DE60316423T2

DE60316423T2 - Tyrosinkinase-hemmer

Info

Publication number: DE60316423T2
Application number: DE60316423T
Authority: DE
Inventors: B. Wesley Rahway TROTTER
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2002-04-12
Filing date: 2003-04-08
Publication date: 2008-06-12
Anticipated expiration: 2023-04-09
Also published as: JP2005528387A; WO2003086315A3; ES2292956T3; CA2480758A1; EP1496907A2; AU2003223689A1; WO2003086315A2; US20050227988A1; DE60316423D1; EP1496907B1; AU2003223689B2; US7371754B2; JP4475389B2; ATE373662T1; EP1496907A4

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Proteinkinasen (PKs) sind Enzyme, die die Phosphorylierung von Hydroxygruppen an Tyrosin-, Serin- und Threoninresten von Proteinen katalysieren. Die Folgen dieser scheinbar einfachen Aktivität sind erstaunlich; Zellwachstum, -differenzierung und -proliferation, d.h. nahezu alle Aspekte des Zelllebens, hängen auf die eine oder andere Weise von der PK-Aktivität ab. Darüber hinaus wurde eine abnormale PK-Aktivität mit einer ganzen Reihe von Störungen in Verbindung gebracht, die von relativ gering lebensbedrohlichen Erkrankungen, wie z.B. Psoriasis, bis extrem virulenten Erkrankungen, wie z.B. Glioblastom (Hirnkrebs), reichen. PKs können in zwei Klassen unterteilt werden, die Protein-Tyrosin-Kinasen (PTKs) und die Serin-Threonin-Kinasen (STKs).
Bestimmte Wachstumsfaktorrezeptoren, die eine PK-Aktivität ausüben, sind als Rezeptor-Tyrosin-Kinasen (RTKs) bekannt. Sie umfassen eine große Familie von Transmembranrezeptoren mit mannigfaltiger biologischer Aktivität. Momentan sind mindestens neunzehn (19) verschiedene Unterfamilien von RTKs bekannt. Eine RTK-Unterfamilie enthält den Insulinrezeptor (IR), den Rezeptor von insulinähnlichem Wachstumsfaktor 1 (IGF-1R) und den Insulinrezeptor-related Rezeptor (IRR). IR und IGF-1R Wechselwirken mit Insulin, IGF-I und IGF-II, wobei ein Heterotetramer aktiviert wird, das aus zwei vollständig extrazellulären glycosylierten α-Untereinheiten und zwei β-Untereinheiten besteht, welche die Zellmembran kreuzen und die Tyrosin-Kinase-Domäne enthalten. Der Rezeptor von insulinähnlichem Wachstumsfaktor 1 (IGF-1R) und seine Liganden, IGF-1 und IGF-2, werden in zahlreichen Tumoren, einschließlich, ohne jedoch daraufbeschränkt zu sein, Brust-, Prostata-, Schilddrüsen-, Lungen-, Leber-, Darm-, Gehirn-, Neurokin-Tumoren und anderen, abnormal exprimiert.
Eine vollständigere Auflistung der bekannten RTK-Unterfamilien ist bei Plowman et al., KN&P, 1994, 7(6): 334-339 beschrieben, einschließlich sämtlicher Zeichnungen, genauso als ob sie hierin vollständig beschrieben wäre.
Zusätzlich zu den RTKs existiert auch eine Familie von vollständig intrazellulären PTKs, die "Nichtrezeptor-Tyrosinkinasen" oder "zelluläre Tyrosinkinasen" genannt werden. Letztere Bezeichnung, abgekürzt "CTK", wird hierin verwendet werden. CTKs enthalten keine extrazellulären und Transmembran-Domänen. Bislang wurden mehr als 24 CTKs in 11 Unterfamilien (Src, Frk, Btk, Csk, Abl, Zap70, Fes, Fps, Fak, Jak und Ack) identifiziert. Die Src-Unterfamilie scheint bisher die größte Gruppe von CTKs zu sein und umfasst Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr und Yrk. Für eine detaillierte Erörterung von CTKs siehe Bolen, Oncogene, 1993, 8:2025-2031.
RTKs, CTKs und STKs wurden alle mit einer Reihe von pathogenen Zuständen in Verbindung gebracht, einschließlich bedeutsam Krebs. Andere pathogene Zustände, die mit PTKs in Verbindung gebracht wurden, sind u.a., jedoch ohne Beschränkung, Psoriasis, Leberzirrhose, Diabetes, Atherosklerose, Angiogenese, Restenose, Augenerkrankungen, rheumatische Arthritis und andere Entzündungserkrankungen, Autoimmunerkrankungen und eine Reihe anderer Nierenerkrankungen.
Die WO 02/087587 offenbart kondensierte bicyclische Amine, die in der Lage sind, die Aktivität von Klasse-I-Rezeptor-Tyrosinkinasen zu inhibieren.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen, die in der Lage sind, die Signaltransduktion von Tyrosinkinasen sowohl vom Rezeptor- als auch vom Nichtrezeptortyp zu inhibieren, modulieren und/oder regulieren. Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung besitzen eine Kernstruktur, die einen Benzazocinrest enthält. Die vorliegende Erfindung betrifft auch die pharmazeutisch annehmbaren Salze und Stereoisomere dieser Verbindungen.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Die Verbindungen dieser Erfindung eignen sich bei der Inhibierung von Kinasen und werden durch eine Verbindung der Formel I:
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon veranschaulicht, wobei
R^1a unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl und
3) OR⁴,

R^1b unabhängig ausgewählt ist aus

1) Hund
2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl,

X unabhängig ausgewählt ist aus

1) einer Bindung,
2) C(O),
3) O,
4) NR⁴,
5) S(O)_mR⁴,
6) C(O)OR⁴ und
7) C(O)N(R⁴)₂,

R¹ unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) Halogen,
3) OR⁴,
4) NO₂,
5) -S(O)_mR⁴,
6) CN,
7) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl,
8) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl,
9) unsubstituiertem oder substituiertem C₂-C₆-Alkenyl,
10) unsubstituiertem oder substituiertem C₃-C₁₀-Cycloalkyl,
11) unsubstituiertem oder substituiertem C₂-C₆-Alkinyl,
12) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus,
13) -C(O)R⁴,
14) C(O)OR⁴,
15) C(O)N(R⁴)₂,
16) S(O)_mN(R⁴)₂ und
17) N(R⁴)₂,

V unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) CF₃,
3) Aryl,
4) Heterocyclus und
5) C₃-C₁₀-Cycloalkyl,

R² unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl,
3) -(CR^1b)_tOR⁴,
4) Halogen,
5) CN,
6) NO₂,
7) CF₃,
8) -(CR^1b)_tN(R⁴)₂,
9) -C(O)OR⁴,
10) -C(O)R⁴,
11) -S(O)₂R⁴,
12) -(CR^1b)_tNR⁴(CR^1b)_tR⁵,
13) -(CR^1b)_tS(O)_mNR⁴,
14) -C(O)OR⁴R⁵,
15) -NR⁴C(O)R⁴,
16) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl und
17) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus,

R⁴ unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl,
3) unsubstituiertem oder substituiertem C₃-C₁₀-Cycloalkyl,
4) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl,
5) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus und
6) CF₃,

R⁵ unabhängig ausgewählt ist aus

1) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl und
2) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus,

m unabhängig 0, 1 oder 2 ist,
n 0 bis 6 ist,
p 0 bis 6 ist,
q 0 bis 6 ist, mit der Maßgabe, dass, wenn V H oder CF₃ ist, q 0 ist, und
s 0 bis 16 ist,
t unabhängig 0 bis 6 ist.
Eine zweite Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist eine Verbindung der Formel I, wie sie oben beschrieben ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon, wobei R^1b, R⁴, R⁵ und die Variablen m, n, p, q und t wie oben definiert sind, und R^1a unabhängig ausgewählt ist aus

1) Hund
2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl,

X unabhängig ausgewählt ist aus

1) einer Bindung,
2) -C(O)R⁴ und
3) C(O),

R¹ unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) Halogen,
3) OR⁴,
4) N(R⁴)₂,
5) NO₂ und
6) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl,

V unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) CF₃,
3) Aryl und
4) Heterocyclus,

R² unabhängig ausgewählt ist aus

1) H,
2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl,
3) -(CR^1b)_tOR⁴,
4) Halogen,
5) CN,
6) NO₂,
7) CF₃,
8) -(CR^1b)_tN(R⁴)₂,
9) -C(O)OR⁴,
10) -(CR^1b)_tS(O)_mNR⁴,
11) -(CR^1b)_tNR⁴(CR^1b)_tR⁵,
12) -C(O)OR⁴R⁵ und
13) -NR⁴C(O)R⁴,

Eine weitere Ausführungsform der zweiten Ausführungsform ist eine Verbindung der Formel I, wie sie oben beschrieben ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon, wobei R^1b, X, R¹, R², R⁴, R⁵ und die Variablen m, s und t wie oben definiert sind und R¹ unabhängig ausgewählt ist aus

