[go: up one dir, main page]

EA005161B1 - Предупреждение потери и восстановление костной массы некоторыми агонистами простагландина - Google Patents

Предупреждение потери и восстановление костной массы некоторыми агонистами простагландина Download PDF

Info

Publication number
EA005161B1
EA005161B1 EA200200806A EA200200806A EA005161B1 EA 005161 B1 EA005161 B1 EA 005161B1 EA 200200806 A EA200200806 A EA 200200806A EA 200200806 A EA200200806 A EA 200200806A EA 005161 B1 EA005161 B1 EA 005161B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
phenyl
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
acid
hydroxy
Prior art date
Application number
EA200200806A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200200806A1 (ru
Inventor
Кимберли О'Киф Кэмерон
Хуа Зу Ки
Брюс Аллен Лефкер
Роберт Луис Росэйти
Дейвид Дуэйн Томпсон
Original Assignee
Пфайзер Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Пфайзер Инк. filed Critical Пфайзер Инк.
Publication of EA200200806A1 publication Critical patent/EA200200806A1/ru
Publication of EA005161B1 publication Critical patent/EA005161B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/263—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/32—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C07C235/34—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C311/03—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C311/04—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to acyclic carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C311/03—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C311/06—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to acyclic carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/46—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having at least one of the nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, further bound to other hetero atoms
    • C07C323/49—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having at least one of the nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, further bound to other hetero atoms to sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/14—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C07D213/42—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms having hetero atoms attached to the substituent nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/18—Halogen atoms or nitro radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/26—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/04—1,2,3-Triazoles; Hydrogenated 1,2,3-triazoles
    • C07D249/06—1,2,3-Triazoles; Hydrogenated 1,2,3-triazoles with aryl radicals directly attached to ring atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/12—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/28—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/52—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/68—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/81—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/50—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/58—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/10—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes
    • C07D319/14—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D319/16—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D319/18—Ethylenedioxybenzenes, not substituted on the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/20—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/24—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/30—Hetero atoms other than halogen
    • C07D333/34—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/38—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Heterocyclic Compounds That Contain Two Or More Ring Oxygen Atoms (AREA)
  • Quinoline Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Abstract

Агонисты простагландина формулы (I), где Y, Q, Z, R, Ar и Rтакие, как определено в формуле изобретения, способы применения таких агонистов простагландина, фармацевтические композиции, содержащие такие агонисты простагландина и наборы, которые можно применять для лечения костных расстройств, включая остеопороз.

Description

Предпосылки изобретения
Настоящее изобретение относится к агонистам простагландина, к фармацевтическим композициям, содержащим такие агонисты, и к применению таких агонистов для предупреждения потери кости, либо восстановления или увеличения костной массы, в том числе к лечению состояний, которые свидетельствуют о низкой костной массе у млекопитающих, в том числе у людей.
Остеопороз является системным скелетным заболеванием, которое характеризуется низкой костной массой и деградацией костной ткани с последующим увеличением хрупкости кости и восприимчивости к перелому. В США это состояние поражает более 25 миллионов человек и является причиной более 1,3 миллионов переломов каждый год, в том числе 500000 переломов позвоночника, 250000 переломов шейки бедра и 240000 переломов запястья ежегодно. Переломы шейки бедра являются наиболее серьезными последствиями остеопороза, при этом в течение года умирают 5-20% пациентов, а свыше 50% оставшихся в живых имеют ухудшение физического состояния.
Наиболее сильно подвергаются риску остеопороза люди пожилого возраста, и поэтому предсказывают, что эта проблема будет существенно усиливаться со старением населения. Ожидается, что общее число переломов в мире увеличится в три раза за ближайшие 60 лет, а по оценкам некоторого исследования в 2050 году в мире будет 4,5 миллиона случаев перелома шейки бедра.
Женщины подвергаются риску остеопороза более сильно, чем мужчины. Они испытывают резкое ускорение потери кости в течение 5 лет после менопаузы. Другие факторы, которые увеличивают риск, включают в себя курение, злоупотребление алкоголем, сидячий образ жизни и недостаточное потребление кальция.
В настоящее время существует два основных типа фармакотерапии для лечения остеопороза. Первым является применение антирезорбтивных соединений для уменьшения резорбции костной ткани.
Эстроген является примером антирезорбтивного агента. Известно, что эстроген сокращает переломы. Кроме того, описано, что эстроген, особенно при пероральном приеме, понижает уровни плазмы липопротеинов низкой плотности (ЛНП) и увеличивает уровни плазмы полезных липопротеинов высокой плотности (ЛВП) (В1аск е! а1., ЕР0605193А1). Однако, недостаток эстрогена заключается в том, что в восстановленном остеопорозном скелете он не возвращает кость обратно до уровней молодого взрослого человека. Более того, длительная терапия эстрогеном была, однако, причастна к ряду расстройств, включая увеличение риска рака матки, рака эндометрия и, вероятно, рака груди, заставляя многих женщин избегать этого лечения. Существенные нежелательные эффекты, связанные с терапией эстрогеном, подкрепляют необходимость разработки аль тернативных терапий для остеопороза, которые обладают желательным действием на сыворотку ЛНП, но не вызывают нежелательных эффектов.
Вторым типом фармакотерапии для лечения остеопороза является применение анаболических агентов для стимулирования образования кости и увеличения костной массы. Предполагают, что этот класс агентов восстанавливает кость до установленного остеопорозного скелета.
Известны (патент США № 4112236) некоторые интерфениленовые 8-аза-9-диоксотиа-11,12секопростагландины для лечения пациентов с нарушенной деятельностью почек.
Известны (патенты Великобритании
1478281, 1479156 и патенты США № 4175203, 4055596, 4175203, 3987091 и 3991106) некоторые агонисты простагландина, которые можно применять, например, в качестве почечных вазодилаторов.
Известны (патент США № 4033996) некоторые 8-аза-9-оксо(и диоксо)тиа-11,12-секопростагландины, которые можно применять в качестве почечных вазодилаторов для предотвращения образования тромбов, для индуцирования высвобождения гормона роста и в качестве регуляторов иммунного ответа.
Известны (патент Франции № 897566) некоторые производные аминокислот для лечения неврологических, психических или сердечно-сосудистых заболеваний.
Известна (1. Отд. Сйеш. 26; 1961; 1437) Νацетил-М-бензил-п-аминофенилмеркаптоуксусная кислота.
Обнаружено, что кроме остеопороза, только в Америке приблизительно 20-25 миллионов женщин и увеличивающееся число мужчин имеют переломы позвоночника как следствие пониженной костной массы, в дополнение к 250000 случаям переломов шейки бедра, о которых сообщают ежегодно. Последний случай ассоциируется с 12%-ной смертностью в течение первых двух лет и с 30% пациентов, которые требуют после перелома домашнего ухода под наблюдением медсестры. Несмотря на то, что это уже имеет важное значение, предполагают, что экономические и медицинские последствия выздоровления из-за медленного или неполного заживления этих переломов кости усиливаются вследствие старения основного населения. Несмотря на разработку нескольких обнадеживающих терапий (бисфосфонаты, например) для предотвращения потери кости с возрастом и, таким образом, уменьшения вероятности переломов, приводящих к ослаблению здоровья, эти терапии не предназначены для восстановления костной массы, если перелом уже произошел.
Было показано, что эстроген улучшает качество заживления аппендикулярных переломов (Во1аибет е! а1., 38'1' Аппиа1 Меейид ОгШоребю Кезеатсй 8ос1е!у). Таким образом, заместительная терапия эстрогенами, по-видимому, может быть способом восстановления после перело мов. Однако, пациенты соглашаются с терапией эстрогеном сравнительно редко из-за побочных эффектов, в том числе возобновления менструации, мастодинии, увеличения риска рака матки, увеличения риска рака груди, и сопутствующего применения прогестина. Кроме того, мужчины, видимо, возражают против терапии эстрогеном. Очевидно, что существует потребность в терапии, которая приносила бы пользу пациентам, которые страдают от переломов, приводящих к ослаблению здоровья, или которые имеют низкую костную массу, и с которой соглашалось бы большее количество пациентов.
Хотя существует множество терапий остеопороза, остается потребность в альтернативных терапиях остеопороза и продолжаются поиски в этой области. Кроме того, есть потребность в терапиях для излечивания переломов кости.
Сущность изобретения
Данное изобретение относится к соединению формулы I
Υ--(СН2)„—0(0ζ о.—ζ
ΝΖ I К4---Аг---К5 , или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарству, где Υ представляет собой -Н или (С3-С7)циклоалкил;
η равно числу от 0 до 5;
группировка Υ-(ΟΗ2)η-Ο(Θ)- возможно моно-, ди- или тризамещена по углероду независимо гидрокси или галогеном-;
представляет собой -(С4-С8)алкилен- или -(С1 -С5)алкилен-Х,
Х представляет собой 5- или 6-членное ароматическое кольцо, которое возможно имеет один гетероатом, независимо выбранный из кислорода и серы;
Ζ представляет собой карбоксил или (С1С6)алкоксикарбонил;
К4 представляет собой (С1-С8)алкилен;
Аг является полностью ненасыщенным 58-членным кольцом или бициклическим кольцом, состоящим из двух конденсированных частично насыщенных, полностью насыщенных или полностью ненасыщенных 5- или 6членных колец, взятых независимо, которое возможно имеет от одного до четырех гетероатомов, представляющих собой кислород;
К5 представляет собой -Н;
указанная группировка Аг возможно замещена по углероду на одном кольце, если группировка является моноциклической, или на одном или обоих кольцах, если группировка является бициклической, заместителями в количестве вплоть до трех, независимо выбранными из К1, К2 и К3, где К1, К2 и К3 представляют собой галоген- или (С1-С7)алкил;
К1, К2 и К3 возможно независимо монозамещены по углероду гидрокси; и при условии, что когда К4 представляет собой (С2-С4)алкилен, а Аг представляет собой циклопент-1-ил, циклогекс-1-ил, циклогепт-1-ил или циклоокт-1-ил, тогда указанные (С5С8)циклоалкильные заместители не замещены по положению один гидрокси, и при условии, что 6-[(3-фенилпропил)-(2пропилпентаноил)амино]капроновая кислота и ее этиловый эфир не включены.
К предпочтительным относятся соединения по изобретению, как они определены выше, где Х представляет собой тиенил и Аг представляет собой фенил, бензо [Ь]фуранил или 2,3дигидробензо [1,4] диоксинил, 2,3-дигидробензофуранил.
Также предпочтительными являются соединения по изобретению, где Х представляет собой тиенил и Аг представляет собой фенил. Из них предпочтительны соединения, где группировка СН3-(СН2)П-С(О)- возможно моно-, диили тризамещена по углероду независимо галогеном-; К4 представляет собой метилен и К1 представляет собой хлор-, фтор- или (С1-С4) алкил.
К предпочтительным соединениям по изобретению также относятся соединения, охарактеризованные выше, где К4 представляет собой метилен и Аг представляет собой фенил, где -Аг замещен по меньшей мере К1; К1 представляет собой (С1-С7)алкил, возможно монозамещенный гидрокси. Из них особенно предпочтительными являются соединения, где η равно 2; О представляет собой н-гексилен; Ζ представляет собой карбоксил; К4 представляет собой метилен и группировка -Аг-К5 представляет собой 4-(н-1гидроксигексил)фенил.
Согласно еще одному аспекту изобретения, предпочтительны соединения, охарактеризованные выше, где группировка СН3-(СН2)ПС(О)- возможно моно-, ди- или тризамещена независимо по углероду галогеном-.
Согласно еще одному аспекту предпочтительными являются соединения по изобретению, охарактеризованные выше, где группировка СН3-(СН2)П-С(О)- возможно моно-, ди- или тризамещена по углероду независимо галогеном- и Аг представляет собой фенил.
Также, согласно следующему аспекту изобретения предложен способ лечения млекопитающего, имеющего состояние, при котором наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства. Предпочтительно, лечению подвергают женщин после менопаузы и мужчин старше 60 лет. Кроме того, не обращая внимания на возраст, лечат отдельных людей, которые обладают значительно уменьшенной костной массой, т. е. >1,5 8.6. (стандартное отклонение) ниже уровней среднего молодого человека.
В частности, этим способом предлагается лечить остеопороз, остеотомию, детскую идиопатическую потерю кости или потерю кости, связанную с периодонтитом, в частности им предлагается лечить остеопороз у человека. Данным способом можно лечить остеопороз, индуцированный глюкокортикоидом, остеопороз, индуцированный гипертиреоидизмом, остеопороз, индуцированный иммобилизацией, остеопороз, индуцированный гепарином или остеопороз, индуцированный иммуносупрессивным средством.
Согласно следующему аспекту изобретения предложен способ наращивания и сохранения костной массы у млекопитающего, при котором млекопитающему вводят терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства. Данным способом, в частности, осуществляют заживление кости после лицевой реконструкции, верхнечелюстной реконструкции или нижнечелюстной реконструкции, индуцируют вертебральный синостоз или усиливают вытяжение длинных костей, усиливают скорость заживления костного трансплантата или усиливают врастание протеза. В частности, данным способом лечат перелом кости у человека.
Согласно еще одному аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, которая содержит терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель. Предпочтительно данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, определенным выше, для лечения остеопороза, где терапевтически эффективным количеством является количество, которое лечит остеопороз.
Данное изобретение также относится к фармацевтической композиции для наращивания костной массы, которая содержит количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, которое увеличивает костную массу, и фармацевтически приемлемый носитель. Также предложена фармацевтическая композиция, как она определена непосредственно выше, для лечения перелома кости, где используют количество соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, которое лечит перелом кости.
Согласно еще одному аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция для лечения состояния, при котором наблюдается низкая костная масса, у млекопитающего, которая содержит количество соединения по данному изобретению или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, которое лечит состояние низкой костной массы, и фармацевтически приемлемый носитель.
Еще одним аспектом данного изобретения являются комбинации соединений формулы I или их фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и других соединений, таких как описано ниже.
Еще один аспект данного изобретения относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и антирезорбтивный агент, и к применению таких композиций для лечения (например для профилактики) состояний, при которых наблюдается низкая костная масса, в том числе остеопороза, у млекопитающих (например у человека, в особенности у женщин), или к применению таких композиций для других применений в целях наращивания костной массы.
Комбинации данного изобретения включают в себя терапевтически эффективное количество первого соединения, причем первое соединение является соединением формулы I или его фармацевтически приемлемой солью или пролекарством; и терапевтически эффективное количество второго соединения, причем второе соединение является антирезорбтивным агентом, таким как агонист/антагонист эстрогена или бифосфонат.
Предпочтительные агонисты/антагонисты эстрогена включают в себя дролоксифен, ралоксифен, тамоксифен, 4-гидрокситамоксифен, торемифен, центхроман, левормелоксифен, идоксифен,
6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)бензил]нафталин-2-ол, {4-[2-(2-аза-бицикло [2.2.1] гепт-2-ил)этокси]фенил}-[6-гидрокси2-(4-гидроксифенил)бензо [Ь]тиофен-3-ил] метанон, цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2ол;
(-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-1-[6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-фенил6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин и их фармацевтически приемлемые соли.
Особенно предпочтительные агонисты/ антагонисты эстрогена включают в себя дролоксифен;
цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2ол;
(-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-ил-этокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-1- [6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил] -5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-фенил6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин и их фармацевтически приемлемые соли.
Предпочтительные бифосфонаты включают в себя тилудроновую кислоту, алендроновую кислоту, ибандроновую кислоту, ризедроновую кислоту, этидроновую кислоту, клодроновую кислоту и памидроновую кислоту и их фармацевтически приемлемые соли.
Так, согласно еще одному аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства;
б) терапевтически эффективное количество антирезорбтивного агента и
в) фармацевтический носитель.
Предпочтительной, в частности, является такая вышеописанная фармацевтическая композиция, где антирезорбтивным агентом является дролоксифен, ралоксифен, тамоксифен, 4гидрокситамоксифен, торемифен, центхроман, левормелоксифен, идоксифен,
6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)бензил]нафталин-2-ол, {4-[2-(2-аза-бицикло [2.2.1] гепт-2-ил) это кси]фенил}-[6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)бензо[Ь]тиофен-3-ил]метанон, цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2ол;
(-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-1- [6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил] -5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол или
1-(4'-пирролидинолэтоксифенил)-2-фенил6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин или их фармацевтически приемлемая соль.
Предпочтительно, если в вышеуказанной композиции антирезорбтивным агентом является тилудроновая кислота, алендроновая кислота, ибандроновая кислота, ризедроновая кислота, этидроновая кислота, клодроновая кислота и памидроновая кислота или их фармацевтически приемлемая соль.
Согласно еще одному аспекту изобретения предложен способ лечения млекопитающего, имеющего состояние, при котором наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства; и
б) терапевтически эффективное количество антирезорбтивного агента.
В данном способ антирезорбтивным агентом является, предпочтительно, дролоксифен, ралоксифен, тамоксифен, 4-гидрокситамоксифен, торемифен, центхроман, левормелоксифен, идоксифен,
6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)бензил]нафталин-2-ол, {4-[2-(2-азабицикло [2.2.1] гепт-2-ил)этокси]фенил}-[6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)бензо [Ь]тиофен-3 -ил] метанон, цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2ол;
(-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-1-[6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол или
1-(4'-пирролидинолэтоксифенил)-2-фенил6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин или их фармацевтически приемлемая соль. Также предпочтительно, если в данном способе антирезорбтивным агентом является тилудроновая кислота, алендроновая кислота, ибандроновая кислота, ризедроновая кислота, этидроновая кислота, клодроновая кислота и памидроновая кислота или фармацевтически приемлемая соль.
Другим предпочтительным аспектом данного способа является способ, где первое соединение и второе соединение по существу вводят одновременно.
Другим предпочтительным аспектом данного способа является способ, где первое соединение вводят в течение периода от приблизительно одной недели до приблизительно трех лет.
Возможно, что за введением первого соединения следует введение второго соединения, где второе соединение является агонистом/антагонистом эстрогена, в течение периода от приблизительно трех месяцев до приблизительно трех лет без введения первого соединения во время второго периода от приблизительно трех месяцев до приблизительно трех лет.
Альтернативно, за введением первого соединения следует введение второго соединения, где второе соединение является агонистом/антагонистом эстрогена, в течение периода более чем приблизительно три года без введения первого соединения в течение более длительного времени, чем приблизительно трехлетний период.
Также согласно данному изобретению, предложен набор, содержащий:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель в первой стандартной лекарственной форме;
б) терапевтически эффективное количество антирезорбтивного агента и фармацевтически приемлемый носитель во второй стандартной лекарственной форме и
в) контейнер, предназначенный для указанных первой и второй лекарственных форм.
Предпочтительным является вышеописанный набор, где антирезорбтивным агентом является дролоксифен, ралоксифен, тамоксифен, 4-гидрокситамоксифен, торемифен, центхроман, левормелоксифен, идоксифен,
6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)бензил]нафталин-2-ол, {4-[2-(2-азабицикло [2.2.1] гепт-2-ил)этокси]фенил}-[6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил) бензо [Ь]тиофен-3-ил]метанон, цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2ол;
(-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-1- [6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил] -5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол или
1-(4'-пирролидинолэтоксифенил)-2-фенил6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин или их фармацевтически приемлемая соль;
еще предпочтительнее набор, где антирезорбтивным агентом является тилудроновая кислота, алендроновая кислота, ибандроновая кислота, ризедроновая кислота, этидроновая кислота, клодроновая кислота и памидроновая кислота или их фармацевтически приемлемая соль.
Также предложена фармацевтическая композиция, содержащая:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства;
б) терапевтически эффективное количество анаболического агента, иного чем соединение по п.1, или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство и
в) фармацевтический носитель.
Предпочтительно, в данной композиции анаболическим агентом, иным чем соединение по изобретению, является ЮР-1, возможно с ЮР-1-связывающим белком 3, простагландин, агонист/антагонист простагландина, фторид натрия, паратиреоидный гормон (ПТГ), активные фрагменты паратиреоидного гормона, гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста, или их фармацевтически приемлемая соль.
Согласно еще одному аспекту предложен способ лечения млекопитающего, у которого наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и
б) терапевтически эффективное количество костного анаболического агента, иного чем соединение по п.1, или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
Предпочтительно, в таком способе анаболическим агентом, иным чем соединение по п.1, является ЮР-1, простагландин, агонист/антагонист простагландина, фторид натрия, паратиреоидный гормон (ПТГ), активные фрагменты паратиреоидного гормона, гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста, или их фармацевтически приемлемая соль.
Согласно следующему аспекту изобретения предложен набор, включающий в себя:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель в первой стандартной лекарственной форме;
б) терапевтически эффективное количество анаболического агента, иного чем соединение по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство и фармацевтически приемлемый носитель во второй стандартной лекарственной форме и
в) контейнер, предназначенный для указанных первой и второй лекарственных форм.
Согласно еще одному аспекту изобретения предложен набор, описанный выше, где анаболическим агентом, иным чем соединение по п.1, является ЮЕ-1, простагландин, агонист/антагонист простагландина, фторид натрия, паратиреоидный гормон (ПТГ), активные фрагменты паратиреоидного гормона, гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста, или их фармацевтически приемлемая соль.
Также, согласно изобретению, предложена фармацевтическая композиция, содержащая:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства;
б) терапевтически эффективное количество 2-(4-метоксифенил)-3-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)фенокси]бензо[Ь]тиофен-6-ола или его фармацевтически приемлемой соли или 3-[4(1,2-дифенилбут-1 -енил)фенил]акриловой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и
в) фармацевтический носитель.
Также предложен способ лечения млекопитающего, имеющего состояние, при котором наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и
б) терапевтически эффективное количество 2-(4-метоксифенил)-3-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенокси]бензо[Ь]тиофен-6-ола или его фармацевтически приемлемой соли, или 3-[4(1,2-дифенилбут-1-енил)фенил]акриловой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли.
Согласно еще одному аспекту предложен набор, включающий в себя:
а) терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель в первой стандартной лекарственной форме;
б) терапевтически эффективное количество 2-(4-метоксифенил)-3-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенокси]бензо[Ь]тиофен-6-ола или его фармацевтически приемлемой соли или 3-[4(1,2-дифенилбут-1-енил)фенил]акриловой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель во второй стандартной лекарственной форме и
в) контейнер, предназначенный для указанных первой и второй лекарственных форм.
Также предложен способ лечения млекопитающего, нуждающегося в регенерации почки, при котором указанному млекопитающему вводят терапевтически эффективное количество соединения по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства.
Предпочтительной дозой является приблизительно от 0,001 до 100 мг/кг/день соединения по изобретению, как оно описано выше, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства. Особенно предпочтительной дозой является приблизительно от 0,01 до 10 мг/кг/день соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства.
Выражение состояние(я), при котором наблюдается низкая костная масса относится к состоянию, при котором уровень костной массы ниже нормального для конкретного возраста, как определено стандартами Всемирной Организации Здравоохранения Оценка риска переломов и ее применение для скрининга постменопаузального остеопороза (1994). Доклад Рабочей группы Всемирной Организации Здравоохранения. Серия технических докладов Всемирной Организации Здравоохранения 843 (\Уог1б НеаНй ОгдашхаНоп 81ибу \Уог1б НеаНй ϋΓβαηίζαΙίοη. Лккеккшеп! οί ЕтасШте К1кк апб ίΐκ Лррйсайоп 1о Зегеепшд ίοτ Рок1шепораика1 Ок1еороток1к (1994). Керой οί а \Уог1б НеаИй Огβ;·ιηίζ;·ιΙίοη 81ибу Сгоир. \Уог1б НеаИЪ О^даη^ζайоп Тес11шса1 8епек 843).
Состояние(я), при котором наблюдается низкая костная масса охватывает первичный и вторичный остеопорозы. Вторичный остеопороз включает в себя остеопороз, индуцированный глюкокортикоидом, остеопороз, индуцированный гипертиреоидизмом, остеопороз, индуцированный иммобилизацией, остеопороз, индуцированный гепарином, или остеопороз, индуцированный иммуносупрессивным средством. Охвачены также периодонтальное заболевание, альвеолярная потеря кости, остеотомия и детская идиопатическая потеря кости. Состояние(я), при котором наблюдается низкая костная масса также включает в себя долговременные осложнения остеопороза, такие как искривление позвоночника, потеря роста и протезная хирургия.
Выражение состояние(я), при котором наблюдается низкая костная масса относится к млекопитающему, о котором известно, что оно имеет значительно более высокий, чем средний, шанс развития таких заболеваний, как описано выше, включая остеопороз (например к женщинам после менопаузы, мужчинам старше 60 лет).
Другие применения для наращивания или усиления костной массы включают в себя увеличение скорости заживления переломов кости, усиление успешных трансплантатов кости, заживления кости после лицевой реконструкции, или верхнечелюстной реконструкции, или нижнечелюстной реконструкции, врастания протеза, вертебрального синостоза или вытяжения длинных костей.
Квалифицированные специалисты поймут, что термин костная масса по существу относится к массе кости на единицу площади, которую иногда (хотя и не совсем корректно) считают минеральной плотностью кости.
Термин лечение или лечить, используемый в этом документе, включает в себя превентивное (например профилактическое) и паллиативное лечение.
Фармацевтически приемлемый означает, что носитель, разбавитель, эксципиенты и/или соль должны быть совместимыми с другими ингредиентами фармацевтического препарата и не причинять вреда реципиенту.
Выражение пролекарство относится к соединениям, которые являются предшественниками лекарственных средств и после введения высвобождают лекарственное средство ίη νίνο химическим или физиологическим способом (например, пролекарство при физиологическом рН, или под действием фермента превращается в требуемую форму лекарственного средства). Типичные пролекарства при расщеплении высвобождают соответствующую свободную кислоту, и такие гидролизуемые эфиробразующие остатки соединений формулы I включают в себя, но не ограничены заместителями, в которых группировка Ζ представляет собой независимо карбоксил, а свободный водород заменен на (С1-С4)алкил, (С2-С7)алканоилоксиметил, 1-(алканоилокси)этил, имеющие от 4 до 9 атомов углерода, 1-метил-1-(алканоилокси)этил, имеющий от 5 до 10 атомов углерода, алкоксикарбонилоксиметил, имеющий от 3 до 6 атомов углерода, 1-(алкоксикарбонилокси)этил, имеющий от 4 до 7 атомов углерода, 1-метил-1-(алкоксикарбонилокси)этил, имеющий от 5 до 8 атомов углерода, №(алкоксикарбонил)аминометил, имеющий от 3 до 9 атомов углерода, 1-(Ы-(алкоксикарбонил)амино)этил, имеющий от 4 до 10 атомов углерода, 3-фталидил, 4кротонолактонил, гамма-бутиролактон-4-ил, ди^Ы-(С1-С2)алкиламино(С2-С3)алкил (такой как Ьдиметиламинометил), карбамоил-(С1-С2)алкил,
Н№ди(С1-С2)алкилкарбамоил-(С1-С2)алкил и пиперидино-, пирролидино- или морфолино(С2С3)алкил.
Типичные 5-6-членные ароматические кольца, возможно имеющие один или два гетероатома, независимо выбранные из кислорода, азота и серы (т.е. Х кольца), представляют собой фенил, фурил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил и пиразинил.
Типичные частично насыщенные, полностью насыщенные или полностью ненасыщенные 5-8-членные кольца, возможно имеющие от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из кислорода, серы и азота (т.е. Аг, Аг1 и Аг2), представляют собой циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил и фенил. Кроме того, типичными пятичленными кольцами являются фурил, тиенил, 2Н-пирролил, 3Нпирролил, пирролил, 2-пирролинил, 3-пирроли нил, пирролидинил, 1,3-диоксоланил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, 2Н-имидазолил, 2имидазолинил, имидазолидинил, пиразолил, 2пиразолинил, пиразолидинил, изоксазолил, изотиазолил, 1,2-дитиолил, 1,3-дитиолил, 3Н-1,2оксатиолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 1,2,3,4-оксатриазолил, 1,2,3,5-оксатриазолил, 31-1-1,2,3-диоксазолил, 1,2,4-диоксазолил, 1,3,2-диоксазолил, 1,3,4-диоксазолил, 5Н-
1.2.5- оксатиазолил и 1,3-оксатиолил.
Кроме того, типичными шестичленными кольцами являются 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, пиридинил, пиперидинил, 1,2-диоксинил, 1,3диоксинил, 1,4-диоксанил, морфолинил, 1,4дитианил, тиоморфолинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, пиперазинил, 1,3,5триазинил, 1,2,4-триазинил, 1,2,3-триазинил,
1.3.5- тритианил, 4Н-1,2-оксазинил, 2Н-1,3оксазинил, 6Н-1,3-оксазинил, 6Н-1,2-оксазинил, 1,4-оксазинил, 2Н-1,2-оксазинил, 4Н-1,4оксазинил, 1,2,5-оксатиазинил, 1,4-оксазинил, оизоксазинил, п-изоксазинил, 1,2,5-оксатиазинил,
1.2.6- оксатиазинил, 1,4,2-оксадиазинил и
1,3,5,2-оксадиазинил.
Кроме того, типичными шестичленными кольцами являются азепинил, оксепинил, тиепинил и 1,2,4-диазепинил.
Кроме того, типичными восьмичленными кольцами являются циклооктил, циклооктенил и циклооктадиенил.
Типичные бициклические кольца, состоящие из двух конденсированных частично насыщенных, полностью насыщенных или полностью ненасыщенных пяти- или шестичленных колец, взятых независимо, возможно имеющие от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из азота, серы и кислорода, представляют собой индолизинил, индолил, изоиндолил, 3Ниндолил, 1Н-изоиндолил, индолинил, циклопента(Ь)пиридинил, пирано(3,4-Ь)пирролил, бензофурил, изобензофурил, бензо(Ь)тиенил, бензо(с)тиенил, 1Н-индазолил, индоксазинил, бензоксазолил, антранилил, бензимидазолил, бензтиазолил, пуринил, 4Н-хинолизинил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, 1,8-нафтиридинил, птеридинил, инденил, изоинденил, нафтил, тетралинил, декалинил, 2Н-1-бензопиранил, пиридо(3,4-Ь)-пиридинил, пиридо(3,2-Ь)-пиридинил, пиридо(4,3-Ь)-пиридинил, 2Н-1,3-бензоксазинил, 2Н-1,4-бензоксазинил, 1Н-2,3-бензоксазинил, 4Н-3,1-бензоксазинил, 2Н-1,2-бензоксазинил и 4Н-1,4-бензоксазинил.
Под алкиленом подразумевается насыщенный углеводород (неразветвленный или разветвленный), в котором с каждого из концевых атомов углерода удален атом водорода. Примерами таких групп (предполагается, что указанная длина охватывает конкретный пример) яв ляются метилен, этилен, пропилен, бутилен, пентилен, гексилен, гептилен.
Под галогеном- подразумевается хлор-, бром-, йод- или фтор-.
Под алкилом подразумевается неразветвленный насыщенный углеводород или разветвленный насыщенный углеводород. Примерами таких алкильных групп (предполагается, что указанная длина охватывает конкретный пример) являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, трет-пентил, 1-метилбутил, 2метилбутил, 3-метилбутил, гексил, изогексил, гептил и октил.
Под алкокси подразумевается неразветвленный насыщенный алкил или разветвленный насыщенный алкил, связанный через окси. Примерами таких алкоксигрупп (предполагается, что указанная длина охватывает конкретный пример) являются метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, трет-бутокси, пентокси, изопентокси, неопентокси, трет-пентокси, гексокси, изогексокси, гептокси и октокси.
Если не оговорено особо, группировка Аг, определенная выше, возможно замещена (например, простое указание заместителя, такого как К1, в подродовом или зависимом пункте формулы изобретения не означает, что Аг всегда замещен группировкой К1, если не сформулировано, что группировка Аг замещена К1).
Следует понимать, что если карбоциклическая или гетероциклическая группировка могут быть связаны или иным образом присоединены к обозначенному субстрату посредством различающихся кольцевых атомов без обозначения конкретного места присоединения, то подразумеваются все возможные положения, посредством ли атома углерода, или, например, посредством трехвалентного атома азота. Например, термин пиридил означает 2-, 3- или 4-пиридил, термин тиенил означает 2- или 3-тиенил и так далее.
Выражение фармацевтически приемлемая соль относится к нетоксичным анионным солям, содержащим анионы, такие как (но не ограничены ими) хлорид, бромид, йодид, сульфат, бисульфат, фосфат, ацетат, малеат, фумарат, оксалат, лактат, тартрат, цитрат, глюконат, метансульфонат и 4-толуолсульфонат. Это выражение также относится к нетоксичным катионным солям, таким как (но не ограничены ими) соли натрия, калия, кальция, магния, аммония или соли протонированных бензатина (Ν,Ν'дибензилэтилендиамина), холина, этаноламина, диэтаноламина, этилендиамина, мегламина (Νметилглюкамина), бенетамина (Ν-бензилфенетиламина), пиперазина или трометамина (2амино-2-гидроксиметил-1,3-пропандиола).
Выражения реакционно-инертный растворитель и инертный растворитель, используемые в этом документе, относятся к растворителю, который не взаимодействует с исходными веществами, реагентами, промежуточными со единениями или продуктами в такой степени, чтобы неблагоприятно действовать на выход требуемого продукта.
Заключенный в скобки знак минус или плюс, используемый в этом документе в номенклатуре, обозначает направление, в котором конкретный стереоизомер вращает плоскость поляризованного света.
Химику средней квалификации будет ясно, что некоторые соединения по данному изобретению будут содержать один или более чем один атом, который может находиться в конкретной стереохимической или геометрической конфигурации, что приводит к стереоизомерам и конфигурационным изомерам. Все такие изомеры и их смеси охвачены данным изобретением. Охвачены также гидраты соединений по данному изобретению.
Химику средней квалификации будет ясно, что некоторые комбинации заместителей, содержащих гетероатом, перечисленные в данном изобретении, определяют соединения, которые будут менее стабильны в физиологических условиях (например соединения, содержащие ацетальную или аминальную связи). Соответственно, такие соединения менее предпочтительны.
ДТТ означает дитиотреит. ДМСО означает диметилсульфоксид. ЕДТА означает этилендиаминтетрауксусную кислоту.
Результатом способов и соединений по данному изобретению является образование кости, приводящий к снижению процента переломов. Данное изобретение вносит значительный вклад в технику, предлагая соединения и способы, которые усиливают образование кости, результатом которого является предупреждение, задержка и/или регрессия остеопороза и родственных костных расстройств.
Другие особенности и преимущества будут очевидны из подробного описания изобретения и формулы изобретения.
Подробное описание изобретения
Вообще, соединения по данному изобретению можно получать способами, которые включают в себя способы, известные в химической технике, особенно в свете описания, которое содержится в этом документе. Некоторые способы получения соединений по данному изобретению предложены в качестве дополнительных особенностей изобретения и иллюстрируются следующими схемами реакций. Другие способы могут быть описаны в экспериментальной части.
Некоторые заместители (например, карбоксил) лучше всего могут быть получены посредством превращения другой функциональной группы (примерами для карбоксила являются гидроксил или карбоксальдегид) на более поздней стадии последовательности синтеза.
Вообще, соединения формулы I могут быть получены последовательным алкилированием амида двумя соответствующими алкилга логенидами; или восстановительным аминированием амина, содержащего необходимую кислотную функциональную группу (подходящим образом защищенную), альдегидом с последующим взаимодействием с ацилирующим агентом, с последующим гидролизом.
Обычно, соединения формулы I могут быть получены в соответствии со способами, изображенными на схемах 1 и 2, приведенных ниже. Как правило, последовательности включают в себя последовательное алкилирование соответствующего амида формулы 1 двумя соответствующими алкилгалогенидами или алкилсульфонатами. Следует отметить, что схемы 1 и 2 различаются только порядком присоединения двух алкилирующих агентов. Обычно, порядок алкилирования выбирают в зависимости от реакционной способности электрофильной боковой цепи. Для того, чтобы уменьшить степень диалкилирования, которое происходит на первой стадии алкилирования, первой обычно вводят менее реакционноспособную электрофильную боковую цепь. Один из алкилирующих агентов обычно содержит карбоновую кислоту или изостерное соединение кислоты, замаскированные подходящим образом соответствующей защитной группой. На схемах 1 и 2 предшественником кислоты формулы 3 является эфир карбоновой кислоты, где К. представляет собой или неразветвленный низший алкил, предпочтительно метильную или этильную, или третбутильную, или фенильную группу. Другие кислотные изостеры можно использовать путем соответствующего видоизменения этих схем с использованием способов, известных квалифицированным специалистам, (например схема 6, которая описывает получение тетразола). Типичными алкилирующими агентами являются первичные, вторичные, бензильные или аллильные, и предпочтительно, алкилбромиды или алкилйодиды.
Амид формулы 1 превращают в его анион с использованием сильного основания, такого как гидрид натрия, диизопропиламид лития, бис (триметилсилил)амид лития, бис(триметилсилил) амид калия, трет-бутилат калия и т.д., в апротонном растворителе, таком как диметилформамид, тетрагидрофуран (ТГФ) или смесь диметилформамид/бензол, при температуре от приблизительно -78°С до приблизительно 100°С. Полученный анион алкилируют соответствующим алкилгалогенидом или алкилсульфонатом формулы 2 или 3 (где X' представляет собой галогенид или сульфонат) при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 0°С с образованием соответствующего алкилированного соединения формулы 4 или 5. В некоторых случаях в результате диалкилирования амида или сульфонамида получают разные количества побочного продукта, которые могут быть удалены с использованием хроматографических методик, предпочтительно флэшхроматографией (XV.С. δίίΐΐ, М. Кайи, А. Мйга, 1. Огд. Сйет. 43, 2923, 1978). Соединения формулы 4 и 5 снова превращают в анион с использованием подходящего основания, такого как гидрид натрия, бис(триметилсилил)амид лития, диизопропиламид лития, бис(триметилсилил) амид калия, трет-бутилат калия или карбонат калия, в апротонном растворителе, таком как диметилформамид, тетрагидрофуран (ТГФ), смесь диметилформамид/бензол или ацетон, при температуре от приблизительно -78°С до приблизительно 100°С. Алкилирование (такое, как описано выше) соответствующим вторичным алкилгалогенидом или алкилсульфонатом (соединение формулы 3 или 2) дает соответствующий сложный эфир формулы 6. Сложный эфир формулы 6 гидролизуют до соответствующей кислоты формулы I (в случаях, где К представляет собой метил или этил) в разбавленном водном основном растворе (предпочтительно гидроксиде натрия или калия в водном этаноле или метаноле), гидроксиде лития в водноспиртовом растворителе, водном тетрагидрофуране при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 80°С, или описанными способами (Рго1ес1шд Сгоирк ίη Огдашс 8уи1йек1к, 8есоиб Εάίίίοη, Τ.ν. Сгееие аиб Р.С.М. ΧνιιΚ ίοΐιη \νίΚ\· аиб 8оик, 1ис., 1991).
СХЕМА 1
А = У-(СН2)„-С(О)К = -К4
М = -Аг-К5
СХЕМА 2
1.0сновфнич
А--ΝΗ2 -----------►
2. х·—о—С0гК
А---N--О·
Н
ι.Οοκο&χ-καβ
-со2я -------------2. х’—к—м
1. ΝβΟΗ
2. Н3О*
А = У-(СН2)„-С(О)Κ = -Η4 М = -Аг-К5
