DK162717B - Fremgangsmaade til fremstilling af 2beta-chlormethyl-2alfa-methylpenam-3alfa-carboxylsyresulfon samt salte og estere deraf - Google Patents

Description

i

DK 162717 B

Den foreliggende opfindelse vedrører en fremgangsmåde til fremstilling af 2/?-chlormethyl-2a-methylpenam-3ft-carboxylsyre-sul fon, et farmaceutisk acceptabelt salt eller en let hydrolyserbar ester deraf- De ved omhandlede fremgangsmåde opnåede produkter er værdifulde som inhibitorer 5 af /J-lactamaser.

Den formodede sammenhæng mellem den resistens, som udvises af visse bakterier over for Ø-lactam-antibiotika og sådanne bakteriers evne til at producere Ø-lactamaser, har ført til en intensiv søgning efter j8-lac-tamase-inhibitorer. Clavulansyre er et eksempel på en sådan forbindelse, 10 der for tiden studeres grundigt. En anden Ø-lactamase-inhibitor har på syreformen strukturen Η H ' P CH, H i, = 3 ί5 γ ^„3 J—*-1

COOH

og er omhandlet i europæisk patentansøgning 2927 offentliggjort 11. juli 20 1979.

Forbindelsen med strukturen H H e H_N --2 25 2 ^CH3 j—Æ-i.

O COOH

er omhandlet i USA patentskrifter 4.036.847, 4.009.159, 3.993.646, 30 3.989.685 og 3.954.732.

USA patentskrift nr. 4.155.912 beskriver 2-penem-3-carboxyl-syreforbindel ser med formlen 35 d"5^3 —N—\

0 COOH

DK 162717 B

2 og estere og salte, se også Farmdoc Abstracts 82090A, 10336B og 443337B.

Forbindelsen (under nummeret CP-45899) med strukturen

rw /O

^CH3 I—N-

° COOH

10 er en irreversibelt virkende β-lactamase-inhibitor med fremragende opløsningsstabilitet. Den har svag antibakteriel aktivitet og potenti-erer in vitro og in vivo aktiviteterne af ampicillin over for /Macta-mase-producerende stammer [A.R. English et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 14, 414-419 (1978), Aswapokee et al., J. Antibiotics 15 31(12), 1238-1244 (dec. 1978) og Derwent's Farmdoc Abstracts 89627A og 73866B].

B. Baltzer et al. har i Mutual Pro-Drugs of j8-Lactam Antibiotics and ^-Lactamase Inhibitors, J. Antibiotics, 33(10), 1183-1192 (1980) beskrevet, at princippet i at kombinere et /8-lactam antibiotika med en 20 /J-lactamase-inhibitor i et enkelt molekyle, der virker som pro-lægemid-del for de to aktive komponenter, illustreres af de bundne estere 3 og 4, hvori henholdsvis ampicillin og mecillinam er kombineret med /?-lacta-mase-inhibitor penicillan-sulfonen. Det er påvist, at disse estere i mennesker absorberes fremragende fra mave-tarmkanalen og efter absorp-25 tion hydrolyseres under samtidig frigørelse af de aktive komponenter.

Som resultat heraf opnås høje blodspejls- og vævsværdier af antibiotikum og /1-lactamase-inhibitor i et afbalanceret forhold. Fordelene ved "gensidige pro-lægemidler" i forhold til simple kombinationer er diskuteret.

De der omtalte estere 3 og 4 har strukturerne 30 35

DK 162717 B

3

/y-CH-CO-NHV^Y [ ;-Cli=N\^S

w «» oJZ!_J. KJ jxj 0 0 'CO 0 n Λ 5 c t ' 0 0 cc py ^ prsY &

^ 'CO -o X—N- I

O // 'CO-O

10 , 5 h I GB patentskrift 2044255 offentliggjort 15. oktober 1980 anføres det, at den der angivne opfindelse vedrører hidtil ukendte forbindelser 15 med den almene formel 1:

Η H

R-CII-CO-NH^t Sn/ *2 f]

20 /)—N—7X

o J c—O-CH—A

H 11 t η o R3 1 hvori Rj betegner en phenyl4-hydroxyphenyl-, 1,4-cyclohexadienyl-25 eller en 3-thienylgruppe, Rg betegner en primær amino- eller en carb-oxygruppe, R3 betegner et hydrogenatom eller et lavere al kyl-, aryl-eller aral kylradikal, og A betegner et radikal af en ^-lactamase-inhibitor indeholdende såvel en /Mactamring som en carboxygruppe, og hvor A er bundet via carboxygruppen.

30 Disse nye forbindelser er værdifulde til behandling af bakterielle infektioner og er især stærkt aktive over for /J-lactamase-producerende bakterier. Se også Farmdoc Abstracts 60773C og 60776C.

Fra DK-B-155.740, referenceeksempel 1 er det ved hydrolyse af 1-benzyl-6,6-dibrompenicillanat-la-oxid kendt at fremstille penicil1an-35 syre-la-oxid. Det vil imidlertid ikke på grundlag af denne kendte teknik kunne forventes, at katalytisk hydrogenering af et (substitueret)benzyl-2^-chlormethyl-2a-methyl-6a-brompenam-3a-carboxylat-l-oxid og efterfølgende oxidation af det opnåede hydrogenerede produkt frembringer den

DK 162717 B

4 ønskede 2)8-ch1ormethyl“2a-niethyl-penam-3a-carboxyl syresul fon med korrekt stereokemisk konfiguration. Udgangsmaterialet omhandlet DK-B-155.740 indeholder en stabil CH^-gruppe i ringens 2-stilling, medens udgangsmaterialet ifølge den foreliggende opfindelse indeholder en ekstremt 5 labil og følsom -Cl^-Cl-gruppe i 2-stillingen, en gruppe som overraskende og uventet overlever både hydrogenolyse og oxidation.

Fordelen ved at opnå forbindelsen med den rigtige stereokemi er, at man derved bibringer molekylet overlegne /Mactamaseinhibitoriske egenskaber.

10 Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse til fremstilling af 2/S-chlormethyl-2a-methylpenam-3a-carboxyl syresul fon med formlen o o \ # 15 _XS\/CH2C1 , f \:h3 (i) J—N-l

° COOH

20 et farmaceutisk acceptabelt salt af syren eller en let hydrolyserbar ester af syren, er ejendommelig ved, at man i rækkefølge a) katalytisk hydrogenerer, f.eks. med en ædelmetal katalysator', såsom palladium, en ester med formlen 25 A CH_Cl

Sr",_ Γ 7//ch3 (II) h N 1

O- C02R

30 υ Z

hvori R* betegner benzyl eller substitueret benzyl, og dernæst b) underkaster det hydrogenerede produkt oxidation til fremstilling af den ønskede syre eller et salt deraf, og dernæst om ønsket 35 c) esterificerer syren eller et salt deraf til dannelse af en let hydrolyserbar ester af syren.

De ovenfor nævnte farmaceutisk acceptable salte omfatter non-toxiske metalsalte, såsom natrium-, kalium-, calcium- og magnesiumsalte,

DK 162717 B

5 toxiske aminer, såsom tri al kyl aminer (f.eks. tri ethylamin), procain, di-benzylamin, N-benzyl-/?-phenethylamin, 1-ephenamin, Ν,Ν'-dibenzylethylen-diamin, dehydroabietylamin, N,N'-bis(dehydroabietyl)ethylen-diamin, N-(lavere)alkylpiperidin (f.eks. N-ethylpiperidin) og andre aminer, der 5 har været anvendt til at danne farmaceutisk acceptable salte af penicilliner og cephalosporiner. De mest foretrukne salte er alkalimetalsaltene, nemlig natrium- og kaliumsaltene samt ammoniumsaltet.

Udtrykket "fysiologisk hydrolyserbare estere" refererer her til sådanne farmaceutisk acceptable estere, som, det vides, hydrolyserer til 10 den frie syreform in vivo. Eksempler på egnede fysiologisk hydrolyser--bare estere omfatter, phenacyl, acetoxymethyl, pialoyloxymethyl, a-acet-oxyethyl, α-acetoxybenzyl, a-pivaloyloxyethyl, phthalidyl(3-phthalidyl), indanyl(5-indanyl), methoxymethyl, benzoyloxymethyl, a-ethylbutyryloxy-methyl, propionyloxymethyl, valeryloxymethyl, isobutyryloxymethyl, 6-15 [(R)-2-amino-2-phenylacetamido]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo- [3,2,0]heptan-2-carbonyloxymethyl og 6-[(R)-2-amino-2-p-hydroxyphenyl-acetamido]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-heptan-2-carbonyloxymethyl. De foretrukne estere er acetoxymethyl, pivaloyloxy-methyl, methoxymethyl, phthalidyl, 5-indanyl, 6-[(R)-2-amino-2-phenyl-20 acetamido]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptan-2--carbonyloxymethyl og 6-[(R)-2-amino-2-p-hydroxyphenylacetamido]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thi a-1-azabi cyclo[3,2,0]heptan-2-carbonyloxymethyl.

Der kan anvendes mange forskellige oxidanter, som kendes til oxidation af sulfider til sulfoner. Særligt hensigtsmæssige reagenser er 25 imidlertid al kalimetalpermanganater, f.eks. kaliumpermanganat, og organiske persyrer, f.eks. 3-chlorperbenzoesyre.

Særligt værdifulde beskyttende grupper for R1 er benzylgruppen og substituerede benzylgrupper, især 4-nitrobenzyl. Benzyl og substituerede benzylgrupper kan fjernes bekvemt ved katalytisk hydrogenering. I dette 30 tilfælde omrøres eller rystes en opløsning i et inert opløsningsmiddel af forbindelsen med formlen A, hvori R* betegner benzyl eller substitueret benzyl, under en atmosfære af hydrogen eller hydrogen blandet med et inert fortyndingsmiddel, såsom nitrogen eller argon, i nærværelse af en katalytisk mængde af en hydrogeneringskatalysator. Egnede opløsningsmid-35 ler til denne hydrogenering er lavere alkanoler, såsom methanol, ethere, såsom tetrahydrofuran og dioxan, lavmolekylære estere, såsom ethylacetat og butylacetat, vand, og blandinger af disse opløsningsmider. Det er imidlertid normalt at vælge betingelser, under hvilke udgangsmaterialet

DK 162717 B

6 er opløseligt. Hydrogeneringen udføres sædvanligvis ved en temperatur i intervallet fra ca. 0 til ca. 60°C og ved et tryk i intervallet fra ca.

98 til ca. 98x10 kPa. De til denne hydrogeneringsreaktion anvendte katalysatorer er af den type, som kendes inden for denne transforma- 5 tionsteknik, og typiske eksempler er ædle metaller, såsom nikkel, palladium, platin og rhodium. Katalysatoren er sædvanligvis til stede i en mængde fra ca. 0,01 til ca. 2,5 vægtprocent, og fortrinsvis fra ca.

0,1 til ca. 1,0 vægtprocent baseret på forbindelsen med formlen A. Det er ofte hensigtsmæssigt at suspendere katalysatoren på en inert bærer; 10 en særligt hensigtsmæssig katalysator er palladium suspenderet på en -inert bærer, såsom carbon. Der er endvidere sædvanligt at forpufre reaktionsblandingen for at arbejde ved en pH-værdi i intervallet fra ca.

4 til 9, og fortrinsvis fra 6 til 8. Borat- og phosphatpuffere anvendes normalt. Reaktionen tager typisk ca. 1 time.

15 "Skellysolve B" er en petroleumsetherfraktion med kogepunkt 60-68°C bestående i det væsentlige af n-hexan ("Skellysolve" er et handelsnavn fra Skelly Oil Co.).

Fremgangsmåderne ifølge opfindelsen belyses nærmere i de følgende eksempler.

