DE60003158T2

DE60003158T2 - Benzimidazolverbindungen zur anwendung als therapeutisch wirksame substanzen, verfahren zur herstellung dieser verbindungen und pharmazeutische zusammensetzungen die diese enthalten

Info

Publication number: DE60003158T2
Application number: DE60003158T
Authority: DE
Inventors: Eric Desarbre; Charles Hedgecock; Guido Kurz; Marguerite Luthman; Martin Norin; Cathrin Widerst Hl
Original assignee: Pharmacia AB
Current assignee: Pfizer Health AB
Priority date: 1999-01-25
Filing date: 2000-01-24
Publication date: 2003-12-04
Anticipated expiration: 2020-01-25
Also published as: DE60003158D1; AU2340600A; JP2002535325A; NZ512597A; AU760346B2; WO2000043387A1; EP1155014B1; SE9900211D0; DK1155014T3; ES2202045T3; EP1155014A1; CA2359107A1; PT1155014E; ATE242237T1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Benzimidazolverbindungen der folgenden allgemeinen Struktur (I):
worin:
Y-X ist > C=X, wenn X NR8, O oder S ist und R2 H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; eine gerade oder verzweigte Kette, substituiert mit einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist; oder
Y-X ist > C-X, wenn X H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, CORB und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist, oder X OR9 oder NHR9 ist und R2 eine Bindung zu Y ist;
Z = O, S oder NR12;
R1 ist H, Methyl, Propyl, Butyl oder Isoformen davon, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8;
R3 ist H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, oder R3 ist OR9 oder NHR9;
R4, R5, R6, R7 sind H, Halogen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8, COORB, CONHR8 und/oder R3 in jedweder Kombination, und/oder zwei benachbarte R4, R5, R6 oder R7 bilden einen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring;
R8, R9, R10, R11, R12 und R13 sind H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette, substituiert mit einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen und/oder einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 in einer beliebigen Kombination.
Die in der Formel (I) eingeschlossenen Verbindungen sind brauchbar als ein humanes Wachstumshormon (hGH)-Mimetikum, welches GH-Agonisten-Wirkungen in Tieren auslöst, und insbesondere als ein oral verfügbares humanes Wachstumshormon (hGH) brauchbar.

Einführung

HGH ist ein Protein, welches aus einer Einzelkette von 191 Aminosäuren besteht. Das Molekül ist durch zwei Disulfid-Brücken verknüpft, und die monomere Form besitzt ein Molekulargewicht von 22 kDa. Rekombinantes hGH (22 kDa) war mehrere Jahre lang im Handel verfügbar. Es ist gegenüber den pituitär abgeleiteten Produkten bevorzugt, da das aus menschlichem Gewebe hergestellte Produkt infektiöse Mittel, wie jenes für die Kreuzfeld-Jakob-Erkrankung enthalten kann. Zwei Typen von therapeutisch brauchbaren Rekombinanten-hGH-Präparationen sind auf dem Markt vorhanden: die natürliche Sequenz, z. B. Genotropin®, Kabi Pharmacia AB und ein analoges mit einem zusätzlichen Methionin-Rest an dem N-terminalen Ende, z. B. Somatonorm®.
hGH wird verwendet, um das lineare Wachstum in Patienten mit hypopituitärem Zwergentum oder Turner-Syndrom zu stimulieren, jedoch sind andere Indikationen ebenfalls vorgeschlagen worden.
Das Protein hGH muß durch Injektion verabreicht werden, und es besteht ein Bedarf nach einer oral verfügbaren Verbindung mit der gleichen biologischen Aktivität als das natürlich auftretende GH.
Benzimidazole der allgemeinen Formel I, worin R1 C&sub2;H&sub5; ist, Y-X > C -OH ist, Z=N ist und R2, R3, R4, R5, R6, R7 und R13 H sind, sind dafür bekannt, entzündungshemmende Aktivität zu besitzen, und zwar durch Singh et al., Indian J. of Chemistry, Band 22B, Januar 1983, 37-42 (Verbindung IId, IIp und IIu in Tabelle 1).

Die Erfindung

Wir haben in unerwarteter Weise eine Gruppe von Verbindungen mit der biologischen Aktivität vom Wachstumshormon gefunden und welches brauchbar sein könnte als Alternativen für rekombinantes und natives Wachstumshormon.
Eine Vielzahl von Verbindungen wurde identifiziert, z. B. 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (2) und 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure-Ethylester (1). (1) hat sich als ein selektiver Agonist für den Wachstumshormonrezeptor gegenüber dem eng verwandten Prolactinrezeptor herausgestellt, was von Wichtigkeit ist, wenn man nach einem spezifischen Wachstumshormon-Mimetikum sucht.
Die Erfindung betrifft somit Verbindungen der allgemeinen Struktur (I)
worin:
Y-X ist > C=X, wenn X NR8, O oder S ist und R2 H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; eine gerade oder verzweigte Kette, substituiert mit einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist; oder
Y-X ist > C-X, wenn X H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist, oder X OR9 oder NHR9 ist und R2 eine Bindung zu Y ist;
Z = O, S oder NR12;
R1 ist H, Methyl, Propyl, Butyl oder Isoformen davon, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8;
R3 ist H, eine gerade oder verzweigte Kette mit, 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit T bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, oder R3 ist OR9 oder NHR9;
R4, R5, R6, R7 sind H, Halogen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8, COOR8, CONHR8 und/oder R3 in jedweder Kombination, und/oder zwei benachbarte R4, R5, R6 oder R7 bilden einen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring;
R8, R9, R10, R11, R12 und R13 sind H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette, substituiert mit einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen und/oder einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 in einer beliebigen Kombination.
Eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen ist vorzugsweise eine mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen gemeint, z. B. Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl und Isoformen davon.
Ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen ist z. B. Cyclopropyl, Phenyl, Cyclohexyl und möglicherweise mit einem oder zwei Heteroatomen.
Mit "Heteroatom" ist vorzugsweise O, S und/oder N gemeint.
Die Verbindungen könnten pharmazeutisch annehmbare Salze oder Ester davon sein. Spezieller sind die nachfolgenden Verbindungen von Interesse:
2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure- Ethylester (1),
2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (2).
Die Erfindung betrifft ebenfalls die Verwendung der beanspruchten Verbindungen, pharmazeutische Zusammensetzungen, welche die Verbindungen umfassen, und ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen, wie beansprucht.
Wir haben biologische Aktivität für die beanspruchten Verbindungen durch unterschiedliche Assays nachgewiesen, wie einem Dimerisationsassay, bei dem die Verbindungen, welche die in diesem Assay bei der hGH-Bindung induzierte Quenchung nachahmen, ebenfalls die vollständigen biologischen Wirkungen des nativen Hormons und einen erhöhten Glucosetransport nachahmen.
Die beanspruchten Verbindungen können brauchbar sein für die Behandlung von Erkrankungen, die z. B. mit einem Wachstumshormonmangel, dem Turner-Syndrom, Unfruchtbarkeit, Wundheilung, Dystrophie, Osteoporose und/oder Laktationsversagen in Verbindung stehen, für die präoperative Verabreichung und andere Erkrankungen und Zustände, welche durch die Verabreichung von hGH behandelt werden oder behandelt werden könnten.

Figuren:

Fig. 1A und 1B Schema I bzw. II
Fig. 2 Schema III, IV und V
Fig. 3 Dosis-Antwort-Kurven von hGH und Verbindung (2) in Dimerisierungsassay
Fig. 4A, B Glucoseaufnahme in mit Medium (Kontrolle), hGH (x nM) und Verbindung (2) (10 mM) kardialen Myozyten.

HERSTELLUNGSVERFAHREN

Diese Verbindungen können hergestellt werden gemäß zwei unterschiedlichen Wegen:
1) über Pyrimidin-Derivate oder
2) über das 2-Guanidino-5,6-Dimethylbenzoimidazol,
siehe Fig. 1, Schema I.

Herstellung von 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5- pyrimidinessigsäure-ethylester (1) und Analogen

1) Über Pyrimidin-Derivate

(2-Cyanoamino)-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (4), erhalten aus Diethylacetylsuccinat und Cyanoguanidin in Gegenwart von Natrium in Ethanol, wurde mit Phenyldiamin in H&sub2;O und konzentrierter HCl behandelt, um 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6- methyl-5-pyrimidinessigsäure (2) in 25%iger Ausbeute zu erhalten. Die Umkristallisation von Säure aus DMF ergab die reine Verbindung. Eine Veresterung wurde in Ethanol in Gegenwart von H&sub2;SO&sub4; durchgeführt, was zu 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6- methyl-5-pyrimidinessigsäure-ethylester (1) in nur 19%iger Ausbeute führte (Schema II).
Eine Synthese der Analogen 5a-j wurde in ähnlicher Weise durchgeführt, indem (4) mit unterschiedlichen ortho-Diamino-Derivaten unter Bedingungen, die zur Herstellung von (2) zur Anwendung kamen, umgesetzt wurde, wie es in Schema III gezeigt ist.
Die folgenden Verbindungen wurden entsprechend dem Schema II oder III hergestellt.
Die Reaktion wurde in refluxierendem H&sub2;O 2 Stunden lang durchgeführt, dann wurde auf Raumtemperatur gekühlt, und das Präzipitat wurde gesammelt. Entsprechend können Benzothiazol- Analoge hergestellt werden. So wurde 5k aus dem entsprechenden Aminothiophenol in 3 M HCl bei 100ºC/10 h hergestellt, wodurch man das Produkt in 40%iger Ausbeute nach der Umkristallisation erhielt.

2) Über 2-Guanidinobenzoimidazole, Schema IV

Die Stammsäure (2) wurde in 27%iger Ausbeute erhalten, wenn 2-Guanidino-5,6-dimethylimidazol-2-guanidino-5,6-dimethylbenzimidazol (6) bei 120ºC 45 Minuten in purem Diethylacetylsuccinat erhitzt wurde, gefolgt von einem Refluxieren in Ethanol und einer Umkristallisation aus DMF.
Um eine Vielzahl von Analogen von (2) mittels dieses Weges herzustellen, wurde eine Reihe von 2-Guanidinobenzoimidazolen hergestellt (Schema V).
In entsprechender Weise führte das Erhitzen von 2-Guanidinobenzothiazol und Ethylacetoacetonat zusammen bei 110ºC während 45 Minuten zu (8).

