CN112043818A - 一种用于皮肤创伤的药物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于创伤的药物及其制备方法和应用，所述药物含有多肽以及苯扎氯铵，所述多肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或者是与SEQ ID NO.1的序列相比缺失、替换其中任意一个氨基酸或者是增加一个氨基酸的氨基酸序列。本发明用于皮肤创伤的药物所含有的多肽与苯扎氯铵能够形成稳定的凝胶，并且两者协同作用有助于修复皮肤创伤，特别是能够修复二级以上的烧伤。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于皮肤创伤的药物及其制备方法和应用。
背景技术
皮肤创伤修复一直是临床医学领域中比较棘手的问题。皮肤是人体最大的器官，是人体和外界环境之间的物理屏障，并且承担着诸多重要的生理功能，包括排汗、热感和痛觉等。一旦皮肤被破坏，就会引起机体内外环境失调，从而继发营养不良、多器官衰竭甚至导致死亡。传统的促创伤修复药物都有一定的局限性，比如成本高、活性相对较低并且容易造成增生性瘢痕愈合。因此，寻找新型促创伤修复药物是非常重要和非常有必要的。与传统促创伤修复药物相比，多肽类具有高活性、高特异性以及高稳定性等特性。中国专利申请CN110624097A公开了一种能够修复皮肤创伤的来自于珍珠贝的小分子肽。
近年来，越来越多的纳米药物(制剂)进入创新医药研发序列，以纳米材料为载体的创新药物和将传统药物改造为纳米新剂型迅速成为当前纳米生物医药领域的重要研究内容之一。纳米药物与传统药物相比，具有更好的溶解性、靶向性和缓控性，现已有多个品种纳米药物上市，如脂质体、纳米乳、纳米粒、聚合物水凝胶等。
超分子水凝胶是由糖类衍生物、碱基对或氨基酸小分子以非共价键自组装形成的聚集体，水含量通常高达95％，是上个世纪90年代才出现的一类新型水凝胶。因为具有高生物相容性、低生物毒性、易于降解和体内便于清除等优点，可称作医学工程“无痕”骨架。同时，超分子结构的可塑性、长度可调性、纵横比例的可控性、高序列层级的自组装性均可根据生物体内膜环境与生物学表达信号的要求“量身定制”。而且，凝胶因子自组装形成的三维纳米结构与细胞外基质在同一数量级，可为细胞的迁移、生长和分化提供接近人体的环境。这些优势使超分子水凝胶在药物传输、细胞培养和组织工程学领域备受青睐。
在过去的二十年中，小分子水凝胶在医药学领域的应用引起了广泛的研究兴趣并取得了丰硕的研究成果。本发明的申请人试图结合小分子水凝胶和小分子肽，提出一种以小分子肽为载体的用于皮肤创伤修复的药物。
发明内容
为了提供一种生物兼容性好的用于皮肤创伤的药物，本发明提供拟涉及一种多肽，其能够与药物活性成分形成凝胶并具有修复创伤的作用。具体而言，为了实现本发明的目的，本发明拟采用如下的技术方案：
本发明一方面涉及一种用于创伤的药物，其特征在于含有多肽以及苯扎氯铵，所述多肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或者是与SEQ ID NO.1的序列相比缺失、替换其中任意一个氨基酸或者是增加一个氨基酸的氨基酸序列。
在本发明的一个优选实施方式中，所述药物包括药物学上可接受的载体。
在本发明的一个优选实施方式中，所述药物为凝胶剂。
在本发明的一个优选实施方式中，所述凝胶剂为水凝胶，所述水凝胶剂中含有CaCl2。本发明通过含有CaCl2，更有利于水凝胶的形成。
在本发明的一个优选实施方式中，所述药物中所述多肽以及所述苯扎氯铵的质量比介于10:1至1:10之间，优选介于5:1至1：2之间，进一步优选为2:1至1:1之间。本发明通过控制多肽与苯扎氯铵的质量比，有助于形成稳定的水凝胶。
在本发明的一个优选实施方式中，所述水凝胶的pH值介于7-9之间。本发明通过控制水凝胶的pH值，在不影响水凝胶形成的情况下还能够避免对伤口产生刺激。
本发明的另一方面还涉及上述药物的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
将多肽与苯扎氯铵溶解在缓冲溶液中，通过剪切形成水凝胶。
在本发明的一个优选实施方式中，所述缓冲溶液的pH值为7-9，且含有CaCl2。
本发明另一方面还涉及上述药物在制备修复皮肤创伤的药物中的应用。
在本发明的一个优选实施方式中，所述的皮肤创伤是烧伤；优选地，所述烧伤为二级以上的烧伤。
有益效果
本发明用于皮肤创伤的药物所含有的多肽Ser-His-Ser-Gly-Phe-Pho与苯扎氯铵能够形成稳定的凝胶，并且两者协同作用有助于修复皮肤创伤，特别是能够修复二级以上的烧伤。
附图说明
图1是显示了本发明的实施例的剪切流变实验结果的图。
具体实施方式
为了进一步理解本发明，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。
本发明涉及的多肽为Ser-His-Ser-Gly-Phe-Pho，该肽序列也来自于珍珠贝小分子肽，但是考虑到从珍珠贝中大量提取存在成本高的难题，因此，在本发明的实施例中所使用的多肽，是由上海生工通过固相合成法所制备得到的。
实施例1：制备水凝胶
按照下述表1的配方，将所制备的多肽与苯扎氯铵混合，然后与含有100mM的CaCl2、pH为8.0的PBS溶液配制成混合溶液，得到的混合溶液经搅拌变成粘稠的水凝胶。
表1：水凝胶配比
| 编号 | 多肽(wt％) | 苯扎氯铵(wt％％) | 多肽与苯扎氯铵质量比 |
| 1 | 3％ | 0 | - |
| 2 | 2.5％ | 0.5％ | 5:1 |
| 3 | 2.0％ | 1％ | 2:1 |
| 4 | 1.5％ | 1.5％ | 1:1 |
| 5 | 1.0％ | 2.0％ | 1:2 |
将所制备得到的凝胶在25℃，1％应变条件下进行频率扫描流变学实验，频率扫描范围为1Hz-100Hz，实验结果如图1所示。G表示剪切储存模量，G’表示剪切损耗模量，当在全部扫描范围内G明显高于G’时，表明形成了水凝胶。由图1的结果可知，本发明的多肽与苯扎氯铵以一定的比例混合，能够形成机械强度较高的水凝胶。虽然形成水凝胶的具体机理并不了解，推测是由于多肽中的氨基、羧基与苯扎氯铵中的铵相互作用，通过氢键、范德华力等作用形成了水凝胶。
实施例2：药效学实验
1、动物模型制备：
脱毛：5％戊巴比妥钠4mg/20g，腹腔内注射麻醉，剪除背部长毛，硫化钡脱毛剂均匀涂于背部，片刻后清除毛发，清水洗净脱毛区。24h后同样麻醉，行烫伤创面制备。将温度为90℃的水瓶，轻放在小鼠背部皮肤上，烫伤时间为15s，然后将大鼠置室温25℃的环境中分笼饲养，自由进食水。在伤后48h观察大鼠伤后创面外观情况，同时取创面的皮肤标本，常规固定，HE染色，进行光镜组织学观察，检查此时表皮烧伤程度是否符合深二度烧伤创面。
2、创伤修复实验：
清除小鼠模型创面的分泌物和坏死组织，用碘伏溶液清洗消毒创面。根据不同组别分别喷涂2％苯扎氯铵生理盐水水溶液(对照组)和水凝胶。在烧伤早期每12h涂抹1次，3d后每天涂抹1次。另外术后第3d开始换药时要先用含有庆大霉素的盐水棉球清洗创面，清除液化物，然后继续行涂抹，每天涂药1次，直至皮片逐渐扩大相互融合而痊愈。计算愈合率＝(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积，实验结果如下表2所示。
表2：各实验例的愈合率统计
以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。
Claims (10)
1.一种用于创伤的药物，其特征在于含有多肽以及苯扎氯铵，所述多肽具有如SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列或者是与SEQ ID NO.1的序列相比缺失、替换其中任意一个氨基酸或者是增加一个氨基酸的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的药物，所述药物包括药物学上可接受的载体。
3.根据权利要求1所述的药物，所述药物为凝胶剂。
4.根据权利要求3所述的药物，所述凝胶剂为水凝胶，所述水凝胶剂中含有CaCl2。
5.根据权利要求4所述的药物，所述药物中所述多肽以及所述苯扎氯铵的质量比介于10:1至1:10之间，优选介于5:1至1：2之间，进一步优选为2:1至1:1之间。
6.根据权利要求4所述的药物，所述水凝胶的pH值介于7-9之间。
7.一种用于创伤的药物的制备方法，所述药物含有多肽以及苯扎氯铵，所述多肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或者是与SEQ ID NO.1的序列相比缺失、替换其中任意一个氨基酸或者是增加一个氨基酸的氨基酸序列；所述制备方法包括如下步骤：
将多肽与苯扎氯铵溶解在缓冲溶液中，通过剪切形成水凝胶。
8.根据权利要求7所述的制备方法，所述缓冲溶液的pH值为7-9，且含有CaCl2。
9.权利要求1-6任意一项所述的药物在制备修复皮肤创伤的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，所述的皮肤创伤是烧伤；优选地，所述烧伤为二级以上的烧伤。
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|---|---|---|---|---|
| CN1599748A (zh) * | 2001-12-03 | 2005-03-23 | 参天制药株式会社 | 新型肽及其药物用途 |
| CN102580164A (zh) * | 2012-03-27 | 2012-07-18 | 佛山兰赛特生物科技有限公司 | 一种模拟皮肤结构促进创面修复的复合膜及其制备方法 |
| CN110624097A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-12-31 | 广东海洋大学 | 一种珍珠贝小分子肽在皮肤创伤修复中的应用 |
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2020
- 2020-09-16 CN CN202010971767.4A patent/CN112043818A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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