DE19710277C2

DE19710277C2 - Derivatization reagent for the determination of aldehydes, ketones or isocyanates in liquid or gaseous samples

Info

Publication number: DE19710277C2
Application number: DE1997110277
Authority: DE
Inventors: Wilhelm Poetter; Uwe Dr Karst; Norbert Dr Binding; Holger Klaening
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1997-03-13
Filing date: 1997-03-13
Publication date: 1998-09-03
Anticipated expiration: 2017-03-14
Also published as: DE19710277A1

Description

Die Erfindung betrifft ein Derivatisierungsreagenz, das an einem Trägermolekül eine reaktive Gruppe, eine detektierbare Gruppe und gegebenenfalls eine polaritätsmodifizierende Gruppe in frei wählbarer Kombination enthält.The invention relates to a derivatization reagent on a Carrier molecule a reactive group, a detectable group and optionally a polarity-modifying group in free selectable combination contains.

Die selektive Analytik reaktiver Verbindungen in flüssigen und gasförmigen Matrices ist sowohl in der Chemischen Industrie als auch im Bereich der Umweltüberwachung und der biomedizinischen Diagnostik und Forschung von großer Bedeutung. Die hohe Reaktionsfreudigkeit der Analyte erschwert jedoch deren Bestimmung erheblich, da bei der Probenahme, der Lagerung der Proben und der anschließenden Analyse Verluste durch chemische Reaktionen oder physikalische Vorgänge stattfinden können. Daher werden für reaktive Verbindungen oftmals Derivatisierungsverfahren eingesetzt, bei denen zunächst die Analyte mit einem geeigneten Reagenz zu stabilen Verbindungen umgesetzt werden. Zusätzlich bieten Derivatisierungsverfahren die Möglichkeit, Analyte, die mit einem gewünschten Analysenverfahren nicht oder nicht ausreichend detektierbar sind, zu besser detektierbaren Produkten umzusetzen. Typische Derivatisierungsreagenzien enthalten daher mindestens eine funktionelle Gruppe, die eine hohe Reaktivität in Bezug auf die Analyte aufweist und eine funktionelle Gruppe, die den spektroskopischen Nachweis der Derivate ermöglicht. In der Literatur werden bisher stets Derivatisierungsreagenzien beschrieben, die für eine einzelne Gruppe von Analyten und ein einziges Nachweisverfahren geeignet sind. Daher müssen die Synthesebedingungen für diese Reagenzien, die Reaktionsbedingungen zu den Derivaten, das chromatographische Trennverfahren und das Detektionsverfahren in jedem Einzelfall getrennt entwickelt werden.The selective analysis of reactive compounds in liquid and Gaseous matrices is used both in the chemical industry also in the field of environmental monitoring and biomedical Diagnostics and research of great importance. The height However, the reactivity of the analytes makes their determination difficult considerably, because in the sampling, the storage of the samples and the subsequent analysis losses due to chemical reactions or physical processes can take place. Therefore, for reactive compounds often used derivatization processes, in which the analytes are first added with a suitable reagent stable connections are implemented. Also offer Derivatization methods the ability to analyze analytes with a desired or insufficient analysis method are detectable, to convert to more detectable products. Typical derivatization reagents therefore contain at least one functional group that has high reactivity in relation to the Analyte has and a functional group that the allows spectroscopic detection of the derivatives. In the Literature has always been derivatization reagents described for a single group of analytes and a only detection methods are suitable. Therefore, the Synthesis conditions for these reagents, the reaction conditions to the derivatives, the chromatographic separation process and Detection methods are developed separately in each individual case.

Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Reagenz zur Verfügung zu stellen, das für verschiedene Analyte, verschiedene Trennbedingungen und verschiedene Detektions bedingungen eingesetzt werden kann, ohne im Einzelfall starke Anpassungen vornehmen zu müssen. Überraschenderweise wurde gefunden, daß ein Derivatisierungsreagenz auf Basis der Mehrfachsubstitution an Cyanurchlorid zu diesem Zweck verwendet werden kann.The object of the present invention is a reagent to provide that for different analytes, different separation conditions and different detection conditions can be used without being strong in individual cases Need to make adjustments. Surprisingly found that a derivatization reagent based on the Multiple substitution of cyanuric chloride used for this purpose can be.

