DE102005059222B4

DE102005059222B4 - 11ß-Benzaldoximderivate von D-Homoestra-4,9-dien-3-onen

Info

Publication number: DE102005059222B4
Application number: DE102005059222A
Authority: DE
Inventors: Sven Ring; Gerd Schubert; Lothar Sobek
Original assignee: Bayer Schering Pharma AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 2005-12-08
Filing date: 2005-12-08
Publication date: 2007-10-11
Anticipated expiration: 2025-12-09
Also published as: EP2027141A1; US7473709B2; US20070149621A1; WO2007065726A1; CA2631364A1; JP2009518347A; DE102005059222A1

Abstract

11β-Benzaldoxime der allgemeinen Formel I

worin
R₁ ein Wasserstoffatom, eine C₁-C₆-Alkyl-, C₁-C₆-Acyl-; C₁-C₄-Alkoxycarbonyl-, C₁-C₄-Alkylthiocarbonyl-, C₁-C₆-Alkylaminocarbonyl-, Arylaminocarbonylgruppe;
R₂ ein Wasserstoffatom, ein C₁-C₆-Alkyl- oder C₁-C₆-Acylgruppe sind,
sowie deren pharmazeutisch verträglichen Salze.

Description

Die vorliegende Patentanmeldung betrifft 11β-Benzaldoximderivate von D-Homoestra-4,9-dien-3-onen, Verfahren zu deren Herstellung, sowie pharmazeutische Zusammensetzungen enthaltend die erfindungsgemäßen Verbindungen.
Unter zunehmendem Alter und physischem und/oder psychischem Stress und im menschlichen Organismus ist der Corticoidspiegel gegenüber dem Sexualhormonspiegel erhöht und kann deshalb beim Mann zu sexuellen Dysfunktionen und Hypogonadismus führen ( EP 1285927 ). Diese Krankheiten entstehen durch eine verminderte endogene Produktion von Androgenen, insbesondere durch eine verminderte Produktion von Testosteron im Hoden und durch den altersbedingten Corticoidüberschuss, der einen schnelleren und gesteigerten Abbau von endogenen Testosteron verursacht. Glucocorticoid-Rezeptorantagonisten sind Verbindungen, die die Wirkung von Glucocorticoiden durch eine stärkere und selektivere Bindung an die Glucocorticoid-Rezeptoren kompetitiv hemmen.
In WO 95/04536 wird die Anwendung von Glucocorticoidrezeptorantagonisten für die Behandlung von Angststörungen beschrieben. Ferner werden in EP 0683172 , EP 0793541 und in Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 1997, 7, 2229-2234 eine Reihe von 11,21-Bisphenyl-19-norpregnanen zur Behandlung von bestimmten Glucocorticoid bedingten Erkrankungen wie Cushing Syndrom, Diabetes, Glaukom, Depression, Artheriosklerose, Adipositas, Bluthochdruck, Schlafstörungen und Osteoporose beschrieben. In WO 01/47859 werden nichtsteroidale Verbindungen als selektive Glucocorticoidrezeptor-Antagonisten zur Behandlung des Diabetes beschrieben. Des weiteren wurde das Antiglucocorticoid ORG 34 517 in klinischen Studien für die Indikation Depression untersucht [Pharma Business 2002, 51, 152].
In DE 10140113 werden Verbindungen aufgeführt, die als Antiglucocorticoide zur Behandlung von Glucocorticoid bedingtem Hypogonadismus untersucht wurden.
EP 0057115 beschreibt RU 38486 (Mifepriston) als Glucocorticoid-Rezeptorantagonisten, der nahezu gleich stark an den Progesteron- und Glucocorticoidrezeptor bindet und gegenwärtig als Progesteronrezeptorantagonist zum Abbruch einer Schwangerschaft in der frühen Phase zugelassen ist [M. Moguilewsky, D. Philibert, E. E. Baulieu; S. J. Segal, (Eds): The antiprogestin steroid RU 38486 and human fertility control, p. 87, Plenum Press, New York, London 1985] bzw. als Glucocorticoidrezeptorantagonist zur Behandlung des Cushing-Syndroms eingesetzt wird [L. K. Nieman, G. P. Chrousos, C. K. Kellner, I. M. Spitz, B. C. Nisula, J. Clin. Endocrin. Metab. 1985, 61, 536].
Durch die fehlende Rezeptorselektivität erscheint RU 38486 jedoch nicht geeignet für die Langzeitbehandlung von sexuellen Dysfunktionen und Hypogonadismus des Mannes aufgrund der auf die antiprogestine Aktivität zurückzuführenden Nebenwirkungen.
11β-arylsubstituierte D-Homo-estra-4,9-diene sind in DE 3320580 und EP 414606 offenbart. Sie sind als Antigestagene der Verbindung RU 38486 bezüglich der abortiven Wirkung überlegen. D-Homo-(16)en-11β-aryl-estrene sind aus DE 4042005 bekannt. Diese besitzen starke antigestagene, antiglucocorticoide, antimineralcorticoide und antiandrogene Eigenschaften, und zeichnen sich durch eine starke Affinität zum Gestagenrezeptor aus.
11β-Benzaldoxime von Estra-4,9-dien-3-onen sind aus EP 0648778 , EP 0648779 und EP 1060187 bekannt. Diese Verbindungen binden stark an den Progesteronrezeptor und deutlich schwächer an den Glucocorticoidrezeptor, und zeigen sowohl antigestagene als auch gestagene Eigenschaften [Endocrine Rev. 2005, 26, 423-438]. Sie sind als Progesteronrezeptormodulatoren für die Behandlung einer Vielzahl von gynäkologischen Erkrankungen geeignet [WO 01/34126, WO 01/15679, WO 01/44267].
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, Verbindungen mit antiglucocorticoider Wirkung zur Verfügung zu stellen, die stärker an dem Glucocorticoidrezeptor als an dem Progesteronrezeptor binden. Sie sollten daher zur Behandlung und/oder zur Vorbeugung von Symptomen und/oder Erkrankungen, eingesetzt werden können, die auf einen durch Glucocorticoide, insbesondere Cortisol, induzierten Androgenmangel zurückzuführen sind.
Die erfindungsgemäße Verbindungen sollen sich gegenüber der bekannten Verbindung RU 38486 durch eine bessere Dissoziation zwischen Progesteronrezeptor – und Glucocorticoidrezeptor-Bindung auszeichnen und in der Lage sein, überschüssiges Cortisol vom Rezeptor zu verdrängen, um beispielsweise den durch Corticoide bedingten Abfall des humanen Testosteronspiegels zu kompensieren.
Die Aufgabe wurde gemäß vorliegender Erfindung gelöst durch die 11β-Benzaldoximderivate von D-Homoestra-4,9-dienen der Formel I
worin
R₁ ein Wasserstoffatom, eine C₁-C₆-Alkyl-, C₁-C₆-Acyl-; Benzoyl-, C₁-C₄-Alkoxycarbonyl-, C₁-C₄-Alkylthiocarbonyl-, C₁-C₆-Alkylaminocarbonyl-, Arylaminocarbonyl-gruppe;
R₂ ein Wasserstoffatom, ein C₁-C₆-Alkyl- oder C₁-C₆-Acylgruppe sind,
sowie deren pharmazeutisch verträglichen Salze.
Bei den C₁-C₆-Alkylgruppen kann es sich beispielsweise um unverzweigte Alkylgruppen wie eine Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-, Pentyl- oder eine Hexyl-Gruppe; oder um verzweigte C₃-C₆-Alkylgruppen wie eine iso-Propyl-, iso-Butyl-, sec-Butyl, terf-Butyl-, iso-Pentyl-, 2-Methylbutyl-, 1-Methylbutyl-, 1-Ethylpropyl-, neo-Pentyl-, 1,1-Dimethylpropyl-, 4-Methylpentyl-, 3-Methylpentyl-, 2-Methylpentyl-, 1-Methylpentyl-, 2-Ethylbutyl-, 1-Ethylbutyl-, 3,3-Dimethylbutyl-, 2,2-Dimethylbutyl-, 1,1-Dimethylbutyl-, 2,3-Dimethylbutyl-, 1,3-Dimethylbutyl- oder eine 1,2-Dimethylbutyl-Gruppe handeln.
Bei den C₁-C₆-Acylgruppen für die Reste R1 und R2 kann es sich beispielsweise um eine Formyl-, Acetyl-, Propionyl-, Butyryl-, iso-Butyryl-, Pentanoyl-, iso-Pentanoyl, Pivaloyl oder Hexanoylgruppe handeln.
Unter einer C₁-C₄-Alkoxycarbonylgruppe werden Methoxycarbonyl-[MeOC(O)-], Ethoxycarbonyl [EtOC(O)-), n-Propoxycarbonyl-[CH₃CH₂CH₂OC(O)-], iso-Propoxycarbonyl-[(CH₃)₂CHOC(O)-], n-Butoxycarbonyl-[CH₃CH₂CH₂CH₂OC(O)-], iso-Butoxycarbonyl-[(CH₃)₂CHCH₂OC(O)-], sec-Butoxycarbonyl-[CH₃CH₂(CH₃)CHOC(O)-], tert-Butoxycarbonyl [(CH₃)₃COC(O)-] verstanden.
