DK142057B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 15alfa,16alfa-methylen-1,4-pregnadien-3,20-dionderivater - Google Patents

Description

OD FREMLÆGGELSESSKRIFT 142057

Cw)

\RaJ

DANMARK (i”,nt c|1 c ?2 4 33/Ss (21) Ansøgning nr. 5037/75 (22) Indleveret den 10. nov. 1975 B||gl (23) Løbedag 10,'nOV. 1975 v/ (44) Ansøgningen fremlagt og o o fremlæggelsesskriftet offentliggjort den l8· aug. i960

DIREKTORATET FOR

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET <»» Prioritet begæret fra den

11. nov. 1974, 2453823, DE

(2D SCHERING AKTIENGESELLSCHAFT, Berlin und Bergkamen, Muellerstrasse 1?0-T78, 1 Berlin 65,.DE.

(72) Opfinder: Rudolf Wiechert, Petzowerstrassé 8a, 1 Berlin 39a DB: KLswb Kieslich, Strasse zum Loewen 4, 1 Berlin 39* DE: Henning Koch, Marien* burger Allee 47, 1 Berlin 19, DE.

(74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Firmaet Chas. Hude. _________________ (54) Analogifremgangsmåde til fremstilling af 15alfa,l6alfa-methylen-1,4-pregnadien-3,20-dionderivater.

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 15a,16a-methylen-l,4-pr|gnadien-3,20-dionderivater med den almene formel I |CH2R

HO C=e° 1 ch7 i^jj—m 2 142057 1 2 hvori R betegner et hydrogenatom eller en hydroxygruppe, og R betegner en hydroxygruppe eller en alkanoyloxygruppe med 1-6 carbon-atomer.

Virkningsbegyndelsen og virkningsvarigheden af de hidtil ukendte me= thylensteroider samt deres opløselighed i fysiologisk acceptable opløsningsmidler er, ligesom ved de kendte kortikoider, specielt af-hsngig· af, om og i givet fald med hvilken syre en i 21-stillingen placeret hydroxygruppe er forestret.

Som egnede alkanoyloxygrupper skal f.eks. nævnes: formyloxy-, acetoxy-, propionyloxy-, butyryloxy-, pentanoyloxy-, hexanoyloxy-, dimethylacetoxy-, trimethylacetoxy-, diethylacetoxy- og tert.-bu= tylacetoxygruppen.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af de heri omhandlede hidtil ukendte methylensteroider er kendetegnet ved,

at man fermenterer en forbindelse med den almene formel II

CH^R2 I 2 c=° Γ kCH2 - (II) 1 2 hvori R og R har samme betydning som i formel I, med en kultur af en til 11-hydroxylering egnet mikroorganisme og yderligere dehydrerer i 1,2-stiIlingen, samt i givet fald hydrolyserer en tilstedeværende estergruppe eller forestrer en tilstedeværende 21-hydroxygruppe.

Til gennemførelsen af fremgangsmåden anvendes den sædvanlige fermentation med Ιΐβ-hydroxylerende mikroorganismer. Til Ιΐβ-hydroxy-leringen kan f.eks. anvendes svampestammer af slægterne Curvularia (som f.eks. Curvularia lunata), Cunninghamella (f.eks. Cunning-hamella bainieri, Cunninghamella elegans, Cunninghamella echinolata og Cunninghamelle blackesleana), Absidia (f.eks. Absidia orchidis 3 142057 og Absidia coerula) , Helmintosporium, Rhizoctonia (f.eks. Rhizoc= — tonia solani), Verticillium (f.eks. Verticillium theobromae), Stachylidium (f.eks. Stachylidium bicolor), Pellicularia (f.eks. Pellicularia filamentosa) eller Colletotrichura (f.eks. Colleto= trichum pisi). Fermentationen med disse mikroorganismer gennem-føres under sædvanlige betingelser. Ved denne omsætning afspaltes for det meste en i 21-stillingen placeret acylgruppe.

