DE102004009012A1

DE102004009012A1 - Testelement mit einer Kapillare zum Transport einer flüssigen Probe

Info

Publication number: DE102004009012A1
Application number: DE102004009012A
Authority: DE
Inventors: Volker Zimmer
Original assignee: Roche Diagnostics GmbH
Current assignee: Roche Diagnostics GmbH
Priority date: 2004-02-25
Filing date: 2004-02-25
Publication date: 2005-09-15
Also published as: CN1922484A; WO2005080978A1; US20070041869A1; CA2556577A1; HK1104602A1; EP1723413A1; JP4653156B2; CN1922484B; CA2556577C; US7901622B2; JP2007524102A

Abstract

Die Erfindung bezieht sich auf ein Testelement mit mindestens einer Kapillare (9) zum kontinuierlichen Transport einer flüssigen Probe (4) in einer Tranportrichtung (5), wobei in der Kapillare (9) in der Transportrichtung (5) mehrere Zonen (10) aufeinander folgen, die verschiedene Materialien enthalten, mit denen Wasser unterschiedliche Kontaktwinkel alpha aufweist.

Description

Die Erfindung bezieht sich auf ein Testelement umfassend eine Kapillare zum Transport einer flüssigen Probe in einer Transportrichtung, wobei in der Kapillare in der Transportrichtung verschiedene Zonen aufeinander folgen.
Zur Analyse von Proben, beispielsweise Körperflüssigkeiten wie Blut oder Urin, werden häufig Testelement-Analysesysteme verwendet, bei denen sich die zu analysierenden Proben auf einem Testelement befinden und gegebenenfalls mit einer oder mehreren Reagenzien auf dem Testelement reagieren, bevor sie analysiert werden. Die optische, insbesondere photometrische Auswertung von Testelementen stellt eines der gebräuchlichsten Verfahren zur schnellen Bestimmung der Konzentration von Analyten in der Probe dar. Photometrische Auswertungen werden allgemein im Bereich der Analytik, Umweltanalytik und vor allem im Bereich der medizinischen Diagnostik eingesetzt.

Es gibt verschiedene Formen von Testelementen. Bekannt sind zum Beispiel im Wesentlichen quadratische Plättchen, die als Slides bezeichnet werden, in deren Mitte sich ein mehrschichtiges Testfeld befindet. Diagnostische Testelemente, die streifenförmig ausgebildet sind, werden als Teststreifen bezeichnet. Im Stand der Technik sind Testelemente umfassend beschrieben, beispielsweise in den Dokumenten DE-A 197 53 847, EP-A 0 821 233, EP-A 0 821 234 oder WO 97/02487. Die ebenfalls aus dem Stand der Technik bekannten Kapillarspalttestelemente sind Testelemente, bei denen die Probenflüssigkeit von einem Probenaufgabeort zu einem davon entfernten Probendetektionsort mit Hilfe kapillarer Kräfte in einem Transportkanal (Kapillarkanal, Kapillarspalt) bewegt wird, um dort eine Nachweisreaktion einzugehen.

Aus der EP-B1 0 596 104 ist eine diagnostische Assayvorrichtung mit einem diagnostischen Element bekannt, die einen Kapillarraum, durch den eine Reaktionsmischung fließt, und eine nicht absorbierende Oberfläche umfasst, die fähig zum Immobilisieren mindes tens eines Zielliganden aus der Reaktionsmischung in mindestens einer Zone ist, wobei die nicht-absorbierende Oberfläche darauf immobilisierte Teilchen aufweist, welche einen darauf immobilisierten Rezeptor umfassen. Diese Assayvorrichtung enthält ein Zeittor, das mindestens eine hydrophobe Zone in dem Kapillarraum umfasst, welche den Fluss durch den Kapillarraum zu der mindestens einen Zone verzögert, bis die hydrophobe Zone durch Bindung einer Komponente der Reaktionsmischung ausreichend hydrophil gemacht wird. Dabei sind die Oberflächen der Kapillare glatt oder weisen Rillen auf, die parallel oder senkrecht zum Fluss der Probe stehen. Die unterschiedliche Geschwindigkeit des Flusses der Reagenzien wird mit Hilfe von Spalten erreicht, wobei das Variieren der Größe der jeweiligen Spalte die Kapillarität in der Spalte und somit den Fluss der Reaktionsmischung verändert.

Im Stand der Technik bekannte Testelemente bestehen im Allgemeinen aus vertikalen oder horizontalen Aufbauten, die von einer Flüssigkeitsprobe (z.B. Blut, Plasma, Urin) durchströmt werden. Eine räumliche Trennung von Reagenzien für Vorreaktionen, Entstörreaktionen (z.B. Vitamin C-Entstörung), Anreicherung an Substanzen oder Reagenzientrennung wegen Unverträglichkeit in diesen Testelementen ist durch einen vertikalen Aufbau von Reagenzienschichten (beispielsweise imprägnierte Gewebe, Papiere, Membrane oder mikroporöse Filme) möglich. Im horizontalen Aufbau können verschiedene Reagenzzonen hintereinander, montiert oder diskret imprägniert, erzeugt werden. Eine Steuerung der Verweilzeit in den jeweiligen Zonen oder Kompartimenten ist bisher jedoch nur durch mechanische Einwirkung von außen möglich (zum Beispiel Reflotron, Reaktionsklappe). Der Nachweis verschiedener Parameter in einem Schnelltest bedingt oft eine Steuerung der Verweilzeit in Reaktions- oder Anreicherungszonen, z.B. je nach Reaktionszeit oder Lösezeit. Die mechanische Steuerung dieser Verweilzeit durch ein Gerät erfordert jedoch einen komplexen Geräteaufbau, der hohe Kosten verursacht.

Der vorliegenden Erfindung liegt deshalb die Aufgabe zugrunde, ein Testelement verfügbar zu machen, das die Nachteile des Standes der Technik vermeidet. Insbesondere soll das Testelement vorgegebene Verweilzeiten einer flüssigen Probe in verschiedenen Zonen kostengünstig und ohne weitere Steuerung mit einem einfachen Aufbau ermöglichen. Dadurch soll eine räumliche und zeitliche Trennung von Reaktionen der Probe auf dem Testelement erreichbar sein.

Erfindungsgemäß wird diese Aufgabe gelöst durch ein Testelement, umfassend mindestens eine Kapillare zum kontinuierlichen Transport einer flüssigen Probe in einer Transportrichtung, wobei in der Kapillare in der Transportrichtung mehrere Zonen aufeinander folgen, die verschiedene Materialien enthalten, mit denen Wasser unterschiedliche Kontaktwinkel α aufweist.

Anhand des Kontaktwinkels α, den Wasser (bzw. eine Wasser enthaltende flüssige Probe) mit der festen Innenoberfläche der Kapillare bildet, lässt sich die Benetzungstendenz und damit die Fließgeschwindigkeit der flüssigen Probe in der Kapillare ableiten. Bei der Berührung eines Flüssigkeitstropfens mit einer festen Unterlage können zwei Extremfälle auftreten:

– vollkommene Benetzung: die Adhäsionskräfte sind größer als die Kohäsionskräfte. Deshalb wird sich die Flüssigkeit auf der Oberfläche des festen Körpers ausbreiten;
– unvollkommene Benetzung: die Adhäsionskräfte sind (wesentlich) kleiner als die Kohäsionskräfte. Deshalb wird sich die Flüssigkeit zu einem kugelförmigen Tropfen zusammenziehen.

Die Benetzungstendenz und folglich die Fließgeschwindigkeit der flüssigen Probe in der Kapillare sind umso größer, je kleiner der Kontaktwinkel α ist. Die Füllzeit zur Füllung einer Kapillare pro Strecke steigt mit dem Kontaktwinkel exponentiell an. Bei Wasser enthaltenden Proben genügt die Angabe des Kontaktwinkels von Wasser, um die materialspezifischen kapillaren Eigenschaften zu charakterisieren. Das erfindungsgemäße Testelement macht sich diesen Effekt zunutze, indem die Innenoberfläche der Kapillare in Zonen mit verschiedenen Materialien eingeteilt ist, so dass eine flüssige Probe in diesen Zonen der Kapillare unterschiedliche Kontaktwinkel α bildet und somit kontinuierlich mit sich unterscheidenden Geschwindigkeiten durch diese Zonen der Kapillare fließt. Damit lässt sich gezielt beeinflussen, wie lange sich die flüssige Probe in der jeweiligen Zone befindet und zum Beispiel mit dort platzierten Reagenzien reagiert. Folglich können in einer Kapillare eines erfindungsgemäßen Testelements nacheinander verschiedene Messungen durchgeführt werden, insbesondere auch komplexe Messungen, die durch den in Zonen eingeteilten Aufbau der Kapillare und durch die sich daraus ergebende zeitliche Trennung der Reaktionsschritte ermöglicht werden. Bei einer parallelen Anordnung mehrerer Kapillaren in einem Testelement können sogar gleichzeitig und parallel verschiedene Mehrfachmessungen mit einer flüssigen Probe durchgeführt werden.

Die flüssige Probe ist bevorzugt eine Wasser enthaltende Probe, zum Beispiel Plasma, Blut, interstitielle Flüssigkeit, Urin, Proben der Wasseranalytik, insbesondere Abwasser, Speichel oder Schweiß.

Die Transportrichtung ist diejenige Richtung, in der die Probe aufgrund von Kapillarkräften von einem Probenaufnahmebereich des Testelements aus durch die Kapillare transportiert wird.

In einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfassen die in der Kapillare in Transportrichtung aufeinanderfolgenden Zonen mindestens eine Reaktions-, Anreicherungs- oder Nachweiszone und mindestens eine Verzögerungszone, wobei in der Kapillare zweckmäßig zwischen je zwei sich unterscheidenden Zonen eine Verzögerungszone liegt. Eine Reaktionszone ist dabei eine Zone, in der die flüssige Probe mit dort platzierten Reagenzien reagiert. Es kann sich dabei zum Beispiel um Vorreaktionen, Entstörreaktionen oder Felder zur Reagenzientrennung handeln. In einer Anreicherungszone wird ein Bestandteil der flüssigen Probe angereichert. Eine Nachweiszone ist so gestaltet, dass sich dort bestimmte Bestandteile der flüssigen Probe oder ihre Reaktion mit den Reagenzien nachweisen lassen. Ein Beispiel dafür ist eine Zone, in der eine Nachweisreaktion für Glukose in einer Blutprobe und deren photometrische Auswertung stattfindet. In einer Verzögerungszone wird der Fluss der Probe verzögert, so dass diese erst mit einer zeitlichen Verzögerung in die in Transportrichtung auf eine Verzögerungszone nachfolgende Zone gelangt. In den Reaktions-, Anreicherungs- und Nachweiszonen soll sich die Probe schnell verteilen, damit sie mit den dort platzierten Reagenzien reagieren kann. In den Verzögerungszonen soll die Probe langsamer fließen, so dass sie eine gewisse Zeit benötigt, um sich aus der davor angeordneten Zone durch die jeweilige Verzögerungszone zu bewegen. Daher ist der Kontaktwinkel α mit Wasser in den Reaktions-, Anreicherungs- oder Nachweiszonen kleiner (zur schnellen Füllung) und in den Verzögerungszonen größer (zum „Zurückhalten" der Probe, also zur langsamen Füllung). Zwischen je zwei sich unterscheidenden Zonen liegt zweckmäßig (aber nicht zwingend) eine Verzögerungszone, um Reaktionen in den beiden anderen Zonen zu „trennen".

In einer weiteren Ausführungsform der vorliegenden Erfindung wechseln sich in Transportrichtung Zonen, die Materialien mit kleineren Kontaktwinkeln α, vorzugsweise mit 0° < α < 30° in Bezug auf Wasser enthalten, mit Zonen, die Materialien mit größeren Kontaktwinkeln α, vorzugsweise mit 30° < α < 90° in Bezug auf Wasser enthalten, ab. Im Zusammenhang mit dieser Erfindung bedeutet ein „kleinerer" Kontaktwinkel, dass dieser relativ zu dem „größeren" Kontaktwinkel einen kleineren Wert besitzt, wobei der kleinere Kontaktwinkel insbesondere zwischen 0° und 30° und der größere zwischen 30° und 90° liegen kann. Die Zonen, die Materialien mit kleineren Kontaktwinkeln, vorzugsweise mit α < 30° bezüglich Wasser enthalten, sind schnellere Füllstrecken, auf die jeweils eine langsamere Füllstrecke mit größerem Kontaktwinkel α, vorzugsweise mit α > 30° folgt. Der Kontaktwinkel in den Zonen mit α > 30° bezüglich Wasser beträgt vorzugsweise 50° bis 85° für Wasser.

In einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst die Kapillare vier Innenwände und weist einen im Wesentlichen rechteckigen Querschnitt auf. Die kürzeren Seiten des im Wesentlichen rechteckigen Querschnitts sind dabei die für die wirkenden Kapillarkräfte relevanten Abstände in der Kapillare. Diese Form der Kapillare hat den Vorteil, dass sie sich für das erfindungsgemäße Testelement mit wenigen Arbeitsschritten herstellen lässt (siehe erfindungsgemäßes Verfahren, wie nachstehend beschrieben). Die vier Innenwände können dabei ohne großen Aufwand aus verschiedenen Materialien mit unterschiedlichen Wasser-Kontaktwinkeln gefertigt werden. In Zonen mit kleinerem Kontaktwinkel, insbesondere mit α < 30° genügt es zum schnellen Befüllen dieser Zonen mit einer flüssigen Probe, dass nur eine der vier Innenwände eine Oberfläche mit einem kleineren Kontaktwinkel, insbesondere mit α < 30° besitzt. Mit den übrigen drei Innenwänden kann Wasser auch größere Kontaktwinkel bilden.

Die Kapillare enthält daher vorzugsweise auf der Länge (Strecke) der Reaktions-, Anreicherungs- und Nachweiszonen mindestens eine Innenwand mit einer Oberfläche mit einem kleineren Kontaktwinkel, insbesondere mit α < 30° bezüglich Wasser. Auf der Länge der Verzögerungszonen enthält die Kapillare hingegen möglichst an allen Innenwänden Oberflächen mit einem größeren Kontaktwinkel, insbesondere mit α > 30° bezüglich Wasser. Hier soll sich die flüssige Probe entlang möglichst allen vier Innenwänden gleich langsam in der Kapillare in Transportrichtung ausbreiten.

In einer besonders bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung enthalten die Zonen in der Kapillare, die Oberflächenmaterialien mit einem kleineren Kontaktwinkel, insbesondere mit α < 30° bezüglich Wasser aufweisen, ein mit siedendem Wasser oder Wasserdampf zumindest oberflächlich oxidiertes Element oder eine zumindest oberflächlich oxidierte Legierung, wobei das Element aus der Gruppe Al, Si, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Cu, Ni, Zn, Ga, Ge, Zr, Nb, Cd, In, Sn, Sb stammt oder die Legierung zumindest zwei Elemente aus der Gruppe Al, Si, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Cu, Ni, Zn, Ga, Ge, Zr, Nb, Cd, In, Sn, Sb, Mg, Ca, Sr, Ba enthält. Ein Verfahren zur Herstellung einer solchen Oberflächenbeschichtung ist aus WO 99/29435 bekannt. Auf einer so hergestellten Aluminiumoxid-Oberflächenbeschichtung (AluOx) weist Wasser zum Beispiel einen Kontaktwinkel α < 10° auf. Die Wände der Kapillare können ein Material aus der Gruppe Kunststoff, Metall, Glas, Keramik, Papier, Vlies oder Karton enthalten, das auf seiner der Kapillarinnenseite zugewandten Oberfläche die mit siedendem Wasser oder Wasserdampf oxidierte Schicht trägt. Besonders bevorzugt sind als oxidierte Elemente Al, Si, Ti oder Zr und als oxidierte Legierungen solche mit Al, Si, Ti oder Zr, die mit zumindest einem Element aus der Gruppe Mg, Ca, Sr oder Ba legiert sind.

In einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung enthalten die Zonen in der Kapillare, die Materialien mit einem Kontaktwinkel von α > 30° bezüglich Wasser aufweisen, zumindest ein Material aus der folgenden Gruppe: Polyethylen (PE), Polyester, insbesondere Polyethylenterephthalat (PET), Polyamide (PA), Polycarbonat (PC), Acrylnitril-Butadien-Styrol (ABS), Polystyrol (PS), Polyvinylchlorid (PVC), Cellulosederivate (z.B. -acetate (CA), -nitrat (CN)), Polyvinylpyrrolidon (PVP), Polyvinylalkohole (beides insbesondere langkettige, wasserunlösliche Typen), Polyurethane (PUR), Polyrnethylmethacrylat (PMMA), Polypropylen (PP), Wachse, fluorierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Polytetrafluorethylen (PTFE), nicht passiviertes aufgedampftes Metall.

Dabei bewirken folgende Materialien eine kurze Verzögerungszeit: Cellulosederivate (z.B. -acetate (CA), -nitrat (CN)), Polyamide (PA), Polyvinylpyrrolidon (PVP), Polyvinylalkohole (beides insbesondere langkettige, wasserunlösliche Typen) und Polyurethane (PUR).

Mittlere Verzögerungszeiten erhält man mit: Polymethylmethacrylat (PMMA), Polycarbonat (PC), Polyvinylchlorid (PVC), Polyester, insbesondere Polyethylenterephthalat (PET), Polystyrol (PS) und Acrylnitril-Butadien-Styrol (ABS).

Lange Verzögerungszeiten ergeben sich bei Verwendung von: Polyethylen (PE), Polypropylen (PP), Wachse, fluorierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Polytetrafluorethylen (PTFE) und nicht passiviertes aufgedampftes Metall. Wachse sind dabei alle Materialien, die technisch als Wachse bezeichnet werden, nicht nur rein chemisch.

Die nach innen gewandten Oberflächen der Kapillare des erfindungsgemäßen Testelements weisen in den Verzögerungszonen vorzugsweise mindestens eines dieser Materialien auf.

In der Kapillare befinden sich vorzugsweise im Bereich der Reaktions-, Anreicherungs- oder der Nachweiszonen die jeweils benötigten Reagenzien. Diese werden durch geeignete Verfahren in die jeweiligen Zonen gebracht, z.B. durch ein Beschichtungsverfahren. Es kann beispielsweise eine wässrige Lösung der Reagenzien verwendet werden, die dort platziert wird. Geeignete Verfahren sind z.B. Ink-Jet-Verfahren, Beschichten mit Rollen, z.B. Gravur-Rollen, Flexodruck, Siebdruck, Tampon-Druck, Fließer- oder Gießer-Technik.

