DK142815B - Analogifremgangsmåde til fremstilling af 4-desacetoxyvincristin eller syreadditionssalte deraf. - Google Patents

Description

s yp.a (11) FREMLÆGGELSESSKRIFT 1 U28 1 5 DANMARK <0,) lm Cl ’ 0 07 0 519/04 «(21) Ansøgning nr. 787/77 (22) Indleveret den 23* f®b. 1977 (24) Løbedag 23· feb. 1977 (44) Ansøgningen fremlagt og fremlaeggelsesskriftet offentliggjort den 2 · feb. 1 981

DIREKTORATET FOR

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (3°) Prioritet begår* fra den

24. feb. 1976, RI 586, HU

(7i) RICHTER GEDEON VEGYESZETI GIAR RT., 21 Gyoeraroi u., Budapest X, HU.

(72) Opfinder: Karola Jovanovies, 47 Benezur u., Budapest XII, HU: Lajos Danesi, 18 Szendro u., Budapest XII, HU: Sandor Eckhardt, 2 H&ttyu u., Budapest II, HU: Csaba Lorincz, 28 Teglaveto u-,"Budapest X, HU:

Janos Sugar, Matroz u. B, Budapest III, HU: Zsuzsa Relle, 7-9 Rath Gy., u., Budapest XII, HU: Kalman £zasz, 67/69 Pasareti u., Budapest II, HU: Jozsef Tamas, 2 Fuerdohely u., Budapest XVI, HU: Aron Szollosy, 13 Hogyes u., Budapest XI, HU. "" (74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Kontor for Industriel Eneret ved Svend Schønning.

(64) Analogifremgangsmåde til fremstilling af 4-desacetoxyvincristin el= ler syreadditionssalte deraf.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af et hidtil ukendt diindolalkaloidderivat, nemlig 4-desacetoxyvincristin, der har den i patentkravets indledning viste formel, eller syreadditionssalte deraf.

Det er kendt at visse bialkaloider med diindolstruktur fra planten Vinca rosea L. har cytostatiske egenskaber (se USA-patentskrift nr. 3 097 137, 3 205 220, 3 887 565 og 3 890 325 og de ungarske patentskrifter nr. 153 200, 154 715 og 160 967). Der er også fremstillet virksomme halvsyntetiske derivater, fx N-formylleurosin (ungarsk patentskrift nr. 165 986) såvel som forskellige karboxamid- og desacetylderivater (de tyske patentskrifter nr. 1 795 763 og 2 415 890) samt 4-desacetoxyvinblastin (N. Neuss, A.J. Barnes og L.L. Huckstep, Experimentia 31/1, 18-19, 1975).

2 142815

Det har nu vist sig at 4-desacetoxyvinblastin, der har den i patentkravets kendetegnende del viste formel, ved oxydativ formylering kan omdannes til et hidtil ukendt derivat, 4-desacetoxyvincristin; denne forbindelse udviser fremragende cytostatiske egenskaber og er mindre toxisk end det på lignende måde virksomme vineristin.

Den tumorhæmmende virkning af denne hidtil ukendte forbindelse undersøgtes på forskellige transplanterbare tumorer. Virkningen mod den vincafølsomme lymfoide leukæmi L 1210/VS og den vinca-refraktive lymfoide leukæmi L 1210/ref hos mus afprøvedes på BDF^-mus, virkningen mod Ehrlich's ascites-sarcom afprøvedes på Swiss-mus og virkningen mod Yoshida-sarcom og Novikoff-hepatom afprøvedes på rotter af stammen Wistar. 4-Desacetoxyvincristinsulfat blev indgivet i fysiologisk kogsaltopløsning en gang om dagen intrape-ritonealt til forsøgsdyrene; den tumorhæmmende virkning såvel som dyrenes gennemsnitlige levetid bestemtes i sammenligning med ubehandlede kontroldyr. De opnåede resultater er sammenfattet i tabel 1.

