[go: up one dir, main page]

CN1561222A - 基质金属蛋白酶抑制剂 - Google Patents

基质金属蛋白酶抑制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN1561222A
CN1561222A CNA028190319A CN02819031A CN1561222A CN 1561222 A CN1561222 A CN 1561222A CN A028190319 A CNA028190319 A CN A028190319A CN 02819031 A CN02819031 A CN 02819031A CN 1561222 A CN1561222 A CN 1561222A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ganoderma
extract
lucidum
mmp
hot water
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA028190319A
Other languages
English (en)
Other versions
CN100518747C (zh
Inventor
服部幸治
水谷宏
大隅和寿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nonogawa Shoji Ltd
Original Assignee
Nonogawa Shoji Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nonogawa Shoji Ltd filed Critical Nonogawa Shoji Ltd
Publication of CN1561222A publication Critical patent/CN1561222A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100518747C publication Critical patent/CN100518747C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
    • A61K36/074—Ganoderma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
    • A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Immunology (AREA)

Abstract

一种含有万年菇溶剂提取物的基质金属蛋白酶(MMP)亢进性疾病的预防改善剂。本发明的万年菇溶剂提取物具有抑制MMP的作用，有利于癌的转移、溃疡的形成、风湿性关节炎、骨质疏松症、牙周炎及皮肤老化等因MMP的亢进而引起的各种疾病的预防和抑制及症状的改善等。

