DE60128731T2

DE60128731T2 - Tripeptidylpeptidase-hemmer

Info

Publication number: DE60128731T2
Application number: DE60128731T
Authority: DE
Inventors: Henry Joseph Breslin; Hans Louis Jos De Winter; Michael Joseph Kukla
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2000-10-30
Filing date: 2001-10-24
Publication date: 2008-02-07
Anticipated expiration: 2021-10-25
Also published as: KR20030046465A; NO20031930L; EP1392291A2; WO2002036116A2; PT1392291E; WO2002036116A3; MXPA03003868A; PL361064A1; ES2287185T3; HUP0302770A3; ATE363276T1; US20080108653A1; US8247432B2; EP1392291B1; AU2479702A; CN1471394A; CZ20031422A3; US20060276509A1; BG107729A; US20110224255A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Verbindungen der Formel (I), bei denen es sich um Inhibitoren einer für die Desaktivierung von endogenen Neuropeptiden wie Cholecystokininen (CCKs) verantwortlichen membranständigen Tripeptidylpeptidase handelt. Die Erfindung betrifft weiterhin Verfahren zur Herstellung solcher Verbindungen, pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese Verbindungen enthalten sowie die Verwendung dieser Verbindungen als Medizin.
Cholecystokinine (CCKs) sind eine Familie hormonaler und neuronaler Peptide, die im Darm und im Hirn pleiotrope biologische Wirkungen haben. Die Aktivitäten von CCK werden durch CCK_A- und CCK_B-Rezeptoren vermittelt. Von CCK ist bekannt, daß es eine physiologische Rolle bei der Kontrolle der Nahrungsmittelaufnahme spielt, die durch CCK_A-Agonisten verstärkt wird (Smith G. P. et al., J. Ann. N.Y. Acad. Sci., 713, 236-241 (1994)), sowie bei der Kontolle von Angst, die durch CCK_B-Antagonisten vermindert wird (Woodruff G. et al., Rev. Pharmac., 31, 469-501 (1991)).
Tripeptidylpeptidase II (TPP II) ist eine CCK-desaktivierende Peptidase. TPP II findet sich in auf Cholecystokinin ansprechenden Neuronen sowie in nicht-neuronalen Zellen. Man nimmt an, daß es sich bei TPP II um eine für die CCK-8-Desaktivierung verantwortliche Neuropeptidase handelt (Rose C. et al., Nature, 380, 403-409, (1996)).
TPP II könnte an der CCK-8-Desaktivierung im Magen-Darm-Trakt beteiligt sein. Exogenes CCK reduziert die Nahrungsmittelaufnahme und bewirkt andere mit der Sättigung einhergehende Verhaltensänderungen. Die Nahrungsmittelaufnahme wird durch die systemische Verabreichung von CCK_A-Rezeptoragonisten erhöht (Smith G. P. et al., J. Ann. N.Y. Acad. Sci., 713, 236-241 (1994)). Endogenes, die Nahrungsmittelaufnahme steuern des CCK scheint eher neuronalen als hormonalen Ursprungs zu sein und wirkt auf periphäre CCK_A-Rezeptoren auf vagalen afferenten Fasern (Smith G. P. et al., Am. J. Physiol., 249, R638-R641 (1985)).
Inhibitoren von TPP II sind nützliche Werkzeuge für die Untersuchung der Funktionen von CCK-Neuronen und können für die Behandlung von Störungen wie Überessen, Obesitas, Problemen mit der gastrointestinalen Motilität und psychotischen Syndromen geeignete Arzneimittel sein.
In der am 14. November 1996 veröffentlichten WO-96/35805 werden für die Desaktivierung von endogenen Neuropeptiden verantwortliche Inhibitoren einer membranständigen Tripeptidylpeptidase offenbart, die sich für die Behandlung von gastrointestinalen und mentalen Erkrankungen eignen. In der am 8. Juli 1999 veröffentlichten WO-99/33801 werden die CCK-desaktivierende Tripeptidylpeptidase (TPP II) inhibierende Verbindungen offenbart, die sich für die Behandlung von Eßstörungen, Obesitas, psychotischen Syndromen und damit assoziierten psychiatrischen Erkrankungen eignen.
In der FR-2,735,776 werden Derivate von 2-(1H-Imidazol-4-yl)-2,3-dihydro-1H-indol als für die Behandlung von Diabetes, Obesitas, Hypotonie, postoperativem Ileus und Asthma geeignete Antagonisten des α2-Adrenoceptors offenbart. In der WO-99/55679 werden aromatische Tetrahydroisochinolinamine offenbart, die als Liganden des Melanocortinrezeptors und als Mittel für die Kontrolle von durch Cytokine gesteuerten physiologischen Prozessen wirken. In der US-5,610,144 werden 2-Aryl-3-(ureidoacetyl)thiazolidin-4-carboxylate und Analoga davon als Liganden des CCK-Rezeptors und als Gastrinrezeptorliganden offenbart, die sich somit für die Behandlung oder Prävention von Psychosen, von Angstneurosen, von Parkinson-Krankheit, von dystonem Syndrom, von Reizkolon, von akuter Pankreatitis, von Geschwüren, von Darmmotilitätsstörungen, von gewissen gegenüber CCK empfindlichen Tumoren und als Appetitregulator eignen.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung unterscheiden sich strukturell in der Beschaffenheit des R²-Substituenten von den angegebenen, im Stand der Technik bekannten Verbindungen.
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der Formel (I)
deren stereochemisch isomere Formen und pharmazeutisch unbedenkliche Additionssalze, wobei
n für eine ganze Zahl 0 oder 1 steht;
X für O; oder -(CR⁴R⁵)_m steht, wobei m für eine ganze Zahl 1 oder 2 steht und R⁴ und R⁵ jeweils unabhängig voneinander für Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl stehen;
R¹ für gegebenenfalls hydroxylsubstituiertes C_1-6-Alkylcarbonyl; C_1-6-Alkyloxycarbonyl; Amino-C_1-6-alkylcarbonyl, wobei die C_1-6-Alkylgruppe gegebenenfalls durch C_3-6-Cycloalkyl substituiert ist; Mono- und Di(C_1-4-alkyl)amino-C_1-6-alkylcarbonyl; arylsubstituiertes Aminocarbonyl; C_1-6-Alkylcarbonyloxy-C_1-6-alkylcarbonyl; C_1-6-Alkyloxycarbonylamino-C_1-6-alkylcarbonyl, wobei die Aminogruppe gegebenenfalls durch C_1-6-Alkyl substituiert ist; einen über die Carbonylgruppe gebundenen Aminosäurerest; aminosubstituiertes C_1-6-Alkyl; oder Arylcarbonyl steht;
R² für einen 5-gliedrigen Heterozyklus, ausgewählt aus
steht, wobei m' für eine ganze Zahl 1 bis 2 steht;
R⁶ für Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl steht;
R⁷ unabhängig von den anderen Resten für Halogen; Amino; Hydroxy; Trifluormethyl; C_1-6-Alkyl; durch Hydroxy, Hydroxycarbonyl, C_1-4-Alkyloxycarbonyl, Aminocarbonyl, Mono- oder Di(C_1-4-alkyl)aminocarbonyl, Amino, oder Mono- oder Di(C_1-4-alkyl)amino substituiertes C_1-4-Alkyl; Phenyl; Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl; C_1-4-Alkyloxycarbonyl; C_1-4-Alkylcarbonyl; oder C_1-4-Alkyloxycarbonyl-C_1-4-alkylaminocarbonyl steht;
oder R² für Benzimidazol, oder durch einen oder zwei Substituenten, jeweils unabhängig ausgewählt aus Halogen, Trifluormethyl, C_1-4-Alkyl, Hydroxy, Hydroxycarbonyl, oder C_1-4-Alkyloxycarbonyl, substituiertes Benzimidazol steht;
R³ für einen zweiwertigen Rest der Formel
steht, wobei (b-1) gegebenenfalls durch einen, zwei oder drei Substituenten jeweils unabhängig ausgewählt aus Halogen, Hydroxy, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkyloxy, Nitro, Amino, Cyano, Trifluormethyl, Phenyl, oder durch einen oder zwei jeweils unabhängig aus Halogen, Hydroxy, Cyano, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkyloxy, Nitro, Cyano, und Trifluormethyl ausgewählte Substituenten substituiertes Phenyl substituiert sein kann;
Aryl für Phenyl oder durch Amino, Nitro oder Hydroxycarbonyl susbtituiertes Phenyl steht.
Der Ausdruck „Aminosäurerest" bezeichnet, so wie er hier verwendet wird, die Aminosäurereste von Glycin, Alanin, Valin, Leucin, Isoleucin, Methionin, Prolin, Phenylalanin, Tryptophan, Serin, Threonin, Cystein, Tyrosin, Asparagin, Glutamin, Asparaginsäure, Estern von Asparaginsäure, Glutaminsäure, Estern von Glutaminsäure, Lysin, Arginin und Histidin, die über ihre Carbonylgruppe an das Stickstoffatom des Rests des Moleküls gebunden sind und die sich allgemein als „R-CH(NH₂)-CO-" wiedergeben lassen.
Im Rahmen der vorhergehenden Definitionen steht Halogen allgemein für Fluor, Chlor, Brom und Iod; C_1-4-Alkyl definiert geradkettige und verzweigte gesättigte Kohlenwasserstoffe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, wie zum Beispiel Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl, 1-Methylethyl, 2-Methylpropyl und dergleichen; C_1-6-Alkyl soll C_1-4-Alkyl und die höheren Homologen davon mit 5 oder 6 Kohlenstoffatomen, wie zum Beispiel 2-Methylbutyl, Pentyl, Hexyl und dergleichen, einschließen; C_3-6-Cycloalkyl steht allgemein für Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl; C_3-6-Alkenyl definiert geradkettige und verzweigte ungesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen, wie zum Beispiel Propenyl, Butenyl, Pentenyl oder Hexenyl; C_1-2-Alkandiyl definiert Methylen oder 1,2-Ethandiyl; C_1-5-Alkandiyl definiert zweiwertige geradkettige und verzweigte Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, wie zum Beispiel Methylen, 1,2-Ethandiyl, 1,3-Propandiyl, 1,4-Butandiyl, 1,5-Pentandiyl und verzweigte Isomere davon; C_1-6-Alkandiyl schließt C_1-5-Alkandiyl und die höheren Homologen davon mit 6 Kohlenstoffatomen, wie zum Beispiel 1,6-Hexandiyl und dergleichen, ein. Der Begriff „CO" bezieht sich auf eine Carbonylgruppe.
Unter dem vorhergehend verwendeten Begriff „stereochemisch isomere Formen" sind alle möglichen isomeren Formen, die die Verbindungen der Formel (I) besitzen können, zu verstehen. Sofern nichts anderes angegeben ist, bezeichnet die chemische Bezeichnung der Verbindungen das Gemisch aller möglichen stereochemisch isomeren Formen, wobei diese Gemische alle Diastereomere und Enantiomere der grundlegenden Molekülstruktur enthalten. Insbesondere können stereogene Zentren R- oder S-Konfiguration und Substituenten an zweiwertigen cyclischen (teilweise) gesättigten Resten entweder cis- oder trans-Konfiguration aufweisen. Verbindungen mit Doppelbindungen können an der Doppelbindung E- oder Z-Stereochemie aufweisen. Stereochemisch isomere Formen der Verbindungen der Formel (I) sollen selbstverständlich in den Schutzbereich der vorliegenden Erfindung fallen.
Unter den obengenannten pharmazeutisch unbedenklichen Additionssalzen versteht man die pharmazeutisch unbedenklichen Säureadditionssalze, und sie umfassen die therapeutisch wirksamen nicht toxischen Säureadditionssalzformen, die die Verbindungen der Formel (I) zu bilden vermögen. Die pharmazeutisch unbedenklichen Säureadditionssalze sind zweckmäßigerweise durch Behandeln der Basenform mit einer derartigen geeigneten Säure erhältlich. Als Säuren eignen sich zum Beispiel anorganische Säuren wie Halogenwasserstoffsäuren, z.B. Chlorwasserstoff- oder Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure und dergleichen; oder organische Säuren wie zum Beispiel Essigsäure, Propansäure, Hydroxyessigsäure, Milchsäure, Brenztraubensäure, Oxalsäure (d.h. Ethandisäure), Malonsäure, Bernsteinsäure (d.h. Butandisäure), Maleinsäure, Fumarsäure, Äpfelsäure, Weinsäure, Citronensäure, Methansulfonsäure, Ethansul fonsäure, Benzolsulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure, Cyclaminsäure, Salicylsäure, p-Aminosalicylsäure, Pamoasäure und ähnliche Säuren.
Tragen die erfindungsgemäßen Verbindungen eine saure Einheit, so sind geeignete pharmazeutisch unbedenkliche Basenadditionssalze möglich, zu denen Alkalisalze, zum Beispiel Natrium- oder Kaliumsalze, Erdalkalisalze, zum Beispiel Calcium- oder Magnesiumsalze, und mit geeigneten organischen Liganden, zum Beispiel primären, sekundären, tertiären oder quaternären Ammoniumsalzen, gebildete Basenadditionssalze, wie Morpholinyl, tert.-Butylamino und dergleichen, zählen.
Umgekehrt können die Salzformen durch Behandlung mit einer geeigneten Base in die Form der freien Base umgewandelt werden.
Der Begriff Additionssalz umfaßt im Sinne der obigen Verwendung auch die Solvate, die die Verbindungen der Formel (I) sowie ihre Salze zu bilden vermögen. Beispiele für derartige Solvate sind Hydrate, Alkoholate und dergleichen.
Interessante Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), auf die eine oder mehrere der folgenden Bedingungen zutreffen:

a) n steht für 0;
b) R³ steht für einen gegebenenfalls durch Halogen oder Methoxy substituierten Rest der Formel (b-1);
c) X steht für -CH₂- oder -CH₂CH₂-;
d) R² steht für einen Rest der Formel (a-2), wobei R⁶ für Wasserstoff steht;
e) R² steht für einen Rest der Formel (a-2), (a-4), (a-6) oder (a-7);
f) R² steht für gegebenenfalls durch Methyl, Hydroxy, Halogen, Trifluormethyl, Methyloxycarbonyl oder Hydroxycarbonyl substituiertes Benzimidazol;
g) R¹ steht für C_1-6-Alkylcarbonyl, Amino-C_1-6- alkylcarbonyl oder eine Aminosäure.