3 142815 Η u _

ij_l O O

Li VDVDVOVD VOVDVO r-1 ri iD Φ <>0 VOVO

o \ \ \ \ \ \ \ \\ \ \ \ \ 0) g O H O O OOO -d* O O 04 O o o tn 3

(C -P

τ5 o <d< 0) tS o o

H r< OVDVOO to tD VO HH VOODOO O O

(1) d) \\\\ \ \ \ \\ \\\\ \ \ +J > HHOO OOO ΟΟΊ O O <N O H 00

IH 0) H

W H

O

C O

QJH f- O 00 H H 00 O 04 <T\ O CS 00 "T ΓΟΟ c· γοοοΓ' Tjiroin o-o oo o oo σι -o1 01 00 04 OJ i—li—I HHH HH H04O4O4 Ο4Γ0 H \ P E-< - β Ό +) •η β OHO o ro O ro in uo in -d1 -d* rocoaooo oooo j> ςϊ, j_| kb.·.«. *.*.». *· » **·** ^1»

Otn+J σι co σι oo ooo 0-0- 04^1^^ o-o- ,—j£p$ HHH HH HHi—li 1 id 0 cr h

H -P H

H -PH

H 0) -P

β -P d) dl ih H roooocN oo o o- o-t^in o o h g ¢) d » - » - - - - - - - - d) β Hor-'tf -d* 'd1 in o σι oo oo cn oo σι m d) β d> β 04 Η Η Η Η Η Η 00 04 (ΝΓΟΜ'·^ Η ΟΙ β !Τ> X! X} d) (ti Φ

Ud Χ3 β Εη Μ β d) tn β ' •Η Τ3 Η d) rQx; ο- ο- ο- m οι οι σι σι ηηηη οοοο β θ' iJtH) Χ3 Η t n il d d m > ti tJl to X H \ CO tO ^ „

Og o ni tn o o in o Η N K1 01 04 -d1 00 00 IX Η N 111 O 04 in tø * *.*.·»*. *.·>.··» *· ·» *>*»*» ^ * trift OOOO OOO O O O O O H o o β · Q Η Μ-l cn ΰ) ra i > oi - i g i · ή \ \ x! to o β M-ig o o u d> β τ! S 0 o

Η Η Η Η-ΡΗΗ0 *^-P

0 04 04 Η H 0 Xj O Ή jj §H H HCJPMP > a x! m β o β o a) E-I Pi PI W β O >h tn S χ: 4 142815

Det fremgår af tabellen at den gennemsnitlige levetid for de dyr der var blevet behandlet med doser på 0/1 til 1,0 mg/kg 4-desacetylvincristinsulfat interperitonealt var 70-190% længere end levetiden for de kontroldyr, der var blevet inficeret på samme måde med tumorer, men ikke behandlet med 4-desacetylvincristinsulfat. Virkningen af 4-desacetylvincristinsulfat afhænger af størrelsen af de indgivne doser; den tumorhæmmende virkning forelå først og fremmest mod Ehrlich's ascites-sarcom og mod Yoshida-sarcomet, men også mod Novikoff-hepatomet kunne der fastslås væsentlig virkning. Den i tabellen angivne kvotient T/c viser forholdet mellem den gennemsnitlige overlevelsestid for de behandlede og de ubehandlede dyr.