1) Hund
2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl,

V unabhängig ausgewählt ist aus

1) Aryl und
2) Heterocyclus,

Beispiele für Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind u.a. 3-(3-Brombenzyl)-11-methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin, 3-(3-Brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin, 3,11-Bis(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin, 11-Acetyl-3-(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon.
Weitere Beispiele für Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind u.a. 3-(3-Brombenzyl)-11-methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid, 3-(3-Brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid, 3,11-Bis(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid, 11-Acetyl-3-(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumtrifluoracetat oder die freie Form oder Stereoisomere davon.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können Asymmetriezentren, chirale Achsen und chirale Ebenen (wie beschrieben bei: E.L. Eliel und S.H. Wilen, Stereochemistry of Carbon Compounds, John Wiley & Sons, New York, 1994, Seiten 1119-1190) besitzen und als Racemate, racemische Mischungen und als einzelne Enantiomere und Diastereomere auftreten, wobei alle möglichen Stereoisomere und Mischungen davon, einschließlich optischer Isomere, von der vorliegenden Erfindung umfasst sind. Darüber hinaus können die hierin offenbarten Verbindungen als Tautomere existieren, und beide tautomeren Formen sollen vom Umfang der Erfindung umfasst sein, selbst wenn nur eine tautomere Struktur gezeigt ist.
Wenn irgendeine Variable (z.B. Aryl, Heterocyclus, R¹, R^a usw.) mehr als einmal in irgendeinem Substituenten vorkommt, ist ihre Definition bei jedem Auftreten unabhängig von jedem weiteren Auftreten. Auch sind Kombinationen aus Substituenten und Variablen nur zulässig, wenn solche Kombinationen zu stabilen Verbindungen führen.
Von Substituenten (wie z.B. R², R³ usw.) in die Ringsysteme gezogene Linien zeigen an, dass die angegebene Bindung an irgendeines der substituierbaren Ring-Kohlenstoffatome oder -Heteroatome geknüpft sein kann, einschließlich des Kohlenstoffatoms oder Heteroatoms, das der Verknüpfungspunkt ist. Wenn das Ringsystem polycyclisch ist, wie z.B.
soll die Bindung an irgendeines der geeigneten Kohlenstoffatome oder Heteroatome an einem beliebigen Ring geknüpft sein.
Es ist vorgesehen, dass der Rest A, wie er in Formel I veranschaulicht ist,
auch als
dargestellt werden könnte. Es ist auch vorgesehen, dass irgendeine der obigen Darstellungen des Restes A ferner wie folgt veranschaulicht werden kann:
Es sollte beachtet werden, dass der Rest A:
ein Enantiomer von
ist und deshalb die Reste A und B Stereoisomere sind. Es sollte auch beachtet werden, dass der Rest B als
dargestellt werden könnte und in einer ähnliche Weise wie für Rest A veranschaulicht substituiert sein kann.
Darüber hinaus bedeutet die folgende Struktur
eine racemische Mischung aus Rest A und Rest B.
Es ist zu verstehen, dass Substituenten und Substitutionsmuster an den Verbindungen der vorliegenden Erfindung von einem Durchschnittsfachmann ausgewählt werden können, um Verbindungen zu ergeben, die chemisch stabil sind und die leicht durch im Stand der Technik bekannte Verfahren sowie durch die nachstehend beschriebenen Verfahren aus leicht erhältlichen Ausgangsmaterialien synthetisiert werden können.
So wie hierin verwendet, soll "Alkyl" sowohl verzweigte, geradkettige als auch cyclische gesättigte aliphatische Kohlenwasserstoffgruppen mit der angegeben Anzahl von Kohlenstoffatomen umfassen. Zum Beispiel ist C₁-C₁₀ wie in "C₁-C₁₀-Alkyl" so definiert, dass es Gruppen mit 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 oder 10 Kohlenstoffen in einer linearen oder verzweigten Anordnung umfasst. Zum Beispiel umfasst "C₁-C₁₀-Alkyl" speziell Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, t-Butyl, Pentyl, Hexyl, Heptyl, Octyl, Nonyl, Decyl, Adamantyl usw.
So wie hierin verwendet, soll "Cycloalkyl" nichtaromatische cyclische Kohlenwasserstoffgruppen mit der angegeben Anzahl von Kohlenstoffatomen umfassen, die verbrückt oder strukturell gespannt sind oder nicht. Beispiele für solche Cycloalkyle sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl, Adamantyl, Cyclooctyl, Cycloheptyl, Tetrahydronaphthalin, Methylencyclohexyl und dergleichen. So wie hierin verwendet, können Beispiele für "C₃-C₁₀-Cycloalkyl" u.a. sein:
ohne jedoch darauf beschränkt zu sein.
So wie hierin verwendet, bedeutet die Bezeichnung "Alkoxy" eine Alkylgruppe mit der angegebenen Anzahl von Kohlenstoffatomen, die durch eine Sauerstoffbrücke verknüpft sind.
Wenn keine Anzahl für Kohlenstoffatome angegeben ist, bedeutet die Bezeichnung "Alkenyl" einen nichtaromatischen Kohlenwasserstoffrest, gerade, verzweigt oder cyclisch, der 2 bis 10 Kohlenstoffatome und wenigstens eine Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbindung enthält. Vorzugsweise liegt eine Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbindung vor, und bis zu 4 nichtaromatische Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbindungen können vorliegen. So bedeutet "C₂-C₆-Alkenyl" einen Alkenylrest mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen. Alkenylgruppen sind u.a. Ethenyl, Propenyl, Butenyl und Cyclohexenyl. Wie oben in Bezug auf Alkyl beschrieben, kann der gerade, verzweigte oder cyclische Teil der Alkenylgruppe Doppelbindungen enthalten und substituiert sein, wenn eine substituierte Alkenylgruppe angezeigt ist.
Die Bezeichnung "Alkinyl" bedeutet einen geraden, verzweigten oder cyclischen Kohlenwasserstoffrest, der 2 bis 10 Kohlenstoffatome und wenigstens eine Kohlenstoff-Kohlenstoff-Dreifachbindung enthält. Bis zu 3 Kohlenstoff-Kohlenstoff-Dreifachbindungen können vorliegen. So bedeutet "C₂-C₆-Alkinyl" einen Alkinylrest mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen. Alkinylgruppen sind u.a. Ethinyl, Propinyl und Butinyl. Wie oben in Bezug auf Alkyl beschrieben, kann der gerade, verzweigte oder cyclische Teil der Alkinylgruppe Dreifachbindungen enthalten und substituiert sein, wenn eine substituierte Alkinylgruppe angezeigt ist.
So wie hierin verwendet, soll "Aryl" einen beliebigen stabilen monocyclischen oder bicyclischen Kohlenstoffring mit bis zu 7 Atomen in jedem Ring bedeuten, wobei wenigstens ein Ring aromatisch ist. Beispiele für solche Arylelemente sind u.a. Phenyl, Naphthyl, Tetrahydronaphthyl, Indanyl, Indanonyl, Biphenyl, Tetralinyl, Tetralonyl, Fluorenonyl, Phenanthryl, Anthryl, Acenaphthyl, Tetrahydronaphthyl und dergleichen.
Wie die Fachleute erkennen, soll "Halo" oder "Halogen", wie es hierin verwendet wird, Chlor, Fluor, Brom und Iod umfassen.
Die Bezeichnung Heteroaryl, wie sie hierin verwendet wird, bedeutet einen stabilen monocyclischen oder bicyclischen Ring mit bis zu 7 Atomen in jedem Ring, wobei wenigstens ein Ring aromatisch ist und 1 bis 4 Heteroatome, ausgewählt aus O, N und S, enthält. Heteroarylgruppen innerhalb des Umfangs dieser Definition sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein: Acridinyl, Carbazolyl, Cinnolinyl, Chinoxalinyl, Pyrrazolyl, Indolyl, Benzodioxolyl, Benzotriazolyl, Benzothiofuranyl, Benzothiazolyl, Furanyl, Thienyl, Benzothienyl, Benzofuranyl, Benzochinolinyl, Isochinolinyl, Oxazolyl, Isoxazolyl, Indolyl, Pyrazinyl, Pyridazinyl, Pyridinyl, Pyrimidinyl, Pyrrolyl, Chinolinyl, Tetrahydronaphthyl, Tetrahydrochinolin und dergleichen.
Die Bezeichnung Heterocyclus oder Heterocyclyl, so wie sie hier verwendet wird, bedeutet einen stabilen 5- bis 7-gliedrigen monocyclischen oder einen stabilen 8- bis 11-gliedrigen bicyclischen heterocyclischen Ring, der entweder gesättigt oder ungesättigt ist und der aus Kohlenstoffatomen und ein bis vier Heteroatomen, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus O, N und S, besteht und eine beliebige bicyclische Gruppe umfasst, bei der irgendeiner der oben definierten heterocyclischen Ringe an einen Benzolring kondensiert ist. Der heterocyclische Ring kann an ein beliebiges Heteroatom oder Kohlenstoffatom geknüpft sein, wenn dadurch die Bildung einer stabilen Struktur resultiert. "Heterocyclus" oder "Heterocyclyl" umfasst daher die oben genannten Heteroaryle sowie Dihydro- und Tetrahydro-Analoga davon. Weitere Beispiele für "Heterocyclyl" sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, die folgenden: Benzodioxolyl, Benzofuranyl, Benzofurazanyl, Benzoimidazolyl, Benzopyranyl, Benzopyrazolyl, Benzotriazolyl, Benzothiazolyl, Benzothienyl, Benzothiofuranyl, Benzothiophenyl, Benzothiopyranyl, Benzoxazolyl, Carbazolyl, Carbolinyl, Chromanyl, Cinnolinyl, Diazapinonyl, Dihydrobenzofuranyl, Dihydrobenzofuryl, Dihydrobenzoimidazolyl, Dihydrobenzothienyl, Dihydrobenzothiopyranyl, Dihydrobenzothiopyranylsulfon, Dihydrobenzothiophenyl, Dihydrobenzoxazolyl, Dihydrocyclopentapyridinyl, Dihydrofuranyl, Dihydroimidazolyl, Dihydroindolyl, Dihydroisooxazolyl, Dihydroisothiazolyl, Dihydrooxadiazolyl, Dihydrooxazolyl, Dihydropyrazinyl, Dihydropyrazolyl, Dihydropyridinyl, Dihydropyrimidinyl, Dihydropyrrolyl, Dihydrochinolinyl, Dihydrotetrazolyl, Dihydrothiadiazolyl, Dihydrothiazolyl, Dihydrothienyl, Dihydrotriazolyl, Dihydroazetidinyl, Furyl, Furanyl, Imidazolyl, Imidazolinyl, Imidazolidinyl, Imidazothiazolyl, Imidazopyridinyl, Indazolyl, Indolazinyl, Indolinyl, Indolyl, Isobenzofuranyl, Isochromanyl, Isoindolyl, Isoindolinyl, Isochinolinon, Isochinolyl, Isothiazolyl, Isothiazolidinyl, Isoxazolinyl, Isoxazolyl, Methylendioxybenzoyl, Morpholinyl, Naphthpyridinyl, Oxadiazolyl, Oxazolyl, Oxazolinyl, Oxetanyl, Oxoazepinyl, Oxadiazolyl, Oxodihydrophthalazinyl, Oxodihydroindolyl, Oxoimidazolidinyl, Oxopiperazinyl, Oxopiperidinyl, Oxopyrrolidinyl, Oxopyrimidinyl, Oxopyrrolyl, Oxotriazolyl, Piperidyl, Piperidinyl, Piperazinyl, Pyranyl, Pyrazinyl, Pyrazolyl, Pyridazinyl, Pyridinonyl, Pyridopyridinyl, Pyridazinyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Pyrrolyl, Pyrrolidinyl, Chinazolinyl, Chinolinyl, Chinolyl, Chinolinonyl, Chinoxalinyl, Tetrahydrocycloheptapyridinyl, Tetrahydrofuryl, Tetrahydroisochinolinyl, Tetrahydropyranyl, Tetrahydrochinolinyl, Tetrazolyl, Tetrazolopyridyl, Thiadiazolyl, Thiazolyl, Thiazolinyl, Thienofuryl, Thienyl, Triazolyl, Azetidinyl, 1,4-Dioxanyl, Hexahydroazepinyl und dergleichen. Vorzugsweise ist Heterocyclus ausgewählt aus Oxoazepinyl, Benzimidazolyl, Diazapinonyl, Imidazolyl, Oxoimidazolidinyl, Indolyl, Isochinolinyl, Morpholinyl, Piperidyl, Piperazinyl, Pyridyl, Pyrrolidinyl, Oxopiperidinyl, Oxopyrimidinyl, Oxopyrrolidinyl, Chinolinyl, Tetrahydrofuryl, Tetrahydroisochinolinyl und Thienyl.
So wie hierin verwendet, soll "Aralkyl" einen Arylrest bedeuten, wie er oben definiert wurde, verknüpft durch einen C₁-C₁₀-Alkyl-Linker, wobei Alkyl wie oben definiert ist. Beispiele für Aralkyle sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Benzyl, Naphthylmethyl und Phenylpropyl.
So wie hierin verwendet, soll "Heterocyclylalkyl" einen heterocyclischen Rest bedeuten, wie er nachstehend definiert ist, verknüpft durch einen C₁-C₁₀-Alkyl-Linker, wobei Alkyl wie oben definiert ist. Beispiele für Heterocyclylalkyle sind u.a., ohne jedoch drauf beschränkt zu sein, Pyridylmethyl, Imidazolylethyl, Pyrrolidinylmethyl, Morpholinylethyl, Chinolinylmethyl, Imidazolylpropyl und dergleichen.
So wie hierin verwendet, sollen die Bezeichnungen "substituiertes C₁-C₁₀-Alkyl" und "substituiertes C₁-C₆-Alkoxy" die verzweigte oder geradkettige Alkylgruppe mit der angegeben Anzahl von Kohlenstoffatomen umfassen, wobei die Kohlenstoffatome mit Substituenten substituiert sein können, die ausgewählt sind aus der Gruppe, umfassend, ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Halogen, C₁-C₂₀-Alkyl, CF₃, NH₂, N(C₁-C₆-Alkyl)₂, NO₂, Oxo, CN, N₃, -OH, -O(C₁-C₆-Alkyl), C₃-C₁₀-Cycloalkyl, C₂-C₆-Alkenyl, C₂-C₆-Alkinyl, (C₀-C₆-Alkyl)S(O)_0-2-, (C₀-C₆-Alkyl)S(O)_0-2(C₀-C₆-alkyl)-, (C₀-C₆-Alkyl)C(O)NH-, H₂N-C(NH)-, -O(C₁-C₆-Alkyl)CF₃, (C₀-C₆-Alkyl)C(O)-, (C₀-C₆-Alkyl)OC(O)-, (C₀-C₆-Alkyl)O(C₁-C₆-alkyl)-, (C₀-C₆-Alkyl)C(O)_1-2(C₀-C₆-alkyl)-, (C₀-C₆-Alkyl)OC(O)NH-, Aryl, Aralkyl, Heterocyclus, Heterocyclylalkyl, Halogenaryl, Halogenaralkyl, Halogenheterocyclus, Halogenheterocyclylalkyl, Cyanoaryl, Cyanoaralkyl, Cyanoheterocyclus und Cyanoheterocyclylalkyl.
So wie hierin verwendet, sollen die Bezeichnungen "substituiertes C₃-C₁₀-Cycloalkyl", "substituiertes Aryl", "substituierter Heterocyclus", "substituiertes Aralkyl" und "substituiertes Heterocyclylalkyl" die cyclische Gruppe umfassen, die 1 bis 3 Substituenten zusätzlich zum Verknüpfungspunkt zum Rest der Verbindung enthält. Vorzugsweise sind die Substituenten ausgewählt aus der Gruppe, umfassend, ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Halogen, C₁-C₁₀-Alkyl, CF₃, NH₂, N(C₁-C₆-Alkyl)₂, NO₂, Oxo, CN, N₃, -OH, -O(C₁-C₆-Alkyl), C₃-C₁₀-Cycloalkyl, C₂-C₆-Alkenyl, C₁-C₆-Alkinyl, (C₀-C₆-Alkyl)S(O)_0-2-, (C₀-C₆-Alkyl)S(O)_0-2(C0-C₆-alkyl)-, (C₀-C₆-Alkyl)C(O)NH-, H₂N-C(NH)-, -O(C₁-C₆-Alkyl)CF₃, (C₀-C₆-Alkyl)C(O)-, (C₀-C₆-Alkyl)OC(O)-, (C₀-C₆-Alkyl)O(C₁-C₆-alkyl)-, (C₀-C₆-Alkyl)C(O)_1-2(C₀-C₆-alkyl)-, (C₀-C₆-Alkyl)OC(O)NH-, Aryl, Aralkyl, Heteroaryl, Heterocyclylalkyl, Halogenaryl, Halogenaralkyl, Halogenheterocyclus, Halogenheterocyclylalkyl, Cyanoaryl, Cyanoaralkyl, Cyanoheterocyclus und Cyanoheterocyclylalkyl.
Vorzugsweise ist V unabhängig ausgewählt aus Aryl oder Heterocyclus. Vorzugsweise ist R¹ unabhängig ausgewählt aus H, unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, N(R⁴)₂, NO₂, OR⁴, Halogen, -C(O)R⁴, C(O)OR⁴ und C(O)N(R⁴)₂. Besonders bevorzugt ist R¹ unabhängig ausgewählt aus H, unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, N(R⁴)₂, NO₂, OR⁴ und Halogen. Ganz besonders bevorzugt ist R¹ unabhängig ausgewählt aus H, unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl und Halogen.
Vorzugsweise ist R² unabhängig ausgewählt aus H, unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, -(CR^1b)_tOR⁴, Halogen, CN, NO₂, CF₃, -(CR^1b)_tN(R⁴)₂, -C(O)OR⁴, -C(O)R⁴, -(CR^1b)_tNR⁴(CR^1b)_tR⁵, -(CR^1b)_tS(O)_mNR⁴, -C(O)OR⁴R⁵ und -NR⁴C(O)R⁴. Besonders bevorzugt ist R² unabhängig ausgewählt aus H, unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, -(CR^1b)_tOR⁴, Halogen, NO₂, CF₃ und -(CR^1b)_tN(R⁴)₂. Ganz besonders bevorzugt ist R² unabhängig ausgewählt aus H, unsubstituiertem C₁-C₁₀-Alkyl und Halogen.
Vorzugsweise ist X unabhängig ausgewählt aus einer Bindung, C(O) oder O. Besonders bevorzugt ist X eine Bindung.
Vorzugsweise sind n, p und q unabhängig 0, 1, 2, 3 oder 4. Besonders bevorzugt sind n und p unabhängig 0 oder 1.
Es ist vorgesehen, dass die Definition eines beliebigen Substituenten oder einer beliebigen Variablen (z.B. R¹, R^1a, n usw.) an einer speziellen Stelle in einem Molekül unabhängig von seinen/ihren Definitionen anderswo in diesem Molekül ist. So bedeutet -N(R⁴)₂ -NHH, -NHCH₃, -NHC₂H₅ usw. Es ist zu verstehen, dass Substituenten und Substitutionsmuster an den Verbindungen der vorliegenden Erfindung von einem Durchschnittsfachmann ausgewählt werden können, um Verbindungen zu ergeben, die chemisch stabil sind und die leicht durch im Stand der Technik bekannte Verfahren sowie durch die nachstehend beschriebenen Verfahren aus leicht erhältlichen Ausgangsmaterialien synthetisiert werden können.
Zur medizinischen Verwendung werden die Salze der Verbindungen der Formel I pharmazeutisch annehmbare Salze sein. Es können jedoch auch andere Salze bei der Herstellung der Verbindungen gemäß der Erfindung oder von deren pharmazeutisch annehmbaren Salzen geeignet sein. Wenn die Verbindung der vorliegenden Erfindung sauer ist, bedeuten geeignete "pharmazeutisch annehmbare Salze" Salze, die aus pharmazeutisch annehmbaren nichttoxischen Basen, einschließlich anorganischer Basen und organischer Basen, hergestellt wurden. Salze, die aus anorganischen Basen hergeleitet sind, sind u.a. Aluminium-, Ammonium-, Calcium-, Kupfer-, Eisen(II)-, Eisen(III)-, Lithium-, Magnesium-, Mangan(III)-, Mangan(II)-, Kalium-, Natrium-, Zinksalze und dergleichen. Besonders bevorzugt sind die Ammonium-, Calcium-, Magnesium-, Kalium- und Natriumsalze. Salze, die aus pharmazeutisch annehmbaren organischen nichttoxischen Basen hergeleitet sind, sind u.a. Salze von primären, sekundären und tertiären Aminen, substituierten Aminen, einschließlich natürlich vorkommender substituierter Amine, cyclischen Aminen und basischen Ionenaustauscherharzen, wie z.B. Arginin, Betain, Koffein, Cholin, N,N¹-Dibenzylethylendiamin, Diethylamin, 2-Diethylaminoethanol, 2-Dimethylaminoethanol, Ethanolamin, Ethylendiamin, N-Ethylmorpholin, N-Ethylpiperidin, Glucamin, Glucosamin, Histidin, Hydrabamin, Isopropylamin, Lysin, Methylglucamin, Morpholin, Piperazin, Piperidin, Polyaminharze, Procain, Purine, Theobromin, Triethylamin, Trimethylamin, Tripropylamin, Tromethamin und dergleichen.
Wenn die Verbindung der vorliegenden Erfindung basisch ist, können Salze aus pharmazeutisch annehmbaren nichttoxischen Säuren hergestellt werden, einschließlich anorganischer und organischer Säuren. Solche Säuren sind u.a. Essig-, Benzolsulfon-, Benzoe-, Camphersulfon-, Citronen-, Ethansulfon-, Fumar-, Glucon-, Glutamin-, Bromwasserstoff, Salz-, Isethion-, Milch-, Äpfel-, Mandel-, Methansulfon-, Schleim-, Salpeter-, Pamoa-, Pantothen-, Phosphor-, Succin-, Schwefel-, Wein-, p-Toluolsulfonsäure und dergleichen. Besonders bevorzugt sind Citronen-, Bromwasserstoff-, Salz-, Malein-, Phosphor-, Schwefel- und Weinsäure.
Die Herstellung der oben beschriebenen pharmazeutisch annehmbaren Salze und anderer typischer pharmazeutisch annehmbarer Salze ist vollständiger von Berg et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 1977:66:1-19, beschrieben.
Von der vorliegenden Erfindung umfasst ist die freie Form der Verbindungen der Formel I sowie die pharmazeutisch annehmbaren Salze und Stereoisomere davon. Einige der speziellen Verbindungen, die hierin veranschaulicht sind, sind die protonierten Salze von Aminverbindungen. Die Bezeichnung "freie Form" bedeutet die Aminverbindungen in Nicht-Salz-Form. Die umfassten pharmazeutisch annehmbaren Salze umfassen nicht nur die für die hierin beschriebenen speziellen Verbindungen veranschaulichten Salze, sondern auch sämtliche typischen pharmazeutisch annehmbaren Salze der freien Form der Verbindungen der Formel I. Die freie Form der beschriebenen speziellen Salzverbindungen kann durch Anwendung von im Stand der Technik bekannten Verfahren isoliert werden. Zum Beispiel kann die freie Form durch Behandlung des Salzes mit einer geeigneten verdünnten wässrigen Basenlösung, wie z.B. verdünntem wässrigem NaOH, Kaliumcarbonat, Ammoniak und Natriumhydrogencarbonat, wiedergewonnen werden. Die freien Formen können sich von ihren entsprechenden Salzformen in bestimmten physikalischen Eigenschaften etwas unterscheiden, wie z.B. in der Löslichkeit in polaren Lösungsmitteln, die Säure- und Basesalze sind jedoch ansonsten mit ihren entsprechenden freien Formen für die Zwecke der Erfindung pharmazeutisch äquivalent.
Man wird auch erkennen, dass die Verbindungen der vorliegenden Erfindung potentiell innere Salze oder Zwitterionen sind, da unter physiologischen Bedingungen ein deprotonierter saurer Rest in der Verbindung, wie z.B. eine Carboxylgruppe, anionisch sein kann und die elektrische Ladung dann intern mit der kationischen Ladung eines protonierten oder alkylierten basischen Rests, wie z.B. einem quatemären Stickstoffatom, ausgeglichen werden kann.
Abkürzungen, die bei der Beschreibung der Chemie und in den sich anschließenden Beispielen verwendet werden können, sind u.a.:

Ac₂O: Essigsäureanhydrid,
AcOH: Essigsäure,
AIBN: 2,2'-Azobisisobutyronitril,
BINAP: 2,2'-Bis(diphenylphosphino)-1,1'-binaphthyl,
Bn: Benzyl,
BOC/Boc: tert.-Butoxycarbonyl,
BSA: Bovines Serumalbumin,
CAN: Cerammoniumnitrat,
CBz: Carbobenzyloxy,
CI: Chemische Ionisierung,
DBAD: Di-tert.-butylazodicarboxylat,
DBU: 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en,
DCE: 1,2-Dichlorethan,
DCM: Dichlormethan,
DIEA: N,N-Diisopropylethylamin,
DMAP: 4-Dimethylaminopyridin,
DME: 1,2-Dimethoxyethan,
DMF: N,N-Dimethylformamid,
DMS: O Methylsulfoxid,
DPPA: Diphenylphosphorylazid,
DTT: Dithiothreit,
EDC: 1-(3-Dimethylaminopropyl)3-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid,
EDTA: Ethylendiamintetraessigsäure,
ES: Elektrospray,
ESI: Elektrospray-Ionisierung,
Et₂O: Diethylether,
Et₃N: Triethylamin,
EtOAc: Ethylacetat,
EtOH: Ethanol,
FAB: Fast-Atom-Bombardement,
HEPES: 4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinethansulfonsäure,
HOAc: Essigsäure,
HOBT: 1-Hydroxybenzotriazolhydrat,
HOOBT: 3-Hydroxy-1,2,2-benzotriazin-4(3H)-on,
HPLC: Hochleistungsflüssigchromatographie,
HRMS: Hochauflösende Massenspektroskopie,
KOtBu: Kalium-tert.-butoxid,
LAH: Lithiumaluminiumhydrid,
LCMS: Flüssigchromatographie-Massenspektroskopie,
LiHMDS: Lithiumbis(trimethylsilyl)amid,
MCPBA: m-Chlorperoxybenzoesäure,
Me: Methyl,
MeOH: Methanol,
Ms: Methansulfonyl,
MS: Massenspektroskopie,
MsCl: Methansulfonylchlorid,
n-Bu: n-Butyl,
n-Bu₃P: Tri-n-butylphosphin,
NaHMDS: Natriumbis(trimethylsilyl)amid,
NBS: N-Bromsuccinimid,
Pd(PPh₃)₄: Palladiumtetrakis(triphenylphosphin),
Pd₂(dba)₂: Tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0),
Ph: Phenyl,
PMSF: α-Toluolsulfonylfluorid,
Py oder Pyr: Pyridin,
PYBOP: Benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphoniumhexafluorphosphat (oder PyBOP)
RPLC: Umkehrphasen-Flüssigchromatographie,
RT: Raumtemperatur,
t-Bu: tert.-Butyl,
TRAF: Tetrabutylammoniumfluorid,
TBSCI: tert.-Butyldimethylsilylchlorid,
TFA: Trifluoressigsäure,
THF: Tetrahydrofuran,
TIPS: Triisopropylsilyl,
TMS: Tetramethylsilan,
Tr: Trityl und
Ts: Tosyl.