20 5

DK 162717 B

7

Eksempel 1

Fremsti Π ing af kalium-2g-ch1ormethyT-2tt-methylpenam-3a-carboxy1at-sulfon (BL-P2013)

O O

t ^

Br S , Br. ^ V ' I - o N ^C02H σ go2-CH2-<g>-N02 1 2

V

O

B%,— \ JTch3 -«=- Ϊ _ QJ—n \o2-cK2-(o)-m2 «N ΐο2-αί2-(θ)«ο2 h2 £ 3 Ψ — O o. /0 • * 4ch0ci *.CH9C1 „Mn0 ^ \/ λ

yS N/ 2 KMn04 -f '/,/CH

CH3 -> 3

</-N-ΐο,Η Z V

5 (BL-P2013)

DK 162717 B

8 6tt-bronipenicniansyre-$-sulfoxid (1) 1. 30 g (37,5 mmol) 6a-brompenicillansyre, N,N'-dibenzylethy-lendiaminsalt [G. Cignarella et al., J. Org. Chem. 27, 2668 (1962) og E. Evrard, Nature 201, 1124 (1964)] opløses i 330 ml methylen- 5 chlorid. Der omrøres og afkøles til 0°C.

2. 13 ml (156 mmol) koncentreret saltsyre sættes langsomt til methylenchloridopiøsningen. Udfældning af dibenzyl ethylendiamin, HC1-saltet (DBEDjHCl) finder sted i løbet af et minut. Opslæmningen omrøres ved 0-5°C i 10 minutter.

10 3. Bundfaldet af DBED,HC1 filtreres gennem et forbelagt diato- méjordfilter ("Dicalite"). Kagen vaskes med 150 ml methylenchlorid. Filtreringen bør afsluttes så hurtigt som muligt. Man bør undgå at opbevare den sure methylenchloridopiøsning i længere tidsrum. Der kan være nogle filtreringsproblemer på grund af bundfaldets fine natur. Til sæt- 15 ning af filterhjælpemiddel til opslæmningen kan være til hjælp.

4. Blandingen af methylenchloridfiltrat og vaskevæske vaskes med 60 ml koldt vand. Der omrøres 5 minutter, og den vandige fase kasseres. Vaskevæskens pH-værdi er 2,0-2,3.

5. Methylenchloridopløsningen, som indeholder 6a-brompenicillan- 20 syre, koncentreres under reduceret tryk til et volumen på 65-80 ml. Opløsningen afkøles og omrøres til 5°C.

6. Under kraftig omrøring tilsættes forsigtigt 13 ml (86,9 mmol) 40% pereddikesyre over et tidsrum af 30 minutter. Reaktionen er exoterm. Temperaturen holdes mellem 15 og 18°C med isbadafkøling. Sulfoxidet be- 25 gynder at udkrystallisere, efter at 10 ml persyre er tilsat. Opslæmnin- . gen afkøles og omrøres ved 0-5°C i 2 timer.

7. Den snehvide kage filtreres og vaskes med 10 ml 5°C vand, dernæst med 10 ml 0-5°C methylenchlorid og endelig vaskes med 15 ml heptan.

8. Kagen tørres i luftovn ved 45°C til konstant vægt, hvorved ca.

30 6-10 timer bør være tilstrækkelig. Overdreven opvarmning kan udvikle spor af en lyserødlig farve. Vægten af 1 er ca. 16,26 g, udbytte 73,24%.

9. Reaktionsblandingen og slutproduktet kan analyseres ved tyndt-lagskromatografi under anvendelse af opløsningsmiddel systemer bestående af 15 dele toluen/4 dele acetone/1 del eddikesyre (HAC) eller 8 dele 35 acetone/8 dele methanol/3 dele toluen/1 del HAC. Slutproduktet analyseres ved NMR og IR.

DK 162717 B

9 p-nitrobenzyl-6a-brompenicinanat-S-Sulfoxid (2)

Til en opløsning af 12 g (0,04 mol) 6a-brompenicillansyre-S-sulf-oxid i 100 ml acetone sattes 7,5 g (0,041 mol) kalium-2-ethyl-hexanoat.

Saltet opsamledes ved filtrering, vaskedes med kold acetone og luft-5 tørredes til et udbytte på ialt 10 g. Det krystallinske kaliumsalt opløstes i 75 ml dimethylacetamid, og 7,8 g (0,04 mol) p-nitrobenzyl-bromid tilsattes. Opløsningen omrørtes ved 23°C i 24 timer. Blandingen fortyndedes med 500 ml vand og ekstraheredes med ethyl acetat. Ethyl -acetatlaget vaskedes fire gange med vand og tørredes over vandfri 10 magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdampedes ved 35°C (15 mm) til en olie, der krystalliserede. De lyst tanfarvede krystaller af 2 opslæmme-des med ether og opsamledes ved filtrering til et udbytte på 9 g (70%), smp. 124-125°C dek.

Analyse beregnet for CjgHjgBrNgOgS: 15 C: 41,98, H: 3,05, N: 6,52

Fundet: C: 42,00, H: 3,48, N: 6,98.

IR(KBr): 1800(s), 1740(s), 1610(w), 1520(s), 1450(m), 1350(s), 1060(m), 740(m) cm'1. H-NMR (60 mHz, DMS0): 61,22 (s,3H), 1,6 (s,3H), 4,67 (s,IH), 5,2 (d,J~l-5 Hz,IH), 5,45 (s,2H), 5,68 (d, J-l-5 Hz;lH), 20 7,5-8,5 (m,4H).

p-Nitrobenzyl-2j8-chlormethyl-2a-methyl-6-brompenam-3o:-carboxylat (3)

En opløsning af 5 g (0,012 mol) p-nitrobenzyl-6a-brompenicillanat- S-sulfoxid (2) i 120 ml vandfri dioxan opvarmedes ved tilbagesvaling un-25 der nitrogen i 4 timer med 1,5 g (0,012 mol) quinolin og 1,6 g (0,012 mol) benzoylchlorid. Opløsningen fortyndedes med 600 ml vand og ekstraheredes med ethyl acetat. Ethyl acetatekstrakten vaskedes med 5% natriumbi carbonatopløsning, 5% phosphorsyreopløsning og endelig med vand. Det organiske lag tørredes over vandfri magnesiumsulfat og inddampedes til 30 en olie ved 35°C (15 mm). Olien krystalliserede og opsamledes, vaskedes med ether og endelig med kold toluen til et udbytte af 3, 3,5 g (65%), smp. 130-135°C dek.

Analyse beregnet for CjjjHjgClBrNgOgS: C: 40,06, H: 3,14, N: 6,23, 35 Fundet: C: 40,19, H: 3,12, N: 6,75.

IR(KBr): 1792(s), 1740(s), 1610(w), 1520(s), 1353(s), 1280(m), 1025(w), 990(w), 750(w) cm"1. NMR (60mHz, DMSO): 61,45 (s,3H), 3,5-4,3 (m,2H), 5,05 (s,IH), 5,42 (s,2H), 5,5 (d,J-1,5 Hz,IH), 5,62 (d,J~l,5

DK 162717 B

10

Hz,IH), 7,5-8,5 (m,4H).

p-Nitrobenz.yl-2g-ch1ormethvl-2a-methylpenam-6a-carboxv1at-sulfoxid (4)

En opløsning af 1 g (0,0022 mol) p-nitrobenzyl-30-chlormethyl-2a-5 methyl-6a-brompenam-3a-carboxylat (3) opløst i 50 ml methylenchlorid om-rørtes med 473 mg (0,0022 mol) m-chlorperoxidbenzoesyre. Opløsningen om-rørtes ved 23°C i 3 timer. Methylenchloridet inddampedes til 20 ml ved 15 mm og 33°C, og den koncentrerede opløsning fortyndedes med 50 ml hep-tan ("Skellysolve B"). Opløsningsmidlet dekanteredes, og remanensen op-10 slæmmedes med ether, og (4) udkrystalliserede snart i et udbytte på 250 mg, 24%, smp. 136-137°C dek.

Analyse beregnet for C^H^BrCl^OgS: C: 38,68, H: 3,02, N: 6,02,

Fundet: C: 39,14, H: 3,13, N: 5,96.

15 IR(KBr): 1800(s), 1760(s), 1520(s), 1350(s), 1200(s), 1050(m), 830(w), 740(w) cm"1. H-NMR (60 mHz, DMS0): 51,32 (s,3H), 3,8-4,5 (m,2H), 4,97 (s,IH), 5,25 (d,J-1,5 Hz,IH), 5,45 (s,2H), 5,6 (d,J-l,5 Hz,IH), 7,8-8,5 (m,4H).

20 Kalium-2/?-chlormethyl-2o:-methylpenam-3a:-carboxylat-sulfon (5) (BL-P2013)

Til en opløsning af 7 g (0,015 mol) p-nitrobenzyl-2/i-chlormethyl-2a-methyl-6o!-brompenam-3o!-carboxylat-sulfoxid (4) i 150 ml ethyl acetat sattes en suspension af 4 g 30% palladium-på-diatoméjord ("Celite") og 2,8 g natriumbicarnonat i 150 ml vand. Blandingen hydrogeneredes i 3 ti -25 mer ved 50 psi. Katalysatoren frasepareredes ved filtrering, og det van-, dige lag fraskiltes og behandledes med 1,5 g kaliumpermanganat i 50 ml vand. Blandingen omrørtes i 1 time, og 250 mg natriumbi sul fit tilsattes. Blandingen filtreredes, og filtratet indstilledes til pH 2 med koncentreret saltsyre. Opløsningen lyofili seredes til dannelse af et hvidt 30 amorft pulver. Faststoffet ekstraheredes med ethyl acetat, inddampedes til et volumen på 20 ml og fortyndedes med 100 ml heptan ("Skellysolve B"). Hvidt, hygroskopisk, fast 2/?-chlormethyl-2a-methylpenam-3a-carb-oxylsyre-sulfon opsamledes. Syren opløstes i acetone og behandledes med fast kalium-2-ethylhexanoat. Et krystallinsk hvidt salt udfældede til 35 dannelse, efter filtrering, af 170 mg af 5, smp. >140°C dek.

Analyse beregnet for CgHyClKNOgS^HgO: C: 28,27, H: 3,24, N: 4,12,

Fundet: C: 28,27, H: 3,69, N: 3,84.

DK 162717 B

11 IR(KBr): 1790(s), 1770(m), 1620(s), 1460(m), 1370(s), 1310(s), 1200(s), 1140(s), 955(m), 740(m) cm"1. H-NMR (100 mHz, D20): 51,68 (s,3H), 3,2-3,9 (m,H~2 Hz, J-4 Hz, J-6 Hz,2H), 4,0-4,4 (m, 2H), 4,3 (s,IH), 5,02 (d d, J-4 Hz, J-2 Hz,IH).

5

Eksempel 2

Pi val oyl oxymethyl -2/1-chl ormethyl -2ot-methy1 penam-3tt-carboxy1 at-sul fon 2/J-chlormethyl-2a-methylpenam-3a-carboxylsyre-sul fon i dimethyl formamid behandledes med én ækvivalent triethylamin og omrørtes til 10 effektuering af opløsning. Brommethylpivalat (1 ækvivalent) i dimethyl-formamid tilsattes derpå. Den resulterende blanding omrørtes ved stuetemperatur. Blandingen kl aredes derefter ved filtrering, og filtratet hældtes i isvand. Det fraseparerede faststof opsamledes ved filtrering, vaskedes med vand og tørredes til dannelse af titel esteren.

15 De respektive acetoxymethyl-, methoxymethyl-, acetonyl- og phen-acylestere af samme syre fremstilledes ved at erstatte det i ovennævnte fremgangsmåde anvendte brommethylpivalat med en ækvimolær vægtmængde af henholdsvis chlormethylacetat, chlormethylmethyl ether, chloracetone og phenacylbromid.

