CN1679914A

CN1679914A - 还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物

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Publication number: CN1679914A
Application number: CN 200510006054
Authority: CN
Inventors: 杨喜鸿
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2005-01-09
Filing date: 2005-01-09
Publication date: 2005-10-12

Abstract

还原型谷胱甘肽或其钠盐和依布硒啉的组合药物，其中还原型谷胱甘肽或其钠盐与依布硒啉的质量配比范围为1∶0.001～20，优选1∶0.01～3，更优选1∶0.05～1。本发明组合药物的组合方式包括两种组合方式：一是将还原型谷胱甘肽和依布硒啉制成复方制剂，二是将还原型谷胱甘肽和依布硒啉分别制成单独的制剂并且将两种单独的制剂包装在同一个药盒中。该组合药物能够有效提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH－Px)的活性，克服了由于使用还原型谷胱甘肽而导致的与硒有关的酶代谢失衡，有利于维持体内硒酶代谢的正常，也有利于提高还原型谷胱甘肽的药效。

Description

还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物

技术领域本发明属于医药技术领域，涉及还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物。

背景技术还原型谷胱甘肽(GSH)是人类细胞质中自然合成的一种肽，化学名称为：N-(N-L-γ-谷氨酰-L-半胱氨酰)甘氨酸，其化学结构式如下

由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成，分子结构中含有巯基(-SH)，广泛分布于机体各器官内，为维持细胞生物功能有重要作用，还原型谷胱甘肽具较强的抗氧化、抗自由基、抑制脂质过氧化反应等作用，临床上主要用于肝脏疾病、眼部疾病、肾损伤、放化疗保护、糖尿病、机体中毒和老年病等方面的治疗应用。在临床使用中，还有还原型谷胱甘肽的钠盐-----还原型谷胱甘肽钠，还原型谷胱甘肽钠具有与还原型谷胱甘肽一样的药理作用。

还原型谷胱甘肽在机体内发挥其药用功效在很大程度上依赖于谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)，GSH-Px能催化还原型谷胱甘肽(GSH)变成氧化型谷胱甘肽(GSSG)，同时使有毒的过氧化物还原和分解为无毒物质，达到保护细胞膜和机体的作用。

依布硒啉(ebselen)的化学名称为2-苯基-1，2-苯并异硒唑-3(2H)-酮，其化学结构式如下

依布硒啉是一种人工合成的低毒性含硒有机化合物，具有谷胱甘肽过氧化物酶样活性，是谷胱甘肽过氧化物酶的最佳模拟物，能清除机体内过多的过氧化物，阻断产生自由基的链式反应，避免自由基参与脂质过氧化反应而造成的损害，维持机体的正常生理功能。依布硒啉有多种药理作用，对机体自由基引起的组织损害均有显著的保护和拮抗作用，现代病理学研究表明，自由基是造成机体组织损伤的重要根源，尤其是机体发生某些疾病时产生大量的自由基以攻击核酸、蛋白质、酶等生物大分子、生物膜及其它亚细胞结构，从而破坏细胞和组织，造成组织损伤。

发明内容本发明人通过实验研究发现，在长时间使用还原型谷胱甘肽药物后，动物体内的硒元素含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性会明显下降，而硒元素是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性中心，且动物体内不能自主合成硒元素，只能依靠外源性补充，因此硒元素含量的下降势必会使得体内与硒有关的酶代谢失去平衡；而且，还原型谷胱甘肽在机体内发挥其药用功效在很大程度上依赖于谷胱甘肽过氧化酶，签于此，在用还原型谷胱甘肽治疗疾病的同时，提高谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的活性，对于发挥还原型谷胱甘肽的治疗作用有着重要的促进作用，有利于提高还原型谷胱甘肽(GSH)的药效和与硒有关的酶代谢平衡。

本发明的目的是提供一种还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物。

还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物，还原型谷胱甘肽与依布硒啉的质量配比范围为1∶0.001～20，即每1毫克的还原型谷胱甘肽与0.001～20毫克的依布硒啉配比组合。