NUTZEN
In einem weiteren Aspekt betrifft diese vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Modulierung der katalytischen Aktivität von PKs (Proteinkinasen) bei einem Säuger, der diese benötigt, umfassend das Inkontaktbringen einer PK mit einer Verbindung der Formel I.
So wie hierin verwendet, bedeutet die Bezeichnung "Modulation" oder "Modulierung" die Veränderung der katalytischen Aktivität von Rezeptor-Tyrosinkinasen (RTKs), zellulären Tyrosinkinasen (CTKs) und Serin-Threonin-Kinasen (STKs). Speziell bedeutet Modulation die Aktivierung der katalytischen Aktivität von RTKs, CTKs und STKs, vorzugsweise die Aktivierung oder Inhibierung der katalytischen Aktivität von RTKs, CTKs und STKs, abhängig von der Konzentration der Verbindung oder des Salzes, dem die RTKs, CTKs oder STKs ausgesetzt sind, oder insbesondere die Inhibierung der katalytischen Aktivität von RTKs, CTKs und STKs.
Die Bezeichnung "katalytische Aktivität", so wie sie hierin verwendet wird, bedeutet die Geschwindigkeit der Phosphorylierung von Tyrosin unter dem direkten oder indirekten Einfluss von RTKs und/oder CTKs oder der Phosphorylierung von Serin und Threonin unter dem direkten oder indirekten Einfluss von STKs.
Die Bezeichnung "Inkontaktbringen", so wie sie hierin verwendet wird, bedeutet das Zusammenbringen einer Verbindung dieser Erfindung und einer Ziel-PK in einer solchen Weise, dass die Verbindung die katalytische Wirkung der PK entweder direkt, d.h. durch Wechselwirkung mit der Kinase selbst, oder indirekt, d.h. durch Wechselwirkung mit einem weiteren Molekül von dem die katalytische Aktivität der Kinase abhängt, beeinflussen kann. Ein solches "Inkontaktbringen" kann "in vitro", d.h. in einem Reagenzglas, einer Petrischale oder dergleichen stattfinden. In einem Reagenzglas kann das Inkontaktbringen nur eine Verbindungen und eine PK von Interesse umfassen, oder es kann ganze Zellen umfassen. Zellen können auch in Zellkulturschalen gehalten oder kultiviert und in dieser Umgebung mit einer Verbindung in Kontakt gebracht werden. In diesem Zusammenhang kann die Fähigkeit einer speziellen Verbindung, eine PK-bezogene Störung zu beeinflussen, d.h. der nachstehend definierte IC₅₀-Wert, ermittelt werden, bevor die Verbindungen in vivo an komplexeren lebenden Organismen getestet werden. Für Zellen außerhalb des Organismus existieren mehrere Verfahren, um die PKs mit den Verbindungen in Kontakt zu bringen, und diese sind den Fachleuten gut bekannt und umfassen, ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, die direkte Zell-Mikroinjektion und zahlreiche Transmembranträgerverfahren.
Die oben genannte PK ist ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einer RTK, einer CTK oder einer STK in einem weiteren Aspekt dieser Erfindung. Vorzugsweise ist die PK eine RTK.
Darüber hinaus ist es ein Aspekt dieser Erfindung, dass die Rezeptor-Tyrosinkinase (RTK), deren katalytische Aktivität durch eine Verbindung dieser Erfindung moduliert wird, ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus EGF, HER2, HER3, HER4, IR, IGF-1 R, IRR, PDGFRα, PDGFRβ, TrkA, TrkB, TrkC, HGF, CSFIR, C-Kit, C-fms, Flk-1R, Flk4, KDR/Flk-1, Fit-1, FGFR-1R, FGFR-1R, FGFR-3R und FGFR-4R. Vorzugsweise ist die Rezeptorproteinkinase ausgewählt aus IR, IGF-1R oder IRR.
Ferner ist es ein Aspekt dieser Erfindung, dass die zelluläre Tyrosinkinase, deren katalytische Aktivität durch eine Verbindung dieser Erfindung moduliert wird, ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Src, Frk, Btk, Csk, Abl, ZAP70, Fes, Fps, Fak, Jak, Ack, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr und Yrk.
Ein weiterer Aspekt dieser Erfindung ist, dass die Serin-Threonin-Proteinkinase, deren katalytische Aktivität durch eine Verbindung dieser Erfindung moduliert wird, ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus CDK2 und Raf.
In einem weiteren Aspekt betrifft diese Erfindung ein Verfahren zur Behandlung oder Prävention einer PK-bezogenen Störung bei einem Säuger, der eine solche Behandlung benötigt, umfassend die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge von einer oder mehreren der oben beschriebenen Verbindungen.
So wie hierin verwendet, bedeuten "PK-bezogene Störung", "PK-gesteuerte Störung" und "abnormale PK-Aktivität" alle einen Zustand, der durch unangemessene (d.h. verringerte oder häufiger übermäßige) katalytische PK-Aktivität gekennzeichnet ist, wobei die spezielle PK eine RTK, eine CTK oder eine STK sein kann. Eine unangemessene katalytische Aktivität kann als Folge von entweder: (1) einer PK-Expression in Zellen, die normalerweise PKs nicht exprimieren; (2) erhöhter PK-Expression, die zu unerwünschter/m Zellproliferation, -differenzierung und/oder -wachstum führt; oder (3) verringerter PK-Expression, die zu erwünschten Verringerungen der Zellproliferation, der Zelldifferenzierung und/oder des Zellwachstums fahrt, entstehen. Übermäßige Aktivität einer PK bedeutet entweder die Verstärkung des Gens, das eine spezielle PK oder ihren Liganden kodiert, oder die Produktion eines PK-Aktivitätsgrades, der mit einer Zellproliferations-, -differenzierungs- und/oder -wachstumsstörung korreliert (d.h., bei steigendem PK-Grad nimmt die Schwere von einem oder mehreren Symptomen einer Zellstörung zu, wenn der PK-Aktivitätsgrad abnimmt).
"Behandeln" oder "Behandlung" in Bezug auf eine PK-bezogene Störung bedeutet die Linderung oder Beseitigung der Ursache und/oder der Auswirkungen einer PK-bezogenen Störung.
So wie hierin verwendet, bedeuten die Bezeichnungen "Prävention", "Verhinderung" und "Verhindern" ein Verfahren, um zu verhindern, dass ein Säuger überhaupt eine PK-bezogene Störung ausbildet.
Die Bezeichnung "Verabreichung" und Varianten davon (z.B. "Verabreichung" einer Verbindung) in Bezug auf eine Verbindung der Erfindung bedeutet das Einbringen der Verbindung oder eines Prodrugs der Verbindung in das System des Tiers, das die Behandlung benötigt. Wenn eine Verbindung der Erfindung oder ein Prodrug davon in Kombination mit einem oder mehreren anderen Wirkstoffen (z.B. einem zytotoxischen Mittel usw.) zur Verfügung gestellt wird, sollen "Verabreichung" und dessen Varianten jeweils so verstanden werden, dass das gleichzeitige und das sequentielle Einbringen der Verbindung oder des Prodrugs davon und anderer Mittel umfasst ist.
Die Bezeichnung "therapeutisch wirksame Menge", wie sie hierin verwendet wird, bedeutet die Menge einer Wirkverbindung oder eines pharmazeutischen Mittels, die die biologische oder medizinische Reaktion in einem Gewebe, System, Tier oder Menschen hervorruft, die von einem Forscher, Tiermediziner, Mediziner oder anderen Kliniker gewünscht wird.
Die Bezeichnung "Behandlung von Krebs" oder "Behandeln von Krebs" bedeutet die Verabreichung an einen an einem kanzerösen Zustand erkrankten Säuger und bedeutet eine Wirkung, welche den kanzerösen Zustand durch Abtöten der kanzerösen Zellen abschwächt, sie bedeutet jedoch auch eine Wirkung, die zur Inhibierung des Wachstums und/oder der Metastase des Karzinoms fahrt.
Die Proteinkinase-bezogene Störung kann ausgewählt sein aus der Gruppe, bestehend aus einer RTK-, einer CTK- oder, in einem weiteren Aspekt dieser Erfindung, einer STK-bezogenen Störung. Vorzugsweise ist die Proteinkinase-bezogene Störung eine RTK-bezogene Störung.
Bei noch einem weiteren Aspekt dieser Erfindung kann die oben genannte PK-bezogene Störung ausgewählt sein aus der Gruppe, bestehend aus einer EGFR-bezogenen Störung, einer PDGFR-bezogenen Störung, einer IGFR-bezogenen Störung und einer flk-bezogenen Störung.
Die oben genannte PK-bezogene Störung kann ein Krebs sein, ausgewählt aus, ohne jedoch beschränkt zu sein auf, Astrozytom, basale oder squamöse Zellkarzinome, Hirnkrebs, Glioblastom, Blasenkrebs, Brustkrebs, kolorektalem Karzinom, Chondrosarkom, Gebärmutterhalskrebs, Nebennierenkarzinom, Choriokarzinom, Ösophaguskarzinom, Endometriumkarzinom, Erythroleukämie, Swing-Sarkom, Gastrointestinalkarzinom, Kopf- und Halskrebs, Leberkrebs, Gliom, hepatozellulärem Karzinom, Leukämie, Leiomyom, Melanom, nicht-kleinzelligem Lungenkrebs, Nervenkrebs, Ovarialkarzinom, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Prostatakrebs, Nierenzellkarzinom, Rhabdomyosarkom, kleinzelligem Lungenkrebs, Thymusdrüsenkrebs, Schilddrüsenkrebs, Hodenkrebs und Osteosarkom in einem weiteren Aspekt dieser Erfindung. Besonders bevorzugt ist die PK-bezogene Störung ein Krebs, ausgewählt aus Hirnkrebs, Brustkrebs, Prostatakrebs, kolorektalem Karzinom, kleinzelligem Lungenkrebs, nicht-kleinzelligem Lungenkrebs, Nierenzellkarzinom oder Endometriumkarzinom.
Vom Umfang der vorliegenden Erfindung umfasst ist eine pharmazeutische Zusammensetzung, die aus einer wie oben beschriebenen Verbindung der Formel I und einem pharmazeutisch annehmbaren Träger besteht. Die vorliegende Erfindung umfasst auch ein Verfahren zur Behandlung oder Prävention von Krebs bei einem Säuger, der eine solche Behandlung benötigt, umfassend die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I an den Säuger. Krebsarten, die mit Hilfe der Verbindungen der Formel I behandelt werden können, sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Astrozytom, basale oder squamöse Zellkarzinome, Hirnkrebs, Glioblastom, Blasenkrebs, Brustkrebs, kolorektales Karzinom, Chondrosarkom, Gebärmutterhalskrebs, Nebennierenkarzinom, Choriokarzinom, Ösophaguskarzinom, Endometriumkarzinom, Erythroleukämie, Ewing-Sarkom, Gastrointestinalkarzinom, Kopf- und Halskrebs, Leberkrebs, Gliom, hepatozelluläres Karzinom, Leukämie, Leiomyom, Melanom, nicht-kleinzelliger Lungenkrebs, Nervenkrebs, Ovarialkarzinom, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Prostatakrebs, Nierenzellkarzinom, Rhabdomyosarkom, kleinzelliger Lungenkrebs, Thymusdrüsenkrebs, Schilddrüsenkrebs, Hodenkrebs und Osteosarkom in einem weiteren Aspekt dieser Erfindung. Besonders bevorzugt ist der behandelte Krebs ausgewählt aus Brustkrebs, Prostatakrebs, kolorektalem Karzinom, kleinzelligem Lungenkrebs, nicht-kleinzelligem Lungenkrebs, Nierenzellkarzinom oder Endometriumkarzinom.
Die oben genannte PK-bezogene Störung kann eine IGFR-bezogene Störung sein, ausgewählt aus Diabetes, einer Autoimmunstörung, Alzheimer- und anderen Kognitionsstörungen, einer Hyperproliferationsstörung, Alterung, Krebs, Akromegalie, Morbus-Crohn, Endometriose, diabetischer Retinopathie, Restenose, Fibrose, Psoriasis, Osteoarthritis, rheumatoider Arthritis, einer Entzündungsstörung und Angiogenese bei noch einem weiteren Aspekt dieser Erfindung.
Ein Verfahren zur Behandlung oder Prävention von Netzhautvaskularisierung, umfassend die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I an einen Säuger, der eine solche Behandlung benötigt, ist ebenfalls von der vorliegenden Erfindung umfasst. Verfahren zur Behandlung von Augenerkrankungen, wie z.B. diabetischer Retinopathie und altersbezogener Makuladegeneration, sind ebenfalls Teil der Erfindung. Ebenfalls vom Umfang der vorliegenden Erfindung umfasst ist ein Verfahren zur Behandlung oder Prävention von Entzündungserkrankungen, wie z.B. rheumatoider Arthritis, Psoriasis, Kontaktdermatitis und verzögerten Überempfindlichkeitsreaktionen, sowie zur Behandlung oder Prävention von knochenbezogenen Pathologien, ausgewählt aus Osteosarkom, Osteoarthritis und Rachitis.
Andere Störungen, die mit Verbindungen dieser Erfindung behandelt werden können, sind u.a., ohne darauf beschränkt zu sein, immunologische und kardiovaskuläre Störungen, wie z.B. Atherosklerose.
Die Erfindung sieht auch die Verwendung der hier beanspruchten Verbindungen in Kombination mit einer zweiten Verbindung vor, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus:

1) einem Östrogenrezeptormodulator,
2) einem Androgenrezeptormodulator,
3) einem Retinoidrezeptormodulator,
4) einem zytotoxischen Mittel,
5) einem antiproliferativen Mittel,
6) einem Prenyl-Protein-Transferase-Inhibitor,
7) einem HMG-CoA-Reduktase-Inhibitor,
8) einem HIV-Proteaseinhibitor,
9) einem Reverse-Transkriptase-Inhibitor und
10) einem Angiogeneseinhibitor.

Ein bevorzugter Angiogeneseinhibitor ist ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einem Tyrosinkinaseinhibitor, einem Inhibitor des epidermalen Wachstumsfaktors, einem Inhibitor des Fibroblasten-Wachstumsfaktors, einem Inhibitor des Thrombozyten-Wachstumsfaktors, einem MMP-Inhibitor, einem Integrin-Blocker, Interferon-α, Interleukin-12, Pentosanpolysulfat, einem Cyclooxygenase-Inhibitor, Carboxyamidotriazol, Combretastatin A-4, Squalamin, 6-O-(Chloracetylcarbonyl)fumagillol, Thalidomid, Angiostatin, Troponin-1 und einem Antikörper gegen VEGF. Bevorzugte Östrogenrezeptormodulatoren sind Tamoxifen und Raloxifen.
Ebenfalls vom Umfang der Ansprüche umfasst ist ein Verfahren zur Behandlung von Krebs, umfassend die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I in Kombination mit einer Verbindung, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus:

Und noch eine weitere Ausführungsform ist das Verfahren zur Behandlung von Krebs durch Verwendung der oben erörterten Kombination in Verbindung mit Strahlentherapie.
Und noch eine weitere Ausführungsform der Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung von Krebs, das die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I in Kombination mit Paclitaxel oder Trastuzumab umfasst. Die PKs, deren katalytische Aktivität durch die Verbindungen dieser Erfindung moduliert wird, sind u.a. Protein-Tyrosin-Kinasen, von denen es zwei Arten gibt, Rezeptor-Tyrosinkinasen (RTKs) und zelluläre Tyrosinkinasen (CTKs), und Serin-Threonin-Kinasen (STKs). Die RTK-vermittelte Signaltransduktion wird durch extrazelluläre Wechselwirkung mit einem spezifischen Wachstumsfaktor (Ligand) initiiert, gefolgt von der Rezeptordimerisierung (oder von konformativen Änderungen im Falle von IR, IGF-1R oder IRR), transienter Stimulierung der intrinsischen Protein-Tyrosin-Kinase-Aktivität, Autophosphorylierung und anschließender Phosphorylierung anderer Substratproteine. Dabei werden Bindungsstellen für Moleküle zur intrazellulären Signaltransduktion erzeugt und führen zur Bildung von Komplexen mit einem Spektrum an Molekülen zur zytoplasmischen Signalgebung, welche die entsprechende Zellreaktion ermöglichen (z.B. Zellteilung, metabolische Wirkungen auf die extrazelluläre Mikroumgebung usw.). Siehe Schlessinger und Ullrich, 1992, Neuron 9: 303-391.
Es wurde gezeigt, dass Tyrosinphosphorylierungsstellen an Wachstumsfaktorrezeptoren als hochaffinitive Bindungsstellen für SH2(src-Homologie)-Domänen von Signalgebungsmolekülen fungieren. Fantl et al., 1992, Cell 69: 413-423; Songyang et al., 1994, Mol., Cell. Biol. 14: 2777-2785); Songyang et al., 1993, Cell 72: 767-778; und Koch et al., 1991, Science 252: 668-678. Eine weitere Signalgebungsmoleküldomäne, die mit phosphorylierten Tyrosinen wechselwirkt, wird PTB-Domäne genannt. Blaikie et al., 1994, J. Biol. Chem. 269: 32031-32034; Gustafson et al., 1995, Mol. Cell Biol., 15: 2500-25008; Kavanaugh und Williams, 1994, Science 266: 1862-1865. Verschiedene intrazelluläre Substratproteine, die mit RTKs assoziieren, wurden identifiziert. Sie können in zwei Hauptgruppen unterteilt werden: (1) Substrate, die eine katalytische Domäne besitzen, und (2) Substrate, denen eine solche Domäne fehlt, die jedoch als Adapter dienen und mit katalytisch aktiven Molekülen assoziieren. Songyang et al., 1993, Cell 72: 767-778. Die Spezifität der Wechselwirkungen zwischen Rezeptoren und SH2-Domänen ihrer Substrate wird durch die Aminosäurereste ermittelt, welche den phosphorylierten Tyrosinrest unmittelbar umgeben. Unterschiede bei den Bindungsaffinitäten zwischen SH2- oder PTB-Domänen und den Aminosäuresequenzen, welche die Phosphotyrosinreste an speziellen Rezeptoren umgeben, stimmen mit den beobachteten Unterschieden in ihren Substratphosphorylierungsprofilen überein. Songyang et al., 1993, Cell 72: 767-778. Diese Beobachtungen legen nahe, dass die Funktion einer jeden RTK nicht nur durch ihr Expressionsmuster und ihre Ligandenverfügbarkeit bestimmt wird, sondern auch durch die Reihe von Stromabwärts-Signaltransduktionswegen, die von einem speziellen Rezeptor aktiviert werden. Daher stellt die Phosphorylierung einen wichtigen regulierenden Schritt dar, der die Selektivität der Signalwege, die durch spezielle Wachstumsfaktorrezeptoren rekrutiert werden, sowie Differenzierungsfaktorrezeptoren bestimmt.
STKs, die hauptsächlich zytosolisch sind, beeinflussen die interne Biochemie der Zelle, oft als eine Stromabwärts-Reaktion auf ein PTK-Ereignis. STKs wurden mit dem Signalgebungsverfahren in Verbindung gebracht, welches die DNA-Synthese und die nachfolgende Mitose, die zur Zellproliferation führt, initiiert.
Daher führt die PK-Signaltransduktion neben anderen Reaktionen zur Zellproliferation, zur Zelldifferenzierung, zum Zellwachstum, zum Zellmetabolismus und zu zellulärer Mobilität. Eine abnormale Zellproliferation kann zu einer Reihe von Störungen und Erkrankungen (ihren, einschließlich der Ausbildung von Neoplasie, wie z.B. Karzinom, Sarkom, Glioblastom und Hämangiom, Störungen wie Leukämie, Psoriasis, Arteriosklerose, Arthritis und diabetische Retinopathie, und Störungen, die mit einer unkontrollierten Angiogenese und/oder Vaskulogenese verbunden sind.
Ein genaues Verständnis des Mechanismus, durch den die Verbindungen dieser Erfindung PKs inhibieren, ist nicht notwendig, um die vorliegende Erfindung auszuführen. Dennoch wird angenommen, ohne dabei an einen speziellen Mechanismus oder eine spezielle Theorie gebunden sein zu wollen, dass die Verbindungen mit den Aminosäuren in der katalytischen Region von PKs Wechselwirken. PKs besitzen typischerweise eine zweilappige Struktur, bei der ATP in dem Spalt zwischen den zwei Lappen in einem Bereich, in dem die Aminosäuren unter PKs konserviert sind, zu binden scheint. Man nimmt an, dass Inhibitoren von PKs durch nicht-kovalente Wechselwirkungen binden, wie z.B. durch Wasserstoffbindung, Van-der-Waals-Kräfte und ionische Wechselwirkungen, in dem gleichen allgemeinen Bereich, in dem auch das oben genannte ATP an die PKs bindet. Die hierin offenbarten Verbindungen besitzen einen Nutzen als In-Vitro-Tests für solche Proteine sowie dadurch, dass sie in vivo therapeutische Wirkungen durch Wechselwirkungen mit solchen Proteinen besitzen.
In einem weiteren Aspekt ist die Proteinkinase (PK), deren katalytische Wirkung durch Kontakt mit einer Verbindung dieser Erfindung moduliert wird, eine Protein-Tyrosin-Kinase (PTK), insbesondere eine Rezeptor-Protein-Tyrosin-Kinase (RTK). Unter den RTKs, deren katalytische Aktivität mit einer Verbindung dieser Erfindung oder einem Salz davon moduliert werden kann, sind, ohne Einschränkung, EGF, HER2, HER3, HER4, IR, IGF-1R, IRR, PDGFRα, PDGFRβ, TrkA, TrkB, TrkC, HGF, CSFIR, C-Kit, C-fms, Flk-1R, Flk4, KDR/Flk-1, Fit-1, FGFR-1R, FGFR-2R, FGFR-3R und FGFR-4R. Besonders bevorzugt ist die RTK ausgewählt aus IGF-1R.
Die Protein-Tyrosin-Kinase, deren katalytische Aktivität durch Kontakt mit einer Verbindung dieser Erfindung oder einem Salz oder Prodrug davon moduliert wird, kann auch eine Nichtrezeptor- oder zelluläre Protein-Tyrosin-Kinase (CTK) sein. So kann die katalytische Aktivität von CTKs, wie z.B., ohne Einschränkung, Src, Frk, Btk, Csk, Abl, ZAP70, Fes, Fps, Fak, Jak, Ack, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr und Yrk, durch Kontakt mit einer Verbindung oder einem Salz dieser Erfindung moduliert werden.
Noch eine weitere Gruppe von PKs, deren katalytische Aktivität durch Kontakt mit einer Verbindung dieser Erfindung moduliert werden kann, sind die Serin-Threonin-Proteinkinasen, wie z.B., ohne Einschränkung, CDK2 und Raf.
Diese Erfindung betrifft auch Verbindungen, welche die PK-Signaltransduktion durch Beeinflussung der enzymatischen Aktivität von RTKs, CTKs und/oder STKs modulieren, wodurch sie die von solchen Proteinen transduzierten Signale stören. Speziell betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen, welche die durch RTK, CTK und/oder STK vermittelten Signaltransduktionswege modulieren, als therapeutischen Versuch zur Heilung vieler Arten von festen Tumoren, einschließlich, ohne jedoch beschränkt zu sein auf, Karzinome, Sarkome, einschließlich Kaposi-Sarkom, Erythroblastom, Glioblastom, Meningiom, Astrozytom, Melanom und Myoblastom. Die Behandlung oder Prävention nichtfester Tumorkarzinome, wie z.B. Leukämie, ist von dieser Erfindung ebenfalls vorgesehen. Indikationen können u.a. Hirnkarzinome, Blasenkarzinome, Ovarialkarzinome, Magenkarzinome, Bauchspeicheldrüsenkarzinome, Darmkarzinome, Blutkarzinome, Brustkarzinome, Prostatakarzinome, Nierenzellkarzinome, Lungenkrebs und Knochenkarzinome sein, ohne jedoch darauf beschränkt zu sein.
Weitere Beispiele für die Arten von Störungen, die mit einer unzureichenden PK-Aktivität verbunden sind und für deren Prävention, Behandlung und Untersuchung die hierin beschriebenen Verbindungen von Nutzen sein können, sind, ohne darauf beschränkt zu sein, Zellproliferationsstörungen, fibrotische Störungen und Stoffwechselstörungen.
Wie zuvor erwähnt, gehört der Rezeptor von insulinähnlichem Wachstumsfaktor 1 (IGF-1R) zur Familie der Transmembrantyrosinkinaserezeptoren, wie z.B. der Thrombozytenwachstumsfaktorrezeptor, der Rezeptor von epidermalem Wachstumsfaktor und der Insulinrezeptor. Es gibt zwei bekannte Liganden für den IGF-1R-Rezeptor. Diese sind IGF-1 und IGF-2. So wie hierin verwendet, bezieht sich die Bezeichnung "IGF" sowohl auf IGF-1 als auch auf IGF-2. Die Familie der Liganden, Rezeptoren und Bindungsproteine von insulinähnlichem Wachstumsfaktor ist bei Krywicki und Yee, Breast Cancer Research and Treatment, 22:7-19, zusammengefasst.
IGF/IGF-1R-gesteuerte Störungen sind durch eine unzureichende oder übermäßige Aktivität von IGF/IGF-1R gekennzeichnet. Eine unzureichende IGF-Aktivität bedeutet entweder: (1) eine IGF- oder IGF-1R-Expression in Zellen, die normalerweise IGF oder IGF-1R nicht exprimieren; (2) eine erhöhte IGF- oder IGF-1R-Expression, die zu einer unerwünschten Zellproliferation, wie z.B. Krebs, führt; (3) eine erhöhte IGF- oder IGF-1R-Aktivität, die zu unerwünschter Zellproliferation, wie z.B. Krebs, führt, und/oder eine übermäßige IGF- oder IGF-1R-Aktivität. Eine übermäßige IGF- oder IGF-1R-Aktivität bedeutet entweder eine Verstärkung des Gens, das IGF-1, IGF-2, IGF-1R kodiert, oder die Erzeugung eines IGF-Aktivitätsgrades, der mit Zellproliferationsstörungen korreliert werden kann (d.h. mit steigendem IGF-Grad nimmt die Schwere von einem oder mehreren der Symptome der Zellproliferationsstörung zu). Auch die Bioverfügbarkeit von IGF-1 und IGF-2 kann durch die Gegenwart oder Abwesenheit eines Satzes IGF-Bindungspräsenz oder -abwesenheit eines Satzes IGF-Bindungsproteine (IGF BPs), von denen sechs bekannt sind, beeinflusst werden. Die übermäßige Aktivität von IGF/IGF-1R kann auch von einer Herabregulierung von IGF-2, das eine IGF-2-Bindungsdomäne, jedoch keine intrazelluläre Kinasedomäne, enthält, herrühren. Beispiele für IGF/IGF-1R-gesteuerte Störungen sind u.a. die verschiedenen IGF/IGF-1R-bezogenen menschlichen bösartigen Tumore, die bei Cullen, et al., Cancer Investigation, 9(4): 443-454, 1991, welches hierin durch Bezugnahme vollständig aufgenommen ist, einschließlich sämtlicher Zeichnungen, zusammengefasst sind. Die klinische Bedeutung und Rolle bei der Regulierung der Osteoblastenfunktion von IGF/IGF-1Rs ist bei Schmid, Journal of Internal Medicine, 234: 535-542, 1993, zusammengefasst.
Somit umfassen die IGF-1R-Aktivitäten: (1) Phosphorylierung von IGF-1R-Protein; (2) Phosphorylierung eines IGF-1R-Proteinsubstrats; (3) Wechselwirkung mit einem IGF-Adapterprotein; (4) IGF-1R-Proteinoberflächenexpression. Weitere IGF-1R-Proteinaktivitäten können durch Standardverfahren identifiziert werden. Die IGF-IR-Aktivität kann durch Messung von einer oder mehreren der folgenden Aktivitäten untersucht werden: (1) Phosphorylierung von IGF-1R; (2) Phosphorylierung eines IGF-1R-Susbstrats; (3) Aktivierung eines IGF-1R-Adapter-Moleküls; und (4) Aktivierung von Stromabwärts-Signalgebungsmolekülen, und/oder (5) erhöhte Zellteilung. Diese Aktivitäten können durch nachstehend beschriebene und im Stand der Technik bekannte Verfahren gemessen werden.
IGF-1R wurde als eine absolute Notwendigkeit zur Errichtung und Aufrechterhaltung des transformierten Phänotyps sowohl in vitro als auch in vivo in verschiedenen Zelltypen genannt (R. Baserga, Cancer Research 55: 249-252, 1995). Es wurde berichtet, dass Herbimycin A die IGF-1R-Protein-Tyrosin-Kinase und die Zellproliferation in menschlichen Brustkrebszellen inhibiert (Sepp-Lorenzino, et al., 1994, J. Cell Biochem. Suppl. 18b: 246). Versuche, welche die Rolle von IGF-1R bei der Umwandlung untersuchen, setzten Antisense-Strategien, dominant negative Mutanten und Antikörper für den IGF-1R ein und führten zu der Annahme, dass IGR-1R ein bevorzugtes Ziel für therapeutische Interventionen sein kann.
IGF-1R wurde, außer dass er mit Ernährungstherapie und Typ-II-Diabetes in Verbindung gebracht wurde, auch mit mehreren Arten von Karzinomen in Verbindung gebracht. Zum Beispiel wurde IGF-1 als ein autokriner Wachstumsstimulator für mehrere Tumorarten genannt, z.B. für menschliche Brustkrebs-Karzinomzellen (Arteago et al., J. Clin. Invest., 1989, 84:1418-1423) und kleinzellige Lungentumorzellen (Macauley et al., Cancer Res., 1989, 50: 2511-2517). Ferner scheint IGF-1, während er ganzheitlich bei dem normalen Wachstum und der normalen Differenzierung des Nervensystems beteiligt ist, ein autokriner Anreger für menschliche Gliome zu sein. Sandberg-Nordgvist et al., Cancer Res., 1993, 53: 2475-2478.
Ein Beispiel für die potentielle Beteiligung von IGF-2 bei kolorektalem Karzinom findet sich bei der Hochregulierung von IGF-2 mRNA bei Darmtumoren, verglichen mit normalem Darmgewebe. (Zhang et al., Science (1997) 276: 1268-1272.) IGF-2 kann auch eine Rolle bei der hypoxieinduzierten Neovaskularisierung von Tumoren spielen. (Minet et al., Int. J. Mol. Med. (2000) 5:253-259.) IGF-2 kann auch bei der Tumorgenese durch Aktivierung einer Insulinrezeptor-Isoform-A eine Rolle spielen. Die IGF-2-Aktivierung von Insulinrezeptor-Isoform-A aktiviert die Zellüberlebenssignalgebungswege in Zellen, ihr relativer Beitrag zum Tumorzellenwachstum und -überleben ist derzeit jedoch nicht bekannt. Die Kinasedomäne von Insulinrezeptor-Isoform-A ist mit der des Standard-Insulinrezeptors identisch. Scalia et al., 2001, J. Cell Biochem. 82: 610-618.
Die Bedeutung von IGF-1R und dessen Liganden in kultivierten Zelltypen (Fibroblasten, Epithelzellen, Glattmuskelzellen, T-Lymphozyten, myeloische Zellen, Chondrozyten und Osteoblasten (die Stammzellen des Knochenmarks)) wird durch die Fähigkeit von IGF-1, das Zellwachstum und die Zellproliferation zu stimulieren, veranschaulicht. Goldring und Goldring, Eukaryotic Gene Expression, 1991, 1: 301-326. In einer Reihe von kürzlichen Publikationen schlagen Baserga und andere vor, dass IGF-1R eine zentrale Rolle bei dem Mechanismus der Transformation spielen und als solche ein bevorzugtes Ziel für therapeutische Interventionen für ein breites Spektrum an menschlichen bösartigen Tumoren sein könnten. Baserga, Cancer Res., 1995, 55: 249-252; Baserga, Cell, 1994, 79: 927-930; Coppola et al., Mol. Cell. Biol., 1994, 14: 4588-4595; Baserga, Trends in Biotechnology, 1996, 14: 150-152; H.M. Khandwala et al., Endocrine Reviews, 21: 215-244, 2000. Die vorwiegenden Karzinome, die durch Verwendung einer Verbindung der vorliegenden Erfindung behandelt werden können, sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Brustkrebs, Prostatakrebs, Kolorektalkarzinom, kleinzelliger Lungenkrebs, nicht-kleinzelliger Lungenkrebs, Nierenzellkarzinom oder Endometriumkarzinom.
IGF-1 wurde auch mit Netzhaut-Neovaskularisierung in Verbindung gebracht. Bei manchen Patienten mit einer hohen Konzentration an IGF-1 wurde eine proliferative diabetische Retinopathie beobachtet. (L.E. Smith et al., Nature Medicine, 1999, 5:1390-1395.)
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch als Anti-Aging-Mittel geeignet sein. Es wurde festgestellt, dass eine Verbindung zwischen der IGF-Signalgebung und dem Altern besteht. Versuche haben gezeigt, dass Säuger, deren Kalorienaufnahme eingeschränkt wurde, niedrige Konzentrationen an Insulin und IGF-1 und eine höhere Lebensdauer besitzen. Ähnliche Beobachtungen wurden auch bei Insekten gemacht. (Siehe C. Kenyon, Cell, 2001, 105: 165-168; E. Strauss, Science, 2001, 292: 41-43; K.D. Kimura et al., Science 1997, 277: 942-946; M. Tatar et al., Science, 2001, 292: 107-110).
STKs wurden bei vielen Karzinomarten impliziert, vor allem bei Brustkrebs (Cance et al., Int. J. Cancer, 1993, 54:571-577).
Die Verbindung zwischen einer abnormalen PK-Aktivität und einer Erkrankung ist nicht auf Krebs beschränkt. Zum Beispiel wurden RTKs mit Erkrankungen, wie z.B. Psoriasis, Diabetes mellitus, Endometriose, Angiogenese, Ausbildung atheromatöser Plaques, Alzheimer-Krankheit, epidermale Hyperproliferation, neurodegenerative Erkrankungen, altersbezogene Makuladegeneration und Hämangiome, in Verbindung gebracht. Zum Beispiel wurde EGFR bei der kornealen und dermalen Wundheilung angegeben. Insulin-R- und IGF-1R-Defekte treten bei Typ-II-Diabetes mellitus auf. Eine vollständigere Korrelation zwischen spezifischen RTKs und ihrem therapeutischen Indikationen ist bei Plowman et al., DN&P, 1994, 7: 334-339, angegeben.
Wie zuvor erwähnt, sind nicht nur RTKs, sondern auch CTKs, einschließlich, ohne jedoch beschränkt zu sein auf, src, abl, fps, yes, fyn, lyn, lck, Zap70, lbk, hck, fgr und yrk (zusammengefasst durch Solen et al., FASEB J., 1993, 6: 3403-3409), beim proliferativen und metabolischen Signaltransduktionsweg beteiligt, und es könnte somit erwartet werden und es wurde gezeigt, dass sie bei vielen PTK-vermittelten Störungen beteiligt sind, auf die die vorliegende Erfindung abzielt. Zum Beispiel wurde gezeigt, dass mutiertes src (v-src) ein Onkoprotein (pp60^v-src) bei Hühnern ist. Darüber hinaus überträgt dessen Zellhomolog, das Protoonkogen pp60^c-src onkogene Signale an viele Rezeptoren. Die Überexprimierung von EGFR oder HER2/neu in Tumoren führt zur konstitutiven Aktivierung von pp60^c-src, welche für maligne Zellen charakteristisch ist, die jedoch bei normalen Zellen fehlt. Andererseits weisen Mäuse, die defizient in der Expression von c-src sind, einen osteopetrotischen Phänotyp auf, was auf eine wichtige Beteiligung von c-src bei der Osteoklastenfunktion und auf eine mögliche Beteiligung bei verwandten Störungen hindeutet.
Ähnlich wurde Zap70 mit der T-Zellen-Signalgebung in Verbindung gebracht, welche mit Autoimmunstörungen verbunden sein kann.
STKs wurden mit Entzündung, Autoimmunerkrankungen, Immunreaktionen und Hyperproliferationsstörungen wie Restenose, Fibrose, Psoriasis, Osteoarthritis und rheumatoider Arthritis in Verbindung gebracht.
PKs wurden auch bei der Embryonenimplantierung genannt. So können die Verbindungen dieser Erfindung ein wirksames Verfahren zur Prävention einer solchen Embyonenimplantation liefern und dabei als Mittel zur Geburtenkontrolle geeignet sein.
Schließlich stehen sowohl RTKs als auch CTKs derzeit im Verdacht, bei Hyperimmunstörungen beteiligt zu sein.
Diese und andere Aspekte der Erfindung werden aus den hierin enthaltenen Lehren offensichtlich werden.
Ein Verfahren zur Identifizierung einer chemischen Verbindung, welche die katalytische Aktivität von einer oder mehreren der oben erörterten Proteinkinasen moduliert, ist ein weiterer Aspekt dieser Erfindung. Das Verfahren umfasste das Inkontaktbringen von Zellen, welche die erwünschte Proteinkinase exprimieren, mit einer Verbindung dieser Erfindung (oder ihrem Salz oder Prodrug) und die Untersuchung der Zellen auf irgendwelche Auswirkungen, welche die Verbindung auf diese hat. Die Auswirkung kann eine beliebige, entweder durch das bloße Auge oder durch Verwendung von Gerätschaften beobachtbare Änderung oder nicht vorhandene Änderung in einem Zell-Phänotyp sein. Die Änderung oder die nicht vorhandene Änderung in dem untersuchten Zell-Phänotyp kann zum Beispiel, ohne Einschränkung, eine Änderung oder eine nicht vorhandene Änderung der katalytischen Aktivität der Proteinkinase in Zellen oder eine Änderung oder nicht vorhandene Änderung bei der Wechselwirkung der Proteinkinase mit einem natürlichen Bindungspartner sein.
ZUSAMMENSETZUNG
Pharmazeutische Zusammensetzungen der obigen Verbindungen sind ein weiterer Aspekt dieser Erfindung.
So wie hierin verwendet, soll die Bezeichnung "Zusammensetzung" ein Produkt umfassen, das die angegebenen Bestandteile in den angegebenen Mengen enthält, sowie ein beliebiges Produkt, das direkt oder indirekt durch Kombination der angegebenen Bestandteile in den angegebenen Mengen resultiert.
Die vorliegende Erfindung umfasst auch eine pharmazeutische Zusammensetzung, die zur Behandlung von Krebs geeignet ist, umfassend die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge der Verbindungen dieser Erfindung mit oder ohne pharmazeutisch annehmbaren Trägern oder Verdünnungsmitteln. Geeignete Zusammensetzungen dieser Erfindung enthalten wässrige Lösungen, welche Verbindungen dieser Erfindung und pharmakologisch annehmbare Träger, z.B. Kochsalzlösung, bei einem pH-Wert von z.B. 7,4 enthalten. Die Lösungen können in die Blutbahn eines Patienten durch lokale Bolus-Injektion eingebracht werden.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen, die den Wirkstoff enthalten, können in einer zur oralen Verwendung geeigneten Form vorliegen, zum Beispiel als Tabletten, Pastillen, Lutschtabletten, wässrige oder ölige Suspensionen, dispergierbare Pulver oder Granulate, Emulsionen, Hart- oder Weichkapseln oder Sirupe oder Elixiere. Zur oralen Verwendung bestimmte Zusammensetzungen können gemäß einem beliebigen, im Stand der Technik bekannten Verfahren zur Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen hergestellt werden, und solche Zusammensetzungen können ein oder mehrere Mittel enthalten, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Süßstoffen, Aromastoffen, Farbmitteln und Konservierungsstoffen, um pharmazeutisch geschmackvolle und wohlschmeckende Präparate zur Verfügung zu stellen. Tabletten enthalten den Wirkstoff im Gemisch mit nichttoxischen pharmazeutisch annehmbaren Hilfsstoffen, die sich zur Herstellung von Tabletten eignen. Diese Hilfsstoffe können zum Beispiel inerte Verdünnungsmittel, wie z.B. Calciumcarbonat, Natriumcarbonat, Lactose, Calciumphosphat oder Natriumphosphat; Granulier- und Sprengmittel, zum Beispiel mikrokristalline Zellulose, Croscarmellose-Natrium, Maisstärke oder Alginsäure; Bindemittel, zum Beispiel Stärke, Gelatine, Polyvinylpyrrolidon oder Akaziengummi, und Gleitmittel, zum Beispiel Magnesiumstearat, Stearinsäure oder Talk, sein. Die Tabletten können ohne Überzug sein, oder sie können durch bekannte Verfahren überzogen werden, um den unangenehmen Geschmack des Arzneistoffes zu maskieren oder die Auflösung und Absorption im Magen-Darm-Trakt zu verzögern und dadurch über längere Zeit eine nachhaltige Wirkung zu ergeben. Zum Beispiel kann ein wasserlösliches Maskierungsmaterial, wie z.B. Hydroxypropylmethylcellulose oder Hydroxypropylcellulose, oder ein Zeitverzögerungsmaterial, wie z.B. Ethylcellulose, Celluloseacetatbutyrat, eingesetzt werden.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch zusammen mit anderen gut bekannten therapeutischen Mitteln, die aufgrund ihrer speziellen Eignung gegen den behandelten Zustand ausgewählt werden, verabreicht werden. Zum Beispiel sind im Falle von knochenbezogenen Störungen Kombinationen, die geeignet wären, u.a. diejenigen mit antiresorptiven Bisphosphonaten, wie z.B. Alendronat und Risedronat; Integrinblockern (weiter unten definiert), wie z.B. α_vβ₃-Antagonisten; konjugierten Östrogenen, die bei der Hormonersatztherapie verwendet werden, wie z.B. PREMPRO^®, PREMARIN^® und ENDOMETRION^®; selektiven Östrogenrezeptormodulatoren (SERMs), wie z.B. Raloxifen, Droloxifen, CP-336156 (Pfizer) und Lasofoxifen; Kathepsin-K-Inhibitoren und ATP-Protonenpumpeninhibitoren.
Die vorliegenden Verbindungen eignen sich auch in Kombination mit bekannten Mitteln gegen Krebs. Solche bekannte Mittel gegen Krebs sind u.a. die folgenden: Östrogenrezeptormodulatoren, Androgenrezeptormodulatoren, Retinoidrezeptormodulatoren, zytotoxische Mittel, antiproliferative Mittel, Prenylproteintransferaseinhibitoren, HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren, HIV-Proteaseinhibitoren, Reverse-Transkriptase-Inhibitoren und andere Angiogeneseinhibitoren. Die vorliegenden Verbindungen sind besonders geeignet, wenn sie zusammen mit einer Strahlentherapie verabreicht werden. Die synergistischen Wirkungen der VEGF-Inhibierung zusammen mit einer Strahlentherapie wurden im Fachgebiet beschrieben (siehe die WO 00/61186 ).
"Östrogenrezeptormodulatoren" bedeutet Verbindungen, welche die Bindung von Östrogen an den Rezeptor behindern oder inhibieren, ungeachtet des Mechanismus. Beispiele für Östrogenrezeptormodulatoren sind u.a. Tamoxifen, Raloxifen, Idoxifen, LY353381, LY117081, Toremifen, Fulvestrant, 4-[7-(2,2-Dimethyl-1-oxopropoxy-4-methyl-2-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenyl]-2H-1-benzopyran-3-yl]phenyl-2,2-dimethylpropanoat, 4,4'-Dihydroxybenzophenon-2,4-dinitrophenylhydrazon und SH646.
