DE69620691T2

DE69620691T2 - Therapeutisches Mittel zur Behandlung der Hypercholesterinämie

Info

Publication number: DE69620691T2
Application number: DE69620691T
Authority: DE
Inventors: Mutsunori Fujiwara; Toru Hiyoshi; Shinzo Makita
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1995-06-15
Filing date: 1996-06-12
Publication date: 2002-11-21
Anticipated expiration: 2016-06-13
Also published as: EP0759294A2; EP0759294A3; EP0759294B1; JPH092947A; JP2750281B2; US5849787A; US5705526A; DE69620691D1

Description

Bezugnahme auf die Erfindung betreffende Patente, Anmeldungen und Veröffentlichungen
Soweit uns bekannt, sind die folgenden, die vorliegende Erfindung betreffenden Dokumente des Standes der Technik verfügbar:
(1) SilverPlatter v 2.15 MEDLINE (R) 1991, 12 von 23 Carcinogenesis. 1991 Nov. 12(11), S. 2109-2114; und
(2) SilverPlatter v 2.15 MEDLINE (R) 1992 14 von 27, Free-Radio-Biol-Med. 1992 Okt. 13(4), S. 407-433.
Der Inhalt des in den im vorhergehenden genannten Dokumenten des Standes der Technik offenbarte Stand der Technik wird im folgenden unter der Überschrift "HINTERGRUND DER ERFINDUNG" diskutiert.

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

(Gebiet der Erfindung)

Die vorliegende Erfindung betrifft ein therapeutisches Mittel für Hypercholesterinämie.

(Feststellung verwandter Technik)

