DE69608804T2

DE69608804T2 - Di- und trivalente kleine moleküle als selektininhibitoren

Info

Publication number: DE69608804T2
Application number: DE69608804T
Authority: DE
Inventors: Huong Bui; Brian Dupre; M. Kassir; M. Keller; P. Kogan; L. Scott; L. Wheeler
Original assignee: Texas Biotechnology Corp
Current assignee: Encysive Pharmaceuticals Inc
Priority date: 1995-06-29
Filing date: 1996-06-26
Publication date: 2000-11-02
Anticipated expiration: 2016-06-27
Also published as: FI974618A7; RU2165931C2; JP4046351B2; DE69608804D1; AU6292396A; PL185372B1; PT840606E; EP0840606A4; UA52607C2; CA2221991C; JPH11508885A; CN1149082C; ES2146886T3; AU704596B2; CA2221991A1; CZ407597A3; EP0840606A1; KR100438136B1; FI974618L; CZ290072B6

Description

Technisches Gebiet

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen, die die Bindung von E-Selectin, P-Selectin oder L-Selectin an Sialyl- Lewisx und Sialyl-Lewisa hemmen, und sie betrifft Verfahren zur Hemmung der Bindung von E-Selectin, P-Selectin oder L-Selectin an Sialyl-Lewisx oder Sialyl-Lewisa unter Verwendung dieser Verbindungen. Die vorliegende Verbindung betrifft ebenfalls pharmazeutisch aktive Zusammensetzungen, die Verbindungen umfassen, die die Bindung von E-, P- oder L-Selectin an Sialyl- Lewisx oder Sialyl-Lewisa hemmen.

Hintergrund der Erfindung.

E-Selectin, das ebenfalls ELAM-1 genannt wurde, stehend für endotheliales Leukozytenadhäsionsmolekül 1 und LECAM-2 für Lectinzelladhäsionsmolekül ist ein Glycoprotein, das auf der Oberfläche der endothelialen Zellen aufgefunden wird, den Zellen, die die erste Schicht der inneren Kapillarwandung darstellen. E-Selectin erkennt und bindet an das Kohlehydrat Sialyl-Lewisx (sLex), das auf der Oberfläche von gewissen weißen Blutkörperchen vorhanden ist. B-Selectin hilft den weißen Blutkörperchen bei der Erkennung und Anhaftung an die Kapillarwandungen, in Bereichen, wo das Gewebe, das die Kapillare umgibt, infiziert oder beschädigt worden ist. E- Selectin ist in der Tat eines von drei derzeit bekannten Selectinen. Es gibt deren zwei andere, nämlich L-Selectin und P- Selectin. P-Selectin wird auf entzündeten Endothelialzellen und Blutplättchen exprimiert, und es hat viel strukturelle Ähnlichkeit mit E-Selectin und kann ebenfalls Sialyl-Lewisx erkennen. L-Selectin wird auf Leukocyten exprimiert und hat ebenfalls eine hohe strukturelle Ähnlichkeit mit P- und E- Selectinen. Die Struktur von Sialyl-Lewisx und Sialyl-Lewisa (sLea) ist in den Formeln Ia und Ib unten gezeigt:
Wenn ein Gewebe von einem Mikroorganismus befallen ist, oder wenn es beschädigt wurde, spielen die weißen Blutkörperchen, die man auch Leukozyten nennt, eine Hauptrolle bei der inflammatorischen Antwort. Einer der wichtigsten Aspekte bei der inflammatorischen Antwort ist das Ereignis der Zelladhäsion. Allgemein gibt es weiße Blutkörperchen, die im Blutstrom zirkulieren. Wenn jedoch ein Gewebe infiziert ist oder beschädigt wird, müssen die weißen Blutzellen in der Lage sein, das befallene oder beschädigte Gewebe zu erkennen, und sie müssen in der Lage sein, an die Wandung der Kapillare in der Nähe des beeinträchtigten Gewebes zu binden, und durch die Kapillare in das beeinträchtigte Gewebe hinein zu diffundieren.
E-Selectin hilft zwei besonderen Sorten von weißen Blutkörperchen bei der Erkennung der beeinträchtigten Stellen und bei der Bindung an die Kapillarwandung, so daß diese weißen Blutkörperchen in das beeinträchtigte Gewebe hineindiffundieren können.
Es gibt drei Haupttypen von weißen Blutkörperchen: Granulocyten, Monocyten und Lymphocyten. Von diesen Kategorien erkennt E-Selectin sLex, das als Glycoprotein oder Glycolipid auf der Oberfläche von Monocyten und Neutrophilen präsentiert wird. Neutrophile sind eine Unterklasse der Granulocyten, die kleine Organismen, insbesondere Bakterien zerstören und phagozitieren. Wenn die Monocyten den Blutstrom durch die Kapillarwandung verlassen haben, reifen sie zu Makrophagen, die die einfallenden Mikroorganismen, Fremdkörper und alternden Zellen phagozitieren und verdauen.
Monocyten und Neutrophile sind in der Lage, die Stelle zu erkennen, an denen das Gewebe beschädigt wurde, indem sie an E- Selectin binden, das auf der Oberfläche der endothelialen Zellen erzeugt wird, mit denen die Kapillaren beschichtet sind, wenn das Gewebe, das eine Kapillare umgibt, infiziert oder beschädigt worden ist. Typischerweise ist die Produktion von E-Selectin und P-Selectin erhöht, wenn das Gewebe in der Nähe einer Kapillare beeinträchtigt ist. P-Selectin ist permanent in Speichergranalien vorhanden aus denen es schnell zur Zelloberfläche hin mobilisiert werden kann, sobald das Endothelium aktiviert worden ist. Im Gegensatz dazu erfordert E- Selectin die de novo RNA- und Proteinsynthese, und die Hauptexpression wird etwa 4-6 Stunden nach der Aktivierung erzielt und klingt nach etwa 24-48 Stunden auf die Basalwerte ab. Weiße Blutkörperchen erkennen beeinträchtigte Bereiche, da sLex Gruppen, die auf der Oberfläche der weißen Blutkörperchen vorhanden sind, an E-Selectin und B-Selectin binden. Diese Bindung verringert die Geschwindigkeit der weißen Blutkörperchen, die im Blutstrom zirkulieren, da sie den Angriff der Leucocyten entlang dem aktivierten Endothel vor der Integrin-vermittelten Anbindung und Wanderung vermittelt; und sie dient der Lokalisierung weißer Blutkörperchen in Bereichen von Verletzung oder Infektion.
Obwohl die Wanderung weißer Blutkörperchen zum Ort der Verletzung eine Hilfe zur Bekämpfung der Infektion und zur Zerstörung von Fremdkörpern darstellt, kann die Anhäufung einer außerordentlich großen Zahl von weißen Blutkörperchen eine weit verbreitete Gewebebeeinträchtigung hervorrufen. Verbindungen, die in der Lage sind, diesen Prozess zu blockieren, können daher als therapeutische Wirkstoffe nützlich sein. Es wäre daher nützlich, Inhibitoren zu entwickeln, die die Bindung von weißen Blutkörperchen an E-Selectin oder P-Selectin hemmen würden. Beispiele für einige der Krankheiten, die man mittels Inhibition der Selectinbindung an sLex behandeln könnte, wären, ohne Einschränkung, ARDS, die Crohn'sche Krankheit, septischer Schock, traumatischer Schock, mehrfaches Organversagen, Autoimmunkrankheiten, Asthma, Darmentzündungskrankheiten, Psoriase, rheumatoide Arthritis, und Reperfusionsverletzungen, die nach Herzanfällen, Schlägen und Organtransplantationen eintreten. Zusätzlich zum Auftreten auf einigen weißen Blutkörperchen wird sLea, ein eng verwandtes regiochemisches Isomeres von sLex, auf verschiedenen Krebszellen einschließlich Lungen- und Darmkrebszellen aufgefunden. Es ist vorgeschlagen worden, daß die Zelladhäsion unter Beteiligung von sLea bei der Metastase von gewissen Krebsarten eine Rolle spielt.
EP 627 442 A1 offenbart ein neues Sialyl-Lewisx und Sialyl- Lewisa Typ Gangliosidzuckerkettenderivat, das als Medizin nützlich ist, und das eine neuartige Struktur aufweist, die Moranolin enthält. Diese Verbindung weist die Fähigkeit der Inhibition der Zelladhäsion auf, und sie inhibiert das Selectin gemäß einem antagonistischen Mechanismus.
Den Erfindern von EP 627 442 A1 geht es im wesentlichen um die Tatsache, daß es sehr schwierig ist, Sialyl-Lewis Zuckerketten-Antigene als reine einfache Verbindungen aus dem lebenden Körper zu erhalten, weil diese Verbindungen auf der Zelloberflächenschicht nur in minimalen Mengen aufgefunden werden. Um sich von den bekannten synthetischen Verbindungen der Sialyl-Lewis Zuckerkettenderivate abzugrenzen, offenbaren die Erfinder von EP 627 442 eine neue synthetische Verbindung der genannten Art, die Moranolin als Zuckerkettenbestandteil aufweist. Die Verbindungen nach EP 627 442 A1 scheinen ihren zelladhäsionsinhibitorischen Effekt durch antagonistische Konkurrenz mit natürlich vorkommendem Sialyl-Lewis Zuckerkettenantigenen beim Selectinbindungsprozeß auszuspielen.

Zusammenfassung der Erfindung.

Die vorliegende Erfindung stellt Verbindungen mit der Struktur nach Formel II unten bereit:
worin X gewählt ist aus der Gruppe bestehend aus
-CN, -(CH&sub2;)nCO&sub2;H, -(CH&sub2;)nCONHOH, -O(CH&sub2;) mCO&sub2;H,
-O(CH&sub2;)mCONHOH, -(CH&sub2;)nCONHNH&sub2;, -(CH&sub2;)nCOZ, -(CH&sub2;)nZ,
-CH(CO&sub2;H)(CH&sub2;)mCO&sub2;H, -(CH&sub2;)nO(CH&sub2;)mCO&sub2;H, -CONH(CH&sub2;)mCO&sub2;H,
-CH(OZ)(CO&sub2;H), -CH(Z)(CO&sub2;H), -(CH&sub2;)nSO&sub3;H, -(CH&sub2;)nPO&sub3;D&sub1;D&sub2;,
-NH(CH&sub2;)mCO&sub2;H, -CONH(CHR&sub3;)CO&sub2;H, (1-H-Tetrazolyl-5-alkyl-) und -OH;
worin, für zweiwertige Strukturen, Y gleich folgendem ist
-(CH&sub2;)f-,
-CO(CH&sub2;)fCO-, -(CH&sub2;)fO(CH&sub2;)f-, -CO(CH&sub2;)fO(CH&sub2;)fCO-,
-(CH&sub2;)gS(O)b(CH&sub2;)fS(O)b(CH&sub2;)g-,
-CO(CH&sub2;)gS(O)b(CH&sub2;)fS(O)b(CH&sub2;)gCO-, -(CH&sub2;)fV(CH&sub2;)f-,
-(CH&sub2;)fCOVCO(CH&sub2;)f-, -CO(CH&sub2;)fCOVCO(CH&sub2;)fCO-,
-CO(CH&sub2;)fV(CH&sub2;)fCO-, -CONH(CH&sub2;)fNHCO-, -CO(CH&sub2;)fW(CH&sub2;)fCO-,
-(CH&sub2;)fWSW(CH&sub2;)f-,
-(CH&sub2;)fCONH(CH&sub2;)fNHCO(CH&sub2;)f-, -(CH&sub2;)fCOW(CH&sub2;)fWCO(CH&sub2;)f- oder
-CH&sub2;(CH&sub2;)fW(CH&sub2;)fCH&sub2;-, worin V gleich -N[(CH&sub2;)q]&sub2;N- und q unabhängig 2 bis 4 ist, und W gleich Aryl oder Heteroaryl ist;
worin, für dreiwertige Strukturen, Y gleich folgendem ist:
und worin T ausgewählt ist, aus der Gruppe bestehend aus - (CH&sub2;)f -,
-CO(CH&sub2;)f-, -(CH&sub2;)gS(O)b(CH&sub2;)f- und -CO(CH&sub2;)gS(O)b(CH&sub2;)f-, worin die Carbonylgruppe zur Biphenyleinheit benachbart ist;
worin R&sub1; und R&sub2; unabhängig aus der Gruppe gewählt sind, bestehend aus Wasserstoff, Alkyl, Halogen, -OZ, -NO&sub2;, -(CH&sub2;)nCO&sub2;H, -NH&sub2; und -NHZ;
worin R&sub3; ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Alkyl, Aralkyl, Hydroxyalkyl, Aminoalkyl, Alkylcarbonsäure und Alkylcarboxamid;
worin f gleich 1 bis 16 ist, g gleich 0 bis 6 ist, n gleich 0 bis 6 ist, m gleich 1 bis 6 ist, p gleich 0 bis 6 ist, b gleich 0 bis 2 ist, Z gleich Alkyl, Aryl oder Aralkyl ist, und worin D&sub1; und D&sub2; unabhängig Wasserstoff oder Alkyl sind, und die pharmazeutisch verträglichen Salze, Ester, Amide und Prodrugs davon.
Insbesondere liefert die vorliegende Erfindung Verbindungen nach Formel III:
worin X gleich -(CH&sub2;)nCOOH oder -O(CH&sub2;)nCOOH ist und Y gleich
-(CH&sub2;)n-, -(CH&sub2;)nW(CH&sub2;)n- (OH&sub2;)nWOW(CH&sub2;)n-,
-(CH&sub2;)nS(CH&sub2;)nS(CH&sub2;)n-, -CO(CH&sub2;)nCO-, oder
-(CH&sub2;)nCOW(CH&sub2;)nWCO(CH&sub2;)n- ist, worin W und n wie oben definiert sind.
Besonders bevorzugte Verbindungen umfassen folgende:
Die vorliegende Erfindung stellt ebenfalls pharmazeutische Zusammensetzungen bereit, die eine Verbindung nach Formel II oder Formel III und einen pharmazeutisch verträglichen Träger umfassen.
Die vorliegende Erfindung liefert desweiteren ein Verfahren zur Inhibition der Bindung von E-Selectin, P-Selectin, oder L- Selectin an sLex oder sLea, das den Schritt der Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung, die die Struktur nach Formel II oder Formel III aufweist, an einen Patienten umfaßt und eine pharmazeutisch aktive Zusammensetzung, die eine Verbindung nach Formel III oder III und einen pharmazeutisch verträglichen Träger umfaßt.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindungen können bei den Verfahren zur Behandlung von Krankheiten, wie etwa ARDS, der Cron'schen Krankheit, septischem Schock, traumatischem Schock, mehrfachem Organversagen, Autoimmunkrankheiten, Asthma, Darmentzündungskrankheiten, Psoriase, rheumatoider Arthritis, Reperfusionsverletzungen, die nach Herzanfällen, Schlägen, Organtransplantationen und Krebs auftreten, verwendet werden, was die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung nach Formel II oder Formel III an ein Tier umfaßt, das eine solche Behandlung nötig hat, um die Symptome der Krankheit zu vermindern.

Eingehende Beschreibung der bevorzugten Ausführungsformen.

Es ist herausgefunden worden daß Verbindungen mit der Formel (II), wie sie oben gezeigt ist, als Inhibitoren der E-, P- oder L-Selectinbindung an sLex oder sLea wirken.
Wie hierin verwendet, soll der Ausdruck "Alkyl" für eine monovalente geradkettige oder verzweigtkettige Gruppe von 1 bis 12 Kohlenstoffatomen stehen, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, sec- Butyl, Isobutyl, tert-Butyl und dergleichen.
Der Ausdruck "Niederalkyl" soll jedwede Alkylgruppe bezeichnen, die ein bis sechs Kohlenstoffatome aufweist.
Der Ausdruck "Halogen" soll jedes Atom bezeichnen, das aus der Gruppe gewählt ist, die aus Chlor, Fluor, Brom und Jod besteht.
Der Ausdruck "Alkoxy" soll eine Alkylgruppe bezeichnen, die an ein Molekül über ein Sauerstoffatom geknüpft ist, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf Methoxy, Ethoxy, Isopropoxy, n-Butoxy, sec-Butoxy, Isobutoxy, tert-Butoxy und dergleichen.
Der Ausdruck "Alkylamino" soll Gruppen bezeichnen, die die Struktur -NH-(Alkyl) oder -N-(Alkyl)&sub2; aufweisen, einschließlich beispielsweise Methylamino, Ethylamino, Isopropylamino und dergleichen.
Der Ausdruck "Aryl" soll carbocyclische aromatische Gruppen bezeichnen, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf Phenyl, 1- oder 2-Naphthyl, Fluorenyl, (1,2)-Dihydronaphthyl, Indenyl, Indanyl, Thienyl, Benzothienyl, Thienopyridyl und dergleichen.
Der Ausdruck "Aralkyl" (ebenfalls Arylalkyl genannt) soll eine Arylgruppe bezeichnen, die an eine Alkylgruppe angeknüpft ist, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf Benzyl, 1- und 2-Naphthylmethyl, Halobenzyl, Alkoxybenzyl, Hydroxybenzyl, Aminobenzyl, Nitrobenzyl, Guanidinobenzyl, Fluorenylmethyl, Phenylmethyl(benzyl), 1-Phenylethyl, 2-Phenylethyl, 1- Naphthylethyl und dergleichen.
Der Ausdruck "Hydroxyalkyl" soll -OH bezeichnen, das an eine Alkylgruppe angebunden ist.
Der Ausdruck "Aminoalkyl" soll eine Gruppe bezeichnen, die die Struktur -NRxRy aufweist, die an eine Alkylgruppe angebunden ist. Die Gruppen Rx und Ry werden unabhängig aus beispielsweise Wasserstoff, Alkyl und Aryl gewählt.
Der Ausdruck "Alkylcarbonsäure" soll eine Carboxylgruppe (- CO&sub2;H) bezeichnen, die an eine Alkylgruppe angebunden ist.
Der Ausdruck "Alkylcarboxamid" soll eine Gruppe bezeichnen, die die Formel -CONRxRy aufweist, die an eine Alkylgruppe angebunden ist, worin Rx und Ry die oben unter Aminoalkyl definierte Bedeutung aufweisen.
Der Ausdruck "pharmazeutisch verträgliche Salze, Ester, Amide und Prodrugs", wie er hierin verwendet wird, bezeichnet solche Carboxylatsalze, Aminosäureadditionssalze, Ester, Amide und Wirkstoffvorstufen ["Prodrugs"] der Verbindungen der vorliegenden Erfindung, die im Rahmen der ärtzlichen Beurteilung zur Verwendung im Kontakt mit den Geweben des Patienten geeignet sind, ohne daß übermäßige Toxizität, Reizung oder allergische Antworten auftreten, und die ebenfalls im Einklang mit einem vernünftigen Nutzen-zu-Risiko-Verhältnis stehen, und die zu ihrem gedachten Zweck wirksam sind, wie auch -wo vorhanden- die zwitterionischen Formen der Verbindungen der vorliegenden Erfindung. Der Ausdruck "Salze" bezeichnet relativ nichttoxische, anorganische und organische Säureadditionssalze der Verbindungen der vorliegenden Erfindung. Diese Salze können in situ während der Endisolation und Aufreinigung der Verbindungen hergestellt werden, oder durch separate Reaktionen der aufgereinigten Verbindung in ihrer freien Form mit einer geeigneten organischen oder anorganischen Säure oder Base und durch Isolierung des so ausgebildeten Salzes. Repräsentative Salze umfassen das Hydrobromid-, Hydrochlorid-, Sulfat-, Bisulfat-, Nitrat-, Acetat-, Oxalat-, Valerat-, Oleat-, Palmitat-, Stearat-, Laurat-, Borat-, Benzoat-, Lactat-, Phosphat-, Tosylat-, Citrat-, Maleat-, Fumarat-, Succinat-, Tartrat-, Naphthylat-, Mesyla-t, Glucoheptonat-, Lactiobionat-, sowie das Laurylsulfonatsalz und dergleichen. Diese können Kationen umfassen, die auf Alkali- und Erdalkalimetallen beruhen, wie etwa Natrium, Lithium, Kalium, Calcium, Magnesium und dergleichen, wie auch nicht-toxische Ammonium-, quaternäre Ammonium- und Aminkationen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf Ammonium, Tetramethylammonium, Tetraethylammonium, Methylamin, Dimethylamin, Trimethylamin, Triethylamin, Ethylamin und dergleichen. (Siehe beispielsweise S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sci., 66: 1-19 (1977), das hierin durch Bezugnahme in die vorliegende Anmeldung aufgenommen wird.
Beispiele für pharmazeutisch verträgliche nicht-toxische Ester der Verbindungen der vorliegenden Erfindung umfassen C&sub1; bis C&sub6; Alkylester, wobei die Alkylgruppe eine gerade oder verzweigte Kette ist. Verträgliche Ester umfassen ebenfalls C&sub5; bis C&sub7; Cycloalkylester wie auch Arylalkylester, wie etwa, ohne Einschränkung Benzyl. C&sub1; bis C&sub4; Alkylester werden bevorzugt. Ester der Verbindungen der vorliegenden Erfindung können gemäß herkömmlichen Verfahren dargestellt werden.
Beispiele für pharmazeutisch verträgliche nicht-toxische Amide der Verbindungen der vorliegenden Erfindung umfassen Amide, die von Ammoniak, primären C&sub1; bis C&sub6; Alkylaminen und sekundären C&sub1; bis C&sub6; Dialkylaminen abgeleitet sind, worin die Alkylgruppen gerade oder verzweigte Ketten darstellen. Im Falle von sekundären Aminen können die Amine ebenfalls in der Form eines 5- oder 6-gliedrigen Heterocyclus vorliegen, der ein Stickstoffatom enthält. Amide, die vom Ammoniak abgeleitet sind, primäre C&sub1; bis C&sub3; Alkylamide und sekundäre C&sub1; bis C&sub2; Dialkylamide werden bevorzugt. Die Amide der Verbindungen der vorliegenden Erfindung können gemäß herkömmlichen Verfahren hergestellt werden.
Der Ausdruck "Prodrug" bezeichnet Verbindungen, die schnell in vivo umgewandelt werden, unter Erhalt der Stammverbindung nach obiger Formel, beispielsweise durch Hydrolyse in Blut. Eine eingehende Diskussion wird in T. Higuchi und V. Stella bereitgestellt "Prodrugs als neue Abgabesysteme", Band 14 der A. C. S. Symposium-Reihen und in Bioreversible Carriers in Drug Design, Ausgabe Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, die beide durch Bezugnahme in die vorliegende Anmeldung aufgenommen werden.
Die vorliegende Erfindung stellt ebenfalls pharmazeutisch aktive Zusammensetzungen bereit, die die Verbindungen der vorliegenden Erfindung enthalten. Es wird ebenfalls in Betracht gezogen, daß pharmazeutisch aktive Zusammensetzungen eine Verbindung gemäß der vorliegenden Erfindung enthalten, sowie auch andere Verbindungen, die die E-Selectin- oder P- Selectinbindung an sLex oder sLea inhibieren oder damit konkurrieren, einschließlich sLex und sLea selbst.
Pharmazeutisch aktive Zusammensetzungen gemäß der vorliegenden Erfindung umfassen einen physiologischen Träger und eine Verbindung nach den Formeln II oder III.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen gemäß der vorliegenden Erfindung können eine oder mehrere Verbindungen umfassen, die die obigen Strukturen II oder III aufweisen, die für die parenterale Injektion, die orale Verabreichung in fester oder flüssiger Form, für die rektale oder topische Verabreichung und dergleichen zusammen mit einem oder mehreren nicht-toxischen physiologisch verträglichen Trägern, Hilfsstoffen oder Transportstoffen formuliert sind, die hierin pauschal als Träger bezeichnet werden.
Die Zusammensetzungen können Menschen und Tieren entweder oral, rektal, parenteral, (intravenös, intramuskulär oder subkutan), intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, lokal (mittels Pulvern, Salben oder Tropfen) oder bukkal oder durch Inhalation (zerstäubt oder als Nasalsprays) verabreicht werden.
Die Zusammensetzungen, die für die parenterale Injektion geeignet sind, können physiologisch verträgliche sterile wässerige oder nicht-wässerige Lösungen, Dispersionen, Suspensionen oder Emulsionen und sterile Pulver zur Rekonstitution von sterilen injizierbaren Lösungen oder Dispersionen umfassen. Beispiele für geeignete wässerige und nicht wässerige Träger, Verdünner, Lösungsmittel oder Transportstoffe umfassen Wasser, Ethanol, Polyol (Propylenglykol, Polyethylenglykol, Glyzerin und dergleichen), geeignete Mischungen davon, pflanzliche Öle, (wie etwa Oliven- und Canolaöl) und injizierbare organische Ester, wie etwa Ethyloleat. Die geeignete Fluidität kann beispielsweise durch die Verwendung einer Beschichtung, wie etwa Lezithin beibehalten werden, oder auch durch die Einhaltung der notwendigen Partikelgröße im Falle von Dispersionen und durch die Verwendung von Tensiden.
Diese Zusammensetzungen können ebenfalls Hilfsstoffe, wie etwa Konservierungsstoffe, Netzmittel, Emulgatoren und Dispersionsmittel enthalten. Die Vorbeugung gegen die Einwirkung von Mikroorangismen kann durch verschiedene antibakterielle und antifungielle Wirkstoffe sichergestellt werden, wie beispielsweise Parabene, Chlorbutanol, Phenol, Sorbinsäure und dergleichen. Es kann ebenfalls wünschenswert sein, isotonische Agenzien einzuschließen, wie beispielsweise Zucker, Natriumchlorid und dergleichen. Die verlängerte Absorption der injizierbaren pharmazeutischen Form kann durch die Verwendung von Agenzien erreicht werden, die die Absorption verzögern, beispielsweise Aluminiummonostearat und Gelatine.
Wenn gewünscht, und für eine bessere Verteilung, können die Verbindungen in langsame- oder zeitlich-gesteuerte-Freigabe- ["slow or timed release"] oder zielgerichtete-Abgabe-Systeme ["targeted delivery systems"] eingebaut werden, wie etwa Polymermatrizen, Liposome und Mikrokügelchen. Sie können beispielsweise durch die Filtration durch ein die Bakterien zurückhaltendes Filter sterilisiert werden oder durch den Einschluß von Sterilisationsmitteln in der Form von sterilem Wasser oder einem anderen sterilen injizierbaren Medium kurz vor ihrer Verwendung.
Feste Dosierformen zur oralen Verabreichung umfassen Kapseln, Tabletten, Pillen, Pulver und Granalien. Bei solchen festen Dosierformen wird die aktive Verbindung oder ein Prodrug- Ester mit wenigstens einem inerten üblichen Füllstoff (oder Träger) wie etwa Natriumcitrat oder Dicalciumphosphat oder (a) Füllstoffen oder Streckmitteln, wie beispielsweise Stärken, Laktose, Saccharose, Glukose, Mannitol und Kieselsäure, (b) Bindemitteln, wie etwa beispielsweise Carboxymethylzellulose, Alginaten, Gelatine, Polyvinylpyrrolidon, Saccharose und Acacia, und (c) Befeuchtern, wie beispielsweise Glyzerin, (d) Trennmitteln, wie beispielsweise Agar-Agar, Calciumcarbonat, Kartoffel- oder Tapiocastärke, Alginsäure, gewissen komplexen Silicaten und Natriumcarbonat, (e) Löseverzögerern, wie beispielsweise Paraffin, (f) Absorptionsbeschleunigern, wie beispielsweise quarternären Ammoniumverbindungen, (g) Netzmitteln, wie beispielsweise Cetylalkohol und Glyzerinmonostearat, (h) Adsorbenzien, wie beispielsweise Kaolin und Bentonit, und (i) Schmiermitteln wie beispielsweise Talkum, Calciumsterarat, Magnesiumstearat, festen Polyethylenglykolen, Natriumlaurylsulfat oder Mischungen davon vermischt. Im Falle von Kapseln, Tabletten und Pillen kann die Dosierform ebenfalls puffernde Mittel umfassen.
Feste Zusammensetzungen ähnlichen Typs können ebenfalls als Füllstoffe in festen und hartgefüllten Gelatinekapseln verwendet werden; die Füllstoffe wie etwa Lactose oder Milchzucker wie auch hochmolekulargewichtige Polyethylenglykole und dergleichen verwenden.
Die festen Dosierformen wie etwa Tabletten, Dragees, Kapseln, Pillen und Granalien können mit Beschichtungen und Hüllen, wie etwa enterischen Beschichtungen und anderen, die in der Technik gut bekannt sind, zubereitet werden. Sie können Trübungsmittel enthalten, und sie können ebenfalls eine solche Zusammensetzung aufweisen, daß sie die aktive Verbindung oder die aktiven Verbindungen in einem gewissen Teil des Darmtraktes auf verzögerte Weise freisetzen. Beispiele für einbettende Zusammensetzungen, die zur Verwendung gelangen können, sind polymere Substanzen und Wachse.
Die aktiven Verbindungen können ebenfalls in mikrogekapselter Form vorliegen, wenn möglich, zusammen mit einem oder mehreren der oben genannten Füllstoffe.
Die flüssigen Dosierformen zur oralen Verabreichung umfassen pharmazeutisch verträgliche Emulsionen, Lösungen, Suspensionen, Sirupe und Elixiere. Zusätzlich zu den aktiven Verbindungen können die flüssigen Dosierformen inerte Verdünner enthalten, die üblicherweise in der Technik verwendet werden, wie etwa Wasser oder andere Lösungsmittel, Auflösungshilfsmittel und Emulgatoren, wie beispielsweise Ethylalkohol, Isopropylalkohol, Ethylcarbonat, Ethylacetat, Benzylalkohol, Benzylbenzoat, Propylenglykol, 1,3-Butylenglykol, Dimethylformamid, Öle, insbesondere Baumwollsamenöl, Erdnußöl, Maiskeimöl, Olivenöl, Cannolaöl, Rizinusöl und Sesamöl, Glyzerin, Tetrahydrofurfurylalkohol, Polyethylenglykole und Fettsäureester von Sorbitan oder Mischungen dieser Substanzen und dergleichen.
Neben solchen inerten Verdünnern können die Zusammensetzungen ebenfalls Hilfsstoffe, wie etwa Netzmittel, Emulgatoren und Suspendiermittel, Süßstoffe, Geschmacksstoffe und Geruchsstoffe enthalten.
Die Suspensionen können zusätzlich zu den aktiven Verbindungen Suspendiermittel wie beispielsweise ethoxylierte Isostearylalkohole, Polyoxyethylensorbitol und Sorbitanester, mikroktistalline Zellulose, Aluminiummetahydroxid, Bentonit, Agar-Agar und Tragacanth oder Mischungen dieser Substanzen und dergleichen enthalten.
Die Zusammensetzungen für rektale Verabreichungen werden vorzugsweise als Zäpfchen formuliert, die durch die Vermischung der Verbindungen der vorliegenden Erfindung mit geeigneten nicht-irritierenden Füllstoffen oder Trägern, wie etwa Kakaobutter, Polyethylenglykol oder einem Zäpfchenwachs bereitgestellt werden, die bei gewöhnlichen Temperaturen fest sind, jedoch bei Körpertemperatur flüssig, und die daher in der Rektal- oder Vaginalhöhle schmelzen und den aktiven Bestandteil freisetzen.
Die Dosierformen zur topischen Verabreichung einer Verbindung der vorliegenden Erfindung umfassen Salben, Pulver, Spray und Inhalantien.
Der aktive Bestandteil wird unter sterilen Bedingungen mit einem physiologisch verträglichen Träger und irgendwelchen benötigten Konservierungsstoffen, Puffern oder Treibmitteln, sofern diese benötigt werden, vermischt. Ophthalmische Formulierungen, Augensalben, Suspensionen, Pulver und Lösungen werden ebenfalls als unter den Schutzumfang der vorliegenden Erfindung fallend in Betracht gezogen.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können ebenfalls in der Form von Liposomen verabreicht werden. Wie in der Technik bekannt, werden Liposome allgemein von Phospholipiden oder anderen Lipidsubstanzen abgeleitet. Liposome werden aus mono- oder multilamellar hydratisierten Flüssigkristallen gebildet, die in einem wässerigen Medium dispergiert werden. Jedwedes nicht-toxische physiologisch verträgliche und metabolisierbare Lipid, das Liposome ausbilden kann, kann verwendet werden. Die vorliegenden Zusammensetzungen in Liposomform können zusätzlich zu den Selectinbindungsinhibitoren gemäß der vorliegenden Erfindung Stabilisatoren, Konservierungsstoffe, Füllmittel und dergleichen enthalten. Die bevorzugten Lipide sind Phospholipide und die Phosphatidylcholine (Lecithine), sowohl natürlichen als auch synthetischen Ursprungs. Verfahren zur Ausbildung von Liposomen sind in der Technik gut bekannt.
Der tatsächlich Dosierpegel des aktiven Bestandteils in der Zusammenstzung der vorliegenden Erfindung kann ebenfalls geändert werden, so daß man eine Menge an aktivem Bestandteil erhält, die wirksam ist, um die gewünschte therapeutische Antwort für eine besondere Zusammensetzung und ein besonderes Verabreichungsverfahren zu erhalten. Der ausgewählte Dosierpegel hängt daher von dem gewünschten therapeutischen Effekt, von dem Verabreichungsweg, von der gewünschten Behandlungsdauer und weiteren Faktoren ab.
Die Gesamtdosierung der Verbindungen der vorliegenden Erfindung, die einem Wirt in einzelnen oder aufgeteilten Dosen verabreicht werden, kann im Bereich von etwa 0,3 mg bis etwa 50 mg pro Kilogramm Körpergewicht liegen. Die Dosiseinheitszusammensetzungen können solche Untermengen davon enthalten, wie sie zum Ausmachen der Tagesdosis nötig sind. Es ist jedoch offensichtlich, daß der spezifische Dosispegel für irgendeinen Patienten, ob Mensch oder Tier, von einer Vielzahl von Faktoren einschließlich dem Körpergewicht, dem allgemeinen Gesundheitszustand, dem Geschlecht, dem Ernährungszustand, der Zeit und dem Verabreichungsweg, der Absorptions- und Ausscheidungsgeschwindigkeit, der Kombination mit anderen Wirkstoffen und der Schwere der besonderen zu behandelnden Krankheit abhängt.
Insbesondere können die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung verwendet werden, um eine Vielzahl von Krankheiten zu behandeln, die mit Entzündung, Zell-Zellerkennung und Zell- Zelladhäsion in Verbindung stehen. Beispielsweise können die Verbindungen der vorliegenden Erfindung einem Patienten verabreicht werden, um septischen Schock, chronische Entzündungskrankheiten, wie etwa Psoriase und rheumatoide Arthritis und Reperfusionsgewebeschäden, die nach Herzanfällen, Schlägen und Organtransplantation auftreten, traumatischen Schock, mehrfaches Organversagen, Autoimmunkrankheiten, Asthma und entzündliche Darmkrankheit zu behandeln. In jedem Fall wird einem Patienten, der einer solchen Behandlung bedarf, eine wirksame Menge der Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung entweder alleine oder als Teil einer pharmazeutisch aktiven Zusammensetzung verabreicht. Es ist ebenfalls offensichtlich, daß eine Kombination der Verbindungen einem Patienten verabreicht werden kann, der einer solchen Verabreichung bedarf. Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können ebenfalls verabreicht werden, um andere Krankheiten zu behandeln, die mit Zell-Zelladhäsion assoziiert sind. Da die vorliegenden Verbindungen die Bindung von E-Selectin oder P-Selectin an sLex oder sLea hemmen, kann jede Krankheit, die mit dieser Wechselwirkung im Zusammenhang steht, möglicherweise durch die Inhibition dieser Bindungswechselwirkung behandelt werden.
Außer, daß sLea auf einigen weißen Blutkörperchen aufgefunden wird, wird sLea auf verschiedenen Krebszellen, einschließlich den Lungen- und Kolonkrebszellen aufgefunden. Es ist postuliert worden, daß die Zelladhäsion unter Vermittlung von sLea in die Metastasenbildung von gewissen Krebsarten miteingebunden ist, und daß Inhibitoren der sLea Bindung zur Behandlung einiger Krebsformen nützlich sein könnten.
Viele der Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung können gemäß den allgemeinen Syntheseschemata hergestellt werden, die im folgenden dargestellt sind. SCHEMA 1
In diesem Schema wird ein substituiertes Biphenyl (1, U. S. Patent Nr. 5,444,050) mit einem Disäurechlorid umgesetzt, wodurch man das Diaryldion 2 enthält. Bevorzugte Beispiele umfassen lineare und verzweigte Disäurechloride mit fünf bis 16 Kohlenstoffatomen und Aryl und Arylalkyldisäurechloride. Diese Verbindungen können auf eine Mehrzahl bekannter Weisen reduziert werden, nämlich durch katalytische Hydrierung, Wolff-Kishner Reduktion, durch Metalhydride wie etwa Triethylsilan [sic!], oder durch Clemmensen Reduktion. Die resultierenden Verbindungen (3) werden durch die Einwirkung von Bortribromid in einem halogenierten Lösungsmittel vorzugsweise bei 0ºC bis hin zu Raumtemperatur in das Phenol 4 überführt. Die Glykosylierung unter Verwendung einer geschützten Mannoseeinheit in der Anwesenheit von Bortrifluoridetherat, gefolgt von der basischen Hydrolyse, liefert die gewünschte Verbindung 5. SCHEMA 2
Es kann in gewissen Fällen wünschenswert sein, zwischen den beiden Ringen Linkergruppen einzubauen, die später mit der Mannoseeinheit vor der Anbindung des Rings, der eine Carbonsäure trägt, substituiert werden. Beispielsweise wird in diesem Reaktionsschema eine Verbindung, wie etwa 4-(4- Methoxyphenyl)butansäure unter Verwendung von Thionylchlorid in ein Säurechlorid überführt, gefolgt von einer Friedel-Crafts Reaktion mit Anisol unter Bereitstellung des Ketons 7. Die Reduktion des Ketons gemäß irgendeinem von verschiedenen Verfähren, die in der Technik bekannt sind, liefert Verbindung 8. Die Lithiierung in ortho-Stellung zu der Methoxygruppe, gefolgt von der Umwandlung der Borsäure und der Palladiumvermittelten Biarylkupplung ergibt 9. Die Demethylierung des Ethers, gefolgt von der Glykosylierung und der Entschützung ergibt die Zielverbindung 10. SCHEMA 3
Bei anderen Beispielen kann es vorteilhaft sein, die Friedel- Crafts Reaktion mit einer Verbindung wie etwa 11 (U. S. Patent Nr. 5,444,050) durchzuführen, in der sich die Zuckergruppe bereits am Platz befindet. Beispielsweise kann 11 mit Bernsteinsäureanhydrid in Anwesenheit einer Lewis-Säure wie etwa Aluminiumchlorid behandelt werden, wodurch man die Ketosäure 12 erhält. Die Reduktion des Ketons gemäß irgendeinem in der Technik bekannten Verfahren liefert die Säure 13, die ihrerseits mit Thionylchlorid in einem halogenierten Lösungsmittel bei niedriger Temperatur oder gemäß einem anderen geeigneten Verfahren in das Säurechlorid 14 überführt wird. Das Säurechlorid wird dann mit einer Auswahl von primären oder sekundären Aminen reagieren lassen, insbesondere Diaminen wie Ethylendiamin, Piperazin, Homopiperazin, 4,4'- Trimethylendipiperidin oder mit anderen Alkyldiaminen, unter Erhalt multimerer Verbindungen wie etwa 15. Die Reduktion der Amide unter Verwendung von Boran oder irgendeinem anderen geeigneten Reagenz in einem sauerstoffhaltigen Lösungsmittel bei niedriger Temperatur, gefolgt von der Hydrolyse der Schutzgruppen, ergibt die gewünschte Verbindung 16. Darüber hinaus können die Amide 15 direkt unter Bereitstellung der Amide 17 hydrolysiert werden. SCHEMA 4
Verbindungen, die Etherbindungen enthalten, können gemäß Schema 4 dargestellt werden. Die Oxidation des Hydroxyesters (18) zu den Aldehyden, gefolgt von der Selbstkondensation ergibt die Ether (19), die ihrerseits in die Säurechloride (20) überführt werden. Die Friedel-Crafts Kupplung, Reduktion, Demethylierung, Glykosylierung und Entschützung führt schließlich zu den Ethern (23). SCHEMA 5
In einigen Beispielen kann es wünschenswert sein, andere Verbindungen gemäß der Reaktionssequenz nach Schema 5 herzustellen. 1 kann daher eine Friedel-Crafts Reaktion mit einem anderen halogenierten Säurehalogenid eingehen, beispielsweise mit 3-Brompropionylchlorid, unter Erhalt von 24. Die Reduktion des Benzylketons kann gemäß einer Vielzahl dem Fachmann bekannten Methoden durchgeführt werden, wodurch man das Halogenid 25 erhält. Die Reaktion von 25 mit 1,3-Propandithiol oder einem anderen geeigneten Disulfid in Anwesenheit einer geeigneten Base ergibt die Verbindung 26. Die Demethylierung kann mittels einer Vielzahl von Verfahren durchgeführt werden, insbesondere mit Bortribromid in einem halogenierten Lösungsmittel bei niedriger Temperatur, wodurch man die Phenolverbindung 27 in die Hand bekommt. Das Phenol wird mit einem geschützten Mannopyranosid unter Verwendung von Bortrifluoridetherat in einem halogenierten Lösungsmittel umgesetzt, und die Schutzgruppen werden mit wässeriger Base entfernt, wodurch man Verbindung 29 erhält. Alternativ kann das Glykosid 28 mit einem geeigneten Oxidationsmittel wie etwa mit m-Chlorperoxybenzoesäure in einem geeigneten Lösungsmittel behandelt werden, wodurch man das Sulfon erhält. Die Behandlung mit wässeriger Base ergibt die Endverbindung 30. SCHEMA 6
In weiteren Beispielen geht die Zwischenstufe 11 eine Friedel- Crafts Reaktion mit di-Säurechlorid in halogeniertem Lösungsmittel in Anwesenheit von Aluminiumchlorid oder einer anderen geeigneten Lewissäure ein, unter Erhalt von 31. Die Entschützung der Mannosegruppe unter Verwendung von wässerigem Hydroxid oder Methoxid gefolgt von Hydroxid, ergibt die Endverbindung 32. SCHEMA 7
In diesem Reaktionsschema wird ein substituiertes Biphenyl (1, U. S. Patent Nr. 5,444,050) mit einem Trisäurechlorid unter Erhalt des Benzylketons 33 umgesetzt. Diese Ketone können gemäß einer Vielzahl bekannter Verfahrensweisen, die im Schema 1 aufgeführt sind, reduziert werden. Die resultierenden Verbindungen (34) können demethyliert, glykosyliert und entschützt werden, um die gewünschten Verbindung 35 zu ergeben. SCHEMA 8
Auf ähnliche Weise kann 11 eine Friedel-Crafts Reaktion mit Bromalkylsäurebromid unter Bereitstellung von 36 eingehen. Die Reaktion des Bromketons mit einem 1,3,5-substituierten Benzoltrithiol in Anwesenheit einer Base liefert die Verbindungen 37. Die Hydrolyse der Schutzgruppen ergibt die gewünschten Verbindung (38).
Die vorliegende Erfindung wird durch die folgenden repräsentativen Beispiele veranschaulicht:

BEISPIEL 1

1,6-Bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]hexan

Schritt 1: Adipoylchlorid (2,0g, 10,9 mmol) wurde in 1,2- Dichlorethan (55 ml) gelöst und auf einem Eisbad gekühlt. Aluminiumchlorid (5,8 g, 43,5 mmol) wurde zugesetzt, gefolgt von 3-(2-Methoxyphenyl)phenylessigsäuremethylester (5,75 g, 22,4 mmol) [T. P. Kogan, B. Dupre, I. L. Scott, K. Keller, H. Dao and P. Beck, US Patent 5,444,050 und T. P. Kogan, B. Dupre, K. M. Keller, I. L. Scott, H. Bui R. V. Market, P. J. Beck, J. A. Voytus, B. M. Revelle und D. Scott, J. Med. Chem., 1995, 38, 4976-4984] und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 30 Minuten lang gerührt und dann mit Eiswasser (30 ml) vermischt. Die organischen Substanzen wurden isoliert, und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 5 ml) extrahiert. Die organischen Substanzen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient von Hexan bis hin zu 3 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt des Produktes 2 (2,23 g, 33%).
¹H NMR(400 MHz, CDCl&sub3;): 7.96 (dd, J = 6.6, 1.9 Hz, 2H), 7.92 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 7.42 (m, 2H), 7.34 (t, J = 6 Hz, 2H), 7.18- 7.28 (m, 4H), 7.00 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.69 (s, 6H), 3.68 (s, 4H), 3.01 (m, 4H), 1.84 (m, 4H) ppm. IR (NaCl): 1741, 1677 cm&supmin;¹.
Schritt 2: Teil A: Das Produkt nach Schritt 1 (2,23 g, 3,6 mmol) wurde in Acetonitril gelöst und mit Lithiumhydroxidlösung (0,8 g, 18 mmol Lithiumhydroxidmonohydrat in 8 ml Wasser) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und dann mit 2 N HCl auf pH 4 angesäuert, und mit Ethylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt, getrocknet, (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck eingeengt. IR (NaCl): 1711, 1677 cm&supmin;¹.
Teil B: Die Ketosäure aus Teil A (1,86 g, 3,1 mmol) wurde in Dimethylsulfoxid (15 ml) gelöst und mit Hydrazin (1,0 ml, 31 mmol) vermischt. Diese Mischung wurde unter Stickstoff 2,5 Stunden lang auf 80ºC erhitzt und dann abgekühlt. Kalium t-Butoxid (3,5 g, 31 mmol) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde erneut über Nacht auf 80ºC erhitzt, dann mit Wasser (30 ml) gemischt, und dann mit 2 N HCl angesäuert und schließlich mit Ethylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck unter Erhalt von 3 (1,6 g, 91%) eingeengt. IR (NaCl): 1713 cm&supmin;¹.
Schritt 3: Teil A: Die Disäure aus Schritt 2, Teil B (1,6 g, 2,8 mmol) wurde in Dichlormethan (14 ml) unter Stickstoff gelöst und dann auf einem Trockeneis/2-Propanol-Bad gekühlt. Bortribromid (1,4 ml, 14 mmol) wurde langsam zugegeben; die Mischung wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden lang gerührt und dann mit Eiswasser (25 ml) vermischt. Die organischen Substanzen wurden abgetrennt, mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung (20 ml) gewaschen, mit (20 ml) Wasser gewaschen, mit gesättigter Natriumchloridlösung (20 ml) gewaschen, dann getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert, wobei man 2,38 g des Rohproduktes erhielt.
Teil B: Der Rückstand aus Teil A wurde mit Methanol (50 ml) vermischt, und es wurde Schwefelsäure (5 Tropfen) zugesetzt. Die Mischung wurde über Nacht zum Rückfluß erhitzt, und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde in Dichlormethan (50 ml) aufgelöst und mit Natriumcarbonat behandelt, sodann durch einen Silicagelbausch filtriert. Das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt, und der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient von Hexan bis 3 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,6-bis-(3-(3- Carbomethoxymethylphenyl)-4-hydroxyphenyl)hexan (0,9 g, 38%).
¹NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 6.80-7.50 (m, 14H), 3.70 (s, 6H), 3.68 (s, 4H), 2.55 (dd, J = 5.5, 5.5 Hz, 4H), 1.59 (m, 4H), 1.36 (m, 4H) ppm. IR (NaCl): 3430, 1731 cm&supmin;¹.
Schritt 4 : 1,6-Bis-(3-(3-Carbomethoxymethylphenyl)-4- hydroxyphenyl)hexan (0,9 g, 1,6 mmol) wurde in 1,2-Dichlorethan (8 ml) gelöst. α-D-Mannosepentaacetat (1,9 g, 4,8 mmol) wurde auf einmal zugesetzt, dann wurde Bortrifluoridetherat (2,5 ml, 19,2 mmol) langsam zugesetzt. Die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt und dann in Wasser (15 ml) vermischt. Die organische Substanz wurde abgetrennt und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 2 ml) extrahiert. Die Extrakte wurden mit der ursprünglichen organischen Fraktion vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde durch Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient von Hexan bis hinzu 3 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Lieferung von 1,6-bis -[3-(3-Carbomethoxymethylphenyl)-4-(tetra-O-acetyl-α-Dmannopyranosyl) oxyphenyl] hexan (1,5 g, 77%).
¹H NMR(400 MHz, CDCl&sub3;): 7.31-7.37 (m, 6H), 7.19-7.24 (m, 4H), 7.09-7.13 (m, 4H), 5.25 (d, J = 0.6 Hz, 2H), 3.57 = 3.66 (m, 6H), 3.3-3.50 (m, 10H), 2.54 (m, 4H), 1.58 (m, 4H), 1.34 (m, 4H) ppm. IR (NaCl): 1752 cm&supmin;¹.
Schritt 5: Das Glykosid aus Schritt 4 (1,5 g, 1,2 mmol) wurde in Acetonitril (6 ml) gelöst und mit einer Lösung von Lithiumhydroxidmonohydrat (1,0 g, 24 mmol) in Wasser (10 ml) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und dann mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 angesäuert. Die Mischung wurde unter vermindertem Druck aufkonzentriert und der Rückstand würde mittels HPLC (Umkehrphase, Elutionsgradient 5-50% Acetonitril in Wasser, beobachtet bei 254 nm) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,6-bis -[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-D- mannopyranosyloxy)phenyl]hexan (5), (0,35 g, 33%) als weißen Feststoff mit einem Smp. von 115-117ºC;
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.31-7.37 (m, 6H), 7.19-7.24 (m, 4H), 7.09-7.13 (m, 4H), 5.25 (d, J 0.6 Hz, 2H), 3.57-3.66 (m, 6H), 3.3-3.50 (m, 10H), 2.54 (m, 4H), 1.58 (m, 4H), 1.34 (m, 4H) ppm. IR (KBr): 3420, 1711 cm&supmin;¹.

BEISPIEL 2

1,6-Bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]hexan-Dinatriumsalz (Alternatiwerfahren)

Schritt 1: Adipoylchlorid (16,8 ml, 112 mmol) und 3-(2- Methoxyphenyl)phenylessigsäuremethylester (60, 9 g, 225 mmol) wurden in Dichlormethan (300 ml) gelöst und auf 0ºC gekühlt. Aluminiumchlorid (67,7 g, 507 mmol) wurde zugesetzt, es wurde 5 Minuten lang bei 0ºC gerührt und dann mit Eis gelöscht. Das Produkt wurde mit EtOAc (1L) extrahiert, mit Wasser (500 ml), gesättigter NaHCO&sub3; Lösung (50 ml) und gesättigter NaCl (50 ml) gewaschen. Die Lösung wurde über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet, durch einen Magnesiumsulfatpfropf filtriert, aufkonzentriert, und dann aus Ether/Ethylacetat umkristallisiert, unter Erhalt von 2, (64,7 g, 89%).
Schritt 2: Das bis-Keton 2 (15 g, 23, 1mmol) wurde in heißem EtOAc : EtOH (4 : 1, 100 ml) aufgelöst. Die resultierende Lösung wurde abgekühlt, und es wurden Trifluoressigsäure (/ml) und Pearlman's Katalysator (0,75 g) zugesetzt. Die Mischung wurde unter einer Wasserstoffatmosphäre (50psi) 18 Stunden lang geschüttelt und dann durch einen Celite-Bausch filtriert. Die Lösung wurde mit gesättigter NaHCO&sub3; Lösung, mit Wasser und mit gesättigter wässeriger Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), durch MgSO&sub4; filtriert und aufkonzentriert. Toluol wurde aus dem Produkt abgedampft, um EtOAc zu entfernen, und der Rückstand wurde unter Hochvakuum getrocknet, wobei man 1,6-bis -[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4-methoxyphenyl]hexan quantitativ erhielt.
Schritt 3: Der bis-Methylether (25,6 g, 41 mmol) wurde in Dichlormethan (165 ml) gelöst und auf 0ºC gekühlt. Bortribromid in Dichlormethan (33 ml) wurde langsam zugesetzt, dann wurde das Kühlbad entfernt und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur 20 Minuten lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde auf einem Eisbad gekühlt, der Stickstoffatmosphäreneinlaß wurde gegen ein mit CaCl&sub2; gefülltes Trockenrohr ausgetauscht, und Ethanol (35 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Mischung wurde auf Eis gegossen und mit EtOAc extrahiert. Die organischen Substanzen wurden abgetrennt, mit Wasser, mit gesättigter wässeriger Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck eingeengt und unter Erhalt von 1,6-bis-[3-(3- Carboethoxymethylphenyl)-4-hydroxyphenyl]hexan (24,2g, 100%) aufkonzentriert.
Schritt 4: Zu einer eisgekühlten Lösung von bis-Phenol (25,37 g, 42,7 mmol) und Tetra-O-pivaloyl-Dmannopyranosylfluorid (66,4g, 128 mmol) [I. L. Scott und T. P. Kogan, US Patent Anmeldung, angemeldet am 20. Mai 1996 mit dem Titel High Yield Stereospecific Mannosylation] in Dichlormethan (427 ml) wurde BF&sub3; OEt&sub2; (47,3 ml 384 mmol) tropfenweise zugesetzt, und die eiskalte Mischung wurde 1 Stunde lang gerührt. Die Mischung wurde mit EtOAc verdünnt und mit Wasser gewaschen (2 x), mit Natriumhydroxid (2 M), mit Wasser und mit gesättigter Natriumchloridlösung über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Die Aufreinigung durch Chromatographie (Silica, mit Hexan/EtOAc Gradient 30 : 1 bis 6 : 1 eluiert) ergab 1,6-bis-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4-(tetra-O -pivaloyl-α-D-mannopyranosyloxy)phenyl]hexan (59,8 g, 89%).
Schritt 5: Teil A: Zu einer Lösung des bis-Glycosids in THF (24 ml) wurde Methanol (24,4 ml) zugesetzt, gefolgt von der eiskalten Lösung frisch hergestellten Natriummethoxids (aus Natrium, 0,5 g, 22 mmol) in Methanol (24,4 ml), und die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Der Niederschlag wurde durch Filtration abgetrennt und mit einem kleinen THF/Methanolvolumen (2 : 1, 2 x), dann mit Aceton gewaschen. Das feste Natriumalkoxid (6,3 g) wurde durch weiteres Rühren mit Aceton und durch Filtration aufgereinigt.
Teil B: Der Niederschlag wurde in Wasser (27 ml) bei Raumtemperatur 30 Minuten lang gerührt. Der pH-Wert wurde dann auf 14 eingestellt und unter Verwendung einer Minimalmenge an Natriumhydroxid (2 M) unter Rühren auf pH 14 gehalten. Nach 4 Stunden war die Entschützung gemäß den Umkehrphasen-HPLC-Werten vervollständigt. Die Lösung wurde mit vorgewaschenem Ionenaustauscherharz (Dowex 50, hydrierte Form) neutralisiert und Celite gefiltert. Die Lösung wurde dann gefriergetrocknet, wobei man 1,6-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]hexan-Dinatriumsalz als leicht hygroskopisches weißes Pulver (6,0 g, 90%) erhielt, mit einem Smp. von 243-245ºC.
¹H NMR (400 MHz, D&sub2;O) 7.64 (s, 2H), 7.58 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.49 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.12 (s, 2H), 7.07 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.66 (s, 2H), 4.27 (s, 2H), 4.00-4.20 (m, 4H), 4.04 (dd, J = 12.1 und 3.3 Hz, 2H), 3.80-3.92 (m, 6H), 3.72 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 2.52 (m, 4H), 1.60 (br, 4H), 1.39 (br, 4H); ¹³C NMR (100 MHz, D&sub2;O) 180.9, 151.5, 138.4, 137.5, 137.4, 132.5, 130.9, 129.1, 129.0, 128.9, 127.3, 117.2, 100.2, 74.2, 70.9, 66.6, 60.9, 45.5, 32.3, 31.6, 29.5; Gefunden: 57.54% C, 5.98% H, 5.12 Na: Ber. für C&sub4;&sub6;H&sub5;&sub2;O&sub1;&sub6;Na&sub2;&sub0;3H&sub2;O: 57.50% C, 6.08% H, 4.78 Na.

BEISPIEL 3

1,4-Bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]butan

Schritt 1 : 4-(4-Methoxyphenyl)buttersäure (2,0 g, 10,3 mmol) wurde mit Thionylchlorid (20 ml) behandelt. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur 3 Stunden lang gerührt, über Nacht auf 65ºC erwärmt und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 4-(4-Methoxyphenyl)butyrylchlorid (2,3 g) als gelbes Öl erhielt, das ohne weitere Reinigung weiter verwendet wurde. IR (NaCl): 1795, 1510, 1244 cm&supmin;¹.
Das rohe Säurechlorid (2,07 g, 9,7 mmol) und Anisol (1,26 g, 11,6 mmol) wurden in 1,2-Dichlorethan (32 ml) gelöst und auf einem Eisbad gekühlt. Die Mischung wurde dann mit Aluminiumchlorid (3,9 g, 29,1 mmol) portionsweise behandelt, 5 Minuten lang gerührt, und dann mit Eiswasser (50 ml) vermischt. Die Mischung wurde mit Dichlormethan (3 · 10 ml) extrahiert, und die Extrakte wurden vereinigt, mit gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung (100 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mit 10 : 1 Hexan/Ethylacetat über Silicagel laufen lassen und dann aufkonzentriert, unter Erhalt von 1,4-bis-(4- Methoxyphenyl) butan-1-on (2,49 g, 82%).
¹H NMR(400 MHz, CDCl&sub3;): 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 2.90 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.65 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.02 (m, 2H) ppm. IR (NaCl): 1674, 1602, 1244 cm&supmin;¹.
Schritt 2: Das Keton (2,49 g, 8,8 mmol) wurde in Dichlormethan (30 ml) gelöst und mit Trifluoressigsäure (2,7 ml, 35,2 mmol), Triethylsilan (2,8 ml, 17,6 mmol) und dann mit Bortrifluoridetherat (4,4 ml, 35,2 mmol) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden lang gerührt, dann auf einem Eisbad gekühlt und mit Wasser (50 ml) vermischt. Die Mischung wurde mit Dichlormethan (3 · 5 ml) extrahiert, und die organischen Fraktionen wurden vereinigt, mit gesättigter Natriumchloridlösung (100 ml) gewaschen und getrocknet (MgSO&sub4;), sodann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mit 10 : 1 Hexan/Ethylacetat über Silicagel laufen lassen und aufkonzentriert, unter Erhalt von 1,4-bis-(4- Methoxyphenyl)butan (2,0 g, 85%) als klares Öl.
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 4H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 4H), 3.78 (s, 6H), 2.56 (m, 4H), 1.61 (m, 4H) ppm. IR (NaCl): 160, 1248 cm&supmin;¹.
Schritt 3 : 1,4-Bis-(4-Methoxyphenyl)butan (1,78 g, 6,6 mmol) und TMEDA (4,0 ml, 26,5 mmol) wurden mit wasserfreiem Ether (30 ml) vermischt und auf einem Eisbad gekühlt. n-Butyllithium (10,5 ml einer 2,5 M Lösung, 26,5 mmol) wurden zugesetzt; und die Mischung wurde auf Raumtemperatur aufgewärmt und 1 Stunde lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde auf 0ºC gekühlt und mit Trimethylborat (3,0 ml; 26,5 mmol) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, mit 2 N HCl (bis auf pH 2) gelöscht und eine Stunde lang gerührt. Die organische Phase wurde abgetrennt und der wässerige Anteil wurde mit Ethylacetat (3 · 5 ml) extrahiert. Die Extrakte wurden mit der ursprünglichen organischen Fraktion vereinigt und getrocknet (MgSO&sub4;), dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert, unter Erhalt der Borsäure (3,0 g), die ohne weitere Aufreinigung zum Einsatz gelangte. IR (NaCl): 1603, 1490, 1416, 1328, 1234 cm&supmin;¹.
Die rohe Borsäure und Methyl-3-bromphenylacetat (3,8 g, 16,8 mmol) wurden mit Dimethoxyethan (30 ml) vermischt und unter Stickstoff entgast. Die Mischung wurde mit dreibasigem Kaliumphosphat (10,7 g, 50,5 mmol) und mit bis(triphenylphosphin)palladium-(II)-chlorid (100 mg, 0,17 mmol) behandelt. Die Mischung wurde erneut entgast, dann 2 Stunden lang zum Rückfluß erhitzt, auf Raumtemperatur abgekühlt und mit Wasser (100 ml) vermischt. Die Mischung wurde mit Dichlormethan (3 · 10 ml) extrahiert, und die Extrakte wurden vereinigt, mit Wasser (50 ml) und mit gesättigter Natriumchloridlösung (50 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient, 8 : 1 Hexan/Ethylacetat bis hin zu 4 : 1 Hexan/Ethylacetat) gereinigt, unter Erhalt von 1,4-bis-[3-(3- Carbomethoxymethylphenyl)-(4-methoxy)phenyl]butan (1,14g, 24%) als klarem Öl.
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.41-7.44 (m, 4H), 7.34 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.21-7.60 (m, 2H), 7.08- 7.13 (m, 4H), 6.87 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.68 (s, 6H), 3.66 (s, 4H), 2.61 (m, 4H), 1.67 (m, 4H) ppm. IR (NaCl): 1737, 1606, 1239 cm&supmin;¹.
Schritt 4 : 1,4-Bis-[3-(3-Carbomethoxymethylphenyl)-(4- methoxy)phenyl]butan (0,9 g, 1,6 mmol) wurde in Dichlormethan (3,0 ml) gelöst, auf einem Trockeneisbad gekühlt und. mit Bortribromid (1,2 ml, 12,8 mmol) behandelt. Die Mischung wurde bei -78ºC drei Stunden lang gerührt und dann über Nacht in einen Kühlraum bei -10ºC gebracht. Die Reaktion wurde mit Eiswasser (10 ml) gelöscht und mit Dichlormethan (3 · 5 ml) extrahiert. Die organischen Substanzen wurden vereinigt, mit Wasser (25 ml), gesättigter Natriumchloridlösung (25 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter reduziertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, 5 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,4-bis-[3-(3- Carbomethoxymethylphenyl)-4-hydroxyphenyl]butan (0,4g, 47%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.42 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.35-7.38 (m, 4H), 7.27-7.32 (m, 2H), 7.02-7.05 (m, 4H), 6.87 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 5.12 (s, 2H), 3.70 (s, 6H), 3.68 (s, 4H), 2.59 (m, 4H), 1.65 (m, 4H) ppm. IR (NaCl): 3439, 1732, 1606, 1263 cm&supmin;¹.
Schritt 5: 1,4-Bis-[3-(3-Carbomethoxymethylphenyl)-4- hydroxyphenyl]butan (0,4g, 0,74 mmol) und α-D-Mannosepentaacetat (0,72g, 1,85 mmol) wurden in Dichlorethan (4,0 ml) gelöst und mit Bortrifluoridetherat (1,1 ml, 8,9 mmol) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und dann mit Wasser (10 ml) gelöscht und mit Dichlormethan (3 · 4 ml) extrahiert. Die organischen Substanzen wurden vereinigt, mit Wasser (15 ml) gewaschen, mit wässeriger Natriumchloridlösung (20 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, 2 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,4-bis-[3-(3- Carbomethoxymethylphenyl)-4-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]butan (0,88 g, 99%) als Schaum.
¹H NMIR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.38-7.44 (m, 6H), 7.25-7.29 (m, 2H), 7.17 (br s, 2H), 7.07-7.11 (m, 4H), 5.40 (s, 2H), 5.20-5.30 (m, 6H), 4.15 (dd, J = 12.3, 4.8 Hz, 2H), 3.93 (dd, J = 12.4, 2.2 Hz, 2H), 3.76-3.82 (m, 2H), 3.72 (s, 4H), 3.68 (s, 6H), 2.63 (m, 4H), 2.13 (s, 6H), 2.01 (s, 6H), 2.00 (s, 6H), 1.97 (s, 6H), 1.67 (m, 4H) ppm. IR (NaCl): 1748, 1219 cm&supmin;¹.
Schritt 6: Das per-Acetat (0,87 g, 0,73 mmol) wurde in Acetonitril (3 ml) gelöst und mit einer Lösung von Lithiumhydroxidhydrat (0,46 g, 11 mmol in 2 ml Wasser) behandelt und die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand wurde mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 angesäuert. Ein Anteil der Mischung wurde mittels Umkehrphasen HPLC (C&sub1;&sub8;, Wasser/Acetonitrilgradient 20-80% während 45 Minuten, beobachtet bei 254 nm) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,4-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]butan (230 mg) als weißen Feststoff, Smp.: 195-197ºC.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d&sub6;): 7.31-7.39 (m, 6H), 7.20-7.25 (m, 4H), 7.10-7.15 (m, 4H), 5.25 (s, 2H), 4.88 (br d, J = 4.0 Hz, 2H), 4.76 (br s, 2H), 4.60 (br s, 2H), 4.45 (br t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.55-3.68 (m, 5H), 3.62 (s, 4H), 3.40-3.50 (m, 7H), 2.60 (m, 4H), 1.62 (m, 4H) ppm. IR (KBr): 3333, 3229, 1729, 1224 cm&supmin;¹; Gefunden: 61.30% C, 6.15% H: Ber. für C&sub4;&sub4;H&sub5;&sub0;O&sub1;&sub6; · 0.4 TFA: 61.32% C, 5.79% H.

BEISPIEL 4

N,N'-Bis-[4-(3-(3-carboxymethylphenyl)-4-(a-Dmannopyranosyloxy)phenyl)butan-1-oyl]-4,4'- trimethylendipiperidin

Schritt 1: Bernsteinsäureanhydrid (2,0 g, 19,9 mmol) und Aluminiumchlorid (17,7 g, 132 mmol) wurden mit 1,2-Dichlorethan (45 ml) vermengt und auf einem Eisbad gekühlt. Die Mischung wurde mit einer Lösung von 3-(2-(2,3,4,6-tetra-O-Pivaloyl-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl)phenylacetessigsäureethylester (10,0 g, 13,2 mmol) in Dichlorethan (10 ml) behandelt, und die Mischung wurde über Nacht gerührt, während sich die Badtemperatur langsam bis Raumtemperatur aufwärmte. Die Reaktion wurde mit Eiswasser (100 ml) vermischt und 15 Minuten lang gerührt. Die organische Phase wurde abgetrennt, und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 5 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert, unter Erhalt von 12 (13,5 g) das ohne weitere Aufreinigung eingesetzt wurde. IR (NaCl): 1738, 1685, 1228 cm&supmin;¹.
Schritt 2: Die Säure (12) (13,5 g, 19,7 mmol) wurde in Dichlormethan (65 ml) gelöst und mit Bortrifluoridetherat (15,3 ml, 122 mmol), dann mit Trifluoressigsäure (9,4 ml, 122 mmol) behandelt. Die Mischung wurde dann mit Triethylsilan (9,4 ml, 59,1 mmol) behandelt und bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Reaktion wurde mit Wasser (200 ml) gemischt, und die organischen Phasen wurden abgetrennt. Der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 10 ml) extrahiert, und die Extrakte wurden mit der ursprünglichen organischen Phase vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck eingeengt, unter Erhalt von 4-(3-(3-Carboethoxymethylpheyl)-4-(2,3,4,6-tetra-O-pivaloyl- α-D-mannopyranosyloxy)phenyl)butansäure (13) (1,49 g, 97%) als klares Öl. IR (NaCl): 1737, 1132 cm&supmin;¹.
Schritt 3: Die Säure 13 (16,0 g, 23,8 mmol) wurde mit Thionylchlorid (50 ml) vermengt und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 36 Stunden lang gerührt, dann unter reduziertem Druck eingeengt, unter Erhalt des Säurechlorids 14 (16,3 g, 99%) das ohne weitere Aufreinigung zum Einsatz gelangte. IR (NaCl) 2974, 1797, 1740, 1135 cm&supmin;¹.
Schritt 4 : 4,4'-Trimethylendipiperidin (0,4g, 1,9 mmol) in Dichlormethan (5 ml) wurde zu einer Lösung des Säurechlorids 14 (2,8 g, 3,26 mmol) in Dichlormethan (5 ml) bei 0ºC zugesetzt. Triethylamin (0,61 ml, 4,4 mmol) und 4-Dimethylaminopyridin (35 mg, 10 mol%) wurden zugesetzt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 1 Stünde lang gerührt und dann mit Wasser (20 ml) vermischt. Die organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchloridlösung (20 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, 2 : 1 Ethylacetat: Hexan) aufgereinigt, unter Erhalt des bis-Amids 15 (1,1 g, 18%)
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.40-7.45 (m, 4H), 6.98-7.30 (m, 10H), 5.25-5.42 (m, 6H), 4.09-4.19 (m, 4H), 3.50-3.96 (m, 8H), 2.62-2.69 (m, 4H), 2.28-2.36 (m, 4H), 1.90-2.02 (m, 4H), 1.60-1.74 (m, 6H), 1.35-1.50 (m, 2H), 1.24 (s, 18H), 1.15 (s, 18H), 1.11 (s, 36H), 1.08-1.28 (m, 26H). IR (NaCl): 1739 cm&supmin;¹.
Schritt S: Bis-Amid 15 (1,0 g, 0,54 mmol) wurde in THF (3 ml) gelöst und mit wässerigem Natriumhydroxid (0,40 g, 10 mmol, in 3 ml Wasser) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht behandelt. Das THF wurde unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand wurde mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure auf einen pH-Wert von 2 angesäuert und dann durch Umkehrphasen- HPLC aufgereinigt, unter Erhalt von N,N'-bis-[4-(3-(3- Carboxymethylphenyl)-4-(α-D-mannopyranosyloxy)phenyl)butan-1- oyl]-4,4'-trimethylendipiperidin (17) (30 mg, 5%) als weißen Feststoff, Smp.: 119-121ºC.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d&sub6;): 7.32-7.40 (m, 6H), 7.20-7.27 (m, 4H), 7.10-7.14 (m, 4H), 5.26 (br s, 2H), 4.36 (br d, J = 11 Hz, 2H), 4.05 (br s, 8H), 3.77 (br d, J = 11 Hz, 2H), 3.50-3.70 (m, 8H), 3.40-3.52 (m, 5H), 3.31- 3.40 (m, 2H), 2.92 (br t, J = 14 Hz, 2H), 2.55-2.62 (m, 4H), 2.42-2.53 (m, 3H), 2.27-2.34 (m, 4H), 1.73-1.82 (m, 4H), 1.57-1.67 (m, 4H), 1.36-1.47 (m, 2H), 1.22-1.33 (m, 2H), 1.11-1.20 (m, 4H), 0.80-1.02 (m, 4H). IR (KBr): 3415, 1713, 1609 cm&supmin;¹. MS (FAB): 1150(M&spplus; + Na). Analyse: ber. für C&sub6;&sub1;H&sub7;&sub8;N&sub2;O&sub1;&sub8; · 1.4 TFA: 59.54% C, 6.22% H, 2.18% N. Gefunden: 59.65% C, 6.56% H, 2.23% N.

BEISPIEL 5

Di-6-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]hexylether

Schritt 1: Oxalylchlorid (1,65 ml, 2M in Dichlormethan, 3,30 mmol) wurde zu wasserfreiem Dichlormethan (10 ml) bei -78ºC zugesetzt. Dimethylsulfoxid (0,56 ml, 7,26 mmol) wurde tropfenweise während mehrerer Minuten hinzugesetzt, und die erhaltene Lösung wurde 10 Minuten lang gerührt. Ethyl-6- hydroxyhexanoat, (0,50 ml, 3,07 mmol) wurde tropfenweise zugesetzt und nach dreißig Minuten wurde Triethylamin (2,10 ml, 15,1 mmol) ttopfenweise zugesetzt. Das Kühlbad wurde entfernt und nach 15 Minuten wurde Wasser (10 ml) hinzugesetzt. Die Mischung wurde 10 Minuten lang gerührt, die Phasen wurden getrennt, und die wässerige Phase wurde mit Dichlormethan extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt und getrocknet (MgSO&sub4;), dann wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Die Silicagelchromatographie (2 : 1 Hexan : Ethylacetat) lieferte das reine Produkt (0,44g, 91%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 9.75(1H), 4.10 (2H), 2.45 (2H), 2.30 (2H), 1.65 (4H), 1.24 (3H).
Schritt 2: Triethylsilan (0,89 ml, 5,57 mmol) und Triethylsilyltrifluormethansulfonat (63 ml, 0,28 mmol) wurden in wasserfreiem Dichlormethan (6 ml) bei 0ºC gelöst, und es wurde eine Lösung von 5-Carboethoxypentanal (0,44g, 2,78 mmol) in Dichlormethan (3 ml) zugesetzt. Das Kühlbad wurde entfernt und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur 80 Minuten lang gerührt. Das Lösungsmittel wurde in Vakuum entfernt und der Rückstand wurde mittels Silicagelchromatographie (6 : 1 Hexan: Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt des Produktes (0,31 g, 74%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 4.10 (4H), 3.37 (4H), 2.28 (4H), 1.60 (8H), 1.36 (4H), 1.24 (6H).
Schritt 3: Di-5-Carboethoxypentylether (0,16 g, 0,53 mmol) wurde in Methanol (1 ml) gelöst und 1 N Natriumhydroxidlösung (1,05 ml, 1,05 mmol) wurde zugesetzt. Die resultierende Lösung wurde bei Raumtemperatur 3 Stunden lang gerührt. Das Methanol wurde unter vermindertem Druck entfernt und die verbleibende Lösung wurde angesäuert (konzentrierte HCl) und mit zwei Portionen Diethylether extrahiert. Die Extrakte wurde vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde zwei mal aus Acetonitril aufkonzentriert, um das Produkt als weißen Feststoff zu ergeben (0,16 g, quantitativ).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 3.40 (4H), 2.36 (4H), 1.60 (8H), 1.42 (4H).
Schritt 4: Di-5-Carboxypentylether (0,15 g, 0,53 mmol) und DMF (1 Tropfen) wurden in wasserfreiem Dichlormethan (2,5 ml) gelöst und die resultierende Lösung wurde auf 0ºC gekühlt. Oxalylchloridlösung (0,59 ml 2M in Dichlormethan, 1,18 mmol) wurde langsam zugesetzt. Die Reaktion wurde bei 0ºC 5 Minuten lang gerührt, dann wurde das Kühlbad entfernt und das Rühren wurde 20 Minuten lang bei Raumtemperatur fortgesetzt. Die Lösung wurde auf 0ºC gekühlt und eine Lösung von 3-(2-Methoxyphenyl)phenylessigsäureethylester (0,29 g, 1,07 mmol) in Dichlormethan (1 ml) wurde zugesetzt. Aluminiumchlorid wurde in drei Portionen (0,17 g, 0,17 g, 0,08 g, insgesamt 3,15 mmol) in einminütigen Intervallen zugesetzt. Die Lösung wurde fünf Minuten lang gerührt, dann auf Eis gegossen und mit zwei Portionen Ethylacetat extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt und mit Wasser gewaschen, mit wässeriger Natriumbicarbonatlösung und mit wässeriger Natriumchloridlösung. Die resultierende Lösung wurde getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Die Silicagelchromatographie (Gradient von 4 : 1 bis 1 : 1 Hexan : Ethylacetat) ergab das Produkt als gelbes Öl (0,34g, 85%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.91 (4H), 7.41 (6H), 7.28 (2H), 6.99 (2H), 4,14 (4H), 3.86 (6H), 3.66 (4H), 3.40 (4H), 2.94 (4H), 2.16 (4H), 1.75 (4H), 1.59 (4H), 1.43 (i4H), 1.26 (6H).
Schritt 5: Di-6-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4- methoxyphenyl]-6-oxohexylether (0,34g, 0,45 mmol) wurde in wasserfreiem Dichlormethan (2,5 ml) gelöst und die resultierende Lösung wurde auf 0ºC gekühlt. Trifluoressigsäure (0,23 ml, 3,0 mmol) wurde zugsetzt, dann Triethylsilan (0,29 ml, 1,8 mmol) und Bortrifluoridetherat (0,33 ml, 2,7 mmol). Das Kühlbad wurde entfernt und die Reaktion wurde 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt. Dichlormethan wurde zugesetzt und die resultierende Mischung wurde mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung und mit Wasser extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Die Silicagelchromatographie (6 : 1 Hexan : Ethylacetat) ergab das Produkt als klares Öl (0,23 g, 71%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;):7.42 (4H), 7.35 (2H), 7.25 (2H), 7.09 (4H), 6.87 (2H), 4.16 (4H), 3.77 (6H), 3.65 (4H), 3.37 (4H), 2.57 (4H), 1.57 (10H), 1.35 (8H), 1.25 (6H).
Schritt 6: D&sub1;-6-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4- methoxyphenyl]hexylether (0,23 g, 0,32 mmol) wurde in trockenem Dichlormethan (1,6 ml) gelöst und die Lösung wurde auf 0ºC gekühlt. Bortribromidlösung (1M in Dichlormethan, 1,40 ml, 1,40 mmol) wurde tropfenweise zugesetzt, und das Kühlbad wurde entfernt. Nach zwanzig Minuten wurde die Lösung erneut auf 0ºC gekühlt und absolutes Ethanol (1 ml) wurde tropfenweise zugefügt. Die Reaktionsmischung wurde dann auf Eis gegossen und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Die Silicagelchromatographie (2 : 1 bis 1 : 1 Hexan : Ethylacetat) ergab das Produkt (0,11 g, 50%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.42 (8H), 7.04 (4H), 6.88 (2H), 5.14 (2H), 4.16 (4H), 3.67 (4H), 3.38 (4H), 2.57 (4H), 1.85 (4H), 1.62 (6H), 1.40 (6H), 1.27 (6H).
Schritt 7 : 2,3,4,6-Tetra-O-Pivaloyl-α-Dmannopyranosylfluorid (0,52g, 1,00 mmol) und di-6-[3-(3- Carboethoxymethylphenyl)-4-hydroxyphenyl]hexylether (0,23 g, 0,33 mmol) wurden in trockenem Dichlormethan (2 ml) gelöst, und die Lösung wurde auf 0ºC gekühlt. Bortrifluoridetherat (0,38 ml, 3,10 mmol) wurde langsam zugegeben und die Reaktion wurde 90 Minuten lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit Ethylacetat verdünnt und mit zwei Portionen Wasser dann mit 1N NaOH, Wasser und mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen. Die resultierende Lösung wurde getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Silicagelchromatographie (15 : 1 Hexan : Ethylacetat) aufgereinigt unter Erhalt des Produktes (0,45 g, 82%)
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.45 (7H), 7.15 (7H), 5.32 (8H), 4.14 (4H), 3.86 (4H), 3.72 (4H), 3.54 (2H), 3.40 (4H), 2.59 (4H), 1.85 (4H), 1.62 (4H), 1.46 (4H), 1.36 (4H), 1.26 (24H), 1.15 (18H), 1.10 (36H).
Schritt 8: Di-6-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4-(2,3,4,6- tetra-O-pivaloyl-α-D-mannopyranosyloxy)phenyl]hexylether (0,45 g, 0,27 mmol) wurde in wasserfreiem Tetrahydrofuran (0,9 ml) und in Methanol (1,8 ml) gelöst. Natriummethoxid (49 mg, 0,84 mmol) wurde zugesetzt, und die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Eine weitere Portion Natriummethoxid (50 mg, 0,93 mmol) wurde zugesetzt, gefolgt vier Stunden später, von einer dritten Portion (112 mg, 2,07 mmol). Die Reaktion wurde weitere vier Stunden lang fortgesetzt, dann wurde die Mischung filtriert, und der erhaltene Feststoff wurde mit einer 2 : 1 Mischung von Tetrahydrofuran und Methanol gewaschen. Der Feststoff wurde dann in Wasser (1 ml) gelöst und Natriumhydroxidlösung (1M) wurde zugesetzt, bis der pH-Wert 14 erreichte. Diese Lösung wurde vier Stunden lang gerührt, dann mit vorgewaschenem Dowex 50 Ionenaustauscherharz (H+ Form) neutralisiert. Das Harz wurde abgefiltert und das Filtrat wurde gefriergetrocknet. Das Produkt wurde dann im Vakuum über P&sub2;O&sub5; getrocknet, unter Erhalt von Di-6-[3-(3- carboethoxymethylphenyl)-4-(α-D- mannopyranosyloxy)phenyl]hexylether (0,21 g, 78%).
¹H NMR (400 MHz, CD&sub3;CN/D&sub2;O): 7.46 (2H), 7.34 (2H), 7.16 (10H), 5.31 (2H), 3.79 (2H), 3.66 (2H), 3.57 (4H), 3.42 (5H, 3.28 (2H), 2.56 (4H), 1.80 (4H), 1.60 (4H), 1.36 (6H).

BEISPIEL 6

S,S-Bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(α-D-mannopyranosyloxy)-3- phenylprop-1-yl]-1,3-dithiopropan

Schritt 1: Teil A: 3-(2-Methoxyphenyl)phenylessigsäureethylester (5,04 g, 18,6 mmol) und 3-Brompropionylchlorid (1,88 ml, 18,66 mmol) wurden mit Dichlorethan (30 ml) vermischt. Die Mischung wurde auf einem Eiswasserbad gekühlt und mit Aluminiumchlorid (7,6 g, 57 mmol) behandelt. Nach 15 Minuten wurde die Reaktion mit Eiswasser (100 ml) vermischt, und die organischen Phasen wurden abgetrennt. Der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 5 ml) extrahiert, und die organischen Substanzen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde im nächsten Schritt ohne weitere Aufreinigung eingesetzt.
Teil B: Das Produkt von Teil A (8,5 g, 19 mmol) wurde in Dichlormethan (40 ml) gelöst und auf einem Eiswasserbad gekühlt. Trifluoressigsäure (5,9 ml, 76 mmol), Triethylsilan (6,1 ml, 38 mmol) und dann Bortrifluoridetherat (9,4 ml, 76 mmol) wurden zugesetzt und das Kühlbad wurde entfernt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und dann auf einem Eisbad gekühlt und mit kaltem Wasser gelöscht (100 ml). Die organischen Phasen wurden abgetrennt, und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 10 ml) extrahiert, und die organischen Phasen wurden vereinigt, mit gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung (50 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert, unter Bereitstellung von 3-(2-Methoxyphenyl-5-(3-brompropyl)phenylessigsäureethylester (6,53 g, 90%)
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.41-7.45 (m, 2H), 7.36 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.25-7.28 (m, 1H), 7.12-7.16 (m, 2H), 6.90 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.15 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 3.41 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.75 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.15 (m, 2H), 1.26 (t, J = 7.3 Hz, 3H), IR (NaCl): 1736 cm&supmin;¹.
Schritt 2: Eine Lösung von 1,3-Propandithiol (0,109 g, 0,94 mmol) in THF (4,5 ml) wurde unter Stickstoff entgast und auf einem Eiswasserbad gekühlt. Natriumhydrid (86,5 mg, 2,1 mmol) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden lang gerührt. Eine Lösung des Bromids nach Schritt 1 (0,83 g, 2,12 mmol) in THF (1,0 ml) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde über Nacht zum Rückfluß erhitzt. Die Reaktion wurde zwischen Wasser und Ethylacetat (20 ml einer 1 : 1 Mischung) verteilt, und die organischen Phasen wurden abgetrennt, mit gesättigter Natriumchloridlösung (20 ml) gewaschen und getrocknet (MgSO&sub4;) und so dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient Hexan zu 3 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt von S,S-bis-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)- 4-(methoxy)-3-phenylprop-1-yl]-1,3-dithiopropan (166,2 mg, 24%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl ): 7.39-7.45 (m, 4H), 7.32-7.38 (m, 2H), 7.21-7.28 (m, 2H), 7.08-7.15 (m, 4H), 6.85-6.92 (m, 2H), 4.14 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.77 (s, 6H), 3.65 (s, 4H), 2.80-2.95 (m, 2H), 2.77 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 8.0 Hz, 4H), 2.60 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.52 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.04-2.16 (m, 2H), 1.81-1.93 (m, 4H), 1.25 (t, J = 7.0 Hz, 6H). IR (NaCl): 1731 cm&supmin;¹.
Schritt 3: Eine Lösung des bis-Thioethers aus Schritt 2 (70,7 mg, 0,1 mmol) in Dichlormethan (2 ml) wurde auf einem Trockeneis/Acetonbad gekühlt und mit Bortribromid (0,8 ml einer 1M Lösung in Dichlormethan, 0,8 mmol) behandelt, und die Mischung wurde bei -10ºC über Nacht stehen lassen. Die Reaktion wurde mit Wasser (10 ml) vermischt, und die Mischung wurde mit Dichlormethan (3 · 2 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert, unter Erhalt von S,S-bis-[3-(3- Carboethoxymethylphenyl)-4-(hydroxy)-3-phenylprop-1-yl]-1,3- Dithiopropan (68 mg, 100%).
¹NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.43 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.34-7.39 (m, 4H), 7.30 (br d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.03-7.08 (m, 4H), 6.87 (br d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.96-5.30 (br s, 2H), 4.15 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 3.66 (s, 4H), 2.66 (t, J = 7.3 Hz, 4H), 2.60 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.52 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 1.80-1.92 (m, 6H), 1.26 (t, J = 7.3 Hz, 6H), 1.21- 1.27 (m, 2H). IR (NaCl): 3420, 1726 cm&supmin;¹.
Schritt 4: Das Phenol (0,47 g, 0,68 mmol) und α-D-Mannose Pentaacetat (0,8 g, 2,0 mmol) wurden mit Dichlorethan (8 ml) vermischt und mit Bortrifluoridetherat (1,0 ml, 8,0 mmol) behandelt. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, dann mit Wasser (10 ml) gelöscht. Die organischen Phasen wurden abgetrennt und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 2 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient: 3 : 1 Hexan/Ethylacetat bis 1 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, wobei man S,S-bis-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4-(2,3,4,6-tetra-O -acetyl-α-D-mannopyranosyloxy)-3-phenylprop-1-yl]-1,3- dithiopropan (0,331 g, 36%) IR (NaCl): 1752 cm&supmin;¹ erhielt.
Schritt 5: Das per-Acetat (0,64g, 0,47 mmol) wurde in Acetonitril (5 ml) gelöst und mit einer Lösung von Natriumhydroxid (5,0 ml einer 2 N Lösung, 10 mmol) behandelt und dann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure bis auf einen pH-Wert von 2 angesäuert, und die flüchtigen Stoffe wurden unter vermindertem Druck entfernt. Ein Anteil des wässerigen Rückstandes wurde durch Reversphasenchromatographie aufgereinigt, unter Bereitstellung von S,S-bis-[3-(3- Carboxymethylphenyl)-4-(α-D-mannopyranosyloxy)-3-phenylprop-1- yl]-1,3-dithiopropan als weißen Feststoff. Smp.: 96-100ºC.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d&sub6;): 7.31-7.39 (m, 6H), 7.20-7.27 (m, 4H), 7.11-7.15 (m, 4H), 5.26 (s, 2H), 3.30-3.75 (m, 28H), 2.64 (t, J = 7.7 Hz, 4H), 2.57 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 2.45-2.52 (m, 4H), 1.75-1.84 (m, 4H), 1.66-1.74 (m, 2H). IR (KBr): 3430, 1711 cm&supmin;¹.

BEISPIEL 7

1,6-Bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-1,6-bis-oxohexan

Schritt 1 : 3-(2-(2,3,4,6-Tetra-O-Acetyl-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl)phenylessigsäureethylester (0,56 g, 0,96 mmol) und Adipoylchlorid (0,068 ml, 0,47 mmol) wurden in Dichlorethan (5 ml) gelöst und auf einem Eiswasserbad gekühlt und dann mit Aluminiumchlorid (2,56 g, 19,2 mmol) behandelt. Nach 1,5 Stunden wurde die Reaktion mit Eiswasser (25 ml) vermischt und 15 Minuten lang gerührt. Die organischen Stoffe wurden abgetrennt, und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 2 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, 1 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,6-bis-[3-(3- Carboethoxymethylphenyl)-4-(2,3,4,6-tetra-O-Acetyl-α-Dmariopyranosyloxy)phenyl]-1,6-bis-oxohexan (0,43 g, 35%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 8.00 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 7.93 (dd, J = 8.6, 2.2 Hz, 2H), 7.42-7.48 (m, 6H), 7.31-7.35 (m, 2H), 7.25-7.29 (m, 2H), 5.60 (d, J = 0.2 Hz, 2H), 5.31-5.34 (m, 2H), 5.28 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 5.23- 5.28 (m, 2H), 4.21 (dd, J = 12.3, 5.1 Hz, 2H), 4.15 (q, J = 7.4 Hz, 4H), 3.98 (dd, J = 12.4, 2.2 Hz, 2H), 3.79-3.85 (m, 2H), 3.73 (s, 4H), 3.00-3.06 (m, 4H), 2.17 (s, 6H), 2.03 (s, 6H), 2.01 (s, 6H), 1.98 (s, 6H), 1.81-1.85 (m, 4H), 1.26 (t, J = 7.5 Hz, 6H). IR (NaCl): 1747, 1680 cm&supmin;¹.
Schritt 2: Das per-Acetat (0,43 g, 0,33 mmol) wurde in Acetonitril (4 ml) gelöst, und die Lösung wurde mit 2 N Natriumhydroxid (1,8 ml, 3,6 mmol) gerührt. Nach 18 Stunden bei Raumtemperatur wurde die Reaktionsmischung mit saurem Dowex 50 W Ionenaustauscherharz neutralisiert, und die flüchtigen Stoffe wurden unter vermindertem Druck entfernt. Ein Anteil des Rückstandes wurde mit Umkehrphasen- HPLC gereinigt, unter Erhalt von 1,6-bis-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4-(α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-1,6-bis-oxohexan als weißen Feststoff. Smp.: 127-129ºC.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d&sub6;): 7.98 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.90 (s, 2H), 7.35-7.48 (m, 8H), 7.27 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.53 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.66 (s, 4H), 3.60 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 3.42-3.51 (m, 6H), 3.28-3.35 (m, 2H), 3.07- 3.15 (m, 4H), 1.67-1.73 (m, 4H). IR (KBr): 3430, 1716, 1672 cm&supmin;¹. Analyse: c ber. für C&sub4;&sub6;H&sub5;&sub0;O&sub1;&sub8; · 0.6 TFA: 59.10% C, 5.32% H. Gefunden: 58.92% C, 5.68% H.

BEISPIEL 8

1,3,5-Tris-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenylmethyl]benzol

Schritt 1 : 1,3,5-Benzoltricarbonyltrichlorid (1,0 g, 3,8 mmol) wurde in 1,2-Dichlorethan (20 ml) gelöst.
Aluminiumchlorid (2,6 g, 18,8 mmol) wurde zugesetzt, dann wurde 3-(2-Methoxyphenyl)phenylessigsäuremethylester (4, 8 g, 18,8 mmol) zugesetzt, und die Mischung wurde über Nacht auf 65ºC erwärmt. Nach dem Kühlen auf einem Eiswasserbad wurden (20 ml) Eiswasser langsam zugegeben. Die organischen Substanzen wurden abgetrennt, und der wässerige Anteil wurde mit Methylenchlorid (3 · 5 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient von Hexan bis 1 : 1/Hexan : Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt des Triketons 33(f=1),
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 8.38 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 7.93 (m, 3H), 7.80-7.83 (m, 3H), 7.45 (m, 6H), 7.38 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 7.21-7.29 (m, 3H), 6.95 (dd, J = 8.76, 1.44 Hz, 3H), 3.88 (s, 9H), 3.67 (s, 6H), 3.66 (s, 9H) ppm. IR (NaCl): 1734, 1654 cm&supmin;¹.
Schritt 2: Das Triketon 33 (3,13 g, 3,4 mmol) wurde in Dichlormethan (16 ml) gelöst, auf einem Eisbad gekühlt und mit Triethylsilan (3,8 ml, 23,7 mmol), Trifluoressigsäure (2,6 ml, 33,8 mmol) und Bortrifluoriddiethyletherat (4,3 ml, 33,8 mmol) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur 1 Stunde lang gerührt, dann mit Wasser (25 ml) vermischt. Die organischen Phasen wurden abgetrennt, und der wässerige Anteil wurde mit Methylenchlorid (3 · 5 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet, (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde an Silicagel mit Hexan : Ethylacetat/3 : 1 laufen lassen und dann aufkonzentriert, unter Erhalt von 1,3,5-tris-[3-(3-Carbomethoxymethylphenyl)- 4-(2-methoxy)phenylmethyl]benzol (0,88 g, 28%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.38-7.43 (m, 6H), 7.33 (t, J = 7.68 Hz, 3H), 7.23 (s, 3H), 7.14 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 7.08 (dd, J = 8.08, 1.84 Hz, 3H), 6.90 (s, 3H), 6.85 (d, J = 8.4 Hz, 3H), 3.89 (s, 6H), 3.76 (s, 9H), 3.68 (s, 9H), 3.66 (s, 6H) ppm. IR (NaCl): 1738 cm&supmin;¹.
Schritt 3: Teil A: 1,3,5-Tris-[3-(3- Carbomethoxymethylphenyl)-4-(2-methoxy)phenylmethyl]benzol (0,88 g, 1,0 mmol) wurde in Dichlormethan (5 ml) gelöst und auf einem Trockeneis/Acetonbad gekühlt. Bortribromid (0,7 ml, 7,0 mmol) wurde langsam zugesetzt, und die Mischung wurde bei 0ºC 2 Stunden lang gerührt, dann mit Eiswasser (10 ml) gewaschen. Die organischen Phasen wurden abgetrennt und der wässerige Anteil wurde mit Methylenchlorid (3 · 5 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert, unter Erhalt von 0,82 g des Rohproduktes.
Teil B: Der Rückstand aus Teil A wurde mit Methanol (20 ml) vermischt, und es wurde Schwefelsäure (1 ml) zugesetzt. Die Mischung wurde über Nacht zum Rückfluß erhitzt und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mit Dichlormethan (20 ml) und mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung (10 ml) vermischt. Die organische Phase wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mit Hexan : Ethylacetat /1 : 1 durch Silicagel gespült und aufkonzentriert, unter Bereitstellung von 1,3,5-tris -[3-(3-Carbomethoxymethylphenyl)-4-(2- hydroxy)phenylmethyl]benzol (0,63 g, 75%).
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.20-7.50 (m, 12H), 7.0 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 6.98 (s, 2H), 6.95 (dd, J = 8.08, 2.2 Hz, 2H), 6.83 (s, 3H), 6.77 (d, J = 8.44, 3H), 3.85 (s, 6H), 3.69 (s, 9H), 3.66 (s, 6H) ppm. IR (NaCl): 3429, 1737 cm&supmin;¹.
Schritt 4: Das Triphenol (0,62g, 0,7 mmol) wurde in 1,2- Dichlorethan (4 ml) gelöst, α-D-Mannosepentaacetat (1,4g, 3,7 mmol) wurde zugesetzt, gefolgt von der langsamen Zugabe von Bortrifluoridetherat (1,6 ml, 13,3 mmol). Die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, dann mit Wasser vermischt (10 ml). Das organische Material wurde abgetrennt, und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 2 ml) extrahiert. Die organischen Fraktionen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und dann unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient, Hexan zu 2 : 1/Ethylacetat : Hexan) aufgereinigt, unter Bereistellung von 1,3,5-tris-[3-(3-Carbomethoxymethylphenyl)- 4-(2-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl)-α-D- mannopyranosyloxy)phenylmethyl]benzol (0,9 g, 67%)
¹H NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 6.98-7.50 (m, 21H), 6.86 (s, 3H), 5.26 (m, 3H), 3.90-3.93 (m, 6H), 3.89 (s, 6H), 3.71 (s, 6H), 3.66 (s, 9H), 1.94-2.13 (m, 36H) ppm. IR (NaCl): 1745 cm&supmin;¹.
Schritt 5: Das per-Acetat (0,88 g, 0,48 mmol) wurde in Acetonitril (2 ml) gelöst und mit Lithiumhydroxidmonohydrat (0,4g, 9,6 mmol) in Wasser (2 ml) behandelt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt, dann mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 angesäuert. Die Mischung wurde unter reduziertem Druck aufkonzentriert, und der Rückstand wurde mittels HPLC (C-18 Umkehrphase, Elutionsgradient 20-80% Acetonitril in Wasser, beobachtet bei 254 nm) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,3,5-tris-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenylmethyl]benzol (0,35 g, 57%) als weißen Feststoff, Smp.: 155-158ºC.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d&sub6;): 7.27-7.34 (m, 9H), 7.17-7.22 (m, 9H), 7.08-7.10 (dd, J = 8.44, 1.70 Hz, 3H), 7.01 (s, 3H), 5.24 (s, 3H), 3.85 (s, 6H), 3.33-3.64 (m, 24H) ppm. IR (KBr): 3431, 1710 cm&supmin;¹. Analyse: ber. für C&sub6;&sub9;H&sub7;&sub2;O&sub2;&sub4; · 1.0 TFA: 60.94%C, 5.26%H. Gefunden: 60.85%C, 5.23%H.

BEISPIEL 9

1,3,5-Tris-[4-[3-(3-Carboxymethylphenyl-4-(α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-4-oxo-2-thiobutyl]benzol

Schritt 1 : 3-(2-(2,3,4,6-Tera-O-Acetyl-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl)phenylessigsäureethyl (0,32 g, 0,547 mmol) und Bromacetylbromid (0,06 ml, 0,689 mmol) wurden in Dichlorethan (3 ml) gelöst und auf einem Trockeneis/Acetonbad gekühlt. Die Mischung wurde mit Aluminiumchlorid (1,45 g, 10,9 mmol) behandelt, und das Bad wurde durch ein Eiswasserbad ersetzt. Nach 15 Minuten wurde die Reaktion mit Eiswasser (25 ml) vermischt und 15 Minuten lang gerührt. Die organischen Phasen wurden abgetrennt, und der wässerige Anteil wurde mit Dichlormethan (3 · 2 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;), dann unter vermindertem Druck eingeengt, unter Erhalt von 0,387 g des Produktes, das ohne weitere Aufreinigung zum Einsatz gelangte.
¹NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 8.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.41-7.47 (m, 3H), 7.35 (m, 1H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 5.21-5.34 (m, 3H), 4.42 (s, 2H), 4.10-4.25 (m, 5H), 3.99 (dd, J = 12.1, 2.2 Hz, 1H), 3.80-3.85 (m, 1H), 3.74 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.26 (t, J = 8.0 Hz, 3H). IR (NaCl): 1746, 1220 cm&supmin;¹.
Schritt 2 : 1,3,5-Tris-(Mercaptomethyl)benzol (102 mg, 0,47 mmol) in THF (/ml) wurde mit Natriumhydrid (59,8 mg, 1,49 mmol) behandelt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 30 Minuten lang gerührt. Eine Lösung des α-Bromketons aus Schritt 1 (1,02g, 1,44 mmol) in THF (2,0 ml) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Reaktion wurde mit Wasser (10 ml) gemischt und mit Ethylacetat (3 · 5 ml) extrahiert. Die orangischen Substanzen wurden vereinigt, getrocknet (MgSO&sub4;) und unter vermindertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mittels Flashchromatographie (SiO&sub2;, Elutionsgradient, 3 : 1 Hexan/Ethylacetat bis 1 : 1 Hexan/Ethylacetat) aufgereinigt, unter Erhalt von 1,3,5-tris -[4-[3-(3-Carboethoxymethylphenyl)-4-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-4-oxo-2-thiobutyl]benzol (0,59 g, 60%).
¹NMR (400 MHz, CDCl&sub3;): 7.98 (d, J = 2.5 Hz, 3H), 7.89 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 3H), 7.40-7.46 (m, 6H), 7.25-7.35 (m, 12H), 5.61 (s, 3H), 5.22-5.33 (m, 9H), 4.10- 4.25 (m, 10H), 3.97 (dd, J = 12.1, 2.2 Hz, 3H), 3.78-3.84 (m, 3H), 3.72 (s, 6H), 3.69 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 2.16 (s, 9H), 2.02 (s, 9H), 2.01 (s, 9H), 1.97 (s, 9H), 1.25 (t, J = 8.0 Hz, 9H); IR (NaCl): 1747, 1219 cm&supmin;¹.
Schritt 3: Das Triester per-Acetat aus Schritt 2 (0,59 g, 0,28 mmol) in THF (3 ml) wurde mit einer Lösung frisch hergestellten Natriummethoxids (93 mg, 4,04 mmol in 3 ml Methanol) behandelt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Der sich bildende Niederschlag wurde mittels Vakuumfiltration gesammelt und mehrere Male mit 2 : 1 THF/Methanol gewaschen und unter Vakuum getrocknet, wobei man 0,38 g eines weißen Feststoffes erhielt. Der Feststoff wurde in Wasser (12 ml) gelöst, 2 N Natriumhydroxid wurde bis zur Einstellung eines pH- Wertes von 14 hinzugegeben, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 4 Stunden lang gerührt. Die Reaktion wurde mit saurem Dowex 50 W Ionenaustauscherharz angesäuert, filtriert, und die flüchtigen Stiffe wurden unter vermindertem Druck entfernt. Ein Anteil des wässerigen Rückstandes wurde mittels Umkehrphasenchromatographie aufgereinigt, unter Erhalt von 1,3,5-tris-[4-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-4-oxo-2-thiobutyl]benzol als weißen Feststoff, Smp. 140-143ºC.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d&sub6;): 7.95 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 3H), 7.89 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 7.32-7.45 (m, 12H), 7.26 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 7.16-7.20 (m, 3H), 5.54 (s, 3H), 5.05 (br s, 3H), 4.85 (br s, 3H), 4.70 (br s, 3H), 4.50 (br s, 3H), 3.88-3.92 (m, 6H), 3.58-3.73 (m, 18H), 3.40-3.49 (m, 6H), 3.30-3.40 (m, 6H plus H&sub2;O). IR (KBr): 3429, 1708, 1669 cm&supmin;¹. Analyse: bar. für C&sub7;&sub5;H&sub7;&sub8;O&sub2;&sub7;S&sub3; · 1.8 TFA: 55.12%C, 4.79%H. Gefunden: 55.14%C, 5.20%H.

BEISPIEL 10

Bindungsassays

Die Verbindungen wurden auf ihre Fähigkeit zur Inhibition der Bindung von E-, P-, und/oder L-Selectin an Sialyl-Lewisx getestet.
Der E-Selectin Bindungsassay umfaßte die Beurteilung der Fähigkeit von HL60 Zellen, die Sialyl-Lewisx und Lewisx exprimieren, gegenüber aufgereinigten rekombinanten E-Selectin, P-Selectin und L-Selectin Proteinen (Zellproteinassay). Ein ähnlicher Bindüngsassay, der aufgereinigte Glykolipide und aufgereinigte rekombinante L-Selectin Proteine (Glykolipid- Protein) verwendete, wurde angewandt, um die L-Selectinbindung zu beurteilen.

Zellproteinassay

E-Selectin, P-Selectin und L-Selectin wurden in rekombinanten löslichen Formen als Fusionsproteine exprimiert, die das aminoterminale Lectin EGF und komplementäre regulatorartige Wiederholungen (CR) 1 und 2 aufwiesen, die an die Scharnier- und and die konstanten Schwerkettenregionen 1 und 2 der Mäuse IgG2A cDNA anfusioniert waren. Alle Selectinfusionskassetten wurden durch PCR aus E-Selectin cDNA erzeugt, die von R&D Systems (Minneapolis, MN) erhalten worden waren und aus P-Selectin und L-Selectin cDNAs, die mittels PCR aus Gesamt-RNA-Extrakten humaner Placenta geklont worden waren. Die Mäuse IgG cDNA wurde aus amplifizierter PCR cDNA geklont, die aus RNA erzeugt wurde, die aus der Hybridomzellinie 402C10 extrahiert worden war. Alle Fusionskassetten wurden aus Baculoviren-Vektoren unter Verwendung des BakPAK Verfahrens exprimiert, und die SF21 Zellen wurden von Clonetech erhalten.
Die rekombinanten Fusionsproteine wurden von infizierten Baculovirus-Kulturüberständen durch Immunfällung unter Verwendung von DynalTM Ziegen anti-Mäuse IgG beschichteten Magnetperlen erhalten. Pseudoperlen wurden aus uninfizierten SF21 Kulturüberständen erhalten. Nach der Immunfällung wurden die Perlen mit Pseudokulturüberständen inkubiert und banden nicht an die HLGO Zellen, die Sialyl-Lewisx exprimieren und als negative Kontrolle dienten. Die Perlen, die aus den E-, L- oder P-Selectin Kulturüberständen inkubiert waren, banden an HL60 Zellen.
HL60 Zellen (10&sup7; Zellen) wurden fluoreszent mit Calcein AMC-3099 (Molekularsonden) in RPMI 1640 mit 10% fetalem Kälberserum (FCS) markiert. Die Magnetperlen (7ul, 4 · 10&sup6; Perlen/ml) wurden in doppelten Vertiefungen einer biegsamen 96iger Vertiefungsmikrotiterplatte entlang mit 7 ul der Verbindungen bei verschiedenen Konzentrationen und 74 von Calcein-markierten HL60 Zellen inkubiert. Die Platten wurden zehn Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert. Die Platte wurde dann auf einem magnetischen Separator gesetzt, und weitere 2 Minuten lang inkubiert. Während die Mikrotiterplatte auf dem Separator verblieb, wurden ungebundene HL60 Zellen entfernt, und die Vertiefungen wurden zwei mal mit phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) gewaschen, um alle verbleibenden ungebundenen Zellen zu entfernen. Die HL60 Zellen, die an den Perlen gebunden blieben, wurden mikroskopisch untersucht und dann durch die Zugabe von 50 ml einer 1%igen Lösung von NP40 in PBS lysiert. Die Bindung wurde quantitativ fluorimetrisch unter Verwendung eines Millipore Cytofluor 2350 Fluorimeters bestimmt. Die Dosisantwortkurven und die Konzentration der Verbindung, bei denen 50% der Zellbindung inhibiert war, (IC&sub5;&sub0;) wurden bestimmt.
Die Verbindungen, die in der folgenden Tabelle angeführt sind, sind diejenigen Verbindungen, die als die hier besonders bevorzugten Verbindungen erachtet werden.
Die Ergebnisse dieser Assays sind in der folgenden Tabelle dargestellt: Tabelle der in Vitro Selectin Assaydaten

Claims

1. Verbindung nach folgender Formel:

worin X gewählt ist aus der Gruppe bestehend aus

-CN, -(CH&sub2;)nCO&sub2;H, -(CH&sub2;)nCONHOH, -O(CH&sub2;)mCO&sub2;H,

-O(CH&sub2;)mCONHOH, -(CH&sub2;)nCONHNH&sub2;, -(CH&sub2;)nCOZ, -(CH&sub2;)nZ,

-CH(CO&sub2;H)(CH&sub2;)mCO&sub2;H, -(CH&sub2;)nO(CH&sub2;)mCO&sub2;H, -CONH(CH&sub2;)mCO&sub2;H,

-CH(OZ)(CO&sub2;H), -CH(Z)(CO&sub2;H), -(CH&sub2;)nSO&sub3;H, -(CH&sub2;)nPO&sub3;D&sub1;D&sub2;,

-NH(CH&sub2;)mCO&sub2;H, -CONH(CHR&sub3;)CO&sub2;H, (1-H-Tetrazolyl-S-alkyl-) und -OH;

worin, für zweiwertige Strukturen, Y gleich folgendem ist

-(CH&sub2;)f-,

-CO(CH&sub2;)fCO-, -(CH&sub2;)fO(CH&sub2;)f-, -CO(CH&sub2;)fO(CH&sub2;)fCO-

-(CH&sub2;)gS(O)b(CH&sub2;)fS(O)b(CH&sub2;)g-,

-CO(CH&sub2;)qS(O)b(CH&sub2;)fS(O)b(CH&sub2;)gCO-, -(CH&sub2;)fV(CH&sub2;)f-,

-(CH&sub2;)fCOVCO(CH&sub2;)f-, -CO(CH&sub2;)fCOVCO(CH&sub2;)fCO-,

-CO(CH&sub2;)fV(CH&sub2;)fCO-, -CONH(CH&sub2;)fNHCO-, -CO(CH&sub2;)fW(CH&sub2;)fCO-,

-(CH&sub2;)fWSW(CH&sub2;)f-,

-(CH&sub2;)fCONH(CH&sub2;)fNHCO(CH&sub2;)f-, -(CH&sub2;)fCOW(CH&sub2;)fWCO(CH&sub2;)f- oder

-CH&sub2;(CH&sub2;)fW(CH&sub2;)fCH&sub2;-, worin V gleich -N [(CH&sub2;)q]&sub2;N- und q unabhängig

2 bis 4 ist, und W gleich Aryl oder Heteroaryl ist;

worin, für dreiwertige Strukturen, Y gleich folgendem ist:

und worin T ausgewählt ist, aus der Gruppe bestehend aus -(CH&sub2;)f -, -CO(CH&sub2;)f-, -(CH&sub2;)gS(O)b(CH&sub2;)f- und -CO(CH&sub2;)gS(O)b(CH&sub2;)f-, worin die Carbonylgruppe zur Biphenyleinheit benachbart ist;

worin R&sub1; und R&sub2; unabhängig aus der Gruppe gewählt sind, bestehend aus Wasserstoff, Alkyl, Halogen, -OZ, -NO&sub2;, -(CH&sub2;)nCO&sub2;H, -NH&sub2; und -NHZ;

worin R&sub3; ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Alkyl, Aralkyl, Hydroxyalkyl, Aminoalkyl, Alkylcarbonsäure und Alkylcarboxamid;

worin f gleich 1 bis 16 ist, g gleich 0 bis 6 ist, n gleich 0 bis 6 ist, m gleich 1 bis 6 ist, p gleich 0 bis 6 ist, b gleich 0 bis 2 ist, Z gleich Alkyl, Aryl oder Aralkyl ist, und worin D&sub1; und D&sub2; unabhängig Wasserstoff oder Alkyl sind, und die pharmazeutisch verträglichen Salze, Ester, Amide und Prodrugs davon.

2. Eine Verbindung nach folgender Formel:

worin X gleich -COOH, - (CH&sub2;)nCOOH oder -O(CH&sub2;)nCOOH ist und

Y gleich

-(CH&sub2;)n-, -(CH&sub2;)nW(CH&sub2;)n-, -(CH&sub2;)nWOW(CH&sub2;)n-,

-(CH&sub2;)nS(CH&sub2;)nS(CH&sub2;)n-, -CO(CH&sub2;)nCO-, oder

-(CH&sub2;)nCOW(CH&sub2;)nWCO(CH&sub2;)n- worin W gleich Aryl oder Heteroaryl ist, und worin n gleich 0 bis 6 ist, und pharmazeutisch verträgliche Salze, Ester, Amide und Prodrugs davon.

3. Eine Verbindung nach Anspruch 2, worin Y gleich -(CH&sub2;)f- oder -CH&sub2;(CH&sub2;)fW(CH&sub2;)fCH&sub2;- ist.

4. Eine Verbindung nach Anspruch 2, worin X gleich 3- CH&sub2;CO&sub2;H und Y gleich -(CH&sub2;)f- oder -CH&sub2;(CH&sub2;)fW(CH&sub2;)fCH&sub2; ist.

5. Ein Verbindung ausgewählt aus folgendem:

1,7-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]heptan,

1,6-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]hexan,

1,5-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]pentan,

1,4-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]butan,

N,N'-bis-[4-(3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(α-Dmannopyranosyloxy)phenyl)butan-1-oyl]-4,4'- trimethylendipiperidin,

S,S'-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-D-mannopyranosyloxy)- 3-phenylprop-1-yl]-1,3-dithiopropan,

1,7-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-1,7-bis-oxoheptan,

1,6-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-1,6-bis-oxohexan,

1,5-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(-2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-1,5-bis-oxopentan,

1,4-bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-1,4-bis-oxobutan,

1,3,5-tris-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenylmethyl]benzol, und

1,3,5-tris-[4-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]-4-oxo-2-thiobutyl]benzol.

6. 1,6-Bis-[3-(3-Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-Dmannopyranosyloxy)phenyl]hexan.

7. Eine pharmazeutische Zusammensetzung umfassend eine Verbindung nach Anspruch 1 und einen pharmazeutisch verträglichen Träger.

8. Ein Verfahren der Hemmung der Bindung von E-Selectin, P- Selectin oder L-Selectin an sLex oder sLea, umfassend die Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung nach Anspruch 1 an den Patienten.

9. Ein Verfahren der Hemmung der Bindung von E-Selectin, P- Selectin oder L-Selectin an sLex oder sLea, umfassend die Verabreichung einer wirksamen Menge von 1,6-Bis-[3-(3- Carboxymethylphenyl)-4-(2-α-D-mannopyranosyloxy)phenyl]hexan an den Patienten.