Besondere Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen n für 0 steht und R³ für einen gegebenenfalls durch Halogen oder Methoxy substituierten Rest der Formel (b-1) steht.
Bevorzugte Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen n für 0 steht, R³ für einen gegebenenfalls durch Halogen oder Methoxy substituierten Rest der Formel (b-1) steht und X für -CH₂- steht.
Andere bevorzugte Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen n für 0 steht, R³ für einen gegebenenfalls durch Halogen oder Methoxy substituierten Rest der Formel (b-1) steht und X für -CH₂CH₂-steht.
Noch andere bevorzugte Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen R¹ is C_1-6-Alkylcarbonyl, Amino-C_1-6-alkylcarbonyl oder eine Aminosäure steht.
Als Verbindungen der Formel (I), in denen R^1a für alle R¹-Substituenten mit Ausnahme von durch Amino substituiertes C_1-4-Alkyl steht, definierte Verbindungen der Formel (I-a) lassen sich darstellen, indem man ein Zwischenprodukt der Formel (II) in Gegenwart von 4-Methylmorpholin in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Dichlormethan oder Chloroform mit einem Zwischenprodukt der Formel (III) umsetzt. Die Reaktionsgeschwindgkeit läßt sich durch Rühren erhöhen. Die Umsetzung läßt sich zweckmäßigerweise bei einer Temperatur im Bereich zwischen Raumtemperatur und der Rückflußtemperatur der Reaktionsmischung durchführen, und, falls gewünscht, läßt sich die Reaktion in einem Autoklaven bei erhöhtem Druck durchführen. Gegebenenfalls schließt sich an die Umsetzung ein saurer Hydrolyseschritt zum Entfernen säurelabiler Schutzgruppen wie tert.-Butyloxycarbonyl an.
Alternativ dazu lassen sich Verbindungen der Formel (I-a) auch durch die Umsetzung eines Zwischenprodukts der Formel (II) mit einem Zwischenprodukt der Formel (IV) in Gegenwart eines geeigneten Aktivierungsmittels wie zum Beispiel Chlorameisensäureisobutylester in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Dichlormethan in Gegenwart einer geeigneten Base wie zum Beispiel Triethylamin darstellen. Gegebenenfalls schließt sich an die Umsetzung ein saurer Hydrolyseschritt zum Entfernen säurelabiler Schutzgruppen wie tert.-Butyloxycarbonyl an.
Als Verbindungen der Formel (I), in denen R¹ für durch Amino substituiertes C_1-6-Alkyl steht, definierte Verbindungen der Formel (I-b) lassen sich zweckmäßigerweise darstellen, indem man die entsprechenden Ausgangsverbindungen (I-b'), in denen R¹ für Amino-C_1-6-alkylcarbonyl steht, einer entsprechenden Reduktionsreaktion unterzieht. Eine geeignete Reduktionsreaktion kann zum Beispiel die Behandlung mit einem Boran-Tetrahydrofuran-Komplex sein.
Als Verbindungen der Formel (I), in denen R² für einen Rest (a-2) steht, in welchem R⁶ für Wasserstoff steht und R⁷ sich in der 3-Stellung der Imidazolgruppierung befindet, definierte Verbindungen der Formel (I-c) lassen sich darstellen, indem man ein Zwischenprodukt der Formel (V) in Gegenwart von Kaliumacetat in einem geeigneten Lösungsmittel wie Methanol mit einem Zwischenprodukt der Formel (VI) umsetzt.
Die Verbindungen der Formel (I) lassen sich weiterhin darstellen, indem man Verbindungen der Formel (I) nach im Stand der Technik bekannten Reaktionen zur Umwandlung von Gruppen ineinander umwandelt.
Die Ausgangsmaterialien und einige der Zwischenprodukte wie zum Beispiel die Zwischenprodukte der Formeln (III), (IV) und (VI) sind bekannte Verbindungen und sind im Handel erhältlich oder lassen sich nach herkömmlichen, im Stand der Technik allgemein bekannten Reaktionsvorschriften darstellen.
Verbindungen der Formel (I) und einige der Zwischenprodukte können in ihrer Struktur ein oder mehrere stereogene Zentren aufweisen, die in einer R- oder einer S-Konfiguration vorliegen, wie zum Beispiel das Kohlenstoffatom, das den R²-Substituenten trägt.
Bei Vorliegen von zwei stereogenen Zentren mit bekannter absoluter Konfiguration in einem Molekül ordnet man gemäß CAS-Nomenklaturkonventionen dem chiralen Zentrum mit der niedrigsten Nummer, dem Referenzzentrum, den Deskriptor R oder S zu (auf der Basis der Cahn-Ingold-Prelog-Sequenzregel). Die Konfiguration des zweiten stereogenen Zentrums wird mit den relativen Deskriptoren [R*,R*] oder [R*,S*] angegeben, wobei R* immer als das Referenzzentrum definiert ist und [R*,R*] Zentren mit der gleichen Chiralität und [R*,S*] Zentren mit verschiedener Chiralität bezeichnet. Wenn zum Beispiel das chirale Zentrum mit der niedrigesten Nummer in dem Molekül S-Konfiguration hat und das zweite Zentrum R ist, würde man den Stereodeskriptor als S-[R*,S*] angeben.
Die bei den oben beschriebenen Verfahren anfallenden Verbindungen der Formel (I) können in Form von racemischen Gemischen von Enantiomeren synthetisiert werden, welche sich nach an sich bekannten Trennverfahren voneinander trennen lassen. Die racemischen Verbindungen der Formel (I) können durch Umsetzung mit einer geeigneten chiralen Säure in die entsprechenden diastereomeren Salzformen überführt werden. Die diastereomeren Salzformen werden anschließend getrennt, zum Beispiel durch selektive oder fraktionierte Kristallisation, wonach Enantiomere daraus mit Alkali freigesetzt werden. Man kann die enantiomeren Formen der Verbindungen der Formel (I) aber auch mittels Flüssigkeitschromatographie unter Verwendung einer chiralen stationären Phase trennen. Die reinen stereochemisch isomeren Formen können auch aus den entsprechenden reinen stereochemisch isomeren Formen der geeigneten Edukte erhalten werden, vorausgesetzt, daß die Reaktion stereospezifisch verläuft. Ist ein spezielles Stereoisomer gewünscht, so wird diese Verbindung vorzugsweise nach stereospezifischen Herstellungsverfahren synthetisiert. Bei diesen Verfahren kommen vorteilhafterweise enantiomerenreine Edukte zum Einsatz.
Die Verbindungen der Formel (I) sowie ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze und stereoisomeren Formen sind Inhibitoren einer membranständigen Tripeptidylpeptidase, die für die Desaktivierung von endogenen Neuropeptiden wie Cholecystokinen (CCKs) verantwortlich sind, wie durch das pharmakologische Beispiel C-1 belegt wird.
Angesicht ihrer TPP-II-hemmenden Eigenschaften eignen sich die Verbindungen der vorliegenden Erfindung für die Behadnlung von Leiden bzw. Erkrankungen, die mit der TPP-II-Aktivität assoziiert sind, wie zum Beispiel Eßstörungen, Obesitas, psychotischen Syndromen und damit in Zusammenhang stehenden psychiatrischen Erkrankungen.
Aus dem Nutzen der Verbindungen der Formel (I) folgt, daß die vorliegende Erfindung auch ein Verfahren für die Behandlung von an Eßstörungen, Obesitas, psychotischen Syndromen und damit in Zusammenhang stehenden psychiatrischen Erkrankungen leidenden Warmblütern einschließlich des Menschen (allgemein als Patienten bezeichnet) bereitstellt. Es wird also ein Behandlungsverfahren für die Inhibierung der Aktivität von TPP II und/oder Linderung von Leiden wie zum Beispiel Eßstörungen, Obesitas, psychotischen Syndromen und damit in Zusammenhang stehenden psychiatrischen Erkrankungen bei davon betroffenen Patienten bereitgestellt.
Somit wird die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) als als Inhibitor der CCK-desaktivierenden Peptidase Tripeptidylpeptidase (TPP II) wirkende Medizin und/oder für die Behandlung von Eßstörungen, insbesondere Obesitas und/oder für die Behandlung von psycho tischen Syndromen und damit assoziierten psychiatrischen Erkrankungen bereitgestellt, bei der man eine therepautisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel (I) verabreicht. Ebenfalls bereitgestellt wird die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) zur Herstellung einer Medizin zur Inhibierung der Aktivität von TPP II und/oder zur Behandlung von Eßstörungen, Obesitas, psychotischen Syndromen und damit in Zusammenhang stehenden psychiatrischen Erkrankungen. Vorgesehen sind sowohl die prophylaktische als auch die therapeutische Behandlung.
Es wird angenommen, daß einige der Verbindungen der vorliegenden Erfindung, insbesondere die Verbindungen (153) bis (181), auch eine Opioidwirkung, wie z.B. eine delta-Opioid-(δ), mu-Opioid-(μ) und/oder kappa-Opioid-(κ) Wirkung, aufweisen können. Die Opioidwirkung läßt sich mit den in den pharmakologischen Beispielen C.2 und C.3 beschriebenen Assays messen.
Zur Herstellung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen vereinigt man eine wirksame Menge der jeweiligen Verbindung in Basen- oder Säureadditionssalz-Form als Wirkstoff in Form einer innigen Mischung mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger, der je nach der zur Verabreichung gewünschten Darreichungsform verschiedenste Formen annehmen kann. Diese pharmazeutischen Zusammensetzungen liegen wünschenswerterweise in Einzeldosisform vor, die sich vorzugsweise zur oralen oder rektalen Verabreichung oder zur parenteralen Injektion eignet. Bei der Herstellung der Zusammensetzungen in oraler Dosisform können zum Beispiel alle üblichen pharmazeutischen Medien verwendet werden, wie zum Beispiel Wasser, Glykole, Öle, Alkohole und dergleichen bei oralen Flüssigpräparaten wie Suspensionen, Sirupen, Elixieren und Lösungen, oder feste Träger wie Stärken, Zucker, Kaolin, Gleitmittel, Bindemittel, Sprengmittel und dergleichen bei Pulvern, Pillen, Kapseln und Tabletten. Aufgrund ihrer leichten Verabreichbarkeit stellen Tabletten und Kapseln die vorteilhafteste orale Einzeldosisform dar, wobei man natürlich feste pharmazeutische Träger verwendet. Bei Zusammensetzungen zur parenteralen Applikation besteht der Träger in der Regel zumindest größtenteils aus sterilem Wasser, wenngleich auch andere Bestandteile, z.B. zur Förderung der Löslichkeit, vorhanden sein können. Es lassen sich zum Beispiel Injektionslösungen herstellen, bei denen der Träger aus Kochsalzlösung, Glukoselösung oder einer Mischung aus Kochsalz- und Glukoselösung besteht. Ferner lassen sich Injektionssuspensionen herstellen, wobei geeignete flüssige Träger, Suspendiermittel und dergleichen verwendet werden können. Bei den zur perkutanen Verabreichung geeigneten Zusammensetzungen enthält der Träger gegebenenfalls ein Penetriermittel und/oder ein geeignetes Netzmittel, gegebenenfalls in Kombination mit kleineren Mengen geeigneter Zusatzstoffe jeglicher Art, wobei diese Zusatzstoffe keine wesentliche negative Wirkung auf die Haut ausüben. Derartige Zusatzstoffe können die Aufbringung auf die Haut erleichtern und/oder für die Herstellung der gewünschten Zusammensetzungen von Nutzen sein. Diese Zusammensetzungen können auf verschiedenen Wegen verabreicht werden, z.B. als transdermales Pflaster, Direktauftrag oder Salbe. Säureadditionssalze von (I) sind aufgrund ihrer erhöhten Wasserlöslichkeit im Vergleich zu der entsprechenden Basenform für die Zubereitung wäßriger Zusammensetzungen offensichtlich besser geeignet.
Zwecks einfacher Verabreichung und einheitlicher Dosierung ist es besonders vorteilhaft, die obengenannten pharmazeutischen Zusammensetzungen in Einzeldosisform zu formulieren. Unter dem Begriff Einzeldosisform sind in der Beschreibung und in den Ansprüchen physikalisch diskrete Einheiten zu verstehen, die sich als Einheitsdosen eignen, wobei jede Einheit eine vorbestimmte Menge des Wirkstoffs enthält, die so berechnet ist, daß in Verbindung mit dem erforderlichen pharmazeutischen Träger die gewünschte therapeutische Wirkung erzielt wird. Beispiele für solche Einzeldosisformen sind Tabletten (darunter Tabletten mit Bruchrille und Dragees), Kapseln, Pillen, Pulverbeutel, Oblaten, Injektionslösungen, Injektionssuspensionen, ein Teelöffel voll, ein Eßlöffel voll und dergleichen sowie deren getrennt vorliegende Vielfache.
Zur oralen Verabreichung können die pharmazeutischen Zusammensetzungen in Form fester Dosierungsformen, zum Beispiel als Tabletten (sowohl nur verschluckbare als auch kaubare Formen), Kapseln oder Gelkapseln vorliegen, die auf herkömmliche Art und Weise mit pharmazeutisch unbedenklichen Hilfsstoffen, wie Bindemitteln (z.B. Maisquellstärke, Polyvinylpyrrolidon oder Hydroxypropylmethylcellulose), Füllstoffen (z.B. Lactose, mikrokristalline Cellulose oder Calciumphosphat), Gleitmitteln (z.B. Magnesiumstearat, Talk oder Siliciumoxid), Sprengmitteln (z.B. Kartoffelstärke oder Natriumstärkeglykolat) oder Netzmitteln (z.B. Natriumlaurylsulfat), hergestellt werden. Die Tabletten können nach an sich gut bekannten Methoden überzogen werden.
Flüssige Zubereitungen zur oralen Verabreichung können zum Beispiel in Form von Lösungen, Sirupen oder Suspensionen oder als Trockenprodukt zur Konstitution mit Wasser oder einem anderen geeigneten Vehikel vor der Verwendung vorliegen. Derartige flüssige Zubereitungen können auf herkömmliche Art und Weise hergestellt werden, gegebenenfalls mit pharmazeutisch unbedenklichen Zusatzstoffen, wie Suspendiermitteln (z.B. Sorbitsirup, Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose oder hydrierten Speisefetten), Emulgatoren (z.B. Lecithin oder Gummi arabicum), nichtwäßrigen Vehikeln (z.B. Mandelöl, öligen Estern oder Ethylalkohol) und Konservierungsstoffen (z.B. p-Hydroxybenzoesäuremethylester oder -propylester oder Sorbinsäure).
Pharmazeutisch unbedenkliche Süßungsmittel umfassen vorzugsweise mindestens einen Süßstoff, wie Saccharin, Natrium- oder Calciumsaccharin, Aspartam, Acesulfam-Kalium, Natriumcyclamat, Alitam, einen Dihydrochalcon-Süßstoff, Monellin, Steviosid oder Sucralose (4,1',6'-Trichlor-4,1',6'-tridesoxygalactosaccharose), vorzugsweise Saccharin oder Natrium- oder Calciumsaccharin, und gegebenenfalls einen Zuckeraustauschstoff, wie Sorbit, Mannit, Fructose, Saccharose, Maltose, Isomalt, Glucose, hydrierten Glucosesirup, Xylit, Karamel oder Honig.
Süßstoffe werden zweckmäßigerweise in geringen Konzentrationen eingesetzt. So kann die Konzentration zum Beispiel im Fall von Natriumsaccharin im Bereich von 0,04 bis 0,1% (w/v), bezogen auf das Gesamtvolumen der fertigen Formulierung, liegen und beträgt vorzugsweise etwa 0,06% in den niedrig dosierten Formulierungen und etwa 0,08% in den hochdosierten Formulierungen. Der Zuckeraustauschstoff kann effektiv in größeren Mengen im Bereich von etwa 10 bis etwa 35% und vorzugsweise etwa 10 bis 15% (w/v) verwendet werden.
Die pharmazeutisch unbedenklichen Geschmacksstoffe, die die bitter schmeckenden Bestandteile in den niedrig dosierten Formulierungen maskieren können, sind vorzugsweise Fruchtgeschmacksstoffe, wie Kirsch-, Himbeer-, Johannisbeer- oder Erdbeergeschmack. Eine Kombination von zwei Geschmacksstoffen kann sehr gute Ergebnisse liefern. Bei hoch dosierten Formulierungen sind möglicherweise stärkere Geschmacksstoffe erforderlich, wie Karamelschokoladegeschmack, Mint-Cool-Geschmack, Fantasy-Geschmack und ähnliche pharmazeutisch unbedenkliche starke Geschmacksstoffe. Jeder Geschmacksstoff kann in der fertigen Zusammensetzung in einer Konzentration im Bereich von 0,05 bis 1% (w/v) vorliegen. Vorteilhafterweise werden Kombinationen dieser starken Geschmacksstoffe verwendet. Vorzugsweise verwendet man einen Geschmacksstoff, der unter den sauren Bedingungen der Formulierung weder seinen Geschmack noch seine Farbe ändert oder verliert.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch als Depotzubereitungen formuliert werden. Derartige Formulierungen mit langanhaltender Wirkung können durch Implantation (zum Beispiel subkutan oder intramuskulär) oder durch intramuskuläre Injektion verabreicht werden. So kann man die Verbindungen zum Beispiel mit geeigneten polymeren oder hydrophoben Materialien (zum Beispiel als Emulsion in einem unbedenklichen Öl) oder Ionenaustauscherharzen oder als schlecht lösliche Derivate, zum Beispiel als ein schlecht lösliches Salz, formulieren.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können zur parenteralen Verabreichung durch Injektion, zweckmäßigerweise intravenöse, intramuskuläre oder subkutane Injektion, zum Beispiel durch Bolusinjektion oder kontinuierliche intravenöse Infusion, formuliert werden. Formulierungen zur Injektion können in Einzeldosisform, z.B. in Ampullen, oder in Mehrdosenbehältern mit Konservierungsstoffzusatz dargeboten werden. Die Zusammensetzungen können zum Beispiel in Form von Suspensionen, Lösungen oder Emulsionen in öligen oder wäßrigen Vehikeln vorliegen und Formulierungshilfsmittel wie Isotonisierungs-, Suspendier-, Stabilisier- und/oder Dispergiermittel enthalten. Der Wirkstoff kann aber auch in Pulverform zur Konstitution mit einem geeigneten Vehikel, z.B. sterilem pyrogenfreiem Wasser, vor der Verwendung vorliegen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch als Rektalzusammensetzungen, wie z.B. Suppositorien oder Bleibeklistiere, die z.B. herkömmliche Suppositoriengrundlagen wie Kakaobutter oder andere Glyceride enthalten, formuliert werden.
Zur intranasalen Verabreichung kann man die erfindungsgemäßen Verbindungen zum Beispiel als Flüssigspray, als Pulver oder in Form von Tropfen verwenden.
Experimenteller Teil
Bei den nachstehend beschriebenen Vorschriften wurden die folgenden Abkürzungen verwendet: „ACN" steht für Acetonitril, „THF" steht für Tetrahydrofuran, „DCM" steht für Dichlormethan, und „MIK" steht für Methylisobutylketon.
Für einige Chemikalien wurde die chemische Formel verwendet, z.B. CH₂Cl₂ für Dichlormethan, CH₃OH für Methanol, NH₃ für Ammoniak, HCl für Salzsäure, NaOH für Natriumhydroxid, NaHCO₃ für Natriumhydrogencarbonat und Na₂CO₃ für Natriumcarbonat.
In diesen Fällen wurde die zuerst isolierte stereochemisch isomere Form mit „A" und die zweite mit „B" bezeichnet, ohne daß weiter auf die tatsächliche stereochemische Konfiguration Bezug genommen wurde.
Die präparative Flüssigchromatographie wurde an einer halbpräparativen HPLC-Einheit unter Verwendung einer YMC ODS-A-Säule durchgeführt (30 × 100 mm, 5 Mikron, Temperatur: Raumtemperatur, Fließgeschwindigkeit: 35 ml/min, Laufmittel: a) 10/90 Acetonitril/Wasser mit 0,1% Trifluoressigsäure, b) 90/10 Acetonitril/Wasser mit 0,1% Trifluoressigsäure, Gradient: linearer Gradient von A bis B im Verlauf von 9 Minuten, UV-Detektion bei 254 nm.
A. Darstellung der Zwischenprodukte
Beispiel A.1

