[go: up one dir, main page]

DE3735364A1 - Neuer mikroorganismus und pflanzenzucht mit diesem mikroorganismus - Google Patents

Neuer mikroorganismus und pflanzenzucht mit diesem mikroorganismus

Info

Publication number
DE3735364A1
DE3735364A1 DE19873735364 DE3735364A DE3735364A1 DE 3735364 A1 DE3735364 A1 DE 3735364A1 DE 19873735364 DE19873735364 DE 19873735364 DE 3735364 A DE3735364 A DE 3735364A DE 3735364 A1 DE3735364 A1 DE 3735364A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
microorganism
enterobacter
polysaccharides
seeds
soil
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE19873735364
Other languages
English (en)
Other versions
DE3735364C2 (de
Inventor
Takafumi Ishii
Takashi Adachi
Toshio Yasumura
Hidemasa Hidaka
Shinji Miyadoh
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Meiji Seika Kaisha Ltd
Original Assignee
Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Meiji Seika Kaisha Ltd filed Critical Meiji Seika Kaisha Ltd
Publication of DE3735364A1 publication Critical patent/DE3735364A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE3735364C2 publication Critical patent/DE3735364C2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01CPLANTING; SOWING; FERTILISING
    • A01C1/00Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
    • A01C1/06Coating or dressing seed
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C05FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05FORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00Other organic fertilisers
    • C05F11/08Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/828Aerobacter

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Fertilizers (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Cultivation Of Plants (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)

