DE3119510C2

DE3119510C2 -

Info

Publication number: DE3119510C2
Application number: DE3119510A
Authority: DE
Inventors: Murray Arthur Syracuse N.Y. Us Kaplan; Daniel Franconville Fr Bouzard; Claude Perol; Jacques Paris Fr Stemer; Abraham Saint-Mande Fr Weber
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1980-05-16
Filing date: 1981-05-15
Publication date: 1991-03-07
Also published as: AU7029181A; FI70793B; JPS579716A; DK159376C; FR2482458A1; FI70793C; IE811092L; IT1170970B; DK159376B; AT374682B; ZA813188B; IT8148467A1; IT8148467A0; ATA221181A; FI811474L; YU44831B; FR2482458B1; YU112381A; JPH0136445B2; SE460457B

Description

Die Erfindung betrifft stabile, feste und wasserlösliche pharmazeutische Mittel auf der Basis von m-AMSA und Milchsäure sowie Verfahren zu deren Herstellung.

Über das Acridin-Derivat von m-AMSA [4′-(9-Acridinylamino)- methansulfon-m-anisidid] berichteten Cain et al. in Europ. J. Cancer 10: 539-549 (1974), daß es bei Tumoren bei Tieren eine deutliche Antitumorwirkung aufweise. Seither wurde diese Verbindung mit guten Anfangsergebnissen klinisch getestet.

Wird ein Antitumormittel wie m-AMSA klinisch in der Human medizin verwendet, ist oft die Löslichkeit des Mittels der bestimmende Faktor für die Verabreichungsart und die Dosie rungsformen. Beispielsweise kann eine wasserlösliche Substanz im allgemeinen intravenös verabreicht werden, während ein was ser-unlösliches Material auf andere Formen der parenteralen Verabreichung, z. B. die intramuskuläre oder subkutane, be schränkt ist. Wasserlösliche therapeutische Mittel erleichtern auch die Herstellung oraler und nicht- intravenöser parenteraler Dosierungsformen zur Verabreichung an den Menschen. So ist es entschieden von Vorteil, wenn ein therapeutisches Mittel wasserlöslich ist, insbesondere wenn man in Betracht zieht, daß die direkteste Verabreichungsart zur Erzielung von therapeutischen Blutspiegeln eines Präpara tes beim Menschen die intravenöse Verabreichung ist.

m-AMSA in Form der freien Base hat eine sehr begrenzte Löslich keit in Wasser und kann somit nicht als Dosierungsform zur intravenösen Verabreichung verwendet werden. Es wurden Ver suche unternommen, Säureadditionssalze herzustellen, um dieses Löslichkeitsproblem zu überwinden, jedoch erwiesen sich die eingesetzten Monohydrochlorid- und Monomethansulfonat-Salze für die klinische Verwendung ebenfalls als unzureichend wasser löslich. Das derzeit verwendete klinische Präparat besteht aus zwei sterilen Flüssigkeiten, welche vor der Anwendung ver einigt werden müssen. Eine Lösung von m-AMSA in wasserfreiem N,N-Dimethylacetamid liegt in einer Ampulle vor. Eine andere Ampulle enthält eine wäßrige L(+)-Milchsäurelösung, die als Verdünnungsmittel dienen soll. Nach dem Mischen wird die erhal tene m-AMSA-Lösung durch intravenöse Infusion verabreicht.

Das derzeitige klinische Präparat stellt zwar eine intravenöse Dosierungsform dar, weist jedoch verschiedene Nachteile auf. Zusätzlich zu den offensichtlichen Schwierigkeiten bei der Herstellung und Verabreichung der Dosierungsform enthält es Dimethylacetamid als Träger. Dimethylacetamid zeigt bei Tieren verschiedene toxische Symptome und kann sich als pharmazeuti scher Träger ungeeignet oder unerwünscht erweisen.

Es ist somit Aufgabe der Erfindung, wasserlösliche, stabile, therapeutisch verträgliche Formen von m-AMSA zu schaffen, die intravenös (aber auch auf andere Weise) verabreicht wer den können und kein Dimethylacetamid als pharmazeutischen Trä ger enthalten oder benötigen.

Die vorliegende Erfindung betrifft somit stabile, feste, wasserlösliche Mittel zur Rekonstitution mit Wasser oder einem wäßrigen Träger zur Bildung von stabilen m-AMSA-Lösungen, die dadurch gekennzeichnet sind, daß sie eine Mischung von m-AMSA und Milchsäure enthalten, wobei das Molverhältnis Milch säure zu m-AMSA von 1,5 : 1 bis 4 : 1 be trägt. Die hierbei verwendete Milchsäure kann entweder die D(-)-Milchsäure, die L(+)-Milchsäure oder die DL-Milch säure sein.

Die Erfindung betrifft auch Verfahren zur Herstellung der oben beschriebenen Mittel.

Viele herkömmliche pharmazeutisch verträgliche Säureadditions salze von m-AMSA sind nur geringfügig wasserlöslich und somit zur Herstellung wäßriger intravenöser Lösungen ungeeignet. Dies geht aus den Literaturstellen, die sich mit den Hydro chlorid- und Methansulfonat-Salzen befassen, und aus den Löslichkeitsversuchen, welche mit Salzen, wie Levulinat-, Citrat- und Lactobionat-Salzen durchgeführt wurden (die Lös lichkeit aller dieser Salze ist <5 mg/ml), hervor.

Bei den Untersuchungen der Löslichkeitseigenschaften von m-AMSA-Säureadditionssalzen wurde das kristalline L(+)-Mono lactatsalz von m-AMSA hergestellt (kristallisiert aus Äthanol). Es wurde gefunden, daß auch dieses Salz bei Raumtemperatur nicht genügend wasserlöslich ist, um als geeignete wäßrige Lösung für die intravenöse Verabreichung zu dienen. Es wurde jedoch überraschend und unerwartet gefunden, daß eine feste Dosierungsform, die eine Mischung von ungefähr 1 Mol m-AMSA- Base pro 1,5 bis 4 Mol Milchsäure enthält, die für die klini sche Verwendung gewünschte Löslichkeit besitzt, leicht rekonsti tuiert werden kann und stabil ist. Das Lösungsverhalten verschiedener m-AMSA-Salze ist in folgender Tabelle 1 zu sammengefaßt.

Löslichkeit von m-AMSA-Säureadditionssalzen
Salzbildung mit
Löslichkeit (mg/ml)
Levulinat
<5
Citrat	<5
Lactobionat	<5
D/L-Lactat		(Beispiel 4)

Es zeigt sich, daß ein gemäß Beispiel 4 hergestelltes m-AMSA/ Milchsäuresalz überraschenderweise gegenüber den anderen mit getesteten Salzen eine um über 50% höhere Löslichkeit auf weist.

Die erfindungsgemäßen Mittel besitzen die vorteilhaften Anti tumoreigenschaften der bekannten freien Basen und zeigen eine überraschend hohe Wasserlöslichkeit, so daß gute klinische Dosierungsformen zur intravenösen Verabreichung hergestellt werden können.

Die oben beschriebenen festen Mittel können entweder in Form einer Trockenfüllung (Mischung von trockenen Bestandteilen) oder als lyophilisiertes Produkt eingesetzt werden. Die feste Dosierungsform kann bequem und schnell mit Wasser oder einem sterilen wäßrigen Träger rekonstituiert werden, wobei man eine echte m-AMSA-Lösung (mindestens 5 mg/ml) mit ausgezeichneten Stabilitätseigenschaften erhält.

Die Herstellung der erfindungsgemäßen wasserlöslichen Mittel als Trockenfüllungsmischung kann erreicht werden, indem man einfach die geeigneten Ausgangsmaterialien in den richtigen Anteilen mischt. Somit wird die m-AMSA/Milchsäure-Mischung hergestellt, indem man m-AMSA-Base und D(-)- oder L(+)-Milch säure in einem Verhältnis von 1,5 : 4 Mol Milchsäure pro Mol m-AMSA mischt. Bevorzugt ist eine Mischung von 1,5 : 2,5 Mol Milchsäure pro Mol m-AMSA.

Die Herstellung der wasserlöslichen Mittel als lyophilisierte Mischung kann durchgeführt werden, indem man eine wäßrige Lö sung der geeigneten Ausgangsmaterialien in den richtigen An teilen einem Standard-Lyophilisierungsverfahren unterwirft. Das lyophilisierte m-AMSA/Milchsäureprodukt kann somit folgen dermaßen hergestellt werden. Man stellt eine wäßrige Lösung von m-AMSA und Milchsäure [(D(-)-, L(+)- oder DL-Milchsäure] mit einem Verhältnis von 1,5 bis 4 (vorzugsweise 1,5 bis 2,5) Mol Milchsäure pro Mol m-AMSA-Base her. Man lyophilisiert dann die wäßrige Lösung und erhält dann das ge wünschte feste Mittel. Die wäßrige Lösung wird vor der Lyophi lisierung vorzugsweise zur Entfernung von unlöslichen Verun reinigungen filtriert. Es können auch herkömmliche Arzneimit telträger, beispielsweise Mannit, zur Erleichterung der Auf lösung des lyophilisierten Produktes hinzugefügt werden. Die Lyophilisierung kann nach gut bekannten Methoden in einem her kömmlichen Labor oder in industriellen Lyophilisierungsanlagen durchgeführt werden.

Zur Herstellung der Einheitsdosierungsformen der vorliegenden Mittel kann die m-AMSA-Base in jeder therapeutisch wirksamen Dosis verwendet werden. Ein zweckmäßiger Dosierungsbereich in einer Einheitsdosierungsform liegt zwischen 20 bis 200 mg m-AMSA und 1,5 bis 4 Moläquivalenten Milchsäure.

Die erfindungsgemäßen Trockenfüllungs- und lyophilisierten Mittel besitzen im wesentlichen dieselben Antitumoreigenschaften wie die m-AMSA-Formen des Standes der Technik, die jetzt kli nisch verwendet werden. Aufgrund ihrer hohen Wasserlöslichkeit können sie jedoch zur Herstellung von intravenös verabreich baren klinischen Dosierungsformen, die keine unerwünschten pharmazeutischen Träger wie Dimethylacetamid enthalten, verwen det werden. Die Mittel können verwendet werden zur Herstellung einer einzelnen Ampulle, die eine Trockenfüllung oder ein lyophilisiertes Produkt zur Rekonstitution mit sterilem Wasser oder einem sterilen wäßrigen Träger als parenterale Dosierungs form enthält.

Die erfindungsgemäßen Mittel können zur Herstellung von oralen oder nicht-intravenösen parenteralen Dosierungsformen sowie des bevorzugten intravenös injizierbaren Produktes verwendet werden. Die Mittel sind sowohl in ihrer festen Form als auch in wäßri ger Lösung ausreichend stabil, so daß eine wirksame Dosis von m-AMSA in einem verhältnismäßig kleinen Volumen einer parentera len Lösung verabreicht werden kann. Es sind somit Bolus i. v.- Injektionen möglich.

Bei der Behandlung von Säugetiertumoren können die erfindungsge mäßen Mittel entweder oral oder parenteral, jedoch vorzugsweise parenteral, in Dosierungen (gemäß der Menge an m-AMSA-Aktivi tät eingestellt) und gemäß Behandlungsplänen verabreicht werden, die bereits in der Literatur offenbart sind. Eine besonders bevorzugte Dosierungsform ist eine rekonstituierte wäßrige Lö sung mit 5 mg/ml m-AMSA-Aktivität.

Beispiel 1 Lyophilisierung von m-AMSA und L(+)-Milchsäure

Man löst m-AMSA-Base (100 mg) und L(+)-Milchsäure (50,33 mg) in 10 ml Wasser, filtriert die erhaltene Lösung durch ein 0,22 µ Filter, um eine klare Lösung zu erhalten, und gibt dann das Filtrat in geeignete Flintglasampullen (z. B. 5 ml Lösung pro Ampulle). Man verschließt die Ampullen teilweise und unter wirft sie der Lyophilisierung bei den folgenden Parametern:

Vorfrieren bei -55°C,
Frieren bei -50°C, 2 Stunden lang,
Sublimierung bei -40°C, ungefähr 68 Stunden lang bei einem Druck von ungefähr 5,3×10^-2 mbar (4×10^-2 torr) und
Trocknung bei +30°C, ungefähr 48 Stunden lang.

Dann verschließt man die Ampullen unter Vakuum oder Stickstoff atmosphäre und schmilzt sie zu.

Man kann das lyophilisierte Mittel mit Wasser rekonstituieren, wobei man bei Raumtemperatur eine Lösung mit mindestens 5 mg/ml m-AMSA-Aktivität erhält. Die Rekonstitutionszeit beträgt unge fähr 3 Minuten. Es wurde gefunden, daß die lyophilisierten Ampullen nach 1monatiger Lagerung bei 37°C und 56°C eine ausreichende Stabilität besitzen.

Beispiel 2 Lyophilisierung von m-AMSA und L(+)-Milchsäure

Man schlämmt m-AMSA-Base (150 mg) in 20 ml sterilem Wasser auf, gibt zwei Äquivalente L(+)-Milchsäure (75 mg) hinzu und erhält eine vollständige Lösung. Man filtriert die Lösung dann durch ein 0,22 µ Milliporfilter und lyophilisiert drei 5 ml Teile in 17,5 cm³ Flintflaschen 24 Stunden lang auf einer Labor- Lyophilisierungseinrichtung, wobei man ein festes Produkt er hält. Das Produkt kann mit Wasser rekonstituiert werden, so daß man Lösungen mit 7,5 und 5 mg/ml m-AMSA-Aktivität erhält, die mindestens 24 Stunden klar bleiben.

Beispiel 3 Trockenfüllungsmischung von m-AMSA und L(+)-Milchsäure

Man mischt m-AMSA-Base (100 mg) und L(+)-Milchsäure (47 mg; zwei Äquivalente) in einer 50 cm³ Flintampulle.

Zu der obigen Trockenfüllung gibt man 19 ml steriles Wasser und erhält nach Schütteln bei 16,5°C während 1 bis 3 Minuten eine Lösung mit einer m-AMSA-Aktivität von 5 mg/ml. Die Lösung bleibt mindestens 24 Stunden klar.

Beispiel 4 Lyophilisierung von m-AMSA und DL-Milchsäure

Man schlämmt m-AMSA-Base (150 mg) in 16,5 ml sterilem Wasser (18°C) auf, gibt unter Rühren 3,5 ml einer 20%igen DL-Milch säurelösung hinzu (70 mg DL-Milchsäure, zwei Äquivalente). Man rührt die Mischung 10 Minuten lang, wobei man eine Lö sung mit einem pH 3,9 erhält, gibt die Lösung durch ein 0,22 µ Milliporfilter und gibt 1 ml-Teile der gefilterten Lö sung in 8,5 ml Flintampullen und lyophilisiert 24 Stunden lang auf einer Labor-Lyophilisierungseinrichtung.

Man rekonstituiert das lyophilisierte Produkt mit sterilem Wasser, wobei man eine Lösung mit einer m-AMSA-Aktivität von 7,5 mg/ml erhält, die mindestens 24 Stunden bei Raumtemperatur klar bleibt.

Es kann auch eine Mischung von 35 mg L(+)-Milchsäure und 35 mg D(-)-Milchsäure verwendet werden.

Beispiel 5 Trockenfüllungsmischung von m-AMSA und D(-)-Milchsäure

Man stellt eine Mischung aus den folgenden Bestandteilen her:

m-AMSA-Base\|-100 mg
D(-)-Milchsäure (1,5 Äquivalente)	-35 mg

Beispiel 6 Lyophilisierung von m-AMSA und D(-)-Milchsäure

Indem man wie im Beispiel 2 verfährt, erhält man ein lyophilisier tes Produkt des folgenden Mittels:

m-AMSA-Base\|-150 mg
D(-)-Milchsäure (2 Äquivalente)	-75 mg

Claims

1. Stabiles, festes und wasserlösliches pharmazeutisches Mittel, dadurch gekennzeichnet, daß es m-AMSA [m-AMSA = 4′- (9-Acridinylamino)-methansulfon-m-anisidid] vermischt mit Milchsäure enthält, wobei das Molverhältnis Milchsäure : m-AMSA 1,5 : 1 bis 4 : 1 beträgt.

2. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Molverhältnis Milchsäure : m-AMSA 1,5 bis 2,5 : 1 beträgt.

3. Verfahren zur Herstellung des Mittels nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man

(i) eine wäßrige Lösung von m-AMSA und Milchsäure her stellt, wobei das Molverhältnis Milchsäure zu m-AMSA von 1,5 : 1 bis 4 : 1 beträgt, und
(ii) die so hergestellte wäßrige Lösung lyophilisiert.