Bei den C₁-C₄-Alkylthiocarbonylgruppen kann es sich beispielsweise um Methylthiocarbonyl-[MeSC(O)-], Ethylthiocarbonyl [EtSC(O)-), n-Propylthiocarbonyl-[CH₃CH₂CH₂SC(O)-], iso-Propylthiocarbonyl-[(CH₃)₂CHSC(O)-], n-Butylthiocarbonyl-[CH₃CH₂CH₂CH₂SC(O)-], iso-Butylthiocarbonyl-[(CH₃)₂CHCH₂SC(O)-], sec-Butylthiocarbonyl-[CH₃CH₂(CH₃)CHSC(O)-], terf-Butylthiocarbonyl [(CH₃)₃CSC(O)-] handeln.
Bei den C₁-C₆-Alkylaminocarbonyl-Gruppen kann es sich beispielsweise um eine Methylaminocarbonyl-, Ethylaminocarbonyl-, Propylaminocarbonyl-, iso-Propylaminocarbonyl-, Butylaminocarbonyl-, iso-Butylaminocarbonyl-, sec-Butylaminocarbonyl-, tert-Butylaminocarbonyl-, Pentylaminocarbonyl-, iso-Pentylaminocarbonyl-, (2-Methylbutyl)aminocarbonyl-, (1-Methylbutyl)aminocarbonyl-, (1-Ethylpropyl)aminocarbonyl-, neo-Pentylaminocarbonyl-, (1,1-Dimethylpropyl)aminocarbonyl-, Hexylaminocarbonyl-, (4-Methylpentyl)aminocarbonyl-, (3-Methylpentyl)aminocarbonyl-, (2-Methylpentyl)aminocarbonyl-, (1-Methylpentyl)aminocarbonyl-, (1-Ethylbutyl)aminocarbonyl-, (2-Ethylbutyl)aminocarbonyl-, (3,3-Dimethylbutyl)aminocarbonyl-, (2,2-Dimethylbutyl)aminocarbonyl-, (1,1-Dimethylbutyl)aminocarbonyl-, (2,3-Dimethylbutyl)aminocarbonyl-, (1,3-Dimethylbutyl)aminocarbonyl-, (1,2-Dimethylbutyl)aminocarbonyl-, Pentylaminocarbonyl- oder eine Hexylaminocarbonylgruppe handeln.
Bei den Arylaminocarbonylgruppen kann es sich beispielsweise um eine Phenylaminocarbonyl-, (4-Trifluormethoxyphenyl)carbonyl-, oder Naphthylaminocyrbonylgruppe handeln.
Bevorzugt gemäß vorliegender Erfindung sind Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin
R₁ ein Wasserstoffatom, eine C₁-C₄-Alkyl-, C₂-C₄-Acyl-; Benzoyl, C₁-C₄-Alkoxycarbonylgruppe, C₁-C₄-Alkylthiocarbonyl-; C₁-C₄-Alkylaminocarbonyl-, Phenylaminocarbonyl-, (4-Trifluormethoxyphenyl)aminocarbonyl-Gruppe, und
R₂ ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Ethyl-, oder Acetylgruppe sind.
Besonders bevorzugt gemäß vorliegender Erfindung sind:
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim;
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1Z)-oxim;
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim;
4-[17aβ-Acetoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim;
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-(O-acetyl)oxim;
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-(O-acetyl)oxim;
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(methoxy)carbonyl]oxim;
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(methoxy)carbonyl]oxim;
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethoxy)carbonyl]oxim;
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethoxy)carbonyl]oxim;
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylthio)carbonyl]oxim;
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim;
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim;
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-{O-[(4'-trifuormethoxy)phenylamino)carbonyl]oxim.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I sowie deren pharmazeutisch verträgliche Salze sind zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen und Zubereitungen geeignet. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen beziehungsweise Arzneimittel enthalten als Wirkstoff mindestens einen oder mehrere der erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I oder deren Säureadditionssalze, gegebenenfalls in Kombination mit anderen pharmakologisch wirksamen Stoffen. Die Herstellung der Arzneimittel erfolgt in bekannter Weise, wobei die bekannten und üblichen pharmazeutischen Hilfsstoffe sowie sonstige übliche Träger- und Verdünnungsmittel verwendet werden können.
Für die Bildung von pharmazeutisch verträglichen Salzen der erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I. kommen, nach den dem Fachmann bekannten Methoden, als anorganische Säuren unter anderem Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäure, Salpetersäure, als Carbonsäuren unter anderem Essigsäure, Propionsäure, Hexansäure, Octansäure, Decansäure, Oleinsäure; Stearinsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Benzoesäure, Ascorbinsäure, Oxalsäure, Salicylsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Milchsäure, Glycolsäure, Äpfelsäure, Mandelsäure, Zimtsäure, Glutaminsäure, Asparaginsäure, als Sulfonsäuren unter anderem Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure sowie Naphthalinsulfonsäure in Betracht.
Als Träger- und Hilfsstoffe kommen zum Beispiel solche infrage, die in folgenden Literaturstellen als Hilfsstoffe für Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete empfohlen bzw. angegeben sind: Ullmann's Enzyklopädie der technischen Chemie, 4, 1953, 1-39; J. Pharm. Sciences, 52, 1963, 918 ff; H. v. Czetsch-Lindenwald, Hilfsstoffe für Pharmazie und angrenzende Gebiete; Pharm. Ind. 2, 1961, 72 ff; Dr. H. P, Fiedler, Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete Cantor KG. Aulendorf in Württemberg 1971.
Die Formulierung der pharmazeutischen Präparate auf Basis der neuen Verbindungen erfolgt in an sich bekannter Weise, in dem man den Wirkstoff mit den in der Galenik gebräuchlichen Trägersubstanzen, Füllstoffen, Zerfallsbeeinflussern, Bindemitteln, Feuchthaltemitteln, Gleitmitteln, Absorptionsmitteln, Verdünnungsmitteln, Geschmackskorrigentien, Färbemitteln usw. verarbeitet und in die gewünschte Applikationsform überführt. Siehe auch Remington's Pharmaceutical Science, 15^th ed. Mack Publishing Company, East Pennsylvania (1980).
Die bevorzugten Zubereitungen bestehen in einer Darreichungsform, die zur oralen Applikation geeignet ist. Solche Darreichungsformen sind beispielsweise Tabletten, Filmtabletten, Dragees, Kapseln, Pillen, Pulver, Lösungen oder Suspensionen oder auch Depotformen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel bzw. die pharmazeutischen Zusammensetzungen enthaltend mindestens eine der erfindungsgemäßen Verbindungen werden bevorzugt oral appliziert.
Entsprechende Tabletten können beispielsweise durch Mischen des Wirkstoffs mit bekannten Hilfsstoffen, beispielsweise inerten Verdünnungsmitteln wie Dextrose, Zucker, Sorbit, Mannit, Polyvinylpyrrolidon, Sprengmitteln wie Maisstärke oder Alginsäure, Bindemitteln wie Stärke oder Gelatine, Gleitmitteln wie Magnesiumstearat oder Talk und/oder Mitteln zur Erzielung eines Depoteffektes wie Carboxypolymethylen, Carboxymethylcellulose, Celluloseacetatphthalat oder Polyvinylacetat, erhalten werden. Die Tabletten können auch aus mehreren Schichten bestehen.
Entsprechend können Dragees durch Überziehen von analog den Tabletten hergestellten Kernen mit üblicherweise in Drageeüberzügen verwendeten Mitteln, beispielsweise Polyvinylpyrrolidon oder Schellack, Gummiarabicum, Talk, Titanoxid oder Zucker, hergestellt werden. Dabei kann auch die Drageehülle aus mehreren Schichten bestehen, wobei die oben bei den Tabletten erwähnten Hilfsstoffe verwendet werden können.
