DE69626123T2

DE69626123T2 - Substituierte benzokondensierte heterocyclen als neurokinin antagonisten

Info

Publication number: DE69626123T2
Application number: DE69626123T
Authority: DE
Inventors: T. Lupo; D. Mccormick
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 1995-06-06
Filing date: 1996-06-04
Publication date: 2003-10-09
Anticipated expiration: 2016-06-05
Also published as: EP0848706B1; WO1996039383A1; DE69626123D1; ATE232201T1; EP0848706A1; JPH11506736A; AU5951196A; CA2223239A1; ES2191755T3

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Die vorliegende Erfindung betrifft eine Gattung von substituierten benzolannelierten Heterozyklen, die als Antagonisten von Tachykinin-Rezeptoren, insbesondere als Antagonisten der Neuropeptide Neurokinin-1-Rezeptor(NK&sub1;) und/oder Neurokinin- 2-Rezeptor(NK&sub2;) und/oder Neurokinin-3-Rezeptor(NK&sub3;), brauchbar sind.
Neurokinin-Rezeptoren werden im Nervensystem, im Kreislaufsystem und in periphären Geweben von Säugetieren gefunden und sind daher in eine Vielzahl von biologischen Prozessen eingebunden. Neurokinin-Rezeptor-Antagonisten werden daher als brauchbar bei der Behandlung von oder Vorbeugung vor verschiedenen Säugetier-Krankheitszuständen, z. B. Asthma, Husten, Bronchospasmen, Entzündungskrankheiten wie Arthritis, Zuständen des zentralen Nervensystems wie Migräne und Epilepsie, Nozizeption und von verschiedenen gastrointestinalen Defekten wie Morbus Crohn angesehen.
Insbesondere wurde über NK&sub1;-Rezeptoren berichtet, dass sie bei mikrovaskulärer Leckage und Mucussekretion eine Rolle spielen, und NK&sub2;-Rezeptoren wurden mit der Glattmuskelkontraktion in Verbindung gebracht, was NK&sub1;- und NK&sub2;-Rezeptor-Antagonisten insbesondere bei der Behandlung und Prävention von Asthma brauchbar macht.
Einige NK&sub1;- und NK&sub2;-Rezeptor-Antagonisten wurden bereits offenbart: Arylalkylamine wurden in US-Patent 5,350,852, ausgegeben am 27. September 1994, offenbart, und Spiro-substituierte Azazyklen wurden in WO 94/29309, veröffentlicht am 22. Dezember 1994, offenbart.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Erfindungsgemäße Verbindungen werden repräsentiert durch die Formel I
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon, bei der:
A¹, A², A³ und A&sup4; zusammen mit dem Phenylring, an den sie gebunden sind,
bilden;
E R³-Phenyl ist;
W R&sup4;-Cycloalkyl, R&sup4;-Aryl oder R&sup4;-Heteroaryl ist;
R¹, R², R³ und R&sup4; unabhängig 1 bis 3 Substituenten unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus H, Halogen, C&sub1;- bis C&sub6;- Alkyl, -CF&sub3;, -OR¹¹, -COR¹¹, -CO&sub2;R¹¹, -CON(R¹¹)(R¹²) und -N(R¹¹)(R¹²) sind;
R&sup5;, R&sup7;, R&sup9;, R¹¹, R¹² und R¹&sup4; unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl und -CF&sub3;;
R&sup6; und R&sup8; jeweils Wasserstoff sind, oder R&sup8; Wasserstoff und R&sup6; -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))n-CO&sub2;R ist;
R¹&sup0; unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl;
R¹³ unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl und R¹&sup5;-Phenyl;
R¹&sup5; Wasserstoff, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkoxy oder Halogen ist;
Q -NR¹&sup7;- ist;
R¹&sup6; und R¹&sup7; unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl und C&sub2;- bis C&sub6;-Alkenyl;
Y¹ -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))m- oder -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))m-G- ist;
G ist
unter der Voraussetzung, dass, wenn m 0 ist, R² H, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl, -CF&sub3;, -COR¹¹, -CO&sub2;R¹¹ oder -CON(R¹¹)(R¹²) ist;
unter der Voraussetzung, dass, wenn p 0 ist, T nicht OH oder -NR¹¹R¹² ist;
unter der Voraussetzung, dass, wenn r 1 ist, T nicht OR¹¹ oder -NR¹¹R¹² ist; oder
unter der Voraussetzung, dass T nicht -OR¹¹, -N- (R¹¹)(R¹²), S(O)eR¹³, -NR¹¹CO&sub2;R¹³, -NR¹¹COR¹², -NR¹¹CON(R¹²)(R¹&sup4;) oder -OC(O)N(R¹¹)(R¹²) ist;
T H, R¹&sup5;-Aryl, R¹&sup5;-Heterocycloalkyl, R¹&sup5;-Heteroaryl, R¹&sup5;-Cycloalalkyl, -OR¹¹, N(R¹¹)(R¹²), -COR¹¹, -CO&sub2;R¹¹, -CON(R¹¹)(R¹²), -S(O)eR¹³, -NR¹¹CO&sub2;R¹³, -NR¹¹COR¹², -NR¹¹CON(R¹²)(R¹&sup4;) oder -OC(O)N(R¹¹)(R¹²) ist;
J -O-, -N(Z²)- oder -N(Z²)C(O)- ist;
Y² -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))m- ist;
Z¹ H ist; Z² H, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl, R¹&sup5;-Phenyl, R¹&sup5;-Benzyl, -CF&sub3; oder -C&sub2;F&sub5;, oder Z¹ und Z² zusammen -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))u- sind, wobei u 1 bis 4 ist, und wobei diese mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 4- bis 8-gliedrigen Ring bilden;
e und n unabhängig 0, 1 oder 2 sind;
m und p unabhängig 0, 1, 2 oder 3 sind; und
r und s unabhängig 1, 2, 3 oder 4 sind;
wobei "Aryl" Phenyl, Naphthyl, Indenyl, Tetrahydronaphthyl, Indanyl, Anthracenyl und Fluorenyl repräsentiert; "Heterocycloalkyl" sich auf 4- bis 6-gliedrige gesättigte Ringe bezieht, die 1 bis 3 Heteroatome unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -O-, -S- und -N(R¹&sup6;)- enthalten, wobei die verbleibenden Ringbestandteile Kohlenstoff sind; und "Heteroaryl" sich auf 5- bis 10-gliedrige einzelne oder benzoannelierte aromatische Ringe bezieht, die 1 bis 4 Heteroatome enthalten, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus -O-, -S- und -N= , unter der Voraussetzung, dass die Ringe nicht benachbarte Sauerstoff- und/oder Schwefelatome enthalten.
Bevorzugte Verbindungen beinhalten solche, in denen Z¹ und Z² zusammen Ethylen oder Propylen sind und die mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden. Y¹ ist bevorzugt -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))m oder -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))m-G, wobei m bevorzugt 0 oder 1 ist. In der Definition von Y² ist m bevorzugt 0 oder 1.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I umfassen Verbindungen, in denen A¹, A², A³ und A&sup4; einen Indolylring aufweisen, R&sup5; und R&sup6; jeweils Wasserstoff sind und Q -NR¹&sup7;- ist, d. h. Verbindungen, die die partielle Struktur
haben.
Ebenfalls bevorzugt sind Verbindungen nach Formel I, bei denen R&sup7; und R&sup8; jeweils Wasserstoff sind und s 2 ist.
Eine weitere Gruppe bevorzugter Verbindungen ist die, in der Y¹ -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))m- ist und J -N(Z²)C(O)- ist.
Diese Erfindung betrifft außerdem die Verwendung einer Verbindung nach Formel I bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Asthma, Husten, Bronchospasmen, Entzündungskrankheiten wie Arthritis, Zuständen des zentralen Nervensystems wie Migräne und Epilepsie, Nozizeption, und verschiedener gastrointestinaler Defekte wie Morbus Crohn.
In einem weiteren Aspekt betrifft die Verbindung eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach Formel I in einem pharmazeutisch akzeptablen Träger enthält. Die Erfindung betrifft außerdem die Verwendung dieser pharmazeutischen Zusammensetzung bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Asthma, Husten, Bronchospasmen, inflammatorischen Krankheiten, wie Arthritis, Migräne, Nozizeption und verschiedener gastointestinaler Defekten wie Morbus Crohn.

DETAILLIERTE BESCHREIBUNG

Wie hierin verwendet meint der Begriff "Alkyl" lineare oder verzweigte Alkylketten. "Nieder-Alkyl" bezieht sich auf Alkylketten von 1 bis 6 Kohlenstoffatomen und entsprechend bezieht sich Nieder-Alkoxy auf Alkoxyketten von 1 bis 6 Kohlenstoffatomen.
"Alkenyl" meint eine lineare oder verzweigte Alkankette von 2 bis 6 Kohlenstoffatomen mit einer Doppelbindung.
"Cycloalkyl" bezieht sich auf cyclische Alkylgruppen von 3 bis 6 Kohlenstoffatomen.
"Aryl" bezieht sich auf Phenyl, Naphthyl, Indenyl, Tetrahydronaphthyl, Indanyl, Anthracenyl oder Fluorenyl.
"Halogen" bezieht sich auf Fluor- Chlor-, Brom- oder Iodatome.
"Heterocycloalkyl" bezieht sich auf 4- bis 6-gliedrige gesättigte Ringe, die 1 bis 3 Heteroatome unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -O-, -S- und -N(R¹&sup6;)- aufweisen, wobei die verbleibenden Ringglieder Kohlenstoff sind. Beispiele für Heterocycloalkylringe sind Tetrahydrofuranyl, Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Morpholinyl, Thiomorpholinyl und Piperazinyl. R&sup4;-Heterocycloalkyl bezieht sich auf solche Gruppen, in denen substituierbare Ringkohlenstoffatome einen R&sup4;-Substituenten haben.
"Heteroaryl" bezieht sich auf 5- bis 10-gliedrige einzelne oder benzoannelierte aromatische Ringe, die 1 bis 4 Heteroatome unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -O-, -S- und -N= aufweisen, unter der Voraussetzung, dass die Ringe nicht benachbarte Sauerstoff und/oder Schwefelatome enthalten. Beispiele für Einringheteroarylgruppen sind Pyridyl, Isoxazolyl, Oxadiazolyl, Furanyl, Pyrrolyl, Thienyl, Imidazolyl, Pyrazolyl, Tetrazolyl, Thiazolyl, Thiadiazolyl, Pyrazinyl, Pyrimidinyl, Pyridazinyl und Triazolyl. Beispiele für benzoannelierte Heteroarylgruppen sind Indolyl, Chinolinyl, Thianaphthenyl und Benzofurazanyl. N-Oxide von Stickstoff enthaltenden Heteroarylgruppen sind ebenfalls eingeschlossen. Alle Positionsisomere sind eingeschlossen, z. B., 1-Pyridyl, 2-Pyridyl, 3-Pyridyl und 4-Pyridyl. R&sup4;-Heteroaryl bezeichnet solche Gruppen, in denen geeignete Ringkohlenstoffatome einen R&sup4;-Substituenten haben.
In den obigen Definitionen, bei denen R&sup5;, R&sup7;, R&sup9;, R¹¹, R¹² und R¹&sup4; als unabhängig ausgewählt aus einer Gruppe von Substituenten angegeben sind, ist gemeint, dass R&sup5;, R&sup7;, R&sup9;, R¹¹, R¹² und R¹&sup4; unabhängig ausgewählt sind, aber auch, dass, wenn eine R&sup5;-, R&sup7;-, R&sup9;-, R¹¹-, R¹²- und R¹&sup4;-Variable mehr als einmal in einem Molekül auftritt, diese Auftritte unabhängig ausgewählt sind. Entsprechend können R¹-, R³-, R&sup4;- und die R²-Variablen unabhängig ausgewählt werden aus einer Gruppe von Substituenten, und wo mehr als eine dieser Variablen vorliegt, werden die Substituenten unabhängig ausgewählt; der Fachmann wird erkennen, dass die Größe und Art des/der Substituent(en) die Anzahl der Substituenten, die vorliegen können, beeinflussen wird.
Erfindungsgemäße Verbindungen können mindestens ein asymmetrisches Kohlenstoffatom haben und daher werden alle Isomere, inklusive der Diastereomere, Enantiomere und Rotationsisomere als Bestandteil der Erfindung angesehen. Die Erfindung beinhaltet D- und L-Tsomere sowohl in reiner Form als auch in Mischung, inklusive racemischer Mischungen. Isomere können unter Verwendung konventioneller Techniken hergestellt werden, entweder durch Umsetzung optisch reiner oder optische angereicherter Startmaterialien oder durch Abtrennung der Isomere einer Verbindung nach Formel I.
Der Fachmann wird erkennen, dass für einige Verbindungen nach Formel I ein Isomer größere pharmakologische Aktivität als andere Isomere zeigen wird.
Erfindungsgemäße Verbindungen haben mindestens eine Aminogruppe, die pharmazeutisch akzeptable Salze mit organischen und anorganischen Säuren bilden kann. Beispiele für zur Salzbildung geeignete Säuren sind Salz-, Schwefel-, Phosphor-, Essig-, Zitronen-, Oxal-, Malon-, Salicyl-, Äpfel-, Fumar-, Bernstein-, Ascorbin-, Malein-, Methansulfon- und andere Mineral- und Carbonsäuren, die dem Fachmann bekannt sind. Das Salz wird durch Inkontaktbringen der freien Basenform mit einer geeigneten Menge der gewünschten Säure hergestellt, um ein Salz zu ergeben. Die freie Basenform kann durch Behandlung des Salzes mit einer geeigneten verdünnten wässrigen Basenlösung, wie verdünntem wässrigem Natriumbicarbonat, regeneriert werden. Die freie Basenform unterscheidet sich von ihrer entsprechenden Salzform in bestimmten physikalischen Eigenschaften, wie der Löslichkeit in polaren Solventien, aber das Salz ist ansonsten für die Zwecke der Erfindung äquivalent zu seiner entsprechenden freien Basenform.
Bestimmte erfindungsgemäße Verbindungen sind sauer (z. B. die Verbindungen, die eine Carboxylgruppe besitzen). Diese Verbindungen bilden pharmazeutisch akzeptable Salze mit anorganischen oder organischen Basen. Beispiele für solche Salze sind die Natrium-, Kalium-, Calcium-, Aluminium-, Gold- und Silbersalze. Ebenfalls enthalten sind Salze, die mit pharmazeutisch akzeptablen Ammen, wie Ammonium, Alkylaminen, Hydroxyalkylaminen, N-Methylglucamin und anderen, gebildet werden.
Verbindungen nach Formel I können unter Verwendung von dem Fachmann bekannten Verfahren hergestellt werden. Es folgen typische Verfahren zur Herstellung verschiedener Verbindungen; der Fachmann wird erkennen, dass andere Verfahren möglich sein können, und dass die Verfahren geeignet modifiziert werden können, um andere Verbindungen, die im Bereich von Formel I liegen, herzustellen.