20

Eksempel 3

Pi valoyloxymethyl-20-chlormethyl-2a-methy1penam-3oi-carboxylat-sulfon BL-P2024 O o 25 CH3

_O

I Vch2ci + Nai + h2o + cich2-o-c-c(ch3)3 acetoIML·» i—H .¾.

o <3°6> co2-K - 30 (BL-P2013)

O O

^ CH3 ΓΤ Ίν 35 1 CH_C1 s « s o co2ch2-o-c-c(ch3)3 (BL-P2024)

DK 162717 B

12

Til en omrørt suspension af 14,6 g (0,0487 mol) BL-P2013 (5) i 200 ml acetone sattes 4 ml af en 10% vandig opløsning af natriumiodid, og blandingen bragtes til tilbagesvaling på dampbad. Til denne under tilbagesvaling værende suspension sattes 14,8 ml (0,1 mol) redesti lieret 5 chlormethylpivalat (kp. 34°C ved 7 mm Hg) på én gang. Blandingen omrør-tes ved tilbagesvaling i tre timer og afkøledes derpå til stuetemperatur (22°C). De krystallinske faststoffer opsamledes ved filtrering, vaskedes med 3 x 30 ml acetone, og de forenede filtrater inddampedes i en olie i vakuum ved <22°C. Olien optoges derpå i 500 ml ethyl acetat og vaskedes 10 én gang med vand (200 ml) og én gang med mættet Na2So4, medens den omrørtes med 2 g affarvende carbon under afkøling (isbad). Efter 20 minutter filtreredes blandingen gennem en diatomé (Dicalite) pude med sugning, og puden vaskedes med 4 x 100 ml ethylacetat. De forenede filtrater koncentreredes i vakuum ved 22°C til en olie. Olien koncentrere-15 des derpå yderligere ved ca. 22°C og <1 mm Hg til fjernelse af det meste af det resterende chlormethylpivalat. Den tilbageblevne olie triturere-des så to gange med 50 ml portioner n-pentan og henstod weekenden over i kølerum (ca. 10°C) under n-heptan. Den faste krystallinske masse blev derefter brudt op til et fast pulver med 40 ml af en 4:1 blanding af 20 ether-n-pentan. Produktet opsamledes så ved filtrering, vaskedes med ether-pentan (1:1), derpå pentan, hvorefter det lufttørredes. Efter tørring i vakuum i fire timer over PgOg opnåedes 13,37 g pivaloyloxy-methyl -2/J-chlormethyl-2a-methylpenam-3a-carboxylat-sulfon (ca. 75% udbytte), smp. 93-95°C.

25 Analyse beregnet for Cj^qCINO^S: C: 44,03, H: 5,27, N: 3,67,

Fundet: C: 44,11, H: 5,08, N: 3,85.

Eksempel 4 30 Omkrystallisation af ka1ium-2j3-ch1ormethyl-2o:-methylpenam-3tt-carboxy1at-sulfon (BL-P2013)

Til en blanding af 20 ml n-butanol og 1 g BL-P2013 (5) sattes vand, 1 ml ad gangen, under omrystning i en skilletragt, indtil der opnåedes en lys gul opløsning. Den klare opløsning filtreredes gennem et 35 foldefilter, og kolben og filterpapiret vaskedes med ca. 10 ml 9:1 n-butanol^O, og de forenede filtrater fortyndedes med yderligere 20 ml n-butanol. Den resulterende opløsning anbragtes i en rundbundet kolbe på "roto-vap" og inddampedes under reduceret tryk til ca. halvdelen af det

DK 162717 B

13 oprindelige volumen. Det snehvide krystallinske produkt opsamledes ved filtrering, vaskedes med 6 x 10 ml acetone og lufttørredes. Udbytte 810 mg. Efter vakuumtørring i 6 timer over PgOg ved <1 mm Hg opnåedes 800 mg, smp. 215°C (dek.) (80% udbytte).

5 Analyse beregnet for CgHgCINOgSK.lHgO: C: 29,67, H: 3,39, N: 4,63, Cl: 10,94, K.F.HgO: 5,56,

Fundet: C: 29,23, H: 3,38, N: 4,49, Cl: 10,74, K.F.HgO: 5,74.

Denne omkrystallisationsprocedure tilvejebringer et krystallinsk 10 monohydrat, forskelligt fra udgangsmaterialet, som er i det væsenti ige-vandfrit.

Eksempel 5 15 CH2

a) -/ O

// \ f/ + N-Bromosuccinimid a-azo-isobutyronitril 20 CCl^ Δ Ψ CHBr 0Λ * 30 Som beskrevet i USA patentskrift nr. 3.860.579 til bagesval edes re-krystalli seret phthalid (50 g, 0,375 mol) og rekrystalli seret N-brom-succinimid (0,375 mol) i 4,5 time i nærværelse af ca. 100 mgm a-azo-butyronitril i 1 liter CCl^. Blandingen afkøledes til ca. 15°C og filtreredes til fjernelse af succinimid, som selv var vasket med ca. 100 ml 35 CCl^ og filtreret. De forenede CCl^-faser koncentreredes i vakuum til ca. 150 ml, hvilket gav fast 3-bromphthalid, som opsamledes ved filtrering, vaskedes med ca. 50 ml CCl^ og lufttørredes til dannelse af 54 g udbytte, som vejede 50 g efter omkrystallisation fra kogende

DK 162717 B

14 cyclohexan, smp. 84-86°C.

O o CHBr CH Cl r<>· ' * CM - -N-

Ό C-OK

(I

5 0

*“ DMF

10 22 °C. -

15 O O

\s^ CH Cl _/ 2 I CH3 X-N--% u C-O-CH—BL-P2056

20 H / I

00 \c—> *dl

II

0 11 25 Til en omrørt delvis opløsning og delvis suspension af forbindelse 5 (BL-P2013, 2,3 g, 0,0075 mol) i 20 ml dimethyl formamid (DMF, tørret i mindst 3 uger over 3A° molekylærsigter) sattes 1,7 g (0,008 mol 3-bromphthalid (12), og blandingen omrørtes i 4 timer ved 22°C. Den resulterende blanding hældtes i en blanding af 200 ml iskoldt vand og 200 30 ml iskoldt ethylacetat (idet kolben skylledes med en lille smule ethyl-acetat), og blandingen rystedes. Derpå fraskiltes den organiske opløsningsmiddelfase og vaskedes med syv portioner iskoldt vand (100 ml).

Ethyl acetatfasen vaskedes én gang med mættet vandig I^SO^, tørredes i kulden over Na2S04, filtreredes og inddampedes til tørhed i vakuum,* 35 hvilket som remanens efterlod en olie, som tritureredes to gange med methylcyclohexan (25 ml), to gange med "Skellysolve B" (kp. 60-68°C, i det væsentlige n-hexan) (25 ml) og fire gange med 25 ml n-hexan til dannelse af 2,5 g af forbindelse 13 som et næsten hvidt faststof efter tør-

DK 162717 B

15 ring i luft. Dette produkt tørredes derpå over PgOg ved under 1 mm Hg til dannelse af 2,5 g af forbindelse 13, snip. 104°C dek. Dens anslåede renhed var 85-95%.

Analyse beregnet for CjgHj^ClNO^S: 5 C: 51,61, H: 3,79, N: 3,77, Cl: 9,53,

Fundet: C: 52,59, H: 4,67, N: 3,21, Cl: 7,73, K.F.H20: 0,27.

Eksempel 6 10 Pi valoyloxymethyl-2ff-chlormetyl-2tt-methylpenam-3a-carboxylat-sulfon -En blanding af 1 g (0,0031 mol) kalium-2j3-chlormethyl-2a-methyl-penam-3a-carboxylat-sulfon,hydrat og 1 g 3A molekyl sier omrørtes i 15 ml dimethylacetamid i 2 timer ved 23°. Til denne blanding sattes 470 mg (0,0031 mol) pivaloyloxymethylchlorid, og omrøringen fortsattes i 18 ti -15 mer. Molekylærsigterne opsamledes, og filtratet fortyndedes med 100 ml vand og ekstraheredes med ethyl acetat. Ethyl acetatet vaskedes ni gange med vand og tørredes over vandfri magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet fjernedes ved 30° (15 mm), hvilket efterlod en olie, som kromatografere-des på silica under anvendelse af "silicar CC-7" (methylenchlorid 8, 20 ethylacetat 2), som viste én plet ved Rf 0,5. Den opnåede remanens krystalliseredes fra heptan ("Skellysol ve B"), hvilket som udbytte gav 100 mg (smp. 94-95°) pi valoyloxymethyl-20-chlormethyl-2a-methylpenam-3a-carboxylat-sulfon.

Analyse beregnet: C: 44,03, H: 5,27, N: 3,67, 25 Fundet: C: 44,20, H: 5,24, N: 3,63.

NMR- og IR-spektrene var konsistente for strukturen.

Eksempel 7

Natri um-2fl-chlormethyl-2tt-methylpenam-3e-carboxvl at-sul fon 30 ν°Λα H+ NaEH yC/C*sCi -w* γΥ n J-i—i /~N 'V* 35 q rn K ^

CgH C1NO S Na O06) (289.67)

DK 162717 B

16

Til en omrørt opløsning af 500 mg af BL-P2013 (kaliumsalt) i 5 ml HgO og 10 ml ethylacetat sattes 2N HC1, indtil pH 1 opnåedes (i et isbad med kraftig omrøring). Blandingen mættedes derpå med NagSO^, det vandige lag fraskiltes, og den organiske fase tørredes kort i is over 5 ^SO^, filtreredes og behandledes dråbevis med 50¾ NaEH (natrium-2- ethylhexanoat) i vandfri n-butanol til neutral for fugtigt pH papir.

Produktet krystalliserede ikke ved skrabning, og det koncentreredes dernæst i vakuum til en olie, som opløstes i acetone (5 ml), skrabedes - ingen krystaller, ether tilsattes til uklarhedspunktet - ingen kry-10 staller. Det koncentreredes i vakuum på "roto-vap" til en olie, som op^ løstes i ethylacetat, der tilsattes én dråbe H20, skrabedes - ingen krystaller. Det koncentreredes i vakuum, og remanensen tritureredes med 5 ml n-butanol, 200 mg amorft hvidt pulver opnåedes, det vaskedes med ether, lufttørredes og vakuumtørredes over PgOg i 24 timer. Der opnåedes 15 180 mg endeligt udbytte af natri um-2/5-chl ormethyl-2a-methylpenam-3a-carboxylat-sulfon; dek. punkt >100° indef.

Analyse beregnet for CgHgClNO^SNa: C: 33,10, H: 3,13, N: 4,89,

Fundet: C: 33,20, H: 3,69, N: 4,44, K.F.HgO: 4,04-.

20

Eksempel 8

Kai i um-2fl-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sulfon (BL-P2013)

Til 10 liter vand, 130 g (1,25 mol) natriumhydrogencarbonat og 200 g 10% Pd på BaSO^ sattes 272 g (0,565 mol) p-nitrobenzyl-6a-brom-2/l· 25 chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sulfon opløst i 5 liter ethylacetat. Blandingen hydrogeneredes ved 40°C og et tryk på 1 kg. Efter 5 timer blev hydrogenoptagningen meget langsom, og 200 g 10% Pd på BaSO^ tilsattes, og blandingen hydrogeneredes, indtil der ikke iagttoges yderligere signifikant hydrogenabsorption.

30 Opslæmningen filtreredes gennem en diatoméjord ("Celite") pude, puden vaskedes med vand, og den vandige fase vaskedes med 3 liter ethylacetat. Til den vandige opløsning sattes 3 liter ethylacetat, og blandingens pH-værdi indstilledes til 1,5 med 150 ml 12N HC1 ved 10°C. Den organiske fase fraskiltes, og den vandige opløsning mættedes med 35 Na2S0^.10H20 og ekstraheredes med 2x1 liter ethylacetat. De forenede ekstrakter tørredes med magnesiumsulfat. Tørringsmidlet fjernedes, og 260 ml 2N kalium-2-ethylhexansyre i butanol tilsattes ved 0°C.

Efter omrøring i 2 timer ved 0°C opsamledes kal i um-2j8-chl ormethyl-

DK 162717 B

17 2-methylpenam-3-carboxylat-sulfon (BL-P2013) og tørredes i vakuum ved stuetemperatur.

Udbytte 134,8 g (ca. 70%).

5 Eksempel 9 p-ni trobenzyl-6ft-brompeni ci11 i nat-sulfoxi d

O

10 S—/NC * TEA + BrCHs-\)—»o2 -

1 (101) '—V

cΓ Xo# <2l6) (296) Ψ 15 o -Τ' 1 wsx 20 0 C°2CH2-^ N02 (431.28) 25 Fremgangsmåde;

Til 200 ml Ν,Ν-dimethylacetamid sattes 44 g (0,148 mol) 6a-brompe-nicillansyre-sulfoxid efterfulgt af 20,5 ml (0,148 mol) triethylamin og 38,2 g (0,177 mol) p-nitrobenzylbromid. Der omrørtes ved 22° i 20 timer.

