DE4003854A1

DE4003854A1 - New vitamin=D derivs. - are cell differentiators and proliferation inhibitors useful for treating psoriasis and malignant tumours

Info

Publication number: DE4003854A1
Application number: DE4003854A
Authority: DE
Inventors: Guenter Dr Neef; Gerald Dr Kirsch; Andreas Dr Steinmeyer; Katica Dipl Chem Schwarz; Matthias Dr Braeutigam; Ruth Dr Thieroff-Ekerdt; Petra Rach
Original assignee: Schering AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 1990-02-06
Filing date: 1990-02-06
Publication date: 1991-08-08
Also published as: ZA91901B

Abstract

Vitamin D derivs. of formula 8I) are new. In (I), R1 = H, OH or 1-9C acyloxy; R2 = H or 1-9C acyloxy; A = a direct bond or -CH2-; B, D = H or together form another bond in the E configuration. One of R3 and R4 = OH or 1-9C acyloxy and the other is H, or both gps. together form = O. X = -(CH2)n- or -(CH2)nO- (where n = 1-3); R5, R6 = independently up to 4C alkyl, CF3 or together form a 5-6 membered (un)satd. or aromatic carbocycle or heterocycle. 14 cpds. are specifically claimed, including (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R) -9,10-seco-24a-homo 5,7,10(19),22-cholestatetraer -1,3,24-triol. Also claimed is a method for preparing (I) from the corresp. enone of formula (II), where R1 = H or protected OH and R2' = a protecting gp. USE/ADVANTAGE - For the treatment of diseases associated with abnormal mitosis, namely psoriasis and malignant tumours. (I) have only a weak effect on calcium and phosphate metabolism, and therefore fewer side effects at high doses.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft seitenketten-homologe Vitamin D-Derivate der Formel IThe present invention relates to side chain homologous vitamin D derivatives of Formula I.

worinwherein

R¹ ein Wasserstoffatom, eine Hydroxy- oder eine Acyloxygruppe mit 1 bis 9 Kohlenstoffatomen,
R² ein Wasserstoffatom oder eine Acylgruppe mit 1 bis 9 Kohlenstoffatomen,
A entweder eine direkte Bindung zwischen dem Kohlenstoffatom 20 und dem Kohlenstoffatom 22 oder eine Methylenbrücke (-CH₂-) zwischen diesen beiden Kohlenstoffatomen,
B und D entweder jeweils ein Wasserstoffatom oder gemeinsam eine zweite Bindung (E-konfigurierte Doppelbindung),
R³ oder R⁴ eine Hydroxy- oder Acyloxygruppe mit 1 bis 9 Kohlenstoffatomen, und der jeweils andere Substituent ein Wasserstoffatom oder R³ und R⁴ gemeinsam ein Sauerstoffatom,
X entweder einen Alkylenrest -(CH₂)_n- oder einen Alkylenoxyrest -(CH₂)_nO- mit n=1 bis 3 sowie
R⁵ und R⁶ unabhängig voneinander jeweils einen linearen oder verzweigten Alkyl rest mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen, eine Trifluormethylgruppe oder gemein sam einen mit dem tertiären Kohlenstoffatom gebildeten gesättigten, ungesät tigten oder aromatischen carbocyclischen oder heterocyclischen 5- oder 6gliedrigen RingR¹ is a hydrogen atom, a hydroxy or an acyloxy group with 1 to 9 carbon atoms,
R² is a hydrogen atom or an acyl group with 1 to 9 carbon atoms,
A either a direct bond between the carbon atom 20 and the carbon atom 22 or a methylene bridge (-CH₂-) between these two carbon atoms,
B and D either each represent a hydrogen atom or together a second bond (E-configured double bond),
R³ or R⁴ is a hydroxy or acyloxy group with 1 to 9 carbon atoms, and the other substituent is a hydrogen atom or R³ and R⁴ together are an oxygen atom,
X is either an alkylene radical - (CH₂) _n - or an alkyleneoxy radical - (CH₂) _n O- with n = 1 to 3 and
R⁵ and R⁶ independently of one another each have a linear or branched alkyl radical having up to 4 carbon atoms, a trifluoromethyl group or together a saturated, unsaturated or aromatic carbocyclic or heterocyclic 5- or 6-membered ring formed with the tertiary carbon atom

bedeuten, sowie ein Verfahren zu deren Herstellung, pharmazeutische Präparate, die diese Verbindungen enthalten sowie deren Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln.mean, as well as a process for their preparation, pharmaceutical preparations, which contain these compounds and their use in the preparation of Medicines.

Die für die Reste R¹, R² und innerhalb der Reste R³ oder R⁴ möglichen Acyloxy- bzw. Acylgruppen sind insbesondere von gesättigten Carbonsäuren oder auch der Benzoesäure abgeleitet.The acyloxy possible for the radicals R¹, R² and within the radicals R³ or R⁴ or acyl groups are especially of saturated carboxylic acids or Derived from benzoic acid.

Bilden R⁵ und R⁶ gemeinsam mit dem tertiären Kohlenstoffatom einen gesättigten carbocyclischen Ring, so ist insbesondere an den Cyclohexylring gedacht. Als Alkylgruppen für R⁵ und R⁶ kommen insbesondere solche mit 1 bis 5 Kohlenstoff atomen in Betracht.R⁵ and R⁶ form a saturated together with the tertiary carbon atom carbocyclic ring, in particular the cyclohexyl ring is thought of. As Alkyl groups for R⁵ and R⁶ come in particular those with 1 to 5 carbon atoms into consideration.

Bevorzugt gemäß vorliegender Erfindung sind seitenketten-homologe Vitamin-D- Derivate der allgemeinen Formel I, in welchenSide chain homologous vitamin D are preferred according to the present invention. Derivatives of the general formula I, in which

R¹, R³ und R⁴ für eine Hydroxygruppe oder
R⁵ und R⁶ für eine Methylgruppe oder
R² für ein Wasserstoffatom
steht/stehen und n 1 oder 2 ist.R¹, R³ and R⁴ for a hydroxy group or
R⁵ and R⁶ for a methyl group or
R² for a hydrogen atom
stands / stand and n is 1 or 2.

Zwischen den Kohlenstoffatomen 22 und 23 (wenn A eine direkte Bindung bedeutet) oder zwischen den Kohlenstoffatomen 23 und 24 (wenn A eine Methylengruppe be deutet) befindet sich vorzugsweise eine Doppelbindung. Besonders bevorzugt sind die VerbindungenBetween carbon atoms 22 and 23 (when A is a direct bond) or between carbon atoms 23 and 24 (when A is a methylene group indicates) there is preferably a double bond. Are particularly preferred the connections

(5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-9,10-Seco-24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatet-raen- 1,3,24-triol,
(5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-9,10-Seco-24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatet-raen- 1,3,24-triol,
24-(1(R)-Hydroxy-4-methylpentyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tet-raen- 1(S),3(R)-diol,
24-(1(S)-Hydroxy-4-methylpentyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tet-raen- 1(S),3(R)-diol,
24-(1(R)-Hydroxy-3-methylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetr-aen- 1(S),3(R)-diol,
24-(1(S)-Hydroxy-3-methylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetr-aen- 1(S),3(R)-diol,
24-(1(R)-Hydroxy-3-methylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19)-trien-1(-S),3(R)- diol,
24-(1(S)-Hydroxy-3-methylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19)-trien-1(-S),3(R)- diol,
24-(1(R)-Hydroxy-3-isopropoxypropyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E--tetraen- 1(S),3(R)-diol,
24-(1(S)-Hydroxy-3-isopropoxypropyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E--tetraen- 1(S),3(R)-diol,
24-Isopropoxymethyl-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S),3(R-),24(R)- triol,
24-Isopropoxymethyl-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S),3(R-),24(S)- triol,
24-(2-Isopropoxymethyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S)-,3(R),24(R)- triol,
24-(2-Isopropoxymethyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S)-,3(R),24(S)- triol.(5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24R) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatet-raen- 1,3,24-triol,
(5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatet-raen- 1,3,24-triol,
24- (1 (R) -hydroxy-4-methylpentyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tet-raen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (S) -hydroxy-4-methylpentyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tet-raen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (R) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tetr-aen-1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (S) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tetr-aen-1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (R) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19) -triene-1 (-S), 3 (R) - diol,
24- (1 (S) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19) -trien-1 (-S), 3 (R) - diol,
24- (1 (R) -hydroxy-3-isopropoxypropyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E - tetraen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (S) -hydroxy-3-isopropoxypropyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E - tetraen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24-isopropoxymethyl-9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R -), 24 (R) - triol,
24-isopropoxymethyl-9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R -), 24 (S) - triol,
24- (2-isopropoxymethyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S) -, 3 (R), 24 (R) - triol,
24- (2-isopropoxymethyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S) -, 3 (R), 24 (S) - triol.

Die natürlichen Vitamine D₂ und D₃ (vgl. allgemeine Formel V) sind an sich biologisch inaktiv und werden erst nach Hydroxylierung in 25-Position in der Leber bzw. in 1-Position in der Niere in deren biologisch aktive Metaboliten umgewandelt. Die Wirkung der Vitamine D₂ und D₃ besteht in der Stabilisierung des Plasma-Ca⁺⁺- und Plasma-Phosphat-Spie gels, indem einem Absinken dieser Plasma-Spiegel entgegengewirkt wird.The natural vitamins D₂ and D₃ (cf. general formula V) are inherently biologically inactive and are only converted into their biologically active metabolites after hydroxylation in the 25-position in the liver or in the 1-position in the kidney. The effect of vitamins D₂ and D₃ consists in the stabilization of the plasma Ca ⁺⁺ and plasma phosphate mirror by counteracting a drop in these plasma levels.

Neben ihrer ausgeprägten Wirkung auf den Calcium- und Phosphatstoffwechsel be sitzen Vitamin D₂ und D₃ und seine synthetischen Abkömmlinge auch proliferati onshemmende und zelldifferenzierende Wirkungen (H.F. De Luca The Metabolism and Function of Vitamin D in Biochemistry of Steroid Hormones, Hrsg. H.L.J. Makin, 2nd Edition, Blackwell Scientific Publications 1984, S. 71-116). Bei Vitami D-Anwendung kann es aber zu Überdosierungserscheinungen kommen (Hypercalcämie).In addition to their pronounced effects on the calcium and phosphate metabolism be sit vitamin D₂ and D₃ and its synthetic derivatives also proliferati inhibitory and cell-differentiating effects (H.F. De Luca The Metabolism and Function of Vitamin D in Biochemistry of Steroid Hormones, ed. H.L.J. Makin, 2nd Edition, Blackwell Scientific Publications 1984, pp. 71-116). With Vitami D application, however, overdose symptoms can occur (Hypercalcaemia).

In 24-Stellung hydroxylierte 1α-Cholecalciferole gehen bereits aus der DE-AS- 25 26 981 hervor; sie besitzen eine geringere Toxizität als das entsprechende nicht-hydroxylierte 1α-Cholecalciferol. Die hydroxylierten Verbindungen zeigen eine selektive Aktivierung der intestinalen Calciumabsorption und eine schwä chere Knochenabsorptionswirkung als 1α-Cholecalciferol. Die in der internationalen Patentanmeldung WO 87/00834 beschriebenen 24-Hydro xy-Vitam-D-Analoga können für die Behandlung von durch abnormer Zellprolife ration und/oder Zelldifferentiation hervorgerufenen Störungen beim Menschen und Tier dienen.1α-Cholecalciferols hydroxylated in the 24-position are already known from DE-AS- 25 26 981; they have a lower toxicity than the corresponding one non-hydroxylated 1α-cholecalciferol. The hydroxylated compounds show a selective activation of intestinal calcium absorption and a weak Better bone absorption than 1α-cholecalciferol. The 24-hydro described in international patent application WO 87/00834 xy-Vitam-D analogs can be used for the treatment of abnormal cell proliferation ration and / or cell differentiation caused disorders in humans and Serve animal.

Für verschiedene 1,25-Dihydroxy-Homo-Vitamin-D-Derivate ist eine Dissoziation bezüglich der Eigenschaften Knochenabsorptionswirkung und HL-60 Zelldiferenti ation schon kürzlich von De Luca erwähnt worden. Die Knochenabsorptionswirkung in vitro ist dabei ein direktes Maß für die Calciummobilisierung in vivo.There is a dissociation for various 1,25-dihydroxy-homo-vitamin D derivatives regarding the properties of the bone absorption effect and HL-60 cell differenti ation was recently mentioned by De Luca. The bone absorption effect in vitro is a direct measure of calcium mobilization in vivo.

Es wurde nun gefunden, daß die erfindungsgemäßen seitenketten-homologen Vita min-D-Derivate der allgemeinen Formel I im Vergleich zum Vitamin-D-Abkömmling Calcitriol (1α,25-Dihydroxycholecalciferol) überraschenderweise ein günstigeres Wirkungsspektrum aufweisen. Während die Effekte auf den Calcium- und Phosphat stoffwechsel deutlich abgeschwächt sind (Verringerung der Nebenwirkungen durch Überdosierung oder erforderlicher hoher Dosierung), bleiben die proliferations hemmenden und zelldifferenzierenden Wirkungen annähernd erhalten (Dissoziati on).It has now been found that the side chain homologous Vita min-D derivatives of the general formula I compared to the vitamin D derivative Calcitriol (1α, 25-dihydroxycholecalciferol) surprisingly a cheaper one Show spectrum of activity. While the effects on calcium and phosphate metabolism are significantly weakened (reduction of side effects through Overdose or high dosage required), the proliferations remain inhibiting and cell-differentiating effects are approximately preserved (dissociation on).

Die Vitamin-D-Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wird mittels des Calcitriol-Rezeptortests bestimmt. Er wird unter Verwendung eines spezifischen Rezeptorproteins aus dem Darm rachitischer Hühner durchgeführt. Rezeptorhaltiges Bindungsprotein wird mit ³H-Calcitriol (0,5 ng/ml) in einem Reaktionsvolumen von 0,575 ml in Abwesenheit und in Anwesenheit der Prüfsubs tanzen für eine Stunde in einem Teströhrchen inkubiert. Zur Trennung von freiem und rezeptogebundenem Calcitriol wird eine Charcoal-Dextran-Absorption durch geführt. Dazu werden 200 µl einer Charcoal-Dextran-Suspension jedem Teströhr chen zugeführt und bei 22°C für 30 Minuten inkubiert. Anschließend werden die Proben bei 1500×g 10 Minuten bei 4°C zentrifugiert. Der Überstand wird dekan tiert und nach ca. 1stündiger Äquilibrierung in Atom-Light in einem β-Zähler gemessen.The vitamin D activity of the compounds according to the invention is determined using the Calcitriol receptor tests determined. He is using a specific Receptor protein carried out in the intestines of rachitic chickens. Binding protein containing the receptor is combined with 3 H-calcitriol (0.5 ng / ml) in one Reaction volume of 0.575 ml in the absence and in the presence of the test subs dance incubated for one hour in a test tube. To separate from free and receptor-bound calcitriol undergoes charcoal dextran absorption guided. For this purpose, 200 µl of a Charcoal dextran suspension are added to each test tube Chen fed and incubated at 22 ° C for 30 minutes. Then the Centrifuge samples at 1500 × g for 10 minutes at 4 ° C. The supernatant becomes dean and after approx. 1 hour equilibration in atomic light in a β counter measured.

Die mit verschiedenen Konzentrationen der Prüfsubstanz sowie der Referenzsub stanz (unmarkiertes Calcitriol) bei konstanter Konzentration der Bezugssubstanz (³H-Calcitriol) erhaltenen Kompetitionskurven werden in Beziehung zueinander gesetzt und ein Kompetitionsfaktor (KF) ermittelt. Er ist definiert als Quotient aus den Konzentrationen der jeweiligen Prüfsubs tanz und der Referenzsubstanz, die für 50%ige Kompetition erforderlich sind:The with different concentrations of the test substance and the reference sub punch (unlabelled calcitriol) with constant concentration of the reference substance (3 H-Calcitriol) competition curves obtained are in relation to each other set and a competition factor (KF) determined. It is defined as the quotient from the concentrations of the respective test subs dance and the reference substance required for 50% competition:

Demnach besitztAccordingly owns

[5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-9,10-Seco-24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatet-raen- 1,3,24-triol einen KF-Wert von 67 und
[5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-9,10-Seco-24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatet-raen-1,3,24- triol einen KF-Wert von 0,8.[5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24R) -9,10-Seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatet-raen-1,3,24-triol a KF Value of 67 and
[5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) -9,10-Seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatet-raen-1,3,24-triol a KF Value of 0.8.

Zur Bestimmung der antiproliferativen Potenz der erfindungsgemäßen Verbindungen wird stellvertretend mit den Verbindungen A und B als Prüfsubstanzen der nach folgend beschriebene Test durchgeführt:To determine the antiproliferative potency of the compounds according to the invention is representative of the compounds A and B as test substances according to The following test was carried out:

Keratinocyten von neugeborenen Mäusen werden in Abwandlung der Methode von Yuspa, S. und Harris, C.C., "Altered differentiation of mouse epidermal cells treates with retinyl acetate in vitro", Exp. Cell Res. 86 : 95-105, 1974 präpa riert und kultiviert. Neonatale NMRI-Mäuse beiderlei Geschlechts werden durch Dekapitation getötet, die Haut abpräpariert, in einer Antibiotica-Antimykotika-Lösung gewaschen und mit der dermalen Seite nach unten in Dispase II-Lösung (1,2 U/ml in Gewebekul turmedium M199 +25 mmol/l HEPES+15% fötales Kälberserum (FCS)+50 U/ml Peni cillin/Streptomycin (P/S) (Präparationsmedium, PM) bei 4°C über Nacht inku biert. Die Epidermis wird abgezogen und durch Trypsinierung eine Einzelzellsus pension hergestellt. Nach Zentrifugation wird das Zellsediment resuspendiert, nach Trypanblaufärbung die Zahl lebender kleiner runder Zellen bestimmt und die Zellen in einer Dichte von 4×10⁵ Zellen/cm² in Primaria-24-Loch-Platten in Gewebekulturmedium (M199+15% FCS+50 U/ml P/S) ausgesät. Nach 24 Stunden Inkubation bei 37°C werden die Zellen mit phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) gewaschen und weitere 24 Stunden in serumfreiem Gewebekulturmedium (M199+50 U/ml P/S+0,5% Ethanol) mit und ohne Testsubstanzen bei 32,5°C inkubiert. Dann werden 0,4 µCi/50 µl ³H-Methyl-thymidin (40 Ci/mmol) zugegeben. Nach 4 Stunden wird das Medium abgesaugt und die Reaktion durch Zugabe von 500 µl eiskalter 10%iger Trichloressigsäure (TCA) beendet. Die Zellen werden mit TCA und PBS gewaschen, durch Inkubation in einer Proteinase K-Lösung (10 mmol/l Tris-HCl, 10 mmol/l EDTA, 10 mmol/l NaCl, 0,2% Triton-X 100, pH 8,0, 50 µg/ml Proteinki nase K) lysiert und das Lysat durch Zentrifugation geklärt. Im Überstand wird szintillationsphotometrisch die Radioaktivität und, nach spezifischer Färbung der DNA mit Diamidinophenylindol (DAPI), die DNA-Konzentration fluoreszenzpho tometrisch bestimmt. Keratinocytes from newborn mice are modified from the method of Yuspa, S. and Harris, C.C., "Altered differentiation of mouse epidermal cells treates with retinyl acetate in vitro ", Exp. Cell Res. 86: 95-105, 1974 prep cultivated and cultivated. Neonatal NMRI mice of both sexes are killed by decapitation, dissected the skin, washed in an antibiotic-antifungal solution and with the dermal side down in Dispase II solution (1.2 U / ml in tissue culture turmedium M199 +25 mmol / l HEPES + 15% fetal calf serum (FCS) +50 U / ml peni cillin / streptomycin (P / S) (preparation medium, PM) at 4 ° C overnight beer. The epidermis is peeled off and a single cell by trypsinization pension manufactured. After centrifugation, the cell sediment is resuspended, after trypan blue staining determine the number of living small round cells and the Cells with a density of 4 × 10⁵ cells / cm² in 24-well Primaria plates Tissue culture medium (M199 + 15% FCS + 50 U / ml P / S) sown. After 24 hours Incubate at 37 ° C with phosphate buffered saline (PBS) washed and a further 24 hours in serum-free tissue culture medium (M199 + 50 U / ml P / S + 0.5% ethanol) with and without test substances at 32.5 ° C. Then 0.4 µCi / 50 µl ³H-methyl-thymidine (40 Ci / mmol) are added. After 4 hours the medium is suctioned off and the reaction is ice-cold by adding 500 μl 10% trichloroacetic acid (TCA) terminated. The cells are made with TCA and PBS washed, by incubation in a Proteinase K solution (10 mmol / l Tris-HCl, 10 mmol / l EDTA, 10 mmol / l NaCl, 0.2% Triton-X 100, pH 8.0, 50 µg / ml protein ki nose K) lysed and the lysate clarified by centrifugation. In the supernatant radioactivity and scintillation photometry, after specific staining the DNA with diamidinophenylindole (DAPI), the DNA concentration fluorescence pho determined geometrically.

Demnach hemmen Calcitriol sowie die Verbindungen A und B dosisabhängig den ³H- Thymidin-Einbau in DNA mit annähernd denselben IC₅₀-Werten von 4×10^-9 mol/l bzw. 6,5×10^-9 mol/l.Accordingly, calcitriol and the compounds A and B dose-dependently inhibit the ³H-thymidine incorporation in DNA with approximately the same IC₅₀ values of 4 × 10 ^-9 mol / l and 6.5 × 10 ^-9 mol / l.

Durch das verminderte Hypercalciämie-Risiko eignen sich die erfindungsgemäßen Substanzen in besonderer Weise zur Herstellung von Arzneimitteln für die Be handlung von Erkrankungen, die durch eine anomale Mitose gekennzeichnet sind (Psoriasis, maligne Tumoren). Voraussetzung für eine erfolgreiche Behandlung ist der Nachweis von Calcitriolrezeptoren im Zielorgan.Due to the reduced risk of hypercalcemia, the invention is suitable Substances in a special way for the production of pharmaceuticals for the Be act of diseases characterized by abnormal mitosis (Psoriasis, malignant tumors). Prerequisite for successful treatment is the detection of calcitriol receptors in the target organ.

Die vorliegende Erfindung bezieht sich somit auch auf pharmazeutische Präpara te, die mindestens eine Verbindung gemäß der allgemeinen Formel I zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger enthalten.The present invention thus also relates to pharmaceutical preparations te, the at least one compound of the general formula I together with contain a pharmaceutically acceptable carrier.

Außerdem betrifft die Erfindung die Verwendung der Verbindungen gemäß Formel I zur Herstellung von Arzneimitteln.The invention also relates to the use of the compounds of the formula I. for the manufacture of pharmaceuticals.

Die Herstellung der seitenketten-homologen-Vitamin-D-Derivate der Formel I erfolgt erfindungsgemäß dadurch, daß eine Verbindung der allgemeinen Formel IVThe production of the side chain homologous vitamin D derivatives of the formula I. takes place according to the invention in that a compound of general formula IV

worinwherein

R¹′ ein Wasserstoffatom oder eine geschützte Hydroxygruppe und
R²′ eine Hydroxyschutzgruppe bedeuten und
A, X sowie R⁵ und R⁶ die in Formel I angegebene Bedeutung haben,
gewünschtenfalls nach selektiver Hydrierung der Doppelbindung in der Seitenket te zu einer Verbindung der allgemeinen Formel IVaR¹ 'is a hydrogen atom or a protected hydroxy group and
R² 'represent a hydroxy protecting group and
A, X and R⁵ and R⁶ have the meaning given in formula I,
if desired after selective hydrogenation of the double bond in the side chain to a compound of general formula IVa

worin R¹′, R²′, A, X sowie R⁵ und R⁶ die in Formel IV angegebene Bedeutung haben und gewünschtenfalls nach Reduktion der Carbonylfunktion und gegebenenfalls nach Trennung des Gemisches der durch die Reduktion gebildeten epimeren Hydroxyver bindungen der allgemeinen Formeln IIIa und IIIbwherein R¹ ', R²', A, X and R⁵ and R⁶ have the meaning given in formula IV have and if desired after reduction of the carbonyl function and optionally after Separation of the mixture of the epimeric hydroxyver formed by the reduction bonds of the general formulas IIIa and IIIb

worin
R¹′, R², A, X sowie R⁵ und R⁶ die in Formel IV und B und D die in Formel I angegebene Bedeutung haben,
durch Bestrahlung mit ultraviolettem Licht unter Umkehr der Stereoisomerie an der 5,6-Doppelbindung in eine Verbindung der allgemeinen Formel IIwherein
R¹ ′, R², A, X and R⁵ and R⁶ have the meanings given in formula I in formula IV and B and D,
by irradiation with ultraviolet light with reversal of the stereoisomerism on the 5,6 double bond into a compound of the general formula II

worin
R¹′, R²′, A, B, D, X sowie R⁵ und R⁶ die in Formel IIIa/IIIb angegebene Be deutung haben,
umgewandelt
und diese anschließend durch Abspaltung vorhandener Hydroxyschutzgruppen und gegebenenfalls durch partielle oder vollständige Veresterung der Hydroxy gruppen in eine Verbindung der allgemeinen Formel I überführt wird. wherein
R¹ ′, R² ′, A, B, D, X and R⁵ and R⁶ have the meaning given in formula IIIa / IIIb,
converted
and this is then converted into a compound of the general formula I by splitting off existing hydroxyl protective groups and, if appropriate, by partially or completely esterifying the hydroxyl groups.

Die Reduktion der Seitenketten-Carbonylfunktion in der Verbindung der allgemei nen Formel IV erfolgt beispielsweise mit Cer(III)chlorid/Natriumborhydrid in einem polaren Solvens. Bei der Reduktion entsteht sowohl das R- als auch das S-Hydroxyisomere der allgemeinen Formeel IIIa bzw. IIIb. Die beiden Isomeren lassen sich chromatographisch trennen.The reduction of the side chain carbonyl function in the connection of the general NEN formula IV takes place, for example, with cerium (III) chloride / sodium borohydride a polar solvent. Reduction creates both the R and the S-hydroxy isomers of the general formulas IIIa and IIIb. The two isomers can be separated chromatographically.

Gewünschtenfalls kann vor Reduktion der Carbonylfunktion die Doppelbindung in der Seitenkette selektiv hydriert werden. Als Hydrierungsmittel ist u. a. Lithi um-tri-tert.-butoxy-aluminiumhydrid in einem polaren Solvens geeignet.If desired, the double bond in can be reduced before reducing the carbonyl function the side chain are selectively hydrogenated. As a hydrogenating agent is u. a. Lithi um-tri-tert-butoxy aluminum hydride in a polar solvent.

Die nachfolgende Umwandlung einer Verbindung der allgemeinen Formel IIIa/IIIb in eine Verbindung der allgemeinen Formel II erfolgt z. B. durch Bestrahlung mit ultraviolettem Licht in Gegenwart eines sogenannten "Triplettsensibilisators". Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wird hierfür Anthracen verwendet. Durch Spaltung der pi-Bindung der 5,6-Doppelbindung, Rotation des A-Ringes um 180° um die 5,6-Einfachbindung und Reetablierung der 5,6-Doppelbindung wird die Stereo isomerie an der 5,6-Doppelbindung umgekehrt.The subsequent conversion of a compound of general formula IIIa / IIIb in a compound of general formula II z. B. by irradiation with ultraviolet light in the presence of a so-called "triplet sensitizer". Anthracene is used for this purpose in the context of the present invention. By Cleavage of the pi bond of the 5,6 double bond, rotation of the A ring by 180 ° the 5.6 single bond and re-establishment of the 5.6 double bond becomes the stereo Reverse isomerism on the 5,6 double bond.

Anschließend werden vorhandene Hydroxyschutzgruppen abgespalten, vorzugsweise unter Verwendung von Tetra-n-butyl-ammoniumfluorid sowie gewünschtenfalls die freien Hydroxygruppen nach gängigen Verfahren partiell oder vollständig mit dem entsprechenden Carbonsäurehalogenid (Halogenid=Chlorid, Bromid) oder Carbon säureanhydrid verestert. Existing hydroxyl protective groups are then split off, preferably using tetra-n-butyl ammonium fluoride and, if desired, the free hydroxyl groups partially or completely with the corresponding carboxylic acid halide (halide = chloride, bromide) or carbon acid anhydride esterified.

Production of raw materials 1. 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20 (S) -formyl-9,10-secopr-egna- 5E, 7E, 10 (19) -triene 1

Die Herstellung von 1 erfolgt nach M.J. Calverley, Tetrahydron 43, 4609 (1987); siehe auch internationale Patentanmeldung WO 87/00834. Dort ist auch die Herstellung der Ausgangsverbindung, worin R¹′ ein Wasserstoffatom ist, beschrieben.The production of 1 takes place according to M.J. Calverley, Tetrahydron 43, 4609 (1987); see also international patent application WO 87/00834. There is also the preparation of the starting compound in which R¹ ′ is a hydrogen atom, described.

2. 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20 (R) -methyl-9,10-secopr-egna- 5E, 7E, 10 (19) -triene-21-carbaldehyde 2

Der Aldehyd 2 wird nach einem neuen Verfahren hergestellt.Aldehyde 2 is produced using a new process.

a) To a suspension of 1.8 g sodium hydride (80% in oil) in 70 ml abs. THF a solution of 15.57 g of diethylphosphono-ethoxyacetic acid is added dropwise at 25 ° C. Acid ethyl ester (produced according to W. Grell and H. Machleidt, Liebigs Ann. Chem. 699, 53 (1966)) in 200 ml THF. After addition, stir for another 90 mi grooves at 60 ° C, cools again to 25 ° C and gives a solution drop by drop of 6.2 g 1 in 70 ml THF. The mixture is stirred under reflux for 2 hours and poured the cooled reaction solution then in water and extracted with ethyl acetate. After drying (Na₂SO₄) and concentrating it is chromatographed holding crude product on silica gel with hexane / ethyl acetate. The main fraction gives 5.2 g of 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -23- (ethoxy-9,10- secochola-5E, 7E, 10 (19) -tetraen-24-acid-ethyl ester as an oily mixture of C-22 double bond isomers.
b) 5.2 g of the product obtained under a) are dissolved in 120 ml of toluene and at 0 ° C slowly with 20 ml of a 20% solution of diisobutyl aluminum hydride added in toluene. After 30 minutes at 0 ° C, the reacti are poured solution carefully in NH₄Cl solution and extracted with ethyl acetate. To The usual workup gives 4.88 g of 1 (S), 3 (R) -bis (tert-butyldime) thylsilyloxy) -23-ethoxy-9,10-secochola-5E, 7E, 10 (19), 22-tetraen-24-ol- as colorless oily mixture of isomers, which can be separated into the fol stage is used.
c) The compound (4.88 g) produced under b) is mixed out 55 ml dichloromethane and 55 ml 70% aqueous acetic acid for 4 hours Room temperature stirred. It is then neutralized by adding NH₃ solution and extracted with dichloromethane. The raw product is sent to Kie self-chromatographed with hexane / ethyl acetate. That way 2.02 g of 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -24-hydroxy-9.10- secochola-5E, 7E, 10 (19) -trien-23-one as a colorless oil. 1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.01 ppm (s, 12H, Si-CH₃), 0.52 (s, 3H, H-18), 0.81 and 0.84 (s, each 9H, Si-t-butyl), 0.90 (d, J = 7Hz, 3H, H-21), 3.09 (t, J = 5Hz, 1H, OH), 4.10 (dd, 1H, H-24), 4.16 (m, 1H, H-3), 4.21 (dd, 1H, H-24), 4.39 (m, 1H, H-1) ), 4.88, 4.93 (s, each 1H, H-19), 5.77, 6.39 (d, J = 11Hz, each 1H, H-6, H-7).
d) The product obtained under c) (2.02 g) is in 25 ml of methanol and 25 ml THF dissolved and 300 mg of sodium borohydride added at 0 ° C. You stir 1.5 hours at 0 ° C, the reaction mixture is then poured into NH₄Cl solution and extracted with ethyl acetate. 1.75 g of 1 (S), 3 (R) -bis (tert-bu tyldimethylsilyloxy) -9,10-secochola-5E, 7E, 10 (19) -triene-23,24-diol as colorless, oily mixture of 23-epimers, which as a result reaction is used.
e) 1.75 g of the product obtained under d) are dissolved in 40 ml of toluene and adds 1.23 g of lead tetraacetate in portions with ice water cooling. The mixture is stirred for 30 minutes, another 1.0 g of Pb (OAc) ₄ is added and stirring is continued 15 minutes at +5 to + 10 ° C. For working up, NaHCO₃ solution is added and the resulting mixture is filtered ne suspension over Celite and extracted the filtrate with ethyl acetate. The The crude product is chromatographed on silica gel with hexane / ethyl acetate. After crystallization of the main fraction from ethanol, 560 mg is obtained 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20 (R) -methyl-9,10-secopr-egna- 5E, 7E, 10 (19) -triene-21-carbaldehyde, melting point 101-104 ° C.

Die Umsetzung des Aldehyds 1 bzw. 2 mit einem Phosphoran der FormelThe reaction of aldehyde 1 or 2 with a phosphorane of the formula

führt zu den Verbindungen der allgemeinen Formel IV (Wittig-Reaktion). leads to the compounds of general formula IV (Wittig reaction).

Production of the phosphorus ylides used 1. isobutylcarbonylmethylene triphenylphosphorane a) Bromomethyl isobutyl ketone

50 ml Isobutylmethylketon in 240 ml Methanol werden bei 0°C mit 20 ml Brom versetzt und nach Zugabe noch 1,5 Stunden bei +10°C gerührt. Danach setzt man 360 ml Wasser zu und rührt weitere 16 Stunden bei Raumtempera tur. Zur Aufarbeitung wird die Reaktionsmischung mit gesättigter Kochsalzlö sung versetzt, die sich abscheidende organische Phase abgetrennt und die wäßrige Phase mit Ether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden mit 10%iger Na₂CO₃-Lösung gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Nach Filtration wird das Lösungsmittel im Wasserstrahlvakuum abgezogen und der Rückstand destilliert. Die Hauptfraktion enthält 53,7 g Bromme thylisobutylketon vom K_p ^15-20 67-69°C.50 ml of isobutyl methyl ketone in 240 ml of methanol are mixed with 0 ml of bromine at 0 ° C and, after addition, stirred at + 10 ° C for a further 1.5 hours. Then add 360 ml of water and stir for a further 16 hours at room temperature. For working up, the reaction mixture is mixed with saturated sodium chloride solution, the organic phase which separates off and the aqueous phase is extracted with ether. The combined organic phases are washed with 10% Na₂CO₃ solution and dried over Na₂SO₄. After filtration, the solvent is removed in a water jet vacuum and the residue is distilled. The main fraction contains 53.7 g of bromomethyl isobutyl ketone with K _p ^15-20 67-69 ° C.

b) isobutylcarbonylmethyltriphenylphosphonium bromide

Brommethylisobutylketon (53,6 g) und Triphenylphosphin (78,5 g) werden in einem 500 ml-Rundkolben innig vermischt und nach Abklingen der anfängli chen starken Wärmetönung 12 Stunden unter Stickstoff bei Raumtemperatur belassen. Danach wird die feste Reaktionsmasse in 330 ml Methylenchlorid aufgenommen und 30 Minuten unter Rückfluß erhitzt. Nach Zusatz von 500 ml Ether läßt man auf Raumtemperatur abkühlen und isoliert das Produkt durch Filtration. Nach Trocknung erhält man 111,7 g des Phosphoniumsalzes vom Schmelzpunkt 244-245°C.Bromomethyl isobutyl ketone (53.6 g) and triphenylphosphine (78.5 g) are described in a 500 ml round bottom flask mixed intimately and after the initial Chen strong heat tone 12 hours under nitrogen at room temperature leave. Then the solid reaction mass in 330 ml of methylene chloride recorded and heated under reflux for 30 minutes. After adding 500 ml Ether is allowed to cool to room temperature and the product is isolated Filtration. After drying, 111.7 g of the phosphonium salt are obtained Melting point 244-245 ° C.

c) isobutylcarbonylmethylene triphenylphosphorane

111,6 g des unter b) erhaltenen Phosphoniumbromids werden sukzessive mit 1500 ml Methylenchlorid und 1500 ml 2N-NaOH versetzt und 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Die organische Phase wird abgetrennt, mit Wasser gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Der nach Einengen erhaltene feste Rückstand wird aus tert.-Butylmethylether umkristallisiert und ergibt 72,2 g des Ylids vom Schmelzpunkt 120-212°C. 111.6 g of the phosphonium bromide obtained under b) are gradually added 1500 ml of methylene chloride and 1500 ml of 2N NaOH were added and the mixture was stirred for 30 minutes Room temperature stirred. The organic phase is separated off with water washed and dried over Na₂SO₄. The solid obtained after concentration The residue is recrystallized from tert-butyl methyl ether and gives 72.2 g of the ylide, melting point 120-212 ° C.

2. Isoamylcarbonylmethylene triphenylphosphorane

Die Bildung der Titelverbindung erfolgt in Analogie zu dem unter 1. be schriebenen Verfahren durch Bromierung von Isoamylmethylketon, Umsetzung des Bromids mit Triphenylphosphin zum Phosphoniumsalz und Bildung des Ylids mit 2N NaOH. Aus 50,0 ml Isoamylmethylketon und 18,2 ml Brom erhält man nach destillativer Aufreinigung 54,68 g 1-Brom-5-methyl-hexan-2-on vom K_p ^15-20 80-86°C. Aus 54,58 g des Bromids und 74,14 g Triphenylphosphin erhält man 91,6 g des Phosphoniumsalzes vom Schmelzpunkt 230-233°C. Aus 91,6 g des Phosphoniumsalzes erhält man nach Behandlung mit NaOH und Umkristallisation des Rohprodukts aus Methylenchlorid/Ester 69,8 g der Ti telverbindung vom Schmelzpunkt 64-67°C.The formation of the title compound takes place in analogy to the procedure described under 1. be by bromination of isoamyl methyl ketone, reaction of the bromide with triphenylphosphine to the phosphonium salt and formation of the ylide with 2N NaOH. From 50.0 ml of isoamyl methyl ketone and 18.2 ml of bromine, 54.68 g of 1-bromo-5-methyl-hexan-2-one of K _p ^15-20 80-86 ° C are obtained after purification by distillation. 54.58 g of the bromide and 74.14 g of triphenylphosphine give 91.6 g of the phosphonium salt with a melting point of 230-233 ° C. After treatment with NaOH and recrystallization of the crude product from methylene chloride / ester, 69.8 g of the titanium compound of melting point 64-67 ° C. are obtained from 91.6 g of the phosphonium salt.

3. Isopropoxymethylcarbonylmethylene triphenylphosphorane

2,34 g Natrium werden in 150 ml Isopropanol gelöst. Nach Zugabe von 20,0 g (Chlormethyl)-(triphenylphosphoranylidenmethyl)-keton (R.F. Hudson et al., J. Org. Chem. 28 2446, 1963), in 200 ml Isopropanol gelöst, erhitzt man 8 Stunden unter Rückfluß. Die abgekühlte Reaktionsmischung wird in Kochsalzlösung gegossen und mit Ethylacetat extrahiert. Der nach Einengen erhaltene ölige Rückstand wird an Kieselgel mit Ethylacetat chromatographiert. Man erhält 9,53 g der Titelver bindung.2.34 g of sodium are dissolved in 150 ml of isopropanol. After adding 20.0 g (Chloromethyl) - (triphenylphosphoranylidenemethyl) ketone (R.F. Hudson et al., J. Org. Chem. 28 2446, 1963), dissolved in 200 ml of isopropanol, is heated 8 Hours under reflux. The cooled reaction mixture is poured into saline and with Extracted ethyl acetate. The oily residue obtained after concentration is on Chromatographed silica gel with ethyl acetate. 9.53 g of the title ver binding.

4. (2-isopropoxyethyl) carbonylmethylene triphenylphosphorane a) 1-bromo-4-isopropoxy-butan-2-one

Eine Lösung aus 68,2 g 4-Isopropoxy-2-butanon (F.B. Hasan et al., J. Bio- log. Chem. 256, 7781, 1981) in 315 ml Methanol wird bei 0°C tropfenweise mit 26,9 ml Brom versetzt und danach 1,5 Stunden bei +10°C gerührt. An schließend tropft man 470 ml Wasser zur Reaktionslösung und rührt 16 Stunden bei Raumtemperatur. Zur Aufarbeitung gießt man in gesättigte Kochsalzlösung und extrahiert mit Ether. Destillation des Rohprodukts ergibt 78,07 g des Bromderivats vom K_p ^15-20 95°C. A solution of 68.2 g of 4-isopropoxy-2-butanone (FB Hasan et al., J. Biolog. Chem. 256, 7781, 1981) in 315 ml of methanol is added dropwise at 0 ° C. with 26.9 ml Bromine added and then stirred at + 10 ° C for 1.5 hours. 470 ml of water are then added dropwise to the reaction solution and the mixture is stirred at room temperature for 16 hours. For working up, pour into saturated saline and extract with ether. Distillation of the crude product gives 78.07 g of the bromine derivative of K _p ^15-20 95 ° C.

b) 4-isopropoxy-2-oxo-butyl triphenylphosphonium bromide

Aus 78,0 g des unter a) erhaltenen Bromids und 97,85 g Triphenylphosphin erhält man nach dem unter 1. beschriebenen Verfahren 133,35 g des Phos phoniumsalzes vom Schmelzpunkt 183°C.From 78.0 g of the bromide obtained under a) and 97.85 g of triphenylphosphine 133.35 g of Phos are obtained by the method described under 1. phonium salt of melting point 183 ° C.

c) (2-isopropoxyethyl) carbonylmethylene triphenylphosphorane

Das unter b) erhaltene Phosphoniumbromid (133,2 g) wird wie unter 1. be schrieben mit 2N-NaOH in Methylenchlorid behandelt. Nach Umkristallisa tion des Rohprodukts aus Ethylacetat erhält man 64,38 g der Titelverbin dung vom Schmelzpunkt 97°C.The phosphonium bromide (133.2 g) obtained under b) is as in 1. be wrote treated with 2N NaOH in methylene chloride. After recrystallization tion of the crude product from ethyl acetate, 64.38 g of the title compound are obtained The melting point is 97 ° C.

Durch Variation der für die Wittig-Reaktion eingesetzten Keto-Komponente lassen sich in analoger Weise weitere Phosphorane der allgemeinen Formel IV herstel len.By varying the keto component used for the Wittig reaction similarly produce further phosphoranes of the general formula IV len.

example 1

Eine Lösung von 1,6 g 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-20(R)-methyl- 9,10-secopregna-5E,7e,10(19)-trien-21-carbaldehyd in 50 ml Toluol wird nach Zusatz von 3,02 g Isoamylcarbonylmethylentriphenylphosphoran 16 Stunden bei 80°C unter Argon gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abgezogen und der Rückstand an Kieselgel mit Hexan/Ethylacetat chro matographiert. Die Hauptfraktion ergibt 1,15 g [1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldime thylsilyloxy)-9,10-secochola-5E,7E,10(19),23(E)-tetraen-24-yl]-4-met-hyl-pentan- 1-on als farbloses Öl.A solution of 1.6 g of 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20 (R) -methyl- 9,10-secopregna-5E, 7e, 10 (19) -triene-21-carbaldehyde in 50 ml of toluene is added Add 3.02 g of isoamylcarbonylmethylene triphenylphosphorane for 16 hours 80 ° C stirred under argon. The solvent is then reduced The pressure is removed and the residue on silica gel with hexane / ethyl acetate matographed. The main fraction gives 1.15 g [1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldime thylsilyloxy) -9,10-secochola-5E, 7E, 10 (19), 23 (E) -tetraen-24-yl] -4-met-hyl-pentane 1-one as a colorless oil.

¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,01 ppm (s, 12H, Si-CH₃), 0,56 (s, 3H, H-18), 0,87 (s, 18H, Si- t.-butyl); 0,88 (d, J=7Hz, 6H, C-(CH₃)₂), 0,95 (d, J=7Hz, 3H, H-21); 4,25 (m, 1H, H-3); 4,55 (m, 1H, H-1); 4,94 und 5,00 (s, je 1H, H-19); 5,82 und 6,46 (d, J=11Hz, je 1H, H-6, H-7); 6,10 (d, J=16Hz, 1H, H-24); 6,80 (m, 1H, H-23).1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.01 ppm (s, 12H, Si-CH₃), 0.56 (s, 3H, H-18), 0.87 (s, 18H, Si t-butyl); 0.88 (d, J = 7Hz, 6H, C- (CH₃) ₂), 0.95 (d, J = 7Hz, 3H, H-21); 4.25 (m, 1H, H -3); 4.55 (m, 1H, H-1); 4.94 and 5.00 (s, 1H each, H-19); 5.82 and 6.46 (d, J = 11Hz, each 1H, H-6, H-7); 6.10 (d, J = 16Hz, 1H, H-24); 6.80 (m, 1H, H-23).

Example 2

Man löst 572 mg Cer(III)-chlorid-Heptahydrat in 10 ml Methanol und gibt die nach Beispiel 1 hergestellte Verbindung (1,10 g) in 5 ml Methanol gelöst hinzu. Nach Zusatz von 61 mg Natriumborhydrid wird 30 Minuten bei 0°C gerührt. Zur Aufarbeitung gießt man in Wasser, extrahiert mit Dichlormethan, trocknet (Na₂SO₄) und engt ein. Das so erhaltene Gemisch der diastereomeren Alkohole wird durch Chromatographie an Kieselgel mit Hexan/Ethylacetat getrennt. Man erhält in der Elutionsreihenfolge 290 mg 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethyl silyloxy)-24-(1-hydroxy-4-methylpentyl)-9,10-seco-5E,7E,10(19),23(E)--cholate traen (Epimer A) und 120 mg Epimer B. Die Epimeren zeigen identische NMR-Spek tren.572 mg of cerium (III) chloride heptahydrate are dissolved in 10 ml of methanol and are added Compound prepared according to Example 1 (1.10 g) dissolved in 5 ml of methanol. After adding 61 mg of sodium borohydride, the mixture is stirred at 0 ° C. for 30 minutes. To Working up is poured into water, extracted with dichloromethane and dried (Na₂SO₄) and constricts. The mixture of diastereomeric alcohols thus obtained is separated by chromatography on silica gel with hexane / ethyl acetate. Man receives 290 mg of 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethyl) in the elution order silyloxy) -24- (1-hydroxy-4-methylpentyl) -9,10-seco-5E, 7E, 10 (19), 23 (E) - cholates traen (Epimer A) and 120 mg Epimer B. The epimers show identical NMR spectra tren.

¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,01 ppm (s, 12H, Si-CH₃), 0,49 (s, 3H, H-18), 0,86 (s, 18h, Si- t.-butyl); 0,86 (d, J=7Hz, 6H, C-(CH₃)₂); 0,88 (d, J=7Hz, 3H, H-21); 4,16 (m, 1H, H-3); 4,48 (m, 1H, H-1); 4,88 und 4,93 (s, je 1H, H-19); 5,40 (dd, J=15,5 u. 7Hz, 1H, H- 24); 5,55 (m, 1H, H-23); 5,77 und 6,40 (d, J=11Hz, je 1H, H-6, H-7). 1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.01 ppm (s, 12H, Si-CH₃), 0.49 (s, 3H, H-18), 0.86 (s, 18h, Si t-butyl); 0.86 (d, J = 7Hz, 6H, C- (CH₃) ₂); 0.88 (d, J = 7Hz, 3H, H-21); 4.16 (m, 1H, H-3); 4.48 (m, 1H, H-1); 4.88 and 4.93 (s, 1H each, H-19); 5.40 (dd, J = 15.5 and 7Hz, 1H, H- 24); 5.55 (m, 1H, H-23); 5.77 and 6.40 (d, J = 11Hz, each 1H, H-6, H-7).

Example 3

Eine Lösung von 290 mg des unter Beispiel 2 erhaltenen Produkts (Epimer A) in 80 ml Toluol wird nach Zusatz von 44 mg Anthracen und 0,01 ml Triethylamin in einem Pyrex-Tauchreaktor mittels einer Quecksilberhochdrucklampe (Philips HPK 125) bestrahlt. Die Bestrahlungszeit beträgt 3,5 Minuten, die Durchmischung der Lösung wird durch Einleiten eines Stickstoffstroms gewährleistet. Nach Einengen und Chromatographie an Kieselgel mit Hexan/Ethylacetat erhält man 241 mg 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-24-(1-hydroxy-4-methylpe-ntyl)-9,10- secochola-5Z,7E,10(19)23(E)-tetraen als farbloses Öl.[α] + 49,6° (CHCl₃, c=0,425).A solution of 290 mg of the product obtained in Example 2 (Epimer A) in 80 ml of toluene is added after adding 44 mg of anthracene and 0.01 ml of triethylamine a Pyrex submersible reactor using a high pressure mercury lamp (Philips HPK 125) irradiated. The irradiation time is 3.5 minutes, the mixing of the Solution is ensured by introducing a stream of nitrogen. After constriction and chromatography on silica gel with hexane / ethyl acetate gives 241 mg 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -24- (1-hydroxy-4-methyl-p-ntyl) -9.10- secochola-5Z, 7E, 10 (19) 23 (E) -tetraen as a colorless oil. [α] + 49.6 ° (CHCl₃, c = 0.425).