"Androgenrezeptormodulatoren" bedeutet Verbindungen, welche die Bindung von Androgenen an den Rezeptor behindern oder inhibieren, ungeachtet des Mechanismus. Beispiele für Androgenrezeptormodulatoren sind u.a. Finasterid und andere 5α-Reduktaseinhibitoren, Nilutamid, Flutamid, Bicalutamid, Liarozol und Abirateronacetat.
"Retinoidrezeptormodulatoren" bedeutet Verbindungen, welche die Bindung von Retinoiden an den Rezeptor behindern oder inhibieren, ungeachtet des Mechanismus. Beispiele für solche Retinoidrezeptormodulatoren sind u.a. Bexaroten, Tretinoin, 13-cis-Retinsäure, 9-cis-Retinsäure, α-Difluormethylornithin, ILX23-7553, frans-N-(4'-Hydroxyphenyl)retinamid und N-4-Carboxyphenylretinamid.
"Zytotoxische Mittel" bedeutet Verbindungen, die einen Zelltod herbeiführen, hauptsächlich durch direkten Eingriff in die Zellfunktion, oder die die Zellmyosis inhibieren oder behindern, einschließlich Alkylierungsmitteln, Tumomekrosefaktoren, Interkalatoren, Mikrotubulininhibitoren und Topoisomeraseinhibitoren.
Beispiele für zytotoxische Mittel sind u.a. Tirapazimin, Sertenef, Cachectin, Ifosfamid, Tasonermin, Lonidamin, Carboplatin, Doxorubicin, Altretamin, Prednimustin, Dibromdulcitol, Ranimustin, Fotemustin, Nedaplatin, Oxaliplatin, Temozolomid, Heptaplatin, Östramustin, Improsulfantosilat, Trofosfamid, Nimustin, Dibrospidiumchlorid, Pumitepa, Lobaplatin, Satraplatin, Profiromycin, Cisplatin, Irofulven, Dexifosfamid, cis-Amindichlor(2-methylpyridin)platin, Benzylguanin, Glufosfamid, GPX100, (trans,trans,trans)-Bis-mu-(hexan-1,6-diamin)-mu-[diaminplatin(II)]bis[diamin(chlor)platin(II)]tetrachlorid, Diarizidinylspermin, Arsentrioxid, 1-(11-Dodecylamino-10-hydroxyundecyl)-3,7-dimethylxanthin, Zorubicin, Idarubicin, Daunorubicin, Bisantren, Mitoxantron, Pirarubicin, Pinafid, Valrubicin, Amrubicin, Antineoplaston, 3'-Desamino-3'-morpholino-13-desoxo-10-hydroxycarminomycin, Annamycin, Galarubicin, Elinafid, MEN10755 und 4-Desmethoxy-3-desamino-3-aziridinyl-4-methylsulfonyldaunorubicin (siehe die WO 00/50032 ).
Beispiele für Mikrotubulininhibitoren sind u.a. Paclitaxel, Vindesinsulfat, 3',4'-Didehydro-4'-desoxy-8'-norvincaleukoblastin, Docetaxol, Rhizoxin, Dolastatin, Mivobulinisethionat, Auristatin, Cemadotin, RPR109881, BMS184476, Vinflunin, Cryptophycin, 2,3,4,5,6-Pentafluor-N-(3-fluor-4-methoxyphenyl)benzolsulfonamid, Anhydrovinblastin, N,N-Dimethyl-L-valyl-L-valyl-N-methyl-L-valyl-L-prolyl-L-prolin-t-butylamid, TDX258 und BMS188797.
Einige Beispiele für Topoisomeraseinhibitoren sind Topotecan, Hycaptamin, Irinotecan, Rubitecan, 6-Ethoxypropionyl-3',4'-O-exobenzylidenchartreusin, 9-Methoxy-N,N-dimethyl-5-nitropyrazol[3,4,5-k]acridin-2-(6H)propanamin, 1-Amino-9-ethyl-5-fluor-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H,12H-benzo[de]pyrano[3',4':b,7]indolizino[1,2b]chinolin-10,13(9H,15H)dion, Lurtotecan, 7-[2-(N-Isopropylamino)ethyl]-(20S)camothecin, BNP1350, BNPI1100, BN80915, BN80942, Etoposidphosphat, Teniposid, Sobuzoxan, 2'-Dimethylamino-2'-desoxyetoposid, GL331, N-[2-(Dimethylamino)ethyl]-9-hydroxy-5,6-dimethyl-6H-pyrido[4,3-b]carbazol-1-carboxamid, Asulacrin, (5a,5aB,8aa,9b)-9-[2-[N-[2-(Dimethylamino)ethyl]-N-methylamino]ethyl]-5-[4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl]-5,5a,6,8,8a,9-hexohydrofuro(3',4':6,7)naphtho(2,3-d)-1,3-dioxol-6-on, 2,3-(Methylendioxy)-5-methyl-7-hydroxy-8-methoxybenzo[c]-phenanthridinium, 6,9-Bis[(2-aminoethyl)amino]benzo[g]isoguinolin-5,10-dion, 5-(3-Aminopropylamino)-7, 10-dihydroxy-2-(2-hydroxyethylaminomethyl)-6H-pyrazol[4,5,1-de]acridin-6-on, N-[1-[2(Diethylamino)ethylamino]-7-methoxy-9-oxo-9H-thioxanthen-4-ylmethyl]formamid, N-(2-(Dimethylamino)ethyl)acridin-4-carboxamid, 6-[[2-(Dimethylamino)ethyl]amino]-3-hydroxy-7H-indeno[2,1-c]chinolin-7-on und Dimesna.
"Antiproliferative Mittel" sind u.a. Antisens-RNA- und -DNA-Oligonukleotide, wie z.B. G3139, ODN698, RVASKRAS, GEM231 und INX3001, und Antimetabolite, wie z.B. Enocitabin, Carmofur, Tegafur, Pentostatin, Doxifluridin, Trimetrexat, Fludarabin, Capecitabin, Galocitabin, Cytarabinocfosfat, Fosteabinnatriumhydrat, Raltitrexed, Paltitrexid, Emitefur, Tiazofurin, Decitabin, Nolatrexed, Pemetrexed, Nelzarabin, 2'-Desoxy-2'-methylidencytidin, 2'-Fluormethylen-2'-desoxycytidin, N-[5-(2,3-Dihydrobenzofuryl)sulfonyl]-N'-(3,4-dichlorphenyl)harnstoff, N6-[4-Desoxy-4-[N2-[2(E),4(E)-tetradecadienoyl]glycylamino]-L-glycero-B-L-mannoheptopyranosyl]adenin, Aplidin, Ecteinascidin, Troxacitabin, 4-[2-Amino-4-oxo-4,6,7,8-tetrahydro-3H-pyrimidino[5,4-b][1,4]thiazin-6-yl-(S)-ethyl]-2,5-thienoyl-L-glutaminsäure, Aminopterin, 5-Flurouracil, Alanosin, 11-Acetyl-8-(carbamoyloxymethyl)-4-formyl-6-methoxy-14-oxa-1,11-diazatetracyclo(7.4.1.0.0)-tetradeca-2,4,6-trien-9-ylessigsäureester, Swainsonin, Lometrexol, Dexrazoxan, Methioninase, 2'-Cyano-2'-desoxy-N4-palmitoyl-1-B-D-arabinofuranosylcytosin und 3-Aminopyridin-2-carboxaldehydthiosemicarbazon. "Antiproliferative Mittel" umfasst auch monoklonale Antikörper für Wachstumsfaktoren, anders als diejenigen, die unter "Angiogeneseinhibitoren" aufgeführt sind, wie z.B. Trastuzumab, und Tumorsuppressorgene, wie z.B. p53, die durch einen rekombinanten virusvermittelten Gentransfer zugeführt werden können (siehe zum Beispiel US-Patent Nr. 6069134 ).
"HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren" bedeutet Inhibitoren von 3-Hydroxy-3-methylglutaryl-COA-Reduktase. Verbindungen mit Inhibitorwirkung für HMG-CoA-Reduktase können leicht durch Anwendung im Stand der Technik gut bekannter Tests identifiziert werden. Siehe zum Beispiel die in US-Patent 4231938 in Spalte 6 und in der WO 84/02131 auf den Seiten 30-33 beschriebenen Tests. Die Bezeichnungen "HMG-CoA-Reduktaseinhibitor" und "Inhibitor von HMG-CoA-Reduktase" haben dieselbe Bedeutung, wenn sie hier verwendet werden.
Beispiele für HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren, die verwendet werden können, sind u.a. Lovastatin (MEVACOR^®, siehe US-Patent Nr. 4231938 , 4294926 und 4319039 ), Simvastatin (ZOCOR^®, siehe US-Patent Nr. 4444784 , 4820850 und 4916239 ), Pravastatin (PRAVACHOL^®, siehe US-Patente Nr. 4346227 , 4537859 , 4410629 , 5030447 und 5180589 ), Fluvastatin (LESCOL^®, siehe US-Patente Nr. 5354772 , 4911165 , 4929437 , 5189164 , 5118853 , 5290946 und 5356896 ), Atorvastatin (LIPITOR^®, siehe US-Patente Nr. 5273995 , 4681893 , 5489691 und 5342952 ) und Cerivastatin (auch bekannt als Rivastatin und BAYCHOL^®, siehe US-Patent Nr. 5177080 ). Die Strukturformeln dieser und weiterer HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren, die bei den vorliegenden Verfahren verwendet werden können, sind auf Seite 87 von M. Yalpani, "Cholesterol Lowering Drugs", Chemistry & Industry, S. 85-89 (5. Februar 1996) und in den US-Patenten Nr. 4782084 und 4885314 beschrieben. Die Bezeichnung HMG-CoA-Reduktaseinhibitor, so wie sie hier verwendet wird, umfasst alle pharmazeutisch annehmbaren Lacton- und offenen Säureformen (d.h., bei denen der Lactonring geöffnet wird, um die freie Säure zu bilden) sowie Salz- und Esterformen von Verbindungen, die eine HMG-CoA-Reduktase-Inhibitorwirkung besitzen, und daher ist die Verwendung solcher Salze, Ester, offenen Säure- und Lactonformen vom Umfang dieser Erfindung umfasst. Eine Darstellung des Lactonteils und von dessen offener Säureform ist nachstehend als Strukturen I und II gezeigt.
Bei HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren, bei denen eine offene Säureform existieren kann, können Salz- und Esterformen vorzugsweise aus der offenen Säure gebildet werden, und alle diese Formen sind von der Bedeutung der Bezeichnung "HMG-CoA-Reduktaseinhibitor", so wie sie hier verwendet wird, umfasst. Vorzugsweise ist der HMG-CoA-Reduktaseinhibitor ausgewählt aus Lovastatin und Simvastatin und besonders bevorzugt aus Simvastatin. Die Bezeichnung "pharmazeutisch annehmbare Salze" soll hier, in Bezug auf den HMG-CoA-Reduktaseinhibitor, nichttoxische Salze der bei dieser Erfindung eingesetzten Verbindungen bedeuten, die im allgemeinen durch Umsetzung der freien Säure mit einer geeigneten organischen oder anorganischen Base hergestellt werden, insbesondere diejenigen, die aus Kationen, wie z.B. Natrium, Kalium, Aluminium, Calcium, Lithium, Magnesium, Zink und Tetramethylammonium, gebildet werden, sowie diejenigen Salze, die aus Aminen, wie z.B. Ammoniak, Ethylendiamin, N-Methylglucamin, Lysin, Arginin, Ornithin, Cholin, N,N'-Dibenzylethylendiamin, Chlorprocain, Diethanolamin, Procain, N-Benzylphenethylamin, 1-p-Chlorbenzyl-2-pyrrolidin-1'-ylmethylbenzimidazol, Diethylamin, Piperazin und Tris(hydroxymethyl)aminomethan, gebildet werden. Weitere Beispiele für Salzformen von HMG-CoA-Reduktaseinhibitoren können u.a. Acetat, Benzolsulfonat, Benzoat, Bicarbonat, Bisulfat, Bitartrat, Borat, Bromid, Calciumedetat, Camsylat, Carbonat, Chlorid, Clavulanat, Citrat, Dihydrochlorid, Edetat, Edisylat, Estolat, Esylat, Fumarat, Gluceptat, Gluconat, Glutamat, Glycollylarsanilat, Hexylresorcinat, Hydrabamin, Hydrobromid, Hydrochlorid, Hydroxynaphthoat, Iodid, Isothionat, Lactat, Lactobionat, Laurat, Malst, Malest, Mandelat, Mesylat, Methylsulfat, Mucat, Napsylat, Nitrat, Oleat, Oxalat, Pamoat, Palmitat, Panthothenat, Phosphat/Diphosphat, Polygalacturonat, Salicylat, Stearat, Subacetat, Succinat, Tannst, Tartrat, Teoclat, Tosylat, Triethiodid und Valerat sein.
Esterderivate der beschriebenen HMG-CoA-Reduktaseinhibitorverbindungen können als Prodrugs fungieren, die, wenn sie im Blutstrom eines warmblütigen Tiers absorbiert sind, sich in einer Weise spalten können, welche die Freisetzung der Arzneistoffform ermöglicht und dem Arzneistoff eine verbesserte therapeutische Wirksamkeit verleihen.
"Prenylproteintransferaseinhibitor" bedeutet eine Verbindung, die irgendein Prenylproteintransferaseenzym oder eine beliebige Kombination aus den Prenylproteintransferaseenzymen inhibiert, einschließlich Famesylproteintransferase (FPTase), Geranylgeranylproteintransferase Typ I (GGPTase-1) und Geranyigeranyiproteintransferase Typ II (GGPTase-II, auch Rab GGPTase genannt). Beispiele für Prenylproteintransferaseinhibitorverbindungen sind u.a. (±)-6-[Amino(4-chlorphenyl)(1-methyl-1H-imidazol-5-yl)methyl]-4-(3-chlorphenyl)-1-methyl-2(1H)-chinolinon, (-)-6-[Amino(4-chlorphenyl)(1-methyl-1H-imidazol-5-yl)methyl]-4-(3-chlorphenyl)-1-methyl-2(1H)-chinolinon, (+)-6-[Amino(4-chlorphenyl)(1-methyl-1H-imidazol-5-yl)methyl]-4-(3-chlorphenyl)-1-methyl-2(1H)-chinolinon, 5(S)-n-Butyl-1-(2,3-dimethylphenyl)-4-[1-(4-cyanobenzyl)-5-imidazolylmethyl]-2-piperazinon, (S)-1-(3-Chlorphenyl)-4-[1-(4-cyanobenzyl)-5-imidazolylmethyl]-5-[2-(ethansulfonyl)methyl)-2-piperazinon, 5(S)-n-Butyl-1-(2-methylphenyl)-4-[1-(4-cyanobenzyl)-5-imidazolylmethyl]-2-piperazinon, 1-(3-Chlorphenyl)-4-[1-(4-cyanobenzyl)-2-methyl-5-imidazolylmethyl]-2-piperazinon, 1-(2,2-Diphenylethyl)-3-[N-(1-(4-cyanobenzyl)-1H-imidazol-5-ylethyl)carbamoyl]piperidin, 4-{5-[4-Hydroxymethyl-4-(4-chlorpyridin-2-ylmethyl)piperidin-1-ylmethyl]-2-methylimidazol-1-ylmethyl}benzonitril, 4-{5-[4-Hydroxymethyl-4-(3-chlorbenzyl)piperidin-1-ylmethyl]-2-methylimidazol-1-ylmethyl}benzonitril, 4-{3-[4-(2-Oxo-2H-pyridin-1-yl)benzyl]-3H-imidazol-4-ylmethyl}benzonitril, 4-{3-[4-(5-Chlor-2-oxo-2H-[1,2']bipyridin-5'-ylmethyl]-3H-imidazol-4-ylmethyl}benzonitril, 4-{3-[4-(2-Oxo-2H-[1,2']bipyridin-5'-ylmethyl]-3H-imidazol-4-ylmethyl}benzonitril, 4-[3-(2-Oxo-1-phenyl-1,2-dihydropyridin-4-ylmethyl)-3H-imidazol-4-ylmethyl}-benzonitril, 18,19-Dihydro-19-oxo-5H,17H-6,10:12,16-dimetheno-1H-imidazo[4,3-c][1,11,4]dioxaazocyclononadecin-9-carbonitril, (±)-19,20-Dihydro-19-oxo-5H-18,21-ethano-12,14-etheno-6,10-metheno-22H-benzo[d]imidazo[4,3-k][1,6,9,12]oxatriazacyclooctadecin-9-carbonitril, 19,20-Dihydro-19-oxo-5H,17H-18,21-ethano-6,10:12,16-dimetheno-22H-imidazo[3,4-h][1,8,11,14]oxatriazacycloeicosin-9-carbonitril und (±)-19,20-Dihydro-3-methyl-19-oxo-5H-18,21-ethano-12,14-etheno-6,10-metheno-22H-benzo[d]imidazo[4,3-k][1,6,9,12]oxatriazacyclooctadecin-9-carbonitril.
Andere Beispiele für Prenylproteintransferaseinhibitoren sind in den folgenden Publikationen und Patenten zu finden: WO 96/30343 , WO 97/18813 , WO 97/21701 , WO 97/23478 , WO 97/38665 , WO 98/28980 , WO 98/29119 , WO 95/32987 , US-Patent Nr. 5420245 , US-Patent Nr. 5523430 ,
US-Patent Nr. 5532359 , US-Patent Nr. 5510510 , US-Patent Nr. 5589485 , US-Patent Nr. 5602098 , Europäische Patentveröffentlichung 0618221 , Europäische Patentveröffentlichung 0675112 , Europäische Patentveröffentlichung 0604181 , Europäische Patentveröffentlichung 0696593 , WO 94/19357 , WO 95/08542 , WO 95/11917 , WO 95/12612 , WO 95/12572 , WO 95/10514 , US-Patent Nr. 5661152 , WO 95/10515 , WO 95/10516 , WO 95/24612 , WO 95/34535 , WO 95/25086 , WO 96/05529 , WO 96/06138 , WO 96/06193 , WO 96/16443 , WO 96/21701 , WO 96/21456 , WO 96/22278 , WO 96/24611 , WO 96/24612 , WO 96/05168 , WO 96/05169 , WO 96/00736 , US-Patent Nr. 5571792 , WO 96/17861 , WO 96/33159 , WO 96/34850 , WO 96/34851 , WO 96/30017 , WO 96/30018 , WO 96/30362 , WO 96/30363 , WO 96/31111 , WO 96/31477 , WO 96/31478 , WO 96/31501 , WO 97/00252 , WO 97/03047 , WO 97/03050 , WO 97/04785 , WO 97/02920 , WO 97/17070 , WO 97/23478 , WO 97/26246 , WO 97/30053 , WO 97/44350 , WO 98/02436 , and US-Patent Nr. 5532359 . Für ein Beispiel für die Rolle eines Prenylproteintransferaseinhibitors bei der Angiogenese siehe das European J. of Cancer, Band 35, Nr. 9, S.1394-1401 (1999).
Beispiele für HIV-Proteaseinhibitoren sind u.a. Amprenavir, Abacavir, CGP-73547, CGP-61755, DMP-450, Indinavir, Nelfinavir, Tipranavir, Ritonavir, Saquinavir, ABT-378, AG 1776 und BMS-232632. Beispiele für Reverse-Transkriptase-Inhibitoren sind u.a. Delaviridin, Efavirenz, GS-840, HB Y097, Lamivudin, Nevirapin, AZT, 3TC, ddC und ddI.
"Angiogeneseinhibitoren" bedeutet Verbindungen, welche die Bildung von neuen Blutgefäßen inhibieren, ungeachtet des Mechanismus. Beispiele für Angiogeneseinhibitoren sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Tyrosinkinaseinhibitoren, wie z.B. Inhibitoren des Tyrosinkinaserezeptors Flt-1 (VEGFR1) und Flk-1/KDR (VEGFR20), Inhibitoren von epidermalen, Fibroblasten- oder Thrombozyten-Wachstumsfaktoren, MMP(Matrixmetalloprotease)-Inhibitoren, Integrin-Blocker, Interferon-α, Interleukin-12, Pentosanpolysulfat, Cyclooxygenaseinhibitoren, einschließlich nichtsteroidale Antiphlogistika (NSAIDs) wie Aspirin und Ibuprofen sowie selektive Cyclooxygenase-2-Inhibitoren wie Celcoxib und Rofecoxib (PNAS, Band 89, S. 7384 (1992); JNCI, Band 69, S. 475 (1982); Arch. Opthalmol., Band 108, S. 573 (1990); Anat. Rec., Band 238, S. 68 (1994); FERS Letters, Band 372, S. 83 (1995); Clin, Orthop. Band 313, S. 76 (1995); J. Mol. Endocrinol., Band 16, S. 107 (1996); Jpn. J. Pharmacol., Band 75, S. 105 (1997); Cancer Res., Band 57, S. 1625 (1997); Cell, Band 93, S. 705 (1998); Intl. J. Mol. Med., Band 2, S. 715 (1998); J. Biol. Chem., Band 274, S. 9116 (1999), Carboxyamidotriazol, Combretastatin A-4, Squalamin, 6-O-Chloracetylcarbonyl)fumagillol, Thalidomid, Angiostatin, Troponin-1, Angiotensin-II-Agonisten (siehe Fernandez et al., J. Lab. Clin. Med. 105:141-145 (1985)) und VEGF-Antikörper (siehe Nature Biotechnology, Band 17, S. 963-968 (Oktober 1999); Kim et al., Nature, 362, 841-844 (1993); WO 00/44777 und WO 00/71186 ).
Wie oben beschrieben, betreffen die Kombinationen mit NSAIDs die Verwendung von NSAIDs, die wirksame COX-2-Inhibierungsmittel sind. Für die Zwecke dieser Beschreibung ist ein NSAID wirksam, wenn es einen IC₅₀-Wert für die COX-2-Inhibierung von 1 μM oder weniger besitzt, gemessen durch den hierin offenbarten Zell- oder Mikrosomaltest.
Die Erfindung umfasst auch Kombinationen mit NSAIDs, die selektive COX-2-Inhibitoren sind. Für die Zwecke dieser Beschreibung sind NSAIDs, die selektive COX-2-Inhibitoren sind, derart definiert, dass sie eine Spezifität für die COX-2-Inhibierung gegenüber der COX-1-Inhibierung von wenigstens dem 100-Fachen besitzen, gemessen anhand des Verhältnisses der IC₅₀-Werte für COX-2 zu den IC₅₀-Werten für COX-1, ermittelt durch den nachstehend offenbarten Zell- oder Mikrosomaltest. Solche Verbindung sind u.a. diejenigen, die in US-Patent 5474995 , erteilt am 12. Dezember 1995, US-Patent 5861419 , erteilt am 19. Januar 1999, US-Patent 6001843 , erteilt am 14. Dezember 1999, US-Patent 6020343 , erteilt am 1. Februar 2000, US-Patent 5409944 , erteilt am 25. April 1995, US-Patent 5436265 , erteilt am 25. Juli 1995, US-Patent 5536752 , erteilt am 16. Juli 1996, US-Patent 5550142 , erteilt am 27. August 1996, US-Patent 5604260 , erteilt am 18. Februar 1997, US-Patent 5698584 , erteilt am 16. Dezember 1997, US-Patent 5710140 , erteilt am 20. Januar 1998, WO 94/15932 , veröffentlicht am 21. Juli 1994, US-Patent 5344991 , erteilt am 6. Juni 1994, US-Patent 5134142 , erteilt am 28. Juli 1992, US-Patent 5380738 , erteilt am 10. Januar 1995, US-Patent 5393790 , erteilt am 20. Februar 1995, US-Patent 5466823 , erteilt am 14. November 1995, US-Patent 5633272 , erteilt am 27. Mai 1997, und US-Patent 5932598 , erteilt am 3. August 1999, offenbart sind.
COX-2-Inhibitoren, die bei dem vorliegenden Behandlungsverfahren besonders geeignet sind, sind: 3-Phenyl-4-(4-(methylsulfonyl)phenyl)-2-(5H)-furanon und
5-Chlor-3-(4-methylsulfonyl)phenyl-2-(2-methyl-5-pyridinyl)pyridin
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Allgemeine und spezielle Syntheseverfahren zur Herstellung der oben beschriebenen COX-2-Inhibitorverbindungen finden sich in US-Patent Nr. 5474995 , erteilt am 12. Dezember 1995, US-Patent Nr. 5861419 , erteilt am 19. Januar 1999, und US-Patent Nr. 6001843 , erteilt am 14. Dezember 1999, die alle hierin durch Bezugnahme aufgenommen sind.
Verbindungen, die als spezifische COX-2-Inhibitoren beschrieben wurden und sich daher bei der vorliegenden Erfindung eignen, sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, die folgenden:
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Verbindungen, die als spezifische COX-2-Inhibitoren beschrieben sind und somit bei der vorliegenden Erfindung geeignet sind, und Syntheseverfahren dafür, können in den folgenden Patenten, anhängigen Anmeldungen und Veröffentlichungen gefunden werden, die hierin durch Bezugnahme aufgenommen sind: WO 94/15932 , veröffentlicht am 21. Juli 1994, US-Patent Nr. 5344991 , erteilt am 6. Juni 1994, US-Patent Nr. 5134142 , erteilt am 28. Juli 1992, US-Patent Nr. 5380738 , erteilt am 10. Januar 1995, US-Patent Nr. 5393790 , erteilt am 20. Februar 1995, US-Patent Nr. 5466823 , erteilt am 14. November 1995, US-Patent Nr. 5633272 , erteilt am 27. Mai 1997, und US-Patent Nr. 5932598 , erteilt am 3. August 1999.
Verbindungen, die spezifische COX-2-Inhibitoren sind und somit bei der vorliegenden Erfindung geeignet sind, und Syntheseverfahren dafür, können in den folgenden Patenten, anhängigen Anmeldungen und Veröffentlichungen gefunden werden: US-Patent Nr. 5474995 , erteilt am 12. Dezember 1995, US-Patent Nr. 5861419 , erteilt am 19. Januar 1999, US-Patent Nr. 6001843 , erteilt am 14. Dezember 1999, US-Patent Nr. 6020343 , erteilt am 1. Februar 2000, US-Patent Nr. 5409944 , erteilt am 25. April 1995, US-Patent Nr. 5436265 , erteilt am 25. Juli 1995, US-Patent Nr. 5536752 , erteilt am 16. Juli 1996, US-Patent Nr. 5550142 , erteilt am 27. August 1996, US-Patent Nr. 5604260 , erteilt am 18. Februar 1997, US-Patent Nr. 5698584 , erteilt am 16. Dezember 1997, und US-Patent Nr. 5710140 , erteilt am 20. Januar 1998.
Andere Beispiele für Angiogeneseinhibitoren sind u.a., ohne jedoch darauf beschränkt zu sein, Endostation, Ukrain, Ranpirnase, IM862, 5-Methoxy-4-[2-methyl-3-(3-methyl-2-butenyl)oxiranyl]-1-oxaspiro[2,5]oct-6-yl(chloracetyl)carbamat, Acetyldinanalin, 5-Amino-1-[[3,5-dichlor-4-(4-chlorbenzoyl)phenyl]methyl]-11-1-1,2,3-triazol-4-carboxamid, CM 101, Squalamin, Combretastatin, RPI4610, NX31838, sulfatiertes Mannopentaosephosphat, 7,7-(Carbonyl-bis[imino-N-methyl-4,2-pyrrolocarbonylimino[N-methyl-4,2-pyrrol]carbonylimino]-bis-(1,3-naphthalindisulfonat) und 3-[(2,4-Dimethylpyrrol-5-yl)methylen]-2-indolinon (SU5416).
Die Bezeichnung "Integrin-Blocker", wie sie oben verwendet wird, bedeutet Verbindungen, welche die Bindung eines physiologischen Liganden an das α_vβ₃-Integrin selektiv antagonisieren, inhibieren oder dieser Bindung entgegenwirken, Verbindungen, welche die Bindung eines physiologischen Liganden an das α_vβ₅-Integrin selektiv antagonisieren, inhibieren oder dieser Bindung entgegenwirken, Verbindungen, welche die Bindung eines physiologischen Liganden sowohl an das α_vβ₃-Integrin als auch an das α_vβ₅-Integrin antagonisieren, inhibieren oder dieser Bindung entgegenwirken, und Verbindungen, welche die Wirkung des/der auf Kapillarendothelzellen exprimierten speziellen Integrins/Integrine antagonisieren, inhibieren oder dieser Wirkung entgegenwirken. Die Bezeichnung bedeutet auch Antagonisten der α_vβ₆-, α_vβ₈-, α₁β₁-, α₂β₁-, α₅β₁-, α₆β₄- und α₆β₄-Integrine. Die Bezeichnung bedeutet auch Antagonisten einer beliebigen Kombination aus α_vβ₃-, α_vβ₅-, α_vβ₆-, α_vβ₈-, α₁β₁-, α₂β₁-, α₅β₁-, α₆β₁- und α₆β₄-Integrinen.
Einige spezielle Beispiele für Tyrosinkinaseinhibitoren sind u.a. N-(Trifluormethylphenyl)-5-methylisoxazol-4-carboxamid, 3-[(2,4-Dimethylpyrrol-5-yl)methylidenyl)indolin-2-on, 17-(Allylamino)-17-desmethoxygeldanamycin, 4-(3-Chlor-4-fluorphenylamino)-7-methoxy-6-[3-(4-morpholinyl)-propoxyl]chinazolin, N-(3-Ethinylphenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinamin, BIBX1382, 2,3,9,10,11,12-Hexahydro-10-(hydroxymethyl)-10-hydroxy-9-methyl-9,12-epoxy-1H-diindolo[1,2,3-fg:3',2',1'-kl]pyrrolo[3,4-i][1,6]benzodiazocin-1-on, SH268, Genistein, STI571, CEP2563, 4-(3-Chlorphenylamino)-5,6-dimethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinmethansulfonat, 4-(3-Brom-4-hydroxyphenyl)-amino-6,7-dimethoxychinazolin, 4-(4'-Hydroxyphenyl)amino-6,7-dimethoxychinazolin, SU6668, ST1571A, N-4-Chlorphenyl-4-(4-pyridylmethyl)-1-phthalazinamin und EMD121974.
Die vorliegenden Verbindungen eignen sich auch alleine oder in Kombination mit Blutplättchenfibrinogenrezeptor(GP IIb/IIIa)-Antagonisten, wie z.B. Tirofiban, zur Inhibierung der Metastase von kanzerösen Zellen. Tumorzellen können Blutplättchen größtenteils durch Thrombinerzeugung aktivieren. Diese Aktivierung ist mit der Freisetzung von VEGF verbunden. Die VEGF-Freisetzung fördert die Metastase durch Erhöhung des Extravasats an den Punkten der Adhäsion an das vaskuläre Endothel (Amirkhosravi, Platelets 10, 285-292, 1999). Daher können die vorliegenden Verbindungen dazu dienen, die Metastase alleine oder in Kombination mit GP IIb/IIIa-Antagonisten zu inhibieren. Beispiele für andere Fibrinogenrezeptorantagonisten sind u.a. Abciximab, Eptifibatid, Sibrafiban, Lamifiban, Lotrafiban, Cromofiban und CT50352.
FORMULIERUNGEN
Die Verbindungen dieser Erfindung können an Säuger, vorzugsweise an Menschen, entweder alleine oder vorzugsweise in Kombination mit pharmazeutisch annehmbaren Trägern, Hilfsstoffen oder Verdünnungsmitteln, gegebenenfalls mit bekannten Hilfsstoffen, wie z.B. Alaun, in einer pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß pharmazeutischer Standard-Praxis verabreicht werden. Die Verbindungen können oral oder parenteral verabreicht werden, einschließlich der intravenösen, intramuskulären, intraperitonealen, subkutanen, rektalen und/oder topischen Verabreichungswege.
Wenn sie als eine feststehende Dosis formuliert werden, setzen solche Kombinationsprodukte die Verbindungen dieser Erfindung in dem nachstehend beschriebenen Dosisbereich und den/die anderen pharmazeutischen Wirkstoff(e) in dessen/deren bewährtem Dosisbereich ein. Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können alternativ der Reihe nach mit einem oder mehreren bekannten pharmazeutisch annehmbaren Mitteln verwendet werden, wenn eine Kombinationsformulierung unangemessen ist.
Formulierungen zur oralen Verwendung können auch als Hartgelatinekapseln, bei denen der Wirkstoff mit einem inerten festen Verdünnungsmittel, zum Beispiel Calciumcarbonat, Calciumphosphat oder Kaolin, vermischt ist, oder als Weichgelatinekapseln, bei denen der Wirkstoff mit einem wasserlöslichen Träger, wie z.B. Polyethylenglycol, oder einem Ölmedium, zum Beispiel Erdnussöl, Flüssigparaffin oder Olivenöl, vermischt ist, dargereicht werden.
Zur oralen Verwendung einer Verbindung gemäß dieser Erfindung, insbesondere zur Chemotherapie, kann die ausgewählte Verbindung zum Beispiel in Form von Tabletten oder Kapseln oder als eine wässrige Lösung oder Suspension verabreicht werden. Im Falle von Tabletten zur oralen Verwendung sind Träger, die üblicherweise verwendet werden, u.a. Lactose und Maisstärke, und üblicherweise werden Gleitmittel, wie z.B. Magnesiumstearat, zugegeben. Zur oralen Verabreichung in Kapselform sind geeignete Verdünnungsmittel u.a. Lactose und getrocknete Maisstärke. Wenn wässrige Suspensionen zur oralen Verwendung benötigt werden, wird der Wirkstoff mit Emulgatoren und Suspensionsmittel kombiniert. Falls erwünscht, können bestimmte Süß- und/oder Aromastoffe zugegeben werden. Zur intramuskulären, intraperitonealen, subkutanen und intravenösen Verwendung werden üblicherweise sterile Lösungen des Wirkstoffs hergestellt, und der pH-Wert der Lösungen sollte geeignet eingestellt und gepuffert werden. Zur intravenösen Verabreichung sollte die Gesamtkonzentration der gelösten Stoffe gesteuert werden, um das Präparat isotonisch zu machen.
Wässrige Suspensionen enthalten den Wirkstoff in einer Mischung mit Hilfsstoffen, die zur Herstellung von wässrigen Suspensionen geeignet sind. Solche Hilfsstoffe sind Suspensionsmittel, zum Beispiel Natriumcarboxymethylcellulose, Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Natriumalginat, Polyvinylpyrrolidon, Tragantgummi und Akaziengummi; Dispersions- oder Benetzungsmittel können ein natürlich vorkommendes Phosphatid, zum Beispiel Lecithin, oder Kondensationsprodukte eines Alkylenoxids mit Fettsäuren, zum Beispiel Polyoxyethylenstearat, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit langkettigen aliphatischen Alkoholen, zum Beispiel Heptadecaethylenoxycetanol, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit Teilestern, erhalten aus Fettsäuren und einem Hexitol, wie z.B. Polyoxyethylensorbitmonooleat, oder Kondensationsprodukte von Ethylenoxid mit Teilestern, erhalten aus Fettsäuren und Hexitolanhydriden, zum Beispiel Polyethylensorbitanmonooleat, sein. Die wässrigen Suspensionen können auch ein oder mehrere Konservierungsmittel, zum Beispiel Ethyl- oder n-Propyl-p-hydroxybenzoat, ein oder mehrere Farbmittel, einen oder mehrere Aromastoffe und einen oder mehrere Süßstoffe, wie z.B. Saccharose, Saccharin oder Aspartam, enthalten.
Ölige Suspensionen können durch Suspendieren des Wirkstoffs in einem Pflanzenöl, zum Beispiel Arachisöl, Olivenöl, Sesamöl oder Kokosnussöl, oder in Mineralöl, wie z.B. Flüssigparaffin, formuliert werden. Die öligen Suspensionen können ein Verdickungsmittel, zum Beispiel Bienenwachs, Hartparaffin oder Cetylalkohol, enthalten. Süßstoffe, wie z.B. die oben genannten, und Aromastoffe können zugegeben werden, um ein wohlschmeckendes Oralpräparat zu ergeben. Diese Zusammensetzungen können durch die Zugabe eines Antioxidationsmittels, wie z.B. butyliertes Hydroxyanisol oder alpha-Tocopherol, konserviert werden.
Dispergierbare Pulver und Granulate, die zur Herstellung einer wässrigen Suspension durch Zugabe von Wasser geeignet sind, stellen den Wirkstoff in einer Mischung mit einem Dispersions- oder Benetzungsmittel, Suspensionsmittel und einem oder mehreren Konservierungsmitteln zur Verfügung. Beispiele für geeignete Dispersions- oder Benetzungsmittel und Suspensionsmittel sind diejenigen, die bereits oben genannt wurden. Zusätzliche Hilfsstoffe, zum Beispiel Süß-, Aroma- und Farbstoffe, können ebenfalls vorhanden sein. Diese Zusammensetzungen können durch die Zugabe eines Antioxidationsmittels, wie z.B. Ascorbinsäure, konserviert werden.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung können auch in Form von Öl-in-Wasser-Emulsionen vorliegen. Die ölige Phase kann ein Pflanzenöl, zum Beispiel Olivenöl oder Arachisöl, oder ein Mineralöl, zum Beispiel Flüssigparaffin, oder Mischungen daraus sein. Geeignete Emulgatoren können natürlich vorkommende Phosphatide, zum Beispiel Sojabohnenlecithin, und Ester oder Teilester, erhalten aus Fettsäuren und Hexitolanhydriden, zum Beispiel Sorbitanmonooleat, und Kondensationsprodukte der Teilester mit Ethylenoxid, zum Beispiel Polyoxyethylensorbitanmonooleat, sein. Die Emulsionen können auch Süßstoffe, Aromastoffe, Konservierungsmittel und Antioxidantien enthalten.
Sirupe und Elixiere können mit Süßstoffen, zum Beispiel Glycerin, Propylenglycol, Sorbit oder Saccharose, formuliert werden. Solche Formulierungen können auch ein Demulzens, ein Konservierungsmittel, Aroma- und Farbstoffe und Antioxidantien enthalten.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in der Form einer sterilen injizierbaren wässrigen Suspension vorliegen. Unter den annehmbaren Vehikeln und Lösungsmitteln, die eingesetzt werden können, sind Wasser, Ringer-Lösung und isotonische Natriumchloridlösung.
Das sterile injizierbare Präparat kann auch eine sterile injizierbare Öl-in-Wasser-Mikroemulsion sein, wobei der Wirkstoff in der öligen Phase gelöst ist. Zum Beispiel kann der Wirkstoff zunächst in einer Mischung aus Sojabohnenöl und Lecithin gelöst werden. Die Öllösung wird dann in eine Mischung aus Wasser und Glycerin eingebracht und weiterverarbeitet, um eine Mikroemulsion zu bilden.
Die injizierbaren Lösungen oder Mikroemulsionen können durch eine lokale Bolus-Injektion in den Blutstrom des Patienten eingebracht werden. Alternativ kann es vorteilhaft sein, die Lösung oder Mikroemulsion in einer solchen Weise zu verabreichen, dass eine konstante zirkulierende Konzentration der vorliegenden Verbindung aufrechterhalten wird. Um eine solche konstante Konzentration aufrecht zu erhalten, kann eine Vorrichtung zur kontinuierlichen intravenösen Zufuhr eingesetzt werden. Ein Beispiel für eine solche Vorrichtung ist die intravenöse Pumpe Deltec CADD-PLUS^TM Modell 5400.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in Form einer sterilen injizierbaren wässrigen oder öligen Suspension zur intramuskulären und subkutanen Verabreichung vorliegen. Diese Suspension kann gemäß dem bekannten Stand der Technik formuliert werden, wobei diejenigen Dispersions- oder Benetzungsmittel und Suspensionsmittel verwendet werden, die oben erwähnt wurden. Das sterile injizierbare Präparat kann auch eine sterile injizierbare Lösung oder Suspension in einem nichttoxischen, parenteral annehmbaren Verdünnungsmittel oder Lösungsmittel sein, zum Beispiel eine Lösung in 1,3-Butandiol. Zusätzlich werden sterile nichtflüssige Öle herkömmlicherweise als ein Lösungsmittel oder Suspensionsmittel verwendet. Für diesen Zweck kann jedes beliebige milde nichtflüssige Öl verwendet werden, einschließlich synthetischer Mono- oder Diglyceride. Zusätzlich finden Fettsäuren, wie z.B. Ölsäure, Verwendung bei der Herstellung injizierbarer Präparate.
Die Verbindungen der Formel I können auch in der Form von Zäpfchen zur rektalen Verabreichung des Arzneistoffes verabreicht werden. Diese Zusammensetzungen können durch Vermischen des Arzneistoffes mit einem geeigneten nichtreizenden Hilfsstoff, der bei normalen Temperaturen fest ist, bei der Rektaltemperatur jedoch flüssig ist und deshalb im Rektum schmelzen und den Arzneistoff freisetzen wird, hergestellt werden. Solche Materialien sind u.a. Kakaobutter, glycerinierte Gelatine, hydrierte Pflanzenöle, Mischungen aus Polyethylenglycolen mit verschiedenen Molekulargewichten und Fettsäureester von Polyethylenglycol.
Zur topischen Verwendung werden Cremes, Salben, Gele, Lösungen oder Suspensionen usw. verwendet, welche die Verbindung der Formel I enthalten. (Für die Zwecke dieser Anmeldung soll die topische Anwendung Mundwaschungen und Gurgelanwendungen beinhalten.)
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch in intranasaler Form durch die topische Verwendung geeigneter Intranasalvehikel und Abgabevorrichtungen oder auf transdermalen Wegen unter Verwendung von Transdermal-Hautpflastern, die den Durchschnittsfachleuten gut bekannt sind, verabreicht werden. Um in Form eines transdermalen Abgabesystems verabreicht zu werden, wird die Dosisverabreichung während des Dosierungsregimes natürlich kontinuierlich anstatt intermittierend sein. Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch als ein Zäpfchen verabreicht werden, wobei Grundstoffe wie Kakaobutter, glycerinierte Gelatine, hydrierte Pflanzenöle, Mischungen aus Polyethylenglycolen mit verschiedenen Molekulargewichten und Fettsäureester von Polyethylenglycol eingesetzt werden.
Zusätzlich können die Verbindungen der vorliegenden Erfindung an einen Säuger, der diese benötigt, unter Verwendung einer Gelextrusionsmechanismus(GEM)-Vorrichtung verabreicht werden, wie sie z.B. in US-Patent Nr. 4976697 , eingereicht am 11. Dezember 1990, beschrieben ist.
Wenn eine Verbindung gemäß dieser Erfindung an ein menschliches Subjekt verabreicht wird, wird die Tagesdosis normalerweise vom verschreibenden Arzt bestimmt werden, wobei die Dosis im Allgemeinen mit dem Alter, Gewicht, Geschlecht und Ansprechverhalten des einzelnen Patienten sowie mit der Schwere der Symptome des Patienten variiert.
Bei einer beispielhaften Anwendung wird eine geeignete Menge der Verbindung an einen Säuger, der sich einer Krebstherapie unterzieht, verabreicht. Die Verabreichung erfolgt in einer Menge zwischen etwa 0,1 mg/kg Körpergewicht bis etwa 60 mg/kg Körpergewicht pro Tag, vorzugsweise zwischen 0,5 mg/kg Körpergewicht bis etwa 40 mg/kg Körpergewicht pro Tag.
Die Verbindungen dieser Erfindung können durch Anwendung von Reaktionen, wie sie in den folgenden Schemata gezeigt sind, zusätzlich zu anderen Standardmanipulationen, die in der Literatur bekannt sind oder in den Experimentalverfahren veranschaulicht sind, hergestellt werden. Es sollte beachtet werden, dass, um sich kurz zu halten, in den folgenden Schemata nur ein Enantiomer aus der Ringexpansion veranschaulicht ist. Substitutionen am Benzazocinrest A, wie hierin oben veranschaulicht, die anders sind als die in den Schemata speziell veranschaulichten Substitutionen, können durch Anwendung von im Stand der Technik bekannten Verfahren oder geeignet substituierten Ausgangsmaterialien hergestellt werden. Diese Schemata sind daher weder durch die beschriebenen Verbindungen, noch durch irgendwelche für Veranschaulichungszwecke eingesetzte spezielle Substituenten eingeschränkt. Die Substituentennummerierung, wie sie in den Schemata gezeigt ist, muss nicht notwendigerweise mit der in den Ansprüchen verwendeten Nummerierung übereinstimmen.
Es ist zu verstehen, dass in den nachstehenden Schemata R¹-(CR^1a ₂)_n-1-X-(CR^1a ₂)_p-V-(R²)_q bedeutet, wie es in Formel I definiert ist.
SCHEMA 1
SCHEMA 2
SCHEMA 3
BEISPIELE
Die angegebenen Beispiele sollen dem weiteren Verständnis der Erfindung dienen. Spezielle eingesetzte Materialien, Spezies und Bedingungen sollen die Erfindung weiter veranschaulichen und nicht deren angemessenen Umfang einschränken.
BEISPIEL 1
3-(3-Brombenzyl)-11-methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid
Schritt A: {2-[(Tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)methyllphenyl}methanol
Zu einer Suspension von 1,2-Benzoldimethanol (5 g, 36,19 mmol) in Toluol/2,3-Dihydropyran (206 ml/11 ml) bei 30°C wurden 3,62 g Dowex (50WX2-100) zugegeben. Die Reaktion wurde 5 Stunden bei 30°C gerührt. Die Mischung wurde filtriert, um Dowex zu entfernen, dann im Vakuum eingeengt und über Nacht unter Rühren an eine Vakuumpumpe angeschlossen, um 2,3-Dihydropyran zu entfernen. Das rohe Reaktionsprodukt wurde durch Normalphasenchromatographie (20% EtOAc/Hexane – 25% – 30%) gereinigt, um eine klare Flüssigkeit zu ergeben (5,72 g).
Schritt B: 2-[(Tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)methyl]benzyl-4-methylbenzolsulfonat
Eine Lösung von {2-[(Tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)methyl]phenyl}methanol (5,52 g, 24,84 mmol) in CH₂Cl₂ (100 ml) wurde auf 0°C abgekühlt und mit Et₃N (6,92 ml, 49,68 mmol) behandelt, gefolgt von der Zugabe von Ts₂O (8,9 g, 27,33 mmol). Die Reaktion wurde 3,5 Stunden bei 0°C gerührt. Die Mischung wurde mit gesättigtem NH₄Cl verdünnt und mit CH₂Cl₂ (2x) extrahiert. Die vereinten organischen Lösungen wurden mit Wasser gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde durch Normalphasenchromatographie (10% EtOAc/Hexane – 20%) gereinigt, um ein hellbraunes Öl zu ergeben (7,36 g).
Schritt C: 3-[2-(Hydroxymethyl)benzyl]-1,4-dimethylpiperazin-2,5-dion
Eine Lösung von 1,4-Dimethylpiperazin-2,5-dion (3,06 g, 21,51 mmol) in THF (100 ml) wurde auf –70°C abgekühlt. Eine LiHMDS-Lösung (1M, 23,46 mmol, 23,46 ml) wurde durch eine Spritze zugegeben und die Reaktion 15 Minuten gerührt. Eine Raumtemperaturlösung von 2-[(Tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)methyl]benzyl-4-methylbenzolsulfonat (7,36 g, 19,55 mmol) in THF (30 ml) wurde durch eine Kanüle zugegeben. Die Reaktion wurde bei –65°C gerührt, und man ließ das Bad 9 Stunden lang schmelzen. Die Mischung wurde mit gesätt. NH₄Cl gequencht und mit EtOAc (2 × 400 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Lösungen wurden anschließend mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Die Reaktion wurde durch Umkehrphasen-HPLC gereinigt, und dies führte zu einer Mischung aus geschütztem/ungeschütztem erwünschtem Produkt. Die Mischung wurde zwischen gesätt. NaHCO₃ und CH₂Cl₂ aufgetrennt und mit CH₂Cl₂ (2x) extrahiert. Die vereinten organischen Lösungen wurden über Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt, um 2,02 g eines hellgelben Feststoffs zu ergeben, der sowohl geschütztes als auch von der Schutzgruppe befreites erwünschtes Produkt enthielt. Die wässrige Schicht wurde mit CH₂Cl₂ und CHCl₃ (5x) extrahiert. Die vereinten organischen Lösungen wurden über Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt, um 449 mg des erwünschten Produkts zu ergeben. Die Mischung aus geschütztem/ungeschütztem erwünschtem Produkt wurde in 90 ml MeOH gelöst und mit 2 g Dowex (50WX2-100) behandelt. Die Lösung wurde 5 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Die Reaktion wurde filtriert, mit MeOH gewaschen und eingeengt, um das erwünschte Produkt (1,48 g) zu ergeben.
Schritt D: 2-[(1,4-Dimethvl-3,6-dioxopiperazin-2-yl)methyl]benzylchlorid
Eine Lösung von 3-[2-(Hydroxymethyl)benzyl]-1,4-dimethylpiperazin-2,5-dion (1,48 g, 5,64 mmol) und Et₃N (1,57 ml, 11,28 mmol) in DMF wurde auf 0°C abgekühlt. Mesylchlorid wurde durch eine Spritze bei 0°C zugegeben, und man hell die gerührte Reaktion über Nacht durch Schmelzen des Bades auf Umgebungstemperatur erwärmen. Weiteres Et₃N (2 Äquiv.) und Mesylchlorid (1,1 Äquiv.) wurden bei 0°C zugegeben, und man ließ die gerührte Reaktion 6 Stunden durch Schmelzen des Bades auf Umgebungstemperatur erwärmen. LiCl (478 mg, 11,28 mmol) wurde zugegeben und die Reaktion bei Umgebungstemperatur 1,5 Stunden gerührt. Die Mischung wurde zwischen NH₄Cl und EtOAc aufgetrennt und mit EtOAc (3x) extrahiert. Die vereinten organischen Lösungen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wurde durch Normalphasenchromatographie (0-3% MeOH(NH₃)/CH₂Cl₂) gereinigt, um ein gelbes Öl (1,47 g) zu ergeben.
Schritt E: 3,11-Dimethvl-2,3,5,6-tetrahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin-4,12(1H)-dion
Eine Lösung von 2-[(1,4-Dimethvl-3,6-dioxopiperazin-2-yl)methyl]benzylchlorid (1,47 g, 5,24 mmol) in THF (52 ml) wurde auf –65°C abgekühlt. LiHMDS (1M, 5,76 mmol, 5,76 ml) wurde durch eine Spritze zu der Lösung zugegeben, um eine gelbe Suspension zu ergeben. Die Reaktion wurde 2,5 Stunden gerührt, und anschließend hell man sie auf –30°C erwärmen. Die Mischung wurde mit gesätt. NH₄Cl gequencht und mit EtOAc (3 Mal) extrahiert. Die vereinten organischen Lösungen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das rohe Reaktionsprodukt wurde durch Normalphasenchromatographie (0-6% MeOH/CH₂Cl₂) gereinigt, um einen weißen Feststoff zu ergeben (0,678 g).
Schritt F: 3,11-Dimethvl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin
Eine Suspension von 3,11-Dimethvl-2,3,5,6-tetrahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin-4,12(1H)-dion (647 mg, 2,65 mmol) in THF (26 ml) wurde mit LAH (1M, 10,59 mmol, 10,59 ml) behandelt und 3 Stunden zum Rückfluss erhitzt. Die Reaktion wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt und mit Na₂SO₄-Decahydrat gequencht. Die Mischung wurde filtriert, gründlich mit THF gewaschen und eingeengt, um ein klares Öl zu ergeben (0,566 g).
Schritt G: Benzyl-11-methyl-1,4,5,6-tetrahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin-3(2H)-carboxylat
Eine Lösung von 3,11-Dimethyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin (92 mg, 0,425 mmol) in Toluol (5 ml) wurde mit Benzylchlorformiat (1,4 mmol, 200 μl) behandelt und auf 85°C erwärmt. Die Reaktion wurde über Nacht gerührt. Weitere 0,070 ml Benzylchlorformiat wurden zu der Mischung zugegeben und diese 5 Stunden am Rückfluss gerührt. Die Reaktion wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt und zwischen gesätt. wässrigem NaHCO₃ und EtOAc aufgetrennt. Die wässrige Schicht wurde mit EtOAc gewaschen. Die organische Lösung wurde mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde durch Normalphasenchromatographie gereinigt (0-6% MeOH(NH₃)/CH₂Cl₂), um ein hellbraunes Öl zu ergeben (69 mg).
Schritt H: 3-Methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin
Eine Lösung von Benzyl-11-methyl-1,4,5,6-tetrahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin-3(2H)-carboxylat (69 mg, 0,205 mmol) in EtOH (4 ml) wurde mit einer Aufschlämmung von Pd/C (11 mg) in EtOH behandelt. Die Reaktion wurde kurz mit H₂ gespült, dann 2 Stunden unter einem H₂-Ballon gerührt. Die Mischung wurde mit Ar gespült, dann durch Celite filtriert und gründlich mit EtOH gewaschen. Die Reaktion wurde im Vakuum eingeengt, um ein klares Öl zu ergeben (38 mg).
Schritt I: 3-(3-Brombenzyl)-11-methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid
Zu einer Lösung von 0,038 g, 3-Methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin (0,188 mmol) in 2 ml DCE wurden 0,02 ml 3-Brombenzaldehyd (0,21 mmol) und 0,056 g Na(OAc)BH₃ (0,26 mmol) zugegeben. Die resultierende Mischung wurde unter N₂ über Nacht bei Umgebungstemperatur gerührt, dann in gesättigtes wässriges Natriumhydrogencarbonat gegossen und mit CH₂Cl₂ (2 Mal) extrahiert. Die organischen Lösungen wurden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und durch Flashchromatographie (0%-10% MeOH/CH₂Cl₂) gereinigt, um ein hellgelbes Öl (57 mg) zu ergeben. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,28 (br. d, J = 8 Hz, 1H), 7,21-7,15 (m, 2H), 7,08-7,00 (m, 4H), 6,83 (br. d, J = 8 Hz, 1H), 3,49 (d, J = 14 Hz, 1H), 3,45 (d, J = 14 Hz, 1H), 3,22-3,16 (m, 3H), 3,10 (dd, J = 15, 3 Hz, 1H), 3,03-2,97 (m, 2H), 2,91 (dd, J = 11,3 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 11, 5 Hz, 1H), 2,78 (d, J = 10 Hz, 1H), 2,59 (dd, J = 11, 1 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H). Das Bis-HCl-Salz der Verbindung wurde durch Einwirkenlassen eines Überschusses an HCl gebildet. Exakte Masse laut HRMS (ES) berechnet für C₂₀H₂₄BrN₂ (M+H⁺): 371,1118. Gefunden 371,1117.
BEISPIEL 2
3-(3-Brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumchlorid
Schritt A: Dibenzyl-1,4,5,6-tetrahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin-3,11(2H)-dicarboxylat
Eine Lösung von 3,11-Dimethyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin (51 mg, 0,236 mmol), hergestellt durch Nacharbeiten der in Beispiel 2 (Schritte A-F) beschriebenen Verfahren, in Toluol (4 ml) wurde mit Benzylchlorformiat (130 μl, 0,94 mmol) behandelt und zum Rückfluss erhitzt. Nach 2,5-tägigem Rühren war nur eine 85%ige Umwandlung in das Mono-Austauschprodukt erfolgt. Weitere 0,260 ml Benzylchlorformiat wurden zu der Reaktion zugegeben und diese 24 Stunden am Rückfluss gerührt. Es erfolgte ein deutlicher Fortschritt hin zum mutmaßlichen erwünschten Produkt (2:1 Mono:Di-Cbz). Weitere 0,300 ml Benzylchlorformiat (4x) wurden im Verlauf von 6 Tagen zu der refluxierenden Reaktion zugegeben. Die Mischung wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt und zwischen gesätt. wässrigem NaHCO₃ und EtOAc aufgetrennt. Die wässrige Schicht wurde mit EtOAc (1x) extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde durch Normalphasenchromatographie (0-3-6% MeOH(NH₃)/CH₂Cl₂) gereinigt, um einen hellbraunen Schaum (70 mg) zu ergeben.
Schritt B: 1,2,3,4,5,6-Hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin
Eine Lösung von Dibenzyl-1,4,5,6-tetrahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin-3,11(2H)-dicarboxylat (63 mg, 0,138 mmol) in EtOH (4 ml) wurde mit einer Aufschlämmung von Pd/C (15 mg) in EtOH behandelt. Die Reaktion wurde kurz mit H₂ gespült, dann 2,5 Stunden unter einem H₂-Ballon gerührt. Die Mischung wurde mit Ar gespült, dann durch Celite filtriert und gründlich mit EtOH gewaschen. Die Reaktion wurde im Vakuum eingeengt, um ein klares Öl (27 mg) zu ergeben.
Schritt C: 3-(3-(Brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid
Durch Nacharbeiten der in Beispiel 1 beschriebenen Verfahren, wobei 3-Methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin in Schritt 1 durch 1,2,3,4,5,6-Hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin ersetzt und ein einziges Äquivalent 3-Brombenzaldehyd eingesetzt wurde, wurde die Titelverbindung erhalten. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,37-7,35 (m, 1H), 7,33 (br. s, 1H), 7,22-7,18 (m, 2H), 7,16-7, m, 4H), 3,81-3,78 (m, 1H), 3,75 (d, J = 14 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 14 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 14, 6 Hz, 1H), 3,35 (dd, J = 13, 4 Hz, 1H), 3,21-3,20 (m, 1H), 3,08-3,03 (m, 2H), 2,97 (dd, J = 11, 4 Hz, 1H), 2,94 (dd, J = 16, 7 Hz, 1H), 2,89-2,84 (m, 2H). Das Bis-HCl-Salz der Verbindung wurde durch Einwirkenlassen eines Überschusses an HCl gebildet. Exakte Masse laut HRMS (ES) berechnet für C₁₉H₂₂BrN₂ (M+H⁺): 357,0461. Gefunden: 357,0955.
BEISPIEL 3
3,11-Bis(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid
Durch Nacharbeiten der in Beispiel 1 beschriebenen Verfahren, wobei 3-Methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin in Schritt I durch 1,2,3,4,5,6-Hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin ersetzt und zwei Äquivalente 3-Brombenzaldehyd verwendet wurden, wurde die Titelverbindung erhalten. ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7,32 (br. d, J = 8 Hz, 2H), 7,21-7,18 (m, 2H), 7,16 (br. s, 2H), 7,09 (t, J = 8 Hz, 2H), 7,05-7,03 (m, 2H), 6,97 (br. d, J = 8 Hz, 2H), 3,62 (d, J = 14 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 14 Hz, 1H), 3,20 (m, 2H), 3,13 (dd, J = 14, 6 Hz, 2H), 2,98 (dd, J = 14, 6 Hz, 2H), 2,85 (dd, J = 11, 3 Hz, 2H), 2,73 (d, J = 10 Hz, 2H). Das Bis-HCl-Salz der Verbindung wurde durch Einwirkenlassen eines Überschusses an HCl gebildet. Exakte Masse laut HRMS (ES) berechnet für C₂₆H₂₇Br₂N₂ (M+H⁺): 525,0536. Gefunden 525,0526.
BEISPIEL 4
11-Acetyl-3-(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocinium-Trifluoracetat
Eine Lösung von 3-(3-Brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazociniumdichlorid (26 mg, 0,138 mmol), hergestellt durch Nacharbeiten der in Beispiel 2 beschriebenen Verfahren, in CH₂Cl₂ (2 ml) wurde mit Pyridin (0,19 mmol, 20 μl) und Acetylchlorid (0,09 mmol, 10 μl) behandelt. Die Reaktion wurde 2,5 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Die Mischung wurde mit EtOH verdünnt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Acetonitril aufgenommen und durch Umkehrphasen-HPLC gereinigt, um ein weißes Pulver zu ergeben. ¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD) δ 7,82 (d, J = 11 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 9 Hz, 1H), 7,44 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,22-7,15 (m, 3H), 7,07 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,90 (m, 1H), 4,67 (br., 1H), 3,90 (br. d, J = 12 Hz, 1H), 3,69-3,33 (m, 6H), 3,27-3,24 (m, 1H), 3,14 (dd, J = 15, 8 Hz, 1H), 1,50 (s, 3H). Exakte Masse laut HRMS (ES) berechnet für C₂₁H₂₄BrN₂O (M+H⁺): 399,1067. Gefunden 399,1073.
BEISPIEL 5

Die oben hergestellten Salzverbindungen können durch im Stand der Technik bekannte Verfahren neutralisiert werden. Zum Beispiel kann das Salz mit einer geeigneten verdünnten wässrigen Basenlösung, wie z.B. verdünntem wässrigem NaOH, Kaliumcarbonat, Ammoniak und Natriumhydrogencarbonat, behandelt werden, um die freie oder Nicht-Salz-Form der Verbindung zu ergeben. Nachstehend aufgeführt ist der Name der freien Form für die entsprechende Salzverbindung, die in dem angegebenen Beispiel beschrieben ist:

Beispiel	Name der freien Form
1	3-(3-Brombenzyl)-11-methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin
2	3-(3-Brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin
3	3,11-Bis(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin
4	11-Acetyl-3-(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin

TESTS
Die in den obigen Beispielen beschriebenen Verbindungen der vorliegenden Erfindung wurden durch die nachstehend beschriebenen Tests getestet, und es wurde gefunden, dass sie eine Kinaseinhibitorwirkung besitzen. Speziell inhibierten die Verbindungen der vorliegenden Erfindung die IGF-1R- oder Insulinrezeptorkinaseaktivität mit einem IC₅₀-Wert von weniger als oder gleich etwa 100 μM. Andere Tests sind in der Literatur bekannt und könnten leicht von den Fachleuten durchgeführt werden (siehe zum Beispiel Dhanabal et al., Cancer Res. 59:189-197; Xin et al., J. Biol. Chem. 274:9116-9121; Sheu et al., Anticancer Res. 18:4435-4441; Ausprunk et al., Dev. Biol. 38:237-248; Gimbrone et al., J. Natl. Cancer Inst. 52:413-427; Nicosia et al., In Vitro 18:538-549).
IGF-1R-KINASE-TEST
Die IGF-1R-Rezeptorkinaseaktivität wird durch Einbau von Phosphat in ein Peptidsubstrat, das einen Tyrosinrest enthält, gemessen. Die Phosphorylierung des Peptidsubstrats wird mit Hilfe von Anti-IGF-1R und Anti-Phosphotyrosin-Antikörpern in einem HTRF(Homogeneous Time Resolved Fluorescence)-Detektionssystem quantifiziert. (Park, Y-W., et al. Anal. Biochem., (1999) 269, 94-104).
MATERIALIEN
IGF-1R-REZEPTORKINASEDOMÄNE
Die intrazellulären Kinasedomänen von menschlichem IGF-1R wurde als ein Glutathion-S-Transferase-Fusionsprotein kloniert. Die IGF-1R-β-Untereinbeit-Aminosäurereste 930 bis 1337 (Nummerierungssystem wie bei Ullrich et al., EMBO J. (1986) 5, 2503-2512) wurden in den Baculovirus-Transfervektor pAcGHLT-A (BD-Pharmingen) kloniert, so dass die N-Termini der IGF-1R-Reste an die C-Termini der GST-Domäne, kodiert im Transfervektor pAcGHLT-A, fusioniert werden. Rekombinanter Virus wurde erzeugt und das Fusionsprotein in SF-9-Insektenzellen (BD-Pharmingen) exprimiert. Das Enzym wurde mit Hilfe einer Glutathion-Sepharose-Säule gereinigt.
INSULINREZEPTORKINASEDOMÄNE
Die intrazellulären Kinasedomänen von menschlichem Insulinrezeptor wurde als ein Glutathion-S-Transferase-Fusionsprotein kloniert. Die Insulinrezeptor-β-Untereinheit-Aminosäurereste 941 bis 1343 (Nummerierungssystem wie bei Ullrich et al., Nature, (1985) 313, 756-761) wurden in den Baculovirus-Transfervektor pAcGHLT-A (BD-Pharmingen) kloniert, so dass die N-Termini der IGF-1R-Reste an die C-Termini der GST-Domäne, kodiert im Transfervektor pAcGHLT-A, fusioniert werden. Rekombinanter Virus wurde erzeugt und das Fusionsprotein in SF-9-Insektenzellen (BD-Pharmingen) exprimiert. Das Enzym wurde mit Hilfe einer Glutathion-Sepharose-Säule gereinigt.
INSEKTENZELLENLYSEPUFFER
10 mM Tris pH 7,5; 130 mM NaCl; 2 mM DTT; 1% Triton X-100; 10 mM NaF; 10 mM NaPi; 10 mM NaPPi; 1X Protease Inhibitor Cocktail (Pharmingen).
WASCHPUFFER
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS): 137 Mm NaCl, 2,6 mM KCl, 10 mM Na₂HPO₄, 1,8 mM KH₂PO₄, pH 7,4; 1 mM DTT; 1X Protease-Inhibitor-Cocktail.
DIALYSEPUFFER
20 mM Tris pH 7,5; 1 mM DTT, 200 mM NaCl; 0,05% Triton X-100 und 50% Glycerin.
ENZYMVERDÜNNUNGSPUFFER
50 mM Tris, pH 7,5; 1 mM DTT; 100 mM NaCl; 10% Glycerin, 1 mg/ml BSA.
ENZYMREAKTIONSPUFFER
20 mM Tris pH 7,4; 100 mM NaCl; 1 mg/ml BSA; 5 mM MgCl₂; 2 mM DTT.
QUENCHPUFFER
125 mM Tris pH 7,8; 75 mM EDTA; 500 mM KF; 0,125% Triton X-100; 1,25% BSA; 60 nM SA-XL665 (Packard); 300 pM Europiumcryptat-markierter Anti-Phosphotyrosin-Antikörper (Eu-PY20).
PEPTIDSUBSTRAT
Sequenz LCB-EQEDEPEGDYFEWLE-NH₂; Stammlösung ist 1 mM gelöst in DMSO; verdünnt auf 1 μM in 1X Enzymreaktionspuffer für eine 10X Arbeitsstammlösung. (LCB = Aminohexanoylbiotin).
ATP
Stammlösung ist 0,5M ATP (Boehringer) pH 7,4; Stammlösung wird auf 40 mM ATP in Enzymreaktionspuffer verdünnt, um 20X Arbeitsstammlösung zu ergeben.
HEK-21-ZELLLINIE
Menschliche embryonale Nierenzellen (HEK-293) (ATCC) wurden mit einem Expressionsplasmid, das die gesamte IGF-1R-kodierende Sequenz enthält, transfektiert. Nach der Antibiotika-Auswahl wurden die Kolonien auf IGF-1R-Überexpression durch Western-Blot-Analyse gescreent. Ein Klon, der als HEK-21 bezeichnet wird, wurde für zellbasierende IGF-1R-Autophosphorylierungstests ausgewählt.
HEK-ZELLWACHSTUMSMEDIUM
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM), 10% fatales Kälberserum, 1X Penn/Strep, 1X Glutamin, 1X nichtessentielle Aminosäuren (alle von Life Technologies).
ZELLLYSEPUFFER
50 mM Tris-HCl pH 7,4; 150 mM NaCl; 1% Triton X-100 (Sigma); 1X Säuger-Protease-Inhibitoren (Sigma); 10 mM NaF; 1 mM NaVanadat.
WESTERN-BLOCKIERPUFFER
20 mM Tris-HCl pH 8,0; 150 mM NACl; 5% BSA (Sigma); 0,1% Tween 20 (Biorad).
VERFAHREN
A. PROTEINREINIGUNGEN
Spodoptera frugiperda SF9-Zellen wurden mit rekombinantem Virus, kodierend entweder die GST-IGF-1R-β-Untereinheit oder das GST-InsR-Fusionsprotein, bei einem MOI von 4 Virusteilchen/Zellen transfektiert. Die Zellen werden 48 Stunden bei 27°C kultiviert, durch Zentrifugation geerntet und einmal mit PBS gewaschen. Das Zellpellet wird nach der letzten Zentrifugation bei –70°C eingefroren. Alle anschließenden Reinigungsschritte werden bei 4°C durchgeführt. 10 Gramm der gefrorenen Paste werden in einem 90-ml-Volumen Insektenzellenlysepuffer (BD-Pharmingen) aufgetaut und unter gelegentlichem Rühren 20 Minuten auf Eis gehalten. Das Lysat wird bei 12000 g zentrifugiert, um Zelltrümmer zu entfernen. Der Lyse-Überstand wurde mit 45 ml Glutathionagarosekügelchen (BD-Pharmingen) vermischt und langsam bei 4°C eine Stunde gerührt, wonach die Kügelchen zentrifugiert und 3 Mal mit Waschpuffer gewaschen wurden. Die Kügelchen werden erneut in 45 ml Waschpuffer suspendiert und als eine Aufschlämmung in eine Chromatographiesäule gegossen. Die Säule wird mit 5 Volumen Waschpuffer gewaschen und das GST-IGF-1R aus der Säule mit 5 mM Glutathion in Waschpuffer eluiert. Die gesammelten Fraktionen werden gegen Dialysepuffer dialysiert und bei –20°C aufbewalt.
B. IGF-1R-KINASETEST
Die IGF-1R-Enzymreaktion wird in einem 96-Well-Plattenformat durchgeführt. Die Enzymreaktion besteht aus Enzymreaktionspuffer plus 0,1 nM GST-IGF-1R, 00 nM Peptidsubstrat und 2 mM ATP in einem Endvolumen von 60 Mikrolitern. Der Inhibitor in DMSO wird in ein Volumen von 1 Mikroliter gegeben und 10 Minuten bei 22°C vorinkubiert. Die letztendliche Inhibitorkonzentration kann von 100 μM bis 1 nM reichen. Die Kinasereaktion wird mit 3 Mikroliter 40 mM ATP initiiert. Nach 20 Minuten bei 22°C wird die Reaktion mit 40 Mikroliter Quenchpuffer gestoppt, und man lässt sie 2 Stunden bei 22°C äquilibrieren. Die relativen Fluoreszenzeinheiten werden an einem Discovery-Plattenlesegerät (Packard) abgelesen. Die IC₅₀-Werte für die Verbindungen werden durch eine 4-Punkt-Sigmoidal-Kurvenanpassung ermittelt.
C. INSULINREZEPTORKINASETEST
Die Kinasereaktion für den Insulinrezeptor ist identisch mit der für den Test von IGF-1R (oben) verwendeten Reaktion, außer dass GST-InsR mit einer Endkonzentration von 0,1 nM verwendet wird.
D. ZELLBASIERENDER IGF-1R-AUTOPHOSPHORYLIERUNGSTEST
IGF-1R-Inhibitorverbindungen werden auf ihre Fähigkeit, IGF-I-induzierte IGF-1R-Autophosphorylierung in einer IGF-1R-transfektierten menschlichen embryonalen Nierenzelllinie (HEK-21) zu blockieren, getestet. HEK-21-Zellen, welche den menschlichen IGF-1R-Rezeptor überexprimieren, werden in 6-Well-Platten in HEK-Zellwachstumsmedium bis zu einer 80%igen Konfluenz kultiviert (37°C in einer 5%-CO₂-Atmosphäre). In den Zellen wird durch vier Stunden in HEK-Wachstumsmedium mit 0,5%igem fötalem Kälberserum ein Serummangel erzeugt. Eine 10X-Konzentration an Inhibitor in Wachstumsmedium wird zu den Zellen in einem Zehntel des Endvolumens des Mediums zugegeben, und man lässt ein Stunde bei 37°C vorinkubieren. Die Inhibitorkonzentration kann von 10 nM bis 100 μM reichen. IGF-I (Sigma) wird zu den Zellen mit Serummangel bis zu einer Endkonzentration von 30 ng/ml zugegeben. Nach einer 10-minütigen Inkubation in Gegenwart von IGF-I bei 37°C wird das Medium entfernt, die Zellen einmal mit PBS gewaschen und mit 0,5 ml kaltem Zelllysepuffer versetzt. Nach 5-minütiger Inkubation auf Eis werden die Zellen von den Wänden der Vertiefungen abgekratzt, und Lysepuffer plus Zellen werden in ein 1,5-ml-Mikrofugenröhren überführt. Das gesamte Lysat wird zwanzig Minuten bei 4°C gehalten und anschließend mit maximaler Geschwindigkeit in einer Mikrofuge zentrifugiert. Der Überstand wird entfernt und für die Analyse aufbewahrt. Der Phosphorylierungsstatus des Rezeptors wird durch Western Blot ermittelt. Die Lysate werden auf 8% denaturierenden Tris-Glycin-Polyacrylamidgelen elektrophoresebehandelt und die Proteine durch Elektroblotting auf Nitrozellulosefilter übertragen. Die Blots werden mit Blockierreagenz 10 Minuten blockiert, wonach Antiphosphotyrosin-Antikörper (4G10, Upstate Biotechnology) bis zu einer Endverdünnung von 1:1500 zugegeben wird. Die Blots und primärer Antikörper werden über Nacht bei 4°C inkubiert. Nach dem Waschen mit PBS plus 0,2% Tween 20 (Biorad) wird ein HRP konjugierter Anti-Maus sekundärer Antikörper (Jackson Labs) in einer Verdünnung von 1:15000 zugegeben und 2 Stunden bei 4°C inkubiert. Die Blots werden anschließend mit BPS-Tween gewaschen und unter Verwendung von ECL (Amersham) Lumineszenzreagenz gewaschen. Phosphorylierter IGF-1R auf den Blots wird durch Autoradiographie oder Darstellung mit Hilfe einer Kodak Image Station 440 sichtbar gemacht. Die IC₅₀-Werte werden durch densitometrisches Scannen oder durch Quantifizierung mit Hilfe der Kodak Digital Science Software ermittelt.