Ved undersøgelsen af toxiciteten af den omhandlede forbindelse viste det sig at 4-desacetoxyvincristin er ca. 25% mindre toxisk end det i de samme doser lignende virkningsfulde vineristin. Det er en væsentlig fordel ved den ved fremgangsmåden tilvejebragte forbindelse, at den efter indgift af vineristin hyppigt optrædende, af lammelsessymptomer ledsaget neurotoxicitet ikke en gang optræder ved indgift af letale doser af 4-desacetoxyvincristin. De tilnærmelsesvise værdier for den akutte toxicitet (LDr_) af 4- ou desacetoxyvineristin og af vineristin fremgår af nedenstående tabel 2

Tabel 2

Forbindelse LD50' 4-Desacetoxyvincristin (hos mus, i.p.) 5 4-desacetoxyvincristin (hos mus, i.v.) 6 4-desacetoxyvincristin (hos rotter, i.p.) 1,3 vineristin (hos mus, i.p.) 4,2 vineristin (hos rotter, i.p.) 1,3 i.p. = interperitonealt i.v. = intravenøst 5 142815 I humanterapien kan 4-desacetoxyvincristin navnlig indgives intravenøst eller ved infusion og i doser på 0,01-0,03 mg/kg, fordelagtigt 0,05-0,02 mg/kg om dagen, evt. fordelt på mindre doser.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af 4-desacetoxyvincristin eller syreadditionssalte deraf er ejendommelig ved at man formylerer 4-desacetoxyvinblastin oxy-dativt, om ønsket renser det vundne produkt og derpå om ønsket omdanner det vundne 4-desacetoxyvincristin til et fysiologisk acceptabelt syreadditionssalt.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen vinder man af 4-desacetoxyvinblastin, der indeholder en N-metylgruppe ved oxyda-tiv formylering 4-desacetoxyvincristin, der indeholder en N-formyl-gruppe. Ved oxydativ formylering menes der her samtidig eller successiv udførelse af oxydation og formylering.

Hvis formyleringen gennemføres efter oxydationen, vinder man ved oxydationen som mellemprodukt en blanding af 4-desacet-oxyvincristin og N-desmetyl-4-desacetoxyvinblastin. Evt. kan denne blanding opdeles i de enkelte komponenter, hvorefter man ved formy-lering kan omdanne N-desmetyl-4-desacetoxyvinblastinet til det ønskede 4-desacetoxyvincristin, men hensigtsmæssigt underkaster man umiddelbart det vundne oxydationsprodukt formylering i processen, hvorved det i blandingen tilstedeværende 4-desacetoxyvincristin forbliver uændret og N-desmetyl-4-desacetoxyvinblastinet ligeledes omdannes til 4-desacetoxyvincristin.

Hvis reaktionen gennemføres med samtidig tilstedeværelse både af oxydationsmidlet og af formyleringsmidlet, så vindes der som enkelt reaktionsprodukt umiddelbart det ønskede 4-desacetoxyvincristin.

Oxydationen kan gennemføres med en oxyderende virkende syre eller med anhydridet eller et salt deraf, eller med oxygen eller luft og i nærværelse af en til overføring af oxygen egnet katalysator.

6 142815 kommer

Som oxyderende syre/ fx salpetersyre og navnlig kromsyre (Cr03) eller alkalimetaldikromater, fx kalium- eller natriumdikromat i betragtning.

Som katalysatorer der egner sig til overførelse af oxygen kan man anvende metaller af platingruppen, fx platin, palladium eller rodium, fordelagtigt i en form hvor de er påført på en bærer.

Som formyleringsmiddel anvender man navnlig myresyre.

Ved en hensigtsmæssig udførelsesform for fremgangsmåden opløser man 4-desacetoxyvinblastin- som man om ønsket umiddeltbart før reaktionen kan frigøre fra et syreadditionssalt - i et inaktivt organisk opløsningsmiddel eller i selve formy-leringsmidlet, eventuelt i en blanding af disse to midler. Som reaktionsmedium kan man bruge formyleringsmidlet selv, hensigts mæssigt myresyre, eller en kulbrinte af benzenrækken som fx toluen eller xylen, særligt hensigtsmæssigt anvender man benzen eller en blanding af myresyre og et organisk opløsningsmiddel.

