DE2308801A1 - Verfahren zur herstellung von nucleosid-5'-diphosphat-aethanolaminen - Google Patents

Description

Priorität: 23. Februar 1972, Japan, Nr. 18 669/1972

Verfahren zur Herstellung von Nucleosid-5^fdlphosphat-äthanolaminen

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Nucleosid-5^f-öiphosphat-äthanolaminen sowie neue Nucleosid-5¹-diphosphat-äthanolamine.

Es ist bekannt, daß Nucleosid-5'-diphosphat-äthanolamine durch Kondensation der entsprechenden Nucleosid-5^f-monophosphate mit Phosphoryläthanolamin in Gegenwart von Kondensationsmitteln, wie Dicyclohexylcarbodiinid (J.Bio.Chem. 222 1956 I85), Trichloracetonitril (bekanntgemachte japanische Patentanmeldungen 4505/1970, 2759Vl971) oder N,N^l-Thionyl-bis-2-alkylimidazol (bekanntgemachte japanische Patentanmeldung 375^6/1971) hergestellt v/erden können. Cytidin-5'-diphosphatcholin kann nach den bekannten Methoden hergestellt werden. Es ist ein bekanntes Stimulans für das Zentralnervensystem.

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Die bekannten Methoden sind jedoch für industrielle Anwendungsztyecke aufgrund der' hohen Kosten der erforderlichen Kondensationsmittel, ihrer umständlichen Handhabbarkeit und der niedrigen Ausbeuten der angestrebten Produkte nicht gut geeignet.

Es wurde nun gefunden, daß die bekannte Umsetzung mit relativ niedrigen Kosten und mit guten Ausbeuten einfach durchgeführt werden kann, wenn man als Kondensations.mittel ein s-Triazinderviat verwendet, insbesondere Cyanurchlorid oder 2-Amino-4,6-dichlor-, 2-Hydroxy-^,6-dichlor-, 2-A"thoxy-4,6-dichlor-, 2,4-Dipyridino-6-chlor-, und 2,4-Diamino-6-chlor-s-triazin. Wenn sich aus den komplexeren und weniger gut verfügbaren Triazinderivaten kein Vorteil ergibt, dann wird Cyanurchlorid bevorzugt.

Es hat sich gezeigt, daß die erfindungsgemäß verwendeten Kondensationsmittel dazu imstande sind, sämtliche untersuchten Nueleosid-ü:'-rsonophosphate in die entsprechenden Diphosphatäthar.olainjrie umzuwandeln, indem eine Umsetzung mit Phosphoryläthanolamin und seinen Homologen durchgeführt wird. Die hierin verwendete P.ezeichnung "Nucleosid" soll im breitesten Sinne verwendet werden, um Stickstoffglucoside von heterocyclischen Basen zu bezeichnen. (Chemical Dictionary von Hackh).

Das primäre Ausgangsmaterial kann daher ein Nucleosid-5'-monophosphat auf Purinbasis oder Pyrimidinbasis sein, welches in der Natur vorkommen kann oder nicht, AICAR oder ein Derivat von AICAR· mit einem Substituenten auf dem Imidazolring. Die Bezeichnung AICAR ist die übliche Abkürzung für 5-Amino-l-ribofuranosylinidazol-4-carboxamid-5'-phosphat. Nucleoside, deren 5'-Phosphate erfolgreich dazu verwendet worden sind, um das Verfahren der Erfindung durchzuführen, sind z.B. Adenosin, Inosin, Guanosin, N Methylinosin, 2-Methylinosin, 2-Methylthioinosin, 6-Thioinosin, N -Methylguanosin, N ,N^-Dimethylguanosin, N-Methyladenosin, N N -Dimethyladenosin, Cytidin, Uridin, Deoxycytidin, Deoxyuriäin, und 1-ß-D-Arabinofuranosyluracil. Das Verfahren wurde auch mit

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AICAR-5*-phosphat und N-Succinyl-AICAR-S* -phosphat erfolgreich durchgeführt (Abkürzung für 5-Amino-4-imidazolcarboxamid-ribos id).

Das Kucleosid-5^f-»nonophosphat kann mit dem PhosphorylUthanolarjiri und den Konden3ätionsmittel in der freien Säureform oder in der Fora eines Salzes umgesetzt werden, welche als freie SKure reagiert. Beispiele für geeignete Salze sind z.B. diejenigen von vielen Metallen, von Ammonium und von Aminen, beispielsweise von Xthylamin, Diethylamin, Triethylamin, Pyridin, Piperidin, Pyrrolidin und Morpholin. Es hat sich gezeigt, daß der kationisch/: Teil keinen signifikanten oder überraschenden Effekt mit sich bringt.

Die verwendeten Phosphorylfithanolamin-Verbindungen haben die all gemeine Formel

? /^Bl

HO-P-O-CH₂CH₂-N ®^— R₂ (I)

0® ^

worin R₁, Rg* R3 Wasserstoff oder Alkyl mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen bedeutet. Auf diese Weise werden die entsprechenden Verbindungen der Formel

R - P-O-P-O-CH₂CH₂N ^- R₂ i¹¹) OH 0 ^θ ^ R₃

hergestellt, worin R den Nucleosid-5^f-Rest bedeutet und R,, R₂ und R-, die oben angegebene Bedeutung haben.

Phosphoryläthanolamine, die sich in Gegenwart der erfindungsgem£0 verwendeten Kondensationsmittel ohne weiteres mit den IJucle; sid-5¹ -phosphaten umsetzen, sind z.B. Phosphorylcholin, 0-Fho3-phodimethyl-äthanolamin, 0- Fho 5 phor.onome thy 1 -Ithjftoi *m\ w » O-Phosphoäthanolcrnin und ihre h'-Vazre^ Homologen. DB· oy-Kthanolaraine können zu dem Kondensationsgemisch in der freien

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Säureform oder in der Form von Salzen zugegeben werden, welche bei den Reaktionsbedingungen wie die entsprechenden Säuren wirken» Geeignete Salze sind z.B. die Halogenide und die Metallhalogenide-SaI ze .

Die Reaktion wird vorzugsweise in Gegenwart eines inerten organischen Lösungsmittels durchgeführt. Ein solches Lösungsmittel ist jedoch nicht immer erforderlich. Formamid, Dimethylformamid, o-Chlorphenol, Acetonitril, Triäthylphosphat und Pyridin sind repräsentative Beispiele für viele Arten von Lösungsmitteln, die sicher verwendet werden können und die bevorzugt werden. Die Kondensationsreaktion erfolgt bei Raumtemperatur von etwa 2o°C, cb- * gleich die Temperatur nicht kritisch ist. Wenn sich aus einem Erhitzen oder Abkühlen keine Vorteile ergeben, dann ist es gewöhnlicherweise am einfachsten, die Bestandteile des Kondensationsgemisches bei Umgebungstemperatur zu vermischen und die Reaktion ablaufen zu lassen. Wenn das R^rtaktionsgemisch nicht homogen ist, dann kann in üblicher Weise gerührt v/erden.

Das Nucleosid-5¹-phosphat wird am besten ausgenutzt, wenn das normalerweise weniger teuere Phosphoryläthanolamin in dem Kondensationsgemisch in einem Überschuß vorliegt, dessen Größenicht kritisch ist. Das Kondensationsmittel wird vorzugsweise im Überschuß verwendet, wobei die Menge des Kondensationsmittels 1,5 Mol bis 5 Mol je Mol Nucleosid-5*-monophosphat betragen kann. Größere Mengen des Kondensationsmittels bringen keine Vorteile mit sich, obgleich hierdurch die Reaktion nicht nachteilig beeinflußt wird.

Das Rohprodukt kann ohne weiteres aus dem Kondensationsgemisch isoliert und auf herkömmliche Weise gereinjg; werden. Es kann auch eine selektive Lösungsmittelextraktion gefolgt von einem Eindampfer des Lösungsmittels und/oder eine Reinigung durch Ionenaustauscher-Harze angewendet werden. Das gereinigte Produkt kann durch E]emen-

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taranalyse, Papierelektrophorese, Phosphorbestimmung mit dem Hanes Reagenz' (Nature 164 1949 Ilo7) Perio.datoxidation, Vergleich der ^ P-NMR Spektren des Ausgangsmaterials der Formel (I) mit dem Produkt der Formel (II) und dergleichen identifiziert werden.

Die Erfindung wird in den Beispielen erläutert.

Beispiel 1;

o,348 g Inosin-5*-monophosphat und o,46 g Phosphorylcholin wurden in 8 ml Dimethylformamid aufgelöst. Es wurden 2 ml Pyridin und o,4 g (2,2 mMol) Cyanurchlorid zugefügt. Das Gemisch wurde 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wurde es filtriert und das Filtrat wurde mit 2oo ml Aceton versetzt. Der gebildete Niederschlag wurde abgetrennt und in 5o ml Wasser gelöst. Die wässrige Lösung wurde durch eine 6o ml Säule von Dowex-1 χ 2-Formiat geleitet. Nach dem Klarw«-sehen der Säule mit Wasser wurde das auf dem Ionenaustauscher-Harz absorbierte Material mit o,5 m Ameisensäure eluiert. Die erste Fraktion des Eluats wurde im Vakuum bei etwa 4o°C zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde in verdünnter Natriumhydroxid-Lösung aufgenommen. Zu der resultierenden Lösung wurden 2o ml Äthylalkohol gegeben, wodurch o,24 g des Natriumsalzes von Inosin-5'-diphosphatcholin (Ausbeute 45#) ausgefällt wurden. Das Produkt wurde durch Elementaranalyse identifiziert. Die physikalischen Eigenschaften sind nachstehend aufgeführt.

Berechnet für:	C15H24N5O11P2Na.	2H2O	12,3	% N	lo,8	% P
Gefunden:	31,5# C 4,94	% H	12,3	ίί Ν	lo,8	% P
	JIM C 4,92	/ο Η
Schmelzpunkt:	24o°C (Zers.)
UV-Absorptions spektrum:	max dz>i tr Ai maxpH7 249 ryi maxpH1^ 253,5 m	/U

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Beispiel 2:

4,24 g Cytidin-S'-monophosphat-triäthylamin-Salz wurden in 4o ml Formamid aufgelöst. Hierzu wurden 6,6 g Phosphorylcholinchlorid gegeben. 6,4 g Cyanurchlorid wurden in 15 ml Dimethylformamid aufgelöst. Die Lösung des Kondensationsmittels wurde tropfenweise zu der Lösung der Reaktionsteilnehmer über einen Zeitraum von 3 Stunden gegeben. Das resultierende Gemisch wurde bei Raumtemperatur weitere 16 Stunden gerührt. Sodann wurde es filtriert. Das Piltrat wurde in 4oo ml Aceton gegossen, um das Reaktionsprodukt auszufällen. Dieses wurde abgetrennt und in 8o ml Wasser aufgelöst. Die Wässrige Lösung wurde durch eine 3°ο ml Kolonne von Dowex-1 χ 2-Formiat geleitet. Nach dem Waschen der Kolonne mit Wasser wurde das auf dem Harz absorbierte Material mit o,oo5 m Ameisensäure eluiert. Das Eluat wurde im Vakuum zur Trockene eingedampft, wodurch 2,5 g Cytidin-5'-diphosphatcholin erhalten wurden (Ausbeute 51#5#)· Das Infrarot-Spektrum und der Schmelzpunkt des krista. linen Materials entsprachen den entsprechenden Eigenschaften einer bekannten Probe.

Beispiel 3:

o,43 g (1 mMol) AICA-Ribosid-5'-monophosphat-Morpholinsalz und o*36 6 (2 mMol) Phosphorylcholin wurden in Io ml Formamid aufgelöst. Zu der Lösung wurden allmählich o,4 g (2,2 mMol) Cyanurchlorid gegeben. Die Lösung wurde sodann l4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wurde wie im Beispiel 2 aufgearbeitet. Eine wässrige Lösung des Reaktionsprodukts wurde durch eine 50 ml Säule von Dowex-1 χ 4-Formiat geleitet. Nach dem Waschen der Säule mit Wasser wurde das auf dem Harz absorbierte Material mit 0,05 m Ameisensäure eluiert. Die Eluatfraktion, die AICA-Ribosid-5¹-diphosphatcholin enthielt, wurde im Vakuum bei 30 bis 4o°C eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in einer geringen Wassermenge aufgelöst. Die Lösung wurde mit verdünnter Natriumhydroxid-Lösung neutralisiert. Es wurde Äthanol zugefügt, wodurch o,2 g des Natriumsalzes von AICA-Ribosid-5'-diphosphatcholin ausgefällt

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wurden (Ausbeute 41,8$). Das Produkt wurde durch Elementaranalyse identifiziert. Es hatte die folgenden physikalischen Eigenschaften:

Berechnet für: ^ci4^Hp6^N5°ll^P2^Na

Gefunden: 31,98$ C 4,99$ H 13,33$ N

C 5,3o$ H 13,12$ N

Üv-Absorptions- max^p 269 und 248 m/U Spektrum: Wl3 _β

Beispiel 4:

3,62 g N -Methylinosin-S'-monophosphat wurden in 7o ml Dimethylformamid aufgelöst. Zu der Lösung wurden 3*8 g Phosphorylcholin gegeben. 7*4 g Cyanurchlorid wurden sodann bei 5 bis lo°C zugefügt und das resultierende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 12 Stunden gerührt und abfiltrier-t. Das FiItrat wurde in 6oo ml Aceton gegossen, wodurch das Reaktionsprodukt ausgefällt wurde. Dieses wurde mit loo ml Äthanol gewaschen, in 2oo ml V/asser aufgelöst und die erhaltene Lösung wurde mit verdünnter Natriumhydroxid-Lösung neutralisiert. Die Lösung wurde durch eine 3oo ml Säule von Dowex-1 χ 2-Formiat geleitet. Nach dem Waschen der Säule mit Wasser wurde das auf dem H-arz absorbierte Material mit o,o3 m Ameisensäure eluiert. Das Eluat wurde sodann im Vakuum bei 3o bis 4o°C zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde mit Äthanol gewaschen, wodurch 2,3 g eines weißen Pulvers von N -Methylinosin-5^l-diphosphatcholin-monohydrat erhalten wurden (Ausbeute 43$). Das Produkt wurde durch Elementaranalyse identifiziert. Es hatte die folgenden physikalischen Eigenschaften:

Berechnet für: ^ci6^H27^N5°ll^P2*^H2°

Gefunden: 35,23$ C 5,32$ H 12,84$ N 11,$8$ P

35,48$ C 5,63$ H 12,95$ N 11,33$ P

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UV-Absorptions- max^pH1 252 rayu

enoH-Ttiim« . '

spektrnm:

max^pH7 251 m ,u max^pH15 251,5 m Ai

Bei einer Papierelektrophorese in o,5$-igem Triäthylaminearbonat-Puffer war der beobachtete Bewegungswert halb so groß wie derjenige des als AUi
5'-monophosphats.

Jenige des als Ausgangsverbindung verwendeten N -Methylinosin-

Belspiel 5;

1,8 g 2-Methylinosin-5^f-monophosphat und 1,5 g Phosphorylcholin wurden in 4o ml Dimethylformamid aufgelöst. Zu der Lösung v;urden 3,5 g Cyanurchlorid im Verlauf von 6 Stunden bei 5 bis lo°C gegeben. Die resultierende Lösung wurde bei Raumtemperatur lh Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde wie im Beispiel Ά aufgearbeitet, wodurch 1,65 g pulverförmiges 2-Methylinosin-5^f-diphosphatcholin-dihydrat erhalten wurden (Ausbeute 57#)· Das Produkt wurde durch Elementaranalyse identifiziert. Es hatte die folgenden physikalischen Eigenschaften:

Berechnet für:

Gefunden: 34,lo# C 5,51# H 12,43# N 11,ol# P

C 5,82£ H 12,15^ N lo,76# P

UV-Absorptions- max^p 25o m ax spektrum: ^₁₇ '

max^pw' 253 m ,u

max^pH1? 257 m/U

Bei der .Papierelektrophorese in 0,5^-igem Triäthylamincarbonat-Puffer war der beobachtete Bewegungswert halb so groß wie derjeni ge des als Ausgangsverbindung verwendeten 2-Methylinosin-5'-rconophosphats.

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Beispiel 6;

0,36 g Thioinosin-S'-monophosphat wurden in 15 ml Formamid aufgelöst. Hierzu wurden σ,7 g Phosphorylcholin gegeben. o,55 g Cyanurchlorid wurden in 5 ml Dimethylformamid aufgelöst und die Lösung des Kondensationsmittels wurde tropfenweise zu der Lösung der Reaktionsteilnehmer über einen Zeitraum von3 Stunden bei 0 bis 5°C zugegeben. Die resultierende Lösung wurde bei Raumtemperatur 8 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde abgesaugt und das Filtrat.wurde in 150 ml Aceton gegossen, wodurch das Rohprodukt ausgefällt wurde. Es wurde abfiltriert, mit einer geringen Menge von Äthanol gewaschen und in 5o ml Wasser aufgelöst. Die wässrige Lösung wurde mit verdünnter Natriumhydroxid-Lösung neutralisiert und durch eine 50 ml Säule von Dowex-1 χ 4-Formiat (o,297 bis o,l49 mm) geleitet. Nach dem Waschen der Säule mit Wasser und sodann mit q.i-al m Ameisensäure wurde das auf dem Harz absorbierte Material mit 0,07 m Ameisensäure eluiert. Das Eluat wurde y.vv Trockene im Vakuum bei 2o bis 25°C eingedampft. Der Rückstand wurde mit so wenig Äthanol wie möglich gewaschen. Durch Abfiltrieren der äthanolischen Suspension wurden o,21 g eines leicht gelben Pulvers von 6-Thioinosin-5'-diphosphatcholin-dihydrat erhalten (Ausbeute 36,2$). Das Produkt wurde durch Elementaranalyse identifiziert. Es hatte die folgenden physikalischen Eigenschaften:

Berechnet für: 0_1κΗ_οκΝ_κ0_1λ3Ρ_ο·2Η_οΗ

Gefunden: ?1,86# C 5,13# H 12,39# N lo,97# P

C 5,4o# H 12,41$ N 11,26# P

UV-Absorptions- max^p Z>2h m/U spektrum: «wi^

max^pHi;> 311 m/U

- Io -

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■ 4ο

Bei der Papierelektrophorese in o,5#-igem Triäthylamincarbonat-Puffer War der beobachtete Bewegungswert halb so groß wie der-, jenige des als Ausgangsverbindimg verwendeten 6-Thioinosin-5^fmonophosphats. NMR-Spektrum: 3,3 ppm N(CH,)-*

Beispiel 7:

0,58 g 2-Methylthioinosin-5'-monophosphat-tri-n-Butylaminsalz und 0,38 g Phosphorylcholin wurden in 2o ml Formamid aufgelöst. Zu der Lösung wur-den bei 5 bis lo°C in kleinen Mengen o,55 g Cyanurchlorid gegeben. Die Lösung wurde Io Stunden bei etwa 30⁰C gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde wie im Beispiel 4 aufgearbeitet. Auf diese Weise wurden o,31 S 2-Methylthioinosin-5'-diphosphatcholin-dihydrat erhalten (Ausbeute 55>6^). Das Produkt wurde durch Elementaranalyse identifiziert. Es hatte die folgenden physikalischen Eigenschaften:

Berechnet für: ^ci6^H27^N5°ll^SP2*^2H2⁰

Gefunden: 32,27# C 5,21# H 11,76$ N lo,42# P

C 5,63$ H 11,68# N lo,21# P

UV-Absorptions- max^p 27o m/U Spektrum: ^₇ '

max^p ' 2βο und 278 (Schulter) m/u

max^pH1^ 272 m/u

Bei der Papierelektrophorese in 0,5^-igem Triäthylamincarbanat- Puffer war der beobachtete Bewegungswert halb so groß wie derjenige des als Ausgangsverbindung verwendeten 2-Methylthioinosin 5 ^f -monophosphats.

Beispiel 8:

5#6 g W" -Methylguanosin-S'-nionophosphat-tri-n-Butylaminsalz wurden in 80 ml Formamid aufgelöst. Zu der Lösung wurden 3*8 g Phosphorylcholin gegeben. Nach Zugabe von 4,4 g Cyanurchlorid

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bei O bis 5 C in kleinen Mengen wurde die resultierende Lösung bei Raumtemperatur 12 Stunden gerührt.

Hierzu wurden erneut 3 6 Cyanurchlorid gegeben und die Lösung wurde 8 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, und das Piltrat wurde in 8oo ml Aceton gegossen. Nach 18 Stunden wurde der Niederschlag abfiltriert, mit einer geringen Menge Äthanol gewaschen und in 25o ml Wasser aufgelöst. Die wässrige Lösung wurde mit verdünnter Natriumhydroxid-Lösung neutralisiert und durch eine 4oo ml Säure von Dowex 1x2 (Cl-Form) geleitet. Nach dem Waschen der Säule mit Wasser wurde das auf dem Harz absorbierte Material mit o,oo5 η Salzsäure gewaschen. Etwa 6 1 des Eluats wurden durch eine Säule geleitet, die mit 15o ml Aktivkohle gefüllt war. Die Aktivkohlesäule wurde mit Wasser neutral gewaschen und mit einem Gemisch von gleichen Volumina von 5/&-igem Ammoniak und Methanol gewaschen. Das Eluat wurde im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde in Jo ml Wasser aufgelöst und die Lösung wurde durch Zugabe von Amberlite IR-12O (Η-Form) auf einen pH-Wert von ~5,o eingestellt. Der Ionenaustauscher wurde abfiltriert und das Filtrat wurdemit verdünnter Natriumhydroxid-Lösung neutralisiert und im Vakuum eingedampft. Zu der zurückbleibenden Paste wurden loo ml Äthanol gegeben, wodurch ein filtrierbarer Niederschlag erhalten wurde, welcher ein Gewicht von 3*8 g hatte (Ausbeute 6o,5#)·

Durch Elementaranalyse wurde bestätigt, daß das Produkt N -Methylguanosin-5¹-diphosphatcholin war. Es hatte die nachfolgenden angegebenen Eigenschaften:

Berechnet für: C₁₆H₂₇NgO₁₁P₂Na

Gefunden: 34,29# C . 5,56# H 13,33# N Io,l6# P

c 5,3i£ H 13, W N 10,025g P

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UV-Absorptions- max^p 258 und 280 (Schulter) τηλΐ · Spektrum: „- '

max^pn' 253 und 280 (Schulter) nyu

raax^pH15 258 und 27o (Schulter) nyu

Bei der Papierelektrophorese in o,5$-igem Triäthylamincarbonat-Puffer war der beobachtete Bewegungswert halb so groß wie derjenige des als Ausgangsverbindung verwendeten N^-Methylguanosin-5' -inonophosphats.

Es wurden im wesentlichen die gleichen Ergebnisse erhalten, als das Cyanurchlorid durch äquimolare Mengen von 2-Amino-4,6-dichlors-triazin, 2-Hydroxy-4,6-dichlor-s-triazin, 2-Äthoxy-4,6-dichlors-triazin, 2,4-Dipyridino-6-chlor-s-triazin und 2,4-Diamino-6-chlor-s-triazin ersetzt wurde.

Die nach den Methoden der Beispiele 1 und ~5 bis 8 hergestellten

Verbindungen, welche die Formel
0 0

R¹ -P-O-P-O- CH₂ - CH₂ - N ^= (CH₃), OH 0 ^ö

haben, worin R¹ den 5'-Ribosid-Rest von Inosin, 5-Amino-l-ribufuranoxylimidazol-4-carboxamid, N -Methylinosin, 2-Methylinosin, 6-Ihioinosin, 2-Methylthioinosin oder N^-Methylguanosin bedeutet, sind neu. Sie haben die gleichen physiologischen Eigenschaften wie das bekannten Cytidin-5^f-diphosphatcholin, hergestellt gemäß Beispiel 2. Diese Verbindungen sind aber in manchen Fällen wirksamer.

Cytidin-5'-diphosphatcholin wurde beispielsweise im Falle von Gehirnschäden als Lecithin-Vorläufer verabreicht. Es führte zu einer erheblichen Verbesserung der klinischen Symptome. Durch Behandlung mit dieser Substanz könnte die Uberlebensrate im Falle von Gerhirnschäden erheblich gesteigert werden.

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Die in den Beispielen 1 und 3 bis 8 hergestellten Verbindungen sind physiologisch interessant. Sie sind nicht nur als Arzneimittel verwendbar, sondern auch zu ^orschungszwecken. Viele dieser Verbindungen spielen in physiologischen Zellprozessen, beispielsweise bei der Biosynthese von Phosphatiden und von Zellwandstrukturen eine Rolle.

- Patentansprüche -

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Claims (13)

1. Patentansprüche

   Verfahren zur Herstellung von Nucleosid-5'-diphosphat· fthanolaminen der allgemeinen Formel

   0 0 R₁

   Il H /

   R - P-O-P-O-CH₂-CH₂N ^φ — R_g

   OH 0 ^{θ R}3

   worin R den 5^I-Nucleosid-Teil des Nucleosid-5'-monophosphats bedeutet und R,; R₂ und R, für Wasserstoff oder"eine Alkylgruppe mit bis zu4 Kohlenstoffatomen stehen, dadurch gekennzeichnet, daß man

   (a) ein Nucleosid-5^!-monophosphat der Formel R-P0-,H₂ mit einer Verbindung der Formel

   1 ff»
   HO - P-O-CH₂CH₂-N ⁹

   worin die Substituenten R., R₂ und R^ die angegebenen Bedeutungen haben, in Gegenwart eines s-Triazinderivats, . nämlich von Cyanurchlorid, 2-Amino-4,6-dichlor-s-triazin, 2-Hydroxy-4,6-dichlor-s-triazin, 2-Ä'thoxy~4_J6-dichlors-triazin, 2,4-Dipyridino-6-chlor-^s-triazin und/oder 2,4-Diamino-6-chlor-s-triazin als Kondensationsmittel umsetzt, bis das Nucleosid-5'-diphosphat-äthanolamin gebildet ist.
2. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß man als Kondensationsmittel Cyanurchlorid verwendet.

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3. 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man Verbindungen herstellt, bei denen R der 5'-Nucleosid-Rest von Adenosin, Inosin, Guanosin,

   N -Methylinosin, 2-Methylinosin, 2-Methylthioinosin, 6-Kiioinosin,

   ο 2 2 6

   IT"-Methylguanosin, N ,N -Dimethylguanosin, N -Methyladenosin,

   N ,N -Dimethyladenosin, Cytidin, Uridin, Deoxycytidin, Deoxyuridin, 1-ß-D-Arabinofurancsyluracil, 5-Amino-l-ribofuranosylimidazol-4-carboxamid oder N-Succinyl-5-amino-l-ribofuranosylimidazol-4-carboxamid ist.
4. 4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet , daß man die Umsetzung mit Phosphorylcholin, O-Phosphodimethyläthanolamin, O-Phosphomonomethyläthanolamin oder O-Phosphoäthanolamin vornimmt.
5. 5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis ^, dadurch gekennzeichnet, daß man die Umsetzung in Formamid, Dimethylformamid, o-Chlorphenol, Acetonitril, Triäthylphosphat und/oder Pyridin als Lösun^mittel vornimmt.
6. 6. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 5* dadurch gekennzeichnet , daß man das Cyanurchlorid in einer Menge von 1,5 Mol bis 5 Mol je Mol des Nucleosid-5^!-monophosphats einsetzt.
7. 7. Verbindungen der allgemeinen Formel

   0 0

   BH

   R¹ -P-O-P-O- CH₀ - CH₀ - If⁹^

   ! I₀ 2 2 - 33

   OH 0^ö

   worin R der 5^!-Ribosid-Rest von Inosin-5-amino-l-ribofuranosyl imidazol-4-carboxamid, N -Methylinosin, 2-Methylinosin, 6-Thio inosin, 2-Methylthioinosin oder N -Methylguanosin ist.
8. 8. Inosin-S'-diphosphatcholin.

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9. 9. AICA-Ribosid-5'-diphosphat-cholin.
10. Ιο. Ν -Methylinosin-5¹-diphosphatcholin.
11. Xl. 2-Methylinosin-5'-diphosphatcholin.
12. 12. 6-Thioinosin-5^!-diphosphatcholin.
13. 13. 2-Methylthioinosin-5'-diphosphatcholin, 1^. N^-Methylguanosin-5'-diphosphatcholin.

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