CZ419397A3

CZ419397A3 - Mono- a disulfo-substituované antrachinony a jejich použití pro léčbu onemocnění kostní matrix

Info

Publication number: CZ419397A3
Application number: CZ974193A
Authority: CZ
Inventors: Dino Benetti; Ruggero Aloisi; Giuseppe Guainai; Sergio Rosini
Original assignee: Boonville Limited
Priority date: 1995-06-23
Filing date: 1996-06-17
Publication date: 1998-07-15
Also published as: EP0833626A1; SK281853B6; ATE233553T1; DK0833626T3; ITMI951357A0; DE69626514T2; ES2193248T3; EP0833626B1; JP3307650B2; CZ293326B6; CA2225277A1; DE69626514D1; JPH11509186A; PT833626E; ITMI951357A1; AU6303996A; WO1997000675A1; SK176097A3; US5856358A; MX9800049A

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká sloučenin použitelných pro léčbu patologií, při kterých se vyskytuje erose chrupavčité a kostní matrix v nejpokročilejším stadiu onemocnění, jako je osteoartrosa a revmatoidní artritida, a farmaceutických kompozic, které je obsahují. Dále se vynalez týká nových antrachinonových derivátů a procesů pro jejich přípravu.

Dosavadní stav techniky

Osteoartrosa je léčena zejména substancemi působícími na bolest a vykazujícími svůj symptomatický účinek díky jejich protizánětlivé aktivitě. Uvedené léky jsou obvykle označovány jako nesteroidní protizánětlivé léky (NSAID) jako je například indometacin a steroidní léky, jako je například hydrokortison a bethametason.

Jinými používanými sloučeninami jsou měď chelatující činidla, jako je penicilamin, a sloučeniny, které interferují se syntesou kolagenu, DNA nebo synoviálních membrán, jako je cyklofosfamid.

Mezi nové substance používané u výše uvedených patologií patří diacetylrhein, proléčivo rheinu, který působí jako měď chelatující činidlo a navíc inhibuje tvorbu ceruloplasminu v průběhu akutní fáze artritického zánětu a je také vápníkovým chelačním agens vytvářejícím solubilní komplexy s vápníkem díky solubilizační COOH skupině přítomné v jeho struktuře. Taková • · « · · · · · · v · V « ·· • · · · · · • · ·4 · · · · charakteristika tvorby solubílních komplexů s vápníkem má pravděpodobně prvořadý význam, protože neumožňuje tvorbu a precipitaci mikrokrystalů v artikulačních místech a tak zabraňuje zánětlivým reakcím z tohoto vycházejícím (Friedman,

U.S. Patent č. 4244968 z 13.1.1981). Kromě toho, rhein inhibuje tvorbu a uvolňování superoxídového aniontu z NADPH-dependentních biologických systémů (Mian M. et al., J. Pharm, Pharmacol. 39: 845 - 847, 1987) a aktivitu serinových proteas, jako je elastasa a kathepsin G u lidí (Raimondi I. et al., Pharmacol. Res. Comm., 14 (2): 103 - 112, 1982); Zembower DE. et al., J. Med. Chem. 35: 1597 - 1605, 1992) .

Další farmakologické a klinické studie popsané v literatuře zjistily, že, kromě výše uvedených mechanismů, účinkují jiné patologické mechanismy u onemocnění postihujících klouby, způsobujících erose chrupavčité a kostní matrix.

Mezi takovými mechanismy by mělo být zdůrazněno zvýšení některých enzymových aktivit nebo nerovnováha mezi takovými aktivitami a jejich inhibitory. Jak bylo nedávno zjištěno některými výzkumníky, cysteinové proteasy, jako je kathepsin B a L, jsou enzymy přísně napojené na degradaci chrupavky a proto jsou ve vztahu s uvedenými patologiemi. V literatuře bylo mnohokrát popsáno, že cysteinové proteasy kathepsin B a L jsou schopné přímo nebo nepřímo {aktivací proenzymů) indukovat degradaci hlavních složek chrupavčité a kostní extracelulární matrix (Roughley PJ. et al., Biochem. J. 167: 639 - 637, 1977; Sakamoto Ξ. et al., MOL. Aspects Med. 10: 299 - 428, 1988;Nguyen PJ. et al., Biochem. J. 1991 Aug. 15: 278 (pt 1); Maciewiez RA. et al., Biomed. Biochim. Acta 50 {4 - 6) : 561 - 4, 1991; Buttle DJ. Arthritis Rheum. 36 (12): 1709 - 17, 1993; pelletier JP. et * « η · · · · *»· *«· ·*··»· ·«·«·· • * · «·*· «· ··* ·· ·· ·0 · * · « al., Osteoarthritis 19 (3): 545 - 568, 1993).