Verfahren A:

Verbindungen nach Formel I, in denen -Q-(C(R&sup7;)(R&sup8;)s- -N(R¹¹)CH&sub2;CH&sub2;- ist, Z¹ Wasserstoff ist, Y¹ -CH&sub2;- ist, und J -N(CH&sub3;)C(O)- ist, können, wie in dem Reaktionsschema gezeigt, hergestellt werden: Stufe 1
In Stufe 1 wird eine 3-(R³-Phenyl)-2-propensäure (1) mit einem Nieder-Alkylalkohol wie CH&sub3;OH in Gegenwart eines geeigneten sauren Katalysators, wie HCl, im Bereich von 0 bis 100ºC behandelt, um den korrespondierenden Ester zu ergeben. Dieser Ester wird mit einem Nitroalkan wie CH&sub3;NO&sub2; in Gegenwart einer geeigneten Base, wie Benzyltrimethylammoniumhydroxid, in einem Temperaturbereich von 0 bis 100ºC zur Reaktion gebracht, um die gewünschte Verbindung 2 zu ergeben. Stufe 2
In Stufe 2, wird Verbindung 2 mit einem starken Reduktionsmittel, wie LiAlH&sub4; oder BH&sub3;·DMS in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie THF, Ether oder Benzol, bevorzugt THF, in einem Temperaturbereich von 0 bis 80ºC zur Reaktion gebracht. Der resultierende Aminoalkohol wird mit einem Elektrophil, wie einer Verbindung nach Formel R²&sup0;L¹, in der R²&sup0; eine geeignete Hydroxylschutzgruppe wie (R²¹)&sub3;Si- ist, in der R²¹ unabhängig ausgewählt ist aus den Nieder-Alkylgruppen (z. B. Methyl, Ethyl, Isopropyl oder tert. -Butyl), und L¹ eine Abgangsgruppe, wie Cl oder Br, ist, zur Reaktion gebracht. Stufe 3
In Stufe 3, wird Amin 3 nach Standard-Verfahren acyliert, z. B. durch Behandlung mit einem Säurechlorid, WY²COCl, in Gegenwart einer Aminbase in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie CH&sub2;Cl&sub2; oder Toluol, bevorzugt CH&sub2;Cl&sub2;, bei einer Temperatur von -10 bis 50ºC. Geeignete Basen beinhalten (CH&sub3;)&sub3;N, Et&sub3;N und Pyridin, bevorzugt Et&sub3;N. Andere Verknüpfungsmethoden, die dem Fachmann bekannt sind, wie EDC-Kopplung, können ebenfalls verwendet werden. Das resultierende Amid wird mit einer Base, wie NaH oder LDA, in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie THF, Ether, DMSO oder DMF, bevorzugt THF, behandelt. Das resultierende Anion wird mit einem Alkylierungsmittel R¹¹L behandelt, wobei R¹¹ wie oben definiert ist und L eine geeignete Abgangsgruppe Cl, Br, I, Triflat oder Mesylat ist; bevorzugt ist R¹¹L CH&sub3;I. Die Reaktionen werden typischerweise bei 0 bis 50ºC durchgeführt. Stufe 4
In Stufe 4 wird die freie Hydroxylgruppe durch die Behandlung von Verbindung 4 mit einem Fluorreagenz, wie Tetrabutylammoniumfluorid, regeneriert. Die Hydroxylgruppe wird in eine geeignete Abgangsgruppe L, wie oben definiert, bevorzugt Mesylat, umgewandelt. Das korrespondierende Mesylat kann durch Behandlung mit CH&sub3;SO&sub2;Cl in einem geeigneten Lösungsmittel wie CH&sub2;Cl&sub2; in Gegenwart einer Base wie Et&sub3;N erhalten werden. Stufe 5
In Stufe 5 wird Verbindung 5 mit Verbindung 6 in einem inerten Lösungsmittel, wie CH&sub2;Cl&sub2;, THF oder DMF, bevorzugt DMF, bevorzugt mit einer katalytischen Menge von NaI, und bevorzugt bei Temperaturen von 20 bis 80ºC, behandelt. Verfahren A1: Stufe 1
Alternativ zu Prozedur A wird Verbindung 4 mit einem Fluoridreagenz, wie Tetrabutylammoniumfluorid, behandelt, um die freie Hydroxylgruppe zu regenerieren. Die resultierende Verbindung wird durch ein geeignetes Oxidationsverfahren in Aldehyd 30 umgewandelt, z. B. durch das Swern-Verfahren, wie in Tetrahedron, 1978, 34, 1651 beschrieben.

Stufe 2

6 + 30 → 7
In Stufe 2 wird Verbindung 30 mit einem Amin der Formel 6 in einem Alkohol, wie CH&sub3;, CH&sub3;CH&sub2;OH oder bevorzugt CF&sub3;CH&sub2;OH, in Gegenwart eines Dehydratisierungsmittels, wie einem Molekularsieb, und eines Reduktionsmittels, wie NaBH&sub3;CN, oder unter Hydrierungsbedingungen (H&sub2;/Pd/C) zur Reaktion gebracht. Ein geeigneter Temperaturbereich ist 0 bis 60ºC. Verfahren A2: Stufe 1
Als andere Alternative zu Verfahren A wird Verbindung 3 durch Standardverfahren zu dem Formamid umgesetzt, z. B. durch Behandlung mit Ethylformiat, bevorzugt bei einer Temperatur von 30 bis 60ºC. Das resultierende Formamid wird mit einem geeigneten Reduktionsmittel wie BH&sub3;·DMS oder AlH&sub3;, bevorzugt BH&sub3;·DMS behandelt. Der resultierende Aminboran-Komplex und die Silylschutzgruppe werden durch Behandlung mit wässriger Säure, wie Hei, bevorzugt bei einer Temperatur von 50 bis 100ºC hydrolysiert. Stufe 2
In Stufe 2 wird die Aminogruppe in Verbindung 31 geeignet geschützt, wie durch Behandlung mit Di-tert.-butyldicarbonat, um das tert.-Butylcarbamat zu ergeben. Die Hydroxylgruppe wird durch ein geeignetes Oxidationsverfahren zum Aldehyd umgewandelt, z. B. durch das Swern-Verfahren. Stufe 3
In Stufe 3 wird Verbindung 32 mit einem Amin nach Formel. 6 in einer Weise zur Reaktion gebracht, wie in Verfahren A1, Stufe 2 beschrieben. Die freie Methylaminogruppe wird durch Behandlung mit Säure, wie Trifluoressigsäure oder HCl, in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittels, wie CH&sub2;Cl&sub2; oder CH&sub3;OH, regeneriert.

Stufe 4

33 → 7
In Stufe 4 wird Verbindung 33 mittels Standardverfahren acyliert, z. B. durch Behandlung mit einem Säurechlorid, WY&sub2;COCl, in Gegenwart einer Aminbase in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie CH&sub2;Cl&sub2; oder Toluol, bevorzugt CH&sub2;Cl&sub2;, bei einer Temperatur von -10 bis 50ºC. Geeignete Basen beinhalten (CH&sub3;)&sub3;N, Et&sub3;N und Pyridin, bevorzugt Et&sub3;N. Andere Verknüpfungsverfahren, die dem Fachmann bekannt sind, wie die EDC-Kupplung, können ebenfalls verwendet werden.

Verfahren B:

Verbindungen nach Formel 1, in denen -Q-(C(R&sup7;)(R&sup8;))s-N(R¹)CH&sub2;CH&sub2;- ist, Z¹ Wasserstoff ist, Y¹ -C(OH)H- ist, und J -Oist, können, wie in dem folgenden Reaktionsschema gezeigt, hergestellt werden: Stufe 1
In Stufe 1 wird die 3-(R³-Phenyl)-4-pentensäure 8 mit einem Oxidationsmittel, wie Dimethyldioxiran oder m-CPBA, in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie CH&sub2;Cl&sub2; oder Toluol, bevorzugt bei Reaktionstemperaturen von 0 bis 60ºC zur Reaktion gebracht. Ein saurer Katalysator wie Amberlyst-15 oder Ameisensäure wird zugegeben, um das gewünschte Lacton 9 zu ergeben. Stufe 2
In Stufe 2 wird Lacton 10 mit einem Elektrophil L¹-Y²-W, in dem L¹ eine Abgangsgruppe, wie Cl oder Br, ist, zur Reaktion gebracht. Die Reaktion wird in Gegenwart eines Silbersalzes, wie Ag&sub2;O, in einem organischen Lösungsmittel, wie DMF oder THF, am bevorzugtesten DMF, bei einer Temperatur von 0 bis etwa 50ºC durchgeführt. Stufe 3
In Stufe 3 wird Verbindung 10 in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie CH&sub2;Cl&sub2;, THF oder Toluol, bevorzugt CH&sub2;Cl&sub2;, gelöst und mit einem Reduktionsmittel, wie DIBAL-H, bei Temperaturen von etwa -78ºC bis Raumtemperatur behandelt. Stufe 4
In Stufe 4 wird Verbindung 11 mit einem Amin der Formel 6 in einer Weise, wie sie in Verfahren A1, Stufe 2 beschrieben ist, zur Reaktion gebracht.

Verfahren C:

Verbindungen nach Formel I, in denen -Q-(C(R&sup7;)(R&sup8;))s- -N(R¹¹)(CH&sub2;)s- ist, s 2 oder 3 ist, Z¹ Wasserstoff ist, Y¹ -C(=NO(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))rT)(CH&sub2;)m- ist, m 1 bis 3 ist und J -O- ist, können hergestellt werden, wie in dem folgenden Reaktionsschema dargestellt ist: Stufe 1
In Stufe 1 wird ein Alkohol der Struktur 13 mit einer Base, wie NaH oder LDA, bevorzugt NaH, in einem inerten Lösungsmittel, wie THF oder DMF, behandelt. Das resultierende Alkoxid wird zu einem Elektrophil, wie einer Verbindung nach Formel 14, in der m 1, 2 oder 3 und L eine Abgangsgruppe, wie oben definiert, bevorzugt Br, ist und X -N(CH&sub3;)OCH&sub3; oder -OAlkyl ist, gegeben. Bevorzugte Reaktionstemperaturen reichen von -20 bis 50ºC. Wenn X OAlkyl ist, wird es mit HN(CH&sub3;)OCH&sub3; und Al(CH&sub3;)&sub3; in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie THF oder Toluol, bei einer Temperatur von -20 bis 40ºC behandelt. Stufe 2
In Stufe 2 wird Verbindung 15 mit einem Reagenz nach Formel 16, in der M Li, MgCl oder MgBr ist, in einem inerten organischen Lösungsmittel wie THF oder Ether bei einer Temperatur von -78 bis 40ºC behandelt. Stufe 3
In Stufe 3 wird Verbindung 17 mit einer geeigneten Base, wie NaN(TMS)&sub2; oder LDA, bevorzugt NaN(TMS)&sub2;, in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie THF, behandelt. Das resultierende Anion wird mit einer Verbindung nach Formel 18, in der s 1 oder 2 ist und L eine Abgangsgruppe, wie oben definiert, ist, in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie THF oder Ether, bei Reaktionstemperaturen, die von -78 bis 30ºC reichen, behandelt. Stufe 4
Eine Verbindung nach Formel 19 wird in das korrespondierende Oxim der Formel 20 umgewandelt, indem das Keton 19 mit einem Hydroxylaminderivat der Formel H&sub2;NO(C(R&sup9;)(R¹&sup9;))rT in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Pyridine, bei Temperaturen von 25 bis 100ºC behandelt wird. Alternativ kann ein niedrigmolekulargewichtiger Alkohol (z. B. CH&sub3;OH oder CH&sub3;CH&sub2;OH) als Lösungsmittel verwendet werden, wobei in einem solchen Fall eine Base wie Natriumacetat zugegeben werden muss. Stufe 5
In Stufe 5 wird Verbindung 20 mit einem Reduktionsmittel, wie DIBAL-H, in einem inerten organischen Lösungsmittel, wie THF oder CH&sub2;Cl&sub2;, bei einer Temperatur von -78 bis -40ºC behandelt. Stufe 6
In Stufe 6 wird Verbindung 21 mit einem Amin der Formel 6 in einer Weise, wie sie in Verfahren A1, Stufe 2 beschrieben ist, zur Reaktion gebracht.

Prozedur D:

Verbindungen nach Formel 1, in denen -Q-(C(R&sup7;)(R&sup8;))s -N(R¹¹)CH&sub2;CH&sub2;- ist, Z¹ Wasserstoff ist, Y¹ -CH&sub2;C(O)- ist und J -N(CH&sub3;)- ist, können, wie in dem folgenden Reaktionsschema gezeigt, hergestellt werden: Stufe 1
In Stufe 1 wird ein Aldehyd der Formel 23 mit Ethylacetoacetat in einem polaren organischen Lösungsmittel, wie CH&sub3;CH&sub2;OH, in Gegenwart einer geeigneten Base, z. B. Piperidin, bei einer Temperatur von 10 bis 50ºC zur Reaktion gebracht. Stufe 2
In Stufe 2 wird Verbindung 24 durch Behandlung mit einer starken Base, wie NaOH, in einem wässrigen alkoholischen Lösungsmittel, wie CH&sub3;CH&sub2;OH, bei einer Temperatur von 60 bis 100 ºC, bevorzugt bei der Rückflusstemperatur des Lösungsmittels, in die Disäureverbindung gemäß Formel 25 umgewandelt. Stufe 3
In Stufe 3 wird Verbindung 25 mit einem Dehydratisierungsreagenz, wie CH&sub3;COCl oder DCC, bevorzugt CH&sub3;COCl, behandelt. Stufe 4
Die Behandlung des Anhydrids 26 mit einem Amin der Formel W-Y²-NHR¹¹ in einem geeigneten Lösungsmittel, wie CH&sub2;Cl&sub2;, in Gegenwart einer geeigneten Base, wie Et&sub3;N oder N,N-Dimethylaminopyridin, ergibt Säure 27. Stufe 5
Säure 27 wird durch ein geeignetes Reduktionsverfahren zum Alkohol umgewandelt. Zum Beispiel wird Verbindung 27 mit 1,1'-Carbonyldiimidazol in einem organischen Lösungsmittel, wie Ethylacetat, in Gegenwart einer geeigneten Base, wie N,N-Dimethylaminopyridin, behandelt, gefolgt von Behandlung mit wässrigem NaBH&sub4;. Der Alkohol wird durch ein geeignete Oxidationsverfahren in den Aldehyd 28 umgewandelt. Stufe 6
In Stufe 6 wird Verbindung 28 mit einem Amin nach Formel 6 in einer Weise, wie sie in Verfahren A1, Stufe 2 beschrieben ist, zur Reaktion gebracht.

Verfahren E:

Verbindungen der Formel I, in denen -Q-(C(R&sup7;)(R&sup8;))s- -N(R¹¹)CH&sub2;CH&sub2;- ist, Y¹ -CH&sub2;- ist, J -N(Z²)CO- ist und Z¹ und Z² zusammen -CH&sub2;CH&sub2;- sind, können, wie in dem folgenden Reaktionsschema gezeigt, hergestellt werden: Stufe 1
In Stufe 1 wird 3-(R³-Phenyl)-3-(2-hydroxyethyl)-pyrrolidin 34 (das durch das Verfahren, das in T. B. Burkholder et al. Bioorg. & Med. Chem. Let. 6, (1995), S. 951 beschrieben ist, erhalten werden kann) durch Standardverfahren acyliert, wie sie in Verfahren A2, Stufe 4 beschrieben sind. Stufe 2
In Stufe 2 wird Verbindung 35 durch ein geeignetes Oxidationsverfahren zu Aldehyd 36 umgewandelt, z. B. durch das Swern- Verfahren. Stufe 3
In Stufe 3 wird Verbindung 36 mit einem Amin der Formel 6 in einem Verfahren zur Reaktion gebracht, wie es in Verfähren A1, Stufe 2, beschrieben ist.
Reaktive Gruppen, die nicht an den oben genannten Verfahren teilnehmen, können während der Reaktionen mit konventionellen Schutzgruppen geschützt werden, die durch Standardverfahren nach der Reaktion entfernt werden können. Die folgende Tabelle 1 zeigt einige typische Schutzgruppen: Tabelle 1
oder -OCH&sub2;phenyl
Es wurde gefunden, dass Verbindungen nach Formel I Antagonisten von NK&sub1;- und/oder NK&sub2;- und/oder NK&sub3;-Rezeptoren sind, und sie sind daher brauchbar bei der Behandlung von Zuständen, die durch die Aktivität dieser Rezeptoren verursacht oder verstärkt werden.
Die vorliegende Erfindung betrifft außerdem eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach Formel I und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger enthält. Zusammensetzungen dieser Erfindung können in konventionellen oralen Dosierungsformen wie Kapseln, Tabletten, Pulvern, Kathetern, Suspensionen oder Lösungen, oder in injektierbaren Dosierungsformen wie Lösungen, Suspensionen oder Pulvern zur Rekonstitution verabreicht werden. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können mit konventionellen Hilfsmitteln und Additiven unter Verwendung bekannter pharmazeutischer Formulierungstechniken hergestellt werden.
Pharmazeutisch akzeptable Hilfsstoffe und Additive beinhalten nicht-toxische und chemisch kompatible Füllstoffe, Bindemittel, Zerfallsmittel, Puffer, Konservierungsmittel, Antioxidantien, Schmiermittel, Geschmacksstoffe, Verdickungsmittel, Färbemittel, Emulgatoren und andere.
Die tägliche Dosis einer Verbindung nach Formel I zur Behandlung von Asthma, Husten, Bronchospasmen, Entzündungskrankheiten, Migräne, Nozizeption und gastrointestinalen Infekten beträgt etwa 0,1 mg bis etwa 20 mg/kg Körpergewicht pro Tag, bevorzugt etwa 0,5 bis etwa 15 mg/kg. Für ein durchschnittliches Körpergewicht von 70 kg liegt der Dosisbereich daher von etwa 1 bis etwa 1.500 mg Wirkstoff pro Tag, bevorzugt etwa 50 bis etwa 200 mg, bevorzugt etwa 50 bis etwa 500 mg/kg/Tag, gegeben als Einzeldosis oder 2 bis 4 geteilte Dosen. Die exakte Dosis wird allerdings durch den betreuenden Arzt bestimmt und ist abhängig von der Wirksamkeit der verabreichten Verbindung, dem Alter, Gewicht, dem Zustand und dem Ansprechen des Patienten.
Es folgen Beispiele zur Herstellung von Startmaterialien und Verbindungen nach Formel I. Beispiele und Verbindungen, die mit einem Sternchen markiert sind, beziehen sich auf Analoga von Verbindungen nach Formel I und sind für die Zwecke der Illustration analoger synthetischer Verfahren, die bei der Herstellung von Verbindungen der vorliegenden Erfindung nützlich sein können, eingefügt. Beispiel 1

Stufe 1:

Eine Lösung von 3-(3,4-Dichlorphenyl)-2-propensäure (26,02 g, 0,12 mol), CH&sub3;OH (500 ml) und gesättigter methanolischer HCl (5,0 ml) wurde für 14 h unter Rückfluss erhitzt. Um weiße Kristalle zu fällen, wurde gekühlt und diese wurde durch Filtration gewonnen, um 22,6 g des Methylester-Produkts (0,098 mol, 82%) zu ergeben. Das Filtrat wurde konzentriert und auf einer kurzen Silikagelsäule gereinigt, wobei mit 3 : 1 Hexan zu EtOAc eluiert wurde, um weitere 4,43 g des Methylesters (0,019 mol, 16%) zu ergeben.

Stufe 2:

Das Produkt von Stufe 1 (25,0 g, 0,108 mol) wurde mit 40% methanolischem Benzyltrimethylammoniumhydroxid (9,3 ml, 22 mmol) und CH&sub3;NO&sub2; (210 ml) behandelt und für 1,5 Stunden erhitzt auf 180ºC erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde mit Diethylether (Et&sub2;O) (1 l) verdünnt, mit 1 N HCl (400 ml und 100 ml) und Salzwasser (500 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 3 : 1 Hexan : EtOAc ergab 31,0 g Methyl-3-(3,4-dichlorphenyl)-4-nitrobutyrat (0,106 mol, 98%).

Stufe 3:

Zu einer 1 M Et&sub2;O-Lösung von LiAlH&sub4; (200 ml, 200 mmol) wurde bei 0ºC das Produkt aus Stufe 2 (14,35 g, 4911 mmol), gelöst in Tetrahydrofuran (THF) (100 ml), langsam zugegeben. Der Reaktionsmischung wurde ermöglicht, sich auf Raumtemperatur zu erwärmen und es wurde für 45 min. gerührt. Nach erneuter Abkühlung auf 0ºC wurde das überschüssige LiAlH&sub4; durch vorsichtige Zugabe von wässrigem gesättigtem Na&sub2;SO&sub4; (20 ml) gequencht. Die Lösung wurde mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und filtriert. Die Lithiumsalze wurden mit Et&sub2;O (3 · 300 ml) gewaschen. Die kombinierten Filtrate wurden konzentriert, um 8,65 g 4-Amino-3-(3,4-dichlorphenyl)- butanol als weißen Feststoff (36,9 mmol, 75%) zu ergeben.

Stufe 4:

Eine Lösung des Aminoalkohols aus Stufe 3 (8,13 g, 34,7 mmol) und Imidazol (3,56 g, 52,3 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (350 ml) wurden mit tert.-Butyldimethylsilylchlorid (7,84 g, 52,0 mmol) behandelt. Nach Rühren für 1 h wurde die Reaktionsmischung mit 0,1 N HCl (350 ml) gewaschen, und die wässrige Schicht wurde mit CH&sub2;Cl&sub2; (100 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit gesättigtem NaHCO&sub3; (200 ml) und Salzwasser (200 ml) gewaschen, mit K&sub2;CO&sub3; getrocknet und konzentriert, um 11,4 g des silylierten Produktes als blassgelbe viskose Flüssigkeit (34,2 mmol, 98%) zu ergeben.

Stufe 5:

Das Amin aus Stufe 4 (15, 3 g, 44 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (250 ml) wurde mit Triethylamin (Et&sub3;N) (13 ml, 93 mmol) und Benzylchlorid (8,0 ml, 69 mmol) behandelt. Bei Raumtemperatur wurde für 1,5 h gerührt, dann wurde die Reaktionsmischung mit H&sub2;O (500 ml) gewaschen und die wässrige Schicht mit CH&sub2;Cl&sub2; (2 · 100 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit 0,3 N HCl (150 ml), gesättigtem NaHCO&sub3; (150 ml) und Salzwasser (200 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie des Rohmaterials auf Silikagel, Elution mit 6 : 1 bis 3 : 1 Hexan : EtOAc, ergaben 13,7 g des Benzamids (30 mmol, 69%).

Stufe 6:

Das Produkt aus Stufe 5 (10,54 g, 23,3 mmol) in THF (170 ml) wurde mit 60% NaH (1,87 g, 47 mmol) behandelt, gefolgt durch CH&sub3;I (1,9 ml, 30,5 mmol). Die Reaktionsmischung wurde für 30 min bei 60ºC erhitzt und dann zwischen Et&sub2;O (250 ml) und H&sub2;O (500 ml) verteilt. Die wässrige Schicht wurde mit Et&sub2;O (500 ml) extrahiert, die kombinierten organischen Schichten wurden mit Salzwasser (250 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert, um 9,9 g des Methylbenzamid-Produkts als farbloses Öl (21 mmol, 91%) zu ergeben.

Stufe 7:

Das Produkt aus Stufe 6 (9,9 g, 21 mmol) in THF (125 ml) wurde mit einer 1 M THF-Lösung von tert.-Butylammoniumfluorid (50 ml, 50 mmol) behandelt und für 4 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen H&sub2;O (200 ml) und Et&sub2;O (100 ml) verteilt. Die wässrige Schicht wurde mit Et&sub2;O (2 · 100 ml) extrahiert, die organischen Schichten kombiniert und mit Salzwasser (100 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch Umkristallisation aus CH&sub2;Cl&sub2; : Hexan gereinigt, um 5,5 g des Alkoholprodukts als weiße Kristalle (15,6 mmol, 74,4%) zu ergeben.

Stufe 8:

Das Produkt aus Stufe 7 (1,37 g, 3,8 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (20 ml) wurde mit Et&sub3;N (0,6 ml, 4,3 mmol) und CH&sub3;SO&sub2;Cl (0,32 ml, 4,1 mmol) für 45 min gerührt, dann wurde die Reaktionsmischung zu 0,3 N HCl (200 ml) gegeben und mit CH&sub2;Cl&sub2; (3 · 100 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit gesättigtem NaHCO&sub3; (100 ml) und Salzwasser (100 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert, um 1,49 g des Methansulfonatesters als farbloses viskoses Öl (3,47 mmol, 89%) zu ergeben.

Stufe 9:

Das Produkt aus Stufe 8 (0,499 g, 1,16 mmol) in DMF (5 ml) wurde mit Nω-Methyltryptamin (0,241 g, 1,38 mmol) und NaI (16,4 mg, 0,11 mmol) bei 50ºC für 38 h erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde zu gesättigtem NaHCO&sub3; (100 ml) gegeben und mit CH&sub2;Cl&sub3; (3 · 40 ml) extrahiert, die kombinierten organischen Schichten wurden mit Salzwasser (80 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 20 : 1 : 0,1 bis 13 : 1 : 0,1 CH&sub2;Cl&sub2; : MeOH : NH&sub3; (aq.), ergab 413 mg der Titelverbindung als weißen Schaum (0,81 mmol, 70%). HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub2;&sub9;H&sub3;&sub2;Cl&sub2;N&sub3;O]&spplus; 508,1922; gefunden 508,1929. Beispiel 2

Stufe 1:

Zu einer 0ºC-Lösung des Produkts aus Beispiel 1, Stufe 4 (8,0 g, 22,9 mmol) in DMF wurden 4-Methylmorpholin (NMM) (2,5 ml, 22,9 mmol), 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidhydrochlorid (6,5 g, 34,4 mmol), 1-Hydtoxybenzotriazolhydrat (HOBT) (3,0 g, 22,9 mmol) und 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure (4,9 g, 22,9 mmol) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei 0ºC für 30 min gerührt, dann bei Raumtemperatur über Nacht. Unter Hochvakuum wurde konzentriert, und das resultierende Material wurde in H&sub2;O resuspendiert und mit EtOAc extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit gesättigtem NaHCO&sub3; gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie des Rohprodukts auf Silikagel, Elution mit 20 : 1 CH&sub2;Cl&sub2; : NH&sub3; gesättigtem CH&sub3;OH ergab 9,0 g Amid als leicht gelben Feststoff (72%).

Stufen 2-5:

Das Produkt aus Stufe 1 wurde zur Titelverbindung umgewandelt, wobei die Verfahren denen entsprechen, die in Beispiel 1, Stufen 6 bis 9 beschrieben sind.
MS (FAB, M + H&spplus;): m/e 598; Analyse für C&sub3;&sub2;H&sub3;&sub7;Cl&sub2;N&sub3;O&sub4;: berechnet C, 64,21; H, 6,23; N, 7,20%; gefunden: C, 63,84; H, 6,37; N, 7,00. Beispiel 2a
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 2 wurde 3,5-Bis(trifluormethyl)phenylessigsäure statt 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure in Stufe 1 eingesetzt und in Stufe 2 die benzylische Position der Phenylacetylgruppe und die Amidposition methyliert, um die Titelverbindung zu ergeben. MS (FAB, M + H&spplus;): m/e 672. Beispiel 2b
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 2 wurde 3,5-Bis(trifluormethyl)benzoesäure statt 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure in Stufe 1 und Tryptamin statt Nω-Methyltryptamin in Stufe 5 eingesetzt, um die Titelverbindung zu ergeben. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub0;H&sub2;&sub8;N&sub3;OCl&sub2;F&sub6;]&spplus; 630,1514; gefunden 630,1513. Beispiel 2c
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 2 wurde 3,5-Bis(trifluormethyl)benzoesäure statt 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure in Stufe 1 eingesetzt, um die Titelverbindung zu ergeben. Beispiel 2d
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 2c wurde 5-Fluor-Nω-Methyltryptamin statt Nω-Methyltryptamin in Stufe 5 eingesetzt, um die Titelverbindung zu ergeben. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub1;H&sub2;&sub9;N&sub3;OCl&sub2;F&sub7;]&spplus; 662,1576; gefunden 662,1584. Beispiel 2e*
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 2 wurde N-Methyl-3-(2-aminoethyl)benzothiophen statt Nω-Methyltryptamin in Stufe 5 eingesetzt, um die Titelverbindung zu ergeben. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub2;H&sub3;&sub7;N&sub2;O&sub4;Cl&sub2;S]&spplus; 615,1851; gefunden 615,1850. Beispiel 3*

Stufe 1:

Eine Lösung von 3-(3,4-Dichlorphenyl)-2-propensäure (100 g, 461 mmol) in trockenem DMF (500 ml) wurde auf 0ºC gekühlt und mit Cs&sub2;CO&sub3; (100 g, 307 mmol) behandelt. Die resultierende schmutzigweiße Aufschlämmung wurde für 15 min gerührt, dann wurde CH&sub3;I (33 ml, 530 mmol) über eine Spritze zugegeben. Nach 1 h wurde zusätzliches DMF (250 ml) zugegeben und die Aufschlämmung für 14 h gerührt, dann zwischen Ethylacetat (EtOAc) (1,5 l) und halbgesättigter wässriger NaHCO&sub3; (500 ml) verteilt. Die organische Schicht wurde abgetrennt und die wässrige Schicht mit EtOAc (1 l, 500 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit halbgesättigtem wässrigem NaHCO&sub3; (500 ml) und Wasser (5 · 500 ml) gewaschen, dann über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und konzentriert, um 105,4 g (456 mmol, 99%) Methyl-3-(3,4-dichlorphenyl)-2-propenoat als leicht braune Nadeln zu ergeben.

Stufe 2:

Eine Lösung des Produkts aus Stufe 1 (15 g, 65 mmol) in trockenem THF (250 ml) (kühl gehalten in einem großen Wasserbad mit Umgebungstemperatur wurde mit DIBAL-H (140 ml, 140 mmol) für 30 min behandelt. Die resultierende Lösung wurde für 30 Minuten bei 23ºC gerührt, in Et&sub2;O (500 ml) gegossen und mit Wasser (5 ml), 15% NaOH (5 ml) und Wasser (15 ml) behandelt. Es wurde für 5 min gerührt, die Mischung mit Et&sub2;O (200 ml) verdünnt, 15% NaOH (15 ml) zugegeben, dann wurde MgSO&sub4; zugegeben, um einen farblosen Niederschlag zu ergeben. Die Aluminiumsalze wurden durch Filtration durch eine grobe Glasfritte entfernt, die Feststoffe mit Et&sub2;O (1 l) gewaschen und das Filtrat im Vakuum konzentriert, um 13,2 g (65 mmol, 99%) 3-(3,4-Dichlor-phenyl)- 2-propen-1-ol als schmutzigweißen Feststoff zu ergeben.

Stufe 3:

Eine Lösung des Produkts aus Stufe 2 (13,2 g, 65 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (250 ml) wurde bei 0ºC mit Pyridin (7,89 ml, 97,5 mmol) und Dimethylaminopyridin (DMAP) (397 mg, 3,25 mmol) kombiniert, gefolgt von Acetylchlorid (6,48 ml, 74,7 mmol). Der Mischung wurde ermöglicht, sich auf 23ºC zu erwärmen, sie wurde in 1 M HCl (100 ml) gegossen, und die resultierende organische Schicht wurde mit 1 M HCl (100 ml) gefolgt von Wasser (5 · 100 ml; pH- Wert = 6,5-7) gewaschen. Die organische Schicht wurde über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und konzentriert, wodurch sich 15,4 g (62,9 mmol, 97%) 3-(3,4-Dichlor-phenyl)-2-propen-1-olacetat als farbloses Öl ergaben.

Stufe 4:

Eine Lösung des Produkts von Stufe 3 (15 g, 61 mmol, getrocknet durch azeotrope Destillation mit Toluol, 1 · 50 ml) in trockenem THF (250 ml) wurde bei -78ºC mit Chlortriethylsilan (20,2 ml, 120 mmol) behandelt, schnell gefolgt von der durch einen Tropftrichter über 50 min erfolgenden Zugabe von 0,5 M Toluollösung von Kaliumbis(trimethylsilyl)amid (183 ml, 91,5 mmol). Der Reaktionsmischung wurde ermöglicht, sich auf 23ºC zu erwärmen, dann erhitzt, um unter Rückfluss 3 h zu kochen. Der Reaktionsmischung wurde erlaubt über Nacht allmählich abzukühlen, dann wurde mit gesättigtem NH&sub4;Cl (150 ml) gequencht. Die resultierende Mischung wurde kräftig für 3 Stunden gerührt, mit 1 M HCl (150 ml) behandelt und mit Et&sub2;O (500 ml) extrahiert. Die wässrige Schicht wurde mit Et&sub2;O (400 ml) extrahiert und die kombinierten organischen Schichten wurden mit 300 ml 5% NaOH gefolgt von 8 · 150 ml 5% NaOH gewaschen. Die kombinierten wässrigen Schichten wurden auf 5ºC gekühlt und vorsichtig (die Temperatur wurde zwischen 5 und 10ºC gehalten) mit konzentrierter HCl (ca. 175 ml) auf pH 1 angesäuert. Die wässrige Schicht wurde mit CH&sub2;Cl&sub2; (2 · 800 ml) extrahiert, getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;) und konzentriert, um 13,4 g (54,5 mmol, 89%) 3-(3,4-Di-chlorphenyl)-4-pentenonsäure als schwachgelbes Öl zu ergeben.

Stufe 5:

Eine Lösung des Produkts aus Stufe 4 (5,0 g, 20,4 mmol) in trockenem CH&sub2;Cl&sub2; (60 ml) wurde mit gereinigtem m-CPBA (7 g, 40 mmol) behandelt [13 g kommerzielles 55% mCPBA in 250 ml Benzol wurden mit pH 7,4 Puffer (5 · 30 ml) gewaschen, getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;) und konzentriert, um etwa 9 g sauberes m-CPBA zu ergeben]. Nach Rühren für 48 h wurde Amberlyst 15 (1,2 g) zugegeben und die Mischung für 8 h gerührt. Das Amberlyst wurde durch Filtration durch eine Glasfritte mittlerer Porosität entfernt und mit EtOAc gespült. Das Filtrat wurde mit 100 ml gesättigtem Na&sub2;SO&sub3;/NaHCO&sub3; (1 : 1) gewaschen, die resultierende organische Schicht getrocknet und im Vakuum konzentriert. Das Rohprodukt wurde in Hexan : CH&sub2;Cl&sub2; (1 : 1) aufgenommen und filtriert, um 3,3 g (12,6 mmol, 62%) einer Mischung von Isomeren (3 : 2, trans/als) der Titelverbindung als farblosen weichen Feststoff zu ergeben. Das Filtrat wurde konzentriert, um 2,0 g eines viskosen Öls zu ergeben, das durch Silikagel-Chromatographie (Säule: 7 · 15 cm; Lösungsmittel: Hexan : EtOAc, 5 : 4 Gradient auf 1 : 1) gereinigt wurde, um 1,07 g (4,1 mmol, 20%) des reinen cis-Isomers der Titelverbindung als ein Öl, Gesamtausbeute 4,3 g (16,47 mmol, 81%) zu ergeben.

Stufe 6:

Eine Lösung von 4-(3,4-Dichlorphenyl)-dihydro-5-(hydroxymethyl)2(3H)-furanon (3,3 g, 12,6 mmol, 3 : 2 Verhältnis der Stereoisomere laut NMR) in trockenem DMF (10 ml) wurde mit 3,5-Bistrifluormethylbenzylbromid (5,9 ml, 32,2 mmol) behandelt, gefolgt von Ag&sub2;O (5,8 g, 25,3 mmol); der Behälter wurde in Folie eingewickelt und es wurde für 2,5 Tage gerührt. Das Rohmaterial wurde durch eine Lage von Silikagel (10 cm · 4 cm), gepackt mit Hexan : EtOAc (1 : 1), gegeben, die Lage mit demselben Lösungsmittel gewaschen, bis kein weiteres Produkt mehr eluiert wurde, wie durch TLC angezeigt wurde; das resultierende Filtrat wurde im Vakuum konzentriert, um das Rohprodukt als Feststoff (10 g) zu ergeben. Das Rohprodukt wurde in Hexan : EtoAc (4 : 1) gelöst und durch Silikagel-Chromatographie (Säulen: 7,5 · 19; Lösungsmittel: Hexan : EtOAc, 4 : 1) gereinigt, um 3,33 g (6,8 mmol, 54%) des Isomers (trans)-[[[(3,5-Bis(trifluormethyl)phenyl]methoxy]- methyl]-4-(3,4-dichlorphenyl)dihydro-2(3H)-furanon und 1,08 g (2,2 mmol, 17%) des korrespondierenden cis-Isomers in einer Gesamtausbeute von 71% zu ergeben.
Trans-Isomer: HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub2;&sub0;H&sub1;&sub5;O&sub3;Cl&sub2;F&sub6;]&spplus;: 487,0302, gefunden 487,0312.
Cis-Isomer: HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub2;&sub0;H&sub1;&sub5;Cl&sub2;F&sub6;O&sub3;]&spplus;: 487,0302, gefunden 487,0297.

Stufe 7:

Eine Lösung des cis-Isomers aus Stufe 6 (2,1 g, 4,31 mmol) in trockenem CH&sub2;Cl&sub2; (50 ml) wurde auf -78ºC gekühlt und mit DIBAL-H (5,1 ml, 5,1 mmol, 1 M in CH&sub2;Cl&sub2;) behandelt. Es wurde für 2 h bei -78ºC gerührt, dann wurde die Lösung mit NaF (905 mg; 22 mmol) und Wasser (400 ul, 22 mmol, 5 eq.) behandelt. Der Suspension wurde ermöglicht, sich auf 23ºC zu erwärmen, und es wurde für 45 min gerührt, die Mischung wurde mit Et&sub2;O (50 ml) verdünnt und durch eine Lage von Silikagel (6,5 cm · 2 cm; 150 ml Vakuumglasfritte, gepackt mit Hexan : EtOAc (1 : 1) filtriert, die Lage mit Hexan : EtOAc (1 : 1) gewaschen bis kein weiteres Produkt mehr vorlag, wie durch TLC angezeigt. Das Filtrat wurde konzentriert, um 1,92 g (3,86 mmol, 91%) der Titelverbindung als Schaum zu ergeben, der ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe verwendet wurde.

Stufe 8:

Eine Aufschlämmung des Lactols aus Stufe 7 (1,03 g, 2,1 mmol), Nω-Methyltryptamin (0,73 g, 4,2 mmol) und 3 Å Molekularsieb (1,7 g) in CF&sub3;CH&sub2;OH (5,0 ml) wurde für 1 h gerührt, NaCNBH&sub3; (0,26 g, 4,2 mmol) wurde zugegeben und die Reaktionsmischung wurde über das Wochenende gerührt, dann konzentriert. Der Rückstand wurde auf Silikagel chromatographiert, mit 20 : 1 CH&sub2;Cl&sub2;/CH&sub3;OH (gesättigt mit Ammoniak) eluiert, um 0,809 g der gewünschten Verbindung als weißen Feststoff (60%) zu ergeben. MS (FAB, M + H&spplus;): m/e 647. Beispiel 4

Stufe 1:

3,5-Bis(trifluormethyl)benzylalkohol (25,0 g, 0,103 mol) in THF (50 ml) wurden mit 60% NaH (4,14 g, 0,104 mol) kombiniert und für 30 min gerührt. Die resultierende Alkoxidmischung wurde über eine Kanüle über 30 min in eine Lösung von Methylbromacetat (11,8 ml, 0,125 mol) in THF (250 ml) überführt. Die Reaktionsmischung wurde für 18 h gerührt und in 0,3 N HCl (300 ml) gegeben. Die organische Schicht wurde abgetrennt und die wässrige Schicht wurde mit EtOAc (2 · 150 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit Salzlösung (200 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 10 : 1 Hexan : EtOAc ergaben das gewünschte Produkt als farblose Flüssigkeit (26,1 g, 80%).

Stufe 2:

Eine Suspension aus N,O-Dimethylhydroxylaminhydrochlorid (19,5 g, 0,20 mol) in THF (350 ml) wurde bei 0ºC mit AlMe&sub3; (100 ml, 0,20 mol, 2 M in Toluol) kombiniert und die Erwärmung auf Raumtemperatur für 30 min wurde ermöglicht. Diese Mischung wurde auf 0ºC gekühlt, das Produkt aus Stufe 1 (26,1 g, 82,7 mmol), gelöst in THF (140 ml), wurde über 30 min zugegeben, die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmt und für 40 min gerührt. Die Reaktionsmischung wurde auf 0ºC gekühlt, durch vorsichtige Zugabe von 1 N HCl (100 ml) gequencht und konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen H&sub2;O (250 ml) und CH&sub2;Cl&sub2; (300 ml) verteilt, die wässrige Schicht mit CH&sub2;Cl&sub2; (2 · 150 ml) extrahiert, die kombinierten organischen Schichten mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 3 : 1 Hexan : EtOAc ergab das Produkt als farblose Flüssigkeit (28,1 g, 98%).

Stufe 3:

Eine Suspension von Mg (1,35 g, 55,6 mmol) in Et&sub2;O (10 ml) wurde bei 30ºC gehalten und mit einer Lösung von α,3,4-Trichlortoluol (7,7 ml, 55,6 mmol) in Et&sub2;O (45 ml) über 1 h behandelt und dann für 30 min gerührt. Die resultierende Lösung wurde mittels Kanüle über 30 min in eine -78ºC-Lösung des Produkts aus Stufe 2 (9,56 g, 27,7 mmol) in Et&sub2;O (350 ml) überführt und die Reaktionsmischung über 1 h auf Raumtemperatur erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde auf 0ºC gekühlt und mit HCl gesättigtem CH&sub3;OH (4 ml) und CH&sub3;OH (100 ml) behandelt, für 1 h gerührt und konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen CH&sub2;Cl&sub2; (300 ml), Et&sub2;O (500 ml) und H&sub2;O (250 ml) verteilt, die organische Schicht mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 2 : 1 CH&sub2;Cl&sub2; : Hexan ergab das Produkt als weißen Feststoff (6,22 g, 50%)

Stufe 4:

Zu einer Lösung von Natriumbis(trimethylsilyl)amid (2,5 mmol) in THF (20 ml) bei -78ºC wurde tropfenweise eine Lösung des Produkts aus Stufe 3 (1,11 g, 2,5 mmol) in THF (5 ml) über 15 min gegeben. Es wurde bei -78ºC für 2 h gerührt und dann wurde eine Lösung von 2-Brom-N-methoxy-N-methylacetamid (455 mg, 2,5 mmol) in THF (5 ml) tropfenweise über 10 min zugegeben. Der Mischung wurde ermöglicht, sich über 1 h auf Raumtemperatur zu erwärmen, dann wurde für weitere 30 min bei Raumtemperatur gerührt. Salzwasser wurde zu der Reaktionsmischung (2 ml) gegeben und konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen CH&sub2;Cl&sub2; (60 ml), Et&sub2;O (90 ml) und H&sub2;O (30 ml) verteilt. Die organische Schicht wurde mit Salzwasser (30 ml) gewaschen, mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit CH&sub2;Cl&sub2;, ergab das Produkt als farbloses Öl (800 mg, 56%).

Stufe 5:

Eine Mischung des Produkts aus Stufe 4 (597 mg, 1,1 mmol), Pyridin (10 ml) und Methoxylaminhydrochlorid (101,5 mg, 1,2 mmol) wurde für 1 h bei 60ºC erhitzt und dann konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 3 : 1 Hexan : EtOAc, ergab das Oxim (syn-Isomer) als ein farbloses Öl (442 mg; 70%) HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub2;&sub3;H&sub2;&sub2;Cl&sub2;F&sub6;N&sub2;O&sub4;]&spplus;: 575,0939, gefunden 575,0932.

Stufe 6:

Das Produkt aus Stufe 5 (347 mg, 0,60 mmol) in THF (6 ml) wurde bei -78ºC mit DIBAL-H (1,8 ml, 1,8 mmol, 1 M in Hexan) über 15 min behandelt. H&sub2;O (5 ml) wurde zugegeben und auf Raumtemperatur erwärmt; zu dieser Mischung wurde NaF (0,2 g, 4,8 mmol) gegeben und für 20 min gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen Salzwasser (25 ml) und Et&sub2;O (25 ml) verteilt, die organische Schicht mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert, um das Rohprodukt (298 mg, 94%) zu ergeben.

Stufe 7:

Der Aldehyd aus Stufe 6 (35 mg, 68 umol) wurde mit Nω-Methyltryptamin (26,2 mg, 0,15 mmol), CF&sub3;CH&sub2;OH (0,4 ml) und zerstoßenen 3 Å-Molekularsieben (36 mg) behandelt und für 20 min gerührt. NaCNBH&sub3; (13 mg, 0,21 mol) wurde zugegeben, für 14 h gerührt und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 10 : 1 : 0,1 CH&sub2;Cl&sub2;: MeOH : NH&sub3; (aq) ergab die Titelverbindung als farbloses Öl (32 mg, 70%). MS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet 674,1776; gefunden 674,1787. Beispiel 5

Stufe 1:

3,4-Dichlorbenzaldehyd (100 g) in 95% CH&sub3;CH&sub2;OH (120 ml) wurden mit Ethylacetoacetat (146 ml) kombiniert und gerührt, bis eine homogene Lösung erhalten wurde. Die Lösung wurde mit Piperidin (8 ml) behandelt und für 18 h stehen gelassen. Das Rohprodukt wurde aus 95% Ethanol umkristallisiert, um Diethyl-3,4-dichlorbenzal-bis-acetoacetat (230 g) zu ergeben.

Stufe 2

Das Produkt aus Stufe 1 (155 g) wurde in CH&sub3;CH&sub2;OH (2 l) und 50% NaOH (2 l) für 4 h unter Rückfluss gekocht. Wasser (1 l) wurde zur Reaktionsmischung gegeben, und ungefähr 1,5 l Lösungsmittel wurden durch Destillation entfernt. Die verbleibende Lösung wurde auf Eis (1 kg) gegossen und eine geeignete Menge HCl wurde zugegeben, um den pH-Wert auf 1 einzustellen. Die resultierende Lösung wurde mit EtOAc (3 · 1,5 l) extrahiert, die kombinierten Extrakte über MgSO&sub4; getrocknet, filtriert und konzentriert, um 100 g 3-(3,4-Dichlorphenyl)glutarsäure zu ergeben.

Stufe 3:

Eine Kombination des Produkts aus Stufe 2 (100 g) und Acetylchlorid (300 ml) wurde für 5 h unter Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde gekühlt, mit Toluol azeotrop destilliert und unter reduziertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde mit Et&sub2;O (250 ml) aufgeschlämmt und filtriert, um 3-(3,4-Dichlorphenyl)glutarsäureanhydrid (86 g) zu ergeben.

Stufe 4:

Das Produkt aus Stufe 3 (5,9 g) in CH&sub2;Cl&sub2; (80 ml) wurde bei 0ºC nacheinander mit N-Methyl-N-[2-(methoxyphenyl)methyl]amin (3,8 g), Et&sub3;N (3,5 ml) und DMAP (278 mg) behandelt. Die Mischung wurde bei 0ºC für 2 h gerührt, auf Raumtemperatur aufwärmen gelassen und für 20 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit 1 N HCl (1 · 100 ml) und Salzwasser (1 · 100 ml) gewaschen, die organischen Schichten über MgSO&sub4; getrocknet, filtriert und konzentriert, um 3,4-Dichlor-β-[2-[[(2-methoxyphenyl)methyl]-methylamino]-2-oxoethyl]benzopropionsäure (9,3 g) zu ergeben.

Stufe 5:

Die Säure aus Stufe 4 (9,3 g) in EtOAc (100 ml) wurde mit 1,1'-Carbonyldiimidazol (4,62 g) und DMAP (345 mg) behandelt, die resultierende Lösung bei Raumtemperatur für 15 min gerührt, dann bei 50ºC für 1 h erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde auf 0ºC gekühlt und mit einer Lösung von NaBH&sub4; (3,45 g) in H&sub2;O (50 ml) behandelt, langsam auf Raumtemperatur erwärmt und für 12 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit EtOAc (250 ml) verdünnt und mit 1 N HCl (1 · 100 ml) und H&sub2;O (1 · 100 ml) gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet, filtriert und unter reduziertem Druck konzentriert, um ein rohes Öl (13 g) zu ergeben. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 5% CH&sub3;OH/CH&sub2;Cl&sub2;, ergab 3,4-Dichlor-β-(2-hydroxyethyl)-N-methyl-N-[(2-methoxyphenyl)methyl]benzopropanamid (8, 7 g). HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub2;&sub0;H&sub2;&sub4;NO&sub3;Cl&sub2;]&spplus; 396,1133; gefunden 396,1124.

Stufe 6:

Eine Lösung von Oxalylchlorid (1,43 ml) in CH&sub2;Cl&sub2; (30 ml) wurde auf -78ºC gekühlt, DMSO (2,32 ml) wurde tropfenweise über 15 min zugegeben, es wurde für 15 min gerührt, dann eine CH&sub2;Cl&sub2;- Lösung (20 ml) des Produkts aus Stufe 5 (1,3 g) über 20 min zugegeben. Die Mischung wurde für 30 min gerührt, mit Et&sub3;N (9,2 ml) behandelt und für weitere 30 min bei -78ºC gerührt, gefolgt von 1,5 h bei Raumtemperatur. Die Reaktionsmischung wurde mit Wasser gequencht und mit CH&sub2;Cl&sub2; (100 ml) verdünnt. Die organische Fraktion wurde abgetrennt, nacheinander mit 1 N HCl (1 · 50 ml), gesättigter NaHCO&sub3; (1 · 50 ml) und Salzwasser (1 · 50 ml) gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet, filtriert und unter reduziertem Druck konzentriert, um ein Öl zu ergeben. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 50 bis 100% EtOAc/Hexan, ergab 3,4-Dichlor-β-(2-oxoethyl)-N-methyl-N-[(2-methoxyphenyl)- methyl]benzopropanamid (950 mg).

Stufe 7:

Der Aldehyd aus Stufe 6 (770 mg) in 2,2,2-Trifluorethanol (5 ml) wurde nacheinander mit Molekularsieben 3 Å (510 mg) N-ω-Methyltryptamin (510 mg) und NaCNBH&sub3; (123 mg) behandelt. Die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur für 18 h gerührt, die Reaktionsmischung wurde mit EtOAc (50 ml) verdünnt und über Silikagel filtriert. Die resultierende organische Schicht wurde unter reduziertem Druck konzentriert, um das Rohprodukt als ein Öl zu ergeben. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 10% MeOH/CH&sub2;Cl&sub2;, ergab die Titelverbindung (525 mg). HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub2;&sub1;H&sub3;&sub5;N&sub3;O&sub2;Cl&sub2;]&spplus; 552,2185; gefunden 552,2179. Beispiel 6
Die Verbindung aus Beispiel 6 wurde durch ein Verfahren entsprechend dem in Beispiel 5 beschriebenen hergestellt, mit der Ausnahme, dass N-Methyl-N-phenylmethylamin anstelle von N-Methyl-N-[2-(methoxyphenyl)methyl]amin verwendet wurde. MS (FAB, M + H&spplus;): m/e 522; Analyse für C&sub3;&sub0;H&sub3;&sub3;Cl&sub2;N&sub3;O·0,5H&sub2;O: gefunden C, 67,84; H, 6,43; N, 7,90; berechnet C, 67,79, H, 6,45; N, 7,91%. Beispiel 7

Stufe 1:

Zu einer -55ºC Lösung von Oxalylchlorid (2,25 ml, 25,8 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (45 ml) wurde langsam eine Lösung von DMSO (2,4 ml, 33,8 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (45 ml) gegeben, gefolgt von einer Lösung des Alkohols aus Beispiel 2, Stufe 3 (7,55 g, 17,1 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (90 ml). Es wurde für 30 min bei -55ºC gerührt, Et&sub3;N (9,2 ml, 66 mmol) zugegeben und für 2 h bei -55ºC gerührt. 20% gesättigte KHSO&sub4; (75 ml) und Et&sub2;O (100 ml) wurden zugegeben, es wurde auf Raumtemperatur erwärmt und für 30 min gerührt. Et&sub2;O (225 ml) wurde zugegeben und die wässrige Schicht entfernt, mit gesättigtem NaHCO&sub3; (2 · 100 ml), H&sub2;O (100 ml) und Salzwasser (100 ml) gewaschen. Die Lösung wurde mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert, um 7,36 g des gewünschten Aldehydproduktes als weißen Schaum zu ergeben (16,7 mmol, 98%).

Stufe 2:

Eine Lösung des Produkts aus Stufe 1 (2,48 g, 5,6 mmol), Tryptamin (1,44 g, 9,0 mmol) und zerstoßenen 3 Å Molekularsieben (1,66 g) in CF&sub3;CH&sub2;OH (50 ml) wurde mit NaCNBH&sub3; (1,57 g, 25 mmol) behandelt. Die Reaktionsmischung wurde für 30 Minuten gerührt, filtriert und konzentriert. Chromatographie des Rohprodukts auf Silikagel, Elution mit 25 : 10 : 1 bis 10 : 1 : 0,1 CH&sub2;Cl&sub2; : MeOH : NH&sub3; (aq.) ergab 2,43 g des Produkts als weißen Schaum (4,16 mmol, 74%). MS (FAB, M + H&spplus;): m/e 584. Beispiel 7a
Das Verfahren von Beispiel 7 wurde unter Verwendung von 5-Methoxy-Nω-methyltryptamin anstelle von Nω-Methyltryptamin in Stufe 2 eingesetzt, um die Titelverbindung zu erhalten. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub3;H&sub4;&sub0;N&sub3;O&sub5;Cl&sub2;]&spplus; 628,2345; gefunden 628,2345. Beispiel 7b
Die Verwendung des Verfahrens von Beispiel 7 mit 3-(N-Methyl-3-aminopropyl)indol anstelle von Nω-Methyltryptamin in Stufe 2 ergab die Titelverbindung. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub3;H&sub4;&sub0;N&sub3;O&sub4;Cl&sub2;]&spplus; 612,2396; gefunden 612,2399. Beispiel 7c
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 7 mit 5-Fluor- Nω-methyltryptamin anstelle von Nω-Methyltryptamin in Stufe 2, wurde die Titelverbindung erhalten. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub2;H&sub3;&sub7;N&sub3;O&sub4;Cl&sub2;F]&spplus; 616,2145; gefunden 616,2148.
Das Produkt aus Beispiel 7c wurde durch chirale präparative HPLC unter Verwendung einer Chiralpak AS Säule, Elution mit 80 : 20 bis 75 : 25 Hexan : i-Propylalkohol in seine Enantiomere getrennt. Das zweite eluierte Enantiomer hat eine optische Rotation von
[α] = +8,8º (c = 4,4 g/l in CH&sub3;OH). Beispiel 7d
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 7 und L-Tryptophan anstelle von Nω-Methyltryptamin in Stufe 2 wurde die Titelverbindung erhalten. MS (FAB, M + H&spplus;): m/e 628. Beispiel 8*
Eine Lösung des Produkts aus Beispiel 7 (144,8 mg, 0,248 mmol) und Pyridin (30 ul, 0,37 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (1,5 ml) wurde mit Essigsäureanhydrid (23,5 ul, 0,25 mmol) behandelt und für 35 min gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zu 0,2 N HCl (25 ml) gegeben und mit CH&sub2;Cl&sub2; (3 · 10 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit gesättigtem NaHCO&sub3; (10 ml) und Salzwasser (10 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 20 : 1 CH&sub2;Cl&sub2; : CH&sub3;OH ergab 127 mg des gewünschten Produktes als weißen Schaum (0,2 mmol, 82%).
HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub3;H&sub3;&sub8;N&sub3;O&sub5;Cl&sub2;]&spplus; 626,2189; gefunden 626,2181. Beispiel 9
Eine Lösung des Produkts aus Beispiel 7 (63,5 mg, 0,109 mmol) und CH&sub3;CH&sub2;I (10 ul, 0,13 mmol) in DMF (1,1 ml) wurde mit 50% KF-Celite (40,7 mg) behandelt und über Nacht bei 60ºC gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zu H&sub2;O (50 ml) gegeben und mit EtOAc (3 · 25 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten wurden mit Salzwasser (25 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 10 : 1 CH&sub2;Cl&sub2; : CH&sub3;OH : NH&sub3; (aq), ergab 42,7 mg des Produkts als weißen Schaum (0,07 mmol, 64%). HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub3;H&sub4;&sub0;N&sub3;O&sub4;Cl&sub2;]&spplus; 612,2396; gefunden 612,2405. Beispiel 9b
Unter Verwendung der Verfahrens von Beispiel 9 und Allylbromid anstelle von CH&sub3;CH&sub2;I wurde die Titelverbindung erhalten. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub4;H&sub4;&sub0;N&sub3;O&sub4;Cl&sub2;]&spplus; 624,2396; gefunden 624,2385. Beispiel 9c
Unter Verwendung des Verfahrens gemäß dem von Beispiel 9 und Einsatz von CH&sub3;I (2 Äquivalente) als Alkylierungsmittel und NaH als Base, wurde die Titelverbindung erhalten. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub3;H&sub4;&sub0;N&sub3;O&sub4;Cl&sub2;]&spplus; 612,2396; gefunden 612,2407.
Die folgende Verbindung* wurde als Nebenprodukt der vorherigen Reaktion isoliert:
HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub4;H&sub4;&sub2;N&sub3;O&sub4;Cl&sub2;]&spplus; 626,2552; gefunden 626,2564, Beispiel 10*
Das Produkt aus Beispiel 2 (49,3 mg, 82 umol) wurde mit Ameisensäure (750 ul, 20 mmol) und Essigsäureanhydrid (30 ml, 0,32 mmol) behandelt und bei 70ºC für 3 Tage erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde zu H&sub2;O (50 ml) gegeben und mit CH&sub2;Cl&sub2; (2 · 35 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit Salzwasser (25 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 20 : 1 bis 10 : 1 CH&sub2;Cl&sub2; : CH&sub3;OH : NH&sub3; (aq), ergab 9,3 mg des gewünschten Produkts als weißen Schaum. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub3;H&sub3;&sub8;N&sub3;O&sub5;Cl&sub2;]&spplus; 626,2187; gefunden 626,2189. Beispiel 11*

Stufe 1:

Eine Lösung des Produkts aus Beispiel 7 (115,1 mg, 0,197 mmol) in DMF (2,0 ml) wurde mit Methylacrylat (30 ul, 0,33 mmol) behandelt und bei 60ºC über Nacht gerührt. Zusätzliches Methylacrylat (20 ul, 0,22 mmol) wurde zu der Reaktionsmischung gegeben und es wurde bei 60ºC für 24 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde in. H&sub2;O (50 ml) gegeben und mit EtOAc (3 · 25 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit Salzwasser (25 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 25 : 1 CH&sub2;Cl&sub2; : CH&sub3;OH, ergab 66,9 mg des gewünschten Produkts (0,10 mmol, 51%). HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub5;H&sub4;&sub2;N&sub3;O&sub6;Cl&sub2;]&spplus; 670,2451; gefunden 670,2447. Beispiel 12

Stufe 1:

Eine Lösung des Produkts aus Beispiel 1, Stufe 4 (5,8 g, 17 mmol) in Ethylformiat (100 ml) wurde unter Rückfluss für 65 h erhitzt und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 1 : 1 Hexan : EtOAc, ergab 4,4 g des gewünschten Formamids als farbloses Öl (12 mmol, 72%).

Stufe 2:

Eine Lösung des Produkts aus Stufe 1 (4,2 g, 11,6 mmol) in Et&sub2;O (25 ml) wurde mit BH&sub3;·DMS (7,5 ml, 75 mmol) behandelt und bei Umgebungstemperatur für 24 h gerührt. Nach Konzentration der Reaktionsmischung wurde das überschüssige BH&sub3;DMS durch vorsichtige Zugabe von CH&sub3;OH gequencht. HCl-gesättigtes CH&sub3;OH wurde zu der resultierenden Mischung gegeben, bei 60ºC für 1 h erhitzt und konzentriert, um 3,08 g von N-Methyl-4-amino-3-(3,4-dichlorphenyl)-butanol zu ergeben.

Stufe 3:

Das Rohprodukt aus Stufe 2 (3,08 g) wurde mit K&sub2;CO&sub3; (3,02 g) und (BOC)&sub2;O (3,43 g, 15,7 mmol) in CH&sub3;OH (30 ml) für 2,5 h behandelt, filtriert und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 1 : 1 Hexan : EtOAc, ergab 2,50 g des BOC-geschützten Produktes (7,2 mmol, 62% für 2 Stufen).

Stufe 4:

Zu einer -55ºC Lösung von Oxalylchlorid (0,94 ml, 10,8 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (20 ml), wurde langsam DMSO (1,0 ml, 14,1 mmol) gefolgt von einer Lösung des Alkohols aus Stufe 3 (2,50 g, 7,2 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (35 ml) gegeben. Nach Rühren für 30 min bei -55ºC würde Et&sub3;N (4,0 ml, 29 mmol) zugegeben und für 2 h bei -55ºC gerührt. 20%ige gesättigte KHSO&sub4; (28 ml) und Et&sub2;O (35 ml) wurden zugegeben, es wurde auf Raumtemperatur erwärmt und für 30 min gerührt. Dies wurde zu Et&sub2;O (100 ml) gegeben, die wässrige Schicht wurde entfernt, mit gesättigtem NaHCO&sub3; (3 · 35 ml), H&sub2;O (35 ml) und Salzwasser (35 ml) gewaschen. Die Lösung wurde mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert, um 2,5 g des gewünschten Aldehydprodukts (quantitative Ausbeute) zu ergeben.

Stufe 5:

Eine Lösung des Produkts aus Stufe 4 (2,50 g, 7,2 mmol), N-Methyltryptamin (13,8 mmol) und zerstoßenen 3 Å-Molekularsieben (2,0 g) in CF&sub3;CH&sub2;OH (25 ml) wurde mit NaCNBH&sub3; (1,75 g, 27,8 mmol) behandelt. Es wurde für 1 h gerührt, H&sub2;O (250 ml) zugegeben und mit 2 : 1 CH&sub2;Cl&sub2; : Et&sub2;O (3 · 150 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit Salzwasser (150 ml) gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie des Rohprodukts auf Silikagel, Elution mit 10 : 1 : 0,1 CH&sub2;Cl&sub2; : CH&sub3;OH : NH&sub3; (aq.), ergab 2,5 g des Produkts als weißen Schaum (5,0 mmol, 69%).

Stufe 6:

Das Produkt aus Stufe 5 (4,5 g, 8,9 mmol) wurde mit Trifluoressigsäure (30 ml) für 2 h behandelt und konzentriert. Der Rückstand wurde in gesättigtem NaHCO&sub3; suspendiert und mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden mit Salzwasser gewaschen, mit MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 10 bis 20% NH&sub3; gesättigtem CH&sub3;OH : CH&sub2;Cl&sub2;, ergab 2,0 g des Aminoprodukts als weißen Feststoff (4,9 mmol, 55%).

Stufe 7:

Das Produkt aus Stufe 6 würde in die Titelverbindung umgewandelt, indem ein Verfahren ähnlich dem in Beispiel 2, Stufe 1 beschriebenen und 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure anstelle von 3-Fluor-5-trifluormethylbenzoesäure verwendet wurde. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub0;H&sub3;&sub0;N&sub3;OCl&sub2;F&sub4;]&spplus; 594,1702; gefunden 594,1702.
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 12 und einer geeigneten Säure in Stufe 7, wurden die Verbindungen der folgenden Struktur, in denen VI wie in der Tabelle gezeigt ist, erhalten: Beispiel 13*
3,4-Dichlor-β-(2-oxoethyl)-N-methyl-N-phenylbenzopropanamid (0,53 g) in CH&sub3;OH (35 ml) wurden nacheinander mit Molekularsieb- 3 Å (5,5 g), Isochinolin-HCl (0,33 g) und NaBH&sub3;CN (0,4 g) behandelt. Die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur für 20 h gerührt, durch eine Lage von Celite filtriert und unter reduziertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen 10% NH&sub4;OH-Lösung und CH&sub2;Cl&sub2; (25 ml) verteilt, die organischen Phasen abgetrennt und die wässrige Schicht mit CH&sub2;Cl&sub2; (2 · 25 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Schichten wurden über MgSO&sub4; getrocknet, filtriert und unter reduziertem Druck konzentriert, um ein rohes Öl (0,7 g) zu ergeben. Chromatographie auf Silikagel, Elution mit 2% CH&sub3;OH/CH&sub2;Cl&sub2; ergab die Titelverbindung (0,27 g). Massenspektrum (FAB): 467. Beispiel 14
3-(3,4-Dichlorphenyl)-3-(2-hydroxyethyl)-pyrrolidin wurde in dem Verfahren von Beispiel 12, Stufen 3 bis 7 verwendet, und 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure wurde anstelle von 3-Fluor-5-trimethylbenzoesäure verwendet, um die Titelverbindung zu ergeben. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub3;H&sub3;&sub7;N&sub3;O&sub4;Cl&sub2;]&spplus; 610.2239; gefunden 610,2219. Beispiel 14a
Das Verfahren von Beispiel 14 und 3,5-Dimethoxybenzoesäure anstelle von 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure wurden verwendet, um die Titelverbindung zu ergeben. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub2;H&sub3;&sub6;N&sub3;O&sub3;Cl&sub2;]&spplus; 580.2134; gefunden 580,2116. Beispiel 14b
Das Verfahren von Beispiel 14 und 3,5-Bis(trifluormethyl)- benzoesäure anstelle von 3,4,5-Trimethoxybenzoesäure wurden verwendet, um die Titelverbindung zu ergeben. HRMS (FAB, M + H&spplus;): m/e berechnet für [C&sub3;&sub2;H&sub3;&sub0;N&sub3;OCl&sub2;F&sub6;]&spplus; 656.1670; gefunden 656,1663.
Die folgenden Formulierungen stellen beispielhaft einige erfindungsgemäße Dosierungsformen dar. In jeder bezieht sich der Begriff "aktive Verbindung" auf eine Verbindung der Formel I. BETSPIEL A Tabletten

Methode der Herstellung

Die Bestandteile Nr. 1 und 2 wurden in einem geeigneten Mischer für 10 bis 15 min gemischt. Die Mischung wurde mit Bestandteil Nr. 3 granuliert. Die feuchten Granulate wurden, wenn nötig, durch einen grobes Sieb (z. B. 1/4", 0,63 cm) gemahlen. Die feuchten Granulate wurden getrocknet. Wenn nötig, wurden die getrockneten Granulate gesiebt und dann mit Bestandteil Nr. 4 gemischt und für 10 bis 15 min gemischt. Bestandteil Nr. 5 wurde zugegeben und für 1 bis 3 min gemischt. Die Mischung wurde auf geeignete Größe und Gewicht mit einer geeigneten Tablettiermaschine komprimiert. BEISPIEL B Kapseln

Methode der Herstellung

Die Bestandteile Nr. 1, 2 und 3 wurden in einem geeigneten Mischer für 10 bis 15 min gemischt. Bestandteil Nr. 4 wurde zugegeben und für 1 bis 3 min gemischt. Die Mischung wurde in geeignete zweiteilige Hartgelatine-Kapseln mittels einer geeigneten Einkapselungsmaschine gefüllt. BEISPIEL C
Für die Rekonstitution wurde steriles Wasser für die Injektion oder bakteriostatisches Wasser für die Injektion zugegeben.
Die in vitro und in vivo Aktivität der Verbindungen nach Formel I wurden nach den folgenden Verfahren bestimmt.

In vitro-Verfahren zur Bestimmung der NK&sub1;-Aktivität

Die Testverbindungen wurden auf ihre Fähigkeit, die Aktivität der NK&sub1;-Agonistsubstanz P zu inhibieren, an isolierten Meerschweinchensamenleitern untersucht. Frisch geschnittene Samenleiter wurden von männlichen Hartley-Meerschweinchen (230 bis 350 g) entfernt und in 25 ml Gewebebädern suspendiert, die auf 37ºC erwärmte und konstant mit 95% O&sub2; und 5% CO&sub2; begaste Krebs Henseleit-Lösung enthielten. Die Gewebe wurden auf 0,5 g gebracht, und die Gleichgewichtseinstellung wurde für einen Zeitraum von 30 Minuten ermöglicht. Die Samenleiter wurden einer elektrischen Feldstimulation (Grass S48 Stimulator) alle 60 Sekunden mit einer Intensität ausgesetzt, die das Gewebe zu einer Kontraktion um 80% seiner Maximalkapazität veranlasst. Alle Reaktionen wurden isometrisch mittels eines Grass-Kraftverdrängungsumwandler (FT03) und eines Harvard Electronic Recorders aufgenommen. Substanz P inhibiert die durch ein elektrisches Feld induzierten Kontraktionen der Meerschweinchensamenleiter. In ungepaarten Studien wurden alle Gewebe (Kontrolle und Wirkstoff-behandelte) steigenden Konzentrationen von Substanz P(1 · 10&supmin;¹&sup0; M - 7 · 10&supmin;&sup7; M) ausgesetzt. Einzelne log-Konzentrationen der Testsubstanzen wurden separaten Geweben verabreicht und die Gleichgewichtseinstellung wurde für 30 min ermöglicht, bevor eine Substanz P Konzentration-Reaktionskurve erzeugt wurde. Mindestens 5 separate Gewebe wurden für jede Kontrolle und einzelne Wirkstoffkonzentration bei jeder Wirkstoffassay verwendet.
Die Inhibierung der Substanz P wird durch eine rechtswärtige Verschiebung der Konzentrations-Reaktionskurve angezeigt. Diese Verschiebungen werden verwendet, um den pA&sub2;-Wert zu ermitteln, der als negativer Logarithmus der molaren Konzentration des Inhibitors definiert ist, der es erfordern würde, dass zweimal soviel Agonist verwendet werden müsste, um eine gewählte Reaktion auszulösen. Dieser Wert wird verwendet, um die relative Antagonistwirksamkeit zu bestimmen.

Isolierte Hamster-Tracheen-NK&sub2;-Assay

Die generelle Methologie und Charakterisierung von Hamster- Tracheen-Reaktion auf Neurokinin-Agonisten wie das Liefern eines NK&sub2;-Monorezeptorassays kann in C. A. Maggi, et al., Eur. J. Pharmacol. 166 (1989) 435 und J. L. Ellis, et al., J. Pharm. Exp. Ther. 267 (1993) 95 gefunden werden.
Kontinuierliche isometrische Spannungsmessung wird mit einem Grass FR-03 Kraftverdrängungsumwandler, verbunden mit Buxco Electronics Vorverstärkern, eingebaut in ein Graphtec Linearcorder Modell WR 3310, erhalten.
Männliche Charles river LAK : LVG (SYR) Hamster, 100 bis 200 g Futtergewicht, wurden durch einen scharfen Schlag auf den Kopf betäubt, der Verlust des Cornealreflexes wurde sichergestellt und die Hamster wurden durch Thoraxöffnung und Herausschneiden des Herzens getötet. Cervikale Tracheen-Segmente wurden in Krebs-Puffer bei Raumtemperatur, pH-Wert 7,4, begast mit 95% O&sub2;-5% CO&sub2;-Gas, entfernt und von anhängendem Gewebe gereinigt. Die Segmente wurden in zwei 3 bis 4 mm lange Ringsegmente geschnitten. Die Tracheenringe wurden von Signalgebern suspendiert und in 15,0 ml Wassermantelorganbädern mit Hilfe von Edelstahlhaken und 6-0 Seide verankert. Die Bäder wurden mit Krebs- Puffer, pH-Wert 7,4 gefüllt, bei 37ºC gehalten und kontinuierlich mit 95% O&sub2;-5% CO&sub2;-Gas begast. Die Tracheenringe wurden unter 1,0 g anfänglicher Spannung gebracht und die Gleichgewichtseinstellung wurde über einen Zeitraum von 90 min mit vier 1 uM NKA-Anregungen, Wasch- und Erholungszyklen in 20 min Intervallen ermöglicht. 30 min Trägersubstanzvorbereitung wurde gefolgt von Zugaben von steigenden Mengen an NKA (3 nM-1 uM Endkonzentration, 5 min Intervalle zwischen den Zugaben). Die letzte NKA-Reaktion wurde gefolgt von einem 15minütigen Wasch- und Erholungszeitraum. 30 min Vorbehandlung mit einer Testverbindung oder ihrem Träger wurde gefolgt von kumulativen Zugaben von steigenden Mengen an NKA (3 nM-10 uM Endkonzentration, wenn nötig, 5 min Intervalle zwischen den Zugaben). Die letzte NKA-Reaktion wurde gefolgt von einer 1 mM Carbacholanregung, um die maximale Spannungsreaktion in jedem Gewebe zu erhalten.
Die Gewebereaktion auf NKA wurden als positive Schreiberausschläge über der Basislinie aufgenommen und in Gramm Spannung durch Vergleich mit Standardgewichten konvertiert. Die Reaktionen wurden normalisiert als ein Prozentsatz der maximalen Gewebespannung. ED&sub5;&sub0;-Werte wurden für NKA aus den Kontroll- und den behandelten NKA-Dosisreaktionen berechnet und verglichen. Testverbindungen, die ein Agonist-Dosisverhältnis ≥2 bei einer Untersuchungskonzentration von 1 uM (d. h. pA&sub2; ≥ = 6,0) ergaben, wurden als aktiv angesehen. Weitere Dosisreaktionsdaten wurden für aktive Verbindungen erhalten, so dass eine tendenzielle pA&sub2;- Abschätzung berechnet werden kann. pA&sub2; wird entweder durch Abschätzung von Ki, wie von Furchgott beschrieben (wobei pA&sub2; = -Log Ki, R. F. Furchgott, Pharm. Rev. 7 [1995] 183), oder durch Shild Plot Analyse (O. Arunlakshana & H. O. Shild, Br. J. Pharmacol. 14 [1959] 48) berechnet, wenn die Daten ausreichend sind.

Effekt von NK&sub1;-Antagonisten auf durch Substanz P induzierte Luftwegsmikrovaskularleckagen bei Meerschweinchen

Die Untersuchungen wurden an männlichen Hartley-Meerschweinchen durchgeführt, die ein Gewicht von 400 bis 650 g hatten. Den Tieren wurden Nahrung und Wasser ad libitum zur Verfügung gestellt. Die Tiere wurden durch intraperitoneale Injektion von Dialurethan (enthaltend 0,1 g/ml Diallylbarbitursäure, 0,4 g/ml Ethylurea und 0,4 g/ml Urethan) anästhesiert. Die Trachee wurde direkt unter dem Larynx kanülisiert und die Tiere wurden mit einem Harvard-Nagetierbeatmer beatmet (VT = 4 ml, f = 45 Atemzüge/min). Die Jugularvene wurde für die Injektion von Wirkstoffen kanülisiert.
Die Evans Blue-Färbetechnik (G. Danko, et al., Pharmacol. Commun., 1, 203-209, 1992) wurde zur Messung der Atemwegsmikrovaskularleckage (AML) verwendet. Evans Blue (30 mg/kg) wurde intravenös injiziert, 1 min später gefolgt von intravenöser Injektion von Substanz P (10 ug/kg). 5 min später wurde der Thorax geöffnet und eine stumpfendige 13-Guage Nadel in die Aorta geführt. Ein Einschnitt wurde in das rechte Atrium vorgenommen und Blut durch Spülen von 100 ml Salzlösung durch den Aortakatheter ausgestoßen. Die Lungen und Tracheen wurden enbloc entfernt und die Tracheen und Bronchien wurden dann mit Filterpapier trockengetupft und gewogen. Evans Blue wurde durch Inkubation des Gewebes bei 37ºC für 18 h in 2 ml Formamid in zugepfropften Röhrchen extrahiert. Die Absorption der Formamidextrakte der Farbe wurde bei 620 nm gemessen. Die Menge an Farbe wurde durch Interpolation von einer Standardkurve von Evans Blue im Bereich 0,5 bis 10 ug/ml in Formamid berechnet. Die Farbkonzentration wurde ausgedrückt als ng Farbe pro mg Gewebefeuchtgewicht. Die Testverbindungen wurden in Cyclodextranträger suspendiert und intravenös 5 min vor Substanz P gegeben.

Messung der NK&sub2;-Aktivität in vivo

Männliche Hartley-Meerschweinchen (400 bis 500 g) mit ad libitum Zugang zu Nahrung und Wasser wurden mit einer intraperitonealen Injektion von 0,9 ml/kg Dialurethan (enthaltend 0,1 g/ml Diallylbarbitursäure, 0,4 g/ml Ethylharnstoff und 0,4 g/ml Urethan) anästhesiert. Nach Einführung einer chirurgischen Anästhesiefläche, wurden Tracheal-, Esophageal- und Jugularvenenkanülen implantiert, um die mechanische Beatmung, die Messung des esophagenalen Drucks und die Verabreichung von Wirkstoffen zu vereinfachen.
Die Meerschweinchen wurden in einen Ganzkörperplethysmographen plaziert und die Katheter mit Auslassanschlüssen in der Plethysmographenwand verbunden. Der Luftfluss wurde unter Verwendung eines Differentialdruckumwandlers (Validyne, Northridge CA, Modell MP45-1, Bereich ±2 cm H&sub2;O) gemessen, der den Druck über einem Netzschirm misst, der ein 1 Inch-Loch in der Wand des Plethysmographen bedeckt. Das Luftflusssignal wird elektrisch zu einem Signal proportional zu Volumen integriert. Der transpulmonare Druck wird als Druckdifferenz zwischen der Trachee und dem Esophagus unter Verwendung eines Differentialdruckumwandlers (Validyne, Northridge, CA, Modell MP45-1, Bereich ±20 cm H&sub2;O) gemessen. Die Volumen-, Luftfluss- und transpulmonaren Drucksignale werden mittels eines Pulmonaranalysecomputers (Buxco Electronics, Sharon, CT, Modell 6) verfolgt und zur Ableitung des pulmonaren Widerstandes (RL) und der dynamischen Lungenerfüllung (CDyn) verwendet.

Verengung der Bronchien infolge von NKA

Steigende intravenöse Dosen von NKA wurden in logarithmischen (0,01 bis 3 ug/kg) Intervallen verabreicht, wobei die Wiederherstellung der pulmonaren Mechanik zwischen zwei Dosen bis zur Basislinie erlaubt wurde. Die maximale Bronchienverengung tritt innerhalb von 30 Sekunden nach jeder Gabe von Agonist auf. Die Dosisreaktion wurde gestoppt, wenn CDyn 0 bis 90% von der Basislinie reduziert war. Eine Dosisreaktion auf NKA wurde bei jedem Tier durchgeführt. Die Testverbindungen wurden in Cyclodextranträgern suspendiert und intravenös 5 min vor der Initiierung der NKA-Dosisreaktion verabreicht.
Für jedes Tier wurden Dosisreaktionskurven auf NKA durch Auftragung von Prozentanstieg an RL oder Abfall an CDyn gegen den Logarithmus der Dosis des Antagonisten aufgezeichnet. Die Dosen an NKA, die RL um 100% erhöhten (RL100) oder CDyn um 40% (CDyn40) senkten, ausgehend von den Basiswerten, wurden durch log-lineare Interpolation der Dosisreaktionskurven erhalten.

Neurokinin-Rezeptor-Bindungsassay(s)

Chinesische Hamsterovarien (CHO)-Zellen, die mit den Kodierungsregionen für das humane Neurokinin 1 (NK1) des humanen Neurokinin (NK2)-Rezeptors transfektiert waren, wurden in Dulbecco's minimal essentiellem Medium, ausgestattet mit 10% fötalem Kälberserum, 0,1 mM nicht-essentiellen Aminosäuren, 2 mM Glutamin, 100 Einheiten/ml Penicillin und Streptomycin, und 0,8 mg G418/ml bei 37ºC in einer feuchten Atmosphäre, die 5% CO&sub2; enthielt, aufgezogen.
Die Zellen wurden aus T-175 Kolben mit einer sterilen Lösung, die 5 mM EDTA in Phosphat-gepufferter Salzlösung enthielten, abgelöst. Die Zellen wurden durch Zentrifugieren und Waschen in RPMI Medium bei 40ºC für 5 min geerntet. Das Pellet wurde in Tris-HCl (pH-Wert 7,4) enthaltend 1 uM Phosphoramidon und 4 ug/ml Chymostatin bei einer Zelldichte von 30 · 10&sup6; Zellen/ml resuspendiert. Die Suspension wurde dann in einem Brinkman-Polytron (Einstellung 5) für 30 bis 45 Sekunden homogenisiert. Das Homogenisat wurde bei 800 · g für 5 min bei 4ºC zentrifugiert, um ungebrochene Zellen und Kerne zu sammeln. Der Überstand wurde in einer Sorvall RC5C bei 19.000 UpM (4.400 · g) für 30 min bei 4ºC zentrifugiert. Der Pellet wurde resuspendiert, ein Aliquot wurde für eine Proteinbestimmung (BCA) entfernt und erneut gewaschen. Der resultierende Pellet wurde bei -80ºC gelagert.
Um die Rezeptorbindung zu untersuchen, wurden 50 ul von [³H]-Substanz P (9-Sar, 11-Met [02]) (spezifische Aktivität 41 Ci/mmol) (Dupont-NEN) (0,8 nM für NK-1-Untersuchung) oder [³H]-Neurokinin A (spezifische Aktivität 114 Ci/mmol) (Zenca) (1,0 nM für die NK-2-Untersuchung) in Röhren gegeben, die Puffer (50 mM Tris-HCl (pH-Wert 7,4) mit 1 mM MnCl&sub2; und 0,2% Rinderserumalbumin) und entweder DMSO oder Testverbindung enthielten. Die Bindung wurde durch Zugabe von 100 ul Membran (10 bis 20 ug), die den Human-NK-1- oder -NK-2-Rezeptor in einem Endvolumen von 200 ul enthielt, initiiert. Nach 40 min bei Raumtemperatur wurde die Reaktion durch schnelle Filtration mit Whatman GF/C-Filter, die mit 0,3% Polyethylenimin vorgetränkt waren, abgebrochen. Die Filter wurden zweimal mit 3 ml 50 mM Tris-HCl (pH-Wert 7,4) gewaschen. Die Filter wurden zu 6 ml von Ready- Safe Flüssigscintillationscocktail gegeben und durch Flüssigscintillationsspektrometrie in einem LKB 1219 RackBeta-Zähler quantifiziert. Nicht-spezifische Bindung wird durch die Zugabe von entweder 1 uM von CP-99994 (NK-1) oder 1 uM SR-48968 (NK-2) (beide synthetisiert durch die Chemieabteilung des Schering- Plough Research Instituts) bestimmt. IC&sub5;&sub0;-Werte wurden aus vergleichenden Bindungskurven bestimmt, und Ki-Werte wurden gemäß Cheng und Prusoff unter Verwendung der experimentell bestimmten Werte 0,8 nM für den NK-1-Rezeptor und 2,4 nM für den NK-2-Rezeptor bestimmt.
Die NK&sub3;-Aktivität wurde durch das folgende Verfahren entsprechend dem in der Literatur beschriebenen, z. B. Molecular Pharmacol., 48 (1995), S. 711-716, bestimmt.
%- Inhibierung ist die Differenz zwischen dem Prozentsatz an maximaler spezifischer Bindung (MSB) und 100%. Der Prozentsatz an MSB ist durch die folgende Gleichung definiert, wobei "dpm" Auflösungen pro Minute meint:
Es wird erkannt werden, dass Verbindungen der Formel I NK&sub1;-, NK&sub2;- und/oder NK&sub3;-Antagonistaktivität unterschiedlichen Grades zeigen, z. B., haben bestimmte Verbindungen starke NK&sub1;-Antagonistaktivität, aber schwächere NK&sub2;- und NK&sub3;-Antagonistaktivität, während andere starke NK&sub2;-Antagonisten sind, aber schwächere NK&sub1;- und NK&sub3;-Antagonisten. Während Verbindungen mit ungefähr gleicher Wirksamkeit bevorzugt sind, liegt es ebenfalls im Bereich der Erfindung, Verbindungen zu verwenden, die ungleiche NK&sub1;/NK&sub2;/NK&sub3;- Antagonistaktivität haben, wenn dies klinisch geeignet ist.
Unter Verwendung der oben beschriebenen Testverfahren wurden die folgenden Daten (% Inhibierung oder Ki) für bevorzugte und/oder repräsentative Verbindungen der Formel I erhalten:
Verbindungen der vorliegenden Erfindung zeigen einen Bereich der Aktivität: Der Prozentsatz der Inhibierung bei einer Dosis von 1 uM reicht von etwa 0 bis etwa 100% Inhibierung von NK&sub1; und/oder etwa 0 bis etwa 100% Inhibierung von NK&sub2;. Bevorzugt sind Verbindungen, die ein Ki ≤ 100 nN für den NK&sub1;-Rezeptor haben. Ebenfalls bevorzugt sind Verbindungen, die ein Ki ≤ 100 nM für den NK&sub2;-Rezeptor haben. Eine weitere Gruppe von bevorzugten Verbindungen sind die, die ein Ki ≤ 100 nM für sowohl die NK&sub1;- als auch die NK&sub2;-Rezeptoren haben.

Claims

1. Verbindung, repräsentiert durch die Strukturformel

oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon, bei der:

A¹, A², A³ und A&sup4; zusammen mit dem Phenylring, an den sie gebunden sind,

bilden;

E R³-Phenyl ist;

W R&sup4;-Cycloalkyl, R&sup4;-Aryl oder R&sup4;-Heteroaryl ist;

R¹, R², R³ und R&sup4; unabhängig 1 bis 3 Substituenten unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus H, Halogen, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl, -CF&sub3;, -OR¹¹, -COR¹¹, -CO&sub2;R¹¹, -CON(R¹¹)(R¹²) und -N(R¹¹)(R¹²) sind;

R&sup5; R&sup7;, R&sup9;, R¹¹, R¹² und R¹&sup4; unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl und -CF&sub3;;

R&sup6; und R&sup8; jeweils Wasserstoff sind, oder R&sup8; Wasserstoff und R&sup6; -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))n-CO&sub2;R¹¹ ist;

R¹&sup0; unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl;

R¹³ unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl und R¹&sup5;-Phenyl;

R¹&sup5; Wasserstoff, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkoxy oder Halogen ist;

Q -NR¹&sup7;- ist;

R¹&sup6; und R¹&sup7; unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl und C&sub2;- bis C&sub6;-Alkenyl;

Y¹ -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;)m- oder -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))mG- ist;

G ist

unter der Voraussetzung, dass, wenn m 0 ist, R² H, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl, -CF&sub3;, -COR¹¹, -CO&sub2;R oder -CON(R¹¹)(R¹²) ist;

unter der Voraussetzung, dass, wenn p 0 ist, T nicht OH oder -NR¹¹R¹² ist;

unter der Voraussetzung, dass, wenn r 1 ist, T nicht OR¹¹ oder -NR¹¹R¹² ist; oder

unter der Voraussetzung, dass T nicht OR¹¹, N(R¹¹)(R¹²), -S(O)eR¹³, -NR¹¹CO&sub2;R¹³, -NR¹¹COR¹², -NR¹¹- CON(R¹²)(R¹&sup4;) oder -OC(O)N(R¹¹)(R¹²);

T H, R¹&sup5;-Aryl, R¹&sup5;-Heterocycloalkyl, R¹&sup5;-Heteroaryl, R¹&sup5;-Cy- cloalalkyl, -OR¹¹, N(R¹¹)(R¹²), -COR¹¹, -CO&sub2;R¹¹, -CON(R¹¹)(R¹²), -S(O)eR¹³, -NR¹¹CO&sub2;R¹³, -NR¹¹COR¹², -NR¹¹CON(R¹²)(R¹&sup4;) oder OC(O)- N(R¹¹)(R¹²) ist;

J -O-, -N(Z²)- oder -N(Z²)C(O)- ist;

Y² -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))m ist;

Z¹ H ist; Z² H, C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl, R¹&sup5;-Phenyl, R¹&sup5;-Benzyl, -CF&sub3; oder -C&sub2;F&sub5; ist; oder Z¹ und Z² zusammen -(C(R&sup9;)(R¹&sup0;))u- sind, wobei u 1 bis 4 ist, und wobei diese mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 4- bis 8-gliedrigen Ring bilden;

e und n unabhängig 0, 1 oder 2 sind;

m und p unabhängig 0, 1, 2 oder 3 sind; und

r und s unabhängig 1, 2, 3 oder 4 sind;

wobei "Aryl" Phenyl, Naphthyl, Indenyl, Tetrahydronaphthyl, Indanyl, Anthracenyl und Fluorenyl repräsentiert; "Heterocycloalkyl" sich auf 4- bis 6-gliedrige gesättigte Ringe bezieht, die 1 bis 3 Heteroatome unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -O-, -S- und -N(R¹&sup6;)- enthalten, bei denen die verbleibenden Ringbestandteile Kohlenstoff sind; und "Heteroaryl" sich auf 5- bis 10-gliedrige einzelne oder benzoannelierte aromatische Ringe bezieht, die 1 bis 4 Heteroatome enthalten, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus -O-, -S- und -N= , unter der Voraussetzung, dass die Ringe nicht benachbarte Sauerstoff- und/oder Schwefelatome enthalten.

2. Verbindung nach Anspruch 1, bei der Z¹ Wasserstoff ist oder Z¹ und Z² zusammen Ethylen oder Propylen sind und zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6- gliedrigen Ring bilden.

3. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus

und einer Verbindung der Formel

in der W

ist.

4. Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine wirksame Menge einer Verbindung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche in einem pharmazeutisch akzeptablen Träger enthält.

5. Verwendung einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Asthma, Husten, Bronchiospasmen, Erkrankungen des zentralen Nervensystems, Entzündungskrankheiten und gastrointestinalen Erkrankungen.