Соединения формулы I также могут быть получены из аминов (например, схемы 3-4). Обычно соответствующие исходные амины (соединения формул 9 и 10) являются промышленными продуктами или могут быть получены способами, известными квалифицированным специалистам (Тйе СйепиЧгу о! Агшио, Шгоко аиб Шго Сотроиибк аиб 1Не1г Оепуабуек. Еб.8. Ра1а1, 1. \νίΚ\·. Ыете Уогк, 1982). Например, в соответствии со схемами 3 и 4 исходные амины могут быть получены из соответствующих нитрилов формулы 7 и 8. Нитрилы являются или коммерчески доступ19 ными, или могут быть получены способами, известными квалифицированным специалистам (Каррарой, ТНс СНснийгу о! 111с Суапо Сгоир. 1п1сг5с1спсс. Ыете Уогк, 1970; ΡαΙαί аиб Каррарой, ТНс Сйсткйу о! Еипсйоиа1 Сгоирк, р1.2, Уйсу, Νσν Уогк, 1983). Нитрил формулы 7 или 8 восстанавливают таким восстановителем, как комплекс боран-тетрагидрофуран, комплекс боранметилсульфид, алюмогидрид лития, или гидрируют в присутствии никеля Ренея или платинового или палладиевого катализатора в протонном растворителе, таком как метанол или этанол, при температуре от прибилизительно 0 до приблизительно 50°С. Полученный амин формулы 9 или 10 превращают или в сульфонамид, или в амид формулы 11 или 12 обработкой (ацилированием) хлорангидридом или сульфонилхлоридом в присутствии слабого основания, такого как триэтиламин, пиридин или 4-метилморфолин, в апротонном растворителе, таком как метиленхлорид или диэтиловый эфир, при температуре от приблизительно -20 до приблизительно 50°С. Альтернативно, для получения соединений формулы 11 или 12 сочетание аминов формул 9 или 10 с карбоновыми кислотами удобно проводить в инертном растворигеле, таком как дихлорметан или Ν,Νдиметилформамид (ДМФ), при помощи такого реагента для реакции сочетания, как гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (ЭКД) или 1,3-дициклогексилкарбодиимид (ЦКД), в присутствии гидрата 1-гидроксибензо-триазола (ГБТ). В случае, когда амин существует в виде гидрохлоридной соли, к реакционной смеси предпочтительно добавляют один эквивалент подходящего основания, такого как триэтиламин. Альтернативно, сочетание можно осуществлять с таким реагентом для реакции сочетания, как гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфония (БОФ) в инертном растворителе, таком как метанол. Такие реакции сочетания обычно проводят при температурах от приблизительно -30 до приблизительно 80°С, предпочтительно от 0 до 25°С. Изучены другие условия для получения пептидов реакцией сочетания (НоиЬсп-Усу1, Уо1. XV, рай II, Е. ХУшъсй Еб., Ссогдс ТНс ί тс ^г1ад, 1974, §1ийдай). Алкилирование и, если требуется, реакция снятия защиты с соединения формулы 11 или 12, как изображено на схемах 1 и 2, приводит к соответствующей кислоте - соединению формулы 13 и 14.
Амины формулы 9 и 10 также могут быть получены восстановлением амидов формулы 15 и 16. Восстановление можно успешно выполнять с использованием таких реагентов, как комплекс боран-тетрагидрофуран, комплекс боран-метилсульфид или гидрид диизобутилалюминия, в апротонном растворителе, таком как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, при температуре от прибилизительно -78 до приблизительно 60°С.
Амины формулы 9 и 10 также могут быть получены из соответствующих нитро-предшест венников восстановлением нитрогруппы с использованием таких восстановителей, как цинк/НС1, гидрированием в присутствии никеля Ренея, палладиевого или платинового катализатора, и других реагентов (Ρ.Ν. Ку1апбсг Нубгодспайоп МсШобк, Асабспнс Ргскк, №\ν Уогк, 1985).
СХЕМА 3
СХЕМА 4
Описание и получение других аминов и алкилирующих агентов, пригодных для упомя нутых выше синтезов, описаны ниже в разделе Препараты.
Альтернатива к описанной выше химии алкилирования для получения соединений формулы I включает в себя восстановительное аминирование амина, содержащего необходимую кислотную функциональную группу (подходящим образом защищенную), альдегидом, и показана на схеме 5. Альтернативно, альдегид может содержать кислотную функциональную группу для сочетания с амином.
Восстановительное аминирование обычно проводят таким восстановителем, как цианоборогидрид натрия или триацетоксиборогидрид натрия, предпочтительно при рН от 6 до 8. Реакцию обычно проводят в протонном растворителе, таком как метанол или этанол, при температурах от приблизительно -78°С до приблизительно 40°С (А. АЬбе1-Мад1б, С. Магуайо!!, К. Сагкоп, Тейайебгоп Ьей. 39, 31, 5595-5598, 1990). Другие условия включают в себя использование изопропилата титана и цианоборогидрида натрия (Я.1 Майкой е1 а1, 1. Огд. Сйет. 1990, 55, 2552-4) или предварительное образование имина в условиях дегидратации, а затем восстановление. Полученный амин формулы 42, 42А превращают в требуемый амид реакцией сочетания с хлорангидридом или карбоновой кислотой, как изображено на схемах 3 и 4. Если требуется, то гидролиз дает соответствую щую кислоту.
СХЕМА 5 η2ν—о—со2я онс—к—м (Н)
ΗΝ--о--согк
АО
0с.но€о.кце или сульфонат), предпочтительно первичным, вторичным, бензильным или аллильным алкилбромидом, йодидом или сульфонатом, который содержит нитрил. Алкилирование успешно поводят обработкой соединения формулы 59 основанием, таким как гидрид натрия, бис(триметилсилил)амид лития, бис(триметилсилил)амид калия, трет-бутилат калия или карбонат калия, в апротонном растворителе, таком как диметилформамид, смесь диметилформамид/ бензол или ацетон. Алкилирование происходит при температуре от приблизительно -78 до приблизительно 100°С. Предпочтительные условия для превращения полученного нитрила в тетразол формулы 60 включают в себя обработку оксидом дибутилолова и триметилсилилазидом в толуоле при нагревании с обратным холодильником (8.1. ^1йепЬетдет апб В.О. Ооппег, 1. Огд. Сйет. 1993, 58, 4139-4141, 1993).
Обзор альтернативных способов получения тетразолов смотри в Η.Ν. Вибет, Те1гахо1ек, СотртейепЦуе Сйетщйу; Ройк. К.Т. Еб.; Регдатоп Ргекк: Ох!огб, 1984, Уо1.5, рр 791-838.
СХЕМА
А---N---К---М
Н
1. №Н
------·- А---N---О--СИ ' О----ΟΝ |
X· 59 Ах
N—О—С0гН
1. ИаОН
О--СОгК
2. Н3О(ВизЗп)2О
ΤΜδΝ3 толуол
СОгН
1. ΝάΟΗ
2. Н3О* η2ν—-к—м ·*
ОНС о—СО2Р
А—N
£Н]
АС! Оснобо-ные
А = У-(СН2)„-С(О)- ; К = -К4; М = -Аг-К5
Описание и использование альдегидов, пригодных в упомянутой выше схеме 5, можно обнаружить в разделе Препараты.
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I (т.е. тетразолов формулы 60, где В представляет собой Ν, а А, К, М и О являются такими, как описано выше) изображен на схеме 6. Для того, чтобы получить соединения формулы 59, исходный сульфонамид или амид формулы 4 алкилируют соответствующим алкилгалогенидом или сульфонатом (где X' представляет собой галогенид
А = У-(СН2)„-С(О)К = -К4 М = -Аг-К5
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I изображен на схеме 7. Сложные эфиры формулы 46 могут быть получены с использованием методик, описанных ранее (схемы 1 и 2). Последующее Неск сочетание этого промежуточного соединения с арилгалогенидом (предпочтительно арилбромидом или арилйодидом), арилтрифлатом или с кольцевой системой, которая содержит винилбромид, йодид или трифлат, выполняют с палладиевым катализатором, таким как ацетат палладия или тетракис(трифенилфосфин)палладий (0), в присутствии триалкиламина, такого как триэтиламин. В некоторых случаях в реакционную смесь может быть добавлен триарилфосфин. Реакцию обычно осуществляют в апротонном растворителе, таком как диметилформамид или ацетонитрил, при температуре от приблизительно 0 до приблизительно 150°С (КЕ. Неск, Сотр. Огд. 8уп., Уо1. 4, Сй. 4.3, р. 833; Эасек апб На11Ьегд, Сйет. Неу. 1989, 89, 1433). Если требуется, то соединения формулы 47 могут быть гидролизованы до соответствующей ки слоты. Альтернативно, соединения формулы 47 можно гидрировать и, если требуется, далее гидролизовать до соответствующей кислоты формулы 49. Предпочтительные условия гидрирования включают в себя использование палладиевого или платинового катализатора в спиртовом растворителе, таком как этанол или метанол, при температуре от приблизительно 0 до приблизительно 50°С. В случаях, когда М представляет собой частично насыщенную кольцевую систему, гидрирование будет приводить к насыщенной кольцевой системе.
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I (где Я является таким, как описан для схем 1 и 2) изображен на схеме 8. Соединения формулы 51 могут быть получены, как изображено на схемах 1 и 2, алкилированием соединений формулы 5 электрофилом формулы 2, который содержит соответствующую функциональную группу на кольце М, для последующего превращения в альдегид. Например, электрофилы формулы 2 (схема 2) могли бы содержать защищенную спиртовую группу на кольце М, с которой после алкилирования, можно снять защиту и окислить до альдегида с использованием реагентов, известных квалифицированным специалистам, с образованием соединений формулы 51. Альтернативный способ заключается в алкилировании электрофилом формулы 2, где М содержит винильную группу. После алкилирования окислительное расщепление двойной связи дает требуемый альдегид формулы 51. Окислительное расщепление можно выполнить каталитическим превращением двойной связи в 1,2-диол оксидом осмия (IX) и Ν-метилморфолином, а затем окислительным расщеплением до альдегида с использованием периодата натрия. Альтернативно, окислительное расщепление через озонолиз, а затем восстановление с использованием таких реагентов, как метилсульфид, трифенилфосфин, цинк/ уксусная кислота или тиомочевина, будет приводить к требуемому альдегиду
формулы 51. Присоединение ЬМе1а1, где ЬМе1а1 представляет собой любой металлорганический реагент, такой как литийорганический реагент или реагент Гриньяра, в апротонном растворителе, таком как диэтиловый эфир или тетрагидрофуран, при температуре от приблизительно -78 до приблизительно 80°С, а затем гидролиз сложного эфира, как описано выше, приводит к соединению формулы 50.
СХЕМА 8
1. ίΜβίθΙ
2.
СНО
А = У-(СН2)П-С(О)-; К = -К4; М = -Аг-К5
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I изображен на схеме 9. Соответствующий амид формулы 5 алкилируют в условиях, изображенных на схемах 1 и 2, электрофилом, который содержит ароматический бромид или йодид или кольцевую систему, которая содержит винилбромид или йодид (АГ1) с образованием соединений формулы 53. Сочетание Сузуки-типа соединения формулы 53 с арилбороновой кислотой (Аг2) дает соединения формулы 53а (обзор Сузуки-реакции: А.Я Майш апб У. Уапд. Ас1а Сбет. 8сапб., 1993, 47, 221). Реакцию сочетания успешно выполняют с использованием приблизительно двух эквивалентов основания, такого как карбонат натрия, карбонат калия, гидроксид натрия, гидроксид таллия, фосфат калия или метилат натрия, в присутствии палладиевого катализатора, такого как тетракис(трифенилфосфин)палладий(0), ацетат палладия, хлорид палладия, трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) или [1,4-бис(дифенилфосфин)бутан] палладий(0). Реакция может протекать в водноспиртовых растворителях (метанол или этанол), водном тетрагидрофуране, водном ацетоне, водном диметиловом эфире гликоля или водном бензоле при температурах в пределах от приблизительно 0 до приблизительно 120°С. Когда АГ1 представляет собой частично насыщенное кольцо, то, для того, чтобы получить насыщенную кольцевую систему, на этой стадии выполняют восстановление кольца. Условия для выполнения этого превращения включают в себя гидрирование в присутствии катализатора, такого как палладий или платина, в спиртовом растворителе (этанол или метанол) и/или этилацетате. Эфирный гидролиз соединений формулы 53а, если требуется, дает соответствующую кислоту. Полученные кислоты могут содержать функциональные группы на любой из кольцевых систем (Αγι или Аг2), которые можно изменять способами, известными квалифицирован25 ным специалистам. Примеры таких изменений показаны на схеме 10.
СХЕМА 9
А--N--О--СО2К
V Ыан соединением такого агента для реакции сочетания, как трифенилфосфин и диэтилазодикарбоксилат (ДЭАД) или диизопропилазодикарбоксиА = Υ-ί
К = -Р4 [Вг, I]
А--N—а—со2к
лат, в инертных растворителях, таких как метиленхлорид или тетрагидрофуран, при температуре от приблизительно 0 до приблизительно 80°С. Если требуется, то последующий гидролиз приводит к соответствующей кислоте. СХЕМА 11 А\
N О —— СО гР
I к^он м-он
РР*з
ОЕАО
Вг. I
АГ2В(ОН)2
Основание.
А--N--О—”·002Κ К—-АГ,
I 53з
Аг2
Соединения формулы 54, которые содержат альдегидную функциональную группу, могут быть получены способами, изображенными на схемах 8 и 9. В соответствии со схемой 10 обработка соединения формулы 54 соответствующим металлорганическим реагентом (ЬМеталл), таким как литиийорганический реагент или реагент Гриньяра, в апротонном растворителе, таком как диэтиловый эфир или тетрагидрофуран, при температуре то приблизительно -78 до приблизительно 80°С, а затем гидролиз сложного эфира дают соединения формулы 56 (где В представляет собой Ν, а А, О и К являются такими, как описано в разделе Сущность изобретения, и Аг1 и Аг2 являются такими, как описано на схеме 9). Альтернативно, восстановление альдегида, а затем гидролиз дают соединения формулы 55.
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I (т.е. соединений формулы 57, где К является таким, как описано на схемах 1 и 2, и соответственно аналогичных кислот) изображен на схеме 11. Исходный спирт формулы 58 может быть получен способом, изображенным на схемах 1 и 2. Промежуточное соединение 58 сочетается с множеством ароматических спиртов (М представляет собой ароматическое кольцо) в условиях ΜίΐкопоЬи (О. МЮопоЬи, 8уп111С515. 1, 1981). Обычно реакцию сочетания успешно выполняют приА = У-(СН2)„-С(О)К = -К4
М = -Аг-К5
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I (т.е. соединений формулы 106, где К является таким, как описано на схемах 1 и 2, и соответственно аналогичных кислот) изображен на схеме 12. Соединение формулы 12 присоединяют к соединению формулы 105 (где Х представляет собой ароматическое кольцо, такое как бензольное кольцо или тиофеновое кольцо) в присутствии кислоты Льюиса, такой как тетрахлорид титана, или неорганической кислоты, такой как соляная кислота. Если требуется, то сложный эфир формулы 106 можно превратить в соответствующую кислоту гидролизом или реакцией снятия защиты.
СХЕМА 12
А = У-(СН2)„-С(О)к = -к4
М = -Аг-К5
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I (т.е. соединений формулы 107 или 108 и соответственно аналогичных кислот) изображен на схеме 13. Хлорметильные соединения формулы 104 обрабатывают соответствующей системой замещенных ароматических колец, М, такой как 4этоксибензол или тиофен, в присутствии кислоты Льюиса, такой как тетрахлорид титана, или неорганической кислоты, такой как соляная ки слота, в апротонном растворителе, таком как хлороформ, при температуре от приблизительно 0 до приблизительно 80°С с образованием соединения формулы 107, которое впоследствии можно подвергнуть гидролизу или реакции снятия защиты, как описано выше, с образованием соответствующей кислоты. Альтернативно, хлорметильные соединения формулы 104 можно обработать кислотой Льюиса, такой как тетрахлорид титана, и подходящим образом заме щен винилсиланом в апротонном растворителе, таком как метиленхлорид, при температуре от приблизительно -50°С до приблизительно 50°С с образованием соединений формулы 108, которые впоследствии можно подвергнуть гидролизу или реакции снятия защиты, как описано выше, с образованием соответствующей кислоты. Если требуется, то восстановление двойной связи можно выполнять при условиях, изображенных на схеме 7.
СХЕМА 13
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I (т.е. соединений формулы 109 и, следовательно, соответствующих кислот) изображен на схеме 14. Хлорметильные соединения формулы 104 обрабатывают кислотой Льюиса, такой как тетрахлорид титана, и подходящим образом замещенным аллилсиланом в апротонном растворителе, таком как хлороформ, при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 80°С с образованием соединений формулы 109, которые впоследствии можно подвергнуть гидролизу или реакции снятия защиты, как описано выше.
Альтернативно, другой способ получения некоторых соединений формулы I (т.е. соединений формулы 112 и, следовательно, соответствующих кислот) изображен на схеме 15. Хлорметильные соединения формулы 104 обрабатывают сульфиновой кислотой формулы 111 в присутствии основания, такого как триэтиламин, в апротонном растворителе, таком как хлороформ, при температуре от приблизительно -30 до приблизительно 50°С с образованием соединений формулы 112, которые впоследствии можно подвергнуть гидролизу или реакции снятия защиты, как описано выше, с образованием соответствующей кислоты.
СХЕМА 15
Препараты
Амины, Амиды и Сульфонамиды
Некоторые амиды или сульфонамиды формул 21, 22 и 23 (где А и Ζ являются такими, как описано в разделе Сущность изобретения, а Х и М являются ароматическими или насыщенными кольцевыми системами) могут быть получены в соответствии со схемой 18. Алкиниламиды или сульфонамиды формул 25, 26 и 27 получают реакцией сочетания алкинилсульфонамида или амида формулы 24 с ароматическим или винилгалогенидом, предпочтительно ароматическим или винилбромидом или йодидом (где А и Ζ являются такими, как определено выше, и где Х и М представляют собой ароматическую или частично насыщенную кольцевую систему). Реакцию сочетания обычно выполняют в присутствии йодида меди, палладиевого катализатора, такого как хлорид палладия, дихлорид бис(трифенилфосфин) палладия или тетракис(трифенилфосфин) палладий(0), и амина, такого как триэтиламин, диизопропиламин или бутиламин, в апротонном растворителе, таком как ацетонитрил, при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 100°С. Полученные алкины формулы 25, 26 и 27 можно превратить в соответствующие алканы формулы 21, 22 или 23 гидрированием в присутствии палладиевого или платинового катализатора и в растворителях, таких как метанол, этанол и/или этилацетат, при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 50°С. Альтернативно, алкин можно превратить в цис-алкен с использованием Ыпб1аг катализатора (Рб-СаСО3РЬО). В случае, где М представляет собой частично насыщенную кольцевую систему, гидрирование будет превращать М в полностью насыщенную кольцевую систему. Алкилирование и реакция снятия защиты, как изображено на схемах 1 и 2, приводят к соответствующим соединениям формулы I.
СХЕМА 18
В соответствии со схемой 19 соединения формулы 33 (где А и Х являются такими, как описано в разделе Сущность изобретения) могут быть получены из подходящего амина формулы 32 (например метоксиарилалкиламина). Амины формулы 32 являются коммерчески доступными или могут быть получены способами, известными квалифицированным специалистам (например схема 4), и их превращают в амиды или сульфонамиды формулы 31 способами, например, изображенными на схемах 3 и 4. Полученный сложный ароматический метиловый эфир формулы 31 подвергают реакции снятия защиты при помощи таких реагентов, как трибромид бора, гидрохлорид пиридиния, бромоводород/уксусная кислота, или других описанных в литературе реагентов (Рго1ес1шд Сгоирк ίη Огдашс 8уп1йек1к, 8есопб Εάίίίοη, Т.А. Сгеепе апб Р.С.М. Аи1к, бо11п А11еу апб 8опк, 1пс., 1991). Алкилирование сложным бромалкиловым эфи ром с использованием мягкого основания, такого как карбонат калия, в апротонном растворителе, таком как диметилформамид или ацетон, при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 100°С приводит к требуемому амиду или сульфонамиду формулы 33.
СХЕМА 19
А = У-(СН2)„-С(О)Алкилирующие агенты
Для синтеза требуемых алкилирующих агентов, используемых в вышеупомянутых методиках, существуют многочисленные способы, которые известны квалифицированным специалистам (Тйе СйетПйу о! 1Не СагЬоп-На1одеп Вопб, Еб. 8. Ра1ш, 1. А11еу, №\ν Уогк, 1973; Тйе СйетПйу о! НаЛбек, Ркеибо-Найбек, апб Л/|бек. Ебк. 8. Ра1а1 апб Ζ. Каррарой, 1. Айеу, Ыете Уогк, 1983). Некоторые примеры изображены на схемах 20-26. Как изображено на схеме
20, толильные или аллильные субстраты можно превратить галогенированием в бензил- или аллилбромиды (где М, X, А и Ζ являются такими, как указано выше). Эту реакцию обычно выполняют Ν-бромсукцинимидом (БСИ) в при сутствии инициатора радикалов, такого как ΑΙΒΝ или пероксид, предпочтительно перекись бензоила. Альтернативно, реакцию может инициировать свет. Реакцию проводят в инетном растворителе, таком как четыреххлористый углерод или хлороформ, при температуре от приблизительно 50 до приблизительно 100°С.
СХЕМА 20
Схема 21 показывает синтез алкилирующих агентов, используемых для получения соединений формулы I, где Аг представляет собой биарильную или арилциклическую группу. Сочетание Сузуки-типа арилйодида или бромида или кольцевой системы, содержащей винилбромид или йодид (Аг2) с метиларилбороновой кислотой (Αη) при условиях, изображенных на схеме 9, дает соединения формулы 34. В случае, когда применяют винилбромид или йодид, соединения формулы 34 можно восстанавливать с образованием полностью насыщенного кольца. Восстановление выполняют гидрированием в присутствии палладиевого или платинового катализаторов, обычно в протонных растворителях (метаноле или этаноле), тетрагидрофуране или этилацетате. Галогенирование метильной группы с использованием реагентов и при условиях, как описано в схеме 20, дает алкилирующие агенты формулы 35.
СХЕМА 21
Другим общепринятым способом для получения алкилгалогенидов является галогенирование спирта или производного спирта. Спирты являются коммерчески доступными, или они могут быть получены способами, известными квалифицированным специалистам. Например, на схеме 22 карбоновую кислоту или эфир вос станавливают до спирта с использованием таких реагентов, как борогидрид натрия, алюмогидрид лития, комплекс боран-тетрагидрофуран, комплекс боран-метилсульфид, и т.д. Соответствующие алкилхлориды обычно получают из спиртов при помощи таких реагентов, как хлороводород, тионилхлорид, пентахлорид фосфо ра, хлорангидрид фосфорной кислоты или трифенилфосфин/четыреххлористый углерод. Для получения алкилбромидов спирт обычно обрабатывают такими реагентами, как бромоводород, трибромид фосфора, трифенилфосфин/ бром или карбонилдиимидазол/аллилбромид (Катуо, Т., Нагаба, Н., Ыхика. К. Скет. Ркагт. Ви11. 1983, 38, 4189). Для получения алкилйодидов спирт обычно подвергают взаимодействию с такими реагентами, как трифенилфосфин/йод/имидазол или йодоводород. Алкилхлориды можно превращать в более реакционноспособные алкилбромиды или алкилйодиды обработкой неорганической солью, такой как бромид натрия, бромид лития, йодид натрия или йодид калия, в растворителях, таких как ацетон или метилэтилкетон. Алкилсульфонаты также можно применять в качестве электрофилов или можно превращать в алкилгалогениды. Сульфонаты получают из спирта с использованием мягкого основания, такого как триэтиламин или пиридин, и сульфонилхлорида в инертном растворителе, таком как метиленхлорид или диэтиловый эфир. Превращение в галогенид выполняют обработкой неорганическим галогенидом (йодидом натрия, бромидом натрия, йодидом калия, бромидом калия, хлоридом лития, бромидом лития и т.д.) или галогенидом тетрабутиламмония.
П = Н, ОДКЛСЛ
Коричные кислоты или сложные эфиры являются коммерчески доступными и их можно превращать в алкилирующие агенты формулы 37 или 38 следующим образом (схема 23). Производные коричной кислоты или сложного эфира восстанавливают в присутствии палладиевого или платинового катализаторов обычно в протонных растворителях (например метаноле или этаноле), тетрагидрофуране или этилацетате. Восстановление и превращение в алкилгалогенид или сульфонат, как изображено на схеме 22, дает соединение формулы 38. Если возможно, то коричные кислоты или сложные эфиры прямо превращают в спирты формулы 39 обработкой такими реагентами, как алюмогидрид лития, в инертных растворителях, таких как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир. Альтернативно, коричную кислоту или сложный эфир можно восстанавливать до аллильного спирта формулы 40 с использованием таких реагентов, как алюмогидрид лития/хлорид алюминия, гидрид диизобутилалюминия или борогидрид лития. Превращение в аллилгалогенид или сульфонат, как изображено на схеме 22, дает реагенты формулы 37.
СХЕМА 23
Получение алкилирующих агентов формулы 41 (где А и М являются такими, как описано выше) изображено на схеме 24. Соединения формулы 42 алкилируют рядом оснований, выбор которых зависит от природы А и М. Некоторыми предпочтительными основаниями являются гидроксид натрия, гидрид натрия, диизопропиламид лития, бис(триметилсилил)амид лития, бис(триметилсилил)амид калия и третбутилат калия и т.д. Обработка полученного аниона рядом диалкилгалогенидов приводит к требуемым алкилирующим агентам формулы 41. Для получения соединений, где А представляет собой кислород, и М представляет собой ароматическое кольцо, предпочтительные условия включают в себя образование с гидроксидом натрия аниона алкоголята, а затем присоединение дигалогеналкана, например дибромалкана. Реакцию обычно выполняют в воде при от приблизительно 75 до приблизительна 25°С.
СХЕМА 24
Ηνν—м 1. 0СК©6сиАи.е. ХЛ/ — м X---->п
2 /X
42 X Вг. I 41
х = С1, Вг
Альдегиды, применяемые для химии, описанной на схеме 5, являются коммерчески доступными или могут быть получены из доступных промежуточных соединений способами, известными квалифицированным специалистам. Схема 25 показывает типичный способ, используемый для получения оксиальдегидов формулы 43 (где М в схеме 5 содержит алкильную группу, замещенную гидрокси). Обработка диальдегида, где один из альдегидов защищен в виде ацетали формулы 44 (где ОК. группы являются традиционными заместителями, используемыми в ацетальной защитной группе), металлорганическим реагентом (ЪМеталл), предпочтительно литийорганическим реагентом или реагентом Гриньяра, в инертном растворителе, таком как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, дает соединения формулы 45. Последующий гидролиз ацетали в мягкой кислой среде, например, разбавленной соляной кислоте, смоле АтЬег1укк-15, силикагеле или других реагентах, дает требуемые оксиальдегиды формулы 43 (Рго1сс(1пд Сгоирк ίη Огдатс Ξνηΐΐιοδίδ. 8есопб Ε6ίΐίοη, Т.У. Сгеепе апб Р.С.М. ХУиК ίοΐιη \УПеу апб 8опу 1пс., 1991).
СХЕМА 25
Хлорметильные промежуточные соединения Промежуточные хлорметильные соединения могут быть получены, как изображено на схемах 26 и 27. Обычно, соответствующий сульфонамид или карбоксамид формулы 101 или 103 обрабатывают эквивалентом формальдегида, таким как параформальдегид, в инертном органическом растворителе, таком как метиленхлорид или хлороформ, с подходящим катализатором, таким как НС1, хлорид цинка или триметилсилилхлорид, при температурах в пределах от приблизительно 0 до приблизительно 60°С с образованием хлорметильных производных формулы 102 и 104, соответственно.
СХЕМА 26 а—мн (СН0) ,
I на тмзс1 | км к-м
101 102
/~ он
А---N
СХЕМА 27
Квалифицированным специалистам будет ясно, что антирезорбтивные агенты (например прогестины, полифосфонаты, бифосфонат(ы), агонисты/антагонисты эстрогена, эстроген, комбинации эстроген/прогестин, Ргетагш, эстрон, эстриол или 17α- или 17в-этинилэстардиол) можно применять вместе с соединениями по данному изобретению.
Типичные прогестины являются коммерчески доступными и включают в себя: алгестон ацетофенид, алтреногест, амадинонацетат, ана гестонацетат, хлормадинонацетат, цингестол, клогестонацетат, кломегестонацетат, делмадинонацетат, десогестрел, диметистерон, дидрогестерон, этинерон, этинодиолдиацетат, этоногестрел, фторгестонацетат, гестацион, гестоден, гестоноронкапроат, гестринон, галогенпрогестерон, гидроксипрогестеронкапроат, левоноргестрел, линестренол, медрогестон, медроксипрогестеронацетат, меленгестролацетат, метинодиолдиацетат, норетиндрон, норетиндронацетат, норетинодрел, норгестимат, норгестомет, норгестрел, оксогестонфенпропионат, прогестерон, хингестанолацетат, хингестрон и тигестол.
Предпочтительными прогестинами являются медроксипрогестерон, норетиндрон и норетинодрел.
Типичные полифосфонаты, ингибирующие резорбцию кости, включают в себя полифосфонаты известного типа (патент США 3683080, выданный 8 августа 1972, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки). Предпочтительными полифосфонатами являются геминальные дифосфонаты (также называемые бисфосфонаты). Динатрийтилудронат является особенно предпочтительным полифосфонатом. Ибандроновая кислота является особенно предпочтительным полифосфонатом. Алендронат является особенно предпочтительным полифосфонатом. Другими предпочтительными полифосфонатами являются 6амино-1-гидроксигексилиденбисфосфоновая кислота и 1-гидрокси3(метилпентиламино)пропилиденбисфосфоновая кислота. Полифосфонаты можно вводить в виде кислоты, или в виде растворимой соли щелочного металла, или щелочно-земельного металла. Также включают гидролизуемые сложные эфиры полифосфонатов. Конкретные примеры включают в себя этан-1-гидрокси1,1-дифосфоновую кислоту, метандифосфоновую кислоту, пентан-1-гидрокси-1,1-дифосфоновую кислоту, метандихлордифосфоновую кислоту, метангидроксидифосфоновую кислоту, этан-1-амино-1,1-дифосфоновую кислоту, этан-2-амино-1,1-дифосфоновую кислоту, пропан-3-амино-1-гидрокси-1,1дифосфоновую кислоту, пропан-Ы,№диметил-3амино-1-гидрокси-1,1-дифосфоновую кислоту, пропан-3,3-диметил-3 -амино-1-гидрокси-1,1 -дифосфоновую кислоту, фениламинометандифосфоновую кислоту, Ν,Ν-диметиламинометандифосфоновую кислоту, ^2-гидроксиэтил) аминометандифосфоновую кислоту, бутан-4амино-1-гидрокси-1,1-дифосфоновую кислоту, пентан-5-амино-1-гидрокси-1,1-дифосфоновую кислоту, гексан-6-амино-1-гидрокси-1,1-дифосфоновую кислоту, и их фармацевтически приемлемые сложные эфиры и соли.
В частности, соединения по данному изобретению могут быть объединены с агонистом/антагонистом эстрогена у млекопитающего. Любой агонист/антагонист эстрогена можно применять в качестве второго соединения по данному изобретению. Термин агонист/ антагонист эстрогена относится к соединениям, которые связываются с рецептором эстрогена, ингибируют обновление кости и предупреждают потерю кости. В частности, в этом документе агонисты эстрогена определены как химические соединения, которые способны связываться с сайтами рецептора эстрогена в ткани млекопитающего и имитировать действия эстрогена в одной или более чем одной тканях. В этом документе антагонисты эстрогена определены как химические соединения, которые способны связываться с сайтами рецептора эстрогена в ткани млекопитающего, и блокировать действия эстрогена в одной или более чем одной тканях. Квалифицированные специалисты легко определяют такие активности по данным стандартных анализов, включая анализ связывания с рецептором эстрогена, стандартными костными гистоморфометрическими и денситометрическими методами (Епкзеп Е.Р. с1. а1, Вопе Шз1ошогр1ютс1гу. Вауеп Ргезз, №\ν Уогк, 1994, радез 1-74; Снег 8.1. е1. а1., Т1е Изе οί Биа1-Епегду XРау ЛЬзогрботейу 1п Лшта1з, Ιην. РабюС 1996, 31(1):50-62; Аайпег Н.А. апб Роде1тап I., Т1е Еνа1иаΐοп οί Оз1еорогоз1з: БиаРЕпегду XРау ЛЬзогрботейу т СИшса1 РгасНсе., Магбп Бипб/ Ыб., Ьопбоп 1994, радез 1-296). Ряд этих соединений описаны и упоминаются ниже.
Предпочительным агонистом/антагонистом эстрогена является дролоксифен: (фенол, 3[1-[4[2-(диметиламино)этокси] фенил]-2-фенил1-бутенил]-, (Е)-) и ассоциируемые с ним соединения (патент США 5047431, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Другим предпочительным агонистом/антагонистом эстрогена является тамоксифен: (этанамин, 2-[4-(1,2-дифенил-1-бутенил)фенокси]-Х,Ы-диметил-, (Ζ)-2-, 2-гидрокси1,2,3пропантрикарбоксилат (1:1)) и ассоциируемые с ним соединения (патент США 4536516, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Другим родственным является 4-гидрокситамоксифен (патент США 4623660, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Предпочительным агонистом/антагонистом эстрогена является ралоксифен: (метанон, [6-гидрокси2-(4-гидроксифенил)бензо[Ь]тиен-3ил][4-[2-(1-пиперидинил)этокси]фенил]-, гидрохлорид) (патент США 4418068, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Другим предпочительным агонистом/ антагонистом эстрогена является торемифен: (этанамин, 2-[4-(4-хлор-1,2-дифенил-1-бутенил) фенокси]-Х,Ы-диметил-, (Ζ)-, 2-гидрокси1,2,3пропантрикарбоксилат (1:1)) (патент США
4996225, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Другим предпочительным агонистом/антагонистом эстрогена является центхроман: 1-[2-[4-(метокси2,2-диметил-3-фенилхроман-4 -ил) фенокси] этил] пирролидин (патент
США 3822287, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки). Также предпочтительным является левормелоксифен.
Другим предпочительным агонистом/антагонистом эстрогена является идоксифен: пирролидин, 1 - [- [4- [ 1 -(4-йодфенил)-2-фенил-1бутенил]фенокси]этил] (патент США 4839155, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Другим предпочительным агонистом/антагонистом эстрогена является 6-(4гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)бензил]нафталин-2-ол (патент США 5484795, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Другим предпочительным агонистом/антагонистом эстрогена является {4-[2-(2-азабицикло[2.2.1]гепт-2-ил)этокси]фенил}-[6-гидрокси2-(4-гидроксифенил)бензо[Ь]тиофен-3-ил] метанон (публикация РСТ № АО 95/10513, переуступленная компании РПхег 1пс.).
Другим предпочтительным агонистом/антагонистом эстрогена является СА5638: 3-[4(1,2-дифенилбут-1-енил)фенил]акриловая кислота (Абзоп, Т.М. апб со^огкегз, Епбгосппо1оду 1997, 138, 9, 3901-3911).
Другие предпочтительные агонисты/антагонисты эстрогена включают в себя другие соединения, как они описаны в надлежащим образом переуступленном патенте США 5552412, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки. Особенно предпочтительными соединениями, описанными в нем, являются:
цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2ол;
(-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,б,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
цис-1-[6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол и
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-фенил6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
Описаны другие агонисты/антагонисты эстрогена (патент США 4133814, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки). Известны производные 2 фенил-3-ароилбензотиофена и 2-фенил-3-ароилбензотиофен-1-оксида (патент США 4133814).
Квалифицированным специалистам будет ясно, что другие костные анаболические агенты (агенты, увеличивающие костную массу) могут быть использованы в сочетании с соединениями по данному изобретению. Известно, что агентом, наращивающим костную массу, является соединение, которое наращивает костную массу до уровня, который выше, чем порог перелома кости (Аог1б Неабб Огдашхабоп 8!ибу Аог1б НеаНН ОгдашхаРоп, Аззеззтеп! о! РгасШге Ккк апб бз Аррбсабоп !о 8сгеешпд Гог Роз!тепораи5а 1 Оз!еорогозк (1994). Керой о! а АНО 8!ибу Сгоир. Аог1б Неабб Огдашхабоп Тесбшса1 8епез 843).
Любой простагландин или агонист/антагонист простагландина можно применять в качестве второго соединения по данному изобретению (изобретение будет включать в себя применение двух разных соединений формулы I по данному изобретению). Квалифицированные специалисты поймут, что также можно применять ЮР-1 с или без ЮР-1-связывающего белка 3, фторид натрия, паратиреоидный гормон (ПТГ), активные фрагменты паратиреоидного гормона, гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста. Следующие абзацы более детально описывают типичные вторые соединения по данному изобретению.
Любой простагландин можно применять в качестве второго соединения по данному изобретению. Термин простагландин относится к соединениям, которые являются аналогами природных простагландинов РСЭ1, РСО2, РСЕ2, РСЕ! и РСР2, которые можно применять при лечении остеопороза. Эти соединения связываются с рецепторами простагландина. Квалифицированные специалисты легко определяют такое связывание по данным стандартных анализов (например, Ап 8. е! а1., С1ошпд апб Ехргеззюп о! Гбе ЕР2 8иЬГуре о! Нитап Кесер!огз Гог Рго51ад1апбб1 Е2, Вюсбетюа1 апб Вюрбузюа1 Кезеагсб Соттишсабопз, 1993, 197(1): 263-270).
Простагландины представляют собой алициклические соединения, родственные основному соединению простаноидной кислоте. Атомы углерода основного простагландина нумеруют последовательно от карбоциклического атома углерода по циклопентильному кольцу к концевому атому углерода на соседней боковой цепи. Обычно соседние боковые цепи находятся в транс ориентации. Наличие оксогруппы при С-9 циклопентильной группировки служит признаком простагландина в пределах Е класса, тогда как РСЕ2 содержит транс ненасыщенную двойную связь по положению С13-С14 и цис двойную связь по положению С5-С6.
Известен ряд простагландинов, на которые ссылаются ниже, однако, квалифицированным специалистам будут известны и другие простагландины. Известны типичные простагландины (патент США 4171331 и 3927197, раскрытие которых приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Тбе Ко1е о! Р^озΐад1аиб^ηз ш Вопе ш У1уо(Моггбш е! а1., Ргоз!ад1апбшз Ьеикобгепе Еззепба1 Рабу Ас1бз 41, 139-150, 1990) является обзором костных анаболических простагландинов. Тбе Ш У1уо АпаЬобс Асбопз о! Ргоз1ад1апбшз ш Вопе (1ее апб Ма, Вопе, 21: 297-304) является современным обзором костного анаболического действия простагландинов.
Любой агонист/антагонист простагландина можно применять в качестве второго соединения по данному изобретению. Термин агонист/антагонист простагландина относится к соединениям, которые связываются с рецепторами простагландина (например, !А. Кедап е! а1., С1ошпд о! а №уе1 Нитап РгозГад1апбт Кесер!ог ^бб Сбагас!епзбсз о! Гбе Рбагтасо1одб са11у ЭеПпеб ЕР2 8иЬГуре, Мо1еси1аг Рбагтасо1оду, 46: 213-220, 1994) и имитируют действие простагландина ш у1уо (например стимулируют образование кости и увеличивают костную массу и прочность). Квалифицированные специалисты легко определяют такие действия по данным стандартных анализов (Епкзеп Е.Р. е! а1., Вопе Нк!отогрботебу, Кауеп Ргезз, Νονν Уогк, 1994, радез 1-74; Сбег 8.1. е! а1., Тбе Изе о! Эпа1Епегду Х-Кау АЬзогрботебу Ш Аштак, Шу. Кабю1., 1996, 31(1): 50-62; Аабпег Н.А. апб Роде1тап I., Тбе Еуа1иабоп о! Оз!еорогозк: Эпа1 Епегду Х-Кау АЬзогрботебу ш Сбшса1 Ргасбсе., Магбп ΟιπιίΙχ ЬГб., Ьопбоп 1994, радез 1-296). Описан ряд этих соединений, на которые ссылаются ниже, однако, квалифицированным специалистам будут известны и другие агонисты/антагонисты простагландины. Типичные агонисты/антагонисты простагландина раскрыты следующим образом.
Известно, что 2-дезкарбокси2-(тетразол-5ил)-11-дезокси-15-замещенные-омега-простагландины являются полезными относительно активности образование кости (надлежащим образом переуступленный патент США 3932389, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Известно, что 16-арил-13,14-дигидро-РСЕ2 п-бифениловые сложные эфиры являются полезными относительно активности образование кости (надлежащим образом переданный патент США 4018892, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Известно, что 2,3,6-замещенные-4-пироны являются полезными относительно активности образование кости (надлежащим образом переданные патенты США 4219483 и 4132847, раскрытие которых приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Известно, что 16-арил-13,14-дигидро-РСЕ2 п-бифениловые сложные эфиры являются полезными относительно активности образование кости (патенты США 4000309 и 3982016, рас крытие которых приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Известно, что замещенные циклопентаны являются полезными относительно активности образование кости (патент США 4621100, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Известно, что циклопентаноны являются полезными относительно активности образование кости (патент США 5216183, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки).
Фторид натрия можно применять в качестве второго соединения по данному изобретению. Термин фторид натрия относится к фториду натрия во всех его формах (например фторид натрия медленного высвобождения, фторид натрия пролонгированного высвобождения). Описан фторид натрия пролонгированного высвобождения (патент США 4904478, раскрытие которого приводится в настоящем документе посредством ссылки). Квалифицированные специалисты легко определяют активность фторида натрия по биологическим протоколам (например, Епккеп Е.Е. е! а1., Вопе Нткототрйотейу, Яауеп Ргекк, №\ν Уогк, 1994, радек 1-74; Спет 8.1. е! а1., Тбе Ике ок Ьиа1-Епегду Х-Яау АЬкогрйотекту Ш Ашта1к, Шу. Яабю1., 1996, 31(1): 5062; Аабпег Н.А. апб Еоде1тап I., Тбе ЕуаШайоп ок Оккеоротокт: Эиа1 Епегду Х-Яау АЬкотрйотекгу ш С11шса1 Ртасйсе., Майш ΟιιπίΙζ Ькб., Ьопбоп 1994, радек 1-296).