Lösungen oder Suspensionen mit den erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I können zusätzlich geschmacksverbessernde Mittel wie Saccharin, Cyclamat oder Zucker sowie z. B. Aromastoffe wie Vanillin oder Orangenextrakt enthalten. Sie können außerdem Suspendierhilfsstoffe wie Natriumcarboxymethylcellulose oder Konservierungsstoffe wie p-Hydrozybenzoate enthalten.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel I enthaltende Kapseln können beispielsweise hergestellt werden, indem man die Verbindung der allgemeinen Formel I mit einem inerten Träger wie Milchzucker oder Sorbit mischt und in Gelatinekapseln einkapselt.
Die Dosierung der zu verabreichenden Menge der Verbindungen schwankt innerhalb eines weiten Bereiches und kann jede wirksame Menge abdecken.
In Abhängigkeit des zu erzielenden Effektes und der Art der Verabreichung kann die Menge der zu verabreichenden Verbindung einen Bereich von 0,01 bis 50 mg umfassen. Beim Menschen liegt eine empfohlene tägliche Dosis im Bereich von 0,05 bis 10 mg.
Geeignete Dosierungen für die erfindungsgemäßen Verbindungen betragen von 0,1 bis 10 mg. Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden kontinuierlich, vorzugsweise täglich bis einmal wöchentlich verabreicht.
Die Erfindung umfasst ebenfalls die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I als therapeutischen Wirkstoff zusammen mit pharmazeutisch verträglichen und annehmbaren Hilfsstoffen und/oder Trägerstoffen.
Ebenfalls umfasst die Erfindung pharmazeutische Zusammensetzungen, die eine der pharmazeutisch aktiven, erfindungsgemäßen Verbindungen oder ein Gemisch von diesen oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz sowie pharmazeutisch verträgliche Hilfsstoffe und Trägerstoffe enthalten.
Pharmakologische Untersuchungen
Rezeptorbindungsaffinität
Die Rezeptorbindungsaffinität wurde bestimmt durch kompetitive Bindung eines spezifisch bindenden ³H-markierten Hormons (Tracer) und der zu testenden Verbindung an Rezeptoren im Cytosol aus tierischen Target-Organen. Dabei wurden Rezeptorsättigung und Reaktionsgleichgewicht angestrebt.
Der Tracer und steigende Konzentrationen der zu testenden Verbindung (Competitor) wurden bei 0-4°C über 18 h co-inkubiert mit der rezeptorhaltigen Cytosolfraktion. Nach Abtrennung des ungebundenen Tracers mit Kohle-Dextran-Suspension wurde für jede Konzentration der Rezeptor-gebundene Tracer-Anteil gemessen und aus der Konzentrationsreihe die IC₅₀ bestimmt. Als Quotient der IC₅₀-Werte von Referenzsubstanz und zu testender Verbindung (× 100 %) wurde die relative molare Bindungsaffinität (RBA) errechnet (RBA der Referenzsubstanz = 100 %).
Für die einzelnen Rezeptortypen wurden folgende Inkubationsbedingungen gewählt:
Progesteron-Rezeptor:
Uterus-Cytosol des Estradiol-geprimten Kaninchens, homogenisiert in TED-Puffer (20 mMTris/HCl, pH 7,4; 1 mM Ethylendiamintetraacetat, 2 mM Dithiothreitol) mit 250 mM Saccharose; aufbewahrt bei –30°C. Tracer: ³H-ORG 2058, 5 nM; Referenzsubstanz: Progesteron.
Glucocorticoid-Rezeptor:
Thymus-Cytosol der adrenalectomierten Ratte, Thymi aufbewahrt bei –30°C; Puffer: TED. Tracer: ³H-Dexamethason, 20 nM; Referenzsubstanz: Dexamethason.
Glucocorticoide/antiglucocorticoide Aktivität
Die antagonistische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen am Glucocorticoidrezeptor wurde durch Transaktivierungsversuche in HeLa-Zellen nachgewiesen.
HeLa-AGP-LUC Zellen wurden in DMEM Medium (ohne Phenolrot) kultiviert, versetzt mit 10 % fötalem Kälberserum (FCS), 2 mM L-Glutamin, Penicillin (100 U/ml), Streptomycin (100 μg/ml) und Geneticin (300 μg/ml) Die Zellen wuchsen bei 37°C in feuchter Athmosphäre und einem Luft/CO₂-Gemisch von 95:5 %. Ein Tag vor Aussaat in die Mikrotiterplatte wurden die Zellen auf Versuchsmedium umgestellt (3 % Dextran-Aktivkohle behandeltes FCS an Stelle von 10 % FCS). Die Aussaat in die Mikrotiterplatten (96-well) erfolgte in einer Konzentration von 10 000 Zellen/200 μl Versuchsmedium/well. Am nächsten Tag wurden die Zellen mit 0,1-0,2 % Äthanolkontrolle oder einem Glucocorticoidagonisten bzw. 10 nM DEX in behandelt (jeweils 6 Replikate). Vor der Lyse (1 Stunde, schütteln bei 400 rpm) mit Lysispuffer (100 μl/well, Promega, Katalognummer 3912) wurden die Zellen einmal mit 200 μl PBS/well gewaschen.
Die erfindungsgemäßen 11β-Benzaldoximderivate von D-Homoestra-4,9-dien-3-onen sind antiglucocorticoid wirkende Substanzen, die besser als die endogen Corticoide und das exogene, sehr stark bindende Glucocorticoid Dexamethason am Glucocorticoidrezeptor, aber weniger gut wie RU 38486 am Progesteronrezeptor binden. Die Verbindungen sind bezüglich der Rezeptorbindung besser dissoziert als RU 38486. (siehe Tabelle 1)
Tab. 1. Rezeptorbindung von ausgewählten Verbindungen
Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen überraschenderweise eine stärkere Bindung am Glucocorticoidrezeptor, eine schwächere Bindung am Progesteronrezeptor und eine bessere Dissoziation der Rezeptorwerte im Vergleich zu RU 38486.
Verbindungen mit diesem Wirkprofil sind geeignet für die Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten und/oder Symptomen, die auf einen endogenen Glucocorticoidinduzierten, insbesondere alters- und/oder stressbedingten, Cortisol-induzierten Androgenmangel zurückzuführen sind. Sie können zur Behandlung von Glucocorticoidbedingtem Hypogonadismus, sexuellen Dysfunktionen oder Infertilität beim Mann eingesetzt werden.
Im Gegensatz zu den 11β-Benzaldoximen von Estra-4,9-dien-3-onen des Standes der Technik binden die erfindungsgemäßen Verbindungen überraschend stärker am Glucocorticoidrezeptor und erweisen sich als Antiglucocorticoide.
Des weiteren binden die erfindungsgemäßen Verbindungen überraschend selektiv am Glucocorticoidrezeptor und verdängen dabei die natürlichen (endogenen) Liganden der Glucocorticoid-Rezeptoren, die Glucocorticoide, ohne selbst eine glucocorticoide Wirkung hervorzurufen. Es findet eine selektive Antagonisierung des Glucocorticoid-Rezeptors statt, der die Signalübertragung über diesen Rezeptor vermindert bzw. auch weitgehend verhindert.
Diese Reduzierung oder Verhinderung der Besetzung der Glucocorticoid-Rezeptoren durch Glucocorticoid-Rezeptorantagonisten ist besonders bei erhöhtem endogenen Glucocorticoidspiegel sinnvoll. Eine solche Erhöhung kann beispielsweise durch Altern, pathologische Erhöhung der sekretorischen Aktivität der Nebennierenrinde, physischen oder psychischen Stress und Alkohol – und Drogenmissbrauch hervorgerufen werden.
Die erfindungsgemäßen Glucocorticoidrezeptorantagonisten binden signifikant schwächer an anderen Steroidrezeptoren, wie z. B. an Mineralcorticoidrezeptoren, Östrogenrezeptoren, Progesteronrezeptoren und Androgenrezeptoren. Mit dem Begriff „signifikant schwächer" ist gemeint, dass die Bindung an anderen Steroidrezeptoren praktisch nicht zu Wirkungen führt.
Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist auch ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach einem der vorherigen Ansprüche umfassend