Die mehrfache Substitution der Halogenatome an Cyanurhalogeniden, speziell Cyanurchlorid, ist in der Synthese organischer Substanzen bereits vielfach genutzt worden. Unter einer Vielzahl anderer Produkte haben besonders die Triazinherbizide sowie die Reaktivfarbstoffe besondere Bedeutung erlangt.The multiple substitution of the halogen atoms on cyanuric halides, especially cyanuric chloride, is in the synthesis of organic substances have been used many times. Among a variety of others Products especially have the triazine herbicides as well Reactive dyes gain particular importance.

Triazinherbizide basieren auf dem grundlegenden Reaktionsschema der Mehrfachsubstitution an Cyanurhalogeniden (J. T. Thurston, J. R. Dudley, D. W. Kaiser, I. Hechenbleikner, F. C. Schaefer und D. Holm- Hansen, Journal of the American Chemical Society 73 (1951) 2981- 2983; H. Gysin, Chemistry and Industry (1962) 1393-1400; H. Nestler und H. Fürst, Journal für praktische Chemie, 22 (1963) 173-185; H. Koopman, J. H. Uhlenbroek, H. H. Haeck, J. Daams und M. J. Koopmans, Recueil 78 (1959) 967-980). Durch die nucleophile Mehrfachsubstitution mit Alkylamino-, Alkoxy- oder Alkylthiogruppen am Cyanurchlorid kann hier die herbizide Wirkung modifiziert werden.Triazine herbicides are based on the basic reaction scheme of Multiple substitution on cyanuric halides (J. T. Thurston, J. R. Dudley, D. W. Kaiser, I. Hechenbleikner, F. C. Schaefer and D. Holm- Hansen, Journal of the American Chemical Society 73 (1951) 2981- 2983; H. Gysin, Chemistry and Industry (1962) 1393-1400; H. Nestler and H. Fürst, Journal for Practical Chemistry, 22 (1963) 173-185; H. Koopman, J.H. Uhlenbroek, H.H. Haeck, J. Daams and M.J. Koopmans, Recueil 78 (1959) 967-980). By the nucleophile Multiple substitution with alkylamino, alkoxy or alkylthio groups the herbicidal action on the cyanuric chloride can be modified here will.

Im Falle der Reaktivfarbstoffe wird zunächst ein farbgebender Bestandteil an das Cyanurhalogenid gebunden. Anschließend findet eine weitere Reaktion freier Halogenatome am Triazingerüst mit den Nucleophilen (Hydroxy- oder Aminogruppen) der Textilfaser statt (neben einer Vielzahl weiterer Literaturstellen: F. Lehr, Dyes and Pigments (1990) 239-263; H. Zollinger, Angewandte Chemie 73 (1961) 125; E. Siegel, Suppl. Chimia (1968) 100). Sowohl für Triazinherbizide als auch für Reaktivfarbstoffe wird die aufeinanderfolgende mehrfache Reaktion der Halogenatome, in der Regel durch nucleophile Substitution, zum Aufbau komplexerer Moleküle genutzt. In the case of reactive dyes, a coloring agent is used first Constituent bound to the cyanuric halide. Then finds Another reaction of free halogen atoms on the triazine skeleton with the Nucleophiles (hydroxy or amino groups) of the textile fiber instead (in addition to numerous other references: F. Lehr, Dyes and Pigments (1990) 239-263; H. Zollinger, Angewandte Chemie 73 (1961) 125; E. Siegel, Suppl. Chimia (1968) 100). As well as Triazine herbicides as well as for reactive dyes successive multiple reaction of the halogen atoms in which Rule through nucleophilic substitution, to build more complex ones Molecules used.

Die analytische Nutzung der Mehrfachreaktion am Cyanurchlorid ist in der wissenschaftlichen Literatur zur Bestimmung von Aminosäuren mit Vorsäulenderivatisierung und anschließender Trennung mit Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC) beschrieben worden (H. Brückner und B. Strecker, Chromatographia 33 (1992) 586-587; H. Brückner und B. Strecker, Journal of Chromatography 627 (1993) 97- 105). In diesem Fall wird zunächst ein Chromophor oder Fluorophor durch Reaktion mit einem Chlorsubstituenten an Cyanurchlorid gebunden. Im zweiten Schritt erfolgt mittels Substitution des zweiten Chloratoms am Cyanurchlorid die Anbindung einer chiralen Aminosäure. Durch Umsetzung des dritten Chloratoms des Cyanurchlorids mit den zu bestimmenden Aminosäuren entstehen diastereomere Produkte, welche nun mittels nicht-chiraler stationärer HPLC-Phasen getrennt werden können. Der Ersatz der Halogenatome wird hierbei durch nucleophile Substitution oder Friedel-Crafts-Alkylierung durchgeführt.The analytical use of the multiple reaction on cyanuric chloride is in the scientific literature for the determination of amino acids with precolumn derivatization and subsequent separation with High performance liquid chromatography (HPLC) has been described (H. Brückner and B. Strecker, Chromatographia 33 (1992) 586-587; H. Brückner and B. Strecker, Journal of Chromatography 627 (1993) 97- 105). In this case, first a chromophore or fluorophore by reaction with a chlorine substituent on cyanuric chloride bound. In the second step, the second chlorine atom on the cyanuric chloride, the attachment of a chiral Amino acid. By reacting the third chlorine atom of the Cyanuric chloride with the amino acids to be determined arise diastereomeric products, which are now using non-chiral stationary HPLC phases can be separated. The replacement of the Halogen atoms are replaced by nucleophilic substitution or Friedel-Crafts alkylation carried out.

Das erfindungsgemäße Reagenz ist dagegen durch seinen stärker modularen Charakter gekennzeichnet, d. h., es lassen sich, ausgehend von einem 1,3,5-Triazin-Grundgerüst, eine reaktive Gruppe, eine detektierbare Gruppe und gegebenenfalls eine polaritätsmodifizierende Gruppe aus den mit einem Cyanurhalogenid, in der Regel Cyanurchlorid, umsetzbaren Grundsubstanzen frei kombinieren. Als reaktive Gruppe kann erfindungsgemäß die Hydrazingruppe zur Bestimmung von Aldehyden und Ketonen, aber auch die Aminoalkylaminogruppe zur Bestimmung von Isocyanaten verwendet werden. Im Gegensatz zu den bei Brückner und Strecker beschriebenen Reagenzien wird hier also nicht ein Chloratom am Triazinring nucleophil durch den Analyten, sondern durch eine zusätzlich eingebrachte reaktive Gruppe ersetzt, die dann ihrerseits mit dem Analyten reagiert. Hierdurch ist der Einsatz dieser Reagenzien nicht auf die Bestimmung von Nucleophilen beschränkt. Als detektierbare Gruppe wird ein Chromophor oder ein Fluorophor eingesetzt, beispielsweise basierend auf einer Phenylazoanilinofunktion, Dimethylaminophenylazoanilinofunktion, Methoxyphenylazoanilinofunktion, Methoxynaphthalinfunktion oder Dimethylaminonaphthalinfunktion. Entscheidend für die Auswahl der detektierbaren Gruppe sind neben einer zu erreichenden niedrigen Nachweisgrenze auch eine geringe Molekülgröße und die Abwesenheit solcher funktioneller Gruppen, die die anschließende flüssigchromatographische Trennung auch einer Vielzahl von Derivaten, zum Beispiel aus einer homologen Reihe von Analyten, erschweren. In einem dritten Reaktionsschritt kann bei Bedarf eine polaritätsmodifizierende Gruppe eingefügt werden, um die chromatographischen Eigenschaften der entsprechenden Derivate zu beeinflussen. Hierbei handelt es sich um kurzkettige Alkylamine, Dialkylamine oder Alkohole, die wiederum nucleophil am Cyanurchlorid substituiert werden. Alternativ hierzu kann eine zweite detektierbare Gruppe eingefügt werden, um die Detektionseigenschaften weiter zu verbessern. In der praktischen Durchführung ist es in diesem Fall sinnvoll, zunächst zwei Äquivalente des Chromophors oder Fluorophors einzufügen, und die reaktive Gruppe im letzten Arbeitsschritt einzusetzen. Prinzipiell ist die Reihenfolge der Substitution frei wählbar, es empfiehlt sich jedoch, zunächst die schwächeren Nucleophile (in der Regel Chromophor oder Fluorophor) einzufügen.In contrast, the reagent according to the invention is stronger due to its characterized by modular character, d. that is, starting from from a 1,3,5-triazine backbone, a reactive group, a detectable group and optionally one polarity-modifying group from those with a cyanuric halide, usually cyanuric chloride, convertible base substances free combine. According to the invention, the Hydrazine group for the determination of aldehydes and ketones, but also the aminoalkylamino group is used to determine isocyanates will. In contrast to those described by Brückner and Strecker Reagents do not become chlorine atoms on the triazine ring nucleophilic by the analyte but by an additional one introduced reactive group, which then in turn with the Analyte reacts. This is the use of these reagents not limited to the determination of nucleophiles. As detectable group becomes a chromophore or a fluorophore used, for example based on a Phenylazoanilino function, dimethylaminophenylazoanilino function, Methoxyphenylazoanilino function, methoxynaphthalene function or Dimethylaminonaphthalene function. Decisive for the selection of the detectable group are next to a low to be reached Detection limit also a small molecule size and the absence of such functional groups that the subsequent liquid chromatographic separation also of a variety of Derivatives, for example from a homologous series of analytes, complicate. In a third reaction step, a polarity-modifying group can be added to the chromatographic properties of the corresponding derivatives influence. These are short chain alkyl amines, Dialkylamines or alcohols, which in turn are nucleophilic Cyanuric chloride can be substituted. Alternatively, a second detectable group can be added to the To further improve detection properties. In practical In this case, it makes sense to start with two To insert equivalents of chromophore or fluorophore, and the reactive group in the last step. In principle the order of substitution is freely selectable, it is recommended themselves, however, initially the weaker nucleophiles (usually Chromophore or fluorophore).

Das erfindungsgemäße Reagenz wird, zur Beschleunigung der Reaktion auch in Anwesenheit von Säure als Katalysator im Fall der Bestimmung von Aldehyden und Ketonen, mit den Analyten umgesetzt. Hierzu können sowohl Lösungen des Reagenzes in geeigneten Lösungsmitteln als auch mit Reagenz beschichtete feste Sammelphasen (z. B. Probenahmeröhrchen und -kartuschen, Passivsammelsysteme oder Diffusionsrohre) eingesetzt werden. Die Probenahme erfolgt bei flüssigen Proben durch Umsetzen einer Reagenzlösung mit der Probenlösung, bei gasförmigen Proben dadurch, daß die mit Reagenz beschichtete Sammelphase der Gasprobe ausgesetzt wird. Bei der aktiven Gasprobenahme wird hierzu eine geeignete Pumpe verwendet. Nach vollendeter Probenahme werden die festen Sammelphasen mit einem geeigneten organischen Lösungsmittel, z. B. Acetonitril, eluiert. Die das Reagenz und die entstandenen Derivate enthaltende Lösung wird anschließend nach Bedarf weiterbehandelt, zum Beispiel durch Festphasenextraktion zur Anreicherung oder durch Filtration. Die Auftrennung der Einzelsubstanzen erfolgt durch Flüssigchromatographie, bevorzugterweise durch Hochleistungs- Flüssigkeitschromatographie auf Umkehrphasen und unter Verwendung mobiler Phasen hoher Polarität. Die Detektion erfolgt photometrisch oder fluoreszenzspektroskopisch unter Nutzung der Absorptionsmaxima bzw. Anregungs- und Emissionsmaxima. Aufgrund der beim erfindungsgemäßen Reagenz erfolgten räumlichen und elektronischen Isolation von Chromophor oder Fluorophor und reaktiver Gruppe sind die Detektionseigenschaften des Reagenzes und seiner Derivate nahezu identisch, was eine vereinfachte Quantifizierung und Kalibration ermöglicht. Die quantitative Auswertung erfolgt wahlweise über die Peakhöhen oder die Peakflächen.The reagent according to the invention is used to accelerate the reaction also in the presence of acid as a catalyst in the case of Determination of aldehydes and ketones, implemented with the analytes. For this purpose, both solutions of the reagent in suitable Solvents as well as solid collection phases coated with reagent (e.g. sampling tubes and cartridges, passive collection systems or Diffusion tubes) are used. Sampling takes place at liquid samples by reacting a reagent solution with the Sample solution, for gaseous samples in that the reagent coated collection phase of the gas sample is exposed. In the A suitable pump is used for active gas sampling. After sampling is complete, the fixed collection phases are included a suitable organic solvent, e.g. B. acetonitrile, eluted. The one containing the reagent and the resulting derivatives The solution is then processed as needed, for example by solid phase extraction for enrichment or by filtration. The individual substances are separated by Liquid chromatography, preferably by high performance Reverse phase and using liquid chromatography mobile phases of high polarity. The detection is carried out photometrically or by fluorescence spectroscopy using the absorption maxima or excitation and emission maxima. Because of the Reagent according to the invention was carried out spatially and electronically Isolation of chromophore or fluorophore and reactive group are the detection properties of the reagent and its derivatives almost identical, which is a simplified quantification and Calibration enables. The quantitative evaluation takes place either via the peak heights or the peak areas.

