DE60120494T2

DE60120494T2 - Substituieten triazoldiamin derivaten und ihre verwendung als kinase inhibitoren

Info

Publication number: DE60120494T2
Application number: DE60120494T
Authority: DE
Inventors: Ronghui East Brunswick LIN; J. Peter East Providence CONNOLLY; Steven Flemington WETTER; Shenlin Raritan HUANG; Stuart Doylestown EMANUAL; Robert Easton GUNINGER; Steve Flemington MIDDLETON
Original assignee: Ortho McNeil Pharmaceutical Inc
Current assignee: Janssen Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2000-12-22
Filing date: 2001-12-21
Publication date: 2006-12-21
Anticipated expiration: 2021-12-22
Also published as: US20050182116A1; NZ526624A; IL156584A0; RU2274639C2; SK9062003A3; HUP0303868A3; NO20032848L; CA2432870A1; CN100357278C; MXPA03005777A; US7317031B2; BR0116792A; NO20032848D0; US20040077699A1; WO2002057240A1; HUP0303868A2; ATE328874T1; EP1355889B1; HK1057373A1; ES2266313T3

Description

GEBIET DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung stellt Triazoldiamin-Derivate als selektive Kinase- oder Dual-Kinase-Inhibitoren und ein Verfahren zur Verwendung derselben bereit. Genauer stellt die vorliegende Erfindung substituierte 1,2,4-Triazol-3,5-diamin-Derivate als selektive Kinase- oder Dual-Kinase-Inhibitoren und ein Verfahren zur Behandlung oder Linderung einer durch eine selektive Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störungen bereit.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Patentanmeldung WO 99/21845 beschreibt 4-Aminothiazol-Derivate als Inhibitoren Cyclin-abhängiger Kinasen der Formel:
worin R₁ eine substituierte oder unsubstituierte Gruppe ist, ausgewählt aus: C_1-6-Alkyl (z.B. Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, sec-Butyl oder tert-Butyl); C_1-6-Alkenyl; C_1-6-Alkinyl; C_1-6-Alkoxyl; C_1-6-Alkohol; carbocyclischem oder heterocyclischem Cycloalkyl, das monocyclisch oder kondensiert oder nicht-kondensiert polycyclisch sein kann (z.B. Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl) oder Heterocycloalkyl, das monocyclisch oder kondensiert oder nicht-kondensiert polycyclisch sein kann (z.B. Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Morpholinyl); carbocyclischem oder heterocyclischem, monocyclischem oder kondensiert oder nicht-kondensiert polycyclischem Aryl (z.B. Phenyl, Naphthyl, Pyrrolyl, Indolyl, Furanyl, Thiophenyl, Imidazolyl, Oxozolyl, Isoxazolyl, Thiazolyl, Triazolyl, Tetrazolyl, Pyrazolyl, Pyridinyl, Chinolinyl, Isochinolinyl, Acridinyl, Pyrazinyl, Pyridazinyl, Pyrimidinyl, Benzimidazolyl, Benzothiophenyl oder Benzofuranyl); Carbonyl (z.B. Carboxyl, Ester, Aldehyd oder Keton); Ether; (C_1-6-Alkyl)-carbonyl; (C_1-6-Alkyl)-aryl; (C_1-6-Alkyl)-cycloalkyl; (C_1-6-Alkyl)-(C_1-6-alkoxyl); Aryl-(C_1-6-alkoxyl); Thioether (z.B. Aryl-S-aryl, Cycloalkyl-S-aryl, Cycloalkyl-S-cycloalkyl oder Dialkylsulfid); Thiol; und Sulfonyl; und R₂ eine substituierte oder unsubstituierte, carbocyclische oder heterocyclische, monocyclische oder kondensierte oder nicht-kondensierte polycyclische Ringstruktur ist; wobei jeder fakultative Substituent für R₁ und R₂ unabhängig ein Halogen (z.B. Chlor, Iod, Brom oder Fluor); Sauerstoff (=O); Haloalkyl (z.B. Trifluormethyl); C_1-6-Alkyl; C_1-6-Alkenyl; C_1-6-Alkinyl; Hydroxyl; C_1-6-Alkoxyl; carbocyclisches Cycloalkyl, das monocyclisch oder kondensiert oder nicht-kondensiert polycyclisch sein kann (z.B. Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl), oder ein Heterocycloalkyl, das monocyclisch oder kondensiert oder nicht-kondensiert polycyclisch sein kann (z.B. Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Piperazinyl, Morpholinyl oder Thiazinyl); carbocyclisches oder heterocyclisches, monocyclisches oder kondensiertes oder nicht-kondensiertes polycyclisches Aryl (z.B. Phenyl, Naphthyl, Pyrrolyl, Indolyl, Furanyl, Thiophenyl, Imidazolyl, Oxazolyl, Isoxazolyl, Thiazolyl, Triazolyl, Tetrazolyl, Pyrazolyl, Pyridinyl, Chinolinyl, Isochinolinyl, Acridinyl, Pyrazinyl, Pyridazinyl, Pyrimidinyl, Benzimidazolyl, Benzothiophenyl oder Benzofuranyl); Amino (primär, sekundär oder tertiär); Nitro; Thiol; Thioether; Imin; Cyano; Amido; Phosphonato; Phosphin; Carboxyl; Thiocarbonyl; Sulfonyl; Sulfonamid; Keton; Aldehyd; oder Ester ist; (ii) pharmazeutisch annehmbare Salze von Verbindungen der Formel; und (iii) Prodrugs oder pharmazeutisch aktive Metabolite von Verbindungen der Formel oder pharmazeutisch annehmbare Salze derselben; und (b) ein pharmazeutisch annehmbarer Trägerstoff.
Patentanmeldung WO 01/09106 beschreibt Diamino-1,2,4-triazolcarboxyl-Verbindungen und -Derivate als GSK-3(Glykogen-Synthase-Kinase)-Inhibitoren von Formel (I):
worin
die R³CZ-Einheit an das Stickstoffatom an Position 1 oder das Stickstoffatom an Position 2 gebunden sein kann; R¹ Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Aralkyl, Aralkenyl oder alicyclisch ist; R² Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Aralkyl, Aralkenyl oder alicyclisch ist oder R¹ und R² zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen heterocyclischen Ring bilden können, wobei dieser Ring unsubstituiert oder substituiert sein kann; R³ Alkyl, Aryl, Aralkyl, Aryl(Q)alkyl, wobei Q O oder S ist, Aralkenyl, alicyclisch, Heteroaryl, Heteroaralkyl, Arylcarbonylalkyl, Alicyclylalkyl, Diarylalkyl oder NR⁶R⁷ ist; R⁴ Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Aralkyl, Aralkenyl oder alicyclisch ist; R⁵ Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Aralkyl, Aralkenyl oder alicyclisch ist oder R⁴ und R⁵ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen hetercyclischen Ring bilden können, wobei dieser Ring unsubstituiert oder substituiert sein kann; R⁶ Wasserstoff, Aryl oder alicyclisch ist; R⁷ Wasserstoff, Aryl oder alicyclisch ist; und Z Sauerstoff oder Schwefel ist. Geeigneterweise ist R¹ Wasserstoff oder unsubstituiertes oder substituiertes Phenyl, wobei die Substituenten für die Phenylgruppe unabhängig ausgewählt sind aus bis zu drei von C₁-C₆-Alkyl, C₁-C₆-Alkoxy, C₁-C₆-Alkoxy-(C₁-C₆)-alkyl, Aryl, Aryloxy, Halo, Hydroxy, Carboxy, Cyano und Nitro. Vorzugsweise ist R¹ Phenyl, entweder unsubstituiert oder substituiert mit bis zu drei von Methyl, Methoxy oder Chlor. Geeigneterweise ist R² Wasserstoff oder unsubstituiertes oder substituiertes Phenyl, wobei die Substituenten für die Phenylgruppe unabhängig ausgewählt sind aus bis zu drei von C₁-C₆-Alkyl, C₁-C₆-Alkoxy, C₁-C₆-Alkoxy-(C₁-C₆)-alkyl, Aryl, Aryloxy, Halo, Hydroxy, Carboxy, Cyano und Nitro. Vorzugsweise ist R² Wasserstoff. Geeigneterweise ist R³ unsubstituiertes oder substituiertes Phenyl, unsubstituiertes oder substituiertes Naphthyl, unsubstituiertes oder substituiertes Benzyl, unsubstituiertes oder substituiertes Thienylmethyl, unsubstituiertes oder substituiertes Phenylthiomethyl, unsubstituiertes oder substituiertes Naphthylmethyl, unsubstituiertes oder substituiertes Furylethenyl, unsubstituiertes oder substituiertes Cyclohexyl, unsubstituiertes oder substituiertes Pyridyl, unsubstituiertes oder substituiertes Indolylmethyl, unsubstituiertes oder substituiertes Phenylcarbonylethyl, unsubstituiertes oder substituiertes Cyclopentenylmethyl, unsubstituiertes oder substituiertes Phenylpropyl, unsubstituiertes oder substituiertes Diphenylethyl, wobei die Substituenten für die R³- Arylgruppen ausgewählt sind aus -O(CH₂)_nO-, worin n 1 bis 3 ist, oder bis zu drei von Halo, Aryl, Perfluor-(C₁-C₆)-alkyl, Nitro, Arylcarbonyl, Aryloxy, C₁-C₆-Acyl; oder R³ NR⁶R⁷ ist, worin R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff, unsubstituiertes oder substituiertes Aryl oder unsubstituiert oder substituiert C₁-C₆ alicyclisch sind, wobei die Substituenten für die R⁶- und R⁷-Gruppen unabhängig ausgewählt sind aus bis zu drei von Halo, Aryl, Aryloxy, Alkyl, Nitro und Alkoxy. Bevorzugt ist R³ Phenyl, entweder unsubstituiert oder substituiert mit bis zu drei von Chlor, Brom, Phenyl, Trifluormethyl, Nitro, Benzyl, Phenoxy, Acetyl oder 3,4-OCH₂O-; Naphthyl; Benzyl, entweder unsubstituiert oder substituiert mit bis zu drei von Phenyl oder Fluor; 2-Thienylmethyl; Phenylthiomethyl-2-naphthylmethyl; Cyclohexyl; 3-Pyridyl; 3-Indolylmethyl; Phenylcarbonylethyl; Cyclopent-2-enylmethyl; Phenylpropyl; 2,2-Diphenylethyl; oder 2-Furylethenyl; oder NR⁶R⁷, wobei R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff, Phenyl, entweder unsubstituiert oder substituiert mit bis zu drei von Chlor, Phenyl, Phenoxy, Methyl, Brom, Nitro oder Methoxy; Cyclohexyl; oder 1-Naphthyl sind. Geeigneterweise ist R⁴ Wasserstoff. Geeigneterweise ist R⁵ Wasserstoff. Geeigneterweise ist R⁶ unsubstituiertes oder substituiertes Aryl oder unsubstituiert oder substituiert alicyclisch. Bevorzugterweise ist R⁶ Cyclohexyl, Naphthyl oder Phenyl, wobei die Phenylgruppe entweder unsubstituiert sein kann oder mit bis zu drei von Chlor, Brom, Phenyl, Methyl, Phenoxy, Nitro oder Methoxy substituiert. Geeigneterweise ist R⁷ Wasserstoff.
U.S.-Patent 5,750,545 beschreibt Triazol-Derivate als Mittel für die Prophylaxe und Behandlung immunbezogener Erkrankungen, mit Formel (I) und Formel (III):
worin
X ein Sauerstoffatom oder ein Schwefelatom ist; W -NR⁴R⁵ oder -SR⁶ ist; R¹ ein Wasserstoffatom, ein Niederalkyl, -NR¹⁰R¹¹, -N=R¹³ oder eine Gruppe der Formel (II) ist
worin
Y ein Wasserstoffatom, ein Niederalkyl, ein Niederalkoxy, ein Halogen, ein Cyano, ein Nitro, ein mit Halogen substituiertes Niederalkyl, -NR¹⁴R¹⁵, ein Tetrazolyl, ein fakultativ substituiertes Phenyl, ein Hydroxy oder ein Carboxyl ist, L eine direkte Bindung, ein Sauerstoffatom, ein Schwefelatom, ein Alkylen, ein Vinylen oder ein Ethinylen ist und n eine ganze Zahl von 1 bis 3 ist, vorausgesetzt, daß, wenn n 2 oder 3 ist, Y identisch oder verschieden sein kann; und R² oder R³ identisch oder verschieden sind und jedes ein Wasserstoffatom oder Niederalkyl ist; wobei R⁴ und R⁵ identisch oder verschieden sind und jedes ein Wasserstoffatom, ein fakultativ substituiertes Niederalkyl, Cycloalkyl, ein Phenyl oder -(CH₂)_mCOOR¹⁶ ist, R¹⁶ ein Wasserstoffatom oder ein Niederalkyl ist, wobei m eine ganze Zahl von 1 bis 6 ist, R⁶ ein Niederalkyl ist, R¹⁰ und R¹¹ identisch oder verschieden sind und jedes ein Wasserstoffatom, ein fakultativ substituiertes Benzoyl, ein fakultativ substituiertes Phenyl, ein Niederalkylcarbonyl oder -COCOOR¹⁷ ist, R¹⁷ ein Niederalkyl ist R¹³ ein fakultativ substituiertes Methylen ist, R¹⁴ und R¹⁵ identisch oder verschieden sind und jedes ein Wasserstoffatom, ein Niederalkyl, -COCOOR¹⁴ oder -CSNHR¹⁸ ist und R¹⁸ ein Niederalkyl ist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz derselben.
Demgemäß ist es eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung, substituierte Triazoldiamin-Derivate als selektive Kinase- oder Dual-Kinase-Inhibitoren und ein Verfahren zur Verwendung derselben bereitzustellen. Es ist eine Aufgabe der vorliegenden Erifndung, substituierte 1,2,4-Triazo-3,5-diamin-Derivate als ausgewählte Kinase oder Dual-Kinase- Inhibitoren und ein Verfahren zur Verwendung zur Behandlung oder Linderung einer durch selektive Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung bereitzustellen.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung stellt eine Verbindung der folgenden Formel bereit:
worin
R₄ ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus C_1-8-Alkyl; C_1-8-Alkoxy; -CO₂H; Amino; -SO₂-, substituiert mit Amino, wobei Amino mit zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus Wasserstoff und C_1-8-Alkyl; Cycloalkyl; und Aryl;
X -C(O)- ist; und
R₃ ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus: Cycloalkyl, Thienyl, Imidazolinyl, Thiazolyl und Aryl; wobei Cycloalkyl, Thienyl, Imidazolinyl und Aryl fakultativ mit 1 bis 3 Substituenten substituiert sind, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, die aus Cyano, Halo, Hydroxy und Nitro besteht; und wobei Cycloalkyl, Aryl, Thienyl, Imidazolinyl oder Thiazolyl fakultativ mit 1 bis 2 Substituenten substituiert sind, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus: C_1-8-Alkyl, C_2-8-Alkenyl; -CH(OH)-(C_1-8)-Alkyl; C_1-8-Alkoxy; -CO₂H; Amino;
und pharmazeutisch annehmbare Salze derselben.
Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung der Erfindung zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung oder Linderung einer durch selektive Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung.
Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung schließt ein Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung ein, das das Vermischen einer Verbindung der Erfindung und eines pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoffes umfasst.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Beispielhafte Verbindungen der vorliegenden Erfindung schließen eine Verbindung von Formel (I) ein, ausgewählt aus einer Verbindung von Formel (Ic):
Formel (Ic) worin X, R₂, R₃ und R₄ unabhängig ausgewählt sind aus:

und pharmazeutisch annehmbare Salze derselben.
Beispielhafte Verbindungen der vorliegenden Erfindung schließen eine Verbindung von Formel (I) ein, ausgewählt aus einer Verbindung von Formel (Id):
Formel (Id) worin X, R₃ und R₄ unabhängig ausgewählt sind aus:
und pharmazeutisch annehmbare Salze derselben.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können in der Form pharmazeutisch annehmbarer Salze vorliegen. Zur Verwendung in der Medizin beziehen sich die Salze der Verbindungen dieser Erfindung auf nicht-toxische „pharmazeutisch annehmbare Salze" (Ref. International J. Pharm., 1986, 33, 201-217; J. Pharm. Sci., 1997 (Jan), 66, 1, 1). Andere Salze können jedoch bei der Herstellung von Verbindungen gemäß dieser Erfindung oder von deren pharmazeutisch annehmbaren Salzen nützlich sein. Repräsentative organische oder anorganische Säuren schließen Salz-, Bromwasserstoff-, Iodwasserstoff-, Perchlor-, Schwefel-, Salpeter-, Phosphor-, Essig-, Propion-, Glykol-, Milch-, Bernstein-, Malein-, Fumar-, Äpfel-, Wein-, Zitronen-, Benzoe-, Mandel-, Methansulfon-, Hydroxyethansulfon-, Benzolsulfon-, Oxal-, Pamoa-, 2-Naphthalinsulfon-, p-Toluolsulfon-, Cyclohexansulfamid-, Salicyl-, Saccharin- oder Trifluoressigsäure ein, sind aber nicht hierauf beschränkt. Repräsentative organische oder anorganische Basen schließen basische oder kationische Salze, wie etwa Benzathin, Chlorprocain, Cholin, Diethanolamin, Ethylendiamin, Meglumin, Procain, Aluminium, Calcium, Lithium, Magnesium, Kalium, Natrium und Zink ein, sind aber nicht hierauf beschränkt.
Die vorliegende Erfindung schließt in ihrem Schutzumfang Prodrugs der Verbindungen dieser Erfindung ein. Im allgemeinen werden solche Prodrugs funktionelle Derivate der Verbindungen sein, die in vivo leicht in die benötigte Verbindung umwandelbar sind. So soll, bei den Behandlungsverfahren der vorliegenden Erfindung, der Begriff „Verabreichen" die Behandlung der verschiedenen Störungen umfassen, die mit der spezifisch offenbarten Verbindung beschrieben sind oder mit einer Verbindung, die nicht spezifisch offenbart sein kann, sich aber in vivo nach Verabreichung an den Patienten in die spezifische Verbindung umwandelt. Herkömmliche Verfahren zur Auswahl und Herstellung geeigneter Prodrug-Derivate sind zum Beispiel in „Design of Prodrugs", Hrg. H. Bundgaard, Elsevier, 1985, beschrieben.
Wenn die Verbindungen gemäß dieser Erfindung wenigstens ein chirales Zentrum besitzen, können sie entsprechend als Enantiomere vorliegen. Wenn die Verbindungen zwei oder mehr chirale Zentren besitzen, können sie zusätzlich als Diastereomere vorliegen. Wenn die Verfahren zur Herstellung der Verbindungen gemäß der Erfindungen zu Mischungen von Stereoisomeren führen, können diese Isomere durch herkömmliche Techniken, wie etwa präparative Chromatographie, getrennt werden. Die Verbindungen können in razemischer Form hergestellt werden, oder individuelle Enantiomere können hergestellt werden, mit Standardtechniken, die den Fachleuchten bekannt sind, zum Beispiel durch enantiospezifische Synthese oder Trennung, Bildung von diastereomeren Paaren durch Salzbildung mit einer optisch aktiven Säure, gefolgt von fraktionierter Kristallisation und Regeneration der freien Base. Die Verbindungen können auch durch Bildung diastereomerer Ester oder Amide, gefolgt von chromatographischer Trennung und Entfernung des chiralen Hilfsstoffes, getrennt werden. Alternativ können die Verbindungen unter Verwendung einer chiralen HPLC-Säule getrennt werden. Man sollte verstehen, daß alle solche Isomere und Mischungen derselben im Schutzumfang der vorliegenden Erfindung umfasst sind und daß überdies der Begriff „eine Verbindung von Formel x" Enantiomere, Diastereomere und dergleichen einer Verbindung umfassen wird.
Sofern nicht anders spezifiziert, bezieht sich der Begriff „Alkyl" auf eine gesättigte gerade oder verzweigte Kette, die ausschließlich aus 1-8 mit Wasserstoff substituierten Kohlenstoffatomen besteht; vorzugsweise 1-6 mit Wasserstoff substituierten Kohlenstoffatomen; und am bevorzugtesten 1-4 mit Wasserstoff substituierten Kohlenstoffatomen. Der Begriff „Alkenyl" bezieht sich auf eine teilweise ungesättigte gerade oder verzweigte Alkylkette, die wenigstens eine Doppelbindung enthält. Der Begriff „Alkinyl" bezieht sich auf eine teilweise ungesättigte gerade oder verzweigte Alkylkette, die wenigstens eine Dreifachbindung enthält. Der Begriff „Alkoxy" bezieht sich auf -O-Alkyl, wobei Alkyl ist, wie oben definiert.
Der Begriff „Cycloalkyl" bezieht sich auf einen gesättigten oder teilweise ungesättigten cyclischen Alkylring, der aus 3-8 mit Wasserstoff substituierten Kohlenstoffatomen besteht. Beispiele schließen Cyclopropyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl oder Cycloheptyl ein und sind nicht daraufbeschränkt.
Der Begriff „Heterocyclyl" bezieht sich auf einen gesättigten oder teilweise ungesättigten Ring mit fünf Gliedern, von denen wenigstens ein Glied ein N-, O- oder S-Atom ist und der fakultativ ein zusätzliches O-Atom oder ein, zwei oder drei zusätzliche N-Atome enthält; einen gesättigten oder teilweise ungesättigten Ring mit sechs Gliedern, von denen ein, zwei oder drei Glieder ein N-Atom sind; einen gesättigten oder teilweise ungesättigten bicyclischen Ring mit neun Gliedern, von denen wenigstens ein Glied ein N-, O- oder S-Atom ist und der fakultativ ein, zwei oder drei zusätzliche N-Atome enthält; und einen gesättigten oder teilweise ungesättigten bicyclischen Ring mit zehn Gliedern, von denen ein, zwei oder drei Glieder ein N-Atom sind. Beispiele schließen Pyrrolinyl, Pyrrolidinyl, Dioxolanyl, Imidazolinyl, Imidazolidinyl, Pyrazolinyl, Pyrazolidinyl, Piperidinyl, Morpholinyl oder Piperazinyl ein und sind nicht hierauf beschränkt.
Der Begriff „Aryl" bezieht sich auf ein aromatisches monocyclisches Ringsystem, das 6 mit Wasserstoff substituierte Kohlenstoffatome enthält, ein aromatisches bicyclisches Ringsystem, das 10 mit Wasserstoff substituierte Kohlenstoffatome enthält, oder ein aromatisches tricyclisches Ringsystem, das 14 mit Wasserstoff substituierte Kohlenstoffatome enthält. Beispiele schließen Phenyl, Naphthalinyl oder Anthracenyl ein und sind nicht hierauf beschränkt.
Der Begriff „Heteroaryl" bezieht sich auf ein aromatisches monocyclisches Ringsystem, das fünf Glieder enthält, von denen wenigstens ein Glied ein N-, O- oder S-Atom ist und das fakultativ ein, zwei oder drei zusätzliche N-Atome enthält, einen aromatischen monocyclischen Ring mit sechs Gliedern, von denen ein, zwei oder drei Glieder ein N-Atom sind, einen aromatischen bicyclischen Ring mit neun Gliedern, von denen wenigstens ein Glied ein N-, O- oder S-Atom ist und das fakultativ ein, zwei oder drei zusätzlich N-Atome enthält, und einen aromatischen bicyclischen Ring mit zehn Gliedern, von denen ein, zwei oder drei Glieder ein N-Atom sind. Beispiele schließen Furyl, Thienyl, Pyrrolyl, Oxazolyl, Thiazolyl, Imidazolyl, Pyrazolyl, Isoxazolyl, Isothiazolyl, Pyridinyl, Pyridazinyl, Pyrimidinyl, Pyrazinyl, Indolyl, Indazolyl, Chinolinyl oder Isochinolinyl ein und sind nicht hierauf beschränkt.
Der Begriff „Halo" oder „Halogen" bezieht sich auf ein Fluor-, Chlor-, Brom- oder Iod-Atom.
„Unabhängig" bedeutet, daß, wenn eine Gruppe mit mehr als einem Substituenten substituiert ist, die Substituenten identisch oder verschieden sein können. „Abhängig" bedeutet, daß die Substituenten in einer angegebenen Kombination von Strukturvariablen spezifiziert sind.
Eine Ausführungsform der Erfindung ist eine pharmazeutische Zusammensetzung oder ein Arzneimittel, die/das einen pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoff und eine der oben beschriebenen Verbindungen umfasst. Veranschaulichend für die Erfindung ist eine pharmazeutische Zusammensetzung oder ein Arzneimittel, hergestellt durch Vermischen irgendeiner der oben beschriebenen Verbindungen und eines pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoffes. Eine weitere Veranschaulichung der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung oder eines Arzneimittels, das Vermischen irgendeiner der oben beschriebenen Verbindungen und eines pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoffs umfasst. Weiter veranschaulichend für die vorliegende Erfindung sind pharmazeutische Zusammensetzungen oder Arzneimittel, die eine oder mehrere Verbindungen dieser Erfindung zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoff umfassen.
Wie hierin verwendet, soll der Begriff „Zusammensetzung" ein Produkt umfassen, das die spezifizierten Inhaltsstoffe in den spezifizierten Mengen umfasst, sowie jedes Produkt, das, direkt oder indirekt, aus Kombinationen der spezifizierten Inhaltsstoffen in den spezifizierten Mengen resultiert.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind selektive Kinase- oder Dual-Kinase-Inhibitoren, die in einem Verfahren zur Behandlung oder Linderung einer durch Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung nützlich sind. Insbesondere ist die Kinase ausgewählt aus einer Cyclin-abhängigen Kinase und einer Tyrosin-Kinase. Genauer ist die Kinase ausgewählt aus Cyclin-abhängiger Kinase-1, Cyclin-abhängiger Kinase-2, Cyclin-abhängiger Kinase-4, Gefäßendothelwachstumsfaktorrezeptor-2, Endothelwachstumsfaktorrezeptor oder menschlichem Epidermiswachstumsfaktorrezeptor-2.
Inhibitoren Cyclin-abhängiger Kinase spielen eine kritische Rolle bei der Regulation der Progression der eukaryotischen Zelle durch den Zellzyklus durch Assoziation mit Proteinkomplexen, die aus Cyclinen und Cyclin-abhängigen Kinasen bestehen, und somit Herunterregulieren der Aktivität der Cyclin-abhängigen Kinasen. Stoffwechselwege, die Inhibitoren Cyclin-abhängiger Kinase enthalten, werden häufig in Tumorzellen unterbrochen, was zu abnormer Regulation des Zellzyklus führt. Überexpression von Inhibitoren Cyclin-abhängiger Kinase führt zur Hemmung von Zellen bei einem der Checkpoints im Zellzyklus. Daher ist die Verwendung von Inhibitoren Cyclin-abhängiger Kinase für Tumortherapie intuitiv attraktiv, weil sie das Potential für Tumorwachstum besitzt. Hemmung oder für die Hemmung oder Kontrolle von unkontrollierter Zellproliferation, wie sie bei einigen Angiopathien, gutartigem Tumorwachstum, Leukämien oder dergleichen auftritt. Ein besonders gutes CDK-Inhibitor-Target für das Design von Anti-Tumormitteln ist der CDK-1-Rezeptor. Dieses Protein kontrolliert den letzten Checkpoint im Zellzyklus zwischen der G2- und M-Phase.
Ein zweites Protein-Target, das die Eliminierung eines Tumors erleichtern kann, ist der Tyrosinkinase-Gefäßendothelwachstumsfaktor(VEGF)-Rezeptor. Dieses Protein ist mit sowohl normaler als auch pathologischer Angiogenese assoziiert. Die VEGF-Rezeptoren sind dreiteilig, bestehend aus einer extrazellulären Ligandenbindungsdomäne, einer Transmembrandomäne und einer intrazellulären Tyrosinkinase-Domäne. Gegenwärtig gibt es zwei bekannten VEGF-Rezeptoren: (1) VEGF-R2 (KDR/Flk1/VEGF-R2), ein Rezeptor, der die biologischen Aktivitäten der Mitogenese und Proliferation von Endothelzellen vermittelt; und (2) VEGF-R1 (Flt1/VEGF-R1), ein Rezeptor, der solche Funktionen wie Endothelzelladhäsion vermittelt. Es ist gezeigt worden, daß die Hemmung von VEGF-R2-Signalübermittlung den Angiogeneseprozeß hemmt. Inhibitoren dieses Rezeptors sind wahrscheinlich bei der Kontrolle oder Beschränkung von Angiogenese nützlich.
Viele herkömmliche zytotoxische Krebstherapien zerstören das sich schnell teilende Epithel des Haarfollikels und induzieren Alopezie (Haarausfall). Hemmung Cyclin-abhängiger Kinasen kann eine therapeutische Strategie zur Verhinderung von durch Chemotherapie induzierter Alopezie durch Hemmen des Zellzyklus und Verringern der Empfindlichkeit von Epithelzellen gegen Antitumormittel darstellen (Davis S.T., et al., Prevention of chemotherapy-induced alopecia in rats by CDK inhibitors, Science, 2001, (Jan 5), 291, 5501, 25-6). Topische Anwendung nicht-apoptotischer CDK-Inhibitoren stellt einen potentiell nützlichen Ansatz zur Verhinderung von durch Chemotherapie induzierter Alopezie bei Krebspatienten dar.
Obgleich Koronarangioplastik ein hocheffektives Verfahren ist, das verwendet wird, um die Schwere von Koronarokklusion zu verringern, ist ihr Langzeiterfolg durch eine hohe Restenoserate beschränkt. Gefäßglattmuskelzellaktivierung, -migration und -proliferation ist in großem Maße verantwortlich für Restenose im Anschluß an Angioplastik (Ross, R., Nature, 1993, 362, 801-809). Kürzliche Studien haben gezeigt, daß CDK2 sehr früh nach Endotheldenudation in einem Rattenhalsschlagader-Modell der Restenose aktiviert wird (Wei, G.L., et al., Circ. Res., 1997, 80, 418-426). Daher können antiproliferative Therapien, die auf Cyclin-abhängige Kinase" oder andere Komponenten der Zellzyklusmaschinerie zielen, ein geeigneter Ansatz sein, um diese Störungen zu behandeln.
Ein Verfahren zur Behandlung oder Linderung einer durch selektive Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung in einem Patienten, der derselben bedarf, umfasst die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge einer vorliegenden Verbindung oder pharmazeutischen Zusammensetzung derselben an den Patienten. Die therapeutisch wirksame Menge der Verbindung von Formel (I), die in solch einem Verfahren exemplifiziert ist, liegt von etwa 0,001 mg/kg/Tag bis etwa 300 mg/kg/Tag.
Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung schließen die Verwendung einer Verbindung von Formel (I) zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung oder Linderung einer durch Kinase oder Dualen-Kinase vermittelten Störung bei einem Patienten, der derselben bedarf, ein.
Eine einzelne Verbindung der vorliegende Verbindung oder eine pharmazeutische Zusammensetzung derselben kann getrennt zu unterschiedlichen Zeitpunkten während des Therapieverlaufes oder gleichzeitig in aufgeteilten oder einzelnen Kombinationsformen verabreicht werden. Der Begriff „Verabreichen" soll daher so verstanden werden, daß er alle solche Regimes gleichzeitiger oder alternierender Behandlung umfasst.
Eine Verbindung oder pharmazeutische Zusammensetzung derselben kann vorteilhafterweise gleichzeitig in Kombination mit anderen Mitteln zur Behandlung oder Linderung einer durch Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung verabreicht werden. Das Kombinationsprodukt umfasst die gleichzeitige Verabreichung einer Verbindung von Formel (I) oder pharmazeutischen Zusammensetzung derselben und eines zusätzlichen Mittels zur Behandlung oder Linderung einer durch Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung, die sequentielle Verabreichung einer Verbindung von Formel (I) oder pharmazeutischen Zusammensetzung derselben und eines zusätzlichen Mittels zur Behandlung oder Linderung einer durch Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung, Verabreichung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die eine Verbindung von Formel (I) oder pharmazeutischen Zusammensetzung derselben und ein zusätzliches Mittel zur Behandlung oder Linderung einer durch Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung enthält, oder die im wesentlichen gleichzeitige Verabreichung einer getrennten pharmazeutischen-Zusammensetzung, die eine Verbindung von Formel (I) oder pharmazeutische Zusammensetzung derselben enthält, und einer getrennten pharmazeutischen Zusammensetzung, die ein zusätzliches Mittel zur Behandlung oder Linderung einer durch Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störung enthält.
Der Begriff „andere Mittel" schließt Antiangiogenesemittel, Antitumormittel, zytotoxische Mittel, Inhibitoren der Zellproliferation und dergleichen ein und ist nicht darauf beschränkt. Der Begriff „Behandlung oder Linderung" schließt Erleichterung der Ausmerzung, Hemmung der Progression oder Förderung der Stasis einer Malignität ein und ist nicht darauf beschränkt. Eine duale CDK1-VEGF-R-Inhibitorverbindung der vorliegenden Erfindung, die als ein Antiangiogenesemittel wirkt, kann zum Beispiel in einem Dosierungsregime mit wenigstens einer anderen zytotoxischen Verbindung, wie etwa einem DNA-Alkylierungsmittel, verabreicht werden. Bevorzugte Antitumormittel sind ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Cladribin (2-Chlor-2'-desoxy-(beta)-D-adenosin), Chlorambucil (4-[Bis(2-chlorethyl)amino]-benzolbutansäure), DTIC-Dome (5-(3,3-Dimethyl-1-triazeno)-imidazol-4-carboxamid), Platin-Chemotherapeutika und Nicht-Platin-Chemotherapeutika. Platinhaltige Antitumormittel schließen Cisplatin (cis-Dichlordiaminplatin) ein, sind aber nicht darauf beschränkt. Kein Platin enthaltende Antitumormittel schließen Cyclophosphamid, Fluorouracil, Epirubicin, Methotrexat, Vincristin, Doxorubicin, Bleomycin und Etoposid ein, sind aber nicht darauf beschränkt. Jedes Antitumormittel wird in einer therapeutisch wirksamen Menge verabreicht, die basierend auf dem verwendeten Mittel, dem Typ der zu behandelnden oder zu lindernden Malignität und anderen Bedingungen gemäß den im Stand der Technik gut bekannten Verfahren variiert.
Der Begriff „Patient", wie hierin verwendet, bezieht sich auf ein Tier, vorzugsweise einen Säuger, am bevorzugtesten einen Menschen, das/der der Gegenstand von Behandlung, Beobachtung oder Experiment gewesen ist.
Der Begriff „therapeutisch wirksame Menge", wie hierin verwendet, bedeutet diejenige Menge aktive Verbindung oder pharmazeutisches Mittel, die die biologische oder medizinische Reaktion in einem Gewebesystem, Tier oder Menschen hervorruft, die von einem Forscher, Tierarzt, Mediziner oder anderem Kliniker gesucht wird, was Linderung der Symptome der zu behandelnden Erkrankung oder Störung einschließt.
Die allgegenwärtige Natur der Kinase-Isoformen und ihre wichtigen Rollen in der Physiologie liefern einen Anreiz, um hochselektive Kinase-Inhibitoren herzustellen. Vor dem Hintergrund von Beweisen, die die Verknüpfung bestimmter Isoformen mit Erkrankungszuständen zeigen, ist es vernünftig anzunehmen, daß hemmende Verbindungen, die für eine oder zwei Isoformen (diejenigen Verbindungen, die für wenigstens zwei Cyclin-abhängige Kinase- oder Tyrosinkinase-Isoformen selektiv sind, werden als Dual-Kinase- Inhibitoren bezeichnet) oder für eine einzelne Isoform relativ zu anderen Isoformen und anderen Kinasen selektiv sind, überlegene therapeutische Mittel sind. Solche Verbindungen sollten größere Wirksamkeit und geringere Toxizität aufgrund ihrer Spezifität zeigen. Demgemäß wird von einem Fachmann anerkannt werden, daß eine Verbindung der Formel (I) für bestimmte durch Kinase oder Dual-Kinasen vermittelte Störungen auf der Grundlage der Modulation der Störung durch selektive Hemmung von Kinase oder Dual-Kinase therapeutisch wirksam ist. Die Aktivität der vorliegenden Verbindungen als selektive Kinase oder Dual-Kinase-Inhibitoren leitet sich ab von der neuartigen Kombination der Strukturelemente X, R₃ und R₄, die optimal auf dem Triazol-Gerüst substituiert sind. Die Nützlichkeit einer Verbindung von Formel (I) als ein selektiver Kinase- oder Dual-Kinase-Inhibitor kann gemäß dem hierin offenbarten Verfahren bestimmt werden und der Schutzumfang solcher Nützlichkeit schließt die Verwendung bei einer oder mehrerer durch Kinase oder Dual-Kinase vermittelten Störungen ein.
Daher schließt der Begriff „durch Kinase- oder Dual-Kinase vermittelte Störungen", wie hierin verwendet, Verbindungen ein, die in der Lage sind, eine oder mehrere Kinasen zu hemmen, wobei Kinase-Hemmung auch mit Krebserkrankungen, abnormer Zellproliferation, Tumorwachstum, Tumorvaskularisierung sowie Angiopathie, Angiogenese, durch Chemotherapie induzierte Alopezie und Restenose assoziiert ist, und ist nicht darauf beschränkt.
Die Verbindungen dieser Erfindung sind nützlich als ein Zusatz in einer Vielzahl von chemotherapeutischen Mittel, die für spezifische Krebstherapieregimes empfohlen sind. Die Verbindungen dieser Erfindung haben sich zum Beispiel als nützlich in Kombinationstherapien mit wenigstens einem weiteren chemotherapeutischen Mittel zur Behandlung einer Reihe von unterschiedlichen Krebserkrankungen erwiesen und scheinen vorteilhafterweise die Verwendung einer verringerten Dosis des chemotherapeutischen Mittels zu erleichtern, das für eine bestimmte Krebserkrankung oder Zellproliferationsstörung empfohlen ist. Daher wird es in Betracht gezogen, daß die Verbindungen dieser Erfindung in einem Behandlungsregime vor der Verabreichung des bestimmten chemotherapeutischen Mittels verwendet werden können, das die für die Behandlung einer bestimmten Krebserkrankung empfohlen ist, während der Verabreichung des chemotherapeutischen Mittels oder nach der Behandlung mit einem bestimmten chemotherapeutischen Mittel.
Pharmazeutische Zusammensetzungen, die in dieser Erfindung betrachtet werden, können gemäß herkömmlichen pharmazeutischen Techniken hergestellt werden. Ein pharmazeutisch annehmbarer Trägerstoff kann in der Zusammensetzung der Erfindung verwendet werden. Die Zusammensetzung kann eine breite Vielfalt von Formen annehmen, abhängig von der Form der für die Verabreichung gewünschten Zubereitung, einschließlich intravenös (sowohl Bolus als auch Infusion), oral, nasal, transdermal, topisch mit oder ohne Okklusion, intraperitoneal, subkutan, intramuskulär oder parenteral, aber nicht darauf beschränkt, wobei alle Verwendungsformen den Durchschnittsfachleuten auf dem pharmazeutischen Gebiet gut bekannt sind. Bei der Herstellung der Zusammensetzungen in oraler Dosierungsform können ein oder mehrere der üblichen pharmazeutischen Trägerstoffe eingesetzt werden, wie etwa Wasser, Glykole, Öle, Alkohole, Geschmacksstoffe, Konservierungsstoffe, Färbemittel, Sirup und dergleichen im Falle oraler flüssiger Zubereitungen (zum Beispiel Suspensionen, Elixiere und Lösungen), oder solche Trägerstoffe wie Stärken, Zucker, Verdünnungsmittel, Granulierungsmittel, Gleitmittel, Bindemittel, Desintegrationsmittel und dergleichen im Falle oraler fester Zubereitungen (zum Beispiel Pulver, Kapseln und Tabletten).
Wie ebenfalls im Stand der Technik bekannt ist, können die Verbindungen alternativ parenteral über Injektion einer Formulierung verabreicht werden, die aus dem aktiven Inhaltsstoff, gelöst in einem inerten flüssigen Trägerstoff, besteht. Die injizierbare Formulierung kann den aktiven Inhaltsstoff vermischt mit einem geeigneten inerten flüssigen Trägerstoff einschließen. Annehmbare flüssige Trägerstoffe schließen Pflanzenöle, wie etwa Erdnußöl, Baumwollsaatöl, Sesamöl und dergleichen, sowie organische Lösemittel, wie etwa Solketal, Glycerol, Formal und dergleichen, ein. Als eine Alternative können wässrige parenterale Formulierungen verwendet werden. Annehmbare wässrige Lösemittel schließen zum Beispiel Wasser, Ringer'sche Lösung und eine isotonische wässrige Kochsalzlösung ein. Weiter kann ein steriles nicht-flüchtiges Öl als Lösemittel oder Suspendiermittel in der wässrigen Formulierung eingesetzt werden. Die Formulierungen werden durch Lösen oder Suspendieren des aktiven Inhaltsstoffs im flüssigen Trägerstoff hergestellt, so daß die Endformulierung von 0,005 bis 10 Gew.-% des aktiven Inhaltsstoffs enthält. Weitere Zusatzstoffe, die einen Konservierungsstoff, einen Isotonisierer, einen Löslichmacher, einen Stabilisator und ein schmerzlinderndes Mittel einschließen, können angemessenerweise eingesetzt werden.
Überdies können Verbindungen der vorliegenden Erfindung in intranasaler Form über topische Verwendung geeigneter intranasaler Vehikel oder über transdermale Wege unter Verwendung derjenigen Formen von transdermalen Hauptpflastern, die den Durchschnittsfachleuten auf diesem Gebiet gut bekannt sind, verabreicht werden. Um in der Form eines transdermalen Zuführungssystems verabreicht zu werden, wird die Dosierungsverabreichung natürlich kontinuierlich statt intermittierend während des gesamten Dosierungsregimes sein.
Wegen der Leichtigkeit ihrer Verabreichung stellen Tabletten und Kapseln eine vorteilhafte orale Dosierungseinheitsform dar, bei der feste pharmazeutische Trägerstoffe eingesetzt werden. Falls erwünscht, können Tabletten durch Standardtechniken mit Zucker oder magensaftresistent beschichtet worden.
Für flüssige Formen kann die Wirkstoffkomponente in geeignet aromatisierten Suspendier- oder Dispergiermitteln kombiniert werden, wie etwa den synthetischen und natürlichen Gummis, einschließlich zum Beispiel Tragacanthgummi, Akaziengummi, Methylcellulose und dergleichen. Weitere Dispergiermittel, die eingesetzt werden können, schließen Glycerin und dergleichen ein.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch in Form von Liposom-Zuführungssystemen verabreicht werden, wie etwa kleinen unilamellaren Vesikeln, großen unilamellaren Vesikeln und multilamellaren Vesikeln. Liposome enthaltende Zuführungssysteme, wie gut bekannt im Stand der Technik, werden aus einer Vielzahl von Phospholipiden gebildet, wie etwa Cholesterol, Stearylamin oder Phosphatidylcholinen.
Die vorliegende pharmazeutische Zusammensetzung wird im allgemeinen pro Dosierungseinheit (z.B. Tablette, Kapsel, Pulver, Injektion, Teelöffelfüllung und dergleichen) von etwa 0,001 bis etwa 100 mg/kg enthalten. In einer Ausführungsform enthält die vorliegende pharmazeutische Zusammensetzung pro Dosierungseinheit von etwa 0,01 bis etwa 50 mg/kg Verbindung und vorzugsweise von etwa 0,05 bis etwa 20 mg/kg. Verfahren sind im Stand der Technik bekannt zur Bestimmung therapeutisch wirksamer Dosen für die vorliegende pharmazeutische Zusammensetzung. Die therapeutisch wirksame Menge zur Verabreichung der pharmazeutischen Zusammensetzung an einen Menschen kann zum Beispiel mathematisch aus den Ergebnissen von Tierversuchen bestimmt werden.
Abkürzungen

"Vbd"

Verbindung

"CSCl₂"

Thiophosgen

"DIC"

Diisopropylcarbodiimid

"DMF"

N,N-Dimethylformamid

"EDCI"

Ethyldimethylaminopropylcarbodiimid

"HOBT"

Hydroxybenzyltriazol

"NH₂NH₂"

Hydrazin

"Pd"

Palladium(II)

"Ph"

Phenyl

"rt"

Raumtemperatur

"TBAF"

Tetrabutylammoniumfluorid

"TFA"

Trifluroessigsäure

"THF"

Tetrahydrofuran

Nomenklatur
Verbindungen werden gemäß der im Stand der Technik gut bekannten Nomenklatur benannt, wie exemplifiziert, unter Verwendung einer Ringnummerierung wie im Folgenden:
4-[[5-Amino-1-[(3-methyl-2-thienyl)carbonyl]-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid
Namen können unter Verwendung eines auf diesem Beispiel basierenden Nomenklatursystems erzeugt werden oder können unter Verwendung kommerzieller Software zur Benennung von Chemikalien erzeugt werden, wie etwa ACD/Index Name (Advanced Chemistry Development, Inc., Toronto, Ontario).
Allgemeine Syntheseverfahren
Beispielhafte Verbindungen der vorliegenden Erfindung können gemäß den unten beschriebenen allgemeinen Syntheseverfahren synthetisiert werden und sind genauer in den Schemata veranschaulicht, die folgen. Da die Schemata Veranschaulichungen sind, sollte die Erfindung nicht als durch die ausgedrückten chemischen Reaktionen und Bedingungen begrenzt angesehen werden. Die Herstellung der verschiedenen Ausgangsmaterialien, die in den Schemata verwendet werden, liegt innerhalb der Fähigkeiten von auf diesem Gebiet versierten Fachleuten.
Schema A
Um eine Verbindung A3 herzustellen (wie beschrieben in Jenardanan, G.C., Francis, M., Deepa, S., und Rajaskekharan, N.R., Synthetic Communications, 1997, 27, 19, 3457-3462), wurde das Isocyanat, Verbindung A1, (hergestellt gemäß R.L. McKee und R.W. Bost, J. Am. Chem. Soc., 1946, 68, 2506-2507) (worin R₁ ist wie zuvor definiert) in einem geeigneten Lösemittel gelöst und mit einer Suspension von Verbindung A2 und Kaliumhydroxid in Lösemittel vereinigt. Die Mischung wurde erwärmt und gerührt und das Produkt, Verbindung A3 wurde durch Ausfällung mit kaltem Wasser isoliert.
Um eine Verbindung A5 (Reiter, J., Pongo, L. und Dvortsak, P., J. Heterocyclic Chemistry, 1987, 24, 127-142) herzustellen, wurde Verbindung A3 in einem geeigneten Lösemittel gelöst und mit Hydrazin umgesetzt. Das Lösemittel wurde dann verdampft und der Rückstand von Verbindung A3 wurde in einem Alkohol-Lösemittel unter Rückfluß gekocht, um einen Feststoff, Verbindung A4, herzustellen. Verbindung A4 wurde in einem geeigneten Lösemittel gelöst und mit R₃CO₂H oder R₃COCl (worin R₃ ist wie zuvor definiert) und einem Kopplungsreagens, wie etwa DIC (Diisopropylcarbodiimid) oder EDCI (Ethyldimethylaminopropylcarbodiimid), umgesetzt, um die Zielverbindung A5 zu liefern.
Schema B
Alternativ wurde Verbindung B3 gemäß dem veröffentlichten Verfahren (wie beschrieben in Webb, R.L., Eggleston, D.S. und Labaw, C.S., J. Heterocyclic Chemistry 1987, 24, 275-278) hergestellt. Unter Befolgung des Verfahrens von Schema A wurde Verbindung B3 mit Hydrazin umgesetzt, um das Zielzwischenprodukt-Verbindung A4, herzustellen.
Schema C
Verbindung C1 (CAS # 1455-77-2) wurde in einem geeigneten Lösemittel gelöst und mit R₃CO₂H oder R₃COCl (worin R₃ ist wie zuvor definiert) und einem Kopplungsreagens, wie etwa DIC oder EDCI, umgesetzt, um die Verbindung C2 zu liefern. Verbindung C2 wurde gereinigt, in einem geeigneten Lösemittel gelöst und in einer inerten Atmosphäre mit R₁-Halo (wobei R₁ und Halo sind wie zuvor definiert; zusätzlich zu Halo kann R₁ mit einer anderen geeigneten Abgangsgruppe gekoppelt sein) in Gegenwart einer Base, wie etwa Kaliumcarbonat, und einen Katalysators, wie etwa eines Palladium-Komplexes, umgesetzt. Das Produkt, Verbindung A5, wurde unter Verwendung herkömmlicher Mittel isoliert.
Schema D
Alternativ wurde Verbindung D1 (CAS # 24807-56-5) in einem geeigneten Lösemittel gelöst und mit R₁NH₂ in Gegenwart einer Base, wie etwa Kaliumcarbonat, und eines Katalysators, wie etwa eines Palladium-Komplexes, umgesetzt, um die Verbindung D2 zu liefern. Verbindung D2 wurde gereinigt, in einem geeigneten Lösemittel gelöst und katalytischer Hydrierung unterzogen, um Verbindung A4 zu ergeben. Verbindung A4 kann dann verwendet werden, um andere Zielverbindungen der Erfindung, wie beschrieben in Schema A, herzustellen.
Schema E
Verbindung A3 wurde in einem Lösemittel gelöst und mit einer Schutzgruppe, wie etwa substituiertem Benzylhalogenid (zum Beispiel 4-Methoxybenzylbromid), in Gegenwart einer Base (wie etwa Kaliumcarbonat) umgesetzt, um eine Verbindung E1 zu liefern. Verbindung E1 wurde gereinigt, in einem geeigneten Lösemittel gelöst und dann mit R₂-Halo (worin R₂ und Halo sind wie zuvor definiert; zusätzlich zu Halo kann R₂ mit einer anderen geeigneten Abgangsgruppe gekoppelt sein) in Gegenwart einer Base (wie etwa Kaliumcarbonat) umgesetzt, um eine Verbindung E2 zu ergeben. Verbindung E2 wurde mit einem geeigneten Reagens, wie etwa Trifluoressigsäure, behandelt, was bei Erhitzen Verbindung E3 erzeugte. Verbindung E3 wurde in einem geeigneten Lösemittel gelöst und mit R₃CO₂H oder R₃COCl (worin R₃ ist wie zuvor definiert) und einem Kopplungsreagens, wie etwa DIC oder EDCI, umgesetzt, um eine Zielverbindung E4 zu liefern. Das Produkt, Verbindung E4, wurde unter Verwendung herkömmlicher Mittel gereinigt.
Alternativ wurde Verbindung A5, um eine Verbindung E4 herzustellen, in einem geeigneten Lösemittel gelöst und mit R₂-Halo (worin R₂ und Halo sind wie zuvor definiert; zusätzlich zu Halo kann R₂ mit einer anderen geeigneten Abgangsgruppe gekoppelt sein) in Gegenwart einer Base (wie etwa Kaliumcarbonat) umgesetzt.
Spezifische Synthesebeispiele
Spezifische Verbindungen, die repräsentativ für diese Erfindung sind, wurde entsprechend den folgenden Beispielen und Reaktionssequenzen hergestellt. Die Beispiele und die Diagramme, die die Reaktionssequenzen darstellen, werden zur Veranschaulichung angeboten, um beim Verständnis der Erfindung zu helfen, und sollten nicht als die in den Ansprüchen, die danach folgen, angegebene Erfindung in irgendeiner Weise beschränkend angesehen werden. Die dargestellten Zwischenprodukte können auch in den anschließenden Beispielen verwendet werden, um zusätzliche Verbindungen der vorliegenden Erfindung herzustellen. Kein Versuch ist unternommen worden, die in irgendeiner der Reaktionen erhaltenen Ausbeuten zu optimieren. Ein Fachmann würde wissen, wie man solche Ausbeuten durch Routinevariationen der Reaktionszeiten, Temperaturen, Lösemittel und/oder Reagentien erhöht.
¹H- und ¹³C-NMR-Spektren wurden auf einem Spektrometer Bruker AC-300 (300 MHz) unter Verwendung von Tetramethylsilan bzw. DMSO als internen Standards gemessen. Elementaranalysen wurden von Quantitative Technologies Inc. (Whitehouse, New Jersey) erhalten, und die Ergebnisse lagen innerhalb von 0,4% der berechneten Werte, sofern nicht anders erwähnt. Schmelzpunkte wurde in offenen Kapillarröhrchen mit der Apparatur Mel-Temp II (Laboratory Devices Inc.) bestimmt und waren unkorrigiert. Elektrospray-Massenspektren (MS-ES) wurden auf einem Spektrometer Hewlett Packard 59987A aufgezeichnet.
Beispiel 1
4-[[5-Amino-1-(2,6-difluorbenzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid (Vbd 1)
Eine Suspension von 1-Amidino-3,5-dimethylpyrazolnitrat, Verbindung 1C, (2,012 g, 10 mmol) und Kaliumhydroxid-Pulver (0,561 g, 10 mmol) in DMF (8 ml) bei 0°C wurde zu einer DMF-Lösung (3 ml) von Isocyanat, Verbindung 1B, (hergestellt aus Sulfanilamid, Verbindung 1A und Thiophosgen gemäß R.L. McKee und R.W. Bost, J. Am. Chem. Soc., 1946, 68, 2506-2507) zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde auf 50–60°C erwärmt, für 1 h gerührt und dann in 250 ml Eiswasser gegossen. Der resultierende gelbe Feststoff wurde filtriert, mit Wasser gespült und im Vakuum getrocknet, um ein Zwischenprodukt, Verbindung 1D, als gelbes Pulver (2,5513 g) zu ergeben; m.p. 69–80°C (zersetzt); ¹H-NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 7,90 (m, 4H), 6,05 (s, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,20 (s, 3H); (CDCl₃) δ 10,75 (s, br, 1H), 8,35 (s, br, 1H), 7,90 (q, 4H), 7,65 (s, br, 2H), 5,95 (s, 1H), 5,00 (s, br, 2H); MS (ESI) m/z: 353 (M + H⁺).
Hydrazin (1,845 g, 57,58 mmol) wurde zu einer Lösung des Zwischenproduktes, Verbindung 1D, (1,88 g, 5,33 mmol) in THF (60 ml) zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei 50–60°C für 2-3 Stunden kräftig gerührt und dann in vacuo eingedampft. Der Rückstand wurde dann in Methanol (60 ml) unter Rückfluß gekocht und auf rt heruntergekühlt. Der resultierende Feststoff wurde durch Filtration gesammelt und mit Methanol gespült, um Zwischenprodukt, Verbindung 1E, als einen grauen Feststoff herzustellen (0,8722 g, 64%). m.p. 291-296°C (zersetzt); ¹H-NMR (300 MHz, CD₃)₂SO) δ 9,20 (s, 1H), 7,60 (m, 4H), 7,00 (s, 2H), 5,90 (s, 2H); MS (ESI) m/z: 255 (M + H⁺), 277 (M + Na⁺).
2,6-Difluorbenzoylchlorid, Verbindung 1F, (41,4 μl, 0,33 mmol) wurde zu einer Lösung des Zwischenproduktes, Verbindung 1E, (63,6 mg, 0,25 mmol), gelöst in wasserfreiem Pyridin (2,5 ml), in einem Eiswasserbad zugegeben. Die resultierende Reaktionsmischung wurde bei rt für 6 Stunden gerührt und dann in vacuo bis zur Trockne eingedampft. Chromatographiereinigung des Rückstandes mit 10% Methanol/Methylenchlorid und Umkristallisation aus THF/Methylenchlorid ergab Verbindung 1 (50,2 mg, 51%) als ein weißes Pulver. m.p. 149-155°C (zersetzt); ¹H-NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 7,65 (m, 3H), 7,55 (d, 2H), 7,18 (t, 2H); ((CD₃)₂SO) δ 9,86 (s, 1H), 8,03 (s, 2H), 7,72 (m, 1H), 7,58 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,35 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 7,11 (s, 2H), ¹³C-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 160,4, 159,7, 158,9, 157,9, 157,1, 157,0, 156,6, 144,0, 135,6, 133,9, 127,0, 116,3, 112,9, 112,5, 112,3; MS (ESI) m/z: 395 (M + H⁺) (M + H⁺), 4,17 (M + Na⁺). Anal. ber. für C₁₅H₁₂F₂N₆O₃S: C, 45,69; H, 3,07; N, 21,31. Gefunden: C, 45,29; H, 3,04; N, 20,89.
Verbindung 1
Unter Verwendung des Verfahrens für Beispiel 1 wurden die folgenden Verbindungen durch Acylierung mit dem Zwischenprodukt, Verbindung 1E, unter Verwendung des angegebenen Ausgangsmaterial anstelle von Verbindung 1F und Reagens(Reagentien) hergestellt.
Beispiel 2
4-[[5-Amino-1-[(5-ethyl-2-thienyl)carbonyl]-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid (Vbd. 32)
Hydrazin-Monohydrat (0,97 ml, 1,019 mol) und Kaliumhydroxid (1,12 g, 20 mmol) wurden zu einer Lösung von 5-Acetyl-thiophen-2-carbonsäure (1,70 g, 10 mmol) in Diethylenglykol (20 ml) und Wasser (1 ml) zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde in einem Ölbad bei 110°C für 16 Stunden gerührt, auf rt abgekühlt, mit 2N HCl angesäuert und dann mit Methylenchlorid (4 × 50 ml) extrahiert. Organische Schichten wurden vereinigt, getrocknet, konzentriert und Chromatographietrennung auf Silicagel (eluiert mit 10% methanol/Methylenchlorid) unterzogen, um 3-Ethylthiophen-2-carbonsäure, Verbindung 3A, als einen blaßgelben Feststoff herzustellen (1,161 g, 74%). ¹H-NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 7,59 (d, J 3,7, 1H), 6,87 (d, J 3,7, 1H), 2,88 (q, J 7,5, 1H), 1,32 (t, J 7,5, 3H); MS (ESI) m/z: 155 (M – H⁺). Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1 wurde Verbindung 1E mit Verbindung 3A, vermittelt durch DIC/HOBt, in wasserfreiem DMF acyliert, um Verbindung 32 (59% Ausbeute) herzustellen. ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂CO) δ 8,90 (s, br, 1H), 8,25 (d, 1H), 7,88 (q, 4H), 7,45 (s, br, 2H, 7,10 (d, 1H), 6,45 (s, br, 2H), 3,05 (q, 2H), 1,42 (t, 3H); MS (ESI) m/z: 393 (M + H⁺), 415 (M + Na⁺).
Verbindung 32
Beispiel 3
4-[[5-Amino-1-[(3,5-dimethyl-2-thienyl)carbonyl]-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid (Vbd 33)
2,2 Äquivalente 2,0 M LDA-Lösung in Heptan/THF/Ethylbenzol (0,97 ml, 1,019 mol) wurde zu einer Lösung von 3-Methylthiophen-2-carbonsäure (1,42 g, 10 mmol) in wasserfreiem THF (20 ml) bei 0°C zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei 0°C für 1,5 Std. gerührt; dann wurde Methyliodid (1,4 ml, 22 mmol) zugegeben. Die resultierende Mischung wurde bei 0°C für zusätzliche 2 Std. gerührt, mit 2N HCl angesäuert und mit Methylenchlorid (4 × 50 ml) extrahiert. Die organischen Schichten wurden dann vereinigt, konzentriert und über HPLC getrennt, um 3,5-Dimethylthiophen-2-carbonsäure, Verbindung 4A, als ein weißes Pulver zu ergeben. ¹H-NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 6,72 (s, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,46 (s, 3H); MS (ESI) m/z: 155 (M – H⁺). Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1 wurde Verbindung 1E mit Verbindung 4A, vermittelt durch DIC/HOBt, in wasserfreiem DMF acyliert, um Verbindung 33 herzustellen (73% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 9,88 (s, br, 1H), 7,85 (s, br, 2H), 7,78 (q, 4H), 7,18 (s, br, 2H), 6,93 (s, 1H), 2,58 (s, 3H), 2,55 (s, 3H); MS (ESI) m/z: 393 (M + H⁺), 415 (M + Na⁺).
Verbindung 33
Beispiel 4
4-[[5-Amino-1-[2,6-difluor-3-(1-hydroxyethyl)benzoyl]-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid (Vbd 58)
2',4'-Difluoracetophenon (5 g, 32 mmol) wurde mit Natriumborhydrid (1,21 g) in THF (20 ml) und Methanol (10 ml) für 1 Std. umgesetzt. Die resultierende Mischung wurde zur Trockne eingedampft und zwischen Methylenchlorid und Wasser aufgeteilt. Die organische Schicht wurde getrennt, getrocknet und eingedampft, um 1-(2',4'-Difluorphenyl)-ethanol als ein farbloses Öl zu ergeben (4,86 g, 96%). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7,48 (m, 1H), 6,85 (m, 1H), 6,75 (m, 1H), 5,15 (q, 1H), 2,0 (s, 1H), 1,5 (d, 3H). 1-(2',4'-Difluorphenyl)-ethanol (5,384 g, 34 mmol), t-Butyltrimethylsilylchlorid (6,148 g, 40,8 mmol) und Imidazol (5,567 g, 81,8 mmol) in DMF (60 ml) wurden zusammengebracht und bei rt über Nacht gerührt. Die resultierende Mischung wurde im Vakuum zur Trockne eingedampft und dann wurde der Rückstand zwischen Methylenchlorid und Wasser aufgeteilt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet und eingedampft, um 1-(2',4'-Difluorphenyl)-ethyl-t-butyltrimethylsilylether als einen weißen Feststoff zu ergeben (6,88 g, 74%). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7,45 (q, 1H), 6,75 (m, 1H), 6,62 (m, 1H, 5,05 (q, 1H), 1,32 (d, 3H), 0,88 (s, 9H), 0,05 und 0,01 (jeweils s, jeweils 3H). Eine 1,6 M Lösung n-Butyllithium in Hexan (3,75 ml, 6 mmol) wurde tropfenweise zu einer Lösung von 1-(2',4'-Difluorphenyl)-ethyl-t-butyltrimethylsilylether (1,362 g, 5 mmol) in THF (60 ml) bei –50°C zugegeben und wurde bei derselben Temperatur für 3 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde auf Trockeneis gegossen und wurde dann zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und Wasser aufgeteilt, mit Essigsäure angesäuert. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet und eingedampft, um 2,6-Difluor-3-(1-t-butyltrimethylsilyloxyethyl)-benzoesäure, Verbindung 5A, als einen weißen Feststoff zu ergeben (1,57 g, 99%). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7,70 (q, 1H), 7,00 (t, 1H), 6,00 (br, 1H), 5,15 (q, 1H), 1,40 (d, 3H), 0,90 (s, 9H), 0,12 und 0,05 (jeweils s, jeweils 3H).
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1 wurde Verbindung 1E mit Verbindung 5A, vermittelt durch DIC/HOBt, in wasserfreiem DMF acyliert, um 4-[[5-Amino-1-(2,6-difluor-3-(1-t-butyltrimethylsilyloxyethyl)-benzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid, Verbindung 5B, zu liefern (46% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7,72 (m, 3H), 7,38 (d, 2H), 7,02 (t, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,45 (s, 2H), 5,15 (q, 1H), 4,68 (s, 2H), 1,15 (d, 3H), 0,92 (s, 9H), 0,10 (s, 3H), 0,02 (s, 3H); MS (ESI) m/z: 553 (M + H⁺), 575 (M + Na⁺). 4-[[5-Amino-2-(2,6-difluor-3-(1-t-butyltrimethylsilyloxyethyl)-benzoyl)-2H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid (ein geringfügigeres Regioisomer) wurde ebenfalls aus der Reaktionsmischung isoliert (192 mg, 34%). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 10,00 (s, 1H), 7,92 (d, 2H), 7,82 (d, 2H), 7,70 (q, 1H), 7,02 (t, 1H), 5,18 (q, 1H), 4,82 (s, 2H), 4,32 (s, 2H), 1,42 (d, 3H), 0,92 (s, 9H), 0,10 (s, 3H), 0,02 (s, 3H); MS (ESI) m/z: 553 (M + H⁺), 575 (M + Na⁺).
0,7 ml 1,0 M TBAF-Lösung in THF wurde zu einer Lösung von 4-[[5-Amino-1-(2,6-difluor-3-(1-t-butyltrimethylsilyloxyethyl)-benzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]-amino]-benzolsulfonamid, Verbindung 5B, (193 mg, 0,35 mol) in THF (10 ml) zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei rt für 1 Std. gerührt und zur Trockne eingedampft. Der resultierende Rückstand wurde dann Säulenchromatographie auf Silicagel mit 20% Methanol/Methylenchlorid unterzogen, um das Produkt, Verbindung 58, als einen weißen Schaum zu ergeben (90 mg, 59%). ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 9,85 (s, 1H), 8,00 (s, 2H), 7,75 (m, 1H), 7,55 (m, 2H), 7,45 (m, 2H), 7,30 (t, 1H), 7,10 (s, 2H), 6,80 (s, 1H), 5,55 (d, 1H), 5,00 (m, 1H), 1,38 (d, 3H); MS (ESI) m/z: 421 (M + H⁺ – H₂O), 439 (M + H⁺), 461 (M + Na⁺).
Verbindung 58
Beispiel 5
4-[[5-Amino-1-(2,6-difluorbenzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonsäure (Vbd 59)
Das Natriumsalz von 4-Sulfophenylisothiocyanat, Verbindung 6B, (hergestellt unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1) wurde mit 1-Amidino-3,5-dimethylpyrazolnitrat, Verbindung 1C, umgesetzt, um Verbindung 6C herzustellen, die mit Hydrazin umgesetzt wurde, um Verbindung 6D herzustellen. ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 11,1 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 7,3 (m, 4H), 5,85 (s, 2H); MS (ESI) m/z: 256 (M + H⁺). Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1 wurde Verbindung 6D mit 2,6-Difluorbenzoylchlorid, Verbindung 1F, in wasserfreiem Pyridin acyliert, um Verbindung 59 herzustellen (4% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 9,35 (s, 1H), 7,95 (s, 2H), 7,82 (m, 2H), 7,45-7,25 (m, 5H); MS (ESI) m/z: 396 (M + H⁺).
Unter Verwendung des Verfahrens für Beispiel 5 wurden die folgenden Verbindungen durch Acylierung des Zwischenproduktes Verbindung 6D unter Verwendung des angegebenen Ausgangsmaterials anstelle von Verbindung 1F und Reagens(Reagentien) hergestellt:
Beispiel 6
4-[[5-Amino-1-(2,6-difluorbenzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-N-ethyl-benzolsulfonamid (Vbd 76)
Verbindung 1 (100 mg, 0,254 mmol) wurde mit 1,2 Äquivalenten Ethyltrifluormethansulfonat (Et-TFMS) (40 μl, 0,305 mmol) und 1,5 Äquivalenten Kalium-t-butoxid (K-t-Bo) (0,38 mmol, 381 μl einer 1,0 THF-Lösung) in THF (5 ml) bei 50°C unter Rühren für 16 Stunden umgesetzt. Reinigung der Reaktionsmischung durch Säulenchromatographie in 10% Methanol/Methylenchlorid ergab das Produkt, Verbindung 76 (27,1 mg, 25% Ausbeute). ¹H-NMR (400 MHz, (CD₃)₂SO) δ 9,87 (s, 1H), 8,00 (s, 2H), 7,76-7,68 (m, 1H), 7,55-7,48 (m, 4H), 7,34 (t, 2H), 7,22 (t, 1H), 2,73-2,67 (m, 2H), 0,94 (t, 3H); MS (ESI) m/z: 423 (M + H⁺)
Verbindung 76
Beispiel 7
4-[[5-Amino-1-(2,6-difluorbenzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-N-methylbenzolsulfonamid (Vbd 80)
t-BuOK (23,1 ml, 1,0 M Lösung in t-BuOH, 23,1 mmol) wurde tropfenweise zu einer Lösung von 4-Isothiocyanat-N-methylbenzolsulfonamid, Verbindung 13B, (hergestellt unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1) (4,8 g, 21,0 mmol) und 2,5-Dimethylpyrazol-1-carboximidinnitrat, Verbindung 1C (4,2 g, 21,0 mmol) in DMF (20 ml) zugegeben. Die Mischung wurde für 2 h auf 60°C erhitzt, dann in Eis gegossen. Der Niederschlag wurde durch Filtration gesammelt und mit Wasser gewaschen, dann luftgetrocknet, um 4-[3-(3,5-Dimethylpyrazol-1-yliminomethyl)thioureido]-N-methylbenzolsulfonamid, Verbindung 13C, als einen gelben Feststoff zu liefern (7,3 g, 95% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 8,01 (s, 1H), 7,71 (m, 4H), 6,15 (s, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,22 (s, 6H); MS (ESI) m/z: 367 (M + H⁺). Hydrazin (3,3 g, 110,0 mmol) bei 0°C wurde zu einer Suspension von 4-[3-(3,5-Dimethylpyrazol-1-yliminomethyl)thioureido]-N-methylbenzolsulfonamid, Verbindung 13C, (2,0 g, 5,5 mmol) in THF (20 ml) zugegeben. Die Mischung wurde für 2 Std. auf 60°C erhitzt, dann in Eis gegossen. Der Niederschlag wurde durch Filtration gesammelt, mit Wasser und CH₂Cl₂ gewaschen, dann luftgetrocknet, um Verbindung 13D als einen weißen Feststoff herzustellen (1,3 g, 87% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 11,36 (s, 1H), 9,31 (s, 1H), 7,63 (q, 4H), 7,09 (q, 1H), 6,05 (s, 2H), 2,39 (d, 3H); MS (ESI) m/z: 269 (M + H⁺). Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1 wurde Verbindung 13D mit 2,6-Difluorbenzoylchlorid, Verbindung 1F, in wasserfreiem Pyridin acyliert, um Verbindung 80 herzustellen (80% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 7,64 (m, 1H9, 7,63 (d, 2H), 7,53 (d, 2H), 7,15 (t, 2H), 2,43 (s, 3H); MS (ESI) m/z: 409 (M + H⁺)
Verbindung 80
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 7 wurden die folgenden Verbindungen durch Acylierung des Zwischenproduktes Verbindung 13D unter Verwendung des angegebenen Ausgangsmaterials anstelle von Verbindung 1F und Reagens(Reagentien) hergestellt:
Beispiel 8
1-[(3,5-Dimethyl-2-thienyl)carbonyl]-N³-[4-(1H-imidazol-1-yl)phenyl]-1H-1,2,4-triazol-3,5-diamin (Vbd 85)
4-Isothiocyanato-N,N-dimethylbenzolsulfonamid, Verbindung 14B, (hergestellt unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 1) (1,8 g, 7,4 mmol) wurde mit 2,5-Dimethylpyrazol-1-carboximidinnitrat, Verbindung 1C, (1,5 g, 7,4 mmol) und t-BuOK (7,4 ml, 1,0 M Lösung in t-BuOH, 7,4 mmol) umgesetzt, um 4-[3-(3,5-Dimethylpyrazol-1- yliminomethyl)thioureido]-N,N-dimethylbenzolsulfonamid, Verbindung 14C, als einen gelben Feststoff herzustellen (2,5 g, 89% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 10,05 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 7,67 (m, 4H), 6,15 (s, 1H), 2,57 (s, 6H), 2,18 (s, 6H); MS (ESI) m/z: 381 (M + H⁺). Verbindung 14C (2,5 g, 6,6 mmol) wurde mit Hydrazin (4,2 g, 132,0 mmol) umgesetzt, um 1,7 g (90%) von Verbindung 14D als einen weißen Feststoff herzustellen. ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 9,47 (s, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 6,10 (s, 1H), 2,67 (s, 6H); MS (ESI) m/z: 283 (M + H⁺). Verbindung 14D wurde mit 3,5-Dimethylthiophen-2-carbonsäure, Verbindung 1F, vermittelt durch DIC/HOBt, in DMF acyliert, um Verbindung 85 herzustellen (52% Ausbeute). ¹H-NMR (300 MHz, (CD₃)₂SO) δ 9,93 (s, 1H), 7,88 (d, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,65 (d, 2H), 6,90 (s, 1H), 2,60 (s, 6H), 2,56 (s, 3H), 2,54 (s, 3H); MS (ESI) m/z: 421 (M + H⁺).
Verbindung 85
Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 8 wurden die folgenden Verbindungen durch Acylierung des Zwischenproduktes Verbindung 14D unter Verwendung des angegebenen Ausgangsmaterials anstelle von Verbindung 14E und Reagens(tien) hergestellt:
Biologische Beispiele
Die Nützlichkeit der Verbindungen, um eine durch Cyclin-abhängige Kinase oder Tyrosin-Kinasevermittelte Störung zu behandeln oder zu lindern, wurde unter Verwendung der folgenden Verfahren bestimmt.
Beispiel 1
CDK1-Screeningtest
Eine Kinase-Reaktionsmischung wurde hergestellt, die 50 mM Tris-HCl pH = 8, 10 mM MgCl₂, 0,1 mM Na₃PO₄, 1 mM DTT, 10 μM ATP, 0,025 μM biotinyliertes Histon-H1-Peptidsubstrat und 0,2 μCuries pro Vertiefung ³³P-γ-ATP [2000–3000 Ci/mmol] enthielt. 70 μl der Kinase-Reaktionsmischung wurden in die Vertiefung einer mit Streptavidin beschichteten FlashPlate^® (Cat. # SMP103, NEN, Boston, MA) eingebracht. Dann wurde 1 μl Testverbindungsvorrat in 100% DMSO zu den Vertiefungen zugegeben, was zu einer Endkonzentration von 1% DMSO in der Reaktion mit einem Endreaktionsvolumen von 100 μl führte. Als nächstes wurde CDK1:Cyclin-B-Protein in 50 mM Tris-HCl pH = 8,0, 0,1% BSA auf einer Konzentration von 1 ng pro μl verdünnt, und 30 μl (30 ng Enzym pro Testvertiefung) wurden zu jeder Vertiefung zugegeben, um die Reaktion einzuleiten. Die Reaktion würde für eine Stunde bei 30°C inkubiert. Am Ende der 1-stündigen Inkubation wurde die Reaktion durch Absaugen der Reaktionsmischung von der Platte und zweimaliges Waschen der Vertiefung mit PBS, das 100 mM EDTA enthielt, abgebrochen. Das Histon-H1-biotinylierte Peptidsubstrat wurde auf der FlashPlate^® immobilisiert und der Einbau von ³³P-γ-ATP wurde durch Ablesen der Platte auf einem Szintillationszähler gemessen. Hemmung der enzymatischen Aktivität von CDK1 wurde durch Beobachtung einer verringerten Menge ³³P-γ-ATP, das eingebaut ist in das immobilisierte Peptid, gemessen.
VEGF-R-Screeningtest
Eine Kinase-Reaktionsmischung wurde hergestellt, die 50 mM Tris-HCl pH = 8, 10 mM MgCl₂, 0,1 mM Na₃PO₄, 1 mM DTT, 10 μM ATP, 0,025 μM biotinyliertes Peptidsubstrat und 0,8 μCuries pro Vertiefung ³³P-γ-ATP [200–3000 Ci/mmol] enthielt. 70 μl der Kinase-Reaktionsmischung wurde in die Vertiefung einer mit Streptavidin beschichteten FlashPlate^® (Cat. # SMP103, NEN, Boston, MA) eingebracht. Dann wurde 1 μl Testverbindungsvorrat mit 100% DMSO in die Vertiefungen zugegeben, was zu einer Endkonzentration von 1% DMSO in der Reaktion mit einem Endreaktionsvolumen von 100 μl führte. Als nächstes wurde lösliche Ratten-Tyrosin-Kinase, die eine N-terminale 6XHIS-Markierung enthielt, in 50 mM Tris-HCl pH = 8,0, 0,1% BSA auf eine Konzentration von 5 ng pro μl verdünnt, und 30 μl (150 ng Enzym pro Testvertiefung) wurden zu jeder Vertiefung zugegeben, um die Reaktion einzuleiten. Die Reaktion wurde für eine Stunde bei 30°C inkubiert. Am Ende der 1-stündigen Inkubation wurde die Reaktion unter Absaugen der Reaktionsmischung von der Platte und zweimaliges Waschen der Vertiefung mit PBS, das 100 mM EDTA enthielt, abgebrochen. Das PLC1-biotinylierte Peptidsubstrat wurde auf der FlashPlate^® immobilisiert und der Einbau von ³³P-γ-ATP wurde durch Ablesen der Platte auf einem Szintillationszähler gemessen. Hemmung der enzymatischen Aktivität des VEGF-R wurde durch Beobachten einer verringerten Menge ³³P-γ-ATP, das in das immobilisierte Peptid eingebaut ist, gemessen.
IC₅₀-Daten für VEGF-R und CDK sind in Tabelle 1 dargestellt. IC₅₀-Werte, die als > 10 oder > 100 aufgelistet sind, geben keine beobachtete 50% Hemmung bei der höchsten getesteten Dosis an, noch wurde ein Hemmungsmaximum beobachtet. ND bedeutet nicht getestet.
Tabelle 1
Beispiel 2
Kinase-Selektivitätstests
Tests, um Verbindungshemmung anderer Kinasen zu testen, wurden unter Verwendung von Methoden durchgeführt, die die Phosphorylierungsmenge eines biotinylierten Peptidsubstrats messen. Biotinylierte Peptidsubstrate wurden aus der Literatur als angemessen für das zu bewertende Enzym ausgewählt. Das allgemeine Verfahren, das verwendet wurde, um auf Kinase-Aktivität zu testen, ist wie folgt: Ein Kinase-Reaktionsgemisch wurde in 50 mM Tris-HCl pH = 8, 10 mM MgCl₂, 0,1 mM Na₃VO₄, 1 mM DTT, 10 μM ATP, 0,25-1 μM biotinyliertem Peptidsubstrat, 0,2–0,8 μCuries pro Vertiefung ³³P-γ-ATP [2000–3000 Ci/mmol] hergestellt. Die Testbedingungen variieren hierin leicht für jede Proteinkinase, zum Beispiel erfordert Insulinrezeptor-Kinase 10 mM MnCl₂ für Aktivität und Calmodulin-abhängige Proteinkinase erfordert Camodulin und 10 mM CaCl₂. Diese Testbedingungen sind im Stand der Technik bekannt. Die Reaktionsmischung wurde in die Vertiefungen einer mit Streptavidin beschichteten FlashPlate eingebracht und 1 μl Arzneistoffvorrat in 100% DMSO wurde zu einem 100 μl-Reaktionsvolumen zugegeben, was zu einer Endkonzentration von 1% DMSO in der Reaktion führte. Enzym wurde in 50 mM Tris-HCl pH = 8,0 0,1% BSA verdünnt und zu jeder Vertiefung zugegeben. Die Reaktion wurde für eine Stunde bei 30°C in Gegenwart von Verbindung inkubiert. Nach einer Stunde wurde das Reaktionsgemisch von der Platte abgesaugt. Die Platte wurde mit PBS, das 100 mM EDTA enthielt, gewaschen. Die Platte wurde auf einem Szintillationszähler abgelesen, um ³³P-γ-ATP, das in das immobilisierte Peptid eingebaut ist, zu bestimmen. Testverbindungen wurden doppelt bei 8 Konzentration [100 μM, 10 μM, 1 μM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, 100 pM, 10 pM] getestet. Ein maximales und minimales Signal für den Test wurde auf jeder Platte bestimmt. Die IC₅₀ wurde aus der Dosis-Reaktions-Kurve der prozentualen Hemmung des maximalen Signals im Test gemäß der Formel [maximales Signal – Hintergrund/Testverbindungssignal – Hintergrund (100) = % Hemmung] durch Auftragen der prozentualen Hemmung gegen die logarithmische Konzentration der Testverbindung berechnet. Bekannte Inhibitorverbindungen, die für die zu testende Kinase geeignet sind, wurden ebenfalls auf jeder Platte einbezogen.
Definition und Herkunft von Kinase-Enzymen

VEGF-R (Gefäßendothelwachstumsfaktorrezeptor-2) ist ein Fusionsprotein, das eine Polyhistidin-Markierung am N-Terminus enthält, gefolgt von den Aminosäuren 786-1343 der Ratten-VEGF-R2-Kinase-Domäne (GenBank Accession #U93306). CDK1 (Cyclin-abhängige Kinase 1) wurde aus Insektenzellen isoliert, die sowohl die menschliche CDK1-Katalyseuntereinheit als auch ihre positive regulatorische Untereinheit Cyclin B exprimieren (New England Biolabs, Beverly, MA, Cat. # 6020). CDK2 in Komplex mit Cyclin A ist kommerziell erhältlich (Upstate Biotech, Lake Placid, NY). Der CDK4-Komplex bestand aus einem Mäuse-CDK4-Protein und einem Mäuse-Cyclin-D1-Protein. (Das Mäuse-CDK4-Protein war genetisch verschmolzen mit einer N-terminalen Flag-Epitop-Markierung und das Mäuse-Cyclin-D1-Protein war verschmolzen mit einer N-terminalen AU-1-Epitop-Markierung. Die Gene, die diese Proteine codieren, wurden auf kommerziell erhältliche bacoluvirale Vektoren übertragen. Der rekombinante CDK4/D1-Komplex wurde dann durch Coinfektion von kommerziell verfügbaren Insektenzellen mit Viren, die diese zwei Konstrukte tragen, hergestellt). Insulinrezeptor-Kinase besteht aus den Resten 941-1313 der cytoplasmatischen Domäne der Beta-Untereinheit des Humaninsulinrezeptors (BIOMOL, Plymouth Meeting, PA, Cat. #SE-195). Proteinkinase A ist die katalytische Untereinheit von cAMP-abhängiger Proteinkinase-A, aufgereinigt aus Rinderherz (Upstate Biotech, Lake Placid, NY, Cat#14-114). PKC (Proteinkinase-C) ist die Gamma- oder Beta-Isoform des menschlichen Proteins, produziert in Insektenzellen (BIOMOL, Plymouth Meeting, PA, Cat. #SE-143). Casein-Kinase 1 ist eine Trunkation an Aminosäure 318 des C-terminalen Abschnitts der Ratten-CK1-Delta-Isoform, erzeugt in E.coli (New England Biolabs, Beverly, MA, Cat. #6030). Casein-Kinase 2 schließt die Alpha- und Beta-Untereinheiten des menschlichen CK2-Proteins, erzeugt in E.coli (New England Biolabs, Beverly, MA, Cat. #6010), ein. Calmodulin-Kinase (Calmodulin-abhängige Proteinkinase 2) ist eine verkürzte Version der Alpha-Untereinheit des Rattenproteins, erzeugt in Insektenzellen (New England Biolabs, Beverly, MA, Cat. #6060). Glykogensynthase-Kinase-3 ist die Beta-Isoform des Kaninchenenzyms, erzeugt in E. coli (New England Biolabs, Beverly, MA, Cat. #6040). MAP-Kinase ist die Ratten-ERK-2-Isoform, die eine Polyhistidin-Markierung am N-Terminus enthält, erzeugt in E. coli und aktiviert durch Phosphorylierung mit MEK1 vor Reinigung (BIOMOL, Plymouth Meeting, PA, Cat. #SE-137). ERK-1-Protein (abgesetzt von Calbiochem). EGFR (Epidermiswachstumsfaktorrezeptor) ist aufgereinigt aus menschlichen A431-Zellmembranen (Sigma, St. Louis, MO, Cat. #E3641). PDGF-R (aus Thrombozyten gewonnener Wachstumsfaktorrezeptor) ist ein Fusionsprotein, das eine Polyhistidin-Markierung am N-Terminus enthält, gefolgt von den Nukleotiden 1874-3507 der menschlichen PDGF-R-Beta-Untereinheit-Kinase-Domäne (Accession #M21616). Das HER2(menschlicher Epidermiswachstumsfaktorrezeptor-2)-Konstrukt enthält eine Polyhistidin-Markierung am N-Terminus, gefolgt von 24 zusätzlichen Aminosäuren, und beginnt bei Aminosäure 676, gefolgt vom Rest der HER2-Cytoplasma-Domäne. Peptidsubstrate

VEGF-R	(Biotin)KHKKLAEGSAYEEV-Amid
CDK1	(Biotin)KTPKKAKKPKTPKKAKKL-Amid

CDK2	(Biotin)KTPKKAKKPKTPKKAKKL-Amid
CDK4	(GST)Aminosäuren 769-921 aus Retinoblastom
EGF-R	(Biotin)Poly(GT) 4:1
Proteinkinase A	(Biotin)GRTGRRNSI-Amid
PKC	(Biotin)RFARKGSLRQKNV-NH2
Casein-Kinase 1	(Biotin)KRRRALS(phospho)CASLPGL-Amid
Casein-Kinase 2	(Biotin)RREEETEEE-Amid
Calmodulin-Kinase	(Biotin)KKALRRQETVDAL-Amid
GSK-3	(Biotin)KRREILSRRP(phospho)SYR-Amid
MAP-Kinase ERK-1	(Biotin)APRTPGGRR-Amid
MAP-Kinase ERK-2	(Biotin)APRTPGGRR-Amid
Insulin-Kinase	(Biotin)TRDIYETDYYRK-Amid
FGF-R2	(Biotin)Poly(GT) 4:1
PDGF-R	(Biotin)KHKKLAEGSAYEEV-Amid
HER2	(Biotin)KHKKLAEGSAYEEV-Amid

Die IC₅₀-Daten für verschiedene Kinasen sind in Tabelle 2a bis Tabelle 2g dargestellt. IC₅₀-Werte, die als > 10 oder > 100 aufgelistet sind, zeigen keine beobachtete 50% Hemmung beider höchsten getesteten Dosis für den angegebenen Test an, noch wurde ein Hemmungsmaximum beobachtet. Werte, die als ~10 dargestellt sind, zeigen einen ungefähren Wert auf der Basis einer beobachteten 50% Hemmung an. ND bedeutet nicht getestet.
Tabelle 2a Kinase-Selektivität
Tabelle 2b Kinase-Selektivität
Tabelle 2c Kinase-Selektivität
Tabelle 2d Kinase-Selektivität
Tabelle 2e Kinase-Selektivität
Tabelle 2f Kinase-Selektivität
Tabelle 2g Kinase-Selektivität
Beispiel 3
Test, um die Hemmung von Zellproliferation zu messen
Die Fähigkeit einer Testverbindung, die Proliferation des Zellwachstums zu hemmen, wurde durch Messen des Einbaus von ¹⁴C-markiertem Thymidin in neu synthetisierte DNA innerhalb der Zellen bestimmt. Diese Methode wurde an Zelllinien verwendet, die aus Karzinomen gewonnen wurden, die aus mehreren Geweben stammten, wie etwa HeLa-Gebärmutterhalsadenokarzinom (American Type Culture Collection (ATCC), Virginia, Cat. #CCL-2), A37S malignes Melanom (ATCC CRL-1619), SK-OV-3 Eierstock-Adenokarzinom (ATCC-HTB-77), HCT-116 Dickdarm-Karzinom (CCL-247), PC-3 Prostata-Adenokarzinom (ATCC CRL-1435) und MDA-MB-231 (Xenogen Corp.). Auf diese Weise kann die Wirkung einer Verbindung auf das Zellwachstum von Zellen mit vielen unterschiedlichen Phänotypen bestimmt werden. Zellen wurden trypsinisiert und gezählt und 3000–8000 Zellen wurden zu jeder Vertiefung auf einer mit CytoStar-Gewebekultur behandelten Szintillationsmikroplatte mit 96 Vertiefungen (Amersham #RPNQ0160) in vollständigem Medium in einem Volumen von 100 μl zugegeben. Zellen wurden für 24 Stunden in vollständigem Medium bei 37°C in einer Atmosphäre inkubiert, die 5% CO₂ enthielt.
Als nächstes wurde 1 μl Testverbindung in 100% DMSO zu den Vertiefungen der Platte zugegeben. Nur DMSO wurde zu Kontrollvertiefungen zugegeben. Zellen wurden für 24 weitere Stunden in vollständigem Medium bei 37°C in einer Atmosphäre inkubiert, die 5% CO₂ enthielt. Methyl-¹⁴C-thymidin 56 mCi/mmol (NEN #NEC568 oder Amersham #CFA532) wurde in vollständigem Medium verdünnt und 0,2 μCi/Vertiefung wurden zu jeder Vertiefung der CytoStar-Platte in einem Volumen von 20 μl zugegeben. Die Platte wurde für 24 Stunden bei 30°C plus 5% CO₂ in Arzneistoff plus ¹⁴C-Thymidin inkubiert. Die Inhalte der Platte wurden in einen ¹⁴C-Radioaktivabfallbehälter durch Umdrehen der Platte verworfen und die Platte wurde zweimal mit 200 μl PBS gewaschen. 200 μl PBS werden zu jeder Vertiefung zugegeben. Die Oberseite der Platte wurde mit einem durchsichtigen Plattenverriegeler verriegelt und ein weißer Plattenrückseitenverriegeler (Packard #6005199) wurde auf den Boden der Platte aufgebracht. Der Grad an Einbau von Methyl-¹⁴C-thymidin wurde auf einem Packard Top Count quantifiziert.
Tabelle 3 Hemmung der Zellproliferation (IC₅₀ μM)
Beispiel 4
In-Vivo-Modelle – Hemmung des Tumorwachstums
Die in-vivo-Wirkung einer Verbindung auf das Wachstum menschlicher Tumorzellen kann durch Implantieren menschlicher Tumorzellen in die Hinterflanke athymischer Mäuse und Verabreichen von Testverbindung an die Mäuse bewertet werden. Menschliche Tumorzellen, die aus einer Vielzahl menschlicher Tumortypen stammen, wie etwa A375 menschlichen Melanomzellen, werden subkutan in die Hinterflanke männlicher athymischer Mäuse (Charles River) implantiert, und man läßt für 6-10 Tage einen meßbaren Tumor sich etablieren, bestimmt durch Zirkelmessungen. Testverbindung wird dann durch intraperitoneales Injizieren der Verbindung, die in einem geeigneten Vehikel formuliert ist, in die Mäuse einmal täglich für 30 Tage verabreicht. Die Testverbindung kann auch über andere Wege verabreicht werden, wie etwa oral, subkutan oder durch intravenöse Infusion. Die Größe des Tumors in dieser Studie wird alle vier Tage gemessen und der Grad der Hemmung wird durch Vergleichen von mit Arzneistoff behandelten Tieren mit Tieren, denen nur Vehikel injiziert wird, bestimmt.
Die synergistische Wirkung oder Verstärkung herkömmlichen therapeutischen Mittels durch eine Testverbindung kann auch mit diesem Modell durch Vergleichen von Tieren, die mit der Standardtherapie allein behandelt werden und Tieren, die mit Testverbindung plus derselben Standardtherapie behandelt werden, bestimmt werden. Ein additiver Effekt auf die Verzögerung des Tumorwachstums wird beobachtet werden, wenn synergistische Wirkung aufgrund von Testverbindung auftritt.

Claims

Verbindung der folgenden Formel: Formel (I)
worin R₄ ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus C_1-8-Alkyl; C_1-8-Alkoxy; -CO₂H; Amino; -SO₂-, substituiert mit Amino, wobei Amino mit zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus Wasserstoff und C_1-8-Alkyl; Cycloalkyl; und Aryl; X -C(O)- ist; und R₃ ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus: Cycloalkyl, Thienyl, Imidazolinyl, Thiazolyl und Aryl; wobei Cycloalkyl, Thienyl, Imidazolinyl und Aryl fakultativ mit 1 bis 3 Substituenten substituiert sind, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, die aus Cyano, Halo, Hydroxy und Nitro besteht; und wobei Cycloalkyl, Aryl, Thienyl, Imidazolinyl oder Thiazolyl fakultativ mit 1 bis 2 Substituenten substituiert sind, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus: C_1-8-Alkyl, C_2-8-Alkenyl; -CH(OH)-(C_1-8)-Alkyl; C_1-8-Alkoxy; -CO₂H; Amino; und pharmazeutisch annehmbare Salze derselben.
Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß C, R₃ und R₄ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus:
Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß X, R₃ und R₄ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus:
Verbindung nach Anspruch 1, die ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus: 4-[[5-Amino-1-(2-chlor-6-fluor-3-methylbenzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid; 4-[[5-Amino-1-(2-chlor-6-fluorbenzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-benzolsulfonamid; 4-[[5-Amino-1-(2,6-difluor-3-methylbenzoyl)-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-N-methylbenzolsulfonamid; 4-[[5-Amino-1-[(3-methyl-2-thienyl)carbonyl]-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-N-methylbenzolsulfonamid; und 4-[[5-Amino-1-[(3-methyl-2-thienyl)carbonyl]-1H-1,2,4-triazol-3-yl]amino]-N-[2-(dimethylamino)ethyl]-benzolsulfonamid.
Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß X, R₃ und R₄ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe, bestehend aus:
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 und einen pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoff umfasst.
Pharmazeutische Zusammensetzung, hergestellt durch Vermischen einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 und eines pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoffes.
Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, das das Vermischen einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 und eines pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoffes umfasst.
Verwendung einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung oder Linderung einer Kinase-vermittelten Erkrankung.
Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Erkrankung durch selektive Hemmung einer Kinase vermittelt ist, die ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus einer Cyclin-abhängigen Kinase und einer Tyrosinkinase besteht.
Verwendung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß die Kinase ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus Cyclin-abhängiger Kinase-1, Cyclin-abhängiger Kinase-2, Cyclin-abhängiger Kinase-4, Gefäßendothelwachstumsfaktorrezeptor-2, Endothelwachstumsfaktorrezeptor und menschlichem Epidermiswachstumsfaktorrezeptor-2 besteht.
Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Erkrankung durch duale Hemmung von wenigstens zwei Kinasen vermittelt ist, die ausgewählt sind aus der Gruppe, die aus einer Cyclin-abhängigen Kinase und einer Tyrosinkinase besteht.
Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens zwei Kinasen ausgewählt sind aus der Gruppe, die aus Cyclin-abhängiger Kinase-1, Cyclin-abhängiger Kinase-2, Cyclin-abhängiger Kinase-4, Gefäßendothelwachstumsfaktorrezeptor-2, Endothelwachstumsfaktorrezeptor und menschlichem Epidermiswachstums-faktorrezeptor-2 besteht.
Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß die therapeutisch wirksame Menge der Verbindung von 0,001 mg/kg/Tag bis 300 mg/kg/Tag beträgt.
Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Kinase-vermittelte Erkrankung ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus Krebs und Tumorwachstum, Tumorvaskularisierung, Angiopathie, Angiogenese, durch Chemotherapie induzierte Alopezie und Restenose besteht.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zur Herstellung eines Arzneimittels, das als ein Begleitmittel zu Chemotherapie und Strahlungstherapie verwendet werden soll.
Verwendung einer therapeutisch wirksamen Menge einer pharmazeutischen Zusammensetzung nach Anspruch 6 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung oder Linderung einer Kinase-vermittelten Erkrankung.
Verwendung nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, daß die therapeutisch wirksame Menge der pharmazeutischen Zusammensetzung von 0,001 mg/kg/Tag bis 300 mg/kg/Tag beträgt.
Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß das Arzneimittel in Kombination mit einer wirksamen Menge wenigstens eines weiteren Mittels verwendet wird.
Verwendung nach Anspruch 19, dadurch gekennzeichnet, daß das wenigstens eine weitere Mittel ein chemotherapeutisches Mittel ist, um Krebs zu behandeln.
Verwendung nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß die Dosis des chemotherapeutischen Mittels relativ zu der Dosis verringert wird, die bei Abwesenheit der therapeutisch wirksamen Menge der Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 10 gegeben würde.
Verwendung nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß das Arzneimittel vor, während oder nach dem chemotherapeutischen Mittel verwendet wird.