Den efterfølgende dehydrering af i 1,2-stillingen mættede steroider med den almene formel I kan såvel gennemføres ved hjælp af 4 mikrobiologiske metoder som ved hjælp af rent kemiske metoder. Δ -steroiderne kan f.eks. under de saadvanlige betingelser dehydreres i 1,2-stillingen med bakteriekulturer af slægterne Bacillus (f.eks. Bacillus lentus eller Bacillus spaericus) eller Arthrobacter (f.eks. Arthrobacter simplex). På den anden side er det imidlertid også muligt at gennemføre Δ^-dehydreringen ved, at man i inaktive opløs- 4 ningsmidler opvarmer Δ -steroiderne med de til denne reaktion sædvanlige oxidationsmidler som f.eks. selendioxid eller 2,3-dichlor- 5,6-dicyanbenzoquinon.

Den eventuelle efterfølgende hydrolyse af esterne sker ved hjælp af, i og for sig kendte metoder.

Eksempelvis skal nævnes hydrolyse af esterne i vand eller vandige alkoholer i nærværelse af sure katalysatorer som saltsyre, svovlsyre, p-toluensulfonsyre eller af basiske katalysatorer som kaliumhydro= gencarbonat, kaliumcarbonat, natriumhydroxid eller kaliumhydroxid.

En eventuelt efterfølgende forestring af frie 21-hydroxylgrupper sker ligeledes ved hjælp af i og for sig kendte metoder. Hydroxysteroiderne kan således f.eks. forestres med acylchlorider eller acylanhydri-der i nærværelse af syrer som f.eks. hydrogenchlorid, p-toluensul=

• V

fonsyre, trifluoreddikesyre, eller i nærværelse af baser som kalium= carbonat, pyridin, kollidin eller p-dimethylaminopyridin.

På den anden side er det også muligt at forestre hydroxyforbindel-serne med carboxylsyrer i nærværelse af trifluoreddikesyreanhydrid.

, 142057

De hidtil ukendte kor tiko ider med den almene formel I er farmakologisk virksomme stoffer, som specielt udmærker sig ved, at de ved topisk anvendelse besidder en udpræget antiinflammatorisk virkning.

Disse forbindelser udmærker sig desuden ofte ved en hurtig virkningsbegyndelse, en høj virkningsintensitet og en lang virkningsvarighed, de har en god resorberbarhed og i galeniske præparater en relativt god stabilitet.

De hidtil ukendte forbindelser egner sig i kombination med de i den galeniske farmaci sædvanlige bærere til lokal behandling af kontakt-dermatitis, eksemer af forskellige arter, neurodermatoser, erythro-dermi, forbrændinger, Pruritis vulvae et ani, Rosacea, Erythematodes cutaneus, psoriasis, lichen ruber pianus et verrucosus og lignende hudsygdomme.

Fremstillingen af lægemiddelspecialiteterne sker på sædvanlig måde, ved at de virksomme stoffer med egnede tilsætninger overføres i de ønskede applikationsformer som f.eks. opløsninger, lotioner, salver, creme eller plastre. I de således fremstillede lægemidler er koncentrationen af virksomt stof afhængig af applikationsformen. Ted lotioner og salver anvendes fortrinsvis en koncentration af virksomt stof på 0,001-2$.

Desuden er de hidtil ukendte forbindelser eventuelt i kombination med de sædvanlige bærestoffer og hjælpestoffer også velegnede til fremstillingen af inhalationsmidler.

Den lokale antiinflammatoriske virkning af kortikoider kan bestemmes ved hjælp af vasokonstriktionstesten.

På ryggen af frivillige forsøgspersoner påvirkes Stratum cornum med en 2 cm bred tesafilm ved hjælp af 20 gange på samme sted anbragte stykker, og således frembringes en udpræget hyperæmi.

2 På afmærkede 4 cm store felter inden for det behandlede område, påføres 50 mg salvepræparat. Salvegrundlaget uden virksomt stof tjener som blindværdi.

5 142057

Farveværdien for den ubehandlede hud ansættes til 100, og for den påvirkedehud til 0. Tilsvarende vurderes hudfarveværdien for den i vasokonstriktion tilstedeværende hud til mellem 0 og 100.

I den efterfølgende tabel er anført middelværdier, som stammer fra undersøgelser af forskellige forsøgspersoner og forskellige rygområder.

6 142057 h η

(1) (D

+> B

IH -H

(U 4> o\° o\° c'P et? o oo m en ri co <y> r- r- in 0 ♦H +> Æ Ή

H

4-1

M

G H O (U Λ B

O -H

[Q +J o\° o\? o\0 o’P

ri en o m n > co m io

G

O

•H

4-1

ri o\° o\° o1? o'P

HH H

H 44 O O

<D G Η O H O

J3 O) - - - - ri υ o o o o

Eh G

O

«

I I

ril co. i

lO O (D O

H IN H <N

^ ^ ·>* ** ri en eden in I m l

HG H G

10) Id)

>rH >1H

X Ό X Ti 0 ni O ri

H ri HG

ri Cn id Cn >i 0) >1 0)

XI H ÆH

•H Hi -H CL|

Hl Hl 44 'tf 44 -=r 1 - I -

HH r—I (—I

CN I CM I

- G 'G

ri 0) ri Q)

Γ- i—I Γ— H

Η ί>) Η i>i

44 -ÆG -ÆG

O 0144 O CCL 44 O

44 1—] 0) *r4 i—I 01 H

03 H g 'd H gd 7 142057

Betændelseshæmmende virkning ved lokal applikation på rotteøre:

Stoffet, der skal afprøves, opløses i et pirringsmiddel bestående af 4 dele pyridin, 1 del destilleret vand, 5 dele ether og 10 dele af en 4%'ig etherisk crotonolieopløsning. Med denne testopløsning gennemvædes filtstrimler, som på indersiden er fastgjort til en ob-jektbærepincet, og strimlerne presses under et let tryk i 15 sekunder på højre øre af hanrotter med en vægt på 100 til 160 g. Venstre øre forbliver ubehandlet og tjener til sammenligning. 3 timer efter applikationen aflives dyrene, og af deres ører udstanses 9 mm store skiver. Vægtforskellen mellem skiven fra højre og fra venstre øre er et mål for det dannede ødem.

I dette forsøg udviste 1,3 mg/kg llfi,17a,21-trihydroxy-15a,16a-methy» len-l,4-pregnadien-3,20-dion og 3,2 mg/kg 110,17a,21-trihydroxy-153, 16f3-methylen-l,4-pregnadien-3,20-di0n en 50%'s hæmning af ødemdannelsen.

De farmakologiske sammenligningsforsøg viser, at forbindelserne ifølge opfindelsen ved topisk anvendelse viser en væsentlig stærkere antiinflammatorisk virkning end den fra den danske patentansøgning nr. 6425/70 kendte forbindelse ll&,17a,21-trihydroxy-150, Ιββ-methylen-l,4-pregnadien-3,20-dion.

De efterfølgende eksempler tjener til belysning af fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

Eksempel l a) 11,0 g 3P-acetoxy-15a,16a»methylen-5-p3:egnen-17,20^-^01 opløses i 230 ml dimethylsulfoxid, afkøles til 15°0, tilsættes 30,8 ml tri= ethylamin og tildryppes i løbet af 30 minutter en opløening af 22 g pyridin-svovl(Vl)-oxid-kompleks i 100 ml dimethylsulfoxid. Der ef-terrøres i 1 time ved stuetemperatur, røres derpå i svagt eddikesurt isvand, og det udfældede bundfald filtreres fra, vaskes godt og optages i methylenchlorid. Efter tørring og inddampning omkrystalliseres resten fra eddikeester, og således fås 7,5 g 17-hydrqxy-3p-acetoxy-15a,l6a-methylen-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 245-247°C (dekomponering).

8 142057 ft) 10,0 g IT-kydroay^P-aceto^-^ajlSa-methylen^-pregnen-^O-on opløses delvis i 350 ml eddikesyre og 100 ml chloroform, 0,1 ml hydro-genbromid i eddikesyre (37^’ig) tilsættes, og i løbet af 1 1/2 time tildryppes en opløsning af 2,85 ml brom i 100 ml eddikesyre. Derpå efterrøres i 1 time, fortyndes reaktionsopløsningen med methylenchlo-rid, vaskes med vand, natriumhydrogencarbonatopløsning og vand og tørres. Efter inddampning fås 17,9 g rå 5,6β,21-tribrom-17-hydroxy-3 β-ac e toxy-15α,16 α-methylen-5 a-pregnan-20-on.

