ES2222463T3 - Uso de anticuerpos monoclonales o ligandos oligomericos solubles en la fabricacion de un medicamento para la prevencion o tratamiento de trastornos neoplasicos. - Google Patents
Uso de anticuerpos monoclonales o ligandos oligomericos solubles en la fabricacion de un medicamento para la prevencion o tratamiento de trastornos neoplasicos.Info
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Abstract
SE MUESTRA UN METODO PARA TRATAR A UN MAMIFERO AFECTADO POR UNA ENFERMEDAD CARACTERIZADA POR LA EXISTENCIA DE CELULAS NEOPLASICAS QUE EXPRESAN CD40 Y QUE CONSISTE EN LA ADMINISTRACION DE UNA CANTIDAD TERAPEUTICAMENTE EFECTIVA DE PROTEINA DE UNION CD40 EN UN TAMPON FARMACEUTICAMENTE ACEPTABLE. LAS PROTEINAS DE UNION CD40 INCLUYEN ANTICUERPOS MONOCLONALES A CD40 Y UN LIGANDO CD40. ESTAS PROTEINAS DE UNION CD40 PUEDEN SER USADAS PARA PREVENIR ENFERMEDADES EN LAS QUE EXISTEN CELULAS NEOPLASICAS QUE EXPRESAN CD40, EN LOS INDIVIDUOS SUSCEPTIBLES DE SUFRIR TAL ENFERMEDAD.
Description
Uso de anticuerpos monoclonales o ligandos
oligoméricos solubles en la fabricación de un medicamento para la
prevención o tratamiento de trastornos neoplásicos.
La presente invención se refiere a los
procedimientos relativos a la prevención o tratamiento de
enfermedades neoplásicas caracterizadas por células neoplásicas que
expresan CD40. Más específicamente, la presente invención se
refiere a los procedimientos de tratamiento o prevención de los
linfomas de células B.
Los linfomas de células B inmunoblásticas
aparecen frecuentemente en individuos inmunocomprometidos tales
como receptores de transplantes procedentes de donantes no
relacionados con ellos y otros que reciben terapia de larga
duración, pacientes de SIDA y pacientes con síndromes de
inmunodeficiencia primaria tales como síndrome linfoproliferativo
ligado al cromosoma X o síndrome de Wiscott-Aldrich
(Thomas y col., Adv. Cancer Res. 57:329, 1991; Straus y
col.,Ann. Intern. Med. 118:45, 1993). Estos tumores parecen
aparecer como resultado de un control dañado de las células T sobre
una infección latente por el virus de Epstein-Barr
(EVB). Linfomas similares de origen humano se pueden inducir en
ratones con síndrome de inmunodeficiencia severa combinada (SCID)
mediante inoculación de linfocitos periféricos de la sangre (PLB) de
individuos sanos, EBV-positivos (Mosier y col.,
Nature 335:256, 1988; Rowe et al., J. Exp. Med. 173:147,
1991).
El CD40, un antígeno de la superficie celular
presente en la superficie tanto de las células humanas normales
como de las neoplásicas, es un péptido de 277 aminoácidos que tiene
un peso molecular predecido de 30.600, con un péptido señal de
secreción que comprende predominantemente aminoácidos hidrófobos.
Este antígeno celular de superficie ha mostrado jugar un importante
papel en la proliferación y diferenciación de células B. Un cDNA
que codifica un CD40 se aisló a partir de una biblioteca de cDNA
preparado a partir de la línea celular Raji del linfoma de Burkitt
(Stamenkovic et al., EMBO J, 8:1403, 1989). CD40 se
expresa también sobre la superficie de células monocíticas y
epiteliales y algunos carcinomas epiteliales (E.A. Clark, Tissue
Antigens 36:33; 1990).
Las células T CD4+ expresan altos niveles de un
ligando de CD40 (CD40L). El CD40L humano, una glicoproteína de
unión a membrana, se ha clonado recientemente a partir de las
células T de sangre periférica como se describe en Spriggs y
col., J. Exp. Med. 176: 1543 (1992), y en la solicitud de
patente de los Estados unidos número 07/969.703, presentada el 23
de octubre de 1992, la descripción de la cual se incorpora por
referencia en el presente documento. El clonado del CD40L murino se
describe en Armitage y col., Nature 357:80, 1992. El CD40L
induce la proliferación celular en ausencia de cualquier
coestímulo, y también puede inducir la producción de
inmunoglobulinas en presencia de citoquinas.
Los anticuerpos monoclonales de CD40 se conocen
en la técnica (véase, por ejemplo, las secciones dedicadas a los
antígenos de células B en LEUKOCYTE TYPING III: A.J. McMichael ed.
Oxford University Press, Oxford, y LEUKOCYTE TYPING IV: Oxford
University Press, Oxford). Se ha demostrado que los anticuerpos
contra CD40 ejercen señales coestimulatorias en las células B
normales, que resultan en respuestas proliferativas y de
diferenciación. De forma similar, CD40-L ejerce
señales proteicas estimulatorias o coestimulatorias para las
células B normales.
Se ha observado que el entrecruzamiento de IgM de
superficie sobre algunas líneas de linfoma de células B ejerce
señales inhibitorias para las células del linfoma (Becwith y
col., J. Immunol. 147:2411, 1991). Similarmente, la exposición
de las células B o T malignas a los estímulos que conducen a la
activación de los linfocitos normales puede resultar en una cesación
del crecimientos de las células (Ashwell y col., Science
237:61, 1987; Brigdes y col., J. Immunol. 139:4242, 1987;
Mercep y col., J. Immunol. 140:324, 1988; Syssman y col.,
J. Immunol. 140:2520, 1988; Warner y Scott, Cell.
Inmunol. 115:195, 1988; Page y DeFranco, J. Immunol.
140:3717, 1988).
Garnier y col., observaron que los
anticuerpos para CD40 u otro marcador de célula B, CD23, mostraron
algún grado de efectividad en inhibir la formación de linfoma en
ratones SCID que se han inyectado con PLB humano y después se han
infectado con EVB (Abstract 167, XIVth Intl. Congress of the
Transplantation Society, 1992). Sin embargo, se desconoce en la
técnica si el ,mecanismo de acción implicado fue inhibición de la
unión de CD40L al CD40 mediante el anticuerpo
anti-CD40, o por algunos otros medios. Por lo tanto,
hay una necesidad en la técnica para determinar los efectos de
otros anticuerpos anti-CD40, y de CD40 por sí
mismos, sobre los linfomas celulares y otras células malignas que
expresan CD40.
La presente invención se refiere al tratamiento
de un mamífero afligido por una enfermedad neoplásica caracterizada
por células neoplásicas que expresan CD40 usando una proteína de
unión a CD40 que inhibe la unión de CD40 a CD40L en un tampón
farmacéuticamente aceptable. Las proteínas de unión a CD40 se
seleccionan del grupo que consta de anticuerpos monoclonales para
CD40, logrando oligómero soluble de CD40, y combinaciones de los
mismos. Los anticuerpos monoclonales particularmente preferidos son
hCD40m2 (depositado como Hn CD40-M2 en la American
Type Culture Collection, Rockville, MD, USA, bajo los términos del
Tratado de Budapest, y proporcionado un número de acceso ATCC
HB11459) y hCD40m3, el cual se describe en el documento
WO-A-95/09653. Las formas
oligoméricas del ligando CD40 incluyen una proteína soluble de
fusión Fc-ligando de CD40, y una proteína
oligomérica de cremallera de leucina de fusión con CD40, de las
cuales ambas han sido descritas en el documento
WO-A-93708207. Las células
neoplásicas que expresan CD40 incluyen células de linfoma B, algunas
células de melanoma y algunas células de carcinoma.
La figura 1 ilustra la expresión de CD40 mediante
varias líneas celulares de linfoma, usando anticuerpos monoclonales
anti-CD40 M2 y M3.
La figura 2 demuestra la inhibición de la
proliferación de varias líneas celulares de linfoma mediante
anticuerpos para CD40 (cuadrados cerrados); en contraste, msIgG no
inhibió proliferación (cuadrados abiertos).
La figura 3 presenta una comparación de los
efectos de los anti-CD40 solubles (panel A) o
anti-CD40 inmovilizado (panel B) en el crecimiento
del linfoma.
La figura 4 demostró la habilidad del ligando
CD40 para inhibir el crecimiento de las células B de linfomas in
vitro.
La figura 5 muestra que los anticuerpos a CD40
inhiben el crecimiento de las células del melanoma humano in
vitro.
La figura 6 demostró la capacidad del ligando
soluble de CD40 para inhibir el crecimiento de linfomas de células B
in vivo.
La presente invención se refiere a los
tratamientos o la prevención de enfermedades caracterizadas por
células neoplásicas de superficie que expresan una proteína celular
de superficie conocida como CD40. El invento principal utiliza una
proteína (o proteínas) que unen específicamente CD40 (referida como
una proteína de unión CD40) en una interacción no covalente que se
basa en la propia conformación de la proteína de unión a CD40 y en
la misma CD40. Por ejemplo, una proteína de unión a CD40 puede
comprender un anticuerpo que une CD40 a través de una región de
unión a antígeno. Las proteínas de unión adicional a CD40 que
inhiben la unión de CD40 a CD40L se pueden preparar a través de
procedimientos recombinantes, mediante preparación de proteínas de
fusión que comprenden una región (o dominio) de unión a CD40 de un
ligando de CD40, o un anticuerpo a CD40, con una segunda proteína,
por ejemplo, un dominio Fc de una inmunoglobulina humana.
El antígeno CD40 humano (CD40) es un péptido de
227 aminoácidos que tiene un peso molecular de 30.600, y un péptido
señal secretor de 19 aminoácidos que comprende predominantemente
aminoácidos hidrofóbicos (Stamenkovic y col., supra). Un
cDNA que codifica CD40 humano se aisló de una librería de cDNA
preparada a partir de la línea celular Raji. La teórica proteína
codificada por el cDNA de CD40 contiene una teórica secuencia
líder, dominio transmembrana y un número de otras características
comunes a las proteínas receptoras de unión a membrana. CD40 se ha
encontrado que se expresa en los linfocitos B, células epiteliales
y algunas líneas celulares de carcinomas.
CD40 es un miembro de la familia de receptores
factor de supresión de tumores (TNF)/factor de crecimientos
nervioso (NGF); la cual se define por la presencia de residuos
ricos en cisteína en la región extracelular (Smith y col.,
Science 248:1019, 1990: Mallet and Barclay, Inmunology Today
12:220; 1991). Esta familia incluye el antígeno linfocitario
CD27, el CD30 (un antígeno encontrado en el linfoma de Hodkins y en
las células de Reed-Sternberg), dos receptores para
TNF, una proteína murina referida como 4-IBB, un
antígeno OX40 de rara, receptor NGF, y antígeno Fas.
CD40 se puede detectar sobre la superficie de una
célula mediante uno cualquiera de varios medios conocidos en la
técnica. Por ejemplo, un anticuerpo específico para CD40 se puede
usar en una técnica de clasificación celular activada por
fluorescencia para determinar si las células expresan CD40, como se
describe en el ejemplo 1 en el presente documento. Otros
procedimientos de detectar las moléculas se superficie celular
también son útiles en detectar CD40.
Los anticuerpos monoclonales dirigidos contra los
antígenos de superficie CD40 (CD40 mAb) ha mostrado mediar varias
actividades biológicas en las células B. Por ejemplo, CD40 mAb
inducen adhesiones homotípicas y heterotípicas (Barrett y col.,
J. Immunol. 146: 1722, 1991; Gordon y col., J. Immunol.
140:1425, 1988), e incrementar el tamaño de las células (Gordon
y col., J. Immunol. 140:1425, 1988; Valle y col., Eur. J.
Immunol. 19:1463, 1989). CD40 mAb induce también proliferación
de las células B activadas con anti-IgM, CD20 mAb,
o éster de forbol solo (Clark y Ledbetter; Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 83:4494, 1986; Gordon y col., LEUKOCYTE TYPING III:
A.J. McMichael ed. Oxford University Press. Oxford, p. 426;
Paulie y col., J. Immunol. 142:590, 1989) o en concierto con
IL-4 (Valle y col., Eur. J. Immunol.
19:1463, 1989; Gordon y col., Eur. J. Immunol.
17:1535, 1987), y produce IgE (Jabara y col., J. Exp. Med.
172: 1861, 1990: Gascan y col., J. Inmunol. 147:8,
1991), IgG, e IgM (Gascan y col., J. Inmunol. 147:8 1991) a
partir de cultivos de células T estimulados con
IL-4.
Además, se ha notificado que CD40 mAb mejora la
liberación mediada por IL-4 de
CD23/Fc\varepsilonRII soluble a partir de células B (Gordon y Guy,
Inmunol. Today 8:339, 1987, Cairns y col., Eur. J.
Inmunol. 18:349, 1988)y para promover la producción de
células B de IL-6 (Clark y Shu, J. Inmunol.
145:1400, 1990). Recientemente, en presencia de células
adherentes CD_{w}32+, las líneas celulares humanas B se han
generado a partir de poblaciones primarias de células B con
IL-4 y CD40 mAb (Banchereau y col., Science
241:70, 1991). Además, los centrocitos germinales interiores
pueden protegerse de sufrir apoptosis se activan a través de CD40
y/o receptores para antígeno (Liu y col., Nature 342:929,
1989). Cada una de las publicaciones mencionadas anteriormente en
este documento describe CD40 mAb que estimulan una actividad
biológica de las células B.
El documento
WO-A-95/09653 describe dos
anticuerpos monoclonales para CD40, referidos como hCD40m2 y
hCD40m3. Al contrario que otros CD40 mAb, hCD40m2 (ATCC HB1459) y
hCD40m3 une CD40 e inhibe la unión de CD40 a células que expresan
constitutivamente CD40L. Una inhibición de unión mayor del 95% se
observó con hCD40m2 o con CD40 mAb M3, a concentraciones tan bajas
como 12,5 \mug/ml, comparadas con la IgG irrelevante o un CD 40
mAb control, G28,5 hCD40m2 también fue capaz de inhibir la
producción de TNF-\alpha inducida por CD40L.
Los anticuerpos monoclonales adicionales CD40 se
pueden generar usando técnicas convencionales (véanse las patentes
de los Estados Unidos Nº^{s}. RE 32.011, 4.902.614, 4.543.439 y
4.411.993: véase también Monoclonal Antibodies, Hybridomas: A
New Dimension in Biological Analyses, Plenum Press, Kennett,
McKearn, y Bechtol (eds.), 1980, y Antibodies: A Laboratory
Manual, Harlow y Lane (eds.), Cold Spring Harbor Laboratory
Press, 1988).
Brevemente, se inyecta a un animal con una forma
de CD40 adecuada para generar un respuesta inmune contra CD40. El
animal puede reinmunizarse como necesita hasta niveles de
anticuerpo en suero al haber alcanzado CD40 estancamiento, después
se da un estímulo final de CD40 soluble, y de tres a cuatro días
después se sacrifica. Los órganos que contienen grandes números de
células tales como el bazo y los nódulos linfáticos se recogen y
disgregan en una suspensión celular única pasando los órganos a
través de una pantalla de malla o rompiendo las membranas del bazo
y los nódulos linfáticos que encapsulan las células.
Alternativamente, las células adecuadas para
preparar anticuerpos monoclonales se obtienen a través del uso de
técnicas de inmunización in vitro. Brevemente, un animal se
sacrifica y el bazo y las células de los nódulos linfáticos se
retiran. Se prepara una única suspensión celular, y las células se
sitúan en un cultivo que contiene una forma de CD40, la cual es
adecuada para generar una respuesta inmune como se describe
anteriormente en este documento. Subsiguientemente, los linfocitos
se recogen y fusionan como se describe más adelante en este
documento.
Las células que se obtienen a través del uso de
inmunización in vitro o a partir de un animal inmunizado
como se describe anteriormente en este documento se pueden
inmortalizar mediante transfección con un virus como el
Epstein-Barr (EBV) (véase Glasky y Reading,
Hybridoma 8(4):377-389, 1989).
Alternativamente, las suspensiones celulares recogidas de bazo y/o
nódulos linfáticos se fusionan con una célula de mieloma adecuada
con el fin de crear un "hibridoma" que secrete anticuerpo
monoclonal. Las líneas de mieloma adecuadas son preferiblemente
defectivas en la construcción o expresión de anticuerpos, y son
adicionalmente singénicas con las células del animal inmunizado.
Muchas líneas celulares de mieloma se conocen bien en la técnica y
se pueden obtener a partir de fuentes tales como la American Type
Culture Collection (ATCC). Rockville. Maryland (véase Cataloge
of Cell Lines & Hybridomas, 6^{th} ed., ATCC, 1988).
Las células T CD4+ activadas expresan niveles
altos de un ligando para CD40 (CD40L). El CD40L humano, una
glicoproteína de unión a membrana, se ha clonado recientemente a
partir de células T periféricas de la sangre como se describe en
Spriggs y col., J. Exp. Med. 176:1543 (1992) y en el
documento WO-A-93/08207. El clonado
del CD40L murino se describe en Armitage y col., Nature
357:80, 1992. CD40L induce la proliferación de células B en ausencia
de cualquier coestímulo, y también puede inducir producción de
inmunoglobulinas en presencia de citoquinas.
CD40-L es un polipéptido de
membrana tipo II que tiene una región extracelular en su extremo
C-terminal, una región transmembrana y una región
intracelular en su N-terminal. El
CD40-L soluble comprende una región extracelular de
CD40-L con CD40, e incluye proliferación de células
B e inducción de secreción de anticuerpos (incluyendo secreción de
IgE).
El documento
WO-A-95/08207 describe preparación
de una proteína de fusión soluble CD40-L/Fc referida
como CD40-L/FC2. CD40-L/FC2 contiene
una secuencia hidrofílica de ocho aminoácidos descrita por Hopp y
col., (Hopp y col., Bio/Technology 6:1204, 1988; referido como
Flag®), y dominio Fc de IgG, una secuencia de unión
[Gly_{4}Ser]_{3} (descrita en la patente de los Estados
Unidos 5.073.627), y la región extracelular del
CD40-L humano. También se describe en el documento
WO-A-93/08207 una proteína de fusión
CD40-L referida como CD40-L
trimérico, el cual contiene una secuencia de 33 aminoácidos referida
como una "cremallera de leucina", la secuencia hidrofílica de
ocho aminoácidos descrita por Hopp y col. (supra), seguida
por la región extracelular del CD40-L humano. Ambas
formas oligoméricas de CD40-L inducen la
proliferación de células B en la ausencia de cualesquiera
coestímulos, y (en conjunción con la citoquina apropiada) dan como
resultado la producción de IgG, IgE, IgA e IgM.
El CD40-L trimérico descrito en
el documento WO-A-93/08207 será útil
en la presente invención.
Las proteínas de unión se pueden construir
también utilizando técnicas de DNA recombinante para incorporar las
regiones variables de un gen que codifica un anticuerpo para CD40
que inhibe la unión de CD40 a CD40L (véase James W. Larrick y
col., "Polymerase Chain Reaction Using Mixed Primers: Cloning
of Human Monoclonal Antibody Variable Regios Genes From Single
Hybridoma Cells", Biotechnology
7:934-938, Septiembre 1989: Reichmann y
col., "Reshaping Human Antibodies for Therapy", Nature
332:323-327, 1988: Roberts y col.,
"Generation of an Antibody wu¡ith Enhanced Affinity and
Specificity for its Antigen by Protein Engineering", Nature
328:731-734, 1987: Verhoeyen y col.,
"Reshaping Human Antibodies: Grafting an Antilisozyme
Activity", Science 239: 1534-1536. 1988:
Chaudhary y col. "A Recombinant Immunotoxin Consisting of
Two Antibody Variable Domains Fused to Pseudomonas
Exotoxin", Nature 339: 394-397, 1989).
Brevemente, el DNA codifica el sitio de unión a
antígeno (o sitio de unión a CD40; región variable) de un CD40 mAb
se aísla, amplifica, y une a DNA codificando otra proteína, por
ejemplo un IgG humano (véase Verhoeyen y col., supra; véase
también Reichmann y col., supra). Alternativamente, el sitio
de unión a antígeno (región variable) puede estar bien unido a o
bien insertado dentro de, otra proteína completamente diferente
(véase Chaudhary y col., supra), lo que da como resultado
una nueva proteína con sitios de unión de antígenos del anticuerpo
igual que con la actividad funcional de la proteína completamente
diferente.
Además, las secuencias de DNA que codifican
proteínas o péptidos que forman oligómeros serán particularmente
útiles en la preparación de proteína de unión a CD40 que inhibe la
unión de CD40 a CD40L que comprende un dominio de unión a antígeno
del anticuerpo para CD40, o un dominio extracelular del ligando
CD40. Ciertas de tales proteínas formadoras de oligómeros se
describen también en el documento
WO-A-93/08207: proteínas formadoras
de oligómeros útiles adicionales se describen también en el
documento WO-A-93/10308.
Una vez se han obtenido anticuerpos adecuados o
proteínas de unión, se pueden aislar o modificar mediante muchas
técnicas conocidas por aquellos con habilidad media en la técnica
(véase Antibodies: A Laboratory Manual, Harlow y Lane (eds.)
Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988). Las técnicas adecuadas
incluyen columnas de afinidad por péptidos o proteínas, HPLC o
RO-HPLC, purificación en columnas de proteínas A o
G, o cualquier combinación de estas técnicas. Las proteínas
recombinantes de unión a CD40 se pueden preparar de acuerdo a
procedimientos estándar, y se puede probar su especificidad de unión
a CD40 y la inhibición de la unión CD40/CD40L mediante ensayos
utilizando ensayos conocidos en la técnica, incluyendo por ejemplo
ELISA, ABC, o ensayos transferencia por puntos, igual mediante
ensayos de bioactividad tales como aquellos descritos durante CD40
mAb.
El término ratones SCID (inmunodeficiencia
combinada severa) se refiere a un mutante de la cepa de ratones
C.B-17 con una deficiencia en el cromosoma 16 que
impide la aparición receptor de células T correcto y el
reordenamiento de genes de inmunoglobulina correcto, y está así
virtualmente desprovisto de células B y T (Bosma y col.,
Nature 301:257: 1983). Los ratones SCID pueden reconstituirse
exitosamente con tejidos linfoides fetales humanos, y con
linfocitos humanos adultos, y así han sido útiles como un modelo
para estudiar la función inmune in vivo (Mosier y
col, Nature 335:256, 1988: McKune y col., Science 241:
1632, 1988:Kamel-Reid y Dick, Science
242:1707, 1988). Los ratones SCID reconstituidos con linfocitos
periféricos de sangre humana (PBL) a partir de individuos con
evidencia serológica de infección con virus de
Epstein-Barr (EBV) a menudo desarrollando linfomas
originados en células B (Mosier y col., supra: Cannon y
col., J. Clin. Invest. 85:1333, 1990: Rowe y col.,
J. Exp. Med. 173:147, 1991: Purtilo y col., Int. J.
Cancer 47:510, 1991). Veronese y col. comunicó que la
presencia de células T funcionales en las PBL inyectadas fue
absolutamente necesaria para la progresión de células B infectadas
latentemente con EBV dentro de las masas tumorales (J. Exp.
Med. 176:1763, 1992). Los linfomas que se desarrollan en este
modelo de ratones SCID son altamente agresivos, y análogos a los
linfomas EBV que surgen en individuos inmunocomprometidos.
La presente invención proporciona uso terapéutico
que incluye una cantidad efectiva de una proteína de unión a CD40
que inhibe la unión de CD40 a CD40L en un diluyente o vehículo
adecuado para administrarse. Para uso terapéutico, la proteína
purificada de unión a CD40 que inhibe la unión de CD40 a CD40L o un
análogo biológicamente activo de la misma se administra a un
paciente, preferiblemente u humano, para tratamiento en una forma
apropiada a la indicación. Así, por ejemplo, las composiciones
farmacéuticas de la proteína de unión a CD40 que inhibe la unión de
CD40 a CD40L (por ejemplo, en la forma de un dominio soluble
extracelular de ligando CD40, o un fragmento del mismo, o un
anticuerpo monoclonal para CD40) las cuales se administraron para
lograr un efecto terapéutico deseado pueden darse mediante una
inyección de bolo, infusión continua, liberación sostenida a partir
de implantes, u otra técnica adecuada.
Típicamente, un agente terapéutico proteína de
unión a CD40 que inhibe la unión de CD40 a CD40L se administra en
la forma de una composición farmacéutica que comprende dicho agente
en conjunción con vehículos, excipientes o diluyentes
fisiológicamente aceptables. Tales vehículos no serán tóxicos para
los pacientes a las dosis y concentraciones empleadas.
Ordinariamente, la preparación de tales composiciones implica
combinar una proteína de unión a CD40 que inhibe la unión de CD40 a
CD40L con tampones, antioxidantes, tales como ácido ascórbico,
polipéptidos de bajo peso molecular (menos de aproximadamente 10
residuos), polipéptidos, proteínas, aminoácidos, hidratos de
carbono incluyendo la glucosa, sacarosa o dextranos, agentes
quelantes como el EDTA, glutatión y otros estabilizadores y
excipientes. Medio salino neutro o medio salino mezclado con
seroalbúmina coespecífico son diluyentes apropiados como
ejemplos.
Las dosis apropiadas se pueden determinar por
medio de medios que se conocen en la técnica. Típicamente, las
dosificaciones efectivamente apropiadas de proteína de unión a CD40
que inhibe la unión de CD40 a CD40L estarán en el intervalo de
aproximadamente 0,01 a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal.
Además, las proteínas de unión a CD40 que inhiben la unión de CD40 a
CD40L se pueden usar como conjugados de, o combinaciones con,
fármacos, toxinas o compuestos radiactivos. La preparación de tales
conjugados para el tratamiento de varias enfermedades se conoce en
la técnica (véase, por ejemplo, Waldmann, Science 252:1657,
1991).
Estos resultados presentes en el presente
documento indican que proteína de unión a CD40 que inhibe la unión
de CD40 a CD40L puede ser de uso cínico significativo no sólo en el
tratamiento de linfomas de las células B, sino también en la
prevención de linfoma de células B inducido por EBV que puede tener
lugar después de un transplante o otros ejemplos de inmunosupresión,
tales como SIDA, y los cuales presentan un riesgo significativo en
tales poblaciones de pacientes. Partiendo de que las proteínas de
unión a DC40 que inhiben la unión de CD40 a DC40L pueden inhibir
varios linfomas de células B directamente, no es necesario usarlas
en conjugados de toxinas o compuestos radiactivos, evitando de este
modo la toxicidad y lo efectos negativos potenciales en las células
B normales.
La invención puede ser útil de este modo en la
prevención de linfomas inmunoblásticos de células B que
frecuentemente surgen en individuos inmunocomprometidos. En tales
procedimientos preventivos, a un mamífero en riesgo de desarrollar
un linfoma inmunoblástico de células B se le administra proteína de
unión a CD40. Las proteínas de unión a CD40 pueden administrarse
durante tanto tiempo como exista el estado de inmunocompromiso que
sitúa al individuo en riesgo.
De forma similar, los resultados indican que la
invención puede usarse para prevenir la aparición (o recurrencia)
de enfermedades neoplásicas caracterizadas por otros tipos de
células malignas que expresan CD40 en individuos en riesgo de la
enfermedad. Los individuos que se consideran en riesgo en estos
ejemplos incluyen aquellos con historial familiar u otras
características genéticas que indican predisposición a cánceres en
los cuales la células neoplásicas expresan CD40, e individuos que
desarrollan enfermedad neoplásica resistente a fármacos como
resultado de la quimioterapia, en la cual las células neoplásicas
resistentes a fármaco expresan CD40.
Los individuos afligidos con enfermedad
caracterizada por células neoplásicas que expresan CD40 pueden
tratarse también con la invención. El término tratamiento, como se
entiende generalmente en la técnica, se refiere a la iniciación de
terapia después de los síntomas clínicos o de haberse observado
signos de enfermedad. La invención se puede usar en la composición
en conjunto con otras terapias apropiadas para individuos
afectados, incluyendo quimioterapia, terapia de radiación, e
inmunoterapia.
Los siguientes ejemplos se desean para ilustrar
realizaciones particulares y no limitar el alcance de la
invención.
Este ejemplo describe la caracterización de
células B humanas de linfoma, y líneas celulares. Las células
usadas incluyen líneas celulares RL y DB obtenidas de pacientes con
linfomas difusos de células grandes cuyo origen está en las células
B (Beckwith y col, supra), y los linfomas inducidos por EBV
TCU2C y CHIM62 a partir de ratones SCID que se han inyectado con PLB
de individuos seropositivos a EBV. Estas células se mantuvieron en
cultivo bajo condiciones de cultivo estándar durante menos de seis
meses antes a la iniciación del estudio. Otras células, incluyendo
Raji, una línea celular formada a partir de un paciente con linfoma
de Burkitt, y LCL-2311, una línea celular
linfoblastoide generada infectando PBL humanas con EVB in
vitro.
Todas esas nuevas líneas celulares fueron
positivas en lo referente a expresión de CD40 mediante citometría
de flujo, usando anticuerpos monoclonales anti-CD40
M2 y M3; los resultados se muestran en la figura 1. Las células RL,
DB y Raji fueron homogéneas en su expresión de CD40, mientras que
los linfomas de SCID inducidos por EBV fueron heterogéneos en la
intensidad de tinción con anti-CD40. Los linfomas
de estos ratones han demostrado previamente ser herogéneos y
oligoclonales (Nakamine y col., Am J. Pathol. 142:239, 1993),
el cual debe dar cuenta de la expresión diferencial de CD40. CD20,
otro marcador de células B, estuvo presente también en células
tumorales.
Este ejemplo describe el efecto de anticuerpos
monoclonales anti-CD40 (M2 y M3) en el potencial
proliferativo de células de linfoma y líneas celulares in
vitro. La proliferación se determinó usando un ensayo
sustancialmente como el descrito por Rowe y col. (J. Exp.
Med. 173:147, 1991). Brevemente, las líneas celulares se
dividieron 24 horas antes de que se llevaran a cabo los ensayos.
Las células se resuspendieron en medio de cultivo a una
concentración de 1 x 10^{5}/ml, y se plaquearon 100 \mul de
suspensión celular en placas de fondo redondo de microtitulación de
96 pocillos (Corning Glass Works, Corning NY, USA) conteniendo ya
100 \mul de agentes apropiadamente diluidos (anticuerpos
monoclonales anti-CD40 M2 y M3, obtenidos a partir
de la Immunex Corporation, Seattle, WA, USA, o proteína de ratón
IgG de mieloma (msIgG) adquirida de Cappel, Wetschwester PA, USA).
Setentaidos horas después, se añadió 1 \muCi de
[^{3}H]-timidina/pocillo (actividad específica 6,7
Ci/nmol; New England Nuclear Research Products, Boston, MA, USA)
durante la 8-18 horas finales del cultivo. Los
cultivos se recogieron sobre filtros de fibra de vidrio con un
Sistema de Recolección OhDCell (Cambrigde Technology Inc.,
Cambridge, MA, USA), y la captación de
[^{3}H]-timidina se ensayó mediante centelleo
líquido usando un contador-\beta LKB (LKB
Instruments Inc., Turku, Finlandia). Cada experimento se llevó a
cabo de cuatro a seis veces, presentándose los resultados de un
experimento representativo en la figura 2.
La incubación con anticuerpos monoclonales
anti-CD40M2 y M3 resultó en una inhibición
significativa de la proliferación de RL, DB,
LCL-2311 y líneas celulares de
linfoma-EVB probadas, con una inhibición óptima del
40-60% que tiene lugar a 1-10
\mug/ml de anticuerpo soluble, dependiendo de la célula del
linfoma. La línea celular Raji no parece afectarse
significativamente por anti-CD40 soluble.
Los efectos de anti-CD40 soluble
en el crecimiento del linfoma se compararon entonces con aquellos
del anti-CD40 inmovilizado. Brevemente, las células
se incubaron durante toda una noche a 37ºC con anticuerpos
antirratón de cabra. Después, los anticuerpos monoclonales
anti-CD40 M2,. M3, y el anticuerpo monoclonal
anti-CD20 proporcionado por el Dr. Kevin Conlon
(Laboratorio de Inmunología Experimental, BRMP,
NCI-FCRDC, Frederick, MD, USA), o msIgG, a una
concentración de 10 \mug/ml, se añadieron a los pocillos, y los
pocillos se incubaron durante 4 horas adicionales a 37ºC: Los
ensayos de proliferación se llevaron a cabo entonces como se
describe anteriormente en este documento, los resultados se
muestran en la figura 3. La inmovilización resultó en una
inhibición significativamente mayor de proliferación (p<0,05)
mediante los anticuerpos inmovilizados anti-CD40
comparados con el anti-CD40 soluble, o
anti-CD20 soluble o inmovilizado. Así, en contraste
con sus efectos sobre las células B normales, la estimulación de
CD40 ejerce efectos inhibitorios sobre los linfomas B inducidos por
EBV.
Este ejemplo ilustra el efecto del ligando CD40
en el crecimiento de linfomas de células B in vitro. El
ligando CD40 soluble (CD40-L; descrito en
Wo-A-9308207) se obtuvo a partir de
células COS-7 transfectadas como fluido
sobrenadante,. Y se probó en un ensayo de proliferación usado como
se describe anteriormente, en el ejemplo 2, usando células RL o
TU2C. Ambos fluidos sobrenadantes, murino y humano, conteniendo
CD40-L se probaron, partiendo de que el
CD40-L murino se une a células humanas que expresan
CD40, y actuaron como coestímulos de la misma manera que el
CD40-L humano. Cada lote de fluido sobrenadante se
marcó con tritio para determinar la concentración que produjo una
inhibición de proliferación óptima: una dilución 1:5 que produjo la
inhibición máxima.
Los resultados ejemplares se presentan en la
figura 4: los valores se presentan como porcentajes de inhibición
comparados con fluidos sobrenadantes de control. El ligando humano
soluble fue inhibitorio para varios linfomas probados, con la
inhibición máxima viéndose (50-80%) en las células
RL y TU2C a una dilución 1:5 del fluido sobrenadante. El fluido
sobrenadante de control de las células COS-7
transfectadas con el vector solo realmente promueve el crecimiento
de las células del linfoma. De acuerdo con esto, los efectos
inhibitorios de CD40-L en linfomas B son paralelos a
los de los anticuerpos para CD40.
Este ejemplo ilustra en efecto de
anti-CD40 en el crecimiento de los linfomas de
células B en los ratones SCID. Los ratones C.B.-17 scid/scid
(SCID) se obtuvieron del Servicio de Producción Animal
(NCI-FCRDC, Frederick, MD, USA) y no se usaron
hasta las 6-8 semanas de edad. Los ratones se
mantuvieron bajo condiciones específicas libres de patógenos a todos
lis tiempos; se alojaron en jaulas microaislantes, y toda la
comida, agua y camas se autoclavó antes de usar. Se incluyó en la
forma de administración suspendida en el agua para beber dada a los
ratones trimetoprim/sulfametoxazol (40 mg de trimetoprim y 200 mg de
sulfometoxazol por 320 ml). Todos los ratones recibieron antisuero
contra asialo GM1 (Wako Chemical, Dallas, TX, USA), un marcados
presente en las células murinas NK (Murphy y col., Eur. J.
Immunol. 22:1421; 1992) intravenosamente un día antes de la
transferencia de células, para eliminar la resistencia del
hospedador al tumor.
En el día 0, los ratones SCID se inyectaron bien
intravenosamente o bien intraperitonealmente con 5 x 10^{6}
células RL o TU2C. Los destinatarios de las células tumorales
reciben después o bien 2 \mug de anti-CD40 o bien
msIgG en 0,2 ml de HBSS (disolución de sal en equilibrio de Hank)
intravenosamente cada uno de los otros días durante un periodo de
10 días (total de 5 inyecciones), comenzando en el día 0, 3 ó 14.
Los ratones se sometieron a un seguimiento del desarrollo y
progresión del tumor. Ambos análisis, paramétrico (prueba de
student) y no paramétrico (suma del rango de la prueba de Wilcoxan),
se llevaron a cabo para determinar si los grupos se diferenciaban
significativamente (p<0,05). Todos los experimentos tuvieron
3-10 ratones por grupo, y se llevaron a cabo
2-3 veces. Los resultados se presentan a
continuación en la tabla 1.
Anti-CD40 (p<0,05) incrementó
significativamente la supervivencia de los ratones que recibieron
bien tumores RL o bien tumores TU2C cuando el tratamiento se inició
en el día 0, 3 ó 14. Cuando los ratones SCID se trataron con
anti-CD40 en el día 0, no se presentó ninguna
evidencia de tumor en los ratones que recibieron el linfoma de la
línea RL de células B después de varios meses. Sin embargo, algunos
ratones que recibieron el linfoma TU2C inducido por EBV y
anti-CD40 desarrollaron tumor algunas semanas
después de cesar el tratamiento con anti-CD40.
Los patrones diferenciales del crecimiento
metastático se observaron para las diferentes rutas de
administración de células tumorales. Los ratones que reciben los
linfomas inducidos con EBV i.p. desarrollaron tumores peritoneales
con metástasis extensivas en los nódulos linfáticos y el hígado,
mientras que los ratones que recibieron los linfomas i.v.
desarrollaron principalmente metástasis renales. El
anti-CD40 fue capaz de inhibir el crecimiento del
tumor y promover la supervivencia del ratón destinatario sin tener
en cuenta la ruta de administración del tumor.
El tratamiento de los ratones portadores de tumor
con anti-CD40 dio como resultado también una
supervivencia incrementada significativamente cuando el tratamiento
se inició 3 ó 4 días después de la transferencia de las células
tumorales, e incluso tan tarde como 14 días después. Estos
resultados indican que el tratamiento anti-CD40 fue
también eficaz cuando el tratamiento se inició con cargas tumorales
relativamente grandes y extensas (>1 cm^{3}) en los ratones
destinatarios.
Este ejemplo ilustra el efecto del
anti-CD40 en el crecimiento de los tumores en los
ratones SCID inyectados con PBL de individuos seropositivos a EBV.
Se les dieron a los ratones SCID (descritos en el ejemplo 4
anteriormente) inyecciones de hormona humana recombinante del
crecimiento (rhGH: Genentech, South San Francisco, CA, USA), el
cual se ha demostrado que promueve la linfogénesis con EVB en
ratones huPBL-SCID (Murphy y col., Brain Behav.
Immun. 6:355: 1992), debido presumiblemente a la promoción de la
implantación de las células T humanas en ratones tratados (Murphy
y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4481: 1992). La
implantación de células T parece ser esencial para la formación de
linfoma de células B en el modelo huPBL-SCID (18).
Se dio rhGH (10 \mug en 0,2 ml deHBSS) i.p. en el día 0 y
cualquier otro día hasta de 4 a 8 semanas después de empezar el
ensayo. Se obtuvieron PBL de humanos de donantes sanos en paquetes
de leucocitos. Se administró anti-asialo
GM-1 como se describe en el ejemplo 4.
Se obtuvieron PBL de humanos de donantes sanos
seropositivos a EBV en paquetes de leucocitos. Todos los donantes
se examinaron para ver si tenían anticuerpos contra el virus de la
inmunodeficiencia humana de tipo 1 (HIV-1) y contra
el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (HbsAg) y
proporcionaron consentimiento informado antes de la donación. El PBL
se purificó mediante un contador de corriente de decantación, y la
fracción linfocitaria, que contiene más del 90% de los linfocitos
como se calculó mediante citometría de flujo, se obtuvo. El PBL (1
x 10^{8}) se inyectó i.p. dentro de los ratones destinatarios SCID
en el día 0.
Los ratones se trataron con
anti-CD40, anti-CD20, o con msIgG
(2 \mug/0,2 ml de PBS) i.p. cada uno de los otros días durante 20
días para un total de 10 inyecciones. La tabla 2 presenta
resultados representativos de tres experimentos con
5-8 ratones por grupo.
Los resultados demostraron que el tratamiento de
ratones quiméricos huPBL-SCID con
anti-CD40 al tiempo de la transferencia de huPBL
evitó completamente el desarrollo de linfomas de células B humanas
en el ratón. Aunque anti-CD20 no tuvo efecto sobre
los linfomas in vitro, el tratamiento de las quimeras
huPBL-SCID con anti-CD20 evitó
también la parición del linfoma.
Este ejemplo ilustra el efecto de
anti-CD40 en la implantación de las células T
(HLA^{+}, CD3^{+}) y B (HLA^{+}, CD3^{-}) en los ratones
SCID. Las quimeras de ratones huPBL-SCID se
prepararon como se describió en el ejemplo 5 anteriormente. Los
porcentajes de células T y B humanas encontradas en la cavidad
peritoneal se determinaron, y la inmunoglobulina humana en el suero
se cuantificó mediante ensayo de enzimoinmunoabsorción (ELISA). Los
animales se examinaron también para comprobar la presencia de
linfoma: aquellos animales que evidenciaron linfoma estaban
moribundos, con evidencia de nódulos de tumores extensivos en la
cavidad peritoneal. Los ratones se sometieron al ensayo
4-8 semanas después del huPBL transferido, con
todos los ratones control (msIg) tratados sucumbiendo al linfoma de
células de células B en el día 33,2\pm1,2.
Las suspensiones únicas de células de la cavidad
peritoneal se obtuvieron, y evaluaron por medio de citometría de
flujo (FACS). La tinción se llevó a cabo en presencia de un 2% de
suero humano AB (Gibco BRL, Grand Island, NY, USA) a los receptores
Fc saturados de humano y ratón. Los reactivos usados en los
análisis de FACS fueron anticuerpos monoclonales
anti-HLA-ABC humanos conjugados con
isotiocianato de fluoresceína (FITC: Olympus, Lake Success, NY,
USA), y Leu4-biotinilado anti-CD3
(Becton-Dickinson, Mountain View, CA, USA). Después
de la incubación primaria con anticuerpos, las células se
analizaron usando citómetro de flujo EPICS.
Los niveles de inmunoglobulina humana se
analizaron mediante ELISA. Se recubrieron placas de microtitulación
de 96 pocillos de fondo plano (Corning Glass Works, Corning, NY,
USA) con anticuerpos de cabra antiinmunoglobulina humana
(Kirkegaard and Perry Laboratory, Gaithersburg, MD, USA) a 1
\mug/ml en PBS, se lavaron dos veces y se bloquearon con un 5% de
suero de cabra. Los pocillos se incubaron después con suero
obtenido a partir de los ratones quiméricos
huPBL-SCID, o una titración de IgM+IgG humanas
estándar (DAKO Corp., Santa Bárbara, CA, USA). Después de lavar
cuatro veces, se añadió el anticuerpo de cabra antiinmunoglobulina
humana conjugado con fosfatasa alcalina (Kirkegaard and Perry
Laboratory, Gaithersburg, MD, USA). Las placas se incubaron, y se
lavaron de nuevo. Después del lavado final, se añadió sustrato, y se
permitió desarrollarse a la enzima de reacción. OD (densidad óptica)
se midió a 402 nm. Los resultados se presentan en la tabla 3.
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(Tabla pasa a página
siguiente)
El tratamiento con anti-CD40 no
impidió la implantación de células T y B humanas, como se determinó
con análisis de FACS de células peritoneales, y la determinación de
niveles de suero de inmunoglobulina humana. En el experimento A, la
extensión de la implantación de las células humanas aparece
cuantitativamente menor en los animales tratados con
anti-CD40 que en los animales que recibieron msIgG,
tomando como base los valores en el suero de Ig humana. Sin
embargo, dado que los ratones quiméricos huPBL-SCID
que no recibieron anti-CD40 desarrollaron linfomas
de células B, los altos niveles de inmunoglobulina humana detectados
probablemente se deben al linfoma de células B,. En contraste con
el anti-CD40, el tratamiento con
anti-CD20 parece inhibir la implantación de las
células B, como se indica tanto en los menores porcentajes de
células B como en los niveles disminuidos de Ig humana en el
suero.
Este ejemplo ilustra el efecto de
anti-CD40 y msIgG en la implantación de células B
en los ratones SCID. Los ratones quiméricos se prepararon como se
describe en el ejemplo 5 anteriormente, excepto en que los PBL se
obtuvieron a partir de donantes negativos para EVB. No se esperó
así que las quimeras desarrollaran linfomas, proporcionando así una
indicación más segura de la implantación de células B normales. Las
quimeras se trataron bien con anti-CD40 o bien con
anti-CD20, y se determinaron los porcentajes de
células humanas T y B hallados en la cavidad peritoneal, y la
cantidad de inmunoglobulina humana se cuantificó en el suero como
se describe en el ejemplo 6. Los resultados se muestran en la tabla
5.
El tratamiento con anti-CD40
promoverá la implantación de las células B humanas, indicando que
las anti-CD40 tienen valores adicionales para el
tratamiento o la prevención de linfomas debidas a su capacidad para
eliminar las células del linfoma mientras deja las células B
normales.
Este ejemplo ilustra el efecto de los anticuerpos
para CD40 en el crecimiento de las células del melanoma humano
in vitro. El anticuerpo para el ligando de CD40 (M2) se
probó en un ensayo de proliferación sustancialmente como se
describe anteriormente, en el ejemplo 2, usando células del
melanoma humano M16, que expresan CD40.
Los resultados obtenidos se presentan en la
figura 5; los valores se presentan como porcentajes de inhibición
comparados con los fluidos sobrenadantes de control. La incubación
con el anticuerpo monoclonal anti CD40 M2 dio como resultado una
inhibición significativa de la proliferación de la línea celular
del melanoma humano M16 probada, con tan poco como 0,1 ng/ml
causando una inhibición de al menos un 50%. La inhibición
incrementada se observó con el incremento de la concentración de
anti.CD40.
Este ejemplo ilustra el efecto del ligando CD40
humano recombinante en el crecimiento de los linfomas de las células
B humanas en los ratones SCID. Los ratones SCID se obtuvieron, y
trataron sustancialmente como se describe en el ejemplo 4,
anteriormente. En el día 0, los ratones SCID se inyectaron bien
intraperitonealmente con 5 x 10^{6}RL o células TU2C. Los
destinatarios de las células tumorales recibieron después 100
\mul de fluido sobrenadante concentrado de células transfectadas
bien con un vector que codifica el ligando CD40 humano, o el vector
solo (control). Se probaron dos concentraciones del sobrenadante
concentrado que contiene anti-CD40: un concentrado
diez veces y un concentrado dos veces (10x y 2x, respectivamente).
Los sobrenadantes concentrados se administraron intraperitonealmente
cada tercer día durante un periodo de 15 días (total de 5
inyecciones), empezando en el día 3. Los ratones se sometieron a
seguimiento del desarrollo y progresión del tumor; a los ratones
moribundos se les hizo la eutanasia. Todos los ratones se sometieron
a necropsia en busca de evidencias del tumor. El hígado, el riñón y
los órganos linfoides se analizaron histológicamente para ver
presencia de células tumorales. Ambos análisis, paramétrico (prueba
de student) y no paramétrico (suma del rango de la prueba de
Wilcoxan), se llevaron a cabo para determinar si los grupos se
diferenciaban significativamente (p<0,05). Todos los experimentos
tuvieron 7-10 ratones por grupo, y se llevaron a
cabo 3 veces.
Los resultados de un experimento ejemplar
utilizando células RL se muestran en la figura 6. De forma similar
a los resultados obtenidos in vitro en el ejemplo 3, el
ligando recombinante CD40 inhibe el crecimiento in vivo de
las células tumorales en ratones SCID.
(1) INFORMACIÓN GENERAL
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- SOLICITANTE: ARMITAGE, RICHARD
\hskip3.9cmFANSLOW, WILLIAM
\hskip3.9cmLONGO, DAN L.
\hskip3.9cmMURPHY, WILLIAM
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TÍTULO DE LA INVENCIÓN: PROCEDIMIENTO DE PREVENCIÓN O TRATAMIENTO DE ENFERMEDAD CARACTERIZADA POR CÉLULAS NEOPLÁSTICAS QUE EXPRESAN CD40
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- NÚMERO DE SECUENCIAS: 2
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- DOMICILIO POSTAL:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- DOMICILIO: INMUNEX CORPORATION
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- CALLE: 51 UNIVERSITY STREET
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CIUDAD: SEATTLE
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- ESTADO: WASHINGTON
\vskip0.500000\baselineskip
- (E)
- PAÍS: USA
\vskip0.500000\baselineskip
- (F)
- CÓDIGO POSTAL: 98101
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- FORMA LEGIBLE POR ORDENADOR:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- TIPO DE MEDIO: DISQUETE
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- ORDENADOR: Macintosh
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- SISTEMA OPERATIVO: Sistema Apple Macintosh 7.1
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- SOFTWARE: Microsoft Word for Macintosh, versión #5.1ª
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- DATOS DE LA PRESENTE SOLICITUD:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NÚMERO DE SOLICITUD:
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- DATOS DE ARCHIVADO: 21 de diciembre de 1994
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CLASIFICACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vii)
- DATOS DE LA SOLICITUD PREVIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NÚMERO DE SOLICITUD: USSN 08/172.664
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- DATOS DE ARCHIVADO: 23 de diciembre de 1994
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CLASIFICACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (viii)
- INFORMACIÓN SOBRE EL ABOGADO/AGENTE:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE: Perkins, Patricia A.
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- NÚMERO DE REGISTRO: 34.693
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- REFERENCIA/NÚMERO DE CERTIFICADO: 2818
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- INFORMACIÓN PARA TELECOMUNICACIONES
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- TELÉFONO: (206) 587-0430
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- FAX: (206) 233-0644
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SECUENCIA Nº. 1:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 840 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- FORMA DE LA CADENA: cadena simple
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: cDNA
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- ORGANISMO: Homo sapiens
\vskip0.800000\baselineskip
- (vii)
- FUENTE INMEDIATA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- CLON: CD40-L
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE SECUENCIA: SEQ ID Nº.: 1:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SECUENCIA Nº. 2:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 261aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE SECUENCIA: SEQ. ID. Nº.: 2:
\vskip1.000000\baselineskip
Claims (6)
1. El uso de una proteína de unión a CD40 capaz
de unir CD40 e inhibir la unión de CD40 a CD40L en la preparación
de un agente para la prevención o tratamiento de una enfermedad
neoplásica caracterizada por células neoplásicas que
expresan CD40; caracterizado en que la molécula de unión a
CD40 es un anticuerpo monoclonal de ligando CD40 soluble
oligomérico.
2. El uso como se reivindica en la reivindicación
1 en el que el anticuerpo monoclonal es anticuerpo hCD40m2
(ATCCHB11459).
3. El uso como se reivindica en la reivindicación
1 en el que la proteína de unión a CD40 es un ligando de CD40
soluble oligomérico que comprende un péptido de unión a CD40
derivado de un dominio extracelular del ligando CD40, y un péptido
formador de oligómero.
4. El uso como se reivindica en la reivindicación
3, en el que el péptido que forma oligómero comprende un dominio Fc
de inmunoglobulina o un péptido cremallera.
5. El uso como se reivindica en la reivindicación
4, en el que el péptido cremallera forma un trímero en
disolución.
6. El uso como se reivindica en una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 5, en el que las células que expresan CD40
incluyen las células B del linfoma, células de melanoma o células
de carcinoma.
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| US6340459B1 (en) | 1995-12-01 | 2002-01-22 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Therapeutic applications for the anti-T-BAM (CD40-L) monoclonal antibody 5C8 in the treatment of reperfusion injury in non-transplant recipients |
| US6132978A (en) * | 1995-12-19 | 2000-10-17 | National Jewish Medical And Research Center | Method to regulate CD40 signaling |
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| NZ337073A (en) * | 1997-01-10 | 2001-01-26 | Biogen Inc | use of an anti CD40L compound to treat a patient with an autoimmune disease or chronic immune system disorder |
| CN1261803A (zh) * | 1997-07-01 | 2000-08-02 | 埃瑟若詹尼克斯公司 | 抗氧化剂增强对细胞过度增生性疾病的治疗 |
| AU2004199A (en) * | 1997-12-19 | 1999-07-12 | Immunex Corporation | Method for reducing susceptibility to hiv infection |
| US7338767B1 (en) * | 1998-01-14 | 2008-03-04 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Use of microphthalmia for diagnosis, prognosis and/or treatment of melanoma |
| WO1999036783A1 (en) * | 1998-01-14 | 1999-07-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Use of microphthalmia for diagnosis of melanoma |
| US5965712A (en) * | 1998-06-19 | 1999-10-12 | Virginia Commonwealth University | LZ-CD23 chimera for inhibition of IgE-mediated allergic disease |
| US6284742B1 (en) * | 1998-09-29 | 2001-09-04 | Uab Research Foundation | Immunomodulation by genetic modification of dendritic cells and B cells |
| EP1141240A4 (en) * | 1998-12-29 | 2003-09-10 | Univ Vermont | USE OF CD4 COUPLING TO CHANGE T-CELL RECEPTOR USE |
| EP1185627A2 (en) * | 1999-06-01 | 2002-03-13 | Cornell Research Foundation, Inc. | Activation of dendritic cells to enhance immunity |
| US6946129B1 (en) | 1999-06-08 | 2005-09-20 | Seattle Genetics, Inc. | Recombinant anti-CD40 antibody and uses thereof |
| AU6934600A (en) * | 1999-08-27 | 2001-03-26 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Cd40 ligand and cd40 agonist compositions and methods of use |
| US20020028178A1 (en) * | 2000-07-12 | 2002-03-07 | Nabil Hanna | Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications |
| MXPA02004599A (es) * | 1999-11-08 | 2002-10-23 | Idec Pharma Corp | Tratamiento de tumores malignos de celula b utilizando anticuerpos anti-cd40l en combinacion con anticuerpos anti-cd20 y/o agentes quimioterapeuticos y radioterapia. |
| EP1975182A1 (en) | 2000-02-01 | 2008-10-01 | PanGenetics B.V. | CD40-binding APC-activating molecules |
| PL357939A1 (en) | 2000-04-11 | 2004-08-09 | Genentech, Inc. | Multivalent antibodies and uses therefor |
| WO2001079555A2 (en) | 2000-04-14 | 2001-10-25 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Roles of jak/stat family members in tolerance induction |
| EP1286692A4 (en) * | 2000-04-25 | 2004-11-17 | Idec Pharma Corp | INTRATHECAL ADMINISTRATION OF RITUXIMAB FOR THE TREATMENT OF LYMPHOMAS OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM |
| EP1276501B9 (en) * | 2000-04-25 | 2007-01-24 | Immunex Corporation | Method for treatment of tumors using photodynamic therapy |
| EP1326896B1 (en) * | 2000-10-02 | 2010-11-24 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Human anti-cd40 antibodies |
| US20030202963A1 (en) * | 2000-10-12 | 2003-10-30 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method of treating cancer |
| GB0025132D0 (en) * | 2000-10-13 | 2000-11-29 | Medical Res Council | Method |
| US20030211107A1 (en) * | 2002-01-31 | 2003-11-13 | Kandasamy Hariharan | Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders |
| CN100574803C (zh) | 2001-01-31 | 2009-12-30 | 拜奥根Idec公司 | 免疫调节抗体在治疗肿瘤性疾病中的用途 |
| US20030103971A1 (en) * | 2001-11-09 | 2003-06-05 | Kandasamy Hariharan | Immunoregulatory antibodies and uses thereof |
| US20020159996A1 (en) | 2001-01-31 | 2002-10-31 | Kandasamy Hariharan | Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders |
| US20070065436A1 (en) * | 2001-01-31 | 2007-03-22 | Biogen Idec Inc. | Anti-cd80 antibody having adcc activity for adcc mediated killing of b cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies |
| JP4679035B2 (ja) * | 2001-04-02 | 2011-04-27 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 併用療法 |
| AR039067A1 (es) | 2001-11-09 | 2005-02-09 | Pfizer Prod Inc | Anticuerpos para cd40 |
| US7786282B2 (en) | 2001-12-06 | 2010-08-31 | The Regents Of The University Of California | Nucleic acid molecules encoding TNF-α ligand polypeptides having a CD154 domain |
| US20030180292A1 (en) * | 2002-03-14 | 2003-09-25 | Idec Pharmaceuticals | Treatment of B cell malignancies using anti-CD40L antibodies in combination with anti-CD20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy |
| EP2301575A1 (en) * | 2003-11-04 | 2011-03-30 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Methods of therapy for solid tumors expressing the CD40 cell-surface antigen |
| CA2544364A1 (en) | 2003-11-04 | 2005-05-19 | Chiron Corporation | Use of antagonist anti-cd40 antibodies for treatment of chronic lymphocytic leukemia |
| EP1684869B1 (en) | 2003-11-04 | 2011-07-20 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Methods of therapy for b cell-related cancers |
| DK1684805T3 (da) | 2003-11-04 | 2010-10-04 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Anvendelse af antagonist anti-CD40-monoklonale antistoffer til behandling af multipel myeloma |
| US8277810B2 (en) | 2003-11-04 | 2012-10-02 | Novartis Vaccines & Diagnostics, Inc. | Antagonist anti-CD40 antibodies |
| EP1682178B8 (en) | 2003-11-04 | 2010-09-01 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Methods of therapy for cancers expressing the cd40 antigen |
| US20050136055A1 (en) | 2003-12-22 | 2005-06-23 | Pfizer Inc | CD40 antibody formulation and methods |
| EP2312315A1 (en) | 2005-05-18 | 2011-04-20 | Novartis AG | Methods for diagnosis and treatment of diseases having an autoimmune and/or inflammatory component |
| ES2354865T3 (es) | 2005-05-26 | 2011-03-18 | Seattle Genetics, Inc. | Anticuerpos anti-cd40 humanizados y métodos para utilizarlos. |
| US8926979B2 (en) | 2005-11-01 | 2015-01-06 | Novartis Ag | Treatment of cancer or pre-malignant conditions using anti-CD40 antibodies |
| BRPI0710826A2 (pt) | 2006-04-21 | 2011-08-23 | Novartis Ag | composições farmacêuticas de anticorpo anti-cd40 antagonista |
| CN104357469B (zh) | 2006-05-03 | 2018-10-26 | 科罗拉多州立大学董事会 | Cd40激动剂抗体/1型干扰素协同佐剂组合、包含前述的结合物及其用途 |
| US20090074711A1 (en) * | 2006-09-07 | 2009-03-19 | University Of Southhampton | Human therapies using chimeric agonistic anti-human cd40 antibody |
| BRPI0820707A2 (pt) | 2007-11-07 | 2015-06-16 | Genentech Inc | Métodos e composição para avaliar a responsividade do linfoma de células b para o tratamento com anticorpos anti-cd40 |
| ES2605228T3 (es) | 2009-04-18 | 2017-03-13 | Genentech, Inc. | Métodos para evaluar la capacidad de respuesta de un linfoma de células B al tratamiento con anticuerpos anti-CD40 |
| AR083847A1 (es) | 2010-11-15 | 2013-03-27 | Novartis Ag | Variantes de fc (fragmento constante) silenciosas de los anticuerpos anti-cd40 |
| WO2012075111A1 (en) | 2010-11-30 | 2012-06-07 | Novartis Ag | Uses of anti-cd40 antibodies in combination therapy for b cell-related cancers |
| JP6114256B2 (ja) | 2011-04-21 | 2017-04-12 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ | Ｃｄ４０を拮抗する抗体ポリペプチド |
| JP6125489B2 (ja) | 2011-04-29 | 2017-05-10 | アペクシジェン， インコーポレイテッド | 抗ｃｄ４０抗体および使用方法 |
| DK2914627T3 (da) * | 2012-10-30 | 2021-07-12 | Apexigen Inc | Anti-cd40-antistoffer og fremgangsmåder til anvendelse |
| WO2015134988A1 (en) | 2014-03-07 | 2015-09-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Method of using antibody polypeptides that antagonize cd40 to treat ibd |
| HUE048284T2 (hu) | 2015-05-29 | 2020-07-28 | Abbvie Inc | Anti-CD40 antitestek és alkalmazásuk |
| ES3041500T3 (en) | 2016-03-10 | 2025-11-12 | Cg Oncology Inc | Methods of treating solid tumors by combination therapy |
| EP3445783A2 (en) | 2016-04-18 | 2019-02-27 | Celldex Therapeutics, Inc. | Agonistic antibodies that bind human cd40 and uses thereof |
| ES2913257T3 (es) * | 2016-04-27 | 2022-06-01 | Univ Osaka | Péptido que inhibe la colonización por bacterias patógenas e inhibidor de la colonización que incluye el mismo |
| BR112018076281A2 (pt) | 2016-06-20 | 2019-03-26 | Kymab Limited | imunocitocina, uso de uma imunocitocina, método, composição farmacêutica, método para tratar uma doença proliferativa em um animal, ácido nucleico, vetor, hospedeiro e anticorpo ou fragmento do mesmo |
| HRP20250696T1 (hr) | 2021-01-28 | 2025-08-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Sastavi i postupci za liječenje sindroma oslobađanja citokina |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5247069A (en) * | 1986-06-13 | 1993-09-21 | Oncogen | Ligands and methods for augmenting B-cell proliferation |
| US5182368A (en) * | 1986-06-13 | 1993-01-26 | Ledbetter Jeffrey A | Ligands and methods for augmenting B-cell proliferation |
| SE8701004D0 (sv) * | 1987-03-11 | 1987-03-11 | Astra Ab | Method for therapy of leukemias and certain other malignancies |
| DE3920358A1 (de) * | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
| KR100283541B1 (ko) * | 1991-10-25 | 2001-03-02 | 크리스토퍼 엘. 와이트, 스코트 지. 홀퀴스트, 스티븐 엘. 말라스카 | 신규 사이토킨 |
| US5540926A (en) * | 1992-09-04 | 1996-07-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Soluble and its use in B cell stimulation |
| GB9425060D0 (en) * | 1994-12-13 | 1995-02-08 | Univ Birmingham | Carcinoma treatment |
-
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