Description

基质金属蛋白酶抑制剂
技术领域
本发明涉及基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂，进一步说，本发明涉及可在癌的转移、溃疡的形成、风湿性关节炎、骨质疏松症、牙周炎及皮肤老化等因MMP的亢进而引起的各种疾病的预防、抑制以及症状的改善等方面产生一定效果、同时具有高安全性的MMP抑制剂。
背景技术
癌症几乎是所有先进国家的主要死亡原因之一，在日本，约有三成人是死于癌症的。近年来，随着外科疗法、放射性疗法的发展，几乎可除去癌症的原发病灶，但是，因为癌具有转移性，所以死亡率还是很高，并且在现阶段还很难治疗多发性转移的癌。因此，还应该在以往的治疗原发病灶方法的基础上制定抑制癌转移的方法来作为治疗癌症的主要目标之一。在这种情况下，癌转移机制在分子级别上已逐渐清楚，并且最近作为一种转移过程的细胞外基质的分解系统已引起人们的关注。
所谓癌的转移是指：从原发部位脱离的癌细胞随着血液的流动散布到全身各处，并在其他器官上存活，进而在该组织内重新开始繁殖的过程。一般来说，因为肿瘤组织都是由致密的细胞外基质所包围，所以，癌细胞若要从原发部位移动，则需要进行细胞外基质的酶分解。细胞外基质由胶原、弹性蛋白、粘连蛋白、层粘连蛋白、蛋白多糖等多种大分子构成，而与这些细胞外基质的分解有关的主要酶群则是MMP。根据如下文献1所记载，在癌组织中血管形成时或者癌转移时，MMP的表达量上升，并引起酶的活化。因此，可知降低这些酶的表达量或者抑制其活性，可以抑制癌细胞的浸润性，从而可抑制转移。
文献1为“肿瘤浸润及基质金属蛋白酶合成的类维生素A介导抑制”(Schoenermark M P等，“Annals New York Academy of Sciences”Vol.878，第466-486页，1999年)。
在癌细胞向大分子群的浸润过程中，尤其以胶原的分解作为重要步骤。例如，当癌细胞要侵入到血管内或向血管外脱离时，需要分解血管基底膜中所存在的IV型胶原。如下述文献2中所公开，Liotta等人认为癌细胞分泌的IV型胶原分解酶的作用是决定癌转移能力的重要因素。属于MMP的明胶酶是由纤维母细胞、内皮细胞、癌细胞等产生的酶，能够分解IV型胶原、明胶、弹性蛋白等基质。因此，例如对明胶酶有抑制作用的物质具有抑制癌组织中的血管化和癌细胞的转移的效果，所以可用于癌疾病的预防及治疗。
文献2为“转移可能性与基底膜胶原酶分解的关系”(Liotta LA等，“Nature”，Vol.284，第67-68页，1980年)。
下述文献3中公开了MMP不仅对癌症疾病，也对溃疡的形成、风湿性关节炎、骨质疏松症、牙周炎等各种疾病中的细胞外基质的分解起很重要的作用。而且，在皮肤中，因紫外线等外部刺激而被激活的MMP将分解出维持皮肤结构的重要成分。因此，最近MMP作为通过紫外线激活的老化加速因子而受人们的关注。
文献3为“作为组织破坏性蛋白水解酶的基质金属蛋白酶”(中田光俊、冈田保典，“呼吸”，Vol.18，No.4，第365-371页，1999年)。
由于MMP的抑制剂有利于因MMP的亢进而引起的上述疾病的治疗及改善，因此正在各方面进行积极的筛选。关于这种抑制剂，在下述文献中有所记载：
日本专利特开平9-40552号公报；
日本专利特开平11-147833号公报；
日本专利特开2000-226311号公报。
发明内容
这里，本发明的目的是获得一种MMP抑制剂，所述MMP抑制剂对于高转移性恶性肿瘤细胞株产生的MMP具有抑制其活性的作用，并可预防及改善癌转移等因MMP的亢进而引起的疾病。
本发明的发明人将安全性高的植物提取物作为原料进行了MMP抑制活性的筛选。其结果发现了万年菇的溶剂提取物具有优异的MMP抑制效果，并且在使用实验性肺转移模型的动物实验中，也具有很高的癌转移抑制效果，从而完成了本发明。即，可通过其特征为以万年菇的溶剂提取物为其有效成分的MMP抑制剂来实现上述目的中的至少一种。
此外，本发明也适用于特征为含有万年菇溶剂提取物的、并以MMP亢进性疾病的预防、抑制或者病症的改善等为目的的医药品、准医药品、化妆品或者食品等。
发明的最佳实施方式
下面，详细说明本发明的具体实施方式。本发明所使用的万年菇是用于中草药“灵芝”中的担子菌，属于灵芝菌科(Ganodermataceae)、灵芝属(Ganoderma)，包括灵芝(赤芝)、黑灵芝(黑芝)、紫芝等。根据文献“Acta Microbiologica Sinica，19(3)，265-279，1979”，其可被分为灵芝(赤芝，学名：Ganoderma lucidum)、黑灵芝(学名：Ganoderma atrum)、紫芝(学名：Ganoderma sinense)，但并不仅限于此。用于本发明的万年菇可以使用在中国和日本市场中广泛流通的万年菇。此外，在万年菇中，优选灵芝(赤芝)和黑灵芝，首选黑灵芝。