o) 17,9 g rå 5,6β,21-ΐτ^^ιη-Γ7-1^<1το33Γ-3β^οβΐο:^-15α,ΐ6α-]ΐιβΐ1^Γΐθη-5a-pregnan-20-on opvarmes i 400 ml acetone med 9,1 g natrium;]odid og 40 g kaliumacetat i 4 timer under omrøring og tilbagesvaling. Efter fældning med isvand optages det affiltrerede bundfald i methylenehlo-rid, tørres og inddampes. Resten kromatograferes på silicagel, og efter omkrystallisation fra diisopropylether/acetone fås 4,75 g 17-hydroxy-^, 21-diacetoxy-15oc, 16a-methylen-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 197,5-199°C.

d) En glasfermenteringsbeholder, der kan rumme 20 liter, forsynes med 15 liter af en næringsopløsning af 0,3% gærekstrakt, 0,5% majsstøbevæske. og 0,2% stivelsessukker , steriliseres ved 1/2 times opvarmning til 120°C og podes efter afkøling med 250 ml af en 2-dage gammel rystekolbekultur af Elavobacterium dehydrogenans ATCC 13 930. (Rystékolbekulturen fremstilles ved inokulering af 250 ml af det samme medium med afskylningen af en 7 dage gammel skråagarkultur) .

Efter 24 timers formering ved 30°C under omrøring (220 omdrejninger pr. minut) og luftbehandling (15 liter pr. minut) udtages 900 ml af den fremstillede kultur under sterile betingelser og overføres i en lige så stor fermenteringsbeholder med 14 liter af det samme medium. Efter 6 timers forløb reduceres kultursuppen til 13 liter, behandles med en sterilf il trer et opløsning af 6,5 g 17-1^άτο:χ3Γ-3β, 21-diacetoxy-15a,l6a-methylen-5-pregnen-20-on i 100 ml dimethylformamid og fermenteres under de samme betingelser yderligere i 13 timer.

Efter endt fermentering ekstraheres kultursuppen tre gange med 6 liter methylisobutylketon hver gang. De forenede ekstrakter inddampes til tørhed i vakuum. Resten vaskes med 100 ml varm hexan fri for 9 142057 anvendt antiskummemiddel Silicon SH, og herved fås 4,7 g råprodukt, som med ringe carbontilsætning omkrystalliseres fra eddikeester. Der fås 3,13 g 17,21-dihydroxy-15a,l6a-methylen-4-pregnen-3,20-dion (udbytte 68$ af det teoretiske) med smeltepunkt 225-226°C.

En 20-liter glasfermenteringsbeholder forsynes med 14 liter af en næringsopløsning af 3$ glucose, 1$ majsstøbevæske, 0,2$ NaJO^, 0,1$ KH2P04, 0,2$ K2HP04, 0,05$ MgS04, 0,002$ FeS04 og 0,05$ KOI, steriliseres ved 1/2 times opvarmning til 120°C og podes efter afkøling med 900 ml af en 3 dage gammel rystekolbekultur af Pellicularia·filamen-tosa f. sp. sasakii, IPO 6675. (Rystekolbekulturen fremstilles ved inokulering af 900 ml af det samme medium med en af skylning af en 7 dage gammel skråagarkultur).

Efter 12 timers formering ved 29°C under de foran anførte betingelser tilsættes en sterilf iltreret opløsning af 17,21-dihydro3y-15cc,16a-methylen-4-pregnen-3,20-dion i 100 ml dimethylformamid. Efter yderligere 36 timers fermentation affiltreres kultursuppen over gaze.

Mycelresten vaskes flere gange med vand. Filtrat og vaskevand eks-traheres med methylisobutylketon og oparbejdes som beskrevet i eksempel 2 d). Råproduktet kromatograferes på kiselgel med et hexan/ace= tone-gradientsystem.

Efter omkrystallisation fra eddikeester fås 1,2 g lip,17,21-trihy= droxy-15cc,l6oc-methylen-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 209-210°C.

Af de polære fraktioner fås efter omkrystallisation fra diisopropyl= ether/acetone 22 mg 11a,17,21-trihydroxy-15a,l6a-methylen-4-pregnen- 3,20-dion med smeltepunkt 214-215°C.

