CN1303073C

CN1303073C - 取代三唑酮苄胺三唑醇类抗真菌化合物及其制备方法

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Publication number: CN1303073C
Application number: CNB2005100263313A
Authority: CN
Inventors: 张万年; 盛春泉; 姚建忠; 张珉; 缪震元; 徐辉; 张晶
Original assignee: Second Military Medical University SMMU
Current assignee: Second Military Medical University SMMU
Priority date: 2005-05-31
Filing date: 2005-05-31
Publication date: 2007-03-07
Anticipated expiration: 2025-05-31
Also published as: CN1699351A

Abstract

本发明涉及医药技术领域，是一种新型的三氮唑醇类抗真菌化合物——1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[N-甲基-N-(2-取代-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基)苄胺基]-2-丙醇类化合物和其盐类以及制备方法。本发明的化合物对各种浅部和深部真菌具有很强的抗真菌效果，与现有临床应用的抗真菌药物相比，具有高效、毒性低、抗真菌谱宽的优点，可用于制备新的抗真菌药物。

Description

取代三唑酮苄胺三唑醇类抗真菌化合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是一种新型的三氮唑醇类抗真菌化合物——1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[N-甲基-N-(2-取代-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基)苄胺基]-2-丙醇类化合物和其盐类以及制备方法。

背景技术

近年来，随着广谱抗菌素、抗肿瘤药、免疫抑制剂的大量应用，放射治疗和器官移植的广泛进行，导管和插管的普遍开展，以及免疫缺陷患者尤其是艾滋病患者的急速增加，致使真菌感染特别是深部真菌感染大幅度上升，深部真菌感染现已成为艾滋病和肿瘤等重大疾病死亡的主要原因。但就目前临床应用的抗真菌药物而言，存在副作用大、抗菌谱窄、易产生耐药性等问题，有效的抗真菌药物特别是抗深部真菌药物十分缺乏，远不能满足治疗需要。现有抗真菌药物主要为作用于角鲨烯环氧化酶的烯丙胺类、作用于羊毛甾醇14α去甲基化酶的氮唑类和作用于细胞壁β-(1，3)-葡聚糖合成酶的脂肽类等。但至今还未见有1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[N-甲基-N-(2-取代-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基)苄胺基]-2-丙醇类化合物及其抗真菌活性的报道。

发明内容

本发明提供-种高效、低毒、广谱的新型三氮唑醇类抗真菌化合物，包括1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[N-甲基-N-(2-取代-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基)苄胺基]-2-丙醇类化合物(包括其消旋体，以及R型或S型异构体)和该类化合物的盐酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐和甲烷磺酸盐。

本发明化合物的结构通式如下：

其中：X基团代表羟基或酯基

这里的酯基指1～4个碳原子的直链或支链酯基和具有易离去基团的酯基，如甲酸酯基、乙酸酯基、丙酸酯基、异丙酸酯基、叔丁基甲酸酯基、苯甲酸酯基、苯乙酸酯基、N，N-二乙基胺乙基苯甲酸酯基等。特别优选叔丁基甲酸酯基和N，N-二乙基胺乙基苯甲酸酯基。

Y基团代表芳环上的各种取代基，取代位置可位于邻、间、对位。可以是单取代，也可以多取代。取代基指：

(1)卤素，如F、Cl、Br、I，特别优选2，4-二氟或2，4-二氯取代；

(2)脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、叔丁基等，优选三氟甲基取代。

M基团代表氢或甲基，特别优选甲基。

R基团代表

(1)苄基或取代苄基

取代苄基苯环上取代基可位于邻、间、对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指：

a.卤素，如F、Cl、Br、I，特别优选2，4-二氟取代和4-碘取代；

b.1～5个碳原子的直链或支链烷基，如甲基、乙基、叔丁基等，特别优选叔丁基；

c.三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、硝基、苯甲酰基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、胺基，特别优选三氟甲基和三氟甲氧基；

(2)1～5个碳原子的直链或支链烷基，如甲基、乙基、三氟甲基、叔丁基、叔戊基等，特别优选2-戊基取代和3-戊基取代；

(3)2-氧代苯乙基或取代2-氧代苯乙基

取代2-氧代苯乙基苯环上取代基可位于邻、间、对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指：

a.卤素，如F、Cl、Br、I，特别优选2，4-二氟取代和4-碘取代；

(4)苯基或取代苯基

取代苯基苯环上的取代基可位于邻、间、对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基是指：

a.卤素，如F、Cl、Br、I，特别优选碘原子；

c.三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、硝基、苯甲酰基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、胺基，特别优选三氟甲基和三氟甲氧基。

本发明化合物盐类包括：盐酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐和甲烷磺酸盐。

上述取代三唑酮苄胺三唑醇类化合物可以为其消旋体，也可以为其R型或S型异构体。经试验抗真菌效果较好的化合物为X、Y、M和R基团的组合分别如下的化合物：

(1)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲氧基苄基。

(2)X基团为乙酸酯基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为甲基，R基团为4-三氟甲基苄基。

(3)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为甲基，R基团为4-氟苄基。

(4)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为甲基，R基团为4-氯苄基。

(5)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为甲基，R基团为4-碘苄基。

(6)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为甲基，R基团为4-氰基苄基。

(7)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为甲基，R基团为4-甲氧基苄基。

(8)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为2，4-二氟苄基。

(9)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲氧基2-氧代苯乙基。

(10)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲基2-氧代苯乙基。

(11)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-氟2-氧代苯乙基。

(12)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-氯2-氧代苯乙基。

(13)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-碘2-氧代苯乙基。

(14)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为2，4-二氟2-氧代苯乙基。

(15)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-氰基2-氧代苯乙基。

(16)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲氧基苯基。

(17)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲基苯基。

(18)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-硝基苯基。

(19)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为2-戊基。

(20)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为3-戊基。

本发明化合物的合成反应流程如下：

本发明化合物盐类的合成是在上述反应的基础上，进一步作如下反应：

其中HX代表盐酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐或甲烷磺酸盐。

具体步骤为：

(1)制备N-甲基对硝基苄胺(II)

4-硝基溴苄与甲胺醇溶液反应生成N-甲基-4-硝基苄胺(II)；

(2)制备N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-硝基苄胺(III)

N-甲基-对硝基苄胺(II)在CH₂Cl₂下，经(BOC)₂O保护得N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-硝基苄胺(III)；

(3)制备N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-胺基苄胺(IV)

N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-硝基苄胺(III)在乙醇中，经镍/水合肼还原反应10h，生成N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-胺基苄胺(IV)；

(4)制备N-甲基-N-叔丁氧羰基-(4-苯氧羰基氨基)苄胺(V)

N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-胺基苄胺(IV)在乙酸乙酯中，以吡啶为碱，与氯甲酸苯酯反应3h，生成N-甲基-N-叔丁氧羰基-(4-苯氧羰基氨基)苄胺(V)；

(5)制备4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯胺基脲(VI)

N-甲基-N-叔丁氧羰基-(4-苯氧羰基氨基)苄胺(V)在二甲氧基乙烷中与85％水合肼室温反应24h，得肼解产物4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯胺基脲(VI)；

(6)制备4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VII)

4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯胺基脲(VI)在DMF中，在醋酸存在条件下与甲脒醋酸盐发生环合反应生成4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VII)；

(7)制备2-取代-4-[4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VIII)

4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VII)在DMF中，以K₂CO₃为碱，在80℃与各种卤代物反应8～12h，生成2-取代-4-[4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VIII)；

(8)制备2-取代-4-[4-(N-甲基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(IX)

2-取代-4-[4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VIII)与10％盐酸反应24h，脱去BOC保护基生成2-取代-4-[4-(N-甲基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(IX)；

(9)制备2-氯-2’，4’-二氟苯乙酮(XI)

间二氟苯(X)与氯乙酰氯在无水AlCl₃中发生傅克反应生成2-氯-2’，4’-二氟苯乙酮(XI)；

(10)制备2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2’，4’-二氟苯乙酮(XII)

2-氯-2’，4’-二氟苯乙酮(XI)与三氮唑、氯化三乙基苄基铵(TEBA)和K₂CO₃在CH₂Cl₂中0～5℃反应5小时，接着在室温反应24小时，生成2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2’，4’-二氟苯乙酮(XII)；

(11)制备1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲磺酸盐(XIII)

2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2’，4’-二氟苯乙酮(XII)与碘化三甲基氧硫、三甲基十六烷基溴化铵，在甲苯和氢氧化钠中反应生成1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲磺酸盐(XIII)；

(12)制备目标化合物(XIV)

2-取代-4-[4-(N-甲基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(IX)与1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲磺酸盐(XIII)在乙醇中，以三乙胺为碱，80℃回流反应6～9h，生成目标化合物(XIV)；

(13)制备目标化合物(XV)

目标化合物(XIV)与过量的酸在室温下反应2～3小时，生成目标化合物(XV)。

本发明已合成的部分优选化合物的化学结构、产率、熔点和分子式见表1。

表1部分优选化合物的化学结构、产率、熔点和分子式

化合物编号	X基团	M基团	R基团	产率(％)	熔点(℃)	分子式
化合物编号	X基团	M基团	R基团	产率(％)	熔点(℃)	分子式	1234	OHOHOHOH	HHHH	p-CH₃-benzylp-NO₂-benzylp-F-benzylp-C(CH₃)₃-benzyl	74.168.976.284.6	80～8286～88102～10470～73	C₂₉H₂₉F₂N₇O₂C₂₈H₂₆F₂N₈O₄C₂₈H₂₆F₃N₇O₂C₃₂H₃₅F₂N₇O₂

567891011121314151617181920212223242526272829303132333435

OHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOH

HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH

o-F-benzylo-Cl-benzylm-Cl-benzylp-CH₂CH₃-benzyl2，4-2Cl-benzylp-Cl-benzylbenzylp-I-benzylm-I-benzylp-Br-benzylm-CH₃-benzyl2-F-4-Br-benzyl2-Br-4-F-benzyl2-Br-5-F-benzyl4-CF₃-benzyl3-CF₃-benzyl4-OCF₃-benzyl2，4-2Cl-PhCH₂CO-4-C(CH₃)₃-PhCH₂CO-4-CH₃-PhCH₂CO-2，4-2CH₃-PhCH₂CO-4-CH₂CH₃-PhCH₂CO-4-Cl-PhCH₂CO-4-F-PhCH₂CO-4-Br-PhCH₂CO-4-OCH₃-PhCH₂CO-4-CH(CH₃)₂-PhCH₂CO-PhCH₂CO-2-Cl-4-CH₃-PhCH₂CO-2，4-2F-PhCH₂CO-2-pentyl

65.175.181.669.476.471.381.675.476.878.168.970.571.976.572.882.674.678.571.469.685.163.568.975.176.477.163.981.679.877.886.6

88～9069～7282～8473～7568～7078～80108～110110～112102～10488～8999～102108～112128～131138～14150～5170～73oil77～78181～183175～17763～64180～183172～17372～73188～19057～60190～193144～14764～6660～6373～75

C₂₈H₂₆F₃N₇O₂C₂₈H₂₆ClF₂N₇O₂C₂₈H₂₆ClF₂N₇O₂C₃₀H₃₁F₂N₇O₂C₂₈H₂₅Cl₂F₂N₇O₂C₂₈H₂₆ClF₂N₇O₂C₂₈H₂₇F₂N₇O₂C₂₈H₂₆F₂IN₇O₂C₂₈H₂₆F₂IN₇O₂C₂₈H₂₆BrF₂N₇O₂C₂₉H₂₉F₂N₇O₂C₂₈H₂₅BrF₃N₇O₂C₂₈H₂₅BrF₃N₇O₂C₂₈H₂₅BrF₃N₇O₂C₂₉H₂₆F₅N₇O₂C₂₉H₂₆F₅N₇O₂C₂₉H₂₆F₅N₇O₃C₂₉H₂₅Cl₂F₂N₇O₂C₃₃H₃₅F₂N₇O₂C₃₀H₂₉F₂N₇O₂C₃₁H₃₁F₂N₇O₂C₃₁H₃₁F₂N₇O₂C₂₉H₂₆ClF₂N₇O₂C₂₉H₂₆F₃N₇O₂C₂₉H₂₆BrF₂N₇O₂C₃₀H₂₉F₂N₇O₃C₃₂H₃₃F₂N₇O₂C₂₉H₂₇F₂N₇O₂C₃₀H₂₈ClF₂N₇O₂C₂₉H₂₅F₄N₇O₂C₂₆H₃₁F₂N₇O₂

363738394041

OHOHOHOHOHOH

HHHHHH

3-pentyl4-CF₃-phenyl4-CF₃O-phenyl4-CN-phenyl4-F-phenyl2，4-2F-phenyl

79.974.474.181.788.276.8

110～11378～79135～136104～105165～166125～106

C₂₆H₃₁F₂N₇O₂C₂₈H₂₄F₅N₇O₂C₂₈H₂₄F₅N₇O₃C₂₈H₂₄F₂N₈O₂C₂₇H₂₄F₃N₇O₂C₂₇H₂₃F₄N₇O₂

注：C、H、N三种元素分析的测定值与理论计算值相差小于0.3％。

具体实施方式：

实施例1：N-甲基对硝基苄胺(II)的制备

于1000ml圆底烧瓶中加入700ml饱和甲胺醇溶液和对硝基氯苄24g(0.14mol)，60℃下回流反应5h，反应液由绿色变为棕红色，反应结束后蒸干溶剂，残余物在稀盐酸液300ml和100ml无水乙醚中分散，水层用NaOH调至碱性，无水乙醚提取(200ml×3)，合并提取液，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干得固体21.9g，产率92.86％。

实施例2：N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-硝基苄胺(III)的制备

于500ml圆底烧瓶中，加入N-甲基-对硝基苄胺(II)16.7g(0.1mol)和250mlCH₂Cl₂，在0℃～5℃下(冰浴)慢慢滴加(BOC)₂O 22g(0.1mol)溶于CH₂Cl₂50ml的溶液。滴加完毕后，即有大多数产物生成。继续室温反应10h，反应几乎完全。加入氯仿300ml稀释，水洗(200ml×3)，饱和食盐水洗(200ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，蒸干滤液得棕红色液体25g，收率93.4％。

实施例3：N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-胺基苄胺(IV)的制备

取化合物(III)24g(0.09mol)、85％水合肼96ml和无水乙醇300ml置于500ml圆底烧瓶中，小心加入催化剂量的活性镍。75℃回流反应10h，反应结束后，过滤(用稀盐酸处理残余的镍)，滤液蒸干即得黄色固体21.3g，收率100％。熔点：105～107℃.无须纯化即可用于下一步反应。

1HNMR：6.04～7.03(4H，m，Ar-H)，4.29(2H，s，-CH2-Ph)，3.63(2H，br，-NH₂)，2.78(3H，s，N-CH₃)，1.48(9H，s，-C(CH₃)₃)

实施例4：N-甲基-N-叔丁氧羰基-(4-苯氧羰基氨基)苄胺(V)的制备

取化合物(IV)23.6g(0.1mol)，吡啶8.5g(0.11mol)和乙酸乙酯200ml置于500ml圆底烧瓶中，0℃下滴加氯甲酸苯酯17.2g(0.11mol)，注意滴加速度要慢，滴加完毕后室温反应3h，TLC监测，反应进行几乎完全，反应液中有少量固体，反应液用水洗(200ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干得黄色液体，放置后变为固体34.8g，收率97.75％。熔点：109～110℃。

¹HNMR：7.18～7.42(9H，m，Ar-H)，7.00(1H，br，-NH)，4.39(2H，s，-CH₂-Ph)，2.82(3H，s，N-CH₃)，1.48(9H，s，-C(CH₃)₃)

实施例5：4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯胺基脲(VI)的制备

于500ml圆底烧瓶中加入化合物(V)35.6g(0.1mol)，85％水合肼10ml和二甲氧基乙烷150ml，室温搅拌24h。反应结束后将溶剂蒸干得淡黄色固体，用乙酸乙酯洗涤得白色固体25g，收率85％。

¹HNMR：8.21(1H，s，-NHCONH-)，7.16～7.42(4H，m，Ar-H)，6.76(1H，br，-NHCONH-)，4.36(2H，s，-CH₂-Ph)，3.84(2H，br，-NH₂)，2.81(3H，s，N-CH₃)，1.48(9H，s，-C(CH₃)₃)

实施例6：4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VII)的制备

取化合物(VI)15g(0.05mol)，甲脒醋酸盐22g(0.2mol)溶于DMF250ml，室温搅拌反应30min，加入醋酸14.3ml，然后升温至80℃，继续搅拌反应6h。反应结束后，减压蒸去溶剂，残余物用冰水处理，过夜，过滤，得淡黄色固体12.5g，收率82.24％。

¹HNMR：11.80(1H，br，NH)，8.31(1H，s，Triazolone，C₅-H)，7.33～7.67(4H，m，Ar-H)，4.40(2H，s，benzyl)，2.74(3H，s，N-CH₃)，1.42(9H，s，-C(CH₃)₃)

实施例7：2-取代-4-[4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(VIII)的制备

于50ml圆底烧瓶中加入化合物(VII)1.5g(0.005mol)，对三氟甲基氯苄2.9g(0.015mol)，K₂CO₃1.4g和DMF 15ml，于80℃搅拌反应12h。反应结束后，加水50ml，乙酸乙酯提取(50ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干，残余物柱层析纯化(梯度洗脱法，展开剂：乙酸乙酯∶石油醚＝1∶4，1∶2，1∶1)，得无色固体1.8g，收率78.26％。

¹HNMR：8.48(1H，s，Triazolone，C₅-H)，7.35～7.74(8H，m，Ar-H)，5.07(2H，s，benzyl)，4.41(2H，s，-CH₂-Ph)，2.78(3H，s，N-CH₃)，1.42(9H，s，-C(CH₃)₃)

其它VIII类化合物以不同的取代溴苄、卤代苯、1-氯-2-氧代取代苯乙基或卤代烷基为原料，与化合物(VII)发生取代反应，重复实施例7中的步骤制得。

实施例8：2-(4-三氟甲基苄基)-4-[4-(N-甲基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(IX)的制备

取化合物(VIII)1.8g(0.0039mol)溶于乙酸乙酯25ml，加入10％盐酸20ml，室温搅拌反应24h。反应结束后，蒸干溶剂，加水50ml，K₂CO₃调PH至8，过滤，得白色固体1.1g，收率78.57％。

¹HNMR：8.55(Triazolone，C₅-H)，7.53～7.80(8H，m，Ar-H)，5.08(2H，s，benzyl)，4.10(2H，s，-CH₂-Ph)，2.50(3H，s，N-CH₃)

其它IX类化合物以相应的化合物VIII重复实施例8中的步骤制得。

实施例9：2-氯-2’，4’-二氟苯乙酮(XI)的制备

无水三氯化铝100g(0.747mol)和间二氟苯75.33g(0.667mol)置于500ml三颈瓶中，室温下搅拌，慢慢滴加氯乙酰氯75.33g(0.667mol)，滴加完毕后继续于室温下搅拌30分钟，慢慢升温至50℃，在此温度下继续搅拌5小时，将反应液倒入冰水中，析出结晶，过滤得固体，滤液用二氯甲烷400ml分两次提取，合并二氯甲烷提取液，水洗至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，回收溶剂得固体，合并两次所得固体用甲醇重结晶，得2-氯-2’，4’-二氟苯乙酮107.38g，收率87.2％，熔点：46～47℃。

实施例10：2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2’，4’-二氟苯乙酮(XII)的制备

将三氮唑27.2g(0.4mol)、TEBA0.4g、无水K₂CO₃41.56g(0.3mol)加入180ml的CH₂Cl₂中得悬浮液；将2-氯-2’，4’-二氟苯乙酮(XI)38.2g(0.2mol)溶于60mlCH₂Cl₂中，于冰浴条件下将其滴加入上述的180ml悬浮液中，约1.5小时滴完，滴毕后在0～5℃反应5小时，常温反应24小时。然后过滤，滤饼用CH₂Cl₂洗数次，收集滤液，滤液用水洗3次，每次100ml，无水Na₂SO₄干燥，过滤，蒸出CH₂Cl₂，将残留物溶于100ml无水乙酸乙酯中，搅拌滴加浓硝酸，至黄色固体不再析出为止，过滤，滤饼用少量乙酸乙酯洗数次，干燥，将其溶于100ml水，用30％的NaOH溶液(w/w)调PH值为9，析出固体，过滤，干燥得粗品，用正己烷∶乙酸乙酯(v/v)＝1∶1重结晶，得化合物(XII)37.98g，收率85.2％，熔点：104～105℃。

实施例11：1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲磺酸盐(XIII)的制备

取2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2’，4’-二氟苯乙酮(XII)29.8g(0.115mol)，三甲基氧硫化碘25.3g(0.115mol)、三甲基十六烷基溴化铵1.6g，放入500ml三颈瓶中，加入甲苯180ml和20％氢氧化钠溶液(w/w)225ml，60℃加热3小时，反应结束后，分离出甲苯层，水层用甲苯萃取(100ml×2)，合并甲苯层，水洗至中性，回收绝大部分甲苯后，残留液加120ml乙酸乙酯稀释，0℃下滴加溶有8.3g甲磺酸的乙酸乙酯2ml，析出淡黄色固体，过滤，用甲醇重结晶，得化合物XIII 21.71g，产率56.7％，熔点：128～129℃。

实施例12：1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-{N-甲基-N-[2-(4-甲基苄基)-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基]苄胺基}-2-丙醇(表中化合物1)的制备

取环氧化物XIII 1.1g(0.0033mol)，化合物IX 1.0g(0.0033mol)，三乙胺2m]溶于无水乙醇25ml，升温至80℃，回流搅拌反应9h，反应结束后，蒸干溶剂，残余物溶于乙酸乙酯，依次用水洗(50ml×3)和饱和食盐水洗(50ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干，残余物柱层析纯化(展开剂：CH₂Cl₂∶CH₃OH＝98∶2)，得无色固体1.33g，收率74.10％。

¹HNMR(CDCl₃，TMS)δ：8.06(1H，Triazolone-C5-H)，6.80～7.76(13H，m，Ar-H)，5.00(2H，d，triazolone-CH₂)，4.47(2H，d-d，J1＝14.2Hz，J2＝33.7Hz，C1-H)，3.72(2H，d-d，Jl＝7.0Hz，J2＝14.0Hz，N-benzyl)，2.40(2H，d，C3-H)，2.03(3H，s，N-CH₃)，1.24(3H，s，ph-CH₃))

IR(cm^-1，KBr)：3413，3126，3054，1710，1615，1554，1500

实施例13：1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-{N-甲基-N-[2-(4-氟苄基)-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基]苄胺基}-2-丙醇(表中化合物3)的制备

取环氧化物XIII 1.1g(0.0033mol)，化合物IX 1.0g(0.0033mol)，三乙胺2ml溶于无水乙醇25ml，升温至80℃，回流搅拌反应9h，反应结束后，蒸干溶剂，残余物溶于乙酸乙酯，依次用水洗(50ml×3)和饱和食盐水洗(50ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干，残余物柱层析纯化(展开剂：CH₂C₂∶CH₃OH＝98∶2)，得无色固体1.38g，收率76.20％。

¹HNMR(CDCl₃，TMS)δ：8.05(1H，Triazolone-C5-H)，6.81～7.76(13H，m，Ar-H)，4.99(2H，s，triazolone-CH₂)，4.44(2H，d-d，J1＝14.3Hz，J2＝35.3Hz，C1-H)，3.45(2H，d-d，J1＝13.1Hz，J2＝36.4Hz，N-benzyl)，3.08(1H，d，J＝13.4Hz，C3-Ha)，2.77(1H，d，J＝13.4Hz，C3-Hb)2.04(3H，s，N-CH₃)IR(cm^-1，KBr)：3475，3124，3055，1709，1617，1562，1152

实施例14：1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-{N-甲基-N-[2-(4-三氟甲基苄基)-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基]苄胺基}-2-丙醇(表中化合物19)的制备

取环氧化物XIII 1.1g(0.0033mol)，化合物IX 1.03g(0.0033mol)，三乙胺2ml溶于无水乙醇20ml，升温至80℃，回流搅拌反应7h，反应结束后，蒸干溶剂，残余物溶于乙酸乙酯，依次用水洗(50ml×3)和饱和食盐水洗(50ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干，残余物柱层析纯化(展开剂：CH₂Cl₂∶CH₃OH＝98∶2)，得无色固体1.4g，收率71.90％。

¹HNMR(CDCl₃，TMS)δ：8.46(1H，Triazolone-C₅-H)，6.93～8.37(13H，m，Ar-H)，5.01(2H，s，triazolone-CH₂)，4.56～4.59(2H，m，C₁-H)，3.57(1H，d，J＝13.6Hz，N-benzyl-Ha)，3.44(1H，d，J＝13.6Hz，N-benzyl-Hb)，3.06(1H，d，J＝13.6Hz，C₃-Ha)，2.78(1H，d，J＝13.6Hz，C₃-Hb)，2.08(3H，s，N-CH₃)

IR(cm^-1，KBr)：3391，3128，3075，2950，1710，1617，1555，1500，1423，1399，1367，1325，1272，1209，1165，1137，1066，1018，966，851，817

实施例15：1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-{N-甲基-N-[2-(4-氟-2-氧代苯乙基)-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基]苄胺基}-2-丙醇(表中化合物28)的制备

取环氧化物XIII 1.1g(0.0033mol)，化合物2-(4-氟2-氧代苯乙基)-4-[4-(N-甲基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮1.1g(0.0033mol)，三乙胺2ml溶于无水乙醇20ml，升温至80℃，回流搅拌反应9h，反应结束后，蒸干溶剂，残余物溶于乙酸乙酯，依次用水洗(50ml×3)和饱和食盐水洗(50ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干，残余物柱层析纯化(展开剂：CH₂Cl₂∶CH₃OH＝98∶2)，得无色固体1.43g，收率75.10％。

¹HNMR(CDCl₃，TMS)δ：8.50(1H，s，Triazolone-C₅-H)，6.94～8.27(13H，m，Ar-H)，5.67(1H，s，-OH)，5.42(2H，s，triazolone-CH₂)，4.54～4.55(2H，m，C₁-H)，3.61(1H，d，J＝13.6Hz，N-benzyl-Ha)，3.45(1H，d，J＝13.6Hz，N-benzyl-Hb)，3.06(1H，d，J＝14.4Hz，C₃-Ha)，2.79(1H，d，J＝14.4Hz，C₃-Hb)，2.09(3H，s，N-CH₃)；IR(cm^-1，KBr)：3428，3130，3074，1699，1615，1598，1566

实施例16：1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-{N-甲基-N-[2-(3-戊基)-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基]苄胺基}-2-丙醇(表中化合物36)的制备

取环氧化物XIII 1.1g(0.0033mol)，化合物2-(3-戊基)-4-[4-(N-甲基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮0.9g(0.0033mol)，三乙胺2ml溶于无水乙醇20ml，升温至80℃，回流搅拌反应9h，反应结束后，蒸干溶剂，残余物溶于乙酸乙酯，依次用水洗(50ml×3)和饱和食盐水洗(50ml×3)，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液蒸干，残余物柱层析纯化(展开剂：CH₂Cl₂∶CH₃OH＝98∶2)，得无色固体1.35g，收率79.90％。

¹HNMR(CDCl₃，TMS)δ：8.41(1H，s，Triazolone-C₅H)，6.94～8.28(9H，m，Ar-H)，4.56(2H，d-d，J₁＝14.4Hz，J₂＝27.6Hz，C₁-H)，3.90(1H，p，-CH(CH₂)₂(CH3)₂)3.60(1H，d，J＝13.2Hz，N-benzyl-Ha)，3.44(1H，d，J＝13.2Hz，N-benzyl-Hb)，3.06(1H，d，J＝13.6Hz，C₃-Ha)，2.78(1H，d，J＝13.6Hz，C₃-Hb)，2.08(3H，s，N-CH₃)，1.70(4H，h，-CH(CH₂)₂(CH3)₂)，0.79(6H，t，-CH(CH₂)₂(CH₃)₂)；IR(cm^-1，KBr)：3128，3066，1690，1614，1554，1508.

其余目标化合物以不同的取代三唑酮苄胺为合成原料，如表1所列，重复实施例12、13、14、15和16中的步骤，便能合成所需的取代苄胺三氮唑醇类抗真菌化合物或其盐类。实施例中所用试剂均为市售分析纯。

实施例17：本发明合成的1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[N-甲基-N-(2-取代-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基)苄胺基]-2-丙醇类化合物具有抗真菌作用，其药理实验结果如下：

(一)实验方法：采用常规的体外抑菌实验方法(详见：Antimicrob AgentsChemother 1995，39(5)：1169)

1.材料与方法

(1)实验菌株

本实验选用了以下8种常见的人体致病标准真菌菌株作为筛选对象，真菌菌株由长征医院真菌室提供。

1)白色念珠菌(Candida albicans，标准株ATCC64550)；

2)近平滑念珠菌(Candida parapsilosis，标准株ATCC18062)；

3)热带念珠菌(Candida tropicalis标准株ATCC12034)；

4)新型隐球菌(Cryptococcus neoformans标准株ATCC32609)；

5)烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus临床株0109196)；

6)裴氏着色真菌(Fonsecaea pedrosoi临床株0208007)；

7)红色毛癣菌(Trichophyton rubrum临床株0310404)；

8)申克氏孢子丝菌(Sporothrix schenckii临床株9503060)。

(2)试验方法

菌悬液配制：上述真菌经YEPD液体培养基35℃培养16小时，两次活化，用血细胞计数板计数，以RPM1640液体培养基调整菌浓度至1×10⁴～1×10⁵个/ml。

药液配制：取本发明待测化合物溶于二甲亚砜，配成8.0mg/ml的药物储存液，实验前用RPM1640稀释成640μg/ml。

接种：96孔板1号孔加RPM1640 100μl作空白对照，3-12号孔各加菌悬液100μl，2号孔加菌悬液180μl和药液20μl，2-11号孔的药物浓度作10级倍比稀释，各孔药物浓度分别为64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。12号孔不加药液，作阳性对照。药物对照为氟康唑和酮康唑。

培养及检测：设阳性对照孔光密度值(OD值)为100％，以光密度值比阳性对照孔低于80％的最低药物浓度为最小抑菌浓度值(MIC)。

(二)实验结果

体外抑菌实验结果见表2

表2部分优选目标化合物体外抗真菌最小抑菌浓度值(MIC，μg/ml)

化合物编号	白念	近平	热念	新隐	烟曲	裴氏	红毛	孢子
化合物编号	白念	近平	热念	新隐	烟曲	裴氏	红毛	孢子	12345678910111213141516171819202122	0.0020.06250.0040.0310.0310.0040.0160.0080.0020.0020.0310.0310.0020.0020.0040.0020.0040.0020.0010.0020.0020.031	0.1250.254420.0640.0080.0080.0080.0160.0310.0080.0080.0080.0080.0080.0080.0080.0080.0081	0.50.0625110.06250.1250.50.250.06250.0625110.06250.06250.1250.06250.1250.250.06250.06250.031250.125	11642110.50.50.0080.5640.250.250.00810.1250.1250.50.250.1250.01616	326464832328824642281641632816864	0.25410.250.06250.50.1250.250.1250.1250.50.06250.06250.06251.250.1250.250.250.06250.1250.1254	11680.5140.50.50.250.5160.250.250.250.50.5120.50.50.2532	6464323264323264464646464646464641616643264

2324252627282930313233343536	0.06250.0020.0020.250.0040.0040.0020.0160.0040.0160.1250.0080.0020.008	20.0080.12520.030.0610.030.060.0080.50.0160.50.031	0.50.031250.06250.50.06250.06250.06250.1250.1250.06250.06250.06250.06250.0625	320.1250.516210.258186480.54	64168646464163232643264232	20.1250.062580.250.06250.062510.1251120.06250.25	6410.532420.254186440.54	6464646464646464646464646464
2324252627282930313233343536		20.0080.12520.030.0610.030.060.0080.50.0160.50.031		320.1250.516210.258186480.54	64168646464163232643264232	20.1250.062580.250.06250.062510.1251120.06250.25	6410.532420.254186440.54	6464646464646464646464646464	FluKetTer	0.250.062516	0.50.03116	0.50.062532	160.0314	3210.25	640.0625≤0.125	80.0625≤0.125	＞640.52

Flu：Fluconazole；Ket：Ketoconazole；Ter：Terbinafine。

上述实验结果表明本发明所述化合物及其盐类具有较好的抗真菌活性，多数对所选真菌的体外抑制活性均强于氟康唑，与酮康唑相当或更优，说明本化合物及其盐类可用于制备治疗抗真菌感染的药物。

本发明的优点与积极效果

本发明的化合物对各种浅部和深部真菌具有很强的抗真菌效果，与现有临床应用的抗真菌药物相比，具有高效、毒性低、抗真菌谱宽的优点，可用于制备新的抗真菌药物。

Claims

1.一种三氮唑醇类化合物，其特征在于该类化合物的结构通式为：

其中：X基团代表羟基或酯基；

这里的酯基指具有1～4个碳原子的直链或支链酯基，甲酸酯基、乙酸酯基、丙酸酯基、异丙酸酯基；

Y基团代表芳环上的各种取代基，取代位置可位于邻、间、对位，可以是单取代，也可以多取代，取代基指：

(1)卤素，F、Cl、Br、I；

(2)甲基、乙基、三氟甲基、叔丁基；

M基团代表氢或甲基；

R基团代表

(1)苄基或取代苄基

取代苄基苯环上取代基可位于苯环的邻、间或对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基是指；

a.F、Cl、Br、I；

b.1～5个碳原子的直链或支链烷基；

c.三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、硝基、苯甲酰基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、胺基；

(2)2-氧代苯乙基或取代2-氧代苯乙基

取代2-氧代苯乙基苯环上取代基可位于苯环的各邻、间或对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基是指：

a.F、Cl、Br、I；

b.1～5个碳原子的直链或支链烷基；

(3)苯基或取代苯基；

取代苯基苯环上取代基可位于苯环的邻、间或对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基是指；

a.F、Cl、Br、I；

b.1～5个碳原子的直链或支链烷基；

(4)1～5个碳原子的直链或支链烷基；

所说的1～5个碳原子的直链或支链烷基指甲基、乙基、叔丁基、叔戊基、仲戊基、异戊基。

2.按权利要求1所述的三氮唑醇类化合物，其特征在于所说化合物为X、Y、M和R基团的组合分别如下的化合物：

(1)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲氧基苄基，

(2)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为2，4-二氟苄基，

(3)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-氟2-氧代苯乙基，

(4)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-氯2-氧代苯乙基，

(5)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为2，4-二氟2-氧代苯乙基，

(6)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲氧基苯基，

(7)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为4-三氟甲基苯基，

(8)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为2-戊基

(9)X基团为羟基，Y基团为2，4-二氟基，M基团为H，R基团为3-戊基。

3.权利要求1或2所述三氮唑醇类化合物，其特征在于其盐类为盐酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐或甲烷磺酸盐。

4.权利要求1或2所述三氮唑醇类化合物在制备抗真菌药物中的应用。

5.权利要求3所述三氮唑醇类化合物的盐类在制备抗真菌药物中的应用。

6.权利要求1所述三氮唑醇类化合物的制备方法，合成路线如下，其中R基团如权利要求1所述：

具体步骤为：

(1)制备N-甲基对硝基苄胺(II)

4-硝基溴苄与甲胺醇溶液反应生成N-甲基-4-硝基苄胺(II)；

(2)制备N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-硝基苄胺(III)

(3)制备N-甲基-N-叔丁氧羰基-4-胺基苄胺(IV)

(4)制备N-甲基-N-叔丁氧羰基-(4-苯氧羰基氨基)苄胺(V)

(5)制备4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基-胺甲基)苯胺基脲(VI)

(9)制备2-氯-2’，4’-二氟苯乙酮(XI)

(10)制备2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2’，4’-二氟苯乙酮(XII)

(12)制备目标化合物(XIV)

2-取代-4-[4-(N-甲基-胺甲基)苯基]-2H-1，2，4-三唑-3-酮(IX)与1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲磺酸盐(XIII)在乙醇中，以三乙胺为碱，80℃回流反应6～9h，生成目标化合物(XIV)。

7.权利要求3所述三氮唑醇类化合物盐类的制备方法，在权利要求6所说三唑醇类化合物合成路线下进一步作如下反应：

其中HX分别表示盐酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐或甲烷磺酸盐，

具体步骤为：

1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-{N-甲基-N-[(2-取代-2H-1，2，4-三唑-3-酮-4-基)苄胺基]}-2-丙醇(XIV)与过量的盐酸、硝酸、氢溴酸或甲烷磺酸在室温下反应2～3小时，生成目标化合物(XIV)的盐类(XV)。