a) 2,3-Dihydroxy-1H-indol-2-carbonsäureamid (0,030 mol) wurde in Trichlormethan (400 ml) suspendiert. Die Mischung wurde auf 0ºC abgekühlt. Triethylamin (0,045 mol) wurde zugesetzt. Acetylchlorid (0,045 mol) wurde im Verlauf von 2 Minuten zugegeben. Nach 30 Minuten zeigte die DC, daß die Umsetzung unvollständig war. In den noch kalten Kolben wurde weiteres Triethylamin (6,26 ml) und 15 Minuten später weiteres Acetylchlorid (3,21 ml) gegeben. Die DC zeigte, daß die Umsetzung immer noch unvollständig war. Der Ansatz wurde weiter gerührt, auf 0ºC abgekühlt und mit weiterem Triethylamin (6,26 ml) versetzt. Im Verlauf von 2 Minuten wurde weiteres Acetylchlorid (3,21 ml) unverdünnt zugegeben. Die DC zeigte 80% Umwandlung nach 60 Minuten, und keinen Fortschritt nach 30 weiteren Minuten. Eine dritte Portion an Acetylchlorid und Triethylamin wurde zugesetzt. Nach weiteren 15 Minuten wurde eiskaltes Wasser (200 ml) zugegeben. Die Mischung wurde 10 Minuten lang gerührt, filtriert und mit Wasser (3 × 100 ml) und Trichlormethan (2 × 75 ml) gewaschen. Die Probe wurde über Nacht trocknen gelassen, wodurch man 4,71 g an (S)-1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäureamid (Zwischenprodukt 1, Schmp. > 260ºC) erhielt.
b) Zwischenprodukt (1) (0,02022 mol) wurde in DCM (175 ml) suspendiert. Die Mischung wurde auf 0ºC abgekühlt. Triethylamin (0,06066 mol) wurde unverdünnt zugegeben. Trichloracetylchlorid (0,03033 mol) in DCM (20 ml) wurde im Verlauf von 20 Minuten tropfenweise zugesetzt. Nach 2 Stunden wurde Eiswasser (200 ml) zugesetzt, die Phasen wurden getrennt und die organische Phase wurde mit 3 N HCl und dann mit einer gesättigten wäßrigen NaHCO₃-Lösung rückextrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet, filtriert und eingedampft, worauf 4,61 g eines braunen Feststoffs zurückblieben. Der Feststoff wurde mit eiskaltem Diethylether (30 ml) verrieben, filtriert und mit eiskaltem Diethylether gewaschen (zweimal), wodurch man 3,12 g (83%) an (S)-1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäurenitril (Zwischenprodukt 2, Schmp. 134-135ºC) erhielt.
c) Zwischenprodukt (2) (0,0151 mol) wurde in Diethylether (200 ml) suspendiert. Ethanol (0,0214 mol) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde auf 0ºC abgekühlt. HCl (Gas) wurde 45 Minuten lang durch die Mischung geleitet. Die Mischung wurde vom Eisbad genommen und gerührt. Nach 20 Minuten sammelte sich ein Rückstand an den Seitenwänden. Die Wände wurden angerieben, worauf ein weißer Feststoff ausfiel. Nach 1 Stunde wurde die Probe filtriert, mit Diethylether gewaschen und schnell an der Luft getrocknet, wodurch man 3,99 g an (S)-1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carboximidsäureethylester-monohydrochlorid (Zwischenprodukt 3) erhielt.

Analog dazu wurde 1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carboximidsäureethylester-monohydrochlorid (Zwischenprodukt 6) ausgehend von 1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäurenitril dargestellt.
Beispiel A.2

a) 5-Chlor-2,3-dihydroxy-1H-indol-2-carbonsäuremethylester (0,00761 mol) wurde in Methanol (25 ml) gelöst und auf 0ºC abgekühlt. NH₃ wurde 10 Minuten lang durch die Lösung geleitet. Der Kolben wurde mit einem Stopfen verschlossen und auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Die Mischung wurde über Nacht gerührt. Die DC zeigte, daß die Umsetzung größtenteils abgeschlossen war. Die Probe wurde auf 1/3 ihres Volumens eingeengt, abgekühlt, und filtriert, wobei der erhaltene Feststoff mit eiskaltem Methanol (2 ml) gewaschen und dann an der Luft getrocknet wurde, wodurch man 0,74 g an 5-Chlor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäureamid (Zwischenprodukt 7, Schmp. 151-152ºC) erhielt.
b) Triethylamin (0,02080 mol) wurde zu in Trichlormethan (700 ml) gelöstem Zwischenprodukt (7) (0,09632 mol) gegeben. Die Mischung wurde auf 5ºC abgekühlt. Acetylchlorid (0,2480 mol) wurde im Verlauf von 2 Minuten unter Rühren zugesetzt. Nach 5 Minuten bildete sich ein Niederschlag. Das Eisbad wurde entfernt, und der Container wurde 15 Minuten lang stehengelassen. Eiswasser (250 ml) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde 10 Minuten lang gerührt. Die Probe wurde filtriert und mit Wasser und Trichlormethan gewaschen. Der Feststoff wurde in Wasser (200 ml) suspendiert und 10 Minuten lang umgeschwenkt. Trichlormethan (200 ml) wurde zugesetzt und die Mischung wurde gerührt, dann filtriert und mit Wasser und Trichlormethan gewaschen, und dann über Nacht an der Luft getrocknet, wodurch man 19,71 g an 1-Acetyl-5-chlor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäureamid (Zwischenprodukt 8) erhielt.
c) Triethylamin (0,41291 mol) wurde bei 0ºC zu in Dichlormethan (500 ml) suspendiertem Zwischenprodukt (8) (0,08258 mol) gegeben. Trichloracetylchlorid (0,20645 mol) wurde im Verlauf von 10 Minuten zugesetzt. Als die Umsetzung zu langsam zu verlaufen schien, wurde eine weitere Portion an Triethylamin (20 ml) und dann weiteres Trichloracetylchlorid (7,6 ml) zugesetzt, und die Mischung wurde 2 Stunden lang bei niedriger Temperatur gerührt. Das Eisbad wurde entfernt, und die Mischung wurde 2 Stunden lang stehengelassen. Hierdurch erhielt man einen dunkler gefärbten Ansatz, der wieder auf 0ºC abgekühlt wurde. Eiskaltes Wasser (150 ml) wurde langsam zugesetzt, und die Mischung wurde 5 Minuten lang gerührt. Die Phasen wurden getrennt, und die organische Phase wurde gewaschen (eiskalte 3 N HCl, gesättigte NaHCO₃-Lösung), getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mit eiskaltem Diethylether (40 ml) verrieben. Es wurde filtriert, wobei mit eiskaltem Diethylether (10 ml) gewaschen wurde, wodurch man 15,13 g an 1-Acetyl-5-chlor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäurenitril (Zwischenprodukt 9, Schmp. 140-142ºC) erhielt.
d) HCl (als eine 2 M Lösung) wurde langsam zu Zwischenprodukt (9) gegeben, bis eine Gasentwicklung festgestellt wurde. Dann gestoppt Zugabe der zubereiteten HCl (2 N in Diethylether), und HCl suspendiert in Diethylether (150 ml) und dann wurde Ethanol (0,042 mol) zugesetzt. Die Mischung würde auf 0ºC abgekühlt und im Verlauf von einer Stunde mit HCl (Gas) versetzt, wobei ein Öl ausfiel. Der Ansatz wurde mit Diethylether auf 1 l verdünnt. Weiteres Öl fiel aus, und nach 1 Stunde Stehenlassen hatte sich kein Feststoff gebildet. Der Diethylether wurde abdekantiert. Der Rückstand wurde verdünnt (Diethylether, 500 ml). Der Feststoff begann sich zu bilden, und die Mischung wurde 2 Stunden lang gerührt. Die Probe wurde filtriert, wobei mit Diethylether gewaschen wurde. Die Probe wurde unter Vakuum gegeben, wodurch man 6,41 g an 1-Acetyl-5-chlor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carboximidsäureethylester-monohydrochlorid (Zwischenprodukt 10) erhielt.

Beispiel A.3

a) Dikohlensäurebis-1,1-dimethylethylester (0,07615 mol) in DCM (50 ml) wurde bei 0ºC im Verlauf von 5 Minuten zu 2,3-Dihydro-1H-indol-2-methanol (0,07615 mol) in DCM (150 ml) gegeben. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und über Nacht gerührt. Die Mischung wurde im Vakuum eingeengt und einer Kugelrohrdestillation unterzogen, wodurch man 11,98 g an 2,3-Dihydro-2-(hydroxymethyl)-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Zwischenprodukt 11) erhielt.
b) Dess-Martin-Reagens (0,011 mol) wurde im Verlauf von 1 Minute unverdünnt zu in DCM (35 ml) gelöstem Zwischenprodukt (11) (0,010 mol) gegeben. Nach 15 Minuten wurde das Eisbad entfernt, und die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Weiteres Dess-Martin-Reagens (0,33 g) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde weitere 30 Minuten lang gerührt. Die Mischung wurde wieder auf 0ºC abgekühlt und langsam mit einer teils Suspension/teils Lösung von Na₂S₂O₃ (25 g) versetzt, das in einer gesättigten wäßrigen NaHCO₃-Lösung (100 ml) zu lösen versucht worden war. Nach 10 Minuten wurde die Mischung vom Eis genommen, und die Phasen wurden getrennt. Weiteres DCM wurde zugesetzt, und die Mischung wurde filtriert. Das Organische wurde vom Filtrat getrennt, und die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet, filtriert, eingeengt und durch Flash-Säulenchromatographie (Laufmittel: 10% Essigsäureethylester:Hexan, wobei die Probe in 3:1 Essigsäureethylester:Hexan (5 ml) gelöst wurde) aufgereinigt, wodurch man 2-Formyl-2,3-dihydro-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Zwischenprodukt 12, Schmp. 85-872ºC) erhielt.

Beispiel A.4
In eine Lösung von 1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäurenitril (0,00988 mol) und Triethylamin (0,0197 mol) in Pyridin (50 ml) wurde bei Raumtemperatur mittels eines Blasenzählers 2 Stunden lang Schwefelwasserstoff (Gas) eingeleitet, und die auf diese Weise erhaltene gesättigte Reaktionsmischung wurde verschlossen und 16 Stunden lang stehengelassen. Die Reaktionsmischung wurde in 200 ml einer Eis-Wasser-Aufschlämmung gegossen. Es bildete sich ein voluminöser Niederschlag. Die Mischung wurde wieder in einem Eisbad gekühlt und der Niederschlag wurde abgesaugt, mit kaltem Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man 1,62 g an 1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbothioamid (Zwischenprodukt 13, Schmp. 194-195ºC) erhielt.
Beispiel A.5
1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäurenitril (0,0132 mol) wurde mit Wasser (54 ml) versetzt, und die auf diese Weise erhaltene Suspension wurde nacheinander mit Na₂CO₃ (0,00726 mol) und NH₂OH·HCl (0,0145 mol) versetzt. Die Mischung wurde mit Ethanol (26 ml) versetzt und auf 80-90ºC erhitzt. Beim Erreichen der Reaktionstemperatur war die Mischung noch eine Suspension. Weitere 26 ml Ethanol wurden zugesetzt, was eine klare Lösung ergab. Der Ansatz wurde 2,5 Stunden lang erhitzt und auf Raumtemperatur unter Rühren abgekühlt. Es bildete sich ein voluminöser Niederschlag, der abgesaugt, mit kaltem destillierten Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet wurde, wodurch man 2,23 g an 1-Acetyl-2,3-dihydro-N'-hydroxy-1H-indol-2-carboximidamid (Zwischenprodukt 14, Schmp. 204-205ºC) erhielt.
Beispiel A.6
1-Acetyl-2-(4-ethyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol (0,0035 mol) und 6 N HCl (50 ml) wurden unter einer Stickstoffatmosphäre vereinigt. Die Reaktionsmischung wurde sofort erhitzt, und es wurde 3,5 Stunden lang mit dem Erhitzen fortgefahren. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur abkühlen gelassen, dann mit Diethylether (2 × 75 ml) extrahiert, auf 0ºC abgekühlt, alkalisch gestellt (mit gekühlter 3 N NaOH), und dann mit Chloroform (3 × 60 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet und filtriert und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 0,79 g an 2-(4-Ethyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol (Zwischenprodukt 15) erhielt.
Beispiel A.7

a) Eine Suspension von 5-Fluor-1H-indol-2-carbonsäureethylester (0,121 mol) in Methanol (600 ml) wurde mit Mg (0,36 mol) versetzt. Die Mischung was in einem Dreihalskolben unter Argon bei Raumtemperatur. Die Temperatur des Ansatzes wurde genau beobachtet. Nach etwa 10 Minuten begannen sich in der Mischung Blasen zu bilden, zunächst langsam und dann kräftiger. Die Reaktionstemperatur wurde durch gelegentliche Anwendung eines Eisbads zwischen 15 und 25ºC gehalten. Nach 30 Minuten hatte sich die Blasenbildung verlangsamt. Die Mischung wurde drei Tage lang bei Raumtemperatur rühren gelassen. Die Mischung wurde zwischen 600 ml Chloroform und 500 ml gesättigter NH₄Cl-Lösung verteilt. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet und zu einem braunen 51 eingeengt. Das Öl wurde in Ether gelöst und mit 3 N HCl extrahiert. Die wäßrige Phase wurde mit Ether gewaschen, mit 3 N NaOH basisch gestellt und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wurde über MgSO₄ getrocknet und eingeengt, wodurch man 13,91 g an 5-Fluor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäuremethylester (Zwischenprodukt 16) erhielt.
b) In einem Eisbad unter Ar gekühlte 2 M NH₃ in Methanol (0,6 mol) wurde mit in Methanol (150 ml) gelöstem Zwischenprodukt (16) (0,0574 mol) versetzt. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und 6 Stunden lang unter Argon gerührt. Der Ansatz wurde auf 150 ml eingeengt und filtriert. Der Feststoff wurde mit einer kleinen Menge an kaltem Methanol gewaschen und trocknen gelassen, wodurch man 2,33 g an 5-Fluor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäureamid (Zwischenprodukt 17, Schmp. 197-199ºC) erhielt.
c) Eine in einem Eisbad unter Argon gekühlte Mischung von Zwischenprodukt (17) (0,0094 mol) in DCM (30 ml) wurde mit Triethylamin (0,031 mol) und anschließend mit Acetylchlorid (0,031 mol) versetzt. Die auf diese Weise erhaltene Mischung wurde wieder auf Raumtemperatur kommen gelassen. Nach 6 Stunden Rühren wurde die Mischung in einem Eisbad gekühlt und mit 50 ml Wasser versetzt. Die Mischung wurde etwa 20 Minuten rühren gelassen und filtriert und der Feststoff wurde trocknen gelassen, wodurch man 1,58 g an 1-Acetyl-5-fluor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäureamid (Zwischenprodukt 18, Schmp. 232-235ºC) erhielt.
d) Eine in einem Eisbad unter Argon gekühlte Suspension von Zwischenprodukt (18) (0,0076 mol) in DCM (30 ml) wurde mit Triethylamin (0,0228 mol) und anschließend mit Trichloracetylchlorid (0,0115 mol) versetzt. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und 2 Stunden lang gerührt. Die Mischung wurde mit Wasser, 2 N HCl und gesättigter NaHCO₃ gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet und eingeengt. Das Konzentrat wurde mit Ether verrieben und unter Verwendung von 50% Essigsäureethylester in Hexan als Laufmittel an einer Kieselgelsäule aufgereinigt. Die gewünschten Fraktionen wurden vereinigt und eingeengt. Der Rückstand wurde mit Ether verrieben und der Feststoff wurde abfiltriert und trocknen gelassen, wodurch man 0,30 g an 1-Acetyl-5-fluor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonsäurenitril (Zwischenprodukt 19, Schmp. 93-95ºC) erhielt.
e) Eine Lösung von Zwischenprodukt (19)(0,004 mol) und HCl/Diethylether (60 ml) wurde in einem Eisbad unter Argon gekühlt. Ethanol (0,0075 mol) wurde zugesetzt. HCl wurde 50 Minuten lang durch die Lösung geleitet, bis die Mischung homogen wurde. Die Mischung wurde langsam auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und 4 Stunden lang gerührt. Der Ether wurde abdekantiert und in Methanol gelöst. Die Methanollösung wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde so wie er war in den nächsten Schritt eingesetzt, wodurch man 1-Acetyl-5-fluor-2,3-dihydro-1H-indol-2-carboximidsäureethylestermonohydrochlorid (Zwischenprodukt 20) erhielt.

Beispiel A.8

a) 2,3-Dihydro-5-methoxy-1H-indol-2-carbonsäuremethylester (0,084 mol) und 2 M NH₃ in Methanol (500 ml) wurden zusammengegeben und über das Wochenende bei Raumtemperatur unter Argon gerührt. Die Lösung wurde auf 100 ml eingeengt, in einem Eisbad gekühlt und filtriert. Der Feststoff wurde mit einer kleinen Menge an kaltem Methanol gewaschen und getrocknet. Der Rückstand wurde mit Methanol/ACN verrieben und filtriert, wodurch man 4,56 g an 2,3-Dihydro-5-methoxy-1H-indol-2-carbonsäureamid (Zwischenprodukt 21, Schmp. 228-229ºC) erhielt.
b) Triethylamin (0,0106 mol) und dann Acetylchlorid (0,0106 mol) wurden unter Argon zu einer in einem Eisbad gekühlten Lösung von Zwischenprodukt (21) (0,0032 mol) in DCM (40 ml) gegeben. Die Mischung wurde langsam auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und über Nacht gerührt. Die Mischung wurde in einem Eisbad gekühlt und mit eiskaltem Wasser (30 ml) versetzt. Nach 10 Minuten Rühren wurde die Mischung filtriert, und der Feststoff wurde über Nacht trocknen gelassen. Der Rückstand wurde in 50 ml Wasser suspendiert. Die Suspension wurde 30 Minuten lang rühren gelassen, filtriert und über Nacht getrocknet, wodurch man 0,40 g an 1-Acetyl-2,3-dihydro-5-methoxy-1H-indo1-2-carbonsäureamid (Zwischenprodukt 22, Schmp. 196-197ºC) erhielt.
c) Eine in einem Eisbad unter Argon gekühlte Suspension von Zwischenprodukt (22) (0,022 mol) in DCM (150 ml) wurde mit Triethylamin (0,066 mol) und dann mit Trichloracetylchlorid (0,033 mol) versetzt. Die Mischung wurde über Nacht langsam auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Die Mischung wurde mit Wasser, 2 N HCl und gesättigter NaHCO₃-Lösung gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet, eingeengt und mit Ether verrieben und der Feststoff wurde gesammelt, wodurch man 1-Acetyl-2,3-dihydro-5-methoxy-1H-indol-2-carbonsäurenitril (Zwischenprodukt 23, Schmp. 108-110ºC) erhielt.
d) Durch eine in einem Eisbad gekühlte Lösung von Zwischenprodukt (23) (0,0154 mol) und Ethanol (0,0231 mol) in 1 M HCl/Diethylether (200 ml) wurde 60 Minuten lang HCl (Gas) geleitet. Der Ansatz wurde noch 45 Minuten lang im Eisbad belassen, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur im Vakuum auf 200 ml eines öligen Niederschlags eingeengt. Der Rückstand wurde zu einem braunen Feststoff verrieben, der nach dem Abdekantieren des Diethylethers zu einem Öl wurde. Der Rückstand wurde zweimal mit Diethylether gewaschen, in Methanol gelöst und ohne weitere Aufreinigung für die weitere Synthese verwendet, wodurch man 1-Acetyl-2,3-dihydro-5-methoxy-1H-indol-2-carboximidsäureethylestermonohydrochlorid (Zwischenprodukt 24) erhielt.

Beispiel A.9
In DCM (25 ml) gelöste (S)-2-(tert.-Butoxycarbonylamino)buttersäure (0,010 mol) wurde in ein –10ºC kaltes Kühlbad gegeben. Pyridin (0,010 mol) wurde zugesetzt, gefolgt von 2,4,6-Trifluor-1,3,5-triazin (0,0345 mol). Die Mischung wurde unter Stickstoff gerührt. Nach einer Stunde wurde eiskaltes Wasser (75 ml) zugesetzt. Weiteres DCM (45 ml) wurde zugegeben, und die Mischung wurde geschüttelt. Die organische Phase wurde abgetrennt, nochmals mit eiskaltem Wasser (100 ml) gewaschen, und die organische Phase wurde dann getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man 2,29 g an (S)-[1-(Fluorcarbonyl)propyl]carbaminsäure-1,1-dimethylethylester (Zwischenprodukt 25) erhielt.
Beispiel A.10
Verbindung (8) (0,00170 mol) wurde in 6 N HCl (20 ml) gelöst und sofort in einem Ölbad unter Stickstoff 200 Minuten lang auf 100ºC erhitzt. Die Hitzezufuhr wurde abgeschaltet, und die Probe wurde auf 0ºC abgekühlt. 3 N NaOH (35 ml) wurde langsam zugegeben. Das Basischstellen wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung abgeschlossen. Die Probe wurde mit Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet und filtriert, und die auf diese Weise erhaltene Lösung wurde ohne weitere Aufreinigung für die weitere Synthese verwendet, wodurch man (S)-2,3-Dihydro-2-(4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol (Zwischenprodukt 5) erhielt.
Beispiel A.11
Eine Mischung von Zwischenprodukt (13) (0,00844 mol) in Ethanol (180 ml) wurde in einer Portion mit 1-Brom-2-butanon (0,0085 mol) versetzt und 16 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und zwischen Ether und kalter 1 M NaOH (wäßrig) verteilt. Die organische Fraktion wurde über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt, was einen dunklen Feststoff lieferte, der einer Kieselgel-Flashsäulenchromatographie (Laufmittel 100% DCM bis 97:3 DCM/Diethylether) unterzogen wurde, wodurch man 0,91 g an 2-(4-Ethyl-2-thiazolyl)-2,3-dihydro-1H-indol (Zwischenprodukt 4) erhielt.
Beispiel A.12
3-(2-Oxo-2-phenylethylcarbamoyl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-carbonsäure-tert.-butylester
3,4-Dihydro-1H-isochinolin-2,3-dicarbonsäure-2-tert.-butylester (2,77 g, 10 mmol) und 2-Amino-1-phenylethanon (1,71 g, 10 mmol), und HOBT (1-Hydroxybenzotriazol) (2,70 g, 20 mmol) wurden in Dichlormethan (100 ml) gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC abgekühlt und dann mit (4-Dimethylaminobutyl)ethylcarbodiimid (2,29 g, 12 mmol) und anschließend mit NMM (N-Methylmorpholin) (1,31 g, 13 mmol) versetzt. Die Reaktionsmischung wurde dann auf Raumtemperatur erwärmt. Nach 72 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Wasser extrahiert, und die organische Phase wurde nacheinander mit gesättigter NaHCO₃-Lösung, 2 N Citronensäure und NaHCO₃-Lösung extrahiert, über MgSO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man das Titelprodukt als einen gelben Schaum erhielt. Flüssigchromatographie (Liquid Chromatography, LC) zeigte, daß die Verbindung 86% rein war (214 nm), und die Verbindung wurde ohne weitere Aufreinigung verwendet.
Beispiel A.12a
Die Dehydratisierung von 3-(2-Oxo-2-phenylethylcarbamoyl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-carbonsäurebenzylester (dargestellt auf ähnliche Weise wie 3-(2-Oxo-2-phenylethylcarbamoyl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-carbonsäure-tert.-butylester von Beispiel A.12) mit POCl₃ liefert das folgende Zwischenprodukt:
Die CBZ-Gruppe des auf diese Weise erhaltenen Oxazols läßt sich leicht durch Behandeln mit Iodtrimethylsilan abspalten. Das auf diese Weise erhaltene Noraminoxazol-Zwischenprodukt läßt sich nach ähnlichen Vorschriften wie für seine analogen Imidazol-Zwischenprodukte beschrieben weiter in Verbindung 170 umwandeln.
Beispiel A.13
3-(4-Phenyl-1H-imidazol-2-yl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-carbonsäure-tert.-butylester
Das oben in Beispiel A.12 dargestellte Produkt (3,55 g, 9 mmol), NH₄OAc (Ammoniumacetat) (20,8 g, 270 mmol) und AcOH (Essigsäure) (30 ml) wurden bei Raumtemperatur zusammengegeben, und die Reaktionsmischung wurde etwa 3 Stunden lang auf einem Dampfbad erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde dann auf Raumtemperatur abgekühlt und in eine Eis/Wasser-Mischung (400 g) gegossen. Diese Mischung wurde mit konzentrierter Ammoniumhydroxidlösung (50 ml) und Ethylether versetzt. Die Phasen wurden getrennt, und die wäßrige Phase wurde mit einer zweiten Portion Ethylether gewaschen. Die organischen Phasen wurden vereinigt, über MgSO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt im Vakuum, wodurch man einen braunen Schaum erhielt. Diese Probe wurde durch präparative HPLC aufgereinigt, was die aufgereinigte Titelverbindung als ein weißes Pulver lieferte. LC bei 214 nm zeigte, daß die Probe 96% rein war.
Gemessen MW (MH⁺): 376
Beispiel A.14
3-(4-Phenyl-1H-imidazol-2-yl)-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin
Trifluoressigsäure (trifluoroacetic acid, TFA) (4 ml) wurde in einem Reagensglas auf etwa 0ºC abgekühlt. In das abgekühlte Lösungsmittel wurde dann das oben in Beispiel A.13 dargestellte Produkt (0,75 g, 2 mmol) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde im Verlauf von 45 Minuten auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Überschüssige TFA wurde unter einem Strom von N₂-Gas entfernt. Der Rückstand wurde zwischen Dichlormethan (15 ml) und gesättigter NaHCO₃-Lösung verteilt. Die wäßrige Phase wurde dann mit einer zweiten Portion Dichlormethan rückextrahiert und die organischen Phasen wurden vereinigt, über MgSO₄ getrocknet und filtriert, wodurch man die Titelverbindung als eine Lösung in Dichlormethan erhielt. Das Filtrat wurde ohne weitere Aufreinigung oder Isolierung in den nächsten Schritt (Beispiel A.15) eingesetzt.
Gemessen MW (MH⁺): 276
Beispiel A.15
[1-(4-tert.-Butoxybenzyl)-2-oxo-2-[3-(4-phenyl-1H-imidazol-2-yl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-yl]ethyl]- carbaminsäure-tert.-butylester
2-tert.-Butoxycarbonylamino-3-(4-tert.-butoxyphenyl)propionsäure (0,74 g, 2,2 mmol) wurde in Dichlormethan (40 ml) gelöst, und die Reaktionsmischung auf etwa 0ºC abgekühlt. Die Lösung wurde dann mit NMM (0,21 g, 2,1 mmol) und anschließend mit Chlorameisensäureisobutylester (0,27 g, 2 mmol, 0,26 ml) versetzt, und die Lösung wurde etwa 1,25 Stunden lang stehengelassen. Die Reaktionsmischung wurde dann mit dem in Beispiel A.14 dargestellten Produkt (0,55 g, 2 mmol) versetzt, und die Reaktionsmischung wurde etwa 16 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde dann mit Wasser, gesättigter NaHCO₃-Lösung, 2N Citronensäure und gesättigter NaHCO₃-Lösung extrahiert, über MgSO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man das Titelprodukt als einen Schaum erhielt. Gemessen MW (MH⁺): 595. Indem man dieses Zwischenprodukt bei 0ºC in Chloroform mit 1 Äquivalent Br₂ umsetzt, läßt sich in die 5-Stellung der Imidazolgruppe des Zwischenprodukts Brom einführen. Indem man dieses Zwischenprodukt mit N-Chlorsuccinimid umsetzt, läßt sich in die 5-Stellung der Imidazolgruppe des Zwischenprodukts Chlor einführen.
Beispiel A.16
3-(5-Methyl-4-phenyl-1H-imidazol-2-yl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-carbonsäure-tert.-butylester
3-Formyl-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-carbonsäure-tert.-butylester (1,83 g, 7 mmol) wurde mit AcOH (25 ml) zusammengegeben, worauf sofort 1-Phenylpropan-1,2-dion (3,11 g, 21 mmol) und NH₄OAc (13,49 g, 175 mmol) zugesetzt wurden. Die Reaktionsmischung wurde dann auf ein Dampfbad gegeben und 20 Minuten lang unter einer Argonatmosphäre erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde in einem Eisbad abgekühlt und dann zu einer Eis/Wasser-Mischung (44 g) gegeben. Die auf diese Weise erhaltene Mischung wurde durch Zugabe von konzentrierter NH₄OH-Lösung (50 ml) basisch gestellt und dann zweimal mit Diethylether (jeweils 150 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über MgSO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man das Rohprodukt erhielt. Dieses Material wurde durch präparative HPLC aufgereinigt, was die Titelverbindung als einen weißen Feststoff lieferte. Gemessen MW (MH⁺): 390
Beispiel A.17
3-(5-Methyl-4-phenyl-1H-imidazol-2-yl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin
In eine auf etwa 0ºC abgekühlte Lösung von TFA (5 ml) wurde die in Beispiel A.16 dargestellte Verbindung (1,10 g, 2,82 mmol) gegeben, und die Reaktionsmischung wurde etwa 30 Minuten gerührt. Die Reaktionsmischung wurde dann vom Eisbad genommen und auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Überschüssige TFA wurde unter einem N₂-Strom entfernt. Der Rückstand wurde zwischen gesättigter NaHCO₃-Lösung und Dichlormethan verteilt. Die wäßrige Phase wurde mit einer zweiten Portion Dichlormethan gewaschen, und die organischen Phasen wurden vereinigt. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Na₂SO₄ getrocknet und dann filtriert, wodurch man das Titelprodukt als eine Lösung in Dichlormethan erhielt, die ohne weitere Aufreinigung oder Isolierung verwendet wurde.
Beispiel A.18
[1-(4-tert.-Butoxybenzyl)-2-[3-(5-methyl-4-phenyl-1H-imidazol-2-yl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-yl]-2-oxoethyl]carbaminsäure-tert.-butylester
2-tert.-Butoxycarbonylamino-3-(4-tert.-butoxyphenyl)-propionsäure (0,74 g, 2,2 mmol) wurde in Dichlormethan (60 ml) gelöst und auf etwa 0ºC abgekühlt. In die Reaktionsmischung wurde dann NMM (0,30 g, 2,97 mmol) und anschließend Chlorameisensäureisobutylester (0,39 g, 2,82 mmol, 0,37 ml) gegeben. Die Lösung wurde etwa 90 Minuten lang bei 0ºC stehengelassen. In die Reaktionsmischung wurde dann das in Beispiel A.17 dargestellte Produkt (2,82 mmol) als eine Lösung in Dichlormethan gegeben. Die Reaktionsmischung wurde dann auf Raumtemperatur erwärmt. Nach 16 h wurde die Reaktionsmischung nacheinander mit Wasser, gesättigter NaHCO₃-Lösung, 2 N Citronensäure und gesättigter NaHCO₃-Lösung extrahiert, dann über MgSO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man das Rohprodukt erhielt. Dieses Material wurde durch präparative HPLC aufgereinigt, was das Titelprodukt als einen weißlichen Schaum lieferte.
Gemessen MW (MH⁺): 609
B. Darstellung der Endprodukte
Beispiel B.1
4-Methylmorpholin (0,003 mol) wurde zu in Chloroform (80 ml) gelöstem Zwischenprodukt (5) (0,003 mol) gegeben. Nach dem Abkühlen auf 0ºC wurde Zwischenprodukt (25) (0,003 mol) unverdünnt als ein Öl zugesetzt. Nach 27 Minuten wurde die Reaktionsmischung mit Wasser, gesättigter NaHCO₃-Lösung und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man [2S-[1(R*),2R*]]-[1-[[2,3-Dihydro-2-(4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol-1-yl]carbonyl]propyl]carbaminsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 14) erhielt.
Beispiel B.2
Zwischenprodukt (3) (0,047 mol) in Methanol (200 ml) wurde mit Kaliumacetat (0,199 mol) versetzt. Die Mischung wurde unter Argon auf Rückfluß erhitzt. Hierzu wurde im Verlauf von 45 Minuten langsam eine Lösung von 1-Amino-2-pentanon-hydrochlorid (0,094 mol) in Methanol (95 ml) gegeben. Nach Ende der Zugabe wurde die Mi schung über Nacht unter Rückfluß röhrengelassen und dann eingeengt. Das Konzentrat wurde in DCM aufgenommen und mit gesättigter NaHCO₃-Lösung gewaschen. Die wäßrige Phase wurde mit DCM extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden getrocknet und zu einem festen Rückstand eingeengt. Der Rückstand wurde durch Verreiben mit Diethylether und ACN aufgereinigt und gegebenenfalls weiter durch Säulenchromatographie aufgereinigt, wodurch man 5,83 g an (S)-1-Acetyl-2,3-dihydro-2-(4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol (Verbindung 8, Schmp. 174-175ºC) erhielt.
Beispiel B.3
Zwischenprodukt (12) (0,00101 mol), 2-3-Hexandion (0,004 mol) und Ammoniumacetat (0,025 mol) wurden in Essigsäure (4 ml) zusammengegeben und sofort 15 Minuten lang auf ein Dampfbad gegeben. Nach 2 Stunden bei Raumtemperatur wurde der Ansatz in Eiswasser (100 ml) gegossen, mit 3 N NaOH basisch gestellt und mit Diethylether extrahiert (zweimal). Die organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Diethylether aufgenommen, eingeengt und dann durch präparative LC aufgereinigt, wodurch man 0,440 g an 2,3-Dihydro-2-(5-methyl-4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 99) erhielt.
Analog dazu wurde Verbindung (80) durch die Umsetzung von Zwischenprodukt (12) mit dem entsprechenden Aldehyd von 1,1,1-Trifluor-3,3-dibromaceton dargestellt.
Beispiel B.4
N-[(1,1-Dimethylethoxy)carbonyl]-N-methyl-L-alanin (0,00181 mol) wurde in DCM gelöst und auf 0ºC abgekühlt. Triethylamin (0,00181 mol) und dann Chlorameisensäureisobutylester (0,00181 mol) wurden zuge setzt, und die Mischung wurde 70 Minuten lang bei 0ºC gerührt. Zwischenprodukt (5) (0,00181 mol) in DCM (6 ml) wurde zugegeben. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und über Nacht gerührt. Die Mischung wurde extrahiert (Wasser, gesättigte NaHCO₃-Lösung), getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch HPLC aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 0,380 g an [2S-[1(R*),2R*]]-[2-[2,3-Dihydro-2-(4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol-1-yl]-1-methyl-2-oxoethyl]methylcarbaminsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 63, Schmp. 77-80ºC) erhielt.
Beispiel B.5
Verbindung 14 (0,0073 mol) und Trifluoressigsäure (5 ml), die beide in einem Eisbad vorgekühlt worden waren, wurden unter Stickstoff zusammengegeben und langsam auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Nach 1 Stunde wurde die Mischung eingeengt. Das Konzentrat wurde in Wasser gelöst und mit Diethylether extrahiert. Die wäßrige Phase wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung basisch gestellt und zweimal mit Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden über MgSO4 getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wurde in Ether gelöst und mit 3 ml an 1 M HCl in Ether behandelt. Der Niederschlag wurde abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Der Rückstand wurde zwischen gesättigter NaHCO₃-Lösung und Chloroform verteilt. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet und eingeengt. Das Konzentrat wurde an einer Biotage-Säule unter Verwendung von 5% MeOH in Chloroform als Laufmittel aufgereinigt. Der Rückstand wurde in Ether gelöst und mit 2 ml 1 M HCl in Diethylether behandelt. Der Feststoff wurde unter Stickstoff abfiltriert und über Nacht im Vakuum getrocknet, wodurch man 0,364 g an [2S-[1(R*),2R*]]-α-Ethyl-2,3-dihydro-β-oxo-2-(4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol-1-ethanamindihydrochlorid-dihydrat (Verbindung 15, Schmp. 132-140ºC) erhielt.
Beispiel B.6
Eine Suspension von Zwischenprodukt (13) (0,0102 mol) in n-Butanol (200 ml) wurde mit Butansäurehydazid (0,0254 mol) versetzt, 10 Minuten lang gerührt und dann 10 Tage lang auf Rückfluß erhitzt. Der Ansatz wurde abgekühlt, im Vakuum eingeengt und zwischen DCM und destilliertem Wasser verteilt. Die eingeengte organische Phase wurde einer präparativen Umkehrphasen-Säulenchromatographie unterzogen, wodurch man 1-Acetyl-2,3-dihydro-2-(5-propyl-1H-1,2,4-triazol-3-yl)-1H-indol (Verbindung 91) erhielt.
Beispiel B.7

a) Eine Lösung von Verbindung 91 (0,42 g) in Ethanol (25 ml) wurde mit einer wäßrigen NaOH-Lösung (3 M, 25 ml) versetzt, und die Reaktionsmischung wurde 24 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt. Der Ansatz wurde abgekühlt, with Essigsäureethylester verdünnt und mit kaltem destilliertem Wasser behandelt. Die Phasen wurden getrennt, die wäßrige Fraktion wurde 5mal mit Essigsäureethylester extrahiert und die vereinigten organischen Fraktionen wurden getrocknet, eingeengt und durch präparative Säulenchromatographie aufgereinigt, wodurch man 2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1H-1,2,4-triazol-3-yl)-1H-indol erhielt.
b) Eine Lösung von 2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1H-1,2,4-triazol-3-yl)-1H-indol (0,00017 mol) in DCM (5 ml) wurde mit N-Ethyl-N-(1-methylethyl)-2-propanamin (0,00072 mol) und dann mit (2-Fluor-2-oxoethyl)-9H-fluoren-9-ylcarbaminsäuremethylester (0,00070 mol) versetzt. Der Ansatz wurde 15 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Der Ansatz wurde mit DCM verdünnt, zweimal mit gesättigter NaHCO₃-Lösung behandelt und über Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wurde einer präparativen Umkehrphasen-Säulenchromatographie unterzogen, wodurch man 0,02 g des gewünschten Mono-Addukts und 0,02 g eines Bis-Addukts, das durch Behandlung mit dem Laufmittel für die präparative Chromatographie (0,1% Trifluoressigsäure in Wasser/Acetonitril) vollständig in das gewünschte Mono-Addukt umgewandelt wurde, erhielt. Diese wurden vereinigt, wodurch man 0,03 g an [2-[2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1H-1,2,4-triazol-3-yl)-1H-indol-1-yl]-2-oxoethyl]carbaminsäure-H-fluoren-9-ylmethylester erhielt.
c) Eine Lösung von [2-[2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1H-1,2,4-triazol-3-yl)-1H-indol-l-yl]-2-oxoethyl]carbaminsäure-H-fluoren-9-ylmethylester (0,00006 mol) in DCM (10 ml) wurde mit Piperidin (0,010 mol) versetzt und 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt. Der vollständig umgewandelte Ansatz wurde im Vakuum eingeengt und einer präparativen Umkehrphasen-Säulenchromatographie unterzogen, wodurch man 0,02 g an 2,3-Dihydro-β-oxo-2-(5-propyl-1H-1,2,4-triazol-3-yl)-1H-indol-1-ethanamintrifluoracetat (1:1) (Verbindung 92) erhielt.

Beispiel B.8
Eine Mischung von Zwischenprodukt (14) (0,00898 mol) und Butanoylchlorid (0,0094 mol) in Pyridin (140 ml) wurde 40 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und dann auf Rückfluß erhitzt. Nach 21 Stunden wurde der Ansatz abgekühlt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde zwischen DCM und gesättigter wäßriger NaHCO₃-Lösung verteilt, und die organische Fraktion wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde einer Flash-Kieselgelsäulenchromatographie (Laufmittel 100% CH₂Cl₂ bis 95/5 CH₂Cl₂/Ether) unterzogen, wodurch man 1-Acetyl-2,3-dihydro-2-(5-propyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1H-indol (Verbindung 89, Schmp. 93-94ºC) erhielt.
Beispiel B.9

a) Eine Lösung von Verbindung 89 (0,0035 mol) in Ethanol (60 ml) wurde mit 3 M NaOH (60 ml) versetzt, und der Reaktionsansatz wurde 5,5 Stunden lang auf 55-60ºC erhitzt. Der Ansatz wurde schnell in einem Eisbad gekühlt, mit DCM verdünnt und mit kaltem destilliertem Wasser behandelt. Die Phasen wurden getrennt und die wäßrige Fraktion wurde dreimal mit DCM extrahiert. Die organischen Fraktionen wurden vereinigt, einmal mit 1 M NaOH gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch präparative Säulenchromatographie aufgereinigt, wodurch man 0,45 g an 2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1H-indol erhielt.
b) Eine Lösung von 2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1H-indol (0,0011 mol) in DCM (10 ml) wurde mit N-Methyl-N-(1-methylethyl)-2-propanamin (0,40 ml) und dann mit (2-Fluor-2-oxoethyl)-9H-fluoren-9-yl-carbaminsäuremethylester (0,67 g) versetzt. Der Ansatz wurde 40 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und mit einer weiteren Portion sowohl von N-Methyl-N-(1-methylethyl)-2-propanamin als dann auch (2-Fluor-2-oxo-ethyl)-9H-fluoren-9-ylcarbaminsäuremethylester versetzt und zwei Tage lang bei Raumtemperatur gerührt. Der Ansatz wurde mit DCM verdünnt, zweimal mit gesättigter NaHCO₃-Lösung behandelt und über Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wurde einer präparativen Umkehrphasen-Säulenchromatographie unterzogen, wodurch man 0,35 g an [2-[2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1H-indol-1-yl]-2-oxoethyl]carbaminsäure-9H-fluoren-9-ylmethylester erhielt.
c) [2-[2,3-Dihydro-2-(5-propyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1H-indol-1-yl]-2-oxoethyl]carbaminsäure-9H-fluoren-9-ylmethylester (0,35 g) wurde in DCM (40 ml) gelöst, mit Piperidin (0,50 ml) versetzt und 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der vollständig umgewandelte Ansatz wurde im Vakuum eingeengt und einer präparativen Umkehrphasen-Säulenchromatographie unterzogen, wodurch man 0,13 g an 2,3-Dihydro-β-oxo-2-(5-propyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1H-indol-1-ethanamintrifluoracetat (1:1) (Verbindung 90, Schmp. 160-162ºC) erhielt.