Reaktionsblandingen hældtes i 1 liter HgO og ekstraheredes i 3 x 30 300 ml methylenchlorid. De forenede methylchloridekstrakter vaskedes med 200 ml 5% vandig natriumbicarbonatopløsning og tørredes over natriumsulfat ved 5° i en halv time. Opløsningen filtreredes og inddampedes under vakuum til en remanens. Remanensen fortyndedes med ether, og faststoffet opsamledes ved filtrering til et udbytte på 54 g p-nitroben- 35 zyl-6or-brompenicillinat-sulfoxid efter tørring. Udbytte 85%. NMR var konsistent for strukturen.

Udbyttet i dette trin var det samme som for K-salt-esterificerin-gen. Fordelen var, at det ikke var nødvendigt at fremstille K-saltet.

DK 162717 B

18 (Et trin som forløber med et udbytte på 85-90%).

Eksempel 10

Fremstilling af p-nitrobenz.y1-6a-brompenicmanat-sulfoxid 5 Til 4,375 liter Ν,Ν-dimethylacetamid sattes 873,0 g (2,95 mol) 6a-brompenicillansyre-(S)-sulfoxid og derpå, under omrøring og medens den indre temperatur holdtes under 35°C, 293 g (2,95 mol) triethylamin efterfulgt af 764 g (3,54 mol) p-nitrobenzylbromid. Blandingen omrørtes derpå ved stuetemperatur i 5 timer og henstod natten over.

10 Reaktionsblandingen hældtes i 20 liter vand og ekstraheredes med 3 x 7 liter methylenchlorid. De forenede organiske ekstrakter vaskedes med 5x7 liter vand og derpå med 7 liter 5% vandig natriumbicarbonatopløs-ning og tørredes over magnesiumsulfat.

Magnesiumsulfatet frafiltreredes, og opløsningen inddampedes til en 15 krystallinsk remanens; 4 liter di ethyl ether tilsattes, og krystallerne opsamledes, hvilket gav et udbytte efter tørring ved stuetemperatur på 1171 g (92%) p-nitrobenzyl-6a-brompenicillanat-sulfoxid.

Br 18,48% (beregnet 18,53%), (0,25% MeOH) + 162°.

20 Eksempel 11

Fremstilling af p-nitrobenzyl-6tt-brom-2j3-chlormethy1-2-methylpenam--3-carboxylat-sulfon

Til 16 liter eddikesyre sattes 364,6 g (0,812 mol) p-nitrobenzyl-6a-brom-2/?-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat. Til den således opnå-25 ede opløsning, som omrørtes ved stuetemperatur, sattes en opløsning af 282 g (1,78 mol) KMnO^ i 26 liter vand dråbevis i løbet af 3 timer.

Blandingen omrørtes derpå ved stuetemperatur i 1 time, og H202 (37%) tilsattes dråbevis, indtil der opnåedes en farveløs opløsning. 30 liter vand tilsattes derefter, blandingen omrørtes i 1 time ved stuetempera-30 tur, og det krystallinske bundfald opsamledes, vaskedes med 3 x 5 liter vand og med 2x2 liter ethanol og tørredes over vakuum ved stuetemperatur.

Udbytte: 297 g (76%). aQ (0,5% CH2C12) +75,9°.

35

DK 162717 B

19

Eksempel 12

Fremstilling af BL-P2013 fri syre 5 V rl V CH Cl

<f "//C02eK® g ^ "'C02E

10 Til en blanding af 25 ml ethyl acetat og 10 ml vand sattes 800 mg ' (0,00261 mol) BL-P2013 kaliumsalt. Efter at alt faststoffet var opløst, behandledes blandingen dråbevis med 50% vandig phosphorsyre under kraftig rystning, indtil der ikke bundfældedes mere materiale fra det vandige lag. Ethylacetatlåget fraskiltes, vaskedes derpå med mættet 15 natriumchloridopløsning og tørredes over vandfri magnesiumsulfat. Tørringsmidlet fjernedes ved filtrering og vaskedes med 10 ml ethylacetat. (Vaskevæsken forenedes med det oprindelige filtrat). "Skellysolve B" sattes så til ethyl acetatet indtil uklarhedspunktet (ca. 10 ml). Blandingen behandledes med 500 mg aktiveret carbon ("Darko KB”) og f-iltrere-20 des. Filtratet fortyndedes med 15 ml "Skellysolve B" og podedes derefter med krystaller af BL-P2013 fri syre. Efter ca. 3 timer ved stuetemperatur opsamledes det krystallinske bundfald af fri syre og tørredes i vakuum (15 minutter) over P205 til dannelse af 323 mg (46%), smp. langsom dek. over 100°.

25 Analyse beregnet for CgH^ClNOgS: C: 35,89, H: 3,77, N: 5,23, Cl: 13,25,

Fundet: C: 35,88, H: 3,91, N: 5,41, Cl: 13,52.

Dette produkt viste sig at være ustabilt, når det opbevaredes ved 23°C i syv dage.

30 35

DK 162717B

20

Eksempel 13 6o;-brompeni ci 11 ansyre-sul foxid 0

Br'"" ^>S\ Br/x —, 'rr y

L°2l O "-bCOgH

10 I- —12 MW 800.64 m 296.14

Til 3 liter methylenchlorid sattes 300 g (0,75 mol) 6a-brompenicil-15 lansyre-N,N'-dibenzylethylendiaminsalt, og denne suspension afkøledes til 5°. Derpå tilsattes i løbet af 15 minutter under god omrøring 130 ml koncentreret HC1 dråbevis. Opslæmningen omrørtes ved 5° i 2 timer. Den filtreredes så gennem en ("Celite") pude af diatoméjord, og kagen vaskedes med 3 x 250 ml methylenchlorid.

20 De forenede methylenchloridopløsninger vaskedes med 2 x 500 ml HgO og tørredes over natriumsulfat i 15 minutter. Natriumsulfatet fjernedes ved filtrering, og filtratet inddampedes under reduceret tryk til ca.

750 ml.

Denne opløsning afkøledes til 5° og under kraftig omrøring tilsat-25 tes 130 ml 40% pereddikesyre dråbevis, således at temperaturen holdtes ved 5-12°. Tilsætningen var helt exotermisk. Ved slutningen af tilsætningen omrørtes opslæmningen ved 5° i 2 timer, og produktet opsamledes ved filtrering og vaskedes med 100 ml kold HgO (5°) og 100 ml kold methylenchlorid (5°). Der opnåedes 126 g (57%) 6a-brompenicillan-30 syre-sul foxid, smp. 129°. IR- og NMR-spektrene var konsistente for det ønskede produkt.

Analyse beregnet for C8H10BrN04S: C: 32,44, H: 3,40, N: 4,73,

Fundet: C: 32,30, H: 3,35, N: 4,71, H20: 2,18.

35

DK 162717 B

21

Kai ium-6a-brompenici11anat-sulfoxid O o

5 Br’Y-VSY

* ' ''"C02R ^co2k MW 334.24 10

Til 3 liter acetone sattes 126 g (0,43 mol) 6a-brompenicillansyre-sulfoxid og 162 ml 50 vægtprocent kalium-2-ethylhexansyre i n-butanol.

Efter omrøring i 1 time ved 22° opsamledes produktet ved filtrering, vaskedes med 2 x 250 ml acetone og tørredes. Der opnåedes 127 g (90%) 15 kalium-6tt-brompenicillanat-sulfoxid, smp. 185°. IR-og NMR-spektrene var konsistente for den ønskede struktur.

Analyse beregnet for CgHgBrKNO^S: C: 28,75, H: 2,71, N: 4,19,

Fundet: C: 29,03, H: 2,78, N: 4,04.

20 p-ni trobenzyl -6tt-brompeni ci 11 anat-sul foxid

0 O

t Rr * 25 ^ N ^

Jr— Wco2K }— ^oo2CH2_^f^)—no2 MW 431.28 30 Til 1 liter Ν,Ν-dimethylacetamid sattes 145 g (0,43 mol) kali -um-6a-brompenicillanat-sulfoxid, og, under omrøring, tilsattes 115 g (0,53 mol) p~nitrobenzylbromid ved 22°. Blandingen omrørtes ved 22° i 20 timer.

Reaktionsblandingen hældtes i 3 liter 1^0 og ekstraheredes med" 35 3 x 1500 ml ethyl acetat. De forenede ethyl acetatekstrakter vaskedes med 2 x 500 ml 5% vandig natriumbicarbonatopløsning og tørredes over natriumsulfat i \ time. Natriumsulfatet frafiltreredes, og filtratet inddampedes under reduceret tryk til en remanens, hvortil der sattes 1

DK 162717 B

22 liter di ethyl ether, hvilket forårsagede krystallisation af produktet. Krystallerne opsamledes ved filtrering, vaskedes med 2 x 100 ml di ethyl -ether og tørredes til et udbytte på 162 g (87%) p-nitrobenzyl-6a-brompe-nicillanat-sulfoxid, smp. 111°. IR- og NMR-spektrene var konsistente for 5 den ønskede struktur.

Analyse beregnet for C^HigBrNgOgS: C: 41,78, H: 3,51, N: 6,50,

Fundet: C: 41,66, H: 3,45, N: 6,85, H20: 0,69.

10 p-nitrobenzyl -6oi-brom-2/3-chl ormethyl -2-methyl penam-3-carboxyl at

O

ϊ Ώ .q j CHpCl

Br a s 2 f Η, _I ""CHj

15 I_N ·_\f/ ,—v J N

g N02

MW 449.7I

20 Til 1 liter p-dioxan sattes 70 g (0,16 mol) p-nitrobenzyl-6a--brompenicillanat-sulfoxid efterfulgt af 21,2 ml (0,10 mol) benzoyl-chlorid og 21,8 ml (0,19 mol) quinolin. Reaktionsblandingen tilbagesval edes i 4 timer og afkøledes derpå til 22°, hældtes i 2500 ml H20 og ekstraheredes i 3 x 800 ml ethyl acetat. De forenede ethyl acetat-25 ekstrakter vaskedes med 300 ml 5% vandig natriumbicarbonatopløsning, 300. ml 5% vandig phosphorsyre og 300 ml H20. Ethyl acetatopløsningen tørredes over natriumsulfat i ½ time, og natriumsulfatet fjernedes ved filtrering. Filtratet inddampedes under reduceret tryk til en remanens, som genopløstes i 1 liter ethylacetat og igen inddampedes under reduceret 30 tryk til en remanens. Derpå tilsattes 1 liter di ethyl ether, og produktet opsamledes ved filtrering til et udbytte på 41 g (57%) p-nitrobenzyl-6a-brom-20-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat, smp. 132°. IR- og NMR-spektrene var konsistente for den ønskede struktur.

Analyse beregnet for C^gH^BrClN20gS: 35 C: 40,06, H: 3,14, N: 6,23,

Fundet: C: 40,62, H: 3,11, N: 6,13.

DK 162717 B

23 p-Nitrobenzyl -6a-brom-2j3-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxyl at-sulfoxid 0

Br s yCHgCl ÅyCHSC1 5 YY <1 -> ΓΊ Γ"™3 -_ ^ ' i-N-^ 0 ^°2 .N02 C02CI^\ N02 mw 465.71 10 Til 1200 ml methylenchlorid sattes 51 g (0,11 mol) p-nitroben- zyl-6a-brom-2/J-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxyl at efterfulgt af 23 g (0,12 mol) m-chlorperoxybenzoesyre. Opløsningen omrørtes ved 22° i 2 timer og inddampedes under reduceret tryk til en våd remanens. Remanensen omrørtes med 4 liter diethylether i 1 time og henstod ved 10° i 15 20 timer. Produktet udkrystalliserede og opsamledes ved filtrering, vaskedes med 2 x 200 ml diethylether og tørredes, hvilket gav et udbytte på 39 g p-nitrobenzyl-6a-brom-2/J-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sulfoxid (75%), smp. 132°. IR- og NMR-spektrene var konsistente for den ønskede struktur.

20 Analyse beregnet for CjgHj^BrClNgOgS: C: 38,69, H: 3,03, N: 6,07,

Fundet: C: 38,98, H: 3,04, N: 5,84, H20: 0,35.

