CZ146699A3

CZ146699A3 - Naftyridinové deriváty, způsob jejich přípravy a farmaceutické prostředky, které je obsahují

Info

Publication number: CZ146699A3
Application number: CZ991466A
Authority: CZ
Inventors: Rene Hersperger
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1996-10-28
Filing date: 1997-10-24
Publication date: 1999-08-11
Also published as: TW399052B; NO991903D0; SI0934320T1; HUP9904204A2; SK283562B6; PT934320E; CA2269946C; HK1022305A1; SK55799A3; PL189280B1; PE10899A1; CO4910164A1; EP0934320A1; AU6908498A; DE69720493D1; US6136821A; NO991903L; JP4451496B2; ES2196377T3; IL129502A

Description

(57) Anotace:

Nové 8-aryl-l, 7- naftyridiny ve volné formě nebo ve formě soli jsou PDE IV inhibitory a Jsou tedy vohodné jako léčiva například při léčbě astmatu. Výhodné jsou sloučeniny I a II, kde skupiny R jsou definovány výše. Farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny, způsoby přípravy sloučenin a nových me? ..............—ziproduktů-pro-použltí-v-uvedenýeh-způsolj*· i * bech.

CZ 1466-99 A3

z • · toto • · · to to·· to * · • · • •to'· ««

• ·· * to · to to · • to · tototo ·*· ·' « » >< «· ·«

Naftyridinové deriváty, způsob jejich přípravy a farmaceutické prostředky, které je obsahují * f

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nových 8-aryl-l,7-naftyridinu, způsobu jejich přípravy, jejich použití jako léčiv a farmaceutické prostředky, které je obsahují.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje 8-aryl-l,7-naftyridiny ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelných solí. Termín „arylová skupina znamená monocyklickou nebo bicyklickou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu obsahující 10 atomatických nevodíkových atomů a je připojena k 1,7naftyridinu buď přímo (například fenylová skupina, pyridylová skupina, tetrazolylová skupina, benzofurazanylová skupina, nebo benzothiofurazanylová skupina) nebo přes methylenový můstek (například benzylová skupina nebo pyridylmethylová skupina); s výhodou monocyklická aromatická skupina obsahuje až 6 aromatických atomů uhlíku, ze kterých až dva mohou být nahrazeny atomem dusíku, například fenylová skupina, benzylová skupina, 4-pyridylová skupina nebo 4-pyridylmethylová skupina, popřípadě nese karboxylovou skupinu, karboxyesterovou skupinu nebo hydroxylovou skupinu. 8-Arylová skupina může být popřípadě dále substituovaná zejména skupinami přitahujícími elektrony, například nitroskupinou, nitriloskupinou, iminoskupinou, atomem halogenu nebo substituentem obsahujícím halogen (například trifluormethýlovou skupinou) nebo kyanoskupinou, s výhodou v poloze meta. Například 8-arylovou skupinou může být kyanofenylová skupina, nitrofenylová skupina, tetrazolylfenylová skupina (například tetrazol-1-

ylfenylová skupina) nebo chlorfenylová skupina. Popřípadě může být dvojitý kruh naftyridínové části molekuly dále substituovaný nebo disubstituovaný, zejména substituovaný v poloze 6, hydroxylovou skupinou, alkylovou skupinou, alkenylovou skupinou, alkinylovou skupinou, alkoxyskupinou, arylovou skupinou, aryloxyskupinou, aminoskupinou, arylaminoskupinou, diarylaminoskupinou, alkaminoskupinou, dialkaminoskupinou, arylamidoskupinou nebo alkamidoskupinou, kde „alk znamená alifatickou skupinu obsahující až 8 atomů uhlíku, která popřípadě nese karboxylovou skupinu nebo karboxyesterovou skupinu nebo hydroxylovou skupinu a/nebo popřípadě obsahuje etherovou spojku a/nebo estrerovou spojku.

I’

Předkládaný vynález zejména poskytuje 8-fenyl- a 8-benzyl-l,7naftyridiny, kde 1,7-naftyridinový dvojitý kruh je popřípadě -&, substituovaný v poloze 6, jak je například uvedeno níže, a fenylový kruh je popřípadě substituovaný substituentem přitahujícím elektrony, jako je nitroskupina; například sloučeniny . j obecného'vzorce I:

R kde

R_x je fenylová skupina, benzylová skupina, 3-nitrofenylová skupina, 3-chlorfenylová skupina, 3-kyanofenylová skupina, 3(tetrazolyl)fenylová skupina, benzofurazanylová skupina nebo benzothiofurazanylová skupina;

R₂ je hydroxylová skupina, aminoskupina, trifluormethansulfonylová skupina, allylová skupina, alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, alkoxyskupina, arylová skupina, toto toto to· · to ·♦· • to • to toto to* • to · • · · to tototo. * to · ···♦ · toto to ' * to arylalkylová skupina, aryloxyskupina, aminoskupina, arylaminoskupina, diarylaminoskupina, alkylaminoskupina, dialkylaminoskupina, alkylarylová skupina, arylamidoskupina nebo alkylamidos kup i na a jejich estery a amidy;

ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelných solí.

V obecném vzorci I a kdekoli v předkládaném vynálezu má termín „alkylová skupina a „arylová skupina stejný význam, jako je uvedeno v souvislosti s 8-aryl-l,7-naftyridiny podle vynálezu.

R₂ je s výhodou vybráno ze skupiny, kterou tvoří hydroxylová skupina, aminoskupina, arylaminoskupina (například fenylaminoskupina), arylová skupina (například fenylová skupina), alkylarylová skupina (například nižší alkylfenylová skupina)·, alkenylová skupina (například vinylová skupina), alkinylová skupina (například ethinylová skupina), alkoxyskupina obsahující etherovou spojku a/nebo esterovou spojku' (například methoxykarbonylmethoxyskupina) a alkylamidoskupina (například acetamidoskupina).

Zejména bylo překvapivě zjištěno, še celá nová třída 6,8-aryl1,7-naftyridinů je využitelná jako léčiva, zejména jako orálně aktivní inhibitory PDE 4, například pro léčbu astmatu.

Předkládaný vynález tedy ve výhodném provedení poskytuje 6(karboxyfenyl nebo karboxymethylfenyl)-8-(fenyl,benzo[c]thiadiazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7naftyridiny, a jejich estery a amidy, ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelných solí.

Výhodněji předkloádaný vynález poskytuje 6-(4-karboxyfenyl nebo 4-karboxymethylfenyl)-8-(fenyl,4-benzo [c] thiadiazolyl ne·· « · φ φ

• φ • · · fc φφφφ φ φ φ «* *' • · · · » « φ · · φ · * ·.

• φ ·· bo 4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridiny, a jejich estery a amidy, ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelných solí.

Benzo[c]thiadiazolylovou skupinou a benzo[c]furazanylovou skupinou se rozumí zbytek obecného vzorce A a B v tomto pořadí:

A

B

Předkládaný vynález tedy ve zvláště výhodném provedení poskytuje sloučeninu obecného vzorce II

kde n je nula nebo jedna;

R-, je hydroxylová skupina, aminoskupina, alkylaminoskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, s výhodou hydroxylová skupina nebo aminoskupina; a buď

R₃ je atom vodíku R₄ je nitroskupina, atom halogenu (například atom chloru), kyanoskupina nebo tetrazolylová skupina (například 1-tetrazolylová skupina), a R_s a R₆ společně tvoří další vazbu, nebo

R₃, ^R4, R_s a R₆ jsou společně skupina =N-O-N= nebo =N-S-N=; a její estery a amidy;

ve volné vormě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli.

Vhodné farmaceuticky přijatelné formy solí 8-aryl-l,7-naftyridinů, například obecného vzorce I nebo II, pro farmaceutické použití se připraví běžnými způsoby. Například sloučeniny obsahující volné karboxylové skupiny, například sloučeniny obecného vzorce II, kde R₇ je hydroxylová skupina, se mohou reagovat s vhodnou baží, například aminocukrem, jako je Nmethylglukamin, za získání odpovídající bazické adiční soli. Obvykle je taková bazická adiční sůl rozpustná ve vodě.

8-Aryl-l,7-naftyridiny podle předkládaného vynálezu, například obecného vzorce I, se mohou připravit pomocí reakce 2-kyano-3'pyridylacetonitrilu

a) s kyselinou, například H-A, kde A je atom halogenu, například atom bromu, za získání sloučeniny obecného vzorce III:

A

ΙΠ která se může dále derivatizovat za získání sloučenin podle předkládaného vynálezu, například pomocí zkřížené kondenzace (cross-coupling) za použití kovových činidel v přítomnosti palladiového nebo niklového katalyzátoru za vzniku vazby uhlík-uhlík, například pomocí Stilleho, Suzukiho nebo Heckovy reakce, t.j. reakce sloučeniny vzorce III se sloučeninou Y-R_e, kde Y je kovová odstupující skupina, například B(OH)₂-, (CH₂)₃Sn- (CH₃ (CH₂) ₃) ₃Sn-, a R_e je 8-arylová skupina, jak je «·· · * φ- φ · · · φφφφ φ φφφ φ φ · · φ φ_<·ί'₁_φ··φ··φ ···.···.

