DE20118772U1 - Functionalized carrier card for fast diagnosis of an infarction based on an immunoassay - Google Patents
Functionalized carrier card for fast diagnosis of an infarction based on an immunoassayInfo
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Description
Funktionalisierte Trägerkarte zur schnellen Diagnose eines Infarktes auf der Basis eines ImmunotestsFunctionalized carrier card for rapid diagnosis of infarction based on an immunotest
Die Erfindung betrifft eine funktionalisierte Trägerkarte zur schnellen Diagnose eines Infarktes auf der Basis eines Immunotests zum Nachweis von Fettsäure-Bindungsprotein (FABP) zur personenbezogenen Erfassung, Speicherung und Auswertung von biologischen Flüssigkeiten, insbesondere Blutproben.The invention relates to a functionalized carrier card for the rapid diagnosis of an infarction based on an immunoassay for the detection of fatty acid binding protein (FABP) for the personal recording, storage and evaluation of biological fluids, in particular blood samples.
460.000 Herzinfarkte und etwa 5mal mehr Angina-Pectoris-Fälle gibt es allein in Deutschland pro Jahr. 380.000 Menschen überleben einen Infarkt.There are 460,000 heart attacks and about five times more cases of angina pectoris in Germany alone each year. 380,000 people survive a heart attack.
Beim Herzinfarkt ist eines der Herzkranzgefäße durch Ablagerung eiweißartiger Stoffe und Blutfette verstopft. Das Blut kann nicht mehr zirkulieren, und die Sauerstoffzufuhr ist unterbrochen. Der von diesem Herzkranzgefäß versorgte Herzmuskel stirbt ab, wenn es nicht gelingt, das verschlossene Gefäß innerhalb von etwa sechs Stunden wieder zu öffnen.In a heart attack, one of the coronary arteries is blocked by deposits of protein-like substances and blood fats. The blood can no longer circulate and the oxygen supply is interrupted. The heart muscle supplied by this coronary artery dies if the blocked vessel cannot be reopened within about six hours.
Die erfindungsgemäße Trägerkarte ermöglicht die biochemische Diagnose eines Infarktes in wenigen Minuten. Die Diagnose basiert auf der immunologischen Schnelldetektion des Fettsäure-Bindungsproteins (H(uman)-h(eart)-FABP), welches spezifisch im Herzen vorkommt. Die Feststellung des Plasma- FABP-Niveaus zum Nachweis eines Akuten Myocard Infarktes (AMI) ist bekannt. Das Protein gilt als hoch sensitiver und hoch selektiver Marker zur frühen Feststellung von AMI. Antikörper zum Nachweis von FABP sind beschrieben.The carrier card according to the invention enables the biochemical diagnosis of an infarction in just a few minutes. The diagnosis is based on the rapid immunological detection of the fatty acid binding protein (H(uman)-h(eart)-FABP), which is specifically found in the heart. The determination of the plasma FABP level for the detection of an acute myocardial infarction (AMI) is known. The protein is considered a highly sensitive and highly selective marker for the early detection of AMI. Antibodies for the detection of FABP have been described.
Mit der erfindungsgemäßen Trägerkarte kann auf der Basis von Vollblut ohne jegliche Probenvorbereitung nahezu sofort (nach ca. 10 min.) über einen in der Trägerkarte befindlichen Reaktionsstreifen, der spezifische farbmarkierte FABP-Antikörper sowie spezifische nicht-farbmarkierte anti-FABP-Antikörper (fixiert) zum Nachweis von FABP in einem Sandwich-Immunoassay aufweist , das Vorliegen eines Infarktes angezeigt werden. Die Trägerkarte zum Schnelltest fungiert als Antikörper-Kit für FABP.Using the carrier card according to the invention, the presence of an infarction can be indicated almost immediately (after about 10 minutes) on the basis of whole blood without any sample preparation using a reaction strip in the carrier card which contains specific color-labeled FABP antibodies and specific non-color-labeled anti-FABP antibodies (fixed) for the detection of FABP in a sandwich immunoassay. The carrier card for the rapid test functions as an antibody kit for FABP.
Durch eine zeitversetzte Zweitmessung, die ebenfalls auf der selben Trägerkarte über einen zweiten Reaktionsstreifen erfolgen kann, ist sowohl eine Aussage über den Zeitpunkt als auch über die Schwere des Infarktes innerhalb von wenigen Minuten möglich. Die Zweitmessung erhöht entscheidend die Diagnosesicherheit. In Verbindung mit einem handelsüblichen Auswertegerät ist der Schnelltest quantifizierbar.A delayed second measurement, which can also be carried out on the same carrier card using a second reaction strip, makes it possible to determine both the time and the severity of the infarction within a few minutes. The second measurement significantly increases the reliability of the diagnosis. In conjunction with a commercially available evaluation device, the rapid test can be quantified.
Die erfindungsgemäße funktionalisierte Trägerkarte besteht aus einer strukturierten Mittelplatte, in der zwei identische Reaktionsstreifen eingebracht sind, die durch Folien beidseitig verschlossen wird. In Fig. 1 ist die Vorderansicht, in Fig. 2 der Aufbau der Reaktionsstreifen und in Fig. 3 die Rückansichtdargestellt.The functionalized carrier card according to the invention consists of a structured central plate in which two identical reaction strips are introduced, which is closed on both sides by foils. Fig. 1 shows the front view, Fig. 2 shows the structure of the reaction strips and Fig. 3 shows the rear view.
Im wesentlichen ist die erfindungsgemäße funktionalisierte Trägerkarte, vorzugsweise in Form und Dimension einer handelsüblichen Checkkarte aus dem bis dato verwendeten lichundurchlässigem Folien- und Plattenmaterial sowie aus klaren Werkstoffen durch folgende Bestandteile gekennzeichnet:Essentially, the functionalized carrier card according to the invention, preferably in the form and dimensions of a commercially available check card made of the opaque film and plate material used to date as well as of clear materials, is characterized by the following components:
Strukturierte Mittelplatte, in welcher oben oder unten eine Lanzette integriert ist (Fig. 1 und 3) sowie zwei parallel angeordnete Reaktionsstreifen in folgendem Aufbau eingebracht sind (Fig. 2):Structured middle plate in which a lancet is integrated at the top or bottom (Fig. 1 and 3) and two parallel reaction strips are inserted in the following structure (Fig. 2):
• Trägermaterial, vorzugsweise aus Polystyren oder Polyester;• Carrier material, preferably made of polystyrene or polyester;
• Analyse-Feld, vorzugsweise aus Nitrocellulose oder Nylon;• Analysis field, preferably made of nitrocellulose or nylon;
• Konjugat-Matrix, vorzugsweise aus Glasfasern oder Polyester;• Conjugate matrix, preferably made of glass fibers or polyester;
• Blutseparator, vorzugsweise aus Mikro-Glasfasern,• Blood separator, preferably made of micro-glass fibres,
• Vor-Membran, vorzugsweise aus Polyester-Fasern, Cellulose oder Glasfasern;• Pre-membrane, preferably made of polyester fibers, cellulose or glass fibers;
• Abdeckfolie, vorzugsweise aus Polyester-Filmen;• Covering film, preferably made of polyester film;
• Saug-Membran vorzugsweise aus Cellulose.• Suction membrane preferably made of cellulose.
Die Einzelkomponenten werden schichtweise mit definierten Überlappungs-Bereichen zu dem Reaktionsstreifen zusammengefügt (Fig. 2). Der Reaktionsstreifen enthält auf dem Analyse-Feld in Laufrichtung betrachtet zunächst die Test-Linie, dann eine Kontroll-Linie, die durch entsprechend fixierte Antikörper gebildet werden und im Ausgangszustand nicht sichtbar sind. In der Konjugat-Matrix sind FABP-spezifische farbmarkierte Antikörper derart immobilisiert, dass sie mit der Probe herausgelöst werden können.The individual components are assembled layer by layer with defined overlapping areas to form the reaction strip (Fig. 2). The reaction strip contains the test line on the analysis field, viewed in the direction of travel, followed by a control line, which are formed by appropriately fixed antibodies and are not visible in the initial state. FABP-specific color-labeled antibodies are immobilized in the conjugate matrix in such a way that they can be dissolved out with the sample.
Die Vorder-Folie (Fig. 1) weist zwei längliche Öffnungen auf, in welchen das Analyse-Feld (Fig. 2) des Reaktionsstreifens sichtbar ist auf dem bei Test-Benutzung die Kontroll- und/oder Test-Linie generiert wird. Auf dieser Folie befinden sich im unteren Drittel weiterhin zwei runde oder ovale Öffnungen ohne oder mit aufgebrachtem Trichter, die im Ausgangszustand mittels Folie verschlossen sind und beim Test zur Aufnahme der Blutprobe dienen, die durch diese Öffnung sofort auf die Vor-Membran (Fig. 2) des Reaktionsstreifens gelangt.The front foil (Fig. 1) has two long openings in which the analysis field (Fig. 2) of the reaction strip is visible, on which the control and/or test line is generated when the test is used. In the lower third of this foil there are also two round or oval openings with or without a funnel attached, which are initially closed with foil and are used during the test to collect the blood sample, which immediately passes through this opening onto the pre-membrane (Fig. 2) of the reaction strip.
Auf der Folie der Rückseite sind eine Kurzanleitung zur Durchführung des Tests sowie mögliche Test-Resultate dargestellt.The slide on the back contains brief instructions on how to carry out the test and possible test results.
Der Test-Ablauf kann wie folgt dargestellt werden:The test procedure can be represented as follows:
Nach Entfernen der Schutzfolie von Probenöffnung 1 und Lanzette (Fig. 1) wird mit letzterer die Fingerbeere seitlich angestochen. Das so gewonnene Blut wird direkt in Probenöffnung 1 aufgetropft und durchfließt, resultierend aus Kapillarkräften, den darunter befindlichen Reaktionsstreifen. Mit der Vor-Membran (Fig. 2) wird eine erste Separation des Blutes in feste (zelluläre) und flüssige (Plasma) Bestandteile realisiert. Die vollständige Trennung, also das Zurückhalten aller zellulären Bestandteile, ereignet sich in dem Blutseparator. Von ihm fließt nur noch Plasma in die FABP-spezifische farbmarkierte Antikörper enthaltende Konjugat-Matrix. Die Probenflüssigkeit löst diese Antikörper ab und fließt dann, die markierten Antikörper und den Analyten mitführend, von der Konjugat-Matrix in das Analyse-Feld, auf dem zwei immun-reaktive Linien durch Fixierung FABP-spezifischer Antikörper (Test-Linie) bzw. Antimaus-Antikörper (Kontroll-Linie) realisiert sind. Bei Vorhandensein des Analyten in der Probe wird dann an der Test-Linie über den Analyten ein Sandwich-Komplex generiert, der entsprechend der Farb-Markierung eine sichtbare Linie erzeugt, deren Intensität mit der Analyt-Konzentration in der Probe korreliert. Da in der Konjugat-Matrix die farbmarkierten Antikörper im Überschuss vorhanden sind, kann durch unspezifische Bindung hinter der Test-Linie eine Kontroll-Linie erzeugt werden, die anzeigt, ob die Probenflüssigkeit die Test-Linie überströmt hat. Schließlich erreicht die Probenflüssigkeit die Saug-Membran, wodurch ein Sog erzeugt wird, der gewährleistet, dass das Analyse-Feld komplett durchströmt wird.After removing the protective film from sample opening 1 and lancet (Fig. 1), the fingertip is pricked from the side with the latter. The blood obtained in this way is dripped directly into sample opening 1 and, as a result of capillary forces, flows through the reaction strip underneath. The pre-membrane (Fig. 2) is used to first separate the blood into solid (cellular) and liquid (plasma) components. Complete separation, i.e. the retention of all cellular components, takes place in the blood separator. From there, only plasma flows into the conjugate matrix containing FABP-specific color-marked antibodies. The sample liquid dissolves these antibodies and then flows, carrying the marked antibodies and the analyte with it, from the conjugate matrix into the analysis field, on which two immuno-reactive lines are created by fixing FABP-specific antibodies (test line) and anti-mouse antibodies (control line). If the analyte is present in the sample, a sandwich complex is generated at the test line over the analyte, which creates a visible line according to the color marking, the intensity of which correlates with the analyte concentration in the sample. Since the color-marked antibodies are present in excess in the conjugate matrix, a control line can be created behind the test line by non-specific binding, which indicates whether the sample liquid has flowed over the test line. Finally, the sample liquid reaches the suction membrane, which creates a suction that ensures that the analysis field is completely flowed through.
Die erfindungsgemäße funktionalisierte Trägerkarte hat eine Reihe von Vorteilen.The functionalized carrier card according to the invention has a number of advantages.
- Sie ist zur Selbstkontrolle geeignet.- It is suitable for self-control.
- Das Testergebnis liegt nach ca. 10 Minuten vor.- The test result is available after about 10 minutes.
- Die Doppelbestimmung garantiert eine größtmögliche Diagnosesicherheit.- The double determination guarantees the greatest possible diagnostic reliability.
- Die Form der Karte ermöglicht eine bequeme Aufbewahrung beim Nutzer.- The shape of the card allows it to be conveniently stored by the user.
Fig. 1 Draufsicht auf die funktionalisierte Trägerkarte (CardioDetect-Test) Fig. 2 Aufbau Reaktionsstreifen Fig. 3 Rückseite der fünktionalisierten TrägerkarteFig. 1 Top view of the functionalized carrier card (CardioDetect test) Fig. 2 Structure of reaction strip Fig. 3 Back of the functionalized carrier card
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