ES2578154T3

ES2578154T3 - Forma 2 de ciclosporina y método para prepararla

Info

Publication number: ES2578154T3
Application number: ES12791059.4T
Authority: ES
Inventors: Ke Wu; Scott W. Smith
Original assignee: Allergan Inc
Current assignee: Allergan Inc
Priority date: 2011-11-15
Filing date: 2012-11-14
Publication date: 2016-07-21
Anticipated expiration: 2032-11-14
Also published as: HK1202124A1; KR102072252B1; CA2856034C; AU2019204591B2; US20140303343A1; EP2780358B1; AU2012339693A1; EP3067363A1; EP2780358A1; AU2019204591A1; US20130123193A1; US20180312543A1; CN104039813A; RU2014123468A; JP2017210488A; KR20140101790A; US10017541B2; EP3067363B1; US20160272681A1; BR112014011768A2

Abstract

Un método para preparar ciclosporina A en una forma cristalina, comprendiendo el método las etapas de: a) preparar una suspensión de ciclosporina A en un disolvente que comprende agua y un ingrediente seleccionado del grupo que consiste en acetonitrilo, 1,4-dioxano y etanol; b) un primer ciclo de calentamiento-enfriamiento que comprende el calentamiento de la suspensión a una temperatura de entre 5°C y 50°C, seguido del enfriamiento de la suspensión a una temperatura de 1°C a 35°C; c) un segundo ciclo de calentamiento-enfriamiento que comprende el calentamiento de la suspensión a una temperatura de entre 5°C y 50°C, seguido del enfriamiento de la suspensión a una temperatura de 1°C a 35°C; y d) un tercer ciclo de calentamiento-enfriamiento que comprende el calentamiento de la suspensión a una temperatura de entre 5°C y 50°C, seguido del enfriamiento de la suspensión a una temperatura de 1°C a 35°C;

Description

5

10

15

20

25

30

DESCRIPCION

Forma 2 de ciclosporina A y metodo para prepararla Antecedentes

Se describe en la presente memoria un metodo para preparar una nueva forma cristalina de la ciclosporina A. El metodo de la invencion es como se define en la reivindicacion 1.

Ciclosporina A

La ciclosporina A (CsA) es un peptido dclico que tiene la siguiente estructura qmmica:

imagen1

Su nombre qmmico es ciclo[[(E)-(2S,3R,4R)-3-hidroxi-4-metil-2-(metilamino)-6-octenoil]-L-2-aminobutiril-A/-metilglicil- W-metil-L-leucil-L-valil-A/-metil-L-leucil-L-alanil-D-alanil-W-metil-L-leucil-W-metil-L-leucil-A/-metil-L-valilo]. Se conoce tambien por los nombres ciclosporina y ciclosporina A, ciclosporina y ciclosporina A. Es el principio activo en Restasis® (Allergan, Inc., Irvine, California), una emulsion que comprende ciclosporina al 0,05% (p/v). Restasis® esta aprobado en Estados Unidos para aumentar la produccion de lagrimas en pacientes cuya produccion de lagrimas se supone que se ha suprimido debido a la inflamacion ocular asociada con la queratoconjuntivitis seca.

Se sabe que la ciclosporina A existe en una forma amorfa, forma de cristal lfquido, forma cristalina tetragonal (forma 1) y una forma ortorrombica (forma 3). Los autores de la invencion describen aqrn un metodo para preparar una nueva forma cristalina, la forma 2 de la ciclosporina A. Esta forma se describio originalmente en el documento GB-A- 2211848 (Sandor, 12 julio de 1989)

Breve descripcion de los dibujos

La figura 1 representa patrones de difraccion de rayos X de polvo (XRPD) caractensticos de CsA en una nueva forma cristalina (denominada forma 2 en la presente memoria), forma tetragonal (denominada forma 1 en la presente memoria) y forma ortorrombica (denominada forma 3 en la presente memoria).

La figura 2 representa el difractograma de XRPD de la forma cristalina 2 de la CsA.

La figura 3 representa el perfil de sorcion/desorcion de agua de la forma 2 de la CsA.

La figura 4 representa el analisis de MDSC de la forma 2 de la CsA recuperada de una formulacion al 0,04% con PS80 al 1%.

La figura 5 representa un ciclo de calentamiento y enfriamiento usado para generar la forma 2 de la CsA por un metodo segun la invencion.