Kromě toho, zájem o tyto enzymatické aktivity byl potvrzen studiemi provedenými na laboratorních zvířatech (krysách), u kterých byla indukována revmatoidní artritida. U uvedených zvířat byl hodnocen účinek inhibitorů cysteinových proteas, jako jsou fluoromethylketony, na rozvoj onemocnění a zejména na rozvoj kloubních lézí chrupavky a kosti.

výsledky uvedených studií ukazují, že inhibitory enzymů mohou mít klinický význam v léčbě artritidy (Ahmed NK. et al., Biochem. Pharmacol. 44 (6): 1201 - 7, 1992; Meijers M., Billingham M. et al., Agents actions 39 (1): 219 - 21, 1993; Esser RE. et al., J. Reumatol. 20 (7); 1176 - 83, 1993).

Jiní autoři (Gabrijelcic D. et al., J. Clin. Chim. Biochem. 28 (3): 149 - 53, 1990) dokázali přítomnost kathepsinu B a H v synoviální tekutině pacientů s různými onemocněními kloubů, zatímco Martel-Pelletier J. et al., J. Orthop. 8 (3): 336, 1990, ukázal přítomnost nerovnováhy mezi hladinami kathepsinu B a jeho inhibitorů v chrupavčité tkáni od pacientů s osteoartrosou.

Huet et al., Arthritis Rheum. 36 (3): 772, 1993) ukázal, že IL-1 a TNF stimulují aktivitu cysteinových proteas v synoviálních buňkách explantátů od pacientů postižených osteoartrosou a artritidou.

Z toho, co bylo uvedeno výše, je zřejmé, že cysteinové proteasy jsou aktivně zapojeny v v osteoartrose a artritidě, a proto že použití terapeutických agens významně inhibujících aktivitu uvedených proteas je oprávněné.

• · • · · ·

Nyní bylo překvapivě zjištěno, že deriváty antrachinonových mono- a disulfonových kyselin mají významnou aktivitu proti cysteinovým proteasám.

Podstata vynalezu

Předmětem předkládaného vynálezu je použití sloučeniny podle obecného vzorce (I) pro přípravu léčiva použitelného pro léčbu patologií, při kterých se vyskytuje v nejpokročilejším stadiu onemocnění erose chrupavčité a kostní matrix, zejména pro léčbu osteoartrosy a revmatoidní artritidy. Sloučeniny mají obecný vzorec (I)

kde

A je skupina vzorce -SO₃R, kde R je vodík nebo kationt schopný dávat ve vodě rozpustný derivát; nebo

A je skupina vzorce -SO_R^L, kde R¹ je NR²R³ skupina, ve které je R² vodík nebo C -C přímý nebo rozvětvený alkyl,

R³ je -CH(COOH) -R^s, kde R^s je CyC_s alkyl nebo arylalkyl; - (CH₂)_n-COOH, kde n je celé číslo od l do 6, C^-C^ přímý nebo rozvětvený alkyl, -C^H^-O-(CH₂)_m-CH_s, kde m je celé číslo od 1 do 4; nebo • · · · ··« «·*· * · * ·*·*· ·· « * ·· · ·

Rů je -OR⁴ skupina, kde R⁴ je C^-C^ přímá nebo rozvětvená alkyl skupina nebo volitelně substituovaná C_g-C_io aryl skupina;

B je atom vodíku,- nebo

B má stejný význam jako A,- s výjimkou toho, že A a B jsou simultáně -SO-R nebo -S0 R¹.

2

Výraz kationt schopný dát ve vodě rozpustný derivát znamená kationty, které mají solubilizující funkci a zárověň způsobují vznik netoxických derivátů, které neovlivňují nežádoucím způsobem farmakologickou aktivitu sloučenin podle vzorce (I). Příklady uvedeného typu kationtů jsou kationty kovů jako je lithium, sodík, draslík.

Příklady C -C_e přímé nebo rozvětvené alkyl skupiny jsou methyl, ethyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, terc-butyl, pentyl, hexyl.

Příklady arylalkyl skupiny jsou benzyl, 2-fenylethyl,

1-fenylethyl, 3-fenylpropyl, i-naftylmethyl, 2-naftylmethyl.

Příklady C_g-C_io skupiny jsou fenyl, naftyl. Volitelné substituentové skupiny mohou být například amino, mono- nebo -(C_x~C_e)-alkylamino, jako je diethylamino, hydroxy, C^-C^ alkoxy, jako je izopropoxy, thio.

Následující nové sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou zahrnuty v obecném vzorci:

2,6-antrachinonsulfonamido-N,N-kyselina kapronová;

v vw « v · * · » vv • 99 9 9 · 9 9 9 · • ••9 9 9 9 · · ·

9· 999 « « 9 9999 9

999 999· 99* • 9 9 · 9 9 9 99 ·· ··

N,N'-diethyl-2,6-antrachinondisulfonamid;

N,N'-(p-ethoxyfenyl)-2,6-antrachinondisulfonamid;

bis-2-(2,6-antrachinondisulfon)-N,Ν'-kyselina diamidopropionová; bis-2-{2,6-antrachinondisulfon)~N,N-diamido-3-fenyl-kyselina propionová.

Antrachinonové dibazické sulfonamičy s antivirovou aktivitou byly popsány M.Grisarem et al., v Journal of Medicinal Chemistry, 1974, svazek 17, č. 8, str. 890 - 893.

Antrachinonové sulfonamičy jsou popsány v GB 2025954 jako obecně použitelné jako intermediáty pro barviva, chemické produkty pro zemědělství a farmacii. Zejména jsou popisovány jako složky pro vodné roztoky pro odstraňování sirovodíku z plynů.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny z antrachinonové mono- a/nebo disulfonové kyseliny prostřednictvím intermediátů:

kde X je halogen, zejména chlor.

O takových intermediátech je známo, že mohou být připraveny reakcí mono- nebo disulfonové kyseliny s kyselinou chlorsulfonovou nebo s chloridem fosforečným nebo s oxychloridem fosforitým nebo se směsí posledních dvou.

fl·* flfl · · fl fl « •flflfl · · « fl flflfl •fl flflfl « flfl flflflfl · • * * · » · · ♦ fl ♦ • flfl flfl «· flfl flfl flfl

Výsledný halogenovaný derivát je reagován se sloučeninou mající obecný vzorec HNR²R³.

Techniky, které mohou být použity na poslední krok se liší podle R² a R³, čistoty a výnosu. V některých případech reaguje chlorid kyseliny sulfonové s HNR²?.³ ve značném přebytku, zatímco v jiných případech se preferuje provedení reakce ve vhodném rozpouštědle; jako příklad vhodného rozpouštědla mohou být uvedeny ethylether nebo methvlenchlorid. Pokud je vhodná přítomnost baze, pak jsou preferovány baze jako jsou aminy, například triethylamin a paradimethvlaminopyridin.

Podmínky reakce závisejí na vlastnostech reagens, rozpouštědla a na přítomnosti nebo na absenci baze stejně jako na jejím množství, pokud je nějaká přítomna. Rozmezí teplot je od -10 °C do bodu varu rozpouštědla. Nejvhodnější operativní podmínky jsou v rozsahu od 5 °C do 30 °C. Reakční časy se velmi liší v závislosti na jiných parametrech, ale obvykle jsou v rozsahu od 2 hodin do 3 dnů.

Analogicky halogenovaný derivát reaguje s R^T0H alkoholem, kde R¹ je C -C alkyl, za zisku esteru kyseliny sulfonové.

Preferovaná metoda spočívá v reakci sodné sole kyseliny sulfonové s kyselinou chlorsulfonovou v nadbytku při pokojové teplotě po asi 24 hodin.

Potom je sulfurylchlorid odstraněn filtrací, po hydrolýze nadbytku kyseliny chlorsulfonové vodou a ledem, Sulfurylchlorid reaguje s aminem HNRjR'· nebo s alkoholem R³0H, kde R¹, R², a R³mají významy definované výše, preferovaně při pokojové teplotě a za přítomnosti terciálních aminů, zejména pokud je reakce φ φ

ΦΦΦΦ 1 φ φ φ φ φ φ prováděna v rozpouštědle.

Antrachinonové mono- a disulfonové kyseliny a substituované deriváty podle předkládaného vynálezu jsou značně účinné v různých farmakologických testech.

Například jsou popsány experimentální výsledky některých enzymových testů provedených s mono- a disulfonovými deriváty majícími SO^R skupiny v pozici 1,5 a 2,6 (viz tabulky 1 a 2).

Účinky na enzymatickou aktivitu lidského kathepsinu B a L

Antrachinonové monosulfonované a disulfonované sloučeniny jsou rozpuštěny v destilované vodě, zatímco jejich deriváty jsou rozpuštěny v dimethylsulfoxidu. Koncentrace testovaného produktu je přidána do reakční směsi v objemu 100 μΐ.

Složení reakční směsi: 0,005 M octanového pufru pH 6,0 + 2 mM cysteinu + 1 mM EDTA; Enzym 1 U/ml (kathepsin B nebo L) (Calbiochem); substrát 0,2 mM Z ·Phe-Arg-AMC (Novabiochem), konečný reakční objem 2 ml; teplota 25 °C; pozorovací čas pro kathepsin B: 2 minuty; pro L: 8 minut. Toto je fluorimetrické určení, kde excitační vlnová délka je 380 nm, kde emisní vlnová délka je místo toho 460 nm. Fluorescence je odečítána na Perkin-Elmer spektrofotometru model LS-3B.

Studované koncentrace:

Antrachinon-2,6-disulfonová kyselina

Antrachinon-1,5-disulfonová kyselina

Ν,Ν' -(p-ethoxyfenyl)-2,6-antrachinon

- 5 - 10 μΜ

- 5 - 10 μΜ • · · · · · 9

9 9 9 9 99

999 9 99 9999 · • · · 9 9 9 9 9 9 9

99 9 9 99 99 99 99 disulfonamid : 1 - 10 μΜ

Výsledky popsané v tabulkách 1 a 2 ukazují, že testované sloučeniny významně inhíbují aktivitu lidského kathepsinu B a L.

Tabulka 1 - Účinek antrachinon mono- a disulfonových kyselin - na enzymatickou aktivitu lidského kathepsinu B

Sloučenina	Konc . μιπ	Pokus č.	0, 0 3	Inhibice
1	z.
2 , 6-antrachinondísulfonová	10	98,9	98,2	87,7	94,9
kyselina	5	68,5	65,8	76,0	70, 1
	1	43,7	33,7	38,5	40,7
1, 5-antrachinondísulf-	10	55,1	36,6	41,6	44,4
onová kyselina	5	10,3	7,2	11,4	9,6
	1	4,1	3,6	2,5	3,4
N,N'-(p-ethoxyfenyl)-2,6-	10	76,6	80,6	83,4	80,2
antrachinondisulfonamid	1	23,7	18,6	14,8	19,0

* ·*· · « · · · · * ***· * « t ···« • · · ♦ · » · 4 * 4 · « · ·* »··· · 4 · ··»·· ·· 4« ·4 *4

Tabulka 2 - Účinek antrachinon mono- a disulfonových kyselin na enzymatickou aktivitu lidského kathepsinu L

Sloučenina	Konc. μτη	Pokus 1	; č. 2	0^ 0 3	Inhibice
2,6-antrachinondisulfonová	10	92,1	96,5	94,8	94,5
kyselina	1	39,6	31,4	35,8	35,6
1,5-antrachinondisulfonová	10	48,6	60,5	53,9	54,3
kyselina	1	10,5	8,4	5,5	8,1
N,Ν’ -(p-ethoxyfenyl)-2,6-	10	53,6	48,1	63,8	55,2
antrachinondisulfonamid	1	8,5	7,1	10,9	8,8

Adjuvantní artritida

Test hodnotí účinek sloučenin antrachinon-2,6-disulfonové kyseliny a N,Ν'-diethylantrachinon-2,6-disulfonamídu na revmatoidní artritidu u krys indukovanou podáním kompletního Freundova adjuvans. Diacetylrhein byl použit jako kontrola.

Pro test byly albíni Sprague Dawley krys o hmotnosti 200 + 10 g rozděleni do čtyřech skupin po šesti zvířatech. Všechny sloučeniny byly podány orálně v dávce 20 mg/kg. Artritida byla indukována podáním 5 mg kompletního Freundova adjuvans suspendovaného v 0,05 ml parafinového oleje všem zvířatům, do levé zadní tlapky (před léčbou byl měřen objem tlapky obou zadních tlapek). Léčba testovanými produkty začala 5 dní po indukci artritidy a byla prováděna po dobu deseti dní. Na konci * · * • 4 ··* *··· 4 · « »· »1 « ς, 4 4 4 4 této doby byla zvířata usmrcena pro provedení analýzy následujících parametrů: měření objemu levé a pravé zadní tlapky; Rx v laterální a předozadní pozici tibio-tarsálního kloubu levé tlapky; histologického vyšetření kloubů obou zadních tlapek.

Získané výsledky ukazují, že sloučeniny antrachinon-2,-6-disulfonová kyselina a N, N' -diethylantrachinon-2, 6disulfonamíd inhibují o 18,6 a 21,4%, v příslušném pořadí, zvýšení objemu levé zadní tlapky, zatímco diacetylrhein způsobuje 8,3% redukci. Účinek dvou disultónovaných sloučenin na zvýšení objemu pravé tlapky byl mnohem výraznější. Skutečně byla pozorována inhibice 67,5 a 62,3% (antrachinon-2,6-disulfonová kyselina a N,Ν’-diethylantrachinon-2, 6-disulfonamíd) oproti úplnému chybění aktivity u diacetylrheinu (viz tabulka 3). Dále, radiografie ukázala, že dvě disulfonované sloučeniny inhibují ztrátu kostní hmoty a signifikantně chrání tibio-tarsální skloubení. Mimo to je z histologického vyšetření skloubení zřejmé, že disulfonované sloučeniny výrazně inhibují tvorbu fibrosní tkáně ve skloubení, zatímco tato fibrosní tkáň je významně přítomná ve skloubení u kontrolních skupin a u skupin ošetřených diacetylrheinem.