• · Φ . Φ φτ... · φ ~ Φ · ·«· -φφ· ·· ·? ·* ··

definováno výše,	například	benzylová	skupina	nebo 3-nitro
fenylová skupina,	za získání	sloučeniny	obecného	vzorce IV
		²

	II ks N
		1 rv

b) s Grignardovým	činidlem,	například	R_e-MgBr,	kde R_s je 8

arylová skupina, jak je definováno výše, například benzylová skupina nebo 3-nitrofenylová skupina./..za... získání sloučeniny obecného vzorce IV; nebo

c) s alkanolem alkalického kovu, například methanolátem sodným, za získání sloučeniny vzorce III'

kde Alk je alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, například methylová skupina. Substituent -O-Alk múze být převeden na atom halogenu A a sloučenina se potom může derivatizovat v poloze 8 tak, jak je popsáno výše pro sloučeninu vzorce III.

Aminoskup.ina ve .vzorci—III___I.I.IJ1—nebo—I-V—pod-l-éhá—d-a-Iš-í—reak-c-i-7například (i) aktivaci vhodným aktivačním Činidlem, například trifluorme thansul fonovou kyselinou a NaNO₂, za získání triflátu vzorce V:

Q

V

0« * • · » >0« • 00

0 0

0 0 * « » » 0 000,0 0

0Γ· 9 0Τ ♦,¹

·. ·3 0 «000 40 kde Q je bud' atom halogenu A definovaný výše, substituent -O-Alk definovaný výše u sloučeniny vzorce III' nebo 8-arylový zbytek R_e definovaný výše, což je nový a vysoce užitečný meziprodukt pro přípravu sloučenin podle předkládaného vynálezu. Například pokud je R₂ ve vzorci I připojen ke zbytku molekuly vazbou uhlík-uhlík, lze substituci provést křížovým spojením za použití kovového činidla v přítomnosti palladiového nebo niklového katalyzátoru za vzniku vazby uhlíkuhlík například Stilleho, Suzukiho nebo “Heckovou reakcí, například reakcí sloučeniny vzorce V, kde Q je R_e se sloučeninou vzorce Y-R₂, kde Y je kovová odstupující skupina definovaná výše a R₂ je požadovaný substituent uhlíku, například alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová .skupina, arylová skupina nebo alkylárylová skupina definovaná výše u vzorce I, popřípadě v chráněné formě s následným odstraněním chránící skupiny;

(ii) substituci alkylovou skupinou nebo arylovou skupinou (například reakcí s odpovídajícím alkylhalogenidem nebo organokovem) za získání požadovaného sekundárního nebo terciárního aminu; nebo (iii) acylaci (například reakcí s karboxylovou kyselinou nebo jejím anhydridem) za získání odpovídajícího amidu za ,· použití. konvenčních postupů; nebo '· *' ' ' (iv) konverzi na hydroxyskupinu například reakcí NaNO₂ v přítomnosti zředěné kyseliny například sírové a popřípadě další deřivatizaci například O-alkylaci například reakcí s alkylhalogenidem za vhodných reakčních podmínek.

Výhodné 6-(karboxy- nebo karboxymethyl- fenyl)-8-(fenyl, benzo[c]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridiny *ι 4 4

4 4* nebo jejich estery nebo amidy například vzorce II se konvenčně připraví následujícím způsobem j

44 • 4

Μ 4 4 4,

44 *4 *

4 4 · (A) při přípravě 6-(karboxy- nebo karboxymethyl--fenyl)8-(fenyl,benzo[c]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7naftyridinů nebo jejich esteru nebo amidu se nechá reagovat 6-X-8-(fenyl,benzo[c]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridin s X'-(karboxy- nebo karboxymethyl- -fenyl) nebo jeho esterem nebo amidem, nebo se nechá reagovat 6-(karboxy nebo karboxymethyl--fenyl)-8-X1,7-naftyridin nebo jeho ester nebo amid s X'-(fenyl, benzo [c]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl), kde X a X' jsou odstupující skupiny schopné účasti v křížové spojovací reakci; například kde X je trifluormethansulfonylová. skupina nebo atom halogenu, například bromu nebo chloru*a X' je kovová odstupující skupina například substituovaný bor (například -B(OH)₂, -B(OAlk)_z nebo -Balk₂, kde Alk je alkylová skupina například methylová skupina nebo ethylová ;

skupina) nebo trialkylstannýlová skupina (například (CH₃ (CH₂) j)₃Sn- nebo (CH₃)₃Sn-) nebo Grignardúv zbytek ^τ·. i (například MgBr; a/nebo (B) popřípadě reakcí 6-(karboxy- nebo karboxymethyl--fenyl)8-(fenyl,benzo[c]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7naftyridinu s vhodným aminem například amoniakem 'nebo” alkylaminem obsahujícím 1 až 4 atomy uhlíku za získání odpovídajícího amidu; a/nebo (C) popřípadě reakcí 6-(karboxy- nebo karboxymethyl--fenyl)8-(fenyl,benzotc]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7naftyridinu s vhodným alkoholem například a alkoholem obsahujícím 1 až 4 atomy uhlíku za získání odpovídajícího esteru; a « 0 « · · * «·*·. ·. ·*·_: ·*·, « ·^: i » · 0 ♦:·“ ' ·

0000 00 00 ·' ·· ·· získání výsledného 6-(karboxy- nebo karboxymethyl--£enyl)8-(fenyl,benzo[c]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridinu nebo jeho esteru buď volného nebo ve formě soli.

Reakční podmínky pro krok (A) jsou normální podmínky křížového spojení v této oblasti používající kovová činidla například v přítomnosti palladiového nebo niklového katalyzátoru za vzniku vazby uhlík-uhlík; například Stilleho, Suzukiho nebo Heckovou reakcí. Reakční podmínky pro kroky (B) a (C) jsou normální podmínky používané pro přípravu amidů reakcí karboxylové kyseliny a aminu pro přípravu esterů z karboxylových kyselin a alkoholů například v kyselém nebo bazickém prostředí. Izolace a čištění se provádí běžnými metodami například chromatograficky nebo krystalizací.

Provedení podle vynálezu tak poskytuje postup pro přípravu sloučeniny vzorce II uvedeného výše, který zahrnuje reakci sloučeniny vzorce VI

- kde—R₃-,—-R-₄-,—Ryj—-R—a—X-j-sou—definovány výše se sloučeninou vzorce VII

X'

O

Μ ·· • * · ♦ fc ·· • · _ -i ···· *· • fc · fcfc ·♦ ♦ · « fc · · • · · · fc ♦· · ·_ρ ♦♦♦*·· ·· · ·♦· ’ ί i·;· fc ’ ·' • fc fc' ·· ·· kde R₇ a X¹ jsou definovány výše, a izolaci sloučeniny vzorce II, která se tak získá volná nebo ve formě soli.

6-X-8-(fenyl,benzo[c]thiadazolyl nebo benzo[c] furazanyl)-1,7naftyridiny a 6-(karboxy- nebo karboxymethyl--fenyl)-8-X-l,7naftyridiny nebo jejich estery nebo amidy pro použití ve výše uvedených reakcích se s výhodou připraví reakcí 2-kyano3-pyridylacetonitrilu s kyselinou například H-A, kde A je atom halogenu například bromu, za získání sloučeniny vzorce III, která se podle potřeby dále derivatizuje, jak je popsáno výše.

Výše uvedené postupy přípravy 8-aryl-l,7-naftyridinů podle předkládaného vynálezu, zejména výhodných 6-(karboxy-, nebo karboxymethyl--fenyl)-8-(fenyl,benzo[c]thiadazolyl nebo benzole] furazanyl)-1,7-naftyridinu a jejich esterů a amidů jsou nové stejně jako intermediáty vzorců IV, V a VI a tyto nové postupy a intermediáty patří do rámce předkládaného vynálezu. Je třeba poznamenat, že sloučeniny vzorce V, kde Q je R_s a sloučeniny vzorce IV jsou zahrnuty mezi 8-aryl-l,7-naftyridiny podle předkládaného vynálezu.

Proto v dalších ohledech poskytuje vynález meziprodukty vzorce

kde Q' je atom halogenu nebo -O-Alk, kde Alk je C^-Cg alkylová skupina a vzorce VI

* · * · ·

VI r₃ kde R₃, R₄, R_s, R_s a X jsou definovány výše.

Vynález ilustrují následující příklady.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

6-Amino-8- (3-ni trofenyl) -1, 7-naftyridin

A. 2-Kyano-3-pyridylacetonitril

K míchané suspenzi 3-kyanomethylpyridin-N-oxidu (30 g, 0,22m mol; syntéza viz. Shigenobu Okuda, Michael M. Robison, J. Am.

Čhem. Soc. 81, 740 (1959)) v dichlormethanu (200 ml) se přidá trimethylsilankarbonitril (26 g, 0,26 mol). K této suspenzi se λ přidá dimethylkarbamylchlorid (28 g, 0,26 mol). Směs se míchá 45 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Roztok se promyje IN hydroxidem sodným a vodou a zahustí se ve vakuu. Produkt se čistí velmi rychlou kolonovou chromatografií na silikagelu (15:2 toluen/aceton) za získání_ sloučeniny uvedené v názvu. Molekulový pík M+H 144,1. Teplota tání 62-63 °C.

B. 6-Amino-8-brom-1,7-naftyridin

Míchaným roztokem 2-kyano-3-pyridylacetonitrilu (3,6 g,

0,025 mol) v toluenu (80 ml) se probublává 5 hodin bromovodíkem. Potom se opatrně přidá 4N roztok hydroxidu sodného a suspenze se intenzivně míchá. Směs se zfiltruje a produkt se • 4 4* ·· * *4 44 * 4 4·· 4 » 4 4 ·♦· 4··» 4··· • «ι 4 V 4 « 4444 » 4»é 4*< ·· · í - Ϊ « 4

4444 ·* ·· * ·· · promyje vodou a vysuší. Krystalizace z toluenu poskytne sloučeninu uvedenou v názvu. Molekulový pík M+H 225. Teplota tání 188°C (rozklad) .

C. 6-Amino-8- (3-nitrof enyl-1,. 7-naf tyridin

K míchanému roztoku 6-amino-8-brom-1,7-naftyridinu (4 g, 0,018 mol) ve směsi tetrahydrofuranu (80 ml) a vodného uhličitanu sodného (34 ml, 2N) se přidá bis(dibenzylidenaceton)palladium (0,40 g, .0,0007 mol), trifenylfosfin (0,37 g, 0,0014 mol) a 3-nitrofenylboronová kyselina (3,7 g, 0,022 mol). Směs se 16 hodin míchá při 80°C. Směs se zfiltruje, přidá se ethylacetát a směs se promyje 2N roztokem hydroxidu sodného a vodou. Organické rozpouštědlo se odpaří a zbytek se suspenduje v etheru. Filtrace poskytne sloučeninu uvedenou v názvu. Molekulový pík M+H 267, teplota tání 221-223 °C.

Příklad 2

6-amino-8 - (4-benzo[c]furazanyl) -1, 7-naftyridin

K míchanému roztoku 6-amino-8-brom-1,7-naftyridinu (3,0 g,

13,4 mmol) v dimethylformamidu (50 ml) se přidá bis (dibenzylidenaceton)palladium (308 mg, 0,54mmol), trifenylfosfin (565 mg, 2,15 mmol) a 4-trimethylstannylbenzo[c]furazanyl (4,92 g,

16,0 mmol) . Směs se 4 hodiny udržuje při 125 °C. Pak se přidá ethy-l-aeet-á-t—(-5ΌΌ—mlý^a”pa'k 'vodňy roztok fluoridu draselného (40% roztok, 100 ml). Směs se intenzivně míchá 45 min a pak se zfiltruje. Organická vrstva se oddělí, promyje vodou a zahustí. Zbytek se převede do etheru (20 ml), 30 min se míchá (0 °C) a pak zfiltruje za získání sloučeniny z nadpisu (2,8 g) . Molekulový pík M+H 264, teplota tání 244-250 °C.

fcfc fc* fcfc · fcfc ♦ · t · · · ♦ · · · fc • fcfcfc · · · · fcfcfcfc

- _ fcfcfcfc·· ···· · fcfcfc fc·· .·.··* τ - - fc «fcfcfcfc* ·· · fcfc · ·

Příklad 3

6-Hydroxy-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin

K roztoku 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (500 mg,

1,87 mmol; připraví se podle příkladu 1) v koncentrované kyselině sírové a vodě (3 ml, .2:1) se přidá při 4 °C dusičnan sodný (155 mg, 2,25 mmol). Po 30 minutách, se odstraní ledová lázeň a směs se 3 0 minut zahřívá na 70 °C. Reakční směs se nalije na led a roztok se neutralizuje přidáním hydrogenuhličitanu sodného. Sraženina se zfiltruje a promyje vodou za získání sloučeniny uvedené v názvu. Teplota tání 262-265 °C.

Příklad 4 >

6-Methoxykařbonylmethoxy-8- (3-nitrofenyl) -1, 7-naftyridin

Suspenze 6-hydroxy-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyrídinu (107. mg,

0,40 mmol; připraví se podle předchozího příkladu popřípadě bez dalšího čištění), uhličitanu draselného (55 mg, 0,40 mmol) a methylesteru bromoctové kyseliny (37 μΐ, 0,4 mmol) se dvě hodiny míchá ve směsi aceton-dimethylformamid (2 ml, 1:1) při teplotě místností. Pak se přidá ethylacetát a organická fáze se promyje 2N roztokem hydroxidu sodného. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a produkt se čistí preparativní tenkovrstvou chromatografii za získání sloučeniny z nadpisu. Molekulový pík M+H 340; teplota tání 160-162 °C.

Příklad 5

Hydrochlorid 6-acetamido-8- (3-nitrofenyl) -1, 7-naftyridinu

Suspenze 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (300mg,

1,1 mmol; připraví se podle příkladu 1) a acetanhydridu (0,12 ml, 1,2 mmol) v pyridinu (1 ml) a dimethylformamidu (3 ml) se 3 hodiny zahřívá na 80 °C. Pak se přidá voda a sraftft · • ftft ft ftftft ftft »· « ftftft « ftft ft • ft ftft • ft

ženina se zfiltruje a důkladně promyje vodou. Filtrace poskytne poskytne produkt z nadpisu. Molekulový pík M+H 308; teplota tání 235-238 °C.

Příklad 6

6-Amino-8-benzyl-1,7-naftyridin

K roztoku 2-kyano-3-pyridylacetonitrilu (2 g, 0,014 mol) v toluenu (20 ml) se přidá benzylmagnesiumbromid 8,4 ml, 2M roztok v tetrahydrofuranu (0,17 mol) při teplotě místnosti. Po 1 hodině se reakční směs rozloží nasyceným roztokem chloridu amonného. Produkt se extrahuje ethylacetátem a organická vrstva se promyje 2N roztokem hydroxidu sodného a vodou. Produkt se čistí tlakovou kolonovou chromatografií na silikagelu (10:3 toluen/aceton) za získání sloučeniny z nadpisu. Molekulový pík M+H 236; teplota tání 113-116 °C.

Příklad 7

6-Fenylamino-8- (3-nitrofenyl)-1, 7-naftyridin

K roztoku trifenylbismuthu (182 mg, 0,41 mmol) v dichlormethanu (0,5 ml) a tetrahydrofuranu (0,5 ml) se přidá peroctová kyselina (0,083 ml, 40% roztok). Směs se míchá 1 hodinu a pak se přidá roztok 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (100 mg, 0,37 mmol; připraví se podle příkladu 1) v dichlormethanu (0,5 ml) a tetrahydrofuranu (0,5 ml). Pak se přidá měď (30 mg, 0,47 mmol) a suspenze se míchá 40 hodin. Suspenze se zředí ethylacetátem a zfiltruje se. Filtrát se promyje 2N roztokem uhličitanu sodného a vodou a organická vrstva se zahustí ve vakuu. Preparativní tenkovrstvá chromatografie (8:2 dichlormethan/n-hexan) poskytne sloučeninu z nadpisu. Molekulový pík M+H 343,1; teplota tání 158-160 °C.

* *

·* ♦· • »· • · · · •···» « 9 ·

Příklad 8

6-Trifluormethansulfonyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin

K roztoku 6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (1,24 g, 0,0047 mol; připraví se podle příkladu 1) v trifluormethansulfonové kyselině (12 ml) se po několika částech přidá dusitan sodný (0,64 g, 0,0093 mol). Roztok se zahřívá na 62 °C a míchá přes noc. Roztok se nalije do .směsi ethylacetátu a ledu a pak se přidává 2N roztok hydroxidu sodného, dokud reakce vodné fáze není alkalická. Organická fáze se promyje vodou a zahustí se ve vakuu.. Produkt se čistí tlakovou kolonovou chromatografií na silikagelu (7:3 hexan/ethylacetát) za získání sloučeniny z nadpisu. Molekulový pík M+H 400; teplota tání 106-108 °C.

Příklad 9

6-Fenyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin

K roztoku 6-trifluormethansulfonyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (300 mg, 0,75 mmol; připraví se podle příkladu 8) v tetrahydrofuranu (5 ml) se přidá fenylboronová kyselina (118 mg, 0,97 mmol), bis(dibenzylidenaceton)palladium (18 mg, 0,03 mmol), trifenylfosfin (16 mg, 0,06 mmol) á vodný roztok uhličitanu sodného (2N roztok, 1,44 ml). Roztok se 20 hodin zahřívá na .60 °C. Roztok se zředí ethylacetátem, zfiltruje se a promyje se IN roztokem hydroxidu sodného a vodou. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu za získání čistého produktu. Molekulový pík M+H 328, teplota tání 172-175 °C.

Příklad 10

- Vinyl - 8 - (3 -ni trof enyl )-1,7 -naf tyri din *9 · Β ΒΒΒ ΒΒ ** ΒΒΒ ΒΒΒ Β · · · • 1*9 φ ΒΒΒ Β · · · _ _ β·β··β ·Β·β β β·· ·♦· t « * · Β Β * Β · · *! · ΒΒ · *

Κ roztoku 6-trifluormethansulfonyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (250 mg, 0,62 mmol, připraví se podle příkladu 13) v tetrahydrofuranu (3 ml) se přidá vinyltributylstannan (218 mg,

0,68 mmol), bis(dibenzylidnaceton)palladium (14 mg, 0,025 mmol), trifenylfosfin (13 mg, 0,049 mmol) a chlorid lithný (78 mg, 1,86 mmol). Směs se přes noc zahřívá na 70°C. Roztok se zředí ethylacetátem, zfiltruje a promyje vodou. Preparativní tenkovrstvá chromatografie (8:2 dichlormethan/n-hexan) poskytne sloučeninu z nadpisu. Molekulový pík M+H 278; teplota tání 145-151 °C.

Příklad 11

6-Ethinyl-8-(3-nitrofenyl)-1, 7-naftyridin

A. 6-Trimethylsilylethynyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin se připraví následovně: k roztoku 6-trifluormethansulfonyl-8-(3nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (200 mg, 0,50 mmol; připraví se podle příkladu 13) v dimethylformamidu (1 ml) a triethylaminu (0,5 ml) se přidá ethynyltrímethylsilan (0,078 ml, 0,56 mmol), bis(dibensylidnaceton)palladium (5,8 mg, 0,020 mmol), trifenylfosfin (5,3 mg, 0,020 mmol) a jodid mědi (3,8 mg, 0,020 mmol). Směs se 2 hodiny míchá při 60°C. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se vodou. Produkt se čistí tlakovou kolonovou chromatografií na silikagelu (20:0,2 toluen/aceton) za získání 6-trimethylsilylethinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu. Molekulový pík M+H 348; teplota tání 160-163 °C.

Β. K roztoku 6-trimethylsilylethynyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu (77 mg, 0,22 mmol) v methanolu (0,5 ml) a toluenu (0,5 ml) se přidá IN roztok hydroxidu draselného (0,22 ml).

Směs se 2 hodiny míchá a suspenze se pak zfiltruje a produkt promyje vodou a etherem za získání sloučeniny z nadpisu.

Molekulový pík M+H 276; teplota tání 215°C za rozkladu.

toto · to · to · · · » · · ··* ··*· ···· to tototo · ·· · • · to** * »··* · *·· toto· to*···· to to to··· »· ·· to *· ··

Příklad 12

6-(4-Karboxyfeny1)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridin

K roztoku 6-trifluormethansulfonyl-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridinu (2,15 g, 5,67 mmol) v dimethylformamidu (21,5 ml) se přidá 4-karboxyfenylboronová kyselina (1,13 g, 6,81mmol), bis(dibenzylidenaceton)palladium (131 mg, 0,23 mmol), trifenylfosfin (95 mg, 0,36 mmol) a vodný.uhličitanu draselného (2N roztok, 17 ml). Reakční směs se míchá 2,5 hodiny při 80 °C. Horký roztok se zfiltruje přes křemelinu a surový produkt se opatrně vysráží přidáním vody (10 ml) a vodné kyseliny chlorovodíkové (2N roztok, 8 ml) . Suspenze se zfiltruje a surový produkt se míchá v horkém tetrahydrofuranu (30 ml). Chladná suspenze se opět přefiltruje za získání sloučeniny· z nadpisu (1,12 g). Molekulový pík M+H=352, teplota tání >300 °C, retenční čas HPLC = 7,58 min (kolona: LiChroCart

125-4, Supersfere 60 RP-select B, 40°; eluent: acetonitrilvoda (0,1 % TFA) = 45:55,- 1 ml/min; detekce při 254 nm) .

Příklad 13.

6- (4-Karbamoylfenyl)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridin

K suspenzi 6-(4-karboxyfenyl)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridinu (100 mg, 0,28 mmol) v toluenu (2 ml) se přidá thionylchlorid (0,1 ml, 1,37 mmol). Reakční směs se 3 hodiny zahřívá k varu.

Potom se odpaří rozpouštědlo a zbytek se převede do tetrahydrofuranu (2 ml) . Pak se přidá vodný amoniak a roztok se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, pak se přidá ethylacetát a organická vrstva se promyje vodou za získání čisté sloučeniny z nadpisu, která má teplotu tání 237-240 °C.

« · •fc ·· · ·· fcfc ·· «· · · · · *«·· · · · · · · · ·

-Q ····♦· ···· * ··· ···

1ti £ 5 ’ * ’ fc · » ···· fcfc ·* · fcfc ·*

Příklad 14

6-(4-Karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridin

A. 6-Amino-8-methoxy-1,7-naftyridin

K roztoku sodíku (3,2 g, 0,139 mol) v methanolu (1400 ml) se přidá 2-kyano-3-pyridylacetonitril (20 g, 0,139 mol) a reakční směs se míchá 17 hodin při teplotě místnosti. Pak se přidá voda (700 ml) a po odpaření většiny methanolu vykrystaluje sloučenina z nadpisu. Teplota tání 178-180 °C.

B. 6-Trifluormethansulfonyl-8-methoxy-1,7-naftyridin

K roztoku 6-amino-8-methoxy-1,7-naftyridinu (19 g, 0,108 mol) v 1:1 směsi vody a trifluormethansulfonové kyseliny (380 se opatrně pří 0 °C přidá roztok dusitanu sodného (11,2 g,

0,162 mol) ve vodě (40 ml). Po 1 hodině se chladicí lázeň odstraní a reakční směs se míchá další hodinu při teplotě místnosti. Pak se přidá ethylacetát (500 ml) a roztok se neutralizuje přidáním hydrogenuhličitanu sodného (4N roztok, .

litr). Vodná fáze se opět extrahuje ethylacetátem (3 x 500 ml) . Organické rozpouštědlo se odpaří a surový produkt se čistí tlakovou kolonovou chromatografií na silikagelu (20:3 toluen/aceton) za získání sloučeniny z nadpisu. Molekulový pík M⁺ 308; teplota tání 99-101 °C.

C. 6-(4-Karboxyfenyl)-8-methoxy-l,7-naftyridin

K roztoku 6-trifluormethanesulfonyl-8-methoxy-l,7-nafthyridinu (1,5 g, 4,86 mmol) v dimethylformamidu (40 ml) se přidá 4-karboxyfenylboroňová kyselina (0,866 g, 5,34 mmol), bis(dibenzylidenaceton)palladium (112 mg, 0,167 mmol), trio-tolylfosfin (96 mg, 0,32 mmol) a vodný uhličitan sodný (14,6 ml, 2N roztok) . reakční směs se 3 hodiny míchá při 110 °C.

• · • fcfc ♦ · · * · · · fcfc·· « · « fc · · · · fc·········*······ ±17 fc s s - ř ·· ·«·* ·· fc* < ·· ··

Horký roztok se zfiltruje přes křemelinu a odpaří se do sucha.

Surový produkt se rozpustí v horké vodě (60 ml) a vodná fáze se promyje ethylacetátem (3 x 50 ml) . Produkt se z vodné fáze vysráží opatrným přidáním vodné kyseliny chlorovodíkové (2N roztok, 6 ml) . Suspenze se zfiltruje a surový produkt se opět rozmíchá v horkém ethylacetátu (50 ml) . Chladná suspenze se zfiltruje za získání sloučeniny z nadpisu (1,10 g). Molekulový pík M⁺ 280; teplota tání >300 °C.

D. 6-(4-Karboxyfenyl)-8-brom-l,7-naftyridin)

K roztoku 6-(4-karboxyfenyl)-8-methoxy-l,7-naftyridinu (250 mg, 0,892 mmol) v dimethylformamidu (10 ml) se přidá bromid fosforitý (0,63 ml, 6,63 mmol). Reakční směs se 30 minut zahřívá na 100 °C. Potom se suspenze nalije do vody (50 ml) a roztok se promyje ethylacetátem (2 x 50 ml) . Organické rozpouštědlo se odstraní a surový produkt se rozmíchá v etheru. Suspenze se zfiltruje za získání sloučeniny z nadpisu (215 mg). Teplota tání 248-250 °C, rozklad.

E. 4-Benzo[c]furazanylboronová kyselina

K roztoku 4-benzo[c]furazanylbromidu (4 g, 0,020 mol) v tetrahydrof uranu (80 ml) a n-pentanu (20 ml) se přidá triethylborát (3,8 ml, 0,022 mol) a Ν,Ν,Ν,Ν-tetraethylendiamin (3 ml, 0,02 mol). Pak se po kapkách při -100 °C přidá n-BuLi (8,8 ml, 2,5N roztok v hexanu, 0,022 mol) a roztok se míchá dalších 5 minut. Reakční směs se nalije do vodného roztoku nasyceného chloridu amonného a vodná fáze se extrahuje ethylacetátem. Organické rozpouštědlo se odstraní a surový produkt se převede do směsi dichlormethan/n-hexan (5:6). Suspenze se zfiltruje za získání sloučeniny z nadpisu (1,05 g) , která se použije bez dalšího čištění.

•» · ftft • « · ftftft ftftft • ft ftft ftft » ftft • · v « vij

F. 6-(4-Karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridin

K roztoku 6-(4-karboxyfenyl)-8-brom-l,7-naftyridinu (100 mg, 0,304 mmol) v dimethylformamidu (2,5 ml) se přidá 4-benzo [c] furazanylboronová kyselina (60 mg, 0,36 mmol), bis(dibenzylidenaceton)palladium (7 mg, 0,0122 mmol), tri-o-tolylfosfin(7,4 mg, 0,024 mmol) a vodný uhličitan sodný (0,9vml, 2N roztok) . Reakční směs se 2 hodiny míchá při 80 °C. Horký roztok se zfiltruje přés křemelinu a .filtrát se odpaří do sucha. Zbytek se rozmíchá v ethylacetátu (20 ml) , suspenze se zfiltruje a organické rozpouštědlo se odstraní. Zbytek se rozpustí v horkém dimethylformamidu (7 ml) a surový produkt se vysráží opatrným přidáním vodné kyseliny chlorovodíkové (2N roztok, 1 ml). Surový produkt se překrystaluje z horkého dimethylformamidu za získání sloučeniny z nadpisu (68 mg) . Molekulový pík MH+ 369; teplota tání >300 °C, retenční čas

HPLC = 10,40 min (kolona: LiChroCart 125-4, Supersphere 60 RP-select B, 40°; eluent: acetonitril/voda (s přídavkem 0,1 % TFA) = 45:55; 1 ml/min; detekce při 254 nm).

Opakováním postupu u příslušných příkladů uvedených výše a za použití příslušných výchozích látek se získají sloučeniny vzorce I uvedené v následující tabulce 1.

>

φ« ·♦ • · « · · *

Tabulka 1

R,

Př. č.	R.	r₂	tepl. tání °C
¹⁵	A Cl	-nh₂	141-143
16	A CN	u	173-176
17	, MA -N \-f N^JN	u M
¹⁸	—o	-^nhAŽ)	95-98
19	u	1	60
20	ss	⁰ 0	92-95
21	v Cl	ss	94-96
22	A CN	H	102-104
23	Tc>	SI	95-98
24		n	155-158

·« • ft · ft · • · · ftftft • ftftft · ft · ft ft ft ftftft ·*··· ftftft ftftft ftftft# ftft ftft ft ft _ _ · • ft · • ftft ftftft • · • ft ftft

Př. č.	R.	r₂	tepl. tání °C
25	—O	“O
26	tt	H A'^H 1 H
27	tt	—C=C-H
28	ςτ Cl		265-267
29	- no₂	w	>260 za rozkl.
30	ζϊ Cl	/>7 NH₂	234-236
31	no₂	tt	295 za rozkl.
32	Cl	-CH och₃	225-227
33	ůq> no₂	u	214-216

• 9 o -a

Bazické adiční soli sloučenin majících volné karboxylové skupiny, například sloučenin popsaných výše, lze připravit spojením sloučeniny s příslušným aminosacharidem například N-methyl-D-glukaminem. Příprava takových bázických adičních solí je popsána následujícími příklady.

Příklad 34

6- (4-Karboxyfenyl) -8 (4-benzo [c] furazanyl) -1, 7-naftyridin: sůl s N-methyl-D-glukaminem

K horkému roztoku 6-(4-karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl)1.7- nafthyridin (1 g, 2,72 mmol) v dimethylformamidu (100 ml) se přidá N-methyl-D-glukamin (0,53 g, 2,72 mmol). Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se překrystaluje z horkého methanolu (ca. 50 ml) za získání čistého produktu (1,11 g). Teplota tání: 230 °C, rozklad. Retenční čas HPLC' = 6,65 min (kolona: LiChroCart 125-4, Supersphere 60 RP-select B, 50°; eluent: gradient od 0 % B/100 % A do 70 % B/30 % A během 15 minut; A: 2,7 g KHPO₄/0,027 g Na₂HPO₄ v 900 ml vody a 100 ml acetonitrilu a B: 100 ml vody a 900 ml acetonitrilu; detekce při 220 nm). Produkt je rozpustný ve vodě.

8-Aryl-1,7-naftyridiny podle předkládaného vynálezu například vzorce I a zejména výhodné 6-(karboxy- nebo karboxymethyl-fenyl)-8-(fenyl,benzo[c]thiadazolyl nebo benzo[c]furazanyl)1.7- naftyridiny a jejich estery a amidy volné nebo ve formě soli (zde uvedené jako činidla podle předkládaného vynálezu) vykazují farmakologickou aktivitu a jsou užitečné jako léčiva například pro léčení chorob uvedených níže.

Činidla podle předkládaného vynálezu vykazují zejména inhibiční aktivitu vůči cyklické nukleotidové fosfodiesteráze (PDE), a to selektivně pro isoenzym typu 4.

0 0

0'

Činidla podle předkládaného vynálezu mají protizánětlivé a bronchodilatační účinky a působí proti hyperaktivitě dýchacích cest. Dále mají imunosupresivní účinky, inhibují sekreci TNFa a jsou i jinak farmakologicky aktivní, což lze dokázat standardními testovacími metodami, například následujícími:

A, Inhibice PDE4: testování inhibice rekombinovaných isoenzymů PDE4A, PDE4B, PDE4C a PDE4D

Klonování a exprese: PDE4 cDNA kódující čtyři isoenzymy, lidský PDE4A (popsaný Sullivanem a dalšími, Cell Signál 1994; 6:793-812), krysí PDE4B (popsaný Colicellim a dalšími, Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1989; 86:3599-3903), lidský PDE4C (popsaný Engelsem a dalšími, FEBS Lett. 1995; 358:305-310) a lidský PDE4D (popsaný Baeckerem a dalšími, Gene 1994; 138:253-256) se klonuje buď do extrachromsomálního kvasinkového expresního vektoru (PDE4C, PDE4D) nebo integruje (PDE4A, PDE4B; jednoduchá kopie) v pep4 místě kmenu Saccharorr.yces cerevisiae chybějícím v obou typech PDE genů přírodního typu kvasinek. Kmeny kvasinek s expresí PDE4 isoenzymů se kultivují v 1 litru kultury při 30 °C, peletizují a mrazí do homogenizace.

Homogenizace: Peletované kvasinky (5 ml) se suspendují v 50 ml pufru (10 mM trishydroxymethylaminomethanu, 1 mM ethylendiamintetraoctové kyseliny, 1 mg/ml leupeptinu a pepstatinu A, 175 mg/ml fenylmethylsulfonylfluoridu, 1 mM dithiothreitolu, pH 7,4 s HCl). Po odstředění se k peletám přidá 15 g skleněných kuliček promytých pufrem (425-600 mm, promyté kyselinou, Sigma Chemical Co.). K této kaši se přidá 1 ml pufru a 60 mg cholamidopropansulfonové kyseliny a kaše se intenzivně míchá 4 h při 4 °C. Buňky kvasinek se rozmělní, což se mikroskopem pozoruje jako (fázově kontrastní optika) tmavé buňky >30 % »· 00 0 00 *· • Β «00 0 0 0 ·

0 00 0 · · 0 0 ·· *

000 Φ 0000 · 000 0·· · · 0 0 0 *

0 0 Ť * '- · ' » - - - (obvykle 50 %). Kaše se převede do skleněné nálevky a homogenní podíl se oddělí odsáním a promytím skleněných kuliček celkem 15 ml pufru. Fragmenty buněk se od roztoku oddělí odstředěním (2000xg, 10 min, 4 °C) . Pelety se suspendují v 15 ml pufru a testují se na PDE aktivitu spolu s roztokem,

Isoenzymové prostředky se jinak odvodí z lidských zdrojů. Prostředky typu 3 a 4 se získají za “využití predominance isoenzymů typu 3 v krevních destičkách a prostředky isoenzymu 4 v neutrofilech za použití následující techniky:

Buňky a tkáně se homogenizují na ledu v tris-HCl 10 mM pH 7,4 obsahujícím: sacharosu (250 mM) , EDTA 1 mM, dithiothreitol.

(1 mM) , leupeptin a pepstatin A (každého 1 μg/ml) a fenyl-: _t τ methylsulfonylfluorid (PMSF, 0,17 .mg/ml, přidá se těsně před homgenizcí) . Neutrofily (typ 4) a krevní destičky (typ 2 a 3) se získají z lidské krve a podrobí se působení ultrazvuku (Bransonova sonda, 4 x 15 sekund) . Lidská plicní tkáň se získá od pacientů (typy 1 a 5) , kteří se podrobili operaci a homgenizuje se za použití polytronového homgenizátoru (dva impulsy po 30 sekundách).

Isoenzymové prostředky: PDE 3 a 4 (substrátová cAMP 1 μΜ) prostředky sestávají z roztoku z pomalého odstředění krevních destiček respektive roztoku z homogenizace neutrofilu. Typy 1 (substrátowá cAMP 100 μΜ, Ca²⁺ 0,5 mM, calmodulin 125 nM) , 2 (cAMP 100 μΜ) a 5 (cGMP 1 μΜ) se oddělí intově výměnnou chromatografií (Q-sefarosa) za použití gradientu NaCl v homogenizačním pufru bez sacharosy a PMSF (0 až 0,1 M NaCl v 2,5 objemech kolony, 0,1 až 0,45 M ve 24 objemech kolony). PDE 1: frakce, kde lze stimulovat hydrolýzu cAMP 1 μΜ pomocí Ca²⁺ + calmodulin (0,5 mM respektive 125 nM) ; eluce 0,17-0,18 M NaCl.

4* *4 »* ·» * 44 «44 · · β · · * · ♦ ·· · · · · · «4 · _ 4 4 4*4 · *44* 4 44· *♦· «44*44 4* “ ~ *4*4 · 44 4 44 44

PDE 2: frakce vykazující značnou cAMP hydrolytickou aktivitu při 100 μΜ ale ne při 1 μΜ; eluce 0,31-0,32M NaCI. PDE 5: frakce selektivně hydrolyzující cGMP 1 μΜ při cAMP 1 μΜ; eluce 0,20-0,24M roztokem NaCI.

Testování PDE: Testovací postup je založen na dvoukrokové metodě popsané Thompsonem a dalšími (Adv. Second Messenger Phosphoprotein Res. 1979; 10:69-92) modifikované pro 96jamkovou mikrotitrační desku. Enzym se zředí homogenizačnim pufrem (viz. výše) za účelem dosažení 10% až 30% hydrolýzy celkového množství substrátu během testu. Pro zahájení reakce se k 25 ml substrátu ([3H]-cAMP, 1,25 mM, 740 Bq) a 75 ml roztoku inhibitoru (viz. níže) přidá 25 ml zředěného enzymu.

Po 30 minutách při 37 °C se reakce zastaví v lázni s horkou vodou (65 °C, 5 minut). Desky se ochladí na ledu a inkubují se 10 minut při 37 °C s 25 ml roztoku 5¹-nukleotidasy (hadí jed oiofaghus hannah, Sigma Chemical Co., 0,1 mg/ml ve vodě). Nezreagovaný substrát se oddělí od [3H]-adenosinu postupným přidáním alikvotú (100+50+50 ml v 5 min intervalech) 30% (objemově) Dowexu 1x2 jako kaše (acetátová forma) v 0,2'% (objemově) octové kyselině. Dowex se sbalí odstředěním (150xg, min). Alíkvoty roztoku se převedou na 96-jamkovou scintilační desku pro tuhou fázi (LumaPlate, Canberra Packard) za použití automatického pipetovacího zařízení (Hamilton MicroLab 22 00) , vysuší (alespoň 4 hodiny při 50 °C) a změří (Canberra Packard TopCount).

Inhibitory: Zásobní roztoky inhibitorů se připraví v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zředí se směsí voda/DMSO za získání 7 koncentrací v rozsahu inhibice 30 % až 70 %. Během testu se koncentrace DMSO udržuje konstantně na 50 ml/ml.

• I ·Β BBB ·· ·♦

Β Β BBB · · Β · • BBB · Β · Β Β ·· · _ΑΠ Β · Β Β Β · ΒΒΒΒ · ··* ··· £ ! β····· Β · • · · · ·Β ΒΒ · Β· ΒΒ

Stanovení inhibičních parametrů: Koncentrace, při které se dosáhne poloviny maximální inhibice (IC50), a strmost křivky závislosti na dávce (Hillův koeficient) se stanoví z křivky koncentrace-inhibice pomocí nelineární metody nejmenších čtverců za získání rovnice se dvěma parametry. Výsledky se vyjádří jako záporný dekadický logaritmus koncentrace inhibitoru, při které se dosáhne poloviny maximální inhibice (IC50; v mol/1; pIC50). Pak se odhadne interval 95% spolehlivosti a vyjádří se jako pL a pU {záporný dekadický logaritmus horního a spodního limitu spolehlivosti). Z analýzy se vyloučí koncentrace, které způsobí viditelnou tvorbu sraženiny.

V této testovací metodě inhibují činidla podle předkládaného vynálezu PDE isoenzymy typu 4, které mají poměrně malý vliv v porovnání s typy 1, 2, 3 a 7. V rámci skupiny isoenzymů PDE typu 4 (tj. PDE typy 4 A až D) činidla podle předkládaného vynálezu obecně vykazují v porovnání s PDE typu 4 A, 4B a 4C selektivní inhibici isoenzymů PDE typu 4 D.

Protizánětlivé účinky: Inhibice eosinofilní aktivace pomocí formyl-MetLeuFe (fMLP)

Čištěné lidské eosinofily (104/jamku v 0,2 ml HBSS) se stimulují pomocí fMLP (1 μΜ) vpřítomnosti lucigeninu (25 μΜ) . Inhibice stupně oxidace (měří se jako změna chemiluminiscence) se stanoví z křivky odpovědi dávky za použití logistické rovnice.

Činidla podle předkládaného vynálezu jsou aktivní ve výše uvedené testovací metodě při koncentracích řádově 0,001 až 5 μΜ, obecně v nízkém nM rozsahu. Sloučenina z příkladu 2 má například IC50 v tomto testu na hodnotě 0,006 μΜ.

·« ·· • · · · fc · « · • •fc ··· • * • fc · • · fc • fc ·· • · fc • · · · * • fc «fcfc * a a · ·*· ·· ·· • · ·♦·· ·

S ohledem na jejich protizánětlívé účinky, jejich vliv na hyperaktivitu dýchacích cest a jejich profil v souvislosti s inhibicí PDE isoenzymú, zejména jako selektivní inhibitory typu 4, jsou činidla podle předkládaného vynálezu užitečná pro léčení (zejména profylaktické) obstruktivních nebo zánětlivých chorob dýchacích cest. Při kontinuálním a pravidelném podávání po delší dobu jsou činidla podle předkládaného vynálezu užitečná jako způsob zlepšené ochrany proti opakování stažení bronchosvěraču nebo jiných symptomatických ataků souvisejících s obstruktivními nebo zánětlivými onemocněními dýchacích cest nebo pro zvládání, zlepšení nebo vyléčení bazálního stavu takových chorob.

S ohledem na jejich bronchodilatační účinky jsou činidla podlé předkládaného vynálezu užitečná jako bronchodilatační látky, například pro léčení chronického nebo akutního stažení průdušek například při symptomatickém léčení obstruktivních nebo zánětlivých chorob dýchacích cest.

Slovo „léčení v popisu a nárocích použité v souvislosti s obstruktivními nebo zánětlivými chorobami dýchacích cest se myslí jak pro profylaktický tak i symptomatický způsob léčby.

V souladu s výše uvedeným předkládaný vynýlez dále poskytuje:

A. způsob

a) léčení hyperreaktivity dýchacích cest,

b) bronchodilatace nebo zejména

c) léčení obstruktivních nebo zánětlivých chorob dýchacích cest, u pacientů, u kterých je takové léčení nutné , a tento způsob sestává z podávání uvedenému pacientovi účinného množství Činidla podle předkládaného vynálezu.

• · • ·

ftftft • * • ··· • · ·· · ft · · ft ftft

Obstruktivní nebo zánětlivé choroby dýchacích cest, ke kterým se vynález vztahuje, zahrnují astma, pneumokoniózu, chronické obstruktivní choroby dýchacích cest nebo plic (COAD nebo COPD) a syndrom dýchacího stresu dospělých (ARDS), a dále drážděni hyperreaktivity dýchacích cest v souvislosti s jinými léky například aspirinem nebo β-agonisty.

Předkládaný vynález lze použít při léčení astmatu všech typu a stádií včetně vnitřního a zejména vnějšího astmatu. Dále jej lze použít pro léčení alergického (atopického/lgE) astmatu a pro léčení nonatopického astmatu včetně například bronchitického astmatu, cvičením indukovaného astmatu a astmatu z povolání, astmatu indukovaného po. bakteriální infekci a dalších nealergických typů. Dále je použitelný pro léčení syndromu sípavých dětí (začínající astma u dětí).

Vynález je použitelný pro léčení pneumokoniózy všech typů a stádií včetně například aluminózy, anthrakózy, asbestózy, chalikózy, ptilózy, siderózy, silikózy, tobakózy a byssinózy..

Vynález je použitelný pro léčení COPD nebo COAD včetně chronické bronchitidy, plicního emfysema nebo spojeného dyspnea.

Vynález je použitelný i pro léčení bronchitidy všech typů a stádií například akutní, arachidické, katarové, chronické, záškrtové tuberkulózové bronchitidy apod.

S ohledem na jejich aktivitu jako selektivních inhibitorů uvolňování TNF-α jsou činidla podle předkládaného vynálezu užitečná také pro snížení nebo inhibici uvolňování TNF-a například pro léčení chorob, kdy je implikované uvolňování TNF-α nebo hraje zprostředkující roli například u chorob majících etiologii zahrnující nebo obsahující chorobné například nežádoucí, nadměrné nebo neřízené uvolňování TNF-a *e · ft 1 ftft • ♦ · « ··· ftft · · ♦·»« ·· ft « · • ftftft • * · » · · · ft ♦ ftft ftft • ftft ft • ftft · • ftft ftftft • · «ft ftft zejména pro léčení kachexie nebo endotoxinového šoku a při léčení AIDS [srovnej Sharief a další, Mediators of Inflammation, 1 323-338 (1992)].

Způsob podle předkládaného vynálezu lze použít pro léčení kachexie spojené s chorobným uvolňováním TNF-α nebo hladinou TNF-α v krevním séru jakéhokoliv původu včetně kachexie následkem například bakteriální, virové nebo parazitické infection nebo pro zbavení nebo následkem .zhoršení nebo zničení humorální nebo jiné organické například renální funkce. Například je použitelný při léčení rakovinné, malariové a vermální kachexie, kachexie způsobené dysfunkcí hypofýzy, štítné žlázy nebo brzlíku a uremické kachexie. Zejména je způsob podle předkládaného vynálezu použitelný pro léčení kachexie spojené s AIDS, tj . kachexie následkem nebo spojené s HIV infekcí.

Způsob podle předkládaného vynálezu je také použitelný k léčení septického šoku například šoku následkem bakteriální infekce. V tomto ohledu je třeba poznamenat, že předkládaný vynález poskytuje způsob léčení septického šoku i stavu následkem nebo ' symptomů septického šoku například ARDS (syndrom dýchacího stresu dospělých).

Způsob podle předkládaného vynálezu je dále použitelný pro léčení chorob následkem HIV infekce například AIDS, například pro zlepšení nebo zvládnutí postupu takové choroby.

S ohledem k jejich profilu ve vztahu k inhibici uvolňování TNF-α a/nebo PDE isoenzymů a na jejich imunosupresivní aktivitu, jsou činidla podle předkládaného vynálezu také užitečná jako imunosupresivní Činidla například pro léčení autoimunních chorob zejména léčení autoimunních chorob s implikací zánětlivých procesů nebo zánětlivé části nebo etiologie nebo jako ♦ 44

4 ·4 « 4

444 4

4444 44

4« 4 • 4 4

4 4 4 • 4444 4 « ·

4 ·« • 4

444 • 4 protizánětlivá činidla pro léčení zánětlivých s implikací autoimunní rekace nebo s podílem autoimunní nebo etiologie.

chorob složky

Příklady takových chorob, na které lze použít činidla podle předkládaného vynálezu, zahrnují autoimunní hematologické poruchy (například hemolytická anemie, aplastická anemie, anemie červených krvinek a idiopatická thrombocytopenie) a další jako je systemická lupus erythematosus,. polychondritida, skleroderma, Wegenerova granulomatosa, dermatomyositida, chronická aktivní hepatitida, myastenia gravis, Steven-Johnsonův syndrom, idiopatický maladsorpční syndrom, autoimunní zánět vnitřnosti (například hnisavá lolitida a Crohnova choroba), endokrynní oftalmopatie, Graveova choroba, sarkoidosa, alveolitida, chronická hypersensitivní pneumonitida, mnohočetná skleróza, primární žlučová cirhóza, mladická cukrovka (diabetes mellitus typ I) , uveitida (anteriorní a posteriorní), keratokonjunktivitida siccatus a jarní keratokonjunktivitida, intersticiální fibróza plic, psoriatická artritida a glomerulonefritida (včetně nefrotického syndromu například včetně idiopatického nefrotického syndromu nebo nefropatie minimální změny), zánětlivé a/nebo hyperproliferativní poruchy kůže jako psoriatická atopická dermatitída, puchýř a zejména kontaktní dermatitida například alergická kontaktní dermatitída.

Činidla podle předkládaného vynálezu jsou zejména užitečná pro léčení artritidy a dalších revmatických nebo zánětlivých chorob zejména pro léčení revmatoidní artritidy.

Jako imunosupresivní činidla jsou činidla podle předkládaného vynálezu dále indikovaná pro použití při prevenci odmítnutí transplantátu například při udržení alogenického orgánového •» « ζ _ς * *. . > · ·««» ·* ·· * ·· ·· transplantátu apod. například ledvin, jater, plic, srdce, vnitřností, kostní dřeně kůže nebo rohovky.

S ohledem na jejich protizánět1ivé účinky zejména inhibici aktivace eosinofilů jsou činidla podle předkládaného vynálezu také užitečná pro léčení chorob spojených s eosinofily například eosinofilie zejména chorob dýchacích cest spojených s eosinofily (například chorobná eosinofilická infiltrace plicní tkáně) včetně hypereosinofilie, která ovlivňuje dýchací cesty a/nebo plíce jako například s eosinofily spojené poruchy dýchacích cest následkem nebo průvodem Lofflerova syndromu, eosinofilická pneumonie, parasitická (zejména metazoální) infestace (včetně tropické eosinofilie), .bronchopulmonární aspergilosa, polyarteritis nodosa (včetně Churg-Straussova syndromu), eosinofilická granuloma a s.eosinofily související choroby působící na dýchací cesty s lékovou reakcí.

S ohledem na jejich profil vzhledem k inhibici PDE isoenzymům, zejména jako selektivních inhibitorů typu 4, jsou činidla podle předkládaného vynálezu dále užitečná jako inhibitory PDE typu 4 například pro léčeni chorob zahrnujících tkáňové kalciové vyčerpání zejména degenerativních choirob kostí a spojů zahrnujících nedostatek vápníků zejména osteoporosu.

V tomto ohledu jsou dále užitečná pro léčení alergických zánětlivých chorob jako je rhinitida, konjunktivitida, atopická dermatitida, kopřivka a gastrointestinální alergie; a užitečná jako vasodilatátory například pro léčení angíny, hypertense, kongestivních poruch srdce a multiinfarktové demence; a pro léčení dalších savců, kdy je indikovaná inhibice PDE 4 například deprese, poruchy kognitivní funkce včetně Alzheimerovy choroby, Parkinsonovy choroby a mrtvice.

• · ·* • t * * »··· ·φ φ···· » <♦ * » ί ·*

S ohledem na jejich schopnost synergicky interagovat s imunosupresivy a/nebo protizánetlivými léčivy jsou činidla podle předkládaného vynálezu užitečná také pro použití ve spojení s těmito léčivy . například jako potenciátory terapeutické aktivity těchto léčiv nebo jako prostředky snížení nutné dávky nebo omezení vedlejších účinku těchto léčiv. Léčiva, se kterými lze vhodně ' podávat činidla podle předkládaného vynálezu, zahrnují například cyklopeptidová, cyklopeptolidová nebo makrolidová imunosupresivní nebo protizánětlivá léčiva, například léčiva patřící do skupiny cyklosporinů například cyklosporiny A nebo G, lékové formy takrolimu (známý také jako FK 506), askomycin a rapamycin a jejich různé známé deriváty a dále glukokortikosteroidová léčiva. Choroby, na které lze použít tuto kombinovanou léčbu, zahrnují například všechny choroby a stavy vyžadující imunosupresivní nebo protizánětlivou lékovou terapii například ty, které jsou uvedeny výše.

Činidla podle předkládaného vynálezu jsou vhodná pro kombinovanou léčbu, jak bylo uvedeno výše, a to například pro účely imunosupresivní, protizánět1ivé nebo antiastmatické léčby například pro dosažení cyklosporinového například cyklosporinů A-, makrolidového nebo steroidového šetrného účinku.

V souladu s výše uvedeným předkládaný vynález také poskytuje:

B. způsob

a) omezení nebo inhibice uvlňování TNF-a,

b) inhibice aktivity isoenzymu PDE 4

c) ovlivnění imunosuprese,

d) léčení zánětlivých chorob, nebo

e) léčení jakýchkoliv stavu nebo chorob uvedených výše, • φ · φ ·· * · » · · · • v v · * * · • ·«·« · ·»· ··* β - * » · • · i · * *· u pacientů, kteří takové léčení potřebují. Tento způsob zahrnuje podávání uvedenému pacientovi účinného množství činidla podle předkládaného vynálezu.

Předkládaný vynález také poskytuje:

C. činidlo podle “předkládaného vynálezu pro použití ' jako léčiva například pro použití při všech způsobech nebo léčeních všech chorob nebo stavů uvedených výše, například jak je uvedeno v bodech A nebo B výše.

Dávkování použité při aplikaci předkládaného vynálezu se samozřejmě lesí například v závislosti na konkrétní .chorobě nebo léčeném stavu, konkrétním použitém činidle podle předkládaného vynálezu, způsobu podávání a požadované terapii. Obecně se ale dostatečných výsledků, například při léčení chorob popsaných výše, dosahuje orálním podáváním dávek řádově 0,01 až 2,0 mg/kg. U větších savců například člověka je indikovaná denní dávka pro orální podávání v rozsahu 0,75 až 150 mg, výhodně podávaná jednorázově nobo rozděleně 2 až 4x za den nebo v formě pro udržovací uvolňování. Jednotková dávka pro orální podávání tak s výhodou obsahuje 0,2 až 75 nebo 150, například od 0,2 nebo 2,0 do 50, 75 nebo 100 mg činidla podle předkládaného vynálezu spolu s farmaceuticky vhodným ředidlem nebo nosičem.

Při léčení chronických nebo obstruktivních chorob dýchacích cest, například astmatu, lze činidla podle předkládaného vynálezu podávat také inhalačně. Použitá dávka se opět liší například podle konkrétní choroby, konkrétního použitého činidla podle předkládaného vynálezu, způsobu podávání (například suchý inhalační prášek nebo jinak) a požadovaného účinku. Obcně je ale indikovaná inhalační denní dávka řádově 2,5 až 130,0 pg/kg/den, například 13,0 až 60,0 pg/kg/den. U • tototo toto ί» ·* *· • to» · * * · · · * • ·** τ · * · · * .ϊ ••toto·· ·**· to ··· ·· »1 · · U * . . · , · * ,;·· ·· ·· · ·· větších savců například člověka je indikovaná denní inhalační dávka například při léčení astmatu 0,2 až 10,0 mg, například 1 až 5 mg, s výhodou podaná najednou nebo ve 2 nebo 3 oddělených dávkách během dne. Vhodná dávka pro podávání je tak 200 μg až 3,3 mg, podávaná aže ve 3 částech během dne, s výhodou podávaná ze zařízení pro inhalaci suchého prášku v sérii 2 až 8 fouknutí při každém podávání.

Činidla podle předkládaného vynálezu .lze podávat i jakýmkoliv jiným vhodným způsobem, například infuzí, například při léčení endotoxinového šoku; nasálně, například při léčení rhinitidy; do očí, například při léčení autoimunních chorob.očí; dermálně tj. topicky kůží například při léčení dermatóz nebo psorias; nebo rektálně například klystýrem nebo. čípky například při léčení zánětů střev. Vhodná dávka při takovém podávání je obecně 10 až lOOx méně než při orálním podávání.

Farmaceutické prostředky obsahující činidla podle předkládaného vynálezu lze připravit za použití konvenčních ředidel nebo excipientů a technik známých v této oblasti. Formy pro orální podávání tak zahrnují tablety, kapsle apod. Prostředky pro kožní podávání jsou ve formě krémů, mastí, gelu nebo transdermálních podávácích systémů například náplastí a kromě inertních ředidel nebo nosičů s výhodou obsahují pronikání kůže usnadňující činidla opět v této oblasti známá.

Prostředky pro inhalací zahrnují aerosolové nebo jiné rozprašovací prostředky i inhalační suché prášky s nebo bez ředidla pro podávání jakýmikoliv vhodnými inhalačními systémy pro podávání suchých prášků, které jsou v této oblasti známé. Pro pří právu suchých inhalačních práškových forem se činidla podle předkládaného vynálezu používají ve formě farmaceuticky vhodné kyselé adiční soli. Uvedená sůl Se vhodným způsobem • fcfc fcfc fcfc • fcfc · · » · · · · fc fc ·« · i»»· » · * ·, fc fc fc········ fcfc····

Ό čT ·.· ^{J υ} fc··· ’·· fc· · ·* ·’^λ rozemele, například za použití vzduchové trysky nebo keramického mlýnu, za získání jemného vdechovatelného prášku například s průměrem částic 2-3 μ. Alespoň 90 % materiálu má průměr Částic menší než 7,8 μ, s výhodou méně než 4,8 μ. 2a účelem získání produktu s vhodnými a stejnoměrnými částicemi pro podávání jako suchý inhalační prášek může být vhodné mletí aktivní složky, která se nejdřív smíchá s vhodným vdechovatelným nosičem například laktosou, za snížené teploty.

fi V souladu s fakty uvedenými výše předkládaný vynález také 3 zahrnuj e:

farmaceutický prostředek obsahující Činidlo podle předkládaného vynálezu spolu s farmaceuticky vhodným ředidlem nebo nosičem například pro použití v jakékoliv metodě uvedené výše.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 8-Aryl-1,7-naftyridin nebo jeho N-oxid ve volné formě nebo ve formě soli.

2. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I kde

Rj je fenylová skupina, benzylová skupina, 3-nitrofenylová skupina, 3-chlorfenylová skupina, 3-kyanofenylová skupina, 3(tetrazolyl)fenylová skupina, benzofurazanylová skupina nebo benzothiofurazahylová skupina;

R₂ je hydroxylová skupina, aminoskupina, trifluormethansulfonyloxyskupina, allylová skupina, alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, alkoxyskupina, arylová skupina, arylalkylová skupina, aryloxyskupina, aminoskupina, arylaminoskupina, diarylaminoskupina, alkylaminoskupina, dialkylaminoskupina, alkylarylová skupina, arylamidoskupina nebo alkylamidoskupina; .

a jejich estery a amidy;

ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelných solí.

3. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 6-(karboxyfenyl nebo karboxymethylfenyl)-8-(fenyl,benzo[c]thiadiazolyl nebo benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridin nebo její ester nebo amid ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli.

4 ♦ ♦ · · 4 i

R_x je 3-chlorfenylová skupina a R₂ je 4-aminokarbonylfenylová skupina,

R_x je 3-nitrofenylová skupina a R₂ je 4-aminokarbonylfenylová skupina,

R_x je 3-chlorfenylová skupina a R₂ je 4-methoxykarbonylfenylová skupina, nebo

R_: je 3-nitrofenylová skupina a R₂ je 4-methoxykarbonylfenylová skupina.

4 4»· *444 « -Σ “ 4

4 * · 4 4 ♦ 4

4. Sloučenina podle nároku 3 obecného vzorce II kde n je nula nebo jedna;

R₇ je hydroxylová skupina, aminoskupina, alkylaminoskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo. alkoxyskupina. obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, s výhodou hydroxylová skupina nebo aminoskupina; a bud'

R₃ je atom vodíku a R₄ je nitroskupina, atom halogenu (například atom chloru), kyanoskupina nebo tetrazolylová skupina (například 1-tetrazolylová skupina), a

R₅ a R₆ společně tvoří další vazbu, nebo

R₃, R₄, R_s a R_s jsou společně skupina =N-O-N= nebo skupina =N-S-N=; nebo .její ester nebo amid;

ve volné formě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli.

5.

5. Sloučenina podle nároku 1, kterou je

6. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 5 pro použití jako léčivo.

6-(4-karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl) -1,7-naftyridin, N-methyl-D-glukaminová sůl 6-(4-karboxyfenyl)-8-(4-benzo[c]furazanyl)-1,7-naftyridinu, nebo sloučenina obecného vzorce I, kde

Ri je 3-chlorfenylová skupina a R₂ je aminoskupina,

R_xje 3-kyanofenylová skupina a R₂ je aminoskupina,

R_x je 4-(5-tetrazolyl)fenylová skupina a R₂ je aminoskupina,

R_x je benzylová skupina a R₃ je fenylaminoskupina,

R_x je benzylová skupina a R₂ je difenylaminoskupina,

R_x je benzylová skupina a R₂ je trifluormethansulfonyloxyskupina,

R_x je 3-chlor fenyl ová skupina a R₂ je' trifluormethansulfonyloxyskupína,

R_x je 3-kyanofenylová skupina a R₂ je trif luormethansulfonyl-,. oxyskupina,

R_x je 4-benzo[c]furazanylová skupina a R₂ je trifluormethansulfonyloxyskupina,

R_x je 4-(5-tetrazolyl)fenylová skupina a R₂ je trifluormethansulfonyloxyskupina,

R_x je benzylová skupina a R₂ je fenylová skupina,

R_x je benzylová skupina a R₂ je vinylová skupina,

R_x je benzylová skupina a R₂ je ethinylová skupina,

R, je 3-chlorfenylová skupina a R₂ je 4-karboxyfenylová skupina,

Rj je 3-nitrofenylová skupina a R₂ je 4-karboxyfenylová skupina, • 4 * 4 4 44

6-(4-karbamoylfenyl)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridin,

6-(4-karboxyfenyl)-8-(3-kyanofenyl)-1,7-naftyridin,

6-ethinyl-8-(3-nitrofenyl)-1, 7-naftyridin,

6-vinyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin,

6-trifluormethansulfonyloxy-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin, 6-fenyl-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin,

6-fenylamino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin, ·

6-methoxykarbonyImethoxy-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin, hydrochlorid 6-acetamido-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridinu, 6-amino-8-benzyl-1,7-naftyridin,

6-hydroxy-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin,

6-amino-8-(4-benzo [c]furazanyl)-1,7-naftyridin,

6-amino-8-(3-nitrofenyl)-1,7-naftyridin,

7. Farmaceutický prostředek vyz.načující se tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoli z nároků 1 až

8. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z' nároků 1 až 5 při přípravě léčiva pro .léčbu zánětů, zejména zánětlivych a

obstrukčních onemocnění dýchacích c est, například astmatu. 9. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 4 vyznačuj í c í se tím, žé zahrnuje reakcí- sloučeniny obecného vzorce VI - N VI [[Ία ^RA?^R- t. kde Rj, R₄, R₅, R₆ j sou definovány v nároku 4 a X odstupující skupina, se sloučeninou obecného vzorce VII

• «·· * ·' · · to to to ·*·> « · to · ·· '· • · »· to to··· · ·»· ·· _ » « · · - s · i '«to ·* · * kde R, jedefinováno v nároku 4 a X je odstupující skupina, a tím získání sloučeniny obecného vzorce II ve volné, formě nebo ve formě soli.