还原型谷胱甘肽与依布硒啉组合药物的协同作用，可在一定的质量配比范围内观察到，例如1∶0.01～3，优选1∶0.05～1。方便起见，可将每一种化合物分别以其单独使用时表现出的最佳疗效的剂量组合使用。

还原型谷胱甘肽与依布硒啉的质量配比范围，优选1∶0.01～3。

还原型谷胱甘肽与依布硒啉的质量配比范围，更优选1∶0.05～1。

必须理解，本发明组合药物包括两种组合方式：

一是将还原型谷胱甘肽和依布硒啉制成复方制剂，使用相应的药用辅料和制备工艺可制成不同的复方药物剂型，如注射用还原型谷胱甘肽依布硒啉冻干粉针剂、复方还原型谷胱甘肽依布硒啉注射液、复方还原型谷胱甘肽依布硒啉胶囊等；

二是将还原型谷胱甘肽和依布硒啉分别制成单独的制剂，在使用时，患者可以先后依次用药，也可以将分开的还原型谷胱甘肽的制剂和依布硒啉的制剂混合后同时用药，以最终达到使用本发明所述的组合药物的目的。必须的，为了方便患者用药，应当将两种单独的制剂包装在同一个药盒中。

此外，还原型谷胱甘肽和依布硒啉是单独制剂时，两者的药物剂型可以相同，也可以是不同的，如还原型谷胱甘肽粉针剂与依布硒啉注射液组合用药物，还原型谷胱甘肽注射液与依布硒啉注射液组合用药物，还原型谷胱甘肽注射液与依布硒啉粉针剂组合用药物，还原型谷胱甘肽粉针剂与依布硒啉片组合用药物，还原型谷胱甘肽肠溶片与依布硒啉胃溶片组合用药物，等等。

本发明还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物，可以是药剂学上可以接受的任何药物剂型，例如粉针剂、水针剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、舌下含服片剂、滴眼液、滴鼻液以及口服的速释或缓释或控释等剂型。

虽然本发明组合药物的活性组份可以作为未加工的化学品给药，但事实上，签于药品在生产和使用上的必要性，本发明所述的组合用药物还可以包含药剂学上可以接受的药用辅料，使用相应的、不同的药用辅料和制备工艺，可以将本发明组合药物制成不同的药物剂型。本领域内的技术人员可以理解到的是，这些药用辅料是为了便于生产加工成各种剂型、确保药物的安全、有效与稳定等因素，以及根据不同的药物剂型和药物的自身的理化性质来选用的，如赋形剂可选用甘露醇、山梨醇、乳糖、氨基酸、水、聚乙二醇，等等；PH值调节剂可选用盐酸、枸橼酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钾(钠)，等等；抗氧剂可选用亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、维生素C，等等；增溶剂可选用吐温-80、硬脂酸聚烃氧酯、羟丙基-β环状糊精、二甲亚砜，等等；金属络合剂选用乙二胺四乙酸及其盐等。药用辅料的选择使用是本发明领域内的技术人员熟知和显而易见的。

特别的，还原型谷胱甘肽钠具有与还原型谷胱甘肽一样的药理作用，因此，本发明还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物，其中还原型谷胱甘肽还可以用还原型谷胱甘肽的钠盐-----还原型谷胱甘肽钠来代替。

将还原型谷胱甘肽和依布硒啉组合用药，能够有效提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性，克服了由于使用还原型谷胱甘肽而导致的与硒有关的酶代谢失衡，有利于维持体内硒酶代谢的正常，也有利于提高还原型谷胱甘肽的药效。

进一步的，以动物实验来验证本发明组合药物的疗效优势。

实验一.给大鼠长时间注射还原型谷胱甘肽，测定其体内血液中硒的含量和GSH-Px酶的活性。

实验方法：(1)实验动物及分组：SD大鼠32只，体重220～250g，将大鼠随机分为四组，每组8只，分为对照组、还原型谷胱甘肽组、依布硒啉组、还原型谷胱甘肽+依布硒啉组。

(2)药物施用方案：从大鼠腹腔注射相应药物，对照组：给予动物注射生理盐水；还原型谷胱甘肽组：给予动物注射300mg/kg体重的还原型谷胱甘肽；依布硒啉组：给予动物注射30mg/kg体重的依布硒啉；还原型谷胱甘肽+依布硒啉组：给予动物注射300mg/kg体重的还原型谷胱甘肽和30mg/kg体重的依布硒啉；

(3)按以上药物施用方案每天注射一次，连续注射，于注射后第1天、第2天、第5天、第10天、第15天，从股静脉抽取其血液，测定其血硒含量和胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。

硒含量测定方法：用荧光分光光度法；GSH-Px活性测定方法：用分光光度计法直接测定。

(4)数据统计与分析：实验数据均以均数加减标准差( x±s)表示，以SPSS10.0软件包处理，得出结果如下表：

表一：SD大鼠血硒含量测定(μg/ml)

项目/内容

1天

5天

10天

15天

对照组	0.2898±0.087	0.2909±0.031	0.2914±0.065	0.2905±0.038
对照组	0.2898±0.087	0.2909±0.031	0.2914±0.065	0.2905±0.038	还原型谷胱甘肽组	0.2808±0.052	0.2591±0.044	0.2065±0.038	0.2007±0.062
依布硒啉组	0.8664±0.039	0.8912±0.043	0.8952±0.027	0.8938±0.071	还原型谷胱甘肽组	0.2808±0.052	0.2591±0.044	0.2065±0.038	0.2007±0.062
依布硒啉组	0.8664±0.039	0.8912±0.043	0.8952±0.027	0.8938±0.071	还原型谷胱甘肽+依布硒啉组	0.6258±0.041	0.6249±0.033	0.6308±0.039	0.6292±0.058

表二：SD大鼠血液GSH-Px酶的活力单位数测定(u/mg蛋白)

项目/内容	1天	5天	10天	15天
项目/内容	1天	5天	10天	15天	对照组	45.77±4.16	46.62±3.70	46.05±5.18	45.82±4.22
还原型谷胱甘肽组	45.02±3.27	44.23±2.81	35.15±3.80	35.10±3.55	对照组	45.77±4.16	46.62±3.70	46.05±5.18	45.82±4.22
还原型谷胱甘肽组	45.02±3.27	44.23±2.81	35.15±3.80	35.10±3.55	依布硒啉组	78.47±4.71	86.26±3.29	88.71±4.22	88.55±4.03
还原型谷胱甘肽+依布硒啉组	58.01±4.42	63.25±3.75	64.65±3.92	64.98±4.26	依布硒啉组	78.47±4.71	86.26±3.29	88.71±4.22	88.55±4.03

由表一数据可看出，给予大鼠还原型谷胱甘肽后，由于其代谢GSH要消硒元素，大鼠血硒含量随使用时间而减少，至第10天时，与对照组相比已有显著统计学意义(p＜0.01)；给予大鼠还原型谷胱甘肽+依布硒啉后，可使其血硒含量保持在相对稳定的水平，且血硒含量与对照组和还原型谷胱甘肽组相比均有显著差异(p＜0.01)。

由表二数据可看出，给予大鼠还原型谷胱甘肽后，大鼠血液GSH-Px酶的活力随使用时间而减弱，而给予大鼠还原型谷胱甘肽+依布硒啉后，可使其血液GSH-Px酶的活力保持相对稳定，且与对照组相比有显著差异(p＜0.01)。

实验二.采用四氯化碳(CCl₄)中毒性大鼠肝损害模型，观察给予还原型谷胱甘肽+依布硒啉后对于大鼠肝损害的保护作用。

实验方法：(1)实验动物及分组：SD大鼠30只，体重220～250g，将大鼠随机分为五组，每组6只，分为空白组、染毒对照组、还原型谷胱甘肽组、依布硒啉组、还原型谷胱甘肽+依布硒啉组；

(2).大鼠肝损害模型：除空白组外，其余各组动物按2.0ml/kg体重的CCl₄进行灌胃染毒；

(3)药物施用方案：从大鼠腹腔注射相应药物，空白组：不染毒，仅给予动物注射生理盐水；染毒对照组：仅CCl₄进行灌胃染毒；还原型谷胱甘肽组：CCl₄进行灌胃染毒后给予动物注射300mg/kg体重的还原型谷胱甘肽；依布硒啉组：CCl₄进行灌胃染毒后给予动物注射30mg/kg体重的依布硒啉；还原型谷胱甘肽+依布硒啉组：CCl₄进行灌胃染毒后给予动物注射300mg/kg体重的还原型谷胱甘肽和30mg/kg体重的依布硒啉；

(4)动物染毒后即给予各组动物施以相应的药物，连续至第四天时断头处死，分别取肝脏和血清，测定其肝脏匀浆和血清脂质过氧化物LPO的含量；

LPO测定方法：硫代巴比妥酸测定；

(5)数据统计与分析：实验数据均以均数加减标准差( x±s)表示，以SPSS10.0软件包处理，得出结果如下表：

表三：大鼠肝脏匀浆和血清中LPO含量

组别	肝脏匀浆(μmol/g)	血清(μmol/L)
组别	肝脏匀浆(μmol/g)	血清(μmol/L)	空白组	0.17±0.06	5.55±1.30
染毒对照组	0.57±0.07	9.23±1.21	空白组	0.17±0.06	5.55±1.30
染毒对照组	0.57±0.07	9.23±1.21	还原型谷胱甘肽组	0.31±0.04	6.61±1.43
依布硒啉组	0.35±0.06	6.46±1.33	还原型谷胱甘肽组	0.31±0.04	6.61±1.43
依布硒啉组	0.35±0.06	6.46±1.33	还原型谷胱甘肽+依布硒啉组	0.18±0.04	4.92±1.41

由表三数据可看出，四氯化碳中毒大鼠的肝脏和血清中的LPO含量比空白组显著增多，提示机体有脂质过氧化损害；注射GSH和依布硒啉均可拮抗脂质过氧化损害；注射还原型谷胱甘肽+依布硒啉对损害亦有拮抗作用，且优于单独注射GSH和依布硒啉，相对于还原型谷胱甘肽组和依布硒啉组，具有良好的统计学意义(p＜0.05)，显示出比单独注射GSH和依布硒啉都好的疗效。

具体实施方式以下面的几个实施例，进一步通过其制备过程来说明本发明还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物，但并不表示实施例对本发明的限制。

实施例1.注射用还原型谷胱甘肽依布硒啉冻干粉针剂

处方：还原型谷胱甘肽 300g

依布硒啉 30g

甘露醇 100g

亚硫酸氢钠 2.5g

吐温-80 适量

PH值调节剂适量

注射用水 1800ml

取以上处方量的依布硒啉与吐温-80混合后用适量注射用水溶解，再加入处方量的还原型谷胱甘肽、甘露醇和亚硫酸氢钠，充分溶解后用pH值调节剂调节pH＝5～6.5，再加入针用活性炭保温脱色，滤除针用活性炭后，精滤，检测含量合格后，将滤液分装入1000支西林瓶中，按冻干粉针剂制备工艺进行冷冻干燥，即可制备成1000瓶注射用的冻干粉复方针剂，每瓶药中含药物活性成份330mg，具中还原型谷胱甘肽300mg和依布硒啉30mg。还原型谷胱甘肽和依布硒啉的质量配比为1∶0.1。

实施例2.注射用还原型谷胱甘肽钠依布硒啉冻干粉针剂

将实施例1中的还原型谷胱甘肽用还原型谷胱甘肽钠代替，即可制得注射用还原型谷胱甘肽钠依布硒啉冻干粉针剂。

实施例3.还原型谷胱甘肽冻干粉针和依布硒啉注射液的组合用药物

类似的，将还原型谷胱甘肽制成每支西林瓶含300mg还原型谷胱甘肽的冻干粉针，将依布硒啉制成每支安瓿瓶含20mg/2ml依布硒啉的注射液，贴标签后，将该冻干粉针与注射液包装在同一个包装盒中，即得还原型谷胱甘肽冻干粉针和依布硒啉注射液的组合用药物，每盒组合用药物中含药物活性成份320mg，其中还原型谷胱甘肽300mg，依布硒啉20mg，两者的质量配比为1∶0.0667。使用时可以用依布硒啉注射液将还原型谷胱甘肽冻干粉针溶解后成为混合溶液一起使用，也可以用适量注射用水将还原型谷胱甘肽冻干粉针溶解后与依布硒啉注射液混合使用，或先后依次使用。

实施例4.还原型谷胱甘肽冻干粉针和依布硒啉冻干粉针的组合用药物

类似的，将还原型谷胱甘肽制成每支西林瓶含600mg还原型谷胱甘肽的冻干粉针，将依布硒啉制成每支西林瓶含依布硒啉40mg的冻干粉针，贴标签后，将该还原型谷胱甘肽的冻干粉针与依布硒啉冻干粉针包装在同一个包装盒中，即还原型谷胱甘肽冻干粉针和依布硒啉冻干粉针的组合用药物，还原型谷胱甘肽与依布硒啉质量配比为1∶0.0667。使用时用适量注射用水将将两种冻干粉针溶解后混合使用，或先后依次使用。

实施例5.复方还原型谷胱甘肽依布硒啉片

处方：还原型谷胱甘肽 300g

依布硒啉 30g

羧甲基纤维素 35g

淀粉 15g

微晶纤维素 40g

硬脂酸镁 2g

将上述物料粉末除硬脂酸镁外充分混匀，用无水乙醇润湿后，湿法制粒，烘干整粒后加入硬脂酸镁，混匀，压制成1000片，即得复方还原型谷胱甘肽依布硒啉片，每片含还原型谷胱甘肽300mg，依布硒啉30mg，还原型谷胱甘肽与依布硒啉质量配比为1∶0.1。

实施例6.复方还原型谷胱甘肽依布硒啉肠溶片

将实施例5所制备的片剂用包肠溶衣溶液包裹，即得复方还原型谷胱甘肽依布硒啉肠溶片。其中，包肠溶衣溶液可选用如下处方的包衣溶液：邻苯二甲酸醋酸纤维素10g，十八醇4.0g，苯二甲酸二乙酯1.0ml，异丙醇40ml，丙酮45ml。

实施例7.还原型谷胱甘肽依布硒啉滴眼液

处方：还原型谷胱甘肽 10g

依布硒啉 1g

羟丙基β-环糊精 14g

磷酸氢钠盐缓冲溶液适量

氯化钠适量

注射用水加至500ml

将14g羟丙基β-环糊精作为助溶剂溶解于470ml注射用水中后加入1g依布硒啉充分搅拌使依布硒啉溶解，再加入10g还原型谷胱甘肽溶解后用磷酸氢钠盐缓冲溶液调节pH至6.0～6.5，而后加入适量氯化钠调节成等渗溶液后加注射用水加至500ml，搅匀，精滤后无菌分装成5ml/瓶，即得每瓶滴眼液含还原型谷胱甘肽100mg，依布硒啉10mg，还原型谷胱甘肽与依布硒啉质量配比为1∶0.1。

Claims

1.还原型谷胱甘肽和依布硒啉的组合药物。

2.根据权利要求1所述的组合药物，其特征在于还原型谷胱甘肽与依布硒啉的质量配比范围为1∶0.001～20。

3.根据权利要求1所述的组合药物，其特征在于还原型谷胱甘肽与依布硒啉的质量配比范围为1∶0.01～3，优选1∶0.05～1。

4.根据权利要求1至3中任何一项所述，其特征在于将还原型谷胱甘肽和依布硒啉制成复方制剂。

5.根据权利要求1至3中任何一项所述，其特征在于将还原型谷胱甘肽和依布硒啉分别制成单独的制剂，并且将两种单独的制剂包装在同一个药盒中。

6.根据权利要求1至5中任何一项所述，其特征在于药物的剂型是药剂学上可以接受的任何药物剂型。

7.根据权利要求6所述，其特征在于组合药物可以包含药用辅料。

8.根据权利要求1至7中任何一项所述，其特征在于还原型谷胱甘肽可以用还原型谷胱甘肽钠来代替。