Description

Die Erfindung betrifft einen neuen Mikroorganismus mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Wirkung und ein Verfahren zur Pflanzenzucht mit diesem Mikroorganismus.
Eine große Anzahl von Mikroorganismen lebt in der Wurzelzone (Wurzelbereich) oder Wurzeloberfläche von Pflanzen mit großem Einfluß auf das Wachstum, den Ausbruch von Krankheiten lebender Organismen und ähnlichem.
Versuche industriell nützliche Mikroorganismen abzusondern und sie zur Verbesserung der Landwirtschaftsproduktivität zu nutzen sind bis jetzt gemacht worden und es gibt viele Berichte über diese Untersuchungen.
Beispielsweise fixieren stickstoff-fixierende Bakterien Luftstickstoff, um die Pflanze mit Stickstoff, einem der drei Pflanzennährstoffe zu versorgen. Es ist bekannt, daß Mykorrhiza Bakterien die Bioverfügbarkeit von Phosphor im Boden steigern und das Pflanzenwachstum beschleunigen, indem sie sie mit Phosphor, einem für Pflanzen wesentlichen Element versorgen. Da einen Anzahl pathogener, Pflanzenkrankheiten verursachender Bakterien den Boden bewohnt, ist außerdem bekannt, daß Mikroorganismen, die diesen pathogenen Bakterien entgegenwirken, auch im Boden vorhanden sind. Beispielsweise sind Bakterien der Gattung Pseudomonas als Antagonisten isoliert worden und auf ihre Verwertbarkeit hin untersucht worden.
Da die Züchtung von Mykorrhiza Bakterien wegen ihres Parasitismus Pflanzenkörper erfordert, ist ihre Massenzüchtung im industriellen Maßstab schwierig gewesen. Deshalb hat sich die praktische Verwertung dieser Bakterien noch nicht durchgesetzt. Obwohl stickstoff-fixierende Bakterien industriell gezüchtet werden können, wenn sie im Boden verteilt sind, nimmt die Anzahl der Mikrobenzellen mit der Zeit ab, was zu einer Abnahme des fixierten Stickstoffs führt. Im Vergleich zu im Handel erhältlichen Stickstoffdüngern führt das zu einem wirtschaftlichen Problem. Viele der antagonistischen Bakterien erzeugen antagonistisch wirkende Stoffe gegen das Wachstum pathogener Bakterien, d. h. Antibiotika, die manchmal mehr oder weniger inhibitorische Wirkungen auf das Pflanzenwachstum haben.
Aufgabe der Erfindung ist, einen nützlichen aus dem Wurzelbereich von Pflanzen isolierten Mikroorganismus zur Verfügung zu stellen, der leicht im industriellen Maßstab gezüchtet werden kann, ausreichende Fixierung im Wurzelbereich oder der Wurzeloberfläche von Pflanzen zeigt und eine pflanzenwachstumsbeschleunigende Aktivität erzeugt.
Aufgabe der Erfindung ist ferner, ein Verfahren zur Nutzbarmachung eines solchen Mikroorganismus zur Verfügung zu stellen, um die Ernteleistung zu verbessern.
Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß durch einen neuen Mikroorganismus der Gattung Enterobacter, der aus dem Boden im Wurzelbereich der Gurke isoliert wurde, insbesondere Enterobacter cloacae gelöst, der das Wachstum verschiedener Arten landwirtschaftlicher Nutzpflanzen einschließlich der Gurke beschleunigt. Die erfindungsgemäße Lösung ergibt sich aus den Ansprüchen 1 bis 8.
Die vorliegende Erfindung stellt Enterobacter cloacae mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität zur Verfügung.
Die vorliegende Erfindung stellt außerdem ein Verfahren zur Pflanzenzucht zur Verfügung, wobei auf die Samen direkt ein Mikroorganismus der Gattung Enterobacter mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität und dergleichen aufgetragen wird und diese Samen im Boden ausgesät werden, oder der Mikroorganismus mit dem Boden vermischt wird und die Samen in dem vorbehandelten Boden ausgesät werden.
Die vorliegende Erfindung stellt außerdem ein Verfahren zur Pflanzenzucht durch Hydroponik zur Verfügung, wobei ein Flüssigdünger mit Gehalt an einem Mikroorganismus der Gattung Enterobacter mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität verwendet wird.
Die vorliegende Erfindung stellt außerdem noch ein Verfahren zur Pflanzenzucht zur Verfügung, wobei auf die Samen direkt ein von Mikroorganismen der Gattung Enterobacter erzeugtes Polysaccharid mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität aufgebracht wird und der Boden mit dem Samen besät wird, oder das Polysaccharid mit dem Boden vermischt wird und der vorbehandelte Boden mit Samen besät wird, oder das Polysaccharid auf das Pflanzenblattwerk aufgesprüht wird.
Die Mikroorganismen der Gattung Enterobacter mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität, insbesondere Enterobacter cloacae, können erfindungsgemäß aus dem Boden im Wurzelbereich der Gurke isoliert werden und weisen folgende mikrobiologische Eigenschaften auf.
1. Morphologische Eigenschaften
(1)Gestalt und Größe: Bazillus, 0,8 bis 1,0×1,5 bis 3,0 µm
(2)Polymorphismus: kein Polymorphismus
(3)Beweglichkeit: beweglich mit peritrichen Geißeln
(4)Sporen: keine
(5)Gram-Färbung: negativ
(6)Säurefestigkeit: negativ
2. Wachstum in verschiedenen Medien
(1)Fleischextrakt-Agarplattenkultur: Die Mikrobenzellen erzeugen keine unterscheidbaren Pigmente, sondern wachsen zu einer schwachgelben Creme.
(2)Fleischextrakt-Agarschrägkultur: Dasselbe wie unter (1)
(3)Fleischextrakt-Flüssigkultur: Der ganze Pilzkörper wächst unter Eintrübung. Es wird keine
Pellicula gebildet.