Til opløsningen tilsætter man derefter en til overføring af ojygen egnet katalysator, fx et ædelmetal af platingruppen på en bærer, fordelagtigt palladium på aktive kul eller platinsod. Oxydationen gennemføres navnlig ved en temperatur på O°-30°C, især ved stuetemperatur og i oxygenatmosfæren, fortrinsvis under et tryk på 1-3 atmosfære oxygentryk. Efter reaktionens afslutning fjernes katalysatoren ved filtrering og filtratets pH-værdi inde-stilles hensigtsmæssigt ved hjælp af en uorganisk base, hensigtsmæssigt ammoniak til 7-10, fortrinsvis 8,5-9. Opløsningen der således er gjort alkalisk kan ekstraheres med et inaktiv organisk opløsningsmiddel, fx benzen, toluen eller o-xylen, eller med en kloreret kulbrinte, navnlig diklormetan eller kloroform. Det ved inddampning af ekstrakten vundne produkt kan renses ved omkrystallisation, hensigtsmæssigt fra en blanding en lavtkogende alkohol såsom metanol, ætanol eller propanol og vand. Det vundne 4-desacetoxyvincristin kan eventuelt på sædvanlig måde omdannes til et syreadditionssalt, navnlig sulfatsalt.

Ved en anden fordelagtig udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen opløses 4-desacetoxyvinblastin i en lavtkogende alifatisk keton, som fx acetone, metylætylketon eller metylisobutylketon. Som oxydationsmiddel anvendes hensigtsmæssigt kromsyre eller en alkalinstaldikromat; oxydationen gennemføres i nærværelse af iseddikesyre og eddikesyreanhydrid ved temperaturer under OOc, fortrinsvis mellem -90°C og -30°C. Efter oxydationens 142815 7

afslutning indstilles reaktionsblandingens pH-værdi til 5-10, hvilket hensigtsmæssigt gennemføres i to trin, først til pH

5-7, og derefter til pH 8-9. Som oxydationsprodukt opstår der i dette tilfælde en blanding af 4-desacetoxyvincristin og N-desmetyl-4-desacetoxyvinblastin. Denne blanding kan fx ved søjlekromatografi opdeles i de enkelte komponenter, og N-desmetyl-4-desacetoxyvinblastinet formyleres særskilt, men hensigtsmæssigt underkastes den som oxydationsprodukt vundne blanding umiddelbart formyleringsprocessen, hvorved der som enhedsprodukt vindes 4-desacetoxyvincristin.

Formyleringen kan gennemføres i et med hensyn til reaktionen inert opløsningsmiddel, fx i en kulbrinte af benzenrækken. Hensigtsmæssigt anvendes imidlertid formyleringsmidlet selv, navnlig en blanding af myresyre og eddikesyreanhydrid som reaktionsmedium. Formyleringen gennemføres ved en temperatur mellem 0-15°C fordelagtigt ved 0°-5°C og derefter indstilles reaktionsblandingens pH-værdi på 7-10, fordelagtigt 8-9,5. Det vundne 4-desacetoxyvincristin kan ekstraheres fra blandingen, der på denne måde er gjort alkalisk, med et inert organisk opløsningsmiddel og hensigstmæssigt med en kulbrinte af benzenrækken, fx med benzen, toluen eller o-xylen, eller med en kloreret kulbrinte, fordelagtigt diklormetan eller kloroform, og derefter kan det ved inddampning af ekstrakten isolerede råprodukt renses ved fx søjlekromatografi eller omkrystallisation.

Til kromatograferingen kan der bruges partielt deaktive-ret aluminiumoxyd (hensigtsmæssigt af aktivitet III) som adsorbent og et inert organisk opløsningsmiddel, fx benzen, toluen eller o-xylen og/eller en kloreret kulbrinte, hensigtsmæssigt diklormetan eller kloroform som elueringsmiddel. Af de eluatfraktioner som indeholder hovedmængden af 4-desacetoxyvincristin kan man umiddelbart vinde produktet ved inddampning af de forenede fraktioner, mens de før eller efter disse hovedfraktioner indsamlede eluatfraktioner først kan inddampes, hvorpå indampningsremanenserne kan underkastes yderligere kromatografisk rensning.

De på denne måde vundne produkter kan eventuelt særskilt eller forenet endnu engang omkrystalliseres og/ eller omdannes til et syreadditionssalt, fordelagtigt sulfatsalt.

142815 8 4-Desacetoxyvincristin og/eller syreadditionssalte deraf kan ved terapeutisk anvendelse i almindelighed indgives parente-ralt. Til dette formål fremstilles med fordel injektions- eller infusionsopløsninger som indeholder det virksomme stof opløst i et til parenteralt indgift egnet opløsningsmiddel. Som opløsningsmiddel kommer destilleret vand eller fysiologisk kogsaltopløsning på tale såvel som lavtkogende alifatiske alkoholer eller glykolæter. ‘ Det virksomme stof kan også med fordel fremstilles i lyofiliseret form, i tørampuller til injektionspræparater, hvorved det nødvendige sterile opløsningsmiddel leveres ved samtidige særskilte ampuller, og det virksomme stof umiddelbart før indgiften opløses i et sådant opløsningsmiddel. De pågældende opløsninger eller opløsningsmidler kan indeholde forskellige sædvanlige tilsætningsstoffer som fx konserveringsmidler såsom benzylalkohol eller p-oxybenzoesyreestre, antioxydanter såsom askorbinsyre eller tokoferol, laktose, pufferstoffer og/eller yderligere farmakologiske virksomme stoffer såsom lokalanæstetiske midler. Opløsninger eller opløsningsmidlerne kan steriliseres fx ved filtrering.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen skal i det følgende belyses nærmere ved nogle udførelseseksempler. De i eksemplerne givne optiske drejninger måltes i et Opton-Polarimeter; de protonmagnetiske kerneresonansspektre blev optaget ved hjælp af Varian EM 360 spektrometer.

9 142815

Eksem^el^l 4-Desacetoxyvincristin 12 g (0r01.59 mol) 4-desacetoxyvinblastin opløses i 2640 ml acetone og derefter sættes der til opløsningen 600 ml fra kromsyre frisk afdestilleret iseddikesyre. Blandingen afkøles til -55°C og der tilsættes under omrøring en til -55°C til -60°C afkølet blanding af 5,94 g (0,135 mol) kromsyre og 2000 ml eddike-syreanhydrid. Efter reaktionens afslutning indstilles reaktionsblandingen pH på 6 ved hjælp af en koncentreret ammoniumhydroxyd-opløsning afkølet^-^50 til -40°C. Derved drages der under yderligere afkøling omsorg for at reaktionsblandingens temperatur ikke overstiger 50°C. Derefter tilsættes 9 liter destilleret vand og den således fortyndede opløsning gøres alkalisk til pH 8,5 med 25% ammoniumhydroxyd. Reaktionsblandingen ekstraheres ved 4 x 1500 ml diklormetan, de organiske faser forenes og til fjernelse af det som biprodukt dannede ammoniumacetat vaskes der med 3 x 1Q00 ml destilleret vand. Den fraskilte organiske fase tørres over vandfrit natriumsulfat og filtreres og filtratet inddampes til tørhed under nedsat tryk. Remanensen, der består af råt 4-desacetoxy-vin-cristin og N-desmetyl-4-desacetoxyvinblastin , opløses i en blanding af 60 ml koncentret myresyre og 10 ml eddikeanhydrid, opløsningen udhældes i 300 ml vand med en temperatur på 0-5°C og under omrøring indstilles pH på 9 ved hjælp af en koncentreret ammoniumhydroxydopløsning med en temperatur på 0-5°C. Den således opnåede alkaliske opløsning ekstraheres med 3 x 100 ml diklormetan, de organiske faser forenes og tørres og inddampes under nedsat tryk til tørhed. Som remanens vindes der 9,8 råt 4-desacetoxyvincristin.

Dette råprodukt opløses i 60 ml benzen og anbringes på en kromatografisøjle med en diameter på 45 mm og indeholdende 500 g aluminiumoxyd (aktiviet III) og benzen. Elueringen påbegyndes med 1200 ml benzen, fortsættes med 5000 ml 2:1 blanding af benzen og kloroform og derpå med 3000 ml af 1:1 blanding af benzen og kloroform og den afsluttes med 800 ml kloroform. Der opsamles fraktioner på 400 ml. Hovedmængden af det ønskede produkt forefindes i fraktionerne 15-20, disse forenes og inddampes under nedsat tryk til tørhed. På denne måde vindes der 6,5 g 4-desacetoxyvincristin (fraktion I).

U2815 10

Af fraktionerne nr. 11 til 14 og 21 til 26 kan der vindes yderligere 4-desacetoxy-vincristin ved at man forener disse fraktioner, inddamper dem under nedsat tryk til tørhed opløser den vundne remanens (1,75 g) i 15 ml benzen og anbringer opløsningen på en kromatografisøjle indeholdende 90 g aluminiumoxyd (aktivitet III) o^ benzen. Der elueres med 1200 ml af 2:1 blanding af benzen og kloroform og eluatet inddampes under nedsat tryk. På denne måde vindes der 1,05 g 4-desacetoxyvineristin (fraktion II).

De på den beskrevne måde vundne fraktioner I og II forenes, opløses i 60 ml 3:2 blanding af metanol og vand og henstår i 16 timer ved 5°C til krystallisation. De vundne krystaller frafiltreres, vaskes med 10 ml af en 3:2 blanding af metanol og vand med en temperatur på 5°C og tørres i vakuum. Der vindes 7,0 4-desacetoxyvincristin med smeltepunkt 205-209°C, [a]^ = + 105,7° (c = 1 i kloroform).

Infrarød spektrum; lignende som for 4-desacetoxy-vinblastin, der findes dog ved v= 1672 cm ^ det for N-formylgruppen karakteristiske absorptionsbånd.

Massespektrum: molekyl-ionspidser ved m/e = 766. Massetallet svarer til bruttoformlen C44H54N3°8· PMR-spektrum: i sammenligning med vinblastin fastslås at de i spektrene for vineristin og vinblastin for 4-acetoxygrup-pen karakteristiske spidser ved δ = 2,09 ppm mangler i spektret for 4-desacetoxyvincristin. De karakteristiske topværdier: δ = 3,64 ppm, metoxykarbonyl protoner 3,81 ppm, aromatiske -OCH^ protoner 3,85 ppm, metoxykarbonyl protoner 8,30 ppm, N-formyl proton

Eksempel_2 4-desacetoxyvincristinsulfat 7,0 g 4-desacetoxyvincristin (fremstilles som angivet i eksempel 1) opløstes i 20 ml diklormetan, og derefter inddampedes opløsningen under nedsat tryk til tørhed. Den tørre remanens opløstes i 30 ml vandfri ætanol og opløsningens pH indstilledes med vandfri ætanol indeholdende 1% svovlsyre på 4. Sulfatsaltet 11 142815 af 4-desacetoxyvincristin begynder straks at udkrystallisere.

Den krystalliserende opløsning henstår ved stuetemperatur og derefter frafiltreres krystallerne, vaskes med 30 ml vandfri ætanol og tørres. Der vindes 7,1 g 6-desacetoxyvincristin-monosulfat (63,7%). [a]^ = + 58,3° (c = 1 i vand); [a]^ =+42,0° (c = 1 i metanol).