Kai ium-2j8-ch1ormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sul fon (BL-P2013)

25 O O

>CH2C1 /SV 2 \-/ Nf ->- \ ""CE-z

30 i N02 * ^C02K

'— BL-P2013 MW 3Ο5.77

Til 600 ml H20 sattes 8 g 30% Pd på "Celite" og 16 g (0,19 mol) 35 natriumbicarbonat. Derpå opløstes 32 g (0,69 mol) p-nitrobenzyl-6ar--brom-2j8-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sulfoxid i 400 ml ethyl acetat og sattes til den vandige opslæmning. Blandingen hydrogeneredes på et Paar-apparat ved 50 p.s.i. ved 22° i 4 timer. Op-

DK 162717 B

24 slæmningen filtreredes gennem en tynd "Celite" pude på en sintret glastragt, puden vaskedes med 2 x 50 ml HgO, og det vandige lag af det kombinerede filtrat og vaskevæskerne fraskiltes. Det vandige lag vaskedes med 200 ml diethylether, afkøledes dernæst til 5°, og, under omrø-5 ring, tilsattes en opløsning af 12 g (0,076 mol) KMnO^ i 200 ml 1^0 dråbevis i løbet af en periode på ½ time, idet pH-værdien holdtes mellem 7,5 og 8,0 ved tilsætning af 40% H^PO^. Da den lyserøde farve havde varet i 5 minutter, ophørte tilsætningen af KMnO^-opløsning. Reaktionsblandingen omrørtes med en lille smule (ca. 50 mg) natriumbisulfit i \ 10 time, derpå filtreredes opslæmningen gennem en "Celite" pude. Puden vaskedes med 2 x 50 ml 1^0. Det kombinerede filtrat og vaskevæsker lagdeltes med 500 ml ethyl acetat, og under omrøring indstilledes pH-værdien til 1,5 ved tilsætning af 2N HC1. Lagene adskiltes, og det vandige lag mættedes med natriumsulfat. Der genekstraheredes med 2 x 400 ml ethyl-15 acetat, og de forenede ethyl acetatekstrakter tørredes over natriumsulfat i ½ time ved 5°. Natriumsulfatet fjernedes ved filtrering, og filtratet inddampedes under reduceret tryk til en remanens. Denne remanens opløstes i 160 ml acetone og 160 ml diethylether, og 50 vægtprocent kalium-2-ethylhexanoat i n-butanol tilsattes, indtil opløsningen var neutral for 20 fugtigt pH-papir. Kaliumsaltet af BL-P2013 udkrystalli serede, opsamledes ved filtrering, vaskedes med diethylether og tørredes. Udbyttet var 16 g kali um-20-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sulfon (BL-P2013) (76%), smp. 202°. IR- og NMR-spektrene var konsistente for den ønskede struktur.

25 Analyse beregnet for CgHgCIKNOgS: C: 31,42, H: 2,97, N: 4,58,

Fundet: C: 31,18, H: 2,98, N: 4,51, H20: 0,93.

Eksempel 14 30 Pi val oyl oxymethyl -2/?-chl ormethyl -2-methyl penam-3-carboxyl at-sul fon (BL-P2024)

O O O O

_Js^ci^ci _ 35 ΓΊ Τ'011? -> Γί rCH3 N_ N-1* J ^co2K / ^co2ch2ococ(ch5)3 BL-P2024 MW 381.83

DK 162717 B

25

Til en omrørt suspension af 14,6 g (0,0487 mol) kalium-B/J-chlor-methyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sulfon (BL-P2013) i 200 ml acetone sattes 4 ml af en 10% vandig opløsning af natriumiodid, og blandingen bragtes til tilbagesvaling på dampbad. Til denne under tilbagesvaling 5 værende suspension sattes 14,8 ml (0,1 mol) redestilleret chlormethyl-pivalat (kgp. 34°C ved 7 mm Hg) på én gang. Blandingen omrørtes under tilbagesvaling i tre timer og afkøledes så til stuetemperatur (22°C). De krystallinske faststoffer opsamledes ved filtrering, vaskedes med 3 x 30 ml acetone, og de forenede filtrater inddampedes til en olie under 10 reduceret tryk ved <22°C. Olien optoges dernæst i 500 ml ethylacetat og vaskedes én gang med vand (200 ml) og én gang med mættet NagSO^-opløsning (200 ml). Opløsningen tørredes derefter kort over Na2S04, medens den omrørtes med 2 g affarvende carbon under afkøling (isbad).

Efter 20 minutter filtreredes blandingen gennem en "Celite" pude, og 15 puden vaskedes med 4 x 100 ml ethylacetat. De forenede filtrater koncentreredes under reduceret tryk ved 22°C til en olie. Olien koncentreredes så yderligere ved ca. 22°C og <1 mm Hg til fjernelse af det meste af det tilbageværende chlormethylpivalat. Den resterende olie tritureredes dernæst to gange med 50 ml portioner n-pentan og henstod så 20 weekenden over ved ca. 10°C under n-pentan. Den resulterende faste krystallinske masse blev så brudt op til et pulver med 40 ml af en 4:1 blanding af di ethylether-n-pentan. Produktet opsamledes ved filtrering, vaskedes med diethylether-n-pentan (1:1), derefter n-pentan og lufttørredes. Efter tørring under højvakuum i fire timer over P2Og 25 opnåedes 13,37 g pivaloyloxymethyl-2/J-chlormethyl-2-methylpenam-3-carboxylat-sulfon (BL-P2024) ca. (75%), smp. 93-95°C.

Rensning af BL-P2024

Ca. 3 g rå BL-P2024 (opnået som beskrevet ovenfor) opløstes i 5 ml 30 ethylacetat, anbragtes på en 4,5 x 40 cm søjle af silicagel ("Mallinckrodt CC-7") og elueredes med 4:1 v/v CH2Cl2-ethylacetat.

Fraktionerne, der indeholdt en enkelt plet ved 0,84 (TLC på silica-gelplader med 4:1 CH2Cl2-ethylacetat, I2 påvisning) forenedes og koncentreredes under reduceret tryk til 1,38 g af et krystallinsk faststof.

35 En portion af dette materiale (900 mg) opløstes i 5 ml ethylacetat; den resulterende opløsning filtreredes, fortyndedes næsten til uklarhedspunktet med petroleumsether ("Skellysol ve B") og opbevaredes så ved stuetemperatur i tre dage. De krystaller, der dannedes, opsamledes ved

DK 162717 B

26 filtrering, vaskedes med petroleumsether og tørredes til dannelse af 560 mg, smp. 100-101°, renset BL-P2024.

Analyse beregnet for Cj^qCINO^S: C: 44,03, H: 5,27, N: 3,67, 5 Fundet: C: 44,11, H: 5,08, N: 3,85.

Alle temperaturer i denne ansøgning anføres i grader Celsius.

Eksempel 15

Fremstilling af ammoniumsaltet af BL-P2013 10 1. Den frie syre af BL-P2013 (250 ml) opløst i 20 ml acetone- -methanol (1:1 volumen) filtreredes til fremstilling af en klar opløsning.

2. Vandfri ammoniumopløsning fremstilledes ved tilsætning af 1 ml ammoniumhydroxid (30%, reagenskvalitet) til 10 ml acetone-methanol (1:1 15 volumen) opløsningsmiddel, og derpå tilsattes 1 g vandfri magnesiumsulfat til denne opløsning under mild omrøring, og blandingen filtreredes gennem filterpapir; filtratet betegnedes "vandfri ammoniumopløsning".

3. Til filtratet ifølge trin 1 sattes gradvis ca. 2 ml "vandfri ammoniumopløsning", og der blandedes godt.

20 4. En 100 ml portion diethylether blandedes med blandingen fra trin 3 til udfældning af ammoniumsaltet af BL-P2013.

5. Det hvide ammoniumsalt isoleredes fra opløsningsmidlet og vaskedes med to portioner på hver 50 ml diethylether.

6. Det isolerede pulver tørredes ved 35°C i vakuumovn natten over.

25 7. Analysedata var som følger:

Beregnet % C: 33,7, H: 4,6, N: 9,8,

Fundet: C: 33,66, H: 4,63, N: 10,12, tør ved KF.

Mikroskopisk undersøgelse: Krystallinsk substans.

30 Eksempel 16

Fremstilling af non-hygroskopisk natriumsalt af BL-P2013 1. 50 mg af den frie syre af BL-P2013 opløstes i 4 ml acetone--methanol (1:1 volumen) blanding. Der filtreredes til opnåelse af en klar opløsning.

35 2. Natrium-2-ethylhexanoatopløsning fremstilledes ved opløsning af 40 mg natrium-2-ethylhexanoat i 10 ml acetone-methanol (1:1 volumen) blanding.

3. Til filtratet ifølge trin 1 sattes 10 ml opløsning ifølge trin

DK 162717 B

27 2, og der blandedes godt.

4. En 10 ml portion diethylether blandedes med blandingen ifølge trin 3 til bundfældning af natriumsaltet af BL-P2013.

5. Det hvide salt nedsænkedes i diethyletheren i 1-2 timer og 5 i soleredes derpå fra opløsningsmidlet og vaskedes med tre portioner på hver 5 ml diethylether.

6. Det isolerede pulver tørredes ved 30°C i vakuumovn natten over. Eksempel 17 10 Omkrystallisation af BL-P2013

00 O O

5<^ ^ CHgCl Omkrypfall. ^ ^CE^Cl

Γ* Yrn H00-aceton^ I^CBL

15 I CH5 2 I *3 /-" C0aK.H20 ' Jr- V, 20 BL-P2013 (400 mg) opløstes i en minimal mængde acetone-HgO (1:1) volumen og fortyndedes med 10 ml acetone, filtreredes, fortyndedes så med acetone til ca. 25 ml, skrabedes, og efter 30 minutter opsamledes det krystallinske hydrat ved filtrering, vaskedes godt med acetone, lufttørredes og vakuumtørredes så ved <1 mm Hg natten over. Udbytte 280 25 mg.

Analyse beregnet for CgHgClN0SK.H20: C: 29,67, H: 3,39, N: 4,63, Cl: 10,94, H20: 5,55,

Fundet: C: 29,32, H: 3,32, N: 4,44, Cl: 11,31, H20: 5,90.

30 35

DK 162717 B

28

Eksempel 18 Ν,Ν'-dibenzylethylendiaminsalt af BL-P2013) 5 Onikryst-al 1. X 0 0 \

Acetone-ether / \^CH2C1 \ / I rCH3 \ ]_N-1 / ''cO^.Cg^CHgNH-CH^J- 10 \ /« 306 mg (0,001 ml) BL-P2013 opløstes i 7 ml HgO og sattes til en op-15 løsning af 180 mg (0,0005 mol) Ν,Ν'-dibenzylethylendiamindiacetat i 7 ml HgO. Blandingen omrørtes, og saltet krystalliserede, og efter omrøring i ca. 10-15 minutter opsamledes saltet ved filtrering og lufttørredes til dannelse af N,Ν'-di benzyl ethylendiaminsaltet af BL-P2013 (300 mg).

Materialet rekrystalli seredes ved opløsning i-ca. 10 ml kogende acetone 20 og fortynding med ether til uklarhedspunktet. 260 mg lufttørret og vakuumtørret materiale opnåedes.

Analyse beregnet: C: 51,69, H: 5,42, N: 7,53, Cl: 9,55,

Fundet: 25 C: 49,39, H: 5,49, N: 7,05, Cl: 8,96, Η£0: 1,23 (KF).

Eksempel 19

Chlormethylester af BL-P2013 30 O O

Wg/ -.CHgCl + 01CH2-0-S02C1 ^ -Uk + 3 KHC03 35 (305-7) 2. Cf^Clg H2°

DK 162717 B

29

O O

I I CHx 1— N-1 5 0 C-0CHoCl

II 2 O

(316.17) 7 10 Til en kraftigt omrørt blanding af 15,25 g {0,05 mol) BL-P2013 (5), 15 g (0,15 mol) KHC03 og 1,7 g (0,005 mol) tetrabutyalmmoni-umhydrogensulfat (Aldrich Chem. Co.) i en blanding af 50 ml vand og 50 ml CH2C12 sattes dråbevis en opløsning af 9,5 g (0,0575 mol) ClCHg-O-SO^Cl i 40 ml CH^lg. Temperaturen steg til 26°C og efter tilsætningen 15 (som tog ca. 15 minutter), omrørtes blandingen i yderligere 30 minutter.

Fordi produktet udkrystalliserede, ti Isattes mere CH2C12 (ca. 400 ml) til opnåelse af en opløsning. Det fraskilte CHgClg-lag og en 50 ml CH2Cl2-vaskevæske forenedes, tørredes over MgS04 under omrøring, og 2 g affarvende carbon ("Darco KB") tilsattes. Efter ca. 30 minutter filtre-20 redes blandingen, koncentreredes til ca. 50 ml, og isopropyl al kohol (150 ml) tilsattes. Resten af CH2C12 fjernedes derpå under reduceret tryk.

Det resul rende krystallinske bundfald opsamledes ved filtrering, vaskedes godt med isopropyl al kohol og lufttørredes. Efter vakuumtørring ved mindre end 1 mm Hg opnåedes 8,5 g chlormethyl-2j3-chlormethyl-2-methyl-25 penam-3-carboxylat-sulfon (7), smp. 116° (dek., mørkfarves over 100°C).

Analyse beregnet for CgHjjCl2N0gS: C: 34,18, H: 3,51, N: 4,43, Cl: 22,43,

Fundet: C: 34,16, H: 3,45, N: 4,47, Cl: 22,46, H20: 0,33 (KF).

30 Anslået renhed i området 90-95%.

Iodmethylester af BL-P2013 i i /[I2C1 \ J /H2C1 ‘ 35 ,-,>Sn/ Na I - I '"'CH, -> ''CH, /) ""c-om Cl J ""

o' S OCHgLl 0 C-OCH.I

7 0 8 J 2

DK 162717 B

30

Til en omrørt blanding af 5 g (0,0159 mol) chlormethylester af BL-P2013 (7) i 25 ml acetone sattes 3 g (0,02 mol) natriumiodid. Den resulterende opslæmning omrørtes i 17 timer og afkøledes derpå til ca.

0°C. To dråber mættet vandig KHCOg tilsattes, og blandingen fortyndedes 5 langsomt dråbevis med vand i løbet af 10 minutter, indtil 50 ml var blevet tilsat. Opslæmningen undergik et pludseligt farveskift fra gul til grå til violet til sort, og krystallerne opsamledes derfor øjeblikkeligt ved filtrering og vaskedes med koldt acetone-vand (1:2), derpå isopropyl al kohol (3 x 10 ml), så diethylether og endelig n-pentan og lufttør-10 redes til dannelse af et udbytte på 5,55 g (91¾ udbytte) af iodmethyl--esteren af BL-P2013 (8). Smp. 118-119°C under dekomponering. Renheden ansloges til ca. 90%.

Biologiske data 15 Produktet fra eksempel 1, forbindelse 5 med strukturen \/° ,CH2C1 /V —r '"ch3 2° i—N -1

O C02K

vil i det følgende blive omtalt som BL-P2013.

Selv om BL-P2013 i bedste fald i sig selv er et meget svagt 25 antibakterielt middel, hæmmer det j8-lactamaser og beskytter ceforanid og. amoxicillin mod ødelæggelse af /Mactamaseproducerende bakterier in vitro og in vivo ved anvendelse i kombination med disse to midler.

DK 162717 B

31 TABEL Γ

Antibakteriel aktivitet af ny sul fon 5 MIC (pg/ml)

Organisme BL-P2013 Ampicillin S. pneumoniae A-9585 16 0,004 S. pyogenes A-9604 63 0,004 10 S. aureus A-9537 >125 0,16 S. aureus + 50% serum A-9537 >125 0,06 S. aureus Pen-Res A-9606 >125 >125 S. aureus Meth-Res A15097 >125 125 S. faecal is A20688 >125 0,13 15 E. coli A15119 >125 1 E. coli A20341-1 >125 >125 K. pneumoniae Al5130 >125 125 K. pneumoni ae A20468 >125 >125 P. mirabilis A-9900 >125· 0,13 .

20 P. vulgaris A21559 >125 125 P. morganii A15153 >125 >125 P. rettgeri A21203 >125 4 S. marcescens A20019 >125 16 E. cloacae A-9659 >125 63 25 E. cloacae A-9656 >125 >125 P. aeruginosa A-9843A >125 >125 P. aeruginosa A21213 >125 >125

DK 162717 B

32

ro O

“5 _ <o

Zf O) >>>>>>>>>>>>DJ 2.

NMNWMWWWMNMND (Λ ΝΝΜΜΓΟΜΙνίΜ-'ΜΝ-ι- 3 cncncncncncncncncoooco — 5 οοοοοοοοοοωοοοο^Γοοη —» w ,u aiurouijiUvi^ui-iuro + + + + + + + + + + + + tu το

3 _L

£D oj <5 n i > 3 i V \/· V V V 0)0 O" -1—1 — —1-1 —1 3m 0)0) rororororocncnrooocoooCT) — liL — y~ aicncncncncococnrororooo Q-o ro i+ i S ς 0

CD CL

— Q; X £ 1 '< -) + o σ ^ j,

f- 2, 3 *+ OD

. . , C · ° s. o> m 100 100 100 i—i 1—1 100 "Ό ni —· -h ^

Iro iro i ro ren |cn |j^ ico |ro i rv> i-t* iro _i ro o O 3 0 — —'CL 5.

w 3 o1 2 n

CL QJ

pi i ss

- 8 ® " 1 I

rucoæwcD(j)cni\j^cocnf\3 —» ~ ^ o

(JIMWWWWOJUIWWOOUI °°·0Ώ X

n* z= 't 5‘ + > ~ £ 3

—1^0 ·· ' X

loo co i —i i _i ro —·

|ro ro loo i-c* |ro iro |ro len |ro iro |ro iro ro Q

1 ° — oo 5' s/ Ny rorororo—i-iro 3 cnoncncn(T>cnoocnoo-fc.coco o κ n 5'

DK 162717 B

33

ro cd O

Qj . -s o to r+ <-+ Qj rororoOiMror-trororurororj w

o—'On‘rorotur\jnororororo B

ΰωω„Ι\)(\)η'^^ΜΝΐΝ|^ m

ru en eo ~-j~-j;^.(£U3cotDiotD

(O U3 i. w CD-vfQj OD si ϋ) Λ ω N) w 8 Ό 3 o ς' ro o U) 3 + + + ++ + + + + + + ro "ro

Dj qj (A o <D r·*· > 3 «“+

v 0) Π CT

-J -u -> 3 m tu tu m od ω ru ru oo cn cn oo co ru ---5, ;r X" ojwinj enen μ ω u w ro w D. o ϋί <-* -5 3 <0 I ft> “5

g I

— QJ 7Γ £ 3 <

+ n er £ H

ro «o 5· S· > q 7 o tu cd ^ -O 2 er. 5; m l-ft. IJj. 1^ læ 14^ Ui. IJSs Ui. 14S. 14a. 100 —1 g 3 ° n ^

—a Q_ tU

w 3 o’ ro ~s -—' α “ S’ ro 5; 3 f— ^ en 1 Q Oi I 5 Ω c ro ro n 2 |

ro i— ^00 -O

oo 00 00 enen ro od w u to ω —1 , o

N m w oo oo 00 00 tu ru ru ro w ^ ^ X

\ o’ 3 =; w 3’ * o m ^ CD 3

O f- O

·· ' x _i T3 —· |fU 1 ro ΙΓΟ Ua. IΓΟ ΙΓΟ IΓΟ I4s HU I ro |ja. ru fj.

00 5' ^ > _a_. —. —» —» —» ro 3 cncnco enen co cn cn co 00 cn o n 5"

DK 162717 B

34 * ! I O ' • I c2

QJ

o^ssct) >>>>>> 2.

° r tu o ro ro ro ro ro ro c/> w. v 3 T CL OOOOO-» g < x 5 (Q to <o ω φ Φ (O m CD 3 — (Λ co ro co co co cn g P c 3 .< cn^j-ioco-fe.

ro S 3 BL d ' D. r+ (0 P *< 5' W -5 ξ n 4 < iq 3 a ~ s w.

σ 3 S ® 3

2 rø O 9. ^ + + + + + + (DTD

r+ -? 2, c/> 3 _L

2 w 3 ro qj 6 7Γ a> ro n -» fD r+ ro __ i -

-k M J

> o ? - π R 3 3 ro 2 4 — ro _ IH 7Γ r+ > v, £ o* => 3 d-

«O C T

Ϊ t ς ro π σ n ro 2 -1 3 π» roro •π 3 — ·" cn ro ω ro -· 4 r ^ n ro o co cn co co Q-o !“ r+ S S - 7n 7 ro 2 “ 3 σ o 2.

$ = S Ώ α : S ' - “ ro c 4 o- ~ ro ro 3 <

q. _ m + O cr d —II

= £ α ® 4 5' S >

-h-2 ^ r~ 0 ron(D

πιο ro —1 ~s ro _

SirocQ l-'l-1 ·· T3 ro r· ~*i p ro 3 ro ro —s |4L. |oo |cn |cn _>ro-j ° “ ES J w g s I S - o -s O CO 3 o D. ro 3 ro -< an 3· £ α ro p o ^ -i o CQ < 3 m 2. 3 Ϊ 5: η α ro

° 3- CQ S XI Ώ C

"Π '— cn — ro ro gj n 2 ^ 3 o ro cn co ro σ> cr> 2 r~ -ρ ω o — ro q. cn co ro cn co co d ^ x < ^ ro \ n' P w D 3 = rod· ~ — g ro c 4 3 Ξ. ro 3 * 3 3_ Q_ + > w ro ^ ro g :x 3 _i i o

. -- . . 1 V

5 ro , H -D -· 2 o o in ΙΛ ul Iro v-' ro ro 7Γ < - I O — C ro -Λ _1 -> — ;r 3 co co co 3 r+ Cl

O (D

7 5Γ ro ro > - co 3 O o cn ro oo cn o co co 0.

5’

DK 162717 B

35

03 03 O

fD · "S

iT » “ 3 > T 2.

u- i ro w -· o C 3

3 03 cn (D

(Q O

cn 03

ΙΛ 7Γ fD

3 -j cn tn O > O) “3 -i XXX (Q ,n cd

H O O O 5. (D

™ C» 00 00 W cr ^ ro c

o t SJ

T w -> ΓΤ ^

DJ

3 — a

fD

5Γ CD-I

ro r- ro -i i 3 T3 ro ro r\j ^ a ™ o ro . oT oo <-· 2. co oo co 2 g 2- — 3.

CO · O O O Q; ^ <- ooo o g 3 m -3 x 3 r ro ro —· ro i- —b g n w in fD — ro ro i- — i a ye -j l/i fD ^ O V V, T3 5Γ T <‘ „ coco 5 _ — o ioo ^ t> 3 ro £ iq o o r\ 3 ~ ro w ro w

ro ^ ro H

r* ro ro _ >

g 3' ro CD

2 CO 3 q m i® r-r ro ^ |—

ro 3 S

m a X. _ 2, -o 3- 2. ro r i? S 1 " Ξ "S O ° < 5' o ro ro 3 ^ 8 -5 ~ fl> cncjicn <! .— (T> r- -i X* 2? 000 O 5 i ro S σ 3 o E c T -s w 5’ ro 2- ro Λ ΙΩ c _ g· V v T) C' 1 3 5 ro r\3 n D3 . /-N ro ro ioo w w g a ° ° <o m 3 xr ro ro > 3 α

fD

—1 — > O CO 03 2 cn ω + 03 —J ·£* Ό w -C* o

DK 162717 B

36 < ro ro *n

» r- r- O

"5 1 1 Jr α ~o td E.

-· ro ro 3 ® o o n ~s ro —» 2-

13 .tk oo 2L

CD Ut ro ro 3

(Q

ro ro —i -» ro-»-» '“'O

3 OOO OOO 3n

3 OOO OOO (QW

3 x w

ui CD

3 w Γ+ <—*·

CD

Γ+ o> m “ti 03 g- ί. ω ru -o j;. cn . Ό—»COJ^CDOl w !2. Ό — ro —h — — Ut 3 ^ < ro (jr & -»-»-» oo Z-.ro r+ j^roro ro * cn o ,3 ro - 1 o.

