CN1339319A - 一种治疗艾滋病的药物及其制备方法 - Google Patents
一种治疗艾滋病的药物及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1339319A CN1339319A CN00123486A CN00123486A CN1339319A CN 1339319 A CN1339319 A CN 1339319A CN 00123486 A CN00123486 A CN 00123486A CN 00123486 A CN00123486 A CN 00123486A CN 1339319 A CN1339319 A CN 1339319A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- epitope
- medicine
- aids
- gpgrafy
- variant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- C07K16/1145—
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明公开了一种治疗艾滋病的药及其制备方法,本发明治疗艾滋病的药,它基本上包括至少一种单克隆抗体,所述抗体的抗原是人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的中和表位GPGRAFY表位及其变异表位,所述变异表位为GPGQTFY或GPGQAWY。本发明药的制备方法为(1)人工合成至少一条分别含有人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的中和表位GPGRAFY或/和它的变异表位;(2)将上述多肽分别耦联到载体蛋白或载体多肽上;(3)用上述耦联物免疫动物;(4)制备杂交瘤;(5)将得到的抗体配以药用佐剂,制成药物。
Description
本发明涉及用生物工程技术制备的治疗艾滋病的药物及其制备方法，特别是涉及用艾滋病病毒膜蛋白的单克隆抗体制备的治疗艾滋病的药物及其制备方法。
艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的一种免疫性疾病。由于其传播迅速、病死率极高，且目前尚无特效治疗方法，更无疫苗可以预防，因而有“世纪瘟疫”之称。
现有的用于临床的抗艾滋病药物仅能推迟发病期和延长病人的生命，并且价格昂贵，毒性大。最近国外抗艾滋病药物临床研究结果证明，针对HIV-1膜蛋白gp120上的几个特定中和表位的中和抗体(单克隆抗体)在被动免疫治疗中的组合使用能抑制HIV-1病毒的粘膜传染以及母婴传播，并能清除血液中的HIV-1病毒(Nature Medicine 1999，5：204；Nature Medicine 2000，6：200；Nature Medicine 1999，5：211)；HIV-1 gp120上的主要中和表位GPGRAFY以及识别该表位的抗体能够体外抑制HIV-1感染靶细胞，并能预防HIV-1感染黑猩猩(Nature 1990，345：622；Science 1992，256：1687；Nature 1992，355：728-730；J.Biol.Chem.1995，271：8236)。
本发明的目的是提供一种有效的治疗艾滋病的药物，该药物可对付艾滋病病毒的变异。
本发明的另一个目的是提供一种制备上述治疗艾滋病的药物的方法。
为实现上述目的，本发明采取以下设计方案：一种治疗艾滋病的药，它基本上包括至少一种单克隆抗体，所述抗体的抗原是人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的中和表位GPGRAFY表位及其变异表位。
所述变异表位为GPGQTFY或GPGQAWY。
本发明治疗艾滋病的药物优选由以下组分组成：
GPGRAFY-表位特异性的单克隆抗体
GPGQTFY-表位特异性的单克隆抗体
GPGQAWY-表位特异性的单克隆抗体
一种制备上述治疗艾滋病的药物的方法，基本上包括以下步骤：
(1)、人工合成至少一条分别含有人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的中和表位的表位多肽，所述中和表位选自GPGRAFY表位或/和它的变异表位或者至少一次重复的GPGRAFY表位或/和它的变异表位；
(2)、将上述多肽分别耦联到载体蛋白或载体多肽上形成耦联物；
(3)、用上述耦联物分别配以可接受的佐剂免疫动物；
(4)、采用常规的细胞融合技术分别制备杂交瘤；
(5)、将自上述不同杂交瘤细胞系得到的抗体纯化，混合制成治疗艾滋病的药物。
其中，所述人工合成的至少一条多肽，优选为分别含有人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的至少一次重复的GPGRAFY表位或它的变异表位。所述GPGRAFY表位的变异表位为GPGQTFY或GPGQAWY。
研究表明，针对HIV-1病毒膜蛋白上中和表位的抗体在艾滋病治疗中能降低病毒的载量，延缓疾病的进行。本发明治疗艾滋病的药物是含有抗人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的GPGRAFY表位及其变异表位(如GPGQTFY，GPGQAWY)的多种抗体的药物，即使在艾滋病病毒产生变异的情况下，注射了该药物的人体内也会有相应的抗体来杀灭变异的病毒。
本发明的药物不但无毒性，而且在提高艾滋病的免疫治疗效果的同时，还可降低艾滋病治疗成本。
本发明采用人工合成表位多肽的方法来诱导、制备预先确定的表位特异性的单克隆抗体，克服了需要利用天然蛋白或重组蛋白免疫，然后大量筛选和鉴定才能得到预先确定的表位特异性的单克隆抗体的诸多复杂工作。
根据本发明，可以按照艾滋病病毒的变异情况，很快生产出其相应类型的药物，不需进行长时间的试验，降低生产成本。该技术将对世界预防医学研究产生重大影响，并将带来巨大的经济效益和社会效益。
下面结合非限制性具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例一：由抗HIV-1 gp120上的中和表位GPGRAFY的抗体为主要活性成分制成的治疗艾滋病的药物，由以下步骤生产：
(1)、人工合成一条含有人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的4次重复的GPGRAFY中和表位的表位多肽C-(GPGRAFY)4；
(2)、利用MBS(m-maleimidobenzoyl-N-hydroxy succinimide ester)将上述表位多肽与载体蛋白BSA耦联；；
(3)、将上述耦联物与福氏佐剂混合(两种物质的重量份数比为，耦联物∶福氏佐剂＝1∶1)免疫Balb/c小鼠。第一次用完全福氏佐剂，以后每两周免疫一次，用不完全福氏佐剂，每次免疫的抗原剂量为：含10微克表位多肽的耦联物/次/只，共免疫3次；
(4)、将免疫后的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系采用常规的细胞融合技术融合，并制备杂交瘤；
(5)、从上述杂交瘤细胞系筛选出能产生预先定义的表位特异性的单克隆抗体的克隆，将提纯的抗体制成治疗艾滋病的药物。
该药物在实际应用中的使用剂量根据患者的病情来确定。
实施例二：由抗HIV-1 gp120上的中和表位GPGRAFY及其变异表位GPGQTFY、GPGQAWY的抗体为主要活性成分制成的治疗艾滋病的药物，由以下步骤生产：
(1)、人工合成4条分别含有人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的中和表位GPGRAFY及其变异表位GPGQTFY、GPGQAWY的表位多肽：
CGPGRAFYGPGRAFYGPGRAFYGPGRAFY
CGPGQTFYGPGQTFYGPGQTFYGPGQTFY
CGPGQAWYGPGQAWYGPGQAWYGPGQAWY
(2)、利用戊二醛或MBS将上述多肽分别耦联到载体蛋白牛血清白蛋白上形成耦联物；
(3)、将上述耦联物与福氏佐剂混合(两种物质的体积比为，耦联物∶福氏佐剂＝1∶1)免疫Balb/c小鼠。第一次用完全福氏佐剂，以后每两周免疫一次，用不完全福氏佐剂。每次免疫的抗原剂量为：含10微克表位多肽的耦联物/次/只，共免疫3次；
(4)、将免疫后的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系采用常规的细胞融合技术融合，并制备杂交瘤；
(5)、从上述杂交瘤细胞系筛选出能产生预先定义的表位特异性的单克隆抗体的克隆。
(6)、自上述杂交瘤细胞系分别得到抗HIV-1 gp120上的中和表位GPGRAFY及其变异表位GPGQTFY、GPGQAWY的3种抗体，将上述抗体制成治疗艾滋病的药物，其中，各种抗体的加入量由适用人群的统计学处理得出的各种表位的出现概率进行调整。
使用本发明的药物，可以明显抵抗艾滋病病毒的变异，降低艾滋病病毒的载量，延缓疾病的进行，最后达到治愈的目的。
Claims (6)
1、一种治疗艾滋病的药，它基本上包括至少一种单克隆抗体，所述抗体的抗原是人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的中和表位GPGRAFY表位及其变异表位。
2、根据权利要求1所述的一种治疗艾滋病的药，其特征在于：所述变异表位为GPGQTFY或GPGQAWY。
3、根据权利要求1或2所述的一种治疗艾滋病的药，其特征在于：它是由以下组分组成的：GPGRAFY-表位特异性的单克隆抗体
GPGQTFY-表位特异性的单克隆抗体
GPGQAWY-表位特异性的单克隆抗体
4、一种制备权利要求1-3所述的治疗艾滋病的药物的方法，基本上包括以下步骤：
(1)、人工合成至少一条分别含有人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的中和表位的表位多肽，所述中和表位选自GPGRAFY表位或/和它的变异表位或者至少一次重复的GPGRAFY表位或/和它的变异表位；
(2)、将上述多肽分别耦联到载体蛋白或载体多肽上形成耦联物；
(3)、用上述耦联物分别配以可接受的佐剂免疫动物；
(4)、采用常规的细胞融合技术分别制备杂交瘤；
(5)、将自上述不同杂交瘤细胞系得到的抗体纯化，混合制成治疗艾滋病的药物。
5、根据权利要求4所述的制备治疗艾滋病的药物的方法，其特征在于：所述人工合成的至少一条多肽，分别含有人免疫缺陷病毒膜蛋白gp120上的至少一次重复的GPGRAFY表位或它的变异表位。
6、根据权利要求4或5所述的制备治疗艾滋病的药物的方法，其特征在于：所述GPGRAF表位的变异表位为GPGQTF或GPGQAWF。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN00123486A CN1339319A (zh) | 2000-08-18 | 2000-08-18 | 一种治疗艾滋病的药物及其制备方法 |
| PCT/CN2001/001191 WO2002026259A1 (en) | 2000-08-18 | 2001-07-20 | A pharmaceutical composition for treating acids and its preparation |
| AU2002212074A AU2002212074A1 (en) | 2000-08-18 | 2001-07-20 | A pharmaceutical composition for treating acids and its preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN00123486A CN1339319A (zh) | 2000-08-18 | 2000-08-18 | 一种治疗艾滋病的药物及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1339319A true CN1339319A (zh) | 2002-03-13 |
Family
ID=4589906
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN00123486A Pending CN1339319A (zh) | 2000-08-18 | 2000-08-18 | 一种治疗艾滋病的药物及其制备方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1339319A (zh) |
| AU (1) | AU2002212074A1 (zh) |
| WO (1) | WO2002026259A1 (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103459410A (zh) * | 2011-02-25 | 2013-12-18 | 埃斯特韦实验室有限公司 | HIV gp-120变体的快速选择方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5266478A (en) * | 1987-05-29 | 1993-11-30 | Tanox Biosystems, Inc. | Antibodies which target a neutralization site within the second variable region of human immunodeficiency virus type 1 gp120 |
| JPH0292298A (ja) * | 1988-09-30 | 1990-04-03 | Olympus Optical Co Ltd | Ｈｉｖ構成蛋白に対するモノクローナル抗体 |
| EP0554446B1 (en) * | 1991-08-22 | 1998-11-04 | Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha | Monoclonal antibodies useful in therapy of HIV-1 infection |
| US5618922A (en) * | 1994-07-25 | 1997-04-08 | Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha | NM03 antibody materials and methods |
| ES2178672T3 (es) * | 1995-04-19 | 2003-01-01 | Polymun Scient Immunbio Forsch | Anticuerpos monoclonales frente al vih-1 y vacunas hechas a partir de ellos. |
| MXPA02010374A (es) * | 1996-10-10 | 2003-04-25 | Probe Internat | Composiciones y metodos para tratar infecciones virales. |
-
2000
- 2000-08-18 CN CN00123486A patent/CN1339319A/zh active Pending
-
2001
- 2001-07-20 AU AU2002212074A patent/AU2002212074A1/en not_active Abandoned
- 2001-07-20 WO PCT/CN2001/001191 patent/WO2002026259A1/zh not_active Ceased
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103459410A (zh) * | 2011-02-25 | 2013-12-18 | 埃斯特韦实验室有限公司 | HIV gp-120变体的快速选择方法 |
| CN103459410B (zh) * | 2011-02-25 | 2016-05-25 | 埃斯特韦实验室有限公司 | HIV gp-120变体的快速选择方法 |