Hypercholesterinämie ist eine Krankheit, bei der die Cholesterinkonzentration im Blut kontinuierlich ausnehmend hoch ist, und sie ist ein wichtiger Faktor, der eine arteriosklerotische Veränderung in verschiedenen Organen beschleunigt. Eine schwere Hypercholesterinämie verursacht ernsthafte Komplikationen einschließlich von ischämischen Herzerkrankungen, wie Myokardinfarkt, Hirninfarkt und Hirnhämorrhagie, die durch eine cerebrale Arteriosklerose verursacht ist, und ein Gangrän der unteren Extremitäten, das durch eine die unteren Extremitäten zerstörende Arteriosklerose verursacht ist, und dergleichen.
Bei Hypercholesterinämie wird ein langer Zeitraum des kontinuierlichen Vorliegens einer Gesamtcholesterinkonzentration von mindestens 220 mg/dl in Serum als eine arteriosklerotische Veränderung beschleunigend angesehen. Der größte Teil des Cholesterins im Blut liegt in den Formen Low-Density- Lipoprotein (LDL), High-Density-Lipoprotein (HDL), Very-Low- Density-Lipoprotein (VLDL) und Chylomicron vor und der Restliegt in Form von freiem Cholesterin vor. Die im vorhergehenden genannte Gesamtcholesterinkonzentration bedeutet die Gesamtcholesterinmenge, die erhalten wird, wenn alle im vorhergehenden genannten Formen von Cholesterin in die Form von freiem Cholesterin umgewandelt werden.
Insbesondere übt die Konzentration der Low-Density-Lipoprotein(LDL)-Fraktion im Blut eine große Wirkung auf eine arteriosklerotische Veränderung aus. Es ist ferner bekannt, dass Schaumzellen in einem Anfangsherd von Arteriosklerose beobachtet werden. Low-Density-Lipoprotein (LDL) ist eine essentielle Substanz, die von LDL-Rezeptoren in periphere Gewebe von Herz, Muskeln und dergleichen eingebaut wird, um als Material für eine Zellmembran zu dienen. Wenn Low-Density- Lipoprotein (LDL), das sich gerne an Blutgefäßwänden abscheidet, jedoch im Überschuss vorhanden ist und sich dort ansammelt, wird es in Makrophagen eingebaut und es bewirkt eine Veränderung von Makrophagen zu Schaumzellen, was daher zur Bildung eines Arterioskleroseherds führt.
Die derzeit in der Praxis angewandten therapeutischen Mittel für Hypercholesterinämie umfassen:
(1) einen Hydroxymethylglutaryl-CoA(HMG-CoA)-Reduktaseinhibitor (beispielsweise Pravastatin), der die Synthese von Cholesterin einschränkt,
(2) Probucol, das hauptsächlich den Katabolismus von Cholesterin zu einer Gallensäure und deren Ausscheidung fördert,
(3) ein Anionenaustauscherharz, das hauptsächlich die Absorption von Cholesterin einschränkt und die Ausscheidung einer Gallensäure (beispielsweise Cholestyramin) fördert, und
(4) ein Arzneimittel des Clofibrat-Typs (beispielsweise Clofibrat).
Bei der Verwendung dieser therapeutischen Mittel ist es jedoch, da feine Unterschiede zwischen adaptiven Symptomen bezüglich dieser therapeutischen Mittel in Abhängigkeit von der Art der Hypercholesterinämie bestehen, notwendig, in passender Weise ein therapeutisches Mittel, das für das spezielle adaptive Symptom am wirksamsten ist, auszuwählen. Die Auswahl des wirksamen therapeutischen Mittels sollte auch in Reaktion auf das Auftreten von Komplikationen und Nebenwirkungen, die bei der Verwendung des therapeutischen Mittels auftreten können, erfolgen. Wenn ein Symptom durch eine einzige Art eines therapeutischen Mittels nicht ausreichend bekämpft werden kann, sollten ferner eine Mehrzahl von therapeutischen Mitteln mit unterschiedlichen Wirkungsmechanismen in Kombination verwendet werden.
Unter diesen Umständen besteht ein starker Bedarf nach der Entwicklung eines neuen therapeutischen Mittles für Hypercholesterinämie mit der Fähigkeit zur Überwindung der im vorhergehenden genannten Probleme, doch wurde ein solches therapeutisches Mittel für Hypercholesterinämie noch nicht vorgeschlagen.
Ein wirksamer Hauptbestandteil des erfindungsgemäßen therapeutischen Mittels für Hypercholesterinämie ist, wie später beschrieben, Lycopin, und die folgenden Dokumente sind im Hinblick auf Lycopin als Dokumente des Standes der Technik verfügbar:
(1) SilverPlatter v 2.15 MEDLINE (R) 1991, 12 von 23 Carcinogenesis. 1991 Nov. 12(11), S. 2109-2114 (im folgenden als "Stand der Technik 1" bezeichnet); und
(2) SilverPlatter v 2.15 MEDLINE (R) 1992 14 von 27, Free-Radio-Biol-Med. 1992 Okt. 13(4), S. 407-433 (im folgenden als "Stand der Technik 2" bezeichnet).
Stand der Technik 1 und 2 offenbaren jedoch nur die Erkenntnisse, dass Lycopin, das eine Art der Carotinoide ist, in einem Organismus als Radikalfänger wie die anderen Carotinoide zur Desaktivierung von aktivem Sauerstoff dient und das Auftreten einer Gewebeschädigung oder von Krebs, die durch aktiven Sauerstoff verursacht sind, verhindert.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist daher die Bereitstellung einer neuen Verwendung von Lycopin in Kombination mit anderen Verbindungen bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Hypercholesterinämie.
Gemäß einem der Merkmale der vorliegenden Erfindung erfolgt die Bereitstellung einer neuen Verwendung von Lycopin als wirksamer Bestandteil wie in Anspruch 1 beansprucht.