• · «« «<*· · · · «··« · ·«· ·«· ··» ♦ •fa·· * ·· · V ·

Tabulka 3 - Účinek antrachinon mono- a disulfonavých kyselina na edem indukovaný Freundovým kompletním adjuvans

Sloučenina	Dávka mg/kg/os	Objem po 15 levá	zvýšení dnech tlapka pí	edemu
ravá	tlapka
Kontrola	-	252 +	26	77 +	29
2,6-antrachinondi- sulfonová kyselina)	20	205 ±	41	25 ±	20
Ν,N'-diethyl-2,6 - antrachinondisulfonamid	20	198 ±	31	29 ±	12
Diacetylrhein	20	231 ±	22	92 ±	30

Tato ochranná aktivita je také dokázána histologickými vyšetřeními provedenými na tibiotarsálním skloubení krys.

Oproti rheinu nejsou uvedené produkty chelatující agens mědi ani vápníku, neinhibují produkci a uvolňování superoxídových aniontů z NADPH-dependentních biologických systémů, neinhibují aktivitu superoxid dismutasy, nejsou inhibitory serinových proteas, nejsou mutagenní v Amesově testu a nezpůsobují chromosomální aberace.

Test indukce chromosomálních aberací

Klastogenetický účinek rheinu a 2,6-anytrachinondisulfonové • · »··« » « »« *· ·«· « · · · * * » · • * · < » · · 0 • »· · * t 0 «· 0 * , · 0 kyseliny byl hodnocen za použití testu indukce chromosomálních aberací v buněčných kulturách ovarií čínského křečka (CHO). V tomto testu je buněčná linie ošetřena testovanými substancemi a vhodnými kontrolami, za přítomnosti metabolického aktivačního systému po dobu čtyř hodin. Potom jsou buňky v exponenciální fázi růstu ošetřeny kolchicinem (Colcemid^R) po dobu 90 minut tak, aby byl získán signifikantní počet buněk v metafázi a jsou odebrány pro přípravu chromosomální suspense. Jako pozitivní standard byl použít cyklofosfamid (1-5-10-12,5-25 /ig/ml).

Toxicita testované sloučeniny je hodnocena pomocí testu účinnosti umístění na plotny, ošetření buněk po dobu čtyř hodin a potom jejich umístění v koncentraci 200 bunek/5 ml čerstvého kultivačního media.

Na základě výsledků získaných v tomto testu jsou vybrány dávky pro ošetření v testu indukce chromosomálních aberací tak, že nepřesahují, v nejvyšší dávce, 50% hladinu toxicity.

Vybrané dávky byly:

rhein: 25 - 50 - 100 - 200 gg/ml

2,6-antrachinondisulfonová kyselina 50 - 100 - 150 - 200 - 250 gg/ml

Chromosomální aberace jsou zaznamenávány popisem typu strukturálního poškození. Aberace počtu a mezery jsou odstraněny. Jsou vybrány metafáze vykazující dobré otevření chromosomu, dobré barvení a akceptovatelný počet chromosomu (20 ± 2). Pro statistické hodnocení výsledků je použit kvadratický Chí test.

« ·

Výsledky ukazují, že sloučenina 2,6-antrachinondisulfonová kyselina neindukuje žádné chromosomální aberace, zatímco rheín je pozitivní v dávkách 100 a 200 Mg/ml (viz tabulky 4 a 5).

Tabulka 4 - Test chromosomálních aberací na ovariálních buňkách čínského křečka

Sloučenina	Dávka I	Metafáze celkem	Metafáze s aberacemi	P
Kontrola + S - 9	//	220	13
	10 Mg/ml	32	12	P<0,001
CPS + S -9	5 /xg/ml	100	25	P<0,001
	1 /ug/ml	100	10	N.S .
	250 Mg/ml	100	6	N.S .
2,6-antrachinondi-	200 Mg/ml	100	8	N.S .
sulfonová kyselina	150 Mg/ml	100	8	N.S .
+ S - 9	100 Mg/mi	100	4	N.S.
	50 Mg/^mí	100	2	N.S .