Ut JiCDOO—»—»^ "0 — r+ 5* ro ro i" i E S " S s. - - ro ut rri

CD 00 CD Ό 00 00 -SO-n (DUJ

° ro 21- co -vj -» cd ro -ii. g i i-t cn "s ^

CD s PU

“s S O o H

ro “s i>

g. S. Si. w S

3 cd ro tQ !H

ω m o λ ro μ —· o ^ cl V Vi To V o To -· co I ro < q- > ± o ro Ξ- £ w 2. ^ no 3 « -· co —» 2 <.

cn oo cn roro-» ro -ιω ' ^ ^ ^ ^ o λΪΤ -» co cn oo cn cn £3 ^ o’ 1 Ϊ /s /s ^ /s /s —> ro roro- roroo cn >-+ ~ - i\j - » - o 3" cn cn cn o co < ro”

UI

(-+

(D

“3 C 1 _ Εϋ 5’ < cn σι o cn cn 2 3 OOO O o r-f -· ro 3 3 co w tn r-+ α

Cn cn m cn cn m Ό • · · · · · 3 ro ro n ro ro η o.

c c o_ c c o_ < 3-5 — 3 3 — ro ro ro ro ro o c c > c c > 3

cn cn i cn cn i CQ

cd to ro > > 05 > > cn 3 i i *"-Ί i i '-I fn‘ CD CD cn to CD cn 05 05 05 05 5 o o o o ro 05 05 05 05

DK 162717 B

37 O O < DO CD "Π

-J (D Qi i— O

's. » 7 V 5.

< ™ α -u -o 5 ro ~ ro ro 3 o C. ro o o n 3 — -s ro ro ir «0 co 3 ^ - ω ω ro ro 3 _* cn ro w' o ro c 2 i -s ro = ro Ί3 ro ia iq π> Λ _

• · (Q CD 3 Γ0—1 C' O

D ?; o o . tn ro 3o m -h 3 ^ ooocn iq ro 2 g 3 > (Λ- n 3 n> 7?

o ro W CL (Q

— o 3 ro w os; «" co 3 ru cn ro -r = cn ττ ^ ς CQ —h (T) —* —* 1 7? o ro ^ ro ό tn tn ra ^ o ro = o w o ro o ro cn "g· i Q- — ro ta o o 01 ro 3 _ ^ o X> a ' 2 π - = O ' -i -1 00 qj ro w ro< ro o ro o n< ro cnro ' ' - ' ir ω -s- 3 ti ro tu ro ^ 3_ ™ 3 (Q ^ D CD 9: ro C r- cn ro o- g S o. q- n c 3 to ω cn w ® g -D 2/ Ώ q, (Q oo t. ω oi n *· 3

sr > ? s Ώ I

t ^ » s. < i

ro g- g o -h 2 OQ

ro o Q- _. o 3 in -. 3 tD 3 ,3 r- ro w 5-0^ ^.ro ^ ti -M t, t, 5· <6 ^ = < ° - ro - 5‘ ® a — 3 ^ ro 3 — · n

CD cn U D. O

\ (Q —1 O “5 X· -n ui ui u o ro ro o ~ ' o ro 00 ^ -s j si ro w η_ w , CD Ό. η· ' r^ (D - £

So 3 °

Di 3 λ —1 c ti tro roa^roo tn o ro ro w o ^ o g cn 3 -i

CD

OJ \

C X" ^ I

ro ° i. “i c a 3 < ro o c ro ro ro co ro t r-i-3 > ro o ui o o r* - s 5.1 o cn cn -.

^ Q.

DK 162717 B

38

>m>m > cn > in > cn O

ro - ro · ro · —» · to · -5 —1 „ o „ o „ cn cn „ to ro Q cn n co ro o ro o ro o·

roOj^o ό C to C cn C

co — to — to “S —1 "5 ~s —.

(D fl> (D in c c c 3

in in in fD

CL

ro Ό cn cn cn m cn ui λ ro sj o ^ >> i "5 DJ Li X X X X X XXXXXX CQ 3 ,3 <

QJ <-+ ttJ DJ

—i —i —i —i —i —i —i —i —i —i —i DJ 3 -5 OOOOO OOOOOO — ~ cncncncncn oo co co co cd oo w cr ro 3 *· ro ro , s Ό ^ ro 5 2. 5 3 Ό \S 'S \S \/ \S \S \S \S \S \S \S n >> 2 (- rororororo ro ro co ro co ro ~ -i — 00000 000000 —3 m — 00000 000000 3‘° —ro -3 X r+ 7Γ '' 5 " ^ —h n 2 ro ^ i Ci-.

2. < r*f oo cn ro ro -j -» v 305 o cn --J co ro ·· ro ^ ro -» ·· ·· -t. ro o -j an, - cn cr> o E.

cn -t. cn

CO Ji. CJJ V I DJ

cn - — -3 o DJ 2

Ό O O

D ro -· _| S 3-.ro x. ro zz σ CO ro 5' 2 cn cn co —1 cn i, -1 ^4 co 4^ roro i ........ —1 O .t* —» CO 00 -Dk ·· ir -n — < co co CO JL. -· - · · · -t,...... -1 ry :r _ - cn ro ro ·· oo -> ro o x cn - U1 N U1 ID vi w 3 3 o cn ό ϋ y· 3 5' η σ cq ro -,· cntncn—i . λ w -* -> oo ro 9J.

...... co in o ^ Ji ω ·· 3 3 — cn cn cn - · .... o...... —, = a° -> Λ ΓΟ ·· Λ -J CO (Ω<Τ)3 —s oo cn -r* -ro. co \ o χ- in 3 O (Q r* („ w I a —» co ro cn —> co 3 ø] ·· o cn ro cn o co ·· ro co ·· ...... .... ro ”s i ro M JL -J N si xi o o -Ex oo o cn 5irTi ro -·* g . ω ω ro co on -j ro -j c - co to cn -j q cn .- -. ro 3 ••ro -o -1 C h: —' ai cn o in 1/1 -Ck o - o

IQ

m n n/ ^ v/ ^ 'y x/ k/ k/ ro m rororororo ro—»rorororo o OOOOO ΟΌΟΟΟΟ —1 ' ooooo o 4x o o o o °°-σ

DK 162717 B

39

H CD > m O

fD fD ID ' “3

ffl y CD (Q

Qj Ό DJ

o’ 3 ° 3 3d - w σ = 3 5' 3 ro o. 10 m 1/1 Φ C/1 ro f g- n> ro ro 3 3 CTJ'JOO O ''n > 3 DJ 3 Ol ζ < .· XXX (DD.g < DJ O) «-+ 'g ω

-s i _i _i _i -jQjT “S

H ooo -· — ro

in ro on on cn ^ CT fD

c £ 3 %

W CD ±2 —J

“O ° -3 ^ φ (D 3 fD ro 3 5ΞΓ 3. Qj

g- 3* 3 -D

ro o fD ro

-3 g" O > 3 C

ro EL j3 -j ro ~ 3 4 r~ w ooo =n ro ro ooo 3 ° _ro O 2 7 i 5 ^ < o ro O ro ^ qj 3 — 3 - 5.

5' _i _» c» £» 3 ro d. oo o ·· ·· ro ΙΛ ----00 —1 Q. n.

r* U) DJ

3 " " 30 ro oo on i qj ”3 — -3 CD O) ^

r* X) O O

o O ro -· _| 3 g 3 2. ro 3. *2 ro — er CD ro 5' — < 000 ro ro 1 ro ...... "3- O - < Π GO GO l*J —1 Dj _ — 3 o £

° 9z °r § Q

O 5' O σ- ° fQ cq ro 5‘ - ro οπ ό 00 -j^rog.ro er. oi3jw j 3 α o ^ 3 ^ ro 3 ro pr vi 3 ^ ro ro ro ^ % d ro on ro —1 ij ^ -3 ·· - ·· g r-

= 0 ϋ. ϊ, IS

a> ,Λ 2 5 w - -> .. “T 3 —i 4^ CD i— σ> cg vi 1

O

IQ

m n o_ ro p ro —* ro ooo —1 ooo W T)

DK 162717 B

40

mmmrnintn O

* ...... -i (Ω η η η o ro cu ni o o o o c C —i ' O' > S ~ ~ -5 ~5 — n < 3 c CD CD w ro ro g w >>>>cc 3

r-h-’v CD CO CD CD W C/l (D

r+Q.—. cr <τ>σ>σ>σ> ™ O ro ·—J —f '—i t, Έ> ^ — ZT en en en en p -χ E ^ -· o σι

J» 3 3 Co O

3 φ ·· Q. si (D

§ g ® ω ^ “L r+ η ' 3 O CO Cn en O «-s > IX)

}rniv)3 -s ro t-T

2. “ o “» X X X X X X CQ 3 ,3 < 2- ro p ro p p —tu

o < o o o o o o — — ™ m9H

X 7Γ Φ cjicncncnoaca 2 <-> O _ CD

"< O Q_ 3 CD o 3 3 3 (D 3 X ω S- E ° 3 ® < » < 2 (Q 3 CD § — r+ CD _j. w £ o' ro -I -3 £ £ Η Η σ 3> ro °-<χ- p ro d; n o O\o o\» p Q 5 ^ ^ ? ro cd E. 3 3 SS SS CU, 3 g φ πησυηη £ g § £ ro ro ro < -5 SS ro ro 2. U.-5X- rog 0) (Λ CDCTO. Oj (D r+ 2" ^ 5, O O D°S- 3 -3 <" O r+ 3 2L £D — f 1 " ' * ? » s |ίϊ 5i4 3 ,3‘ CD O (V, 0 <S x α o g CL ro r+ . c ro 3 .

_.o' η ^ o H

m 2 vv's's^'o-s^ n > cd —' x *r> - r-Cn? £, _> J _! oo co — 3 3„-·Ρπ *o o o o o o o — 3 cd ro π ro 1 ΛΟ oooooo -J o 3 *·> -· m

So T % Z - S w i - 5 cn <-+ X3 —

dj ° i g O

o. 3 2 3 3 > § “ £

3 3 3 — CD

— O CD 00-1-1 Js — ro •'••ΟΓΟ ·· Q) 3 —

<-fX. roro···· -* -* i (O

ro £!. ru ^ ru xiCow<1) ro -· ^ O qj o. q" ro 3 > ζ £ 3

W ω o ro g < I

o 3 X §. c ro £ 3 -§ Ξ 3 cg ro o ro — si οι o ro j o) ro — n ^ 3 3 ·©. ........ M ro ·· 3 E m £ £ CO CO CO CO · · · · —1 · · — mX)-5 in ro ' cn CO rD~^'m 2— enen co riconro £- »o o 2. 3

w “i i — 3 CD

O — 13 3 m α ro ro g g 3 —I O <P g.

-.o g ^ ro O S CD -*- 3 n r ~o en Ji co co en -1 .......... ~Ί o e/ι i w to ·· —1 ui

"J

s/ v ro ro rovs's/roro °r- ororotooo ro 1 otncncnoo "^xj

DK 162717 B

41 —I < τι CO CD CO CO 03 03 ^ CDOjO I- I— I— I— I I t W Ϊ > i I I i i i rj- -d-d-dotjo r^!±-· ro ro ro ro ro ro 3 3 0> 3 OOOOOO Q_ I T 3 3 3 W (jO CO φ c* 33 ro^ 00 co 00 σο cn cn — 5 o> w £

Cl ro ™

ro — "J

v> Ό -ti ro o» -i Λ _

.. ~l (0 —1 —i ^ O

ro 3 ocn ro ocn ro 3o oocnoocji^^ ro ^ ω n w rr £ S. ro ft £

^ ' JO

j-* i£> _ I 3— 3~S 3— 3— -5

ID tn , I\) i —ι ΓΟ —i—1 OJ

o 0^0 1 ----- - — '-Ji-aco—>cnou> ro tn jr (j O ro looiroi-i'toirji-i -* d ^ -j ------ cn c Ό = OliLWM-JU^æACOWsJ w •rQ-Aj^Vicnooou) ™ I, g § - - - - ^ ^ σ

rn ro o O

i1 2 3 4 5* to V CL

m “J -T- ίΛ roroooro-^ro ro m

Pro^cn^rocD i — ro cn ro 0\o "» · λ . ro < - - w 'ω w ro ro g < __ cncncocn—‘-P^cntD-—-cocnco -5

3 - ' - ' ^ CL

O --1 ro cn —1 — o 'w' v_^ w ro C · "5 c <; Τ' -♦> _j § -· 0 o rj 3 3-3-3-3-3-3-- 3 CO * “5 >* ^ 00 —1 o ro —1 o Cjr^oo - - - - - - O „ GO m _£, _fc>. CO -C>. ΙΌ OT rf CL tQ ._

Π) (/1 1 L

l00,3|3iG0irOlC> "3 <?? 13 D -L

%. ·»* *» O φ -5 U

.c* co ro co —1 o l N tn tn -'CD ro^ tc · £3 — cd cn ro w co —

^ ~ ~ ~ ~ ~ " » O

0-9; Ώ s — 3- 3- ^ 3 ro Q3 ro —' —i o 5· ^ ραπ -* cn —J ro’ 4j i w « —» 3» 1 ro > —1 <> 3¾1° ro - - O - O φ O o cn ro ro tn - ro ro co - -5 3 —* σι- - cn — — ω —1 -o 4S. 3-3 w -3 -3 (O ro.

ro 3 3-3- 3-3- Q3 —1 O —* O I-

Vi co li cn 1 ro 1 —1 3.1—110 'T —1 ££

- - O - - O ro O

---g—»31 - m tn -> co - o 1^) - - cn - cn -e» OO X» 3 ui

0 O

2

4L. Ui 1—I

1 ro 1 o 3 1 o O- ,τί - - o - c> ci cn 3 co -j» 3 00 - 3cx> ' ' o 4 - cn - cn cn 5 ro co o

DK 162717 B

42 H<TI CD CD CD CD 00 CD Ti roftøO i— i— i— i— i— r~ o

-j T I I I I I I T

i Q. Ξ. "O TU “U "Ό "O ~D E, o —· -i ro ro ro ro ro ro n -i ro X o o o o o o 0 cr 2 m CO OJ CO ΓΟ l\3 ΓΌ —.32. cn cn cn _c> -p» 2.