(4)Fleischextrakt-Gelatinestichkultur: es tritt äußerst langsame Verflüssigung auf.
(5)Milchkultur: Es werden keine ausgeprägten Veränderungen bei der Verflüssigung, Gerinnung, dem pH-Wert etc. bemerkt.
3. Physiologische Eigenschaften
(1)Nitratreduktion: positiv
(2)Denitrifikationsreaktion: negativ
(3)MR Test: negativ
(4)VP Test: positiv
(5)Indolbildung: negativ
(6)Schwefelwasserstoffbildung: negativ
(7)Stärkehydrolyse: negativ
(8)Verwertung von Zitronensäure: positiv
(9)Anorganische Stickstoffquelle: Nitrate und Ammoniumsalze werden als Stickstoffquelle verwertet.
(10)Pigmentbildung: Es wird keine merkliche Erzeugung von löslichen oder unlöslichen Pigmenten beobachtet.
(11)Urease: positiv
(12)Oxidase: negativ
(13)Katalase: positiv
(14)Wachstumsbereich: Die Wachstumstemperatur liegt in einem Bereich von 15 bis 45°C, mit einer optimalen Temperatur von 28 bis 37°C und der geeignete Wachstums-pH-Wert liegt in der Nähe der Neutralität.
(15)Verhalten gegenüber Sauerstoff: fakultativ anaerob
(16)O-F Test: F-Typ
(17)Säure- und Gasbildung aus Sacchariden
4. Andere Eigenschaften
(1)Erzeugung von DNase: negativ
(2)Erzeugung von Tryptophandesaminase: negativ
(3)Erzeugung von β-Galactosidase: positiv
(4)Argininzersetzungstest: positiv
(5)Lysindecarboxylierungsreaktion: negativ
(6)Ornithindecarboxylierungsreaktion: positiv
(7)Äsculinzersetzung: negativ
Wie oben gezeigt, weist der erfindungsgemäße Stamm morphologische Eigenschaften auf; es handelt sich um einen Gram-negativen und fakultativ anaeroben Bazillus, der keine Spuren bildet und sich mit peritrichen Geißeln bewegt; hinsichtlich seiner physiologischen Eigenschaften ist er Oxidase-negativ und bei der Nitratreduktion positiv. Aus diesen Eigenschaften schließt man, daß der Stamm zur Familie Enterobacteriaceae gehört. Angesichts verschiedener anderer physiologischer Eigenschaften ist es angemessen, den Stamm als zur Enterobacter cloacae gehörig anzusehen. Der Stamm wurde als BIKOKEN-KIN KI Nr. 8968 (FERM P-8968) bei der Agency of Fermentation Research Institute, Japan, hinterlegt.
Mit dem erfindungsgemäßen Verfahren können Mikroorganismen der Gattung Enterobacter mit einer wachstumsbeschleunigenden Aktivität, beispielsweise Enterobacter cloacae zur Wachstumsbeschleunigung von Pflanzen auf die Samen in einer Menge von 10⁶ bis 10¹⁰ Zellen pro Samen aufgebracht werden und der Boden kann direkt mit solchen Samen besät werden. Die Mikroorganismen können alternativ mit dem Boden in einer Menge von 10⁵ bis 10¹⁰ Zellen pro Gramm Boden gemischt werden und der vorbehandelte Boden kann mit Samen besät werden. Bei einer Wasserkultur kann der Mikroorganismus mit einem Flüssigdünger für Hydroponik in einer Menge von 10⁶ bis 10⁸ Zellen/ml gemischt werden und, wenn gewünscht, kann der Mikroorganismus zusätzlich während der Züchtung zugeführt werden.
Die Einimpfung des erfindungsgemäßen Mikroorganismus zeigt seine Wirkungen zuerst bei der Wachstumsbeschleunigung des Wurzelsystems und dann bei der Wachstumssteigerung des Blatt- und Stengelbereichs.
Mikroorganismen der Gattung Enterobacter und insbesondere Enterobacter cloacae sind fähig, das Pflanzenwachstum zu beschleunigen, wenn sie auf Samen etc. aufgetragen oder mit dem Boden vermischt werden. Ferner wurde festgestellt, daß extrazelluläre Polysaccharide, die bei der Züchtung von Enterobacter erzeugt werden, eine ähnliche pflanzenwachstumsbeschleunigende Wirkung zeigen.
Diese Polysaccharide können durch Züchtung von Enterobacter cloacae (FERM P-8968) in einem M-Agarmedium mit der selben Zusammensetzung wie das weiter unten beschriebene M- Medium in Beispiel 1 zuzüglich 0,0033 Gew.-% Bengalrosa und 1,5 Gew.-% Agar bei 30°C auf experimenteller Basis erzeugt werden. Im industriellen Maßstab können die Polysaccharide hergestellt werden durch Schüttelkultur von Enterobacter cloacae (FERM P-8968) in einem flüssigen Medium mit beispielsweise 1 Gew.-% Laktose, 0,5 Gew.-% Pepton, 0,1 Gew.-% KH₂PO₄, und 0,05 Gew.-% MgSO₄ · 7 H₂O bei 30°C zwei bis drei Tage lang; zum Entfernen des Pilzkörpers wird die resultierende Kultur der Zentrifugalabscheidung unterzogen, die überstehende Flüssigkeit wird auf ein Drittel ihres ursprünglichen Volumens konzentriert, zu dem Konzentrat wird das dreifache Volumen Äthanol gegeben, um die erzeugten Polysaccharide auszufällen, die zum Erhalt von 0,6 bis 1,2 g Polysaccharide pro Liter der Kultur isoliert und getrocknet werden.
Die auf diese Weise erhaltenen Polysaccharide sind wasserlöslich. Wenn die Polysaccharide bei Pflanzen verwendet werden, beschleunigen sie das Wachstum der Wurzel und Sprößlingsysteme der Pflanze, was zu gesteigerten Erträgen führt. Die Polysaccharide können direkt auf Samen in einer Menge von 5 bis 100 γ/Same aufgetragen werden; oder eine wäßrige Lösung der Polysaccharide mit 50 bis 200 γ/ml kann über den Boden in einer Menge von 0,5 bis 5,0 kg/ha gesprüht werden; oder eine wäßrige Polysaccharidlösung mit 20 bis 200 γ/ml kann auf das Blattwerk aufgesprüht werden. Außerdem können die Polysaccharide in einen Flüssigdünger für Wasserkulturen eingemischt werden. Durch diese Behandlungen können die Pflanzenerträge gesteigert werden und die auf diese Weise gezüchteten Pflanzen sind geschmacklich und qualitativ ausgezeichnet, was sich beispielsweise durch einen gesteigerten Stärkegehalt ausdrückt.