Любой паратиреоидный гормон (ПТГ) можно применять в качестве второго соединения по данному изобретению. Термин паратиреоидный гормон относится к паратиреоидному гормону, его фрагментам или метаболитам и его структурным аналогам, которые могут стимулировать образование кости и увеличение костной массы. Также включают пептиды, родственные паратиреоидному гормону, и активные фрагменты и аналоги пептидов, родственных паратиреоидному гормону (АО 94/01460). Квалифицированные специалисты легко определяют такую функциональную активность по данным стандартных анализов (например, Епккеп Е.Е. е! а1., Вопе Шккототрйотейу, Яауеп Ргекк, №\ν Уогк, 1994, радек 1-74; Спет 8.1. е! а1., Тбе Ике ок ОиаЬЕпегду Х-Яау АЬкотркютейу Ш Ашта1к, Шу. Яабю1., 1996, 31(1): 50-62; Аайпег Н.А. апб Еоде1тап I., Тбе Еуа1иа!юп ок Оккеорогокт: Эиа1 Епегду Х-Яау АЬкотрйотейу ш Сйшса1 Ртасйсе., Матйп ΟιιπίΙζ Ь!б., Ьопбоп 1994, радек 1-296). Описан ряд этих соединений, на которые ссылаются ниже, однако, квалифицированным специалистам будут известны и другие паратиреоидные гормоны. Примеры типичных паратиреоидных гормонов приведены в следующих ссылках:
Нитап РатаШуто1б Рерйбе Тгеа!теп! ок УейеЬта1 Оккеоротокт, Оккеоротокт Ш!., 3, (8ирр1 1):199-203;
РТН 1-34 Тгеа!теп! ок Оккеорогокт \νί11ι Аббеб Ногтопе Яер1асетеп! Тйегару: В1осйет1са1, КШейс апб Н1к!о1од1са1 Яекропкек, Оккеорогок1к Шк. 1:162-170.
Любой гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста, можно применять в качестве второго соединения по данному изобретению. Термин средства, стимулирующие секрецию гормона роста, относится к соединениям, которые стимулируют выделение гормона роста или имитируют действие гормона роста (например увеличивают образование кости, приводя к увеличенной костной массе). Квалифицированные специалисты легко определяют такие действия по данным стандартных анализов. Ряд этих соединений включен в следующие опубликованные РСТ патентные заявки: АО 95/14666; АО 95/13069; АО 94/19367; АО 94/13696 и АО 95/34311. Однако, квалифицированным специалистам будут известны и другие гормоны роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста.
Особенно предпочтительным средством, усиливающим секрецию гормона роста, является Ν- [ 1 (Я) -[1,2 -дигидро -1 -метансульфонилспиро [3Н-индол-3,4'-пиперидин]-1'-ил-карбонил]-2-(фенилметилокси)этил]-2-амино-2-метилпропанамид: МК-667.
Другие предпочтительные средства, стимулирующие секрецию гормона роста, включают в себя:
2-амино-№[2-(3а-(Я)-бензил-2-метил-3оксо-2,3,3а,4,6,7-гексагидро-пиразоло-[4,3-с] пиридин-5-ил)-1-(Я)-бензилоксиметил-2-оксоэтил]изобутирамид или его соль Ь-винной кислоты;
2-амино-№{1-(Я)-бензилоксиметил-2-[3а(Я)-(4-фторбензил)-2-метил-3-оксо-2,3,3а,4,6,7гексагидропиразоло-[4,3-с]пиридин-5-ил]-2-оксоэтил}изобутирамид и
2-амино-№[2-(3а-(Я)-бензил-3-оксо-2,3,3а, 4,6,7-гексагидропиразоло-[4,3-с]пиридин-5-ил)1-(Я)-бензилоксиметил-2-оксо-этил]изобутирамид;
2-амино-№{1-(2,4-дифтор-бензилоксиметил)-2-оксо-2-[3-оксо-3а-пиридин-2-илметил-2(2,2,2-трифторэтил)-2,3,3а,4,6,7-гексагидропиразоло-[4,3-с] пиридин-5 -ил] этил }-2-метилпро пионамид.
Некоторые способы получения, полезные для получения соединений, описанных в этом документе, могут требовать защиты отдаленной функциональной группы (например первичной аминогруппы, вторичной аминогруппы, карбоксила в предшественниках формулы I). Потребность в такой защите будет зависеть от природы отдаленной функциональной группы и условий способов получения. Квалифицированные специалисты легко определяют потребность в такой защите, а также применяют такие способы защиты/снятия защиты. Общие защитные группы и их применение описаны в литературе (Т.^. Сгсспс. Рго1сс11ус Огоирз ίη Огдашс 8уп111С513. Ιοίιη \У1су & 8опз, Ναν Уогк, 1991).
Исходные вещества и реагенты для описанных выше соединений являются легкодоступными или могут быть легко синтезированы квалифицированными специалистами традиционными способами органического синтеза. Например, многие из соединений, применяемых в этом документе, относятся к, или их получают из соединений, находящихся в природе, к которым существует большой научный интерес или промышленная потребность, и, следовательно, многие такие соединения являются коммерчески доступными, или о них сообщают в литературе, или их легко получают из других общедоступных веществ способами, о которых сообщают в литературе. Такие соединения включают в себя, например, простагландины.
Некоторые соединения по данному изобретению имеют асимметрические атомы углерода и, следовательно, являются энантиомерами или диастереомерами. Диастереомерные смеси могут быть разделены на свои индивидуальные диастереомеры на основе своих физикохимических различий способами, по существу известными, например хроматографией и/или фракционной кристаллизацией. Энантиомеры можно разделять путем превращения энантиомерной смеси в диастереомерную смесь взаимодействием с соответствующим оптически активным соединением (например спиртом), разделения диастереомеров и превращения (например гидролизом) индивидуальных диастереомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Все такие изомеры, в том числе диастереомеры, энантиомеры и их смеси, рассматриваются как часть данного изобретения. Также, некоторые соединения по данному изобретению являются атропоизомерами (например замещенные биарилы) и их рассматривают как часть данного изобретения.
Многие соединения по данному изобретению являются кислотными, и они образуют соль с фармацевтически приемлемым катионом. Многие соединения по данному изобретению являются основными, и они образуют соль с фармацевтически приемлемым анионом. Все такие соли включены в рамки данного изобретения, и они могут быть получены традиционными способами. Например, они могут быть легко получены при контакте кислотного и основного веществ, обычно в стехиометрическом соотношении, в любой водной, неводной или частично водной среде, такой, которая является наиболее подходящей. Соли извлекают таким способом, который является наиболее подходящим: либо фильтрованием, либо осаждением при помощи соединения, в котором они нерастворимы, а затем фильтрованием, либо выпариванием растворителя, либо, в случае водных растворов, лиофилизацией.
Кроме того, если соединения по данному изобретению образуют гидраты или сольваты, то они также включены в рамки изобретения.
Все соединения по данному изобретению являются адаптированными для терапевтического применения в качестве агентов, которые стимулируют образование кости и увеличивают костную массу у млекопитающих, особенно у человека. Так как образование кости тесно связано с развитием остеопороза и родственных костных расстройств, эти соединения, благодаря своему действию на кость, предупреждают, задерживают и/или регрессируют остеопороз.
Активность соединений по данному изобретению в традиционных анализах, в том числе ίη νίνο анализе, анализе связывания с рецепторами, анализе циклического АМФ и анализе заживления перелома (все из которых описаны ниже) демонстрирует полезность соединений по настоящему изобретению в качестве медицинских средств при лечении состояний, при которых наблюдается низкая костная масса (например остеопороза) у млекопитающих (например у человека, в особенности у женщин). Ιη νίνο анализ (с соответствующими модификациями в пределах уровня квалификации в данной области) можно применять для установления активности других анаболических агентов, также как и агонистов простагландина по данному изобретению. Протокол агониста/антагониста эстрогена можно применять для определения активности агонистов/антагонистов эстрогена (в особенности), а также других антирезорбтивных агентов (с соответствующими модификациями в пределах уровня квалификации в данной области). Комбинацию и последующий протокол лечения, описанный ниже, можно применять для того, чтобы продемонстрировать полезность комбинаций анаболических агентов (например соединений по данному изобретению) и антирезорбтивных агентов (например агонистов/антагонистов эстрогена), описанных в этом документе. Также такие анализы предлагают способ, посредством которого активности соединений по данному изобретению (или других анаболических агентов и антирезорбтивных агентов, описанных в этом документе) можно сравнивать друг с другом и с активностями других известных соединений. Результаты этих сравнений являются полезными для определения уровней доз при лечении таких заболеваний у млекопитающих, в том числе у людей.
Ιη νίνο анализ анаболического агента
Активность костных анаболических агентов в стимулировании образования кости и увеличении костной массы можно проверить на интактных крысах-самцах или крысах-самках и крысах-самцах (орхидэктомия) или крысахсамках (овариэктомия) с недостаточным количеством половых гормонов.
При исследовании можно применять крыссамцов или крыс-самок разного возраста (таких как в возрасте 3 месяцев). Крысы являются или интактными, или кастрированными (овариэктомированными или орхидэктомированными). Им подкожно или через желудочный зонд вводят различные дозы агонистов простагландина (такие как 1, 3 или 10 мг/кг/день) в течение 30 дней. Обработку кастрированных крыс начинают на следующий день после операции (с целью предотвращения потери кости) или в то время, когда уже произошла потеря кости (с целью восстановления костной массы). Во время исследования всем крысам предоставляют свободный доступ к воде и коммерческий пищевой рацион в виде пилюль (Тек1аБ ЯоБеп1 Όίβΐ #8064, Наг1ап Тек1аБ, Майкоп. VI). который содержит 1,46% кальция, 0,99% фосфора и 4,96 МЕ/г (ΐυ/д) Витамина Ό3. Всем крысам подкожно вводят 10 мг/кг кальцеина на 12 день и 2 день перед умерщвлением. Крыс умерщвляют. Определяют следующие крайние точки:
Минеральные измерения бедренной кости:
У каждой крысы во время аутопсии удаляют правую бедренную кость, которую сканируют с использованием двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (ЭХА, ЦЭР 1000/ν, Но1од1с 1пс., Vа1ΐйатаη, МА) с программным обеспечением К.едюпа1 Н1дЬ К.е§о1иΐίοη 8сап (Но1од1с 1пс., Vа1ΐйат, МА). Размеры области сканирования составляют 5,08 х 1,902 см, разрешение - 0,0254 х 0,0127 см, а скорость сканирования - 7,25 мм/с. Анализируют сканированные изображения бедренной кости и определяют площадь кости, минеральный состав кости (МСК) и минеральную плотность кости (МПК) целых бедренных костей (ЦБК), дистальных бедренных метафизов (ДБМ), бедренного стержня (БС) и проксимальных частей бедренной кости (ПЧ).
Гистоморфометрические анализы большеберцовой кости
Правую большеберцовую кость удаляют во время аутопсии, отрезают мышцу и рубят кость на три части. Проксимальную часть большеберцовой кости и стержень большеберцовой кости фиксируют в 70%-ном этаноле, дегидратируют в этаноле при градиурованных концентрациях, обезжиривают в ацетоне и заливают метилметакрилатом (ЕаЧтап Огдашс СЬеткак, КосЬейег, ΝΥ).
Фронтальные срезы проксимальных большеберцовых метафизов толщиной 4 и 10 мкм готовят с использованием микротома Кеюкей1ипд Ро1уси1 8. Срезы 4 мкм окрашивают модифицированным красителем Маккоп'к трихром, в то время как срезы 10 мкм оставляют неокрашенными. Для гистморфометрии губчатого вещества кости применяют один срез 4 мкм и один срез 10 мкм от каждой крысы.
Поперечные срезы стержня большеберцовой кости толщиной 10 мкм готовят с использованием микротома Яе1сйеп-1ипд Ро1уси1 8. Эти срезы применяют для гистоморфометрического анализа кортикального слоя кости.
Гистоморфометрия губчатого вещества кости
Для статического и динамического гистоморфометрических измерений вторичного спонгиоза проксимальных большеберцовых метафизов между 1,2 и 3,6 мм дистально к месту соединения растущей пластинки и эпифиза используют Вюс.|иап1 О8/2 гистоморфометрическую систему (К.&М ЬютеЧюк, 1пс., М-МтсШе, ΤΝ). Первыми 1,2 мм области, относящейся к метафизу большеберцовой кости, следует пренебречь, для того, чтобы ограничить измерения до вторичного спонгиоза. Срезы 4 мкм используют для определения индексов, связанных с объемом кости, структурой кости и резорбцией кости, в то время как срезы 10 мкм используют для определения индексов, связанных с образование костиом и обновлением кости.
I) Измерения и расчеты, связанные с трабекулярным костным объемом и структурой (1) Общая площадь метафиза (ОМП, мм2): площадь метафиза между 1,2 мм и 3,6 мм дистально к месту соединения растущей пластинки и эпифиза. (2) Трабекулярная костная площадь (ТКП, мм2): общая площадь трабекул внутри ОМП. (3) Трабекулярный костный периметр (ТКПР, мм): длина общего периметра трабекул.
(4) Трабекулярный костный объем (ТКП/ОМП, %): ТКП / ОМП х 100. (5) Трабекулярное костное число (ТКЧ, #/мм): 1,199/2 х ТКПР/ОМП. (6) Трабекулярная костная толщина (ТКТ, мкм): (2000 /1,199) х (ТКП/ТКПР). (7) Трабекулярное костное разделение (ТКР, мкм): (2000 х 1,199) х (ОМП - ТКП).
II) Измерения и расчеты, связанные с резорбцией кости (1) Число остеокластов (ЧО, #): общее количество остеокластов в пределах общей площади метафиза. (2) Периметр остеокласта (ПО, мм): длина трабекулярного периметра, покрытого остеокластом. (3) Число остеокластов/мм (ЧО/мм, #/мм): ЧО/ТКПР. (4) Процент периметра остеокласта (%ПО,%):ПО/ТКПРх100.
III) Измерения и расчеты, связанные с образование костиом и обновлением кости (1) Периметр, меченый кальцеином один раз (МОП, мм): общая длина трабекулярного периметра, меченого одной кальцеиновой меткой. (2) Периметр, меченый кальцеином два раза (МДП, мм): общая длина трабекулярного периметра, меченого двумя кальцеиновыми метками. (3) Ширина между метками (ШММ, мкм): среднее расстояние между двумя кальцеиновыми метками. (4) Процент минерализации периметра (ПМП, %): (МОП/2 +
МДП)/ТКПР х 100. (5) Скорость минеральной аппозиции (СМА, мкм/день): (ШММ/интервал между метками). (6) Скорость образования кости/поверхность геГ. (СКО/ТКПР, мкм2/день/ мкм): (МОП/2 + МДП) х СМА/ТКПР. (7) Ско рость обновления кости (СТК, %/год): (МОП/2 + МДП) х СМА/ТКП х 100.
Гистоморфометрия кортикального слоя кости
Для статического и динамического гистоморфометрических измерений кортикального слоя стержня большеберцовой кости используют гистоморфометрическую систему В|ос.|иап1 О8/2 (К&М Ь|оте1г1ск, 1пс., МакйуШе, ΤΝ). Измеряют общую площадь ткани, площадь полости костного мозга, периостеальный периметр, эндокортикальный периметр, периметр, меченый один раз, периметр, меченый два раза и ширину между метками как периостеальной, так и эндокортикальной поверхности, и рассчитывают площадь кортикального слоя кости (общая площадь ткани - площадь полости костного мозга), процент кортикального слоя кости (площадь кортикального слоя/общая площадь ткани х 100), процент периостеального и эндокортикального меченого периметра [(периметр, меченый один раз/2 + периметр, меченый два раза)/общий периметр х 100], скорость минеральной аппозиции (ширину между метками/интервалы), скорость образования кости [скорость минеральной аппозиции х (периметр, меченый один раз/2 + периметр, меченый два раза)/ общий периметр].
Статистика
Статистические данные можно рассчитать с использованием пакетов 81а1У1е\у 4.0 (АЬасик СопсерК 1пс., Вегке1еу, СА). Для того, чтобы сравнить различия между группами, используют дисперсионный анализ (АNОVА), а затем Икйег РЬ8О.
Определение увеличения цАМФ в клеточных линиях 293-8 устойчиво суперэкспрессирующих рекомбинантные рецепторы ЕР2 и ЕР4 человека.
кДНК, представляющие собой законченные открытые рамки считывания рецепторов человека ЕР2 и ЕР4, синтезируют обратной транскриптазной полимеразной цепной реакцией с использованием олигонуклеотидных праймеров на основании опубликованных последовательностей (1, 2) и РНК от первичных почечных клеток человека (ЕР2) или первичных легочных клеток человека (ЕР4) в качестве матриц. кДНК клонируют во множественный сайт клонирования рс^NА8 (1иуйгодеи) и используют для трансфекции почечных эмбриональных клеток человека 293-8 через соосаждение фосфатом кальция. С418-резистентные колонии увеличиваются и их проверяют на специфическое связывание [3-Н]РСЕ2. Трансфектанты, проявляющие высокие уровни специфического связывания [3-Н]РСЕ2, в дальнейшем охарактеризовывают анализом Скэтчарда для определения Втах и Кбк для РСЕ2. Линии, выбранные для скрининга соединений, имеют приблизительно 338,400 рецепторов на клетку и Кб = 12нМ для РСЕ2 (ЕР2) и приблизительно 256,400 рецепторов на клетку и Кб = 2,9нМ для РСЕ4 (ЕР4). Конституитивная экспрессия обоих рецепторов в родительских клетках 293-8 является незначительной. Клетки хранят в КРМ1 с добавлением коровьей фетальной сыворотки (конечная концентрация 10%) и С418 (конечная концентрация 700 мкг/мл).
Отклики цАМФ в линиях 293-8/ЕР2 и 2938/ЕР4 определяют отделением клеток из колб для культивирования в 1 мл фосфатно-солевого буферного раствора (РВ8) с недостатком Са++ и Мд++ через энергичное растирание, добавление КРМ1 (без сыворотки) до конечной концентрации 1х106 клеток/мл и добавления 3-изобутил-1метаксантина (1ВМХ)до конечной концентрации 1 мМ. 1 мл суспензии клеток сразу же аликвотируют в индивидуальные 2 мл микроцентрифужные пробирки с завинчивающимися пробками и культивируют незакрытыми в течение 10 мин при 37°С, 5% СО2 и относительной влажности 95%. Затем к клеткам добавляют тестируемое соединение в разведении 1:100, так, чтобы конечная концентрация ДМСО или этанола составляла 1%. Сразу же после добавления соединения, пробирки закрывают, содержимое перемешивают, переворачивая пробирки 2 раза, и инкубируют при 37°С в течение 12 мин. Затем образцы лизируют путем инкубирования при 100°С в течение 10 мин и сразу же охлаждают во льду в течение 5 мин. Клеточные обломки осаждают центрифугированием при 1000 х д в течение 5 мин и осветленные лизаты переносят в новые пробирки. Концентрации цАМФ определяют с использованием коммерчески доступного набора для радиоиммунного анализа цАМФ (ΝΕΚ-033, НЕН/ОиРоп1) после разведения осветленных лизатов в буфере для радиоиммунного анализа (К1А) цАМФ (1:10). Обычно, клетки обрабатывают 6-8 концентрациями тестируемого соединения с логарифмической дискретностью, равной 1. Расчеты ЕС50 выполняют на карманном калькуляторе Не\\'1е11 Раскагб 328ΙΙ методом линейной регрессии на линейном участке кривых доза-ответ.
Ссылки:
1. Кедам, ГXV. ВаПеу, ТЛ. Реррег1, Ό.Γ Р1егсе, К.Ь. Водагбик, А.М. Оопе11о, ГЕ. ГапЬалп, С.Е. Κебζ^е. К.М. \Vοοб\νа^б. Ό.Γ. апб С11, Ό.ν. 1994 С1ошпд οί а Νο\ό1 Нитап Ргок!ад1апбш КесерЮг \\йй Сйагас1епкйск οί 1Не Рйагтасо1од1са11у ЭеПпеб ЕР2 8иЫуре. Мо1. Рйагтасо1оду 46:213-220.
2. Вакйеп, Ь. 8а\\уег, Ν., С^удο^сζик, К., МеИегк, К., апб Абат, М. 1994 С1ошпд, ГипсΙίοпа1 Ехргеккюп, апб Сйа^асΐе^^ζаΐ^οи οί 1йе Нитап Ргок1ад1апбт Е2 КесерЮг 8иЫуре. 1. Вю1. Сйет. Уо1 269,16:11873-11877.
Анализ связывания с рецепторами простагландина Е2
Приготовление мембран: все процедуры выполняют при 4°С. Трансфецированные клетки, экспрессирующие рецепторы простагланди на Е2 1 типа (ЕР1), 2 типа (ЕР2), 3 типа (ЕР3) или 4 типа (ЕР4) отделяют и суспендируют до концентрации 2 миллиона клеток на мл в Буфере А [50 мМ Трис-НС1 (рН 7.4), 10 мМ МдС12, 1 мМ ЕЭТА, 1 мМ пептида РсГаЬ1ос, (81дта, 81. Ьошк, МО), 10 мкМ пептида РНокрогатйбоп, (81дта, 81. Ьошк, МО), 1 мкМ пептида Рср§1а1т А, (81дта, 81. Ьошк, МО), 10 мкМ пептида Е1а§1а1та1, (81дта, 81. Ьошк, МО), 100 мкМ пептида Апйрат (81дта, 81. Ьошк, МО)]. Их лизируют ультразвуком (кошйсаИоп) с использованием Вгапкоп 8ошДсг (Мобс1 #250, Вгапкоп И11га§ошс8 СогрогаДоп, ОапЬигу, СТ) двумя пятнадцатисекундными импульсами. Нелизированные клетки и обломки удаляют центрифугированием при 100 х д в течение 10 мин. Затем центрифугированием при 45,000 х д в течение 30 мин отделяют мембраны. Осажденные мембраны ресуспендируют до концентрации белка 3-10 мг на мл, причем концентрацию белка определяют в соответствии со способом Бредфорда [ВгапГогб, М., Апа1. ВюсНст., 72, 248 (1976)]. Затем ресуспендированные мембраны хранят в замороженном состоянии при -80°С до применения.
Анализ на связывание: замороженные мембраны, приготовленные вышеупомянутым способом, размораживают и разводят в Буфере А до концентрации 1 мг белка на мл. Один объем препарата мембран объединяют с 0,05 объема тестируемого соединения или буфера и одним объемом 3 нМ 3Н-простагландина Е2 (#ТКК 431, АтсгкНат, Аг1шд1оп НадНК 1Ь) в Буфере А. Смесь (общий объем 205 мкл) инкубируют в течение 1 ч при 25°С. Затем мембраны извлекают фильтрованием через стекловолоконный фильтр типа СР/С (#1205-401, Уа11ас, СаИйсгкЬшд, МО) с использованием Тот1сс Нагусйсг (Мобс1 МасН 11/96, Тот1сс, Огапдс, СТ). Мембраны со связанным 3Н-простагландином Е2 остаются на фильтре, а буфер и несвязанный 3Н-простагландин Е2 направляются через фильтр в отходы. Затем каждый образец промывают 3 раза 3 мл [50 мМ Трис-НС1 (рН 7.4), 10 мМ МдС12, 1 мМ ЕЭТА|. Затем фильтры сушат нагреванием в микроволновой печи. Для определения количества 3Н-простагландина, связанного с мембранами, высушенные фильтры помещают в пластиковые контейнеры со сцинтилляционной жидкостью и подсчитывают счетчиком ЬКВ 1205 Вс1ар1а1с (Уа11ас, СаййсгкЬигд, МО). ИК50 определяют исходя из концентрации тестируемого соединения, требуемой для замещения 50% специфически связанного 3Нпростагландина Е2.
АНАЛИЗЫ НА ЗАЖИВЛЕНИЕ ПЕРЕЛОМА
АНАЛИЗ В ОТНОШЕНИИ ВЛИЯНИЯ НА ЗАЖИВЛЕНИЕ ПЕРЕЛОМА ПОСЛЕ СИСТЕМНОГО ВВЕДЕНИЯ
Методика перелома: крыс линии 8ргадсОаМсу в возрасте 3 месяцев анестезируют ке тамином. Выполняют 1 см надрез на переднемедиальной стороне проксимальной части правой большеберцовой кости или бедренной кости. Хирургическую методику для большеберцовой кости проводят следующим образом. Надрез доводят до кости, и просверливают отверстие 1 мм (4 мм проксимально к дистальной стороне бугристости большеберцовой кости и 2 мм медиально к переднему гребню).
Выполняют интрамедуллярную установку штифта в виде 0.8 мм трубки из нержавеющей стали (максимальная нагрузка 36,3 Н, максимальная прочность 61,8 Н/мм, трубка проверена в условиях, которые являются такими же, что и условия для костей). Никакого рассверливания медуллярного канала не выполняли. Стандартный закрытый перелом получают 2 мм выше большеберцового-малоберцового соединения сгибанием в трех точках с использованием специально сконструированных регулируемых щипцов с тупыми губками. Для сведения к минимуму повреждения мягкой ткани требуется осторожно выполнять перелом, чтобы его не сместить. Кожу зашивают нейлоновым шовным материалом в одну нить. Операцию выполняют в стерильных условиях. Сразу после установки штифта выполняют рентгенограммы всех переломов и исключают животных с переломами вне специфической диафизарной области или со смещенными штифтами. Оставшихся животных произвольно распределяют на следующие группы по 10-12 животных в каждой подгруппе для проверки заживления перелома. Первая группа ежедневно получает растворитель через желудочный зонд (вода:100%-ный этанол = (95:5) в количестве 1 мл на крысу), в то время как другие ежедневно получают через желудочный зонд от 0,01 до 100 мг/кг/день тестируемого соединения (1 мл на крысу) в течение 10, 20, 40 и 80 дней.
На 10, 20, 40 и 80 день 10-12 крыс из каждой группы анестезируют кетамином и подвергают аутопсии через обескровливание. Отрезают обе большеберцовые и малоберцовые кости и отделяют все мягкие ткани. Кости от 5-6 крыс каждой группы хранят в 70%-ном этаноле для гистологического анализа, а кости от других 5-6 крыс каждой группы хранят в буферном растворе Рингера (+4°С, рН 7.4) для рентгенограмм и биомеханического анализа, который впоследствии выполняют.
Гистологический анализ: способы гистологического анализа сломанной кости известны (МокскПбс апб Вак, ЕГГссй о! Сго\\1Н Ногтопс оп Ргас1игс НсаНпд ш Ка1к: А Н181о1од1са1 ЭскспрНоп. Вопс, 14:19-27, 1993). Кратко, по обе стороны линии перелома отпиливают по 8 мм сломанной части, недекальцинированные заливают метилметакрилатом и готовят фронтальные срезы толщиной 8 мкм на микротоме Кс1сНсй-Лшд Ро1уси1. Для визуализации клеточной или тканевой реакции на заживление перелома при лечении и без лечения применяют средние фронтальные срезы, окрашенные красителем Маккоп'к трихром (в том числе как большеберцовой, так и малоберцовой кости). Срезы, окрашенные сириусом красным, используют для демонстрации характеристик структуры костной мозоли и для дифференцирования между слившейся костной тканью и пластинчатой костной тканью в месте перелома. Выполняют следующие измерения: (1) промежуток перелома - измеряют как кратчайшее расстояние между концами кортикального слоя кости при переломе, (2) длина костной мозоли и диаметр костной мозоли, (3) площадь всего костного объема костной мозоли (4) площадь костной ткани на площадь ткани внутри области костной мозоли, (5) фиброзная ткань в костной мозоли, (6) площадь хряща костной мозоли.
Биомеханический анализ: способы биомеханического анализа известны (Вак апб Апбгеаккеп, Т11С ЕГГсс1к оЕ Адшд оп ЕтасШте Неайпд ίη Ва!к. Са1с1Г Тйкие 1п! 45:292-297, 1989). Кратко, до биомеханического испытания снимают рентгенограммы всех переломов. Механические свойства переломов, которые лечат, анализируют деструктивной методикой сгибания в трех или четырех точках. Определяют максимальную нагрузку, прочность, энергию при максимальной нагрузке, деформацию при максимальной нагрузке и максимальное напряжение.
АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ НА ЗАЖИВЛЕНИЕ ПЕРЕЛОМА ПОСЛЕ МЕСТНОГО ВВЕДЕНИЯ Методика перелома: для исследования используют гончих собак в возрасте двух лет. Поперечные радиальные переломы получают медленной непрерывной нагрузкой в три точки сгибания (Ьепейап, Т.М.; ВаШдапб, М.; Иипатакет, Ό.Μ.; ЭДооб, Е.Е.: ЕЕЕес!к оГ ЕН ЭР оп ЕгасЮге Неайпд ш Иодк. 1. Ог11юр. Век. 3:499-507; 1985). Чтобы обеспечить полное анатомическое разрушение кости по месту перелома натягивают проволоку. После этого, выполняют местную доставку агонистов простагландина в область перелома посредством медленного высвобождения доставляемого соединения или медленного высвобождения пилюль или мининасосами А1хе1 в течение 10, 15 или 20 недель.
Гистологический анализ: способы гистологического анализа сломанной кости известны (Ре!ег, С.Р.; Соок, ЭД.О.; Иипатакет, Ό.Μ.; Ргоуок1, М.Т.; Беебог, ТО.; Водап, О. А. ЕЕЕес!к оЕ А1епбгопа!е Оп ЕгасЮге Неа1шд Апб Вопе ВетобеНпд 1п Иодк. 1. Ог11юр. Век. 14:74-70, 1996; апб Мокекббе апб Вак, ЕЕЕес!к оЕ Сго\\Л1 Ногтопе оп ЕгасШте Неайпд ш Ва!к: А Н1к!о1од1са1 Эекспрбоп. Вопе, 14:19-27, 1993). Кратко, по обе стороны линии перелома отпиливают по 8 мм сломанной части, недекальцинированные заливают метилметакрилатом и готовят фронтальные срезы толщиной 8 мкм на микротоме Ве1сйеп-1ипд Ро1уси!. Для визуализации клеточного или тканевого ответа на заживление пере лома при лечении и без лечения используют средние фронтальные срезы, окрашенные красителем Маккоп'к трихром (в том числе как большеберцовой, так и малоберцовой кости). Срезы, окрашенные сириусом красным, используют для демонстрации характеристик структуры костной мозоли и для дифференцирования между слившейся костной тканью и пластинчатой костной тканью в месте перелома. Выполняют следующие измерения: (1) промежуток перелома - измеряют как кратчайшее расстояние между концами кортикального слоя кости при переломе, (2) длина костной мозоли и диаметр костной мозоли, (3) площадь всего костного объема костной мозоли, (4) площадь костной ткани на площадь ткани внутри области костной мозоли, (5) фиброзная ткань в костной мозоли, (6) площадь хряща костной мозоли.
Биомеханический анализ: способы биомеханического анализа известны (Вак апб Апбгеаккеп, ТЕе ЕЕЕес!к оЕ Адтд оп Е гас Юге Неа1шд ш Ва!к. Са1с1Е Тйкие 1п! 45:292-297, 1989; апб Ре!ег, С.Р.; Соок, ЭД.О.; Иипатакет, И.М.; Ртоуок!, М.Т.; Беебог, ТО.; Водап, О. А. ЕЕЕес!к оЕ А1епбгопа!е Оп ЕгасЮге Неа1шд Апб Вопе Ветобе1тд 1п Иодк. 1. Ог11юр. Век. 14:74-70, 1996). Кратко, до биомеханического испытания снимают рентгенограммы всех переломов. Механические свойства переломов, которые лечат, анализируют деструктивной методикой сгибания в трех или четырех точках. Определяют максимальную нагрузку, прочность, энергию при максимальной нагрузке, деформацию при максимальной нагрузке и максимальное напряжение.
ПРОТОКОЛ АГОНИСТА/АНТАГОНИСТА ЭСТРОГЕНА
Агонисты/антагонисты эстрогена являются классом соединений, которые ингибируют обновление кости и предупреждает потерю кости, индуцированную дефицитом эстрогена. В качестве модели постменопаузальной потери кости широко используют модель потери кости у овариэктомированной крысы. Используя эту модель можно проверить эффективность соединений агонистов/антагонистов эстрогена для предупреждения потери кости и ингибированя резорбции кости.
В этих исследованиях используют крыссамок Бртадие-ОаМеу (Сйат1ек В1ует, ЭДПтшд!оп, МА) различного возраста (такого как 5 месяцев). Во время экспериментального периода крысы живут в отдельных клетках 20 см х 32 см х 20 см. Всем крысам предоставляют свободный доступ к воде и коммерческий пищевой рацион в виде пилюль (Ад^ау РтоЬаЬ 3000, Ад\тау СошНу Еооб, 1пс.. Бугасике, ΝΥ), содержащий 0,97% кальция, 0,85% фосфора и 1,05 МЕ/г Витамина Ό3.
Группу крыс (от 8 до 10) ложно оперируют и перорально обрабатывают растворителем (10% этанола и 90% солевого раствора, 1 мл/день), в то же время оставшихся крыс билатерально подвергают овариэктомии (ОУХ) и обрабатывают любым растворителем (перорально), 17в-эстрадиолом (81дта, Е-8876, Е2, 30 мкг/кг, ежедневная подкожная инъекция) или агонистами/антагонистами эстрогена (такими как дролоксифен, 5, 10 или 20 мг/кг, ежедневное введение через рот) в течение некоторого периода (такого как 4 недели). Всем крысам подкожно вводят 10 мг/кг кальцеина (флюорохромный костный маркер) за 12 дней и 2 дня перед умерщвлением для того, чтобы проверить динамические изменения костной ткани. После 4 недель обработки крыс умерщвляют и подвергают аутопсии. Определяют следующие конечные точки: увеличение веса тела: вес тела во время аутопсии минус вес тела во время операции.
Вес матки и гистология: у каждой крысы во время аутопсии удаляют матку и сразу же взвешивают. После этого, матку подвергают гистологическим измерениям, таким как площадь ткани поперечного сечения матки, стромальная толщина и люминальная толщина эпителия.
Полный сывороточный холестерин: кровь добывают кардиальной пункцией и оставляют свертываться при 4°С, а затем центрифугируют при 2000 д в течение 10 мин. Образцы сыворотки анализируют на полный сывороточный холестерин, используя высокоэффективный холестерин-калориметрический анализ (Воейппдег Маппйеип ВюСйетюак, Ιηάίαηαροΐίδ. ΙΝ).
Минеральные измерения бедренной кости
У каждой крысы во время аутопсии удаляют правую бедренную кость, которую сканируют с использованием двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (ΌΕΧΑ, ΟΩΒ 1000/А, Но1од1с 1пс., АаНйашап, МА) с программным обеспечением К.едюпа1 Н1дй К.е§о1иΐίοη 8сап (Но1од1с 1пс., АаНйаш, МА). Размеры области сканирования составляют 5,08 х 1,902 см, разрешение - 0,0254 х 0,0127 см, а скорость сканирования - 7,25 мм/с. Анализируют сканированные изображения бедренной кости и определяют площадь кости, минеральный состав кости (МСК) и минеральную плотность кости (МПК) целых бедренных костей (ЦБК), дистальных бедренных метафизов (ДБМ), бедренного стержня (БС) и проксимальных частей бедренной кости (ПЧ).
Гистоморфометрические анализы проксимальных большеберцовых метафизов, губчатого вещества кости.
Правую большеберцовую кость удаляют во время аутопсии, отрезают мышцу и рубят кость на три части. Проксимальную часть большеберцовой кости и стержень большеберцовой кости фиксируют в 70%-ном этаноле, дегидратируют в этаноле при градиурованных концентрациях, обезжиривают в ацетоне и заливают метилметакрилатом (Еа§1шап Огдашс
Сйеш1са18, Восйейег, ΝΥ). Фронтальные срезы проксимальных большеберцовых метафизов толщиной 4 и 10 мкм готовят с использованием микротома Ве1с11ег1-Л.1пд Ро1уси1 8. Для гистморфометрии губчатого вещества кости применяют один срез 4 мкм и один срез 10 мкм от каждой крысы. Срезы 4 мкм окрашивают модифицированным красителем Маккоп'к трихром, в то время как срезы 10 мкм оставляют неокрашенными.
Для статического и динамического гистоморфометрических измерений вторичного спонгиоза проксимальных большеберцовых метафизов между 1,2 и 3,6 мм дистально к месту соединения растущей пластинки и эпифиза используют гистоморфометрическую систему Вюс.|иап1 О8/2 (В&М Ыотейзск, 1пс., №8ЙуШе, ΤΝ). Первыми 1,2 мм области, относящейся к метафизу большеберцовой кости, пренебрегают, чтобы ограничить измерения до вторичного спонгиоза. Срезы 4 мкм используют для определения индексов, связанных с объемом кости, структурой кости и резорбцией кости, в то время как срезы 10 мкм используют для определения индексов, связанных с образование костиом и обновлением кости.
I) Измерения и расчеты, связанные с трабекулярным костным объемом и структурой
1. Общая площадь метафиза (ОМП, мм2): площадь метафиза между 1,2 мм и 3,6 мм дистально к месту соединения растущей пластинки и эпифиза.
2. Трабекулярная костная площадь (ТКП, мм2): общая площадь трабекул внутри ОМП.
3. Трабекулярный костный периметр (ТКПР, мм): длина общего периметра трабекул.
4. Трабекулярный костный объем (ТКП/ОМП, %): ТКП/ОМП х 100.
5. Трабекулярное костное число (ТКЧ, #/мм): 1,199/2 х ТКПР/ОМП.
6. Трабекулярная костная толщина (ТКТ, мкм): (2000/1,199) х (ТКП/ТКПР).
7. Трабекулярное костное разделение (ТКР, мкм): (2000 х 1,199) х (ОМП -ТКП).
II) Измерения и расчеты, связанные с резорбцией кости
1. Число остеокластов (ЧО, #): общее количество остеокластов в общей площади метафиза.
2. Периметр остеокласта (ПО, мм): длина трабекулярного периметра, покрытого остеокластом.
3. Число остеокластов/мм (ЧО/мм, #/мм): ЧО/ТКПР.
4. Процент периметра остеокласта (%ПО, %): ПО/ТКПР х 100.
III) Измерения и расчеты, связанные с образование костиом и обновлением кости:
1. Периметр, меченый кальцеином один раз (МОП, мм): общая длина трабекулярного периметра, меченого одной кальцеиновой меткой.
2. Периметр, меченый кальцеином два раза (МДП, мм): общая длина трабекулярного периметра, меченого двумя кальцеиновыми метками.
3. Ширина между метками (ШММ, мкм): среднее расстояние между двумя кальцеиновыми метками.
4. Процент минерализации периметра (ПМП, %): (МОП/2 + МДП)/ТКПР х 100.
5. Скорость минеральной аппозиции (СМА, мкм/день): (ШММ/интервал между метками).
6. Скорость образования кости/поверхность ге£. (СКО/ТКПР, мкм2/день/мкм): (МОП/2 + МДП) х СМА/ТКПР.
7. Скорость обновления кости (СТК, %/год): (МОП/2 + МДП) х СМА/ТКП х 100.
Статистика
Статистические данные можно рассчитать с использованием пакетов §1а1У1ете 4.0 (АЬасиб СопсерК 1пс., Вегке1еу, СА). Для того, чтобы сравнить различия между группами используют дисперсионный анализ (АЫОУА), а затем Ибкег РЬ8И.
ПРОТОКОЛ КОМБИНИРОВАННОЙ И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОЙ ОБРАБОТКИ Следующие протоколы, конечно, могут быть изменены квалифицированными специалистами. Например, можно использовать интактных крыс-самцов или крыс-самок и крыссамцов (орхидэктомия) или крыс-самок (овариэктомия) с недостаточным количество половых гормонов. Кроме того, при исследовании можно применять крыс-самцов или крыс-самок разного возраста (таких как в возрасте 12 месяцев). Крысы могут быть или интактными, или кастрированными (овариэктомированными или орхидэктомированными), и им можно вводить анаболические агенты, такие как соединения по данному изобретению в различных дозах (таких как 1, 3 или 6 мг/кг/день) в течение некоторого периода (такого как от двух недель до двух месяцев), а затем антирезорбтивный агент, такой как дролоксифен в различных дозах (таких как 1, 5, 10 мг/кг/день) в течение некоторого периода (такого как от двух недель до двух месяцев), или можно осуществлять комбинированную обработку как анаболическим агентом, так и антирезорбтивным агентом в различных дозах в течение некоторого периода (такого как от двух недель до двух месяцев). Обработку кастрированных крыс можно начинать на следующий день после операции (с целью предотвращения потери кости) или в то время, когда уже произошла потеря кости (с целью восстановления костной массы). Крыс умерщвляют под анестезией кетамином.
Определяют следующие конечные точки Минеральные измерения бедренной кости: у каждой крысы во время аутопсии удаляют правую бедренную кость, которую сканируют с использованием двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (ИХА, РРК 1000/А,
Но1ощс 1пс., АаННатап, МА) с программным обеспечением Кедюпа1 Н 1дП Ке8о1ийоп 8сап (Но1ощс 1пс., АаИЪат, МА). Размеры области сканирования составляют 5,08 х 1,902 см, разрешение - 0,0254 х 0,0127 см, а скорость сканирования - 7,25 мм/с. Анализируют сканированные изображения бедренной кости и определяют площадь кости, минеральный состав кости (МСК) и минеральную плотность кости (МПК) целых бедренных костей (ЦБК), дистальных бедренных метафизов (ДБМ), бедренного стержня (БС) и проксимальных частей бедренной кости (ПЧ).
Минеральные размеры кости поясничного позвонка
Двухэнергетическую рентгеновскую абсорбциометрию (РЭК 1000/А, Но1ощс 1пс., АаНкатап, МА) с программным обеспечением Кедюпа1 Н1дН Ке8о1ийоп 8сап (Но1од1с 1пс., Ааккат, МА) используют для определения площади кости, минерального состава кости (МСК) и минеральной плотности кости (МПК) целого поясничного отдела позвоночника и каждого из шести поясничных позвонков (ПП1-6) у анестезированных крыс. Крыс анестезируют внутрибрюшинной инъекцией 1 мл/кг смеси кетамина и готрип (соотношение 4:3), а затем помещают на площадку для крыс. Размеры области сканирования составляют 6 х 1,9 см, разрешение - 0,0254 х 0,0127 см, а скорость сканирования - 7,25 мм/с. Получают и анализируют сканированное изображение целого поясничного отдела позвоночника. Определяют площадь кости (ПК) и минеральный состав кости (МСК), а минеральную плотность кости рассчитывают (МСК делят на ПК) для целого поясничного отдела позвоночника и каждого из шести поясничных позвонков (ПП1-6).
Гистоморфометрические анализы проксимальных большеберцовых метафизов, губчатого вещества кости
Правую большеберцовую кость удаляют во время аутопсии, отрезают мышцу и рубят кость на три части. Проксимальную часть большеберцовой кости и стержень большеберцовой кости фиксируют в 70%-ном этаноле, дегидратируют в этаноле при градиурованных концентрациях, обезжиривают в ацетоне и заливают метилметакрилатом (Еайтаи Огдашс Скет1са15, КоскеЧег, ΝΥ). Фронтальные срезы проксимальных большеберцовых метафизов толщиной 4 и 10 мкм приготавливают с использованием микротома РехНеН-Лтд Ро1уси1 8. Для гистморфометрии губчатого вещества кости применяют один 4 мкм срез и один 10 мкм срез от каждой крысы. 4 мкм срезы окрашивают модифицированным красителем Маккоп'к трихром, в то время как 10 мкм срезы оставляют неокрашенными.
Для статического и динамического гистоморфометрических измерений вторичного спонгиоза проксимальных большеберцовых метафи зов между 1,2 и 3,6 мм дистально к месту соединения растущей пластинки и эпифиза применяют Вюс.|иап1 О8/2 гистоморфометрическую систему (К&М ЬютеШск, 1пс., №1к11уП1е, ΤΝ). Первыми 1,2 мм области, относящейся к метафизу большеберцовой кости, следует пренебречь, для того, чтобы ограничить измерения до вторичного спонгиоза, 4 мкм срезы применяют для определения индексов, связанных с объемом кости, структурой кости и резорбцией кости, в то время как 10 мкм срезы применяют для определения индексов, связанных с образование костиом и (игпоуег кости.
I) Измерения и расчеты, связанные с трабекулярным костным объемом и структурой
1. Общая площадь метафиза (ОМП, мм2): площадь метафиза между 1,2 мм и 3,6 мм дистально к месту соединения растущей пластинки и эпифиза.
2. Трабекулярная костная площадь (ТКП, мм2): общая площадь трабекул внутри ОМП.
3. Трабекулярный костный периметр (ТКПР, мм): длина общего периметра трабекул.
4. Трабекулярный костный объем (ТКП/ОМП, %): ТКП/ОМП х 100.
5. Трабекулярное костное число (ТКЧ, #/мм): 1,199/2 х ТКПР/ОМП.
6. Трабекулярная костная толщина (ТКТ, мкм): (2000/1,199) х (ТКП/ТКПР).
7. Трабекулярное костное разделение (ТКР, мкм): (2000 х 1,199) х (ОМП -ТКП).