3 CD t/1 cn

Q_ _ CD CD

2. ’ n t/ι Ό CD CU -5 ·· 3 (X) _» —λ s—- r-j 23 ocnroocnrogo m 3 w oocnoocnjQ^ roi·. \ sr 0^- *-

O CO ID

CD r+ g cn oo co ro σι o ro "~J IX) cn CO 05 ^ o n i4^(Ji^tU>iOD»CntO0 —i 3 -j-j -s. ^ ^ "· Cn u -h v cnøwooiæ-^cow cn*-j □: o* *< w ro co-

„ g g S S o> co S

“> <S f cn t i; " fB t-i ^ ^ ^ ^ ^ ^ 2 E oo —i ro cn —1 co o „ ' 'n>8° —J ro ro cn i λ\ο3_ icnicoi oo i co i -t. cn .&. co - o — ^ —» cn co cn -t. oo —» cn -* cn ro co 3 ζ —i w ^ OCOw o cd π φ cn 'w' cn -C^ 3 w w w c · 2 - "Π 3 Λ —o 3003 S co —i —i ji. ro o r — cn Γ) ' ' ~ " r+ O T3.

Y -b> -ts. ΟΙ ΓΟ 4^ CO Γ+Ο.Ώ J- CD cn X ixs.iroiroi-^ii4i.iro n cn -π -j

ro o ^ X

O cncnoororo—i-icacococnoo cd ^X. .

sisCsb ? < m ^ n » 0) 3 CL 9-,

s v ✓"N s V n 3 CD

ro o co co o -· η roco^jj^—»4^ tn’i' ιηο<ηοι-^ι-£.ιωιο C ω te " - " - " - m O \ co»w-*r\)*(DooA(n->(» 2 3 cn cn os —»c» 3 <3

'—^ x_*· n—' v_y (Q

—» o o ro -j ·. ^ v — i cn ro cn co —ii—s i o i co i ro λ —i ~ ^ ^ o ro -vicooocn—ioocncojL.cn - o ^ cn cn ->.i co co ' ^ ^ 0 o ro o cl cn oo cd 1 —i i —i i CO I —i /·· —1 - ' o - - o cn jl co ro o ' ui -o co si - o - cn w cn jl —»

DK 162717 B

43

Η<*π DO CD 03 03 DO CD "TI

m 91 ο Γ- Γ- I- Γ- Γ- I- 9 in ”1 i i i i i i Ο- " η σ τι "U ro tj ro Ό bf.

F — F r\o no ro ro ro no 3 9 ro 9 ooooop a 2. 3 ® cn cn cn co oo co lie

3 (D W W

a a> ro (Ό ' ”5 to *O —r, tu a» -5

. . ~5 (Π _» —i ^ O

ro g ocnroocni\>3o m d w o o en o o en (Q (/i

(D -. P: W

π U) — S' 8 m n> 10

_ Π> fH· W

— “5 _ >CD ^ ^ ^ g 0^0 0¾ ω W W * ω -* w ω 00 O i^ji^iJ^iCTiCDJ^i—4 —1 ^-jO _ ., - ~ - - Cn T3 -h"C3 _i_itDCn<J)COCDOOCDCT5—'4^.

I g- < cn - - w

„ I » TO ΰ S S S

55¾¾ /-. /— — /— A— ™2_ Co 00 ΓΟ --J CO —1 -P^gocncoroco i cn cto -« = icnij^i^i-^^yitno ω __ H —i~~j-joococn—i - " enroo 3 ? ro - oo cn -1 ' O oj ~ ^rviwwcn n a» oo — w c 3 ^ F = ^ n g e. o = 0,-,.- /—/— — /— Dro-5 ^ 2 00 ^ W ro o c o ^ 0 CO 00 —J ro CD r* Q. (Ω i (D (0 1 icnicoicoicncncoi-1 3 cn -p 3 (Ό - ' - ^--- -. Ο φ -j n æcoNiui-siw-t^^QMji ro ·— r ^ ^ ' P m

cn ΓΟ -1 m < CO

- s ” * ro £ Q. 9-.

CO —1 Γ0 —* O ~ 3 i ro w — —i cn F p-

cn.t>.iroiror-ro.icoi—1 pptQ

—/ - ' -- - ' - (D 0 \ WAWAcnaroin-twro -5 g 00 <n —I CO 3 \s

W W W W (Q

.— /— /— /—

Γ0 _1 -A -4 O

00 ΓΟ I -fA oo I I —' rvj I CO I ΓΟ — —* s'.*» ’t« 1" ^ ΓΟ cncocDcDro—icocn - o -, v*, ----. -- -w' ro cn ro _> o —1 o o co co i -i oo i ro i -1 oo ro i ro · j-4 ^ ji.'vjjiCO'-jococn—>—1 o w cn co cn

v_, v_. W

DK 162717 B

44

De omhandlede forbindelser er således værdifulde, indgivet oralt og parenteralt, til forbedring af effektiviteten af /Mactam-antibiotika over for /Mactamase-producerende bakterier. På vægtbasis er doseringen fra 1/5 til 5 gange, og fortrinsvis lig med doseringen af /Mactam-anti-5 biotiket. Eksempelvis forbedrede de omhandlede forbindelser som vist ovenfor anvendt i et 1:1 forhold markant aktiviteten af ceforanid og amoxicillin over for /Mactamase-producerende stammer af anaerobe bakteroider, såsom B. fragil is, B. thetaiotaomicron og andre arter af denne slægt og også over for resistent Staphylococcus aureus. De omhand-10 lede forbindelser indgives enten i blanding med eller samtidig med β- -lactam-antibiotiket med en dosis inden for det angivne forhold sammen med den kendte eller sædvanlige dosis af antibiotiket.

De omhandlede forbindelsers evne til at forøge effektiviteten af et /Mactam-antibiotikum over for visse Ø-lactamase-producerende bak-15 terier gør dem således værdifulde til coadministrering med visse β--lactam-antibiotika til behandling af bakterielle infektioner i mennesker og pattedyr. Ved behandlingen af en bakteriel infektion kan en forbindelse ifølge opfindelsen sammenblandes med ^-lactam-antibiotiket, og de to midler herved administreres samtidigt. Alternativt kan en -forbin-20 del se ifølge opfindelsen administreres som et separat middel under et behandlingsforløb med et /Mactam-antibiotikum.

Når en forbindelse ifølge opfindelsen eller et salt deraf anvendes til forøgelse af den anti bakteriel le aktivitet af et /Mactam-antibiotikum, kan den administreres alene eller fortrinsvis formuleret med 25 standard farmaceutiske bærere og fortyndingsmidler. En forbindelse ifølge opfindelsen, som er på syreform eller som et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, kan administreres oralt eller parenteralt. En forbindelse ifølge opfindelsen i form af en ester, som er let hydrolyserbar in vivo, administreres bedst oralt. Parenteral administrering omfatter 30 intramuskulær, subkutan, intraperitoneal og intravenøs administrering.

Når en forbindelse ifølge opfindelsen anvendes i nærværelse af en bærer eller et fortyndingsmiddel, vælges bæreren eller fortyndingsmidlet på basis af den tilsigtede administreringsmåde. Ved oral administrering kan forbindelsen f.eks. anvendes i form af tabletter", 35 kapsler, sugetabletter, pastiller, pulvere, sirupper, eliksirer, vandige opløsninger og suspensioner, og lignende, i overensstemmelse med standard farmaceutisk praksis. Forholdet mellem aktive bestanddele og bærer vil naturligvis afhænge af den kemiske natur, oplø-

DK 162717 B

45 selighed, stabilitet og styrke af de aktive bestanddele samt af den tilsigtede dosis. Disse farmaceutiske præparater vil dog sandsynligvis indeholder fra ca. 5% til ca. 80% af bærer. I tilfælde af tabletter til oral brug omfatter sædvanligt anvendte bærere lactose, 5 natriumcitrat og salte af phosphorsyre. Forskellige di sintegreringsmidler, såsom stivelse, og smøremidler, såsom magnesiumstearat, natri-umlaurylsulfat og talkum, anvendes almindeligt i tabletter. Til oral administrering på kapselform er værdifulde fortyndingsmidler lactose og højemolekylære polyethylenglycoler. For vandige suspensioner til 10 oral brug kombineres de aktive bestanddele med emulgerings- og suspenderingsmidler. Om ønsket kan tilsættes visse søde- og/eller duftstoffer. Til parenteral administrering, som omfatter intramusku-lær, intraperitoneal, subkutan og intravenøs brug, fremstilles sædvanligvis sterile opløsninger af de aktive bestanddele, og pH-værdi-15 en af opløsningen indstilles passende og forpufres. Til intravenøs brug bør den totale koncentration af opløste stoffer kontrolleres således, at præparatet bliver i sotonisk.

Selv om den ordinerende læge i sidste instans bestemmer den dosis, der skal anvendes for et menneskeligt individ, vil forholdet for.de dag-20 lige doser mellem en forbindelse ifølge opfindelsen eller et salt deraf og ^-lactam-antibiotiket normalt være i området fra ca. 1:5 til 5:1, og fortrinsvis ca. 1:1. Yderligere vil den daglige orale dosis af hver komponent normalt være i området fra ca. 10 til ca. 200 mg pr. kg legemsvægt, og den daglige parenterale dosis af hver komponent vil normalt 25 være ca. 10 til ca. 100 mg pr. kg legemsvægt. Disse tal tjener kun til at belyse opfindelsen, og det kan i nogle tilfælde være nødvendigt at anvende doser uden for disse grænser.

Claims (4)

46 DK 162717 B

1. Fremgangsmåde til fremstilling af 2/?-chlormethyl-2a-methylpenam-3a-carboxylsyresul fon med formlen c o o S '/ \S CH Cl / V ""cn3 i« X-N-J4 O boOH 10 et farmaceutisk acceptabelt salt af syren eller en fysiologisk hydrolyserbar ester af syren, KENDETEGNET ved, AT man i rækkefølge a) katalytisk hydrogenerer en ester med formlen

15. CH_ci I '"ch3 (ii) N—L i O- co2ra . 20 hvori R* betegner benzyl eller substitueret benzyl og dernæst b) underkaster det hydrogenerede produkt oxidation til fremstilling af den ønskede syre eller et salt deraf og dernæst om ønsket c) esterificerer syren eller et salt deraf til dannelse af en 25 fysiologisk hydrolyserbar ester af syren.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, AT der fremstilles en pivaloyloxymethylester.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1-2, KENDETEGNET ved, AT hydroge- y neringen udføres med en palladiumkatalysator.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1-2, KENDETEGNET ved, AT oxidationen udføres med et alkalimetalpermanganat eller en organisk persyre. 35