DETAILLIERTE BESCHREIBUNG BEVORZUGTER AUSFÜHRUNGSFORMEN

Von obigem Gesichtspunkt aus wurden intensive Untersuchungen durchgeführt, um ein von Nebenwirkungen freies therapeutisches Mittel für Hypercholesterinämie zu entwickeln.
Infolgedessen wurden die folgenden Erkenntnisse während des Verlaufs einer Untersuchung der physiologischen Wirkung von Lycopin erhalten: die Cholesterinkonzentration im Blut wird verringert, wenn Lycopin an einen Organismus verabreicht wird und insbesondere nimmt die Konzentration von Low-Density- Lipoprotein (LDL) in Blut, das einen großen Einfluss auf eine arteriosklerotische Veränderung hat, unter anderen Cholesterin enthaltenden Lipoproteinarten beträchtlich ab.
Die vorliegende Erfindung wurde auf der Basis der im vorhergehenden genannten Erkenntnisse gemacht und ein gemäß der vorliegenden Erfindung herzustellendes therapeutisches Mittel für Hypercholesterinämie ist dadurch gekennzeichnet, dass es Lycopin als wirksamen Bestandteil enthält.
Wenn Lycopin an einen Organismus verabreicht wird, besitzt es die Funktion einer beträchtlichen Verminderung der Cholesterinkonzentration im Blut. Insbesondere weist Lycopin die Funktion einer beträchtlichen Verminderung der Konzentration von Low-Density-Lipoprotein (im folgenden als "LDL" bezeichnet) in Blut, das einen großen Einfluss auf eine arteriosklerotische Veränderung besitzt, uner anderen Arten von Cholesterin enthaltendem Lipoprotein auf. Lycopin ist daher sehr wichtig als wirksamer Bestandteil eines therapeutischen Mittels für Hypercholesterinämie. Lycopin besitzt andererseits die Eigenschaft, dass es gerne sehr leicht oxidiert wird.
Lycopin, das ein wirksamer Bestandteil des gemäß der vorliegenden Erfindung herzustellenden therapeutischen Mittels für Hypercholesterinämie ist, ist eine bekannte Substanz und es lässt sich durch die folgende chemische Formel darstellen:
Lycopin ist in großer Menge im allgemeinen in vollreifem Obst, insbesondere in einer vollreifen Tomate enthalten. Als Verfahren zur Gewinnung von Lycopin ist ein als Lösemittelextraktionsverfahren bezeichnetes Verfahren bekannt, das üblicherweise die Verwendung einer vollreifen Tomate als Ausgangsmaterial und die Extraktion von Lycopin aus dieser durch die Verwendung eines Lösemittels, wie Ethylacetat, normales Hexan oder Aceton, umfasst.
Lycopin kann direkt an einen Organismus verabreicht werden. Lycopin kann auch entsprechend formuliert werden und das formulierte Lycopin kann auf einem von verschiedenen Wegen an einen Organismus verabreicht werden. Bei Bedarf können ferner ein Streckmittel, ein Bindemittel, ein den Zerfall förderndes Mittel, ein Glanzmittel, ein Überzugsmittel, ein Emulgator, ein Dispergiermittel, ein Lösemittel oder ein Stabilisator Lycopin zur Formulierung zu einem Weichkapselarzneimittel zugesetzt werden.
Das ein Weichkapselarzneimittel umfassende therapeutische Mittel für Hypercholesterinämie umfasst eine weiche Kapsel, die Gelatine und Glycerin umfasst, und den Inhalt dieser Weichkapsel, der Lycopin, β-Karotin, α-Karotin, d-α-Tocopherol und ein Gemisch von einem Weizenkeimöl und einem pflanzlichen Öl umfasst.
Es reicht aus, Lycopin oral in einer Menge innerhalb eines Bereichs von 1-25 mg pro Tag pro Erwachsenem zu verabreichen, wobei diese Menge in Abhängigkeit vom Symptom entsprechend erhöht oder vermindert wird. Die Menge bei der oralen Verabreichung von Lycopin sollte vorzugsweise im Bereich von 3-15 mg pro Tag pro Erwachsenem liegen. Bei einer Menge der oralen Verabreichung von unter 1 mg ist keine gewünschte Wirkung erreichbar. Auch mit einer Menge der oralen Verabreichung von über 25 mg ist andererseits die Funktion von Lycopin zur beträchtlichen Verringerung der LDL-Konzentration in Blut gesättigt. Bei Verabreichung an einen großen Organismus kann die Menge der oralen Verabreichung von Lycopin im Bereich von 1-50 mg pro Tag liegen.
In dem Weichkapselwirkstoff besitzen die zusammen mit Lycopin verwendeten β-Karotin, α-Karotin und d-α-Tocopherol die Funktion der Komplementierung der Funktion von Lycopin zur beträchtlichen Verminderung der LDL-Konzentration in Blut und sie besitzen auch die Funktion der Verhinderung einer Oxidation von Lycopin durch in das Weichkapselarzneimittel gemischten Sauerstoff.
Die Menge der oralen Verabreichung von β-Karotin liegt im Bereich von 1-12,5 mg pro Tag pro Erwachsenem. Die Menge der oralen Verabreichung von α-Karotin liegt im Bereich von 1-12,5 mg pro Tag pro Erwachsenem. Die Menge der oralen Verabreichung von d-α-Tocopherol liegt im Bereich von 1-17 mg pro Tag pro Erwachsenem.
Das Gemisch aus Weizenkeimöl und einem pflanzlichen Öl besitzt die Funktion der Verbesserung der Fluidität des Inhalts des Weichkapselarzneimittels. Die Menge des Gemischs aus dem Weizenkeimöl und dem pflanzlichen Öl kann in Abhängigkeit von der Größe einer weichen Kapsel entsprechend eingestellt werden.
Bei der im vorhergehenden genannten Verabreichung von Lycopin liegt die Menge von Lycopin in dem Weichkapselarzneimittel üblicherweise im Bereich von 1-25 mg, während die Menge des Inhalts des Weichkapselarzneimittels, wenn das Weichkapselarzneimittel verwendet wird, in Abhängigkeit von der Größe der weichen Kapsel variiert. Die Menge von Lycopin in dem Weichkapselarzneimittel, die an einen großen Organismus verabreicht wird, kann im Bereich von 1-50 mg liegen.
Die Menge an β-Karotin in dem Weichkapselarzneimittel liegt im Bereich von 1-12,5 mg. Die Menge von α-Karotin in dem Weichkapselarzneimittel liegt im Bereich von 1-12,5 mg. Die menge von d-α-Tocopherol in dem Weichkapselarzneimittel liegt im Bereich von 1-17 mg.
Nun wird das gemäß der Erfindung herzustellende therapeutische Mittel für Hypercholesterinämie detailliert mittels eines Beispiels weiter beschrieben.

BEISPIEL

Eine Lycopinstammlösung wurde gemäß dem folgenden Verfahren hergestellt und dann wurde ein Lycopin enthaltendes Weichkapselarzneimittel hergestellt:

(1) Herstellung einer Lycopinstammlösung (d. h. 5% Lycopin enthaltendes Ölharz):

Zunächst wurden aus Israel stammende vollreife Tomaten zerkleinert und Tomatenöl und in dem Tomatenöl gelöstes Lycopin unter Verwendung von Ethylacetat als Lösemittel zusammen extrahiert. Dann wurde Ethylacetat aus der erhaltenen Extraktionslösung abgedampft, um eine Lycopinstammlösung mit der folgenden chemischen Zusammensetzung herzustellen:
Lycopin 5 Gew.-% und
Tomatenöl 95 Gew.-%.

(2) Herstellung eines Lycopin enthaltenden Weichkapselarzneimittels:

Zunächst wurden Ausgangsmaterialien so abgewogen, dass die folgenden Gewichtsverhältnisse erreicht wurden, und diese Ausgangsmaterialien wurden gemischt, um den Inhalt eines Weichkapselarzneimittels herzustellen:
Weizenkeimöl: 257 mg
Vitamin E enthaltendes Sojabohnenöl: 8 mg
Lycopinstammlösung: 30 mg und
Palmölkarotin (β-Karotin und α-Karotin enthaltend): 5 mg
insgesamt: 300 mg.
Andererseits wurde mit Wasser versetzte essbare Gelatine zum Schmelzen derselben erhitzt und die entstandene Schmelze wurde mit Glycerin gemischt, um ein Ausgangsmaterial für eine weiche Kapsel herzustellen.
Dann wurde unter Zufuhr einer dünnen Lage, die aus dem im vorhergehenden genannten Ausgangsmaterial für eine weiche Kapsel hergestellt worden war, zu einer Tischeinkapselungsmaschine der im vorhergehenden genannten Inhalt des Weichkapselarzneimittels der auf diese Weise hergestellten dünnen Lage mittels einer Messpumpe oben zugeführt, so dass auf diese Weise ein Lycopin enthaltendes Weichkapselarzneimittel hergestellt wurde. Das enstandene Weichkapselarzneimittel besaß die folgende chemische Zusammensetzung:
Chemische Zusammensetzung des Inhalts pro Teil:
Lycopin: 1,5 mg,
β-Karotin: 1,0 mg,
α-Karotin: 0,5 mg
d-α-Tocopherol: 5,0 mg und
Gemisch aus Weizenkeimöl und pflanzlichem Öl: 292,0 mg,
insgesamt: 300,0 mg,
und
chemische Zusammensetzung der weichen Kapsel pro Teil:
Gelatine: 127,5 mg und
Glycerin: 22,5 mg,
insgesamt: 150,0 mg.
In diesem Beispiel wurden β-Karotin, α-Karotin und d-α- Tocopherol als Antioxidantien zugesetzt.