La figura 6 muestra el patron de difraccion de rayos X (XRPD) de la forma 2 de la CsA obtenida segun un metodo de la invencion, usando ciclosporina A amorfa como material de partida.

La figura 7 muestra el XRPD de la forma 2 de la CsA obtenida segun un metodo de la invencion, usando ciclosporina A tetragonal como material de partida.

La figura 8 muestra el XRPD de la forma 2 de la CsA obtenida segun un metodo de la invencion, usando ciclosporina A ortorrombica como material de partida.

La figura 9 muestra el patron de XRPD simulado de las formas de ciclosporina A.

Descripcion detallada

5 El patron de XRPD de la forma 2 de la CsA difiere significativamente de la forma tetragonal y la forma ortorrombica (FIG. 1). Los picos cristalinos principales para la forma 2 de la CsA aparecen a (20), cuando se hace el barrido mediante un difractometro de rayos X con fuente de rayos X como la radicacion Ka de Cu, A = 1,54 A, a 30 kV /15 mA: 7,5, 8,8, 10,2, 11,3, 12,7, l3,8, 14,5, 15,6 y 17,5 (distancia d en la red cristalina a aproximadamente 11,8, 10,0, 8,7, 7,8, 7,0, 6,4, 6,1, 5,6 y 5,1A, respectivamente, Fig. 2). Estos picos principales se definen como los que son 10 unicos de la forma 2 con respecto a las formas ortorrombica o tetragonal; asf como los picos que tienen una intensidad mayor que 5 veces la senal de fondo.

En una realizacion, la nueva forma cristalina (forma 2) de la CsA es un hidrato no estequiometrico de la ciclosporina A. En otra realizacion, la forma cristalina 2 se representa por la formula:

imagen2

15 en donde X es el numero de moleculas de agua y vana de 0 a 3. En una realizacion, X en la formula anterior es 2.

Parece que la forma 2 es una forma cineticamente estable de la CsA en suspensiones acuosas. Las suspensiones que contienen la forma 2 no presentan conversion a otras formas polimorficas o pseudomorficas conocidas tras el almacenamiento. Se ha encontrado que la forma 1 y la forma amorfa se convierten en la forma 2 en presencia de agua.

20 Se ha determinado la estructura de monocristal de la forma de hidrato de la forma 2 de la CsA y los parametros de la estructura cristalina se dan en la tabla 2. Estos resultados indican que la forma 2 es unica comparada con otras formas cristalinas conocidas de la ciclosporina A.

Tabla 1: Datos cristalinos y parametros de recogida de datos de disolucion de la estructura cristalina de la forma 2 de la CsA

formula: C62H115N11O14

peso formula: 1238,67

grupo espacial: P 21 21 21 (N° 19)

a (A): 12,6390(5)

b (A): 19,7582(8)

c (A): 29,568(2)

volumen (A3): 7383,8(7)

Z: 4

dcalc(g.cm-3): 1,114

dimensiones del cristal (mm): 0,27 x 0,18 x 0,12

temperatura (K): 150

radiacion (longitud de onda en A): Cu Ka(1,54184)

monocromador: optica confocal

coeficiente de absorcion lineal (mm-1): 0,640

correccion de absorcion aplicada: empmca3

factores de transmision (mm, max): 0,80, 0,93

difractometro: Rigaku RAPID-II

intervalo h, k, l: -13 a 13-21 a 21 -32 a 21

intervalo 20 (grados): 5,38-115,00

mosaicidad (grados): 1,31

programas usados: SHELXTL

F000: 2704,0

ponderacion: 1/[a2(Fo2) + (0,0845P)2+ 0,0000P] donde P = (Fo2+ 2Fc2)/3

datos recogidos: 37360

datos unicos: 9964

Rint: 0,077

datos usados en refinamiento: 9964

corte usado en los calculos del factor R: Fo 2> 2,0s(Fo2)

datos con I > 2,0s(I): 6597

numero de variables: 834

desplazamiento mayor/eee en ciclo final: 0,00

R (Fo): 0,061

Rw(Fo2): 0,145

bondad del ajuste: 1,037

determinacion de estructura absoluta: parametro Flackb(0,0(3))

Esta unidad asimetrica de esta forma 2 de la CsA contiene una molecula de ciclosporina A y dos moleculas de agua. Es posible que cualquier molecula pequena que pueda formar enlace de hidrogeno con el agua pudiera tener la funcion de rellenador de espacio, lo que dana una variedad de potenciales estructuras que van desde el dihidrato 5 ortorrombico al dihidrato monoclmico distorsionado. El patron de XRPD calculado a partir de la estructura de monocristal se muestra en la figura 9 y se corresponde con el patron experimental mostrado en la figura 2. Esta correspondencia de los patrones corrobora adicionalmente que la forma 2 es una forma cristalina unica y pura de la ciclosporina A.

Sin querer estar ligados por la teona, el analisis termogravimetrico combinado con la valoracion de KF y el analisis 10 de sorcion-desorcion de vapor (VSA) sugieren que la forma 2 de la CsA es un hidrato no estequiometrico de la CsA. El analisis de sorcion de vapor de la forma 2 de la ciclosporina indica que el contenido de agua en la nueva forma cristalina vana de forma reversible con la humedad relativa como se muestra en la figura 3. De forma similar a la

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

forma tetragonal, la nueva forma de CsA experimenta una transicion de fase a un cristal Ifquido o forma amorfa a 124,4°C antes de fundirse como indica el analisis de calorimetna diferencial de barrido modulado (MDSC) (figura 4).

Se pueden encontrar detalles adicionales relacionados con la forma 2 de la CsA en la solicitud de patente de EE.UU. n° 13/480.710 (WO-A1-2012/166610).

Metodos de obtencion de la forma 2 de la ciclosporina A

Mediante calentamiento y enfriamiento en determinados sistemas de disolventes

En terminos muy generales, la forma 2 de la ciclosporina A se puede obtener 1) suspendiendo la ciclosporina A en una disolucion de agua y acetonitrilo, 1,4-dioxano, o etanol; 2) calentando la suspension a una determinada velocidad; 3) enfriando la suspension a una determinada velocidad; 4) repitiendo el ciclo de calentamiento y enfriamiento; 5) y recuperando el precipitado que resulta. La eleccion del disolvente es cntica: los autores de la invencion no pudieron encontrar una caractenstica estructural u otra propiedad que predijera si un disolvente hana o no que se formara la forma 2 de la CsA.

En esta realizacion se puede usar la ciclosporina A en forma de cristal lfquido, forma tetragonal u ortorrombica, o se puede usar una forma amorfa. La eleccion del material de partida da la forma 2 de la CsA con caractensticas ligeramente diferentes (veanse las figuras X e Y), pero el punto importante es que se pueden usar diferentes materiales de partida y obtener todavfa la forma 2 de la CsA.

En la primera etapa de este metodo, se prepara una disolucion suspendiendo el material de partida deseado (es decir, ciclosporina A en forma de cristal lfquido, tetragonal, ortorrombica, o amorfa) en acetonitrilo, en 1,4-dioxano, o en etanol, cada uno disuelto en agua. Se puede usar en esta etapa entre 0,01 y 1 g de material de partida/l de agua. Por ejemplo, se puede usar 0,01 g/l, 0,02 g/l, 0,03 g/l, 0,04 g/l, 0,05 g/l, 0,06 g/l, 0,07 g/l, 0,08 g/l, 0,09 g/l, 0,1 g/l, 0,2 g/l, 0,3 g/l, 0,4 g/l, 0,5 g/l, 0,6 g/l, 0,7 g/l, 0,8 g/l, 0,9 g/l, o 1 g de material de partida por litro de agua. El disolvente deseado (acetonitrilo, 1,4-dioxano, o etanol) se anade en una cantidad que produce una disolucion que tiene una fraccion molar de agua entre aproximadamente 0,75 y 1. Por ejemplo, el disolvente se anade en una cantidad que produce una disolucion que tiene una fraccion molar de 0,75, 0,76, 0,77, 0,78, 0,79, 0,80, 0,81, 0,82, 0,83, 0,84, 0,85, 0,86, 0,87, 0,88, 0,89, 0,90, 0,91, 0,92, 0,93, 0,94, 0,95, 0,96, 0,97, 0,98, 0,99, y 1.

En la segunda etapa de este metodo, se calienta despues la disolucion a una temperatura de 5°C a 50°C. Esto se puede hacer a la velocidad de 0,01°C por minuto a 1°C por minuto. En una realizacion, se puede calentar la disolucion a una temperatura de 5°C a 10°C, de 10°C a 15°C, de 15°C a 20°C, de 20°C a 25°C, de 25°C a 30°C, de 30°C a 35°C, de 35°C a 40°C, de 40°C a 45°C, o de 45°C a 50°C. En una realizacion, se puede calentar la disolucion a una temperatura de 5°C a 15°C, de 15°C a 25°C, de 25°C a 35°C, de 35°C a 45°C, o de 40°C a 50°C. Por ejemplo, se puede calentar la disolucion a una temperatura de 1°C, 2°C, 3°C, 4°C, 5°C, 6°C, 7°C, 8°C, 9°C, 10°C, 11°C, 12°C, 13°C, 14°C, 15°C, 16°C, 17°C, 18°C, 19°C, 20°C, 21°C, 22°C, 23°C, 24°C, 25°C, 26°C, 27°C, 28°C, 29°C, 30°C, 31°C, 32°C, 33°C, 34°C, 35°C, 36°C, 37°C, 38°C, 39°C, 40°C, 41°C, 42°C, 43°C, 44°C, 45°C, 46°C, 47°C, 48°C, 49°C o 50°C.

En una realizacion, se calienta la disolucion a una velocidad de 0,01°C/min a 0,05°C/min, de 0,05°C/min - 0,1°C por minuto, de 0,1°C/min a 0,2°C/min, de 0,2°C min a 0,3°C/min, de 0,3°C/min a 0,4°C/min, de 0,4°C/min a 0,5°C/min, de 0,5°C/min a 0,6°C/min, de 0,6°C/min a 0,7°C/min, de 0,7°C/min a 0,8°C/min, de 0,8°C/min a 0,9°C/min, o de 0,9°C/min a 1°C/min. Por ejemplo, se puede calentar la disolucion a una velocidad de 0,01°C/min, 0,02°C/min, 0,03°C/min, 0,04°C/min, 0,05°C/min, 0,06°C/min, 0,07°C/min, 0,08°C/min, 0,09°C/min, 0,1°C/min, 0,2°C/min, 0,3°C/min, 0,4°C/min, 0,5°C/min, 0,6°C/min, 0,7°C/min, 0,8°C/min 0,9°C/min, o 1°C/min.

En la tercera etapa de este metodo, despues se enfna la disolucion a una temperatura de entre 1°C a 22°C. En una realizacion, se puede enfriar la disolucion a una temperatura de 1°C a 5°C, de 5°C a 10°C, de 10°C a 15°C, de 15°C a 20°C, o de 17°C a 22°C. En otra realizacion, se puede enfriar la disolucion a una temperatura de 1°C a 10°C, de 5°C a 15°C, de 10°C a 20°C, o de 15°C a 22°C. Por ejemplo, se puede enfriar la disolucion a una temperatura de 1°C, 2°C, 3°C, 4°C, 5°C, 6°C, 7°C, 8°C, 9°C, 10°C, 11°C, 12°C, 13°C, 14°C, 15°C, 16°C, 17°C, 18°C, 19°C, 20°C, 21°C o 22°C.

La disolucion se puede enfriar a la misma o a diferente velocidad a la que se ha calentado. En una realizacion, se enfna la disolucion a una velocidad de 0,01°C/min a 0,05°C/min, de 0,05°C/min a 0,1°C por minuto, de 0,1°C/min a 0,2°C/min, de 0,2°C/min a 0,3°C/min, de 0,3°C/min a 0,4°C/min, de 0,4°C/min a 0,5°C/min, de 0,5°C/min a 0,6°C/min, de 0,6°C/min a 0,7°C/min, de 0,7°C/min a 0,8°C/min, de 0,8°C/min a 0,9°C/min, o de 0,9°C/min a 1°C/min. Por ejemplo, se puede enfriar la disolucion a la velocidad de 0,01°C/min, 0,02°C/min, 0,03°C/min, 0,04°C/min, 0,05°C/min, 0,06°C/min, 0,07°C/min, 0,08°C/min, 0,09°C/min, 0,1°C/min, 0,2°C/min, 0,3°C/min, 0,4°C/min, 0,5°C/min, 0,6°C/min, 0,7°C/min, 0,8°C/min, 0,9°C/min, o 1°C/min.