Beispiel B.10
2,3-Dihydro-2-(4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol (0,0024 mol) und 1,3-Isobenzofurandion (0,0026 mol) wurden in einem birnenförmigen 25-ml-Kolben unter Argon 2 Stunden lang auf 100ºC erhitzt. Die Mischung wurde in Methanol gelöst und 15 Stunden lang auf Rückfluß erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde eingeengt, in DCM aufgenommen und mit Wasser und 3 N NaOH gewaschen. Der basische wäßrige Extrakt wurde mit 6 N HCl angesäuert und mit DCM extrahiert. Dieser organische Extrakt wurde über MgSO₄ getrocknet und eingeengt. Das Konzentrat wurde mit Ether verrieben und gesammelt. Es wurde zusammen mit der sauren wäßrigen Lösung weiter durch präparative Flüssigchromatographie aufgereinigt, wodurch man 0,23 g an 2-[[2-(4-Ethyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol-1-yl]carbonyl]benzoesäuretrifluoracetat (1:1) (Verbindung 85, Schmp. 98-103ºC) erhielt.
Beispiel B.11
1-Isocyanato-2-nitrobenzol (0,002 mol) wurde zu einer Lösung von Zwischenprodukt (15) (0,016 mol) in THF (10 ml) gegeben. Die Mischung wurde 5 Stunden lang bei Raumtemperatur unter Argon gerührt. Die Mischung wurde mit Hexan verdünnt, filtriert und trocknen gelassen, wodurch man 0,34 g an 2-(4-Ethyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-N-(2-nitrophenyl)-1H-indol-1-carbonsäureamid (Verbindung 77, Schmp. 208-209ºC) erhielt.
Beispiel B.12
Eine Mischung von Verbindung 77 (0,0006 mol), Raney-Nickel (0,02 g; 50%ige Aufschlämmung in Wasser), und Methanol (20 ml) wurde zu Hydrazin gegeben. Wasser (0,003 mol). Die auf diese Weise erhaltene Mischung wurde 2 Stunden lang auf Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wurde die Mischung vorsichtig über Celite filtriert, und das Filtrat wurde eingeengt. Der Rückstand wurde mit Ether verrieben und filtriert. Der Rückstand wurde durch präparative Flüssigchromatographie aufgereinigt, wodurch man 0,24 g an N-(2-Aminophenyl)-2-(4-ethyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol-1-carbonsäureamidtrifluoracetat (1:2) (Verbindung 79, Schmp. 106-108ºC) erhielt.
Beispiel B.13
Eine Mischung von Verbindung 16 (0,00697 mol) in THF (70 ml) wurde in einer Portion mit Natriumhydrid (0,007 mol) versetzt und 16 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Iodmethan (0,0071 mol) wurde in einer Portion zugesetzt. Nach 24 Stunden Rühren bei Raumtemperatur wurde weiteres Natriumhydrid (0,007 mol) in einer Portion unter einer Argonatmosphäre zugesetzt. Der Kolben wurde nach Ende des Aufbrausens wieder verschlossen, und es wurde 16 Stunden lang gerührt. Der vollständig umgesetzte Ansatz wurde in einem Eisbad gekühlt, in DCM gegossen und mit kaltem Wasser behandelt. Die Phasen wurden getrennt und die wäßrige Phase wurde dreimal mit DCM extrahiert. Die vereinigten organischen Fraktionen wurden mit gesättigter NaHCO₃-Lösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wurde einer Flash-Kieselgelsäulenchromatographie (DCM bis Ether bis 9:1 Ether/THF) unterzogen. Die entsprechenden Fraktionen wurden vereinigt. Der Rückstand wurde in Ether aufgenommen und in den Gefrierschrank gestellt. Das Produkt kristallisierte aus, was 0,55 g (29,3%) an 1-Acetyl-2-(4-ethyl-1-methyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol (Verbindung 132, Schmp. 105-106ºC) lieferte. Der zweite Satz an Fraktionen wurde vereinigt. Der Rückstand wurde in Ether aufgenommen und in den Gefrierschrank gestellt. Eine Kristallisation des Produkts wurde beobachtet, was 0,38 g an 1-Acetyl-2-(4-ethyl-1-methyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol (Verbindung 133, Schmp. 135-137ºC) lieferte.
Beispiel B.14
Verbindung 80 (0,001 mol) wurde in 1 N NaOH (12 ml) suspendiert. Die Mischung wurde kräftig gerührt und unter Stickstoff 1 Stunde lang auf 88°C erhitzt. Nach 3 Stunden Rühren bei Raumtemperatur wurde die Mischung auf 0ºC abgekühlt und langsam mit 1 M HCl neutralisiert, bis der Niederschlag fest wurde. Der Feststoff wurde abfiltriert, wobei mit eiskaltem Wasser gewaschen wurde. Die wäßrige Phase wurde zweimal extrahiert, getrocknet, filtriert, eingeengt und getrocknet, wodurch man 0,140 g an 2-(4-Carboxy-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 117) erhielt.
Beispiel B.15
1-Hydroxybenzotriazol-hydrat (0,00036 mol), Glycinmethylesterhydrochlorid (0,00047 mol), 4-Methylmorpholin (0,00055 mol) und N'-(Ethylcarbonimidoyl)-N,N-dimethyl-1,3-propandiaminmonohydrochlorid (0,00047 mol) wurden bei 0ºC zu in DCM (30 ml) gelöster Verbindung 117 (0,00036 mol) gegeben. Die Mischung wurde unter Stickstoff auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und über Nacht gerührt. Die Mischung wurde mit Wasser, gesättigter NaHCO₃-Lösung, 2 N Citronensäure und dann gesättigter NaHCO₃-Lösung extrahiert, getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man 0,100 g (69%) an 2,3-Dihydro-2-[4-[[(2-methoxy-2-oxoethyl)amino]carbonyl]-1H-imidazol-2-yl]-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 118) erhielt.
Beispiel B.16
Verbindung 61 (0,00028 mol) wurde mit 3 N NaOH (3 ml) versetzt und 20 Minuten lang bei Raumtemperatur rührengelassen. Die Lösung wurde dann mit 3 ml 3 N HCl behandelt und mit Chloroform extrahiert. Das Material blieb in der wäßrigen Phase. Die wäßrige Phase wurde durch präparative Flüssigchromatographie aufgereinigt, wodurch man 0,12 g an 2-[1-(Aminoacetyl)-2,3-dihydro-1H-indol-2-yl]-1H-benzimidazol-5-carbonsäuremonohydrat-trifluoracetat (1:2) (Verbindung 62, Schmp. 208-211ºC) erhielt.
Beispiel B.17
Verbindung 102 (0,00238 mol) wurde in 40 ml Methanol gelöst und mit 1 N KOH (50 ml) vereinigt. Der Ansatz wurde über Nacht unter Argon auf 40ºC erwärmt. Bei einem weiteren Erhitzen über Nacht wurde die Temperatur auf 55-60ºC erhöht. Der Ansatz wurde dann auf Raumtemperatur abgekühlt, filtriert und bei 0ºC langsam mit 1 N HCl neutralisiert. Die Probe wurde 5mal mit DCM extrahiert und die Extrakte wurden vereinigt und über Na₂SO₄ getrocknet. Diese organische Lösung wurde filtriert und ohne weitere Aufreinigung in der weiteren Synthese verwendet, wodurch man 2-(4-Carboxy-5-propyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 105) erhielt.
Beispiel B.18
1-Hydroxybenzotriazol-hydrat (0,00318 mol) wurde bei Raumtemperatur zu einer Lösung von Verbindung 105 (0,00159 mol) in DCM (160 ml) gegeben. N,N'-Methantetrayl-biscyclohexanamin (0,00206 mol) wurde bei Raumtemperatur unverdünnt zugesetzt. Nach 60 Minuten wurde 5 Minuten lang NH₃-Gas durch die Mischung geleitet, und es kam zur Ausfällung eines Feststoffes. Die Mischung wurde über das Wochenende stehengelassen. Die Mischung wurde filtriert, und das Filtrat wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung extrahiert. Die organischen Phasen wurden über MgSO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Flüssigchromatographie aufgereinigt, wodurch man 0,21 g an 2-[4-(Aminocarbonyl)-5-propyl-1H-imidazol-2-yl]-2,3-dihydro-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 106) erhielt.
Beispiel B.19
1-Hydroxybenzotriazol-hydrat (0,00158 mol) wurde zu einer Lösung von Verbindung 105 (0,00079 mol) in DCM (80 ml) gegeben. Glycinmethylesterhydrochlorid (0,00103 mol), N'-(Ethylcarbonimidoyl)-N,N-dimethyl-1,3-propandiaminmonohydrochlorid (0,00103 mol) und 4-Methylmorpholin (0,00103 mol) wurden zugesetzt. THF (25 mm) wurde zugegeben. Der Ansatz wurde 3 Tage lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde mit Wasser extrahiert. Die organische Phase wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung, 2N Citronensäure und gesättigter NaHCO₃-Lösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet, filtriert und eingeengt, wodurch man 0,20 g an 2,3-Dihydro-2-[4-[[(2-methoxy-2-oxoethyl)amino]carbonyl]-5-propyl-1H-imidazol-2-yl]-1H-indol-1-carbonsäure-1,1-dimethylethylester (Verbindung 109) erhielt.
Beispiel B.20
Verbindung 81 (0,0005 mol) wurde unter Argon in 1 N NaOH (6 ml) suspendiert. Die Mischung wurde sofort 60 Minuten lang auf 80ºC erhitzt. Bei Raumtemperatur wurden Chloroform (6 ml) und dann (2-Fluor-2-oxoethyl)-1,1-dimethylethylcarbaminsäureester (0,001 mol) zugesetzt. Die Mischung wurde über Nacht gerührt. Die Phasen wurden getrennt. Die wäßrige Phase wurde abgekühlt, angesäuert und zweimal mit Chloroform extrahiert. Die letztgenannten organischen Phasen wurden vereinigt, getrocknet, filtriert und eingeengt. Die Probe wurde durch präparative HPLC aufgereinigt, wodurch man 0,040 g an 2-[1-[[[(1,1-Dimethylethoxy)carbonyl]amino]acetyl]-2,3-dihydro-1H-indol-2-yl]-1H-imidazol-4-carbonsäure (Verbindung 138) erhielt.
Beispiel B.21
Verbindung 145 (0,00097 mol) wurde in Ethanol (5 ml) gelöst und mit mehreren Tropfen einer 21%igen Lösung von NaOEt in Ethanol versetzt. Die Mischung wurde unter Argon bei Raumtemperatur röhrengelassen. Nach 30 Minuten wurden 2 weitere Tropfen der 21%igen Lösung von NaOEt in Ethanol zugegeben. Nach 16 Stunden wurden 2 weitere Tropfen der 21%igen Lösung von NaOEt in Ethanol zugegeben. Nach 30 Minuten wurde die Mischung eingeengt und zwischen Wasser und DCM verteilt. Die wäßrige Phase wurde mit weiterem DCM gewaschen. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Wasser gewaschen, getrocknet, und eingeengt, wodurch man 0,193 g (66%) an [2S-[1(R*),2R*]]-2,3-Dihydro-α-methyl-β-oxo-2-(4-propyl-1H-imidazol-2-yl)-1H-indol-1-ethanol (Verbindung 146) erhielt.
Verbindung 148 wurde auf analoge Weise ausgehend von Verbindung 147 dargestellt.
Beispiel B.22
Beispiel B.23
Eine Lösung von Verbindung 149 (0,0012 mol) und THF (200 ml) wurde in einen Reaktor für photochemische Umsetzungen gegeben und 14 Stunden lang mit UV-Licht bestrahlt. Die Mischung wurde dann unter Stickstoff 2 Tage lang bei Raumtemperatur stehengelassen. Die Mischung wurde eingeengt. Das Konzentrat wurde unter Ver wendung von 1:9 THF in DCM als Laufmittel an einer Biotage-Säule aufgereinigt, wodurch man 0,077 g an 1-[2-(1-Acetyl-2,3-dihydro-1H-indol-2-yl)-5-propyl-1H-imidazol-4-yl]ethanon (Verbindung 150) erhielt.
Beispiel B.24
In 10 ml THF gelöste Verbindung 13 (0,00106 mol) wurde bei Raumtemperatur mit BH₃·THF (19 ml), das sich in einer Lösung in THF befand, versetzt. Die Lösung wurde dann in ein Ölbad gegeben und über Nacht auf 60ºC erhitzt. Nach dem Abkühlen auf 0ºC wurde die Lösung vorsichtig mit 15 ml 3 N HCl versetzt. Der Ansatz wurde dann auf Raumtemperatur erwärmt und 4 Stunden lang gerührt. Die Mischung wurde dann wieder auf 0ºC abgekühlt und mit 12 ml 3 N NaOH basisch gestellt; das Basischstellen wurde dann mit festem Na₂CO₃ abgeschlossen. Die Phasen wurden getrennt und die wäßrige Phase wurde nochmals mit Chloroform gewaschen. Die organischen Phasen wurden vereinigt, eine kleine Menge an wäßriger Phase wurde abgetrennt und die organische Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet. Die Mischung wurde filtriert, und das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde einer präparativen Flüssigchromatographie unterzogen, wodurch man 0,33 g an [2S-[1(R*),2R*]]-2-(4-Ethyl-1H-imidazol-2-yl)-2,3-dihydro-α-methyl-1H-indol-1-ethanamintrifluoracetat (1:1) (Verbindung 127) erhielt.
Beispiel B.25
3-Amino-4-(4-hydroxyphenyl)-1-[3-(4-phenyl-1H-imidazol-2-yl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-yl]butan-1-on (Verbindung 155)
TFA (4 ml) wurde auf etwa 0ºC abgekühlt, und dann wurde das in Beispiel A.15 dargestellte Produkt (1,10 g, 1,85 mmol) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde etwa 0,5 Stunden lang stehengelassen. Überschüssige TFA wurde dann unter einem N₂-Strom entfernt, wodurch man ein braunes Öl erhielt. Das Öl wurde durch präparative HPLC aufgereinigt, wodurch man die Titelverbindung als einen weißen Feststoff erhielt. Gemessen MW (MH⁺): 439
Beispiel B.26
2-Amino-3-(4-hydroxybenzyl)-1-[3-(5-methyl-4-phenylimidazol-2-yl)-3,4-dihydro-1H-isochinolin-2-yl]propan-1-on (Verbindung 153)
Zu einer auf etwa 0ºC abgekühlten Lösung von TFA (4 ml) wurde die in Beispiel A.18 hergestellte Verbindung (0,24 g, 0,4 mmol) gegeben, und die Reaktionsmischung etwa 20 Minuten lang gerührt. Die Reaktionsmischung 5 wurde dann vom Eisbad genommen und auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Überschüssige TFA wurde unter einem N₂-Strom entfernt, wodurch man das Rohprodukt erhielt. Dieses Material wurde durch präparative HPLC aufgereinigt, wodurch man die Titelverbindung als einen 10 weißen Feststoff erhielt.
Gemessen MW (MH⁺): 453
In Tabelle F-1 sind die Verbindungen aufgeführt, die nach einem der obigen Beispiele dargestellt wurden. In 15 den Tabellen wurden die folgenden Abkürzungen verwendet: .C₂HF₃O₂ steht für das Trifluoracetatsalz, .2C₂H₂O₄ steht für das Ethandioatsalz und .C₁₀H₈O₃S steht für das 2-Naphthalinsulfonatsalz. In der Tabelle F-1 sind die Struktur der Verbindungen, die Beispielnummer, 20 nach der diese Verbindungen dargestellt wurden, die Salzform, die stereochemische Bezeichnung und der Schmelzpunkt (falls gemessen) angeführt.
Tabelle F-1
C. Pharmakologische Beispiele
C.1. Inhibierung von Tripeptidylpeptidase II (TPP II)
Die Inhibierung von TPP II wurde nach der von C. Rose et al. in Nature, 380, 403-409 (1996) beschriebenen Vorschrift gemessen.
Die TPP-II-Aktivität wurde unter Verwendung von 15 μM AAF-AMC als Substrat in einem 50 mM Kaliumphosphatpuffer pH 7,5 mit 1 mM DTT und 1 mM EGTA bewertet. Die Verbindungen wurden in einer DMSO-Endkonzentration von 1% zugesetzt. Gemessen wurde die Fluoreszenz bei 405 nm. Die Wirksamkeit der Verbindungen der Formel (I) wurde ausgedrückt als der IC₅₀-Wert, d.h. als die Konzentration, die erforderlich ist, um eine 50%ige Inhibierung zu erzielen.
Die Verbindungen 6, 10, 13, 15, 19, 22, 24, 28, 30, 44, 47, 48, 54, 55, 57, 61, 62, 66, 68, 70, 73, 76, 82, 84, 88, 90, 92, 95, 101, 104, 108, 111, 114, 116, 120, 122, 124, 126, 129, 131, 135, 142 und 144 haben einen IC₅₀-Wert gleich oder kleiner als 1,10^–5 M.
C.2 Bindungsassay mit dem δ-Opioidrezeptor des Rattenhirns
Männliche Wistar-Ratten (150-250 g, VAF, Charles River, Kingston, NY, USA) werden durch Genickbruch getötet, und ihre Hirne werden entnommen und sofort in eiskalten Tris-HCl-Puffer (50 mM, pH 7,4) gegeben. Die Vorderhirne werden durch einen Koronalschnitt, der dorsal an den Colliculi beginnt und ventral über die Mittelhirn-Brückenverbindung verläuft, vom Rest des Hirns getrennt. Nach dem Herauspräparieren werden die Vorderhirne in einem Teflon^®-Glas-Homogenisator in Tris-Puffer homogenisiert. Das Homogenisat wird auf eine Konzentration von 1 g an Vorderhirngewebe auf 100 ml Tris-Puffer verdünnt und 10 min bei 39.000 X G zentrifugiert. Das Pellet wird mit mehreren kurzen Stößen eines Polytron-Homogenisators in dem gleichen Volumen Tris-Puffer resuspendiert. Diese partikuläre Zubereitung wird für die δ-Opioid-Bindungsassays verwendet. Nach Inkubation mit dem δ-selektiven Peptidliganden [³H]DPDPE bei 25°C wird der Inhalt des Röhrchens auf einem Zellenharvester von Brandel über Whatman GF/B-Filterblatter filtriert. Die Röhrchen und die Filter werden dreimal mit 4 ml 10 mM HEPES (pH 7,4) gespült, und die mit den Filterkreisen assoziierte Radioaktivität wird unter Verwendung von Formula-989-Szintillationsflüssigkeit (New England Nuclear, Boston, MA, USA) in einem Szintillationszähler bestimmt.
Mit den Daten wird entweder die prozentuale Inhibierung verglichen mit der Bindung bei der Kontrolle (wenn nur eine einzelne Konzentration an Testverbindung gemessen wird) oder ein K_i-Wert (wenn ein Konzentrationsbereich untersucht wird) berechnet.
Die prozentuale Inhibierung wird wie folgt berechnet:
Der K_i-Wert wird mit dem LIGAND-Programm für die Datenanalyse (Munson, P. J. und Rodbard, D., Anal. Biochem. 107: 220-239, 1980) berechnet.
C.3 Bindungsassay mit dem μ-Opioidrezeptor des Rattenhirns
Männliche Wistar-Ratten (150-250 g, VAF, Charles River, Kingston, NY, USA) werden durch Genickbruch getötet, und ihre Hirne werden entnommen und sofort in eiskalten Tris-HCl-Puffer (50 mM, pH 7,4) gegeben. Die Vorderhirne werden durch einen Koronalschnitt, der dorsal an den Colliculi beginnt und ventral über die Mittelhirn-Brückenverbindung verlauft, vom Rest des Hirns getrennt. Nach dem Herauspräparieren werden die Vorderhirne in einem Teflon^®-Glas-Homogenisator in Tris-Puffer homogenisiert. Das Homogenisat wird auf eine Konzentration von 1 g an Vorderhirngewebe auf 100 ml Tris-Puffer verdünnt und 10 min bei 39.000 X G zentrifugiert. Das Pellet wird mit mehreren kurzen Stößen eines Polytron-Homogenisators in dem gleichen Volumen Tris-Puffer resuspendiert. Diese partikuläre Zubereitung wird für die μ-Opioid-Bindungsassays verwendet. Nach Inkubation mit dem μ-selektiven Peptidliganden [³H]DAMGO bei 25°C wird der Inhalt des Röhrchens auf einem Zellenharvester von Brandel über Whatman GF/B-Filterblätter filtriert. Die Röhrchen und die Filter werden dreimal mit 4 ml 10 mM HEPES (pH 7,4) gespült, und die mit den Filterkreisen assoziierte Radioaktivität wird unter Verwendung von Formula-989-Szintillationsflüssigkeit (New England Nuclear, Boston, MA, USA) in einem Szintillationszähler bestimmt.
Mit den Daten wird entweder die prozentuale Inhibierung verglichen mit der Bindung bei der Kontrolle (wenn nur eine einzelne Konzentration an Testverbindung gemessen wird) oder ein K_i-Wert (wenn ein Konzentrationsbereich untersucht wird) berechnet.
Die prozentuale Inhibierung wird wie folgt berechnet:
Der K_i-Wert wird mit dem LIGAND-Programm für die Datenanalyse (Munson, P. J. und Rodbard, D., Anal. Biochem. 107: 220-239, 1980) berechnet.