En 2-liter Erlenmeyer-kolbe forsynes med 500 ml af en næringsopløsning bestående af 1,5$ pepton, 1,2$ majsstøbevæske og 0,2$ MgS04, steriliseres og podes med afskylningen af en 3 dage gammel skråagarkultur af Bacillus lentus ATCC 13 805. Efter 48 timers rystning på 142057 10 et rotationsrysteapparat (165 omdrejninger pr. minut) ved 30°C udtages 50 ml af kulturen under sterile betingelser, overføres i en 2 liter Erlenmeyer-kolbe med 500 ml af en steril næringsopløsning bestående af 0,1% gærekstrakt, 0,5% majsstøbevæske og 0,05% stivelsessukker og rystes i 24 timer. Ti 2 liter Erlenmeyer-kolber hver forsynet med 500 ml af det samme medium podes hver med 50 ml af den opnåede forkultur, dækkes hver med en opløsning af 100 mg 12β,17 ,21-trihydroxy-15a,16a-methylen-4-pregnen-3,20-dion i 4 ml dimethylform-amid efter 6 timers forløb og udrystes i 24 timer ved 30°C og 165 omdrejninger pr. minut. Kultursuppeportionerne forenes og ekstra-heres med methylisobutylketon. Ekstrakterne giver efter inddampning 1,2 g råprodukt. Efter omkrystallisation fra diisopropylether/ace-tone fås .113,17,21-trihydroxy-15a ,16a -methylen-1,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 205-207°C.

Eksempel 2 a) 11,35 g 17-hydroxy-33,21-diacetoxy-15a,16a-methylen-5-pregnen-20-on behandles i 170 ml methanol og 170 ml methylenchlorid ved isafkøling med en opløsning af 568 mg kaliumhydroxid i 10 ml methanol og efterrøres i 1 1/2 time ved istemperatur. Derpå neutraliseres med eddikesyre, og opløsningen inddampes kraftigt i vakuum og fældes i isvand. Det udfældede bundfald suges fra, vaskes og tørres. Efter kromatografi på silicagel fås efter diisopropyletherrivning 7,3 g 17,21-dihydroxy-33-acetoxy-15oc, 16oc-methylen-5-pregnen-20-on. En fra eddikeester omkrystalliseret prøve smelter ved 228-233,5°C (dekomponer ing).

b) 7,0 g 17,21-dihydroxy-33-acetoxy-15a,16a-methylen-5-pregnen-20-on omrøres i 280 ml eddikesyre med 700 mg krystalvandholdigt zinkacetat i 2 timer ved 120°C. Det inddampes derpå kraftigt i vakuum, resten optages i methylenchlorid og vaskes neutral med vand. Efter inddampning fås 7,0 g rå 20-hydroxy-3P-acetoxy-15a,16a-methylen-5,17(20)-pregnadien-21-al.

c) 7,0 g 20-hydroxy-33-acetoxy-15a,l6a-methylen-5,17(20)-pregnadien-21-al henstår i 28 ml pyridin med 14 ml acetanhydrid i 1 time ved stuetemperatur. Det røres derpå i isvand, det udfældede bundfald filtreres fra og optages i ether. Etherfasen vaskes med fortyndet salt- 11 142057 syre, vand, natriumhydrogenearbonatopløsning og vand. Efter inddamp-ning kromatograferes resten på silicagel, og således fås 6,5 g 3β,20-diacetoxy-15a,l6a-methylen-5,17(20)-pregnadien-21-al.

En fra diisopropylether omkrystalliseret prøve smelter ved 147,5-151°C.

d) 6,5 g 36,20-diacetoxy-15a,16a-methylen-5,17(20)-pregnadien-21-al behandles 1 65 ml tetrahydrofuran med 6,5 g lithium-tri-tert.-butoxy= alanat og omrøres i 30 minutter ved stuetemperatur. Det røres derpå i isvand, symes med fortyndet svovlsyre og ekstrahere s med methylen= chlorid. Efter tørring og inddampning fås 6,5 g rå 21-hydroxy-36,20-diace toxy-15oc, l6oc-me thylen-5,17 (20 )-pregnadien.