关于提取溶剂，例如可以列举：水、低级单羟基醇(甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇等)、液态多羟基醇(1，3-丁二醇、丙二醇、丙三醇等)、酮类(丙酮、丁酮等)、乙腈、酯类(醋酸乙酯、醋酸丁酯等)、烃类(己烷、庚烷、液体石蜡等)、醚类(乙醚、四氢呋喃、丙基醚等)。比较好的是水、上述低级醇类及酮类等极性溶剂。也可以将上述溶剂中的一种或者两种混合使用。此外，当用于内服时，应从中选择适合内服的溶剂。
万年菇的溶剂提取物的混合量并没有特别的限制，在MMP亢进性疾病的预防改善医药品、准医药品、化妆品或者食品的总量中，干燥物占0.0005～10.0wt％，优选是0.005～5.0wt％。当小于0.0005wt％时，本发明难以充分发挥出效果，而即使混合10.0wt％以上，也很难看出效果有所增强，而且不经济。
万年菇的溶剂提取物可以直接使用所提取的溶液，也可以根据需要进行浓缩、稀释、过滤等处理及利用活性碳等进行除色、除味处理后使用。而且，也可以对提取的溶液进行浓缩干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等处理后，作为干燥物来使用。
本发明的MMP抑制剂可以用在以预防、抑制MMP亢进性疾病或者改善其症状为目的的医药品、准医药品、化妆品或者食物中，可以直接使用上述提取物，也可以在不影响提取物效果的范围内，混合添加通常的医药品、准医药品、化妆品、食品中所使用的成分，如定型剂、稳定剂、保存剂、结合剂、破坏剂、碳氢化合物、脂肪酸、醇、酯、表面活性剂、金属皂、pH调节剂、防腐剂、香料、保湿剂、粉剂、紫外线吸收剂、增稠剂、色素、抗氧剂、漂白剂、螯合剂、油脂、蜡等成分。
作为本发明的剂型，例如，可以使用：粉剂、丸剂、片剂(锭剂)、注射剂、栓剂、乳剂、硬胶囊剂、颗粒剂、液剂(包括酊剂、流动提取剂、醇剂、悬浊剂及柠檬水剂等)、化妆水、乳膏剂、乳液、凝胶剂、气雾剂、面膜、净化剂、洗浴剂、粉底、痱子粉、口红、软膏、湿敷剂、膏剂、膏药、香精、片状食物、饮料等。
下面列举了用于对本发明进行详细说明的实施例，但本发明并不只局限于此。实施例中所示的混合量的“份”表示的是按重量计的份。
制造例一  黑灵芝的热水提取物
向20g黑灵芝的干燥物中添加400ml的纯净水，在95～100℃下连续萃取两个小时后，进行过滤，然后，浓缩其滤液，冷冻干燥，得到黑灵芝的热水提取物1.4g。
制造例二  黑灵芝的50％乙醇提取物
向100g黑灵芝的干燥物中添加900ml的50％乙醇，在常温下连续萃取七天后，进行过滤，然后，浓缩其滤液并干燥，得到黑灵芝的50％乙醇提取物1.9g。
制造例三  黑灵芝的乙醇提取物
向100g黑灵芝的干燥物中添加900ml的乙醇，在常温下连续萃取七天后，进行过滤，然后，浓缩其滤液并干燥，得到黑灵芝的乙醇提取物1.5g。
制造例四  灵芝(赤芝)的热水提取物
向20g灵芝(赤芝)的干燥物中添加400ml的纯净水，在95～100℃下连续萃取两个小时后，进行过滤，然后，浓缩其滤液，冷冻干燥，得到灵芝(赤芝)的热水提取物2.0g。
制造例五  灵芝(赤芝)的50％乙醇提取物
向100g灵芝(赤芝)的干燥物中添加900ml的50％乙醇，在常温下连续萃取七天后，进行过滤，然后，浓缩其滤液并干燥，得到灵芝(赤芝)的50％乙醇提取物3.1g。
制造例六  黑灵芝的乙醇提取物
向100g灵芝(赤芝)的干燥物中添加900ml的乙醇，在常温下连续萃取七天后，进行过滤，然后，浓缩其滤液并干燥，得到灵芝(赤芝)的乙醇提取物2.5g。
实施例一  粉剂1
配方                                                混合量
1.黑灵芝的热水提取物(制造例一)                       2.0份
2.干燥玉米淀粉                                       38.0
3.微结晶纤维素                                       60.0
[制法]将组分1～3混合，形成粉剂1。
实施例二  粉剂2
在实施例一中，将黑灵芝的热水提取物替换成黑灵芝的50％乙醇提取物(制造例二)，得到粉剂2。
实施例三  粉剂3
在实施例一中，将黑灵芝的热水提取物替换成灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)，得到粉剂3。
实施例四  粉剂4
在实施例一中，将黑灵芝的热水提取物替换成黑灵芝的热水提取物(制造例一)和灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)的等量混合物，得到粉剂4。
比较例一  粉剂A(不含万年菇的溶剂提取物的粉剂)
在实施例一中，将黑灵芝的热水提取物替换成干燥玉米淀粉，得到粉剂A。
