxalato, succinato, tartrato, malato, mandelato, metanosulfonato, p-tolueno sulfonato, sodio, potasio, calcio, amonio, etilendiamina, etanolamina, N,N-dialquilenetanolamina, trietanolamina y aminoácidos básicos.
18. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptables y un transportador farmacéuticamente aceptable.
19. Una forma farmacéutica que comprende una composición farmacéutica según la reivindicación 18.
20. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptables o una composición según la reivindicación 18 o una forma farmacéutica según la reivindicación 19, para su uso como medicamento.
21. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptables o una composición según la reivindicación 18 o una forma farmacéutica según la reivindicación 19, para uso en el tratamiento de cáncer.
22. El compuesto, la composición o la forma farmacéutica según la reivindicación 21, en donde el cáncer se selecciona entre cáncer de pulmón, que incluye cáncer de pulmón no microcítico y cáncer de pulmón microcítico, cáncer de colon, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer de páncreas, sarcoma, cáncer de ovario, cáncer de próstata y cáncer gástrico; preferentemente en donde el cáncer se selecciona entre cáncer de pulmón, que incluye cáncer de pulmón no microcítico y cáncer de pulmón microcítico, cáncer de mama, cáncer de páncreas y cáncer colorrectal.
23. Un proceso para obtener un compuesto como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptables: que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula II con un compuesto de fórmula III para dar un compuesto de fórmula IV:

en donde (donde lo permitan los grupos sustituyentes posibles): X es -O-; R2 es un grupo -C(=O)Ra; R3 es hidrógeno o un grupo -ORb; R4 se selecciona entre hidrógeno, -CH2OH y-CH2OC(=O)Rc; Ra se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir, alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; Rb se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; y Rc se selecciona entre alquilo C1-C12 sustituido o sin sustituir, alquenilo C2-C12 sustituido o sin sustituir y alquinilo C2-C12 sustituido o sin sustituir; y que opcionalmente comprende la etapa adicional de reemplazar el grupo ciano en el compuesto de fórmula IV con un grupo hidroxi para dar un compuesto de fórmula ID, en donde R1 es OH.
24. Un kit que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 o una sal o un éster del mismo farmacéuticamente aceptables y un transportador farmacéuticamente aceptable, opcionalmente comprendiendo el kit además instrucciones para el uso del compuesto en el tratamiento contra el cáncer y, más preferentemente, un cáncer seleccionado entre cáncer de pulmón, que incluye cáncer de pulmón no microcítico y cáncer de pulmón microcítico, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de páncreas, sarcoma, cáncer de ovario, cáncer de próstata, cáncer colorrectal y cáncer gástrico.