Claims

Verbindung der Formel (I)
deren stereochemisch isomere Formen und pharmazeutisch unbedenkliche Additionssalze, wobei n für eine ganze Zahl 0 oder 1 steht; X für O; oder -(CR⁴R⁵)_m steht, wobei m für eine ganze Zahl 1 oder 2 steht und R⁴ und R⁵ jeweils unabhängig voneinander für Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl stehen; R¹ für gegebenenfalls hydroxylsubstituiertes C_1-6-Alkylcarbonyl; C_1-6-Alkyloxycarbonyl; Amino-C_1-6-alkylcarbonyl, wobei die C_1-6-Alkylgruppe gegebenenfalls durch C_3-6-Cycloalkyl substituiert ist; Mono- und Di(C_1-4-alkyl)amino-C_1-6-alkylcarbonyl; arylsubstituiertes Aminocarbonyl; C_1-6-Alkylcarbonyloxy-C_1-6-alkylcarbonyl; C_1-6-Alkyloxycarbonylamino-C_1-6-alkylcarbonyl, wobei die Aminogruppe gegebenenfalls durch C_1-4-Alkyl substituiert ist; einen über die Carbonylgruppe gebundenen Aminosäurerest; aminosubstituiertes C_1-6-Alkyl; oder Arylcarbonyl steht; R² für einen 5-gliedrigen Heterozyklus, ausgewählt aus
steht, wobei m' für eine ganze Zahl 1 bis 2 steht; R⁶ für Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl steht; R⁷ unabhängig von den anderen Resten für Halogen; Amino; Hydroxy; Trifluormethyl; C_1-6-Alkyl; durch Hydroxy, Hydroxycarbonyl, C_1-4-Alkyloxycarbonyl, Aminocarbonyl, Mono- oder Di(C_1-4-alkyl)aminocarbonyl, Amino, oder Mono- oder Di(C_1-4-alkyl)amino substituiertes C_1-4-Alkyl; Phenyl; Aminocarbonyl, Hydroxycarbonyl; C_1-4-Alkyloxycarbonyl; C_1-4-Alkylcarbonyl; oder C_1-4-Alkyloxycarbonyl-C_1-4-alkylaminocarbonyl steht; oder R² für Benzimidazol, oder durch einen oder zwei Substituenten, jeweils unabhängig ausgewählt aus Halogen, Trifluormethyl, C_1-4-Alkyl, Hydroxy, Hydroxycarbonyl, oder C_1-4-Alkyloxycarbonyl, substituiertes Benzimidazol steht; R³ für einen zweiwertigen Rest der Formel
steht, wobei (b-1) gegebenenfalls durch einen, zwei oder drei Substituenten jeweils unabhängig ausgewählt aus Halogen, Hydroxy, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkyloxy, Nitro, Amino, Cyano, Trifluormethyl, Phenyl, oder durch einen oder zwei jeweils unabhängig aus Halogen, Hydroxy, Cyano, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkyloxy, Nitro, Cyano, und Trifluormethyl ausgewählte Substituenten substituiertes Phenyl substituiert sein kann; Aryl für Phenyl oder durch Amino, Nitro oder Hydroxycarbonyl susbtituiertes Phenyl steht.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei n für 0 steht und R³ für einen gegebenenfalls durch Halogen oder Methoxy substituierten Rest der Formel (b-1) steht.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei n für 0 steht, R³ für einen gegebenenfalls durch Halogen oder Methoxy substituierten Rest der Formel (b-1) steht, und X für -CH₂- oder -CH₂CH₂- steht.
Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei R² für (a-2), (a-4), (a-6), oder (a-7) steht.
Verbindung nach einem der vorgehenden Ansprüche, wobei R¹ für C_1-6-Alkylcarbonyl, Amino-C_1-6-Alkylcarbonyl oder eine Aminosäure steht.
Pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend einen pharmazeutisch unbedenklichen Träger und eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5.
Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung nach Anspruch 6, bei dem man eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 innig mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger mischt.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zur Verwendung als Medizin.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I), bei dem man a) ein Zwischenprodukt der Formel (II) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel und gegebenenfalls in Gegenwart einer geeigneten Base mit einem Zwischenprodukt der Formel (III) umsetzt, und so Verbindungen der Formel (I-a) erhält, die als Verbindungen der Formel (I) definiert sind, in denen R^1a für alle R¹-Substituenten mit Ausnahme von aminosubstituiertem C_1-4-Alkyl steht; oder
b) ein Zwischenprodukt der Formel (II) mit einem Zwischenprodukt der Formel (IV) umsetzt, und so eine Verbindung der Formel (I-a) erhält:
wobei in den obigen Reaktionsschemata die Reste R¹, R², R³ und die ganze Zahl n wie in Anspruch 1 definiert sind; c) oder Verbindungen der Formel (I) nach dem Stand der Technik bekannten Transformationsreaktionen ineinander umwandelt; oder, falls gewünscht, eine Verbindung der Formel (I) in ein Säureadditionssalz umwandelt oder umgekehrt ein Säureadditionssalz einer Verbindung der Formel (I) mit Alkali in eine freie Basenform umwandelt; und, falls gewünscht, stereochemisch isomere Formen davon herstellt.