Die Pflanzen, auf die die vorliegende Erfindung anwendbar ist, sind nicht besonders eingeschränkt und bevorzugt sind "Feldfrüchte". DerAusdruck "Feldfrüchte" meint hier alle Arten von Landwirtschaftspflanzen und deren Ernten, wie Getreide, Gemüse, Blumen, Obstbäume und ähnliches. Die Pflanzen schließen auch Gemüsesämlinge von beispielsweise Gurken, Kürbissen, Auberginen, Tomaten, Melonen, Wassermelonen etc., Blumensämlinge, Getreidesämlinge und Sämlinge aller anderen Nutzpflanzen ein. Der Ausdruck "Samen etc." meint hier nicht nur Samen, sondern auch Saatkartoffeln für knotige Wurzeln etc. Der Ausdruck "Hydroponik" schließt hier Hydroponik, Sandkultur, Kieselkultur, Mineralwollenkultur und ähnliches ein.
Die vorliegende Erfindung wird jetzt im einzelnen unter Bezugnahme auf die folgenden Beispiele beschrieben, wobei die Erfindung nicht auf diese Beispiele beschränkt ist. In diesen Beispielen handelt es sich, wenn nicht anders angegeben, um Gewichtsprozente.
Beispiel 1 (1) Massenzüchtung von Enterobacter cloacae
In einen 1-Liter-Dreihalskolben wurden 400 ml eines flüssigen Kulturmediums mit 1,0% Glukose, 0,5% Pepton, 0,1% KH₂PO₄ und 0,05% MgSO₄ · 7 H₂O (M-Medium) gebracht. Nach dem Sterilisieren bei 120°C 30 Minuten lang, wurde das Medium abgekühlt und eine Platinöse voll Enterobacter cloacae (FERM P-8968) wurde zu dem Medium geimpft und bei 240 U/min 24 Stunden lang bei 30°C gezüchtet, um eine Saatkultur herzustellen. Ein 30-Liter-Glaskolbenfermenter wurde mit 20 Litern M-Medium gefüllt, und das Medium wurde bie 120°C 30 Minuten lang sterilisiert. Nach dem Abkühlen auf 30°C wurde das Medium mit der Saatkultur beimpft und bei 200 U/min 24 Stunden lang bei 30°C bei einer Belüftung von 100 vvm gezüchtet. Die resultierende Kultur enthielt 1×10¹⁰ Zellen/ml Enterobacter cloacae.
(2) Das Nähren der Gurke
Der Boden für die Zuchtstätte wurde in eine Zuchtschale gebracht (30 cm×50 cm×3 cm), und 100 Gurkensamen (Art: Kifujin) wurden darauf gesät. Nach dem Züchten bei 20 bis 23°C eine Woche lang, wurden die Gurkensämlinge in einen Topf (Durchmesser 90 mm, Höhe 76 mm) gepflanzt und 2 Wochen lang weiter genährt. Die verwendeten Versuchsgruppen waren wie folgt.
Kontrollgruppe:Die Zuchtstätte wurde so wie sie war verwendet. Bodenbehandelte Gruppe:Enterobacter cloacae (10⁷ Zellen/g Boden) wurden zu dem Boden der Zuchtstätte gegeben. Samenbehandelte Gruppe:Die Samen (Kifujin) wurden in die Kultur von Enterobacter cloacae (1,0×10¹⁰ Zellen/ml) eingetaucht und dann in dem Enterobacter cloacaefreien Boden genährt.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 gezeigt. Tabelle 1 zeigt, daß das Verhältnis der Sämlinge mit Größe S mit einer übererdigen Höhe von 10 cm oder weniger in der Kontrollgruppe 37% betrug, wohingegeben die Anteile in der bodenhehandelten Gruppe und der samenbehandelten Gruppe mit jeweils 6 und 18% kleiner als die in der Kontrollgruppe waren. Deshalb ist bewiesen worden, daß größere und stärkere Sämlinge erhalten werden können, wenn entweder der Boden oder die Samen mit Enterobacter cloacae behandelt sind.
Tabelle 1
(3) Gurkenkultur
Die wie in (2) erhaltenen Gurkensämlinge wurden in den Boden in einem Gewächshaus mit Abständen von 80 cm eingepflanzt und in dem Gewächshaus unter natürlichen Temperatur- und Lichtbedingungen 3 Monate lang gezüchtet. Ein anorganischer Dünger (Kasei Nr. 14 mit 14% NH₄-N, 10% P, 13% K) wurde, wenn nötig, der Grundlage zugeführt. Außerdem wurde, zur Bekämpfung von Blattläusen "Taÿiston" ein Mittel mit 5% 0,0-Diethyl-S-2-(ethylthio)ethyl-phosphordithioat nach dem Ende der zweiten Zuchtwoche, wenn gewünscht, aufgesprüht. Die Ergebnisse sind in Tabelle 2 gezeigt.
Tabelle 2 zeigt, daß die Gurkenpflanzen sowohl von der bodenbehandelten Gruppe, als auch von der samenbehandelten Gruppe übererdig größer waren, als die der Kontrollgruppe, und daß der Gurkenertrag 8 bis 12% größer war, als der der Kontrollgruppe.
Tabelle 2
(4) Fixierung von Enterobacter cloacae an der Wurzeloberfläche
Von den Gurkenpflanzenwurzeln wurden in gewissen Zeitabständen während der Zucht Proben entnommen, und die Anzahl der auf den Wurzeln gewachsenen Zellen von Enterobacter cloacae wurde gezählt. Das Zählen der Zellen wurde gemäß des in Dojo Biseibutsu Kenkyukai (Herausgeber) Dojo Biseibutsu Jikkenho (Procedures of Experiments of Soil Microorganisms, Yokendo, Tokyo, Japan, 1975), Seite 380 beschriebenen Verfahrens durchgeführt. Da Enterobacter cloacae einen charakteristischen Farbton und eine charakteristische Gestalt annimmt, und Polysaccharide erzeugt, wenn er in Martin- Medium (Glukose=1%, Pepton=0,5%, KH₂PO₄=0,1%, MgSO₄ · 7 H₂O=0,05%, Bengalrosa=0,0033%, Agar=2,0%, pH- Wert=6,8) bei 30°C 24 bis 48 Stunden lang gezüchtet wird, wurde die Anzahl der Kolonien mit diesen Eigenschaften als Indikator verwendet. Die Ergebnisse sind in Tabelle 3 gezeigt. In Tabelle 3 wurde die Anzahl der Zellen als Anzahl der lebensfähigen Zellen pro Gramm der Wurzel (Naßgewicht) ausgedrückt.
Tabelle 3
Beispiel 2