a) Umsetzung der Verbindungen der Formel II
mit Hydroxylamin oder dessen Salzen, vorzugsweise dem Hydrochlorid oder Hyrdrogensulfat, in einem Lösungsmittel (beispielsweise Pyridin, Methanol, Ethanol, Tetrahydrofuran), gegebenenfalls in Gegenwart einer organischen Base (Pyridin, Triethylamin), oder einer anorganischen Base (beispielsweise NaOH, KOH, NaHCO₃, KHCO₃ zu Verbindungen der Formel Ia;
und gegebenenfalls
b) Umsetzung der Verbindungen der Formel Ia mit einem Reagenz ausgewählt aus der Gruppe der C₁-C₆-Alkylhalogenide (beispielsweise C₁-C₆-Alkylchloride, C₁-C₆-Alkylbromide oder C₁-C₆-Alkyliodide), C₁-C₆-Acylhalogenide (beispielsweise C₁-C₆-Acylchloride oder C₁-C₆-Acylbromide); C₁-C₆-Carbonsäureanhydride, Benzoylhalogenide (beispielsweise Benzoylchlorid), C₁-C₄-Alkoxycarbonylhalogenide (beispielsweise Chlorameisensäuremethylester), C₁-C₄-Alkylthiocarbonylhalogenide (beispielsweise Chlorameisensäurethioethylester), C₁-C₆-Alkylaminocarbonylhalogenide, C₁-C₆-Alkylisocyanate (beispielsweise Ethylisocyanat), Arylaminocarbonylhalogenide, Arylisocyanate (beispielsweise 4-Trifluormethoxyphenylisocyanat).