实施例五  片剂
配方                                                 混合量
1.黑灵芝的乙醇提取物(制造例三)                        5.0份
2.干燥玉米淀粉                                        25.0
3.羧甲基纤维素钙                                      20.0
4.微结晶纤维素                                        40.0
5.聚乙烯吡咯烷酮                                      7.0
6.云母                                                3.0
[制法]将组分1～4混合，然后，添加组分5的水溶液作为结合剂而形成颗粒。向形成的颗粒内添加组分6并进行压片。得到1粒0.52克。
实施例六  片状食品
配方                                                 混合量
1.灵芝(赤芝)的50％乙醇提取物(制造例五)                2.0份
2.干燥玉米淀粉                                        50.0
3.丁四醇                                              40.0
4.柠檬酸                                              5.0
5.脂肪酸糖酯                                          3.0
6.香料                                                  适量
7.水                                                    适量
[制法]将组分1～4及7混合，形成颗粒。在形成的颗粒内添加组分5及6并进行压片。得到一粒1.0g。
实施例七  饮料
配方                                                    混合量
1.灵芝(赤芝)的乙醇提取物(制造例五)                      1.0份
2.甜菊                                                  0.05
3.苹果酸                                                5.0
4.香料                                                  0.1
5.使总量达到100份的水
[制法]将组分2及3用少量的水溶解。然后，加入组分1、4及5进行混合。
下面，列举实验例对本发明的效果进行详细说明。
实验例-1  MMP抑制实验
使用明胶酶图谱法，对万年菇的溶剂提取物对明胶酶活性的抑制作用进行实验。即，制造含有0.6mg/ml明胶的10％SDS-PDGE凝胶(1mm厚)，在非还原条件下电泳B16老鼠黑素瘤细胞培养液上层0.014ml。然后，在室温下、在30分钟内、使用2.5％TritonX-100(SIGMA公司制造)的溶液清洗凝胶两次以除去SDS，并且在37℃下，在含有200mM氯化钠、5mM氯化钙、0.01％brij-35(SIGMA公司制造)的30mM三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(pH7.6)中培养24小时。此时，将黑灵芝的热水提取物(制造例一)、灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)或者黑灵芝的热水提取物和灵芝(赤芝)的热水提取物的等量混合物添加到浸入凝胶的缓冲剂中。反应结束后，通过0.2％的考马斯亮蓝R(マクシ公司制)的溶液染色，通过5％的甲醇-7.5％醋酸溶液褪色。使用显像密度计(Atto公司制造的Atto Densitograph AE-6905)对作为在蓝色凝胶上未被染色的条块而被检测的明胶酶活性进行量化，算出抑制率。抑制率(单位是％)的计算是利用比重计的数值、根据下面的式子(1)来计算的。其结果如表1所示，万年菇的溶剂提取物以依赖于浓度的方式对B16老鼠黑素瘤细胞产生的明胶酶进行抑制。
抑制率＝{1-(A/B)}×100                            …(1)
A：添加万年菇的溶剂提取液时的比重计的数值
B：不添加万年菇的溶剂提取液时的比重计的数值
表1
         试样 反应液中的最终浓度[％]   抑制率[％]
  黑灵芝的热水提取物(制造例一)     0.25     38
0.50 64
    1.0     99
  灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)     0.25     9
    0.50     49
    1.0     96
 黑灵芝的热水提取物、灵芝(赤芝)的热水提取物的等量混合物     0.25     26
    0.50     58
    1.0     98
实验例-2  MMP抑制实验
此外，可以使用灵芝(赤芝)的50％乙醇提取物(制造例五)、灵芝(赤芝)的乙醇提取物(制造例六)、黑灵芝的50％乙醇提取物(制造例二)及黑灵芝乙醇提取物(制造例三)来进行相同的实验。其结果如表2所示。同时，所述四个例子中提取物在各自反应液中的最终浓度都非常低，为0.03％。相对于万年菇的热水提取物，在这个较低浓度下，使用乙醇提取物能更有效地抑制B16老鼠黑素瘤细胞产生的明胶酶。
表2
         试样 反应液中的最终浓度[％] 抑制率[％]
灵芝(赤芝)的50％乙醇提取物(制造例五)     0.03     67
灵芝(赤芝)的乙醇提取物(制造例六)     0.03     78
黑灵芝的50％乙醇提取物(制造例二)     0.03     85
黑灵芝的乙醇提取物(制造例三)     0.03     96
实验例-2  癌转移抑制实验
将黑灵芝的热水提取物(制造例一)、灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)或者黑灵芝的热水提取物和灵芝(赤芝)的热水提取物的等量混合物按照一日一次、每次以100mg/kg的浓度经腹腔连续一周输入给C57BL/6老鼠。向对照组的腹腔内输入生理盐水。实验动物的数目为一组八只。然后，从尾静脉向每一只老鼠注射B16老鼠黑素瘤细胞1×105个。在此之后，继续输入试样，并从癌细胞的接种开始三周后摘除肺，固定在10％福尔马林溶液中。将福尔马林固定的肺分成五片，计算在其表面上形成的转移巢的数量。其结果如表3所示，与对照组相比较，摄入万年菇的溶剂提取物可以显著地抑制转移巢的形成。即万年菇的溶剂提取物具有充分的抗转移效果。
表3
              试样 转移巢数的平均值(个)
  生理盐水     49
  黑灵芝的热水提取物(制造例一)     8
  灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)     25
  黑灵芝的热水提取物与灵芝(赤芝)的热水提取物的等量混合物     14
从上面可以看出，黑灵芝的热水提取物(制造例一)、灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)及黑灵芝的热水提取物与灵芝(赤芝)的热水提取物的等量混合物的MMP抑制作用和癌转移抑制效果都很优异。此外，还进行了黑灵芝和灵芝(赤芝)的50％乙醇提取物及乙醇提取物(制造例二、三、五及六)的实验，其MMP的抑制作用和癌转移抑制效果同样也很优异。
实验例-3  癌转移抑制实验
在市售饲料(东方酵母工业制造，老鼠、鼠饲养用MF)中，分别以5.0％的浓度添加本发明的粉剂1～4(实施例一～四)来配制饲料，其中分别含有黑灵芝的热水提取物(制造例一)、黑灵芝的50％乙醇提取物(制造例二)、灵芝(赤芝)的热水提取物(制造例四)或者黑灵芝的热水提取物和灵芝(赤芝)的热水提取物的等量混合物。让实验老鼠自由摄取各自的饲料。同样的，配制添加有5.0％的不含万年菇提取物的粉剂A(比较例一)的饲料，让实验老鼠自由摄取(对照组)。实验动物的数目为一组八只。从使用添加了粉剂的饲料饲养开始两周后，与实验例-2的情况一样进行癌细胞的移植，三周后计算转移巢的数目。其结果如表4所示，与对照组(比较例)相比，在饲料内混合含有万年菇的溶剂提取物的粉剂，可以显著地抑制转移巢的形成，即可以有效地抑制癌的转移。
表4
试样 转移巢数的平均值(个)
比较例     62
粉剂1(实施例一)     35
粉剂2(实施例二)     33
粉剂3(实施例三)     47
粉剂4(实施例四)     41
对于实施例五的片剂及实施例六的片状食品，使用乳钵将其粉末化，然后对粉末试样进行与粉剂相同的实验。此外，对于实施例七的饮料，可以使用胃探针按照一日一次经口输入0.3mL试样的量，同样也进行它对癌转移效果的实验。结果，在实施例五～七中也得到同样的癌转移抑制效果。
工业实用性
从上述内容可以看出，万年菇的溶剂提取物对于癌细胞产生的MMP具有抑制效果，对于因MMP而引起的癌的转移有抑制效果。本发明的MMP抑制剂可以用于癌的转移、溃疡的形成、风湿性关节炎、骨质疏松症、牙周炎及皮肤老化等因MMP的亢进而引起的各种疾病的预防、抑制及症状的改善等。