Zwei Sonnenlattichsamen (sunny lettuce) wurden auf ein 4 cm quadratisches Urethanvließ gebracht und in einen Flüssigdünger mit 0,15% Otsuka House Hieryo Nr. 1 (10% N, 8% P₂O₅, 24% K₂O, 5% MgO, 0,1% MnO, 0,1% B₂O₃, 0,18% Fe) und 0,1% Otsuka House Hiryo Nr. 2 (11% N, 23% CaO) getaucht. Nachdem sie 10 Tage lang bei 24°C und 5000 lux genähert wurden, wurden die Sämlinge in eine Hydroponikvorrichtung gebracht und 35 Tage lang bei 24°C und 8000 lux gezüchtet. Die Versuchsgruppen waren wie folgt.
Kontrollgruppe:Mikroorganismen-freier Otsuka House Dünger Behandelte Gruppe:Enterobacter cloacae wurde zu dem Otsuka House Dünger in einem Verhältnis von 1×10⁵ Zellen/ml bis 1×10⁹ Zellen/ml gegeben. Während der Züchtung wurde Enterobacter cloacae einmal wöchentlich (viermal insgesamt) zugefügt. Der dazugegebene Stamm wurde auf dieselbe Weise erhalten wie in Beispiel 1.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 4 gezeigt.
Tabelle 4
Aus Tabelle 4 ist ersichtlich, daß der Ertrag und das Wurzelgewicht durch Zusatz von Enterobacter cloacae zu dem Flüssigdünger gesteigert werden kann. Diese Wirkung war besonders in den Gruppen bemerkenswert, wo 1×10⁶ bis 1×10⁸ Zellen/ml des Stamms hinzugefügt wurden.
Beispiel 3
Auf Schwarzerde in einem Zuchtkasten (50 cm×15 cm×20 cm) wurden 40 g Reissamen (Art: Akinishiki) verteilt, und die Samen wurden mit 3 bis 4 m des Bodens bedeckt. Die Samen wurden bei 30 bis 32°C 2 Tage lang zur Keimung gezüchtet und dann bei 25°C 17 Tage lang. Die Versuchsgruppen waren wie folgt.
Kontrollgruppe:Unbehandelter Boden (Schwarzerde) wurde verwendet Behandelte Gruppe:Der Boden wurde durch Zusatz von 1,0×10⁷ Zellen/g Enterobacter cloacae behandelt. Der verwendete Stamm wurde auf dieselbe Weise, wie in Beispiel 1 erhalten.
Im Ergebnis betrug die Durchschnittslänge des Cormus (Blatt und Stiel)der behandelten Gruppe 18,4 cm und zeigte im Vergleich mit der Kontrollgruppe mit 16,3 cm einen Zuwachs von 13%.
Beispiel 4
In einen Topf (50 cm×15 cm×20 cm) wurden 200 Spinatsamen (Art: Jiromaru) eingepflanzt und 40 Tage bei 20°C und 30 000 lux gezüchtet. Die verwendeten Versuchsgruppen waren wie folgt.
Kontrollgruppe:Es wurde unbehandelter Boden (Schwarzerde) verwendet. Behandelte Gruppe:Der Boden wurde durch Zusatz von 1,0×10⁸ Zellen/g Enterobacter cloacae behandelt. Der Stamm wurde auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1 erhalten.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 5 gezeigt.
Tabelle 5
Wie aus Tabelle 5 ersichtlich, betrug das Durchschnittsgewicht des Ertrags der behandelten Gruppe 135% von dem der Kontrollgruppe.
Beispiel 5
Getreidesamen wurde in Schwarzerde in einem Topf (Durchmesser 90 mm; Höhe 76 mm) ausgesät und 20 Tage lang bei 25°C und 5000 lux gezüchtet. Die Versuchsgruppen waren wie folgt.
Kontrollgruppe:Es wurde unbehandelte Schwarzerde verwendet. Behandelte Gruppe:Der Boden wurde durch Zusatz von 1×10⁴ bis 1×10⁹ Zellen/g Enterobacter cloacae behandelt. Der Stamm wurde auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1 erhalten.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 6 gezeigt.
Tabelle 6
Aus Tabelle 6 ist ersichtlich, daß der Zusatz von Enterobacter cloacae zum Boden bei der Zunahme der Blatt- und Stiellänge der Pflanze wirksam ist. Insbesondere zeigten die Gruppen, in denen der Boden mit 1×10⁵ bis 1×10⁸ Zellen/g des Stamms behandelt wurde eine Wachstumsbeschleunigung von 14 bis 37% über die Kontrollgruppe hinaus.
Beispiel 6
40 Gramm Reissamen (Art: Akinishiki) wurden auf Schwarzerde in einem Zuchtkasten (50 cm×15 cm×20 cm) verteilt und mit dem Boden bis zu einer Dicke von 3 bis 4 mm zugedeckt.
Nach 7tägigem Züchten bei 30 bis 32°C wurden die Wurzeln der jungen Sämlinge in eine Suspension mit 1×10⁵/ml bis 1×10¹⁰/ml lebensfähiger Zellen von Enterobacter cloacae getaucht, und die Züchtung wurde 10 Tage weiter fortgesetzt. In diesem Beispiel wurde die Düngung und die Bewässerung auf herkömmliche Weise durchgeführt. Die lebensfähigen Zellen des verwendeten Stamms wurden auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1 hergestellt. Die Ergebnisse sind in Tabelle 7 gezeigt.
Tabelle 7
Wie aus Tabelle 7 ersichtlich ist, kann das Wachstum der Sämlinge durch Einimpfung von Enterobacter cloacae zu den Sämlingwurzeln beschleunigt werden.
Beispiel 7
56 Kartoffelkeime (Art: Danshaku) wurden in ein Versuchsfeld von 10,8 m² pro Gruppe am 27. Februar gepflanzt und bis zum 29. Mai gezüchtet. Während der Züchtung wurden Düngung und Bewässerung auf herkömmliche Weise durchgeführt. Die Versuchsgruppen waren wie folgt.
Bodenbehandelte Gruppe:Der Boden wurde durch Zusatz von 1×10⁷ Zellen/g Enterobacter cloacae behandelt. Samenbehandelte Gruppe:Die Kartoffelkeime wurden durch Beschichtung jedes Keims mit 1×10¹⁰ Zellen von Enterobacter cloacae behandelt. Kontrollgruppe:Weder beim Boden, noch bei den Kartoffelkeimen wurde eine Behandlung durchgeführt.
Die verwendeten lebensfähigen Zellen von Enterobacter cloacae wurden auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1 erhalten. Die Ergebnisse sind in Tabelle 8 gezeigt.
Tabelle 8
Tabelle 8 zeigt, daß der Ernteertrag und Stärkegehalt im Vergleich zur Kontrollgruppe jeweils auf 110 bis 113% und 108 bis 112% steigt, indem der Boden oder die Saatkartoffeln mit Enterobacter cloacae in einer Menge von 1×10⁷ Zellen/g oder 1×10¹⁰ Zellen/Saatkartoffeln behandelt werden.
Beispiel 8
Ein Gewichtsteil Kaiware Daikonsamen (wörtlich, Kotyledon Rettich (cotyledon radish), künstlich gezogener Rettich mit weißem Stiel und Keimblatt) wurde mit einer wäßrigen Lösung besprüht, die 0,7 bis 0,025% von Enterobacter cloacae (FERM P-8968) erzeugte Polysaccharide und 0,75% Natriumalginat enthält und im Luftstrom bei 40 bis 50°C getrocknet, um mit verschiedenen Mengen von 2,5 bis 100 γ der Polysaccharide beschichtete Samen herzustellen.
Fünfzig der polysaccharidbeschichteten Samen wurden auf einem Kunstharzvließ in einem Glasbehälter verteilt und 70 ml Leitungswasser wurden dazugefügt. Die Samen wurden bei 23°C im Dunkeln 4 Tage lang und dann 2 Tage lang bei einer Beleuchtung von 5000 lux gezüchtet. Als Kontrollgruppe wurden unbehandelte Samen in gleicher Weise gezüchtet. Die Ergebnisse sind in Tabelle 9 gezeigt.
Tabelle 9
Wie aus den Ergebnissen von Tabelle 9 ersichtlich, ist die Behandlung von Samen mit von Enterobacter cloacae erzeugten Polysacchariden in einer Menge von 5 bis 100 γ/Same wirksam, um das Wachstum auf 108 bis 120% bei der Blatt- und Stengelhöhe und auf 121 bis 218% bei der Wurzellänge im Vergleich zur Kontrollgruppe, bei der unbehandelte Samen verwendet wurden, zu beschleunigen.
Die in diesem Beispiel verwendeten extrazellulären Polysaccharide wurden von Enterobacter cloacae folgendermaßen hergestellt.
In einen 250-ml-Dreihalskolben wurden 30 ml eines Mediums mit 1% Laktose, 0,5% Pepton, 0,1% KH₂PO₄ und 0,05% MgSO₄ · 7 H₂O gebracht. Das Medium wurde bei 120°C 15 Minuten lang sterilisiert und wurde dann mit einer Platinöse voll Enterobacter cloacae (FERM P-8968) beimpft und bei 240 min.-1 24 Stunden lang bei 30°C gezüchtet, um eine erste Samenkulturlösung herzustellen. In einen 1-Liter-Dreihalskolben wurden 300 ml des Mediums eingebracht. Nach 15minütigem Sterilisieren bei 120°C wurden 10 ml der Saatkultur dazu eingeimpft, gefolgt von einem 24stündigen Züchten bei 240 min-1 bei 30°C, um eine zweite Samenkulturlösung zu erhalten.
In einen 30-Liter-Glaskolbenfermenter wurden 20 l eines Mediums mit derselben Zusammensetzung wie obiges Medium eingebracht und bei 120°C 30 Minuten lang sterilisiert. Zu dem Medium wurden 100 ml der zweiten Samenkultur geimpft, die bei 30°C und 240 min-1 zwei Tage lang gezüchtet wurde. Zu der Kultur wurde ein gleiches Volumen an Wasser gegeben, und die Kultur wurde bei 10 000 G 40 Minuten lang zentrifugiert, um den Pilzkörper zu entfernen. Die überstehende Flüssigkeit wurde auf ein Volumen von 3 l konzentriert, und 7 l Äthanol wurden zu dem Konzentrat gegeben, um die erzeugten Polysaccharide auszufällen. Der Niederschlag wurde durch Zentrifugieren gesammelt und getrocknet, um 16 g Polysaccharide zu liefern.
Beispiel 9
Die von Enterobacter cloacae auf dieselbe Weise wie in Beispiel 8 erzeugten Polysaccharide wurden verwendet, um ihre pflanzenwachstumsbeschleunigende Aktivität beim Kaiwarerettich wie folgt zu untersuchen.
36 Kaiware Daikonsamen wurden auf einem Kunstharzvließ in einem Glasbehälter verteilt, und 70 ml Leitungswasser mit den Polysacchariden mit Konzentrationen von 0,000025 bis 0,25% wurden in den Behälter gegeben, gefolgt von einem 4tägigen Züchten bei 23°C im Dunkeln und dann 2 Tage lang bei einer Beleuchtung von 5000 Lux. Die Ergebnisse sind in Tabelle 10 gezeigt.
Tabelle 10
Tabelle 10 zeigt, daß bei der Hydroponik die Verwendung von Wasser mit 0,25 bis 0,00025% der von Enterobacter cloacae erzeugten Polysaccharide das Wachstum sowohl des Blatt- und Stengelbereichs, als auch des Wurzelbereichs beschleunigt.
Beispiel 10
56 Kartoffelkeime (Art: Danshaku) wurden in ein Versuchsfeld (10,8 m²/Gruppe) am 27. Februar gepflanzt und 2 Monate lang gezüchtet. Die von Enterobacter Cloacae in gleicher Weise wie in Beispiel 8 erzeugten extrazellulären Polysaccharide wurden mit Wasser auf die unten gezeigten Konzentrationen verdünnt und zweimal auf die Blattoberfläche in der Keimungsphase gesprüht (am 28. April und 8. Mai). Die Züchtung wurde am 29. Mai beendet. Die Testergebnisse sind in Tabelle 11 gezeigt.
Tabelle 11
Wie aus Tabelle 11 ersichtlich, steigert das Besprühen des Blattwerks mit von Enterobacter cloacae erzeugten Polysacchariden in einer Menge von 200 γ/ml bis 20 γ/ml den Ertrag und den Stärkegehalt.
Beispiel 11
In einen Topf (17 cm×60 cm×15 cm) wurden 9 kg Schwarzerde gebracht, und 40 Chinakohlsamen (Brassica Rapa var. pervidis) (Art: Misugi) wurden hineingepflanzt und unter natürlichen Bedingungen vom 15. Juni bis 4. Juli gezüchtet. Während der Züchtung wurde der Topf mit wäßrigen Lösungen der von Enterobacter cloacae in gleicher Weise wie in Beispiel 8 erzeugten Polysaccharide gewässert, die die in Tabelle 12 gezeigten Konzentrationen aufwiesen. Die Ergebnisse sind in Tabelle 12 gezeigt.
Tabelle 12
Tabelle 12 zeigt, daß die Bewässerung mit 0,5 kg/ha bis 2,5 kg/ha der von Enterobacter cloacae erzeugten Polysaccharide den Ertrag auf 111 bis 120% steigert.
Wie oben beschrieben, stellt die vorliegende Erfindung einen neuen Mikroorganismus mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Wirkung zur Verfügung, wobei die Verwendung dieses Mikroorganismus die Leistungsfähigkeit der Pflanzenzüchtung verbessert.

Claims (8)

1. Mikroorganismus der Gattung Enterobacter mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität.
2. Mikroorganismus nach Anspruch 1, wobei der Mikroorganismus Enterobacter cloacae ist.
3. Verfahren zur Pflanzenzüchtung, wobei man direkt auf Samen einen Mikroorganismus der Gattung Enterobacter mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität, oder von diesem extrazellulär erzeugte Polysaccharide aufbringt und den Boden mit dem vorbehandelten Samen besät, oder den Mikroorganismus oder die Polysaccharide mit dem Boden mischt und diesen mit Samen besät.
4. Verfahen nach Anspruch 3, wobei der Mikroorganismus Enterobacter cloace ist.
5. Verfahren zur Pflanzenzüchtung, wobei man bei der Hydroponik von Sämlingen oder Pflanzen einen Flüssigdünger mit Gehalt an einem Mikroorganismus der Gattung Enterobacter mit einer pflanzenwachstumsbeschleunigenden Aktivität oder von dem Mikroorganismus extrazellulär erzeugten Polysacchariden verwendet.
6. Verfahren nach Anspruch 5, wobei der Mikroorganismus Enterobacter cloacae ist.
7. Verfahren zur Pflanzenzüchtung, wobei man auf das Pflanzenblattwerk eine wäßrige Lösung mit Gehalt an Polysacchariden sprüht, die von einem Mikroorganismus der Gattung Enterobacter mit pflanzenwachstumsbeschleunigender Aktivität extrazellulär erzeugt werden.
8. Verfahren nach Anspruch 7, wobei der Mikroorganismus Enterobacter cloacae ist.
DE3735364A 1986-10-17 1987-10-19 Neuer Mikroorganismus und Pflanzenzucht mit diesem Mikroorganismus Expired - Lifetime DE3735364C2 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP61245399A JPS63102668A (ja) 1986-10-17 1986-10-17 新規微生物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3735364A1 true DE3735364A1 (de) 1988-05-11
DE3735364C2 DE3735364C2 (de) 1996-08-08

Family

ID=17133074

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE3735364A Expired - Lifetime DE3735364C2 (de) 1986-10-17 1987-10-19 Neuer Mikroorganismus und Pflanzenzucht mit diesem Mikroorganismus

Country Status (5)

Country Link
US (1) US5360737A (de)
JP (1) JPS63102668A (de)
CA (1) CA1315723C (de)
DE (1) DE3735364C2 (de)
FR (1) FR2605184B1 (de)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2112700A1 (es) * 1994-04-07 1998-04-01 Miera Antonio Almaraz Panel prefabricado para edificaciones y construcciones y sistema para su acoplamiento y montaje.
RU2164942C1 (ru) * 2000-03-13 2001-04-10 Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" Штамм бактерий enterobacter cloacae гиск № 258, обладающий комплексом факторов патогенности

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100397793B1 (ko) * 2000-07-28 2003-09-13 삼성전자주식회사 느릅나무로부터 분리된 신규의 미생물 및 그를 이용한항암 면역활성의 세포밖 당화합물의 제조방법
US7527941B1 (en) * 2006-05-24 2009-05-05 Clear Water Technologies, Inc. Process for producing ethyl alcohol from cellulosic materials
AU2015354699B2 (en) 2014-11-25 2019-06-13 Colorado State University Research Foundation Synergistic bacterial consortia for mobilizing soil phosphorus

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1335363C (en) * 1985-07-02 1995-04-25 Imperial Oil Limited Emergence-promoting rhizobacteria

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NICHTS ERMITTELT *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2112700A1 (es) * 1994-04-07 1998-04-01 Miera Antonio Almaraz Panel prefabricado para edificaciones y construcciones y sistema para su acoplamiento y montaje.
RU2164942C1 (ru) * 2000-03-13 2001-04-10 Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" Штамм бактерий enterobacter cloacae гиск № 258, обладающий комплексом факторов патогенности

Also Published As

Publication number Publication date
DE3735364C2 (de) 1996-08-08
JPH0430271B2 (de) 1992-05-21
JPS63102668A (ja) 1988-05-07
US5360737A (en) 1994-11-01
CA1315723C (en) 1993-04-06
FR2605184B1 (fr) 1993-05-07
FR2605184A1 (fr) 1988-04-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69417750T2 (de) Verwendung von streptomyces wyec 108 zur bekämpfung von pflanzenschädlingen
CN114423291B (zh) 甲基杆菌属新种菌株、包含该菌株的组合物以及其作为生物刺激剂和内生固氮细菌的用途
DE69006639T2 (de) Antibakterielle, Antinematoden- und/oder pflanzenzellaktivierende Zusammensetzung, sowie chitinolytische Mikroorganismen für deren Herstellung.
CN115340968B (zh) 微刺假单胞菌的新用途及其方法、微刺假单胞菌21 4.1 9.2-14及其产品
CN110463551B (zh) 一种花生根结线虫病的生物防治方法
DE69722714T2 (de) Topfballenmischung zur Anzucht von Sämlingen, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verfahren zur Anzucht krankheitsresistenter Sämlinge
DE60015349T2 (de) Methoden zur steigerung des pflanzenwachstums durch die verwendung von wasserstoffgas
KR102599254B1 (ko) 페니바실러스 폴리믹사 mdbdo 균주 또는 이의 배양액을포함하는 미생물제제를 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물 및 이의 제조 방법
DE3851007T2 (de) Zusammensetzung zur Verwendung in der Landwirtschaft.
BE1029878B1 (de) Biofermentierungsmittel zum Kompostieren von Rohrkolben, Verfahren zur seinen Herstellung und Verwendung
CN112359084A (zh) 一种枯草芽孢杆菌发酵产物中菌体蛋白的制备及防治应用
DE3735364C2 (de) Neuer Mikroorganismus und Pflanzenzucht mit diesem Mikroorganismus
DE69814732T2 (de) Pflanzenwachstumsregulator
DE3335643C2 (de)
DE69100494T2 (de) In der Biostimulation der landwirtschaftlichen Produktion wirksamer Streptomycesstamm NCIMB 40227.
DE69828463T2 (de) Düngemittelzusammensetzungen enthaltend natürliche oder synthetische Aminopurinderivate oder Algenextrakte, die diese Produkte enthalten, zusammen mit einer Calciumquelle
KR102229828B1 (ko) 수정조성물을 이용한 체리 꽃 수정 방법 및 그와 같이 수정된 체리 열매
CN117305122A (zh) 一种促进苜蓿生长的木霉菌及其应用
CN114634878A (zh) 一种复合微生物制剂及其在防治根结线虫中的应用
CN114402825A (zh) 一种薄皮甜瓜共砧嫁接苗的栽培方法
CN112457077A (zh) 一种真菌固体发酵有机肥及其制备方法
Mikail et al. Investigation of the relationship between morphological features of different hyacinth cultivars by path analysis
WO2001052869A2 (de) Präparat und verfahren zur behandlung von sclerotinia-infektionen
AU2020288736B2 (en) Methylobacterium sp. nov. strain, compositions comprising it, and its use as bio-stimulant and endophyte nitrogen-fixing bacterium
KR20250087788A (ko) 콩 식물 염해 저감 효과가 있는 스트렙토마이세스 오미얀시스 균주 gc01 및 이의 용도

Legal Events

Date Code Title Description
8110 Request for examination paragraph 44
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition