[go: up one dir, main page]

DE3034618A1 - Verfahren zur bestimmung der aktivitaet des angiotensin-konvertierenden enzyms - Google Patents

Verfahren zur bestimmung der aktivitaet des angiotensin-konvertierenden enzyms

Info

Publication number
DE3034618A1
DE3034618A1 DE19803034618 DE3034618A DE3034618A1 DE 3034618 A1 DE3034618 A1 DE 3034618A1 DE 19803034618 DE19803034618 DE 19803034618 DE 3034618 A DE3034618 A DE 3034618A DE 3034618 A1 DE3034618 A1 DE 3034618A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
leucine
histidyl
hippuryl
activity
converting enzyme
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE19803034618
Other languages
English (en)
Other versions
DE3034618C2 (de
Inventor
Yoshihiro Fuchu Tokyo Ashihara
Yasushi Tama Tokyo Kasahara
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujirebio Inc
Original Assignee
Fujisawa Pharmaceutical Co Ltd
Fujizoki Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujisawa Pharmaceutical Co Ltd, Fujizoki Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Fujisawa Pharmaceutical Co Ltd
Publication of DE3034618A1 publication Critical patent/DE3034618A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE3034618C2 publication Critical patent/DE3034618C2/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
    • C12Q2326/90—Developer
    • C12Q2326/96—4-Amino-antipyrine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

Verfahren zur Bestimmung der Aktivität des Angiotensin-konvertierenden Enzyms. *
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bestimmt&ig der Aktivität des Angiotensin-konvertierenden Enzyms, wobei· X-Hippuryl-L-histidyl-L-leucin als synthetisches Substrat und Bippuricase verwendet wird.
Das Angiotensin-konvertierende Enzym (nachfolgend kurz AGE genannt) katalysiert die Konversion von Angiotensin I in Angiotensin II durch Abspalten des Carboxyend-dipeptids, d.h. des L-Histidyl-L-leucins, und das dabei gebildete Angiotensin II stellt eine Substanz mit stark blutdrucksteigernder Wirkung dar.
Das AGE spielt eine sehr wichtige Rolle im menschlichen Körper, und die Messung des ACE-Spiegels im Blut ermöglicht eine Diagnose der Sarkoidose.
Die genaue Bestimmung des ACE-Gehalts in menschlichem Blut ist aus physiologischen und klinischen Gesichtspunkten wichtig. Als konventionelle Bestimmungsmethoden sind 1) der Eadioimmunoassay, 2) die fluorometrische Bestimmung und 5) die Fltissigkeits-chromatographie-Hilfsbestimmung (liquid chromatography-assisted assay) bekannt. Diese konventionellen Methoden werden jedoch nicht allgemein angewandt, da sie Spezialinstrumente erfordern. Bekannt ist auch die spektralphotometrische Bestimmung fiir ACE von D.W.Gushman (ebenfalls eine der konventionellen Methoden), die in der folgenden Weise durchgeführt wird:
Als synthetisches Substrat wird Hippuryl-L-histidyl-L-leucin verwendet, das zu einer ACE enthaltenden Probe, wie Humanserum oder humor, gegeben und eine bestimmte Zeit reagieren gelassen wird. Die Reaktion wird dann durch Zusatz von HCl zu dem Reaktionssystem gestoppt. Die während der Reaktion gebildete Hippursäure wird mit Essigester aus der Reaktionsmischung extrahiert und der nach dem Verdampfen des Essigesters-erhaltene Rückstand
130015/0831
.. jr.
in destilliertem Wasser gelöst. Die Hippursäurekonzentration wird durch Messen der TJV-Absorption bestimmt. Die ACE-Aktivität wird
aus der gefundenen Hippursäurekonzentration errechnet.
Ziel der Erfindung war, ein einfacheres Verfahren zur Bestimmung der ACE-Aktivität zu entwickeln.
Dieses Ziel ist mit der nachfolgend beschriebenen Methode erreicht worden, der folgendes Prinzip zugrunde liegt:
X-Hippuryl-L-histidyl-L-leucin der allgemeinen Formel
ooo
Il Il ö '
-NH-CHo-C-NH-CH-C-NH-CH-COOH , ι
2.1 v S
worin X OH, MH9 oder N(GHL)5 bedeutet, i
wird als synthetisches Substrat und Hippuricase als Enzym ver- i wendet, das die Hippursäure in Benzoesäure und Glycin spaltet.
Einer AGE enthaltenden Flüssigkeit, wie Humanblut, -serum oder
-humor wird X-Hippuryl-L-histidyl-L-leucin zugegeben, um durch ! Spaltung des X-Hippuryl-L-histidyl-L-leucins durch ACE X-Hippur-j säure und L-Histidyl-L-Ieucin zu bilden. Die Hippuricase gibt ! man der Flüssigkeit zu, um aus der X-Hippursäure durch Spaltung · X-Benzoesäure und Glycin zu bilden. Die X-Benzoesäure reagiert
mit 4—Amino-antipyrin und HpOp in Gegenwart von Peroxidase unter; Bildung von Ohinonxminfarbstoff, dessen Konzentration kolorime- \ trisch gemessen wird, um die Aktivität von ACE zu berechnen. j
J Somit läßt sich die Aktivität von ACE dadurch bestimmen, daß man!
a) eine ACE enthaltende Flüssigkeit mit einem Reagenz vermischt,j das X-Hippuryl-L-histidyl-L-leucin, Hippuricase, Peroxidase, ! 4-Antipyrin und HpOp enthält und !
b) kolorimetrisch die Konzentration des in a) gebildeten Chinon-I .. ..iminfarbstoffs misst. .
130015/0831
Das Prinzip des Verfahrens der Erfindung läßt sich durch folgendes Schema darstellen:
1) X-Hippuryl-1-histidyl-l-leucin } X-Hippursäure + L-Hystidyl-L-leucin
2) X-Hippursäure X-Benzoesäure + Glycin
3) X-Benzoesäure + 4-Aminoantipyrin + HpOp Chinoniminfarbstoff.
Eines der gemäß Erfindung verwendeten Substrate, das p-Hydroxyhippuryl-L-histidyl-L-leucin kann wie folgt hergestellt werden:
30 g Carbobenzoxy-glycin und 24 g L-Histidinmethylester werden in 300 ml Chloroform gelöst, die erhaltene Lösung mit 30 g Aethylaminopropyl-carbodiimid versetzt und reagieren gelassen. Die Reaktionsmischung läßt man 2 Stdn. bei Raumtemperatur stehen, wäscht sie danach mit Wasser und einer 2,5 %igen wässrigen NaHCO,-Lösung und destilliert dann das Lösungsmittel (Chloroform) unter vermindertem Druck ab.
25 g des erhaltenen Reaktionsproduktes, Carbobenzoxy-glycyl-L-histidin-methylester, löst man in 50 ml Aethanol, versetzt die Lösung mit 15 ml Hydrazinhydrat und läßt sie über Nacht stehen. Das so gebildete Garbobenzoxy-glycyl-L-histidin-hydrazid wäscht man mit Wasser und kristallisiert es dann aus heißem Wasser um.
21 g des erhaltenen Carbobenzoxy-glycyl-L-histidin-hydrazids löst man in 185 ml 1 η HCl, versetzt die erhaltene Lösung unter Rühren bei O0C mit 245 ml Essigester und 4,3 g NaNO2, gibt nach 5 Minuten 73 ml einer 50 %igen wässrigen KpCO^-Lösung zu und extrahiert die erhaltene Lösung mit Essigester. Den Essigesterextrakt trocknet man über wasserfreiem Natriumsulfat, versetzt ihn mit einer (auf O0C gekühlten) Lösung von L-Leucin-methylester in Aethyläther (9g/ 208 ml), läßt die Mischung über Nacht bei -50C stehen, filtriert den ausgefallenen kristallinen Carbobenzoxy-glycyl-L-histidyl-L-leucin-methylester ab und wäscht ihn mit Aethyläther. . . _.. _.
130015/0831
20 g des erhaltenen Carbobenzoxy-glycyl-L-histidyl-L-leucinmethylesters gibt man zu 100 ml einer 25 %igen HBr-Lösung in Essigsäure, rührt die erhaltene Mischung 1 Stunde, um die Garbo-; benzoxygruppe abzuspalten, und versetzt sie dann mit 2000 ml abs. Aether. Den dabei gebildeten Niederschlag filtriert man ab, wäscht ihn mit Aethyläther und trocknet ihn in einem Exsikkator.
20 g des erhaltenen Niederschlags, Glycyl-L-histidyl-L-leucinmethylester.2 HBr, und 10,1 ml Triäthylamin löst man in 80 ml Dichlormethan, versetzt die erhaltene Lösung zunächst mit 6,5 6 p-Acetoxy -benzoesäure und dann mit 7»5 S Aethyl-aminopropylcarbodiimid.HCl, rührt die erhaltene Reaktionsmischung 2 Stunden bei Raumtemperatur, wäscht sie mit Wasser und einer 2,5 %igeiji wässrigen NaHCO.,-Lösung, trocknet sie über wasserfreiem Natrium-1 sulfat, entfernt das Lösungsmittel unter vermindertem Druck und j läßt das Ganze bei -200G stehen, damit sich der p-Acetoxyhippuryl-L-histidyl-L-leucin-methylester absetzt.
5,1 g des erhaltenen p-Acetoxy-hippuryl-L-histidyl-L-leucinmethylesters löst man in 20 ml Methanol und gibt zu der erhalte-| nen Lösung 20 ml 1 η Natronlauge bei einer Temperatur von 40C. | Nach 1 Stunde Rühren setzt man den pH-Wert der Lösung durch ; HCl-Zusatz auf 5 herab und destilliert das Wasser und das Methanol ab. Den so erhaltenen Rückstand löst man in Methanol, fil- j triert, versetzt das erhaltene Piltrat mit Aethyläther und läßt j das Ganze bei -200G stehen, wobei kristallines p-Hydroxy-hippu- j ryl-L-histidin-L-leucin ausfällt, das man abfiltriert. ;
Das Verfahren der Erfindung soll durch die nachfolgenden Bei-
spiele näher erläutert werden. ί
Beispiel 1 \
Zur Bestimmung der Aktivität von ACE wurde ein in der angegebenen Weise erhaltenes p-Hydroxy-hippuryl-L-histidyl-L-leucin als synthetisches Substrat verwendet.
0,05 ml Serum und 0,049 ml reines Wasser wurden zu 0,25 ml einer'
130015/0831
Pufferlösung (pH 8,3) gegeben, die 0,5 mM p-Hydroxy-hippuryl-L-histidyl-L-leucin, 1 TJ Hippuricase, 0,5 U Peroxidase, 2 mM 4-
Amino an tipyrin, 2 mM HJD 0,5 M FaOl und 0,1 M Borsäure ent- \
«ic: ι
Melt. ΐ
Die Aenderung der Extinktion (absorbance) der Lösung wurde bei ; Licht von 505 nm "bei einer Temperatur von 370C während des Reaktionsverlaufs gemessen. Bei der Messung wurde ein Zentrifugal- ! analysator benutzt, in dem die Messve-rzögerung (time lag) 5 see.; und die Reaktionsdauer 10 Min. betrug. Die Aktivitätseinheit : (mü.) von ACE wurde im Auto analysator automatisch ausgedruckt. i Die Berechnung erfolgte nach folgender Gleichung: !
TT - Aenderung der Extinktion bei 505 nm \
~ molarer Extinktionskoeffi-zient \+) [FT I
! x Reaktionsdauer (.10 Min.) x Schichtdicke C++) (cmj x
(+) = (molecular absorptivity)
(++) = (light-path length)
£ = 1200C(molarer Extinktionskoeffizient des Ohinoniminfarb-
; stoffs)
j Das Ergebnis der Messung nach 20-facher Wiederholung war
j Aktivitätseinheit (mU) = 15,0 + 0,5 (nMol/ral/tjiin)
! Variantxonskoeffizxent (CV) = 3,3 % «
Beispiel 2
• Die Aktivitätseinheit (mil) und der Variationskoeffizient (CV)
: wurden unter Anwendung der in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrens- und Berechnungsmethode bestimmt, wobei jedoch 10 mM p-Amino-hippuryl-L-histidyl-L-leucin anstelle von 5 mM p-Hydroxyhippuryl-L-histidyl-L-leucin eingesetzt, die Aenderung der
Extinktion bei 480 nm gemessen und bei der Berechnung für
£ 8000 eingesetzt wurde.
Aktivitätseinheit (mU) = 16,0 +_ 0,28 (nMol/ml/min)
Variationskoeffizient (CV) = 1,8 %
130015/0831
Beispiel 3 " · *
Die Aktivitätseinheit (m.U) und der Variatxonskoef fxzxent (CTV) wurden unter Anwendung der in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrens- und Berechnungsmethode bestimmt, wobei jedoch 8 mM p-Dimethylamino-hippuryl-L-histidyl-L-leucin anstelle von 5 mM p-Hydroxy-hippuryl-L-histidyl-L-leucin eingesetzt,.die Aenderung der Extinktion bei 555 nm gemessen und bei der Berechnung für £ 32000 eingesetzt wurde.
Aktivitätseinheit (m.U) = 15,0 ± 0,32 (nMol/ml/min) Variationskoeffizient (CV) = 2,1 %
Zum Vergleich mit dem Verfahren der Erfindung wurde eine Messung nach der Methode von Cushman durchgeführt, wobei das gleiche Serum wie bei dem Verfahren der Erfindung benutzt wurde. Die Messergebnisse wurden in folgender Weise erhalten:
0,1 ml Serum wurden mit 0,25 ml einer Boratpufferlösung (pH 8,3): versetzt, die 5 mM Hippuryl-L-histidyl-L-leucin enthielt und die Mischung 60 Min. bei 370C reagieren gelassen. Danach wurde ' die Eeaktion durch HCl-Zusatz zu der Lösung gestoppt, die gebildete Hippursäure mit 1,5 ml Essigester extrahiert, die überstehende Flüssigkeit abgetrennt und nach dem Abdestillieren des Lösungsmittels der erhaltene Rückstand in 2 ml reinem Wasser gelöst. Die Extinktion dieser Flüssigkeit wurde bei 228 nm gemessen, um die Hippursäuremenge zu bestimmen.und die Aktivitätseinheit von AGE (iU) berechnet. Das Ergebnis der Messung nach 20-facher V/iederholung war:
Aktivitätseinheit (mU) = 15,8 +_ 0,93
Variationskoeffizient (CV) = 5,89 % :
Diese Gegenüberstellung zeigt, daß das Verfahren der Erfindung wesentlich einfacher als das Verfahren von Cushman ist und in der Reproduzierbarkeit, ablesbar an den entsprechenden CV-Werten, dem Cushman-Verfahren überlegen ist. (Die CV-Werte des Verfahrens der Erfindung betragen 3,3 %, 1,8 % und 2,1 %, der CV-Wert des Cushman-Verf ahrens beträgt dagegen 5*89 %.)
130015/0831

Claims (2)

LICHTENSTEINSTRASSE3 FERNSPRECHER: (0611) 655061 TELEGRAMME: LOMOSAPATENT LANDESZENTRALBANK 50007149 POSTSCHECK-KONTO FFM. 1667-600 Fujizoki Pharmaceutical Co., Ltd., 6-7, Shimoochiai 4-chome, Shinjuku-ku, Tokyo, Japan Patentansprüche
1) Verfahren zur Bestimmung der Aktivität des Angiotensin-konvertierenden Enzyms,
dadurch gekennzeichnet, daß man
a) eine Angiotensin-konvertierendes Enzym enthaltende Flüssigkeit mit einem Eeagenz vermischt, das X-Hippuryl-L-histidyl-L-leucin der allgemeinen Formel
O
Ii
O Il
ο I
>^/ΤΓ\ Il II I
^0Vc-NH-CH2-C-NH-CH-C-IiH-CH-COOH
CH2CH(CH3J2
\_y
worin X OH, HHp oder F(CH^)2 bedeutet, Hippuricase, Peroxidase, 4-Aminoantipyrin und HpO2 enthält und
b) kolorimetrisch die Konzentration des in a) gebildeten Ghinoniminfarbstoffs misst.
2) Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als X-Hippuryl-L-histidyl-L-leucin p-Hydroxy-hippuryl-L-histidyl-L-leucin, p-Amino-hippuryl-L-histidyl-L-leucin oder p-Dimethylamino-hippuryl-L-histidyl-L-leucin verwendet.
130015/0831
DE3034618A 1979-09-26 1980-09-13 Verfahren zur Bestimmung der Aktivität des Angiotensin-konvertierenden Enzyms Expired DE3034618C2 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP54122562A JPS5823080B2 (ja) 1979-09-26 1979-09-26 アンジオテンシン変換酵素の活性測定法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3034618A1 true DE3034618A1 (de) 1981-04-09
DE3034618C2 DE3034618C2 (de) 1983-01-13

Family

ID=14838956

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE3034618A Expired DE3034618C2 (de) 1979-09-26 1980-09-13 Verfahren zur Bestimmung der Aktivität des Angiotensin-konvertierenden Enzyms

Country Status (6)

Country Link
US (1) US4292404A (de)
JP (1) JPS5823080B2 (de)
DE (1) DE3034618C2 (de)
FR (1) FR2465785A1 (de)
GB (1) GB2060646B (de)
NL (1) NL183832C (de)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5935597B2 (ja) * 1980-12-23 1984-08-29 富士レビオ株式会社 アンジオテンシン変換酵素の活性測定法
JPS60501191A (ja) * 1983-05-03 1985-08-01 ベ−リンガ−　マンハイム　ゲゼルシヤフト　ミツト　ベシユレンクテル　ハフツング アンギオテンシン転換酵素を測定する方法及び試薬
JPS59227851A (ja) * 1983-06-09 1984-12-21 Sankyo Co Ltd レニン阻害作用を有するペプチド類
US5803357A (en) * 1997-02-19 1998-09-08 Coleman Safety And Security Products, Inc. Thermostat with remote temperature sensors and incorporating a measured temperature feature for averaging ambient temperatures at selected sensors
DE102022132512A1 (de) 2022-12-07 2024-06-13 Diasys Diagnostic Systems Gmbh Testsystem zur Messung der Enzymaktivität des Angiotensin-konvertierenden Enzyms (ACE)

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4108726A (en) * 1976-07-15 1978-08-22 Research Corporation Sarcoidosis test

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chemical Abstracts 75, 105311d (1971) *

Also Published As

Publication number Publication date
JPS5648899A (en) 1981-05-02
GB2060646A (en) 1981-05-07
DE3034618C2 (de) 1983-01-13
NL183832C (nl) 1989-02-01
GB2060646B (en) 1983-06-08
JPS5823080B2 (ja) 1983-05-12
NL8005242A (nl) 1981-03-30
US4292404A (en) 1981-09-29
FR2465785A1 (fr) 1981-03-27
FR2465785B1 (de) 1984-08-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2552570C3 (de) Tri- und Tetrapeptide und deren Verwendung zur Bestimmung von Serinproteasen
DE2920292C3 (de) L-γ -Glutamyl-3-carboxy-4-hydroxyanilid und dessen Säureadditions- oder Alkalisalze, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung zur Bestimmung der Aktivität von γ-Glutamyltranspeptidase
DE2740323C3 (de) Verfahren zur Bestimmung eines bakteriellen Endotoxins und Reagenz zur Verwendung bei diesem Verfahren
DE3348172C2 (de)
DE3413311A1 (de) Reagenz zur bestimmung der thromboplastinzeit
WO2000050446A1 (de) Oligopeptidderivate zur elektrochemischen messung der aktivität von proteasen
DE69029107T2 (de) Substrate für beta-Galactosidase
DE2919545C3 (de) L-Leucin-4-hydroxyanilid-derivate, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung zur Bestimmung der Aktivität von Leucinaminopeptidase
DE2808111A1 (de) Neue dipeptidderivate und deren verwendung zur messung der enzymatischen aktivitaet
DE3034618A1 (de) Verfahren zur bestimmung der aktivitaet des angiotensin-konvertierenden enzyms
DE2629195C3 (de) Tripeptide und deren Verwendung zur Bestimmung von Thrombin
DE2747853C2 (de) Verfahren zum quantitativen Messen von angiotensinumwandelnder Enzymaktivität
DE2724212A1 (de) Verfahren und reagenz zur bestimmung der enzymaktivitaet
DE2943581C2 (de) D-oder L-Valyl-L-leucyl-L-lysinnaphthylester, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
DE2943580C2 (de) L-Phenylalanyl-sowie N-Benzoyl-L-phenylalanyl-L-valyl-L-arginin-naphthylester, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
DE2943582C2 (de) L-Prolyl-L-phenylalanyl-L-argininderivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
DE3136508C2 (de) L-Phenylalanyl-L-argininderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
EP0465998B1 (de) Neue Beta-Galactosidase-Substrate für den CEDIA
DE68906167T2 (de) Zusammensetzung zur erkennung von paradontalen krankheiten.
DE2646033C3 (de) L-Leucin-p-aminoanilide, Verfahren zu deren Herstellung und ihre Verwendung zur Messung der Aktivität von Leucylaminopeptidase
DE3150416C2 (de) Verfahren und Reagenz zur Bestimmung der Aktivität von Angiotensin-konvertierendem Enzym
DE3685724T2 (de) Synthetisches peptid-substrat fuer die bestimmung von trypsin und alpha-1-antitrypsin.
DE68915216T2 (de) Substrate zur Bestimmung der enzymatischen Aktivität.
DD270382A1 (de) Verfahren zur kolorimetrischen bestimmung von dipeptidylpeptidase iv mittels dipeptidhydraziden
DE69822909T2 (de) Verfahren zur Herstellung von Deoxypyridinolin

Legal Events

Date Code Title Description
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
8327 Change in the person/name/address of the patent owner

Owner name: FUJIREBIO K.K., TOKYO, JP

8339 Ceased/non-payment of the annual fee