| US9605030B2 (en) | 2011-02-25 | 2017-03-28 | Laboratorios Del Dr. Esteve, S.A. | Rapid selection method for HIV gp-120 variants |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2002212074A1 (en) | 2002-04-08 |
| WO2002026259A1 (en) | 2002-04-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0822941B1 (en) | Monoclonal antibodies against hiv-1 and vaccines made thereof | |
| AT398080B (de) | Immortalisierte zellinie, verfahren zu ihrer herstellung und verfahren zur herstellung von monoklonalen antikörpern sowie diagnoseverfahren und -mittel | |
| US20030003440A1 (en) | Novel CCR5 epitope and antibodies against it | |
| JPH06502539A (ja) | Ｈｉｖ−１ ｇｐ１２０のｖ３ループおよびｃｄ−４結合部位に特異的な中和ヒトモノクローナル抗体 | |
| DE69610295T2 (de) | Von einem retroviralen regulationsprotein abstammende, detoxifierte immunogene, dagegen gerichtete antikörper, verfahren zur deren herstellung und diese immunogene oder antikörper enthaltende, pharmazeutische zusammensetzungen. | |
| US6268484B1 (en) | HIV-vaccines | |
| CN1172717C (zh) | 一种治疗艾滋病的药物及其制备方法 | |
| CA2729226A1 (en) | Pharmaceutical compositions of antibodies for diseases caused by viruses | |
| US6200575B1 (en) | Non-toxic immunogens derived from a retroviral regulatory protein antibodies preparation process and pharmaceutical compositions comprising them | |
| SK59393A3 (en) | Use of il-4 to enhance immune response to immunogegens in vaccines | |
| DE69420042T2 (de) | Vielfältig verzweigte peptidkonstruktion zur bekämpfung von hiv | |
| WO2001060156A1 (en) | Neutralizing antibody and immunomodulatory enhancing compositions | |
| US12350331B2 (en) | Bivalent dengue/hepatitus B vaccines | |
| CN1339319A (zh) | 一种治疗艾滋病的药物及其制备方法 | |
| AT503297A4 (de) | Allergen-spezifische antikörper | |
| RU2006129097A (ru) | Новые тат-комплексы и включающие их вакцины | |
| EP0370090B1 (en) | Immunogens and biologically active peptides derived from shared sequences from antigens and anti-idiotypic antibodies or antibodies specific for cellular receptors of the antigens | |
| CN1339320A (zh) | 一种艾滋病疫苗及其制备方法与应用 | |
| CN1163271C (zh) | 一种合成肽流感疫苗的制备方法 | |
| JPH04500003A (ja) | ブタ多クローン性抗体および単クローン性抗体 | |
| CA2171531C (en) | Multiple branch peptide constructions for use against hiv | |
| CN121466278A (zh) | 抗tnfsf8肽疫苗及其制备方法和应用 | |
| CN1238499C (zh) | 艾滋病病毒0型株的一种抗体及其生产细胞系与应用 | |
| JP3725899B6 (ja) | Ｈｉｖに対して使用するための多分岐ペプチド構築物 | |
| JP3725899B2 (ja) | Ｈｉｖに対して使用するための多分岐ペプチド構築物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |