ES2391211B1

ES2391211B1 - Combinacion sinergica de polifenoles

Info

Publication number: ES2391211B1
Application number: ES201130710A
Authority: ES
Inventors: José Ángel MARAÑÓN MAROTO
Original assignee: Select Botan S L; SELECT BOTANICAL SL
Current assignee: TRADICHEM INDUSTRIAL SERVICES, S.L.
Priority date: 2011-05-04
Filing date: 2011-05-04
Publication date: 2013-10-02
Anticipated expiration: 2031-05-04
Also published as: ES2391211A1; WO2012150370A1

Abstract

Combinación sinérgica de polifenoles.#La presente invención se refiere a una combinación de los polifenoles resveratrol, quercetina y catequina en una relación molar de aproximadamente 1:1:2 o bien aproximadamente 1:1:5 que presenta un poder antioxidante sinérgico. Esta combinación de polifenoles es adecuada para ser incorporada en todo tipo de formulaciones farmacéuticas, cosméticas, alimenticias o veterinarias y puede utilizarse en la prevención y tratamiento de patologías o estados fisiológicos susceptibles de ser tratados con sustancias antioxidantes y captadoras de radicales libres.

Description

"COMBINACIÓN SINÉRGICA DE POLIFENOLES"

5: Campo de la técnica

La presente invención se refiere a composiciones de polifenoles que presentan un poder antioxidante sinérgico.

1 O: Estado de la técnica anterior

15 20 25 30 35: Los compuestos polifenólicos de origen natural, son reconocidos agentes antioxidantes que se ha demostrado son eficaces como captadores de radicales libres. Los radicales libres son moléculas altamente reactivas que se generan de forma natural en los tejidos, y que pueden también formarse de forma incrementada debido a situaciones de estrés ambiental como, por ejemplo, el humo de los cigarros, a la presencia de radiaciones ionizantes, a la radiación ultravioleta, o a la polución ambiental, así como a otras causas tales como situaciones de estrés o la práctica de un ejercicio muy intenso. Los radicales libres son capaces de inducir la oxidación de ácidos nucleicos, proteínas y lípidos del organismo, lo que puede contribuir a la aceleración del proceso de envejecimiento y a desencadenar enfermedades asociadas al envejecimiento como enfermedades degenerativas, cáncer, enfermedades cardiovasculares y patologías de tipo dermatológico. En el estado de la técnica se describe que las propiedades antioxidantes de los polifenoles de origen natural pueden tener aplicación en diferentes áreas terapéuticas, y pueden también contribuir a retardar los signos del envejecimiento gracias a su capacidad de reducir la oxidación celular y tisular. El resveratrol es un compuesto polifenólico presente en la semilla y en la piel de la uva ( Vítís vinífera) y en otros productos vegetales. Su interés terapéutico se ha visto reforzado desde que se postuló su posible implicación en los efectos cardioprotectores del vino tinto, tal como se describe en el artículo Siemann et al., Concentratíon of the phytoalexín resveratrol in wíne, Am. J. Eno. Vitic., Free. Rad. Res., 1992, 43, 49-52, y su posible participación en la denominada paradoja francesa: La población francesa, que tiene una dieta rica en grasas saturadas, tiene una menor tasa de mortalidad por enfermedad cardiovascular que el resto de países

desarrollados. Esta reducción, se asoció al mayor consumo de vino tinto y a la pre

sencia del resveratrol en el vino tinto. Numerosos estudios, realizados en modelos experimentales y publicados a lo largo de los últimos años corroboran que el resveratrol:

-: puede ser eficaz para prevenir o disminuir la progresión de diversas patolo

gías como, por ejemplo, cáncer, diabetes, y enfermedades cardiovasculares,

-: posee propiedades antivirales y antiinflamatorias, mostrándose como una

buena alternativa para el tratamiento de la inflamación crónica,

posee propiedades protectoras en diferentes órganos, especialmente en la

cardiopatía isquémica asociada al infarto de miocardio, gracias a su capaci

dad de prevenir la oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL, del

inglés low densíty lípoproteíns), y

-: frena los síntomas del envejecimiento en levaduras y algunos vertebrados

sencillos.

También cabe destacar el estudio de Baur et al., Resveratrol ímproves health and survíval of míce on a hígh-caloríe díet, Nature, 2006, 444, 337-342, en el que se demostró que ratas con dieta rica en grasas presentaban mayores patologías y menor supervivencia que otras sometidas a la misma dieta, pero a las que se les administró además resveratrol.

Si bien se han observado efectos farmacológicos para el resveratrol incluso a las concentraciones relativamente bajas presentes en las fuentes habituales de la dieta, dada su baja biodisponibilidad (Walle et al., Hígh absorptíon but very low bíoavaílabílíty of oral resveratrol in humans, Drug Metab. Disp., 2004, 32(12), 13771382), resulta deseable administrar dosis superiores para alcanzar concentraciones plasmáticas y tisulares más elevadas y para potenciar sus efectos terapéuticos. Sin embargo, se desconocen los posibles efectos nocivos de la administración continuada de dosis altas de resveratrol y, en cualquier caso, el coste económico resultaría muy elevado.

Otros polifenoles de la familia de los flavonoides conocidos por sus propiedades antioxidantes son la quercetina y las catequinas tal como se describe, por ejemplo, en los artículos Zhang et al., Antíoxídant propertíes of quercetín, Adv. Exp. Med. Biol., 2011, 915, 283-9, y Plumb et al., Antíoxídant propertíes of catechíns and proanthocyanídíns: effect of polymerísatíon, galloylatíon and glycosylatíon, 1998, 29 (4), 351-8.

En el estado de la técnica se han descrito combinaciones de resveratrol con En la solicitud de patente internacional WO-A-02/081651 se describen comTambién forma parte del objeto de la invención una composición que com

otros polifenoles para aumentar su biodisponibilidad.

Por ejemplo, la combinación con quercetina, puede contribuir a aumentar la

biodisponibilidad del resveratrol, tal como se describe en el artículo De Santi et al.,

5: Sulphatíon of resveratrol, a natural compound present in wíne, and íts ínhíbítíon by

naturalflavonoíds, Xenobiotica, 2000, 30 (9), 857-866.

En el estado de la técnica se han descrito algunas combinaciones de resve

ratrol con otros polifenoles, en particular con quercetina y catequinas, en diferentes

proporciones.

1 O: La solicitud de patente internacional WO-A-201 0/135589 está dirigida espe

cíficamente a suplementos dietéticos bebibles preparados en base a una suspen

sión de resveratrol en agua a la que, opcionalmente, se añaden otros ingredientes,

por ejemplo, quercetina y/o catequinas procedentes de un extracto de té verde, y

que están principalmente en forma galato de epigalocatequina, así como otros anti

15: oxidantes en forma de extractos o concentrados de origen vegetal, y también otros

agentes denominados "energéticos", también de origen vegetal. No se describe

ninguna proporción preferida entre el resveratrol y el resto de los componentes adi

cionales. En particular, se describe un ejemplo concreto de bebida, en la que la

proporción en peso entre resveratrol, quercetina y catequinas resultó ser de

20: 17,2:3,4:1, equivalente a una relación molar de 21,8:3,3:1.

En la solicitud de patente internacional WO-A-03/015738 se describe una

composición cosmética que puede utilizarse para la lucha contra el envejecimiento

de la piel y que incluye una combinación de extractos de semillas de uva, de hojas

de uva y de pieles de uva. Dichos extractos de semillas de uva contienen polifeno

25: les, especialmente catequinas en cantidades de hasta el 15% en peso, los extractos

de hojas de uva contienen quercetinas en cantidades de hasta el 5% en peso, y los

extractos de pieles de uva contienen resveratroles en cantidades de hasta el 5% en

peso. También se describe un ejemplo con una mezcla de extractos de piel, de hoja

y de semillas de uva, que representa una combinación de resvera

30: trol:quercetina:catequinas en una proporción aproximada de 1:1 :3 en peso, equiva

lente a una relación molar aproximada de 1,3:1 :3, 1. Se describe que dicha combi

nación presenta un efecto sinérgico en cuanto a la inhibición de las metaloproteina

sas de matriz (MMP).

posiciones con resveratrol, catequina, epicatequina y quercetina, solos o en combi

nación, para su uso como cardioprotectores, y se analiza su actividad fibrinolítica en

un modelo in vítro con células endoteliales humanas derivadas de la vena umbilical

5: (HUVEC) y en un modelo in vivo en rata. En los ejemplos se describen composicio

nes en forma de cápsulas o zumo de naranja en las que se combina resveratrol,

quercetina y catequinas, en una proporción en peso de 1 :2,5:7,5, equivalente a una

relación molar de 1 :1 ,9:5,9.

Por otro lado, en la solicitud de patente estadounidense US-A-201 0/0247670

1 O: se describe un extracto seco obtenido a partir de uva negra de la variedad Vítís la

brusca, que contiene resveratrol, quercetina, catequina y taninos. También se des

cribe la extracción con agua caliente del extracto seco para la obtención de infusio

nes, que resultaron eficaces para el tratamiento de diversas afecciones, tales como

resfriado común, hipercolesterolemia o hiperglucemia, o para tratamientos dermato

15: lógicos de tipo cosmético. Se describe también el análisis de dos de las infusiones

preparadas, según el cual la proporción en peso entre resveratrol, quercetina y ca

tequina es de 1 :5:15 y 1 :4:63, equivalentes respectivamente a unas relaciones mo

lares de 1 :3,8:11,8 y 1 :3:49,5.

Análogamente, en la solicitud de patente española ES-A-2217966 se descri

20: ben composiciones farmacéuticas, dietéticas y cosméticas con propiedades antioxi

dantes que comprenden un extracto de piel, semillas y raspa de uva negra de la

especie Vítís vinífera que contiene polifenoles y antocianas. Entre los polifenoles se

encuentran catequina, ácido gálico, quercetina, y resveratrol. Se describe que dicha

combinación de polifenoles y antocianas tiene propiedades antioxidantes, en las

25: proporciones en que se obtiene directamente del extracto vegetal. También se des

cribe el resultado del análisis de un extracto de uva negra, en el que resveratrol,

quercetina y catequina están en una proporción aproximada de 1 :3:21, equivalente

a una relación molar aproximada de 1:2,3:16,5.

Subsiste, pues, la necesidad de poder disponer de una composición de res

30: veratrol con propiedades antioxidantes mejoradas, que presente un poder antioxi

dante elevado incluso a dosis relativamente bajas.

Objeto de la invención

El objeto de la invención es una combinación sinérgica de polifenoles.

prende dicha combinación.

Forma parte también de la invención la utilización de la combinación para la preparación de una composición con poder antioxidante.

También forma parte de la invención la combinación para uso como antioxidante.

Descripción detallada de la invención

El objeto de la presente invención es una combinación sinérgica de politenoles que comprende resveratrol, quercetina y catequina, con una relación molar entre resveratrol, quercetina y catequina de aproximadamente 1:1 :2 ó aproximadamente

1:1 :5.

Los autores de esta invención han desarrollado una combinación de los poli-fenoles resveratrol, quercetina y catequina en unas proporciones tales que, sorprendentemente, presenta un poder antioxidante sinérgico.

En una realización preferida, la combinación de antioxidantes comprende resveratrol, quercetina y catequina en una relación molar 1 :1 :2 ó 1 :1 :5.

En una realización preferida, la relación molar es 1:1 :2.

En otra realización preferida, la relación molar es 1:1 :5.

En el contexto de la invención, por el término "aproximadamente" se entiende, para el valor "1" de la relación molar, una variación entre 0,9 y 1,1, preferiblemente entre 0,95 y 1 ,05; para el valor "2" una variación entre 1,8 y 2,2, preferiblemente entre 1 ,9 y 2,1; y para el valor "5" una variación entre 4,5 y 5,5, preferiblemente entre 4,75 y 5,25, y más preferiblemente entre 4,9 y 5, 1.

En toda la descripción los porcentajes se refieren a porcentajes en peso y las relaciones son relaciones molares.

En el marco de esta invención, se entiende por "extracto seco" el producto resultante después de someter el extracto vegetal a un proceso de secado por el que se elimina sustancialmente toda el agua que contiene.

En el marco de esta invención, se entiende por "extracto purificado" un extracto que tiene un contenido de polifenol igual o superior al 90% en peso sobre el extracto seco. En el caso del resveratrol preferiblemente igual o superior al 95%, más preferiblemente igual o superior al 98%; en el caso de la quercetina preferiblemente igual o superior al 95% expresado como dihidrato de quercetina, más prefe

riblemente igual o superior al 98%; y en el caso de la catequina un contenido en catequinas expresado como catequina preferiblemente igual o superior al 80%, más preferiblemente igual o superior al 85%.

5 1 O 15: Antioxidantes Los antioxidantes son sustancias que pueden proteger las células contra la oxidación y los efectos de los radicales libres, porque eliminan dichos radicales del medio y porque inhiben la oxidación oxidándose ellos mismos. Entre los antioxidantes se encuentran los polifenoles, que son compuestos ampliamente distribuidos en el reino vegetal, y que poseen una estructura química apropiada para capturar radicales libres. En su molécula los polifenoles incorporan más de un grupo fenol. Su propiedad como antioxidante proviene de su gran reactividad como donantes de electrones y de la capacidad del radical formado para estabilizar y deslocalizar el electrón desapareado. Las principales fuentes de polifenoles son los frutos rojos, las hojas de té, cerveza, uva, vino, aceite de oliva, chocolate, cacao, nueces, y granadas, entre otros.

20 25: Resveratrol En el contexto de la invención el término resveratrol se refiere a transresveratrol y a cis-resveratrol indistintamente, y también incluye al principio activo y a sus posibles hidratos y/o solvatos. El trans-resveratrol es el nombre común que designa al 5-[(1 E)-2-(4hidroxifenil)etenil]-1 ,3-bencenodiol, que también puede denominarse 3,5,4'trihidroxiestilbeno, y que tiene la siguiente estructura:

OH

HO

OH

El cis-resveratrol es el nombre común que designa al 5-[(1 Z)-2-(4

hidroxifenil)etenil]-1 ,3-bencenodiol, y tiene el doble enlace de la figura anterior en

posición cis.

El trans-resveratrol es un compuesto fenólico que se encuentra en la natura

5: leza, producido por diversas plantas. Así por ejemplo, es uno de los constituyentes

de la piel y la semilla de uva y, por consiguiente, uno de los componentes del vino,

especialmente del vino tinto.

El trans-resveratrol fue aislado por primera vez en el año 1940 a partir de la

raíz del eléboro, tal como se describe en el artículo M. J. Takaoka, Of the phenolíc

1O: substances of whíte hellebore (Veratrum grandíflorum Loes. fíl), J. Faculty Sci. Hok

kaido Imperial University, 1949,3, 1-16.

El trans-resveratrol puede obtenerse como extracto a partir diversas espe

cies vegetales como, por ejemplo, la piel y la semilla de uva ( Vítís), los arándanos

( Vaccíníum), la raíz de Polygonum cuspídatum, el lúpulo (Humulus lupulus), Cassía

15: garrettíana, Cassía Quínquangulata, Gnetum klossíí, Pterolobíum hexapetallum, el

cacahuete (Arachís hypogaea), el pistacho (Pístacía vera), hojas y raíz del ruibarbo

(Rheum rhabarbarum y Rheum Rhapontícum), la corteza de Bauhínía racemosa, las

hojas de Veratrum grandíflorum y la raíz de Veratrum formosanum, el eucalipto, el

abeto y la pícea, entre otros.

20: Comercialmente se pueden encontrar extractos vegetales con diversos con

tenidos de trans-resveratrol, llegando a valores superiores al 95% sobre el extracto

seco.

Por ejemplo, el extracto de raíz Polygonum cuspídatum de la compañía Se

lect Botanical, es un extracto purificado que tiene un contenido de agua como

25: máximo del 8% en peso, y cuyo extracto seco presenta un contenido de trans

resveratrol superior al 98%, determinado por HPLC.

Así mismo, existen extractos provenientes de semilla de uva y de raíz de

Polygonum cuspídatum generalmente, con contenidos muy variables de resveratrol

que pueden estar comprendidos entre el 0,05% y el 98% determinados por HPLC.

30: La determinación del contenido de resveratrol por HPLC puede hacerse, por ejem

plo, según se describe en el artículo Kolouchová-Hanzlíková et al., Rapíd method

for resveratrol determínatíon by HPLC wíth electrochemícal and UV detectíons in

wínes, Food Chem., 2004,87 (1), 151-158.

Así mismo, el trans-resveratrol puede obtenerse en forma sustancialmente le), manzanas, cebolla, uva negra, cítricos, papaya, tomate, brócoli, coliflor, chile

5 1 O 15: pura a través de suministradores como, por ejemplo, la empresa Sigma-Aidrich. El trans-resveratrol también puede sintetizarse, por ejemplo según se describe en el artículo Farina et al., An ímproved synthesís of resveratrol, en Nat. Prod. Res., 2006, 20 (3), 247-52. Por su parte, el cis-resveratrol se puede obtener, por ejemplo, a partir de trans-resveratrol por exposición a la radiación ultravioleta. En la combinación de la invención preferiblemente se emplea transresveratrol. En la combinación de la invención el resveratrol puede ser de origen sintético o natural. Cuando es de origen natural, preferiblemente la fuente de resveratrol es un extracto vegetal. Más preferiblemente como fuente de resveratrol se emplea un extracto de origen vegetal con un contenido elevado en trans-resveratrol, preferiblemente superior al 95% sobre el extracto seco, determinado por HPLC, más preferiblemente un extracto de raíz de Polygonum cuspídatum, y aún más preferiblemente un extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum con un contenido de trans-resveratrol superior al 98% sobre el extracto seco, determinado por HPLC.

20: Quercetina La quercetina o 2-(3,4-dihidroxifenil)-3,5, 7-trihidroxi-4H-1-benzopiran-4-ona, es un polifenol que estructuralmente pertenece al grupo de los flavonoides y que responde a la siguiente fórmula:

OH

HO: OH

25: OH O

30: La quercetina está ampliamente distribuida en la naturaleza, y está presente en gran variedad de plantas y frutos. Debido a ello, la quercetina puede obtenerse como extracto, a partir de diversos vegetales y frutos tales como, por ejemplo, té verde y té negro (Carne/lía sínensís), alcaparras, apio de monte (Levístícum offícína

(Capsícum annum), arándanos, o Sophora japoníca, entre otros.

La quercetina se puede encontrar comercialmente como extracto de origen

vegetal con diversos contenidos, que pueden llegar a ser superiores al 98% sobre

5: el extracto seco, determinado por HPLC, expresado como dihidrato de quercetina.

Por ejemplo, el extracto purificado de flores de acacia del Japón o árbol de las pa

godas (Sophora Japoníca), de la compañía Select Botanical, se presenta en forma

de un polvo amarillo que contiene quercetina en forma de dihidrato de quercetina,

con un contenido en agua que como máximo es del 12,5%, y que tiene un conteni

1 O: do mínimo de dihidrato de quercetina del 98% sobre el extracto seco, determinado

por HPLC, por ejemplo según se describe en el artículo Beecher et al., Analysís of

tea polyphenols, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1999, 220(4), 267-70.

También se encuentra quercetina como extracto de cebolla (AIIíum cepa)

con concentraciones variables comprendidas entre el 0,5% y el 40%, y como ex

15: tractos de manzana, espárrago y uvas.

La quercetina también puede obtenerse comercialmente en forma sustan

cialmente pura a través de suministradores tales como Sigma-Aidrich.

Por otro lado, la quercetina puede sintetizarse, por ejemplo, según se des

cribe en el artículo Shakhova et al., Zh. Obshch. Khím., 1962, 32, 390.

20: En el contexto de la presente invención, el término quercetina se entiende

en forma amplia e incluye al principio activo y a sus posibles hidratos y/o solvatos.

En una realización preferida de esta invención, la quercetina está en forma de dihi

drato.

En la combinación de la invención la quercetina puede ser de origen sintéti

25: co o natural. Cuando es de origen natural, preferiblemente la fuente de quercetina

es un extracto vegetal. Más preferiblemente se emplea un extracto de origen vege

tal con un contenido elevado de quercetina, como por ejemplo superior al 95% so

bre el extracto seco expresado como dihidrato de quercetina, y más preferiblemente

un extracto de Sophora japoníca, y aún más preferiblemente un extracto purificado

30: de Sophora japoníca con un contenido superior al 98% de dihidrato de quercetina

sobre el extracto seco.

Catequina

La catequina es el nombre común por el que conoce al producto (2R,3S)-2(3,4-dihidroxifenil)-3,4-dihidro-2H-cromen-3,5,7-triol, un polifenol también perteneciente al grupo de los flavonoides, y que tiene la siguiente estructura:

~OH

HO ,,,,~

·~ OH

OH

10 La molécula de catequina tiene dos carbonos asimétricos o centros quirales en las posiciones 2 y 3, tal como se indica en la estructura anterior y, por tanto, existen en realidad cuatro estereoisómeros distintos: dos de ellos en la configuración cís y dos en la configuración trans. Las dos formas trans corresponden al enantiómero (2R,3S), representado en la fórmula anterior, y al enantiómero (2S,3R), en

15 el que se invierte la configuración de los dos carbonos asimétricos 2 y 3. Los dos enantiómeros que están en configuración cís se denominan habitualmente epicatequina. Así pues, la denominación epicatequina corresponde al producto (2R,3R)-2-(3,4-dihidroxifenil)-3,4-dihidro-2H-cromen-3,5, 7 -triol, que presenta la siguiente estructura:

crOH

~

HOy)''''··' OH

1 2

ó ..,,,,

3 OH

OH

Al igual que para el isómero trans, se entiende por epicatequina el conjunto 25 formado por los dos isómeros cís, tanto el enantiómero (2R,3R) representado arri

ba, como el correspondiente enantiómero (2S,3S), en el que se invierte la configu

ración de los dos carbonos asimétricos 2 y 3.

Las catequinas también se encuentran en la naturaleza en forma de dímeros

y trímeros, que se conocen por el nombre de proantocianidinas o procianidinas o

5: proantocianidinas oligoméricas.

En el marco de la presente invención se denomina catequina a cualquiera

de los 4 estereoisómeros mencionados, es decir, tanto la catequina como la epica

tequina y sus respectivos enantiómeros, a cualquiera de sus posibles dímeros o

trímeros en la forma de proantocianidinas tipo B (dímeros formados a partir de ca

1o: tequina y/o epicatequina) o proantocianidinas tipo e (trímero formado a partir de

epicatequina), a los dímeros en forma de galato, y a cualquier mezcla de los ante

riores.

Comercialmente la fuente de catequina puede ser un extracto vegetal con

diferentes contenidos en catequinas, que pueden llegar a ser iguales o superiores al

15: 90% sobre el extracto seco expresado como catequina. Por ejemplo, el extracto

purificado de Vítís vinífera de la compañía Select Botanical, que se presenta en for

ma de un polvo anaranjado con un contenido en agua de como máximo el 8% y con

un contenido de catequinas de aproximadamente el 90% sobre el extracto seco

expresado como catequina, determinado por espectrofotometría, por ejemplo según

20: se describe en el artículo Peri et al., An Assay of Dífferent Phenolíc Fractíons in Wí

nes, Am. J. Enol. Vitic., 1971, 22(2), 55-58. Dicho extracto contiene una mezcla de

trans-catequina, epicatequina, dímeros en forma de galato, y proantocianidinas.

Otras fuentes de catequinas son los extractos procedentes de té verde, cacao, café

verde y arándanos.

25: Comercialmente también pueden obtenerse las formas enantioméricas pu

ras de la catequina como, por ejemplo, (2S,3R) a través de suministradores tales

como Sigma-Aidrich.

En una realización preferida de la presente invención se emplea la catequi

na (2S,3R)-2-(3,4-dihidroxifenil)-3,4-dihidro-2H-cromen-3,5,7-triol en forma sustan

30: cialmente pura.

En una realización más preferida de la presente invención, la catequina es el

isómero trans, en cualquiera de sus formas enantioméricas (2S,3R) ó (2R,3S), o

bien una mezcla de los dos en cualquier proporción, y opcionalmente conteniendo

además epicatequina en cualquiera de sus dos formas enantioméricas y/o proanto

cianidinas, o cualquier mezcla de los anteriores en cualquier proporción, preferen

temente obtenida a partir de extractos vegetales. En una realización aún más prefe

rida, la fuente de catequina es un extracto de uva, es decir, un extracto de Vítís viní

fera preferiblemente con un contenido de catequinas igual o superior al 80% sobre

5: el extracto seco expresado como catequina, y aún más preferiblemente se emplea

un extracto purificado de Vítís vinífera con un contenido de catequinas igual o supe

rior al 90% sobre el extracto seco expresado como catequina.

En la presente invención se pueden emplear extractos vegetales como fuen

tes de los antioxidantes que contengan diferentes contenidos de resveratrol, de

1 O: quercetina, de catequina, o extractos que contengan mezclas de dos o más de es

tos polifenoles.

Preferiblemente se emplea un extracto vegetal que contiene resveratrol sus

tancialmente puro, es decir, con un contenido en resveratrol superior al 90% sobre

el extracto seco, preferiblemente superior al 92%, más preferiblemente superior al

15: 95%, y aún más preferiblemente superior al 98%.

Preferiblemente se emplea un extracto vegetal que contiene quercetina sus

tancialmente pura, es decir, con un contenido superior al 90% sobre el extracto se

co, preferiblemente superior al 92%, más preferiblemente superior al 95%, y aún

más preferiblemente superior al 98% expresado como dihidrato de quercetina.

20: Preferiblemente se emplea un extracto vegetal que contiene catequina sus

tancialmente pura, es decir, con un contenido en catequinas superior al 80% sobre

el extracto seco, preferiblemente superior al 85%, y más preferiblemente superior al

90% expresado como catequina.

En una realización especialmente preferida, la combinación de antioxidantes

25: comprende resveratrol, quercetina y catequina en una relación molar resvera

trol:quercetina:catequina de aproximadamente 1 :1 :2, la fuente de resveratrol es un

extracto de raíz de Polygonum cuspídatum, preferiblemente con un contenido de

trans-resveratrol superior al 95% sobre el extracto seco, la fuente de quercetina es

un extracto de Sophora japoníca, preferiblemente con un contenido de di hidrato de

30: quercetina superior al 98% sobre el extracto seco, y la fuente de catequina es un

extracto de Vítís vinífera, preferiblemente con un contenido de catequinas igual o

superior al 90% sobre el extracto seco expresado como catequina.

comprende resveratrol, quercetina y catequina en una relación molar resvera

trol:quercetina:catequina de aproximadamente 1 :1 :5, la fuente de resveratrol es un

extracto de raíz de Polygonum cuspidatum, preferiblemente con un contenido de

un extracto de Sophora japonica, preferiblemente con un contenido de di hidrato de

5: quercetina superior al 98% sobre el extracto seco, y la fuente de catequina es un

extracto de Vitis vinífera, preferiblemente con un contenido de catequinas igual o

superior al 90% sobre el extracto seco expresado como catequina.

En otra realización especialmente preferida, la combinación de antioxidantes

consiste esencialmente en resveratrol, quercetina y catequina en una relación molar

1 O: resveratrol:quercetina:catequina de aproximadamente 1 :1 :2, la fuente de resveratrol

es un extracto de raíz de Polygonum cuspidatum, preferiblemente con un contenido

de trans-resveratrol superior al 95% sobre el extracto seco, la fuente de quercetina

es un extracto de Sophora japonica, preferiblemente con un contenido de dihidrato

de quercetina superior al 98% sobre el extracto seco, y la fuente de catequina es un

15: extracto de Vitis vinífera, preferiblemente con un contenido de catequinas igual o

superior al 90% sobre el extracto seco, expresado como catequina.

resveratrol:quercetina:catequina de aproximadamente 1 :1 :5, la fuente de resveratrol

20: es un extracto de raíz de Polygonum cuspidatum, preferiblemente con un contenido

25: superior al 90% sobre el extracto seco expresado como catequina.

En una realización preferida, la combinación de antioxidantes no contiene

rutina.

La combinación de polifenoles que consiste en trans-resveratrol, catequina

( (2R,3S)-2-(3,4-dihidroxifenil)-3,4-dihidro-2H-cromen-3,5, 7 -triol, su enantiómero o

30: mezclas de ambos), epicatequina ((2R,3R)-2-(3,4-dihidroxifenil)-3,4-dihidro-2H

cromen-3,5,7-triol, su enantiómero, o mezclas de ambos), quercetina y rutina en

una proporción molar 1 :1 :1 :1 :1, en donde cada uno de los polifenoles tienen una

pureza cromatográfica igual o superior al 90%, como los suministrados por la com

pañía Sigma-Aidrich, no forma parte de la invención.

Ensayos de poder antioxidante

El poder antioxidante de las composiciones de la presente invención se

puede determinar empleando un método in vítro diseñado para valorar la capacidad

captadora de radicales libres de las sustancias ensayadas. Por ejemplo, el método

5: denominado TOSC (del inglés Total Oxídant Scavengíng Capacíty), que permite la

determinación del poder antioxidante de los compuestos a concentraciones bajas.

Con el método TOSC se puede determinar el poder antioxidante de un com

puesto a una concentración específica, y puede aplicarse tanto a soluciones con

antioxidantes puros como en mezclas complejas.

1O: En el método TOSC se determina la capacidad de la sustancia a ensayar

para inhibir la oxidación del ácido a-ceto-y-metiltiobutírico (KMBA, del inglés alpha

keto-gamma-methylthíobutíríc acíd) a etileno por la acción de radicales libres como,

por ejemplo, hidroxilo (HO·), peroxilo (ROO·) o peroxinitrito (ONOO} Según se de

scribe en Winston et al., A rapíd gas chromatographíc assay for determíníng

15: oxyradícal scavengíng capacíty of antíoxídants and bíologícal fluíds, Free Rad. Biol.

Med., 1998, 24(3), 480-493, la reacción que tiene lugar es la siguiente:

H3C-S-CH2-CH2-CO-COOH

KMBA Radicales libres Etileno

20

Preferiblemente, se realizó el ensayo TOSC frente a radicales peroxilo

(ROO·) puesto que son más estables y con una vida media más larga que los radi

cales hidroxilo o los radicales peroxinitrito. Los radicales peroxilo pueden obtenerse

25: por descomposición térmica e hidrólisis simétrica del compuesto 2,2'-azobis(2

metilpropionamidina) (ABAP). De este modo, el poder antioxidante de las sustan

cias ensayadas se puede medir por la capacidad de inhibir la formación de etileno

en presencia de radicales peroxilo comparado con una reacción control, en la que

no se emplea una sustancia antioxidante como inhibidor.

30: Los valores TOSC se determinan según la metodología descrita en los artí

culos Regoli et al., Quantífícatíon of total oxídant scavengíng capacíty of antíoxídants

for peroxynítríte, peroxyl radícals, and hydroxyl radícals, Toxicol. Appl. Pharm.,

1999, 156, 96-105 y Regoli et al., Total oxídant scavengíng capacíty (TOSC) of mí

crosomal and cytosolíc fractíons from Antarctíc, Arctíc and Medíterranean scallops: dífferentíatíon between three potent oxídants, Aquat. Toxico l., 2000, 49(1-2), 13-25.

Esencialmente, los valores TOSC se cuantifican midiendo la formación de etileno, por comparación de las áreas integradas para cada sustancia ensayada y la sustancia control, según la siguiente ecuación:

,._'"' f' <;_"'::-.;:, +.~ "'"•>N~·,~ •"!:·X•;:: """~~"'::-·· ·l'~....,·,..-._'!!,.-,.· \

i } ·: >-~$~·X.,?¡...,,·''"'' ~ '".;', ,,,) li.l·XM.~·

TOSC = 100-X 100}

' ~~ ,.~ ..:· ~t,•-.·-~~~-~·... {~~ f' ···:::·~·.;,·f't"''~'"}

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l

..·

Las sustancias control, sin capacidad de eliminación de radicales libres, tienen un valor TOSC del 0%, puesto que tienen la misma área bajo la curva que el control. Los compuestos que impiden completamente la formación de etileno tienen un área bajo la curva igual a O y, por tanto, un valor TOSC del 1 00%.

Sorprendentemente, los autores de la presente invención observaron que la combinación de los polifenoles resveratrol, quercetina y catequina en las proporciones molares aproximadamente 1:1:2 y aproximadamente 1:1:5 muestran una actividad antirradicalaria sinérgica, ya que se obtienen unos valores de TOSC para las combinaciones notablemente superiores a la suma de los valores TOSC de sus componentes, tal como se describe en el Ejemplo 3.

Como resultado de este efecto sinérgico, es posible obtener un potente efecto antioxidante sin necesidad de ingerir grandes cantidades de resveratrol, o de los demás antioxidantes individuales, lo cual es ventajoso de cara a minimizar posibles riesgos de efectos secundarios.

Composiciones También forma parte del objeto de la invención una composición que comprende la combinación de polifenoles de la invención y un vehículo aceptable.

La composición se selecciona entre una composición farmacéutica, una composición cosmética, una composición alimenticia, un suplemento dietético, y una composición veterinaria, y el vehículo es respectivamente farmacéutica, cosmética, alimentaria, dietética, o veterinariamente aceptable.

Las formas farmacéuticas aptas para incorporar la combinación de politenoles de la presente invención pueden formularse para su administración oral, nasal, rectal, parenteral o tópica. Son adecuadas tanto las formas farmacéuticas sólidas y

semi-sólidas tales como comprimidos, cremas, cápsulas duras, cápsulas blandas,

grageas, presentaciones en polvo; como las líquidas o semi-líquidas, tales como

jarabes o cualquier tipo de solución, suspensión o emulsión acuosa, o no acuosa.

Las composiciones farmacéuticas se formulan de acuerdo con los procedi

5: mientas que son conocidos por el experto en tecnología farmacéutica, como se

describe, por ejemplo, en el libro M. E. Aulton, Farmacia. La ciencia del diseño de

las formas farmacéuticas, segunda edición, Elsevier, Madrid, 2004. Por ejemplo,

mediante la mezcla de la combinación antioxidante de la invención con al menos un

vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable y, opcionalmente, con uno o

1 O: más productos con funcionalidades terapéuticas o dietéticas, como por ejemplo

vitaminas, minerales, oligoelementos y otros micronutrientes.

Los excipientes aptos para ser usados en las composiciones farmacéuticas

objeto de la presente invención son bien conocidos por el experto en tecnología

farmacéutica y se describen, por ejemplo, en el libro R. C. Rowe, P. J. Sheskey y

15: P.J. Weller, Handbook of Pharmaceutícal Excipients, cuarta edición, Pharmaceutical

Press, 2003.

Así por ejemplo, entre los tipos de excipientes y vehículos adecuados para

ser usados en las formulaciones líquidas, en forma de soluciones, suspensiones o

emulsiones, están, por ejemplo, disolventes, tampones, modificadores de la visco

20: sidad, modificadores de la densidad, agentes tensioactivos y emulsionantes, agen

tes floculantes, humectantes, conservantes, edulcorantes y aromatizantes, y mez

clas de los anteriores. Análogamente, entre los tipos de excipientes y/o vehículos

adecuados para ser usados en las composiciones farmacéuticas sólidas están, por

ejemplo, las sustancias de relleno, agentes aglutinantes, antiadherentes, lubrican

25: tes, agentes antiapelmazantes, materiales para el recubrimiento de comprimidos,

gelatina para cápsulas duras y blandas, plastificantes, estabilizantes, agentes con

servantes, colorantes, esencias, y sus mezclas.

La combinación de polifenoles de la invención también puede incorporarse

en composiciones cosméticas para su aplicación externa, típicamente para el cui

30: dado del cabello o de la piel. Las formas cosméticas adecuadas para incorporar las

combinaciones antioxidantes de la presente invención son, por ejemplo, cremas,

geles, leches, lociones, emulsiones pulverizables, y barras sólidas, entre otras.

Las composiciones cosméticas se formulan de acuerdo con los procedimien

tos que son conocidos por el experto en la materia, mediante la mezcla de la com

binación de polifenoles de la invención con al menos un vehículo cosméticamente

aceptable en el cual se disuelve, se emulsiona, se dispersa, o se suspende la mis

ma. El vehículo se selecciona entre agua, un vehículo no acuoso miscible en agua,

como por ejemplo etanol o isopropanol, y un vehículo no acuoso no miscible en

5: agua, como por ejemplo aceite de parafina. Opcionalmente, las composiciones

cosméticas pueden contener al menos un ingrediente cosmético adicional, que

puede elegirse, por ejemplo, entre el grupo formado por agentes tensioactivos y

emulsionantes, compuestos lipídicos y emolientes, factores de consistencia y agen

tes espesantes, estabilizantes, hidrótropos, agentes conservantes, esencias, colo

1O: rantes, compuestos de silicona, grasas, ceras, lecitinas, fosfolípidos, factores de

protección solar UV, filmógenos, autobronceadores, o inhibidores de tirosina (agen

tes de despigmentación), o mezclas de los anteriores.

Así mismo, la combinación de polifenoles de la presente invención puede

ser incorporada en productos alimenticios y suplementos dietéticos, por ejemplo en

15: forma de productos nutracéuticos o alimentos funcionales o complementos alimen

ticios para nutrición deportiva.

La elaboración de este tipo de productos, incorporando la combinación anti

oxidante de la invención, se realiza mediante procedimientos conocidos por el ex

perto en tecnología alimentaria.

20: Cualquier tipo de composición alimenticia o suplemento dietético es ade

cuado para incorporar la combinación de polifenoles objeto de la invención, por

ejemplo, infusiones, cafés, bebidas en general tales como zumos u otras bebidas

alcohólicas o no alcohólicas, productos de bollería o panadería, mermeladas, barri

tas energéticas, cereales, harinas, productos lácteos tales como queso, leche, man

25: tequilla, yogures o crema, productos a base de chocolate y dulces como caramelos,

gomas de mascar o helados, aceites, margarina, conservas.

Opcionalmente, el producto alimenticio que incorpora la combinación de po

lifenoles de la invención puede contener adicionalmente otros productos con fun

cionalidades terapéuticas o dietéticas, preferiblemente, vitaminas, minerales, oligoe

30: lementos u otros micronutrientes, u otros extractos vegetales fuente de polifenoles.

Así mismo, el producto alimenticio que contiene la combinación de politeno

les de la invención, puede contener adicionalmente uno o más ingredientes, que se

eligen entre los habituales aditivos alimenticios autorizados, bien conocidos por el

experto en la materia, por ejemplo del tipo colorantes, conservantes, condimentos y

especias, potenciadores del sabor, espesantes y gelificantes. La combinación de polifenoles de la invención también puede incorporarse en composiciones veterinarias destinadas a la alimentación animal, en particular a

5 la alimentación de animales domésticos. Dichas combinaciones se pueden incorporar a composiciones de comida para animales domésticos como, por ejemplo, las descritas en las solicitudes de patente EP-A-1514480 y WO-A-2005/110037, mediante procedimientos bien conocidos por el experto en la materia.

Forma parte también de la invención la utilización de la combinación para la preparación de una composición con poder antioxidante. La composición se selecciona entre el grupo formado por una composición farmacéutica, una composición cosmética, una composición alimenticia, un suple15 mento dietético, y una composición veterinaria. También forma parte de la invención la combinación de la invención para uso como antioxidante. La combinación de polifenoles objeto de la presente invención puede ser utilizada terapéuticamente para prevenir o disminuir la progresión de todos aquellos

20 estados patológicos susceptibles de ser tratados con sustancias antioxidantes y/o captadoras de radicales libres, como por ejemplo, cáncer, enfermedades cardiovasculares, enfermedades inflamatorias, enfermedades coronarias, diabetes, Alzheimer, esclerosis múltiple o afecciones dermatológicas tales como psoriasis o la aparición de eczemas, entre otras.

25 La combinación de la invención es particularmente útil para retardar los síntomas del envejecimiento, por su capacidad de proteger los órganos, tejidos y células frente a los efectos dañinos de la oxidación. También resulta apropiada, por ejemplo, para tratar el envejecimiento prematuro de la piel impidiendo la ruptura de las fibras de colágeno y, en general, de todos los tejidos.

30 La combinación de la invención también es particularmente adecuada para aquellos sujetos más susceptibles de generar radicales libres de forma incrementada en su organismo, por ejemplo, fumadores, personas especialmente expuestas a condiciones adversas de contaminación ambiental, radiaciones ionizantes, exceso

de exposición solar, personas sujetas a situaciones de estrés, o personas que prac

5: tican un ejercicio físico intenso. Los ejemplos que siguen a continuación sirven para ilustrar la invención pero no deben considerarse limitantes de la misma Ejemplos

1 O: Ejemplo 1: Preparación de una composición antioxidante de resveratrol, guercetina y categuina en relación molar 1 :1 :2 en base a resveratrol, guercetina y categuina procedentes de extractos vegetales

15 20: En un recipiente equipado con un mezclador para productos sólidos se pesaron 253,16 g de extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum con un contenido de agua del 8% y un contenido del 98% de resveratrol sobre el extracto seco, equivalente a 1 mol de resveratrol; 386,59 g de extracto purificado de Sophora japoníca con un contenido de agua del 12,5% y un contenido del 100% de dihidrato de quercetina sobre el extracto seco, equivalente a 1 mol de quercetina; y 701,11 g de extracto purificado de Vítís vinífera con un contenido de agua del 8% y un contenido de catequinas del 90% sobre el extracto seco expresado como cate-quina, incluyendo un 12,5% de catequinas monoméricas, siendo el resto procianidinas diméricas de tipo B y triméricas de tipo C, equivalente a 2 moles de catequina, y se mezcló el conjunto hasta obtener una homogeneización completa.

25: Ejemplo 2: Preparación de una composición antioxidante de resveratrol, guercetina y categuina en relación molar 1 :1 :2 en base a resveratrol y guercetina procedentes de extractos vegetales y categuina (2S,3R)

30: En un recipiente equipado con un mezclador para productos sólidos se pesaron 253,16 g de extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum con un contenido de agua del 8% y un contenido del 98% de resveratrol sobre el extracto seco, equivalente a 1 mol de resveratrol; 386,59 g de extracto purificado de Sophora japoníca con un contenido de agua del 12,5% y un contenido del 100% de dihidrato de quercetina sobre el extracto seco, equivalente a 1 mol de quercetina; y 580,52 g de catequina (2S,3R) sustancialmente pura (Sigma), equivalente a 2 mo

les de catequina, y se mezcló el conjunto hasta conseguir una homogeneización

completa.

Ejemplo 3: Ensayo del poder antioxidante El poder antioxidante de las composiciones de la presente invención se midió por el método TOSC, según se ha descrito anteriormente. Se utilizaron disoluciones de concentración 1 ¡.tM de las sustancias o mezclas a ensayar, y agua destilada como control, cuyo valor TOSC es del 0%. Se prepararon las siguientes disoluciones, utilizando agua destilada como disolvente:

1) Resveratrol (R): Se pesaron 253,16 mg de extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum, como el empleado en el Ejemplo 1, y se disolvieron en 1 1 de agua destilada. Se tomó 1 mi de la disolución resultante y se diluyó con agua destilada hasta un volumen de 1 l. La concentración de resveratrol era 1 ¡.tM.

2) Quercetina (Q): Se pesaron 386,57 mg de extracto purificado de Sophora japoníca, como el empleado en el Ejemplo 1, y se disolvieron en 1 1 de agua destilada. Se tomó 1 mi de la disolución resultante y se diluyó con agua destilada hasta un volumen de 1 l. La concentración de quercetina era 1 ¡.tM.

3) Catequina (2S,3R) (C): Se pesaron 290,26 mg de catequina (2S,3R) sustancialmente pura (Sigma) y se disolvieron en 1 1 de agua destilada. Se tomó 1 mi de la disolución resultante y se diluyó con agua destilada hasta un volumen de 1 l. La concentración de catequina era 1 ¡.tM.

4) Catequina (Cextr): Se pesaron 350,56 mg de extracto purificado de semilla de uva Vítís vinífera, como el empleado en el Ejemplo 1 , y se disolvieron en 1 1 de agua destilada. Se tomó 1 mi de la disolución resultante y se diluyó con agua destilada hasta un volumen de 1 l. La concentración de catequina era 1 ¡.tM.

5) Resveratrol-quercetina-catequina R+O+eextr (1 :1 :2): Se tomaron 0,5 mi de la disolución R, 0,5 mi de la disolución Q y 1 mi de la disolución eextr, y se mezclaron. Esta disolución contenía una concentración 0,25 ¡.tM de resveratrol, 0,25 ¡.tM de quercetina y 0,5 ¡.tM de catequina. La concentración total de polifenoles era 1 ¡.tM.

6) Resveratrol-quercetina-catequina R+O+eextr (1 :1 :5): Se tomaron 0,5 mi de la disolución R, 0,5 mi de la disolución Q y 2,5 mi de la disolución eextr, y se mezclaron. Esta disolución contenía una concentración O, 143 ¡.tM de resveratrol, O, 143 ¡.tM de quercetina y O, 714 ¡.tM de catequina. La concentración total de polifenoles era 1 ¡.tM.

7) Resveratrol-quercetina-catequina (2S,3R) R+O+e (1 :1 :2): Se tomaron 0,5 mi de la disolución R, 0,5 mi de la disolución Q y 1 mi de la disolución e, y se mezclaron. Esta disolución contenía una concentración 0,25 ¡.tM de resveratrol, 0,25 ¡.tM de quercetina y 0,5 ¡.tM de catequina. La concentración total de polifenoles era 1 ¡.tM.

8) Resveratrol-quercetina-catequina (2S,3R) R+O+e (1 :1 :5): Se tomaron 0,5 mi de la disolución R, 0,5 mi de la disolución Q y 2,5 mi de la disolución e, y se mezclaron. Esta disolución contenía una concentración O, 143 ¡.tM de resveratrol, O, 143 ¡.tM de quercetina y O, 714 ¡.tM de catequina. La concentración total de polifenoles era 1 ¡.tM. La formación de etileno durante el ensayo TOSe se monitorizó mediante

cromatografía de gases, con un equipo HP 5890-series 11, Software HP ehemsta

tion 5890, y se calculó mediante la determinación del área bajo la curva, mediante

el programa SRI PeakSimple®. La regresión lineal se calculó usando el programa

GraphPad Prism®. La pendiente de la regresión se calculó en el margen lineal de la

curva control TOSe frente a la concentración de los activos ensayados.

Se obtuvieron los resultados que se muestran en la Tabla l.

TABLA 1

Muestra: Politeno les TOSC experimental (%) TOSC calculado (%) Incremento Potencia

1: R 22,00 - -

2: Q 11,00 - -

3: e 8,00 - -

4: Cextr 5,05 - -

5: R+O+C (1 :1 :2) 64,40 12,25 52,15 x5,3

6: R+O+C (1 :1 :5) 61,20 10,43 50,77 x5,9

7: R+O+Cextr (1 :1 :2) 60,00 10,78 49,23 x5,6

8: R+O+Cextr (1 :1 :5) 58,00 8,32 49,68 x7,0

5: La columna "TOSC calculado" representa el valor TOSC que corresponde

teóricamente a las muestras de las diferentes combinaciones de antioxidantes te

niendo en cuenta solamente un efecto aditivo de cada uno de ellos. Así pues, el

valor calculado se obtiene multiplicando la concentración de cada uno de los anti

oxidantes en la muestra por el TOSC experimental de cada uno de los antioxidantes

1O: individuales y dividiendo por la concentración del antioxidante en la muestra indivi

dual.

Por ejemplo en el caso de la muestra 5:

TOSC calculado =: (0,25 11M R x 22,00/1 11M) + (0,25 11M Q x 11 ,00/1 11M) +

+ (0,5 11M e x a,oo11 11M) = 12,25 %

15: La columna "Incremento" corresponde a la diferencia entre el valor TOSC

calculado y el experimental, y permite cuantificar el efecto sinérgico observado en el

poder antioxidante de las combinaciones. Puede observarse que la combinación de

resveratrol, quercetina y catequina de la invención, tanto en la relación molar 1 :1 :2,

como en: la relación molar 1 :1:5, muestra un notable efecto sinérgico. Así mismo,

5: puede observarse que, aunque el efecto sinérgico con catequina (2S,3R) pura es ligeramente superior al de la catequina procedente de extracto de uva, se aprecia en ambos casos un efecto sinérgico comparable, independiente, pues, de la fuente de catequinas empleada. La columna "Potencia" refleja el número de veces que aumenta el poder antioxidante con las combinaciones objeto de la invención en comparación con el poder antioxidante que se obtiene a partir de la adición por separado de los poderes antioxidantes de resveratrol, quercetina y catequina.

1 O: Ejemplo 4: Preparación de un complemento alimenticio para la prevención del envejecimiento cutáneo

15: Se prepararon cápsulas de gelatina blanda (8/1 O oval) de color rojo con el siguiente relleno por cápsula:

Componente: Cantidad (mg)

Extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum del Ejemplo 1: 33,53

Extracto purificado de Sophora japoníca del Ejemplo 1: 52,18

Extracto purificado de semilla de uva del Ejemplo 1: 94,65

Acetato de D,L-a-tocoferol: 10,00

Aceite de borraja(> 20% ácido y-linoleico): 150,00

Grasa de soja hidrogenada: 10,00

Cera de abejas: 5,00

La relación molar resveratrol :quercetina:catequina en este preparado es

1:1 :2,04.

Ejemplo 5: Preparación de un complemento alimenticio para la mejora de la prevención de la degeneración macular asociada a la edad

Se prepararon cápsulas de gelatina blanda (14/16 oblongo) de color negro con el siguiente relleno por cápsula:

Componente: Cantidad (mg)

Extracto de Vítís vinífera (8% de agua y 20% de trans-resveratrol sobre el residuo seco): 168,48

Extracto purificado de Sophora japoníca del Ejemplo 1: 52,18

Extracto purificado de semilla de uva del Ejemplo 1: 94,65

Luteína 20% en peso: 25,00

Extracto seco de arándano azul (>25% en peso de antocianidinas): 325,00

Aceite de pescado (50% en peso de ácido docosahexanoico): 325,00

Grasa de soja hidrogenada: 20,00

Cera de abejas: 10,00

La relación molar resveratrol:quercetina:catequina en este preparado es de 1:0,97:1 ,98.

Ejemplo 6: Preparación de un complemento alimenticio para reparación de las arrugas de expresión

Se prepararon sobres con el siguiente relleno por sobre:

Componente: Cantidad

Colágeno bovino hidrolizado: 50,00 g

Maltodextrina: 80,00 mg

Extracto purificado de raíz de Polygonum cuspída tu m (8% de agua y 50% de trans-resveratrol sobre el residuo seco): 67,06 mg

Extracto de Allíum cepa (40% de quercetina): 102,00 mg

Extracto de té verde (60% de catequinas expresado como catequina): 130,62 mg

Extracto de semilla de granada (40% de ácido elágico): 87,08 mg

Aroma de frutos rojos: 400,00 mg

Colorante rojo remolacha: 150,00 mg

Sucralosa: 15,00 mg

Ácido cítrico: 200,00 mg

Hialuronato sódico: 10,00 mg

La relación molar resveratrol :quercetina:catequina en este preparado es

1:1 :2.

Ejemplo 7: Preparación de un alimento funcional a base de café para la prevención de la enfermedad cardiovascular

Se prepararon sobres monodosis con el siguiente relleno por sobre:

Componente: Cantidad

Café descafeinado: 30,00 g

Extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum del Ejemplo 1: 37,61 mg

Extracto purificado de Sophora japoníca del Ejemplo 1: 58,62 mg

Extracto purificado de semilla de uva del Ejemplo 1: 261,16 mg

Aroma de moka: 50,00 mg

Ácido cítrico: 100,00 mg

La relación molar resveratrol :quercetina:catequina en este preparado es

10 1:1:5.

Ejemplo 8: Preparación de un complemento alimenticio a base de sustancias naturales como antioxidante en nutrición deportiva

15 Se prepararon cápsulas blandas de gelatina blanda (20 oblongo) de color morado con el siguiente relleno por cápsula:

Componente: Cantidad (mg)

Coenzima 01 O: 100,00

Extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum del Ejemplo 1: 37,61

Extracto purificado de Sophora japoníca del Ejemplo 1: 58,62

Extracto purificado de semilla de uva del Ejemplo 1: 261,16

RRR-alfa-tocoferol (67%): 15,00

Vitamina C: 60,00

Beta-caroteno dunaliella (95% retinol): 30,00

Aceite de germen de trigo: 500,00

Grasa de soja hidrogenada: 20,00

Cera de abejas: 10,00

5: 1 :1:5. La relación molar resveratrol :quercetina:catequina en este preparado es

Ejemplo 9:: Preparación de un suplemento alimenticio para la mejora del aspecto de la piel y brillo del pelaje en mascotas (mamíferos)

1 O: Se prepararon cápsulas de gelatina blanda (18/20 oblongo) de color rojo con el siguiente relleno por cápsula:

Componente: Cantidad (mg)

Extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum del Ejemplo 1: 50,13

Extracto purificado de Sophora japoníca del Ejemplo 1: 78,15

Extracto purificado de semilla de uva del Ejemplo 1: 353,61

Aceite de oliva (30% ácido oleico): 400,00

Aceite de borraja(> 20% ácido y-linoleico): 150,00

Grasa de soja hidrogenada: 20,00

Cera de abejas: 10,00

5: La relación molar resveratrol :quercetina:catequina en este preparado es 1:1 :5,09. Ejemplo 10: Preparación de un suplemento alimenticio para la mejora de la fertilidad de sementales (mamíferos)

1 O: Se prepararon cápsulas de gelatina blanda (22 oblongo) de color rojo con el siguiente relleno por cápsula:

Componente: Cantidad (mg)

L -carn itina tartrato: 350,00

Extracto purificado de raíz de Polygonum cuspídatum del Ejemplo 1: 18,80

Extracto purificado de Sophora japoníca del Ejemplo 1: 29,28

Extracto purificado de semilla de uva del Ejemplo 1: 131,11

Aceite de pescado (35% de ácido eicosapentaenóico y 25% de ácido docosahexaenoico): 550,00

Grasa de soja hidrogenada: 20,00

Cera de abejas: 10,00

La relación molar resveratrol :quercetina:catequina en este preparado es

1 :1:5.

ES2391211Al

Claims

REIVINDICACIONES

1.-Combinación sinérgica de polifenoles que comprende resveratrol, quercetina y catequina, caracterizada porque la relación molar entre resveratrol, quercelina y calequina es 0,9-1,1 :0,9-1,1 :1 ,8-2,2 ó 0,9-1,1 :0,9-1,1 :4,5-5,5, con la condición de que la combinación de polifenoles que consiste en trans-resveratrol, catequina, epicatequina, quercetina y rutina en una proporción molar 1:1:1:1:1 , en donde cada uno de los polifenoles tienen una pureza cromatográfica igualo superior al 90% se excluye expresamente.
2.-Combinación según la reivindicación 1, caracterizada porque la relación molar es 1:1:2 Ó 1:1 :5.
3.-Combinación según la reivindicación 2, caracterizada porque la relación molar es 1:1 :2.
4.-Combinación según la reivindicación 2, caracterizada porque la relación molar es 1 :1 :5.
5.-Combinación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el resveratrol es trans-resveratrol.
6.-Combinación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque el resveratrol es de origen natural.
7.-Combinación según la reivindicación 6, caracterizado porque la fuente de resveratrol es un extracto vegetal.
8.-Combinación según la reivindicación 7, caracterizada porque el extracto vegetal es un extracto de raíz de Polygonum cuspidatum.
9.-Combinación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada porque la quercetina es de origen natural.

ES239121 1 Al
10.-Combinación según la reivindicación 9, caracterizada porque la fuente de quercetina es un extracto vegetal.
11.-Combinación según la reivindicación 10, caracterizada porque el extraeto vegetal es un extracto de Sophora japonica.
12.-Combinación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , caracterizada porque la fuente de catequina es un extracto vegetal.
13.-Combinación según la reivindicación 12, caracterizada porque el extracto vegetal es un extracto de Vitis vinífera.
14.-Combinación según la reivindicación 1, caracterizada porque la relación molar resveratroLquercetina:catequina es 0,9-1,1 :0,9-1,1 :1 ,8-2,2, la fuente de resveratrol es un extracto de raíz de Polygonum cuspidatum, la fuente de quercetina es un extracto de Sophora ¡aponica, y la fuente de catequina es un extracto de Vilis vinífera.
15.-Combinación según la reivindicación 1, caracterizada porque la relación molar resveratrol:quercetina:catequina es 0,9-1 ,1 :0,9-1 ,1 :4,5-5,5, la fuente de resveratrol es un extracto de raíz de Polygonum cuspidatum, la fuente de quercetina es un extracto de Sophora japonica, y la fuente de catequina es un extracto de Vitis vinífera.
16.-Composición que comprende la combinación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y un vehículo aceptable.
17.-Composición según la reivindicación 16, caracterizada porque la composición es farmacéutica y el vehículo es farmacéuticamente aceptable.
18.-Composición según la reivindicación 16, caracterizada porque la composición es cosmética y el vehículo es cosméticamente aceptable.

ES2391211Al
19.-Composición según la reivindicación 16, caracterizada porque la composición es un suplemento dietético y el vehículo es dietéticamente aceptable.
20.-Composición según la reivindicación 16, caracterizada porque la com5 posición es alimentaria y el vehículo es alimentariamente aceptable.
21.-Composición según la reivindicación 16, caracterizada porque la composición es veterinaria y el vehículo es veterinariamente aceptable.

10 22.-Utilización de la combinación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para la preparación de una composición con poder antioxidante.
23.-Combinación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para uso como antioxidante.