(3) Verabreichungstest:

Ein Test wurde durch Verabreichen des in diesem Beispiel erhaltenen, Lycopin enthaltenden Weichkapselarzneimittels an gesunde Erwachsene durchgeführt. Der Test wurde an insgesamt 19 Personen angewandt, die zehn männliche Personen (mittleres Alter 52,1, mittlere Größe 166,1 cm und mittleres Gewicht 69,15 kg) und neun weibliche Personen (mittleres Alter 50,0, mittlere Größe 155,67 cm und mittleres Gewicht 58,5 kg) umfassten.
Zwei Teile des Weichkapselarzneimittels wurden zweimal täglich am Morgen und Abend (was zu einer Lycopinverabreichungsmenge von 3 mg bei einer Verabreichung und 6 mg pro Tag führte) an jede dieser 19 Personen über einen Zeitraum von 29 Tagen verabreicht.
Vor Beginn der Verabreichung und nach Beendigung der Verabreichung wurden Blutproben von jeder dieser 19 Personen zur Durchführung einer chemischen Blutuntersuchung genommen. Die Inspektionspunkte umfassten die jeweiligen Konzentrationen von Lycopin, LDL, High-Density-Lipoprotein (im folgenden als "HDL" bezeichnet) und Gesamtcholesterin in Serum. Die Lycopinkonzentration wurde durch das HPLC-Verfahren (Abkürzung für Hochleistungsflüssigkeitschromatographieverfahren) ermittelt. Die LDL-Konzentration wurde durch das Heparin-Ca²&spplus;- Fällverfahren ermittelt. Die HDL-Konzentration wurde durch das Polyanionfällverfahren ermittelt. Die HDL-Konzentration war ein durch Umwandeln der Konzentration von in der HDL- Fraktion enthaltenem Cholesterin in die Konzentration von freiem Cholesterin berechneter Wert. Die Gesamtcholesterinkonzentration wurde durch das Sauerstoffverfahren ermittelt. Die Gesamtcholesterinkonzentration war ein durch Umwandeln der Konzentration des in den gesamten Fraktionen in Serum enthaltenen Cholesterins in eine Konzentration von freiem Cholesterin berechneter Wert.
Tabelle 1 zeigt eine Übersicht über die Personen und Tabelle 2 die Ergebnisse der chemischen Blutuntersuchungen vor dem Beginn der Verabreichung und nach der Beendigung der Verabreichung. Die Abkürzungen in Tabelle 2 besitzen die folgenden Bedeutungen:
reti-p = Retinolpalmitat,
GOT = Glutaminsäure-Oxalessigsäuretransaminase,
GPT = Glutaminsäure-Brenztraubensäuretransaminase,
LDH = Lactatdehydrogenase,
AIP = alkalische Phosphatase,
γ-GTP = Glutamyltransferase,
BUN = Blutharnstoffstickstoff und
VLDL = Very-Low-Density-Lipoprotein. TABELLE 1 TABELLE 2(1) TABELLE 2 (2)
Gemäß den Ergebnissen des Verabreichungstests nahm die LDL- Konzentration in Serum, wie in Tabelle 2(1) angegeben, die vor Beginn der Verabreichung 541,16 ± 159,0 mg/dl betrug, nach Beendigung der Verabreichung auf 510,16 ± 153,67 mg/dl ab. Mit anderen Worten war die LDL-Konzentration in Serum um 31 mg/dl im Mittel, d. h. um etwa 5,5% im Mittel, bezogen auf die LDL-Konzentration im Serum vor dem Beginn der Verabreichung unter der Wirkung der Verabreichung von Lycopin vermindert. Für diese Ergebnisse wurde beim Student-t-Test ein deutlicher Unterschied mit dem Signifikanzniveau P < 0,05% beobachtet.
Andererseits nahm die HDL-Konzentration in Serum, wie in Tabelle 2(1) angegeben, die vor dem Beginn der Verabreichung 52,32 ± 12,39 mg/dl betrug, nach der Beendigung der Verabreichung auf 56,74 ± 13,02 mg/dl zu. Mit anderen Worten zeigte die HDL-Konzentration in Serum unter der Wirkung der Verabreichung von Lycopin eine steigende Tendenz. Ferner verminderte sich die Gesamtcholesterinkonzentration in Serum, wie ebenfalls in Tabelle 2(1) angegeben, die vor dem Beginn der Verabreichung 207,05 ± 32,42 mg/dl betrug, auf 205,47 ± 32,24 mg/dl nach der Beendigung der Verabreichung. Mit anderen Worten zeigte die Gesamtcholesterinkonzentratin in Serum unter der Wirkung der Verabreichung von Lycopin eine abnehmende Tendenz. Das Auftreten von Nebenwirkungen wurde nicht beobachtet.
Aus den im vorhergehenden genannten Ergebnissen ist klar zu erkennen, dass Lycopin die Konzentration im Blut von LDL, das die Funktion der Übermittlung von Cholesterin in periphere Gewebe zur Erhöhung der Cholesterinmenge in Blut besaß, beträchtlich verminderte, und gleichzeitig, dass Lycopin die Konzentration in Blut von HDL, das die Funktion der Übermittlung von Cholesterin von peripheren Geweben zur Leber, um die Menge von Cholesterin im Blut zu vermindern, erhöhte, wodurch Lycopin tatsächlich die Gesamtmenge von Cholesterin im Blut verminderte. Außerdem wurde geurteilt, dass die Verabreichung von Lycopin keine Nebenwirkung verursachte.
Wie im vorhergehenden detailliert beschrieben, vermindert Lycopin die Konzentration in Blut von LDL, das eine große Wirkung auf eine arteriosklerotische Veränderung ausübt, stark und gleichzeitig erhöht es die Konzentration in Blut von HDL, das die Funktion einer Verminderung von Cholesterin im Blut besitzt. Außerdem verursacht Lycopin keine Nebenwirkung. Das erfindungsgemäße therapeutische Mittel für Hypercholesterinämie, das Lycopin als wirksamen Bestandteil enthält, zeigt sehr hervorragende Wirkungen.

Claims

1. Verwendung von Lycopin als wirksamer Bestandteil in Kombination mit β-Karotin, α-Karotin, d-α-Tocopherol und einem Gemisch aus einem Weizenkeimöl und einem pflanzlichen Öl bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Hypercholesterinämie, wobei das Medikament ein Weichkapselarzneimittel umfasst, das eine weiche Kapsel umfasst, die Gelatine und Glycerin umfasst.

2. Verwendung nach Anspruch 1, wobei die Menge von Lycopin in dem Inhalt des Weichkapselarzneimittels in einem Bereich von 1-50 mg liegt.

3. Verwendung nach Anspruch 1, wobei der Inhalt des Weichkapselarzneimittels im wesentlichen aus den folgenden Bestandteilen besteht:

Lycopin 1-25 mg

β-Karotin 1-12,5 mg

α-Karotin 1-12,5 mg und

d-α-Tocopherol 1-17 mg.

4. Verwendung nach Anspruch 1, wobei der Inhalt des Weichkapselarzneimittels im wesentlichen aus den folgenden Bestandteilen besteht:

Lycopin 1,5 mg

β-Karotin 1,0 mg

α-Karotin 0,5 mg

d-α-Tocopherol 5,0 mg und

ein Gemisch aus Weizenkeimöl und einem pflanzlichen Öl:

292,0 mg;

und wobei die Weichkapsel im wesentlichen aus den folgenden Bestandteilen besteht:

Gelatine 127,5 mg und

Glycerin 22,5 mg.