Im folgenden soll der Einsatz des Reagenzes anhand von Beispielen erläutert werden:In the following, the use of the reagent is illustrated by examples are explained:

example 1 Determination of formaldehyde, acetaldehyde and acetone in Laboratory air

Ein Probenahmeröhrchen zur Luftanalytik von Aldehyden und Ketonen wird wie folgt hergestellt: 3 g 2-Chloro-4-hydrazino-6-(4- phenylazo)anilino-1,3,5-triazin werden in 30 ml Acetonitril aufgeschlämmt und zu einem Gemisch aus 5 g gereinigter Trägersubstanz "Chromosorb P/AW" und 10 ml verdünnter Schwefelsäure gegeben. Nach Homogenisierung der Mischung durch Schütteln wird am Rotationsverdampfer solange eingeengt, bis nur noch eine geringe Restfeuchte der Masse verbleibt. Eine Sammelschicht von 300 mg und eine Kontrollschicht von 100 mg dieser Masse werden, separiert durch Glaswolle, in ein Glasröhrchen mit 5 mm Innendurchmesser eingefüllt. Das Glasröhrchen wird nach luftdichtem Verschließen im Kühlschrank gelagert. Zur Probenahme wird in einem chemischen Labor mit Hilfe einer handelsüblichen Probenahmepumpe 60 Minuten lang ein Luftstrom von 0,1 l/min durch das Glasröhrchen gesaugt.A sampling tube for air analysis of aldehydes and ketones is prepared as follows: 3 g of 2-chloro-4-hydrazino-6- (4- phenylazo) anilino-1,3,5-triazine in 30 ml of acetonitrile slurried and purified to a mixture of 5 g Carrier substance "Chromosorb P / AW" and 10 ml of dilute sulfuric acid given. After homogenization of the mixture by shaking on Rotary evaporator concentrated until only a small amount Residual moisture in the mass remains. A 300 mg and a control layer of 100 mg of this mass is separated through glass wool, in a glass tube with 5 mm inside diameter filled. The glass tube is closed in an airtight manner Stored in refrigerator. Sampling is done in a chemical laboratory using a commercially available sampling pump for 60 minutes Air flow of 0.1 l / min sucked through the glass tube.

Anschließend werden Sammel- und Kontrollschicht getrennt in Präparategläschen überführt und mit jeweils 5 ml Acetonitril unter wiederholtem Schütteln für drei Stunden eluiert. Die Desorptionslösungen werden zum Entfernen fester Bestandteile zentrifugiert. 2 µl der überstehenden Lösung werden anschließend in das HPLC-System injiziert, auf einer Umkehrphasensäule RP-18 (Säulendurchmesser: 3 mm, Flußrate: 0,6 ml/min) mit einem binären Gradienten Acetonitril/Wasser getrennt und photometrisch bei der Wellenlänge von 360 nm detektiert. Die Quantifizierung der Hydrazone von Formaldehyd, Acetaldehyd und Aceton wird unter Verwendung von Reinsubstanzen als Kalibrationsstandards durchgeführt. Damit wird eine Konzentration von 110 ppb Formaldehyd, 85 ppb Acetaldehyd und 750 ppb Aceton in der Luftprobe ermittelt.The collection and control layers are then separated into Transfer vials and each with 5 ml of acetonitrile repeated shaking eluted for three hours. The Desorption solutions are used to remove solid components centrifuged. 2 µl of the supernatant solution are then in the HPLC system is injected on a RP-18 reverse phase column (Column diameter: 3 mm, flow rate: 0.6 ml / min) with a binary Gradient acetonitrile / water separated and photometric at the Wavelength of 360 nm detected. The quantification of the Hydrazone of formaldehyde, acetaldehyde and acetone is under Use of pure substances as calibration standards carried out. A concentration of 110 ppb Formaldehyde, 85 ppb acetaldehyde and 750 ppb acetone in the air sample determined.

Example 2 Determination of phenyl isocyanate in industrial exhaust air

Eine gesättigte Lösung von 2-Aminoethylamino-4-dimethylamino-6- dimethylaminophenylazoanilino-1,3,5-triazin wird durch Suspension von 3 g des Reagenzes in 100 ml Acetonitril und anschließendes Dekantieren hergestellt. 50 ml dieser Lösung werden in eine Waschflasche mit Glasfritte umgefüllt. Anschließend wird mit Hilfe einer Probenahmepumpe über 30 Minuten ein Luftstrom von 0,1 l/min durch die Lösung gesaugt. Nach vollendeter Probenahme wird durch Überführung in einen Meßkolben und Auffüllen auf 50 ml das zwischenzeitlich verdampfte Lösungsmittelvolumen nachgefüllt. 5 µl der Lösung werden in eine HPLC-Anlage injiziert. Als stationäre Phase wird eine Umkehrphasensäule RP-8 (Durchmesser: 4,6 mm, Flußrate: 1,5 ml/min) verwendet. Als mobile Phase dient ein binärer Gradient Acetonitril/Wasser. Die Detektion erfolgt UV- spektroskopisch bei 370 nm. Das Derivat des Phenylisocyanates wird mittels eines festen Standards quantifiziert, die Auswertung erfolgt über die Peakflächen. Als Phenylisocyanatkonzentration in der Abluftprobe werden 130 ppb bestimmt. A saturated solution of 2-aminoethylamino-4-dimethylamino-6- dimethylaminophenylazoanilino-1,3,5-triazine is by suspension of 3 g of the reagent in 100 ml of acetonitrile and subsequent Decanting made. 50 ml of this solution are in a Wash bottle filled with glass frit. Then with help an air flow of 0.1 l / min for a sampling pump for 30 minutes sucked through the solution. After sampling is complete, Transfer to a volumetric flask and fill up to 50 ml in the meantime evaporated volume of solvent refilled. 5 µl the solution are injected into an HPLC system. As a stationary Phase is a reverse phase column RP-8 (diameter: 4.6 mm, Flow rate: 1.5 ml / min) was used. A binary serves as the mobile phase Acetonitrile / water gradient. The detection is UV spectroscopic at 370 nm. The derivative of the phenyl isocyanate is quantified using a fixed standard, the evaluation takes place over the peak areas. As a phenyl isocyanate concentration in the exhaust air sample is determined at 130 ppb.

Example 3 Determination of formaldehyde and acetaldehyde in one Mineral water

100 µl einer Stammlösung von 1 mg/ml 2-Chloro-4-hydrazino-6-(4- methoxy)naphthalino-1,3,5-triazin in Acetonitril/2M Schwefelsäure 10/1 werden zu einer Wasserprobe von 1,9 ml gegeben. Nach einer Reaktionszeit von 60 Minuten werden 20 µl des Reaktionsgemisches in eine HPLC-Anlage injiziert. Die Trennung findet auf einer Umkehrphasensäule RP-18 (Durchmesser: 3 mm, Flußrate: 0,62 ml/min) statt. Als mobile Phase dient ein binärer Gradient Acetonitril/Wasser. Die Detektion erfolgt fluoreszenz spektroskopisch bei einer Anregungswellenlänge von 340 nm und einer Emissionswellenlänge von 420 nm. Die Auswertung erfolgt über die Peakflächen. Nach Kalibration mit Reinsubstanz wird die Konzentration an Formaldehyd als 2 µg/l und die Konzentration von Acetaldehyd als 4 µg/l bestimmt.100 .mu.l of a stock solution of 1 mg / ml 2-Chloro-4-hydrazino-6- (4-methoxy) naphthalino-1,3,5-triazine in acetonitrile / 2M sulfuric acid 10/1 are added to a water sample of 1.9 ml given. After a reaction time of 60 minutes, 20 ul of the reaction mixture are injected into an HPLC system. The separation takes place on a reverse phase column RP-18 (diameter: 3 mm, flow rate: 0.62 ml / min). A binary gradient acetonitrile / water serves as the mobile phase. The detection is carried out fluorescence spectroscopically at an excitation wavelength of 340 nm and an emission wavelength of 420 nm. The evaluation is carried out via the peak areas. After calibration with pure substance, the concentration of formaldehyde is determined as 2 µg / l and the concentration of acetaldehyde as 4 µg / l.

Claims

1. derivatization reagent for the determination of aldehydes, ketones or isocyanates in liquid or gaseous samples, characterized in that a combination of a 1,3,5-triazine structure

1. a.) A hydrazine function or an aminoalkylamino function with alkyl chain lengths of 2-6 C atoms in the 2-position of the triazine skeleton,
2. b.) A phenylazoanilino function, dimethylaminophenylazo anilino function, methoxyphenylazoanilino function, methoxy naphthalene function or dimethylaminonaphthalene function as chromophore or fluorophore in the 4-position of the triazine structure and
3. c.) A chlorine or fluorine atom, a further chromophore or fluorophore or an alkylamino function, a dialkylamino function or an alkoxy function with alkyl chain lengths of 1-6 carbon atoms in the 6-position of the triazine skeleton.

2. A method for the determination of aldehydes, ketones or isocyanates, in which the sample to be examined is reacted with a derivatization reagent which consists of a 1,3,5-triazine skeleton in combination with

1. a.) A hydrazine function or an aminoalkylamino function with alkyl chain lengths of 2-6 C atoms in the 2-position of the triazine skeleton,
2. b.) A phenylazoanilino function, dimethylaminophenylazo anilino function, methoxyphenylazoanilino function, methoxy naphthalene function or dimethylaminonaphthalene function as chromophore or fluorophore in the 4-position of the triazine structure and
3. c.) A chlorine or fluorine atom, a further chromophore or fluorophore or an alkylamino function, a dialkylamino function or an alkoxy function with alkyl chain lengths of 1-6 carbon atoms in the 6-position of the triazine skeleton, the derivatizing reagent being in the form of a solution in water, a mineral acid or organic acid or in an organic solvent.

3. Method for the determination of aldehydes, ketones or isocyanates according to claim 2, characterized in that the derivatization reagent in the form a coated collecting phase is used.

4. Methods for the determination of aldehydes and ketones according to one of claims 2 or 3, characterized in that the derivatization of aldehydes and Ketones by using a protonic acid or a Lewis Acid is accelerated.

5. Method for the determination of aldehydes, ketones or isocyanates according to one of claims 2 to 4, characterized in that the reaction products after the Derivatization reaction separated by liquid chromatography and UV / vis spectroscopic or fluorescence spectroscopic can be detected.