Claims

Eine Verbindung der Formel I
wobei R^1a unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) ursubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl und 3) OR⁴, R^1b unabhängig ausgewählt ist aus 1) Hund 2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl, X unabhängig ausgewählt ist aus 1) einer Bindung, 2) C(O), 3) O, 4) NR⁴, 5) S(O)_mR⁴, 6) C(O)OR⁴ und 7) C(O)N(R4)2, R¹ unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) Halogen, 3) OR⁴, 4) NO², 5) -S(O)_mR⁴, 6) CN, 7) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, 8) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl, 9) unsubstituiertem oder substituiertem C₂-C₆-Alkenyl, 10) unsubstituiertem oder substituiertem C₃-C₁₀-Cycloalkyl, 11) unsubstituiertem oder substituiertem C₂-C₆-Alkinyl, 12) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus, 13) -C(O)R⁴, 14) O(O)OR⁴, 15) C(O)N(R⁴)₂, 16) S(O)_mN(R⁴)₂ und 17) N(R⁴)₂, V unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) CF₃, 3) Aryl, 4) Heterocyclus und 5) C₃-C₁₀-Cycloalkyl, R² unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, 3) -(CR^1b)_tOR⁴, 4) Halogen, 5) CN, 6) NO₂, 7) CF₃, 8) -(CR^1b)_tN(R⁴)₂, 9) -C(O)OR⁴, 10) -C(O)R⁴, 11) -S(O)₂R⁴, 12) -(CR^1b)_tNR⁴(CR^1b)_tR⁵, 13) -(CR^1b)_tS(O)_m,NR⁴, 14) -C(O)OR⁴R⁵, 15) -NR⁴C(O)R⁴, 16) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl und 17) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus, R⁴ unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, 3) unsubstituiertem oder substituiertem C₃-C₁₀-Cycloalkyl, 4) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl, 5) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus und 6) CF₃, R⁵ unabhängig ausgewählt ist aus 1) unsubstituiertem oder substituiertem Aryl und 2) unsubstituiertem oder substituiertem Heterocyclus, m unabhängig 0, 1 oder 2 ist, n 0 bis 6 ist, p 0 bis 6 ist, q 0 bis 6 ist, mit der Maßgabe, dass, wenn V H oder CF₃ ist, q 0 ist, und s 0 bis 16 ist, t unabhängig 0 bis 6 ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon.
Die Verbindung gemäß Anspruch 1, wobei R^1b, R⁴, R⁵ und die Variablen m, n, p, q und t wie in Anspruch 1 definiert sind und R¹ unabhängig ausgewählt ist aus 1) Hund 2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl, X unabhängig ausgewählt ist aus 1) einer Bindung, 2) -C(O)R⁴ und 3) C(O), R¹ unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) Halogen, 3) OR⁴, 4) N(R⁴)₂, 5) NO₂ und 6) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, V unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) CF₃, 3) Aryl und 4) Heterocyclus, R² unabhängig ausgewählt ist aus 1) H, 2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₁₀-Alkyl, 3) -(CR^1b)_tOR⁴, 4) Halogen, 5) CN, 6) NO₂, 7) CF₃, 8) -(CR^1b)_tN(R⁴)₂, 9) -C(O)OR⁴, 10) -(CR^1b)_tS(O)_mNR⁴ 11) -(CR^1b)_tNR⁴(CR_1b)_tR⁵, 12) -C(O)OR⁴R⁵ und 13) -NR⁴C(O)R⁴, s 0 bis 6 ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon.
Die Verbindung gemäß Anspruch 2, wobei R^1b, X, R¹, R², R⁴, R⁵ und die Variablen m, s und t wie in Anspruch 2 definiert sind und R^1a unabhängig ausgewählt ist aus 1) Hund 2) unsubstituiertem oder substituiertem C₁-C₆-Alkyl, V unabhängig ausgewählt ist aus 1) Aryl und 2) Heterocyclus, n 0 bis 3 ist, p 0 bis 3 ist, q 0 bis 3 ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon.
Eine Verbindung, die ist 3-(3-Brombenzyl)-11-methyl-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin, 3-(3-Brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin, 3,11-Bis(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin, 11-Acetyl-3-(3-brombenzyl)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-5,2-(epiminomethano)-3-benzazocin, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Stereoisomer davon.
Eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung gemäß Anspruch 1 und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Eine wie in irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 beanspruchte Verbindung zur Verwendung in der Therapie.
Verwendung einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung oder Prävention einer PK-bezogenen Störung.
Verwendung nach Anspruch 7, wobei die PK-bezogene Störung eine IGF-IR-bezogene Störung ist, ausgewählt aus: 1) Krebs, 2) Diabetes, 3) einer Autoimmunstörung, 4) einer Hyperproliferationsstörung, 5) Alterung, 6) Akromegalie und 7) Morbus Crohn.
Die Verwendung einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Krebs oder Netzhautvaskularisation.
Eine Kombination aus einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 mit einer zweiten Verbindung, ausgewählt aus: 1) einem Östrogenrezeptormodulator, 2) einem Androgenrezeptormodulator, 3) einem Retinoidrezeptormodulator, 4) einem zytotoxischen Mittel, 5) einem antiproliferativen Mittel, 6) einem Prenyl-Protein-Transferase-Inhibitor, 7) einem HMG-CoA-Reduktase-Inhibitor, 8) einem HIV-Proteaseinhibitor, 9) einem Reverse-Transkriptase-Inhibitor und 10) einem Angiogeneseinhibitor, zur Behandlung von Krebs.
Die Kombination nach Anspruch 10, wobei die zweite Verbindung ein Östrogenrezeptormodulator ist, ausgewählt aus Tamoxifen und Raloxifen.
Eine Kombination aus einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 mit Strahlentherapie zur Behandlung von Krebs.
Eine Kombination aus einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 und Paclitaxel oder Trastuzumab zur Behandlung von Krebs.
Eine Kombination aus einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 und einem GPIIb/IIIa-Antagonisten oder einem COX-2-Inhibitor zur Behandlung oder Prävention von Krebs.