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DE563858T1 - Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebender Mikroorganismen. - Google Patents

Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebender Mikroorganismen.

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DE563858T1
DE563858T1 DE93105182T DE93105182T DE563858T1 DE 563858 T1 DE563858 T1 DE 563858T1 DE 93105182 T DE93105182 T DE 93105182T DE 93105182 T DE93105182 T DE 93105182T DE 563858 T1 DE563858 T1 DE 563858T1
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DE
Germany
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determining
viable microbes
membrane
hydrophilic
viable
Prior art date
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Pending
Application number
DE93105182T
Other languages
English (en)
Inventor
Masaya Kawakami
Susumu Seto
Seiken Tei
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Merck Ltd Japan
Original Assignee
Nihon Millipore KK
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Filing date
Publication date
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Application filed by Nihon Millipore KK filed Critical Nihon Millipore KK
Publication of DE563858T1 publication Critical patent/DE563858T1/de
Pending legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • C12Q1/06—Quantitative determination
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/968—High energy substrates, e.g. fluorescent, chemiluminescent, radioactive
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
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    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
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Claims (11)

93 105 182.5 NIHON MILLIPORE KOGYO KABUSHIKI KAISHA Patentansprüche
1. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebensfähiger Mikroben in einer Probe, gekennzeichnet durch:
Filtrieren einer Lösung der (betreffenden) Probe durch ein hydrophiles Membranfilter zum Einfangen darin enthaltener lebensfähiger Mikroben auf einer Filtrationsmembran dieses Filters;
Aufsprühen eines flüchtigen Extraktionsreagenz eines Kp unter 120*C auf die Membran zur Extraktion von mikrobiellem Adenosintriphosphat;
Anschließendes oder gleichzeitiges Einwirkenlassen von Umgebungstemperatur oder erhöhter Temperatur auf die Membran zur Verdampfung flüssiger Bestandteile; Aufsprühen einer Lösung eines lumineszenzinduzierenden Reagenz vom Luciferin/Luciferase-Typ auf die Membran zur Induktion von Lumineszenz und
Bestimmen der Lumineszenzmenge unter Verwendung einer für eine solche Messung geeigneten Vorrichtung.
2. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebenfähiger Mikroben nach Anspruch 1, wobei das hydrophile Membranfilter eine Anzahl kleiner hydrophiler Filtrationsmembranabschnitte, die voneinander durch hydrophobe
gO Trenneinrichtungen praktisch vollständig isoliert sind, aufweist.
3. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebensfähiger Mikroben nach Anspruch 1 oder 2, wobei es sich bei dem hydrophilen Membranfilter um einen am unteren Ende bzw. Boden eines KunststoffZylinders mit einer hydrophilen Filtrationsmembran ausgestatteten Filterbecher handelt.
4. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei das hydrophile Membranfilter aus einem Werkstoff, ausgewählt aus der Gruppe hydrophiler Formen von Polytetrafluorethylen, Poly(vinylidenfluorid), Polycarbonat, Polyamid, Polysulfön, Polyethylen, Polypropylen und Mischungen und Mischpolymeren hiervon, Acetylcellulose und Nitrocellulose, hergestellt ist.
5. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei das flüchtige Extraktionsreagenz für ATP aus Methanol oder Ethanol besteht.
. ■
6. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei das flüchtige Extraktionsreagenz für ATP aus einem Gemisch aus Methanol oder Ethanol mit 0,1 bis 5 Gew.% Ammoniumhydroxid besteht.
7. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei das lumineszenzinduzierende Reagenz in 3- bis 6-mal höherer Konzentration als normalerweise verwendet eingesetzt wird.
8. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei die Membran zur Verdampfung flüssiger Bestandteile einer Temperatur von 40*C bis 70*C ausgesetzt wird.
9. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei es sich bei der geeigneten Vorrichtung um ein Biolumineszenz-Bildanalysesystem handelt.
10. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Zellen nach Anspruch 9, wobei der Fernsehkamerakopf des Biolumineszenz-Bildanalysesystems entweder sich verjüngende Fasern, eine Photostromver-Stärkungseinheit und eine Bildröhre oder sich verjüngende Fasern und eine gekühlte CCD-Fernsehkamera umfaßt.
11. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach Anspruch 9 oder 10, wobei das Biolumineszenz-Bildanalysesystem die Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einer Bildverarbeitung derart bestimmt, daß nicht von lebensfähigen Mikroben herrührende Hintergrundlumineszenz ausgelöscht und intensives Licht oberhalb der Schwellenintensität emittierende helle Flecken angezeigt werden.
DE93105182T 1992-04-01 1993-03-29 Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebender Mikroorganismen. Pending DE563858T1 (de)

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