II) Измерения и расчеты, связанные с резорбцией кости
1. Число остеокластов (ЧО, #): общее количество остеокластов в общей площади метафиза.
2. Периметр остеокласта (ПО, мм): длина трабекулярного периметра, покрытого остеокластом.
3. Число остеокластов/мм (ЧО/мм, #/мм): ЧО/ТКПР.
4. Процент периметра остеокласта (%ПО, %): ПО / ТКПР х 100.
III) Измерения и расчеты, связанные с образование костиом и (игпоуег кости
1. Периметр, меченый кальцеином один раз (МОП, мм): общая длина трабекулярного периметра, меченого одной кальцеиновой меткой.
2. Периметр, меченый кальцеином два раза (МДП, мм): общая длина трабекулярного периметра, меченого двумя кальцеиновыми метками.
3. Ширина между метками (ШММ, мкм): среднее расстояние между двумя кальцеиновыми метками.
4. Процент минерализации периметра (ПМП, %): (МОП/2 + МДП)/ТКПР х 100.
5. Скорость минеральной аппозиции (СМА, мкм/день): (ШММ/интервал между метками).
6. Скорость образования кос- ти/поверхность геГ. (СКО/ТКПР, мкм2/день/ мкм): (МОП/2 + МДП) х СМА/ТКПР.
7. Скорость обновления кости (СТК, %/год): (МОП/2 + МДП) х СМА/ТКП х 100.
Статистика
Статистические данные можно рассчитать с использованием пакетов 81а1У1е\у 4.0 (АЬасик СопсерК Шс., Вегке1еу, СА). Для того, чтобы сравнить различия между группами, используют дисперсионный анализ (ΑΝΟνΑ), а затем ИкЛег РЬ8О.
Применение агониста рецептора простагландина в регенерации почки
Роль агониста простагландина в регенерации почки исследуют по способности РСЕ2 или агониста простагландина индуцировать экспрессию Костного Морфогенетического Белка 7 (ВМР) в клетках 2938 дикого типа и в клетках 2938, трансфецированных рецептором ЕР2.
Способы: клетки 2938 и ЕР2 2938 выращивают в модифицированной Дульбекко (Эи1Ьессо) среде Игла (ΌΜΕΜ, С1Ьсо, ВКЬ; СаЛЛегкЬигд, ΜΌ). За один день до обработки РСЕ2 или агонистом простагландина, клетки помещают в количестве 1,5 х 106 клеток на 100 мм чашку. На следующий день монослой клеток один раз промывают ОрЛМЕМ (С1Ьсо, ВКЬ), а затем добавляют 10 мл ОрЛМЕМ на чашку в присутствии или отсутствии растворителя (ДМСО), РСЕ2 (10-6М) или агониста простагландина (10-6М). Клетки отделяют и экстрагируют РНК на 8, 16 и 24 час. Проводят нозернблоттинг анализ всего материала (20 мг на дорожку) зондированием блотов зондом ВМР-7, меченым 32Р. При нанесении РНК блоты стандартизируют гибридизацией с зондом на 18к рибосомальную РНК, меченую 32Р. Обнаружено, что в зависимости от времени как РСЕ2, так и агонист простагландина индуцируют экспрессию ВМР-7 в клетках ЕР2 2938, но не индуцируют в родительской клеточной линии. Таким образом, приведены известная роль ВМР-7 в регенерации почки и способность агониста простагландина индуцировать экспрессию ВМР-7 в почечных клетках 2938 в зависимости от времени, а специфичность действия рецептора показывает роль агониста простагландина в регенерации почки.
Соединения по данному изобретению можно вводить любым способом, который доставляет соединение по данному изобретению системно и/или местно (например в область перелома кости, остеотомии или ортопедической операции). Эти способы включают в себя пероральные, парентеральные, интрадуоденальные пути и т.д. Обычно, соединения по данному изобретению вводят перорально, но можно применять парентеральное введение (например, внутривенное, внутримышечное, подкожное или интрамедуллярное), например, когда пероральное введение является неподходящим для органа-мишени, или когда пациент не способен проглотить лекарственное средство.
Соединения применяют для лечения и активации заживления переломов костей и остеотомии путем местного употребления (например, в областях костных переломов или остеотомии) соединений по данному изобретению или их композиций. Соединения по данному изобретению употребляют в области переломов костей или остеотомий, например либо инъекцией соединения в соответствующем растворителе (например масляном растворителе, таком как арахисовое масло) в хрящевую растущую пластинку, либо, в случаях открытой хирургии, местным употреблением таких соединений в подходящем носителе, таком как костный воск, деминерализованный костный порошок, полимерные костные цементы, костные пломбировочные материалы и т.д. Альтернативно, местное применение можно успешно выполнить путем употребления раствора или дисперсии соединения в подходящем носителе на поверхности, или включения его в твердые или полутвердые имплантаты, традиционно применяемые в ортопедической хирургии, такие как басгоп-текк, Согс-1сх'К гель-пена и к1е1 Ьопе или протезы.
Соединения по данному изобретению также можно употреблять местно в области перелома или остеотомии в подходящем носителе в сочетании с одним или более чем одним анаболическими агентами или костными антирезорбтивными агентами, описанными выше.
Два различных соединения по данному изобретению можно вводить совместно: одновременно или последовательно в любом порядке, или можно вводить единую фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы I, такое как описано выше, и второе соединение, такое как описано выше, в фармацевтически приемлемом носителе.
Например, можно применять только костный анаболический агент или в сочетании с антирезорбтивным агентом в течение от одной недели до трех лет, а впоследствии только антирезорбтивный агент в течение от трех месяцев до трех лет с возможным повтором полного цикла лечения. Альтернативно, можно применять только костный анаболический агент или в сочетании с антирезорбтивным агентом в течение от трех месяцев до трех лет, а впоследствии только антирезорбтивный агент в течение оставшейся жизни пациента. Например, в одном предпочтительном пути введения соединение формулы I, такое как описано выше, можно вводить один раз каждый день, а второе соединение, такое как описано выше (например, агонист/антагонист эстрогена) можно вводить ежедневно в однократной или многократных дозах. Альтернативно, например, в другом предпочтительном пути введения два соединения можно вводить последовательно, где соединение формулы I, такое как описано выше, можно вводить один раз каждый день в течение периода времени, достаточного для увеличения костной массы до уровня, который выше, чем порог перелома кости (\Уог1б НеаЦН Огдаш хабов ЗГибу \Уог1б Неакк Огдашхабоп, АккекктепГ ок РгасГиге Кщк апб 118 АррксаГюп Ю Зсгеешпд Гог Ройтепораи8а1 Ойеорогоыз (1994). Керой оГ а \Уог1б Неакк Огдашхабоп ЗГибу Сгоир. \Уог1б Неакк Огдашхабоп Тескшса1 Зепех 843), за которым следует введение второго соединения, такого как описано выше (например, агониста/антагониста эстрогена) ежедневно в однократной или многократных дозах. Предпочтительным является введение первого соединения, такого как описано выше, один раз каждый день в форме быстрой доставки, такой как пероральная доставка (например предпочтительно избегают доставку непрерывным высвобождением).
Так или иначе, количество и выбор определенного времени для соединений, которые следует вводить, конечно, будут зависеть от пациента, которого лечат, от тяжести страдания от болезни, от способа введения и от мнения врача, прописывающего лекарство. Поэтому, вследствие различия среди пациентов, дозы, данные ниже, являются ориентировочными, и врач может изменять дозы для успешного осуществления лечения (например, увеличения костной массы), таким образом, который, как он считает, является подходящим для пациента. Принимая во внимание уровень требуемого лечения, врач должен обдумывать ряд факторов, таких как начальный уровень костной массы, возраст пациента, наличие заболеваний, существующих до лечения, также как и наличие других заболеваний (например, сердечно-сосудистой болезни).
Обычно, применяют такое количество соединения по данному изобретению, чтобы оно было достаточным для увеличения костной массы до уровня, который выше, чем порог перелома кости (подробно изложено в \Уог1б Неакк Огдашхабоп ЗГибу).
Обычно, эффективная доза для анаболических агентов, описанных выше, находится в пределах от 0,001 до 100 мг/кг/день, предпочтительно от 0,01 до 50 мг/кг/день.
В следующих абзацах предлагаются предпочтительные пределы доз для различных антирезорбтивных агентов.
Количество антирезорбтивного агента, который следует применять, устанавливают по его активности, как агента, ингибирующего потерю кости. Эту активность устанавливают при помощи фармакокинетик для индивидуальных соединений и их минимальной и максимальной эффективной дозе в ингибировании потери кости, с использованием протокола, такого как описано выше (например в ПРОТОКОЛ АГОНИСТА/АНТАГОНИСТА ЭСТРОГЕНА).
Обычно, эффективная доза для антирезорбтивных агентов представляет собой от прибли зительно 0,001 до приблизительно 20 мг/кг/ день.
Обычно, эффективная доза для прогестинов представляет собой от приблизительно 0,1 до 10 мг в день; предпочтительная доза представляет собой от приблизительно 0,25 до 5 мг в день.
Обычно, эффективную дозу для полифосфонатов устанавливают по их эффективности как агентов, ингибирующих резорбцию кости в соответствии со стандартными анализами.
Суточное введение некоторых полифосфонатов находится в пределах от приблизительно 0,001 мг/кг/день до приблизительно 20 мг/кг/ день.
Обычно, эффективная доза для лечения по данному изобретению, например, лечения резорбции кости по данному изобретению, агонистов/антагонистов эстрогена по данному изобретению, находится в пределах от 0,01 до 200 мг/кг/день, предпочтительно от 0,5 до 100 мг/кг/день.
В частности, эффективная доза для дролоксифена находится в пределах от 0,1 до 40 мг/кг/день, предпочтительно от 0,1 до 5 мг/кг/день.
В частности, эффективная доза для ралоксифена находится в пределах от 0,1 до 100 мг/кг/день, предпочтительно от 0,1 до 10 мг/кг/день.
В частности, эффективная доза для тамоксифена находится в пределах от 0,1 до 100 мг/кг/день, предпочтительно от 0,1 до 5 мг/кг/день.
В частности, эффективная доза для цис-6(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси) фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ола;
(-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2ола;
цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ола;
цис-1- [6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталина;
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина;
цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ола или
1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-фенил6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина находится в пределах от 0,0001 до 100 мг/кг/день, предпочтительно от 0,001 до 10 мг/кг/день.
В частности, эффективная доза для 4гидрокситамоксифена находится в пределах от 0,0001 до 100 мг/кг/день, предпочтительно от 0,001 до 10 мг/кг/день.
Соединения по настоящему изобретению обычно вводят в форме фармацевтической ком позиции, содержащей по меньшей мере одно из соединений по данному изобретению вместе с фармацевтически приемлемым наполнителем или разбавителем. Таким образом, соединения по данному изобретению можно вводить индивидуально или вместе в любой традиционной пероральной, парентеральной, ректальной или трансдермальной лекарственной форме.
Для перорального введения фармацевтическая композиция может принимать форму растворов, суспензий, таблеток, пилюль, порошков и им подобных. Таблетки, содержащие различные эксципиенты, такие как цитрат натрия, карбонат кальция и фосфат кальция, применяют вместе с различными разрыхлителями, такими как крахмал, предпочтительно картофельный крахмал или крахмал тапиоки, и некоторыми комлексными силикатами, вместе со связывающими агентами, такими как поливинилпирролидон, сахароза, желатин и аравийская камедь. Кроме того, часто являются полезными для целей изготовления таблеток смазывающие агенты, такие как стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк. Твердые композиции подобного типа также применяют в качестве наполнителей в мягких и твердо-наполненных желатиновых капсулах; в этой связи предпочтительные материалы включают в себя лактозу или молочный сахар, а также полиэтиленгликоли с высокой молекулярной массой. Когда для перорального введения требуются водные суспензии и/или эликсиры, то соединения по настоящему изобретению можно объединять с различными подсластителями, корригентами, красителями, эмульгаторами и/или суспендирующими агентами, а также с такими разбавителями, как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин и различными их комбинациями.
Для парентерального введения можно употреблять растворы в кунжутном или арахисовом масле, или в водном пропиленгликоле, а также стерильные водные растворы соответствующих водорастворимых солей. Такие водные растворы, если необходимо, могут быть подходящим образом смешаны с буферным раствором, а жидкий разбавитель может быть приведен к изотоническому состоянию достаточным количество соли или глюкозы. Эти водные растворы особенно подходят для внутривенных, внутримышечных, подкожных и внутрибрюшинных инъекций. В этой связи все употребляемые стерильные водные среды получают стандартными методиками, хорошо известными квалифицированным специалистам.
Для введения через кожу (например местно) готовят разбавленные стерильные, водные или частично водные растворы (обычно приблизительно 0,1-5%-ной концентрации), во всем остальном подобные вышеупомянутым парентеральным растворам.
Способы приготовления различных фармацевтических композиций с некоторым коли чеством активного ингредиента являются известными или будут очевидны в свете этого описания для квалифицированных специалистов. Например, способы приготовления фармацевтических композиций описаны в литературе (Кетшдои'к Рйагтасеи!1са1 8с1еисек. Маск РиЬШЫид Сотраиу, Еак!ег, Ра., 154Ь Ебйюи (1975)).
Фармацевтические композиции по изобретению могут содержать 0,1-95% соединения(й) по данному изобретению, предпочтительно 170%. Так или иначе, композиция или фармацевтический препарат, которые следует вводить, будут содержать количество соединения(й) по изобретению, эффективное для лечения болезни/состояния пациента, которого лечат, например костного расстройства.
Так как настоящее изобретение имеет аспект, который относится к наращиванию и сохранению костной массы путем обработки комбинацией активных ингредиентов, которые можно вводить раздельно, изобретение также относится к объединению отдельных фармацевтических композиций в форму набора лекарственных средств. Набор лекарственных средств включает в себя две отдельные фармацевтические композиции: соединение формулы I и второе соединение, такое как описано выше. Набор лекарственных средств включает в себя контейнер, предназначенный для отдельных композиций, такой как разделенная бутыль или разделенная фольгой упаковка. Обычно набор лекарственных средств включает в себя инструкции для введения отдельных компонентов. Форма набора лекарственных средств является особенно полезной, когда отдельные компоненты предпочтительно вводят в различных формах дозы (например пероральной и парентеральной), вводят с разными интервалами доз или, когда врач, прописывающий лекарство, требует изменения индивидуальных компонентов комбинации.
Примером такого набора лекарственных средств является так называемая блистерная упаковка. Блистерные упаковки являются хорошо известными в промышленности, которая связана с упаковкой, и их широко применяют для упаковки фармацевтических стандартных лекарственных форм (таблеток, капсул и им подобных).
Блистерные упаковки обычно состоят из пластины относительно жесткого материала, покрытого фольгой предпочтительно прозрачного пластичного материала. Во время упаковочного процесса в пластичной фольге образуются углубления. Углубления имеют размер и форму таблеток или капсул, которые следует упаковать. Затем таблетки или капсулы помещают в углубления и пластину относительно жесткого материала запечатывают пластичной фольгой с лицевой стороны фольги, которая является противоположной направлению, в котором образуются углубления. В результате таблетки или капсулы запечатывают в углубления между пластичной фольгой и пластиной. Предпочтительно, прочность пластины является такой, что таблетки или капсулы можно удалять из блистерной упаковки путем нажатия рукой на углубления, посредством чего в пластине с лицевой части углублений образуется отверстие. Затем через указанное отверстие можно удалить таблетку или капсулу. Желательно, чтобы набор лекарственных средств мог оказывать помощь для запоминания приема лекарства, например, в виде чисел рядом с таблетками или капсулами, где числа соответствуют режимным дням, в которые таблетки или капсулы, отмеченные таким образом, следует проглотить. Другим примером такой помощи для запоминания приема лекарства является календарь, напечатанный на карточке, например, следующим образом: Первая неделя, понедельник, вторник, ... и т.д. Вторая неделя, понедельник, вторник, ... и т. д.. Другие варианты помощи для запоминания приема лекарства будут очевидны. Суточной дозой может быть одна таблетка или капсула, или несколько пилюль или капсул, которые следует принимать в данный день. Суточная доза соединения формулы I может состоять также из одной таблетки или капсулы, в то время как суточная доза второго соединения может состоять из нескольких таблеток или капсул, и наоборот. Помощь для запоминания приема лекарства должна это отображать.
В другом специфическом воплощении изобретения предложен дозатор, предназначенный для дозирования суточных доз в срок и в назначенной последовательности. Предпочтительно, дозатор снабжают помощью для запоминания приема лекарства, чтобы в дальнейшем следовать режиму. Примером такой помощи для запоминания приема лекарства является механический счетчик, который указывает число суточных доз, которое было дозировано. Другим примером такой помощи для запоминания приема лекарства является память на микросхеме с батарейкой, соединенная со счетчиком на жидком кристалле, или со слышимым напоминающим сигналом, который, например, отсчитывает дату, когда была принята последняя суточная доза, и/или напоминает, когда следует принять следующую дозу.
Соединения по данному изобретению обычно вводят либо отдельно, либо в комбинации друг с другом или с другими соединениями, в подходящем препарате. Следующие примеры препаратов являются только иллюстративными, и не предназначены для ограничивания рамок настоящего изобретения.
В следующих препаратах активный ингредиент означает соединение по данному изобретению.
Препарат 1: Желатиновые Капсулы
Твердые желатиновые капсулы получают с использованием следующего:
Ингредиент Количество (мг/капсула)
Активный ингредиент 0,25-100
Крахмал, ΝΕ 0-650
Сыпучий порошок крахмала 0-50
Силиконовая жидкость (350 сантистокс) 0-15
Препарат в форме таблетки получают с использованием ингредиентов, указанных ниже: Препарат 2: Таблетки
Ингредиент Количество (мг/таблетка)
Активный ингредиент 0,25-100
Целлюлоза, микрокристаллическая 200-650
Диоксид кремния, белая сажа 10-650
Стеариновая кислота 5-15
Для формирования таблеток компоненты смешивают и прессуют.
Альтернативно, таблетки, каждая из которых содержит 0,25-100 мг активного ингредиента, изготавливают следующим образом:
Препарат 3: Таблетки
Ингредиент Количество (мг/таблетка)
Активный ингредиент 0,25-100
Крахмал 45
Целлюлоза, микрокристаллическая 35
Поливинилпирролидон (в виде 5%-ного раствора в воде) 4
Натрий карбоксиметилцеллюлоза 4,5
Стеарат магния 0,5
Тальк 1
Активные ингредиенты, крахмал и целлюлозу просеивают через сито №45 меш США и тщательно смешивают. Раствор поливинилпирролидона смешивают с полученными порошками, которые затем просеивают через сито №15 меш США. Полученные таким образом гранулы сушат при 50-60°С и просеивают через сито №18 меш США. Натрий карбоксиметильный крахмал, стеарат магния и тальк предварительно просеивают через сито №60 США, а затем добавляют к гранулам, которые, после смешивания, прессуют на таблеточной машине с образованием таблеток.
Суспензии, каждая из которых содержит 0,25-100 мг активного ингредиента на 5 мл дозы, изготавливают следующим образом.
Препарат 4: Суспензии
Ингредиент Количество (мг/5 мл)
Активный ингредиент 0,25-100 мг
Натрий карбоксиметилцеллюлоза 50 мг
Сироп 1,25 мг
Раствор бензойной кислоты 0,10 мл
Корригент сколько требуется
Краситель сколько требуется
Очищенная вода (до) 5 мл
Активный ингредиент просеивают через сито №45 меш США и смешивают с натрий карбоксиметилцеллюлозой и сиропом с образованием однородной пасты. Раствор бензойной кислоты, корригент и краситель разбавляют некоторым количество воды и при перемешивании добавляют. Затем добавляют воду в количестве, достаточном для получения требуемого объема.
Аэрозольный раствор получают из следующих ингредиентов.
Препарат 5: Аэрозоль Ингредиент
Активный ингредиент Этанол
Количество (%мас.)
025
25,75
Пропеллент 22 (хлордифторметан) 70,00
Активный ингредиент смешивают с этанолом и смесь добавляют к порции пропеллента 22, охлажденного до 30°С, и переносят в устройство для наполнения. Затем в контейнер из нержавеющей стали подают требуемое количество и разбавляют оставшимся пропеллентом. Затем на контейнер устанавливают вентильную арматуру.
Суппозитории получают следующим образом
Препарат 6: Суппозитории
Ингредиент Количество (мг/суппозиторий)
Активный ингредиент 250
Глицериды насыщенных жирных кислот 2,000
Активный ингредиент просеивают через
сито №60 меш США и суспендируют в глицеридах насыщенных жирных кислот, предварительно расплавленных с использованием минимального количества необходимого тепла. Затем смесь вливают в суппозиторную форму номинальной емкости 2 г и оставляют охлаждаться.
Внутривенный препарат получают следующим образом
Препарат 7: Внутривенный Раствор
Ингредиент Количество
Активный ингредиент 20 мг
Изотонический солевой раствор 1,000 мл
Раствор вышеупомянутых ингредиентов внутривенно вводят пациенту со скоростью приблизительно 1 мл в минуту.
Также вышеупомянутый активный ингредиент может представлять собой комбинацию агентов.
ОСНОВНЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДИКИ
ЯМР спектры регистрируют на Уапап ХЬ300 (Уапап Со., Ра1о Αΐΐο, Са1йогша), Вгикег ΑΜ-300 спектрометре при приблизительно 23°С при 300 МГц для ядер протона и 75,4 МГц для ядер углерода (Вгикег Со., ВШепса, Маззасйцзе11з) или Уапап ип11у 400 при 400 МГц для ядер протона. Химические сдвиги выражают в частях на миллионную долю (млн-1) по отношению к триметилсилану. Формы пиков обозначают следующим образом: з, синглет; й, дублет; ΐ, триплет; д, квартет; т, мультиплет; Ьз = широкий синглет. Резонансы, определенные в качестве взаимозаменяемых, не проявляются в индивидуальном ЯМР эксперименте, где образец встряхивают с несколькими каплями Ό20 в том же растворителе. Масс-спектры химической ионизации при атмосферном давлении (АДХИ) получают на Ечзопз Р1аГГогт II спектрометре. Масс-спектры химической ионизации получают на Не\\'1е11-Раскагб 5989 приборе (Не\\'1е11Раскагб Со., Ра1о Л1Ю. СакГогша) (ионизация аммиаком, РВМ8). Когда описана интенсивность хлор- или бром-содержащих ионов, то наблюдают ожидаемое соотношение интенсивностей (приблизительно 3:1 для 35С1/37С1содержащих ионов и 1:1 для 79Вг/81Вгсодержащих ионов) и приводится только интенсивность иона с более низкой массой.
Колоночную хроматографию выполняют или на Вакег силикагеле (Вакег 8Шса Ое1 40 мкм, кТ. Вакег, РЫШркЬигд, N.1.) или на силикагеле 60 (8Шса Ое1 60, ЕМ 8аепсек, С1ЬЬкЮшп. N.1.) в стеклянных колонках под низким давлением азота. Радиальную хроматографию выполняют с использованием хроматрона (Сйгота1оп, тобе1 7924Т, Наткоп Некеагсй). Если не оговорено особо, применяемые реагенты являются промышленными продуктами. Диметилформамид, 2-пропанол, тетрагидрофуран и дихлорметан, применяемые в реакциях в качестве растворителей, являются безводными и поставляются Л1бпс11 С11ет1са1 Сотрапу (Мбшаикее. ХУксопкт). Микроанализы выполняет 8с11\\'агхкорГ М1сгоапа1у1юа1 ЬаЬога1огу, ХУообк1бе. ΝΥ. Термины концентрируют и совместно упаривают относятся к удалению растворителя на ротационном испарителе с водоструйным насосом при температуре бани менее, чем 45°С. Реакции, осуществляемые при 0-20°С или 0-25°С, проводят при первоначальном охлаждении сосуда в изолированной ледяной бане, который затем оставляют нагреваться до комнатной температуры за несколько часов. Сокращения мин и ч обозначают минуты и часы, соответственно.
Пример 1. 7-{[4-(1-Гидроксигексил)бензил] пропиониламино }энантовая кислота.
Стадия А. Образование амида
7-Метил-{ [4-( 1-гидроксигексил)бензил] пропиониламино }гептаноат.
Раствор 7-метил-{[4-(1-гидроксигексил) бензил]амино}гептаноата (314 мг, 0,90 ммоль), пропионовой кислоты (73,02 мг, 0,99 ммоль) и ЦКД (203,6 мг, 0,99 ммоль) в СН2С12 (20 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Твердые вещества удаляют фильтрованием, а фильтрат концентрируют в вакууме. К остатку добавляют Е1ОАс и нерастворимую часть удаляют фильтрованием. Органический раствор последовательно промывают водным раствором НС1 (5,5%, 1х), водой, водным NаНСОз (1х) и рассолом (1х). Органический раствор сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют, получая 7-метил-{[4-(1-гидроксигексил)бензил]пропиониламино}гептаноат (403 мг) в виде масла, которое применяют без дальнейшей очистки.
Стадия Б. Гидролиз
7-{[4-(1-Гидроксигексил)бензил]пропиониламино}энантовая кислота.
Способом, аналогичным методике, описанной в стадии Б примера 1, 7-метил-{[4-(1гидроксигексил)бензил]пропиониламино}гептаноат (365 мг, 0,90 ммоль) гидролизуют при комнатной температуре за 24 ч, получая указанное в заглавии соединение (254 мг) в виде масла. 'Н ЯМР (300 МГц, СЭС13) б 7.33-7.11 (т, 4Н), 4.434.66 (т, 3Н), 3.33 (1, 1Н), 3.17 (1, 1Н), 2.25-2.47 (т, 4Н), 1.02-1.87 (т, 19Н), 0.86 (т, 3Н); МС 391,4 (М+).
Примеры 2-3.
Примеры 2-3 получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным способу для примера 1.
Пример 2. 7-{Бутирил-[4-(1-гидроксигексил)бензил] амино }энантовая кислота.
!Н ЯМР (300 МГц, СОС13) б 7.32-7.21 (б, 2Н), 7.15-7.02 (б, 2Н), 4.60 (ф 1Н), 4.40 (к, 2Н), 3.22 (1, 2Н), 2.70 (1, 2Н), 2.41-2.20 (1, 2Н), 1.851.55 (т, 10Н), 1.45-1.22 (т, 8Н), 1.01-0.85 (т, 6Н); МС 404 (М-1).
Пример 3. 7-[(4-Бутилбензил)пропиониламино]энантовая кислота.
!Н ЯМР (300 МГц, СОС13) б 7.32-7.21 (б, 2Н), 7.10-7.00 (б, 2Н), 4.50 (к, 2Н), 3.30 (1, 2Н), 2.50 (т, 2Н), 2.32 (т, 4Н), 1.50 (т, 4Н), 1.22 (т, 8Н), 1.20 (1, 3Н), 0.95 (1, 3Н); МС 348 (М+).
ПРЕПАРАТ Г1.
1-Бромметил-4-бутил-бензол.
НВг барботируют в раствор (4-бутилфенил)метанола (10,0 г, 60,9 ммоль) и СН2С12 (100 мл) в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают в течение дополнительных 15 мин и вливают в ледяную воду. Водный раствор экстрагируют СН2С12 (2х) и сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют, получая указанное в заглавии соединение, которое применяют без дальнейшей очистки. 1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) б 7.29 (б, 2Н), 7.14 (б, 2Н), 4.49 (к, 2Н),
2.60 (1, 2Н), 1.58 (т, 2Н), 1.36 (т, 2Н), 0.92 (1, 3Н).
Следующие соединения получают из соответствующих исходных веществ аналогичным способом с использованием вышеупомянутой основной методики Препарата Г1.
ПРЕПАРАТ Г2.
1-Бромметил-4-изопропилбензол.
!Н ЯМР (400 МГц, СОС13) б 7.31 (б, 2Н), 7.19 (б, 2Н), 4.49 (к, 2Н), 2.90 (т, 1Н), 1.24 (б, 6Н).
ПРЕПАРАТ Д1.
4'-Бромметил-2-хлорбифенил.
Стадия А. Сузуки
Сочетание
4'-Метил-2-хлорбифенил.
Тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (637 мг, 0,551 ммоль), №2СО3 (5 мл, 1М) и 4метилбензолбороновую кислоту (1,5 г, 11,0 ммоль) добавляют к раствору 2-хлорйодбензола (1,315 г, 5,514 ммоль) в толуоле (98 мл) и Е1ОН (20 мл). Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч. Охлажден ный раствор разбавляют ЕЮ Ас, и органический раствор промывают водой (2х), а затем рассолом (1х). Органический раствор сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Продукт очищают флэш-хроматографией (от смеси гексанов до 10% ЕЮАс/смесь гексанов), получая 4'-метил-2-хлорбифенил (1,08 г). 1Η ЯМР (400 МГц, СБС13) б 7.49-7.21 (т, 8Η), 2.39 (з, 3Η).
Стадия Б. Бензильное бромирование
Смесь 4'-метил-2-хлорбифенила (1,08 г, 5,33 ммоль), БСИ (1,14 г, 6,40 ммоль) и ΑΙΒΝ (175 мг, 1,06 ммоль) в СС14 (37 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляют СН2С12 и органический раствор последовательно промывают насыщенным водным NаНСОз (2х), водой (1х) и рассолом (1х). Органический раствор сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Продукт очищают флэш-хроматографией (от смеси гексанов до 5% ЕЮАс/смесь гексанов), получая указанное в заглавии соединение (920 мг). '11 ЯМР (400 МГц, СБС13) б 7.63-7.25 (т, 8Η), 4.56 (з, 2Η).
Следующие соединения получают из соответствующих исходных веществ аналогичным способом с использованием вышеупомянутой основной методики Препарата Д1:
ПРЕПАРАТ Д2. 4'-Бромметил-2-трифторметилбифенил.
ПРЕПАРАТ Д3. 4'-Бромметил-2,6-дихлорбифенил. ПРЕПАРАТ Е1.
Метиловый эфир (3-бромметилфенил) уксусной кислоты
Раствор метилового эфира м-толилуксусной кислоты (11,41 г, 69,49 ммоль), Νбромсукцинимида (12,59 г, 70,73 ммоль), ΑΙΒΝ (100 мг) в СС14 (200 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют насыщенный водный NаНСОз. Водный раствор экстрагируют СН2С12 (2х) и органический раствор сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка флэшхроматографией (от смеси гексанов до 9:1 смесь гексанов/ЕЮАс) приводит к указанному в заглавии соединению в виде прозрачной и бесцветной жидкости (11,99 мг). 1Η ЯМР (400 МГц, СБС13) б 7.27 (т, 4Н), 4.47 (з, 2Н), 3.69 (з, 3Н), 3.62 (з, 2Н).
Следующее соединение получают из соответствующих исходных веществ аналогичным способом с использованием вышеупомянутой основной методики Препарата Е1.
ПРЕПАРАТ Е2.
2-(4-Бромметилфенил)пиридин.
ПРЕПАРАТ Ж1.
4-[(1-Ацетилокси)гексил]бензилбромид. Стадия А. Реакция Гриньяра и защита 4-[(1-Ацетилокси)гексил]толуол.
Пентилмагнийбромид (2,0М в Е12О, 25 мл, 50 ммоль) медленно добавляют к п-толилбензальдегиду (5,0 мл, 42,4 ммоль) в ТГФ (50 мл) при 0°С.
Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 3 ч. Добавляют водный раствор НС1 (1н.) и экстрагируют ЕЮ Ас. Органический раствор промывают рассолом, сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют. Остаток растворяют в пиридине (35 мл) и добавляют Ас2О (10 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 24 ч и разбавляют водой. Продукт экстрагируют ЕЮАс (3х) и органический раствор промывают 1н. НС1, а затем рассолом, сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют. Продукт очищают флэш-хроматографией (10% ЕЮАс/смесь гексанов), получая 4-[(1-ацетилокси)гексил] толуол (2,082 г). '11 ЯМР (400 МГц, СБС13) б 7.12-7.28 (т, 4Н), 5.69 (ΐ, 1Н), 2.33 (з, 3Н), 2.04 (з, 3Н), 1.88 (т, 1Н), 1.74 (т, 1Н), 1.27 (т, 6Н), 0.86 (т, 3Н); МС 252 (М+18).
Стадия Б. Бензильное бромирование.
Смесь 4-[(1-ацетилокси)гексил]толуола (2,082 г, 8,89 ммоль), БСИ (1,58 г, 8,89 ммоль) и каталитического количества ΑΙΒΝ в СС14 (30 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и промывают насыщенным водным NаНСО3, сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют. Продукт очищают флэш-хроматографией (5% ЕЮАс/смесь гексанов), получая указанное в заглавии соединение (2,67 г). '11 ЯМР (400 МГц, СБС13) б 7.34-7.40 (т, 4Н), 5.70 (ΐ, 1Н), 4.47 (з, 2Н), 2.06 (з, 3Н), 1.86 (т, 1Н), 1.73 (т, 1Н), 1.27 (т, 6Н), 0.85 (т, 3Н).
Следующее соединение получают из соответствующих исходных веществ аналогичным способом с использованием вышеупомянутой основной методики Препарата Ж1.
ПРЕПАРАТ Ж2.
1-(5-бромметилтиофен-2-ил)гексиловый эфир уксусной кислоты.
ПРЕПАРАТ З1.
Транс-1-(3-бромпропенил)-3,5-дихлорбензол.
Стадия А. Реакция Гриньяра 1-(3,5-Дихлорфенил)проп-2-ен-1-ол.
Раствор 3,5-дихлорбензальдегида (7,5 г, 43 ммоль) в ТГФ (75 мл) охлаждают до 0°С и по каплям добавляют винилмагнийбромид (1М в ТГФ, 48 мл, 48 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Добавляют водный раствор НС1 (1н.) и ЕЮАс. Водный раствор экстрагируют ЕЮАс (3х), а органический раствор сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют. Остаток применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки.
Стадия Б. Бромирование
Остаток, полученный на стадии А, растворяют в Е12О и через раствор медленно барботируют бромоводород в течение приблизительно 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч и добавляют ЕЮ Ас. Водный раствор экстрагируют ЕЮ Ас и органический раствор сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют. Очистка флэшхроматографией (смесь гексанов) приводит к указанному в заглавии соединению (6,91 г). 1Н ЯМР (400 МГц, ГОСТ) б 7.24 (к, 3Н), 6.53 (б, 1Н), 6.40 (т, 1Н), 4.10 (т, 2Н).
Следующее соединение получают из соответствующих исходных веществ аналогичным способом с использованием вышеупомянутой основной методики препарата З1.
ПРЕПАРАТ З2
Транс-1 -(3 -бромпропенил)-3.5-дифторбензол
Ή ЯМР (400 МГц, ГОСТ) б 6.83-6.95 (т, 2Н), 6.65-6.75 (т, 1Н), 6.55 (б, 1Н), 6.34-6.45 (т, 1Н), 4.10 (б, 2Н).
ПРЕПАРАТ И1.
4-Изобутилбензилбромид.
Стадия А. Восстановление (4-Изобутилфенил)метанол. Раствор алюмогидрида лития (30 мл, 1М в ТГФ, 30 ммоль) по каплям добавляют к раствору 4изобутилбензойной кислоты (5,34 г, 30 ммоль) в ТГФ (50 мл) при 0°С. Ледяную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь осторожно вливают в смесь льда и водного раствора НС1 (10 мл, 6н.). Продукт экстрагируют Е1ОАс и органический раствор сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют, получая (4-изобутилфенил)метанол, который применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки. !Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 7.26 (б, 2Н), 7.13 (б, 2Н), 4.65 (к, 2Н), 2.46 (б, 2Н), 1.85 (т, 1Н), 0.89 (б, 6Н).
Стадия Б. Бромирование
Бромоводород медленно барботируют через раствор (4-изобутилфенил)метанола (5 г, 28 ммоль) в Е12О (50 мл) в течение 10-15 мин. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч и выливают на лед. Добавляют ЕЮ Ас и органический раствор промывают рассолом (2х). Органический раствор сушат (Мд§О2), фильтруют и концентрируют, получая указанное в заглавии соединение (6 г). 'Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) б
7.28 (б, 2Н), 7.10 (б, 2Н), 4.49 (к, 2Н), 2.45 (б, 2Н), 1.84 (т, 1Н), 0.89 (б, 6Н).
Следующее соединение получают из соответствующих исходных веществ аналогичным способом с использованием вышеупомянутой основной методики препарата И1.
ПРЕПАРАТ И2.
1-(Бромметил)-4-(фенилметил)-бензол.
ПРЕПАРАТ М1.
1-(2-Бром-этокси)-3,5-дихлорбензол.
К раствору №1ОН (2,45 г, 61,3 ммоль) в воде (20 мл) добавляют 3,5-дихлорфенол (5 г, 30,7 ммоль). Раствор нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют дибромэтан (11,52 г, 61,3 ммоль) и реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 24 ч. Охлажденный раствор разбавляют ЕЮ Ас и органический раствор последовательно промывают НС1 (1н., 1х), водой (1х) и рассолом (1х). Органический раствор сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют. Очистка флэшхроматографией (от смеси гексанов до 5% Е1ОАс/смесь гексанов) приводит к указанному в заглавии соединению (3,79 мг). 1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 6.98 (т, 1Н), 6.82 (т, 2Н), 4.25 (1, 2Н), 3.61 (1, 2Н).
Следующие соединения получают из соответствующих исходных веществ аналогичным способом с использованием вышеупомянутой основной методики препарата М1:
ПРЕПАРАТ М2.
1-(2-Бромэтокси)-3,5-диметилбензол.
ПРЕПАРАТ М3.
1-(2-Бромэтокси)-3,5-диметоксибензол. ПРЕПАРАТ Н1.
4-(1-Гидроксигексил)бензальдегид.
Раствор 4-диэтоксиметилбензальдегида (0,300 мл, 1,51 ммоль) в ТГФ (3 мл) охлаждают до 0°С. По каплям добавляют пентилмагнийбромид (3,0 мл, 2,0 М в ТГФ, 6 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и нагревают до комнатной температуры. Добавляют насыщенный водный раствор ΝΉ4Ο и водный раствор экстрагируют Е1ОАс. Органический раствор промывают рассолом, сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют. Остаток растворяют в 10%-ном водном растворе ацетона (50 мл) и добавляют жидкую смолу АтЬег1ук115 (1,5 г). Смесь перемешивают в течение 24 ч и отфильтровывают резину через целит (Се1йе). Раствор концентрируют в вакууме. Очистка флэш-хроматографией (4:1 смесь гексанов: Е1ОАс) приводит к указанному в заглавии соединению (1,15 г). !Н ЯМР (400 МГц, ГОСТ) б 9.99 (к, 1Н), 7.86 (б, 2Н), 7.51 (б, 2Н), 4.77 (т, 1Н), 1.89 (т, 1Н), 1.74 (т, 2Н), 1.48-1.28 (т, 6Н), 0.87 (т, 3Н).
ПРЕПАРАТ О1.
1-(3-Бромпропил)-3-хлорбензол.
Стадия А. Восстановление.
3-(3 -Хлорфенил)пропан-1-ол. Суспензию алюмогидрида лития (2,08 г, 54,7 ммоль) в ТГФ (100 мл) охлаждают до -78°С. По каплям добавляют раствор 3-хлоркоричной кислоты (5,00 г, 27,4 ммоль) в ТГФ (25 мл). Холодную баню удаляют и смесь нагревают до комнатной температуры. Через 6 ч реакционную смесь охлаждают смешиванием с декагидратом сульфата натрия и смесь перемешивают в течение ночи. Твердые вещества удаляют фильтрованием при помощи ЕЮ Ас, а органический раствор промы вают рассолом, сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют в вакууме с образованием 3-(3хлорфенил)пропан-1-ола (5,17 г) в виде масла. 'Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) б 7.30-7.07 (т, 4Н), 5.06 (Ьк, 1Н), 3.67 (т, 2Н), 2.69 (т, 2Н), 1.89 (т, 2Н).
Стадия Б. Бромирование.
Раствор 3 -(3 -хлорфенил)пропан-1-ола (12,54 г, 73,6 ммоль) и Ν,Ν'-карбонилдиимидазола (13,12 г, 81 ммоль) в Ο^ϋΝ перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляют аллилбромид (53,43 г, 442 ммоль) и реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют рассол и ЕЮАс. Водный раствор экстрагируют ЕЮАс и органический раствор сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют. Флэш-хроматография приводит к указанному в заглавии соединению с выходом приблизительно 85%. '11 ЯМР (400 МГц, С1)С1;) б 7.307.09 (т, 4Н), 3.38 (ί, 2Н), 2.76 (ί, 2Н), 2.15 (ί, 2Н).
ПРЕПАРАТ П1.
2-Инданилэтилбромид.
Стадия А. Восстановление.
2-Инданилэтанол. Алюмогидрид лития (1М в ЕьО, 14 мл, 14 ммоль) медленно добавляют к раствору 2-инданилуксусной кислоты (2,5 г, 14 ммоль) в ЕьО. Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 2 ч и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют воду и ЕЮАс, и органический раствор промывают водой (2х) и рассолом (1х), сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют, получая 2-инданилэтанол (2,1 г), который применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки. Ή ЯМР (400 МГц, С1)С1;) б 7.08-7.24 (т, 4Н), 3.75 (ί, 2Н), 3.07 (т, 2Н), 2.61 (т, 3Н), 1.80 (т, 2Н);
МС 180(М+18).
Стадия Б. Бромирование.
2- Инданилэтилбромид. Ν,Ν'-Карбонилдиимидазол (2,0 г, 12,3 ммоль) добавляют к раствору 2-инданилэтанола (2,0 г, 12,3 ммоль) в ацетонитриле. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч и добавляют аллилбромид (8,93 г, 73,8 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 70°С в течение 24 ч и вливают в воду. Водный раствор экстрагируют ЕьО и органический раствор промывают водой (1х), а затем рассолом (1х). Органический раствор сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют, получая указанное в заглавии соединение (2,54 г). 'Н ЯМР (400 МГц, СИС13) б 7.10-7.25 (т, 4Н), 3.48 (ί, 2Н), 3.11 (т, 2Н), 2.63 (т, 3Н), 2.07 (т, 2Н).
ПРЕПАРАТ У1.
1-(3,5-Дихлорфенил)пропилбромид. Стадия А.
3- (3,5-Дихлорфенил)акриловая кислота.
Смесь 3,5-дихлорбензальдегида (15,0 г, 85,7 ммоль), малоновой кислоты (12,5 г, 120,2 ммоль) и пиперидина (5 мл) нагревают при 100°С в течение 2 ч и при 150°С в течение 1 ч. Реакционную смесь вливают в 3н. НС1 (200 мл) и фильтрованием удаляют осадок. Продукт очищают перекристаллизацией (100 мл горячего ЕЮН), получая 3-(3,5-дихлорфенил)акриловую кислоту (11,5 г). '11 ЯМР (250 МГц, ПМ8О-б6) б 12.6 (Ьк, 1Н), 7.83 (т, 2Н), 7.64-7.51 (т, 2Н), 6.72 (б, 1Н).
Стадия Б. Гидрирование.
3-(3,5-Дихлорфенил)пропионовая кислота. К раствору 10% Рб на угле (1,5 г) в ТГФ (200 мл) добавляют 3-(3,5-дихлорфенил)акриловую кислоту (11,5 г). Реакционную смесь гидрируют на шейкере Парра при 344,738кПа (50 пси) в течение 3 ч. Катализатор удаляют фильтрованием через целит (СеШе), а органический раствор концентрируют в вакууме, получая 3-(3,5дихлорфенил)пропионовую кислоту (11,3 г). 1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) б 7.00-7.35 (т, 3Н), 2.89 (ί, 2Н), 2.66 (ί, 2Н).
Стадия В. Восстановление.