e) 6,5 g 21-hydroxy-3P,20-diacetoxy-15a,l6a-methylen-5,17(20)-pregna= dien opvarmes i 260 ml methanol med 65 ml 2B" saltsyre i 31/2 time under tilbagesvaling. Derpå fældes i isvand, og bundfaldet filtreres fra, optages i methylenchlorid, vaskes med vand og tørres. Den efter inddampning opnåede rest kromatograferes på silicagel, og ved pmkry-stallisation heraf fra eddikeester fås 2,6 g 3P,21-dihydroxy-15a,16cc-methylen-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 174,5-179,5°C.

f) 2,0 g 3β,21-dihydroxy-15a,16a-methylen-5-pregnen-20-on opløses i 20 ml dimethylformamid og 2 ml acetanhydrid, behandles med 1,28 g blyacetat og omrøres i 1 1/2 time ved stuetemperatur. Det røres derpå i isvand, det udfældede bundfald suges fra, vaskes og tørres. Efter omkrystallisation fra eddikeester fås 1,8 g 3p-hydroxy-21-acetoxy-15oc,16a-methylen-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 168,5-169,5°C.

g) 500 mg 36-hydroxy-21-acetoxy-15a,l6a-methylen-5-pregnen-20-on behandles i 25 ml toluen og 1 ml cyklohexanon med en opløsning af 100 mg aluminiumisopropylat i 2 ml toluen og opvarmes i 45 minutter under langsom afdestillering. Derpå fortyndes med ether, vaskes med fortyndet svovlsyre og vand. Efter tørring og inddampning kromatograferes på silicagel, og efter omkrystallisation fra diisopropylether fås 275 mg 21-acetoxy-15oc,16a-methylen-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 124-125°C.

Claims (1)

142057 12 En glasfermenteringsbeholder, der kan rumme 20 liter, fyldes med 15 liter af en nærings opløsning af 4,4$ glucose (stive Ise sukker), 1 $ maltekstrakt, 0,3$ MO^, 0,1$ KHgPO^, 0,03$ KOI, 0,05$ MgSO^, 0,002$ EeSO^ og 0,5$ majsstøbevæske, steriliseres ved 1/2 times opvarmning til 120°C og podes efter afkøling med en 3 dage gammel rystekolbekul-tur af Curvularia lunata HERI 2380. (Rystekolbekulturen fremstilles ved inokulering af 250 ml af det samme medium med afskylningen af en 7 dage gammel skråagarkultur). Efter 48 timers formering ved 30°C under omrøring (220 omdrejninger pr. minut) og gennemluftning (15 liter pr. minut) udtages 900 ml af den fremstillede kultur under sterile betingelser og overføres i en lige så stor fermenteringsbeholder med 14 liter af det samme medium. Efter 12 timers forløb tilsættes 3 g 21-acetoxy-15a,l6a-methylen-4-pregnen-3,20-dion, opløst i 100 ml di= methylformamid, og der fermenteres i yderligere 28 timer. Der oparbejdes som beskrevet i eksempel 3 og fås 2,7 g råprodukt, som skilles fra ved søjlekromatografi på kiselgel og giver 11β,21-dihydroxy-15a, 16a-methylen-4-pregnen-3,20-dion, smeltepunkt 182-184,5°C (af acetone-hexan). I to 2-liter Erlenmeyer-kolber bliver 200 mg lip,21-dihydroxy-15a,l6a-methylen-4-pregnen-3,20-dion under de i eksempel 3 beskrevne betingelser dehydreret med Bacillus lentus ATCC 13 805 til 11β,21-dihydroxy-15a,16 oc-methylen-1,4-pregnadien-3,20-dion, smeltepunkt 203-204°C under dekomponering (af acetone-hexan), Eksempel 3 . 180 mg U3-21-dihydroxy-15a,16a-methylen-l,4-pregnadien-3,20-dion omsættes med acetanhydrid i pyridin og oparbejdes. Således fås 145 mg 118-hydroxy-21-acetoxy-15a,16a-methylen-l,4-pregnadien-3,20-dion, smeltepunkt 187-189°C. Patentkrav. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 15a,16a-methylen-l,4-pregna= dien-3,20-dionderivater med den almene formel I