Anschließend wird die Lösung getrocknet, d.h. das Lösungsmittel (z.B. Wasser) wird verdampft.

Die Erfindung bezieht sich weiterhin auf ein Verfahren zur Herstellung von Kapillaren für Testelemente mit folgenden Verfahrensschritten:

(A) Aufbringen mindestens eines Verzögerungsmaterials mit einem größeren Kontaktwinkel, vorzugsweise mit 30° < α < 90° bezüglich Wasser in Form von mindestens einem zur Längsrichtung der Kapillare senkrecht verlaufenden Streifen auf die Oberfläche eines Trägers mit einem Trägeroberflächenmaterial mit einem kleineren Kontaktwinkel, vorzugsweise mit 0° < α < 30° bezüglich Wasser,
(B) Aufbringen mindestens einer Reagenzie auf die Oberfläche des Trägermaterials zwischen den Streifen aus Verzögerungsmaterial,
(C) Aufbringen von linienförmigen Seitenbegrenzungen in Längsrichtung der Kapillare im Wesentlichen auf der gesamten Länge des Trägers, die das Verzögerungsmaterial und gegebenenfalls die mindestens eine Reagenzie zum Teil abdecken,
(D) Aufbringen einer Abdeckschicht, die auf den linienförmigen Seitenbegrenzungen befestigt wird und
(E) Abteilen von mindestens einer Kapillare für einzelne Testelemente.

Das Verzögerungsmaterial ist dabei vorzugsweise ein Material aus der folgenden Gruppe:
Polyethylen, Polyethylenterephthalat, Polyamide, Polycarbonat, Acrylnitril-Butadien-Styrol oder Polyvinylchlorid.

Das Trägeroberflächenmaterial ist vorzugsweise ein als Schicht auf den Träger aufgebrachtes Material, das ein mit siedendem Wasser oder Wasserdampf zumindest oberflächlich oxidiertes Element oder eine zumindest oberflächlich oxidierte Legierung enthält, wobei das Element aus der Gruppe Al, Si, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Cu, Ni, Zn, Ga, Ge, Zr, Nb, Cd, In, Sn, Sb stammt oder die Legierung zumindest zwei Elemente aus der Gruppe Al, Si, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Cu, Ni, Zn, Ga, Ge, Zr, Nb, Cd, In, Sn, Sb, Mg, Ca, Sr, Ba enthält. Besonders bevorzugt handelt es sich dabei um AluOx mit einem Kontaktwinkel α bezüglich Wasser von < 10°. Der mit diesem Trägeroberflächenmaterial beschichtete Träger besteht beispielsweise aus Kunststoff, Metall, Glas, Keramik, Papier, Vlies oder Karton. Die Längsrichtung der Kapillare entspricht der Transportrichtung, in der die flüssige Probe in der Kapillare durch Kapillarkräfte bewegt wird. Die Breite des jeweiligen Streifens aus Mate rial mit einem größeren Kontaktwinkel bzgl. Wasser entspricht der Länge der jeweiligen Verzögerungszone in der Kapillare des fertigen Testelements. Die mindestens eine Reagenzie wird zwischen den Streifen auf das Trägeroberflächenmaterial aufgebracht, dort wo sich in den fertigen Kapillaren die Reaktions-, Anreicherungs- oder Nachweiszonen befinden werden. Die Dicke der Seitenbegrenzungen bestimmt die kapillarwirksame Höhe der fertigen Kapillare. Sie dienen als Seitenwände der einzelnen Kapillaren und als Abstandhalter zwischen dem Träger und der Abdeckschicht. Vorzugsweise liegt die Dicke der Seitenbegrenzungen zwischen 10 und 300 μm. Die Abdeckschicht enthält vorzugsweise eine der Innenseite der Kapillare zugewandte Oberfläche aus einem Material mit einem Kontaktwinkel bezüglich Wasser von > 30%, z.B. aus Polyethylen, Polyethylenterephthalat, Polyamiden, Polycarbonat, Acrylnitril-Butadien-Styrol, Polystyrol oder Polyvinylchlorid. Die Innenoberfläche der Abdeckschicht kann jedoch auch ein Material enthalten, mit dem Wasser einen kleineren Kontaktwinkel bildet. Durch das Aufbringen der Abdeckschicht werden Kapillaren mit einem im Wesentlichen rechteckigen Querschnitt erzeugt, deren Innenwände durch das Material der Seitenbegrenzungen, das Trägeroberflächenmaterial abwechselnd mit Streifen aus Verzögerungsmaterial und dem Abdeckschichtoberflächenmaterial begrenzt werden. Nun können eine oder mehrere parallel verlaufende Kapillaren abgeteilt werden, zum Beispiel durch Schnitte in Längsrichtung im Bereich der Seitenbegrenzungen.

Vorzugsweise wird das Verzögerungsmaterial nach einem der folgenden Verfahren auf dem Trägeroberflächenmaterial aufgebracht:

(i) Beschichten aus dem gasförmigen oder dampfförmigen Zustand,
(ii) Beschichten aus dem flüssigen, breiigen oder pastenförmigen Zustand,
(iii) Beschichten aus dem ionisierten Zustand durch elektrolytisches oder chemisches Abscheiden oder
(iv) Beschichten aus dem festen, d.h. körnigen oder pulvrigen Zustand, beispielsweise die Pulverbeschichtung oder die Beschichtung durch Sintern.

Die Seitenbegrenzungen und die Abdeckschicht werden vorzugsweise durch Kleben oder Schweißen aufgebracht. Die Seitenbegrenzungen bestehen in einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung aus doppelseitigem Klebeband, also aus Klebeband, das zwei klebende Seiten aufweist.

Das erfindungsgemäße Testelement kann zur räumlichen Trennung von Reagenzien für Vorreaktionen, Entstörreaktionen, Anreicherung von Substanzen und Reagenzientrennung wegen Unverträglichkeit und zur zeitlichen Trennung von Reaktionen einer flüssigen Probe mit diesen Reagenzien verwendet werden.

Anhand der Zeichnung wird die Erfindung nachstehend näher erläutert.
1 zeigt schematisch ein Testelement aus dem Stand der Technik mit einer Kapillare, die einen im Wesentlichen rechteckigen Querschnitt aufweist.
2 zeigt die Draufsicht auf eine Kapillare für ein erfindungsgemäßes Testelement.
3 zeigt das Aufbringen des Verzögerungsmaterials auf die Trägeroberfläche gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren.
4 zeigt das Aufbringen der Reagenzien auf die Trägeroberfläche gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren.
5 zeigt das Aufbringen der linienförmigen Seitenbegrenzungen gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren.
1 ist eine schematische Darstellung eines Testelements aus dem Stand der Technik mit einer Kapillare, die einen im Wesentlichen rechteckigen Querschnitt aufweist. Eine solche Kapillare ist beispielsweise aus der WO 99/29435 bekannt. Im oberen Teil der 1 ist eine Seitenansicht des Testelements im Schnitt abgebildet. Es sind die beiden die Kapillare nach oben und unten begrenzenden Innenwände 1, 2 erkennbar. Diese befinden sich in einem Abstand a zueinander, der so gering ist, dass die gezeigte Anordnung als Kapillare wirkt. Der Abstand a beträgt vorzugsweise zwischen 10 und 300 μm. Aus einem angedeuteten Probenaufnahmebereich 3 des Testelements wird eine flüssige Probe 4 durch die Kapillarkräfte in der Kapillare in Transportrichtung 5 (Längsrichtung) bewegt.
Im unteren Teil der 1 ist die Draufsicht auf das Testelement aus dem oberen Teil dargestellt. Dabei stellt die Abbildung im oberen Teil den Schnitt entlang der Symmetrieachse 8 dar. Die Abdeckschicht (obere Seitenwand 1) ist in dieser Darstellung durchsichtig. Der Kanal 6, in dem sich die Probe 4 in Transportrichtung 5 bewegt, wird seitlich durch Seitenbegrenzungen 7 begrenzt. Die Breite b des Kanals 6 ist größer als der Abstand a der oberen und unteren Innenwände 1, 2. Sie wird so gewählt, dass ein gewünschtes Volumen der Probe 4 in den Kanal 6 aufgenommen werden kann.
2 zeigt schematisch die Draufsicht auf eine Kapillare für ein erfindungsgemäßes Testelement.
Die Kapillare 9 besitzt ebenfalls einen im Wesentlichen rechteckigen Querschnitt. Die Abdeckschicht ist in dieser Darstellung wiederum durchsichtig, so dass die Innenseite der Kapillare sichtbar ist. Ein Kanal 6 wird durch Seitenbegrenzungen 7 begrenzt. In der Kapillare 9 sind verschiedene Zonen 10 ausgebildet. Diese Zonen 10 enthalten verschiedene Materialien, mit denen Wasser verschiedene Kontaktwinkel bildet. In den Verzögerungszonen 11 beträgt der Kontaktwinkel vorzugsweise > 30°, insbesondere zwischen 50° und 85°. In diesen Zonen wird eine Probe, die sich aufgrund der Kapillarkräfte in Transportrichtung 5 in dem Kanal 6 bewegt, verzögert. Aufgrund des hohen Kontaktwinkels passiert sie die Verzögerungszonen 11 nur langsam.
In den Reaktions-, Anreicherungs- und Nachweiszonen 12 beträgt der Kontaktwinkel < 30°. Das Oberflächenmaterial ist in diesen Zonen 12 vorzugsweise oxidiertes Aluminium mit einem Kontaktwinkel von α < 10°. Die Zonen 12 füllen sich daher schnell mit flüssiger Probe, die in Transportrichtung 5 in die Kapillare gezogen wird. In den Zonen 12 befinden sich Reagenzien (angedeutet durch die Schraffur), die bei der Füllung der Kapillare durch die flüssige Probe gelöst werden und mit dieser reagieren. Durch die sich in Transportrichtung 5 abwechselnde Reihenfolge von schnell flutbaren Zonen 12 und langsam flutbaren Zonen 11 werden die in den Zonen 12 mit der Probe ablaufenden Reaktionen räumlich und zeitlich getrennt. Nach Applikation der Probe an der Spitze der Kapillare füllt sich die erste Reaktionszone 12. Die Flüssigkeitsfront fließt dann sehr langsam über die Verzögerungsstreifen 11, während die Probe die Reagenzien löst und damit eventuell eine Vorreaktion startet. Nach einer durch die Anordnung definierten Zeit erreicht die Flüssigkeitsfront die zweite Reaktionszone 12, die wiederum schnell geflutet wird. Weitere Schritte erfolgen in analoger Weise.
Die letzte Zone ist zum Beispiel eine Nachweiszone 12, die photometrisch (Reflexion oder Transmission) vermessen wird oder andere Detektionselemente wie elektrochemische Sensoren enthält. Es kann auch ein (nicht dargestelltes) Nachweiselement (beispielsweise ein Reaktionsfilm) oder eine Chromatographiematrix am Ende der Kapillare montiert sein. Das sehr langsame Fluten der Verzögerungszonen 11 ist abhängig von der Oberflächenspannung (und dem daraus folgenden Kontaktwinkel mit Wasser α) der Verzögerungszonen 11, der Oberflächenspannung (und dem daraus folgenden Kontaktwinkel mit Wasser α) der Abdeckschicht, der Breite der Verzögerungszonen 11 und der Oberflächenspannung der Probe. Aus dieser Abhängigkeit können verschiedene, an die Anforderungen angepass te Konstellationen optimiert werden, insbesondere angepasst an das zum Nachweis benötigte Volumen, die nötige Verzögerungszeit und die Anzahl der Reaktions-, Anreicherungs- oder Nachweisschritte. Die Verzögerungszeit kann folglich unter anderem mittels des Materials und der Verzögerungszonenbreite eingestellt werden. Eher kleinere Kontaktwinkel auf der Verzögerungszone 11 und der (nicht dargestellten) Abdeckschicht mit einer eher breiteren Verzögerungszone 11 ergibt eine eher „sanfte" Verzögerung. Eine härtere Verzögerung der Kapillarenfüllung wird mit eher schmalen Verzögerungszonen 11 und eher steileren Kontaktwinkeln auf der (nicht dargestellten) Abdeckschicht und den Verzögerungszonen 11 erreicht.
Die im Folgenden beschriebenen Figuren demonstrieren schematisch einen Teil der Verfahrensschritte des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Herstellung von Kapillaren für Testelemente.
3 zeigt das Aufbringen des Verzögerungsmaterials auf die Trägeroberfläche.
Auf der Trägeroberfläche 13 bildet Wasser einen kleineren Kontaktwinkel, vorzugsweise α < 30°. Vorzugsweise besteht die Trägeroberfläche aus oxidiertem Aluminium. Die Länge und Breite des Trägers 14 hängt von der Länge und der Anzahl der herzustellenden Kapillaren ab. Auf die Trägeroberfläche 13 wird Verzögerungsmaterial 15 streifenförmig aufgedruckt, mit dem Wasser einen größeren Kontaktwinkel, vorzugsweise α > 30° bildet. Dazu wird eines der folgenden Verfahren angewandt: Ink-Jet-Verfahren, Beschichten mit Rollen, z.B. Gravur-Rollen, Flexodruck, Siebdruck, Tampon-Druck, Fließer- oder Gießer-Technik unter Verwendung einer flüssigen Lösung des Verzögerungsmaterials 15. Dieses Verzögerungsmaterial 15 bildet bei dem fertigen Kapillaren die Verzögerungszonen, wobei die Breite der aufgedruckten Streifen der Länge der Verzögerungszonen in Längsrichtung 16 der Kapillaren entspricht. Das Verzögerungsmaterial 15 wird vorzugsweise nach einem der folgenden Verfahren auf dem Träger 14 aufgebracht: Beschichten aus dem gasförmigen, dampfförmigen, flüssigen, breiigen, pastenförmigen, ionisierten, festen oder pulvrigen Zustand.
4 zeigt das Aufbringen der Reagenzien auf die Trägeroberfläche.
Die Reagenzien 17 (schraffiert dargestellt) werden in denjenigen Bereichen auf die Trägeroberfläche 13 aufgebracht, in denen sich kein Verzögerungsmaterial 15 befindet. Diese Bereiche bilden bei den fertigen Kapillaren die Reaktions-, Anreicherungs- oder Nachweiszonen.
5 zeigt das Aufbringen der linienförmigen Seitenbegrenzungen auf dem Träger.
Die linienförmigen Seitenbegrenzungen 18 werden senkrecht zu dem streifenförmig aufgebrachten Verzögerungsmaterial 15 und in einem bestimmten Abstand parallel zueinander mit dem Träger 14 verbunden. Der Abstand der Seitenbegrenzungen 18 voneinander bestimmt dabei die Breite des Kanals 6 der jeweiligen Kapillare. Zwischen je zwei Seitenbegrenzungen 18 befinden sich nun Zonen 10, die in Transportrichtung 5 abwechselnd Reagenzien 17 auf dem Trägeroberflächenmaterial und Verzögerungsmaterial 15 enthalten. Die Seitenbegrenzungen 18 werden vorzugsweise durch Kleben oder Schweißen aufgebracht. Besonders bevorzugt handelt es sich bei den Seitenbegrenzungen 18 um beidseitig klebendes Klebeband, das auf den Träger 14 aufgeklebt wird.
Die sich anschließenden Schritte zum Fertigstellen der Kapillare sind nicht in den Figuren dargestellt. Es wird als nächstes die Abdeckschicht auf die linienförmigen Seitenbegrenzungen 18 aufgelegt und mit diesen fest verbunden, zum Beispiel durch Kleben oder Schweißen. Die nach innen gewandte Oberfläche der (nicht dargestellten) Abdeckschicht kann dabei aus demselben Material (Verzögerungsmaterial 15) wie die Verzögerungszonen oder wie die Trägeroberfläche 13 sein oder auch Reagenzien enthalten. Falls diese Oberfläche der Abdeckschicht das Trägeroberflächenmaterial enthält, muss jedoch spiegelbildlich zu dem auf dem Träger aufgebrachten Verzögerungsmaterial ebenfalls auf der Abdeckschichtoberfläche Verzögerungsmaterial aufgebracht werden, um ein schnelles Fluten der Verzögerungszonen der Kapillare zu verhindern. Zuletzt wird mindestens eine Kapillare abgetrennt, zum Beispiel durch Schnitte in Längsrichtung 5 in der Mitte der Seitenbegrenzungen 18. Somit werden einzelne Kapillaren (wie in 2 dargestellt) oder auch mehrere parallel verlaufende Kapillaren für ein Testelement hergestellt.
Das anhand der 3 bis 5 beschriebene erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung von Kapillaren für Testelemente kann auch dahingehend abgewandelt werden, dass in Verfahrensschritt (A) ein Material mit einem kleineren Kontaktwinkel bezüglich Wasser in Form von Streifen auf eine Trägeroberfläche mit einem größeren Kontaktwinkel bezüglich Wasser (Verzögerungsmaterial) aufgebracht wird. Dann können die nicht mit dem Material mit kleinerem Kontaktwinkel abgedeckten Bereiche der Trägeroberfläche die Verzögerungszonen in der Kapillare bilden.
Die Erfindung bezieht sich daher auf ein Verfahren zur Herstellung von Kapillaren (9) für Testelemente mit den Verfahrensschritten:

(A) Aufbringen mindestens eines Materials mit einem ersten Kontaktwinkel bezüglich Wasser in Form von mindestens einem zur Längsrichtung der Kapillare senkrecht verlaufenden Streifen auf die Oberfläche eines Trägers (14) mit einem Trägeroberflächenmaterial mit einem zweiten Kontaktwinkel bezüglich Wasser,
(B) Aufbringen mindestens einer Reagenzie (17) auf das Trägeroberflächenmaterial oder auf den mindestens einen Streifen,
(C) Aufbringen von linienförmigen Seitenbegrenzungen (7, 18) in Längsrichtung (16) der Kapillare (9) im Wesentlichen auf die gesamte Länge des Trägers (14),
(D) Aufbringen einer Abdeckschicht, die auf den linienförmigen Seitenbegrenzungen (7, 18) befestigt wird und
(E) Abteilen von mindestens einer Kapillare (9) für einzelne Testelemente.

Das Material mit dem ersten Kontaktwinkel ist vorzugsweise ein Verzögerungsmaterial mit einem größeren Kontaktwinkel und das Trägeroberflächenmaterial mit dem zweiten Kontaktwinkel ein Material mit einem kleineren Kontaktwinkel. Es kann aber auch der erste Kontaktwinkel kleiner und der zweite Kontaktwinkel größer sein, beispielsweise wird eine PET-Folie vorgelegt, auf die eine Schicht mit kleinem Kontaktwinkel, z.B. Metalloxid, aufgebracht (z.B. aufgedampft) wird.
Die mindestens eine Reagenzie (17) kann statt auf das Trägeroberflächenmaterial oder den Streifen auch auf die Abdeckschicht aufgebracht werden, bevor diese in Schritt (D) auf den Seitenbegrenzungen befestigt wird.
Anwendungsbeispiele
Die erfindungsgemäßen Testelemente können beispielsweise für folgende Reaktionen eingesetzt werden:
1. Nachweis von Creatinkinase (Enzym, Kurzform CK) im Blutplasma
Dazu dient folgende Reaktionskaskade zum photometrischen Nachweis (nicht stöchiometrisch ausbilanziert):
Enzym-Aktivierung:

CK (teils inaktiv) + NAC → CK aktiviert + NAC-Disulfid

Nachweis:
Die üblichen Redox-Indikatoren sind in oxidierter Form farbig im visuellen Bereich, d.h. während des Nachweises wird Farbe generiert. Die Kürzel über den Reaktionspfeilen sind Enzyme, die die Reaktion katalysieren. Bei der Herstellung von Schnelltests für diesen Nachweis ergeben sich folgende Probleme:

• Die Aktivierung von CK mit NAC muss zeitlich/räumlich von der Nachweiskaskade getrennt werden, da sonst der Umsatz schon erschöpft sein kann, bevor das Enzym ausreichend aktiviert ist.
• NAC ist in leicht saurem Medium lagerstabil, Creatinphosphat in leicht alkalischem. Bei einem falschen pH-Wert sind die Substanzen relativ labil, d.h. der Test funktioniert nicht lange.
• Es ist günstig, das Substrat Creatinphosphat mit der CK einige Zeit getrennt zu halten, bevor die Kaskade abläuft.

Daher ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Testelemente für diese Reaktionen sehr vorteilhaft. Es kann z.B. ein Testelement mit einer Kapillare mit drei Zonen eingesetzt werden, wobei die drei Zonen durch zwei Verzögerungszonen getrennt werden. In der ersten Zone befindet sich NAC in einem leicht sauren Milieu. Die zweite Zone enthält Creatinphosphat in einem leicht alkalischen Milieu. Die dritte Zone umfasst die Nachweiskaskade, da sich dort auf der Oberfläche GK, GPO, POD, ADP Glycerin und der Indikator (reduziert) neutral gepuffert befinden. Zur Fixierung der Reagenzien kann ein leicht wasserlösliches Polymer als Zusatz zu den aufgedruckten Reagenz-Lösungen als Matrix verwendet werden. In der dritten Zone kann der Test photometrisch vermessen werden.
Die Reaktion läuft in einem solchen Testelement wie folgt ab:
Die erste Zone füllt sich mit Blutplasma. NAC wird gelöst und aktiviert das nachzuweisende Enzym. Nach einer kurzen Verzögerungszeit geht der Inhalt aus der ersten Zone in die zweite Zone über, wobei gleichzeitig in die erste Zone Blutplasma oder eine beliebige Spülflüssigkeit nachgefüllt wird, damit sich die Kapillare weiter füllt. In der zweiten Zone wird Creatinphosphat in der Probe gelöst. Nach einer kurzen Veweilzeit wird die dritte Zone geflutet. In der dritten Zone erfolgt der Nachweis. Um den Kapillareingang nicht über den ganzen Füllvorgang in die Probe halten zu müssen, kann vor dem Eingang eine kleine Fläche oder Napf angebracht sein, der ein ausreichendes Reservoir für alle 3 Zonen zur Verfügung stellt.
Das Beispiel beinhaltet eine Vorreaktion (Aktivierung), Reagenzientrennung, Anreicherung und eine Nachweisreaktion.
NAC und Creatinphosphat sind (wie vorgegeben) räumlich getrennt, da sie sich in unterschiedlich gepufferten Umgebungen wohl fühlen und somit über einen vernünftigen Zeitraum lagerbar sind.
2. Nachweis von Creatinin im Blutplasma
Reaktionskaskade zum photometrischen Nachweis (nicht ausbilanziert):
Da aber auch Creatin im Blutplasma vorkommt, würde dadurch ein verfälschtes positives Signal erzeugt werden. Eine Lösung ist, das Creatin der Probe vorher nach folgender Gleichung abreagieren zu lassen.
Beseitigung von endogenem Creatin:
Die Peroxidase (POD) hat eine wesentlich kleinere Michaelis-Konstante für H₂O₂ als die Katalase, d.h. eine viel höhere Affinität. Das bedeutet, solange nur Katalase vorhanden ist und nicht POD/Indikator, reagiert das H₂O₂ blind ab.
Mit POD/Indikator kommt die Katalase nicht mehr zum Zug. H₂O₂ oxidiert den Indikator.
In einer ersten Zone eines erfindungsgemäßen Testelements, in der Creatinase, Sarcosinoxidase und Katalase in der Blutplasma-Probe gelöst werden, reagiert daher vorteilhafterweise Creatin ab. Nachdem ausreichend Zeit verstrichen ist, flutet eine zweite Zone mit Creatinase, POD und Indikator und Creatinin setzt über die Kaskade Indikator um. Die erste und die zweite Zone sind durch eine Verzögerungszone getrennt.