3-(3,5-Дихлорфенил)пропанол. Ь1А1Н4 (1М в ЕьО, 10 мл, 10 ммоль) медленно добавляют к раствору 3-(3,5-дихлорфенил)пропионовой кислоты (2,19 г, 10 ммоль) в ЕьО (50 мл). Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и осторожно добавляют 2н. №ОН (1 мл) и насыщенный водный раствор ЫН4С1 (3 мл). Раствор фильтруют через целит (Се1Пе) и фильтрат сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют. Продукт очищают флэш-хроматографией (25%
ЕЮАс/смесь гексанов), получая 3-(3,5дихлорфенил)пропанол (640 мг). 1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) б 7.17 (т, 1Н), 7.07 (т, 2Н), 3.64 (т, 2Н), 2.65 (ί, 2Н), 1.84 (т, 2Н).
Стадия Г. Бромирование.
Трифенилфосфин (315 мг, 1,20 ммоль) добавляют к раствору 3-(3,5-дихлорфенил) пропанола (200 мг, 0,98 ммоль) в СН2С12 (20 мл). Реакционную смесь охлаждают до 0°С и по каплям добавляют бром (207 мг, 1,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь вливают в воду и водный раствор экстрагируют СН2С12. Органический раствор промывают рассолом, сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Продукт очищают флэш-хроматографией (смесь гексанов), получая указанное в заглавии соединение (134 мг). Ή ЯМР (400 МГц, С1)С1;) б 7.21 (т, 1Н), 7.08 (т, 2Н), 3.37 (ί, 2Н), 2.74 (ί, 2Н), 2.13 (т, 2Н).
ПРЕПАРАТ Х1.
Метиловый эфир 7-(4-бутил-фениламино)энантовой кислоты.
Следуя методике, описанной в стадии А примера 68, восстановительное аминирование 4бутилбензальдегида (1,50 г, 9,26 ммоль) гидро хлоридом метилового эфира 7-аминоэнантовой кислоты (1,51 г, 7,72 ммоль) приводит к указанному в заглавии соединению (955 мг). 'Н ЯМР (300 МГц, С1)С1;) Б 7.29 (Б, 2Н), 7.16 (Б, 2Н), 3.85 (8, 2Н), 3.67 (8, 3Н), 3.54 (т, 1Н), 2.70 (ΐ, 2Н), 2.59 (ΐ, 2Н), 2.29 (ΐ, 2Н), 1.60 (т, 6Н), 1.32 (т, 6Н), 0.92 (ΐ, 3Н); МС 306 (М+1).
Пример 4. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил]трифторацетиламино } пропил)тиофен-2карбоновая кислота.
Стадия А. Трет-бутиловый эфир 5-(3-{[3(3 -хлорфенил)пропил]трифторацетиламино} пропил)тиофен-2-карбоновой кислоты. Время реакции: 24 ч при комнатной температуре. МС 508 (М+18).
Стадия Б. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] трифторацетиламино}пропил)тиофен-2карбоновая кислота. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) Б 6.60-7.80 (т, 6Н), 3.22 (т, 4Н), 2.80 (т, 2Н), 2.63 (т, 2Н), 1.60-2.02 (т, 4Н); МС 433 (М-1).
Пример 5. (3-{[Метансульфонил-(4-метилбензил)амино] метил} фенил)уксусная кислота (сравнительный пример).
Стадия А. Восстановительное аминирование.
Этиловый эфир (3-{[(4-метилбензил) амино]метил}фенил)уксусной кислоты. Раствор 4метилбензиламина (0,097 мл, 0,76 ммоль) и этилового эфира (3-формилфенил)уксусной кислоты (138 мг, 0,72 ммоль) в МеОН (2 мл) перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и добавляют NаΒН4 (43 мг, 1,15 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 мин добавляют смесь насыщенного водного раствора NаНСО3 и Н2О (1:1). Продукт экстрагируют СН2С12 (3х) и органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют с образованием указанного в заглавии соединения (231 мг). 1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) Б 7.13-7.30 (т, 8Н), 4.14 (φ 2Н), 3.83 (Б, 4Н), 3.78 (8, 2Н), 2.34 (8, 3Н), 1.25 (ΐ, 3Н); МС 298 (М+1).
Стадия Б. Образование сульфонамида.
Этиловый эфир (3-{[метансульфонил-(4метилбензил)амино]метил}фенил)уксусной кислоты. К раствору этилового эфира (3-{[(4метилбензил)амино]метил}фенил)уксусной кислоты (119 мг, 0,401 ммоль) и триэтиламина (0,61 мл, 0,726 ммоль) в СН2С12 (2 мл) при 0°С добавляют метансульфонилхлорид (0,031 мл, 0,405 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 ч и добавляют 1н. НС1. Продукт экстрагируют СН2С12 (3х). Органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Продукт очищают хроматографией среднего давления (3:1 смесь гексанов:ЕЮАс), получая указанное в заглавии соединение (101,4 мг). 1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) Б 7.13-7.36 (т, 8Н), 4.274.30 (т, 4Н), 4.14 (ф 2Н), 3.60 (8, 2Н), 2.74 (8, 3Н), 2.33 (8, 3Н); МС 376 (М+1).
Стадия В. Гидролиз сложного эфира.
Стадия В. (3-{[Метансульфонил-(4-метилбензил)амино]метил}фенил)уксусная кислота. К раствору этилового эфира (3-{[метансульфонил(4-метилбензил)амино]метил}фенил)уксусной кислоты (101,4 мг, 0,27 ммоль) в МеОН (3 мл) добавляют водный раствор №1ОН (2н, 0,4 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч и разбавляют смесью 1н. НС1 и воды (1:1). Продукт экстрагируют СН2С12 (3х) и органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют, получая указанное в заглавии соединение (87 мг). 1Н ЯМР (400 МГц, С1ЯЪ) Б 7.13-7.34 (т, 8Н), 4.28 (Б, 4Н), 3.65 (8, 2Н), 2.75 (8, 3Н), 2.33 (8, 2Н); МС 346 (М-1).
Пример 6. 5-{3-[Циклопропанкарбонил(2,3-дигидробензо [1,4] диоксин-6-илметил)амино]пропил}тиофен-2-карбоновая кислота.
Стадия А. Восстановительное аминирование.
Метиловый эфир 5-{3-[(2,3-дигидробензо [1,4] диоксин-6-илметил)амино]пропил}тиофен-
2-карбоновой кислоты. Стадию А проводят способом, аналогичным способу для стадии А примера163.
Стадия Б. Образование амида.
Метиловый эфир 5-{3-[циклопропанкарбонил-(2,3-дигидробензо [1,4] диоксин-6-илметил) амино]пропил}тиофен-2-карбоновой кислоты. Раствор метилового эфира 5-{3-[(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-илметил)амино]пропил} тиофен-2-карбоновой кислоты (0,435 г, 0,125 ммоль), ЦКД (0,0284 г, 0,137 ммоль) и циклопропанкарбоновой кислоты (0,0119 г, 0,137 ммоль) в 10 мл СН2С12 перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь фильтруют и маточный раствор концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в 15 мл ЕЮАс и фильтруют. Органический раствор промывают водой, а затем рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии стадии Б соединение в виде масла (53 мг). МС 416 (М+).
Стадия В. Гидролиз сложного эфира.
5-{3- [Циклопропанкарбонил-(2,3 -дигидробензо[1,4]диоксин-6-илметил)амино]пропил} тиофен-2-карбоновая кислота. Стадию В проводят способом, аналогичным способу для стадии В примера 141. !Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) Б 7.70 (Ь8, 1Н), 6.50-7.00 (т, 4Н), 4.50 (8, 2Н), 4.20 (Ь8, 4Н), 3.32 (т, 2Н), 2.70 (т, 2Н), 1.70-1.80 (т, 2Н), 1.00-0.70 (т, 4Н); МС 402 (М+1), 400 (М-1).
Примеры 7-9.
Пример 182-184 получают способом, аналогичным способу для примера 181, из соответствующих альдегида и амина на стадии А с последующим образованием требуемого амида на стадии Б и гидролизом эфира на стадии В.
Пример 7. 5-[3-(Бензофуран-2-илметилциклопропанкарбониламино)пропил]тиофен-2карбоновая кислота. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 7.70 (Ьк, 1Н), 7.00-7.60 (т, 4Н), 6.60-6.95 (т, 2Н), 4.60 (к, 2Н), 3.20 (т, 2Н), 2.70 (т, 2Н), 1.80 (т, 2Н), 1.00-0.70 (т, 4Н); МС 384 (М+1), 382 (М-1).
Пример 8. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] пропиониламино}пропил)тиофен-2-карбоновая кислота. Ή ЯМР (400 МГц, СИСЬ) б 7.74 (б, 1Н), 7.30-7.00 (т, 4Н), 6.73 (б, 1Н), 3.20 (т, 4Н), 2.92 (т, 2Н), 2.71 (т, 2Н), 2.20 (т, 2Н), 1.89-1.70 (т, 4Н), 1.20 (ΐ, 3Н); МС 392 (М-1).
Пример 9. 5-(3-{Ацетил-[3-(3-хлорфенил) пропил]амино}пропил)тиофен-2-карбоновая кислота.
Стадия А. Метиловый эфир 5-(3-{[3-(3хлорфенил)пропил]амино}пропил)тиофен-2карбоновой кислоты. МС 352 (М+1).
Стадия Б. Метиловый эфир 5-(3-{ацетил[3 -(3-хлорфенил)пропил] амино }пропил)тиофен2-карбоновой кислоты. МС 394 (М+1).
Стадия В. 5-(3-{Ацетил-[3-(3-хлорфенил) пропил]амино}пропил)тиофен-2-карбоновая кислота. Ή ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 7.70 (б, 1Н, 1=4.0), 7.00-7.60 (т, 4Н), 6.80 (б, 1Н, 1=4.0), 3.25 (т, 4Н), 2.82 (т, 2Н), 2.60 (т, 2Н), 2.20 (к, 3Н), 1.60-2.00 (т, 2Н); МС 378 (М-1), 380 (М+1).
Пример 10. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] гидроксиацетиламино}пропил)тиофен-2карбоновая кислота.
Стадия А. Образование сульфонамида.
Метиловый эфир 5-(3-{[3-(3-хлорфенил) пропил]гидроксиацетиламино}пропил)тиофен-
2-карбоновой кислоты. Раствор метилового эфира 5-(3 -{[3 -(3 -хлорфенил)пропил]}пропил) тиофен-2-карбоновой кислоты (80,7 мг, 0,23 ммоль), ацетоксиуксусной кислоты (30 мг, 0,25 ммоль) и ЦКД (52 мг, 0,25 ммоль) в СН2С12 (10 мл) перемешивают в течение 24 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют. Остаток растворяют в ЕЮАс (15 мл) и фильтруют. Фильтрат последовательно промывают НС1 (5,5%, 1х), водой (1х), NаНСО3 (1х), рассолом (1х). Органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют, получая указанный в заглавии продукт в виде масла (90 мг). МС 452 (М+1).
Стадия Б. Гидролиз сложного эфира.
5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] гидроксиацетиламино }пропил)тиофен-2-карбоновая кислота. Указанное в заглавии соединение получают гидролизом метилового эфира 5-(3-{[3-(3хлорфенил)пропил]гидроксиацетиламино}пропил)тиофен-2-карбоновой кислоты. 1Н
ЯМР (400 МГц, СИСЬ) б 6.70-7.80 (т, 6Н), 3.24 (т, 4Н), 2.81 (т, 2Н), 2.60 (т, 2Н), 1.20-2.02 (т, 4Н); МС 394 (М-1), 396 (М+1).
Примеры 11-16.
Пример 11-16 получают способом, аналогичным способу для примера 198, через образование амида из соответствующего амина на стадии А с последующим гидролизом эфира на стадии Б.
Пример 11. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] циклопропанкарбониламино }пропил)тиофен-2карбоновая кислота.
Стадия А. Метиловый эфир 5-(3-{[3-(3хлорфенил)пропил] циклопропанкарбониламино } пропил)тиофен-2-карбоновой кислоты.
Стадия Б. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] циклопропанкарбониламино}пропил)тиофен-2карбоновая кислота. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭСЕ,) б 6.60-7.80 (т, 6Н), 3.25 (т, 4Н), 2.75 (т, 2Н),
2.60 (т, 2Н), 1.80-2.00 (т, 4Н), 0.70-1.00 (т, 4Н); МС 404 (М-1), 406 (М+1).
Пример 12. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил]циклобутанкарбониламино}пропил)тиофен2-карбоновая кислота.
Стадия А. Метиловый эфир 5-(3-{[3-(3хлорфенил)пропил]циклобутанкарбониламино }пропил)тиофен-2-карбоновой кислоты.
Стадия Б. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] циклопропанкарбониламино}пропил)тиофен-2карбоновая кислота. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭСЕ) б 6.60-7.70 (т, 6Н), 3.22 (т, 4Н), 2.86 (т, 2Н), 2.66 (т, 2Н), 1.66-1.99 (т, 10Н); МС 418 (М-1), 420 (М+1).
Пример 13. 5-(3-{Бутирил-[3-(3-хлорфенил) пропил]амино }пропил)тиофен-2-карбоновая кислота.
Стадия А. Метиловый эфир 5-(3-{бутирил[3-(3-хлорфенил)пропил] амино }пропил)тиофен2-карбоновой кислоты. МС 422 (М+1).
Стадия Б. 5-(3-{Бутирил-[3-(3-хлорфенил)пропил]амино}пропил)тиофен-2-карбоновая кислота. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭСЕ) б 6.667.70 (т, 6Н), 3.20 (т, 4Н), 2.81 (т, 2Н), 2.62 (т, 2Н), 1.70-2.20 (т, 6Н), 1.04 (ΐ, 3Н, 1=6.7); МС 408 (М+1), 406 (М-1).
Пример 14. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил]пропиониламино}пропил)фуран-2-карбоновая кислота.
Стадия А. Метиловый эфир 5-(3-{[3-(3хлорфенил)пропил]пропиониламино}пропил) тиофен-2-карбоновой кислоты. МС 392 (М+1).
Стадия Б. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] пропиониламино}пропил)фуран-2-карбоновая кислота. Ή ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 6.80-7.70 (т, 5Н), 6.21 (б, 1Н, 1=3.9), 3.20 (т, 4Н), 2.83 (т, 2Н), 2.60 (т, 2Н), 1.80-2.20 (т, 6Н), 1.04 (ΐ, 3Н, 1=6.8); МС 376 (М-1), 378 (М+1).
Пример 15. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] циклопропанкарбониламино }пропил)фуран-2карбоновая кислота.
Стадия А. Метиловый эфир 5-(3-{[3-(3хлорфенил)пропил] циклопропанкарбониламино } пропил)тиофен-2-карбоновой кислоты. МС 404 (М+1).
Стадия Б. 5-(3-{[3-(3-Хлорфенил)пропил] циклопропанкарбониламино}пропил)фуран-2карбоновая кислота. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭСЕ) б 6.80-7.40 (т, 5Н), 6.19 (б. 1Н, 1=4.0), 3.25 (т, 4Н), 2.81 (т, 2Н), 2.60 (т, 2Н), 1.60-2.00 (т, 4Н); МС 388 (М-1), 390 (М+1).
Пример 16. 5-(3-{Ацетил-[3-(3-хлорфенил) пропил]амино}пропил)фуран-2-карбоновая кислота.
Стадия А. Метиловый эфир 5-(3-{ацетил[3-(3-хлорфенил)пропил] амино }пропил)тиофен2-карбоновой кислоты. МС 378 (М+1).
Стадия Б. 5-(3-{Ацетил-[3-(3-хлорфенил) пропил]амино}пропил)фуран-2-карбоновая кислота. '11 ЯМР (400 МГц, СЭСЕ) б 6.82-7.70 (т, 5Н), 6.20 (б, 1Н, 1=4), 3.20 (т, 4Н), 2.80 (т, 2Н),
2.60 (т, 2Н), 2.10 (к, 3Н), 1.60-2.04 (т, 4Н); МС 362 (М-1), 364 (М+1).
ПРЕПАРАТЫ Г3-Г4.
Препараты Г4-Г6 получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным способу для препарата Г1.
ПРЕПАРАТ Г3.
1-Бромметил-4-пропилбензол.
Ή ЯМР (400 МГц, С0С1;) б 7.30-7.25 (т, 2Н), 7.14 (т, 2Н), 4.48 (к, 2Н), 2.56 (1, 2Н), 1.62 (т, 2Н), 0.93 (1, 3Н).
ПРЕПАРАТ Г4.
1- Бромметил-4-этилбензол.
Ί1 ЯМР (400 МГц, С0С1;) б 7.28 (т, 2Н), 7.16 (б, 2Н), 4.48 (к, 2Н), 2.63 (ф 2Н), 1.22(1, 3Н).
ПРЕПАРАТЫ Е3-Е4.
Препараты Е3-Е4 получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным способу для препарата Е1.
ПРЕПАРАТ Е3.
2- Бромметилбензофуран.
ПРЕПАРАТ Е4.
6-Хлор-2-бромметилбензофуран.
ПРЕПАРАТЫ М4-М17.
Препараты М4-М17 получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным способу для препарата М1.
ПРЕПАРАТ М4.
1-(2-Бромэтокси)-3 -этилбензол.
ПРЕПАРАТ М5.
1-(2-Бромэтокси)-3-изопропилбензол.
ПРЕПАРАТ М6.
1-(2-Бромэтокси)-3 -трифторметилбензол.
ПРЕПАРАТ М7.
1-(2-Бромэтокси)-3,5-дифторбензол.
Ή ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 6.42 (т, 3Н), 4.24 (1, 2Н), 3.62 (1, 2Н).
ПРЕПАРАТ М8.
1-(2-Бромэтокси)-3,5-дихлорбензол.
ПРЕПАРАТ М9.
1-(2-Бромэтокси)-3 -фторбензол.
ПРЕПАРАТ М10.
1-(2-Бромэтокси)-3-хлор-5-метоксибензол.
ПРЕПАРАТ М11.
1-(2-Бромэтокси)-3-этоксибензол.
ПРЕПАРАТ М12.
1-(2-Бромэтокси)-3 -хлорбензол.
ПРЕПАРАТ М13.
5-(2-Бромэтокси)бензо [1,3 ] диоксол.
Ί1 ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 6.69 (б, 1Н), 6.50 (к, 1Н), 6.33 (бб, 1Н), 5.91 (к, 2Н), 4.20 (1, 2Н), 3.59 (1, 2Н).
ПРЕПАРАТ М14.
1-(2-Бромэтокси)-3,5 -бис-трифторметилбензол.
ПРЕПАРАТ М15.
1-(3-Бромпропокси)-3-хлор-5-метоксибензол.
ПРЕПАРАТ М16.
1-(3 -Бромпропокси)-3,5-дихлорбензол.
ПРЕПАРАТ М17.
1-(2-Бромэтокси)-3-метоксибензол.
ПРЕПАРАТ Ч2.
Трет-бутиловый эфир 5-(3-оксопропил) тиофен-2-карбоновой кислоты.
Стадия А. Образование сложного эфира.
Трет-бутиловый эфир 5-бромтиофен-2карбоновой кислоты. К смеси безводного Мд8О4 (11,60 г, 96,4 ммоль) в 100 мл СН2С12 добавляют концентрированную Н28О4 (1,45 мл, 24,1 ммоль) и смесь перемешивают в течение 15 мин, а затем добавляют 5-бромтиофен-2карбоновую кислоту (5,0 г, 24,1 ммоль). После перемешивания в течение 1 мин, добавляют трет-бутанол (11,6 г, 20 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждают смешиванием с насыщенным NаНСО3. Слои разделяют, водный слой экстрагируют СН2С12 и объединенные органические слои сушат над Мд8О4. Органический раствор концентрируют с образованием прозрачного масла, которое очищают хроматографией среднего давления (3% Е1ОАс в смеси гексанов), получая указанное в заглавии соединение (4,97 г). 1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 7.45 (б, 1Н), 7.02 (б, 1Н), 1.54 (к, 9Н).
Стадия Б. Образование альдегида.
Трет-бутиловый эфир 5-(3-оксопропил) тиофен-2-карбоновой кислоты. К раствору третбутилового эфира 5-бромтиофен-2-карбоновой кислоты (0,50 г, 1,89 ммоль) в 5 мл ДМФ добавляют аллиловый спирт (0,51 мл, 7,57 ммоль), затем NаНСО3 (0,397 г, 4,72 ммоль), хлорид тетрабутиламмония (0,525 г, 1,89 ммоль) и ацетат палладия (0,021 г, 0,094 ммоль). Реакционную смесь помещают в масляную баню нагретую до 65°С и нагревают до 90°С в течение 2 ч. Смесь разбавляют Е1ОАс и 25 мл воды, и твердые вещества удаляют фильтрованием через целит (Сс111с). Слои разделяют и органический раствор промывают водой (4х), сушат над Мд8О4 и концентрируют до темно-желтого масла, которое очищают хроматографией среднего давления (7:1 смесь гексанов:Е1ОАс), получая указанное в заглавии соединение (0,190 г). 1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 9.80 (к, 1Н), 7.51 (б, 1Н), 6.78 (б, 1Н), 3.14 (1, 2Н), 2.86 (1, 2Н), 1.54 (к, 9Н).
ПРЕПАРАТ Щ1.
Этиловый эфир (3-формилфенил)уксусной кислоты.
Стадия А.
Способ А
Этиловый эфир (3-цианофенил)уксусной кислоты. К смеси этилового эфира (3-бром фенил)уксусной кислоты (15,3 г, 62,9 ммоль) и
1-метил-2-пирролидинона (125 мл) добавляют цианид меди (I) (8,46 г, 94,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают на масляной бане при 190°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и разбавляют ЕЮАс и смесью воды и МН4ОН (1:1). Реакционную смесь перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через целит (Се11!е). Водный слой промывают ЕЮАс (2х). Органический раствор промывают смесью воды и МН2ОН (1:1) до тех пор, пока цвет водных экстрактов не станет насыщенно-синим.
Органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют, получая этиловый эфир (3-циано-фенил)-уксусной кислоты (11,95 г). !Н ЯМР (400 МГц, СОС13) б 7.51-7.58 (т, 3Н), 7.43 (!, 1Н), 4.16 (ф 2Н), 3.63 (з, 2Н), 1.25 (!, 3Н).
Способ Б.
Этиловый эфир (3-цианофенил)уксусной кислоты. К смеси этилового эфира (3-бромфенил)уксусной кислоты (12,38 г, 54,05 ммоль), цианида цинка (4,33 г, 36,9 ммоль) и ДМФ (150 мл), находящейся в атмосфере азота, добавляют Рб(РРб3)4 (3,10 г, 2,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивают на масляной бане при 190°С в течение 2,5 ч и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют водный 5%-ный раствор МН4ОН и продукт экстрагируют ЕьО (3х). Объединенные органические экстракты промывают 5%-ным раствором МН4ОН, а затем рассолом. Органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют. Флэшхроматография (9:1 смесь гексанов :ЕЮ Ас) приводит к этиловому эфиру (3цианофенил)уксусной кислоты (9,08 г) в виде бледно-желтой жидкости, которая спектроскопически идентична жидкости, полученной по способу А, упомянутому выше.
Стадия Б.
Этиловый эфир (3-формилфенил)уксусной кислоты. К раствору этилового эфира (3-цианофенил)уксусной кислоты (4,8 г, 25,4 ммоль) в 75%-ной водной муравьиной кислоте добавляют сплав никеля и алюминия (4,6 г). Смесь нагревают с обратным холодильником (100°С) в течение 2,25 ч. Реакционную смесь охлаждают и фильтруют через целит (СеШе) при помощи кипящего ЕЮН. Фильтрат разбавляют водой и продукт экстрагируют СНС13 (3х). Органический раствор перемешивают с насыщенным раствором МаНСО3, пока величина рН не станет равной 8. Органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют. Продукт очищают флэш-хроматографией (5:1 смесь гексанов:ЕЮАс), получая указанное в заглавии соединение (3,33 г). !Н ЯМР (400 МГц, СОС13) б 7.76-7.79 (т, 2Н), 7.47-7.57 (т, 2Н), 4.15 (ф 2Н), 3.69 (з, 2Н), 1.25 (!, 3Н); МС 193 (М+1).
ПРЕПАРАТ Я1.
Метиловый эфир (3-формилфенил) уксусной кислоты.
Стадия А.
Метиловый эфир (3-цианофенил)уксусной кислоты. Азот барботируют через смесь метилового эфира (3-бромфенил)уксусной кислоты (22,85 г, 99,78 ммоль), Ζη(СN)2 (7,25 г, 61,75 ммоль) и ДМФ (100 мл) в течение примерно 5 мин, а затем добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (4,60 г, 3,98 ммоль). Реакционную смесь нагревают в течение 3 ч при 80°С и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют водный 2н. раствор МН4ОН и продукт экстрагируют ЕЮАс (3х). Органический раствор промывают 2н. МН4ОН (2х), а затем рассолом (2х). Органический раствор сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка флэш-хроматографией (6:1 смесь гексанов :ЕЮ Ас) приводит к указанному в заглавии соединению в виде масла (15,19 г). 1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) б 7.57-7.41 (т, 4Н), 3.706 (з, 3Н), 3.703 (з, 2Н).
Стадия Б.
Метиловый эфир (3-формилфенил) уксусной кислоты. Смесь метилового эфира (3цианофенил)уксусной кислоты (1,56 г, 8,91 ммоль), сплава алюминия и никеля (1,63 г) и 75%-ной муравьиной кислоты (25 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 1,75 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры и твердые вещества удаляют фильтрованием через целит (СеШе) при помощи кипящего ЕЮН. Добавляют воду и водный раствор промывают СН2С12 (3х). К органическому раствору аккуратно добавляют водный насыщенный раствор МаНСО3, пока величина рН не станет равной 8. Органический раствор промывают рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют. Очистка флэш-хроматографией (5:1 смесь гексанов :ЕЮАс) приводит к указанному в заглавии соединению в виде прозрачного и бесцветного масла (870 мг). !Н ЯМР (400 МГц, СОС13) б 9.98 (з, 1Н), 7.77 (т, 2Н), 7.55-7.46 (т, 2Н), 3.68 (з, 5Н).
ПРЕПАРАТ ВВ1.
3-(3 -Хлорфенил)пропионовый альдегид.
Раствор 1-хлор-3-йодбензола (9,63 г, 40,38 ммоль), аллилового спирта (5,86 г, 100,96 ммоль), бикарбоната натрия (8,48 г, 100,96 ммоль), хлорида тетрабутиламмония (11,22 г, 40,38 ммоль) и Рб(ОАс)2 (317 мг, 1,413 ммоль) в 25 мл ТГФ перемешивают при 50°С в течение 18 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой и водный раствор промывают ЕЮАс. Органический раствор промывают водой, а затем рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Продукт очищают флэш-хроматографией на силикагеле (9:1 смесь гексанов: ЕЮ Ас), получая указанное в заглавии соединение в виде масла (5,04 г).
ПРЕПАРАТ ВВ2.
3-(3 -Бромфенил)пропиональдегид.
Указанное в заглавии соединение получают способом, описанным выше для препарата ВВ1 при времени реакции 1 ч при 90°С.
ПРЕПАРАТ ГГ1.
Метиловый эфир 5-(3-аминопропил) тиофен-2-карбоновой кислоты.
Стадия А.
Метиловый эфир 5-(3-трет-Бутоксикарбониламинопроп-1-инил)тиофен-2-карбоновой кислоты. Смесь трет-бутилового эфира проп-2инилкарбаминовой кислоты (1,67 г, 0,011 ммоль), метилового эфира 5-бромтиофен-2карбоновой кислоты (2,50 г, 0,011 ммоль), тетракистрифенилфосфина(0) палладия (0,622 г, 0,0538 ммоль), СШ (0,102 г, 0,538 ммоль) и триэтиламина (1,57 мл, 0,011 ммоль) в 50 мл ацетонитрила в атмосфере азота нагревают с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют 75 мл ЕГОАс, промывают 5,5%ным раствором НС1, водой и рассолом, сушат над МдЗО4, фильтруют и концентрируют в вакууме до состояния масла. Продукт очищают флэш-хроматографией (от 9:1 до 4:1 смесь гексанов:ЕГОАс), получая указанное в заглавии соединение в виде масла (2,06 г). МС 313 (М+18).
Стадия Б.
Метиловый эфир 5-(3-трет-бутоксикарбониламинопропил)тиофен-2-карбоновой кислоты. Смесь метилового эфира 5-(3-трет-бутоксикарбониламино-проп-1-инил)тиофен-2-карбоновой кислоты (2,06 г) и 10% палладия на угле (1,03 г) в 50 мл МеОН гидрируют на шейкере Парра при 344,738 кПа (50 пси) Н2 в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтруют через целит (СеШе) при помощи МеОН и фильтрат концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение в виде твердого вещества (1,93 г). МС 317 (М+18).
Стадия В.
Метиловый эфир 5-(3-аминопропил) тиофен-2-карбоновой кислоты. Раствор метилового эфира 5 -(3 -трет-бутоксикарбониламинопропил)тиофен-2-карбоновой кислоты (0,118 г, 0,5 ммоль) в 50 мл МеОН охлаждают до 0°С и насыщают НС1 (г). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 90 мин. Раствор концентрируют до состояния твердого вещества, которое распределяют между ЕГОАс и насыщенным раствором NаНСОз. Слои разделяют и органический слой промывают рассолом, сушат над МдЗО4, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение в виде масла (399 мг). МС 200 (М+1).
ПРЕПАРАТ ГГ2.
Гидрохлорид метилового эфира 5-(3аминопропил)фуран-2-карбоновой кислоты.
Указанное в заглавии соединение получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным способу для препарата ГГ1, со следующими изменениями.
Гидрирование, выполняемое на стадии Б, проводят в течение 5,5 ч. На стадии В реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение в виде гидрохлорида.
ПРЕПАРАТ ДД1.
Трет-бутиловый эфир 5-(3-аминопропил) тиофен-2-карбоновой кислоты.
Стадия А.
Бензиловый эфир проп-2-инилкарбаминовой кислоты.
К раствору пропаргиламина (6,4 г, 71,2 ммоль) в пиридине (100 мл) добавляют бензилхлорформиат (13,37 г, 78,2 ммоль) в 100 мл СН2С12 за 0,5 ч. Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч и летучие вещества удаляют в вакууме. Остаток растворяют в ЕГОАс и органический раствор промывают водой (2х). Органический раствор промывают разбавленным водным раствором НС1, а затем насыщенным раствором NаНСОз. Органический раствор сушат над МдЗО4, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение (4,43 г).
Стадия Б.
Трет-бутиловый эфир 5-(3-бензилоксикарбониламино-проп-1-инил)тиофен-2-карбоновой кислоты. Указанное в заглавии соединение получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным стадии А препарата ГГ1.
Стадия В.
Гидрохлорид трет-бутилового эфира 5-(3аминопропил)тиофен-2-карбоновой кислоты. К раствору трет-бутилового эфира 5-(3-бензилоксикарбониламино-проп-1-инил)тиофен-2-карбоновой кислоты (1,0 г, 2,69 ммоль) в 15 мл МеОН и 2,69 мл 1н. водного раствора НС1 добавляют Рб(ОН)2 (1 г). Смесь встряхивают на шейкере Парра при 310,2642 кПа (45 пси) Н2 в течение 16 ч. Катализатор удаляют фильтрованием через целит (Се11Ге) и добавляют дополнительное количество Рб(ОН)2 (1 г). Смесь встряхивают на шейкере Парра при 310,2642 кПа (45 пси) Н2 в течение 6 ч и катализатор удаляют фильтрованием через целит (Се11Ге). Раствор концентрируют в вакууме. Остаток подвергают азеотропной перегонке с СС14 и перетирают с ЕГ2О, получая указанный в заглавии амин (360 мг).
ПРЕПАРАТ ЕЕ1.
Метиловый эфир 5-{3-[3-(3-хлорфенил) пропиламино]пропил}тиофен-2-карбоновой кислоты.
Раствор метилового эфира 5-(3-аминопропил)тиофен-2-карбоновой кислоты (0,118 г, 0,5 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,071 г,
0,55 ммоль) в 10 мл МеОН перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин и добавляют 3-(3-хлорфенил)пропионовый альдегид (0,093 г, 0,55 ммоль). Смесь перемешивают в течение 90 мин. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, добавляют NаВН4 (0,83 мл, 5,98 ммоль) и смесь перемешивают в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждают смешиванием со смесью NаНСОз и воды (1:1) и промывают СН2С12. Экстракты СН2С12 промывают рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение в виде масла (171 мг). МС 352 (М+1).
ПРЕПАРАТЫ ЕЕ2-ЕЕ4.
Препараты ЕЕ2-ЕЕ4 получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным способу для препарата ЕЕ1.
ПРЕПАРАТ ЕЕ2.
Трет-бутиловый эфир 5-{3-[3-(3-хлорфенил)пропиламино]пропил}тиофен-2-карбоновой кислоты.
Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 7.51 (б, 1Н), 7.25-7.05 (т, 4Н), 6.74 (б, 1Н), 2.83 (ΐ, 2Н), 2.722.59 (т, 6Н), 1.97-1.82 (т, 4Н), 1.53 (к, 9Н); МС 394 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЕЕ3.
Метиловый эфир 5-{3-[3-(3-хлорфенил) пропиламино]пропил}фуран-2-карбоновой кислоты. МС 336 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЕЕ4.
Метиловый эфир 5-{3-[3-(3-хлорфенил) пропиламино]пропил}тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты.
МС 340 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЖЖ1.
3-(3-Хлорфенил)пропиламин.
Стадия А.
3-(3-Хлорфенил)акриламид. Раствор 3-(3хлорфенил)акриловой кислоты (15,0 г, 82,15 ммоль) в 50 мл тионилхлорида нагревают с обратным холодильником в течение 30 мин. Избыток тионилхлорида удаляют перегонкой при атмосферном давлении. Остаток подвергают вакуумной азеотропной перегонке с бензолом с образованием 17,288 г оранжевого масла. Масло растворяют в 25 мл СН2С12 и раствор медленно добавляют к жидкому N43 (20 мл, 80,07 ммоль) в СНС13 (50 мл) при -78°С. Полученную суспензию нагревают до комнатной температуры и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение в виде серого твердого вещества (19,38 г)?Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 7.57 (к, 1Н), 7.45 (т, 2Н), 7.36 (т, 1Н), 6.64 (б, 1Н); МС 182 (М+1), 180 (М-1).
Стадия Б.
3-(3-Хлорфенил)пропиламин. 1,0 М раствор Ь1А1Н4 в ТГФ (6,0 мл, 6,0 ммоль) по каплям добавляют к суспензии 3-(3-хлорфенил) акриламида (1,0 г, 5,51 ммоль) в 30 мл ТГФ при 0°С. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 5 ч.
Добавляют дополнительное количество 1 М Ь1А1Н4 (4мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч. Добавляют дополнительное количество 1 М Ь1А1Н4 (2 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждают смешиванием с водой, которую добавляют по каплям. Смесь для удаления ТГФ концентрируют в вакууме и разбавляют водой. Водный раствор экстрагируют ЕЮАс. Органический раствор промывают водой, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в СНС13 и органический раствор промывают 1 М НС1. рН водного раствора доводят до 11 добавлением 1М №1ОН, и продукт экстрагируют СНС13. Органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение в виде желтого масла (0,134 г). Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 7.07.22 (т, 3Н), 7.16 (т, 1Н), 2.74 (ΐ, 2Н), 2.61 (ΐ, 2Н), 1.74 (т, 2Н); МС 170 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЗЗ1.
4-Пиримидин-2-ил-бензальдегид.
Раствор 2-бромпиримидина (1,00 г, 6,3 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (0,218 г, 0,189 ммоль) в диметиловом эфире этиленгликоля (30 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 10 мин. Добавляют раствор 4-формилбензолбороновой кислоты (1,14 г, 7,61 ммоль) и бикарбоната натрия (1,58 г, 18,9 ммоль) в 15 мл воды и реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 18 ч. Смесь разбавляют водой и СН2С12. Слои разделяют и водный раствор промывают СН2С12. Объединенные органические слои сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают флэшхроматографией (от 10% до 30% смесь гексанов в ЕЮАс), получая указанное в заглавии соединение (0,979 г). '11 ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 10.11 (к, 1Н), 8.83 (к, 2Н), 8.82 (к, 1Н), 7.98 (к, 2Н), 7.23 (к, 2Н).
ПРЕПАРАТЫ ЗЗ2-ЗЗ7.
Препараты ЗЗ2-ЗЗ7 получают из соответствующих исходных веществ способом, аналогичным способу для препарата ЗЗ1.
ПРЕПАРАТ ЗЗ2.
4-Пиридин-2-илбензальдегид.
'11 ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 10.09 (к, 1Н), 8.72 (к, 1Н), 8.16 (к, 2Н), 7.95 (к, 2Н), 7.79 (к, 2Н),
7.29 (т, 1Н); МС 184 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЗЗ3.
4-Пиридин-3-илбензальдегид.
'11 ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 10.04 (к, 1Н), 8.88 (к, 1Н), 8.64 (к, 1Н), 7.97 (к, 2Н), 7.91 (т, 1Н), 7.75 (т, 2Н), 7.39 (т, 1Н); МС 184 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЗЗ4. 4-Пиридин-4-илбензальдегид.
'11 ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 10.03 (к, 1Н), 8.70 (к, 2Н), 7.99 (к, 2Н), 7.79 (к, 2Н), 7.52 (к, 2Н); МС 184 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЗЗ5.
4-Тиазол-2-ил-бензальдегид. МС 189 (М+).
ПРЕПАРАТ ЗЗ6.
4-Пиримидин-5-ил-бензальдегид.
Ή ЯМР (400 МГц, СкС1;) й 10.03 (з, 1Н),
9.26 (з, 1Н), 9.00 (з, 2Н), 8.03 (т, 2Н), 7.76 (т, 2Н).
ПРЕПАРАТ ЗЗ7.
4- Пиразин-2-илбензальдегид.
'|| ЯМР (400 МГц, С1ЭС13) й 10.03 (з, 1Н), 9.10 (з, 1Н), 8.69 (з, 1Н), 8.59 (з, 1Н), 8.21 (й, 2Н), 8.03 (й, 2Н).
ПРЕПАРАТ ИИ1.
Этиловый эфир 5-(3-оксо-пропил)-1Нпиразол-3-карбоновой кислоты.
Стадия А.
5- (трет-Бутилдиметилсиланилокси)пентан2-он. Раствор 3-ацетил-1-пропанола (3,000 г, 29,37 ммоль), трет-бутилдиметилсилилхлорида (4,522 г, 30,00 ммоль) и имидазола (5,004 г, 73,5 ммоль) в ДМФ (40 мл) нагревают при 40°С в течение 5 ч и перемешивают при комнатной температуре в течение 66 ч. Добавляют воду (60 мл) и продукт экстрагируют ЕЮАс (4х50 мл). Объединенные органические экстракты промывают водой (2х50 мл), сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют. Очистка флэшхроматографией (смесь гексанов:ЕЮАс 9:1) приводит к указанному в заглавии соединению (3,722 г). '11 ЯМР (400 МГц, СОС1;) й 3.59 (ΐ, 2Н), 2.49 (ΐ, 2Н), 2.13 (з, 3Н), 1.76 (т, 2Н), 0.86 (з, 9Н), 0.02 (з, 6Н); МС 217 (М+1).
Стадия Б.
Этиловый эфир 7-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-2,4-диоксоэнантовой кислоты. Диэтилоксалат (4,048 г, 37,7 ммоль) добавляют к твердому этилату натрия (0,472 г, 69,3 ммоль) при 0°С, а затем медленно добавляют 5-(третбутил-диметилсиланилокси)пентан-2-он (1,500 г, 69,3 ммоль). Полученный оранжевый раствор перемешивают при 0°С в течение 10 мин и при комнатной температуре в течение 3 ч. Очистка флэш-хроматографией (от 19:1 смесь гексанов:ЕЮАс до 9:1 ЕЮАс:МеОН) приводит к указанному в заглавии соединению (1,982 г); МС 317 (М+1).
Стадия В.
Этиловый эфир 5-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)пропил]-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты. Раствор этилового эфира 7-(третбутилдиметилсиланилокси)-2,4-диоксоэнантовой кислоты (1,627 г, 51,4 ммоль) и гидразина (17 мл, 55 ммоль) в ЕЮН нагревают с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме. Очистка флэшхроматографией (6:4 смесь гексанов:ЕЮАс) приводит к указанному в заглавии соединению (333 мг). Ή ЯМР (400 МГц, СОСЕ) й 6.64 (з, 1Н), 4.37 (ф 2Н), 3.67 (ΐ, 2Н), 2.85 (ΐ, 2Н), 1.88 (т, 2Н), 1.38 (ΐ, 3Н), 0.88 (з, 9Н), 0.05 (з, 6Н); МС 313 (М+1).
Стадия Г.
Этиловый эфир 5-(3-гидроксипропил)-1Нпиразол-3-карбоновой кислоты. Раствор этилового эфира 5-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)пропил]-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (327 мг, 1,05 ммоль) и фторида тетрабутиламмония (288 мг, 1,10 ммоль) в ТГФ (50 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме. Флэш-хроматография (от ЕЮАс до ЕЮАс:МеОН 19:1) приводит к указанному в заглавии соединению (165 мг). 1Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ) й 6.58 (з, 1Н), 4.35 (ф 2Н), 3.71 (ΐ, 2Н), 2.84 (ΐ, 2Н). 1.91 (т, 2Н), 1.36 (ΐ, 3Н); МС 199 (М+1).
Стадия Д.
Этиловый эфир 5-(3-оксопропил)-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты. Диметилсульфоксид (0,14 мл, 1,9 ммоль) медленно добавляют к раствору оксалилхлорида (0,137 мг, 1,08 ммоль) в СН2С12 (1 мл) и ТГФ (1 мл) при -78°С. После перемешивания в течение 5 минут раствор по каплям добавляют к раствору этилового эфира
5-(3-гидроксипропил)-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (178 мг, 0,898 ммоль) в ТГФ (10 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 0,5 ч и добавляют триэтиламин (0,64 мл).
Суспензию перемешивают в течение 40 мин и нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляют СН2С12: смесь гексанов (1:4, 40 мл) и смесь промывают 10%ным водным раствором бисульфата натрия (15 мл), а затем водой (2 х 10 мл). Органический раствор сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют, получая указанный в заглавии альдегид. '11 ЯМР (400 МГц, С1ЭСЕ) й 9.82 (з, 1Н), 6.59 (з, 1Н), 4.35 (ф 2Н), 3.06 (т, 2Н), 2.84 (ΐ, 2Н), 1.91 (т, 2Н), 1.34 (ΐ, 3Н); МС 197 (М+1).
ПРЕПАРАТ ЛЛ1.
5-(3 -Бромпропил)бензо [1,3] диоксол. Стадия А.
3-Бензо [1,3] диоксол-5-илпропан-1-ол.
Алюмогидрид лития (1М в ТГФ, 30 мл, 30 ммоль) медленно добавляют к раствору 3бензо(1,3] диоксол-5 -илпропионовой кислоты (5,83 мл, 30 ммоль) в ТГФ (60 мл) при 0°С. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. Раствор порциями добавляют к смеси льда (200 г) и концентрированного раствора НС1 (2 мл). Продукт экстрагируют ЕЮАс. Органический раствор сушат над Мд§О4, фильтруют и концентрируют. Флэш-хроматография (смесь гексанов: ЕЮАс 6:4) приводит к указанному в заглавии спирту (4,51 г). '11 ЯМР (400 МГц, С1ЭСЕ) й 6.73-6.62 (т, 3Н), 5.91 (з, 2Н), 3.66 (ΐ, 2Н), 2.63 (ΐ, 2Н), 1.84 (т, 2Н).
Стадия Б.
5-(3 -Бромпропил)бензо [1,3] диоксол. Следуя методике, описанной в стадии Б препарата П1, 3-бензо[1,3]диоксол-5-илпропан-1-ол пре вращают в указанный в заглавии бромид. 'Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) б 6.74-6.63 (т, 3Н), 5.92 (8, 2Н), 3.37 (1, 2Н), 2.69 (1, 2Н), 2.11 (т, 2Н).
ПРЕПАРАТ ММ1.
2-(3 -Йодпропил)фуран.
К раствору 3-фуран-2-илпропан-1-ола (6,3 г, 50 ммоль) в пиридине (40 мл) при -15°С порциями добавляют п-толуолсульфонилхлорид (11,4 г, 60 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч. Добавляют воду (10 х 0,5 мл) и смесь вливают в смесь концентрированного раствора НС1 (65 мл) и льда (200 гм). Продукт экстрагируют Е12О и органический раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют, получая желтое масло. Масло добавляют к смеси NаI (9 г, 60 ммоль) в ацетоне (70 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 15 ч. Нерастворимые вещества удаляют фильтрованием и фильтрат концентрируют в вакууме. Очистка флэш-хроматографией (смесь гексанов) приводит к указанному в заглавии соединению (7,2 г). 1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) б
7.30 (т, 1Н), 6.28 (т, 1Н), 6.04 (т, 1Н), 3.19 (1, 2Н), 2.75 (1, 2Н), 2.14 (т, 2Н).
ПРЕПАРАТ НН1.
Гидрохлорид метилового эфира 3-(3-аминопропил)бензойной кислоты.
Стадия А.
Метиловый эфир 3-(3-трет-бутоксикарбониламино-проп-1-инил)бензойной кислоты.
Следуя основной методике, описанной в стадии А препарата В1, трет-бутиловый эфир проп-2инилкарбаминовой кислоты подвергают реакции сочетания с 3-бромметилбензоатом, получая указанное в заглавии соединение. МС 307 (М+18).
Стадия Б.
Метиловый эфир 3-(3-трет-бутоксикарбониламинопропил)бензойной кислоты. Следуя основной методике, описанной в стадии Б препарата В1, метиловый эфир 3-(3-третбутоксикарбониламино-проп-1-инил)бензойной кислоты гидрируют, получая указанное в заглавии соединение. МС 311 (М+18).
Стадия В.
Гидрохлорид метилового эфира 3-(3аминопропил)бензойной кислоты. Раствор метилового эфира 3-(3-трет-бутоксикарбониламинопропил)бензойной кислоты (565 мг) в МеОН (25 мл) охлаждают до 0°С и раствор насыщают хлороводородом. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч и концентрируют в вакууме, получая указанный в заглавии амин (399 мг). МС 194 (М+1).
ПРЕПАРАТ РР1.
Гидрохлорид метилового эфира 5-(3аминопропил)тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты.
Стадия А.
Метиловый эфир 5-(3-трет-бутоксикарбониламино-проп-1-инил)фуран-2-карбоновой кислоты. Указанное в заглавии соединение получают способом, описанным в стадии А препарата ГГ1.
Стадия Б.
Метиловый эфир 5-(3-трет-бутоксикарбониламинопропил)тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты и метиловый эфир 5-(3-третбутоксикарбониламинопропил)фуран-2-карбоновой кислоты. К раствору метилового эфира 5(3 -трет-бутоксикарбониламино-проп-1-инил) фуран-2-карбоновой кислоты (1,69 г) в МеОН (50 мл) добавляют 10% палладия на угле (850 мг) и смесь гидрируют на шейкере Парра при 344,738 кПа (50 пси) в течение 18 ч. Катализатор удаляют фильтрованием через целит (Се111е) и летучие вещества концентрируют в вакууме. Флэш-хроматография (смесь гексанов :Е1О Ас 4:1) приводит к метиловому эфиру 5-(3-третбутоксикарбонил-аминопропил)фуран-2-карбоновой кислоты (422 мг, МС 284 М+), а затем к метиловому эфиру 5-(3-трет-бутоксикарбониламинопропил)тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты (903 мг).
Стадия В.
Гидрохлорид метилового эфира 5-(3-аминопропил)тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты. Указанное в заглавии соединение получают из метилового эфира 5-(3-трет-бутоксикарбониламинопропил)тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты следуя методике, описанной в стадии В для препарата ГГ2.
ПРЕПАРАТ СС1.
3-(1Н-Индол-3 -ил)пропиламин.
Описан способ получения указанного в заглавии реагента (1аск8оп, Е Ат. СПет. 8ос., 52, 5029-5033, 1990).
ПРЕПАРАТ ТТ1.
2-(Бифенил-2-илокси)этиламин.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (СВ 521575).
ПРЕПАРАТ УУ1.
2-(3-Хлорфенилсульфанил)этиламин.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (Реб. Вер. Сег. 8сг РБагт., 56, 4, 229-234, 1988).
ПРЕПАРАТ ФФ1.
2- (4-Хлорфенилсульфанил)этиламин.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (Сап. 1. СПет., 37, 325-329, 1959).
ПРЕПАРАТ ХХ1.
3- (4-Хлорфенил)пропиламин.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (1. Меб. СПет., 39, 25. 4942-4951, 1996).
ПРЕПАРАТ ЦЦ1.
4- Фенетилсульфанилбензальдегид.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (ЕР 332331).
ПРЕПАРАТ ЧЧ1.
4-(2-Оксопирролидин-1-ил)-бензальдегид.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (Кика1епко, СНет. Не1егосус1. Сотрб. (Епд1. Тгап§.), 8, 43, 1972).
ПРЕПАРАТ ШШ1.
4- Циклогексилбензиламин.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (Мед1ю апб со^огкег8, Рагтасо Еб. 8с1; 1Т; 35, 3, 191-202, 1980).
ПРЕПАРАТ ЩЩ1.
3-Гидрокси4-пропоксибензальдегид.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (Веке, Ас1а СЫш. Асаб. 8с1. Нипд., 14, 325-8,1958).
ПРЕПАРАТ ЯЯ1.
5- Фенилфуран-2-карбальдегид.
Указанный в заглавии реагент может быть получен известным способом (1)'Аипа апб со^огкегз, Не1егосус1е§, 24, 6,1575-1578, 1986).