Eksemgel_3 4-Desacetoxyvincristin 0,50 g (0,655 mmol) 4-desacetoxvvinblastinsulfat opløses i 15 ml destilleret vand. Opløsningens pH-værdi indstilles med ammoniakvand på 8,5 til 9,0 og den frigjorte 4-desacetoxyvinblastinbase ekstraheres med 3 x 10 ml kloroform. De forenede kloroformekstrakter tørres over vandfrit natriumsulfat og filtreres og filtratet inddampes til tørhed under nedsat tryk. Den som remanens vundne 4-desacetoxyvinblastinbase (0,4 g) opløses i 30 ml 98% myresyre, opløsningen omrøres ved stuetemperatur, luftrummet over opløsningen gennemskylles med oxygen og til opløsningen sættes 0,5 g platinsod. Under oxydationen, der varer 18-20 timer, opretholdes oxygenatmosfæren over opløsningen ved tilførsel af oxygen, og reaktionens fremadskriden følges ved tyndlagskromatografi. Efter reaktionens afslutningen fjernes katalysa-tøren ved filtrering, filtratet fortyndes med den femdobbelte mængde destilleret vand og afkøles til 5°C, pH-værdien indstilles med koncentreret ammoniakvand på 8,5 til 9,0 og den derved vundne basiske opløsning ekstraheres med tre gange 10 ml kloroform. De forenede kloroformekstrakter tørres over vandfrit natriumsulfat og filtreres og filtratet inddampes under nedsat tryk til tørhed.

Som remanens vindes 0,38 g råt 4-desacetoxyvincristin. Eventuelt kan produktet omkrystalliseres på følgende måde: 0,38 g råt 4-desacetoxyvincristin opløses i 3 ml 3:2 blanding af metanol og vand og opløsningen henstår i 16 timer ved 5°C. De vundne krystaller frafiltreres, vaskes og tørres.Der vindes på denne måde 0,3 g renset 4-desacetoxyvincristin (75% af det teoretiske udbytte, beregnet ud fra mængden af 4-desacetoxyvinblastinbase) ;produktets fysiske konstanter er de samme som i eksempel 1.

12 142815

Eksempel 4 4-Desacetoxyvincrlstin

Pra 50 mg 4-desacetoxyvinblastinsulfat frigøres basen på den måde der er beskrevet i eksempel 3, og den isoleres ved ekstraktion med kloroform og inddampning. Den vundne 4-desacetoxy-vinblastinbase opløses i 3 ml 98% myresyre og til opløsningen sættes der en suspension af 200 mg 5% palladium på aktive kul i 2 ml 98-100% myresyre. Beholderen med suspensionen efterskylles med 2 x 0,5 ml myresyre for kvantitativt at overføre katalysatoren til reaktionsbeholderen. Fra luftrummet over opløsningen udskiftes luften med oxygen og reaktionsblandingen omrøres i 18-20 timer ved stuetemperatur under stadig oxygenatmosfære. Reaktionens freroadskriden følges ved tyndlagskromatografi. Derefter oparbejdes reaktionsblandingen på den i eksempel 3 beskrevne måde. Der vindes 25 mg 4-desacetoxyvincristin (62% regnet ud fra den anvendte mængde 4-desacetoxyvinblastinbase).

Eksempel_5 4-Desacetoxyvincristin

Der arbejdes som beskrevet i eksempel 4 med den forskel at 4-desacetoxyvinblastinbasen og katalysatoren i stedet for myresyre opløses henholdsvis suspenderes i en 6:1 blanding af benzen og myresyre. Der vindes 20 mg 4-desacetoxyvincristin (50% regnet på den anvendte mængde 4-desacetoxyvinblastinbase).

Claims (1)

13 142815 Analogifremgangsmåde til fremstilling af 4-desacetoxy-vincristin med formlen \n/X^oh N / H / / / / /X^X - / χ I rVrV„ 2 5 CH3° 0^| H T C00CH, ir eller syreadditionssalte deraf, kendetegnet ved at 4-desacetoxyvinblastin med formlen XX—X x^xX ,11 ,P02CH31 'εΛ N / 2 / / / / /kJ I Jx 2H/ C2H5 CH e^; H3C C00CH3