Despues se repiten las etapas de calentamiento y enfriamiento, usando las mismas o diferentes temperaturas y las mismas o diferentes velocidades de calentamiento y enfriamiento. En una realizacion, se repiten las etapas de calentamiento y enfriamiento dos veces, es decir, primero se calienta y despues se enfna la disolucion, despues se calienta y enfna la disolucion una segunda vez, y despues se calienta y enfna la disolucion una tercera vez. En otra

5

10

15

20

25

30

35

realizacion, se repiten las etapas de calentamiento y enfriamiento tres veces, es decir, primero se calienta y despues se enfna la disolucion, despues se calienta y enfna la disolucion una segunda vez, despues se calienta y enfna la disolucion una tercera vez, y despues se calienta y enfna la disolucion una cuarta vez. Durante cada una de las etapas de calentamiento, se puede calentar la disolucion a la misma o diferente temperature, y a la misma o diferente velocidad; igualmente, durante cada una de las etapas de enfriamiento, se puede calentar la disolucion a la misma o diferente temperatura, y a la misma o diferente velocidad.

En una realizacion, se empieza a enfriar la disolucion inmediatamente despues de calentar la disolucion a la temperatura deseada. En otra realizacion, se mantiene la disolucion a la temperatura calentada durante entre aproximadamente 0 y aproximadamente 25 horas antes de empezar a enfriarla. Por ejemplo, se puede mantener la disolucion a la temperatura calentada durante 0 a 5 horas, 5 a 10 horas, 10 a 15 horas, 15 a 20 horas, o 20 a 25 horas; en otra realizacion, se puede mantener la disolucion a la temperatura calentada durante 0 a 10 horas, 5 a 15 horas, 10 a 20 horas, o 15 a 25 horas. Por ejemplo, se puede mantener la disolucion a la temperatura calentada durante 0,5 horas, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 5 horas, 6 horas, 7 horas, 8 horas, 9 horas, 10 horas, 11 horas, 12 horas, 13 horas, 14 horas, 15 horas, 16 horas, 17 horas, 18 horas, 19 horas, 20 horas, 21 horas, 22 horas, 23 horas, 24 horas, o 25 horas.

Cuando se repite un ciclo de calentamiento-enfriamiento, se puede calentar inmediatamente la disolucion despues de que se ha enfriado a la temperatura deseada, o se puede mantener la disolucion a la temperatura enfriada durante entre 0 y 24 horas antes de empezar a calentarla de nuevo. Por ejemplo, se puede mantener la disolucion durante 0 a 5 horas, 5 a 10 horas, 10 a 15 horas, 15 a 20 horas, o 20 a 25 horas; en otra realizacion, se puede mantener la disolucion a la temperatura enfriada durante 0 a 10 horas, 5 a 15 horas, 10 a 20 horas, o 15 a 25 horas. Por ejemplo, se puede mantener la disolucion a la temperatura enfriada durante 0,5 horas, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 5 horas, 6 horas, 7 horas, 8 horas, 9 horas, 10 horas, 11 horas, 12 horas, 13 horas, 14 horas, 15 horas, 16 horas, 17 horas, 18 horas, 19 horas, 20 horas, 21 horas, 22 horas, 23 horas, 24 horas, o 25 horas

Al finalizar el ciclo de calentamiento y enfriamiento, se puede mantener la disolucion a la temperatura enfriada final durante 0 a 24 horas, antes de recuperar el precipitado como se ha descrito antes.

Ejemplos

La invencion se ilustra ademas mediante los siguientes ejemplos.

Ejemplo 1

Se suspendio ciclosporina A (CsA), en la forma amorfa, tetragonal (F1) u ortorrombica, en agua, acetonitrilo, dioxano o etanol, como se describe en la tabla 1, a continuacion:

Tabla 1: Suspension de ciclosporina usada para hacer la forma 2 de la ciclosporina

Forma de CsA: Disolvente Fraccion molar de agua

: 1 2

Amorfa: agua acetonitrilo 0,87

F1: agua acetonitrilo 0,87

F3: agua acetonitrilo 0,87

F1: agua Nada* 1,00

F1: agua dioxano 0,90

F1: agua etanol 0,89

*Ejemplo de referenda

Cada una de las disoluciones anteriores se calento a 50°C a una velocidad de 0,1°C por minuto, y se mantuvo a esa temperatura durante 600 min; despues la disolucion se enfrio a 20°C a la misma velocidad, y se mantuvo a esa temperatura durante 300 min; este ciclo de calentamiento y enfriamiento se repitio dos veces mas, como se ilustra en la figura 5 y se resume en la tabla 2:

Tabla 2: Caractensticas de los ciclos termicos

Etapa: Temp. (°C) Velocidad de calentamiento (°C/min) Duracion (min) Tiempo total

Mantenimiento: 20 — 30,00 00:30:00

Rampa: 50 0,1000 300,00 05:30:00

Mantenimiento: 50 — 600,00 15:30:00

Rampa: 20 -0,1000 300,00 20:30:00

Mantenimiento: 20 — 600,00 1,06:30:00

Rampa: 50 0,1000 300,00 1,11:30:00

Mantenimiento: 50 — 600,00 1,21:30:00

Rampa: 20 -0,1000 300,00 2,02:30:00

Mantenimiento: 20 — 600,00 2,12:30:00

Rampa: 50 0,1000 300,00 2,17:30:00

Mantenimiento: 50 — 600,00 3,03:30:00

Rampa: 20 -0,1000 300,00 3,06:30:00

Mantenimiento: 20 — 300,00 3,13:30:00

El patron de difraccion de rayos X de polvo (XRPD) de la forma 2 de la ciclosporina A asf obtenida, usando ciclosporina A amorfa como material de partida, se ilustra en la figura 6; el XRPD de la forma 2 de la ciclosporina A 5 obtenida usando ciclosporina A tetragonal como material de partida se ilustra en la figura 7; el XRPD de la forma 2 de la ciclosporina A obtenida usando ciclosporina A ortorrombica como material de partida se ilustra en la figura 8. Los patrones de XRPD de las formas de CsA se obtuvieron usando un difractometro de rayos X MiniFlex de Rigaku (radiacion Ka de Cu, A = 1,54 A, a 30 kV y 15 mA). El instrumento se calibro con una referencia de silicio con un pico de referencia a 28,44° (20). Los experimentos de difraccion de rayos X se llevaron a cabo de 3° a 45° (20) a una 10 velocidad de barrido de 0,5° o 1° (20) por minuto y una anchura de paso de 0,05° (20).

Las condiciones experimentales que no produdan la forma 2 de la ciclosporina A se muestran en la siguiente tabla 3:

Tabla 3 - Condiciones experimentales que no produdan la forma 2 de la ciclosporina A

n°: Forma de CsA Peso de CsA (mg) Disolvente Volumen (jl) Forma final Fraccion molar de agua

1: 2 1 2

1: Amorfa 53,77 Agua acetona 100 42 F1+F2 0,91

2: Amorfa 61,70 Agua etilenglicol 100 42 amorfa 0,88

4: Amorfa 41,17 Agua N/D 100 N/D amorfa 1,00

5: F1 65,74 Agua acetona 100 42 F1+F2 0,91

6: F1 74,51 Agua etilenglicol 100 42 F1 0,88

8: F1 68,59 Agua N/D 100 N/D amorfa 1,00

9: F3 49,70 Agua acetona 100 42 F3 0,91

10: F3 69,45 Agua etilenglicol 100 42 F3 0,88

12: F3 70,87 Agua N/D 100 N/D F3 1,00

15: F1 43,07 Agua metanol 100 42 amorfa + F2 0,84

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Metodos de tratamiento

La forma 2 de la CsA obtenida por los metodos de la invencion se puede usar para tratar cualquier afeccion del ojo que se sabe que es susceptible de tratamiento topico con ciclosporina A (tal como con Restasis®). Por ejemplo, las composiciones de la invencion se pueden usar para tratar pacientes que padecen ojo seco, para el tratamiento de la blefaritis y enfermedad de glandulas de Meibomio, para restablecer la sensibilidad de la cornea que se ha alterado debido a una cirugfa refractiva en el ojo, para tratar la conjuntivitis alergica y queratoconjuntivitis atopica y primaveral, y para tratar el pterigium, inflamacion de la conjuntiva y la cornea, queratoconjuntivitis, enfermedad injerto contra huesped, glaucoma post-trasplante, trasplantes de cornea, queratitis micotica, queratitis punteada superficial de Thygeson, uveftis, y queratoconjuntivitis Umbica superior de Theodore, entre otras afecciones.

El Grupo de trabajo internacional sobre el ojo seco (the International Dry Eye Workshop, DEWS) define el ojo seco como "una enfermedad multifactorial de las lagrimas y de la superficie ocular que causa smtomas de incomodidad, alteracion visual e inestabilidad de la pelfcula lagrimal con dano potencial en la superficie ocular, acompanado de aumento de osmolaridad de la pelfcula lagrimal e inflamacion de la superficie ocular." Incluye afecciones, tal como la queratoconjuntivitis seca, que son causadas por deficiencia de lagrimas o evaporacion excesiva de las lagrimas.

La blefaritis es una enfermedad cronica que produce inflamacion del borde del parpado anterior y posterior, con implicacion de la piel y sus estructuras relacionadas (pelos y glandulas sebaceas), la union mucocutanea y las glandulas de Meibomio. Tambien puede afectar a la conjuntiva, la pelfcula lagrimal y la superficie de la cornea en etapas avanzadas y puede estar asociada con el ojo seco. La blefaritis se clasifica normalmente en blefaritis anterior o posterior, afectando la anterior a la region de los parpados que tiene pestanas, y afectando principalmente la posterior a los orificios de las glandulas de Meibomio.

La enfermedad de las glandulas de Meibomio se produce con mayor frecuencia como una de tres formas: orzuelo interno, meibomitis secundaria y seborrea meibomiana. La seborrea meibomiana se caracteriza por la excesiva secrecion meibomiana en ausencia de inflamacion (enfermedad de las glandulas de Meibomio hipersecretoras). El orzuelo interno, en cambio, se distingue por secreciones de las glandulas de Meibomio estancadas y espesas (enfermedad de las glandulas de Meibomio hipersecretora obstructiva). La meibomitis secundaria representa una respuesta inflamatoria localizada en la que las glandulas de Meibomio se inflaman de forma secundaria en una forma en manchas desde una blefaritis del borde del parpado anterior.

La sensibilidad corneal alterada a menudo ocurre despues de cirugfa refractiva, tal como queratectoirna fotorrefractiva, queratomileusis subepitelial asistido por laser (LASEK), EPI-LASEK, ablacion transepitelial sin contacto personalizada, u otros procedimientos en los que los nervios de la cornea son seccionados. La sensibilidad corneal alterada tambien puede ocurrir despues de infeccion vmca, tal como por virus HSV-1, HSV-2, y VZV. Los pacientes con sensibilidad corneal alterada se quejan de que notan los ojos secos, incluso aunque la produccion de lagrimas y la evaporacion puedan ser normales, sugiriendo que la "sequedad" en dichos pacientes es realmente una forma de neuropatfa de la cornea que se produce cuando los nervios de la cornea son seccionados por cirugfa o estan inflamados despues de infeccion vmca.

La conjuntivitis alergica es una inflamacion de la conjuntiva que se produce por hipersensibilidad a uno o mas alergenos. Puede ser aguda, intermitente o cronica. Se produce de forma estacional, es decir, solo en determinadas epocas del ano, o se produce de forma perenne, es decir, de forma cronica durante todo el ano. Los smtomas de la conjuntivitis alergica estacional y perenne incluyen, ademas de la inflamacion de la conjuntiva, secrecion de lagrimas, lagrimeo, dilatacion vascular conjuntival, prurito, hiperplasia papilar, quemosis, edema palpebral, y secrecion del ojo. La secrecion puede formar una costra enzima de los ojos despues de dormir por la noche.

La queratoconjuntivitis atopica es una forma cronica grave de la conjuntivitis alergica que a menudo conduce al deterioro visual. Los smtomas incluyen prurito, ardor, dolor, enrojecimiento, sensacion de cuerpo extrano, sensibilidad a la luz y vision borrosa. A menudo hay una secrecion, en especial al despertarse despues de dormir por la noche; la descarga puede ser fibrosa, viscosa y mucosa. La conjuntiva inferior es afectada de manera mas importante que la conjuntiva superior. La conjuntiva puede variar desde palida, edematosa, y sin rasgos de tener las caractensticas de enfermedad avanzada, incluyendo la hipertrofia papilar, fibrosis subepitelial, acortamiento del fornix, triquiasis, entropion y madurosis. En algunos pacientes, la enfermedad avanza a erosiones epiteliales puntiformes, neovascularizacion corneal y otras caractensticas de la queratopatfa que pueden alterar la vision. Tfpicamente hay proliferacion de celulas calciformes en la conjuntiva, formacion pseudotubular epitelial, y un numero mayor de eosinofilos de desgranulacion y mastocitos en el epitelio. Los linfocitos T CD25+, macrofagos y celulas dendnticas (HLA-DR.sup.+, HLA-CD1+) estan significativamente elevadas en la sustancia propia.

Como la queratoconjuntivitis atopica, la queratoconjuntivitis primaveral es una forma grave de conjuntivitis alergica, pero tiende a afectar a la conjuntiva superior de forma mas importante que a la inferior. Aparece en dos formas. En la forma palpebral, estan presentes papilas muy compactas, cuadradas, duras, planas; en la forma bulbar (lfmbica), la conjuntiva circuncorneal se vuelve hipertrofiada y grisacea. Ambas formas van acompanadas a menudo de secrecion mucosa. Se puede producir la perdida de epitelio corneal, acompanado de dolor y fotofobia, asf como placas corneales centrales y puntos de Trantas.

Claims

5

10

15

20

25

30

35

REIVINDICACIONES

1. Un metodo para preparar ciclosporina A en una forma cristalina, comprendiendo el metodo las etapas de:

a) preparar una suspension de ciclosporina A en un disolvente que comprende agua y un ingrediente seleccionado del grupo que consiste en acetonitrilo, 1,4-dioxano y etanol;

b) un primer ciclo de calentamiento-enfriamiento que comprende el calentamiento de la suspension a una temperatura de entre 5°C y 50°C, seguido del enfriamiento de la suspension a una temperatura de 1°C a 35°C;

c) un segundo ciclo de calentamiento-enfriamiento que comprende el calentamiento de la suspension a una temperatura de entre 5°C y 50°C, seguido del enfriamiento de la suspension a una temperatura de 1°C a 35°C; y

d) un tercer ciclo de calentamiento-enfriamiento que comprende el calentamiento de la suspension a una temperatura de entre 5°C y 50°C, seguido del enfriamiento de la suspension a una temperatura de 1°C a 35°C;
2. El metodo de la reivindicacion 1, en donde el disolvente comprende agua y acetonitrilo, en donde la fraccion molar del agua en el disolvente es preferiblemente entre 0,8 y 1,0.
3. El metodo de la reivindicacion 2, en donde la fraccion molar del agua en el disolvente es 0,87.
4. El metodo de la reivindicacion 1, en donde el disolvente comprende agua y 1,4-dioxano, en donde la

fraccion molar del agua en el disolvente es preferiblemente entre 0,8 y 1,0.
5. El metodo de la reivindicacion 4, en donde la fraccion molar del agua en el disolvente es 0,90.
6. El metodo de la reivindicacion 1, en donde el disolvente comprende agua y etanol, en donde la fraccion molar del agua en el disolvente es preferiblemente entre 0,8 y 1,0.
7. El metodo de la reivindicacion 6, en donde la fraccion molar del agua en el disolvente es 0,89.
8. El metodo de cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde el primer, segundo o tercer ciclo de

calentamiento-enfriamiento comprende el calentamiento de la suspension a una temperatura de entre 5°C y 50°C a la velocidad de 0,05°C a 2°C por minuto, seguido del enfriamiento de la suspension a una temperatura de 1°C a 35°C a la velocidad de 0,01°C a 1°C por minuto.
9. El metodo de cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde al menos dos de los ciclos de calentamiento- enfriamiento comprenden el calentamiento de la suspension a una temperatura de entre 5°C y 50°C a la velocidad de 0,05°C a 2°C por minuto, seguido del enfriamiento de la suspension a una temperatura de 1°C a 35°C a la velocidad de 0,01°C a 1°C por minuto.
10. El metodo de cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde el primer, segundo y tercer ciclos de calentamiento-enfriamiento comprenden el calentamiento de la suspension a una temperatura de entre 5°C y 70°C a la velocidad de 0,05°C a 2°C por minuto, seguido del enfriamiento de la suspension a una temperatura de 1°C a 35°C a la velocidad de 0,05°C a 2°C por minuto, preferiblemente, en donde el primer, segundo y tercer ciclos de calentamiento-enfriamiento comprenden el calentamiento de la suspension a una temperatura de entre 5°C y 50°C a la velocidad de 0,1°C por minuto, seguido del enfriamiento de la suspension a una temperatura de 5°C a la velocidad de 1°C por minuto.