Herstellung von 6-Alkyl-Analogen von 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4- hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (2)

Diese Analogen wurden in ähnlicher Weise wie bei (2) hergestellt.

Herstellung von N-1-Alkyl-Analogen (2)

N-1-Methyl-Analoge konnten in geringer Ausbeute während der Methylierung des Dithiocarbonimidos unter Verwendung eines Überschusses von Methyliodid hergestellt werden. BEISPIELE Beispiel 1 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (2)
Unter einer inerten Atmosphäre wurde Na-(2-Cyanoamino)-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (4) (0,345 g, 15 mMol) portionsweise zu trockenem Ethanol (10 ml) bei Raumtemperatur hinzugesetzt. Nach 15-minütigem Rühren (Verschwinden des Na), wurden Cyanoguanidin (0,840 g, 10 mMol) und Diethylacetylsuccinat (2,0 ml, 10 mMol) der Lösung bei Raumtemperatur hinzugesetzt.
Die Suspension wurde am Rückfluss 5 Stunden lang erhitzt, und die resultierende Suspension wurde gekühlt, filtriert und mit Ethanol gewaschen. Das Präzipitat wurde in Wasser (am Löslichkeitslimit) gelöst, und konzentrierte HCl wurde hinzugesetzt. Das gebildete Präzipitat wurde filtriert und ergab 1,10 g (50%) Na-(2-Cyanoamino)-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure, Schmp.: 234 bis 236ºC (zers.). IR (KBr): ν = 3520, 3440, 3200-2500, 2190, 1730, 1655, 1602, 1500, 1340, 1200, 830 cm&supmin;¹.
(2-Cyanoamino)-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (4) (0,416 g, 2 mMol) und 5,6-Dimethyl-1,2-diphenyldiamin (0,276 g, 2 mMol) in einer Mischung von H&sub2;O (2 ml) und konzentrierter HCl (0,4 ml) wurden 1,5 Stunden lang bei 100ºC gerührt. Die anfängliche Suspension löste sich auf, und ein zweites Präzipitat erschien nach 1 Stunde. Die Suspension wurde gekühlt, und das Präzipitat wurde gesammelt und mit Wasser gewaschen, wodurch man 0,164 g (25%) 2- [(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (2) erhielt. Schmp.: > 300ºC (DMF). IR (KBr): ν = 3331, 2949, 1705, 1655, 1602, 1509, 1252, 1157, 1047, 701 cm&supmin;¹. Genaue Masse: berechnet: 327,1331. Gefunden 327,1337. Analyse, berechnet für C&sub1;&sub6;H&sub1;&sub7;N&sub5;O&sub3;:C 58,71; H 5,23; N 21,39. Gefunden: C 57,8; H 5,1; N 20,7. Beispiel 3 2-[(2-Benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (5a)
(5a) wurde gemäß der in Beispiel 1 für (2) verwendeten Prozedur hergestellt; Ausbeute 5%, Schmp.: > 300ºC (DMF). IR (KBr): ν = 2878, 1748, 1700, 1625, 1557, 1474, 1357, 1219, 744 cm&supmin;¹. ¹H-NMR (CO&sub2;D): δ = 2,64 (s, 3H, CH&sub3;), 3,88 (s, 2H, CH&sub2;), 7,52 (m, 2H, 2 · Harom), 7,67 (m, 2H, 2 · Hamm). Genaue Masse: berechnet: 299,1018. Gefunden 299,1013. Analyse, berechnet für C&sub1;&sub4;H&sub1;&sub3;N&sub5;O&sub3;: C 55,2; H 4,40; N 23,40. Gefunden: C 55,4; H 4,7; N 22,5. Beispiel 4 2-[(4-Methyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (5b)
L-112787 wurde gemäß der Prozedur, die für (2) in Beispiel 1 zur Anwendung kam, hergestellt: Ausbeute 1%. Schmp.: > 300ºC (DMF). IR (KBr): ν = 3150-2700, 1701, 1638, 1605, 1570, 1419, 1353, 1228, 781 cm&supmin;¹. Genaue Masse: berechnet: 313,1175. Gefunden 313,1190. Analyse, berechnet für C&sub1;&sub5;H&sub1;&sub5;N&sub5;O&sub3;: C 57,50; H 4,83; N 22,35. Gefunden: C 53,3; H 4,5; N 20,4. Beispiel 5 2-[(5-Methyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (5c)
L-112788 wurde gemäß der Prozedur, die für (2) in Beispiel 1 zur Anwendung kam, hergestellt; Ausbeute 5%. Schmp.: > 300ºC (DMF). IR (KBr): ν = 3200-2700, 1702, 1640, 1602, 1474, 1352, 1295, 1207, 875, 796 cm&supmin;¹. Genaue Masse: berechnet: 313,1175. Gefunden 313,1187. Analyse, berechnet für C&sub1;&sub5;H&sub1;&sub5;N&sub5;O&sub3;: C 57,50; H 4,83; N 22,35. Gefunden: C 53,3; H 4,5; N 20,4. Beispiel 6 2-[(4,5-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (5d)
L-112789 wurde gemäß der Prozedur, die für (2) in Beispiel 1 zur Anwendung kam, hergestellt; Ausbeute 4%. Schmp.: > 300ºC (DMF). IR (KBr): ν = 3200-2700, 1703, 1627, 1601, 1565, 1342, 1293, 1234, 903, 788 cm&supmin;¹. Genaue Masse: berechnet: 327,1331. Gefunden 327,1349. Beispiel 7 2-[(5-Nitro-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (5e)
PNU-181223 wurde gemäß der Prozedur, die für (2) in Beispiel 1 zur Anwendung kam, hergestellt: Ausbeute 16%. Schmp.: > 300ºC (DMF). IR (KBr): ν = 3039, 2882, 1738, 1596, 1465, 1333, 1292, 1182, 876 cm&supmin;¹. ¹H-NMR (CF&sub3;CO&sub2;D): δ = 2,62 (s, 3H, CH&sub3;), 3,87 (s, 2H, CH&sub2;), 7,88 (d, 1H, J = 8 Hz, Harom), 8,45 (d, 1H, J = 8 Hz, Harom), 7,88 (s, 1H, Harom). Analyse, berechnet für C&sub1;&sub4;H&sub1;&sub2;N&sub6;O&sub5;: C 55,2: H 4,40; N 23,40; N 23,40. Gefunden: C 55,4; H 4,7; N 22,5. Beispiel 8 2-[(S-Fluor-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (5h)
L-112790 wurde gemäß der Prozedur, die für (2) in Beispiel 1 zur Anwendung kam, hergestellt: Ausbeute 3%. Schmp.: > 300ºC (DMF). IR (KBr): ν = 3150-2700, 1625, 1603, 1559, 1484, 1346, 1297, 1145, 790 cm&supmin;¹. Genaue Masse: berechnet: 317,0924. Gefunden 317,0939. Analyse, berechnet für C&sub1;&sub4;H&sub1;&sub2;FN&sub5;O&sub3;: C 53,00; H 3,81; N 22,07. Gefunden: C 49,5; H 4,0; N 19,9. Beispiel 9 2-(2'-Benzothiazolylamino)-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidylessigsäure (5k)
Eine Mischung von 2-Aminothiophenol (601,4 mg, 4,80 mMol) und 2-Cyanamino-4-hydroxy-6- methyl-5-pyrimidylessigsäure (1,0 g, 4,80 mMol) in konzentrierter HCl (1 ml) und Wasser (5 ml) wurde bei 100ºC 10 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde gekühlt, und das Präzipitat wurde filtriert und mit wässerigem Ethanol gewaschen. Rohe Ausbeute 1,2 g (enthält geringe Verunreinigungen gemäß ¹H-NMR). Der rohe Feststoff wurde aus DMF (~150 ml) umkristallisiert. Das Produkt präzipitierte im Kühlschrank. Die Kristalle wurden mit Wasser/MeOH trituriert und unter Vakuum bei 90ºC (Ausbeute: 604,5 mg, 40%) getrocknet. Schmp.: > 300ºC. ¹H-NMR (CF&sub3;COD) d 7,97-7,86 (m, 2H). 8,00-7,54 (m, 4H), 3,90 (s, 3H), 2,66 (s, 3H); Analyse, berechnet für C&sub1;&sub4;H&sub1;&sub2;N&sub4;O&sub3;S·0,25 H&sub2;O; C 51,67; H 4,03; N 17,22; gefunden: C 51,80; H 3,90; N 16,95.

Beispiel 10

Benzimidazol-2-yl-guanidino-Derivate: allgemeine Prozedur für Intermediate

In Wasser (8 ml) konzentrierter HCl (3 ml), Cyanoguanidin (20 mMol) und ortho-Phenylendiamin-Derivat (10 mMol) wurden unter Rückfluss über Nacht erhitzt. Ein Präzipitat trat nach dem Kühlen auf, der Feststoff wurde filtriert und mit Wasser gewaschen. Eine Suspension des Feststoffes in Wasser wurde mit einer Lösung von NaOH 1 M behandelt, um einen pH-Wert von 10 zu erreichen. Dann wurde die basische Lösung auf einen Wert von (pH 6) mit einer wässerigen Lösung von HCl 1 M eingestellt, und das resultierende Präzipitat wurde filtriert, wodurch man die Titelverbindung erhielt. Beispiel 10a 2-Guanidino-4-methylbenzimidazol-hydrochloridsalz (7a)
Schmp.: > 260ºC IR (KBr): ν = 3500-2800, 1616, 1283, 1224, 1159, 963, 764, 729 cm&supmin;¹. Analyse, berechnet für C&sub9;H&sub1;&sub1;N&sub5;, HCl + 1/2 H&sub2;O: C 46,00; H 5,5; N 29,8; gefunden: C 46,0; H 5,7; N 29,7. Beispiel 10b 2-Guanidino-5-methylbenzimidazol-hydrochloridsalz (7b)
Schmp.: > 260ºC, IR (KBr): ν = 3500-2800, 1667; 1598, 1517, 1487, 1382, 1127, 1037, 802, 782 cm&supmin;¹. Analyse, berechnet für C&sub9;H&sub1;&sub1;N&sub5;, 1/2 HCl: C 52,00; H 5,54; N 33,73; gefunden: C 51,6; H 5,5; N 34,9. Beispiel 10c 2-Guanidino-4,5-dimethylbenzimidazol-hydrochloridsalz (7c)
Schmp.: > 260ºC, IR (KBr): ν = 3500-2800, 3361, 1680, 1608, 1573, 1497, 1309, 1270, 1225, 1148, 1054, 791, 748, 723 cm&supmin;¹. Analyse, berechnet C&sub1;&sub0;H&sub1;&sub3;N&sub5;, HCl + 1/2 H&sub2;O: C 48,3; H 6,0; N 28,2; gefunden: C 47,9; H 5,9; N 29,5. Beispiel 10d 2-Guanidino-5,6-dichlorbenzimidazol-hydrochloridsalz (7d)
Schmp.: > 260ºC, IR (KBr): ν = 3623, 3496, 3500-2800, 1704, 1622, 1565, 1426, 1280, 1096, 862, 852 cm&supmin;¹. Analyse, berechnet für C&sub8;H&sub7;C&sub1;&sub2;N&sub5;. HCl: C 34,20; H 2,85; N 24,95. Gefunden: C 34,2; H 3,3; N 23,7. Beispiel 10e 2-(2'-Benzothiazolylamino)-4-hydroxy-6-methylpyrimidin (8)
2-Guanidinobenzothiazol (0,384 g, 2 mMol) und Ethylacetoacetonat (2 ml) wurden zusammen bei 110ºC für 45 Minuten erhitzt. Nach dem Kühlen wurde Ethanol hinzugesetzt, und das resultierende Präzipitat wurde filtriert, um 0,050 g (10%) der Titelverbindung zu erhalten. Schmp.: > 300ºC. IR (KBr): ν = 3026, 2867, 1644, 1617, 1590, 1546, 1459, 1360, 762, 742, 640 cm&supmin;¹. Analyse, berechnet für C&sub1;&sub2;H&sub1;&sub0;N&sub4;OS: C 55,8; H 3,90; N 21,69. Gefunden: C 55,2; H 4,2; N 22,2. Beispiel 11 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-phenyl-5-pyrimidinessigsäure (9)
Diethyl-2-benzoylsuccinat (2,70 g, 9,7 mMol) und 2-Guanidino-5,6-dimethylbenzimidazol, PNU-10708A (6) (1,0 g, 4,17 mMol) wurden mit etwas EtOH gemischt, um eine Aufschlämmung zu erhalten. Natriumethoxid (4,2 ml, 1 M) in Ethanol wurde hinzugesetzt, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Die Mischung wurde bei 120ºC 20 Stunden lang erhitzt, und die Reaktion wurde durch PDMS verfolgt. Das rohe Produkt wurde aus DMF umkristallisiert, filtriert und mit Aceton und Wasser gewaschen. Während der Umkristallisation wurde der Ester hydrolysiert, und das erhaltene Produkt war die entsprechende Säure: ¹H-NMR (DMSO) δ 2,25 (s, 6H), 3,20 (s, 2H), 7,09 (s, 2H) und 7,53 (m, 511). Beispiel 12 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-trifluormethyl-5-pyrimidinessigsäure (10)
Diethyl-2-trifluoracetylsuccinat (0,40 g, 1,5 mMol) und 2-Guanidino-5,6-dimethylbenzimidazol (6) (0,35 g, 1,5 mMol) wurden mit etwas EtOH gemischt, um eine Aufschlämmung zu erhalten. Natriumethoxid (1,5 ml, 1 M) in Ethanol wurde hinzugesetzt, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Die Mischung wurde bei 100ºC 4 Stunden lang erhitzt, gefolgt von 1-stündigem Erhitzen bei 150ºC. Die Reaktion wurde mittels PDMS verfolgt. Das rohe Produkt wurde aus DMF (5 ml) umkristallisiert, filtriert und mit Aceton und Wasser gewaschen. Während der Umkristallisation wurde der Ester hydrolysiert, und das erhaltene Produkt war die entsprechende Säure. Es wurden 0,23 g als Mischung von Säure und Ester erhalten. 50 mg wurden in NaOH (50 ml, 1 M) hydrolysiert. Die Lösung wurde dann angesäuert, und das präzipitierte Produkt wurde gesammelt, wodurch man 30 mg erhielt.
¹H-NMR (DMSO) δ 2,27 (s, 6H), 3,43 (s, 2H) und 7,18 (s, 2H). Beispiel 13 2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-isopropyl-5-pyrimidinessigsäure (11)
2-Guanidino-5,6-dimethylbenzimidazol (6) (1,24 g, 5,17 mMol) wurde in EtOH gelöst und Ethoxid (5,2 ml, 1 M) in Ethanol wurde hinzugesetzt. Das gebildete Salz wurde filtriert, und Diethyl-2-isobutyrylsuccinat (1,86 g, 7,6 mMol) wurde hinzugesetzt, und das Lösungsmittel wurde durch PDMS verfolgt. Das rohe Produkt wurde aus DMF umkristallisiert, flltriert und mit Aceton und Wasser gewaschen. Das Produkt wurde in NaOH (50 ml, 1 M) hydrolysiert, mit HCl angesäuert, und das Präzipitat wurde gesammelt. Das Produkt wurde aus DMSO (5 ml) umkristallisiert, filtriert und mit Wasser und Aceton gewaschen, wodurch man 54 mg erhielt. ¹H-NMR (DMSO) δ 1,19 (d, 6H), 2,23 (s, 6H), 3,01 (q, 1H), 3,33 (s, 2H) und 7,09 (s, 2H). Beispiel 14 Methyl-2-[(5,6-dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-1,4-dimethyl-6-oxo-5-pyrimidinylacetat (12) (i) 4-Hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure
Guanidinhydrochlorid (4,0 g, 42 mMol) wurde Natriumethoxid in Ethanol (60 ml, 1 M) zugesetzt, und die Lösung wurde 10 Minuten gerührt. Diethylacetylsuccinat (9,0 g, 42 mMol) wurde hinzugegeben, und die Lösung wurde 4 Stunden lang am Rückfluss gehalten und dann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Wasser (20 ml) wurde der Mischung hinzugesetzt, und das Produkt wurde filtriert und mit Wasser und EtOH gewaschen. Ausbeute: 4,2 g (55%). ¹H-NMR (DMSO) δ 2,00 (s, 3H) und 3,22 (s, 2H). (ii) Methyl-2-[(di-(S)-methylthio)carbonimido]-N-methyl-4-oxo-6-methyl-5-pyrimidinacetat
4-Hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (1,0 g, 5,5 mMol) wurde mit DMF (150 ml) gemischt. NaOH (6 ml, 20 M) wurde hinzugesetzt, und die Mischung wurde zur Abkühlung stehen gelassen, und CS&sub2; (10 ml) wurde hinzugesetzt. Die dunkelrote Mischung wurde 30 Minuten lang gerührt, gefolgt von der Zugabe von MeI (10 ml). Die Farbe änderte sich zu Gelb, die Mischung wurde 2 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen Wasser und Methylenchlorid aufgeteilt, und die organische Phase wurde getrocknet und abgedampft. Das rohe Produkt wurde auf Silikagel mit einem Gradienten von Toluol : EtOAc (100% toluol-50% Toluol) gereinigt. Ausbeute: 75 mg (4%). ¹H-NMR (DMSO) δ 2,18 (s, 3H), 2,58 (s, 6H), 3,41 (s, 3H), 3,50 (s, 2H) und 3,58 (s, 3H). (iii) Methyl-2-[(5,6-dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-1,4-dimethyl-6-oxo-5-pyrimidinylacetat (12)
Methyl-2-[(di-(S)-methylthio)carbonimido]-N-methyl-4-oxo-6-methyl-5-pyrimidinacetat (34 mg, 0,108 mMol) wurde in DMF (1 ml) gelöst. Eine Lösung von 4,5-Dimethyl-1,2-phenylendiamin (16 mg, 0,117 mMol) in wenigen Tropfen DMF wurde hinzugesetzt, und die Lösung wurde bei 100ºC 1 Stunde lang und 1 Stunde länger bei 150ºC erhitzt. Die Lösung wurde zur Abkühlung stehen gelassen, und das Verdünnungsmittel wurde abgedampft. Das Produkt wurde auf Silikagel mit Chloroform : Aceton : Ameisensäure (Gradient 96 : 3 : 1 bis 89 : 10 : 1) gereinigt. Ausbeute: 19 mg (50%).
Schmp.: 272-274ºC. Beispiel 15 2-{4-Methyl-6-oxo-2-[(1,5,6-trimethyl-1H-benzimidazol-2-yl)amino]-1,6-dihydro-5- pyrimidinyl}essigsäure
Eine Suspension von N 4,5-Trimethylphenylen-1,2-diamin (541 mg, 3,6 mMol) und (2- Cyanoamino)-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (625 mg, 3,0 mMol) in 3 N wässeriger HCl wurde 90 Minuten lang am Rückfluss gehalten (Bad: 160ºC). Das Erhitzen wurde abgebrochen, und die Reaktionsmischung wurde zur Abkühlung über Nacht stehen gelassen. Der weiße Feststoff, der sich gebildet hatte, wurde durch Filtration abgetrennt, mit kaltem Wasser gewaschen und im Vakuum über P&sub2;O&sub5; getrocknet. Der sehr unlösliche, gebrochen-weiße Feststoff (213 mg, 21%) wurde in einer kleinen Menge an Wasser suspendiert, und der pH-Wert wurde auf 7,0 (von 2,0) durch Zugabe einer wässerigen Lösung von NaOH erhöht. Die Mischung wurde konzentriert und getrocknet, wodurch man einen bräunlichen Feststoffe erhielt. ¹H-NMR (DMSO) δ 2,16 (s, 3H, CH&sub3;), 2,27 (s, 3H, CH&sub3;); 2,30 (s, 3H, CH&sub3;), 3,18 (s, 2H, CH&sub2;), 3,58 (s, 3H, N-CH&sub3;), 7,12 (s, 1H, CH), 7,26 (s, 1H, CH); ¹³C-NMR (DMSO) δ 19,9, 28,0, 31,7 109,1, 115,0, 129,1, 130,6, 153,3, 163,0, 173,0; MS (EI+, [M]&spplus;) m/z 341; Analyse, berechnet (gefunden) für C&sub9;H&sub1;&sub4;N&sub2; (inkl. 1,7 Äq. NaOH): C 50,00 (49,88)% H 5,00 (5,10)% N 17,11 (16,90)%.

BIOLOGISCHE AKTIVITÄT

Beispiel 16

Dimerisierungsassay

Es wurde ein leicht modifiziertes Fluoreszenz-Quenching-Assay verwendet, das bereits früher von Cunningham BC et al., 1991, Science 254, 821-825, beschrieben wurde. Eine Hormoninduzierte Rezeptoroligomerisierung über die Bildung eines 1 : 2-Komplexes mit der extrazellulären Domäne seines Rezeptors oder Bindungsproteins (hGHbp) wurde als ein erster kritischer Schritt bei der hGH-Signal-Transduktion identifiziert. Die Bindung von hGH an rekombinant exprimiertem hGHbp, welches mit einer Fluoreszenzmarkierung, wie Rhodamin, markiert worden war, führte zu einem verringerten Signal. Ein kleines Molekül, welches die durch hGH-Bindung in diesem Assay induzierte Quenchung nachahmt, kann ebenfalls die vollständigen biologischen Effekte von nativem Hormon nachahmen.

Materialien und Methoden

Die in diesem Assay verwendeten Proteinreagenzien wurden in E. Coli rekombinant erzeugt. Diese schlossen das hGH, Referenzwirkstoff und eine modifizierte Form von hGHbp ein. Die Modifikation wurde verwendet, um eine Markierung zu erleichtern, und bestand aus hGHbpGly&sub4;Cys. Dies wird im nachfolgenden als hGHbp 1433 bezeichnet. hGHbp 1433 wurde anschließend mit Rhodamin markiert, welches nachfolgend als rho-hGHbp bezeichnet wird.

Ergebnisse

In der Fig. 3 sind die Wirkungen auf die Fluoreszenz-Quenchung im Dimerisierungsassay für hGH und (2) gezeigt. In beiden Fällen konnten klare Dosis-Antwort-Kurven in wiederholten Experimenten nachgewiesen werden.

Beispiel 17

Glucoseaufnahme

Materialien und Methoden

Zellkultur: AT-1-Zellen von transplantierbaren Tumoren des linken Atriums wurden in primären Kulturen, wie bereits früher von Steinhelper M. E. et al., Am. J. Physiol. 259, 1826-1834, 1990, beschrieben, etabliert.
Glucosetransport: Der Glucosetransport wurde getestet, wie von Hundal et al., Biochem. J. 297, 289-295, 1994, beschrieben.
Zellen wurden in DMEM mit niedrigem Glucosegehalt und ohne Serum 5 Stunden lang vor der Hormonzugabe gehalten. Nach der Inkubation mit Hormonen während 60 Minuten wurden, wenn es nicht anders angegeben ist, Zellenmonoschichten mit PBS gespült. Die Glucoseaufnahme wurde quantifiziert, indem die Zellen in Gegenwart von 0,1 Ci/ml ³H-2-Deoxyglucose in PBS 4 Minuten lang inkubiert wurden. Es wurde keine spezifische Aufnahme bestimmt durch Quantifizieren von Zell-assoziierter Radioaktivität in Gegenwart von 20 uM CytochalasinB. Die Aufnahme von ³H-2-Deoxyglucose wurde bestimmt, indem das Medium schnell aspiriert wurde, gefolgt von zwei aufeinander folgenden Waschungen mit eiskaltem PBS. Die Zellen wurden in 0,5 M NaOH lysiert, und es folgte eine Flüssigkeitsszintillationszählung. Die Raten des Transports wurden für den Proteingehalt in jeder Vertiefung normiert.
Materialien: Weibliche B6D2/F1-Mäuse wurden von Bomholt Gård, Dänemark, gekauft. AT-1- Zellen wurden von Dr. W. Claycomb, Louisiana State University Medical Center, New Orleans, Louisiana, bereitgestellt.
Joklik's MEM, Dulbecko's MEM, Pen/Strep und fötales Kälberserum (FCS) und alle Kunststoffwaren waren von Life Technologies. Collagenase war von Worthington biochemical Corp. und Trypsin (Schweinepankreas) von US Biochemical Corp. USA. ³H-2-Deoxyglucose war von Du Pont NEN, duMedical Scandinavia, Schweden. Menschliches Wachstumshormon, Genotropin-Charge 68199-51 war von Pharmacia & Upjohn, Schweden. CytochalasinB, Rinderinsulin und Wortmannin waren von Sigma.

Ergebnisse

Wenn 10 uM der Verbindung (2) 1 Stunde lang vor der Glucosetransportmessung inkubiert worden waren, erhöhte die Substanz den Glucosetransport im gleichen Ausmaß, wie GH (Fig. 4A). Wenn Cardiomyozyten mit 1 uM Wortmannin zusammen mit hGH oder der Verbindung 60 Minuten lang vor Transportmessungen inkubiert worden waren, reagierten die mit Wortmannin behandelten Zellen nicht mit einem erhöhten Glucosetransport (Fig. 4B). Dies war bedingt durch eine Inhibierung eines von dem Rezeptor erzeugten Signals, und zwar durch Inhibieren der Signal-Transducer-Phosphoinositid-3-kinase (PI-3-Kinase).

Claims

1. Verbindungen der allgemeinen Formel (I):

worin:

Y-X ist > C=X, wenn X NR8, O oder S ist und R2 H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; eine gerade oder verzweigte Kette, substituiert mit einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist; oder

Y-X ist > C-X, wenn X H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, ORIO, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist, oder X OR9 oder NHR9 ist und R2 eine Bindung zu Y ist;

Z = O, S oder NR12;

R1 ist H, Methyl, Propyl, Butyl oder Isoformen davon, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8;

R3 ist H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, oder R3 ist OR9 oder NHR9;

R4, R5, R6, R7 sind H, Halogen, OR10, NR10, R11, N02, CF3, CN, COR8, COOR8, CONHR8 und/oder R3 in jedweder Kombination, und/oder zwei benachbarte R4, R5, R60- der R7 bilden einen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring;

R8, R9, R10, R11, R12 und R13 sind H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette, substituiert mit einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen und/oder einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 in einer beliebigen Kombination.

2. Verbindung gemäß Anspruch 1, gewählt aus beliebigen von

2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-methyl-5-pyrimidinessigsäure (2)

2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-phenyl-5-pyrimidinessigsäure (9)

2-[(5,6-Dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-4-hydroxy-6-trifluormethyl-5-pyrimidinessigsäure (10)

Methyl-2-[(5,6-dimethyl-2-benzoimidazolyl)amino]-1,4-dimethyl-6-oxo-5-pyrimidinylacetat (12)

3. Verbindungen gemäß mindestens einem der Ansprüche 1 bis 2 zur Verwendung als eine aktive therapeutische Substanz.

4. Verbindungen der allgemeinen Formel (I):

worin:

Y-X ist > C=X; wenn X NR8, O oder S ist und R2 H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; eine gerade oder verzweigte Kette, substituiert mit einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, einem Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10; R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist; oder

Y-X ist > C-X, wenn X H, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8 ist, oder X OR9 oder NHR9 ist und R2 eine Bindung zu Y ist;

Z = O, S oder NR12;

R1 ist H, Methyl, Propyl, Butyl oder Isoformen davon, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8;

R3 ist H, eine gerade oder verzweigte Kette mit T bis 8 Kohlenstoffatomen, eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8 und/oder COOR8, ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen oder ein Ring mit 5 bis 12 Kohlenstoffatomen und gegebenenfalls mit einem oder zwei Heteroatomen, substituiert mit Halogen, -OH, einer geraden oder verzweigten Kette mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen; OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, CORB und/oder COOR8, oder R3 ist OR9 oder NHR9;

R4, R5, R6, R7 sind H, Halogen, OR10, NR10, R11, NO2, CF3, CN, COR8, COORB, CONHR8 und/oder R3 in jedweder Kombination, und/oder zwei benachbarte R4, R5, R6 oder R7 bilden einen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring;

zur Verwendung als eine aktive therapeutische Substanz bei der Behandlung von Wachstumshormonmangel, Turner-Syndrom, Unfruchtbarkeit, Wundheilung, Dystrophie, Osteoporose und/oder Lactationsstörung.

5. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend die Verbindung gemäß mindestens einem der Ansprüche 1 bis 4 mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger.

6. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen gemäß mindestens einem der Ansprüche 1 bis 4 durch einen beliebigen der folgenden Wege:

a) Umsetzen von Cyanoaminpyrimidin-Derivaten zusammen mit Phenyldiaminen oder 2- Aminothiophenolen oder 2-Aminophenolen oder

b) Umsetzen von 2-Guanidinobenzoimidazolen zusammen mit Diethylacylsuccinat.

7. Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung gemäß Anspruch 6, welches das Mischen der Verbindung der allgemeinen Formel I und eines pharmazeutisch annehmbaren Trägers umfasst.

8. Verwendung von Verbindungen gemäß irgendeinem der Ansprüche 1 bis 4 zur Herstellung von Medikamenten zur Behandlung von Wachstumshormonmangel, Turner-Syndrom, Unfruchtbarkeit, Wundheilung, Dystrophie, Osteoporose und/oder Lactationsstörung.