Claims (4)

1.一种基质金属蛋白酶抑制剂，其特征在于：
含有万年菇的溶剂提取物。
2.一种基质金属蛋白酶抑制剂，其特征在于：
含有黑灵芝的溶剂提取物。
3.根据权利要求1或2所述的基质金属蛋白酶抑制剂，其特征在于：
提取溶剂是从水、低级醇、液态多羟基醇中选出的一种或者两种以上溶剂的提取物。
4.一种医药品、准医药品、化妆品或者食品，其目的在于对与癌的转移、溃疡的形成、风湿性关节炎、骨质疏松症、牙周炎及皮肤老化等有关的基质金属蛋白酶亢进性疾病进行预防、抑制或者病症的改善，其特征在于：
含有万年菇的溶剂提取物。
CNB028190319A 2001-09-27 2002-09-27 基质金属蛋白酶抑制剂 Expired - Lifetime CN100518747C (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2001297672 2001-09-27
JP297672/2001 2001-09-27

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1561222A true CN1561222A (zh) 2005-01-05
CN100518747C CN100518747C (zh) 2009-07-29

Family

ID=19118704

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB028190319A Expired - Lifetime CN100518747C (zh) 2001-09-27 2002-09-27 基质金属蛋白酶抑制剂

Country Status (11)

Country Link
US (1) US7618638B2 (zh)
EP (1) EP1449534B1 (zh)
KR (1) KR100644357B1 (zh)
CN (1) CN100518747C (zh)
AT (1) ATE506070T1 (zh)
CA (1) CA2460834C (zh)
DE (1) DE60239822D1 (zh)
ES (1) ES2365132T3 (zh)
RU (1) RU2283125C2 (zh)
TW (1) TWI318881B (zh)
WO (1) WO2003028749A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102813672A (zh) * 2009-05-27 2012-12-12 西北大学 硫酸铝铵十二水在制备抗肿瘤基质金属蛋白酶抑制剂中的应用
CN105025906A (zh) * 2012-12-21 2015-11-04 阿克生物科技公司 来自鱼孵化液的化妆品组合物

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10166270B2 (en) 2004-04-23 2019-01-01 Zivo Bioscience, Inc. Composition and method for affecting cytokines and NF-κB
US7807622B2 (en) 2004-04-23 2010-10-05 Health Enhancement Products, Inc. Composition and use of phyto-percolate for treatment of disease
CA2625818A1 (en) * 2005-04-20 2006-10-26 Health Enhancement Products, Inc. Composition and use of phyto-percolate for treatment of disease
JP2007045713A (ja) * 2005-08-05 2007-02-22 Iskra Ind Co Ltd 霊芝胞子抽出物及び霊芝胞子製剤
US9486005B2 (en) 2010-02-22 2016-11-08 Smiti Vaid Gupta Agents and mechanisms for treating hypercholesterolemia
US10232028B2 (en) 2013-06-13 2019-03-19 Zivo Bioscience, Inc. Compounds and methods for affecting cytokines
EP3258948B1 (en) 2015-02-16 2023-12-06 Zivo Bioscience, Inc. Anti-inflammatory and immunomodulatory compositions comprising klebsormidium and uses thereof
EP3416501A4 (en) 2016-02-16 2019-11-20 Zivo Bioscience, Inc. NUTRITIONAL SUPPLEMENT FOR ANIMALS BY ADMINISTERING A FOOD SUPPLEMENT FROM ALGAE

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62239953A (ja) 1986-04-11 1987-10-20 Yasahiro Morita 霊芝茶の製造法
JPH06345636A (ja) 1993-06-08 1994-12-20 Nonogawa Shoji Kk 化粧料
JPH0873369A (ja) 1994-09-01 1996-03-19 Fuairudo:Kk 健康茶
US5863949A (en) * 1995-03-08 1999-01-26 Pfizer Inc Arylsulfonylamino hydroxamic acid derivatives
JP3611638B2 (ja) * 1995-08-02 2005-01-19 カネボウ株式会社 ヒトコラゲナーゼ活性阻害剤
JPH09235293A (ja) * 1996-02-29 1997-09-09 Kanebo Ltd 新規トリテルペン
CN1058190C (zh) * 1996-05-07 2000-11-08 陈帅民 一种记忆口服液
JPH11139947A (ja) 1997-11-11 1999-05-25 Sunstar Inc マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤含有口腔用組成物
JPH11180889A (ja) 1997-12-15 1999-07-06 Buhei Kono 霊芝からの抽出成分を含有する皮膚炎治療用薬液
CN1291511A (zh) 1999-10-10 2001-04-18 四川三优奇康产业股份有限公司 纯天然抗癌转移制剂

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102813672A (zh) * 2009-05-27 2012-12-12 西北大学 硫酸铝铵十二水在制备抗肿瘤基质金属蛋白酶抑制剂中的应用
CN102813672B (zh) * 2009-05-27 2013-11-06 西北大学 硫酸铝铵十二水在制备抗肿瘤基质金属蛋白酶抑制剂中的应用
CN105025906A (zh) * 2012-12-21 2015-11-04 阿克生物科技公司 来自鱼孵化液的化妆品组合物
CN105025906B (zh) * 2012-12-21 2020-08-25 阿克生物科技公司 来自鱼孵化液的化妆品组合物

Also Published As

Publication number Publication date
WO2003028749A1 (fr) 2003-04-10
US20050037024A1 (en) 2005-02-17
CA2460834A1 (en) 2003-04-10
CN100518747C (zh) 2009-07-29
KR100644357B1 (ko) 2006-11-10
ATE506070T1 (de) 2011-05-15
RU2004110616A (ru) 2005-04-20
EP1449534A4 (en) 2006-01-11
TWI318881B (zh) 2010-01-01
RU2283125C2 (ru) 2006-09-10
US7618638B2 (en) 2009-11-17
HK1072564A1 (zh) 2005-09-02
DE60239822D1 (de) 2011-06-01
CA2460834C (en) 2011-10-25
KR20040041629A (ko) 2004-05-17
EP1449534B1 (en) 2011-04-20
ES2365132T3 (es) 2011-09-22
EP1449534A1 (en) 2004-08-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3119382B1 (fr) Applications cosmetiques et pharmaceutiques de la vescalagine et de la castalagine
CN1883590A (zh) 全灵芝孢子油的制备方法
CN100518747C (zh) 基质金属蛋白酶抑制剂
KR20150100288A (ko) 흑효모로 발효한 생약추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR101727788B1 (ko) 글루쿠론산을 다량 함유하는 지충이 분해물 제조 방법 및 이를 함유하는 항노화 기능성 화장료 조성물
JP3984522B2 (ja) マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤
CN101040824A (zh) 对二甲氨基苯甲醛缩氨基硫脲在美白化妆品中的应用
CN111643531A (zh) 一种复合型灵芝破壁孢子粉及其制备方法
JP5101769B2 (ja) 生体の酸化防止または予防剤
JP2018521063A (ja) 蜜蜂花粉組成物
JP5362326B2 (ja) Ｍｉｆ分泌抑制剤
JP7473948B2 (ja) インターロイキン３７発現促進剤
HK1072564B (zh) 基质金属蛋白酶抑制剂
JP6468595B2 (ja) 皮膚外用剤
JP5415216B2 (ja) 皮膚外用剤
CN113893214B (zh) 喙尾琵甲提取物在化妆品中的应用
TWI722492B (zh) 含蓮蓬萃取物之組合物及其用於治療頭頸癌症之用途
JP2012236801A (ja) 紫外線抵抗性増強剤
JP2005298391A (ja) マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤
JP2005035909A (ja) 抗歯周病剤
JP2006182695A (ja) マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤。
KR20240019018A (ko) 유도인자를 이용한 레스베라트롤 고함유 쌀의 제조 방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물
WO2023112717A1 (ja) Ｐａｄ１の産生促進薬剤及び新薬剤評価方法
JP6865426B2 (ja) Ｕｖ感受性軽減剤、ｄｎａ修復促進剤、細胞死抑制剤、及び食品組成物
TWI599576B (zh) Platelet-derived growth factor-BB production hyperthyroidism, and its containing between the leaf stem cell production promoter, and stem cell stabilizer

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1072564

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1072564

Country of ref document: HK

CX01 Expiry of patent term
CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20090729