1: obere Innenwand der Kapillare
2: untere Innenwand der Kapillare
3: Probenaufnahmebereich
4: Probe
5: Transportrichtung (Längsrichtung)
6: Kanal
7: Seitenbegrenzungen
8: Symmetrielinie
9: Kapillare
10: Zonen
11: Verzögerungszonen
12: Reaktions-, Anreicherungs- und Nachweiszonen
13: Trägeroberfläche
14: Träger
15: Verzögerungsmaterial
16: Längsrichtung
17: Reagenzien
18: Seitenbegrenzungen

Claims

Testelement umfassend mindestens eine Kapillare (9) zum kontinuierlichen Transport einer flüssigen Probe (4) in einer Transportrichtung (5), wobei in der Kapillare (9) in der Transportrichtung (5) mehrere Zonen (10) aufeinander folgen, die verschiedene Materialien enthalten, mit denen Wasser unterschiedliche Kontaktwinkel α aufweist.
Testelement gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Zonen (10) mindestens eine Reaktions-, Anreicherungs- oder Nachweiszone (12) und mindestens eine Verzögerungszone (11) umfassen, wobei in der Kapillare (9) zwischen je zwei sich unterscheidenden Zonen eine Verzögerungszone (11) liegt.
Testelement gemäß Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass die Probe (4) mindestens eine Flüssigkeit aus der Gruppe Plasma, Blut, interstitielle Flüssigkeit, Urin, Speichel, Schweiß und Proben der Wasseranalytik, insbesondere Abwasser ist.
Testelement gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass sich in Transportrichtung (5) Zonen (10), die Materialien mit einem kleineren Kontaktwinkel α in Bezug auf Wasser enthalten, mit Zonen (10), die Materialien mit einem größeren Kontaktwinkel α in Bezug auf Wasser enthalten, abwechseln.
Testelement gemäß Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass die kleineren Kontaktwinkel im Bereich zwischen 0° und 30° und die größeren Kontaktwinkel zwischen 30° und 90° liegen.
Testelement gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass die Kapillare (9) vier Innenwände umfasst und einen im Wesentlichen rechteckigen Querschnitt aufweist.
Testelement gemäß Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass die Kapillare auf der Länge der Reaktions-, Anreicherungs- und Nachweiszonen (12) mindestens eine Innenwand mit einer Oberfläche mit einem kleineren Kontaktwinkel bezüglich Wasser enthält.
Testelement gemäß einem der Ansprüche 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Kapillare (9) auf der Länge der Verzögerungszonen (11) Innenwände mit einer Oberfläche mit einem größeren Kontaktwinkel bezüglich Wasser enthält.
Testelement gemäß einem der Ansprüche 4 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Zonen (10) in der Kapillare, die Oberflächenmaterialien mit einem kleineren Kontaktwinkel bezüglich Wasser aufweisen, ein mit siedendem Wasser oder Wasserdampf zumindest oberflächlich oxidiertes Element oder eine zumindest oberflächlich oxidierte Legierung enthalten, wobei das Element aus der Gruppe Al, Si, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Cu, Ni, Zn, Ga, Ge, Zr, Nb, Cd, In, Sn, Sb stammt oder die Legierung zumindest zwei Elemente aus der Gruppe Al, Si, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Cu, Ni, Zn, Ga, Ge, Zr, Nb, Cd, In, Sn, Sb, Mg, Ca, Sr, Ba enthält.
Testelement gemäß einem der Ansprüche 4 bis 9, dadurch gekennzeichnet, dass die Zonen (10) in der Kapillare, die Materialien mit einem größeren Kontaktwinkel bezüglich Wasser aufweisen, zumindest ein Material aus der Gruppe Polyethylen (PE), Polyester, insbesondere Polyethylenterephthalat (PET), Polyamide (PA), Polycarbonat (PC), Acrylnitril-Butadien-Styrol (ABS), Polystyrol (PS), Polyvinylchlorid (PVC), Cellulosederivate (z.B. -acetate (CA), -nitrat (CN)), Polyvinylpyrrolidon (PVP), Polyvinylalkohole (beides insbesondere langkettige, wasserunlösliche Typen), Polyurethane (PUR), Polymethylmethacrylat (PMMA), Polypropylen (PP), Wachse, fluorierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Polytetrafluorethylen (PTFE), nicht passiviertes aufgedampftes Metall enthalten.
Testelement gemäß einem der Ansprüche 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass sich in bestimmten Zonen in der Kapillare (9) Reagenzien (17) befinden.
Verfahren zur Herstellung von Kapillaren (9) für Testelemente mit den Verfahrensschritten: (A) Aufbringen mindestens eines Materials mit einem ersten Kontaktwinkel bezüglich Wasser in Form von mindestens einem zur Längsrichtung der Kapillare senkrecht verlaufenden Streifen auf die Oberfläche eines Trägers (14) mit einem Trägeroberflächenmaterial mit einem zweiten Kontaktwinkel bezüglich Wasser, (B) Aufbringen mindestens einer Reagenzie (17) auf das Trägeroberflächenmaterial oder auf den mindestens einen Streifen, (C) Aufbringen von linienförmigen Seitenbegrenzungen (7, 18) in Längsrichtung (16) der Kapillare (9) im Wesentlichen auf die gesamte Länge des Trägers (14), (F) Aufbringen einer Abdeckschicht, die auf den linienförmigen Seitenbegrenzungen (7, 18) befestigt wird und (G) Abteilen von mindestens einer Kapillare (9) für einzelne Testelemente.
Verfahren gemäß Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Reagenzie (17) statt auf das Trägeroberflächenmaterial oder statt auf den mindestens einen Streifen auf die Abdeckschicht aufgebracht wird.
Verfahren gemäß Anspruch 12 oder 13, dadurch gekennzeichnet, dass das Material mit dem ersten Kontaktwinkel ein Verzögerungsmaterial (15) mit einem größeren Kontaktwinkel bezüglich Wasser und das Trägeroberflächenmaterial ein Material mit einem kleineren Kontaktwinkel bezüglich Wasser ist.
Verfahren gemäß Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, dass das Verzögerungsmaterial (15) durch Beschichten aus dem gasförmigen, dampfförmigen, flüssigen, breiigen, pastenförmigen, ionisierten, festen oder pulvrigen Zustand auf das Trägeroberflächenmaterial aufgebracht wird.
Verfahren gemäß einem der Ansprüche 12 bis 15, dadurch gekennzeichnet, dass die Seitenbegrenzungen (7, 18) und die Abdeckschicht durch Kleben oder Schweißen aufgebracht werden.
Verfahren gemäß einem der Ansprüche 12 bis 15, dadurch gekennzeichnet, dass die Seitenbegrenzungen (7, 18) aus doppelseitigem Klebeband bestehen.
Verwendung eines Testelements gemäß einem der Ansprüche 1 bis 11 zur räumlichen Trennung von Reagenzien (17) für Vorreaktionen, Entstörreaktionen, Anreicherung von Substanzen und Reagenzientrennung wegen Unverträglichkeit und zur zeitlichen Trennung von Reaktionen einer flüssigen Probe (4) mit diesen Reagenzien (17).