Claims (39)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы γ—(сн2)п—ο(θζ ζα—ζ
    I К4---Аг---рз или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство, где Υ представляет собой Н или (С3-С7)циклоалкил;
    п равно числу от 0 до 5;
    группировка Υ-(£Η2)^(Ό)- возможно моно-, ди- или тризамещена по углероду независимо гидрокси или галогеном-;
    С) представляет собой -(С4-С8)алкилен- или -(С1-С5)алкилен-Х;
    Х представляет собой 5- или 6-членное ароматическое кольцо, которое возможно имеет один гетероатом, независимо выбранный из кислорода и серы;
    Ζ представляет собой карбоксил или (С1С6)алкоксикарбонил;
    К4 представляет собой (С1-С8)алкилен;
    Аг является полностью ненасыщенным 58-членным кольцом или бициклическим кольцом, состоящим из двух конденсированных частично насыщенных, полностью насыщенных или полностью ненасыщенных 5- или 6членных колец, взятых независимо, возможно имеющим от одного до четырех гетероатомов, представляющих собой кислород;
    К5 представляет собой -Н;
    указанная группировка Аг возможно замещена по углероду на одном кольце, если группировка является моноциклической, или на одном или обоих кольцах, если группировка является бициклической, заместителями в количестве вплоть до трех, независимо выбранными из К1, К2 и К3, где К1, К2 и К3 представляют собой галоген или (С1-С7)алкил;
    К1, К2 и К3 возможно независимо монозамещены по углероду гидрокси; и при условии, что когда К4 представляет собой (С2-С4)алкилен, а Аг представляет собой циклопент-1-ил, циклогекс-1-ил, циклогепт-1-ил или циклоокт-1-ил, тогда указанные (С5-С8)циклоалкильные заместители не замещены по положению один гидрокси, и при условии, что 6-[(3-фенилпропил)-(2пропилпентаноил)амино]капроновая кислота и ее этиловый эфир не включены.
  2. 2. Соединение по п.1, где Х представляет собой тиенил и Аг представляет собой фенил, бензо [Ь]фуранил или 2,3-дигидробензо[1,4] диоксинил.
  3. 3. Соединение по п.1, где Х представляет собой тиенил и Аг представляет собой фенил.
  4. 4. Соединение по п.3, где группировка Υ-(£Η2)^(Ο)- возможно моно-, ди- или тризамещена по углероду независимо галогеном;
    К4 представляет собой метилен и
    К1 представляет собой хлор-, фтор- или (С1-С4)алкил.
  5. 5. Соединение по п.2, где
    К4 представляет собой метилен;
    Аг представляет собой фенил, где -Аг замещен по меньшей мере К1; и
    К1 представляет собой (С1-С7)алкил, возможно монозамещенный гидрокси.
  6. 6. Соединение по п.5, где п равно 2;
    С) представляет собой н-гексилен;
    Ζ представляет собой карбоксил и группировка -Аг-К5 представляет собой
    4-(н-1-гидроксигексил)фенил.
  7. 7. Соединение по п.2, где группировка Υ(СН2)п-С(О)- возможно моно-, ди- или тризамещена независимо по углероду галогеном.
  8. 8. Соединение по п.2, где группировка Υ(СН2)п-С(О)- возможно моно-, ди- или тризамещена по углероду независимо галогеном; и Аг представляет собой фенил.
  9. 9. Способ лечения млекопитающего, имеющего состояние, при котором наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства.
  10. 10. Способ по п.9, где лечат остеопороз, остеотомию, детскую идиопатическую потерю кости или потерю кости, связанную с периодонтитом.
  11. 11. Способ по п.10, где лечат остеопороз у человека.
  12. 12. Способ по п.9, где лечат остеопороз, индуцированный глюкокортикоидом, остеопороз, индуцированный гипертиреоидизмом, остеопороз, индуцированный иммобилизацией, остеопороз, индуцированный гепарином, или остеопороз, индуцированный иммуносупрессивным средством.
  13. 13. Способ наращивания и сохранения костной массы у млекопитающего, при котором млекопитающему вводят терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства.
  14. 14. Способ по п.13, где осуществляют заживление кости после лицевой реконструкции, верхнечелюстной реконструкции или нижнечелюстной реконструкции, индуцируют вертебральный синостоз или усиливают вытяжение длинных костей, усиливают скорость заживления костного трансплантата или усиливают врастание протеза.
  15. 15. Способ по п.13, где лечат перелом кости у человека.
  16. 16. Фармацевтическая композиция, которая содержит терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства, и фармацевтически приемлемый носитель.
  17. 17. Фармацевтическая композиция по п.16 для лечения остеопороза, где терапевтически эффективным количеством является количество, которое лечит остеопороз.
  18. 18. Фармацевтическая композиция для наращивания костной массы, которая содержит количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства, которое увеличивает костную массу, и фармацевтически приемлемый носитель.
  19. 19. Фармацевтическая композиция по п.18 для лечения перелома кости, где используют количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства, которое лечит перелом кости.
  20. 20. Фармацевтическая композиция для лечения состояния, при котором наблюдается низкая костная масса, у млекопитающего, которая содержит количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства, которое лечит состояние низкой костной массы, и фармацевтически приемлемый носитель.
  21. 21. Фармацевтическая композиция, содержащая
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства;
    б) терапевтически эффективное количество антирезорбтивного агента и
    в) фармацевтический носитель.
  22. 22. Фармацевтическая композиция по п.21, где антирезорбтивным агентом является дролоксифен, ралоксифен, тамоксифен, 4гидрокситамоксифен, торемифен, центхроман, левормелоксифен, идоксифен,
    6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1ил-этокси)бензил]нафталин-2-ол, {4-[2-(2-азабицикло [2.2.1] гепт-2-ил)этокси]фенил}-[6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил) бензо [Ь]тиофен-3 -ил] метанон, цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1ил-этокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин2-ол;
    (-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
    цис-6-фенил-5 -[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
    цис-1-[6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
    1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
    цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол или
    1-(4'-пирролидинолэтоксифенил)-2-фенил-
    6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин или их фармацевтически приемлемая соль.
  23. 23. Фармацевтическая композиция по п.21, где антирезорбтивным агентом является тилудроновая кислота, алендроновая кислота, ибандроновая кислота, ризедроновая кислота, этидроновая кислота, клодроновая кислота и памидроновая кислота или их фармацевтически приемлемая соль.
  24. 24. Способ лечения млекопитающего, имеющего состояние, при котором наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства и
    б) терапевтически эффективное количество антирезорбтивного агента.
  25. 25. Способ по п.24, где антирезорбтивным агентом является дролоксифен, ралоксифен, тамоксифен, 4-гидрокситамоксифен, торемифен, центхроман, левормелоксифен, идоксифен,
    6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1илэтокси)бензил]нафталин-2-ол, {4-[2-(2-азабицикло [2.2.1] гепт-2-ил)этокси]фенил}-[6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил) бензо [Ь]тиофен-3 -ил] метанон, цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1ил-этокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин2-ол;
    (-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
    цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
    цис-1-[6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
    1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
    цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол или
    1-(4'-пирролидинолэтоксифенил)-2-фенил-
    6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин или их фармацевтически приемлемая соль.
  26. 26. Способ по п.24, где антирезорбтивным агентом является тилудроновая кислота, алендроновая кислота, ибандроновая кислота, ризедроновая кислота, этидроновая кислота, клодроновая кислота и памидроновая кислота или фармацевтически приемлемая соль.
  27. 27. Набор, содержащий
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель в первой стандартной лекарственной форме;
    б) терапевтически эффективное количество антирезорбтивного агента и фармацевтически приемлемый носитель во второй стандартной лекарственной форме и
    в) контейнер, предназначенный для указанных первой и второй лекарственных форм.
  28. 28. Набор по п.27, где антирезорбтивным агентом является дролоксифен, ралоксифен, тамоксифен, 4-гидрокситамоксифен, торемифен, центхроман, левормелоксифен, идоксифен,
    6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1ил-этокси)бензил]нафталин-2-ол, {4-[2-(2-азабицикло[2.2.1]гепт-2-ил)этокси]фенил}-[6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил) бензо[Ь]тиофен-3-ил]-метанон, цис-6-(4-фторфенил)-5-[4-(2-пиперидин-1ил-этокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин2-ол;
    (-)-цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
    цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-илэтокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
    цис-1-[6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил]2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин;
    1-(4'-пирролидиноэтоксифенил)-2-(4фторфенил)-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;
    цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)фенил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ол;
    1-(4'-пирролидинолэтоксифенил)-2-фенил-
    6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин или их фармацевтически приемлемая соль.
  29. 29. Набор по п.27, где антирезорбтивным агентом является тилудроновая кислота, алендроновая кислота, ибандроновая кислота, ризедроновая кислота, этидроновая кислота, клодроновая кислота и памидроновая кислота или их фармацевтически приемлемая соль.
  30. 30. Фармацевтическая композиция, содержащая
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства;
    б) терапевтически эффективное количество анаболического агента, иного чем соединение по п.1, или его фармацевтически приемлемая соль, или пролекарство и
    в) фармацевтический носитель.
  31. 31. Фармацевтическая композиция по п.30, где анаболическим агентом, иным чем соединение по п.1, является ЮР-1 возможно с 1СР-1связывающим белком 3, простагландин, агонист/антагонист простагландина, фторид натрия, паратиреоидный гормон (ПТГ), активные фрагменты паратиреоидного гормона, гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста, или их фармацевтически приемлемая соль.
  32. 32. Способ лечения млекопитающего, у которого наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства и
    б) терапевтически эффективное количество костного анаболического агента, иного чем соединение по п.1, или его фармацевтически приемлемая соль, или пролекарство.
  33. 33. Способ по п.32, где анаболическим агентом, иным чем соединение по п.1, является 1СР-1, простагландин, агонист/антагонист простагландина, фторид натрия, паратиреоидный гормон (ПТГ), активные фрагменты паратиреоидного гормона, гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста, или их фармацевтически приемлемая соль.
  34. 34. Набор, включающий в себя
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель в первой стандартной лекарственной форме;
    б) терапевтически эффективное количество анаболического агента, иного чем соединение по п.1, или его фармацевтически приемлемая соль, или пролекарство и фармацевтически приемлемый носитель во второй стандартной лекарственной форме и
    в) контейнер, предназначенный для указанных первой и второй лекарственных форм.
  35. 35. Набор по п.34, где анаболическим агентом, иным чем соединение по п.1, является 1СР-1, простагландин, агонист/антагонист простагландина, фторид натрия, паратиреоидный гормон (ПТГ), активные фрагменты паратиреоидного гормона, гормон роста или средства, стимулирующие секрецию гормона роста или их фармацевтически приемлемая соль.
  36. 36. Фармацевтическая композиция, содержащая
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства;
    б) терапевтически эффективное количество 2-(4-метоксифенил)-3-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенокси]бензо[Ь]тиофен-6-ола или его фармацевтически приемлемой соли или 3-[4(1,2-дифенил-бут-1-енил)фенил]акриловой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и
    в) фармацевтический носитель.
  37. 37. Способ лечения млекопитающего, имеющего состояние, при котором наблюдается низкая костная масса, при котором указанному млекопитающему вводят
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства и
    б) терапевтически эффективное количество 2-(4-метоксифенил)-3-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенокси]бензо[Ь]тиофен-6-ола или его фармацевтически приемлемой соли или 3-[4(1,2-дифенил-бут-1-енил)фенил]акриловой ки слоты или ее фармацевтически приемлемой соли.
  38. 38. Набор, включающий в себя
    а) терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель в первой стандартной лекарственной форме;
    б) терапевтически эффективное количество 2-(4-метоксифенил)-3-[4-(2-пиперидин-1-илэтокси)фенокси]бензо[Ь]тиофен-6-ола или его фармацевтически приемлемой соли или 3-[4(1,2-дифенил-бут-1-енил)фенил]акриловой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель во второй стандартной лекарственной форме и
    в) контейнер, предназначенный для указанных первой и второй лекарственных форм.
  39. 39. Способ лечения млекопитающего, нуждающегося в регенерации почки, при котором указанному млекопитающему вводят терапевтически эффективное количество соединения по п.1, или его фармацевтически приемлемой соли, или пролекарства.
EA200200806A 1996-12-20 1997-11-10 Предупреждение потери и восстановление костной массы некоторыми агонистами простагландина EA005161B1 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3345196P 1996-12-20 1996-12-20