Analoge Behandlung von 120 mg des nach Beispiel 2 erhaltenen polaren Isomeren (Epimer B) ergibt 113 mg als farbloses Öl.[α] + 41,4° (CHCl₃, c=0,285).Analogous treatment of 120 mg of the polar isomer obtained according to Example 2 (Epimer B) gives 113 mg as a colorless oil. [Α] + 41.4 ° (CHCl₃, c = 0.285).

Example 4

Eine Lösung von 225 mg des nach Beispiel 3 aus dem Epimeren A erhaltenen Pro dukts in 5 ml THF wird nach Zusatz von 1,31 ml einer 1M-Lösung von Tetrabutyl ammoniumfluorid in THF 60 Minuten bei 60°C gerührt. Nach dem Abkühlen gießt man in gesättigte Kochsalzlösung und extrahiert mit Ethylacetat. Das Rohprodukt wird an Kieselgel mit Hexan/Ethylacetat chromatographiert und liefert 85 mg 24- (1-Hydroxy-4-methylpentyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-1-(S),3(R)- diol als weißen Schaum.A solution of 225 mg of the pro obtained from epimer A according to Example 3 Duct in 5 ml of THF after adding 1.31 ml of a 1M solution of tetrabutyl ammonium fluoride in THF at 60 ° C for 60 minutes. After cooling, you pour in saturated saline and extracted with ethyl acetate. The raw product is chromatographed on silica gel with hexane / ethyl acetate and gives 85 mg of 24- (1-Hydroxy-4-methylpentyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tetraen-1- (S), 3 (R) - diol as a white foam.

¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,57 ppm (s, 3H, H-18), 0,84 (d, J=7Hz, 3H, H-21); 0,92 (d, J=7Hz 6H, C-(CH₃)₂; 4,03 (m, 1H, H-25); 4,23 (m, 1H, H-3); 4,43 (m, 1H, H-1); 5,00 und 5,33 (s, je 1H, H-19); 5,45 (dd, J=15,5 u. 7Hz, 1H, H-24); 5,60 (m, 1H, H-23); 6,02 und 6,38 (d, J=11Hz, je 11H, H-6, H-7).1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.57 ppm (s, 3H, H-18), 0.84 (d, J = 7Hz, 3H, H-21); 0.92 (d, J = 7Hz 6H, C- (CH₃) ₂; 4.03 (m, 1H, H-25); 4.23 (m, 1H, H-3); 4.43 (m, 1H, H-1); 5.00 and 5.33 (s, 1H each, H-19); 5.45 (dd, J = 15.5 and 7 Hz, 1H, H-24); 5.60 (m, 1H, H-23); 6.02 and 6.38 (d, J = 11Hz, each 11H, H-6, H-7).

Analoge Behandlung des nach Beispiel 3 aus dem Epimer B erhaltenen Produkts (95 mg) ergibt 35 mg des epimeren Triols als farbloses Öl. Die NMR-Spekten der Epimeren sind identisch. Analogous treatment of the product obtained from epimer B according to Example 3 (95 mg) gives 35 mg of the epimeric triol as a colorless oil. The NMR spectra of the Epimers are identical.

Example 5

In Analogie zu dem unter Beispiel 1 beschriebenen Verfahren setzt man 2,05 g 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-20-(R)-methyl-9,10-secop-regna- 5E,7E,10(19)-trien-21-carbaldehyd in 53 ml Toluol mit 3,4 g Isobutylcarbonyl methylentriphenylphosphoran um. Nach chromatographischer Reinigung erhält man [1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-secochola-5E,7E,10-(19),23(E)- tetraen-24-yl]-3-methyl-butan-1-on vom Schmelzpunkt 79-81°C (aus Ethanol), [α] + 52,6° (CHCl₃, c=0,500).In analogy to the process described in Example 1, 2.05 g is used 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20- (R) -methyl-9,10-secop-regna- 5E, 7E, 10 (19) -triene-21-carbaldehyde in 53 ml of toluene with 3.4 g of isobutylcarbonyl methylenetriphenylphosphorane. After chromatographic purification, one obtains [1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -9,10-secochola-5E, 7E, 10- (19), 23 (E) - tetraen-24-yl] -3-methyl-butan-1-one with a melting point of 79-81 ° C. (from ethanol), [α] + 52.6 ° (CHCl₃, c = 0.500).

Example 6

Durch Reduktion von 1,75 g des unter Beispiel 5 erhaltenen Produkts unter den Bedingungen des Beispiels 2 erhält man 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyl oxy)-24-(1(R,S)-hydroxy-3-methylbutyl)-9,10-secochola-5E,7E,10(19),2-3E-tetraen als öliges Gemisch der Epimeren. Durch Chromatographie an Kieselgel mit Hexan/ Ethylacetat erhält man in der Elutionsreihenfolge 780 mg Epimer A und 600 mg Epimer B als farblose Öle, die NMR-spektroskopisch nicht unterscheidbar sind.By reducing 1.75 g of the product obtained in Example 5 under the Conditions of Example 2 give 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyl oxy) -24- (1 (R, S) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5E, 7E, 10 (19), 2-3E-tetraene as an oily mixture of epimers. By chromatography on silica gel with hexane / Ethyl acetate is obtained in the elution order of 780 mg Epimer A and 600 mg Epimer B as colorless oils that cannot be distinguished by NMR spectroscopy.

Example 7

Durch triplett-sensibilisierte Photoisimerisierung analog Beispiel 3 und anschließende Silyletherspaltung analog Beispiel 4 erhält man aus 700 mg des nach Beispiel 6 hergestellten Epimers A 240 mg 24-(1-Hydroxy-3-methylbutyl)- 9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-1(S),3(R)-diol vom Zersetzungsintervall 119-125°C, [α] + 38,8° (Methanol, c=0,505).By triplet-sensitized photoisimerization analogous to Example 3 and subsequent silyl ether cleavage analogous to Example 4 is obtained from 700 mg of the Epimer A prepared according to Example 6 240 mg of 24- (1-hydroxy-3-methylbutyl) - 9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tetraen-1 (S), 3 (R) -diol from the decomposition interval 119-125 ° C, [α] + 38.8 ° (methanol, c = 0.505).

Analoge Behandlung von 330 mg Epimer B ergibt 129 mg vom Zersetzungsintervall 139-145°C, [α] + 54,8° (Methanol, c=0,505). Analogous treatment of 330 mg Epimer B gives 129 mg of the decomposition interval 139-145 ° C, [α] + 54.8 ° (methanol, c = 0.505).

Example 8

Eine Lösung von 170 mg des nach Beispiel 5 erhaltenen Produkts in 5 ml THF wird nach Zusatz von 200 mg Lithium-tri-tert.-butoxy-aluminiumhydrid 90 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Zur Aufarbeitung versetzt man mit 0,8 ml gesättigter NH₄Cl-Lösung, filtriert und engt das Filtrat ein. Chromatographie des Rohpro dukts an Al₂O₃ (Merck, neutral, Stufe III) ergibt 108 mg 1-[1(S),3(R)-Bis- (tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-secochola-5E,7E,10(19)-trien-24-y-l]-3-me thyl-butan-1-on als farbloses Öl.A solution of 170 mg of the product obtained according to Example 5 in 5 ml of THF after adding 200 mg of lithium tri-tert-butoxy aluminum hydride for 90 minutes Room temperature stirred. For working up, 0.8 ml of saturated is added NH₄Cl solution, filtered and the filtrate concentrated. Chromatography of the Rohpro Duct on Al₂O₃ (Merck, neutral, stage III) gives 108 mg 1- [1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -9,10-secochola-5E, 7E, 10 (19) -trien-24-y-l] -3-me thyl-butan-1-one as a colorless oil.

¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,53 ppm (s, 3H, H-18); 4,22 (m, 1H, H-3); 4,54 (m, 1H, H-1); 4,93 und 4,98 (m, je 1H, H-19); 5,82 und 6,46 (d, J=11Hz, je 1H, H-6, H-7).1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.53 ppm (s, 3H, H-18); 4.22 (m, 1H, H-3); 4.54 (m, 1H, H-1); 4.93 and 4.98 (m, each 1H, H-19); 5.82 and 6.46 (d, J = 11Hz, each 1H, H-6, H-7).

Example 9

Photochem. Doppelbindungsisomerisierung analog Beispiel 3 und Silyletherspal tung analog Beispiel 4 ergeben aus 100 mg des Produkts von Beispiel 8 50 mg 1-[1(S),3(R)-Dihydroxy-9,10-secochola-5Z,7E,10(19)-trien-24-yl]-3-me-thyl-butan- 1-on.
UV (Methanol): λ=212 nm (ε=14 300), 265 (15 860).Photochem. Double bond isomerization analogous to example 3 and silyl ether splitting analogous to example 4 yield 50 mg 1- [1 (S), 3 (R) -dihydroxy-9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19) from 100 mg of the product of example 8. -trien-24-yl] -3-methyl-butan-1-one.
UV (methanol): λ = 212 nm (ε = 14 300), 265 (15 860).

Example 10

Umsetzung von 1,6 g 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-20(R)-methyl- 9,10-secopregna-5E,7E,10(19)-trien-21-carbaldehyd mit (2-Isopropoxyethyl)-carb onylmethylentriphenylphosphoran analog Beispiel 1 ergibt 1,15 g 1-[1(S),3(R)- Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-secochola-5E,7E,10(19),23(E)--tetraen-24- yl]-3-isopropoxy-propan-1-on als farbloses Öl.Reaction of 1.6 g of 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20 (R) -methyl- 9,10-secopregna-5E, 7E, 10 (19) -triene-21-carbaldehyde with (2-isopropoxyethyl) carb onylmethylene triphenylphosphorane analogously to Example 1 gives 1.15 g 1- [1 (S), 3 (R) - Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -9,10-secochola-5E, 7E, 10 (19), 23 (E) - tetraen-24- yl] -3-isopropoxy-propan-1-one as a colorless oil.

¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,01 ppm (s, 12H, Si-CH₃), 0,55 (s, 3H, H-18), 0,86 und 0,90 (s, je 9H, Si-t.-butyl); 0,96 (d, J=7Hz, 3H, H-21); 1,15 (d, J=7Hz, 6H, C(CH₃)₂); 3,60 (m, 1H, CH-O); 3,73 (t, J=7Hz, 2H, CH₂-O); 4,23 (m, 1H, H-3); 4,55 (m, 1H, H-1); 4,95 und 5,00 (m, je 1H, H-19); 5,83 und 6,46 (d, J=11Hz, je 1H, H-6, H-7); 6,11 (d, J=15, 5Hz, 1H, H-24); 6,87 (m, 1H, H-23). 1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.01 ppm (s, 12H, Si-CH₃), 0.55 (s, 3H, H-18), 0.86 and 0.90 (s, each 9H, Si-t.-butyl); 0.96 (d, J = 7Hz, 3H, H-21); 1.15 (d, J = 7Hz, 6H, C (CH₃) ₂); 3.60 (m, 1H, CH-O); 3.73 (t, J = 7Hz, 2H, CH₂-O); 4.23 (m, 1H, H-3); 4.55 (m, 1H, H-1); 4.95 and 5.00 (m, 1H each, H-19); 5.83 and 6.46 (d, J = 11Hz, each 1H, H-6, H-7); 6.11 (d, J = 15, 5Hz, 1H, H-24); 6.87 (m, 1H, H-23).

Example 11

Durch Reduktion analog Beispiel 2, Photoisomerisierung analog Beispiel 3 und Silyletherspaltung analog Beispiel 4 erhält man aus 1,05 g des nach Beispiel 10 dargestellten Produkts 143 mg 24-(1(R,S)-Hydroxy-3-isopropoxypropyl)-9,10-se cochola-5Z-7E,10(19),23-tetraen-1(S),3(R)-diol als 1 : 1-Gemisch der Diastereo meren, die durch Hochdruckflüssigkeitschromatographie getrennt werden. Die Isomeren weisen identische NMR-Spektren auf.By reduction analogous to Example 2, photoisomerization analogous to Example 3 and Silyl ether cleavage analogous to Example 4 is obtained from 1.05 g of that according to Example 10 product shown 143 mg 24- (1 (R, S) -hydroxy-3-isopropoxypropyl) -9.10-se cochola-5Z-7E, 10 (19), 23-tetraen-1 (S), 3 (R) -diol as a 1: 1 mixture of Diastereo mers, which are separated by high pressure liquid chromatography. The isomers have identical NMR spectra.

¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,57 ppm (s, 3H, H-18), 0,94 (d, J=7Hz, 3H, H-21); 1,15 (d, J=7Hz, 6H, C(CH₃)₂), 4,17 (m, 1H, H-3); 4,21 (m, 1H, H-25); 4,38 (m, 1H, H-1); 4,98 und 5,29 (m, je 1H, H-19); 5,45 (dd, J=15,5 und 7Hz, 1H, H-24); 5,63 (m, 1H, H-23); 6,02 und 6,38 (d, J=11Hz, je 1H, H-6, H-7).1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.57 ppm (s, 3H, H-18), 0.94 (d, J = 7Hz, 3H, H-21); 1.15 (d, J = 7Hz, 6H, C (CH₃) ₂), 4.17 (m, 1H, H-3); 4.21 (m, 1H, H-25); 4.38 (m, 1H, H-1); 4.98 and 5.29 (m, each 1H, H-19); 5.45 (dd, J = 15.5 and 7Hz, 1H, H-24); 5.63 (m, 1H, H-23); 6.02 and 6.38 (d, J = 11Hz, each 1H, H-6, H-7).

Example 12

Durch Reaktion von 3,0 g 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-20(S)-for myl-9,10-secopregna-5E,7E,10(19)-trien mit 4,75 g Isopropoxymethylcarbonylme thylentriphenylphosphoran in Analogie zu Beispiel 1 und Umsetzung des Produkts nach der in den Beispielen 2-4 beschriebenen Sequenz erhält man 24-Isopropoxy methyl-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S),3(R),24(R,S)-tri-ol. Nach chromatographischer Trennung erhält man Isomer A und Isomer B.By reaction of 3.0 g of 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20 (S) -for myl-9,10-secopregna-5E, 7E, 10 (19) -triene with 4.75 g isopropoxymethylcarbonylme thylenetriphenylphosphoran in analogy to Example 1 and implementation of the product 24-isopropoxy is obtained according to the sequence described in Examples 2-4 methyl-9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R), 24 (R, S) -triol. To chromatographic separation gives isomer A and isomer B.

Isomer A: ¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,51 ppm (s, 3H); 1,00 (d, J=7Hz, 3H); 1,06 (d, J=7Hz 6H); 3,20 (m, 2H); 3,52 (m, 1H): 3,98 (m, 2H); 4,20 (m, 1H); 4,53 (d, J=10Hz, 1H); 4,63 (d, J=10Hz, 1H); 4,75 (m, 1H); 4,84 (d, J=10Hz); 5,23 (m, 1H); 5,32 (m, 1H); 5,43 (m, 1H); 5,98 (d, J=11Hz, 1H); 6,20 (d, J=11Hz, 1H).Isomer A: 1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.51 ppm (s, 3H); 1.00 (d, J = 7Hz, 3H); 1.06 (d, J = 7Hz 6H); 3.20 (m, 2H); 3.52 (m, 1H): 3.98 (m, 2H); 4.20 (m, 1H); 4.53 (d, J = 10Hz, 1H); 4.63 (d, J = 10Hz, 1H); 4.75 (m, 1H); 4.84 (d, J = 10Hz); 5.23 (m, 1H); 5.32 (m, 1H); 5.43 (m, 1H); 5.98 (d, J = 11Hz, 1H); 6.20 (d, J = 11Hz, 1H).

Isomer B: Schmelzpunkt 84-87°C. Isomer B: melting point 84-87 ° C.

Example 13

Aus 1(S),3(R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-20(S)-formyl-9,10-secopr-egna- 5E,7E,10(19)-trien erhält man durch Umsetzung mit (2-Isopropoxyethyl)-carbonyl methylentriphenylphosphoran nach Beispiel 1 und weitere Umwandlung des Produkts nach den Beispielen 2-4 ein 1 : 1-Isomerengemisch von 24-(2-Isopropoxyethyl)-9,10- secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S),3(R),24(R,S)-triol. Chromatographische Trennung ergibt Isomer A und Isomer B.From 1 (S), 3 (R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -20 (S) -formyl-9,10-secopr-egna- 5E, 7E, 10 (19) -triene are obtained by reaction with (2-isopropoxyethyl) carbonyl methylenetriphenylphosphorane according to Example 1 and further conversion of the product according to Examples 2-4 a 1: 1 isomer mixture of 24- (2-isopropoxyethyl) -9.10- secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R), 24 (R, S) -triol. Chromatographic Separation gives isomer A and isomer B.

Isomer A: ¹H-NMR (CDCl₃): δ=0,51 ppm (s, 3H); 1,00 (d, J=7Hz, 3H); 1,06 (d, J=7Hz 6H); 3,40 (m, 3H); 3,98 (m, 2H); 4,20 (m, 1H); 4,52 (m, 2H); 4,75 (m, 1H); 4,85 (d, J=10Hz, 1H); 5,22 (m, 1H); 5,35 (m, 2H); 6,00 (d, J=11Hz, 1H); 6,20 (d, J=11Hz, 1H).Isomer A: 1 H-NMR (CDCl₃): δ = 0.51 ppm (s, 3H); 1.00 (d, J = 7Hz, 3H); 1.06 (d, J = 7Hz 6H); 3.40 (m, 3H); 3.98 (m, 2H); 4.20 (m, 1H); 4.52 (m. 2H); 4.75 (m, 1H); 4.85 (d, J = 10Hz, 1H); 5.22 (m, 1H); 5.35 (m. 2H); 6.00 (d, J = 11Hz, 1H); 6.20 (d, J = 11Hz, 1H).

Isomer B: Schmelzpunkt 125-126°CIsomer B: melting point 125-126 ° C

Example 14

8,0 g (1S,3R)-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-(20S)-formyl-9,10-secopreg-na- (5E,7E,10(19)-trien (Calverley Tetrahedron 43, 4609 (1987)) und 12,0 g Iso butylcarbonylmethylentriphenylphosphoran werden in 46 ml Dimethylsulfoxid 6 Stunden bei 105°C unter Stickstoff gerührt. Anschließend wird die Reaktionsmi schung bei Raumtemperatur mit Essigester verdünnt und mit Kochsalz-Lösung gewa schen. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Nach Entfernung des Lösungsmittels wird der Rückstand mit Toluol durch Kiesel gel filtriert. Verdampfung des Lösungsmittels und Gradientenchromatographie (Toluol/Hexan (1 : 1)→Toluol) des Rückstandes an Kieselgel ergeben 3,6 g (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy-9,10-seco-2-4a-homo- 5,7,10(19)-22-cholestatetraen-24-on als amorphen Feststoff.8.0 g (1S, 3R) -Bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) - (20S) -formyl-9,10-secopreg-na- (5E, 7E, 10 (19) -triene (Calverley Tetrahedron 43, 4609 (1987)) and 12.0 g Iso butylcarbonylmethylene triphenylphosphorane are in 6 ml of dimethyl sulfoxide 6 Stirred at 105 ° C under nitrogen. Then the reaction medium diluted with ethyl acetate at room temperature and washed with sodium chloride solution . The organic phase is dried over sodium sulfate and filtered. After removal of the solvent, the residue with toluene through silica gel filtered. Evaporation of the solvent and gradient chromatography (Toluene / hexane (1: 1) → toluene) of the residue on silica gel give 3.6 g (5E, 7E, 22E) - (1S, 3R) -1,3-bis- (tert-butyldimethylsilyloxy-9,10-seco-2-4a-homo- 5,7,10 (19) -22-cholestatetraen-24-one as an amorphous solid.

Example 15

3,5 g der Verbindung aus Beispiel 14 in 9 ml Tetrahydrofuran und 20,6 ml Metha nol werden mit 20,6 ml einer 0,4 molaren methanolischen CeCl₃ · 7H₂O-Lösung versetzt. Unter Stickstoff werden bei Eiskühlung 570 mg Natriumborhydrid porti onsweise hinzugeben. 3.5 g of the compound from Example 14 in 9 ml of tetrahydrofuran and 20.6 ml of metha nol with 20.6 ml of a 0.4 molar methanolic CeCl₃ · 7H₂O solution transferred. Under nitrogen, 570 mg of sodium borohydride porti add on.

Die Suspension wird noch 40 Minuten bei Eiskühlung gerührt und dann in Eis/- Kochsalz-Lösung gegeben. Die Wasserphase wird mit Essigester extrahiert, die organische Phase mit Wasser neutral gewaschen und über Natriumsulfat getrock net. Filtration und Entfernung des Lösungsmittels ergeben 3,5 g Öl. Durch Chro matographie an Kieselgel mit Essigester/Hexan (1 : 9) werden 534 mg (5E,7E,33E)- (1S,3R,24R)-1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-seco-24a-homo--5,7,10- (19),22-cholestatetraen-24-ol und 692 mg (5E,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3-Bis-(tert- butyldimethylsilyloxy)-9,10-seco-24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatetr-aen-24-ol jeweils als kristallisierendes Öl erhalten.The suspension is stirred for a further 40 minutes while cooling with ice and then in ice. Given saline solution. The water phase is extracted with ethyl acetate organic phase washed neutral with water and dried over sodium sulfate net. Filtration and removal of the solvent give 3.5 g of oil. By chro matography on silica gel with ethyl acetate / hexane (1: 9) become 534 mg (5E, 7E, 33E) - (1S, 3R, 24R) -1,3-bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -9,10-seco-24a-homo - 5,7,10- (19), 22-cholestatetraen-24-ol and 692 mg (5E, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) -1,3-bis- (tert- butyldimethylsilyloxy) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatetr-aen-24-ol each obtained as a crystallizing oil.

Example 16

534 mg (5E,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-s-eco- 24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatetraen-24-ol werden in 75 ml Toluol gelöst und nach Zugabe von 89 mg Anthracen und 1 Tropfen Triethylamin 5 Minuten bei Raum temperatur mit einer Quecksilberhochdrucklampe (Heraeus TQ 150) durch Pyrex- Glas bestrahlt. Die trübe Reaktionsmischung wird filtriert, eingeengt und der Rückstand mit Essigester/Hexan (1 : 9) an Kieselgel chromatographiert. Es werden 410 mg (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-s-eco- 24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatetraen-24-ol als Öl erhalten.534 mg (5E, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24R) -1,3-bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -9.10-s-eco- 24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatetraen-24-ol are dissolved in 75 ml of toluene and after adding 89 mg of anthracene and 1 drop of triethylamine in the room for 5 minutes temperature with a high pressure mercury lamp (Heraeus TQ 150) using Pyrex Irradiated glass. The cloudy reaction mixture is filtered, concentrated and the Chromatograph the residue with ethyl acetate / hexane (1: 9) on silica gel. It will 410 mg (5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24R) -1,3-bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -9.10-s-eco- Obtained 24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatetraen-24-ol as an oil.

Analog den angegebenen Bedingungen werden aus 680 mg (5E,7E,22E)-(1S,3R,24S)- 1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-seco-24a-homo-5,7,10(19),-22-cholesta tetraen-24-ol 570 mg (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyl oxy)-9,10-seco-24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatetraen-24-ol als Öl erhalten.Analogous to the specified conditions, 680 mg (5E, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) - 1,3-bis (tert-butyldimethylsilyloxy) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholesta tetraen-24-ol 570 mg (5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) -1,3-bis (tert-butyldimethylsilyl oxy) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatetraen-24-ol obtained as an oil.

Example 17

200 mg (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-s-eco- 24a-homo-5,7,10(19),22-cholestatetraen-24-ol in 8,8 ml Tetrahydrofuran werden mit 1,5 ml einer 1molaren Lösung von Tetrabutylammoniumfluorid in Tetrahydrofu ran 50 Minuten bei 60°C gehalten. Die abgekühlte Reaktionsmischung wird mit Essigester verdünnt und mit Natriumhydrogencarbonat-Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die organische Phase wird mit Wasser neutral gewaschen und über Na triumsulfat getrocknet. Filtration und Verdampfung des Lösungsmittels ergeben 210 mg Öl als Rückstand. Durch Chromatographie an Kieselgel mit Essigester/ Hexan (2 : 1) werden 124 mg (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-9,10-Seco-24a-homo- 5,7,10(19),22-cholestatetraen-1,3,24-triol als amorpher Feststoff erhalten. UV(MeOM) λ=210 (ε=14 720), 264 (14 240)200 mg (5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24R) -1,3-bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -9.10-s-eco- 24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatetraen-24-ol in 8.8 ml of tetrahydrofuran with 1.5 ml of a 1 molar solution of tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofu ran for 50 minutes at 60 ° C. The cooled reaction mixture is with Diluted ethyl acetate and with sodium bicarbonate solution and saline washed. The organic phase is washed neutral with water and over Na trium sulfate dried. Filtration and evaporation of the solvent result 210 mg of oil as a residue. By chromatography on silica gel with ethyl acetate / Hexane (2: 1) are 124 mg (5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24R) -9,10-Seco-24a-homo- 5,7,10 (19), 22-cholestatetraen-1,3,24-triol obtained as an amorphous solid. UV (MeOM) λ = 210 (ε = 14 720), 264 (14 240)

Example 18

Unter den Bedingungen des Beispiels 17 werden aus 200 mg (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)- 1,3-Bis-(tert.-butyldimethylsilyloxy)-9,10-seco-24a-homo-5,7,10(19),-22- cholestatetraen-24-ol 88 mg (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-9,10-Seco-24a-homo-5,7,10- (19),22-cholestatetraen-1,3,24-triol vom Schmelzpunkt 128-129°C erhalten.Under the conditions of Example 17, 200 mg (5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) - 1,3-bis (tert-butyldimethylsilyloxy) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), - 22- cholestatetraen-24-ol 88 mg (5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) -9,10-Seco-24a-homo-5,7,10- (19), 22-cholestatetraen-1,3,24-triol obtained from melting point 128-129 ° C.

Claims

1. Side chain homologous vitamin D derivatives of the formula I. wherein R1 represents a hydrogen atom, a hydroxy or an acyloxy group having 1 to 9 carbon atoms,
R² is a hydrogen atom or an acyl group with 1 to 9 carbon atoms,
A either a direct bond between the carbon atom 20 and the carbon atom 22 or a methylene bridge (-CH₂-) between these two carbon atoms,
B and D either each represent a hydrogen atom or together a second bond (E-configured double bond),
R³ or R⁴ is a hydroxy or acyloxy group with 1 to 9 carbon atoms, and the other substituent is a hydrogen atom or R³ and R⁴ are together an oxygen atom,
X is either an alkylene radical - (CH₂) _n - or an alkyleneoxy radical - (CH₂) _n O- with n = 1 to 3 and
R⁵ and R⁶ independently of one another each have a linear or branched alkyl radical having up to 4 carbon atoms, a trifluoromethyl group or together a saturated, unsaturated or aromatic carbocyclic or heterocyclic 5- or 6-membered ring formed with the tertiary carbon atom
mean.

2. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein R¹ represents a hydroxy group.

3. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein R² represents a hydrogen atom.

4. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein A is a direct bond between the carbon atom 20 and the carbon atom 22 means.

5. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein A represents a methylene bridge.

6. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein B and D together a second Bond mean.

7. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein R³ or R⁴ is a hydroxy group means.

8. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein n in X is 1 or 2.

9. Vitamin D derivatives according to claim 1, wherein R⁵ and R⁶ for methyl groups stand.

10. (5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24R) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatet-raen-1,3,24-triol ,
(5Z, 7E, 22E) - (1S, 3R, 24S) -9,10-seco-24a-homo-5,7,10 (19), 22-cholestatet-raen- 1,3,24-triol,
24- (1 (R) -hydroxy-4-methylpentyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tet-raen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (S) -hydroxy-4-methylpentyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tet-raen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (R) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tetr-aen-1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (S) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E-tetr-aen-1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (R) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19) -triene-1 (-S), 3 (R) - diol,
24- (1 (S) -hydroxy-3-methylbutyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19) -trien-1 (-S), 3 (R) - diol,
24- (1 (R) -hydroxy-3-isopropoxypropyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E - tetraen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24- (1 (S) -hydroxy-3-isopropoxypropyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 23E - tetraen- 1 (S), 3 (R) -diol,
24-isopropoxymethyl-9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R -), 24 (R) - triol,
24-isopropoxymethyl-9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R -), 24 (S) - triol,
24- (2-isopropoxymethyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R), 24 (R) -triol,
24- (2-isopropoxymethyl) -9,10-secochola-5Z, 7E, 10 (19), 22E-tetraen-1 (S), 3 (R), 24 (S) -triol.

11. Process for the production of side chain homologous vitamin D derivatives of the formula I. wherein R¹, R², R³, R⁴, R⁵ and R⁶ and A, B, D and X have the meaning given in claim 1, characterized in that a compound of the general formula IV wherein
R¹ 'is a hydrogen atom or a protected hydroxy group and
R² 'represent a hydroxy protecting group and
A, X and R⁵ and R⁶ have the meaning given in formula I,
if desired after selective hydrogenation of the double bond in the side chain to a compound of general formula IVa wherein R¹ ', R²', A, X and R⁵ and R⁶ have the meaning given in formula IV and
if desired after reduction of the carbonyl function and optionally after separation of the mixture of the epimeric hydroxy compounds formed by the reduction of the general formula IIIa and IIIb wherein
R¹ ′, R² ′, A, X and R⁵ and R⁶ have the meanings given in formula IV and B and D as given in formula I,
by irradiation with ultraviolet light with reversal of the stereoisomerism on the 5,6 double bond into a compound of the general formula II wherein
R¹ ′, R² ′, A, B, D, X and R⁵ and R⁶ have the meaning given in formula IIIa / IIIb,
converted
and this is then converted into a compound of the general formula I by splitting off existing hydroxyl protective groups and, if appropriate, by partially or completely esterifying the hydroxyl groups.

12. Pharmaceutical preparations, characterized in that they have at least one Compound according to claims 1 to 7 and a pharmaceutically acceptable included carrier.

13. Use of the compounds according to claims 1 to 10 for the preparation of drugs.