DE2557033C2

DE2557033C2 - Acylderivate des 1,2-5,6-Dianhydro-dulcits, Verfahren zu deren Herstellung und diese Verbindungen enthaltende anticarcinogene Mittel

Info

Publication number: DE2557033C2
Application number: DE2557033A
Authority: DE
Inventors: Agoston Dr. Budapest David; Sandor Dr. Eckhardt; Ilona Dr. Elekes; Laszlo Institoris; Zsuzsa Dr. Somfai; Janos Dr. Sugar; Anna Szabolcs; Sandor Dr. Virag; Laszlo Dr. Ötvös
Original assignee: Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt 1045 Budapest Hu
Current assignee: Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt 1045 Budapest Hu
Priority date: 1974-12-24
Filing date: 1975-12-18
Publication date: 1983-12-22
Also published as: YU326975A; DK156271C; DK156271B; FI753643A7; CS220403B1; CH620208A5; DD124803A1; FR2295743B1; AT345303B; FR2295743A1; BE837054A; HU172826B; NO754374L; PL101458B1; JPS6129952B2; DK589775A; GB1490649A; ATA966175A; YU40449B; JPS51125201A

Description

durch eine besondere Aktivität aus. Dies veranschaulichen die Ergebnisse, die bei der Untersuchung tier toxikologischen und der anticarcinogenen Eigenschaften der l^-S.e-Dianhydro-S^-diacetyi-dulcite der Erfindung her Mäusen und Ratten mit transpiandcrten Tumoren tierischer Herkunft erhalten wurden.

Die Untersuchungen wurden mit folgenden Verbindungen durchgeführt: ^!

25

1,2-5,6-Dianhydro-dulcit

1 ^-5,6-Dianhydro-3,*-di-(^-phenylpropK>nyl>dulcit

1 ^-5,6-Dianhydro-3,4-di-(p-chlorbenzol><lul«it l^-5,6-Dianhydro-3,4-di-(^-phenyl-butyryl)-dulcit DAD

Diac-DAD

DS-DAD

FB-DAD

FP-DAD

CA-DAD

DF-DAD

DB-DAD

CB-DAD

P8-DAD

Die Toxizität der Acylderivate der Erfindung wurde an normalen Schweizer Mäusen bei i. p.- und p. o.-Applikation durchgeführt Die Untersuchungsdauer - Bestimmung der LD₅₀-Dosi - Betrug nach einmaliger Dosierung 21 Tage. Die Ergebnisse sind in Tabelle !enthalten.

Tabelle 1

Wirkstoff

MG	LD₅₀ i. p.	LD₅₀ i. p.	LD50 P- 0.
	mg/ kg	mMol/kg	mg/kg
146	15	1,03	18
230	34	1,48	50
374	120	3,20	100
438	110	2,52	100
410	160	3,8	keine
			Untersuchung

Diac-DAD

DS-DAD

FB-DAD

FP-DAD

Die Tabelle zeigt, daß die Toxizität etwa in dem gleichen MaBe abnimmt, in dem das MG des Acylderivats ansteigt und daß die Tiere sowohl nach der Lp.- als auch nach der p.o.-Applikation nach 5 bis 9 Tagen verenden. Daraus ergibt sich, daß alle Verbindun- ₍ gen auch im Magen-Darm-Trakt gut resorbiert werden.'

Die Bestimmung des sogenannten toxischen Kumulationsrestes, mit dem toxische Veränderungen erfaßt werden sollen, die sich langsam manifestieren, zur Schädigung der Organe und schließlich zum Tod der Tiere führen, wurde nach der Methode von Druckrey an Gruppen von jeweils 6 bzw. 10 Mäusen mit der vollen bzw. der halben LD₈O-Wirkstoffdosis, die nach 48 bzw. 96 Stunden noch einmal wiederholt wurde, durchgeführt. Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle 2 zusammengestellt.

Tabelle 2

Wirkstoff

Dosis
mg/kg

Mortalität	%
Stet	90
9/10	0
0/10	40
4/10	0
0/10	83
5/6	0
0/6	17
1/6	0
0/6	83
5/6	0
0/6	0
0/6	17
1/6	83
5/6	0
0/6	0
0/6	17
1/6

Kumulationsrest

DAD

Diac-DAD

DS-DAD

CA-DAD

1 XLDg₀
Ix 1/2 LD₈₀ 2XlZiIiD₈O

2 X.1/2 LD_n

IX LD₈O
1X1/2 LD«, 2 x 1/2 LD₈₀ 2XLaLD₈₀

IXLD₈₀
lxl/2 LD₈₀ 2 X 1/2 LD₈₀ 2 X 1/2 LD₄₀

1 X LD₈₀

1 X 1/2 LD_M

2 X 1/2 LD₈₀ 2 X 1/2 LD₈₀

18	+ 9/48^h	+18/48^h
9	9 + 9/96^h	+19/96^h
9	38
	19
	19	+ 55/48"
19	+ 55/96^h
HO
55
55	+ 24/48"
55	+ 55/96"
48
24
24
55

45

20

. 0

20

Der Tabelle ist zu entnehmen, daß die Kumulierung beim Diac-DAD (mit 17%) geringer als beim DAD (mit 40%) ist, daß sich aber bei beiden Verbindungen die toxische Wirkung innerhalb von 96 Stunden abspielt, und nach 96 Stunden bereits eine Regenerierung einsetzt, bei den Verbindungen DS-DAD und CA-DAD sich dagegen die toxische Wirkung erst nach 96 Stunden manifestiert.

Um die Wirkung der Acylderivatc der Erfindung und des 1.2-5.o-Dianhydro-dulcits (DAD) auf verschiedene Tumorarten zu untersuchen, wurden Mäuse, denen die verschiedenen Tumorarten implantiert worden waren, mit den verschiedenen, in den ·einzelnen Tabellen angegebenen Acylderivaten und DAD — als Vergleichssubstanz — behandelt.

Zur Untersuchung der Wirkung auf Tumor P 388 wurde in Mäusen durch i.p.-Injektion ein Tumor erzeugt. 24 Stunden nach der Injektion wurden die Mäuse I bzw. 9 Tage mit den in der Tabelle angegebenen Dosen der einzelnen Verbindungen 1 mal pro Tag behandelt. Die Ergebnisse sind in Tabelle 3 enthalten.'

Tabelle 3

Wirkstoff	Dosis	Wirkung*)
	mg/kg i. p.	T/C %
Diac-DAD	9X6,3	291
	9 X 10	196
	1X14	190
DAD	9X2	232
	9X4,0	S67
	1 X 5,1	197

*) T/C '

durchschnittliches Überleben der behandelten Tiere (Tage)
durchschnittliches Überleben der unJehandelten Kontrolltiere (Tage)

x 100

Die Tabelle zeigt, daß mit dem Diac-DAD ein höherer T/C-Wert erhalten werden kann als mit DAD.

Die Untersuchung der Wirkung auf Walker ?56 Carcinosarcoma Intramuscularia wurde an Ratten durchgeführt, wobei den Tieren 24 Stunden nach der Injektion der Tumor>ellen auf einmal die in der Tabelle angegebenen Dosen an Wirkstoff i.p. injiziert wurden. Zur Bestimmung des therapeutischen Index wurde jeweils die niedrigste Dosis genommen, mit der am 10. Tag eine Tumorinhibition von mehr als 90% (EDw) erzielt worden war. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle 4 zusammengestellt.

	ED₉₀	7	TI	LYso	25 57	033	ED₅₀	8	LD₅₀	TI
	mg/k«		*ID₅₀J*	mg/kg			mg/kg		mg/kg	LDjo/EDjo
Tabelle 4	i. p.	LD₅₀	ED₉₀	i. p.		Tabelle 6	i. ρ. χ 8	i. p.
Wirkstoff	2,5	mg/kg	12	17	Gr₅₀	Wirkstoff	2,3	35	15
	2,4	i. p.	11,2	14,5	*m/kg j**		9	45	5
	7,0	28	10,7	35	i. p.		9	100	Il
Diac-DAD	80	27	5	400	10	Diac-DAD	100	400	4
CA-DAD	13,5	75	13	105	5,5	CA-DAD	20	270	13
DS-DAD	11	400	15,5	70	22,5 Ό	DS-DAD	23	150	6.5
DP-DAD	7,5	180	12	28	400	DP-DAD	15	120	8,0
DB-DAD	6,6	170	9,5	25	33	CB-DAD	0.8	15	19,0
CB-DAD	2,1	91	4,8	3,65	36	FP-DAD
FP-DAD		63		48	FB-DAD
FB-DAD	U		25 ^l5	DAD
DAD			3,65

(Lw₃₅ hTw. Qr_x betreffen die Werte für Dosen, mit denen die Lymphocytenzahl bzw. die Granulocytenzahl halbiert wird.)

Die Tabelle zeigt, daß die Acylderivate der Erfindung dem DAD bezüglich des therapeutischen Indexes überlegen sind.

Zur Untersuchung der Wirkung auf Harding-Passey s.c. Melanoma wurde der langsam wachsende, weniger beeinflußbare bekannte Tumor durch s.c. Transplantation eines Stückchens Tumorgewebes bei Mäusen erzeugt. Die Behandlung wurde 24 Stunden nach der Transplantation begonnen. Die Auswertung erfolgte am 21. Tag des Versuches. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle 5 enthalten.

Tabelle 5

Wirkstoff	ED₅₀ X 14	MTD/	MTDZED₃₀
		HP X 14·)
	mg/kg	mg/kg
Diac-DAD	3,0	7,0	2,3
CA-DAD	6,0	8,0	U
DS-DAD	22	25	1,1
DP-DAD	12,5	25	1.9
DB-DAD	22	25	1,1
DAD	U	2,5	1,7

·) MTD/HP x 14 = max. tolerierte Dosis/Harding-Passey;die jeweils angegebenen Dosen werden 14 mal nacheinander appliziert

Die Tabelle zeigt daß der therapeutische Index von Diac-DAD bei diesem langsam wachsenden und gegen anticarcinogene Mittel weniger empfindlichen Tumor auch bei langdauernder Behandlung besser ajs derjenige von DAD ist.

Zur Untersuchung der Wirkung auf Sarcoma S 180 wurde der Tumor bei Mäusen durch sx. Transplantation eines Stückchens Tumorgewebe erzeugt. Die Behandlung begann 24 Stunden nach der Transplantation, erfolgte täglich lmal und wurde insgesamt 8 Tage fortgesetzt Die Auswertung der Tumonnhibjtion wurde am !0. Tag vorgenommen. Die Ergebnisse sind in Tabelle 6 zusammengestellt.

Die Ergebnisse zeigen, daß bei diesem Tumor der therapeutische index von Diac-DAD »nd von CB-DAD nur wenig unter dem von DAD liegt, abir die Toxizität (LDso) der Acylderivate wesentlich geringer als die von DA D ist.

Zusammenfassend ist festzustellen, daß die Toxizität der Diacylderivate geringer als die des 1.2-5,6-Dianhy dro-dulcits ist und daß die Diacylderivate nicht nur auf verschiedene Tumorarten (Tumor P 388, Walker Carcinosarcoma. Harding-Passey Melanom. Sarcom S 180) eine antkircinogene Wirkung ausüben, sondern daß die anticarcinogene Wirkung besser ist als die von 1.2-5.6-Dianhydro-dulcit. Hierbei ist überraschend, daß die Diacylderivate der Erfindung auch eine günstige Wirkung auf Melanomen, wie das Harding-Passey Melanom und das Melanom B 16 ausüben. Die neuen Diacylderivate werden im Magen-Darm-Trakt gut resorbiert.

Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung der Acylderivate des 1,2-5,6-Dianhydro-dulcits der allgemeinen Formel I. wonach der entsprechende 1.2-5,6-Dianhydro-hexit in an sich bekannter Weise mit einem entsprechenden Säurehalogenid, Säureanhydrid oder Ester als Acylierungsmittel umgesetzt wird.

Bei der Durchführung des Verfahrens der Erfindung wird zweckmäßig wie folgt vorgegangen:

1 Mol 1,2-5,6-Dianhydro-dulcit wird in wasserfreiem, organischem Lösungsmittel, vorteilhaft in Benzol oder in einem Benzol-homologen, bei einem Volumen/Gewichtsteil-Verhältnis von 40 gelöst Danach gibt man zu der Lösung 2,0 bis 3,01 Mol einer organischen, säurebindenden Base oder eines anorganischen, säure bindenden Mittels. In Einzelfällen kann die säurebinden de Base (z. B. Triethylamin oder Pyridin) in großem Oberschuß zugegeben werden. Dann hat die Base die Funktion des Lösungsmittels. Der Säurebinder enthaltenden Lösung gibt man in Form einer verdünnten, etwa

05 m-Lösung, 2 MoI Acylierungsmittel mit solcher Geschwindigkeit zu, daß die Reaktionstemperatur unter dem Siedepunkt des Reaktionsgemisches gehalten wird. Zweckmäßig wird eins Zugabetemperatur von 20 bis 50⁰C eingehalten. Nach Beendigung der Zugabe wird

das Reaktionsgemisch 10 bis 180 Minuten bei dieser Temperatur gerührt In manchen Fällen muß 10 bis 24 Stunden bei Zimmertemperatur nachgerührt werden.

Bei der Aufarbeitung des Reaktionsgemisches köhneiTzwei verschiedene Wege eingeschlagen werden, was davon abhängt, ob als Acylierungsmittel Slurehalogenid, Säureanhydrid oder Ester verwendet worden ist a) Bei der Acylierung mit Säurehalogeniden werden - die ausgefallenen Salze nach Beendigung der Reaktion ,

bzw. nach dem Nachrühren aus dem Reaktionsgemisch abfiltriert und mit einem wasserfreien organischen Lösungsmittel, vorzugsweise Benzol, gewaschen. Die reine Lösung wird bei 50⁰C zur Trockene eingedampft, der Rest mit Methylalkohol oder anderen Lösungsmitteln (vorzugsweise Äther, Äthylacetat oder anderen Gemischen) vermischt, dann abgekühlt. Nach der Kristallisation filtriert man das erhaltene Produkt ab. Aus der Mutterlauge kann durch Einengen oder Ausfällen mit einem Lösungsmittel weiteres kristallines Produkt (II. Generation) gewonnen v, irden, wobei man noch eine Ausbeute von etwa 10 bis 20% des ursprünglichen Produktes (Generation I) erhält. Die erhaltenen Produkte, sowohl der I. wie der II. Generation, werden gegebenenfalls durch ein- oder mehrmaliges Umkristallisieren (hauptsächlich bei der II. Generation) gereinigt.

b) Bei der Acylierung mit Säureanhydriden oder Cstern wird das Reakiiunsgemiicii nach Beendigung der Reaktion auf die Hälfte des ursprünglichen Volumens eingedampft, der erhaltene Rückstand unter Rühren in das 2- bis 3fache Volumen Eiswasser gegossen und die wäßrige Phase von der organischen Phase abgetrennt. Hat die wäßrige Phase einen sauren pH, wird die organische Phase, vorzugsweise durch Ausschütteln mit 5- bis I0°/oiger Natriumhydrogencarbonat-Lösung neutral gewaschen. Nach der auf das letzte Waschen folgenden Abtrennung wird die organische Phase unter vermindertem Druck eingedampft und der erhaltene Rückstand in der unter a) angegebenen Weise weiter ;uifgearbeitet. (Vermischen mit Lösungsmittel, Auskristallisieren und gegebenenfalls ein- oder mehrmaliges Umkristallisieren.)

Die Herstellung des als Ausgangsmaterial verwendeten 1.2-5.6-Dianhydro-dulcits (Schmelzpunkt: 98.5° C, [oi]" = +2° in Wasser, c=\25) ist in der Literatur beschrieben (Jarman. M, Ross. W. C J, The formation of epoxides from substituted hexitols. Carbohydrate Research. 9,139[1969]).

Als Reaktionsmedium bzw. Lösungsmittel werden zweckmäßig wasserfreie organische Lösungsmittel verwendet, die den Reaktionskomponenten gegenüber inert sind. Einige Beispiele hierfür sind die Homologen der aliphatischen. Cycloalkyl- und aromatischen Kohlenwasserstoffe, halogenierte Kohlenwasserstoffe oder im Überschuß angewandte organische säurebindende Basen, wie Triethylamin oder Pyridin. Zum Waschen des abfiltrierten Salzes nimmt man zweckmäßig die dem ursprünglich verwendeten Lösungsmittel entsprechende Menge an wasserfreiem Lösungsmittel, um die Bildung eines Lösungsmittelgemisches zu vermeiden, das die Aufarbeitung des Reaktionsgemisches erschwert

Als Acyiierungsmittel werden zweckmäßig solche der allgemeinen Formel

R-CO-X

verwendet in der

R eine gegebenenfalls durch eine Carbalkoxygruppe, ein Halogenatom oder eine Phenylgruppe substituierte Ci-ig-Alkanoylgruppe, eine gegebenenfalls durch ein Halogenatom substituierte Benzoylgruppe, eine Cyclohexanoylgruppe oder eine 5- oder 6gliedrige monocycHsche, ein Stickstoff-, Sauerstoff- oder Schwefelatom enthaltende heterocyclische Acylgruppe und

X ein Halogenatom, den SäureanhydridVest oder OR'

bedeuten, worin R' eine Alkyl-, Aryl-, Acyl- oder Aralkylgruppe ist.

Die Acylierung wird zweckmäßig in Gegenwart eines Säurebinders durchgeführt. Einige Beispiele hierfür sind tert. Amine, Trialkylamine, deren Hortiologe sowie Alkalicarbonate. Sehr vorteilhaft ist die Anwendung von Triäthylamin, das das 1,2'5.6-Dianhydro-dulcit gut

ίο löst und aus dem die bei der Acylierung gebildeten Salze leicht abgetrennt werden können.

Die Acylierung wird zweckmäßig im Temperaturbereich von 20 bis 50°C durchgeführt. Eine Ausnahme bilden die Säurehalogenide, die in «-Stellung große raumfüllende Gruppen aufweisen. Bei deren Verwendung ist bei einer Reaktionstemperatur von 50° C eine Reaktionsdauer von 1 bis 3 Stunden erforderlich, um eine gute Ausbeute zu erzielen. Die maximale

TciVipcfäiüf ΚΰΠΓι uci» SicucpüfiiU u£3 3ngCW€nuCtCn

Lösungsmittels bzw. des Reaktionsgemisches entsprechen. Die Temperatur wird gewöhnlich durch die Zugabegeschwindigkeit des Acylierungsmittels geregelt. Eine Außenkühlung ist nur dann hotwendig, wenn zu Beginn die Zugabegeschwindigkeit der Acylierungs mittel zu schnell ist.

Es ist sehr wichtig, daß Ausgangsverbindungen, Lösungsmittel. Säurebinder und Reagentien (Acyiierungsmittel) vollkommen wasserfrei sind. Dies muß vor der Reaktion unbedingt kontrolliert werden. Falls notwendig, müssen die Verbindungen weiterer Entwässerung und Reinigung unterworfen werden.

Die Erfindung betrifft auch ahticarcinogene Mittel mit einem Gehalt an einem oder mehreren Acylderivalen des 1.2-5,6-Dianhydro-dulcits der allgemeinen Formel I neben üblichen inerten Lösungsmitteln oder Trägerstoffen. Hierbei ist

— für die per os-Applikation der reine Wirkstoff gegebenenfalls mit den zur Tablettierung üblichen Hilfsmitteln (Stärke, Lactose, Talcum) vermischt in Form von Tabletten,

— für die i.v.-Applikation der Wirkstoff in wäßriger Lösung oder in der Lösung eines physiologisch inerten organischen Lösungsmittels (verschiedene Glykole usw.),

— für die intramuskuläre, intraperitoneale oder intracavitale Applikation der Wirkstoff in Losung, wie oben angegeben, oder in Form einer Suspen sion und

— für die lokale Applikation der reine Wirkstoff, gegebenenfalls in Mischung mit den üblichen antibakteriellen und zur Behandlung von Wunden verwendeten Mitteln (Sulfonamiden, Corticoiden,

Vitaminen usw.) vorgesehen.

Die Wirkstoffkonzentration in den verschiedenen Präparaten beträgt zweckmäßig:

in Lösungen in Suspensionen in Tabletten

1-10%, 1-70% und 20-90%.

Die Herstellung der Acylderivate der Erfindung und ihre- Adjustierung wird durch die nachfolgenden Beispiele erläutert

Beispiel 1

In einen 100-ml-Dreihalskolben mit Rührer, Rückl'lußkühler und Tropftrichter gibt man 1,46 g (10 mMol) 1,2-5,6-Dianhydro-dulcit und 60 ml abs. Benzol und rührt 10 Minuten bei Zimmertemperatur. Die erhaltene Lösung versetzt m?n mit 2,8 ml (20 mMol) abs. Triäthylamin (oder 2,45 g [20 mMol] wasserfreiem Kaliumcarbonat) und 2,45 g bzw. 1,47 ml (2OmMoI) frisch destilliertem Acetylbromid gelöst in 5 ml abs. Benzol, rührt 20 Minuten bei Zimmertemperatur, saugt dann das ausgefallene Triäthylamin-Hydrobromid auf einer GlasFritte G3 ab und wäscht es gründlich mit abs. Benzol. Die vereinigten Filtrate dampft man im Vakuum ein, setzt dem als Rückstand erhaltenen Sirup 15 ml abs. Äther und 5 ml abs. Methylalkohol zu und kühlt ab, wobei sofort ein kristalliner Niederschlag ausfällt. Das Gemisch läßt man über Nacht im Kühlschrank stehen, saugt die ausgefallenen Kristalle ab und kristallisiert sie danach aus Methylalkohol um, wobei man weiße Kristallnadeln erhält.

Ausbeute: 1,65 g(71,7%).

Schmelzpunkt:91°C.

Rt = 0,63 (Benzol zu Methylalkohol = 90 : 15).

Analyse:

berechnet: C 67,79 H 5,0%
gefunden: C 67.75 H 5,3%

Beispiel 2

1.2-5.6-DianhydroO^-diacetyl-dulcit

In einen mit Rührer, Rückflußkühler und Tropftrichter ausgestatteten 100-ml-Dreihalskolben gibt man 1,46 g( 10 mMol) 1.2-5,6-Dianhydro-dulcit und 60 ml abs. Benzol (öder wasserfreies Toiuoi)'und rührt 10 Minuten bei Zimmertemperatur. Die erhaltene Lösung versetzt man mit 2.8 ml (20 mMol) abs. Triäthylamin, 2,04 g bzw. 2,0 ml (20 mMol) frisch destilliertem Essigsäureanhydrid, gelöst in 5 ml Benzol, rührt eine Stunde bei Zimmertemperatur, dann weitere zwei Stunden bei 50⁰C und dampft die Lösung zur Trockene ein. Den Rückstand nimmt man mit 20 ml Wasser auf, schüttelt die Lösung mit 30 ml Benzol aus, trennt die Benzolphase ab, wäscht sie mit lOVoiger Natriumhydrogencarbonatlösung, trocknet sie über Magnesiumsulfat, filtriert und engt sie ein. Zu dem als Rückstand erhaltenen Sirup gibt man 15 mi abs. Äther und 5 ml abs. Methanol und kühlt ab, wobei sofort ein kristalliner Niederschlag ausfällt. Das Gemisch läßt man über Nacht im Kühlschrank stehen, saugt dann die ausgefallenen Kristalle ab und kristalliert sie aus Methylalkohol um. Man erhält weiße Kristallnadeln.

Ausbeute: 1,65 g(71,7%).

Schmelzpunkt:91°C.

Rf=0,63 (Benzol zu Methylalkohol = 90 :15).

Beispiel 3

Minuten bei Zimmertemperatur. Die erhaltene Lösung versetzt man mit 2.8 ml ,'20 mMol) abs. Triäthylamin und 3,62 g (20 mMol) p-Nitro-phenylacetat, rührt 6 Stunden bei 50°C und läßt die erhaltene Lösung über Nacht bei Zimmertemperatur stehen. Die organische Lösungsmittel enthaltende Lösung wird mit 20 ml Wasser ausgeschüttelt, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Zu dem als Rückstand erhaltenen Sirup gibt man 15 ml abs. Äther und kühlt ab. Das Gemisch läßt man über Nacht im Kühlschrank stehen und saugt dann den ausgefallenen kristallinen Niederschlag auf einer GlasfritteG2 ab.

Ausbeute: 2,5 g.

Schmelzpunkt: 72-78" C.

Das so erhaltene gelbe kristalline Produkt wird wie folgt gereinigt: Die Kristalle werden in 20 ml Benzol gelöst und mit Diäthylamino-propylamin behandelt. Nach einer Stunde gibt man 10 ml Wasser zu, füllt die Mischung in einen Scheidetrichter, trennt die wäßrige Phase ab und wiederholt die Operation mit 10 ml Wasser. Die so erhaltene Benzollösung trocknet man über Magnesiumsulfat und dampft sie ein. Dem als Rückstand erhaltenen Sirup setzt man 15 ml abs. Äther und 5 ml abs. Methanol zu, läßt die Mischung über Nacht im Kühlschrank stehen und saugt dann die Kristalle ab.

Ausbeute: 1.58 g (69%).

Schmelzpunkt: 90⁰C

Rf=0,63(Benzolzu Methylalkohol = 90 :18)

Analyse:

berechnet:
gefunden:

C 67.79
C 67.75

H 5,0%
H 5,3%

Beispiel 4

35 In einen 200-ml-Dreihalskolben mit Rührer. RückfiuBkühier und Tropftrichier gibt man 5 g (34 mMol) 1,2-5.6-Dianhydro-dulcit und 150 ml abs. Benzol, rührt vier Stunden, versetzt das so erhaltene Gemisch mit 10 ml (7OmMoI) abs. Triäthylamin (oder 5,7 ml abs. Pyridin) und tropft dann innerhalb von etwa 5 Mmuten bei Zimmertemperatur 854 g bzw. 6 ml (68 mMol) frisch destilliertes Chloracetylchlorid in 5 ml abs. Benzol zu.

Das Gemisch wird 30 Minuten bei Zimmertemperatur geführt, danach das Triäthylamin-Hydrochlorid auf einer Glasfritte G3 abgesaugt und der Niederschlag mit Benzol gründlich gewaschen. Die vereinigten Filtrate dampft man im Vakuum ein. gibt zu dem als Rückstand

so erhaltenen Sirup 15 ml abs. Äther und 5 ml abs. Methylalkohol und kühlt ab, wobei sofort ein kristalliner Niederschlag ausfällt. Das Gemisch wird über Nacht im Kühlschrank stehengelassen, dann der kristalline Niederschlag abgesaugt und aus Methylalkohol umkristallisiert. Man erhält weiße Kristallnadeln.
Ausbeute: 4,4 g (43%).
Schmelzpunkt: 102⁰C
Rr=0,68 (Benzol zu Methylalkohol = 90 :15).

60

Analyse:

berechnet:
gefunden:

C 40,0
C 40,0

H 4,0%
H 4.4%

In einen mit Rührer, Rückflußkühler und Tropftrich- <a ter ausgestatteten iOO-rnl-Dreihalskolben gibt man 1,46 g (10 mMol) 1,2-5,6-pianhydro-dulcit und 60 im" abs. Benzo! (oder wasserfreies Dichloräthan) und rührt 10 Beispiel 5
1,2-5,6-Dianhydro-3,4-di-benzoyl-dulcit

In einen 200-ml-Dreihalskolben mit Rührer, Ttückflußkühler und Tropftrichter gibt man 1,46 g (10 mMol)

l^-S.ö-Dianhydro-cluIcit und 60 ml abs. Benzol (oder 60 ml wasserfreies Triäthylamin). rührt 10 Minuten bei Zimmertemperatur, versetzt das Gemisch mil 2.8 ml (20 mMol) abs. Triäthylamin und tropf; dann innerhalb von etwa 10 Minuten bei Zimmertemperatur 2.8 g bzw. 2.32 ml (20 mMol) frisch destilliertes Benzoylchlorid in 5 ml abs. Benzol zu. Das Gemisch wird zunächst bei Zimmertemperatur, danach eine Stunde bei 5O⁰C gerührt und über Nacht bei Zimmertemperatur stehengelassen. Das ausgefallene Triäthylamin-Hydrochlorid wird auf einer Glasfritte G3 abgesaugt und mit Benzol gewaschen. Die vereinigten Filtrate werden im Vakuum eingedampft und die als Rückstand erhaltene kristalline Masse mit 10 ml abs. Methylalkohol versetzt, gekühlt, abgesaugt und schließlich aus einem

Benzol-zu-Petroläther-Gemischumkristiillisiert. Ausbeute: 2.7 g (76.2%).
Schmelzpunkt: 17 Γ C.
R₁ = 0.75 (Benzol zu Methylalkohol =90: 15).

Analyse:

berechnet:
gefunden:

C 67.79
C 67.8

H 5,0%
H 5.2%

10

Beispiele 6 bis 13

Nach den in den Beispielen 1 bis 5 angegebenen Methoden wurden die in Tabelle I angegebenen l.2-5,6-Dianhydro-3.4-diacyl-dulcite hergestellt. Nähere Angaben über Ausgangsmaterial. Reaktionsbedingun gen und Endprodukte sind in Tabelle I enthalten.

Tabelle 7

Bei	Ausgangsverbindungen	Reaktions- Endprodukt	Ausbeute	Eigen
spiel		bedin		schaften
Nr.		gungen
	1,2-5,6-Di- Acylierungsmittel	Temp. Dauer	g %	Smp. R,
	anhydro-			⁰C
	dulcit
	g mMol g	mMol ° C Min.

6 10,6 7,26 Acetykhlorid 9,9

7 1,46 10 Propionsäure- 1,85

chlorid

8 5,84 40 jö-Carbometh- 12,2

oxypropionylchlorid

9 5,11 35 jg-Phenylpro- 11,8

pionylchlorid

10 5,0 34,2 y-Phenylbutter- 12,2

säurechlorid

11 1,46 10 /-Phenylbutter- 3,6

säurechlorid

12 1,46 10 a-Furancarbon- 2,61

säurechlorid

13 1,46 10 Cyclohexane«- 2,93

bonsäurechlorid 1,45 25 45 1,2-5,6-Dianhydro- 14,7 88 91 0,63 3,4-di-acetyl-dulcit

25 45 1,2-5.6-Dianhydro- 1,65 63 65 0,68 3,4-di-propionyldulcit

25 60 1,2-5,6-Dianhydro- 6,3 42,15 79,5 0.62 3,4-di-OS-carbomethoxy-propionyl)-dulcit

25 60 1,2-5,6-DianhyJro- 11,25 75 105 0.75 3,4-di-(0-phenylpropionyl)-dulcit

68,4 25 60 1,2-5,6-Dianhydro- 10,35 69 58 0,78 3,4-di-Q>-phenylbutyryl)-dulcit

25 120 1,2-5,6-Dianhydro- 2,7 61,5 085 0,78 3,4-di-0?-phenylbutyliyl)-dulcit

50 180 1,2-5,6-Dianhydro- 2,25 66,45 192 0,6! 3,4-di-(e'-furancarbonyl)-dulctt

50 180 1,2-5,6-Dianhydro- 1,5 41 186 3,4-di-(hexahydrobenzoyl)-dulcit

Beispiel 14 50 mg l^-S^-DianhydroO^-diacetyl-dulcit- Pulverampulle

1.2-5.6- Dian hydro-3.4-diacetyl-dulcit
Lösungsmittelampulle:
Aqua dest. pro inj.

50 mg/Pulverampulle
10 ml/Ampulle

Das Arzneimittelqualität aufweisende Produkt wird granutometrisch kontrolliert. Bei einer Verteilung der Granulatkörner von 0,06 — 032 mm wird das Produkt in an sich bekannter Weise — zweckmäßig mittels einer Pulverabfülleinrichtung — unter aseptischen Bedingungen bei einer 50-mg-EinsteIlung in Ampullen abgefüllt. Die Arzneimittelpackung enthält außer der Pulverampulle eine mit dest. Wasser gefüllte Lösungsmittelampulle, die nach den üblichen Vorschriften rW

pharmazeutischen Industrie hergestellt wird.

Beispiel 15

10 mg l,2-5,6-Dianhydro-3,4-diacetyl-dulcit-(Iyophilisiei?e)-Pulverainpulle

l,2-5,6-Dianhydro-3,4-di-	IO mg/Pulverampulle
acetyl-duldt
Lösungsmittelampulle:	300 mg
Sorbit	2 ml/Ampulle
Aqua dest pro inj. ad

50 g Produkt (die 100%igem Wirkstoff entsprechende Menge) von Arzneimittelqualität wird in ein geeichtes Gefäß mit 101 Fassungsvermögen gegeben, in destilliertem Wasser (lnjektionsquaEtät) gelöst und bis zur tOOOO-nu-Mirkierung aufgefüllt. Das dest. Wasser weist eine Temperatur von 20° C auf. Danach wird die Lösung unter aseptischen Bedingungen durch Filtrieren sterilisiert die erhaltene sterile Lösung mit 2-ml-Einsteliang in Ampuüeo mit Garütnikappe abgefüllt und in an sich bekannter Weise lyophilisiert Nach dem Ausfrieren wird die Eissublimierung bei einer Temperatur unterhalb des eutektischen Punktes und das Endtrocknen bei 30⁰C durchgeführt. Danach werden die Pulverampullen unter sterilen Bedingungen mit Gummistöpsel und geeignetem Metallverschluß verschlossen und in üblicher Weise signiert. Außer der Pulverampulle enthält die Packung eins Lösungsmittelampulle mit einer in der Pharmazie in bekannter Weise hei-gestelhen wäßrigen Sorbitiösung (Konzentration 15 g Sorbit/100 ml Lösung).

Beispiel 16 l^-S.o-Dianhydro-S/l-diacetyl-duIcit-Tabletten

Zusammensetzung der Tablette:

l^-S.ö-Dianhydro-S^-diacetyl-dulcit 250 mg Lactose 45 mg

Kristalline Cellulose

Talcum

Paraffmöl

17njg 5 mg 8 ing

2500 g kristallines ! cit (Arzneimittelqualität), 450 g wasserfreie Lactose und 170 g wasserfreie kristalline Cellulose verknetet irian in einer Homogenisierungsvorrichtung mit einem Gemisch von 80 g Paraffinöl und 350 ml wasserfreiem isopropanoL. siebt die Masse und trocknet sie. Das so erhaltene trockene Granulat wird dann mit 56 "g Tafcum versetzt, homogenisiert und mit einer Tablettiermaschine (11 mm) in üblicher Weise zu 325-mg-TibJettpn gepreßt

Beispiel 17 100 mg U-S.e-Dianhydro-S^diacetyl-dulcit-Kapseln

Zusammensetzung der Kapsel:

l^-S.e-Dianhydro-i^-diacetyl-dülcit Carbowax6000 '

Talcum

5 mg 5 mg

Eine der Chargengröße entsprechende Menge an kristallinem Produkt (Wirkstoff) wird mit dem vorher fein vermischten Gemisch aus Talcum, und Carbowax homogenisiert und — gegebenenfalls nach Granulierung — mit der dafür geeigneten Vorrichtung mit 110 mg Einstellung in sogenannte harte Getatinekäpseln gefüllt

Beispiel 18 Enterosolvent-Dragee oder -Kapsel

Die in Beispiel 16 und 17 beschriebenen Produkte werden in an sich bekannter Weise mit im Dünndarm löslichem Oberzug versehen.

Claims

57Ό33

löslichen 1^-5,6-DiarihydroTdulcit die Wasserloslichkeit" herabgesetzt und die Löslichkeit, in. organischen ■-Lösungsmftteln_;heraufgesetet wiri Die dadurch[bedingte Veränderung im Vertenungsquqtientea der Wurksubstanz zwischen organischen. Losiingsmritebi und Wasser hat im vorliegenden.iiail: — verglichen mit dem, 1,2-5.6-Diänhydro-dulcit 4 eine starke Beschleunigung des biologischen- Transports-..des Acyldenvats Vom" Blutplasma in den Tumor, in die'.-Muskehr sowie in"die Organe (Leber).und eine; erhöhte Anreicherung; des Acylderivats im Tumor aber eine.verringerte Anreiche-·: rung des Acyiderivatsratien Organen zur Folge. ^: :

Bei Mäusen mit impIänüertemTumor S. 180, die Lp.· mit äquimolaren Mengen an l;2-5,6-Dianhydro-dalcit bzw. l^-S.e-Dianhydrftrß/t-diacetyl-duIcit behandelt worden waren, war τ. B, nach 4 Stünden dieXonzentration an l,2-5,6-Dianhydro-3,4-diacetyl-duIc!t "in der Leber und in den Muskeln. 2^mak-im Jiimor.dagegen . 3,5mal so hocji wie die von \ ^-S.e-Dianhydro-duIcit und ' der Quotient von Tpiaorkonzentration/Muskelkonzen- '20 iration betrag for l,2-5,6-Dianhydro-diaceiy!-dü!cii 3,18, für 1,2-5,6-Dianhydro-dulcit dagegen nur 2,16. •Von den-Acyklerivatender Erfindung zeichnen sich .

i^-S.ö-Dianhydro-S/t-diacetyl-dtilcit,

12-5,6-Dianhydro-3,4sii-{ß-caΓbόmethoxy- '

propibnyl)-dulcit, ■ - ^: '

l_r2-5,6rbianhydro-3,4-di-^'-phenylbutyryl)-

dulcit

1^-5,6-D!anhydro-3,+-di-{ß-phenylpropionyl)-. dulcit,

l^-5,6-Dianhydro-3,4-di_:(chIoracetyl)-duIcit, l^-5,6-Diarihydro-3,4-di-benzoyI-duIcit,^: ^₁ • 12-5,6-Dianhydro-3,4-di-propionyl-dulcit, 12-5,6-Dianhydro-3,4-di-(P-phenyl-butyryl!)- dulcit,

12-5,6-Dianhydro-3,4-di-(a-furan-carbonyI)- : dulcit und -u

i 2-5,6-Dianhydro-3,4-di-(hexahydrobenzoyl)- ·.

-julrit '■■ ■' ^l