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200200806A1 EA200200806A1 (ru) 2003-02-27
EA005161B1 true EA005161B1 (ru) 2004-12-30

Family

ID=21870485

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199900474A EA003529B1 (ru) 1996-12-20 1997-11-10 Предупреждение потери и восстановление костной массы некоторыми агонистами простагландина
EA200200806A EA005161B1 (ru) 1996-12-20 1997-11-10 Предупреждение потери и восстановление костной массы некоторыми агонистами простагландина

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199900474A EA003529B1 (ru) 1996-12-20 1997-11-10 Предупреждение потери и восстановление костной массы некоторыми агонистами простагландина

Country Status (44)

Country Link
US (4) US6288120B1 (ru)
EP (1) EP0946501B1 (ru)
JP (2) JP3679418B2 (ru)
KR (1) KR100311566B1 (ru)
AP (1) AP1041A (ru)
AR (1) AR010843A1 (ru)
AT (1) ATE327976T1 (ru)
AU (1) AU721260B2 (ru)
BG (1) BG64893B1 (ru)
BR (1) BR9714155A (ru)
CA (1) CA2275479C (ru)
CO (1) CO4910163A1 (ru)
CZ (1) CZ300107B6 (ru)
DE (1) DE69736007T2 (ru)
DK (1) DK0946501T3 (ru)
DZ (1) DZ2375A1 (ru)
EA (2) EA003529B1 (ru)
ES (1) ES2267133T3 (ru)
GT (1) GT199700141A (ru)
HN (1) HN1997000161A (ru)
HR (1) HRP970696B1 (ru)
HU (1) HUP0000739A3 (ru)
IL (2) IL130306A0 (ru)
IS (1) IS2389B (ru)
MA (1) MA24425A1 (ru)
MY (1) MY141384A (ru)
NO (1) NO313668B1 (ru)
NZ (1) NZ335736A (ru)
OA (1) OA11065A (ru)
PA (1) PA8443001A1 (ru)
PE (1) PE47499A1 (ru)
PL (1) PL192670B1 (ru)
PT (1) PT946501E (ru)
SA (3) SA05260205B1 (ru)
SI (1) SI0946501T1 (ru)
SK (1) SK78299A3 (ru)
TN (1) TNSN97208A1 (ru)
TR (1) TR199901366T2 (ru)
TW (2) TW541310B (ru)
UA (1) UA59384C2 (ru)
UY (1) UY24816A1 (ru)
WO (1) WO1998028264A1 (ru)
YU (1) YU32799A (ru)
ZA (1) ZA9711437B (ru)

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5552412A (en) * 1995-01-09 1996-09-03 Pfizer Inc 5-substitued-6-cyclic-5,6,7,8-tetrahydronaphthalen2-ol compounds which are useful for treating osteoporosis
CA2275595C (en) 1996-12-20 2003-08-05 Pfizer Inc. Prevention and treatment of skeletal disorder with ep2 receptor subtype selective prostaglandin e2 agonists
UA59384C2 (ru) 1996-12-20 2003-09-15 Пфайзер, Інк. Предотвращение потери костной массы и ее восстановление с помощью агонистов простагландина
UA67754C2 (ru) 1997-10-10 2004-07-15 Пфайзер, Інк. Агонисты простагландина и их применение при лечении расстройств костной массы
EP1000619A3 (en) * 1998-06-23 2002-07-24 Pfizer Products Inc. Method for treating glaucoma
SK6952001A3 (en) * 1998-12-11 2001-12-03 Nissan Chemical Ind Ltd Processes for the preparation of (p-chlorophenyl)propanol derivatives
NZ513825A (en) 1999-03-05 2001-09-28 Procter & Gamble C 16 unsaturated FP-selective prostaglandins analogs
US6894175B1 (en) 1999-08-04 2005-05-17 The Procter & Gamble Company 2-Decarboxy-2-phosphinico prostaglandin derivatives and methods for their preparation and use
IL139941A0 (en) * 1999-12-02 2002-02-10 Pfizer Prod Inc Use of prostaglandin agonists to treat erectile dysfunction or impotence
DK1132086T3 (da) 2000-01-31 2006-08-28 Pfizer Prod Inc Anvendelse af prostaglandin (PGE2) selektive receptor 4 (EP4) agonister til behandling af akut og kronisk nyresvigt
EP1265857A1 (en) * 2000-03-13 2002-12-18 Eli Lilly And Company Sulfonamide derivatives
US20020172693A1 (en) 2000-03-31 2002-11-21 Delong Michell Anthony Compositions and methods for treating hair loss using non-naturally occurring prostaglandins
US20020037914A1 (en) 2000-03-31 2002-03-28 Delong Mitchell Anthony Compositions and methods for treating hair loss using C16-C20 aromatic tetrahydro prostaglandins
US20020013294A1 (en) 2000-03-31 2002-01-31 Delong Mitchell Anthony Cosmetic and pharmaceutical compositions and methods using 2-decarboxy-2-phosphinico derivatives
EP1149583A3 (en) * 2000-04-13 2001-11-14 Pfizer Products Inc. Combinations of corticotropin releasing factor antagonists and growth hormone secretagogues
US6472372B1 (en) * 2000-12-06 2002-10-29 Ortho-Mcneil Pharmaceuticals, Inc. 6-O-Carbamoyl ketolide antibacterials
CA2372450A1 (en) * 2001-05-10 2001-09-19 Pharmaceutical Partners Of Canada Inc. Liquid injectable formulation of disodium pamidronate
CA2460947A1 (en) 2001-09-17 2003-03-27 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. 6-o-carbamate-11,12-lacto-ketolide antimicrobials
US20030080191A1 (en) 2001-10-26 2003-05-01 Allen Lubow Method and apparatus for applying bar code information to products during production
EP1448182A1 (en) * 2001-11-30 2004-08-25 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions and methods for administering ep 2 receptor selective agonists
CN1599598A (zh) * 2001-11-30 2005-03-23 美国辉瑞有限公司 骨生长促进性化合物的控释聚合组合物
US7163952B2 (en) 2001-12-03 2007-01-16 Japan Tobacco Inc. Azole compound and medicinal use thereof
CN1585775A (zh) 2001-12-05 2005-02-23 奥索-麦克尼尔药品公司 可用作抗菌药的红霉素的6－o－酰基酮内酯衍生物
EP1466297A4 (en) 2001-12-17 2005-10-19 Int Barcode Corp AS A SINGLE CODE, DOUBLE-SIDED CODE
AU2002358772B2 (en) * 2001-12-20 2008-11-20 Merck Serono Sa Pyrrolidine derivatives as prostaglandin modulators
WO2003103604A2 (en) * 2002-06-01 2003-12-18 Applied Research Systems Ars Holding N.V Gamma lactams as prostaglandin agonists and use thereof
JP2006021998A (ja) * 2002-07-18 2006-01-26 Ono Pharmaceut Co Ltd Ｅｐ２アゴニストを有効成分とする月経困難症治療剤
US6986884B2 (en) * 2002-09-04 2006-01-17 Rosenberg E William Composition and method for treating soft nails
DK2465537T3 (en) 2002-10-10 2016-09-19 Ono Pharmaceutical Co MICROSPHERE INCLUDING ONO-1301
JP4666257B2 (ja) 2003-07-25 2011-04-06 小野薬品工業株式会社 軟骨関連疾患治療剤
US7318925B2 (en) * 2003-08-08 2008-01-15 Amgen Fremont, Inc. Methods of use for antibodies against parathyroid hormone
BR0318454A (pt) 2003-08-08 2006-09-12 Abgenix Inc anticorpos dirigidos a hormÈnio da paratireóide (pth) e seus usos
WO2005027931A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and an ep2 or ep4 selective agonist
US20050203086A1 (en) * 2004-03-04 2005-09-15 Pfizer Inc. Methods of treatment using an EP2 selective receptor agonist
MXPA06015170A (es) * 2004-06-21 2007-08-21 Pharmacia & Upjohn Co Llc Procedimiento para aumentar la cantidad de hueso.
US7183310B2 (en) * 2004-08-10 2007-02-27 Allergan, Inc. Cyclopentane heptan(ene)oic acid, 2-heteroarylalkenyl derivatives as therapeutic agents
US7906552B2 (en) 2004-08-10 2011-03-15 Allergan, Inc. Cyclopentane heptan(ENE)OIC acid, 2-heteroarylalkenyl derivatives as therapeutic agents
US7645755B2 (en) 2004-10-22 2010-01-12 Janssen Pharmaceutical N.V. Inhibitors of c-fms kinase
NZ555289A (en) 2004-10-22 2010-10-29 Janssen Pharmaceutica Nv Inhibitors of c-fms kinase
JP4893999B2 (ja) 2004-10-22 2012-03-07 小野薬品工業株式会社 吸入用医薬組成物
JP5128954B2 (ja) 2004-12-06 2013-01-23 メルク セローノ ソシエテ アノニム Ｄｐ１受容体アゴニストとして使用されるピロリジン−２−オン誘導体
EP2494990A1 (en) 2005-06-03 2012-09-05 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Agent for regeneration and/or protection of nerves
US20060281788A1 (en) 2005-06-10 2006-12-14 Baumann Christian A Synergistic modulation of flt3 kinase using a flt3 inhibitor and a farnesyl transferase inhibitor
US7915316B2 (en) 2005-08-22 2011-03-29 Allergan, Inc Sulfonamides
PL2021335T3 (pl) 2006-04-20 2011-10-31 Janssen Pharmaceutica Nv Związki heterocykliczne jako inhibitory kinazy C-FMS
KR101367646B1 (ko) 2006-04-20 2014-02-27 얀센 파마슈티카 엔.브이. Ｃ-ｆｍｓ 키나제의 저해제
US8697716B2 (en) 2006-04-20 2014-04-15 Janssen Pharmaceutica Nv Method of inhibiting C-KIT kinase
KR101088942B1 (ko) * 2006-07-28 2011-12-01 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 Ｅｐ2 작용제
GB0711463D0 (en) * 2007-06-14 2007-07-25 Opal Drug Discovery Ltd Trimethylsilylbeneylsulphamates as treatments for diseases of bone loss
JO3240B1 (ar) 2007-10-17 2018-03-08 Janssen Pharmaceutica Nv c-fms مثبطات كيناز
CA2718393C (en) 2008-03-12 2015-06-16 Ube Industries, Ltd. Pyridylaminoacetic acid compound
SI2415763T1 (sl) 2009-03-30 2016-05-31 Ube Industries, Ltd. Farmacevtski sestavek za zdravljenje ali preprečevanje glavkoma
WO2010116270A1 (en) 2009-04-10 2010-10-14 Pfizer Inc. Ep2/4 agonists
EP2520570A4 (en) 2009-12-25 2013-07-17 Ube Industries aminopyridine compound
US9090584B2 (en) 2010-01-26 2015-07-28 Allergan, Inc. Therapeutic agents for treatment of ocular hypertension
US8772541B2 (en) * 2011-12-15 2014-07-08 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Cannabinoid receptor 2 (CB2) inverse agonists and therapeutic potential for multiple myeloma and osteoporosis bone diseases
AU2013299922B2 (en) 2012-08-07 2018-06-21 Janssen Pharmaceutica Nv Process for the preparation of heterocyclic ester derivatives
JOP20180012A1 (ar) 2012-08-07 2019-01-30 Janssen Pharmaceutica Nv عملية السلفنة باستخدام نونافلوروبوتانيسولفونيل فلوريد
WO2014069401A1 (ja) 2012-10-29 2014-05-08 株式会社カルディオ 肺疾患特異的治療剤
KR20150135460A (ko) 2013-03-28 2015-12-02 우베 고산 가부시키가이샤 치환 비아릴 화합물
US9968716B2 (en) 2013-10-15 2018-05-15 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Drug-eluting stent graft
KR102006862B1 (ko) * 2019-01-07 2019-08-02 주식회사 하이센스바이오 신규한 펩타이드
CN114805120A (zh) * 2022-05-23 2022-07-29 江苏瑞达环保科技有限公司 一种间氰甲基苯甲酸甲酯的合成工艺
CN121194964A (zh) 2023-05-30 2025-12-23 四国化成工业株式会社 唑化合物、该唑化合物的合成方法及其利用

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE51251C (de) W. LANGENBRUCH in Düren, Rheinl., Kölnstr. 68 b Sicherheitslampe für Bergwerke
DE512251C (de) 1930-01-24 1930-11-07 Koch & Sterzel Akt Ges Verfahren zum Einstellen der Kapazitaet eines auf Induktionswirkung beruhenden elektrischen Apparates, insbesondere Stromwandlers
FR897566A (fr) * 1942-08-28 1945-03-26 Bopp & Reuther Gmbh Machine à rotors
US3442890A (en) 1965-06-15 1969-05-06 Mead Johnson & Co Substituted 3-benzazocin-16-ones
CH549555A (de) 1969-04-02 1974-06-14 Byk Gulden Lomberg Chem Fab Verfahren zur herstellung von cylierten anilinocarbonsaeuren oder deren salze.
DE1917006B2 (de) 1969-04-02 1971-09-23 Siemens AG, 1000 Berlin u. 8000 München Elektrooptischer regelkreis zum regeln der lichtpunktinten sitaet einer kathodenstrahlroehre
US3780095A (en) 1970-04-08 1973-12-18 Byk Gulden Lomberg Chem Fab Acylated anilino-carboxylic acids and their salts
US4092356A (en) 1972-10-30 1978-05-30 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US4066692A (en) 1972-10-30 1978-01-03 Merck & Co., Inc. 11,12-secoprostaglandins
US4055597A (en) 1973-01-26 1977-10-25 Merck & Co., Inc. 10-Aza-11,12-secoprostaglandins
US3987091A (en) 1973-04-12 1976-10-19 Merck & Co., Inc. 11,12-secoprostaglandins
US4033996A (en) * 1973-04-25 1977-07-05 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-oxo(and dioxo)-thia-11,12-secoprostaglandins
US4091107A (en) 1973-04-25 1978-05-23 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-oxo(and dioxo)-thia-11,12-secoprostaglandins
US3894065A (en) 1973-04-27 1975-07-08 Merck & Co Inc Aryl-oxo-alkanoic acids
JPS5019756A (ru) 1973-06-25 1975-03-01
US3989749A (en) 1973-10-17 1976-11-02 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
SE7414770L (ru) * 1973-12-13 1975-06-16 Merck & Co Inc
US3991087A (en) 1973-12-13 1976-11-09 Merck & Co., Inc. 8-Halo-11,12-secoprostaglandins
DK366475A (da) 1974-08-30 1976-03-01 Merck & Co Inc Fremgangsmade til fremstilling af aryloxy- eller arylthioholdige secoprostaglandiner
US4020177A (en) 1974-08-30 1977-04-26 Merck & Co., Inc. Substituted phenoxy-tridecanoic acids
US3991106A (en) 1974-09-13 1976-11-09 Merck & Co., Inc. 16-Ethers of 8-aza-9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins
US4055596A (en) * 1974-09-13 1977-10-25 Merck & Co., Inc. 11,12-Seco-prostaglandins
US4210749A (en) 1974-11-12 1980-07-01 Pennwalt Corporation Substituted 1,2,4,5-tetrahydro-3H,3 benzazepines
GB1479158A (en) 1974-12-18 1977-07-06 Basford A Furniture
US4018802A (en) 1975-04-09 1977-04-19 Merck & Co., Inc. 9-Thia- and oxothia- and 9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins and processes
US4097504A (en) 1975-04-23 1978-06-27 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US4150235A (en) 1976-12-17 1979-04-17 Merck & Co., Inc. Interphenylene 11,12-secoprostaglandins
US4175203A (en) 1976-12-17 1979-11-20 Merck & Co., Inc. Interphenylene 11,12-secoprostaglandins
US4087435A (en) 1977-02-17 1978-05-02 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-dioxothiaprostanoic acids
US4112236A (en) 1977-04-04 1978-09-05 Merck & Co., Inc. Interphenylene 8-aza-9-dioxothia-11,12-secoprostaglandins
AT368358B (de) 1977-12-24 1982-10-11 Fisons Ltd Schaedlingsbekaempfungs- und pflanzenwachstumsregulierungsmittel
GB2012170B (en) 1977-12-24 1982-09-02 Fisons Ltd Pesticidal and platn growth regulant compounds and composiions
US4243678A (en) 1977-12-30 1981-01-06 Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik Gmbh Acylhydrocarbylaminoalkanoic acids, compositions and uses
DK373383A (da) 1982-08-20 1984-02-21 Midit Fremgangsmaade til fremstilling af omega-aminosyrederivater
US4803197A (en) 1987-01-12 1989-02-07 Ciba-Geigy Corporation 2,1-benzothiazepine-2,2-dioxide-5-carboxylic acid derivatives
DE3719046A1 (de) 1987-06-06 1988-12-15 Basf Ag Verwendung von salzen von sulfonamidcarbonsaeuren als korrosionsinhibitoren in waessrigen systemen
DE3829455A1 (de) 1988-08-31 1990-03-15 Boehringer Mannheim Gmbh Sulfonamidoalkyl-cyclohexan-verbindungen, verfahren zu ihrer herstellung sowie arzneimittel
US5084466A (en) 1989-01-31 1992-01-28 Hoffmann-La Roche Inc. Novel carboxamide pyridine compounds which have useful pharmaceutical utility
US5081152A (en) 1989-07-05 1992-01-14 Kotobuki Seiyaku Co., Ltd. Azulene derivatives as thromboxane a2 and prostaglandin endoperoxide receptor antagonist
JPH05502233A (ja) 1989-12-16 1993-04-22 アストラ・フアーマシユウテイカルズ・リミテツド 薬理学的に活性なアミドカルボキシレート誘導体
ES2036926B1 (es) 1991-08-08 1994-01-16 Uriach & Cia Sa J "procedimiento para la obtencion de derivados de la (2-alquil-3-piridil)metilpiperazina".
US6743929B1 (en) * 1992-08-25 2004-06-01 G. D. Searle & Co. Sulfonylalkanoylamino hydroxyethylamino sulfonamides useful as retroviral protease inhibitors
US5352708A (en) 1992-09-21 1994-10-04 Allergan, Inc. Non-acidic cyclopentane heptanoic acid, 2-cycloalkyl or arylalkyl derivatives as therapeutic agents
WO1994008947A1 (fr) 1992-10-15 1994-04-28 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai Nouveau derive aminoacide
US5332730A (en) 1992-10-16 1994-07-26 Allergan, Inc. Azido derivatives of cyclopentane heptanoic or heptenoic acid
US5536716A (en) 1992-12-11 1996-07-16 Merck & Co., Inc. Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone
SK282166B6 (sk) 1992-12-11 2001-11-06 Merck & Co., Inc. Spiropiperidínové deriváty, spôsob ich výroby a farmaceutický prostriedok s ich obsahom
TW383306B (en) 1992-12-22 2000-03-01 Lilly Co Eli New use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in lowering serum cholesterol
US5455258A (en) 1993-01-06 1995-10-03 Ciba-Geigy Corporation Arylsulfonamido-substituted hydroxamic acids
US5605814A (en) 1993-08-31 1997-02-25 Merck Frosst Canada Inc. DNA encoding human prostaglandin receptor EP2
CZ134296A3 (en) 1993-11-09 1996-12-11 Merck & Co Inc Piperidine, pyrrolidine and hexahydro-1h-azepine derivatives, process of their preparation and pharmaceutical compositions containing thereof
WO1995014666A1 (en) 1993-11-24 1995-06-01 Merck & Co., Inc. Indolyl group containing compounds and the use thereof to promote the release of growth hormone(s)
JPH07334432A (ja) * 1994-06-07 1995-12-22 Hitachi Ltd メモリ制御回路
US5777112A (en) 1994-06-13 1998-07-07 Merck & Co., Inc Piperazine compounds promote release of growth hormone
WO1996036595A1 (en) 1995-05-19 1996-11-21 Chiroscience Limited 3,4-disubstituted-phenylsulphonamides and their therapeutic use
JPH11510697A (ja) 1995-08-08 1999-09-21 トーマス ジェファソン ユニバーシティー 組換え体ｃ−プロテイナーゼ、ならびにそのプロセス、方法および使用
JP3843145B2 (ja) * 1995-12-25 2006-11-08 株式会社ルネサステクノロジ 同期型半導体記憶装置
DE19603033A1 (de) 1996-01-19 1997-07-24 Schering Ag Perfluoralkylhaltige Metallkomplexe, Verfahren zu deren Herstellung und ihre Verwendung in der NMR-Diagnostik
KR100338861B1 (ko) * 1996-01-23 2003-02-20 시오노기세이야쿠가부시키가이샤 술폰화아미노산유도체및이를함유한메탈로프로테이나제저해제
CA2242416C (en) 1996-01-23 2006-03-21 Shionogi & Co., Ltd. Sulfonated amino acid derivatives and metalloproteinase inhibitors containing the same
US5658897A (en) 1996-04-08 1997-08-19 Allergan Cyclopentane(ene) heptanoic or cyclopentane(ene) heptenoic acid, 2-hydrocarbyl phosphinyloxyalkyl or phosphonamidoalkyl as therapeutic agents
ATE229935T1 (de) * 1996-10-11 2003-01-15 Warner Lambert Co Sulfonamid-inhibitoren des interleukin-1-beta konvertierenden enzyms
CA2275595C (en) 1996-12-20 2003-08-05 Pfizer Inc. Prevention and treatment of skeletal disorder with ep2 receptor subtype selective prostaglandin e2 agonists
UA59384C2 (ru) * 1996-12-20 2003-09-15 Пфайзер, Інк. Предотвращение потери костной массы и ее восстановление с помощью агонистов простагландина
ES2189142T3 (es) * 1997-02-21 2003-07-01 Bayer Ag Arilsulfonamidas y sus analogos y su uso en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas.
TW378330B (en) * 1997-06-03 2000-01-01 Fujitsu Ltd Semiconductor memory device
US5910923A (en) * 1997-10-23 1999-06-08 Texas Instruments Incorporated Memory access circuits for test time reduction
US6436989B1 (en) * 1997-12-24 2002-08-20 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Prodrugs of aspartyl protease inhibitors
EP1000619A3 (en) 1998-06-23 2002-07-24 Pfizer Products Inc. Method for treating glaucoma
US6436914B1 (en) * 1998-06-30 2002-08-20 Bristol-Myers Squibb Company 2-hydroxy-3—(4-hydroxy-3-sulfonamidophenyl)—propylamines useful as beta 3 adrenergic agonists
US6069829A (en) * 1998-09-29 2000-05-30 Texas Instruments Incorporated Internal clock multiplication for test time reduction
US6246619B1 (en) * 2000-02-07 2001-06-12 Vanguard International Semiconductor Corp. Self-refresh test time reduction scheme
US6720357B2 (en) * 2000-05-19 2004-04-13 Eli Lilly And Company Sulfonamide derivatives
AU2002234165A1 (en) * 2000-11-03 2002-05-27 Tularik, Inc. Combination therapy using pentafluorobenzenesulfonamides and antineoplastic agents

Also Published As

Publication number Publication date
US6649657B2 (en) 2003-11-18
HRP970696A2 (en) 1998-10-31
PA8443001A1 (es) 2000-05-24
CA2275479A1 (en) 1998-07-02
PL334343A1 (en) 2000-02-28
TW541310B (en) 2003-07-11
SK78299A3 (en) 2000-10-09
NZ335736A (en) 2001-01-26
YU32799A (sh) 2002-06-19
HN1997000161A (es) 1998-10-22
GT199700141A (es) 1999-06-22
US6288120B1 (en) 2001-09-11
AU721260B2 (en) 2000-06-29
CZ300107B6 (cs) 2009-02-11
KR100311566B1 (ko) 2001-11-03
NO313668B1 (no) 2002-11-11
DZ2375A1 (fr) 2002-12-28
IS5055A (is) 1999-05-21
ATE327976T1 (de) 2006-06-15
TR199901366T2 (xx) 1999-09-21
SA97180721A (ar) 2005-12-03
NO992996D0 (no) 1999-06-18
ES2267133T3 (es) 2007-03-01
US20020016368A1 (en) 2002-02-07
NO992996L (no) 1999-08-18
JP2000514827A (ja) 2000-11-07
EP0946501B1 (en) 2006-05-31
OA11065A (en) 2002-11-15
BG64893B1 (bg) 2006-08-31
UY24816A1 (es) 2000-09-29
IL130306A (en) 2008-12-29
US6998423B2 (en) 2006-02-14
MY141384A (en) 2010-04-30
SA97180721B1 (ar) 2006-04-22
WO1998028264A1 (en) 1998-07-02
EP0946501A1 (en) 1999-10-06
EA003529B1 (ru) 2003-06-26
JP3679418B2 (ja) 2005-08-03
TNSN97208A1 (fr) 2005-03-15
TWI242560B (en) 2005-11-01
EA199900474A1 (ru) 2000-02-28
DE69736007D1 (de) 2006-07-06
BG103593A (en) 2000-03-31
AU4720097A (en) 1998-07-17
US20040176461A1 (en) 2004-09-09
JP2005068154A (ja) 2005-03-17
HUP0000739A3 (en) 2001-02-28
SA05260204B1 (ar) 2008-07-14
CO4910163A1 (es) 2000-04-24
SA05260205B1 (ar) 2008-05-27
US20030105092A1 (en) 2003-06-05
AP1041A (en) 2002-02-01
PT946501E (pt) 2006-10-31
IL130306A0 (en) 2000-06-01
IS2389B (is) 2008-08-15
ZA9711437B (en) 1999-06-21
PL192670B1 (pl) 2006-11-30
MA24425A1 (fr) 1998-07-01
JP4067105B2 (ja) 2008-03-26
AR010843A1 (es) 2000-07-12
DK0946501T3 (da) 2006-10-02
AP9701166A0 (en) 1998-01-31
US6492412B2 (en) 2002-12-10
PE47499A1 (es) 1999-05-13
SI0946501T1 (sl) 2006-10-31
CZ223399A3 (cs) 2000-08-16
KR20000057684A (ko) 2000-09-25
EA200200806A1 (ru) 2003-02-27
HUP0000739A2 (hu) 2000-09-28
BR9714155A (pt) 2000-05-02
DE69736007T2 (de) 2006-12-28
CA2275479C (en) 2007-05-08
UA59384C2 (ru) 2003-09-15
HRP970696B1 (en) 2007-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA005161B1 (ru) Предупреждение потери и восстановление костной массы некоторыми агонистами простагландина
US6124314A (en) Osteoporosis compounds
US6531485B2 (en) Prostaglandin agonists
DE69836752T2 (de) Prostaglandin-Agonisten und deren Verwendung zur Behandlung von Knochenerkrankungen
KR20100050559A (ko) 3-(((4-ｔｅｒｔ-부틸-벤질)-(피리딘-3-설포닐)-아미노)-메틸)-페녹시)-아세트산 나트륨 염 또는 이의 수화물의 다형체 및 이를 제조하는 방법
US20110046385A1 (en) Polymorphs Of Prostaglandin Agonists And Methods For Making The Same
CZ20001280A3 (cs) Agonisté prostaglandinu a jejich použití pro léčení chorob kostí

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU