ES2296965T3

ES2296965T3 - Derivados de oxazol/tiazol como activadores del receptor pparh-alfa.

Info

Publication number: ES2296965T3
Application number: ES02747331T
Authority: ES
Inventors: Francoise Jeanne GlaxoSmithKline GELLIBERT
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 2001-05-31
Filing date: 2002-05-29
Publication date: 2008-05-01
Anticipated expiration: 2022-05-29
Also published as: US20050070517A1; NZ529754A; TWI245760B; ZA200309095B; KR20040007632A; CA2448205A1; CN1307166C; JP2004532267A; CN1633421A; GB0113231D0; MXPA03011032A; SI1399430T1; DE60223805D1; NO20035209D0; MY132656A; AR034051A1; KR100859591B1; BR0209785A; AU2002317765B2; DK1399430T3

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) y sales, solvatos y ésteres alquílicos C1-6 farmacéuticamente aceptables del mismo en la que X1 representa O; R1 y R2 son metilo; R3 y R4 representan independientemente H, halógeno, -CH3 y -OCH3; R5 representa H; X2 representa NH; Z es N e Y es S; R6 representa fenilo y está opcionalmente sustituido por uno o más de halógeno, CF3, alquilo C1-6 lineal o ramificado (opcionalmente sustituido por halógeno).

Description

Derivados de oxazol/tiazol como activadores del receptor PPARh-alfa.

La presente invención se refiere a ciertos compuestos novedosos. En particular, la presente invención se refiere a compuestos que activan el subtipo alfa del receptor activado por el proliferador de peroxixomas humano ("PPARh alfa"). La presente invención se refiere también a procedimientos para preparar los compuestos y al uso de los compuestos en la fabricación de un medicamento para la prevención o tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por PPAR alfa.

Se han asociado varios factores de riesgo independientes con la enfermedad cardiovascular. Estos incluyen hipertensión, niveles aumentados de fibrinógeno, elevados niveles de triglicéridos, LDL-colesterol elevado, colesterol total elevado y niveles bajos de HDL-colesterol. Los inhibidores de la HMG CoA reductasa ("estatinas") son útiles para tratar afecciones caracterizadas por niveles elevados de LDL-c. Se ha mostrado que disminuir LDL-c no es suficiente para reducir el riesgo de enfermedad cardiovascular en algunos pacientes, particularmente en aquellos con niveles normales de LDL-c. Este grupo de población se identifica por el factor de riesgo independiente de bajo LDL-c. La terapia farmacológica todavía no ha acometido con éxito el riesgo aumentado de enfermedad cardiovascular asociado a niveles bajos de LDL-c (es decir, actualmente no hay fármacos en el mercado que resulten útiles a la hora de elevar HDL-c en más de un 40%). (Bisgaier, C. L.; Pape, M. E. Curr. Pharm. Des. 1998, 4, 53-70).

El síndrome X (incluyendo síndrome metabólico) se define grosso modo como una colección de anormalidades que incluyen hiperinsulinemia, obesidad, niveles elevados de triglicéridos, ácido úrico, fibrinógeno, partículas de baja densidad LDL-c e inhibidor 1 del activador del plasminógeno (PAI-1) y niveles disminuidos de HDL-c.

NIDDM se describe como resistencia a la insulina, lo que a su vez provoca una producción anómala de glucosa y una disminución en la absorción de glucosa por el músculo esquelético. Estos factores llevan finalmente a la tolerancia glucosa dañada (IGT) y a la hiperinsulinemia.

Los receptores activados por el proliferador de peroxisomas (PPAR) son receptores huérfanos que pertenecen a la superfamilia de receptores de esteroides/retinoides de factores de transcripción activados por ligando. Véase, por ejemplo, Willson, T. M. y Wahli, W., Curr. Opin. Chem. Biol., (1997), Vol. 1, páginas 235-241.

Se han aislado tres receptores activados por el proliferador de peroxisomas en mamíferos y se han denominado PPAR alfa, PPAR gamma y PPAR delta (conocido también como NUC1 o PPAR beta). Estos PPAR regulan la expresión de genes diana uniéndose a elementos de secuencias de ADN, denominados elementos de respuesta a PPAR (PPRE). Hasta la fecha, se han identificado PPRE en los promotores de una serie de genes que codifican proteínas que regulan el metabolismo de lípidos, sugiriendo que los PPAR representan un papel fundamental en la cascada de señalización adipogénica y en la homeostasis de lípidos (H. Keller y W. Wahli, Trends Endocrin. Met 291-296, 4 (1993)). Los documentos WO 00/64876 y WO 01/16120 describen compuestos útiles como ligandos o moduladores del receptor PPAR respectivamente, y se refieren a los subtipos PPARh. Sin embargo no se proporciona información concerniente a las estructuras específicas con el subtipo PPAR.

Ciertos compuestos que activan o de otro modo interaccionan con uno o más de los PPAR han estado implicados en la regulación de los niveles de triglicéridos y colesterol en modelos animales. Véase, por ejemplo, las patentes de los EE.UU. 5.847.008 (Doebber y cols.) y 5.859.051 (Adams y cols.) y las publicaciones del PCT WO 97/28149 (Leibowitz y cols.) y WO 99/04815 (Shimokawa y cols.). Los documentos WO 00/64876 y WO 01/16120 describen compuestos útiles como ligandos o moduladores del receptor PPAR respectivamente, y se refieren a los subtipos PPARh. Sin embargo no se proporciona información concerniente a las estructuras específicas con los subtipos PPAR.

Los fibratos son una clase de fármacos que pueden disminuir los triglicéridos en suero en un 20-50%, disminuir LDL-c en un 10-15%, variar el tamaño de partículas LDL desde el LDL-c más aterogénico de baja densidad al de densidad normal, y aumentar HDL-c en un 10-15%. La evidencia experimental indica que la activación de PPAR alfa media los efectos de los fibratos sobre los lípidos en suero. Véase, por ejemplo, B. Staels y cols., Curr. Pharm. Des., 1-14, 3 (1), (1997). La activación de PPAR alfa da lugar a la transcripción de enzimas que aumentan el catabolismo de ácidos grasos y disminuyen la síntesis de ácidos grasos de novo en el hígado, dando lugar a una síntesis disminuida de triglicéridos y a una producción/secreción de VLDL-c disminuida. Además, la activación de PPAR alfa disminuye la producción de apoC-III. La reducción en apoC-III, un inhibidor de la actividad de LPL, aumenta el aclaramiento de VLDL-c. Véase, por ejemplo, J. Auwerx y cols., Atherosclerosis, (Shannon, Irel.), S 29-S 37, 124 (Suppl), (1996). Los ligandos de PPAR alfa pueden ser útiles para el tratamiento de dislipidemia y trastornos cardiovasculares, véase Fruchart, J. C., Duriez, P., y Staels, B., Curr. Opin. Lipidol. (1999), Vol. 10, páginas 245-257.

Según un primer aspecto de la invención se proporciona un compuesto de fórmula (I) y sales, solvatos y ésteres de alquilo C_{1-6} farmacéuticamente aceptables del mismo:

1

en la que

X_{1} representa O;

R^{1} y R^{2} son metilo;

R^{3} y R^{4} representan independientemente H, halógeno, -CH_{3} y -OCH_{3};

R^{5} representa H;

X_{2} representa NH;

Z es N e y es O;

R^{6} representa fenilo y está opcionalmente sustituido por uno o más de halógeno, CF_{3}, alquilo C_{1-6} lineal o ramificado (opcionalmente sustituido por halógeno).

Las enfermedades o afecciones mediadas por PPARh incluyen dislipidemia, incluyendo dislipidemia diabética asociada y dislipidemia mixta, síndrome X (tal y como se define en esta solicitud éste abarca el síndrome metabólico), insuficiencia cardiaca, hipercolesterolemia, enfermedad cardiovascular, incluyendo ateroesclerosis, arterioesclerosis e hipertrigliceridemia, diabetes mellitus de tipo II, diabetes de tipo I, resistencia a la insulina, hiperlipidemia, inflamación, enfermedades hiperproliferativas epiteliales, incluyendo eczema y soriasis, y afecciones asociadas con la mucosa e intestino y regulación del apetito e ingesta de comida en sujetos que padecen trastornos como por ejemplo obesidad, bulimia y anorexia nerviosa. En particular, los compuestos de esta invención son útiles en el tratamiento y prevención de enfermedades y afecciones cardiovasculares, incluyendo ateroesclerosis, arterioesclerosis, hipertrigliceridemia y dislipidemia mixta.

En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la invención, preferiblemente en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la invención para uso en terapia y, en particular, en medicina humana.

En otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por PPARh.

Tal y como se usa en la presente memoria descriptiva, "un compuesto de la invención" quiere decir un compuesto de fórmula (I) o una sal, solvato o ésteres de alquilo C_{1-6} farmacéuticamente aceptables del mismo.

Aunque los ésteres de alquilo C_{1-6} se incluyen en el alcance de esta invención, se prefieren los ácidos porque los datos sugieren que mientras que los ésteres son compuestos útiles, pueden ser realmente los ácido hacia los que se hidrolizan los que son los compuestos activos. Los ésteres que se hidrolizan fácilmente pueden producir el ácido carboxílico en las condiciones de ensayo o in vivo. Generalmente el ácido carboxílico es activo en los ensayos de unión y transfección transitoria, mientras que el éster no se une normalmente bien pero es activo en el ensayo de transfección transitoria presumiblemente debido a la hidrólisis. Los ésteres de alquilo C_{1-6} pueden ser de cadena lineal o de cadena ramificada. Se prefieren más los ésteres metílicos o etílicos.

Preferiblemente uno de R^{3} y R^{4} representa H, prefiriéndose más que R^{3} y R^{4} representen ambos H.

R^{6} es fenilo, opcionalmente sustituido. Preferiblemente R^{6} es mono o disustituido. Preferiblemente R^{6} es monosustituido en la posición para. Un sustituyente preferido es F, CF_{3}, etilo o metilo.

Aunque los grupos preferidos para cada variable se han recogido en una lista anteriormente por separado para cada variable, los compuestos preferidos de esta invención incluyen aquellos en los que varias o cada variable en la Fórmula (I) se seleccionan de los grupos preferidos, más preferidos o los más preferidos para cada variable. Por lo tanto, esta invención pretende incluir todas las combinaciones de grupos preferidos, más preferidos y los más preferidos.

Preferiblemente, los compuestos de fórmula (I) son agonistas de PPARh. Los agonistas de PPARh de fórmula (I) pueden ser agonistas de sólo un tipo ("agonistas selectivos"), agonistas para dos subtipos de PPAR ("agonistas duales") o agonistas para los tres subtipos ("pan agonistas"). Tal y como se usa en la presente memoria descriptiva, se entiende por "agonista" o "compuesto activante" o "activador" o similares, aquellos compuestos que tienen un pKi de al menos 6,0, preferiblemente al menos 7,0, respecto al PPAR relevante, por ejemplo PPARh \alpha en el ensayo de unión descrito a continuación, y el cual logra una activación de al menos un 50% del PPAR relevante en relación al control positivo indicado apropiado en el ensayo de transfección descrito a continuación a unas concentraciones de 10-5 M o menos. Más preferiblemente, los compuestos de esta invención logran una activación de un 50% de al menos un PPAR humano en el ensayo de transfección relevante a unas concentraciones de 10-6 M o menos. Más preferiblemente, los compuestos de esta invención logran una activación de un 50% de al menos un PPAR humano en el ensayo de transfección relevante a unas concentraciones de 10-7 M o menos.

Preferiblemente los compuestos de fórmula (I) son agonistas de PPARh \alpha.

De la forma más preferible, los compuestos de fórmula (I) son agonistas selectivos de PPARh \alpha. Tal y como se usa en la presente memoria descriptiva, un "agonista selectivo de PPARh alfa" es un agonista de PPARh alfa cuya CE_{50} para PPAR alfa es al menos 10 veces inferior que su CE_{50} para PPAR gamma y PPAR delta. Se puede hacer referencia a tales compuestos selectivos como "selectivos 10 veces". CE50 se define en el ensayo de transfección descrito a continuación y es la concentración a la que un compuesto logra un 50% de su actividad máxima. Los compuestos que más se prefieren son agonistas selectivos más de 100 veces de PPARh alfa.

Los compuestos preferidos de la invención incluyen:

éster etílico del ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-etilfenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico;

éster etílico del ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-fluorofenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico.

Los compuestos más preferidos de la invención incluyen:

Un compuesto particularmente preferido de la invención es el ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-etilfenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico.

Los expertos en la materia reconocerán que existen estereocentros en los compuestos de fórmula (I). Según esto, la presente invención incluye todos los posibles estereoisómeros e isómeros geométricos de fórmula (I), e incluye no sólo compuestos racémicos sino que esta invención pretende también abarcar cada uno de estos isómeros en sus formas racémicas, enriquecidas o purificadas. Cuando se desea un compuesto de fórmula (I) en forma de un único enantiómero puede obtenerse por resolución del producto final o por síntesis estereoespecífica usando un catalizador ópticamente activo o un sistema catalítico con ligandos ópticamente activos o material de partida isoméricamente puro o cualquier intermedio conveniente. La resolución del producto final, un intermedio o un material de partida pueden llevarse a cabo mediante cualquier procedimiento adecuado conocido en la materia. Véase por ejemplo Stereochemistry of Carbon Compounds by E. L. Eliel (Mcgraw Hill, 1962) y Tables of Resolving Agents por S. H. Wilen. Además, en situaciones en las que en las que son posibles los tautómeros de los compuestos de fórmula (I), la presente invención pretende incluir todas las formas tautoméricas de los compuestos. En particular, en muchos de los compuestos preferidos de esta invención el átomo de carbono al que están unidos R^{1} y R^{5} es quiral. En algunos de estos compuestos quirales las actividades en los numerosos receptores PPAR varían entre los isómero S y R. Cual de estos isómeros se prefiere depende de la utilidad deseada en particular del compuesto. En otras palabras, incluso con el mismo compuesto, es posible que el isómero S se prefiera para algunos usos mientras que el isómero R se prefiera para otros.

Los expertos en la técnica apreciarán también que los compuestos de la presente invención pueden utilizarse también en forma de una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos. Las sales fisiológicamente aceptables de los compuestos de fórmula (I) incluyen sales convencionales formadas a partir de ácidos o bases inorgánicos u orgánicos farmacéuticamente aceptables así como sales de adición de ácido de amonio cuaternario. Ejemplos más específicos de sales de ácido adecuadas incluyen clorhidrato, bromhidrato, sulfúrica, fosfórica, nítrica, perclórica, fumárica, acética, propiónica, succínica, glicólica, fórmica, láctica, maleica, tartárica, cítrica, pamoica, malónica, hidroximaleica, fenilacética, glutámica, benzoica, salicílica, fumárica, toluensulfónica, metanosulónica, naftalen-2-sulfónica, bencenosulfónica, hidroxinaftoica, yodhídrica, málica, esteroica, tánica y similares. Otros ácidos como por ejemplo el oxálico, aunque no en sí mismos farmacéuticamente aceptables, pueden ser útiles en la preparación de sales útiles como intermedios a la hora de obtener los compuestos de la invención y sus sales farmacéuticamente aceptables. Ejemplos más específicos de sales básicas adecuadas incluyen sales de sodio, litio, potasio, magnesio, aluminio, calcio, cinc, N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, N-metilglucamina y procaína. Las referencias de aquí en adelante a un compuesto según la invención incluyen compuestos de fórmula (I) y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos de la invención y sus derivados farmacéuticamente aceptables se administran convenientemente en forma de composiciones farmacéuticas. Tales composiciones pueden presentarse convenientemente para uso de un modo convencional formando una mezcla con uno o más vehículos o excipientes fisiológicamente aceptables.

Aunque es posible que los compuestos de la presente invención puedan administrarse para uso terapéutico en forma del fármaco bruto, es preferible presentar el ingrediente activo en forma de una formulación farmacéutica. El/los vehículo(s) debe(n) ser aceptable(s) en el sentido de ser compatible(s) con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial(es) para el receptor del/de los mismo(s).

Según esto, la presente invención proporciona además una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo junto con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, por lo tanto y, opcionalmente, otros ingredientes terapéuticos y/o profilácticos.

Las formulaciones incluyen aquellas adecuadas para administración oral, parenteral (incluyendo subcutánea, por ejemplo por inyección o por depósito, comprimido, intradérmica, intratecal, intramuscular, por ejemplo por depósito e intravenosa), rectal y tópica (incluyendo dérmica, bucal y sublingual), aunque la más adecuada de las rutas puede depender de, por ejemplo, la afección y el trastorno del receptor. Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en forma de dosis unitaria y pueden prepararse mediante cualquiera de los procedimientos perfectamente conocidos en la materia de la farmacia. Todos los procedimientos incluyen la etapa de asociar los compuestos ("ingredientes activos") con el vehículo que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan asociando uniforme e íntimamente el ingrediente activo con vehículos líquidos o con vehículos sólidos finamente divididos o ambos, y después, si fuera necesario, dando forma al producto en la formulación
deseada.

Las formulaciones adecuadas para administración oral pueden presentarse como unidades discretas como por ejemplo cápsulas, pastillas en forma de sello o comprimidos (por ejemplo comprimidos masticables, en particular para administración pediátrica) conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del ingrediente activo; en forma de polvo o gránulos; en forma de una solución o una suspensión en un líquido acuoso o en un líquido no acuoso; o en forma de una emulsión líquida de aceite en agua o una emulsión líquida de agua en aceite. El ingrediente activo puede presentarse también en forma de un bolo, electuario o pasta.

Un comprimido puede fabricarse por compresión o moldeado, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos fabricados por compresión pueden prepararse comprimiendo en una máquina adecuada el ingrediente activo en una forma suelta como por ejemplo un polvo o gránulos, opcionalmente mezclado con otros excipientes convencionales como por ejemplo agentes aglutinantes (por ejemplo jarabe, goma arábiga, gelatina, sorbitol, tragacanto, mucílago de almidón o polivinilpirrolidona), cargas (por ejemplo lactosa, azúcar, celulosa microcristalina, almidón de maíz, fosfato de calcio o sorbitol), lubricantes (por ejemplo estearato de magnesio, ácido esteárico, talco, polietilenglicol o sílice), disgregantes (por ejemplo almidón de patata o almidón glicolato de sodio) o agentes humectantes, como por ejemplo laurilsulfato de sodio. Los comprimidos moldeados pueden fabricarse moldeando de una máquina adecuada una mezcla del compuesto en forma de polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Los comprimidos pueden estar recubiertos o marcados opcionalmente y pueden formularse de modo que proporcionen una liberación lenta y controlada del ingrediente activo en los mismos. Los comprimidos pueden estar recubiertos según los procedimientos bien conocidos en la materia.

Alternativamente, los compuestos de la presente invención pueden prepararse en preparaciones líquidas orales como por ejemplo suspensiones acuosas u oleosas, soluciones, emulsiones, jarabes o elixires, por ejemplo. Además, las formulaciones que contienen estos compuestos pueden presentarse en forma de producto seco para constitución con agua u otro vehículo adecuado antes de su uso. Tales preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales como por ejemplo agentes en suspensión como por ejemplo jarabe de sorbitol, metilcelulosa, jarabe de glucosa/azúcar, gelatina, hidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa, gel de estearato de aluminio o grasas comestibles hidrogenadas; agentes emulsionantes como por ejemplo lecitina, mono-oleato de sorbitán o goma arábiga; vehículos no acuosos (los cuales pueden incluir aceites comestibles) como por ejemplo aceite de almendra, aceite de cacahuete fraccionado, ésteres oleosos, propilenglicol o alcohol etílico; y conservantes como por ejemplo p-hidroxibenzoatos metílicos o propílicos o ácido sórbico. Tales preparaciones pueden formularse también en forma de supositorios, por ejemplo conteniendo bases convencionales para supositorios como por ejemplo manteca de cacao u otros glicéridos.

Las formulaciones para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden contener antioxidantes, tampones, bacterioestáticos y solutos que hacen que la formulación se vuelva isotónica con la sangre del receptor tratado; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden incluir agentes en suspensión y agentes espesantes.

Las formulaciones pueden presentarse en contenedores de una sola dosis unitaria o de múltiples dosis, por ejemplo ampollas y viales cerrados herméticamente, y pueden almacenarse bajo condiciones de secado por congelación (liofilizados) requiriendo solamente la adición de un vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyección, inmediatamente antes de su uso. Pueden prepararse soluciones y suspensiones para inyección extemporánea a partir de polvos estériles, gránulos y comprimidos del tipo descrito previamente.

Las formulaciones para administración rectal pueden presentarse en forma de supositorio con los vehículos habituales como por ejemplo manteca de cacao, grasa sólida o polietilenglicol.

Las formulaciones para administración tópica en la boca, por ejemplo vía bucal o sublingual, incluyen grageas que comprenden el ingrediente activo en una base con sabor como por ejemplo sacarosa y goma arábiga o tragacanto, y pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base como por ejemplo gelatina y glicerina o sacarosa y goma arábiga.

Los compuestos pueden formularse en forma de preparaciones de liberación prolongada. Tales formulaciones de prolongada actuación pueden administrarse por implante (por ejemplo subcutáneo o intramuscularmente) o por inyección intramuscular. De esta forma, por ejemplo, los compuestos pueden formularse con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo en forma de emulsión en un aceite aceptable) o resinas de intercambio iónico, o en forma de derivados solubles en poca cantidad, por ejemplo, en forma de una sal soluble en poca cantidad.

Además los ingredientes mencionados anteriormente en particular, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo aquellos adecuados para administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.

Los expertos en la materia apreciarán que referencia a tratamiento en la presente memoria descriptiva se extiende a profilaxis así como al tratamiento de enfermedades o síntomas establecidos. Además, se apreciará que la cantidad de un compuesto de la invención requerida para su uso en el tratamiento variará con la naturaleza de la afección que se va a tratar y la edad y la afección del paciente, y en último caso, quedará a juicio del médico o veterinario. En general, sin embargo, las dosis empleadas para el tratamiento de humanos adultos estará típicamente en el intervalo de 0,02-5000 mg por día, preferiblemente 1-1500 mg por día. La dosis deseada puede presentarse convenientemente en una única dosis o como dosis divididas administradas a intervalos apropiados, por ejemplo como dos, tres, cuatro o más sub-dosis por día. Las formulaciones según la invención pueden contener entre un 0,1-99% del ingrediente activo, convenientemente entre un 30-95% para comprimidos y cápsulas y entre un 3-50% para preparaciones líquidas.

El compuesto de fórmula (I) para usar en la presente invención puede usarse en combinación con otros agentes terapéuticos como por ejemplo estatinas y/u otros fármacos reductores de los niveles de lípidos como por ejemplo los inhibidores de MTP y reguladores por incremento de LDLR. Los compuestos de la invención pueden usarse también en combinación con agentes antidiabéticos, por ejemplo metformina, sulfonilureas y/o agonistas de PPAR gamma (por ejemplo tiazolidindionas como por ejemplo Pioglitazone y Rosiglitazone). Los compuestos pueden usarse también en combinación con agentes antihipertensivos como por ejemplo antagonistas de los canales de calcio e inhibidores de ACE. La invención proporciona también en un aspecto adicional el uso de una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) con un agente terapéutico adicional en el tratamiento de una enfermedad mediada por PPARh alfa.

Cuando los compuestos de fórmula (I) se usan en combinación con otros agentes terapéuticos, los compuestos pueden administrarse secuencial o simultáneamente mediante cualquier ruta conveniente.

Las combinaciones a las que se hace referencia anteriormente pueden presentarse convenientemente para usar en forma de una formulación farmacéutica y, de esta forma, las formulaciones farmacéuticas que comprenden una combinación tal y como se define anteriormente óptimamente junto con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable comprenden un aspecto adicional de la invención. Los componentes individuales de tales combinaciones pueden administrarse secuencial o simultáneamente en formulaciones farmacéuticas por separado o combinadas.

Cuando se combinan en la misma formulación se apreciará que los dos compuestos deben ser estable y compatibles el uno con el otro y con los otros componentes de la formulación y pueden formularse para administración. Cuando se formulan por separado pueden proporcionarse en cualquier formulación conveniente, convenientemente de un modo tal que se conozca para tales compuestos en la técnica.

Cuando un compuesto de fórmula (I) se usa en combinación con un segundo agente terapéutico activo frente a la misma enfermedad mediada por PPARh, la dosis de cada compuesto puede diferir de aquella cuando el compuesto se usa solo. Los expertos en la materia apreciarán fácilmente las dosis apropiadas.

Los compuestos de esta invención pueden prepararse convenientemente mediante un procedimiento general en el que un resto como (A) se acopla a un ácido (B) usando una reacción de acoplamiento de péptidos o por acilación de (A) con un éster (C). R en la fórmula (C) es preferiblemente alquilo C_{1-6}. Nótese que esta síntesis se lleva a cabo con el grupo ácido del resto A protegido por R. De esta forma, mientras que R puede ser H, R es preferiblemente alquilo C_{1-6}, el cual puede hidrolizarse dando un ácido de Fórmula (I) o, si fuese fácilmente hidrolizable, puede administrarse el éster resultante. Los compuestos de fórmula (A), (B) y (C) pueden sintetizarse tal y como se demuestra en los Ejemplos a continuación. Los intermedios de este tipo pueden estar disponibles en el mercado o su preparación quedará perfectamente clara a un experto en la materia, por ejemplo mediante procedimientos análogos a aquellos descritos a continuación.

2

Una síntesis preferida de (A) cuando X_{1} es O y X_{2} es NH (R^{1}, R^{2} son metilo y R^{3}, R^{4}, R^{5} son H) es:

3

Nótese que esta síntesis puede llevarse a cabo con el ácido carboxílico B (procedimiento A) o con el éster C (procedimiento B). Por ejemplo, cuando X_{1} es O, X_{2} es NH, Y es S, Z es N, R^{1} = R^{2} = metilo, R^{3}=R^{4}=R^{5} = H y R^{6} es 4-etil-fenilo:

4

Cuando X1 y X2 son O, los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse por reacción de compuestos de fórmula (B) con compuestos de fórmula (A) con DIC/DMAP/NEt_{3}.

La invención se ilustra posteriormente por los intermedios y ejemplos sucesivos.

Intermedio 1

5

A una solución de 212,8 g (1,79 moles) de para-hidroxibenzonitrilo en 1,7 l de DMF (8 volúmenes) enfriada a 15ºC se añadieron por partes 121 g (3,04 moles, 1,7 equivalentes) de NaH dispersos en parafina (60%) en 35 minutos. Después de volver a temperatura ambiente, la mezcla se agitó durante 30 minutos y se añadieron lentamente 393 ml (2,68 mmoles, 1,5 equivalentes) de bromoisobutirato de etilo en 1 hora. Durante la adición, se mantuvo la temperatura inerte por debajo de 25ºC por enfriamiento porque se dio un efecto ligeramente exotérmico. La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente y se calentó a 80ºC durante 2 horas. Después de enfriar hasta una temperatura por debajo de 20ºC, el exceso de hidruro de sodio se destruyó por adición de 600 ml de una solución 1N de hidróxido de sodio. La solución acuosa se extrajo 3 veces con 1 litro de éter etílico. Las capas orgánicas combinadas se lavaron dos veces con 200 ml de una solución 1N de hidróxido de sodio (para eliminar trazas del para-hidroxibenzonitrilo) y 500 ml de salmuera. Después de secado sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró hasta sequedad, se decantó el residuo oleoso y se retiraron 33,5 g del aceite de parafina (la capa superior). Se estimó que los 189,9 g de residuo oleoso se mezclaran con 14,9 g de aceite de parafina residual. El intermedio bruto 1 se usó sin purificación adicional. El rendimiento se estimó que fue de aproximadamente un 42% (aproximadamente 175 g).

Intermedio 2

6

En un hidrogenador de 1 litro se hidrogenó una mezcla de de 59,3 g de intermedio 1 (0,254 moles, máximo),
43,6 ml (0,762 moles, 3 equivalentes) de ácido acético glacial y 6 g (10% peso/peso) de Pd/C al 10% en 250 ml de alcohol etílico a aproximadamente 203 kPa de hidrógeno y a temperatura ambiente. La reacción finalizó después de 8 horas cuando se absorbieron 8,7 litros de hidrógeno (volumen teórico: 11,4 litros). Después de la filtración del catalizador, la solución se evaporó hasta sequedad dando la sal acética del intermedio 2 (residuo oleoso). El residuo se vertió en 300 ml de agua (pH = 5) y la capa acuosa se extrajo dos veces con 200 ml de ciclohexano. Durante esta operación, apareció un sólido gomoso que se mantuvo en la capa acuosa (probablemente una parte de la sal acética). Después de la adición de 400 ml de acetato de etilo, la mezcla bifásica se enfrió hasta 15ºC y se trató con 500 ml de una solución 1N de hidróxido de sodio (hasta pH = 12). Después de la decantación, la capa acuosa se extrajo dos veces con 400 ml de acetato de etilo. La capa orgánica combinada se lavó con 200 ml de salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó a vacío dando 35,5 g de intermedio 2 bruto (aceite amarillo, rendimiento de un 58,9%), el cual se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional (pureza por CL/EM = aproximadamente un 90%).

Intermedio 3

7

A una solución de 200 g (1,23 moles, Avocado) de 4-etilfenilacetona en 800 ml de ácido acético, se añadieron gota a gota a 10-12ºC 61,8 ml (1 equivalente) de bromo en 600 ml de ácido acético durante 2 horas. Al final de la adición, la mezcla se agitó durante 5 minutos y después se trató con agua (2 litros). Después de enfriar, se añadieron 100 g de Na_{2}SO_{3} y la mezcla resultante se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla bifásica se decantó y la capa acuosa se extrajo dos veces con 1 litro de CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica completa se lavó con 1 litro de agua y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de filtración y concentración hasta sequedad, se obtuvieron 288 g de un aceite marrón (rendimiento de un 97%).

Intermedio 4

8

A una solución de 288 g (1,19 moles) del intermedio 3 en 2,9 litros de alcohol etílico se añadieron 158,8 g
(1 equivalente, Acros) de tiooxamato de etilo. La solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y después se puso a reflujo durante 1 hora. Después de la evaporación del alcohol etílico, el residuo oscuro se diluyó con 1 litro de agua y se extrajo con 3 x 500 ml de CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó dos veces con 500 ml de agua. Después de secado sobre Na_{2}SO_{4} y evaporación a presión reducida, se obtuvieron 32,6 g de un aceite bruto. La purificación por cromatografía con una mezcla 98:2 de éter de petróleo/acetato de etilo dio 30,9 g de intermedio 4 en forma de un aceite gris (rendimiento de un 60,6%).

Intermedio 5

\vskip1.000000\baselineskip

9

A una solución de 0,6 g de intermedio 4 (22 mmoles) en 10 ml de alcohol etílico se añadieron 6,5 ml (13 equivalentes) de NaOH 1N. La mezcla se agitó a reflujo durante 30 minutos y después se concentró a presión reducida. El residuo se diluyó en agua y se extrajo con éter etílico. La capa acuosa se acidificó con HCl 1N y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se evaporó a vacío dando 0,4 g de intermedio 5 en forma de un sólido amarillo (rendimiento de un 73,6%).

EM m/z: 248 (M^{+1}).

Intermedio 6

10

A una solución de 10 g (65,8 mmol, Aldrich) de 4-fluorofenilacetona en 100 ml de benceno, se añadieron gota a gota 10,5 g (1 equivalente) de bromo a 10ºC. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Al final de la reacción, se burbujeó azote en el interior de la mezcla de reacción. La mezcla se concentró a vacío y el aceite resultante se destiló dando 9 g de un aceite (rendimiento = 59%). P.e. = 130-135ºC a 2,67 kPa.

Intermedio 7

11

A una solución de 1 g (4,33 mmoles) de intermedio 6 en 30 ml de alcohol etílico se añadieron 0,54 g (1 equivalente, Acros) de tiooxamato de etilo. La solución se agitó a reflujo durante una noche. La solución se concentró a vacío y el residuo oleoso se diluyó con agua y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó a presión reducida. El aceite bruto resultante se sometió a cromatografía con una mezcla 99:1 de diclorometano/metanol dando 0,26 g del intermedio 7 en forma de un sólido marrón (rendimiento = 22,6%).
P.f. = 69-70ºC.

Intermedio 8

12

A una solución de 1,5 g de intermedio 7 (5,66 mmoles) en 50 ml de alcohol etílico se añadieron 20 ml de NaOH 1N. La mezcla se agitó a reflujo durante 30 minutos y después se concentró a presión reducida. El residuo se diluyó en agua y se extrajo con éter etílico. La capa acuosa se acidificó con HCl 1N y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se evaporó hasta sequedad dando el intermedio 7 en forma de un sólido blanquecino (0,81 g, rendimiento de un 60%). P.f.: 140ºC.

Ejemplo 1

13

Éster etílico del ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-etilfenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico

Procedimiento A

A una solución de 250 mg de intermedio 2 (1 mmol) en 10 ml de diclorometano se añadieron 174 mg de HOBT (1,3 equivalentes), 284 mg de EDC (1,3 equivalentes), 260 g de intermedio 5 (1 equivalente) y 130 mg de trietilamina (1,3 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. La mezcla se trató con hidróxido sódico diluido y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó con HCl diluido, agua y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación a vacío, el aceite bruto resultante se purificó por cromatografía con una mezcla 99:1 de diclorometano/metanol dando 100 mg de ejemplo 1 en forma de un aceite (rendimiento de un 21,5%).

Procedimiento B

A una solución de 26,93 g (97,9 mmoles) de intermedio 4 y 46,5 g (2 equivalentes) de intermedio 2 en 300 ml de alcohol etílico, se añadieron 85,3 ml (5 equivalentes) de diisopropiletilamina. La mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 2 días. Para completar la reacción, se añadieron 23,5 g (1 equivalente). La mezcla de reacción se mantuvo a reflujo durante 24 horas. La reacción se concentró a vacío, el residuo se diluyó con agua y se basificó con NaOH 1N. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 300 ml) y la capa orgánica se lavó con HCl 1N, una solución saturada de NaHCO_{3} y salmuera. La capa orgánica completa se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se evaporó hasta sequedad. El aceite bruto resultante se purificó por cromatografía con una mezcla 80:20 de éter de petróleo/acetato de etilo dando el ejemplo 1 en forma de un aceite incoloro (40,9 g, rendimiento = 89,6%).

RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,57 (m, 1H), 7,29 (d, 2H), 7,15-7,21 (m, 4H), 6,75 (d, 2H), 4,50 (d, 2H), 4,16 (c, 2H), 2,62 (c, 2H), 2,40 (s, 3H), 1,52 (s, 6H), 1,20 (s, 3H), 1,10 (s, 3H).

Ejemplo 2

14

Ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-etilfenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico

A una solución de 100 mg (0,21 mmoles) de ejemplo 1 en 5 ml de alcohol etílico se añadieron 0,63 ml (3 equivalentes) de NaOH (1N). La solución se agitó a reflujo durante 30 minutos. Después de eliminar el disolvente a presión reducida, el residuo se diluyó con agua y se acidificó con HCl 1N hasta pH = 1. La capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de filtración y concentración hasta sequedad, el residuo oleoso se organizó con una mezcla de CH_{2}Cl_{2} y pentano. El sólido se filtró y se secó en estufa a vacío dando el ejemplo 2 en forma de un sólido blanco (50 mg, rendimiento = 53,2%). P.f.: 159-162ºC. EM m/z 467 (M^{+1}).

RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,57 (m, 1H), 7,18 (d, 2H), 7,10 (d, 2H), 6,74 (d, 2H), 4,41 (d, 2H), 2,52 (c, 2H), 2,30 (s, 3H), 1,43 (s, 6H), 1,10 (s, 3H).

Ejemplo 3

15

Éster etílico del ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-fluorofenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico

A una solución de 320 mg de intermedio 2 (1,35 mmol) en 30 ml de dimetilformamida se añadieron 240 mg de HOBT (1,3 equivalentes), 340 mg de EDC (1,3 equivalentes), 320 g de intermedio 7 (1 equivalente) y 0,25 ml de trietilamina (1,3 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se evaporó a presión reducida, se diluyó con agua y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó a vacío. El aceite bruto resultante se purificó por cromatografía con una mezcla 99:1 de diclorometano/metanol dando 330 mg de ejemplo 1 en forma de un sólido blanco (rendimiento = 53,5%). P.f.: 97ºC. EM m/z 457 (M^{+1}).

Ejemplo 4

16

Ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-fluorofenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico

A una solución de 310 mg (0,68 mmol) de ejemplo 3 en 25 ml de tetrahidrofurano se añadieron 2 ml (5 equivalentes) de LiOH 1N. La solución se agitó a 50ºC durante 30 minutos. Para completar la reacción se añadieron 2 ml de NaOH 1N y la solución se agitó 1 hora a 50ºC. Después de eliminar el disolvente a presión reducida, el residuo se diluyó con agua y la capa acuosa se extrajo con éter dietílico. La capa acuosa se trató con 5,4 ml de HCl 1N y se extrajo con éter dietílico. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se evaporó a vacío obteniendo un sólido que recristalizó a partir de éter diisopropílico dando 230 mg de ejemplo 4 en forma de un sólido blanco (rendimiento de un 72%). P.f.: 122ºC. EM m/z 429 (M^{+1}).

Ensayo de unión

Los compuestos se sometieron a ensayo para ver su capacidad de unirse a PPARh gamma, PPARh alfa o PPARh delta usando un ensayo de proximidad por centelleo (SPA, Scintillation Proximity Assay). El dominio de unión del ligando (LBD, Ligand Binding Domain) a PPAR se expresó en E. coli como proteínas de fusión con extremo de poliHis y se purificó. El LBD se marcó después con biotina y se inmovilizó sobre perlas para centelleo por proximidad modificadas por estreptavidina. Las perlas se incubaron entonces con una cantidad constante del ligando radiactivo apropiado (^{3}H-BRL 49653 para PPAR gamma), ácido 2-(4-(2-(2,3-ditritio-1-heptil-3-(2,4-difluorofenil)ureido)etil)fenoxi)-2-metilbutanoico marcado radiactivamente para PPARh alfa (véase el documento WO 00/08002) y GW 2433 marcado radiactivamente para PPAR delta (véase Brown P. J. y cols, Chem. Biol. 1997, 4, 909-918, para la estructura y síntesis de este ligando) y concentraciones variables del compuestos de ensayo y después del equilibrio se midió la radiactividad unida a las perlas con un contador de centelleo. La cantidad de unión no específica se determinó mediante pocillos control que contenían 50 \muM del correspondiente ligando no marcado, y se restó de cada dato puntual. Para cada compuesto ensayado, se construyeron gráficas de concentración de ligando frente a CPM de ligando radiactivo y se estimaron los valores aparentes de Ki a partir de un ajuste por mínimos cuadrados no lineal de los datos asumiendo una unión competitiva simple. Los detalles de este ensayo se han recogido en más sitios (véase Blanchard, S. G. y cols., Development of a Scintillation Proximity Assay for Peroxisome Prolifferator-Activated Receptor gamma Ligand Binding Domain, Anal. Biochem. 1998, 257, 112-119).

Ensayo de transfección

Los siguientes ligandos se prepararon para el ensayo de transfección a continuación:

(i) ácido 2-{2-metil-4-[({(4-metil-2-[4-(trifluorometil)fenil]-13-tiazol-5-il}metil)sulfanil]fenoxi}acético

Este compuesto se usó como referencia para PPAR delta en los ensayos de transfección descritos a continuación y se preparó según el procedimiento recogido en el documento WO 200100603-A1.

(ii) ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-2-[4-(trifluorometilfenil]-tiazol-5-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico

Este compuesto se usó como referencia para PPAR alfa en los ensayos de transfección descritos a continuación y se preparó según el procedimiento recogido en el documento WO 200140207-A1 (y se reproduce a continuación).

Intermedio (a)

17

El mismo procedimiento que Stout, D. M. J. Med. Chem. 1983, 26(6), 808-13. A 4-metoxibencilamina (25 g, 0,18 moles; Aldrich) se añadió HBr al 46% en agua (106 ml, 0,9 moles; Aldrich).La reacción se dejó a reflujo durante una noche, después la reacción se enfrió a 0ºC y se neutralizó lentamente hasta pH 7 con KOH. Se permitió agitar la reacción durante 30 minutos, después se filtró el sólido y se secó. El sólido se volvió a disolver en MeOH caliente, se filtró y la solución se enfrió dando 19 g (85%) de intermedio 1. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 8,0 (s a, 1H), 7,2 (d, 2H), 6,75 (d, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,50 (s a, 2H).

Intermedio (b)

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18

Una solución de 2-cloroacetoacetato de etilo (35,3 g, 29,7 ml, 0,21 moles) y 4-(trifluorometil)tiobenzamida
(44 g, 0,21 moles) en EtOH (300 ml) se dejó a reflujo durante una noche. Después de enfriar a temperatura ambiente el disolvente se eliminó a vacío. El producto final (intermedio (b)) se recristalizó en una cantidad mínima de MeOH dando 40 g (59%) del producto final en forma de un sólido blanco. RMN ^{1}H (CDCl3): \delta 8,10 (d, 2H), 7,70 (d, 2H), 4,40 (c, 2H), 2,80 (s, 3H), 1,4 (t, 3H).

Intermedio (c)

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19

Al intermedio (b) (1,84 g, 5,8 mmol) en THF se añadió LiOH 1N (6 ml, 6 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente. Después de aproximadamente 3 horas, la reacción se neutralizó con HCl 1N, se extrajo 3 veces con 100 ml de AcOEt, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y el disolvente se eliminó a vacío dando 1,5 g (89%) de intermedio (b) en forma de un sólido blanco. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 13,55 (s a, 1H), 8,25 (d, 2H), 7,95 (d, 2H), 2,75 (s, 3H).

Intermedio (d)

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20

Al intermedio (c) (1 g, 7 mmoles) en CH_{2}Cl_{2}/DMF (1:1) se añadió HOBT (565 mg, 4,2 mmoles; Aldrich), EDC (800 mg, 4,2 mmoles; Aldrich) e intermedio 1 (860 mg, 7 mmoles) La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El disolvente se eliminó a vacío, se trató con agua y se extrajo tres veces con 100 ml de CH_{2}Cl_{2}. Las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con HCl 1N, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron y se evaporaron dando una mezcla (sustituido en N y sustituido en N y en O). La mezcla se disolvió en MeOH y se trató con NaOH 1N. La reacción se agitó a 50ºC durante 18 horas. El disolvente se eliminó a vacío, se disolvió en CH_{2}Cl_{2}, se lavó con agua y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. El disolvente se evaporó y el residuo se sometió a cromatografía (CH_{2}Cl_{2}/MeOH: 99/1) dando 610 mg (47%) de intermedio 6 en forma de un sólido blanco. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}): 9,30 (s, 1H), 8,80 (t, 1H), 8,20 (d, 2H), 6,70 (d, 2H), 4,35 (d, 2H), 2,6 (s, 3H).

\newpage

Intermedio (e)

21

Éster etílico del ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-2-[4-(trifluorometilfenil]-tiazol-5-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico

Al intermedio (d) (710 mg, 1,81 mmoles) en DMF (50 ml) se añadió K_{2}CO_{3} (275 mg, 1,99 mmoles) seguido de 2-bromo-2-metilpropionato de etilo (280 \mul, 1,91 mmoles; Aldrich) y la reacción se calentó a 80ºC. Después de 18 horas, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se trató con agua (200 ml), se extrajo 3 veces con 50 ml de CH_{2}Cl_{2}, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se sometió a cromatografía (CH_{2}Cl_{2}/MeOH: 99/1) dando 680 mg (77%) de Ejemplo 1 en forma de un aceite transparente. RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,95 (d, 2H), 7,60 (d, 2H), 7,15 (d, 2H), 6,75 (d, 2H), 6,05 (t, 1H), 4,45 (d, 2H), 4,15 (c, 2H), 2,65 (s, 3H), 1,50 (s, 6H), 1,20 (t, 3H).

22

Ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-2-[4-(trifluorometilfenil]-tiazol-5-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico

Al intermedio (e) (680 mg, 1,39 mmoles) en MeOH se añadió NaOH 1N (1,6 ml, 1,6 mmoles) y la reacción se agitó a 60ºC. Después de 18 horas, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y el disolvente se evaporó. El residuo se trató con HCl 1N, se extrajo 3 veces con 20 ml de THF y el disolvente se eliminó a vacío. Precipitaron 500 mg (75%) del compuesto de título en forma de un sólido blanco en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y pentano. P.f.: cambia la forma entre 60-70ºC; CL/EM (m/z): 477,22 (100%, AP-), 479,12 (100%, AP+); composición analítica: C_{23}H_{21}F_{3}N_{2}O_{4}S: C 5,71 (57,73), H 4,56 (4,42), N 5,77 (5,85), S 6,15 (6,70).

(iii) 5-{4-[2-(Metil-piridin-2-il-amino)-etoxi]-bencil}-tiazolidin-2,4-diona

Este compuesto se usó como referencia para PPAR gamma en el ensayo de transfección descrito a continuación y se preparó según el procedimiento recogido en J. Med. Chem. 1994, 37 (23), 3977.

Los compuestos se rastrearon para ver su potencia funcional en ensayos de transfección transitoria en células
CV-1 para ver su capacidad para activar los subtipos PPAR (ensayo de transactivación). Se utilizó un sistema de receptor quimérico previamente establecido con el fin de permitir la comparación de la actividad transcripcional relativa de los subtipos de receptores en el mismo gen diana y para evitar que la activación endógena del receptor complique la interpretación de resultados. Véase, por ejemplo, Lehmann, J. M.; Moore, L. B.; Smith-Oliver,T. A.; Wilkinson, W. O.; Willson, T. M.; Kliewer, S. A., An antidiabetic thiazolidinedione is a high affinity ligand for peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR gamma), J. Biol. Chem., 1995, 270, 12953-6. Los dominios de unión de ligando para PPAR alfa, PPAR gamma y PPAR delta humanos y murinos se condensaron cada uno con el dominio de unión al ADN del factor de transcripción de levadura GAL4. Las células CV-1 se transfectaron transitoriamente con vectores de expresión para la respectiva quimera de PPAR junto con una construcción reportera que contenía cinco copias del sitio de unión al ADN de GAL4 conduciendo a la expresión de fosfatasa alcalina secretada de placente (SPAP, secreted placental, alkaline phosphatase) y \beta-galactosidasa. Después de 16 horas, el medio se cambió a medio DME suplementado con suero fetal bovino delipidado al 10% y el compuesto de ensayo a la concentración apropiada. Después de 24 horas adicionales, se prepararon los extractos celulares y se sometieron a ensayo para ver la actividad fosfatasa alcalina y \beta-galactosidasa. La actividad fosfatasa alcalina se corrigió con el fin de aumentar la eficacia de la transfección usando la actividad \beta-galactosidasa como patrón interno (véase, por ejemplo, Kliewer, S. A. y cols., Cell 83, 813-819 (1995)). Se usó Rosiglitazone (BRL 49653) como control positivo en el ensayo de PPARh gamma. El control positivo en los ensayos de PPARh alfa fue el ácido 2-(2-metil-3-[3-{3-(4-ciclohexilamino)-[6-(4-fluorofenilpiperazin-1-il)][1,3,5]triazin-2-ilamino}propil]feniltio)-2-metilpropiónico. El control positivo en los ensayos de PPARh alfa fue el ácido 2-{2-metil-4-[({(4-metil-2-[4-(trifluorometil)fenil]-13-tiazol-5-il}metil)sulfanil]fenoxi}acético.

Las actividades en tres subtipos de PPARh se recogen en la tabla a continuación para los más preferidos de los compuestos y se expresan en nanomolar.

23

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I) y sales, solvatos y ésteres alquílicos C_{1-6} farmacéuticamente aceptables del mismo

24

en la que

X_{1} representa O;

R^{1} y R^{2} son metilo;

R^{3} y R^{4} representan independientemente H, halógeno, -CH_{3} y -OCH_{3};

R^{5} representa H;

X_{2} representa NH;

Z es N e Y es S;

2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que uno de R^{3} y R^{4} es H.

3. Un compuesto según cualquiera de la reivindicaciones 2, en el que R^{3} y R^{4} son ambos H.

4. Un compuesto según las reivindicaciones 1-3, en el que R^{6} es fenilo.

5. Un compuesto según la reivindicación 4, en el que R^{6} está monosustituido.

6. Un compuesto según la reivindicación 5, en el que R^{6} está monosustituido en la posición para.

7. Un compuesto según la reivindicación 6, en el que el sustituyente es F, CF_{3}, metilo o etilo.

8. Un compuesto según la reivindicación 1 seleccionado del grupo compuesto por:

Éster etílico del ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-etilfenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico.

Ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-fluorofenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico.

Ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-etilfenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico.

9. Ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-5-[4-etilfenil]tiazol-2-ilcarbonil)amino]metil}fenoxi]propiónico.

10. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-9 para su uso en terapia.

11. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-9.

12. Una composición farmacéutica según la reivindicación 11 que comprende además un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

13. Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-9 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o afección medida por PPARh alfa.

14. Uso según la reivindicación 13, en el que la enfermedad o afección medida por PPARh alfa es dislipidemia, síndrome X, insuficiencia cardiaca, hipercolesterolemia, enfermedad cardiovascular, diabetes mellitus de tipo II, diabetes de tipo I, resistencia a la insulina, hiperlipidemia, obesidad, anorexia, bulimia y anorexia nerviosa.