CZ139198A3 - Nové oligopeptidy, jejich příprava a použití - Google Patents

Description

Nové oligopcptidy, jejich příprava a použití

Oblast techniky

Je známo, že peptidy izolované z mořského prostředí jako jsou Dolastatín-10 (US 4,816,644) a Dolastatin-15 (EP-A-398558) prokazují účinnou aktivitu inhibice buněčného růstu (viz.:Biochem. Pharmacology 40, 1859-64 (1990); J. Nati. Canccr Inst. 85, 483-88 (1993) a reference zde uváděné) Na základě zajímavých výsledků li pokusných nádorových systémů in vivo probíhá v současné době další předklinické hodnocení těchto pří lodníci i produktu tak, aby mohly byt zahájeny kliiiickc Studie u pacientů s rakovinou. Vzhledem k tomu, že procesy čištění těchto vzácných přírodních zdrojů je velmi pracné, byl zkoumán alternativní přístup k těmto peptidům syntetickou cestou (viz: Tetrahedron 50, 5345-60 (1994), Tetrahedron 49, 1913-24 (1993 ); Tetrahedron 48.4115-22 (1992) a reference uvedené zde).

Dosavadní stav techniky

Protože přírodní produkty vykazují určíte nevýhody jako je špatná rozpustnost ve vodných rozpouštědlech a nákladné stavební bloky, byly zkoumány strukturální modifikace [viz.: Bioorganic & Mcď Chem. I.ett. 4, 1947-50 (1994); WO 93 03054? JP-A06234790. LP (O.Z. 43202)|.

Podstata vynálezu

Vynález popsaný v tomto dokumentu nabízí nové oligopeptidy a jejich deriváty, které mají ve srovnání s Dolaslatinem-10 a -15 překvapivě lepší léčebný potenciál při léčení neoplastických nemocí a vykazují aktivit/u dokonce i u odolných nádorových systémů MDR a mají neočekávaně vysokou rozpustnost ve vodných rozpouštědlech. Kromě toho sloučeniny tobolo vynálezu mohou být bez ohlíží syntetizovány lak. jak ju podrobně popsáno dále v textu.

•

Sloučeniny tohoto vynálezu zahrnují peptidy vzorce I

A-B-D-E-F-L (1) a jejich soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami, kde Λ, B, D, E, F a L mají následující význam:

A:

R²a

N---CH --C--

(Ha) kde

Ra je vodík, alkyl C| - 3, který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl. který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru,

R'a je alkyl C'i . 3. který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl. který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru.

Ra je alkyl C_t . 3. který může být substituován 1 až. 3 atomy fluoru nebo cykloalkyl Cý .5, který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru. nebo

B:

(ílu) kde buď

T K'b	je skupina NI 1, je vodík.
R?b	je alkyl cykloalkyl (ý,,. methoxymethvl. 1-mclhoxyethyl nebo methylvinyl. nebo
R'ua 1	Ris dohromady tvoří isopropylidenovou skupinu.

nebo

I je atom kyslíku.

R¹^ je vodík, a

R μ |c alkyl ( i_

(Ho) • · · · kde

Rd je vodík, alkyl C|. 3, který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl, který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru,

R¹!, je vodík a

R²d je alkyl C1.5, cyklopropyl, methoxymethyl, l-methoxyethyl nebo l-methylvinyl, nebo

/TT X

R¹,. je alkyl ('1 . \. který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl, který muže byt substituován 1 až 3 atomy fluoru,

R j a R j_: jsou nezávisle na sobe vodík nebo methy lová skupina.

R⁴i je vodík, skupina hydroxy. methoxy nebo elhoxy nebo atom fluoru, a

R\ je vodík nebo atom fluoru nebo, pokud ri|. je I,

R ’|. a R’i dohromady tvoři vazbu, nebo

R⁴|- a R\ jsou kyslíkovým radikálem s dvojitou vazbou.

nebo, pokud ιη je 2,

R |. a Rj. dohromady tvoří vazbu;

o kde

Ri je vodík nebo methylová nebo ethylová skupina, a

R'i je vodík, alkyl C|. 1. který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl. který můž.e byl substituován I až, 3 atomy fluoru, nebo Γ, zbytek vzorce • · φ · ΦΦΦ φ · ♦· • φ V··· · ·♦ · • · · φ φ · · · · · ··· ·* • φ · φ · ♦ ·· • ΦΦΦΦ «· ♦·φ· ··

kde Χη je atom kyslíku nebo síry kde

(Ur), ii[ je 0. 1 nebo 2,

R¹,. jc alkyl C| . 3, který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl. který' může být substituován 1 až 3 atomy fluoru,

R\ a R\ Jsou nezávisle na sobe vodík nebo methylová skupina,

R⁴i je vodík, skupina hydroxy, methoxy nebo ethoxy nebo atom fluoru, a

R\ je vodík nebo atom fluoru nebo, pokud n_i: je 1,

R'\ a R⁴, dohromady tvoři vazbu, nebo

kde

R¹1 je alkyl C| . kléry může být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl. který může být substituován 1 .1/ 3 alomv fluoru.

R“i a R’i jsou nezávisle na sobě vodík nebo methylová skupina,

R¹]. je vodík, skupina hydroxy. methoxy nebo ethoxy nebo atom fluoru. a

Rý je vodík nebo atom fluoru nebo, pokud Π| jc I.

Rýa R⁴| dohromady tvoří vazbu, nebo

• · · · · · ·«·· • · · · · · · ··· * ··· · « a ··· · « · «*·· ··· ··»· ·♦ »· ·» · ♦ kde Xp je kyslík nebo síra

F: N-methylglycyl, N-cthylglycyl nebo -alanyiový radikál,

I,; substituovaný nebo ncsubstituovaný alkylový, hydroxylaminový nebo oximový zbytek.

Pokud R[. je -(CfDd.-aryl, potom arylem je nejlépe fenyl nebo naftyl, a vhodnými substituenty jsou; halogenové atomy, nejlépe fluor, brom nebo chlor, alkylové skupiny C1.4, triiluorniethyl. skupiny alkoxy C| . 4. trifluormethoxy, dioxymethylen nebo -ethylen, skupina nitro nebo kyano, ί 1V »·ϊ ví Ί· ίγΚλπι ,1 . ί 11/ \ ,· J c 1 > 1 fn ni ? I / q obilnino í ¹„ cl/tmina aminn cil ivc/zvj lAui 1 <--j-4* uiivj MUiivuj iu iu .inupuiu j - / _Ί ui\u|jiiiu uiiimv nebo dialkylamino C|. 7, ve které alkylové radikály mohou také dohromady vytvořit heterocyklícké jádro. Hetaryl je nejlépe 5ti až. 6ti členný řetězcový systém, který' preferovaně obsahuje atomy dusíku, kyslíku a/nebo síry a může být kondenzován na benzenové jádro, jako je imidazolový, pyrrolový, thiofenový. furanový, thiazolový. oxazolový. pyrazolový. 1.2.4- nebo 1.2,3-tiazolový, oxadiazolový, thiadiazolový, isoxazolový, isothiazolový, pyrazi 110 vý. pyridazi nový, pyrim i d i nový. pyri dinový, benzofuranový. bcnzolhiofenový. benziniidazolový.

benzothiazolový. benzopyranový. indolový. isoindolový.

indazolový nebo cliinolinový zbytek, preferovanými substituenty jsou alkylové skupiny _ 4, nebo hvdroxylovv nebo fenylový radikál.

Pokud R[² je substituovaný aryl nebo methylaryl. mají substituenty nejlépe následující význam:

atomy halogenu, alkyl C| .4. triiluorniethyl, alkoxylové skupiny (¹1 —1 trifluormethoxy. dioxymethylen nebo -ethylen, skupina nitro nebo kyano. alkoxykarbonyl (’i .4, alkylsulIbnylová skupina (?_t.₇, skupina amino nebo dialkylamino i'1.7, kde alkylové radikály mohou také dohromady vytvářet heterocyklícké jádro.

Pokud Ri.¹ je substituovaný aryl nebo methylaryl, mají substituenty nejlépe následující význam:

atomy halogenu, alkyl C_M, trifluormethyl, alkoxylově skupiny Cm, trifluormethoxy, dioxymethylen nebo -ethylen, skupina nitro nebo kyano, alkoxykarbonyl Cm, alkylsulfonylová skupina Cj.₇ skupina amino nebo dialkylamino C1.7, kde alkylové radikály mohou také dohromady vytvářet heterocykíické jádro.

Další skupina sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnuje peptidové deriváty vzorce I, kde

L je hydroxy lam i nový zbytek vzorce

R^Ě

L kde

R[ ^S jc vodík, alkyl C».« s přímým nebo rozvětveným řetězcem, který může být substituovaný až 6 atomy halogenu, nejlépe fluoru, nebo cykloalkyl C3-10 nebo alkyl C 4-cykloalkyl Cvií). substituovaný nebo nesubstituovaný aryl nebo hetaryl nebo substituovaný nebo nesubstituovaný alkylaryl Cm- a substituenty mají význam uváděný pro R;. a

Ri ^b má jeden z významu uváděných pro Rp s tím. že Rp ani Ri ⁶ oba nejsou vodík.

nebo

Riý a R| ^b dohromady s atomem N tvoří 5ti. 6li nebo 7mi členné heterocykíické jádro, a jejich soli s fyziologicky í o I erovanýrn i kyselinami.

Další skupina sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnuje peptidové deriváty vzorce 1, jak jsou uváděny v patentovém nároku 1, kde je oximový zbytek vzorce Vf

(Vir), fí⁶

L

L kde

R[ \i R| ⁶ mají výše uvedený vyznám, nebo (,

• ·

4 ·

4··« • · · 4· »aa

44 4

Ri.⁵ a R_l ⁶ dohromady s atomem C tvoří 3 až 7mi členný cyklický systém, který může projít aromatickou kondenzací, a jejich soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami.

Preferovanými cyklickými systémy jsou:

Tyto příklady ilustrují, ale neomezuji rozsah současného vynálezu.

Peptidy vzorce I jsou složeny z L-aminokyselin. ale mohou obsahovat jednu nebo více D-aminokysclin.

Nové sloučeniny mohou být přítomné jako soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami jako jsou: kyselina chlorovodíková, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina mléčná, kyselina fosforečná, kyselina methansulfonová, kyselina octová, kyselina mravenčí, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina jablečná, kyselina jantarová, kyselina malonová, kyselina sírová, kyselina I.-glutamová, kyselina L-asparagová, kyselina pvrohroznová, kyselina slizová, kyselina benzoová, kyselina glukuronová. kyselina šťavclová, kyselina askorbová a acetylglykol.

	v V V	«	V	•
• · ·	• ♦	«· ·	• «	• ·
• ♦ ·· ·	• ·	• · «	• · ·	«	•
• ·	• ·	• ·	•	«	•
·· · «	• ·	• ·	• 9	• ·

Zejména preferované sloučeniny jsou ty, pro jejichž radikály platí následující:

Ra vodík, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, cyklopropyl,

2.2.2- triíluorcthyl, 2-fluorethyl;

R’a vodík, methyl, ethyl, propyl. isopropyl, cyklopropyl,

2.2.2- trifluorethyl, 2-íluorcthyl;

R?a vodík, methyl, ethyl, propyl, isopropyl. bulyl, terciární butyl, isobutyl, cyklopropyl, cyklobutyl, 2,2.2trifluorethyl, 2-fluorethyl;

T skupina NH a

R'b vodík.

R b cyklopropyl, ethyl, isopropyl, butyl, terciární butyl.

sekundární butyl. jnethoxymethyl. 1-methoxyethyl, 1 -methylvinyl;

nebo j -η

R ej a R b dohromady tvoří isopropylidciiovou skupinu, nebo

T je atom kyslíku a

R'b je vodík,

R“b methyl, ethyl, propyl, isopropyl. butyl. sekundární butyl. terciární butyl. isobutyl. pentyl. hcxyl:

Ko vodík, methyl, ethyl, propyl. isopropyl, cvklopropyl,

2.2.2-triíluoretliyl, 2-íluorcthyl;

R’j) vodík;

Rd methyl, ethyl, propyl. isopropyl, bulyl. sekundární butyl.

terciární butyl. isobutyl. pentyl. 3-inethylbutyi. 2,3dimethvlpropyl. cyklopropyl. cyklobutyl. mellioxyethyl. 1-meihoxyclhyl. 1-methylvinyl. nebo

I·. je substituovaný azclidinylový. pyrrolidinylový nebo piperidinylový radikál následujícího vzorce:

_r - ν τ - · • · · · «φφφ · ·· · * ··· · « φ φ · Φ ··· φ· * · Φ · φ · ΦV ··· · · φ· ·φ φφ φφ

R¹)·: je vodík, alkyl C|.₃, který může být substituován I až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl, který může být substituován 1 až 3 atomy fluoru,

R²e a R’\· jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo methylová skupina;

R‘\: jc vodík, hydroxylová skupina, methoxylový nebo cthoxylový radikál nebo atom fluoru;

R\ je vodík nebo fluor nebo

E je substituovaný aminocykfopentylkarbonylový radikál, který' má následující vzorec:

--N-- RE

I<i je vodík, methyl nebo ethyl; a

R¹}. je alkyl který muže být substituován 1 až 3 atomy lluoru nebo cyklopropyl. který muže být substituovaný 1 až 3 atomy fluoru.

E má význam uvedený pro E nebo jc to radikál, který·’ má

vzorec	ch3 1	ch3
i H		i H	1 Ό
CIT o	ch3 0	CH3 0	> 0 ch3
incjvicc preferovanýmt	peptidy vzorce

A- B-D-E -1-1. (I), jsou ly. kde radikále mají následující význam:

♦ ·· * • ···* * · ·« • · ·· • · · · • * « · ·· · 9« • ·· ·· ··

A je

Ra o

kde R..\ a R'_a mají výše uvedený vyznám;

• ·* • · «» » •· • · · ··

kde R|> má výše uvedeny vyznaní,

OCH₃

ri

—NC2H5

O I o

1·’ má význam uvedený pro l·'.

Radikálem 1. je nejlépe radikál, který má vzorec -O-R]. kde radikálem R; je nejlépe alkyl Cv₁₍„ jako je pciityl, hexyL heptyl, oktyl. nonyl. decyl. undecyl, dodecyl, tridecyl, telradecyl. pcntadccyl. hexadecyl. heptadccyk oktadccyl,

1-methylethyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, 2-methylpropyl.

2,2-dinicthylbutyl. 2.3-dimelhylbutyk 3,3-dimcthylhutyl, 4mcthyjpentyl. 4.4-dimethylpcntyL 3-pcntyl. 4-heptyl, 2.2.2trifluorethyI. t-íluorelhyL 2,2-difluorcthyl, 1,3-dif!uoro-2-propyl

« ·		• ·	•	• « ««
•	• * · «	• ·	• · ·	• · · · ·
« ·	• ·	• ·	• · ·
• · ·	• ·	• ·	♦ ·	«« · ·

cykloalkyl C>io. jakoje cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl, cykiononyl, cyklodecyl.

Methyl-, ethyl- nebo propyl-(Crio)-cykIoalkyl; methyladamanlyl; alkenyl Cj-rú, jako je

2- propenyl, 3-butenyl, 2-butenyl, 2-methyi-2-propenyl, 2-pentenyl,

3- mcthyl-2-propenyl, 3-pentenyl, 4-pentenyl, 2-mcthyl-2-butenyi, 3,7-dimethyl-2,6-oktadienyl, 3,7,1 l-trimethyldodcka-2,6,10trienyl, 3,7,1 l,I5-tetramcthy[hexadeka-2.6,10,I4-tetracnyl;

nasycené heterocyklické jádro jako je

o

• · ·	•	♦	·	1 ·	··
• · · » 9	•	•	« ·	• ·· ·	•	•
9 *	• ·	• ·	•	9	9
99 · « fr	• «		··	• ·

2-methoxyelhyl, 2-(2- methoxyethoxyjethyl, 2 - [2 - (2-methoxyethoxy)ethoxy]ethyl, 2-{2-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxy]ethoxy} ethyl;

Preferovaně Rl také představuje radikály jako jsou aryl, methylaryl, ethylaryl, propylaryl, kde aryl může být substituovaný nebo nesubstituovaný.

Arylern je nejlépe fenylový nebo naftylový radikál, který' má

Tl¹ kde vhodnými substituenty T|.' a Ί)² jsou nezávisle na sobě následující radikály (pod podmínkou, žc R_L není fenyl):

H. Cl, F, Br, alkyl Cm, alkoxy Cm, trifluormethyl, trifluormethoxy. nitro, kyano, dioxymethylen nebo -ethylen, alkoxykarbonyl Cm, alkylsulfonyl Cm. amino nebo dialkvlamino Cm, kde alkyiové skupiny mohou dohromady vytvářel heterocyklické jádro, nebo metl iy Ihciaryk cthylhclaryl, propylhctaryl, kde hciaryi může byt subsíitiiovaný nebo nesubstituovaný.

Hetarylcm je nejlépe:

nebo rozvětveným řetězcem, alkoxylová skupina Cho, jakoje:

H3C ch₃

X^-^oti·⁴

II

kde i'i⁴ ” alkyl Cm; radikál , který’ má vzorec

♦ · · • * « · · • · · · · • · • · · · * kde Τι^ύ má význam uvedený pro T_L ⁵ a dále může být acyl Cm, benzoyl, terc-butyloxykarbony], benzyloxykarbonyl.

kde 1 ,⁷ - CHO, NHCHO, NHNIICUO, nebo radikál, který' má vzorec

Ti?

kdo l , \ Γ ' ()(.41., O( ,lk SCI’, SCdl,.

nebo Ί,^s a Ti spolu s atomem C jsou spojeny a vytvářejí cyklický systém, kterv má vzorec

kde R, ¹ je polycthylenglykoleslcr se vzorcem

O

-O-(Cll₂C]l7())_h|-Clh kde lil. je číslo od 40 do 90.

Další skupina zahrnuje substance, kde I. je hvdroxylaminový zbytek se vzorcem — O— N ^Rt? (V, ) kde R|' je nejlépe vodík, methyl, ethyl, propek butyk terciární butyk pentyl. hexyl. heptyk oktyk 2-mcthylbuiyk 3-mcthyl butyk 2-mcthylcthyl. 2-mcthyl propek 2.2-di methyl butyk 2.3-dunc(h\ Ibutyl, lodi methyl butyk 4-mcthylpentyL 4.4-dimcthylpentyl. 2.2.2 • · • · trifluorethyl, 1 -fluorethy). 2,2-difluorethyl, Cvs-cykloalkyl. jako jsou cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl, cyklononyl, cyklodecyl; methyl-, ethyl-, propyl-, butylC3.1 c-cykloalkyi, substituovaný nebo nesubstituovaný arylový nebo hetarylový radikál nebo C i .4-alkyl-aryl nebo -hctaryl s významem uvedeným pro R|;a

2-methylbutyl, 3-methylbutyi. 2-methylcthyl. 2,2-dimethylbutyl, 2,3-dinicthylbutyl, 3,34-meíhylpentyl, 4,4-dimethylpentyl, 2,2,2Ri.⁽'je Z methyl, ethyl, propyl, butyl, terciární butyl, pentyl, hexyl, heptyl, oktyl, 2-niethvlnrnnv) ; i---·^Ί dimethyibutyl, trifluorethyl, 1 -fluorethyi, 2,2-difluorethyl, C-i.s-cykloalkyl, jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl. cykloheptyl, cyklooktyl. cyklononyl, cyklodecyl; methyl-, ethyl·, propyl-, butylC'',-i()-cykloalkyl, nebo R|/'-N-R.j⁶ tvoří cyklický systém, který má následující vzorec:

Další skupina preferovaných sloučenin zahrnuje oximestcry se vzorcem

Rl⁶ — O— N= C

Rl⁵

Rl⁶ tvori cyklický systém , který má následující vzorce:

H

N

s t

i

IS

Obecně,

C|-4-alkyl je methyl, ethyl, propyl, 2-methylethyl, butyl. terciární butyl, 3-methylpropyl;

Cm-aikoxy je methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, terciární butoxy, 2-methylcthoxy, 3-mcthylpropoxy:

Cι-4-alkylsulfonyl je —SO2CH3. —SCcCSlC. --- SCTCJb. — SO₂C₄H_y,- SO2C5H11.- SO₂C₆IÍ|3, — SO₂C₇H_!5;

skupina (b ₇-dialkylamino_r kde alkylové radikály mohou vytvářet obecné heterocyklické jádro je

(j.x-cyk loalkyl je cyklopropyl, cyklobulyl. cyklohexyl. cyklohcpiyi. cyklooktyl.

cyklopentyl.

Nove sloučeniny mohou hýl připraven) podle známých metod peptidové chemie. Takto mohou být peptidy sestaveny postupné z aminokyselin nebo vazbou vhodných malých peptidových fragmentů. Při postupném sestavení se začátkem na C konci se peptidový řetězec rozšiřuje stupňovitě pokaždé o jednu aminokyselinu. Při vazbě fragmentů je možné spojil dohromady fragmenty různých délek, a fragmenty zase mohou byl získány postupným sestavením z aminokyselin nebo z.c sebe samvch prostřednictvím fragmentům] vazby.

.lak při postupném sestavování, lak při fragmentární sazbě je nezbytné spojit jednotky vytvořením amidové, esterové nebo hydroxylaminové vazby. Pro tento účel jsou vhodné enzymatické a chemické metody.

Chemické metod) na vytvoření amidové vazby jsou popsány podrobně v těchto publikacích Mullcr. Metody organické chemie (Methoden der organischcn Chemie) sv.. XV/2. str. 1-364, Thienie Verlag. Stuttgart. 1974; Stewart. Young, Peplidová syntéza tuhé fáze (Solid Pliasc Pcptidc Synthesis). str. 31 až 34. 71 až 82, Pierce Chemical Company, Rockford. 1984: Bodanszky. Klausncr, • * φ · ···» « ··· • · φ φ · · · · φφ · · · ·· φ φ »··· φ ·· • · · φφ φφ φφ «φ φφ

Ondetti, Peptidové syntéza (Peptide Synthesis), sir. 85 až i 28, John Wiley a synové, New York, 1976 a další standardní práce na téma peptidové chemie. Obzvláště preferovanými jsou azidová metoda, metoda na bázi symetrického a smíšeného anhydridu, in šitu generované nebo předtvarované aktivní estery, použití uretanein chráněných N-karboxanhydrídů aminokyselin a vytvoření amidové vazby pomocí činidel vazby (aktivátory, zejména dicyklohcxylkarbodiiniid (DCC), diisopropylkarbodiimid (DIC), 1 -ethoxykarbonyl-2-ethoxy-l ,2-dihydrochinolin (BEDQ). hydrochlorid 1 - ethyl - 3 - (3 - dimcthylaminopropyl)karbodiimidu (EDCI), anhydrid kyseliny n-propanalyklfosfonové, (PPA), N,Nbis(2-oxo-3-oxazolidinyl)-midofosforylchlorid (BOP-C1), bromotris-pyrrolídinofosfonium hexa-fluoro fosfát (PyBrop), difenylfosforylazid (DPPA), Castrovo činidlo (BOP. PyBop), 0-benzotnazolyl-N.N.N’,N’-ietramethyluroniové soli (HBTU), diethyl fosfory lkyanid (DEPCN), 2,5-difenyl-2,3-dihydro-3-oxo-4hydroxylhiofendioxid (Steglichovo činidlo; ΙΙΟΊΌΟ) a 1,1'karbonyldiimidazol (CDI) . 7-azabenzotrÍazolyl-N.N.N‘,Ntctramethyluroniových soli (HATIJ: popsané vΊ'ΙII. Sv. 35. č.33. 5981-5984). Vazebná činidla mohou být použita sama nebo v kombinaci s přídavnými látkami jako jsou N.N-dimethyl-4aminopyridin (DMAP). N-hydroxy-bcnzotriazol (HOBl). 1 -hydíOxy-7-azabenzotria/.ol (HOAl). N-hydroxybenzotriaziii (lIOOBt). N-hydroxysukcinimid (H(.)Su) nebo 2-hydroxypyridin.

Vytvořeni esterové nebo hydroxylaminové vazby muže byt dosaženo spojením vhodné aminokyseliny nebo peptidového derivátu s hydroxy- nebo hydroxylaminovou sloučeninou za přítomnosti vazebného činidla a zásady. Obzvláště preferovány jsou metody a vazebná činidla již popsaná pokud jde o vytvoření amidové vazby. Vhodnými zásadami jsou organické aminy, jako je

Ν,Ν-dimethylaniinopyridin (DMAP), pyridin, N-methylmorfolin, trielhylamin.

Vzhledem k tomu, že je běžně možné obejít se bez ochranných skupin při enzymatické peptidové syntéze, je oboustranná ochrana reaktivních skupin, které se neúčastní vytváření amidové vazby nezbytná pro obě reagující látky chemické syntézy. í’ro chemickou peptidovou syntézu jsou preferovány tři běžné techniky ochranných skupin: benzvloxykarbonylová (Z). t-butoxykarbonylová (Boc) a 9-fluorcnylmethoxykarbonylová (l'moc) technika.

jednotky, která rozšiřuje řetězec. Podrobný přehled ochranných skupin aminokyselin uvádí Muller, Methoden der organischen Chemie, sv. XV/1. str. 20 - 906. Thicmc Vcrlag. Stuttgart, 1974.

Jednotky používané pro sestavení peplidového řetězce mohou reagovat \ roztoku, v suspenzi nebo metodou podobnou té, jakou popsal Merritlekl v .1. Amer. Chem. Soc. 85 (196?) 2149. Zejména preferované metody jsou t\, kde peptidy jsou sestavovány postupně nebo pomocí fragmenlární vazby pomocí techniky ochranných skupin Z. Boc nebo [jnoc. kdy jedna z reagujících látek v uvedeno technice podle Merrificlda je vázána na nerozpustnou polymerní podporu (také se dále nazývá pryskyřice) Toto má běžně za následek, že peptidy jsou sestavovány postupně na polymerní podpoře pomocí techniky ochranných skupin Boc nebo kmoc, a rostoucí peptidový řetězce je na konci (' kovalentně vázán na nerozpustné pryskyřičné částice (viz. obrázek 1 a 2). Tento proces umožňuje zachytit reagující látky a vedlejší produkt filtrací, což znamená. Že rekrystalizace meziproduktu je nezbytná.

Chráněné aminokyseliny mohou být také připojeny na jakékoliv vhodné polymery, které pouze musí být nerozpustné • ··«·« · · · · · · · * • · * · « e · · · »·»·· ·« * · · · · · v používaných rozpouštědlech a musí mít stabilní fyzikální formu, která usnadňuje filtraci. Polymer musí obsahovat funkční skupinu, na kterou může být první chráněná aminokyselina pevně připojena kovalentní vazbou. Vhodná pro tento účel je široká řada polymerů, např. celulóza, polyvinylalkohol. polymethakrylát, sulfonovaný polystyren, chloromethylovaný styren/divinylbenzen kopolymer (Merrifieldova pryskyřice), 4-methylbenzhydrylaminová pryskyřice (MBHA-pryskyřice), fcnyiaeelamidonielhylová pryskyřice (Pain-pryskyřice), p-benzyloxy-benzyl-alkoholová pryskyřice, benzhydryl-aminová pryskyřice (BHA-pryskyřice),

4-(hydroxymethyl)benz.oyloxymcthylová pryskyřice, pryskyřice podle Breipohla a kol. (Tetrahedron Lettcrs 28 (1987) 565; dodávaná firmou BACHEM), 4-(2,4-dimethoxyfcnylaminomcthyljfenoxylová pryskyřice (dodávaná firmou Novabiochem) nebo o-chlortritylová pryskyřice (dodávaná firmou Biohcllas).

Vhodné pro peptidovou syntézu v roztoku jsou všechna rozpouštědla, která jsou za podmínek reakce inertní, zejména voda, N.N-dimelhylformamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO). acetonitril, dichlormcthan (DCM). 1.4-dioxan, tetrahydrofuran (THF). N-methyl-2-pyrrolidon (NMP) a směsi uvedených rozpouštědel. Peplidová syntéza na polymerní podporu muže byl proběhnout ve všech inertních organických rozpouštědlech, ve kterých jsou používané deriváty aminokyselin rozpustné; nicméně preferovaná rozpouštědla mají kromě toho vlastnosti způsobující bobtnáni pryskyřic, jako jsou DMF, DCM. NMP, acetonitril a DMSO, a směsi těchto rozpouštědel. Po dokončení syntézy se od peptidu odštěpí polymerní podpora. Podmínky, za kterých je možné odštěpení různých typů pryskyřic, jsou popsány v literatuře. Štěpné reakce běžně používané představují štěpení pomocí

4 4 4 t · * · · • · · · ··· ·*44 • · « ♦ · · *4 » 4 4 4 · 4 • 4 4 « · *«4 >44 » v «· «· 4 44 >

kyselého a palladiového katalyzátoru, zejména štěpení v tekutém bezvodém fluorovodíku, v bezvodé kyselině trifluormethansulfonové. ve zředěné nebo koncentrované kyselině trifluoroctové, štěpení pomocí palladiového katalyzátoru v THF nebo ve směsi THF-DCM za přítomnosti slabé zásady jako je morfolin nebo štěpení ve směsích kyselina octová/dichlormethan/trifluorethanol. V závislosti na zvolených ochranných skupinách tyto mohou být tyto skupiny zachyceny nebo jinak odštěpeny za podmínek štěpeni. Částečné zbavení ochrany peptidu může být také užitečné, pokud mají proběhnout určité derivační reakce. Peptidy dialkylované na N konci mohou být připraveny buď spojením příslušných N,N-disilVvLíminMvvrh LvcpIih v matním nphn rvi nnlvmrrní nodnom ......— r~·^-------- r ’ ’τ---nebo reduktivní alkylací peptidu vázaného na pryskyřici v DMF/1% kyselina octová s NaCNBHj a příslušnými aldehydy.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být použity k inhibici nebo jinému léčeni pevných nádorů (např. nádory plic, prsu, tlustého střeva, prostaty, močového měchýře, konečníku nebo nádory dčložní sliznicc) nebo hematologického zhoubného bujení (např. leukémie, lymfoin) tím. že jsou tyto sloučeniny podávány savcům. Podáváni může probíhat jakýmkoliv způsobem, který je pro léčebné přípravky běžný, nejlépe jsou lo onkologické prostředky, včetně pcrorálních a parenterálních způsobů, jako jsou podkožní, nilrožilni. nítrosvalové a nitropobříšnicové aplikace. Sloučeniny mohou být podávány samostatné nebo ve formě farmaceutických směsí, které obsahují sloučeninu se vzorcem I spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem, který se hodí pro požadovaný způsob podávání. Tyto farmaceutické směsi mohou být kombinovanými přípravky. Ij. mohou také obsahovat další léčebně účinné složky.

·· · · *·*· · · ·· ··· · * · · * · ·♦· · · • · · · · » · · · «··· « * «♦ · » · ·

Dávkování používané u savců bude obsahovat takové množství účinné látky potlačující růst nádoru, které bude záviset na běžných faktorech včetně biologické aktivity konkrétní použité sloučeniny; na způsobech podávání; na věku, zdravotním stavu a tělesné váze přijímajícího savec; na povaze a rozsahu symptomů; na četnosti léčení; na používání dalších terapií; a na požadovaném účinku. Obecná denní dávka se bude pohybovat mezi 0,05 až. 250 miligramy na kilogram tělesné váhy při perorální aplikaci a asi 0,05 až 100 miligramů na kilogram tělesné váhy při parenterálním podávání.

Nové sloučeniny mohou být podávány v běžných pevných nebo tekutých farmaceutických formách, např. nepotažené nebo tence potažené tablety, kapsle, prášek, granule, čípky nebo roztoky. Všechny tyto formy se vyrábějí běžným způsobem. Účinné substance mohou být pro tento účel zpracovány spolu s běžnými farmaceutickými pomocnými léčivy, jako jsou tabletová pojivá, plniva, konzervační prostředky, tabletová rozvolňovadla. regulátory' toku, zmčkčovadla. smáčedla, rozptylující prostředky, einulgátory. rozpouštědla, trvale uvolňovací směsi, antioxidanty a/nebo hnací plyny (viz H.Sucker a kol.: Farmaceutické technologie (Pharmazcutisehc Technologie). Thiemc-Vcrlag. Stuttgart, 1978). Formy pro podávání získané tímto způsobem běžně obsahují I - 90% své váhy účinné látky .

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady jsou zamýšleny pro ilustraci vynálezu. Protcinogcnni aminokyseliny jsou v příkladech zkráceny pomocí známého třípísmenného kódu. Další zkratky mají tento význam: TFA - kyselina trifluoroclová. Ac - kyselina octová. Bu butyl, lít = ethyl. Me - methyl. Bzl ^_ benzyl.

··*· t ♦ · · · · · • · · · *··· · · · · • ··· * · ♦ ♦ · · ·· · · · • 0 · · · · · · · • · · ·« · · · · · · · ♦

A. Obecné postupy

I. Peptidy uvedené v patentovém nároku 1 jsou syntetizované buď pomocí klasické syntézy v rozpouštědle pomocí standardní metodologie Z- a Boc-, jak bylo popsáno výše nebo standardními metodami syntézy tuhé fáze na úplně automatizovaném modelu syntezátoru 431 A, který dodává firma APPL1ED BIOSYSTEMS. Přístroj používá různé syntetické cykly pro techniky ochranných skupin Boc a Emoc

a) Syntetický cyklus pro techniku ochranné skupiny Boc

1. 30 % kyselina trifluoroctová v DCM

2. 50 % kyselina trifluoroctová v DCM

3. promývání DCM

4. 5 % diisopropylelhylamin v DCM

5. 5 % diisopropylethvlamin v NMP

6. promývání NMP

7. přidání předem aktivované c h raněné ani i no kyše líny (aktivace 1 ekviv. DCC a 1 ekviv. HOBt vNMP/DCM);

peptidová vazba (první část)

8. přidávání DMSO k reakční směsi, dokud tato směs neobsahuje 20 % objem DMSO

9. peptidová vazba (druhá část)

10. přidávání 3.8 ekviv. diisopropylethylaniinu k reakční směsi

11. peptidová vazba (třetí část)

12. promývání DCM

13. pokud je konverze neúplná, opakování vazby (zpět k bodu 5.) x 3 min.

x 1 min.

x 1 min.

x 1 min.

x 1 min.

x 1 min.

I x 30 min.

1x16 min.

I x 7 min.

x 1 min.

·νν· * · V » « · · · · « · · · ♦ · « ·♦· · * · ♦ · · ·· * · • · * · · « · · · ··· · ·· «* · · ··

14. 10 % anhydrid kyseliny octové, 5 % diisopropylethylamin v DCM	1 x 2 min.
15. 10 % anhydrid kyseliny octové v DCM	1 x 4 min.
16. promývání DCM	4 x 1 min.
17. zpět ke kroku 1.

Jako reagenční činidla pro vazbu aminokyseliny byly po Nmcthylaminokyselinách použity BOP-C1 a PyBrop. Reakční doby se odpovídajícím způsobem zvýšily. Při syntéze v rozpouštědle je pro tento typ vazby nej výhodnější použit buď aminokyselinu NCAs (N-terc.-butyloxykarbonyl-aminokyselina-N-karboxyanhydridy) chráněnou skupinou Boc, nebo aminokyselinu NCAs (N - benzyloxykarbonyl - aminokyselina - N - karboxyanhydridy) chráněnou skupinou Z.

b) Syntetický cyklus pro techniku ochranné skupiny Fmoc

1. promývání DMI·'

2. 20 % piperidin v DMF

3. 20 % piperidin v DMF

4. promývání DMI'

5. přidání předem aktivované chráněné aminokyseliny (aktivace 1 ekviv. I BTU a 1,5 ekviv. DIPEA v DMF):

peptidová vazba

6. promývání DMF

7. pokud je konverze neúplná, opakování vazby(zpět ke kroku 5.)

8. 10 % anhydrid kyseliny octové v DMF

9. promývání DMF

10. zpět ke kroku 2

I x 1 min,

I x 4 min. 1x16 min 5 x 1 min.

1x61 min x 1 min.

x 8 min.

x 1 min.

Jako reagenční činidla pro vazbu na aminokyselinu byly po N-methylaminokyselinách použity B0P-C1 a PyBrop. Reakční doby se odpovídajícím způsobem zvýšily.

II. Redukční alkylacc na konci N

Peptidová pryskyřice připravená jako v Ala nebo Alb byla zbavena ochrany na konci N (kroky 2-4 v Alb nebo 1-6 v Ala) a poté reagovala s trojnásobným molárním přebytkem aldehydu nebo ketonu v DME/1% kyselina octová s přidáním 3 ekvivalentů NaCNBIl·,. Po ukončení reakce (negativní Kaiserův test) byla pryskyřice několikrát promývána vodo, isopropanolem, DMF a dichlormethanem.

III. Zpracování peptidových pryskyřic získaných v procesu Ia a II

Peptidová pryskyřice byla vysoušena pod sníženým tlakem a převedena do reakční nádoby přístroje TEFLON IIF (dodávaný firmou PEN1NSULA). Přidání proplachovadla. nejlépe anisolu (1 ml/g pryskyřice) a v případě peptidu obsahujících tryptofan přidáni thiolu pro zachycení indolové íbrmylové skupiny, nejlépe cthandithiolu (0.5 ml/g pryskyřice) bylo následováno kondenzací ve fluorovodíku (10 ml/g pryskyřice) při ochlazování pomocí tekutého N_>. Směs byla ponechána, aby se zahřála na 0°C a při této teplotě byla míchána po dobu 45 minut. Fluorovodík byl poté odstraněn za podmínek sníženého tlaku a zbytek byl propírán cthylacetálem, aby bylo odstraněno zbývající proplachovadlo. Pcptid byl extrahován pomocí 30 % kyseliny octové a filtrován, Ohřát byl poté Ivofllizován.

IV. Zpracování peptidových pryskyřic získaných v procesu Ib a II

Peptidová pryskyřice byla vysoušena za podmínek sníženého tlaku a poté podrobena jednomu z následujících štěpných procesů v závislosti na složení aminokyseliny (Wade, Tregear. lloward Florcy. Fmoc Workshop Manual. Mclboume. 1985).

Podmínky štěpení
	TFA	Proptachovadlo	Reakční doba
1	95 %	5 % H?O	1,5 hod
2	95 %	5 % ethandithiol/anisol (1:3)	1,5 hod

Suspenze peptidové pryskyřice ve vhodné směsi TFA byla míchána při pokojové teplotě po uvedenou dobu a poté byla pryskyřice filtrována a promývána TFA a DCM. Filtrát a odtékající filtrát byly koncentrovány a peptid se srazil po přidání diethyletheru. Po ochlazení v ledové lázni byla sraženina zachycena filtrací, vložena do 30 % kyseliny octové a lyofilizována.

V. Pokud je použita o-chlortritylová pryskyřice (dodávaná firmou Bíohellas), je suspenze peptidové pryskyřice ve směsi kyselina octová/triíluorcthanol/dichlormethan (1:1:3) míchána při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny. Pryskyřice byla poté odfiltrována pomoci odsáli a důkladně promyta štěpným roztokem. Kombinované filtráty jsou koncentrovány v acuo a upraveny vodou. Sražená tuhá látka jc zachycena filtrací nebo odstředěním, promyta diethvletlierem a vysušena za podmínek sníženého tlaku.

f ·« · * ·

Obrázek 1:

Technika ochranné skupiny Boc na polymerní podporu

Boc-NH-CH-CO-pryskyřice

PG-R

1) TFA

2) zásada

H₂N-C’I I-CO-pryskyřice

PG-R

Boc-NH-CH-COOH -PG-R fr aktivátor

Boc-NIl-CH-CO-HN-CH-CO-pryskyřicc

PG-R

PG-R

UF

HF x !HN—Cl I—CO | NU -CH—CO-],, —NH CH— C OOH

R R R

Boc = t-butyloxykarbonvlová ochranná skupina PG - ochranná skupina postranního řetězce R - postranní řetězec aminokyseliny

I Ml * · · · • · φ · · · · ·

Φ · φφφφ ΦΦ • · ♦ ΦΦ φ· «· · · · ·

Obrázek 2 Technika ochranné skupiny Fmoc na podporu

Fmoc-N H-CII-CO-prysky ři ce

PG-R piperidin/DMF

PG-R

Fmoc-NH-CH-COOH

PG-R kmoc-Nlí-GH-CO-HN-CII-CO-pryskyřicc

PG-R

PG-R

Fmoc - 9-fliiorenylmethyloxykarbonylová ochranná skupina

PG - ochranná skupina postranního řetězec

R postranní řetězce aminokyseliny

VI. Vytvoření esterové nebo hydroxylaminovc vazby

Vhodná aminokyselina nebo peptiodovy derivát byly rozpuštěny v THF, DMF' nebo ve směsi obou rozpouštědel. Po ochlazení na teplotu mezi -20 °C a -10 °C bylo přidáno 1,5 ekviv. EDO a 1,5 ekviv. DMAP. Po míchání, které trvalo asi 1 hodinu bylo přidáno 1,5 ekviv. hydroxy- nebo hydroxylaminovc sloučeniny. Reakce byla míchána po dobu 2 hodin při teplotě přibližně 0°C. poté po dobu přibližně 24 hodin při pokojové teplotě. Po dokončeni reakce byla směs přelita do nasyceného roztoku NaCl a několikrát extrahována ethylacetátem nebo dichlormethanem. Organické fáze byly sloučeny a odpařeny.

VII. Čištění a charakterizace peptidů

Čištění bylo provedeno pomocí gelové chromatografie (SEPHADEX G-10. G-15/10% HOAc, SEPHADEX

LH20/MeOH) s nebo bez následné středotlaké chromatografie (MPLC) (nepohyblivá fáze: HD-SII. C-18, 20-45 μ, 100 A; pohyblivá fáze: gradient uA = 0,1% TFA/MeOH, B = 0,1 % TFA/IBO).

Čistota výsledných produktů byla stanovena analytickou HPLC (nepohyblivá fáze: 100 2,1 mm VYDAC C-18, 5 1, 300 A: pohyblivá fáze: gradient CH3CN/H2O, ztlumený roztokem OJ % TFA, 40°C). Charakterizací byla hmotová spektroskopie s rychlým ostřelováním atomů.

B. Syntéza stavebních bloků

1. Me₂Val - Val - MeVal - Pro - Pro - OMe x HCI

a) 234 g (0,463 mol) MejVal-Val-McVal-Pro-OMe x HCI bylo rozpuštěno ve směsi 2,3 I toluenu a 150 ml methanolu. potom bylo ke směsi přidáno 47,7 g (1.157 mol) NaOH a směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu asi 20 hodin.

Poté byla směs /koncentrována, ke zbytku bylo přidáno 500 ml CIHCB a směs byla opět /koncentrována

b) Surový produkt získaný touto cestou byl suspendován v

2.5 I CFECl· a při teplotě + 10 °C bylo po kapkách přidáno 178 g (1.76 mol) triethylaminu a 85.5 g (0.71 mol) pivaloylchloridu. Směs byla míchána při teplotě

5-10%' po dobu I hodiny a poté bylo po částech přidáno 77,6 g H-Pro-OMc x HCi a směs byla míchána při teplotě l()°C po dobu 2 hodin a poté při pokojové teplotě po celou noc.

«· · · · ««·« φ · ·· • · · · t · · · · « · · · · · · • · · · · · · ·

Pro zpracování byla směs zkoncentrována, zbytek byl rozdělen mezi 850 ml í I₂O a 1,1 I toluenu, a pH bylo upraveno na přibližně 1,5 pomocí koncentrované HCL za stálého míchání.

Po oddělení fází byl do vodné fáze přidán 1 1 (Ί 1?( pH bylo upraveno na 9 pomocí koncentrovaného roztoku hydroxidu sodného, fáze byly odděleny a vodná fáze byla opět extrahována. Výsledkem koncentrace sloučené organické fáze bylo asi 285 g zbytku.

c) Výsledný zbytek byl rozpuštěn v 1.6 I isopropanolu a při teplotě 40 °C bylo přidáno 64 g isopropanolovc HCI (29%) a směs mohla být zchlazena při pokojové teplotě za stálého míchám'. Asi po 2 hodinách byla odfiltrována sraženina, promývána isopropanoiem a methyllercbutylctherem a vysoušena při 50 °C. Výsledkem bylo 222 g pentapeptidu s čistotou 98.8 % (podle HPCL).

2. McWal - Val - MeVal - Pro - Pro - OH x HCI

222 g (0.367 mol) Mc?Val - Val - MeVal - Pro - Pro - OMc x HCI bylo rozpuštěno v 700 ml 1 HO a do roztoku bylo přidáno 38 g (0,94 mol) NaOH.

Po dokončení reakce byla směs acidifikována přidáním 61.7 g koncentrované 1 Id a poté byla koncentrována. Krystalický zbytek byl smíchán s 500 ml CH_;()1I. opět koncentrován a poté míchán s 1 I acetonu při teplotě 50 °C. Sraženina byla odfiltrována pomocí odsátí, vysušena, a poté byla rozpuštěna v 1,6 1 acetonu. Za stálého mícháni bylo přidáno 47.5 g roztoku isopropanol/HCI (30 %) a směs byla míchána za pokojové teploty po dobu 2 hodin. Tímto způsobem získaná sraženina byla opět přefiltrována pomocí odsáti, promyta acetonem a vysušena při 50 °C.

• · · • 9 · * » ·»♦9 • 9 9 9 « 9 ·· · · 9 · · ·· • · · 9 9 · ·· • 9999 «9 · 9 9 ·· ·

Výsledkem bylo 191,2 g čistého produktu (99,9 % podle HPLC). Bod tání 242 až 244 °C.

C. Specifické postupy

Obecná metoda ekviv. peptidovc kyseliny byl rozpuštěn spolu s 1 až 2 ekviv. příslušného nukleofilu (alkohol, hydroxylamin, oxim) vDMF/THF a při teplotě -10 °C byly přidány 1 až 2 ekviv. každého z DMAP. EDC x HC1 a HOBt; směs byla poté míchána při teplotě -10 °C a potom při pokojové teplotě.

Pro zpracování byl ke směsi přidán vodný roztok NaCl a ta byla extrahována vhodnými organickými rozpouštědly jako CH₂CL, nebo byla reakční směs koncentrována přímo. Surový produkt tímto způsobem může byt potom čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (CH2CI2/ CILOIl jako eluent) nebo MPC1. na RP silikagelu (CH3CN/ H₂O + TFA).

Příklad

- I MeiVai - Val - MeVal - Pro - Pro cyklohexylester

1.2 g (3 mmol) Mc^Val - Val - MeVal - Pro - Pro - OH x HCI a 0,27 g (2.7 mmol) cyklohexanolu bylo rozpuštěno v 50 ml DN1-7THF' (4:1) a potom, při teplotě -10 ^t;C, bylo postupně přidáváno 0.5 g (4.1 mmol) DMAP. 0.43 g (2,2 mmol) EDC x HCI a 0.34 g (2.2 mmol) HOBt. Směs byla potom míchána při teplotě - 10 ^CC po dobu 2 hodin a při pokojové teplotě po celou noc. Pro zpracování byla reakční směs přelita do nasyceného roztoku NaCl a dokladně extrahována ethylacctátcm. Zbytek, který zůstal po vysušení a koncentraci sloučených organických fázi byl čištěn na silikagelu (eluent CFLCL/CHOH 2%).

Výsledkem bUo 0,26 g esteru ve formě bílé pěny. FAB-MS:

634.5 (M 1 11’).

· · ···· · · ·· • «· · · · * · ·· · · · · · • · ··· ♦ · · ♦ »» ♦» 9 9 · « · · « ·

Následující sloučeniny byly připraveny podobným způsobem.

1-20	MeiVal-Val-MeVal-Pro-Pro-dodecylester FAB-MS: 720,5 (M < H+).
1-26	MejVal-Val-MeVal-Pro-Pro-oktadecylcster FAB-MS: 804.5 (M - 11').
1-89	Mc2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-2-(tcrc-butyloxykarbonylamino)cthylester FAB-MS/695.5 (M t 11 ‘).
1-14	MejVal-Val-MeVal-Pro-Pro-hexylestcr FAB-MS: 636.5 (M + H+).
1-2	MeiVal-Val-McVal-Pro-Pra-cyklopentylester FAB-MS: 620,5 (Μ » 1Γ).
1-58	MezVal-Val-McVal-Pro-Pro-trans-o-meihyl-Z-butenylcster FAB-MS: 620 (M + H+).
1-59	Mc2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-trans-3.7-dimethyl-2.6- oktadienvleslcr FAB-MS: 688.5 (Μ - 1Γ)
1-49	MeiVal-Val-McVat-Pro-Pro-1 -adamantanylmcthylester FAB-MS: 700.4 (M - íΓ)
I - 35	MeiVal-Val-McVal-Pro-Pro-.J-pentylesterr FAB-MS: 630.5 (M + H+)
1-64	Me2Val-Val-MeVal-Pro-P!O-N-methyl-4-piperidylestcr 1AB-MS: 649.4 (M - 11)
1-62	Me?Val-Val-McVal-Pro-Pro-l ,3-diíluoro-2-propylesler FAB-MS: 630.5 (M < 11')
1-74	MciVal-Val-MeVal-Pro-Pro-T-hydroxycthylester FAB-MS: 654 (Μ + 1Γ)
1-76	Mc2Val-Val-MeVal-PiO-Pro-2-(mcthoxyeihoxy)ethylestcr FAB-MS: 654 (M + íF)

• · · * · «· · · to to to • · · · fl fl « · 9 9 99 9 9 • fl · · · fl · · ··*·· · fl flfl · fl · ·

I - 78 Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-2-(2-butoxyethoxy)ethylester FAB-MS: 696,5 (M + JÍ)

I - 79 Me2Val-Vat-MeVal-Pro-Pro-2-(benzyloxy)cthylestcr FAB-MS: 686 (M + IÍ)

- 75 McjVal-Val-MeVal-Pro-Pro-Z-nielhoxyethylester FAB-MS: 610 (M + H')

I -174 Me2VaI-Val-MeVa)-Pro-Pro-2-(4-mclliyl-5-thiazolyl) cthylcstcr

FAB-MS: 677,3 (Μ i ΙΓ)

I -175 Me₂Val-Val-MeVal-Pro-Pro-2-(methoxykarbonyl’2methyl)propylester

FAB-MS: 666 (M + lí)

1-172 Mc2Val-Val-McVal-Pro-PiO-(l-inethoxykarbonyl-2-methyl) propylestcr

FAB-MS: 666 (Μ + ΙΓ)

ΠΙ - 4 McjVal-Val-McVal-Pro-Pro-Z-propanonoximester FAB-MS: 607 (M t lí)

111-34 Mc2Val-Val-McVal-Pro-Pro-4-methylbenzaldehvdoximcster

FAB-MS: 669 (M + 11’)

111- 35 MenVal-Val-MeVal-Pro-PiO-benzofenonoxiniester

FAB-MS: 731,5 (M + lí) • * · ♦ « · · • · · v ·*·· • ····« · v· • · « · · · ··· Φ · · · ··

Následující sloučeniny byly připraveny nebo mohou být připraveny podle příkladu 1 - 1

A - B - D - E - F - O - Ri. (Typ I)

Číslo	A	B	D	E	F	Ri
1- 1	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklohexyl
1-2	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklopentyl
1-3	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklopropyl
1-4	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	cvklobutvl
I c 1-.1	A .4 . 1 r t iviC2 v ai	1 r 1 vai	Vai	Pro	Pro	cykioheptyl
1-6	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklooktyl
1-7	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklononyl
1-8	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	l-methylpropyl
1-9	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	1-methyl butvi
1-10	Me2VaI	Val	Val	Pro	Pro	cyklodccyl
I- 13	Me2Val	XŘiI	Val	Pro	Pro	pentyl
I- 14	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	hexyl
1-15	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	heptyl
[-16	Me2Va!	Val	Val	Pro	Pro	oktyl
I- 17	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	nonyl
1-18	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	decyl
1- 19	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	undccyl
1-20	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	dodccyl
1-21	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	tridecvl
1 - 22	Mc2Vai	Val	Val	Pro	Pro	tclradecyl
1-23	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	pentadecvl
1-24	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	hexadccyl
1-25	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	hepladecyl
1-26	Me2 Val	Val	Val	Pro	Pro	oktadecvl
1-27	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	1 -methylcthvl
1-28	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-nictliylbutyl
1-29	Mc2Va!	Val	Val	Pro	Pro	3-methyl buly 1
1 - 30	Mc-Val	Val	Val	Pro	Pro	2-mcthyl propy 1
1-31	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	3.3-dimethylbutyl
1 - 32	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2.3-dirnethylbutyl
I - 33	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	4-methylpcntyl
1 - 34	Mc2Vai	Val	Val	Pro	Pro	4.4-dínielhy!pentyl
I - 35	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	pent-3-yl
1 - 36	Me2Val	Val	Val	Po	Pro	hept-4-yl

«· · · ·

Číslo	A	B	D	E	F	Rl
1-37	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2,2-dimethylbutyl
1-38	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2,2.2-tri fluorethy]
1 - 39	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	1 -fluorethy 1
1-40	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2,2-dilluorethyl
1-41	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methylcyklopropyl
1-42	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methycyklobutyl
1-43	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methylcyklopentyl
1-44	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methylcyklohexyl
1-45	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methvIrvUnhpntvl -------j.., .
1-46	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methylcyklooktyl
1-47	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methylcyklononyl
1-48	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	mcthylcyklodecyl
1-49	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyladamanty!
1-50	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	2-propenyl
1-51	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-buienyl
1-52	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-butenyl
1 - 53	Me2Val	Val	Vat	Pro	Pro	2-mcthyl-2-propenvl
1-54	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-pentenyl
1 - 55	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-niethy!-2-propenyl
1-56	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-pentenyl
1-57	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	4-pentcnyl
1-58	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-melhyl-2-butenyl
1-59	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	3.7-dimelhyl-2,6-oktadienyl
t - 60	Me2Val	Val	Val	Pro	[ho	3.7.11 -trimcthyldodeka- 2,6,10-lrienyl
1-61	Me?Val	Val	Va!	Pro	Pro	3.7.11,15-tctramethyIhcxadeka-2.6,10.14-tetraenyl
1-62	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	1,3-difluoro-prop-2-yl
1 - 63	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	4-pi peridyl
í-64	Me2Vai	Val	Val	Pro	Pro	N-melliyl-4-pipcridyl
1-65	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	N -acetyl -4-pi peridyl
1 - 66	Me2 Val	Val	Val	Pro	Pro	N-formyl-4-pi peridyl
1-67	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	N-terc-bulyl-4-pjpcridyl
I - 68	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	\-terc-buty loxykarbonyl-4piperidyl
1 - 69	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	N - bcn zy 1 -4-pipcridy 1
I - 70	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	N - ben zy 1 ox y k arbony 1 -4pipcridyl

* ♦ · «· t ♦· « · * « • ♦· · • «

Číslo	Λ	B	I)	E	F	Ri
1-71	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	N-benzoyl-4-piperidyl
1-72	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	4-letrahydropyranyl
1-73	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	4-tetrahydrothienyl
1-74	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-hydroxyethyl
1 - 75	Me2Va!	Val	Val	Pro	Pro	2-methoxyethyl
1-76	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-( 2-methoxyethoxy) ethy 1
1-77	McjVal	Val	Val	Pro	Pro	2-[2-(2-methoxyethoxy)- ethoxyjethyl
1-78	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-í2-butoxyethoxy)efhy!
1-79	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-benzyloxyethyi
1-80	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-fenyloxyethyl
1-81	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	2-methylthiocthyl
1-82	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-benzylthioethyl
I - 83	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-ícnylthioethyl
1-84	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-merkaptoethyl
1-85	Mc>Val	Val	Val	Pro	Pro	2-N.N-dimethylarninocthyl
1-86	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	2-N,N-dicthvlaminoelhyl
1-87	Me2Vai	Val	Val	Pro	Pro	2-N-acctvlaminocthvl
[-88	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-N-bcnzovlaminoethvl
[-89	Me2Val	Val	Val	Pro	Pto	2-N-terc-butyloxykarbonylaminoclhyl
1 - 90	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2 - N - bcnzy 1 o xy k arbo ny 1 aminoethyl
1-91	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	2-( N - iso propy 1 )am i n oc t hy 1
1-92	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-niethoxypropyl
1-93	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-benzyloxypropyl
1-94	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	2.N.N-diíenylanňnoethyl
1 - 95	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-N ,N -d i henzy 1 am i nopropyl
I - 96	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-fenyloxypropyl
[-97	Mc2VaI	Val	Val	Pro	Pro	3-N.N-dimcthylamino- propy]
[-98	Mc>Val	Val	Val	Pro	Pro	3 -N -acet y lan) i n opro py 1
I - 99	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3 -N, N -d i et hy 1 a m i n o pro py 1

• · · • · · ♦ * * · • · « · • · *· • ·· *9 · » • · « · · «♦ • · · · « ♦ · • · * « ·

Číslo	A	B	D	E	F	Rl
I-	100	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	3-mcthylthiopropyi
1-	101	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	2-fenylthiopropyl
1-	102	Me3Val	Val	Val	Pro	Pro	3-bcnzylthiopropyl
I-	111	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(indol-3-yl)tnethyl
1-	112	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(N-methylindoí-3-yl) methyl
1-	113	MeiVal	Val	Val	Pro	Pro	(N-acetylindol-3-yl )methyl
í-	114	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(3-N-formy (indoly 1 )-methyl
I-	115	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(l-methylimidazolyl)methyl
I-	116	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(thienyl-2-yl)methyl
I-	117	Me2Vai	Val	Val	Pro	Pro	(benzimidazolyljmethyí
I-	118	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(isoxazol-5-yl)methyl
I-	119	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(3-methyl-isoxazol-5-yl)- methyl
1-	120	McjVal	Val	Val	Pro	Pro	(3-mcthoxymcthyl-isoxazol· 5-yl)methyl
1 -	121	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-methyl-irnidazol-5-yl)methvl
I-	123	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(luran-2-y Dmethyl
i-	124	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(furan-3-yl)methyl
í-	125	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(benzofuran-2-y l)-mcthy 1
I-	126	Me?V al	Val	Val	Pro	Pro	(thicn-3-yl )methyl
1 -	127	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(i -benzylimidazol-3-yl)methvl
I-	128	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(thiazoI-2-yl)mcthyl
1-	129	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(benzothiazol-2-yl)mcthyl
I-	1.30	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(oxazol-2-yl)methvl
1-	1.31	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(bcnzox azo i -2-y 1 )m ethy I
1 -	1.32	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(thiazol-4-yI)methyi
i-	13.3	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(thiazol-5-yl Imethyl
I-	1.34	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-nicthyl-thÍazol-5-yl)- incthyl
1-	1.35	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(oxazol-4-yl)rnethyl
[-	136	Me2Val	Val	Val	Tm)	Pro	(oxazol-5-yl)methyl
1 -	137	MeyVal	Val	Val	Pro	Pro	(2-fenyloxazol-4-yl )methyl

fr ·

Číslo	A	B	D	E	F	Ri.
I - 138	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(2-fenylthiazol-4-yl)methyl
1-139	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(2-methyl-l,3,4-thiazol-5- yl)-methyl
1-140	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(2-fenyl-1,3,4-thi azo 1-5-y 1 )methyl
1 - 141	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	naftylmethyl
I- 142	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	naftyl-2-methyl
1-143	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-fluorfenyl)-methyl
I- 144	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-methoxyfenyl)meíhyl
1-145	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-trifluormethyl-fenyl)- mcthvl
1-146	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-chiorfenyl)methyl
I- 147	Me2VaI	Val	Val	Pro	Pro	(3,4-dimeihoxyfenyi)methyl
I - 148	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(3,4- d i o xyethy 1 c n feny 1 )methyl
I- 149	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(3,4-dioxycthy lenfcny 1 )methyl
1-150	Me2VaP	Val	Val	Pro	Pro	(3-lhiorfenvl)methyl
1-151	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(3-nicthoxyfenyi)niclhyl
I - 152	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(3 -1 r i 11 u o r m e t h y l fe n y l)methyl
1-153	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(2-iluorfenyl)methyl
1-154	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(2,6-diíluorfenyl)methyi
1- 155	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(2-Ir i 11 uonnethy 1 feny 1 )methyl
I - 156	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-terc-butylfcnyl)nicthyl
1-157	Me2VaI	Val	Val	Pro	Pro	(4-methylfcnyl)mcthyl
I- 158	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(3-pyridyl )niethyl
1-159	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-pyridy Dmelhyl
1 - 160	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(2-pyridyl )inethyl
1-161	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	(l-naftyl)methyl
1 - 162	Mc.Val	Val	Val	Pro	Pro	(2-nafiyDmethyl
1-163	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-chinolinyl)methy 1
1-164	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(5-chinolinvl) methyl

4()

- v * ♦ · · · · · •φ φ · φ φ φ · · · φ ·φ φ φ · φφ ♦* φφ·φ « · φφφφ ·♦ «Μ «« «φ «φ · ·

Číslo	Α	B	D	E	F	Ri.
1-165	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	(3 -methyl feny !)methyl
1-166	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl) methyl
I- 167	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(mcthoxykarbonyl)-2-ethyl
1- 168	MejVal	Val	Val	Pro	Pro	(methoxy karbony 1 )-3-propyl
I- 169	Mc2Vai	Val	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-4-butyl
1-170	Me2Vai	Val	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-1 -ethyl
I- 171	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-1,1- dimethyl-2-ethyl
1 - 17'2	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl )-2-methyl- 1 -propyl
1-173	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-1-propyl
1-174	Me2VaI	Val	Val	ΊΫο	Pro	2-(4-methyl-5-thÍazoly 1) ethyl
1-175	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	2-methoxykarbonyl-2-methyi propyl

• · · · • · *» « · * * 9 • · ·

• 4 ♦v · • «♦ ♦ ·· « ·

Číslo	Λ	13	D	E	I·’	Rl
1-401	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	cyklohexyl
1-402	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	cyklopentyl
1-403	Mc2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	cyklopropyl
1-404	MciVal	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	cyklobutyi
I - 405	Me2Val	Val	leroLcu	Pro	Pro	cykloheptyl
1-406	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	cyklooktyl
1-407	Mc2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	cyklononyl
1 - 408	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	1-melhylpropyI
I - 409	Me.Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	1-methylbutyl
[-410	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	cyklodecyl
1-413	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	pentyl
[-414	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	hexyl
1-415	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	heptyl
1-416	Mc.Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	ok tyl
1-417	Me.Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	nonyl
1-418	Me2 Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	decyl
1-419	Mc2Va!	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	undecyl
1 - 420	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	dodecyl
1-421	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	tridecyl
1-422	McjVal	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	tetradecyl
l - 423	Me?Val	Val	terč 4 eu	Pro	Pro	pentadecyl
1-424	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	hcxadecyl
I - 425	Mc2 V al	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	heptadecyl
I - 426	Mc2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	oktadecyl
1-427	Mc2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	1 -methy lethyl
1-428	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	2-inethylbutyl
1 - 429	Mc2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	3-methylbutyl
l - 430	Me?Val	Val	terč .L eu	Pro	Pro	2-mcthylpropyl
1 - 431	Me2Val	Val	lerc. 1 .eu	Pro	Pro	3,3-dimethylbuty!
I - 432	Mc2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	2.3-dimcthylbutyl
1 - 433	Mc2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	4-melliylpentyi
1 - 434	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	4.4-dimelhylpentyl
1-435	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	pcnt-3-yl
1 - 436	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	hept-4-yl
1 - 437	Me2Val	Val	terč. I.cu	Pro	Pro	2.2-dimethylbutyl
I - 438	Mc2Val	Val	tcrc.Leu	Ψτο	Pro	2,2.2-trilluorethvl
I - 439	Mc2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	I -lluorethyl
1-440	Me.Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	2,2-di lluorethvi

«· * · · φ · · · • · · · ···· · ·*· • ··· «« ♦ * · · ··· * · • · ·*·· · · · • · · ·· ·· · · · ··

Číslo	A	B	D	E	F	Rl
1-441	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	methylcyklopropyl
1-442	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	methycyklobutyl
I - 443	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	methylcyklopentyl
1-444	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	methylcyklohexyl
I - 445	Me-jVal	Val	terč. Leu	Pro	Pro	methylcykloheptyl
1-446	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	methylcyklooktyl
1-447	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	mcthylcyklononyl
1-448	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	methylcyklodecyl
1 - 449	MciVal	Val	terc.Leu	Pro	Pro	methyladamantyl
1 - 450	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	2-propenyl
1-451	Mc2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	3-butcnyl
I - 452	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	2-butenyl
1 - 453	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	2-methyl-2-propenyl
I - 454	Mc?Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	2-pentenyl
1 - 455	Me2Vat	Val	terc.Leu	Pro	Pro	3-methyl-2-propenyI
I - 456	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	3-pentenyl
I - 457	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	4-pentcnyl
1-458	Mc2VaI	Val	terc.Leu	Pro	Pro	3-methyl-2-butcnyl
1 - 459	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	3.7-diinethyl-2,6- oktadicnyl
I - 460	Me.Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	3.7.1 i -trimethyldodeka-2,6,10-trienyl
[-461	Mc2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	3,7.11.15-tetramethyl- hcxadeka-2,6.10.14tetracnvl
I - 462	Mc2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	1,3-dilluoro-prop-2-vl
I - 463	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	4-piperidyi
1 - 464	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N-mcthyl-4-pipcridyl
1 - 465	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N-acetyl-4-piperidyl
1 - 466	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N - formy 1 -4-pí pe ri dy 1
1 - 467	Me?Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N-tcrc-butyl-4- piperidyl
1 468	Mc2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N-terc-butyloxykarbonyl-4-pipcridyl
1 - 469	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N-benz.yl-4-piperÍdyl
I - 470	Mc,Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N-benzyloxykarbonyl- 4-piperidy 1
1-471	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	N-bcnzoyl-4-piperidyl
1-472	Mc2Vai	Val	terc.Leu	Pro	Pro	4-tetrahydropyranyl
I - 473	Me2Val	Val	terc.Leu	Pro	Pro	4-tetrahydrothienyl

Číslo	A	B	D	E	F	Rj.
1-474	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	2-hydroxyethyl
1 - 475	Mc?Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	2-methoxyethyl
1 - 476	MejVal	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-(2-mcthoxyethoxy)- ethyl
1-477	McjVai	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-| 2-(2-methoxycthoxy)elhoxy] ethyl
1-478	Me;Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-(2-butoxyethoxy)-cthyl
i - 479	MejVal	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-benzyloxyethyl
1-480	Mc2Va!	Val	(erc. Leu	Pro	Pro	2-fcnyloxyethyl
1-481	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-methylthiocthyi
1-482	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	2-benzylthioethyl
1 - 483	Mc2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-fcnyllhioethyl
1-484	Me.Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	2-merkaptocthyl
1 - 485	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	2-N.N-dirncthylamino- ethyl
1-486	MejVal	Va!	terč. Leu	Pro	Pro	2-N.N-diethylaminoethyl
1-487	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	2-N-acetylaminoethyl
1-488	Me?Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-N-benzoylaminoethyl
1 - 489	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	2-N-tcrc-bulyloxykarbonylaminoethyl
I - 490	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	2-N-benzyloxykarbonylaminocthyl
1-491	Me?Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	2-(N-isopropyl)- aminocthvl
I - 492	Mc2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	3-meihoxypropyl
1 - 493	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	3-benzyloxypropyl
I - 494	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	2,N,N-difenylaminoethyl
1 - 495	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	3-N.N- d i be nzy 1 am i nopropy 1
1 - 496	Mc2Val	Val	tore. Leu	Pro	Pro	3-ícnyloxypropyl
1 - 497	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	3-N.N- dimethylaminopropyl
I - 498	Me.Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	3-N-acctylaminopropyl
I - 499	Me2Val	Va!	lerc.Leu	Pro	Pro	3-N.N- diethylaminopropyl
I - 500	Me2Val	Val	lcrc.1 ,eu	Pro	Pro	3-methylthiopropyl
1-501	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	2-fenylthiopropyl
1 - 502	Me2Val	Val	lerc.Leu	Pro	Pro	3-bcnzyllhiopropyl
1-511	Mc2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(indol-3-yl)melhyl

Číslo	A	B	D	E	F	Rl
1-512	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(N-methyl i ndol-3-yl)methyl
1-513	Mc2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(N-acetylindol-3-yl)methyl
1-514	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(3-N-formylindolyl)mcthyl
1-515	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(1 -methy limidazolyl) methyl
1-516	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(thienyl-2-yl)methyl
1-517	Me2VaI	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(benzimidazolyl)methyl
i - 5 i 8	Me2Vai	Vai	terč. Leu	Pro	Pro	(isoxazoi-5-yi)methyi
1-519	Mc2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(3-methylisoxazol-5-yl)- methyl
1 - 520	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(3-methoxy methy 1- isoxazol-5-yl)methyl
1-521	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(4-methylimidazol-5yl)mcthyl
1 - 523	Mc2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(furan-2-yl)methyl
I - 524	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(furan-3-yl)methyí
I - 525	Me.Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(bcnzofuran-2-yl)mcthyl
I - 526	Mc?Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(thien-3-yl)melhy 1
I - 527	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(1 -benzylimidazol-3-yl)methyl
1 - 528	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(thiazol-2-yl)methyl
1 - 529	Me2Val	Val	terc.l.eu	Pro	Pro	(bcnzothiazol-2-yl)mcthyl
I - 530	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(oxazol-2-yl)methyl
1-531	Me.Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(benzoxazol-2-yl (methyl
1 - 532	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(thiazol-4-yl)mcthyl
1 - 533	Mc2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(thiazol-5-yl(methyl
I - 534	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(4-methylthiazol-5-yl)methyl
1-535	Me2Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(oxazol-4-yl)methyl
1 - 536	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(oxazol-5-yl)methyl
1 - 537	Me2Val	Val	terc.l.eu	Pro	Pro	(2-fcnyloxazol-4-yl)mcthyl
1 - 538	Me?Val	Val	tcrc.Leu	Pro	Pro	(2 - feny 11 hiazo 1 -4-y 1 )m e t hy 1
1 - 539	Mc2Val	Val	terc.l.eu	Pro	Pro	(2-methyl-L3.4-lhiaz.ol-5- yl (methyl

• · · · V « · « ·· • · · · · »«· «··· · · · · · · « * · * « *4 • · · · · · · · * • · · · · ·· ·« «» ··

Číslo	A	B	D	E	F	Ri.
I - 540	Me2Val	Val	tore.Leu	Pro	Pro	(2-fenyl-1.3,4-thiazol-5yl) methyl
1-541	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	naftylmethyl
I - 542	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	naftyl-2-methyl
I - 543	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(4-fluorfenyl Imethyl
I - 544	Mc2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(4-mclhoxy feny] )methy]
l - 545	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(4-trifl uormethyl fenyl )methyl
1 - 546	Me2Val	Val	tore.Leu	Pro	Pro	(4-chlofenyl Imethyl
r r .1 -*7 1 - J4/	M . V_1 Eviu? v ai	v ai	ičiú.Lču	11 rro	TI rio	(3,4-tí i 11 j c í i io xy feny i) methyl
I - 548	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(3,4-d i oxymet hylenfeny 1 )methyl
1 - 549	Mc2Val	Val	terč. I.eu	Pro	Pro	(3.4-dioxycthylenfenyl )- mclhvl
1 - 550	Me2Val	Val	tore.Leu	Pro	Pro	(3-íluorfenyl Imethyl
1-551	Mc2Va!	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(3-methoxy fenyl Imethyl
1 -552	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(3-triíluormelhyl feny líni ethyl
I - 553	Me.Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(3-11 uorfcnyl Imethyl
1 - 554	Mc2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(2.6-d i 11 uorfcnyl Imethyl
1 - 555	McjVal	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(2-tri fluornielhyl feny 1) methyl
I - 556	Mc?Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(4-te rc-but y 1 fc ny i) met hy 1
I - 557	Me.Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(4- m eth v 1 fe ny 1 )m et 1 ιν 1
1 - 558	MciVal	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(3-pyridyl.Imethyl
1 - 559	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(4-pyridyl Imethyl
1 - 560	McyVal	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(2-pyridyl (methyl
1-561	Me2Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(1-naftyl Imethyl
1 - 562	McjVal	Val	tcrc.Lcu	Pro	Pro	(2-naftvDmctliy 1
1 - 563	Me.Val	Val	terč.Leu	Pro	Pro	(4-chinolíiiyl Imethyl
1 - 564	Me2Val	Val	terč.I.eu	Pro	Pro	(5-chinolinyl) methyl
I - 565	Mc2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(3-nicthyl fenyl Imethyl
I - 566	Mc?Val	Val	tcrc.Lcu	Pro	Pro	(meihoxykarbonyl)nicthyl

Číslo	A	B	D	E	F	Rl
I - 567	Me2Val	Val	terč,Leu	Pro	Pro	(methoxykarbonyl )-2-et hy 1
1 - 568	Me2Val	Val	terč,Leu	Pro	Pro	(mcthoxykarbonyl)-3- propyl
I - 569	Mc2Val	Val	terč, Leu	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-4“butyl
I - 570	Mc2Val	Val	terč. Leu terč.Leu	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-1 -ethyl
1-571	Mc.Val	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl )-1.1dimethyl-2-ethyl
I - 572	Me2Val	Val	terč. Leu	Pro	Pro	(methoxy karbony l)-2mclhyl-1-propyl
T r —i η l - J /.·»	’víe2v'aí	Vai	icrc.Leu	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-1 propyl

a a · o a ♦ ·· ι«» a · a · a a a a a w W * V · · ’ • · · · · ···

Číslo	A	B	D	E	F	Rj
1-201	MciVal	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	cyklohexyl
1-202	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	cyklopentyl
1-203	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	cyklopropyl
[-204	fvle2Val	terč, Leu	Val	Pro	Pro	cyklobutyl
I - 205	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	cykloheptvl
1-206	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	cvklooktvl
I - 207	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	cyklononyl
I - 208	Mc?Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	1 -methylpropyl
I - 209	Me2Vaí	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	1 -methylbutyl
1-210	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	cyklodecyi
1-213	Me2Val	tore. Leu	Val	Pro	Pro	pentyl
1-214	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	hexyl
1-215	McjVal	terč. Leu	Val	Pro	Pro	heptyl
1-216	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	oktyl
1-217	McjVal	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	nonvl
1-218	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	decyl
1-219	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	undeevl
1-220	M Ci Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	dodecyl
1-221	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	tridecy 1
1 - Ί22	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	tetradecyl
1 - 223	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	pentadecyl
1-224	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	hexadccyl
I - 225	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	hcptadecyl
1-226	Me.Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	oktadccyl
1-227	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	1 -methy lethyl
1-228	Mc.Val	tcrc.l .cti	Val	Pro	Pro	2-methylbutyl
I - 229	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	3-methyl butyl
1 - 230	Me2Val	tore.Leu	Val	Pro	Pro	2-methylprop} 1
i -231	McjVal	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	3.3-di melhylbutyl
I - 232	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	2,3-dimethylbuiyl
1 - 233	Me-Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	4-methy Ipeniyl
I - 234	M e2 V a 1	tcrc.l.cu	Val	Pro	Pro	4.4-diniethylpeuivl
[ - 235	Me> Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	pent-3-yl
1 - 236	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	hcpt-4-yl
I - 237	Mc2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	2,2-dimclhy Ibuix 1
i - 238	Me?Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	2.2,2-tri lluorcthyl
1 - 239	Me2Val	terč.Leu	Va!	Pro	Pro	1 -lluorcthyl
I - 240	Mc?Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	2.2-di íluorcthyl

• · * Ml · * ·* * · · · · · · · · · ·*»« · • · · · · · · * · • * · · · · · · * I ♦ · ·

Číslo	A	B	D	E	Γ	Rf
1-241	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	methylcyklopropyl
1-242	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	met hycykl obuty 1
I - 243	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	mcthylcykiopentyl
1-244	Me2Val	terč. Leu	Vai	Pro	Pro	methvlcvklohexvl
I - 245	Me2Va!	terč. Leu	Val	Pro	Pro	methylcykiuheptyl
1-246	Me2Vai	terč. Leu	Val	Pro	Pro	methylcyklooktyl
1-247	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	methylcyklononvl
1-248	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	methylcyklodecyl
1 - 249	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	melhvladam;in.t>!
I - 250	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	2-propenyl
1-251	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	3-butenyl
1 - 252	Mc2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	2-butenyl
I - 253	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-methyl-2-propcnyl
1-254	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-pentenyl
1 - 255	Me?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	3-methyl-2-propenyl
1 - 256	Mc2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	3-pcntenyl
í - 257	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	4-pentenyl
1-258	Me?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	3-methyi-2-butcnyl
1 - 259	McsVal	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	3.7-dimethyl-2.6-oktadienyl
1 - 260	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	3.7.11 -trimethyldodeka- 2.6.10-trienyl
1-261	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	3,7.11.15-tetramethyl- hexadeka-2.6.10.14- tetraenvl
I - 262	Me2 V a 1	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	l.3-difluorprop-2-\l
[ - 263	Mc2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	4-piperidyl
1-264	Me2Val	lerc.l.cu	Val	Pro	Pro	N-melhyl-4-piperid,\ 1
I - 265	Mc?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	N-acetyl-4-piperidy 1
1 - 266	Me?Val	terc.l .cti	Val	Pro	Pro	N-formy]-4-pi peří dyl
1 - 267	Mc?Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	N-terc-buty l-4-piperidyl
1 - 268	Me.Val	lerc.l.cu	Vai	Pro	Pro	N-terc-butyloxykarbonyl-4- pipcridyl
I - 269	Mc2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	N-benzy l-4-pí pcridx 1
1 - 270	Mc?Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	N-bcnzyloxykarboiiyl-4piperidyl
1-271	Mc2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	N-bcnzovI-4-piperidvl
1-272	Mc2Vai	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	4-tetrahxdropyranyl
1 - 273	Me2Val	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	4-tctrahydrothicmI
1 - 274	Me2Va)	lerc.l.cu	Val	Pro	Pro	2-liydro.xyethyl

v --»· * * «* • · · · · · « · · · · · · · * * · · · · · ► fc ***** ·· ·* ft · «

Číslo	A	13	D	L	F	Rf
I - 275	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	2-mcthoxyethyl
1-276	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-(2-methoxyethoxy)ethyl
Ϊ-277	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-[2-(2-niethoxycthoxyj- ethoxyjcthyl
1-278	Mc2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	2-(2-hutoxyethoxy)ethyl
I - 279	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-benzvloxyethvl
1-280	Me?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-fenyloxyethyl
1-281	McjVal	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-methylthioethyl
1-282	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-benzylthioethyl
í - 2X3	Me?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	2-ťcnylthioethyl
1-284	Me2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-merkaptoethyl
1 - 285	MeiVal	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-N,N-dimethylaminocthyl
1-286	Mc2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-N.N-diethylaminocthyl
1-287	Me?Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-N -ac c ty 1 a m i n o c t h v 1
1 - 288	Mc2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-N-benzoylaminoetliyl
I - 289	Me2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-N-ierc-butyloxykarbonyL aniinoethyl
1 - 290	Me2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2 -N - ben zy 1 o x ykarbonv 1aminocthyl
1-291	Me2V al	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-(N.isopropyl)aniinoethyl
I - 292	Me2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3-mcthoxypropyl
I - 293	Me2 Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3-benzyloxypropyl
1 - 294	Mc2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2.N.N-dilén\ laminoethyl
I - 295	MeýVal	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3 - N. N - d i ben zy lam inopropyl
í - 296	Mc>Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3-fcnyloxypropyl
1 - 297	Mc2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3 - N. N -d i met by lamí n o propyl
1 - 298	Me.Val	terci .cu	Val	Pro	Pro	3 -N -acet v 1 ai 11 i n o p ropy 1
1 - 299	Me2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3 -N. N -d i e t h y 1 an i i n o pro py 1
1 - 300	Mc.Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3-mctliy ithiopropvl
1-301	Me2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-tcnylthiopropyl
1 - 302	Me?Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3-bcuz) ltliioprop\ 1
1 - 303	Me2Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	2-cthoxyethvl
1 - 304	Mc.Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	3-elhoxypropyl
1 - 305	Me?Val	tere.Leu	Val	Pro	Pro	4-cthoxvhutv 1

> v · · ·*» · * · · * ··· · · · · · · ··· ·V * · · Φ · » * *· • t· · · <4 «· ·*··

Číslo	A	B	D	L	F	R|.
1-311	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(indoL3-yl)methyl
1-312	Mc2Vai	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(N-methylindol-3-yl)methyl
1-313	Me2VaI	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(N-acetylindol-3-yl)mcthyl
1-314	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(3-N-formy 1 indoly I)methy 1
I - 315	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(1-methylimidazolyl)methyl
1-316	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(thienyl-2-yl)methyl
1-317	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(henz i m i dazoly 1 )nie t h y 1
i - 318	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(isoxazoI-5-yl)methyl
1-319	Mc.Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(3 - m ethy 1 i sox azo 1-5 -y I )methvi
1 - 320	Mc2VaI	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(3-melhoxymethylisoxazo 1- 5-y I )nie t hy 1
1-321	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(4-methylirnidazoL5-yI )methyl
I - 323	Mc?Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(luran-2-yl)nicthyl
1 - 324	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(luran-3-yl)methvl
I - 325	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(bcn/.ofuran-2-yl)methyl
1 - 326	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(thieii-3-y!)mcthyl
I - 327	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(1 -bcnzylimidazol-3yllmclhyl
1 - 328	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(thia/.ol-2-yl )methy1
í - 329	Me2V al	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(be n zoth i azoí-2-y 1 )me t hy 1
1 - 330	Mc.Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(oxazol-2-yl)mcthyl
1 - 331	Mc?V al	terč. I.eu	Val	Pro	Pro	(benzoxazol-2-yl)melhyl
1 - 332	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(thiazol-4-y!)inethyl
1 - 333	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(thiazol-5-yl )nielhyl
1-334	Me.Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(4-mcthylthiazol-5-yl)methyt
1 - 335	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	íoxazol-4-yl)mcthyl
1 - 336	Mc2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(oxazoL5-yl)nielhyl
I - 337	Me?Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(2-teny loxazol-4-y i Jmethyl
1 - 338	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(2 -1 c n y 11 h i azo 1 -4-y 1 Jmelhy 1
1 - 339	Mc.Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(2-melhy 1-1,3.4-thiazol-5yl (methyl

· · 9

Číslo	A	B	D	E	F	Ri
1	-340	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(2-fenyl-L3.4-thiazol-5- yl) methyl
1	-341	Me.Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	naftylmethyl
1	-342	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	nafty l-2-methyl
I	-343	Me?Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(4 - tl u o r 1 é n y 1) m e i h y 1
1	-344	McyVal	tcrc.Leu	Val	Pro	Pro	(4-methoxyfenyl)methyl
1	- 345	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(4-triťI uormethyl feny 1 )methyl
I	- 346	Mc2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(4-chlorfenyl Imethyl
i	- 347	Me2Vaí	í ----1 terč. Leu	Val	Pro	Pro	(3.4-dimethoxyfenyl)- mcthyl
I	-348	Me?Val	tore. Leu	Val	Pro	Pro	(3.4-dioxyethylenfeny 1 )methyl
1	- 349	McyVal	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(3,4-dioxyethy len fenyl )methyl
1	- 350	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(3-fliiorlényl )methy 1
I	-351	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(3-methoxy feny Lmethy 1
I	- 352	Me? Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(3-iri 11 uormethyl feny 1)methyl
I	- 353	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(2-lluorfcny l)melhyl
1	- 354	Mc?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(2,6-difluorfenyl)methyl
I	- 355	MtyVal	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(2-trilluonncthyl fenyl )methyl
i	- 356	Mc?Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(4-terc-butylfcnyl)nicthyl
1	- 357	Me?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(4-m cihy 1 feny L methy 1
i	- 358	Me2Vai	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(3-py ridyl )methyl
1	- 359	Mc?Val	tore.Leu	Val	Pro	Pro	(4-pyridyl lmethy 1
I	- 360	Me?Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	(2-pyridyl )methyl
I	- 361	Me? Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(1-nafty Lmethy 1
1	- 362	Me?Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	(2-naftyl)methyl
1	-363	Me2Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	(4-chinolinv Lmethyl
I	- 364	Me?Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(5-chinolinvl) methyl
1	- 365	Mc?Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	(3-mcthylfcnyl Imethyl
1	- 366	Mc?Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	(methoxykarbony Lmethyl
I	- 367	Me?Val	lerc.Leu	Val	Pro	Pro	(methoxy karbonyL-2- elln 1 *--— - - -

Číslo	Λ	B	D	L	Γ	Ri.
1 - 368	Me2Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(mcthoxykarbonyl )-3-propy 1
I - 369	Me?Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-4-butyl
I - 370	Me?Val	terč.Leu	Val	Pro	Pro	(mcthoxykarbonyl)- i -ethyl
1-371	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(mcthoxykarbonyl)-1,1- dimethyl-2-ethyl
1-372	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(mcthoxykarbonyl )-2-methyl- 1 -ρΓθρν 1
I - 373	Me2Val	terč. Leu	Val	Pro	Pro	(methoxykarbonyl)-1 -propy 1

(Typ II)

Číslo	A	B	I)	E	1	IČJ	ičj.
II	1	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	fenyl
II	2	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	benzyl
II	,)	Me? V al	Val	Val	Pro	Pro	II	l-inethvlethvl
II	4	Me? V al	Val	Val	Pro	Pro	II	2-methylpropvl
Π	5	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	1-melhylpropyl
π	6	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	1,1 -dimethvlethvl
11	7	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	ethyl
II	8	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	11	propyl
II	9	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	blity 1
II	10	Me? V al	Val	Val	Pro	Pro	II	hexyl
11	11	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	11	cyklopentyl
11	12	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	cyklohexyl
II	13	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	cyklohcptyl
11	14	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	11	pentyl
11	15	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	tri fluormethy 1
11	16	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(4-iluorfcnyl)niethyl
11	17	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	(4-clilorlcny! imctliy 1
II	18	Mc.Val	Val	Val	Pro	Pro	H	(4-niethoxyfcnyl )methyl
11 -	19	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	(4-tri lluormctliyl )lenylmethyl
11	20	M e? V a 1	Val	Val	Pro	Pro	II	cyklopropyl
11	21	Mc2Vdl	Val	Val	Pro	Pro	II	2-propcnyl
II	22	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	11	cyklooktyl
II	23	MeA al	Val	Val	Pro	Pro	II	cyklononyl
II	24	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	c\ klodccyl
II	25	M< Val	Val	Val	Pro ,	Pro	II	2.2-d iincthx Ί propx I
II	26	Me;Val	Val	Val	Pro	Pro	II	terc-bulyl
II -	37	Me \ al	Val	Val	Pro .	Pro	metlo 1	icrc-bulv 1

Číslo	A	B	D	E	F	R\	R6i.
Η - 28	Mc2Vai	Val	Val	Pro	Pro	methyl	methyl
11-29	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	ethvl	ethyl
11 - 30	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	ethyl
11-31	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	propyl	propyl
II - 32	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	1-methylcthvl
11 - 33	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	feny!	fenyl
II - 34	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	benzyl	benzyl
11 - 35	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	trifluormcthyl	trifluorm ethyl
i i -	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4-clrlorfenyl)nicthyl	(4-chlorfenyl (methyl
11-37	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	(4trilluorrnethylleriyl) methyl	(4-trifluormethyi- fenyl (methyl
II - 38	Ve-Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(3-lluorfeny|) methyl
11 - 39	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(3-ehlorfenyl) methvl
II - 40	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(3-methoxy fenyl )methyl
11-41	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(4-terc-butyl fenyl)methyl
11-42	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	II	(4-mcthylíenyl)mcthyl
II - 43	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	II	(3-mclhoxy fenyl )methyl
11-44	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(2-íluorfenyl)nielhyl
11-45	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(2-lri lluormeihy 1fenyl)meth\l
II - 46	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	(3-trill iionnethylleityl Jmelhyl
11-47	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	(2.6-di 11 norfenyl )methvl
11-48	MeA'al	Val	Val	Pro	Pro	11	(3.4-dimetho.xy- ienyl (methvl
11-49	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	(3,4-dioxymcthylenfenyl (methyl
11 - 50	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	fenyl
11-51	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	ethyl	fenyl

• to a	to to	• •a
• « a a «	a a	•
• ·	•	a
·«· a a	a *	to »

• · • * to • · • « • to to • * to v

Číslo	Λ	B	I)	E	1	R\ a R6|. dohromady
II - 5.3	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	O N
11-54	Mc.Wil	Val	Val	Pro	Pro	0
11-55	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	o

(Τγρ ΠΓ)

Číslo	A	B	D	r-	[	IV	R6L
111- 1	Me?V al	Val	Val	Pro	Pro	11	methyl
III - 2	Me2Vai	Val	Val	Pro	pro	r 11	x 1 1 ClllV 1
IJI - 3	Mc)Val	Val	Val	Pro	Pro	H	pro pyl
III-4	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methvl	methyl
III - 5	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	ethyl
III - 6	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	ethyl	ethyl - «-1__________________________________________ .
lil - 7	Me 'Val	Val	Val	Pro	Pro	11	fenyl
111-8	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	4-íluorfcnyl
111 - 9	Mc>Val	Val	Val	Pro	Pro	H	4-chlorfenyl
111- 10	Me2Val	Val	Va!	Pro	Pro	11	4-methoxyfcnol
III- 11	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	II	4-lrifluormethyllenyl
111- 12	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	4-tcrc-butyl fenyl
III- 13	MeWal	Val	Val	Pro	Pro	11	3-lluorfcnyl
lil- 14	Mc-Vul	Val	Val	Pro	Pro	II	3-chlor! enyl
111- 15	MoVal	Val	Val	Pro	Pro	1!	3-mcthoxyfenyl
III- 16	McWal	Val	Val	Pro	Pro	11	3-tri íluonncthy licnyl
111- 17	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	li	2-11 nor fenyl
III- 18	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	2-triíluormethyl fenyl
111- 19	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	terc-bulyl
111-20	MeiVal	Val	Val	Pro	Pro	methyl	terč-bul v1
111-21	Mc'Val	Val	Val	Pro	Pro	11	2.6-dilluoríeny 1
111- 22	Me2V a 1	Val	Val	Pro	Pro	11	2-methylpropyl
111-23	MoVal	Val	Val	Pro	Pro	11	2,2-dimethylpropyl
lil- 24	Me \'al	Val	Val	Pro	Pro	11	buly 1
lil- 25	M·.· \ .J	Val	Val	Pro	Pro	11	pcntyl
lil- 26	\1·.· \	Val	Val	Pro	Pro	11	hcxyl
111-27	Me -'Val	Val	Val	Pro	Pro	11	hept\ 1
III- 28	Xk-V.·!	Val	Val	Pro	Pro	lU	oklvl

>7

Číslo	A	B	D	E	F	R\	R6l
III- 29	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	1-1	nonyl
111-30	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	II	cyklopropyl
111-31	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	cyklobutyl
111-32	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	cyklopentyl
111-33	McAal	Val	Val	Pro	Pro	11	cyklohexyl
111- 34	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	I-l	4-methylfenyl
lil- 35	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	fenyl	fenyl
III- 36	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	1 -naftyl
ΠΙ- 37	Me-Va!	Val	Val	Pro	Pro	II	2-naftyl
111-38	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	1-naftyl
III- 39	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-naftyl
III- 40	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	fenyl
III-41	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	4-fluorfcnyl
111-42	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	4-chlorfcnyl
111-43	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	4-niethoxyfcnvl
111-44	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	4-triíluomiethyl fenyl
III- 45	Me;Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	4-methyl fenyl
111-46	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	4-terc-butyl fenyl
111-47	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	3.4-dimethoxyfcnyl
111-48	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	II	3.4-dimethoxyfenyl
III- 49	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	mclhvl	3-11 uorfeny 1
111- 50	Mc-Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	3-chlorfenyl
111-51	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	3-methoxvfenvl
III- 52	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	3-tri iluormethyl fenyl
IH- 53	MoVal	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-llitorfeny 1
III- 54	McjVal	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-chlorfenyl
lil- 55	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-trilluormethylfenyl
III- 56	\lc\al	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2.6-difluorfenyl
111-57	MoVal	Val	Val	Pro	Pro	trilltior- mcthyl	fenyl
111-58	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	trilluormelhyl	2-naftyl
III- 59	MuA.,11	Val	Val	Pro	Pro	II	Íetrahydro-2-furanyl

•«· φ · • · • φ · φ * φ φ φ φ · • ♦ φ · •·· φ♦ φφ ·· φ· «φ

Číslo	Α	B	D	E	F	R5!	R6i
[II- 60	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	tetrahydro-3-furanyl
III- 61	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	2-thienyI
III- 62	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	tctrahvdro-2-furanvl
III- 63	Me2Vaí	Val	Val	Pro	Pro	11	3-thienyl
111-64	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	5-rncthy i imidazol-4yi
III- 65	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	3-indolvl
III- 66	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-thiocnyl
III- 67	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methvl	^-nvrrnlvl - ř .....J ‘
III- 68	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	thiazol-4-yl
III- 69	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	oxazol-4-yl
111-70	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	II	2-fenylthiazol-4-yl
III- 71	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-fenyithiazol-4-yl
111-72	McjVal	Val	Val	Pro	Pro	II	2-fenyloxazol-4-yl
III- 73	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-fenyloxazol-4-yl
III- 74	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	2-pyrrolyl
III- 76	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-pyrrolyI
111- 77	Vlc2Val	Val	Val	Pro	Pro	H	N-methyl-2-pyrrolyl
III- 78	Me.Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	henzo-2-túryl
III- 79	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-thiotcnyl
III- 80	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	metli) 1	3-thiol'eiiy i
III- 81	Mc.Val	Val	Val	Pro	Pro	11	3-ienylisoxazol-5-yl
III- 82	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	11	.3-nicthylisoxazol-5-yl
111- 83	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	II	3-isopropvl-5- isoxazolvl
III- 84	Mc-Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	3-lenyl isoxazol-5-yl
111-85	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	3 -m ethy 1 i sox azo 1 - 5 - v 1
III- 86	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklo- propyl	2-thicnyl
111- 87	M<\ a.	Val	Val	Pro	Pro	metli) 1	imidazol-4-yl
III- 88	Me \ a'	Val	Val	Pro	Pro	II	4-pvridx 1
III- 89	Me A a.	Val	Val	Pro	Pro	11	3-pyri dyl
III- 90	Me Aal	Val	Val	Pro i	Pro	II	2-pyridy1

• · * ·

Číslo	A	B	D	I:	i	R\	R6l
111-91	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	methvl	4-pyridyl
111-92	MenVal	Val	Val	Pro	Pro	methyl	3-pyridyl
lil- 93	Me.Va!	Val	Val	Pro	Pro	methyl	2-pyridyl
lil- 94	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	H	4-cliinolinyl
III- 95	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	methyl	4-chinolinyl
IH- 96	Me?Val	Val	Val	Pro	Pro	II	5-chinolinyl
111-97	Mc2Val	Va!	Val	Pro	Pro	methyl	5-chinoIinyl

♦ ·* *··· •' • 1 · ·«

Číslo	Λ	B	D	E	i-	R5i.a R6,.
III-109	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklopropyl
111- 110	MeA'al	Val	Val	Pro	Pro	cyklobutyl
III- 1 1 1	Mc.Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklopentyl
III- 112	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklohexyl
III- 113	Mc2Va!	Val	Va!	Pro	Pro	cykloheptyl
III- 114	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklookiyl
III- 115	Mc?Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklononvl
III- 116	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	cyklodecyl
IH- 117	McjVal	Val	Val	Pro	Pro	4-pipcridyl
lil· 118	Mc2Val	Val	Val	Pro	Pro	4-pyranyl
III- 119	Me2Val	Val	Val	Pro	Pro	4-thioícnyl
III- 120	Mc-Val	Val	Val	Pro	Pro
lil· 121	Mc2V a 1	Val	Val	Pro	Pro	@3§j
III- 122	Me al	Val	Val	Pro	Pro	II
ili- 122 i 1 i 1	Me- val 1	Val J	V a!	Pře	Pí o	@^2©
III- 122	Mc.Val	Val i	Val	Pro	Pro	LoOoj

D. Biologické hodnoceni

1. Metodologie in vitro

Cytotoxicitu je možno měřit pomocí standardní metodologie pro adherentní buněčné řady, jako je mikrokuilurní tetrazoliová zkouška (MT'ij, Podrobnosti o léto zkoušce byly uveřejněny (Alicy. MG a kol. Výzkum rakoviny (Cancer Rrescarch) 48: 589-601. 1988), Exponenciálně rostoucí kultury nádorových buněk, jako jsou karcinom tlustého střeva I1T-29 nebo nádor plic EX-I, jsou použity pro vytvoření mikrotitrových kultur na miskách. Buňky jsou očkovány v počtu 5 000 - 20 000 buněk na kalíšek v 96-kalíškové misce (v 150 μΙ živné pudy) a rostou přes noc při teplotě 37 °C. K nim jsou přidány reagenční sloučeniny v 10ti násobných zředěních, které kolísají od ΙΟ⁴ M do 10^_lu M. Buňky jsou poté inkubovány na dobu 48 hodin. Aby bylo možno stanovit počet životaschopných buněk v každém kalíšku přidá se barvivo MTT (50 μΙ roztoku 3-(4.5-dimcthylthiazol-2-yl)-2.5difenyItctrazoiiumbromid ve fyziologického roztoku. 3 mg/ml). l ato směs je inkubována při teplotě 37 ' C po dobu 5 hodin a poté je do každého kalisku přidáno 50 μΐ 25 % SDS. pil 2. Po celonočni inkubaci je absorbance každého kalíšku při 550 nm odečtena pomocí čtecího zařízeni El.ISA. Hodnoty pro průměr < - SD údajů ze zopakovaných kalíšku jsou vypočteny pomocí vzorce % T-C' (% životaschopných buněk zreagovaných/kontrolox aných).

OD /.reagovaných hlinek ' x 100 - 1 ιΟΙ) kontrolovaných buněk

Koncentrace reakční sloučeniny, která dává T/(' ve výši 50 % zpomaleni rustu, byla stanovena jako iCsn.

2. Metodologie in vivo

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být dále testován) v rámci nejfu/nčjšich přcdklinických zkoušek kvůli aktivitě in vivo. která indikuje klinické využití. Tyto zkoušky jsou prováděny na holých myších, do kterých byla transplantována (xenoimplantována) nádorová tkáň, nejlépe lidského původů, jak je v tomto oboru dobře známo. Reakční sloučeniny jsou vyhodnoceny z hlediska své prolinádorové účinnosti poté, co jsou sloučeniny podány myši, která nese tento xenoimplantát.

Konkrétně jde o to. že lidské nádory které vyrostly v atymických holých myších jsou transplantovány do nových zvířat za pomoci nádorových fragmentu o velikosti přibližně 50 mg. Den transplantace je označen jako den 0. O šest až deset dní později jsou mvší ošetřeny reakční sloučeninou, která se aplikuje nitiožilní nebo nitropobři.šnicovou injekci, po skupinách 5-10 myší v každé dávce.

Sloučeniny jsou podávány denně po dobu 5 dmi, 10 dnít nebo 15 dmi. při dávkách od 10 do 100 mg/kg tělesné váhy. Dvakrát týdně se měří průměr nádoru a tělesná váha. Objemy nádoru se vypočítají pomocí průměrů měřených prostřednictvím Vernicrova kaliperu a vzorce:

(délka x šířka²)/? - váha tumoru v mg

Průměrné váhy tumoru se vypočítají pro každou léčenou skupinu a hodnoty T/C jsou stanoveny pro každou skupinu ve vztahu k neléčenym kontrolním nádorům.

Nové sloučenin) tohoto vynálezu prokazují dobrou aktivitu in vitro ve \ vše uvedeném systému zkoušek a protinádorovou aktiv úti ve výše uvedeném systému in vivo.

Claims (7)

1. Pcptid, který' má vzorce 1 A-B-D-F-F-L ID

   a jeho soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami, kde Λ. B. 0, F, I·' a I. mají následující význam:

   A:

   ( ΙΙλ) kde

   R.a je xodik. alkyl C_; . ₅. který muže být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl. který nnižc být substituován 1 až 3 atomy fluoru.

   r\ jc alkyl C₍ který muže být substituován I už 3 atomy lluoru. nebo cyklopropyl. který muže být substituován 1 a/ 3 atomy lluoru.

   R² _A jc alkyl C| . který muže být substituován 1 až 3 atomy lluoru. nebo cykloalkyl G. s. který míi/c být substituován I až 3 atom v lluoru. nebo

   B:

   R²e

   R¹b (Hul kde buď

   k |C skli] 11 liti Nil. jc vodík. Rď je alkyl C|.₍,. cykloalkyl (\ . _f,. methoxymelhyl. • l-metlioxycthyl nebo methy l vinyl. nebo R'aa R 6 dohromady představuji isopropvlidenovou skupinu. nebo Ί jc atom kyslíku. ΓΙ ¹ H jc vodík a Rď jc alkyl C|

   • * • 4 4 4 ·· 4 * * • 4 » •4 4 4 • 4 • · 9 9· •4 ·♦·Μ

   D;

   (Udí kde

   Ri> je vodík, alkyl C| . který muže být substituován 1 až 3 atomy fluoru, nebo cyk I opropv!. který múze být substituován I až 3 atomy fluoru,

   R'd je vodík a

   Ri) .je alkyl f|-5- cyklopropyl, methoxymethyl, l-methoxyclhyl nebo 1 -methylvinyl, nebo kde (lli ).

   je alkyl (j . který muže být substituován I až 3 atomy fluoru nebo cyklopropyl. který' může být substituován í až 3 atomy íluoru,

   R j a R j. jsou nezávisle na sobě vodík nebo methylová skupina,

   1<⁴[ je vodík, skupina hydroxy, methoxy nebo ethoxy nebo atom fluoru, a

   R\ je vodík nebo atom Íluoru nebo, pokud m je 1,

   R’i a R^li dohromady tvoří vazbu, nebo k V a l<\ představují kyslíkový radikál s dvojitou \azbou.

   nebo, pokud ty. je 2,

   R'[ a R j dohromady tvoří vazbu;

   (lili).

   kde až 3 být

   1 může je vodík nebo methylová nebo ethylová skupina, a je vodík, alkyl C| . který může být substituován atomy fluoru, nebo cyklopropyl, který·' substituován 1 až .3 atomy fluoru, nebo Iv zbytek v/.orce nebo

   O kde X|. je atom kyslíku nebo síry.

   O je 0, 1 nebo 2.

   je alkyl Cj . který muže byt substituován 1 a/ 3 atomy fluoru, nebo cyklopropyl. kléry muže byt substituován I až 3 atomy fluoru.

   R j jsou nezávisle na sobě vodík nebo methylová skupina, je vodík, skupina hydroxy. methoxy nebo ethoxy nebo atom fluoru, a je vodík nebo atom fluoru nebo, pokud ιη je 1,

   R j a R’í dohromady tvoří vaz kde

   R'i

   R^?r

   IČr je alkyl C, . ·,. který muže byt substituován I až a!<iiuy fluoru nebo cyklopropyl. který muže být substituován 1 až 3 atomy fluoru.

   Rý jsou nezávisle na sobě vodík nebo methylová skupina.

   je vodík, skupina hydroxy. methoxv nebo ethoxy nebo atom fluoru, a je vodík nebo atom fluoru ob

   • · ♦ ·♦· a · « · *·♦ ♦ · « • · » · • · • · • · • • • · · · * • · • · « · • · • • · • · • ·

   nebo, pokud n; je 1.

   [<\ a R’^l| dohromady tvoří vazbu, nebo kde X|. |e kyslík nebo síra

   I·’· \'-meihvlolyc\ I. N-ethvIrlveyl nebo -alanvlovv radikál. substituovaný nebo nesubstituovaný alkylovy, hydroxylaminový nebo oximový zbytek.
2. 2. 1’cptid vzorce i podle patentového nároku 1, kde

   I. je radikál, který má vzorec f ¹¹ l·'. ([|) kde

   Rj je (’μο - cvkloaikvl. (\iχ-nictliylalkcnyl nebo (’--,.|_t)-alk\ 1 nebo (.'j.s-alk)lkarboxy-C;.|_(!-alkyl, který muže byt substituován I až 5 atomv halogenu, nebo

   Ri je radikál (Cl I-1, - R|kde a, je 1. 2 nebo 3, a

   Ri¹ je nasycený nebo částečně nenasycený Gm karbocyklus. nebo nasycený nebo částečně nenasycený cyklický radikál, který kromě atomu uhlíku obsahuje jako členy řetězce heteroatomy ze skupiny obsahující kyslík, síru nebo dusík, a v nasvccnvch systémech je možné, abv byl dusík doJa*Cvne ρ: iροjen na alkyl (. t .|. ac\ I í. ; . aIk<>\\asy Io\ ou skupinu (’i i nebo ben/xlovou nebo benzovlovou skupinu, nebo

   R, je radikal -1( Ih-CII < (< H J < Η -II. kde b| je 1.2. i nebii -I. nebo

   Ri |c -(( ![’-( H i-()),|[-( II;. kde d[ je 1,2.3,4 nebo 5. nebo

   Ri je - ((Ί ko siiyl nebo - (í'IRO-hetaryl (s tím omezením, že R[ není benzd). je možné, aby arylový nebo heiarylový radikál byl substituovaný nebo nesubstituovaný, a

   Č7 « ·

   Ci. je O, 1.2 nebo 3, nebo

   Ri jc radikál, který má vzorec (í 1 l?)ii ' - R|' (lil.) kde li je 2, 3 nebo 4.

   W| je můstek vytvořený z. kyslíku, siry nebo skupina

   -N-Ri ^; kde

   R[^? je vodík, alkyl C i_.i nebo cykloaikyl (A.? nebo substituovaný nebo nesubslituovaný aryl nebo mclhylarvl,

   Ri ' je vodík, alkyl (.'|..|, cykloaikyl (A ?. alkanovl (3.^, henzoyl. karbonylo\y-(‘|.4-alkvl. karhonvlo.xvbenzv I nebo substituovaný nebo nesubstituovaný ani nebo methylatyl. nebo

   Ri je radikál, klen má vzorec

   -<CH.>111. ;

   kde qi je 2, 3 nebo 4 a

   Z| je formyl, aminokarbonyl nebo lodrazinokarbonyl nebo acyklický nebo cyklicky acetalový nebo thioacetalový radikál, nebo

   Ri je radikál, klen iníi vzorce

   O

   ---(CH₂)g_L--- kde t|i má výše uvcdein wznam. a

   R⁴ má význam gl\kolosych zbylkii \zorce <) <:< ir t 11 < >>., i ii.. kde lil je číslo od 40 do 90.

   a jeho soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami.

   i • · ·
3. 3. Peptid vzorce I podle patentového nároku I. kde L je (Vr.) kde je vodík, alkyl C|._x. který muže byt substituovaný až 6 atomy halogenu, nejlépe fluoru, nebo cykloalkyl (\.|_(] nebo (' i _.i-alkyl-(.';.|,,-c\ kloalkyl. substituovaný nebo nesubstituovaný aryl nebo hetaryl nebo alkylaryl Cm. které mohou být substituované 1 až 5 atomy halogenu, a |c úlky! ( , g kíciv múze být sub^íiUiovyiný n/ 6 íitomy halogenu, nejlépe fluoru, nebo cykloalkyl C.oju nebo ίμalkyl-Ci.io -cykloalkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl nebo hetaryl nebo alkylaryl Cm, které mohou být substituované I až 5 atomy halogenu, a nebo tvoří 5ti, 6ti. 7mi členné heterocyklické jádro, a jeho soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami.
4. 4. Peptid vzorce 1 podle patentového nároku 1. kde

   I. je o.ximový zbytek vzorce Vl|

   R⁵

   L kde

   Ri' a Rý' mají oba výše uvedeny význam, nebo

   R⁶

   L

   L spolu Ivon > a/ 7mi členný cyklické svslém. který muže projit aromatickou kondenzací, a jeho soli > fyziologicky tolerovanými kx sel i námi.
5. 5. farmaceutická směs obsahující farmaceuticky přijatelný nosič a léčebně účinné množství sloučeniny podle patentového nároku
6. 6. Způsob léčby nádoru u savců, který' zahrnuje podávání takového množství sloučeniny, která zpomaluje růst nádoru podle patentového nároku 1. savci, který má tento nádor.
7. 7. Způsob přípravy sloučeniny vzorce 1 podle patentového nároku 1. který je charakteristický tím. že tyto sloučeniny jsou připravovány v souladu se známými metodami peptidové chemie.