CPS - Cyklofosfamid

S - 9 = metabolický aktivační systém • 4 ·

Tabulka 5 - Test chromosomálních aberací na ovariálních buňkách čínského křečka

Sloučenina	Dávka (gg/ml)	Aberace jednoduché	Aberace komplexní	Aberace S + C	p
Kontrola 400 metafází	- //	8	4	12
CPS	25	0	87	87	P<0,001
100 metafází	12, 5	0	44	44	P<0,001
Rhein	200	3	5	8	P<0,05
100 metafází	100	3	6	9	P<0,05
	50	1	3	4	N.S.
	25	1	1	2	N.S .
Proto, tyto předkládaného	charaketríštiky jasně vynálezu od rheinu.	odlišuj i	sloučeniny	podle

Účinek disulfonovaných antrachinonů na měď vychytávající agens

Studie zahrnuje produkci superoxídového aniontu prostřednictvím hypoxantin/xantin oxidasového systému a cílem je redukce v obsahu kovu v cytochromu C. 0 mědi je známo, že je schopná vychytávat radikály produkované uvedeným systémem. Měď chelatující činidla inhibují takový efekt vychytávání.

Tabulka 6 ukazuje, že rhein inhibuje uvedený účinek, zatímco « · « · ♦ · * sloučeniny i-antrachinonsulfonová kyselina a 2-antrachinonsulfonová kyselina jsou téměř inaktivní.

Tabulka 6 - Účinek na vychytávání způsobené mědí

Sloučenina	% redukce
1-AQ	3
2-AQ	5
1,5-AQ	4
2,6-AQ	6
rhein	45

1- AQ: antrachinon-l-sulfonová

2- AQ: antrachinon-2-sulfonová

1.5- AQ: antrachinon-1,5-disulfonová kyselina

2.6- AQ: antrachinon-2,6-disulfonová kyselina

Předkládaný vynález se také týká farmaceutických kompozic obsahujících terapeuticky účinné množství sloučeniny podle vzorce I ve směsí s konvenčními nosiči a excipiens.

Kompozice podle předkládaného vynálezu jsou připraveny podle L_ '7 w J- Ol -UI J. ibilií _ i i _ř například podle těch, které jsou popsány v

Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook, XVII Ed., Mack Pub. Inc., N.Y., USA.

Příklady kompozic pro enterální, parenterální, lokální podání jsou tablety, kapsle, granule, přípravky s kontrolovaným uvolňováním, kapalné přípravky pro pití, injektovatelné v « • · · · · « · · · ♦ · · » · * rt · rt rt 4 • ff ff · rt rtrt ···· · ·» * · · « rt·· • · « ·· «« · · «» · · přípravky, čípky, krémy, transdermální přípravky.

V orálních přípravcích je dávka aktivní složky v rozsahu od 10 do 500 mg v závislosti na aktivitě produktu a terapeutickém použití. Pro systémové použití je dávka od 1 do 100 mg.

Dále jsou popsány ilustrativní příklady.

Příklady provedený vynálezu

Příklad 1

Ν,Ν'-diethyl-2,6-antrachinondisulfonamid

13,0 g antrachinon-2,6-disulfonvlchloridu je suspendováno do 300 ml methylenchloridu za důkladného míchání, Do tohoto se přidá 300 mí diethylenaminu, pomocí kapající nálevky takovou rychlostí, aby teplota nepřesáhla 25 - 30 °C, za chlazení roztoku, pokud je nezbytné. Vzniklá suspense je míchána po dobu 6 hodin, a potom se nechá odstát přes noc. Suspense je potom přidána k 100 ml IN NaOH za míšení, potom je míchána po dobu 2 hodin a potom je vzniklá pevná látka filtrována důkladným promýváním ve vodě.

Je získáno 9,3 g produktu dobré čistoty (95 - 97% podle HPLC), který, pokud je to nutné, může být rekrystalízován z 3/1 roztoku dimethylacetamidu/vody.

IR a NMR analýzy potvrdily identitu produktu.

v · • » · · · · • 4 4« • · •

Příklad 2

Ν,Ν'-(p-ethoxyfenyl)-2,6-antrachinondisulfonamid

15,5 ml p-fenetidinu je přidáno k 150 ml methylenchloridu , za důkladného míchání. 6,1 g antrachinon-2,6-disulfonylchloridu je přidáno graduáLně, po malých částech tak, aby teplota nepřesáhla 15 - 20 °C, za chlazení roztoku, pokud je nezbycné. Vzniklá suspense je míchána po dobu 3 hodin, a potom se nechá odscác po 3 dny; vzniklá pevná látka filtrována důkladným promýváním v 1M kyselině chlorovodíkové a potom ve vodě. Je získáno 9,8 g produktu který je rekrvstalizován dvakrát z roztoků dimethylacetamidu/vody. Nakonec je získáno 3,8 g čistého produktu.

IR a NMR analýzy potvrdily identitu produktu.

Příklad 3

2,6-antrachinondisulfonamído-N,N'-kaproová kyselina

16,4 g methyl-6-aminokaproat hydrochlorídu, 18 ml trimethylaminu a 200 mg p-dimethyl-aminopyridinu je přidáno k 150 ml diothylcthcru, co důkladného promíchání, 6,1 g antrachinon-2,6 -disulfonylchloridu je přidáno graduálnš, po malých částech tak, aby teplota nepřesáhla 15 - 20 °C, za chlazení roztoku, pokud je nezbytné. Vzniklá suspense je míchána po dobu 3 hodin při pokojová teplotě a potom se nechá odstát po dobu 3 dnů; potom je rozpouštědlo odpařeno a získaná pevná látka získána s 35 g XOII rozpuštěným v 500 ml voda/methanol l/l. Směs je míchána po dobu 1 hodiny při pokojové teplotě, potom je acidifikována 29% • 9 kyselinou chlorovodíkovou na značně kyselé pH; po míchání po dobu 5 minut je vzniklá pevná látka filtrována důkladným- p-'ý 1 v;

vodě. Je získáno 5,. 0 g produktu, který je rekrvstalizován dvakrát z roztoků dimethylacetamidu/vody. Nakonec je získáno 2.1 g čistého produktu.

IR a NMR analýzy potvrdily identitu produktu.

Příklad 4

Kapsle z měkké želatiny:

každá kapsle z měkké želatiny obsahuje:

1) 2)

Aktivní složka 100 mg 300 mg

Sojový olej 50 mg 150 mg

Disperse aktivní složky v sojovém oleji je do kapslí z měkké želatiny dávkována za použití vhodného prostředku.

Aktivní složky použité v této formulaci jsou preferovaně:

1} - N,N’-diethyl-2,6-antrachinondisulfonamid

2) - -!p-ethoxyfenyl)-2,6-antrachinondisulfonamid

Příklad 5

Kapsle z tuhé želatiny: každá kapsle obsahuje.-

Aktivní	složka	40 mg	200	mg
Laktosa		200 mg	285	mg
Stearát	horečnatý	10 mg	15	mg

Produkty jsou smíseny a potom dávkovány do kapslí vhodné velikosti.

Aktivní složky použité v této formulaci jsou preferovaně vybrány z;

1) - sodných solí 2,6- nebo i,5-antrachinondisulfonové kyseliny;

2) - 2,6-antrachinondisulfonamído-N,N¹-kaproové kyseliny

Příklad 6

Tablety

Každá tableta obsahuje:

Aktivní složka	250 mg	15 mg
Mikrokrystalická celulosa	200 mg	80 0 mg
Anhydrická laktosa	220 mg	97 mg
Karboxymethyl škrob sodný	21 mg	6 mg
Stearát horečnatý	9 mg	2 mg

Aktivní složka je důkladně smísena s mikrokrystalickou celulosou a anhydrickou laktosou, za stálého míchán’ jsou přidán; karboxymcthyl škrob sodný a stearát horečnatý a potom je vzniklá směs proseta a tabletována za získání tablet o hmotnosti 700 a 920 mg, v příslušném pořadí.

Aktivní složky použité v této formulaci jsou preferovaní:

1} - N,N-diethyl-antrachinondisulfonamid;

2) - N,N'-(p-ethoxyfenyl)-2,6-antrachinondisuifonamid;

2) - sodné sole kyseliny antrachinonsulfonové podle vzorce (I) • ·

Příklad 7

Krém

Aktivní složka

Směs cetyl a stearyl alkoholů lauryl síran· sodný decvloleat Vaselinový olej Přečištěná voda Methyl-para-oxv-benzoát Propyl-para-oxy-benzoát Růžová esence

2,000 g 15,000 g

1,500 g 10,000 g

5,000 g 66,000 g

0,160 g 0,040 g 0,300 g je rozpuštěna s laurylsulfátem stearyl alkoholů sodným a decyl oleátem, pak se přidá aktivní složka a důkladně promíchá. Získaný produkt je potom přidán do vody o stejné teplotě, při které byl methyl-p-oxybenzoát a propyl p o;-”'torzo rozpuštěn, pak je pečlivě emulsifikován ve vhodném prostředku, ochlazen na asi 60 °C za míchání, je přidána růžová esence o potom je produkt ochlazen a distribuován ve vhodných kontainerech.

Vhodnými aktivními složkami přípravku jsou:

- N,N'-diethyl-2,6--antrachinondisulfonamid;

- N,N' -(p-ethoxyfenyl)-2, 6-antrachinondisulfonamid.

Příklad 8

Mast • » · · · • » · · • · · · · · · • » · # způsobem múze být připravena mast, kde se aktivní složka skládá ze solí sloučenin podle vzorce (I) za použití kompozic následujícího typu:

Aktivní složka	3,000	g
Hamamelis voda	27,000	g
Cetyl alkohol	16,500	g
Volné a esterifikované steroly	1,000	g
Methyl-para-oxy-benzoat	0,150	g
Propylgalat	0,030	g
Propylenglykol	7, 000	g
Růžová esence	0, 250	g
versenat dvoj sodný	0,050	g
Vitamin F 80%	1,250	g
Polyglykolové estery nasycených
a nenasycených mastných
amidů C -C 13 20	0,500	g

Přečištěná voda q.s. 100 g.

Příklad 9

Intramuskulární injekce

Každá ampule obsahuje:

Aktivní složka 25,00 g

Chlorid sodný 3,80 g

Dihydrát citrátu sodného 25,73 g

Monohydrát kyseliny citrónové 7,87 g

Aqua pro inj, q.s. 2 ml.

• Λ »·♦· a a

Roztok aktivní složky a excipiens je sterilně filtrován a rozdělen do ampulí, které jsou potom sterilizovány v nu teklidobu 15 minut při 121 °C.

Aktivními složkami použitými sodné soli ontroobinonsulfonové v této formulaci jsou preferov kyseliny podle vzorce (I) .

Příklad 10

Intraartikulární injekce

Každá ampule mrazem sušeného produktu Aktivní složku 1 mg

Manitol 50 mg

Hydroxid sodný q.s. pH 6,5

Každá ampule na ředění obsahuje:

Aqua pro inj. 2 ml

Roztok aktivní složky a excipiens je sterilně filtrován o '-dělen do ampulí. a potom, je sušen vymrážením ve vhodném prostředku.

Aktivními složkami použitými v této formulaci jsou preferov sodné soli antrachinonsulfonové kyseliny podle vzorce (I) .

Claims

E³ a. t θ ru t θ λλ é nároky

1. Použití sloučeniny podle vzorce (I):

kde

A je skupina vzorce -SO₃R, kde R je vodík nebo kationt schopný dávat ve vodě rozpustný derivát; nebo

A je skupina vzorce -3CýR\ kde R¹ je NR^R^J skupina, ve které je R² vodík nebo C-C přímý nebo rozvětvený alkyl,

R je -CH(COOH)-R^s, kde R^s je C^-C^ alkyl nebo C.-C^ arylalkyl; - íCHýy-COOH, kde n je celé číslo od 1 do 6,

C^C přímý nebo rozvětvený alkyl, -C_gH^-0-(CH_s)_m~CH₃, kde m je celé číslo od 1 do 4; nebo

R¹ je -OR⁴ skupina, kde R⁴ je C -C_g přímá nebo rozvětvená alkyl skupina nebo volitelně substituovaná C_e-C_io aryl skupina;

B je atom vodíku; nebo

B má stejný význam jako A; s výjimkou toho, že A a B jsou simultáně -Ξ0 R nebo -S0 R¹,

3 2 • · · « * • · ·« * »4 ·♦ pio přípravu léčiva použitelného pro léčbu patologií kterých se vyskytují erose chrupavčité a kostní matrix nej pokročilejšim stadiu onemocnění.

při
2. Použití podle nároku 1 pro přípravu léčiva použitelného p· léčbu osteoartrosy.
3 . Použití podle nároku 1 pro přípravu léčiva použitelné:,;. léčbu revmatoidní artritidy.
4. Použití podle nároku 1 nebo 2 nebo 3, kde sloučenina je vybrána ze skupiny skládající se z:

2,6-antrachinonsulfonamido-N,N-kaproovč kyseliny;

N,N'-diethyl-2,6-antrachinondisulfonamidu;

N,N'- (p-ethoxyf enyl)-2,6-antrachinondis’..:: fenamidu,bio-2- '2, 1-antrachincíidisulfon) -N,N' -diamido-propionové kyseliny;

bis-2-(2,6-antrachinondisulfon)-N,N'-diamido 3 fenyl propionové kyseliny.
5. Sloučenina vybraná ze skupiny skládající se z:

2,1 nntrnshincnsulfonamido-N,N-kaproové kyseliny;

N,Ν'-diethyl-2,
6-antrachinondisulfona~idu,

N,N'- íp-ethoxyfenyl)-2 , 6-antrachinondisulfonamidu; bis-2- (2, 6-antrachinondisulfon) -N,N' -diamid^-py kyseliny;

bis-2- (2,6-antrachinondisulfon) -N, N’ -diamido· 3 fenyl propionové kyseliny.

• 0

5. Způsob pro přípravu sloučenin podle nároku 5 vyznačující se tím, že zahrnuje reakci ^r'Qj3OT.^7r2_Cirj J ících halidů antrachinon mono- nebo disulfonových kyselin s vhodným aminem.
7. Farmaceutická kompozice obsahující terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1 ve směsi s farmaceuticky akceptovatelnými nosiči a excipiens.