Herstellung von Verbindungen der Formel II:
3-Methoxy-17a-D-Homoestra-1,3,5(10)-trien-17a-on (III) [M. W. Goldberg, S. Studer, Helv. Chim. Acta 1941, 24, 295; J. Gutzwiller, W. Meier, A. Fürst, Helv. Chim. Acta 1977, 60, 2258-2269] wird
mit Trimethylsulfoniumiodid und Kalium-tert.-butanolat in Dimethylsulfoxid [E. J. Corey, M. Chaykowsky, J. Amen. Chem Soc. 1962, 84: 3782-3783; G. Drefahl, K. Ponsold, H. Schick, Chem.Ber. 1964, 97, 3529-3535; C. E. Cook, R. C. Corley,M. E. Wall, J. Org. Chem. 1968, 33, 2789-2793] in ein Gemisch der 17(R)- und 17(S)-Spiroepoxide (IV) überführt,
das ohne weitere Trennung mit Natriummethylat ( EP 0411733 ) zu einem Gemisch von Va und Vb umgesetzt wird. Das resultierende Gemisch wird anschließend getrennt, beispielsweise durch chromatographische Reinigung.
Verbindung Va wird danach einer Birch-Reduktion (A. J. Birch, R. J. Harrison, Austral. J. Chemistry 1995, 8, 515) unterworfen um das Dienolderivat VIa zu erhalten.
In an sich bekannter Weise führt die Behandlung von VIa mit verdünnter Säure zum 3-Keto-5(10)-Derivat VIIa, das einer Bromierung/Dehydrobromierung in Pyridin unterworfen wird [M. Perelmann, E. Farkas J. Amer. Chem. Soc. 1960, 82, 2402] um zu dem 3-Keto-4,9-dien-Derivat VIIIa zu gelangen.
Zur Umwandlung des 4,9-Diens VIIIa in das 5(10),9(11)-Dien IXa ist eine Acetalisierung in der 3-Position notwendig. Die Acetalisierung kann sowohl mit Methanol zum Dimethylacetal, mit Ethan-1,2-diol zu dem 3-Ethylenketal bzw. mit Dimethylpropandiol zu dem 3-Neopentylketal erfolgen. Verbindung VIIIa läßt sich beispielsweise in guten Ausbeuten mit Ethandiol und Säure zum Ethylenketal IXa umsetzen. Die 17β-Hydroxygruppe kann anschließend verethert (z. B. zu IXb) oder verestert werden.
Die nachfolgende Epoxidierung des Dien-Systems von IX mit Hexafluoraceton und H₂O₂ [C. T. Ratcliffe, C. V. Hardin, L. R. Anderson, W. B. Fox, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1971, 784; Gasc (1974) Fr. Pat. 2201287;'R. Rhode, G. Neef, G. Sauer, R. Wiechert, Tetrahedron Letters 1984, 26, 2069-2072] führt zu einem ca. 4:1 Gemisch der 5α,10α- und 5β,10β-Epoxide X und XI, wenn R₂ für ein Wasserstoffatom, eine Alkyl- oder Acylgruppe steht.
Die Einführung des 11-Arylrestes erfolgt durch eine Übergangsmetall katalysierte Grignard-Reaktion unter Öffnung des Epoxids [G. Teutsch, A. Bélanger, Tetrahedron Letters 1979, 30, 2051-2054] und Umlagerung des primär gebildeten 10-Arylderivates nach der 11-Stellung. So entsteht bei der Umsetzung von Xa (R₂ = H) mit Brombenzaldehyd-ethylenketal in Gegenwart von Cu(I)-salzen (CuCl oder Cul] die am C-11 substituierte Verbindung XII, wobei aus dem α-Epoxid die entsprechende 11β-Aryl- und aus dem β-Epoxid XII die entsprechende 11α-Arylderivat entsteht.
Die saure Hydrolyse des Gemisches von XII ergibt ein Gemisch der 11β- und 11α-Benzaldehyde II und XIII, aus dem die 11β-konfigurierte Verbindung II durch Umkristallisation abgetrennt werden kann.
Beispiele
Beispiel 1
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim
956 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd werden in 10 ml Pyridin gelöst. Unter Argonschutz werden portionsweise 205 mg Hydroxylaminhydrochlorid zugegegeben. Nach 4 Stunden wird in 500 ml Eiswasser eingerührt, wobei die Substanz ausfällt. Man saugt den Niederschlag ab, wäscht mit Wasser, verd. HCl und Wasser neutral und trocknet an der Luft. Nach Eluation mit Methylenchlorid und Verdampfung des Lösungsmittels verbleiben 955 mg als Rohprodukt, das chromato-graphische gereinigt wird. Man erhält 550 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim als amorphes Produkt.
α_D = +193° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.50 (s, 3H, H-18); 2.18 (s, 1H, OH), 3.12 und 3.53 (2d, 2H, J = 8,4 Hz, CH₂O), 3.41 (s, 3H, OCH₃), 4.37 (d, 1H, J = 6.4 Hz, H-11α), 5.76 (s, 1H, H-4), 7.19 (d, 2H, J = 8.4 Hz, CH-arom.); 7.48 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 8.10 (s, 1H CH=N), 8.55 (s, 1H, NOH).
MS/m7e, 70 eV): 449.25518 (M⁺), 431.24438 (M⁺ – H₂O, 100 %);
und
187 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1Z)-oxim.
Herstellung der Ausgangsverbindung von Beispiel 1:
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd
Stufe A:
17a-(S)-Spiroepoxy-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-3-methylether
Zu einer Lösung von 16,1 g 3-Methoxy-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-17a-on in 500 ml DMSO werden bei 10°C unter Argonschutz 22 g Trimethylsulfoniumiodid und portionsweise 11,6 g Kalium tert.-butanolat zugegeben. Man rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur und gießt in 1,5 l Eiswasser ein, extrahiert den Niederschlag mit Methylenchlorid, wäscht die organische Phase mit Wasser, trocknet über Natriumsulfat, filtriert ab und verdampft die Lösung unter Vakuum. Man erhält 15,4 g, das als Rohprodukt in die nächste Stufe eingesetzt wird.
Zur Analyse werden 240 mg durch präparative Schcichtchromatographie gereinigt. Man erhält 120 mg 17a-(R)-Spiroepoxy-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-3-methylether.
Schmp. 82 bis 86°C (Methanol)
α_D = +13° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
1.06 (s, 3H, H-18), 2.45 und 3.10 (2d, 2H, J = 4.5 Hz, CH₂O), 3.78 (s, 3H, OCH₃), 6.63, 6.7 und 7,20 (3H, CH-arom.);
und 54 mg 17a-(S)-Spiroepoxy-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-3-methylether
Schmp. 142 bis 148°C (Methanol)
α_D = +39° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
1.05 (s, 3H, H-18), 2.41 und 2.88 (2d, 2H, J = 4.5 Hz, 17-CH₂O), 3.78 (s, 3H, OCH₃), 6.62, 6.7 und 7,21 (CH-arom.)
Stufe B:
3-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-17aβ-ol
Zu 15,1 g Gemisch 17a-(R,S)-Spiroepoxy-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-3-methylether (aus der Stufe A) in 500 ml DMSO werden 32,4 g Natriummethylat zugesetzt und die Mischung wird 5 Stunden bei 95°C gerührt. Man kühlt ab, gießt in 1,7 l Eiswasser ein, saugt Niederschlag ab, wäscht mit Wasser und trocknet an der Luft. Das Rohprodukt (16,2 g) wird durch Chromatographie an Kieselgel gereinigt. Man erhält 6,34 g 3-Methoxy-17aα-(methoxy-methyl)-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-17aβ-ol
Schmp. 128 bis 129°C (Methanol)
α_D = +44° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.88 (s, 3H, H-18), 3.20 und 3.51 (2d, 2H, J = 8.7 Hz, 17-CH₂O), 3.40 (s, 3H, OCH₃), 3.78 (s, 3H, OCH₃), 6.62, 6.7 und 7.2 (CH-arom.)
HPLC: 99,9 % F bei 278 nm
und
3,1 g 3-Methoxy-17aβ-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-17aα-ol.
Schmp. 162 bis 163°C (Methanol)
α_D = +48° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
1.02 (s, 3H, H-18), 2.34 (s, 1H, OH), 3.42 (s, 3H, OCH₃), 3.62 (s, 2H, 17-CH₂O), 3.78 (s, 3H, arom-OCH₃), 6.62, 6.7 und 7.2 (CH-arom.)
Stufe C:
3-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-2,5(10)-dien-17aβ-ol
Unter Argonschutz werden 300 ml Ammoniak kondensiert. Man kühlt auf –60°C, fügt 10 ml abs. THF zu, rührt 10 Minuten und färbt die Lösung durch portionsweise Zugabe von Natrium blau. Zu dieser Lösung tropft man 60 ml einer Lösung_; bestehend aus 70 ml abs. THF, 16 ml Methoxypropanol, und 3,49 g 3-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-1,3,5(10)-trien-17aβ-ol. Die Lösung entfärbt sich nach einiger Zeit und man fügt solange portionsweise Natrium zu, bis die Lösung über 30 Minuten stabil blau bleibt. Nach 3 Stunden wird durch Zugabe von Ammoniumchlorid (fest) die Reaktion abgebrochen, das Ammoniak wird verdampft. Man gibt 5 ml Isopropanol zu, rührt weitere 15 Minuten und fällt durch Zugabe von Wasser einen farblosen Niederschlag aus, der abgesaugt, mit Wasser gewaschen und getrocknet wird. Man erhält 3,45 g 3-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-2,5(10)-dien-17aβ-ol.
Schmp.: 144 bis 146°C (Aceton),
α_D = +96° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.87 (s, 3H, H-18); 2.28 (s, 1H, OH), 3.19 und 3.48 (2d, 2H, J = 8.7 Hz, CH₂O), 3.38 (s, 3H, OCH₃), 3.55 (s, 3H, arom.-OCH₃), 4.65 (m, 2H, H-4).
Stufe D:
17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-5(10)-en-3-on
3,2 g 3-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-2,5(10)-dien-17aβ-ol werden in 50 ml Methylenchlorid gelöst, mit 160 ml tert.-Butanol und 50 ml eines Gemisches aus 60 ml Wasser und 0,24 ml 60 %ige Perchlorsäure versetzt und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Mit wäßriger Natriumbicarbonat-Lösung wird der p_H-Wert auf 8 eingestellt, die Phasen werden getrennt, die organische Phase mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, abfiltriert und unter Vakuum verdampft. Man erhält 3,1 g Rohprodukt.
Schmp.: 160 bis 162°C (Methylenchlorid/tert.-Butylmethylether);
α_D = +158° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.88 (s, 3H, H-18); 2.30 (s, 1H, OH), 2.7 (q, 2H, H-4), 3.19 und 3.48 (2d, 2H, J = 8.7 Hz, CH₂O), 3.38 (s, 3H, OCH₃).
Stufe E:
17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-4,9-dien-3-on
7,3 g 17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-5(10)-en-3-on werden in 115 ml Pyridin gelöst und auf –70°C gekühlt. 7,0 g Pyridiniumbromidperbromid werden zugegeben, man nimmt die Reaktion aus dem Kältebad, rührt 20 Stunden bei Raumtemperatur und zersetzt mit Eiswasser. Der Niederschlag wird abgesaugt, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Man erhält 5,8 g Rohprodukt. Die Reinigung erfolgt durch Chromatographie an Kieselgel mit einem Toluol/Acéton-Gradienten. Man erhält 4,9 g 17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-4,9-dien-3-on.
Schmp.: 164 bis 166°C (Aceton);
α_D = –343° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
1.02 (s, 3H, H-18); 2.31 (s, 1H, OH), 3.20 und 3.49 (2d, 2H, J = 8.7 Hz, CH₂O), 3.39 (s, 3H, OCH₃), 4.37 (d, 1H, J = 6.4 Hz, H-11α), 5.65 (s, 1H, H-4).
GC/MS: 99,6 % F bei M⁺ + 1 = 331
Stufe F:
3,3-Ethylendioxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-5(10),9(11)-dien-17aβ-ol
8,6 g 17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-4,9-dien-3-on in 35 ml Methylenchlorid werden mit 7 ml Ethylenglykol gerührt und portionsweise mit 2,2 ml Trimethylchlorsilan versetzt. Nach 5 Stunden wird in wässrige Natriumbicarbonat-Lösung eingerührt, die Phasen werden getrennt, die organische Phasen mit Wasser neutral gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, abfiltriert und unter Vakuum verdampft. Das Rohprodukt (9,9 g) wird durch Chromatographie an Kieselgel mit einem Toluol/Aceton-Gradienten gereinigt wird. Ausbeute 8,5 g (Schaum aus Aceton/n-Hexan).
α_D = +68° (CHCl₃)
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.81 (s, 3H, H-18), 2,26 (s, 1H, OH), 3.23 und 3.44 (2d, 2H, J = 8,7 Hz, CH₂O), 3.39 (s, 3H, OCH₃), 3.98 (s, 4H, ethylenketal), 5.59 (m, 1H, H-11)
Stufe G:
5α,10α-Epoxy-3,3-ethylendioxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-9(11)-dien-17aβ-ol
8,4 g 3,3-Ethylendioxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-5(10),9(11)-dien-17aβ-ol werden in 85 ml Methylenchlorid gelöst; mit 2,1 ml Pyridin versetzt. Man kühlt auf 0°C ab und setzt nacheinander 2,1 ml Hexafluoraceton-Sesquihydrat und tropfenweise 8,5 ml 50 %-iges H₂O₂ zu. Man rührt 3 Stunden bei Raumtemperatur nach, fügt 20 ml wässrige Natriumbicarbonat-Lösung zu und trennt die Phasen. Die organische Phase wird mit 35 %-iger Natriumthiosulfat-Lösung, Natriumchlorid-Lösung und Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, abfiltriert und unter Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Säulenchromatographie gereinigt.
Schmp. 171 bis 173°C (Aceton);
α_D = –31° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.82 (s, 3H, H-18), 2,23 (s, 1H, OH), 3.21 und 3.39 (2d, 2H, J = 8,8 Hz, CH₂O), 3.37 (s, 3H, OCH₃), 3.86-3.95 (m, 4H, ethylenketal), 6.03 (d, 1H, J = 6.0 Hz, H-11);
LC/MS: 98,75 % F bei M⁺ + 1 = 391; 373 (M⁺ – H₂O, 100 %)
Stufe H:
4-[3,3-Ethylendioxy-5α,17aβ-dihydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-9-en-11β-yl]benzaldehyd-dimethylketal
Zu einer Grignard-Lösung (hergestellt aus 700 mg Magnesium in 10 ml abs. THF und 6,7 g Brombenzaldehyd-dimethylacetal in 3 ml abs. THF) werden 300 mg CuCl zugegeben und die Lösung wird auf –30°C abgekühlt. Bei dieser Temperatur tropft man eine Lösung von 2,25 g 5α,10α-Epoxy-3,3-ethylendioxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-9(11)-dien-17aβ-ol in 15 ml abs. THF zu, rührt 20 Minuten bei dieser Temperatur und läßt anschließend auf Raumtemperatur kommen. Nach einer Stunde wird mit wässriger Ammoniumchlorid-Lösung zersetzt, Essigester zugegeben und die organische Phase neutral gewaschen, getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Man erhält 6,6 g eines Öls, das durch Chromatographie gereinigt wird. Ausbeute 2,3 g als farbloses Harz, das ohne weitere Reinigung zur Hydrolyse der Schutzgruppen eingesetzt wird.
α_D = –5° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.41 (s, 3H, H-18); 2.20 (s, 1H, OH), 3.07 und 3.48 (2d, 2H, J = 8,4 Hz, CH₂O), 3.31,3.32 (2s, je 3H, 2 × OCH₃), 3.37 (s, 3H, CH₂OCH₃), 3.90-3.99 (m, 4H, Etylenketal), 4.11 (s, 1H, 5-OH), 4.26 (d, 1H, J = 6.8 Hz, H-11α), 5.35 (s, 1H, CH-ketal), 7.20 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.); 7.31 (d, 2H, J = 8.0 Hz).
Stufe I:
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd
2,25 g 4-[3,3-Ethylendioxy-5a,17aβ-dihydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-9-en-11β-yl]benzaldehyd-dimethylketal werden in 25 ml Aceton gelöst, 2,5 ml Wasser und 820 mg p-Toluolsulfonsäure werden zugefügt. Man rührt 1,5 Stunden bei Raumtemperatur, gießt in 600 ml Eiswasser ein, saugt den ausgefallenen Niederschlag ab, wäscht mit Wasser, wässriger Natriumbicarbonat-Lösung und Wasser, trocknet an der Luft. Das Rohprodukt (1,81 g) wird durch Chromatographie gereinigt wird. Ausbeute 1,43 g 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd.
Schmp. 87 bis 90°C (Aceton);
α_D = +161° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.48 (s, 3H, H-18); 3.11 und 3.52 (2d, 2H, J = 8,8 Hz, CH₂O), 3.41 (s, 3H, OCH₃), 4.43 (d, 1H, J = 6.8 Hz, H-11α), 5.76 (s, 1H, H-4), 7.37 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.); 7.80 (d, 2H, J = 8.0 Hz); 9.96 (s, 1H CH=O);
GC/MS: 99,9 % F bei M⁺ + 1 = 435
Beispiel 2
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim
365 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim werden in 15 ml Toluol gelöst. Unter Argonschutz tropft man 0,25 m Ethylisocyanat in 2 ml Toluol zu, rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur, gibt weitere 0,5 ml Ethylisocyanat zu, erwärmt 3 Stunden auf 50°C, läßt abkühlen und rührt weitere 10 Stunden bei Raumtemperatur. Durch Zugabe von wässriger Ammoniak-Lösung wird das Reaktionsgemisch zersetzt, die Phasen werden getrennt, die organische Phase wird neutral gewaschen getrocknet und unter Vakuum verdampft. Man erhält 379 mg eines farblosen Rohproduktes das durch präparative Schichtchromatographie an Kieselgel PF_{254 nm} mit tert. Butylmethylether gereinigt wird. Man erhält 237 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β- yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim als amorphes Produkt aus Aceton/n-Hexan.
α_D = +207° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.50 (s, 3H, H-18); 1.23 (t, 3H, CH₂CH₃) 3.12 und 3.52 (2d, 2H, J = 8.8 und 9.2 Hz, CH₂O), 3.39 (m, 2H, CH₂), 3.41 (s, 3H, OCH₃), 4.39 (d, 1H, J = 6.8 Hz, H-11α), 5.76 (s, 1H, H-4), 6.22 (t, 1H, NH), 7.26 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.); 7.59 (d, 2H, J = 8.0 Hz); 8.29 (s, 1H CH=NOCO).
LC/MS: M⁺ + 1 = 521
und
75 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzonitril (4811)
amorph aus (tert. Butylmethylether/Cyclohexan)
α_D = +151° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.46 (s, 3H, H-18); 3.11 und 3.52 (2d, 2H, J = 8.4 Hz, CH₂O), 3.41 (s, 3H, OCH₃), 4.39 (d, 1H, J = 7.2 Hz, H-11α), 5.76 (s, 1H, H-4), 7.30 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.); 7.57 (d, 2H, J = 8.0 Hz); IR: 2224 cm^–1 (C≡N); LC/MS: M⁺ +1 = 521
Beispiel 3
Zu 225 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim in 10 ml Touol werden unter Argonschutz 0,6 ml 4-Trifluormethoxyphenylisocyanat in 2 ml Toluol zugetropft. Man rührt 3 Stunden bei Raumtemperatur, fügt 20 ml wässrige Ammoniak-Lösung zu und rührt 1 Stunde nach. Zur Phasentrennung wird mit Methylenchlorid verdünnt, die organischen Phase wird neutral gewaschen, getrocknet und unter Vakuum verdampft. Man erhält 865 mg als Schaum, der durch Chromatographie gereinigt wird. Es werden 115 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-{O-[(4'-trifluormethoxy)phenylamino]carbonyl}oxim als amorphes Produkt aus tert.Butylmethyl-ether/Cyclohexan isoliert.
α_D = +178° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.51 (s, 3H, H-18); 1.23 (t, 3H, CH₂CH₃) 3.12 und 3.52 (2d, 2H, J = 8.4 und 8.8 Hz, CH₂O), 3.41 (s, 3H, OCH₃), 4.41 (d, 1H, J = 6.4 Hz, H-11α), 5.76 (s, 1H, H-4), 6.22 (t, 1H, NH), 7.21 (d, 2H, J = 8.4 Hz, CH-arom.) und 7.54 (d, 2H, J = 8.8 Hz); 7.30 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.) und 7.64 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 8.17 (s, 1H, NH), 8.37 (s, 1H CN=NOCO).
LC/MS: M⁺ +1 = 653
Beispiel 4
4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim-acetat
Zu 200 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim werden 4 ml eines 1:1 (v/v)-Gemisches von Acetanhydrid und Pyridin gegeben. Nach 4 Stunden wird mit Wasser verdünnt, mit CH₂Cl₂ extrahiert, neutral gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, abfiltriert und unter Vakuum eingeengt. Nach Reinigung durch präparative Schichtchromatographie an Kieselgel werden 135 mg 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim-acetat als farloser Schaum isoliert.
α_D = +182° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard): 0.51 (s, 3H, H-18); 2,07 (s, 3H, COCH₃) 3.42 und 3.54 (2d, 2H, J = 8.4 und 8.8 Hz, CH₂O), 4.41 (d, 1H, J = 6.8 Hz, H-11α), 5.78 (s, 1H, H-4), 7.24 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.) und 7.63 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 8.32 (s, 1H CH=N-R).
Beispiel 5
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim
5,2 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd werden in 50 ml Pyridin analog Beispiel 1 mit 970 mg Hydroxylamin; hydrochlorid umgesetzt, aufgearbeitet und gereinigt. Man erhält 4,1 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim.
Schmp. = 148°C (Methyltertiärbutylether)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.57 (s, 3H, H-18); 3.12 und 3.53 (2d, 2H, J = 8,4 Hz, CH₂O), 3.26, 3.37 (2s, 6H, OCH₃), 4.33 (d, 1H, J = 6.0 Hz, H-11α), 5.74 (s, 1H, H-4), 7.20 (d, 2H, J = 8.4 Hz, CH-arom.); 7.49 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 7.85 (s, 1H, NOH), 8.10 (s, 1H CH=N).
Herstellung der Ausgangsverbindung von Beispiel 5:
Stufe A:
4-[3,3-Ethylendioxy-5α,17aβ-dimethoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-estra-9-en-11β-yl]benzaldehyd-dimethylketal
Zu 1,08 g 4-[3,3-Ethylendioxy-5α,17aβ-dihydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homoestra-9-en-11β-yl]benzaldehyd-dimethylketal (Beispiel 1, Stufe H) in 40 ml Toluol werden 784 mg Kalium tert.-butanolat gegeben. Man rührt 10 Minuten bei Raumtemperatur, fügt 3 ml Methyliodid zu und rührt bis zur vollständigen Umsetzung, zersetzt mit Wasser, trennt die Phasen, wäscht die organische Phase neutral, trocknet und filtriert ab und engt unter Vakuum ein. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung zur Hydrolyse der Schutzgruppen eingesetzt wird.
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.50 (s, 3H, H-18); 3.22, 3.23 (2s, je 3H, 2 × OCH₃), 3.31, 3.32 (3s, 3 × OCH₃, 5,17,17-CH₂), 3.37 (s, 2H, CH₂O), 3.78-4.02 (m, 4H, Etylenketal), 4.21 (d, 1H, J = 6.8 Hz, H-11α), 5.35 (s, 1H, CH-ketal), 7.20 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.); 7.30 (d, 2H, J = 8.0 Hz, CH-arom.).
Stufe B:
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd
8 g 4-[3,3-Ethylendioxy-5α-hydroxy-17aβ-methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homoestra-9-en-11β-yl]benzaldehyd-dimethylketal werden in 250 ml Aceton mit 25 ml Wasser und 6 g p-Toluolsulfonsäure analog Beispiel 1 umgesetzt.
Ausbeute 5 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd als kristalliner Rückstand.
α_D = +129° (CHCl₃)
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.55 (s, 3H, H-18); 3.26 (s, 3H, OCH₃), 3.35 (s, 3H, OCH₃), 3.38 (d, 2H, J = 3.6 Hz, CH₂O), 4.38 (d, 1H, J = 6.0 Hz, H-11α), 5.75 (s, 1H, H-4), 7.35 (d, 2H, J = 8.4 Hz, CH-arom.); 7.79 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 9.96 (s, 1H CH=O).
Beispiel 6
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim
1,1 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim werden bei Raumtemperatur in 16 ml Toluol gelöst und mit 1,6 ml Triethylamin sowie 0,65 ml Ethylisocyanat versetzt. Die Lösung wird 3 Stunden auf 65°C erwärmt. Man lässt auf Raumtemperatur abkühlen. Durch Zugabe von wässriger Ammoniak-Lösung wird das Reaktionsgemisch zersetzt, die Phasen werden getrennt, die organische Phase wird neutral gewaschen getrocknet und unter Vakuum verdampft.
Zur Reinigung wird aus Essigsäureethylester umkristallisiert. Man erhält 0.7 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.55 (s, 3H, H-18); 1.23 (t, 3H, CH₂CH₃) 3.10 und 3.55 (2d, 2H, J = 8,4 Hz, CH₂O), 3.26, 3.37 (2s, 6H, OCH₃), 4.31 (d, 1H, J = 6.2 Hz, H-11α), 5.73 (s, 1H, H-4), 6.23 (t, 1H, NH), 7.20 (d, 2H, J = 8.2 Hz, CH-arom.); 7.50 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 8.29 (s, 1H CH=NOCO).
Beispiel 7
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylthio)carbonyl]oxim
1.1 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim werden in 15 ml Pyridin gelöst und auf 0°C gekühlt. Dann werden 1,3 ml Chlorameisensäure-S-ethylester ohne weitere Kühlung zugetropft und es wird 3 Stunden gerührt. Danach werden 30 ml Essigsäureethylester zugegeben und die Lösung auf 10°C gekühlt. Es wird mit 10 %iger Salzsäure auf pH = 2 eingestellt. die Phasen werden getrennt, die organische Phase wird neutral gewaschen getrocknet und unter Vakuum verdampft.
Zur Reinigung wird aus Methyltertiärbutylether umkristallisiert. Man erhält 0.8 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd(1E)-[O-(ethylthio)carbonyl]oxim.
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.58 (s, 3H, H-18); 1.38 (t, 3H, CH₂CH₃) 3.12 und 3.58 (2d, 2H, J = 8,0 Hz, CH₂O), 3.24, 3.36 (2s, 6H, OCH₃), 4.41 (d, 1H, J = 6.2 Hz, H-11α), 5.80 (s, 1H, H-4), 7.25 (d, 2H, J = 8.2 Hz, CH-arom.); 7.62 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 8.31 (s, 1H CH=NOCS).
Beispiel 8
4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-(O-acetyl)oxim
1 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim werden analog Beispiel 4 umgesetzt. Nach Kristallisation aus Essigsäureethylester erhält man 0.8 g 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-(O-acetyl)oxim.
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃, δ in ppm mit TMS als internen Standard):
0.57 (s, 3H, H-18); 2,0 (s, 3H, COCH₃) 3.12 und 3.53 (2d, 2H, J = 8,6 Hz, CH₂O), 3.24, 3.38 (2s, 6H, OCH₃), 4.40 (d, 1H, J = 6.6 Hz, H-11α), 5.77 (s, 1H, H-4), 7.22 (d, 2H, J = 8.4 Hz, CH-arom.); 7.58 (d, 2H, J = 8.4 Hz); 7.85 (s, 1H, NOH), 8.33 (s, 1H CH=N).

Claims

11β-Benzaldoxime der allgemeinen Formel I

Verbindungen nach Anspruch 1 dadurch gekennzeichnet, dass R₁ ein Wasserstoffatom, eine C₁-C₄-Alkyl-, C₂-C₄-Acyl-; C₁-C₄-Alkoxycarbonylgruppe, C₁-C₄-Alkylthiocarbonyl-, C₁-C₄-Alkylaminocarbonyl-, Phenylaminocarbonyl-, (4-Trifluormethoxyphenyl)aminocarbonyl-Gruppe, und R₂ ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Ethyl-, Acetyl- oder Benzoylgruppe sind.

Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2, nämlich 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim; 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1Z)-oxim; 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim; 4-[17aβ-Acetoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-oxim; 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-(O-acetyl)oxim; 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-(O-acetyl)oxim; 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(methoxy)carbonyl]oxim; 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(methoxy)carbonyl]oxim; 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethoxy)carbonyl]oxim; 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethoxy)carbonyl]oxim; 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylthio)carbonyl]oxim; 4-[17aβ-Methoxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim; 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-[O-(ethylamino)carbonyl]oxim; 4-[17aβ-Hydroxy-17aα-(methoxymethyl)-17a-homo-3-oxoestra-4,9-dien-11β-yl]benzaldehyd-(1E)-{O-[(4'-trifuormethoxy)phenylamino)carbonyl]oxim;

Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach einem der vorherigen Ansprüche umfassend a) Umsetzung der Verbindungen der Formel II

mit Hydroxylamin in einem Lösungsmittel in Gegenwart einer organischen oder anorganischen Base zu Verbindungen der Formel Ia;

und gegebenenfalls b) Umsetzung der Verbindungen der Formel Ia mit einem Reagenz ausgewählt aus der Gruppe der C₁-C₆-Alkylhalogenide, C₁-C₆-Acylhalogenide; C₁-C₆-Carbonsäureanhydride, Benzoylhalogenide, C₁-C₄-Alkoxycarbonylhalogenide, C₁-C₄-Alkylthiocarbonylhalogenide, C₁-C₆-Alkylaminocarbonylhalogenide, C₁-C₆-Alkylisocyanate, Arylaminocarbonylhalogenide, Arylisocyanate.

Pharmazeutische Zusammensetzungen enthaltend eine oder mehrere der Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zusammen mit pharmakologisch verträglichen Hilfs- und Trägerstoffen.