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CN119823124A - 用于brd9的靶向降解的化合物 - Google Patents

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CN119823124A
CN119823124A CN202411945573.1A CN202411945573A CN119823124A CN 119823124 A CN119823124 A CN 119823124A CN 202411945573 A CN202411945573 A CN 202411945573A CN 119823124 A CN119823124 A CN 119823124A
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C·G·纳斯维舒克
R·扎伊德
尹宁
K·L·杰克逊
G·K·维茨
M·穆斯塔基姆
J·L·亚普
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C4 Therapeutics Inc
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Abstract

提供了BRD9蛋白质降解化合物或其药学上可接受的盐以用于治疗由BRD9介导的病症，包括但不限于异常细胞增殖。

Description

用于BRD9的靶向降解的化合物
本申请是申请日为2021年3月5日、申请号为202180019698.X、发明名称为“用于BRD9的靶向降解的化合物”的中国发明专利申请的分案申请。
相关申请的交叉引用
本申请要求2020年3月5日提交的美国临时申请62/985,774和2020年8月5日提交的美国临时申请63/061,659的权益。这些申请的全部内容出于所有目的而通过引用并入本文。
技术领域
本发明提供了用于如本文进一步描述的治疗应用的BRD9降解化合物。
背景技术
含溴结构域的蛋白质(BRD)如BRD9是识别乙酰化赖氨酸残基如组蛋白的N-末端上的那些的蛋白质。BRD在进化上是保守的，存在于多种多样的核蛋白中，包括HAT(GCN5、PCAF)、ATP依赖性染色质重塑复合物(BAZ1B)、解旋酶(SMARCA)、甲基转移酶(MLL、ASH1L)、转录共激活因子(TRIM/TIF1、TAF)、转录介质(TAF1)、核支架蛋白(PB1)和BET家族。(MullerS,Filippakopoulos P,Knapp S.,Bromodomains as therapeutic targets,Expert RevMol Med.2011,13(29))。含溴结构域的蛋白质具有许多与转录介导和共激活相关的功能，因此它们参与细胞增殖。
研究还已表明，BRD9优先为携带SMARCB1异常的癌症如恶性横纹肌样肿瘤和若干特定类型的肉瘤所使用。含有BRD9的复合物同时与活性启动子和增强子结合，由此它们有助于基因表达。BRD9的缺失导致与凋亡调节、翻译和发育调节相关的基因表达变化。BRD9对于SMARCB1缺陷型癌细胞系的增殖至关重要，表明它是这些致命癌症的治疗靶点。(Xiaofeng Wang等人,“BRD9 defines a SWI/SNF sub-complex and constitutes aspecific vulnerability in malignant rhabdoid tumors,”Nature Communications,2019,10(1881))。BRD9也是急性骨髓性白血病中所需的关键靶点，“Nature ChemicalBiology,2016,101038/nchembio.2115”。除了在某些癌症中BRD9作为功能依赖性的作用外，BRD9还在免疫细胞中发挥关键作用，其经由Foxp3靶基因的转录控制作为调节性T细胞(Treg)的调节剂，“BioRxiv,10.1101/2020.02.26.964981。
研究还已显示，与经典BAF(cBAF)和多溴(pBAF)复合物相比，新找到的非经典BAF(ncBAF)复合物是由亚基的独特组合构成的截然不同的实体。(Alpsoy,A.&Dykhuizen,E.C.Glioma tumor suppressor candidate region gene 1(GLTSCR1)and its paralogGLTSCR1-like form SWI/SNF chromatin remodeling subcomplexes.J Biol Chem 293,3892–3903(2018))。值得注意的是，BRD9选择性地结合到非经典BAF(ncBAF)复合物中，而SMARCB1不存在。在SMARCB1扰动环境(cBAF复合物驱逐、删除、截短、失活)中，cBAF复合物功能受损，导致对ncBAF复合物功能独特的所谓合成致死依赖性。进而，BRD9对于ncBAF复合物功能至关重要，并因此，BRD9是SMARCB1扰动癌症中的独特依赖性(Michel,B.C.等人.Anon-canonical SWI/SNF complex is a synthetic lethal target in cancers driven byBAF complex perturbation.Nat Cell Biol 20,1–11(2018)和Brien,G.L.等人.Targeteddegradation of BRD9reverses oncogenic gene expression in synovialsarcoma.Elife 7,e41305(2018))。
含溴结构域的蛋白质7(BRD7)也是PBAF SWI/SNF的亚基。描述BRD7以及BRD7和BRD9的配体的出版物包括：Pérez-Salvia M.等人的标题为“Bromodomain inhibitors andcancer therapy:From structures to applications”的论文(Epigenetics.2017；12(5):323–339；99)；和Clark P.G.K.等人的标题为“Discovery and Synthesis of the FirstSelective BRD7/9Bromodomain Inhibitor”的论文(Angew Chem Weinheim BergstrGer.2015,127(21):6315–6319)。
由于BRD9在癌症增殖中的作用，故人们对开发用于治疗癌症的BRD9抑制剂一直很感兴趣，包括见述于以下中的那些：WO 2014/114721；WO 2016/077375；WO 2016/077378；WO2016/139361；WO 2019/152440；Martin L.J.等人的标题为“Structure-Based Design ofan in Vivo Active Selective BRD9 Inhibitor”的论文(Journal of MedicinalChemistry 2016,59,4462-4475)；N.H.等人的标题为“Discovery of I-BRD9,a selectiveCell Active Chemical Probe for Bromodomain Containing Protein 9Inhibition”的论文(Journal of Medicinal Chemistry2015,59,1425-1439)；和Clack P.等人的论文(Angewandte Chemie,2015,127,6315-6319)。
还已报道了对具有E3连接酶结合部分和BRD9结合部分的蛋白质降解化合物的研究，其中BRD9结合配体与BRD9结合并将其带到连接酶以最终被蛋白酶体降解。参见例如WO2017/223452、WO 2019/152440、WO 2019/246423、WO 2019/246430、WO 2020/051235、WO2020/106915、WO 2020/160192、WO 2020/160193、WO 2020/160196和WO 2021/022163。
C4 Therapeutics,Inc.提交的描述能够与E3泛素连接酶和降解靶蛋白结合的化合物的专利申请包括：标题为“Targeted Protein Degradation”的WO/2020/132561；标题为“Spirocyclic Compounds”的WO/2019/204354；标题为“Degraders snd Degrons forTargeted Protein Degradation”的WO/2019/099868；标题为“N/O-Linked Degrons andDegronimers for Protein Degradation”的WO/2018/237026；标题为“Amine-Linked C3-Glutarimide Degronimers for Target Protein Degradation”的WO 2017/197051；标题为“Heterocyclic Degronimers for Target Protein Degradation”的WO 2017/197055；标题为“Spirocyclic Degronimers for Target Protein Degradation”的WO 2017/197036；标题为“C3-Carbon Linked Glutarimide Degronimers for Target ProteinDegradation”的WO 2017/197046titled；和标题为“Bromodomain Targeting Degronimersfor Target Protein Degradation”的WO 2017/197056。
描述蛋白质降解化合物的其他专利申请包括：
WO 2015/160845；WO 2016/105518；WO 2016/118666；WO 2016/149668；WO 2016/197032；WO 2016/197114；WO 2017/007612；WO 2017/011371；WO 2017/011590；WO 2017/030814；WO 2017/046036；WO 2017/176708；WO 2017/176957；WO 2017/180417；WO 2018/053354；WO 2018/071606；WO 2018/102067；WO 2018/102725；WO 2018/118598；WO 2018/119357；WO 2018/119441；WO 2018/119448；WO 2018/140809；WO2018/144649；WO 2018/119448；WO 2018/226542；WO 2019/023553；WO/2019/195201；WO2019/199816；和WO/2019/099926。
由于BRD9在癌症中发挥重要作用，故仍然需要治疗由BRD9介导的病症的新化合物和方法。
发明内容
提供了经由泛素蛋白酶体通路(UPP)降解含溴结构域的蛋白质9(BRD9)的化合物及其用途和制造。本发明提供了式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物，其包含与BRD9结合的“靶向配体”、E3连接酶结合部分(通常经由cereblon亚基)和共价连接靶向配体与E3连接酶结合部分的接头。在某些实施方案中，靶向配体为下文描述的式的B部分，接头为部分L，并且分子的其余部分为E3连接酶结合部分。
通过降解BRD9，本发明的化合物可抑制含有BRD9的BAF复合物的形成并因此减少细胞增殖。一些癌症比健康细胞更依赖于含有BRD9的BAF复合物，因此这些癌症，例如急性骨髓性白血病、横纹肌样肿瘤、滑膜肉瘤和多发性骨髓瘤，可用本发明的化合物有效地治疗。
本文提供的本发明的化合物或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的组合物可用于治疗由与靶向配体结合的选定靶蛋白例如含BRD9或替代地含BRD7或含另一BRD的蛋白质介导的病症。
在一些实施方案中，提供了一种治疗患有由BRD9介导的病症的患者的方法，该方法包括向患者(通常是人)施用有效量的一种或多种如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐，其任选地在药学上可接受的组合物中。
在一个方面，本发明提供了式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中
每个a独立地为0、1或2；
每个y独立地为0、1或2；
X3、X4、X5和X6选自N、CH和CR3，其中X3、X4、X5和X6中不超过3个为N；
X7为N或CH；
X8和X9在每次出现时各自独立地选自N和CH；其中X8或X9中的至少一个为CH；
或者X8和X9在每次出现时各自独立地选自N、CH或C-O-R7；其中X8或X9中的至少一个为CH或C-O-R7；
X12为具有1、2或3个独立地选自N、O和S的原子的5-元杂芳基基团，其中X12任选被1、2或3个独立地选自R3的基团所取代；
X17为芳基、杂芳基、双环或环烷基，其各自任选被1、2、3或4个独立地选自R3的取代基所取代；
Q1在每次出现时独立地选自NH、N(烷基)、N(卤代烷基)、CH2、O和S；其中如果X7为N，则Q1为CH2；
R在每次出现时独立地选自氢、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷基、氟、氯、溴、碘、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2和CBr3；
R1为氢、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基或环烷基；
R3在每次出现时独立地选自氢、羟基、烷氧基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、环烷基、氟、氯、溴和碘；
B选自B1和B2；
B1选自：
X10为C(R7)2、C(O)或O；
X11为杂环、杂芳基、芳基、环烷基或双环，X11基团中的每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代；
或者X10和X11一起形成
X13、X14、X15和X16独立地选自N、CH和CR4，其中X13、X14、X15和X16中不超过3个为N；
每个R4独立地选自氢、芳基、杂芳基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷基、氟、氯、溴和碘；
其中相邻碳原子上的两个R4基团可任选地结合形成稠合环，其中所述稠合环任选被1、2或3个R取代基所取代，因此，的非限制性实例包括 其中两个R4基团结合形成吡咯；
R5为氢、C1-C4烷基、烯丙基、巴豆基、烯基、炔基、卤代烷基或环烷基；
每个R6独立地选自氢、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、氟、氯、溴和碘；
每个R7独立地为氢或C1-C4烷基；
R8为氢、C1-C4烷基、烯丙基、巴豆基、烯基、炔基、卤代烷基或环烷基；和
L为二价连接基团，例如式LI的二价连接基团。
变量、取代基、实施方案和由这些组合产生的化合物的每个组合都被认为是明确且单独公开的，因为这样的描绘只是为了空间的便利而不旨在描述化合物的仅一个属或甚至一个亚属。
在某些实施方案中，L为下式的接头：
其中，
X1和X2在每次出现时独立地选自键、杂环、NR2、C(R2)2、O、C(O)和S；
R2在每次出现时独立地选自氢、烷基、脂族、杂脂族、杂环、芳基、杂芳基、-C(O)H、-C(O)OH、-C(O)烷基、-C(O)O烷基、-C(O)(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、-C(O)O(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、烯烃和炔烃；
R20、R21、R22、R23和R24在每次出现时独立地选自键、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR2-、-NR2C(O)-、-O-、-S-、-NR2-、-C(R40R40)-、-P(O)(OR26)O-、-P(O)(OR26)-、双环、烯烃、炔烃、卤代烷基、烷氧基、芳基、杂环、脂族、杂脂族、杂芳基、乳酸、乙醇酸和碳环；其每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R40的取代基所取代；
R26在每次出现时独立地选自氢、烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、烯烃、炔烃、芳基、杂芳基、杂环、脂族和杂脂族；和
R40在每次出现时独立地选自氢、烷基、烯烃、炔烃、氟、溴、氯、羟基、烷氧基、叠氮化物、氨基、氰基、-NH(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)2、-NHSO2(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)SO2烷基、-NHSO2(芳基、杂芳基或杂环)、-N(烷基)SO2(芳基、杂芳基或杂环)、-NHSO2烯基、-N(烷基)SO2烯基、-NHSO2炔基、-N(烷基)SO2炔基、卤代烷基、脂族、杂脂族、芳基、杂芳基、杂环和环烷基。
在一个方面，式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物为具有与BRD9靶向配体连接的E3泛素连接酶靶向配体的化合物，其功能是募集靶蛋白，通常经由含有cereblon的E3泛素连接酶进行降解。
在某些实施方案中，提供了一种治疗方法，其包括向有此需要的患者、例如人施用有效量的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物，其任选地在药学上可接受的载体中。例如，在一个实施方案中，将式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物施用于人以治疗癌症，例如滑膜肉瘤。在一个实施方案中，将本发明的化合物施用于患者以治疗滑膜肉瘤。在一个实施方案中，将本发明的化合物施用于患有SS18-SSX易位癌的患者。在一个实施方案中，将本发明的化合物施用于患有转移性滑膜肉瘤的患者。在一个实施方案中，将本发明的化合物施用于患有恶性横纹肌样肿瘤的患者。在一个实施方案中，将本发明的化合物施用于患有上皮样肉瘤的患者。
在某些实施方案中，靶向配体(B部分)结合BRD9并用于BRD9介导病症的治疗中。在其他实施方案中，靶向配体(B部分)结合不同的含溴结构域的蛋白质并用于BRD介导病症的治疗中。在一个替代的实施方案中，本发明的化合物用于非BRD介导病症的治疗中。
在某些实施方案中，本发明的化合物提供了优于用BRD9配体的传统治疗的多个优点，例如，本发明的BRD9降解化合物可a)在某些情况下克服抗性；b)通过破坏蛋白质来延长药物作用的动力学，因此即使在化合物被代谢之后也需要重新合成蛋白质；c)一次靶向蛋白质的所有功能而不是特定的催化活性或结合事件；d)通过包括所有可开发配体的蛋白质而不是其活性可能受小分子抑制剂、拮抗剂或激动剂影响的蛋白质来扩大药物靶点的数量；和/或e)由于小分子以催化方式起作用的可能性，故与抑制剂相比具有增加的效力。
在某些实施方案中，当单独施用靶向配体时，本发明的化合物将在低于靶向配体的GI50的GI50值下抑制细胞的生长或降低细胞的活力。
在某些实施方案中，本发明的化合物相对于已知的BRD9抑制剂提供了改进的功效和/或安全性。
在某些实施方案中，与单独的靶向配体部分相比，本发明的化合物在BRD9介导病症的治疗中功效更高。
在某些实施方案中，与单独的靶向配体部分相比，BRD9介导病症的治疗需要较低浓度的本文描述的化合物。
在某些实施方案中，与单独的靶向配体部分相比，本发明的化合物在BRD9介导病症的治疗中副作用较小。
在某些实施方案中，与单独的靶向配体部分相比，BRD9介导病症的治疗需要较低频率的本文描述的化合物的给药方案。
本发明的另一个方面提供了如本文所述的化合物，或者其对映异构体、非对映异构体或立体异构体，或者其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，或者药物组合物，用于制造用于抑制或预防由溴结构域蛋白质介导的病症或用于调节或减小含溴结构域的蛋白质的量的药剂。
本发明的另一个方面提供了如本文所述的化合物，或者其对映异构体、非对映异构体或立体异构体，或者其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，或者药物组合物，用于制造用于治疗或预防其中BRD9起作用的疾病的药剂。
在某些实施方案中，如本文所述的化合物可用于治疗包括异常细胞增殖的病症，如肿瘤或癌症，在其中，BRD9是致癌蛋白或异常细胞增殖通路的信号传导介质并且其降解减少异常细胞生长。
在某些实施方案中，当以有效量施用于患者时，如本文所述的化合物可用作治疗剂，以治疗可用沙利度胺、泊马度胺或来那度胺治疗的医学病症。
在某些实施方案中，式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物具有原子的至少一个所需同位素取代，以高于该同位素的天然丰度的量，即富集。
在一个实施方案中，式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物包含氘或多个氘原子。
本申请的其他特征和优点将从以下具体实施方式变得显而易见。
因此，本发明至少包括以下特征：
(a)如本文所述的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物，或其药学上可接受的盐或同位素衍生物(包括氘代衍生物)；
(b)用于治疗BRD9介导病症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文所述的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐；
(c)式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐或同位素衍生物(包括氘代衍生物)，其用于治疗由BRD9介导的病症，例如异常细胞增殖如肿瘤或癌症；
(d)有效量的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐在治疗有此需要的患有BRD9介导病症、例如异常细胞增殖如肿瘤或癌症的患者、通常人中的用途；
(e)式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐或同位素衍生物(包括氘代衍生物)在制造用于治疗BRD9介导病症、例如异常细胞增殖如肿瘤或癌症的药剂中的用途；
(f)药物组合物，其包含有效治疗患者的量的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐、同位素衍生物；和任选地药学上可接受的载体或稀释剂；
(g)如本文所述的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物，作为对映异构体或非对映异构体(根据相关情况(as relevant))的混合物，包括作为外消旋物；
(h)如本文所述的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物，呈对映异构体或非对映异构体(根据相关情况)富集的形式，包括分离的对映异构体或非对映异构体(即，纯度大于85％、90％、95％、97％或99％)；和
(i)用于制备治疗产品的方法，所述治疗产品含有有效量的如本文所述的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐。
附图说明
图1为用化合物172治疗后的肿瘤体积图，证明了在滑膜肉瘤异种移植模型中的强作用。x-轴为以天为单位量度的治疗开始后时间，y-轴为以mm3为单位量度的肿瘤体积。
图2为化合物172的蛋白质降解图。x-轴为以纳摩尔(nM)为单位量度的剂量，y-轴为通过HiBiT发光读数量度的每种相应蛋白质BRD9、BRD7和BRD4的蛋白质降解水平。
图3为经由蛋白质印迹示意在化合物172作用下Yamato-SS细胞中多种蛋白质的剂量反应降解的图，Yamato-SS细胞是一种源自滑膜肉瘤的人细胞系(Stem Cells2010；28:1119-1131)。
图4为汇合图，展示了在化合物172作用下Yamato-SS细胞中生长抑制随时间的变化。x-轴为以天为单位量度的时间，y轴为以对照的百分数量度的汇合。
图5为展示在Yamato-SS异种移植肿瘤模型中化合物172的药代动力学(PK)的图。x-轴为以小时为单位量度的时间，y-轴为以ng/mL为单位量度的血浆浓度。
图6为展示在Aska-SS异种移植肿瘤模型中化合物172的药代动力学的图。x-轴为以小时为单位量度的时间，y-轴为以ng/mL为单位量度的血浆浓度。Aska-SS是一种源自滑膜肉瘤的人细胞系(Stem Cells 2010；28:1119-1131)。
图7为示出在Yamato-SS异种移植模型中肿瘤体积对不同浓度的化合物172的剂量依赖性反应的图，证明了其在滑膜肉瘤模型中的剂量依赖性功效。x-轴为以天为单位量度的时间，y-轴为以mm3为单位量度的肿瘤体积。
图8为示出在Yamato-SS异种移植模型中小鼠体重变化对不同浓度的化合物172的剂量依赖性反应的图。x-轴为以天为单位量度的时间，y-轴为以百分数量度的体重变化。
图9为展示在SA13412滑膜肉瘤PDX-模型中化合物172的耐受性的图。x-轴为以天为单位量度的治疗开始后天数，y-轴为以百分数量度的体重变化。
图10A和10B为展示化合物172的临床前缩放(scaling)剂量预测模型的图，用于预计人的未结合清除率、半衰期和体积减小值。每个图的x-轴为以kg为单位量度的体重。左上的y-轴为以mL/hr为单位量度的清除率；右上的y-轴为以mL/hr为单位量度的未结合清除率；左下的y-轴为以mL为单位量度的体积，右下的y-轴为以mL为单位量度的未结合体积。
图11为展示在化合物176作用下BRD9蛋白质的选择性降解的图。x-轴为以纳摩尔(nM)为单位量度的剂量，y-轴为通过HiBiT发光读数量度的每种相应蛋白质BRD9、BRD7和BRD4的蛋白质降解水平。
图12为示出在Yamato-SS异种移植模型中用不同浓度的化合物172时的剂量依赖性体内BRD9降解的条形图。x-轴为分别以mg/kg和小时为单位量度的浓度和时间，y-轴为归一化浓度。
图13为示出在Aska-SS异种移植模型中用不同浓度的化合物172时的剂量依赖性体内BRD9降解的条形图。x-轴为分别以mg/kg和小时为单位量度的浓度和时间，y-轴为归一化浓度。
图14为比较单剂量的化合物172之后不同时间点时滑膜肉瘤肿瘤中剩余的BRD9水平的条形图。x-轴为以小时为单位量度的时间，y-轴为剩余的蛋白质百分数。
图15为示意不同浓度的化合物176的跨代表性细胞环境的内源性剂量降解的图。左上代表恶性人横纹肌样肿瘤(A204)，右上代表人滑膜肉瘤(HS-SY-II)，左下代表人软组织肉瘤(SW982，BAF野生型)，右下代表滑膜肉瘤(Yamato SS)，全部经由蛋白质印迹。
图16为不同浓度的化合物176的汇合图。BAF扰动Yamato-SS模型中诱导的选择性生长抑制的降解的单剂量长期生长评价。x-轴为以天为单位量度的时间，y轴为以对照的百分数量度的汇合。
图17为不同浓度的化合物176的汇合图，证明了BAF野生型滑膜肉瘤细胞(SW982)中生长抑制的缺乏。x-轴为以天为单位量度的时间，y轴为以对照的百分数量度的汇合。
图18为示意在滑膜肉瘤CDX(Yamato-SS)模型中不同浓度(PO QD)的化合物176的药代动力学(PK)的图。x轴为以小时为单位量度的时间，y轴为以纳克/毫升(ng/mL)为单位量度的肿瘤PK。
图19为示意在不同浓度(PO QD)的化合物176作用下滑膜肉瘤肿瘤(肿瘤PD)中BRD9的蛋白质降解的图。x轴为以小时为单位量度的时间，y轴为以mg/kg PO QD为单位量度的化合物176的浓度。
图20为示意在不同浓度PO QD的化合物176作用下滑膜肉瘤肿瘤(肿瘤PD)中BRD9的蛋白质降解的图。x轴为以小时为单位量度的时间，y轴为以百分数量度的按媒介物和粘着斑蛋白归一化的剩余BRD9。
图21为展示在滑膜肉瘤CDX模型(Yamato SS)中不同浓度的化合物176的功效的图。x轴为以天为单位量度的治疗，y轴为以立方毫米(mm3)为单位量度的肿瘤体积+SEM。
图22为展示在滑膜肉瘤CDX模型(Yamato SS)中不同浓度的化合物176的耐受性的图。x轴为以天为单位量度的治疗，y轴为以百分数量度的体重变化。
图23为展示在滑膜肉瘤PDX模型(SA13412)中不同浓度的化合物176的功效的图。x轴为以天为单位量度的治疗，y轴为以立方毫米(mm3)为单位量度的肿瘤体积+SEM。
图24为展示在滑膜肉瘤PDX模型(SA13412)中不同浓度的化合物176的耐受性的图。x轴为以天为单位量度的治疗，y轴为以百分数量度的体重变化。
图25提供了本发明的代表性式。
具体实施方式
I.定义
使用标准命名法描述化合物。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域技术人员通常所理解的相同的含义。
本文描述的任何式的化合物可呈外消旋物、对映异构体、对映异构体的混合物、非对映异构体、非对映异构体的混合物、互变异构体、N-氧化物异构体的形式；如旋转异构体，除非上下文明确排除，否则就如同每一个都被明确描述。
术语“一个/一种(a/an)”不表示数量的限制，而是表示存在至少一个所提及的项目。术语“或”指的是“和/或”。除非本文另有指示，否则值的范围的记载仅旨在用作一个一个单独地提及落入该范围内的每个单独的值的速记方法，并且每个单独的值并入本说明书中就好像其在本文中被一个一个单独地记载一样。所有范围的端点均包括在此范围内并可独立地组合。除非本文另有指示或与上下文明显矛盾，否则本文描述的所有方法都可以合适的顺序进行。除非另有声明，否则实例或示例性语言(例如，“如”)的使用仅旨在更好地示意本发明而不对本发明的范围构成限制。
本发明包括式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物，其具有原子的至少一个所需同位素取代，以高于该同位素的天然丰度的量，即富集。同位素为原子序数相同但质量数不同的原子，即质子数相同但中子数不同的原子。
可结合到本发明的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，分别如2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、18F、31P、32P、35S、36Cl和125I。在一个非限制性实施方案中，同位素标记的化合物可用于代谢研究(用例如14C)、反应动力学研究(用例如2H或3H)、检测或成像技术如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，包括药物或底物组织分布测定，或用于患者的放射治疗。特别地，18F标记的化合物对于PET和SPECT研究可能特别理想。本发明的同位素标记的化合物及其前药通常可通过实施方案中或实施例中公开的程序和下文所述的制备方法通过用容易获得的同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂来制备。
同位素取代，例如氘取代，可以是部分的或完全的。部分氘取代指的是至少一个氢被氘取代。在某些实施方案中，在任何目标位置处一种同位素以90、95或99％或更多地富集于该同位素。在一个非限制性实施方案中，氘以90、95或99％富集于所需的位置处。
在一个非限制性实施方案中，可在式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的任何化合物中提供氘原子对氢原子的取代。在一个非限制性实施方案中，氘原子对氢原子的取代发生在一个或多个选自本文描述的任何R或变量、接头和靶向配体的基团内。例如，当任何基团为或含有(例如通过取代)甲基、乙基或甲氧基时，烷基残基可以是氘代的(在非限制性实施方案中，CDH2、CD2H、CD3、CH2CD3、CD2CD3、CHDCH2D、CH2CD3、CHDCHD2、OCDH2、OCD2H或OCD3等)。在某些其他实施方案中，当两个取代基组合形成环时，未取代的碳可以是氘代的。
本发明的化合物可与溶剂(包括水)形成溶剂化物。因此，在一个非限制性实施方案中，本发明包括化合物的溶剂化形式。术语“溶剂化物”是指本发明的化合物(包括其盐)与一种或多种溶剂分子的分子复合物。溶剂的非限制性实例为水、乙醇、异丙醇、二甲基亚砜、丙酮和其他常见的有机溶剂。术语“水合物”是指包含本发明的化合物和水的分子复合物。根据本发明的药学上可接受的溶剂化物包括其中溶剂可被同位素取代(例如，D2O、d6-丙酮、d6-DMSO(二甲基亚砜))的那些。溶剂化物可呈液体或固体形式。
不在两个字母或符号之间的破折号(“-”)用于指示取代基的连接点。例如，-(C＝O)NH2通过羰基(C＝O)基团的碳连接。
“烷基”为支链或直链饱和脂族烃基团。在一个非限制性实施方案中，烷基基团含有1至约12个碳原子，更通常1至约6个碳原子或1至约4个碳原子。在一个非限制性实施方案中，烷基含有1至约8个碳原子。在某些实施方案中，烷基为C1-C2、C1-C3、C1-C4、C1-C5或C1-C6。如本文所用的特定范围指示具有所述范围的每一成员的烷基基团，所述范围的每一成员被描述为独立的物质。例如，如本文所用的术语C1-C6烷基指示具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链烷基基团并且旨在意指这些中的每一个被描述为独立的物质并因此每个子集都被认为是单独披露的。例如，如本文所用的术语C1-C4烷基指示具有1、2、3或4个碳原子的直链或支链烷基基团并且旨在意指这些中的每一个被描述为独立的物质。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、叔戊基、新戊基、正己基、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、2,2-二甲基丁烷和2,3-二甲基丁烷。在一个替代的实施方案中，烷基基团任选被取代。术语“烷基”还涵盖环烷基或碳环状基团。例如，当使用包括“alk”的术语时，“环烷基”或“碳环状”可被认为是该定义的一部分，除非上下文明确排除。例如但不限于，术语烷基、烷氧基、卤代烷基等均可被认为包括烷基的环状形式，除非上下文明确排除。
在一个实施方案中，“烷基”为C1-C10烷基、C1-C9烷基、C1-C8烷基、C1-C7烷基、C1-C6烷基、C1-C5烷基、C1-C4烷基、C1-C3烷基或C1-C2烷基。
在一个实施方案中，“烷基”具有一个碳。
在一个实施方案中，“烷基”具有两个碳。
在一个实施方案中，“烷基”具有三个碳。
在一个实施方案中，“烷基”具有四个碳。
在一个实施方案中，“烷基”具有五个碳。
在一个实施方案中，“烷基”具有六个碳。
“烷基”的非限制性实例包括：甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基。
“烷基”的另外的非限制性实例包括：异丙基、异丁基、异戊基和异己基。
“烷基”的另外的非限制性实例包括：仲丁基、仲戊基和仲己基。
“烷基”的另外的非限制性实例包括：叔丁基、叔戊基和叔己基。
“烷基”的另外的非限制性实例包括：新戊基、3-戊基和活性戊基。
在一个替代的实施方案中，“烷基”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
在一个实施方案中，“环烷基”为C3-C8环烷基、C3-C7环烷基、C3-C6环烷基、C3-C5环烷基、C3-C4环烷基、C4-C8环烷基、C5-C8环烷基或C6-C8环烷基。
在一个实施方案中，“环烷基”具有三个碳。
在一个实施方案中，“环烷基”具有四个碳。
在一个实施方案中，“环烷基”具有五个碳。
在一个实施方案中，“环烷基”具有六个碳。
在一个实施方案中，“环烷基”具有七个碳。
在一个实施方案中，“环烷基”具有八个碳。
在一个实施方案中，“环烷基”具有九个碳。
在一个实施方案中，“环烷基”具有十个碳。
“环烷基”的非限制性实例包括：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基和环癸基。
“环烷基”的另外的非限制性实例包括二氢茚和四氢萘，其中每个基团的连接点在环烷基环上。
例如：为“环烷基”基团。
然而，为“芳基”基团。
在一个替代的实施方案中，“环烷基”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
“烯基”为具有一个或多个碳-碳双键的直链或支链脂族烃基团，所述碳-碳双键可出现在沿链的稳定点处。如本文所用的特定范围指示具有所述范围的每一成员的烯基基团，所述范围的每一成员被描述为独立的物质，如上文针对烷基部分所描述。烯基基团的实例包括但不限于乙烯基、丙烯基、烯丙基、丙烯基、丁烯基和4-甲基丁烯基。术语“烯基”还体现了“顺式”和“反式”烯基几何形状，或替代地，“E”和“Z”烯基几何形状。在一个替代的实施方案中，烯基基团任选被取代。术语“烯基”还涵盖具有至少一个不饱和点的环烷基或环烷基基团。在一个替代的实施方案中，“烯基”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
“炔基”为具有一个或多个碳-碳三键的支链或直链脂族烃基团，所述碳-碳三键可出现在沿链的任何稳定点处。如本文所用的特定范围指示具有所述范围的每一成员的炔基基团，所述范围的每一成员被描述为独立的物质，如上文针对烷基部分所描述。炔基的实例包括但不限于乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、1-己炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基和5-己炔基。在一个替代的实施方案中，炔基基团任选被取代。术语“炔基”还涵盖具有至少一个三键的环烷基或环烷基基团。在一个替代的实施方案中，“炔基”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
“亚烷基”为二价饱和烃。例如，亚烷基可为1、2、3、4、5、6、7至8个碳部分、1至6个碳部分或指定的碳原子数，例如C1-C2亚烷基、C1-C3亚烷基、C1-C4亚烷基、C1-C5亚烷基或C1-C6亚烷基。
“亚烯基”为具有至少一个碳-碳双键的二价烃。例如，亚烯基可为2至8个碳部分、2至6个碳部分或指定的碳原子数，例如C2-C4亚烯基。
“亚炔基”为具有至少一个碳-碳三键的二价烃。例如，亚炔基可为2至8个碳部分、2至6个碳部分或指定的碳原子数，例如C2-C4亚炔基。
“卤素(halo/halogen)”独立地指氟、氯、溴或碘。
“卤代烷基”为被1个或多个上述卤素原子、至多最大许可卤素原子数所取代的支链或直链烷基基团。卤代烷基的实例包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基和二氯丙基。“全卤代烷基”意指所有氢原子均被替换为卤素原子的烷基基团。实例包括但不限于三氟甲基和五氟乙基。
在一个实施方案中，“卤代烷基”为C1-C10卤代烷基、C1-C9卤代烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C7卤代烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C5卤代烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C3卤代烷基和C1-C2卤代烷基。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有一个碳。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有一个碳和一个卤素。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有一个碳和两个卤素。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有一个碳和三个卤素。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有两个碳。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有三个碳。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有四个碳。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有五个碳。
在一个实施方案中，“卤代烷基”具有六个碳。
“卤代烷基”的非限制性实例包括：
“卤代烷基”的另外的非限制性实例包括：
“卤代烷基”的另外的非限制性实例包括：
“卤代烷基”的另外的非限制性实例包括：
“链”指示所有其他长链或短链或者长链和短链均可认为侧挂于此的线形链。在两条或更多条链可同等地视为是主链的情况下，“链”是指导致分子的最简单表示的那一条。
“卤代烷氧基”指示通过氧桥(醇基团的氧)连接的如本文所述的卤代烷基基团。
“杂环烷基”为被如本文所述的杂环代基团所取代的如本文所述的烷基基团。
“芳基烷基”为被如本文所述的芳基基团所取代的如本文所述的烷基基团。
“芳基烷基”的非限制性实例包括：
在一个实施方案中，“芳基烷基”为
在一个实施方案中，“芳基烷基”是指被芳基基团所取代的2碳烷基基团。
“芳基烷基”的非限制性实例包括：
在一个实施方案中，“芳基烷基”是指被芳基基团所取代的3碳烷基基团。
“杂芳基烷基”为被如本文所述的杂芳基基团所取代的如本文所述的烷基基团。
如本文所用，“芳基”是指在芳族环系(“C6–14芳基”)中提供有6-14个环碳原子和零个杂原子的单环状或多环状(例如，双环状或三环状)4n+2芳族环系(例如，在环状阵列中共用6、10或14个π电子)的基团。在一些实施方案中，芳基基团具有6个环碳原子(“C6芳基”；例如，苯基)。在一些实施方案中，芳基基团具有10个环碳原子(“C10芳基”；例如，萘基如1-萘基和2-萘基)。在一些实施方案中，芳基基团具有14个环碳原子(“C14芳基”；例如，蒽基)。“芳基”还包括其中如上文所定义的芳基环与一个或多个碳环基或杂环基团稠合的环系，其中所述基团或连接点位于芳基环上，并且在这样的情况下，碳原子数仍然指定芳基环系中的碳原子数。所述一个或多个稠合的碳环基或杂环基团可为4至7或5至7元饱和或部分不饱和碳环基或杂环基团，其任选含有1、2或3个独立地选自氮、氧、磷、硫、硅和硼的杂原子以形成例如3,4-亚甲基二氧基苯基基团。在一个非限制性实施方案中，芳基基团是侧挂的。侧挂环的一个实例为被苯基基团所取代的苯基基团。在一个替代的实施方案中，芳基基团任选如上所述被取代。在某些实施方案中，芳基基团为未被取代的C6-14芳基。在某些实施方案中，芳基基团为被取代的C6-14芳基。芳基基团可任选被一个或多个官能团所取代，所述官能团包括但不限于卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、卤代烷基、芳基、杂芳基和杂环代。
在一个实施方案中，“芳基”为6碳芳族基团(苯基)。
在一个实施方案中，“芳基”为10碳芳族基团(萘基)。
在一个实施方案中，“芳基”为与杂环稠合的6碳芳族基团，其中连接点为芳基环。“芳基”的非限制性实例包括二氢吲哚、四氢喹啉、四氢异喹啉和二氢苯并呋喃，其中每个基团的连接点在芳族环上。
例如，为“芳基”基团。
然而，为“杂环”基团。
在一个实施方案中，“芳基”为与环烷基稠合的6碳芳族基团，其中连接点为芳基环。“芳基”的非限制性实例包括二氢茚和四氢萘，其中每个基团的连接点在芳族环上。
例如，为“芳基”基团。
然而，为“环烷基”基团。
在一个替代的实施方案中，“芳基”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
术语“杂环基”、“杂环”和“杂环代”包括饱和的和部分饱和的含杂原子的环基团，其中杂原子可选自氮、硫和氧。杂环状环包括单环状3、4、5、6、7、8、9或10元环，以及5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16元双环状环系(其可包括桥接稠合和螺稠合双环状环系)。其不包括含有-O-O-、-O-S-或-S-S-部分的环。所述“杂环”基团可任选被例如1、2、3、4个或更多个取代基所取代，所述取代基包括但不限于羟基、Boc、卤素、卤代烷基、氰基、烷基、芳烷基、氧代、烷氧基和氨基。饱和杂环代基团的实例包括含有1、2、3或4个氮原子的饱和3、4、5或6元杂单环状基团[例如，吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、吡咯啉基、哌嗪基]；含有1或2个氧原子和1、2或3个氮原子的饱和3、4、5或6元杂单环状基团[例如，吗啉基]；含有1或2个硫原子和1、2或3个氮原子的饱和3、4、5或6元杂单环状基团[例如，噻唑烷基]。部分饱和的杂环基团的实例包括但不限于二氢噻吩基、二氢吡喃基、二氢呋喃基和二氢噻唑基。部分饱和的和饱和的杂环代基团的实例包括但不限于吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、吡咯啉基、吡唑烷基、哌嗪基、吗啉基、四氢吡喃基、噻唑烷基、二氢噻吩基、2,3-二氢-苯并[l,4]二噁烷基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并呋喃基、异色满基、色满基、1,2-二氢喹啉基、1,2,3,4-四氢-异喹啉基、1,2,3,4-四氢-喹啉基、2,3,4,4a,9,9a-六氢-lH-3-氮杂-芴基、5,6,7-三氢-l,2,4-三唑并[3,4-a]异喹啉基、3,4-二氢-2H-苯并[l,4]噁嗪基、苯并[l,4]二噁烷基、2,3-二氢-lH-lλ’-苯并[d]异噻唑-6-基、二氢吡喃基、二氢呋喃基、异喹啉-1(2H)-酮基、苯并[d]噁唑-2(3H)-酮基、1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮基、苯并[d]噻唑-2(3H)-酮基、1,2-二氢-3H-吡唑-3-酮基、2(1H)-吡啶酮基、2-哌嗪酮基、二氢吲哚基和二氢噻唑基。
术语“杂环基”、“杂环”和“杂环代”基团还包括其中杂环基团与芳基或杂芳基基团稠合/缩合的部分：如含有1、2、3、4或5个氮原子的不饱和缩合杂环基团，例如，二氢吲哚、异二氢吲哚；含有1或2个氧原子和1、2或3个氮原子的不饱和缩合杂环基团；含有1或2个硫原子和1、2或3个氮原子的不饱和缩合杂环基团；和含有1或2个氧或硫原子的饱和、部分不饱和和不饱和缩合杂环基团。
在一个实施方案中，“杂环”是指具有一个氮和3、4、5、6、7或8个碳原子的环状环。
在一个实施方案中，“杂环”是指具有一个氮和一个氧及3、4、5、6、7或8个碳原子的环状环。
在一个实施方案中，“杂环”是指具有两个氮和3、4、5、6、7或8个碳原子的环状环。
在一个实施方案中，“杂环”是指具有一个氧和3、4、5、6、7或8个碳原子的环状环。
在一个实施方案中，“杂环”是指具有一个硫和3、4、5、6、7或8个碳原子的环状环。
“杂环”的非限制性实例包括氮杂环丙烷、环氧乙烷、环硫乙烷、氮杂环丁烷、1,3-二氮杂环丁烷、氧杂环丁烷和硫杂环丁烷。
“杂环”的另外的非限制性实例包括吡咯烷、3-吡咯啉、2-吡咯啉、吡唑烷和咪唑烷。
“杂环”的另外的非限制性实例包括四氢呋喃、1,3-二氧戊环、四氢噻吩、1,2-氧硫杂环戊烷和1,3-氧硫杂环戊烷。
“杂环”的另外的非限制性实例包括哌啶、哌嗪、四氢吡喃、1,4-二噁烷、噻烷、1,3-二噻烷、1,4-二噻烷、吗啉和硫代吗啉。
“杂环”的另外的非限制性实例包括二氢吲哚、四氢喹啉、四氢异喹啉和二氢苯并呋喃，其中每个基团的连接点在杂环环上。
例如，为“杂环”基团。
然而，为“芳基”基团。
“杂环”的非限制性实例还包括：
“杂环”的另外的非限制性实例包括：
“杂环”的另外的非限制性实例包括：
“杂环”的非限制性实例还包括：
“杂环”的非限制性实例还包括：
“杂环”的另外的非限制性实例包括：
“杂环”的另外的非限制性实例包括：
在一个替代的实施方案中，“杂环”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
术语“杂芳基”表示单环状或多环状(例如，双环状或三环状)4n+2芳族环系(例如，在环状阵列中共用6、10或14个π电子)和1、2、3、4、5或6个独立地选自O、N和S的杂原子，其中一个或多个环氮和硫原子任选被氧化，并且一个或多个氮原子任选被季铵化。实例包括但不限于含有1、2、3或4个氮原子的不饱和5至6元杂单环基基团，如吡咯基、咪唑基、吡唑基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基[例如，4H-l,2,4-三唑基、1H-1,2,3-三唑基、2H-l,2,3-三唑基]；含有氧原子的不饱和5-或6-元杂单环状基团，例如，吡喃基、2-呋喃基、3-呋喃基等；含有硫原子的不饱和5-或6-元杂单环状基团，例如，2-噻吩基、3-噻吩基等；含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的不饱和5-或6-元杂单环状基团，例如，噁唑基、异噁唑基、噁二唑基[例如，1,2,4-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基]；含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的不饱和5或6-元杂单环状基团，例如，噻唑基、噻二唑基[例如，1,2,4-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基]。另外的实例包括8-、9-或10-元杂芳基双环状基团如吲唑基、吲哚基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、苯并咪唑基、4(3H)-喹唑啉酮基、喹啉基、异喹啉基、异吲哚基、噻吩并噻吩基、吲嗪基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、异苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、香豆素基、噌啉基和三唑并吡啶基。
在一个实施方案中，“杂芳基”为含有1、2、3或4个氮原子的5元芳族基团。
5元“杂芳基”基团的非限制性实例包括吡咯、呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三唑、四唑、异噁唑、噁唑、噁二唑、噁三唑、异噻唑、噻唑、噻二唑和噻三唑。
5元“杂芳基”基团的另外的非限制性实例包括：
在一个实施方案中，“杂芳基”为含有1、2或3个氮原子的6元芳族基团(即，吡啶基、哒嗪基、三嗪基、嘧啶基和吡嗪基)。
具有1或2个氮原子的6元“杂芳基”基团的非限制性实例包括：
在一个实施方案中，“杂芳基”为含有1或2个选自氮、氧和硫的原子的9元双环状芳族基团。
为双环状的“杂芳基”基团的非限制性实例包括吲哚、苯并呋喃、异吲哚、吲唑、苯并咪唑、氮杂吲哚、氮杂吲唑、嘌呤、异苯并呋喃、苯并噻吩、苯并异噁唑、苯并异噻唑、苯并噁唑和苯并噻唑。
为双环状的“杂芳基”基团的另外的非限制性实例包括：
为双环状的“杂芳基”基团的另外的非限制性实例包括：
为双环状的“杂芳基”基团的另外的非限制性实例包括：
在一个实施方案中，“杂芳基”为含有1或2个选自氮、氧和硫的原子的10元双环状芳族基团。
为双环状的“杂芳基”基团的非限制性实例包括喹啉、异喹啉、喹喔啉、酞嗪、喹唑啉、噌啉和萘啶。
为双环状的“杂芳基”基团的另外的非限制性实例包括：
在一个替代的实施方案中，“杂芳基”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
术语“双环”是指其中两个环稠合在一起并且每个环独立地选自碳环、杂环、芳基和杂芳基的环系。双环基团的非限制性实例包括：
当在二价残基如接头或X11的上下文中使用术语“双环”时，连接点可在单独的环上或在同一个环上。在某些实施方案中，两个连接点在同一个环上。在某些实施方案中，两个连接点在不同的环上。二价双环基团的非限制性实例包括：
在一个替代的实施方案中，“双环”“任选”被1、2、3或4个取代基“所取代”。
术语“任选被取代的”表示本文中的基团被包括但不限于以下的部分的取代：C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C12环烷基、C3-C12环烯基、C1–C12杂环烷基、C3-C12杂环烯基、C1-C10烷氧基、芳基、芳氧基、杂芳基、杂芳氧基、氨基、C1-C10烷基氨基、C1–C10二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、C1-C10烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、C1-C10烷基亚氨基、芳基亚氨基、C1-C10烷基磺酰亚氨基、芳基磺酰亚氨基、羟基、卤素、硫、C1-C10烷硫基、芳硫基、C1-C10烷基磺酰基、芳基磺酰基、酰基氨基、氨基酰基、氨基硫代酰基、脒基、胍、脲基、氰基、硝基、叠氮基、酰基、硫代酰基、酰氧基、羧基和羧酸酯。
在一个替代的实施方案中，任何合适的基团可以存在于“被取代的”或“任选被取代的”位置上(如果表明形成稳定的分子并满足本发明的所需目的的话)并包括但不限于例如卤素(其可独立地为F、Cl、Br或I)；氰基；羟基；硝基；叠氮基；链烷酰基(如C2-C6链烷酰基基团)；甲酰胺；烷基、环烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳氧基如苯氧基；硫代烷基，包括具有一个或多个硫醚键的那些；烷基亚磺酰基；烷基磺酰基基团，包括具有一个或多个磺酰基键的那些；氨基烷基，包括具有多于一个N原子的基团；芳基(例如，苯基、联苯基、萘基等，每个环是取代或未取代的)；具有例如1至3个单独的或稠合的环和6至约14或18个环碳原子的芳基烷基，其中苄基为示例性的芳基烷基基团；芳基烷氧基，例如具有1至3个单独的或稠合的环，其中苄氧基为示例性的芳基烷氧基基团；或具有1至3个具有一个或多个N、O或S原子的单独的或稠合的环的饱和或部分不饱和杂环，或具有1至3个具有一个或多个N、O或S原子的单独的或稠合的环的杂芳基，例如香豆素基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、三嗪基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基和吡咯烷基。这样的基团可例如被羟基、烷基、烷氧基、卤素和氨基进一步取代。
在某些实施方案中，“任选被取代的”包括一个或多个独立地选自以下的取代基：卤素、羟基、氨基、氰基、-CHO、-COOH、-CONH2、烷基(包括C1-C6烷基)、烯基(包括C2-C6烯基)、炔基(包括C2-C6炔基)、-C1-C6烷氧基、链烷酰基(包括C2-C6链烷酰基)、C1-C6烷基酯、(单-和二-C1-C6烷基氨基)C0-C2烷基、卤代烷基(包括C1-C6卤代烷基)、羟基C1-C6烷基、酯、氨基甲酸酯、脲、磺酰胺、-C1-C6烷基(杂环代)、C1-C6烷基(杂芳基)、-C1-C6烷基(C3-C7环烷基)、O-C1-C6烷基(C3-C7环烷基)、B(OH)2、磷酸酯、膦酸酯和卤代烷氧基(包括C1-C6卤代烷氧基)。
在一些实施方案中，“被取代的”或“任选被取代的”上存在的合适基团是二价的，包括但不限于氧代(＝O)、＝S、＝CH2等。“被取代的”或“任选被取代的”位置上的合适基团可以是单价的、二价的或三价的，使得其形成稳定的分子并满足本发明的所需目的。
在一个实施方案中，可被1、2、3或4个取代基所取代的本文描述的基团被一个取代基所取代。
在一个实施方案中，可被1、2、3或4个取代基所取代的本文描述的基团被两个取代基所取代。
在一个实施方案中，可被1、2、3或4个取代基所取代的本文描述的基团被三个取代基所取代。
在一个实施方案中，可被1、2、3或4个取代基所取代的本文描述的基团被四个取代基所取代。
“脂族”是指饱和或不饱和的直链、支链或环状烃。“脂族”在本文中旨在包括但不限于烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基和环炔基部分，并因此并入了这些定义中的每一个。在一个实施方案中，“脂族”用于指示具有1-20个碳原子的那些脂族基团。脂族链可以是例如单不饱和的、二不饱和的、三不饱和的或多不饱和的，或可为炔基。不饱和脂族基团可为顺式或反式构型。在一个实施方案中，脂族基团含有1至约12个碳原子，更通常1至约6个碳原子或1至约4个碳原子。在一个实施方案中，脂族基团含有1至约8个碳原子。在某些实施方案中，脂族基团为C1-C2、C1-C3、C1-C4、C1-C5或C1-C6。如本文所用的特定范围指示具有所述范围的每一成员的脂族基团，所述范围的每一成员被描述为独立的物质。例如，如本文所用的术语C1-C6脂族指示具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链烷基、烯基或炔基基团并且旨在意指这些中的每一个被描述为独立的物质。例如，如本文所用的术语C1-C4脂族指示具有1、2、3或4个碳原子的直链或支链烷基、烯基或炔基基团并且旨在意指这些中的每一个被描述为独立的物质。在一个实施方案中，脂族基团被一个或多个导致形成稳定部分的官能团所取代。
术语“杂脂族”是指在链中含有至少一个杂原子的脂族部分，例如胺、羰基、羧基、氧代、硫代、磷酸酯、膦酸酯、氮、磷、硅或硼原子，代替碳原子。在一个实施方案中，唯一的杂原子为氮。在一个实施方案中，唯一的杂原子为氧。在一个实施方案中，唯一的杂原子为硫。“杂脂族”在本文中旨在包括但不限于杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂环烷基、杂环烯基和杂环炔基部分。在一个实施方案中，“杂脂族”用于指示具有1-20个碳原子的杂脂族基团(环状的、无环的、取代的、未取代的、支链的或无支链的)。在一个实施方案中，杂脂族基团任选以导致形成稳定部分的方式被取代。杂脂族部分的非限制性实例为聚乙二醇、聚亚烷基二醇、酰胺、聚酰胺、聚丙交酯、聚乙交酯、硫醚、醚、烷基-杂环-烷基、-O-烷基-O-烷基、烷基-O-卤代烷基等。
“剂型”意指活性剂的施用单位。剂型的实例包括片剂、胶囊剂、注射剂、混悬剂、液体剂、乳剂、植入物、颗粒剂、球剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂、可吸入剂型、透皮剂型、含服剂、舌下剂、局部剂、凝胶剂、粘膜剂等。“剂型”还可包括植入物，例如光学植入物。
如本文所用，“有效量”指的是提供治疗或预防益处的量。
如本文所用，“内源性的”是指来自生物体、细胞、组织或系统或在其内部产生的任何材料。
如本文所用，术语“外源性的”是指从生物体、细胞、组织或系统外部引入或在其外部产生的任何材料。
如本文所用，术语“调节”指的是与不存在治疗或化合物的情况下患者的反应水平相比和/或与其他方面相同但未经治疗的患者的反应水平相比介导患者中反应水平可检测的增加或减少。该术语涵盖扰动和/或影响天然信号或反应，从而在患者、优选人中介导有益的治疗反应。
药物组合物的“肠胃外”施用包括例如皮下(s.c.)、静脉内(i.v.)、肌肉内(i.m.)、胸骨内注射或输注技术。
如本文所用，术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”可互换使用，并且是指由通过肽键共价连接的氨基酸残基组成的化合物。蛋白质或肽必须含有至少两个氨基酸，并且蛋白质或肽序列中存在的最大氨基酸数量通常与自然界中发现的至多的氨基酸数量相当。多肽包括包含通过肽键彼此连结的两个或更多个氨基酸的任何肽或蛋白质。如本文所用，该术语既指短链，其在本领域中也通常称为例如肽、寡肽和寡聚体，也指更长的链，其在本领域中通常称为蛋白质，具有许多类型。“多肽”包括例如生物活性片段、基本上同源的多肽、寡肽、同二聚体、异二聚体、多肽的变体、经修饰的多肽、衍生物、类似物、融合蛋白等。多肽包括天然肽、重组肽、合成肽或其组合。
如本文所用，术语“治疗”疾病指的是降低患者经历的疾病或病症的至少一种体征或症状的频率或严重性(即姑息性治疗)或减少该疾病或病症的病因或影响(即疾病改善治疗)。
贯穿本公开，本发明的各个方面可以范围格式呈现。应理解，以范围格式描述仅是为了方便而不应理解为对本发明的范围的限制。范围的描述应视为已具体公开了所有可能的子范围以及该范围内的各个数值。例如，范围如1至6的描述应视为已具体公开了子范围如1至3、1至4、1至5、2至4、2至6、3至6等，以及该范围内的各个数，例如1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。无论范围的广度如何，这都适用。
如本文所用，“药物组合物”为包含至少一种活性剂和至少一种其他物质如载体的组合物。“药物组合”为至少两种活性剂的组合，它们可组合在单一剂型中或一起提供在单独的剂型中并附有活性剂将一起用于治疗本文描述的任何病症的说明。
如本文所用，“药学上可接受的盐”为所公开的化合物的衍生物，其中通过制备其无机和有机、无毒、酸或碱加成盐来修饰母体化合物。本发明的化合物的盐可通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，这样的盐可通过使这些化合物的游离酸形式与化学计量量的适宜碱(如Na、Ca、Mg或K的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等)反应，或通过使这些化合物的游离碱形式与化学计量量的适宜酸反应。这样的反应通常在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中进行。通常，在可行的情况下，典型的是非水介质比如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。本发明的化合物的盐还包括化合物和化合物盐的溶剂化物。
药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基如胺的矿物酸盐或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱金属盐或有机盐；等等。药学上可接受的盐包括常规的无毒盐和由例如无毒的无机或有机酸形成的母体化合物的季铵盐。例如，常规的无毒酸盐包括衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的那些；以及由有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙磺酸、HOOC-(CH2)n-COOH(其中n为0-4)等或使用将产生相同抗衡离子的不同酸制备的盐。另外的合适的盐的列表可见于例如Remington's Pharmaceutical Sciences,17th ed.,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,p.1418(1985)中。
应用于本发明的药物组合物/组合的术语“载体”是指与活性化合物一起提供的稀释剂、赋形剂或媒介物。
“药学上可接受的载体”意指可用于药物组合物/组合的制备中的载体或赋形剂，该药物组合物/组合通常是安全、无毒的并且在生物学上或其他方面均不会不适合施用于患者、通常人。在一个实施方案中，使用兽医用途可接受的赋形剂。
“患者”或“受试者”为需要治疗或预防如本文所具体描述的任何病症的人或非人动物，例如受天然(野生型)或经修饰(非野生型)蛋白质调节的病症，所述蛋白质可根据本发明降解，从而产生治疗作用。如本文进一步描述的，除非从上下文或措辞清楚地表明本公开意在包括非人动物，否则术语患者或受试者通常是指人类患者或受试者。通常，患者为人。在一个替代的实施方案中，患者或受试者为需要这样的治疗并对其有反应的非人动物。
本发明的药物组合物/组合的“治疗有效量”意指当施用于患者、通常人类患者时有效地提供治疗益处如症状的改善或者疾病本身的减轻或减少的量。
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属领域普通技术人员通常所理解相同的含义。在说明书中，单数形式也包括复数，上下文另有明确规定除外。尽管类似于或等同于本文描述的那些的方法和材料均可用于本申请的实施或试验中，但下文描述了合适的方法和材料。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献均通过引用并入本文。本文引用的参考文献不被认为是要求保护的申请的现有技术。在发生冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。另外，材料、方法和实例仅是示意性的而不旨在限制。
II.式I、式II、式III、式IV、式V和式VI的化合物
在某些实施方案中，通常选择化合物的结构使得其足够稳定以在环境条件下维持至少两个月、三个月、四个月或五个月的货架寿命。为了实现这一点，本文描述的每个R基团必须足够稳定以在环境条件下维持至少两个月、三个月、四个月或五个月的相应所需货架寿命。本领域普通技术人员很清楚化学部分的稳定性并且可避免那些在适宜的条件下不稳定或反应性太强的化学部分。
在某些替代的实施方案中，包括本文描述的任何“R”基团的本发明化合物可任选地如下文部分I中所述被取代。如果需要实现目标效果，则定义产生稳定的R部分和对常规人员有化学意义的最终化合物，并且如果是用于治疗的最终化合物，则是药学上可接受的。此外，所有R基团，无论有或没有任选的取代基，都应以不包括冗余的方式解释(即，如本领域已知的，被烷基取代的烷基是冗余的；然而，例如，被烷氧基取代的烷氧基不是冗余的)。
在一个方面，本发明提供了式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中所有变量为如上文所定义。
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
或其药学上可接受的盐；
其中
LD为二价连接基团，例如式LDI的二价连接基团；
X3a、X4a、X5a和X6a选自N、CH和CR3，其中X3b、X4b、X5b和X6b中不超过3个为N；
并且其中所有其他变量为如本文所述。
在某些实施方案中，X3、X4、X5和X6中的至多两个为N。
在某些实施方案中，X3、X4、X5和X6中的全部为CH。
在某些实施方案中，X3、X4、X5和X6中的一个为CR3；其中R3选自氟、氯和溴。在某些实施方案中，R3为C1-C4卤代烷基。在某些实施方案中，R3为C1-C4烷基。
在某些实施方案中，X3、X4、X5和X6中的一个为CR3，其中R3为C1-C4烷基。
在某些实施方案中，X4或X6为N。在某些实施方案中，X4和X6均为N。在某些实施方案中，X4或X6为CH。在某些实施方案中，X4和X6均为CH。
在某些实施方案中，X4或X6为CR3；其中R3选自氟、氯和溴。
在某些实施方案中，X4或X6为CR3，其中R3选自C1-C4卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2和CBr3。
在某些实施方案中，X4或X6为CR3；其中R3为C1-C4烷基。
在某些实施方案中，X7为N并且Q1为CH2。在某些实施方案中，X7为CH。在某些实施方案中，X7为C1-C4烷基。在某些实施方案中，X7为C1-C4卤代烷基。
在某些实施方案中，X8和X9中的至少一个为CH。
在某些实施方案中，X8为N。
在某些实施方案中，X9为N。
在某些实施方案中，X8和X9中的每一个为CH。
在某些实施方案中，X10为CH2。在某些实施方案中，X10为C(O)。在某些实施方案中，X10为O。
在某些实施方案中，X11为含有至少一个N、O或S的杂环。在某些实施方案中，X11为杂环，为含有至少一个N、O或S的C3-C9杂环。
在某些实施方案中，X11为含有至少一个N、O或S的双环状杂环。在某些实施方案中，双环状杂环是稠合的。在某些实施方案中，双环状杂环是桥接的。在某些实施方案中，双环状杂环是螺环状的。
在某些实施方案中，X11为含有至少一个N、O或S的杂芳基。
在某些实施方案中，X11为芳基。
在某些实施方案中，X11为环烷基。
在某些实施方案中，X12为含有至少一个N、O或S原子的被取代5元杂芳基。
在某些实施方案中，X12为含有至少一个N原子的被取代5元杂芳基。
在某些实施方案中，X12为含有至少两个N原子的被取代5元杂芳基。
在某些实施方案中，X12为含有至少一个N、O或S原子的未被取代5元杂芳基。
在某些实施方案中，X12为含有至少一个N原子的未被取代5元杂芳基。
在某些实施方案中，X12为含有至少两个N原子的未被取代5元杂芳基。
在某些实施方案中，Q1为NH。在某些实施方案中，Q1为O。在某些实施方案中，Q1为S。在某些实施方案中，Q1为CH2。在某些实施方案中，Q1为N(烷基)，其中所述烷基为C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基。在某些实施方案中，Q1为N(卤代烷基)，其中所述卤代烷基为C1-C4卤代烷基。
在某些实施方案中，R为氢。在某些实施方案中，R选自氟、氯和溴。在某些实施方案中，R为C1-C4卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2或CBr3。在某些实施方案中，R为C1-C4烷基。
在某些实施方案中，R1为氢。在某些实施方案中，R1选自氟、氯和溴。在某些实施方案中，R1为C1-C4卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2或CBr3。在某些实施方案中，R1为环烷基。
在某些实施方案中，R3为氢。在某些实施方案中，R3选自氟、氯和溴。在某些实施方案中，R3为C1-C4卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2或CBr3。在某些实施方案中，R3为C1-C4烷氧基。在某些实施方案中，R4为C1-C4烷基。在某些实施方案中，R3为环烷基。
在某些实施方案中，R4为氢。在某些实施方案中，R4选自氟、氯和溴。在某些实施方案中，R4为C1-C4卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2或CBr3。在某些实施方案中，R4为C1-C4烷氧基。在某些实施方案中，R4为C1-C4烷基。在某些实施方案中，R4为C1-C4卤代烷氧基。
在一个替代的实施方案中，R4选自氢、芳基、杂芳基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷基、羟基、氨基、氟、氯、溴和碘。
在某些实施方案中，R5为氢。在某些实施方案中，R5为C1-C4烷基。在某些实施方案中，R5为烯丙基。在某些实施方案中，R5为巴豆基。在某些实施方案中，R5为烯基。在某些实施方案中，R5为炔基。在某些实施方案中，R5为卤代烷基。在某些实施方案中，X5为环烷基。
在某些实施方案中，R6为氢。在某些实施方案中，R6选自氟、氯和溴。在某些实施方案中，R6为C1-C4卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2或CBr3。在某些实施方案中，R6为C1-C4烷基。
在某些实施方案中，R7为氢。在某些实施方案中，R7为C1-C4烷基。
在某些实施方案中，R8为氢。在某些实施方案中，R8为C1-C4烷基。在某些实施方案中，R8为烯丙基。在某些实施方案中，R8为巴豆基。在某些实施方案中，R8为烯基。在某些实施方案中，R8为炔基。在某些实施方案中，R8为卤代烷基。在某些实施方案中，X8为环烷基。
在一个替代的实施方案中，X17为任选被1、2、3或4个独立地选自R3的取代基所取代的杂环。X17杂环基团的非限制性实例包括吡咯烷、哌啶、吗啉、硫代吗啉、氮杂环庚烷、四氢呋喃、四氢吡喃、二噁烷、噻烷、氧杂环庚烷、氮杂环辛烷(azocane)、硫杂环己烷(thioane)和氮杂环壬烷(azonane)。
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，X1选自：
在某些实施方案中，X12-L-B选自：
其中上述X12部分中的每一个任选被1或2个独立地选自R3的取代基所取代。
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在一个实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，为：
在某些实施方案中，为：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，选自：
在某些实施方案中，化合物172为
或其药学上可接受的盐。
本发明的另外的实施方案
001.在某些实施方案中，本发明的化合物具有下式：
002.实施方案1的化合物，其中X8为N并且X9为CH。
003.实施方案1的化合物，其中X8为CH并且X9为N。
004.实施方案1的化合物，其中X8为CH并且X9为CH。
005.实施方案1-4中任一项的化合物，其中为
006.实施方案1-4中任一项的化合物，其中为
007.实施方案1-4中任一项的化合物，其中为
008.实施方案1-7中任一项的化合物，其中为
009.实施方案1-8中任一项的化合物，其中R为C1-C4卤代烷基、C1-C4烷基、氟、氯或溴。
010.实施方案1-8中任一项的化合物，其中R为氟。
011.在某些实施方案中，本发明的化合物具有下式：
012.实施方案11的化合物，其中X17为任选被1、2、3或4个独立地选自R3的取代基所取代的芳基基团。
013.实施方案12的化合物，其中X17为苯基。
014.实施方案11的化合物，其中X17为杂芳基基团或环烷基基团；其每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R3的取代基所取代。
015.实施方案1-14中任一项的化合物，其中Q1为NH并且X7为CH。
016.实施方案1-14中任一项的化合物，其中Q1为O并且X7为CH。
017.实施方案1-14中任一项的化合物，其中Q1为N(CH3)并且X7为CH。
018.在某些实施方案中，本发明的化合物具有下式：
019.实施方案1-18中任一项的化合物，其中X3为CR3。
020.实施方案1-18中任一项的化合物，其中X3为N。
021.实施方案1-18中任一项的化合物，其中X3为CH。
022.实施方案1-18中任一项的化合物，其中X3为CF。
023.实施方案1-18中任一项的化合物，其中X3为C(CF3)。
024.实施方案1-18中任一项的化合物，其中X3为C(Cl)。
025.实施方案1-24中任一项的化合物，其中X5为CR3。
026.实施方案1-24中任一项的化合物，其中X5为N。
027.实施方案1-24中任一项的化合物，其中X5为CH。
028.实施方案1-24中任一项的化合物，其中X5为CF。
029.实施方案1-24中任一项的化合物，其中X5为C(CF3)。
030.实施方案1-24中任一项的化合物，其中X5为C(Cl)。
031.在某些实施方案中，本发明的化合物具有下式：
032.实施方案31的化合物，其中R1为氢。
033.实施方案31的化合物，其中R1为CH3。
034.实施方案1-33中任一项的化合物，其中X4为CR3。
035.实施方案1-33中任一项的化合物，其中X4为N。
036.实施方案1-33中任一项的化合物，其中X4为CH。
037.实施方案1-33中任一项的化合物，其中X4为CF。
038.实施方案1-33中任一项的化合物，其中X4为C(CF3)。
039.实施方案1-33中任一项的化合物，其中X4为C(Cl)。
040.实施方案1-39中任一项的化合物，其中X6为CR3。
041.实施方案1-39中任一项的化合物，其中X6为CH。
042.实施方案1-39中任一项的化合物，其中X6为CF。
043.实施方案1-39中任一项的化合物，其中X6为C(CF3)。
044.实施方案1-39中任一项的化合物，其中X6为C(Cl)。
045.在某些实施方案中，本发明的化合物具有下式：
046.实施方案45的化合物，其中Q1为NH并且X7为CH。
047.实施方案45的化合物，其中Q1为O并且X7为CH。
048.实施方案45的化合物，其中Q1为N(CH3)并且X7为CH。
049.实施方案45-48中任一项的化合物，其中X12为具有1、2或3个独立地选自N的原子的5-元杂芳基基团，其中X12任选被1、2或3个独立地选自R3的基团所取代。
050.实施方案45-48中任一项的化合物，其中X12为呋喃，其中X12任选被1、2或3个独立地选自R3的基团所取代。
051.实施方案1-50中任一项的化合物，其中B为B1。
052.实施方案51的化合物，其中B1为
053.实施方案52的化合物，其中R5为氢。
054.实施方案52的化合物，其中R5为甲基。
055.实施方案51的化合物，其中B1为
056.实施方案51的化合物，其中B1为
057.实施方案51的化合物，其中B1为
058.实施方案1-50中任一项的化合物，其中B为B2。
059.在某些实施方案中，本发明的化合物具有下式：
060.实施方案59的化合物，其中Q1为NH并且X7为CH。
061.实施方案59的化合物，其中Q1为O并且X7为CH。
062.实施方案59的化合物，其中Q1为N(CH3)并且X7为CH。
063.实施方案59-62中任一项的化合物，其中X3为CR3。
064.实施方案59-62中任一项的化合物，其中X3为N。
065.实施方案59-62中任一项的化合物，其中X3为CH。
066.实施方案59-62中任一项的化合物，其中X3为CF。
067.实施方案59-62中任一项的化合物，其中X3为C(CF3)。
068.实施方案59-62中任一项的化合物，其中X3为C(Cl)。
069.实施方案59-68中任一项的化合物，其中X5为CR3。
070.实施方案59-68中任一项的化合物，其中X5为N。
071.实施方案59-68中任一项的化合物，其中X5为CH。
072.实施方案59-68中任一项的化合物，其中X5为CF。
073.实施方案59-68中任一项的化合物，其中X5为C(CF3)。
074.实施方案59-68中任一项的化合物，其中X5为C(Cl)。
075.实施方案59-74中任一项的化合物，其中X4为CR3。
076.实施方案59-74中任一项的化合物，其中X4为N。
077.实施方案59-74中任一项的化合物，其中X4为CH。
078.实施方案59-74中任一项的化合物，其中X4为CF。
079.实施方案59-74中任一项的化合物，其中X4为C(CF3)。
080.实施方案59-74中任一项的化合物，其中X4为C(Cl)。
081.实施方案59-80中任一项的化合物，其中X6为CR3。
082.实施方案59-80中任一项的化合物，其中X6为CH。
083.实施方案59-80中任一项的化合物，其中X6为CF。
084.实施方案59-80中任一项的化合物，其中X6为C(CF3)。
085.实施方案59-80中任一项的化合物，其中X6为C(Cl)。
086.实施方案58-85中任一项的化合物，其中B2为
087.实施方案86的化合物，其中R5为氢。
088.实施方案86的化合物，其中R5为甲基。
089.实施方案58-85中任一项的化合物，其中B2为
090.实施方案58-85中任一项的化合物，其中B2为
091.实施方案58-85中任一项的化合物，其中B2为
092.实施方案58-91中任一项的化合物，其中X11为杂环，每一个X11基团任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代。
093.实施方案58-91中任一项的化合物，其中X11为双环，每一个X11基团任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代。
094.实施方案58-91中任一项的化合物，其中X11为杂芳基、芳基或环烷基，每一个X11基团任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代。
095.实施方案58-91中任一项的化合物，其中X11选自：
096.实施方案58-91中任一项的化合物，其中X11选自：
097.实施方案58-91中任一项的化合物，其中X10和X11一起形成
098.实施方案58-91中任一项的化合物，其中X10和X11一起形成
099.实施方案1-96中任一项的化合物，其中X10为C(R7)2。
100.实施方案1-96中任一项的化合物，其中X10为CH2。
101.实施方案1-96中任一项的化合物，其中X10为C(O)。
102.实施方案1-96中任一项的化合物，其中X10为O。
103.实施方案1-102中任一项的化合物，其中X13为CR3。
104.实施方案1-102中任一项的化合物，其中X13为N。
105.实施方案1-102中任一项的化合物，其中X13为CH。
106.实施方案1-102中任一项的化合物，其中X13为CF。
107.实施方案1-102中任一项的化合物，其中X13为C(CF3)。
108.实施方案1-102中任一项的化合物，其中X13为C(Cl)。
109.实施方案1-108中任一项的化合物，其中X14为CR3。
110.实施方案1-108中任一项的化合物，其中X14为N。
111.实施方案1-108中任一项的化合物，其中X14为CH。
112.实施方案1-108中任一项的化合物，其中X14为CF。
113.实施方案1-108中任一项的化合物，其中X14为C(CF3)。
114.实施方案1-108中任一项的化合物，其中X14为C(Cl)。
115.实施方案1-114中任一项的化合物，其中X15为CR3。
116.实施方案1-114中任一项的化合物，其中X15为N。
117.实施方案1-114中任一项的化合物，其中X15为CH。
118.实施方案1-114中任一项的化合物，其中X15为CF。
119.实施方案1-114中任一项的化合物，其中X15为C(CF3)。
120.实施方案1-114中任一项的化合物，其中X15为C(Cl)。
121.实施方案1-120中任一项的化合物，其中X16为CR3。
122.实施方案1-120中任一项的化合物，其中X16为CH。
123.实施方案1-120中任一项的化合物，其中X16为CF。
124.实施方案1-120中任一项的化合物，其中X16为C(CF3)。
125.实施方案1-120中任一项的化合物，其中X16为C(Cl)。
126.实施方案1-125中任一项的化合物，其中R8为氢。
127.实施方案1-125中任一项的化合物，其中R8为甲基。
128.实施方案1-127中任一项的化合物，其中L为具有下式的接头：
其中，
X1和X2在每次出现时独立地选自键、杂环、NR2、C(R2)2、O、C(O)和S；
R2在每次出现时独立地选自氢、烷基、脂族、杂脂族、杂环、芳基、杂芳基、-C(O)H、-C(O)OH、-C(O)烷基、-C(O)O烷基、-C(O)(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、-C(O)O(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、烯烃和炔烃；
R20、R21、R22、R23和R24在每次出现时独立地选自键、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR2-、-NR2C(O)-、-O-、-S-、-NR2-、-C(R40R40)-、-P(O)(OR26)O-、-P(O)(OR26)-、烯烃、炔烃、卤代烷基、烷氧基、芳基、杂环、脂族、杂脂族、杂芳基、乳酸、乙醇酸和碳环；其每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R40的取代基所取代；
R26在每次出现时独立地选自氢、烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、烯烃、炔烃、芳基、杂芳基、杂环、脂族和杂脂族；和
R40在每次出现时独立地选自氢、烷基、烯烃、炔烃、氟、溴、氯、羟基、烷氧基、叠氮化物、氨基、氰基、-NH(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)2、-NHSO2(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)SO2烷基、-NHSO2(芳基、杂芳基或杂环)、-N(烷基)SO2(芳基、杂芳基或杂环)、-NHSO2烯基、-N(烷基)SO2烯基、-NHSO2炔基、-N(烷基)SO2炔基、卤代烷基、脂族、杂脂族、芳基、杂芳基、杂环和环烷基。
129.实施方案128的化合物，其中L为具有下式的接头：
130.实施方案128或129的化合物，其中X1为键。
131.实施方案128或129的化合物，其中X1为杂环。
132.实施方案128或129的化合物，其中X1为NR2。
133.实施方案128或129的化合物，其中X1为C(O)。
134.实施方案128-133中任一项的化合物，其中X2为键。
135.实施方案128-133中任一项的化合物，其中X2为杂环。
136.实施方案128-133中任一项的化合物，其中X2为NR2。
137.实施方案128-133中任一项的化合物，其中X2为C(O)。
138.实施方案128-137中任一项的化合物，其中R20为键。
139.实施方案128-137中任一项的化合物，其中R20为CH2。
140.实施方案128-137中任一项的化合物，其中R20为杂环。
141.实施方案128-137中任一项的化合物，其中R20为芳基。
142.实施方案128-137中任一项的化合物，其中R20为苯基。
143.实施方案128-137中任一项的化合物，其中R20为双环。
144.实施方案128-143中任一项的化合物，其中R21为键。
145.实施方案128-143中任一项的化合物，其中R21为CH2。
146.实施方案128-143中任一项的化合物，其中R21为杂环。
147.实施方案128-143中任一项的化合物，其中R21为芳基。
148.实施方案128-143中任一项的化合物，其中R21为苯基。
149.实施方案128-143中任一项的化合物，其中R21为双环。
150.实施方案128的化合物，其中L为具有下式的接头：
151.实施方案128-150中任一项的化合物，其中R22为键。
152.实施方案128-150中任一项的化合物，其中R22为CH2。
153.实施方案128-150中任一项的化合物，其中R22为杂环。
154.实施方案128-150中任一项的化合物，其中R22为芳基。
155.实施方案128-150中任一项的化合物，其中R22为苯基。
156.实施方案128-150中任一项的化合物，其中R22为双环。
157.实施方案128的化合物，其中L为具有下式的接头：
158.实施方案128-157中任一项的化合物，其中R23为键。
159.实施方案128-157中任一项的化合物，其中R23为CH2。
160.实施方案128-157中任一项的化合物，其中R23为杂环。
161.实施方案128-157中任一项的化合物，其中R23为芳基。
162.实施方案128-157中任一项的化合物，其中R23为苯基。
163.实施方案128-157中任一项的化合物，其中R23为双环。
164.实施方案128的化合物，其中L为具有下式的接头：
165.实施方案128-164中任一项的化合物，其中R24为键。
166.实施方案128-164中任一项的化合物，其中R24为CH2。
167.实施方案128-164中任一项的化合物，其中R24为杂环。
168.实施方案128-164中任一项的化合物，其中R24为芳基。
169.实施方案128-164中任一项的化合物，其中R24为苯基。
170.实施方案128-164中任一项的化合物，其中R24为双环。
171.实施方案128-164中任一项的化合物，其中R24为C(O)。
172.实施方案1-171中任一项的化合物，其中L选自：
173.在某些实施方案中，化合物172为
或其药学上可接受的盐。
174.在某些实施方案中，化合物172为
或其药学上可接受的盐。
175.在某些实施方案中，化合物172为
或其药学上可接受的盐。
176.在某些实施方案中，化合物172为
或其药学上可接受的盐。
III.靶向配体
溴结构域(BRD)是专门识别乙酰化基序的蛋白质相互作用模块。BRD在进化上是保守的，存在于多种多样的核蛋白中，包括HAT(GCN5、PCAF)、ATP依赖性染色质重塑复合物(BAZ1B)、解旋酶(SMARCA)、甲基转移酶(MLL、ASH1L)、转录共激活因子(TRIM/TIF1、TAF)、转录介质(TAF1)、核支架蛋白(PB1)和BET家族。(Muller S,Filippakopoulos P,Knapp S.,Bromodomains as therapeutic targets,Expert Rev Mol Med.2011,13(29))。
含溴结构域的蛋白质7(BRD7)与BRD9相似并且是PBAF SWI/SNF的亚基。(Pérez-Salvia M.,Estellera M.,Bromodomain inhibitors and cancer therapy:Fromstructures to applications,Epigenetics.2017；12(5):323–339；P99:Clark P.G.K.等人,Discovery and Synthesis of the First Selective BRD7/9BromodomainInhibitor,Angew Chem Weinheim Bergstr Ger.2015,127(21):6315–6319)。
在某些实施方案中，部分B为针对由一种或多种含溴结构域的蛋白质介导的病症的靶向配体。
在某些实施方案中，部分B为针对BRD9介导病症的靶向配体。
在某些实施方案中，部分B为针对BRD7介导病症的靶向配体。
在某些实施方案中，B为B1。
在某些实施方案中，B为B2。
在某些实施方案中，B2选自：
其中X18和X19独立地选自-N-和-CH-，并且其中所有其他变量为如本文所定义。
在某些实施方案中，B2选自：
其中X18和X19独立地选自-N-和-CH-，并且其中所有其他变量为如本文所定义。
在某些实施方案中，B2选自：
其中X18和X19独立地选自-N-和-CH-，并且其中所有其他变量为如本文所定义。
在某些实施方案中，B2选自：
其中X18和X19独立地选自-N-和-CH-，并且其中所有其他变量为如本文所定义。
在某些实施方案中，B1选自：
在某些实施方案中，B1选自：
在某些实施方案中，B1选自：
在某些实施方案中，B1选自：
在某些实施方案中，B2选自：
在某些实施方案中，B2选自：
在某些实施方案中，B2选自：
在某些实施方案中，B2选自：
在某些实施方案中，B2选自：
在某些实施方案中，B2选自：
在某些实施方案中，B1为
在某些实施方案中，X11选自：
在某些实施方案中，X11选自：
在某些实施方案中，X11选自：
在某些实施方案中，X11选自：
IV.接头
在如本文所述的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐中包括接头。接头(L或LD)为化学稳定的二价基团，可将E3连接酶结合部分连接到靶向配体。根据本发明，可使用如本文所述的任何所需的接头，只要作为药学上可接受的剂型的一部分，所得化合物具有至少2个月、3个月、6个月或1年的稳定货架寿命，并且其本身是药学上可接受的。
如本文所述的接头可以任一方向使用，即，或左端与E3连接酶结合部分相连而右端与靶向接头相连，或左端与靶向接头相连而右端与E3连接酶结合部分相连。
在某些实施方案中，接头为键。
在某些实施方案中，接头具有2至14、15、16、17、18或20个或更多个碳原子的链，其中一个或多个碳可被替换为杂原子如O、N、S或P。
在某些实施方案中，该链在链中具有2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个连续原子。例如，该链可包括1个或多个乙二醇单元，这些单元可以是连续的、部分连续的或不连续的(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个乙二醇单元)。
在某些实施方案中，该链具有至少1、2、3、4、5、6、7或8个可具有分支的连续链，所述分支可独立地为烷基、芳基、杂芳基、烯基或炔基、脂族、杂脂族、环烷基或杂环取代基。
在其他实施方案中，接头可包含乙二醇、丙二醇、乳酸和/或乙醇酸中的一种或多种或者由乙二醇、丙二醇、乳酸和/或乙醇酸中的一种或多种组成。通常，丙二醇增加疏水性，而丙二醇增加亲水性。乳酸链段往往比乙醇酸链段具有更长的半衰期。嵌段和无规乳酸-共-乙醇酸部分以及乙二醇和丙二醇在本领域中已知是药学上可接受的并且可被改性或排列以获得所需的半衰期和亲水性。在某些方面，这些单元可根据需要侧接或散布有其他部分，如脂族，包括烷基、杂脂族、芳基、杂芳基、杂环、环烷基等，以取得适宜的药物性质。
在某些实施方案中，L为选自以下的接头：
在一个方面，接头(L)选自式LI、式LII、式LIII、式LIV、式LV、式LVI、式LVII、式LVIII、式IX和式LX的部分：
其中，
X1和X2在每次出现时独立地选自键、杂环、NR2、C(R2)2、O、C(O)和S；
R2在每次出现时独立地选自氢、烷基、脂族、杂脂族、杂环、芳基、杂芳基、-C(O)H、-C(O)OH、-C(O)烷基、-C(O)O烷基、-C(O)(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、-C(O)O(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、烯烃和炔烃；
R20、R21、R22、R23和R24在每次出现时独立地选自键、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR2-、-NR2C(O)-、-O-、-S-、-NR2-、-C(R40R40)-、-P(O)(OR26)O-、-P(O)(OR26)-、烯烃、炔烃、卤代烷基、烷氧基、芳基、杂环、脂族、杂脂族、杂芳基、乳酸、乙醇酸和碳环；其每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R40的取代基所取代；
R26在每次出现时独立地选自氢、烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、烯烃、炔烃、芳基、杂芳基、杂环、脂族和杂脂族；和
R40在每次出现时独立地选自氢、烷基、烯烃、炔烃、氟、溴、氯、羟基、烷氧基、叠氮化物、氨基、氰基、-NH(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)2、-NHSO2(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)SO2烷基、-NHSO2(芳基、杂芳基或杂环)、-N(烷基)SO2(芳基、杂芳基或杂环)、-NHSO2烯基、-N(烷基)SO2烯基、-NHSO2炔基、-N(烷基)SO2炔基、卤代烷基、脂族、杂脂族、芳基、杂芳基、杂环和环烷基。
在某些实施方案中，LD为选自以下的接头：
在一个方面，接头(LD)选自式LDI、式LDII、式LDIII、式LDIV、式LDV、式LDVI和式LDVII的部分：
其中所有变量为本文所述。
以下为可用于本发明的接头(L或LD)的非限制性实例。基于该详尽阐述，本领域技术人员将理解如何使用将实现本发明的目标的全部范围的接头。
式LI、式LII、式LIII、式LIV、式LV、式LVI或式LVII的非限制性实例包括：
式LDI、式LDII、式LDIII、式LDIV、式LDV、式LDVI或式LDVII的非限制性实例包括：
在一个实施方案中，X1连接到B。在另一个实施方案中，X2连接到B。
R20、R21、R22、R23和R24部分的非限制性实例包括：
R20、R21、R22、R23和R24部分的另外的非限制性实例包括：
R20、R21、R22、R23和R24部分的另外的非限制性实例包括：
在另外的实施方案中，接头部分为具有至少1、至少2、至少3、至少4、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10个乙二醇单元的任选被取代的(聚)乙二醇，或散布有任选被取代的O、N、S、P或Si原子的任选被取代的烷基基团。
在某些实施方案中，接头侧接、被取代或散布有芳基、苯基、苄基、烷基、亚烷基或杂环基团。
在某些实施方案中，接头可以是不对称的或对称的。
在某些实施方案中，接头可以是非线性链，并且可以是或包括脂族或芳族或杂芳族环状部分。
在本文描述的化合物的任何实施方案中，接头基团可以是如本文所述的任何合适的部分。
在某些实施方案中，接头选自：
在某些实施方案中，接头(L或LD)选自：
在某些实施方案中，接头(L或LD)选自：
在某些实施方案中，接头(L或LD)选自：
在某些实施方案中，接头(L或LD)选自：
在某些实施方案中，接头(L或LD)选自：
在某些实施方案中，上面绘制的接头在左侧上连接到B基团。在其他实施方案中，上面绘制的接头在右侧上连接到B基团。
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
或其药学上可接受的盐。
V.本发明的化合物的另外的非限制性实例
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
在某些实施方案中，本发明的化合物选自：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
本发明的化合物的非限制性实例包括：
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，本发明的化合物为：
或其药学上可接受的盐。
非限制性BRD9降解实施方案
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有小于200nM的BRD结合(Ki)。在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有小于100nM的BRD结合(Ki)。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有小于2000nM的FP-E3结合(Kd)。在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有小于1000nM的FP-E3结合(Kd)。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于在2小时时具有小于10nM的BRD9降解和/或在17小时后具有小于10％的Kendo。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有小于20nM的BRD9降解动力学Kpc。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于在24小时后具有大于>999nM的BRD7降解和/或大于95％的Emax。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于在24小时后具有大于1000nM并小于5000nM的BRD4降解和/或>60％并小于90％的Emax。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有>999nM的IKZF1/SALL4/GSPT1降解。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有>999nM的HEPG2活力。在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有>10,000nM的HEPG2活力。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有>1000nM的SW982活力(GI50)。在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有>10,000nM的SW982活力(GI50)。
在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有>30的hERG。在某些实施方案中，本发明的化合物的特征在于具有>60的hERG。
VI.治疗方法
如本文所述的化合物可以有效量用于治疗有此需要的患有由BRD9介导的病症的患者、通常人类患者。
本发明的另一个方面提供了如本文所述的化合物，或者其对映异构体、非对映异构体或立体异构体，或者其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，或者药物组合物，用于制造用于治疗或预防有此需要的患者、例如人的癌症或更通常异常细胞增殖的药剂；其中所述癌症或异常增殖细胞包含活化的BRD9或其中需要BRD9抑制以治疗或预防癌症。
在某些实施方案中，方法包括向有此需要的患者施用有效量的如本文所述的活性化合物或其盐，任选地包括药学上可接受的赋形剂、载体或佐剂(即，药学上可接受的组合物)，或任选地与另一生物活性剂或剂的组合相组合或交替。
在某些实施方案中，本发明提供了一种在有此需要的患者中治疗本文描述的任何病症的方法。
在其他实施方案中，向患者施用另外的治疗剂。在其他实施方案中，如本文所述的化合物和另外的治疗剂同时或依序施用。
在某些实施方案中，本申请提供了一种在有此需要的患者中预防本文描述的任何病症的方法。
在某些实施方案中，患者为人。
在某些实施方案中，本发明的化合物用于治疗难治性病症，例如难治性癌症。在某些实施方案中，本发明的化合物用于治疗复发性病症，例如复发性癌症。在进一步的实施方案中，本发明的化合物用于治疗难治性和复发性病症，例如难治性和复发性癌症。在进一步的实施方案中，本发明的化合物用于治疗多重耐药性病症，例如多重耐药性癌症。
在某些实施方案中，本发明的化合物用于治疗SMARCB1扰动的癌症，例如SMARCB1扰动的实体瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为滑膜肉瘤、恶性横纹肌样肿瘤、非典型性畸胎瘤或横纹肌样肿瘤、上皮样肉瘤、肾髓样癌、上皮样恶性周围神经鞘瘤、肌上皮癌、骨骼外粘液样软骨肉瘤、脊索瘤、胰腺未分化横纹肌样癌、鼻腔鼻窦基底细胞样癌或胃肠道的横纹肌样癌。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为滑膜肉瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为恶性横纹肌样肿瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为非典型性畸胎瘤或横纹肌样肿瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为上皮样肉瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为肾髓样癌。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为上皮样恶性周围神经鞘瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为肌上皮癌。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为骨骼外粘液样软骨肉瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为脊索瘤。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为胰腺未分化横纹肌样癌。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为鼻腔鼻窦基底细胞样癌。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为胃肠道的横纹肌样癌。
作为BRD9的抑制剂，本申请的化合物和组合物特别可用于治疗其中溴结构域蛋白质与疾病、病患或病症有关的疾病、病患或病症或者减轻其中溴结构域蛋白质与疾病、病患或病症有关的疾病、病患或病症的严重性。
在一个方面，本发明提供了一种治疗其中溴结构域蛋白质与疾病状态有关的疾病、病患或病症或者减轻其中溴结构域蛋白质与疾病状态有关的疾病、病患或病症的严重性的方法。
本发明的另一个方面提供了一种在有此需要的患者中抑制或减少溴结构域蛋白质的量的方法，其包括施用有效量的如本文所述的化合物或者其对映异构体、非对映异构体或立体异构体或者其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和任选地药学上可接受的载体。
本发明的另一个方面提供了一种治疗溴结构域蛋白质介导的病症的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的如本文所述的化合物或者其对映异构体、非对映异构体或立体异构体或者其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和任选地药学上可接受的载体。
本发明的另一个方面提供了一种治疗或预防增殖性疾病的方法。所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的药物组合物，所述药物组合物包含如本文所述的化合物或其对映异构体、非对映异构体或立体异构体或者其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和任选地药学上可接受的载体。
在一些实施方案中，所述疾病由BRD9介导。在其他实施方案中，BRD9在疾病的开始或发展中起作用。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症包括良性生长、转移、赘生物、肿瘤、实体瘤、横纹肌样肿瘤、恶性横纹肌样肿瘤、癌、白血病、癌症、异常细胞增殖、移植物抗宿主排斥、淀粉样蛋白病、蛋白病、纤维化病症、炎症、关节炎、肺部病症和免疫病症。
在某些实施方案中，本发明治疗的病症为SS18-SSX融合蛋白相关病症。在某些实施方案中，本发明治疗的病症为SS18蛋白相关病症。在某些实施方案中，本发明治疗的病症为SSX蛋白相关病症。
在某些实施方案中，所述疾病或病症为癌症或增殖性疾病。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为异常细胞增殖，包括但不限于肿瘤或癌症，或者骨髓或淋巴增殖性病症如B-细胞或T-细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症、Wiskott-Aldrich综合征或移植后淋巴增殖性病症。
在某些实施方案中，血液癌为急性髓性白血病(AML)、急性淋巴母细胞白血病(ALL)、淋巴母细胞T细胞白血病、慢性髓性白血病(CML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、毛细胞白血病、慢性嗜中性粒细胞白血病(CNL)、急性淋巴母细胞T细胞白血病、急性单核细胞性白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞性大细胞白血病、套细胞白血病、多发性骨髓瘤、巨核母细胞白血病、急性巨核细胞白血病、早幼粒细胞白血病、混合谱系白血病(MLL)、红白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、淋巴母细胞T细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、B细胞急性淋巴母细胞白血病、弥漫性大B细胞淋巴瘤、Myc和B-细胞白血病(BCL)2和/或CL6重排/过表达[双重和三重打击淋巴瘤]、骨髓发育不良性/骨髓增生性肿瘤、套细胞淋巴瘤(包括耐硼替佐米套细胞淋巴瘤)。
可用本文描述的化合物治疗的实体瘤包括但不限于：肺癌，包括小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)；乳腺癌，包括炎性乳腺癌、ER-阳性乳腺癌(包括耐他莫昔芬的ER-阳性乳腺癌)和三阴性乳腺癌；结肠癌；中线癌；肝癌；肾癌；前列腺癌(包括去势抵抗性前列腺癌(CRPC))；脑癌，包括神经胶质瘤、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤和成神经管细胞瘤(包括MYC-扩增成神经管细胞瘤)；结肠直肠癌；Wilm's肿瘤；尤因氏肉瘤；横纹肌肉瘤；室管膜瘤；头颈癌；黑色素瘤；鳞状细胞癌；卵巢癌；胰腺癌，包括胰腺导管腺癌(PDAC)和胰腺神经内分泌肿瘤(PanNET)；骨肉瘤；骨巨细胞瘤；甲状腺癌；膀胱癌；尿路上皮癌；外阴癌；子宫颈癌；子宫内膜癌；间皮瘤；食管癌；唾液腺癌；胃癌；鼻咽癌；颊癌；口腔癌；GIST(胃肠道间质瘤)；NUT-中线癌；睾丸癌；鳞状细胞癌；肝细胞癌(HCC)；MYCN驱动实体瘤；和NUT中线癌(NMC)。
在进一步的实施方案中，疾病或病症为骨骼、肌肉、肌腱、软骨、神经、脂肪或血管的肉瘤。
在进一步的实施方案中，疾病或病症为软组织肉瘤、骨骼肉瘤或骨肉瘤。
在进一步的实施方案中，疾病或病症为血管肉瘤、纤维肉瘤、脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、Karposi's肉瘤、骨肉瘤、胃肠道间质瘤、滑膜肉瘤、多形性肉瘤、软骨肉瘤、尤因氏肉瘤、网状细胞肉瘤、脑膜肉瘤、葡萄样肉瘤、横纹肌肉瘤或胚胎性横纹肌肉瘤。
在某些实施方案中，病症为骨骼、肌肉、肌腱、软骨、神经、脂肪或血管肉瘤。
在进一步的实施方案中，疾病或病症为多发性骨髓瘤。
在进一步的实施方案中，疾病或病症为滑膜肉瘤。文献中已经描述了滑膜肉瘤与BRD9之间的联系。例如，Brien等人标题为“Targeted degradation of BRD9 reversesoncogenic gene expression in synovial sarcoma”的论文描述了滑膜肉瘤肿瘤对BRD9降解剂施用的高敏感性。类似地，Michel等人标题为“A non-canonical SWI/SNF complexis a synthetic lethal target in cancers driven by BAF complex perturbation”的论文描述了BAF在滑膜肉瘤中的作用和BRD9在滑膜肉瘤增殖中的作用。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为炎症性疾病，包括但不限于哮喘、慢性消化性溃疡、肺结核、类风湿性关节炎、牙周炎、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病或肝炎。
在其他实施方案中，疾病或病症为炎症、关节炎、类风湿性关节炎、脊椎关节病、痛风性关节炎、骨关节炎、幼年型关节炎和其他关节炎病患、神经性炎症、过敏反应、疼痛、神经性疼痛、发烧、肺部病症、肺炎症、成人呼吸窘迫慢性肺部炎症性疾病和慢性阻塞性肺疾病(COPD)、肝疾病和肾炎、胃肠道病患、炎症性肠疾病、克罗恩氏病、胃炎、肠易激综合征、溃疡性结肠炎、溃疡性疾病、胃溃疡、自身免疫疾病、移植物与宿主的反应和同种异体移植物排斥反应、癌症、白血病、淋巴瘤、结肠直肠癌、脑癌、骨癌、上皮细胞源性肿瘤(上皮癌)、基底细胞癌、腺癌、胃肠癌、唇癌、口腔癌、食管癌、小肠癌、胃癌、结肠癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、肺癌、乳腺癌、皮肤癌、鳞状细胞和/或基底细胞癌、前列腺癌、肾细胞癌和影响全身上皮细胞的其他已知癌症、慢性髓性白血病(CML)、急性骨髓性白血病(AML)和急性早幼粒细胞白血病(APL)、血管生成(包括瘤形成、转移、中枢神经系统病症)、具有炎症或凋亡成分的中枢神经系统病症、周围神经病或B细胞淋巴瘤。
在其他实施方案中，包含如本文所述的化合物和另外的治疗剂的药物组合物同时或依序施用。
在其他实施方案中，疾病或病症为癌症。在进一步的实施方案中，癌症为肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、实体瘤、血液癌或实体癌。
在一些实施方案中，所述方法用于治疗或预防选自自身免疫疾病、炎症性疾病、增殖和过度增殖疾病以及免疫介导疾病的病患。在其他实施方案中，所述病患选自增殖性病症。
在某些实施方案中，BRD9介导的病症为免疫病症，包括但不限于自身免疫性病症如艾迪生氏病、乳糜泻病、皮肌炎、Graves病、甲状腺炎、多发性硬化症、恶性贫血、反应性关节炎、狼疮或I型糖尿病。
本申请的一个方面提供了可用于治疗以过度或异常细胞增殖为特征的疾病、病症和病患的化合物。这样的疾病包括但不限于增殖性或过度增殖性疾病。增殖性和过度增殖性疾病的实例包括但不限于癌症。术语“癌症”包括但不限于以下癌症：乳腺癌；卵巢癌；宫颈癌；前列腺癌；睾丸癌、泌尿生殖道癌；食道癌；喉癌、胶质母细胞瘤；神经母细胞瘤；胃癌；皮肤角化棘皮瘤；肺表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌；骨癌；结肠癌；结肠直肠癌；腺瘤；胰腺癌、腺癌；甲状腺滤泡状癌、未分化的癌、乳头状癌；精原细胞瘤、黑色素瘤；肉瘤；膀胱癌；肝癌和胆道癌；肾癌；骨髓病症；淋巴病症、霍奇金氏病、毛细胞癌；颊腔和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口腔癌、咽癌；小肠癌；结肠直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌；慢性骨髓性白血病(CML)和白血病。术语“癌症”包括但不限于以下癌症：骨髓瘤、淋巴瘤或选自胃癌、肾癌或/和以下癌症的癌症：头颈癌、口咽癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌、肝癌、非霍奇金氏淋巴瘤和肺癌。
术语“癌症”是指由恶性肿瘤细胞的增殖引起的任何癌症，如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤等。例如，癌症包括但不限于间皮瘤、白血病和淋巴瘤如皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)、非皮肤外周T-细胞淋巴瘤、与人类T-细胞嗜淋巴细胞病毒(HTLV)相关的淋巴瘤如成人T-细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、B-细胞淋巴瘤、急性非淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、霍奇金氏淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、成人T-细胞白血病淋巴瘤、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)或肝细胞癌。其他实例包括骨髓增生异常综合征、儿童实体瘤如脑肿瘤、神经母细胞瘤、成视网膜细胞瘤、Wilms肿瘤、骨肿瘤和软组织肉瘤、常见的成人实体瘤如头颈癌(如口腔癌、喉癌、鼻咽癌和食道癌)、泌尿生殖道癌(如前列腺癌、膀胱癌、肾癌、子宫癌、卵巢癌、睾丸癌)、肺癌(如小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、乳腺癌、胰腺癌、黑色素瘤和其他皮肤癌、胃癌、脑肿瘤、与Gorlin综合征有关的肿瘤(如成神经管细胞瘤或脑膜瘤)和肝癌。
癌症的另外的示例性形式包括但不限于骨骼肌或平滑肌癌、胃癌、小肠癌、直肠癌、唾液腺癌、子宫内膜癌、肾上腺癌、肛门癌、直肠癌、甲状旁腺癌和垂体癌。
本文描述的化合物可用于预防、治疗和研究的另外的癌症有例如结肠癌、家族性腺瘤性息肉病性癌和遗传性非息肉病性结肠直肠癌或黑色素瘤。此外，癌症包括但不限于唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺癌(甲状腺髓样癌和甲状腺乳头状癌)、肾癌、肾实质癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌、睾丸癌、尿道癌、黑色素瘤、脑肿瘤如胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、脑膜瘤、成神经管细胞瘤和外周原始神经外胚层肿瘤、胆囊癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤、畸胎瘤、成视网膜细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、颅咽管瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤、尤因氏肉瘤和浆细胞瘤。在本申请的一个方面，本申请提供了一种或多种如本文所述的化合物在制造用于治疗癌症的药剂中的用途，所述癌症包括但不限于本文公开的各种类型的癌症。
在一些实施方案中，本申请的化合物可用于治疗癌症，如结肠直肠癌、甲状腺癌、乳腺癌和肺癌；和骨髓增殖性病症，如真性红细胞增多症、血小板增多症，伴骨髓纤维化的髓样化生、慢性髓性白血病、慢性粒单核细胞白血病、嗜酸细胞增多综合征、幼年型粒单核细胞白血病和系统性肥大细胞病。在一些实施方案中，如本文所述的化合物可用于治疗造血功能障碍，特别是急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性早幼粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病(ALL)。
在一个实施方案中，如本文所述的化合物或其相应的药学上可接受的盐或同位素衍生物可以有效量使用以治疗患有淋巴瘤或淋巴细胞或髓细胞增殖病症或异常的宿主，例如人。例如，如本文所述的化合物可施用于患有霍奇金氏淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤的宿主。例如，宿主可患有非霍奇金氏淋巴瘤，如但不限于：AIDS-相关淋巴瘤；间变性大细胞淋巴瘤；自身免疫母细胞性淋巴瘤；母细胞性NK细胞淋巴瘤；伯基特淋巴瘤；伯基特样淋巴瘤(小无裂细胞淋巴瘤)；弥漫性小裂细胞淋巴瘤(DSCCL)；慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞白血病；皮肤T-细胞淋巴瘤；弥漫性大B细胞淋巴瘤；肠病型T-细胞淋巴瘤；滤泡性淋巴瘤；肝脾γ-δT-细胞淋巴瘤；淋巴母细胞淋巴瘤；套细胞淋巴瘤；边缘区淋巴瘤；鼻T-细胞淋巴瘤；小儿淋巴瘤；外周T-细胞淋巴瘤；原发性中枢神经系统淋巴瘤；T-细胞白血病；转化型淋巴瘤；治疗相关T-细胞淋巴瘤；朗格汉斯细胞组织细胞增生症；或华氏巨球蛋白血症。
在另一个实施方案中，如本文所述的化合物或其相应的药学上可接受的盐或同位素衍生物可以有效量使用以治疗患有霍奇金氏淋巴瘤的患者，例如人，所述霍奇金氏淋巴瘤如但不限于：结节硬化型经典霍奇金氏淋巴瘤(CHL)；混合细胞型CHL；淋巴细胞耗竭型CHL；淋巴细胞丰富型CHL；淋巴细胞优势型霍奇金氏淋巴瘤；或结节性淋巴细胞优势型HL。
本申请还包括细胞增殖性病症如增生、异型增生和癌前病变的治疗或预防。异型增生是病理学家在活检中可识别的癌前病变的最早形式。化合物可出于防止所述增生、异型增生或癌前病变继续发展或变成癌性的目的施用。癌前病变的实例可发生在皮肤、食管组织、乳腺和宫颈上皮内组织中。
作为BRD9蛋白质的抑制剂，本申请的化合物和组合物也可用于生物样品中。本申请的一个方面为抑制生物样品中的蛋白质活性，该方法包括使所述生物样品与如本文所述的化合物或组合物接触。如本文所用，术语“生物样品”指的是体外或离体样品，包括但不限于细胞培养物或其提取物；得自哺乳动物或其提取物的活检材料；以及血液、唾液、尿液、粪便、精液、眼泪或其他体液或其提取物。生物样品中蛋白质活性的抑制可用于本领域技术人员已知的多种目的。这样的目的的实例包括但不限于输血、器官移植和生物样本储存。
本申请的另一个方面为BRD9蛋白质在生物学和病理现象中的研究；由这样的蛋白质介导的细胞内信号转导途径的研究；以及新型蛋白质抑制剂的对比评价。这样的用途的实例包括但不限于生物测定，如酶测定和基于细胞的测定。
本申请的化合物和组合物作为BRD9抑制剂的活性可体外、体内或在细胞系中测定。体外测定包括确定对酶活性或活化蛋白的ATPase活性的抑制的测定法。备选的体外测定法量化抑制剂与溴结构域蛋白质结合的能力并可或通过在结合之前放射性标记抑制剂、分离抑制剂/溴结构域复合物和测定结合的放射性标记的量或通过进行其中新的抑制剂与和已知的放射性配体结合的溴结构域一起孵育的竞争实验来测量。用于测定本申请中用作各种溴结构域蛋白质的抑制剂的化合物的详细条件将在下文实施例中阐述。
根据前述内容，本申请还提供了一种在需要这样的治疗的患者中预防或治疗任何上述疾病或病症的方法，该方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所述的化合物或其对映异构体、非对映异构体或立体异构体或者其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。对于任何上述用途，所需剂量将随施用方式、待治疗的具体病患和期望的效果而异。
VII.组合疗法
式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物或其药学上可接受的盐可以有效量单独地或组合地使用以治疗患有如本文所述病症或BRD9介导病症的患者如人。
本文描述的所公开化合物可以有效量单独地或与本发明的另一化合物或另一生物活性剂或第二治疗剂组合地使用以治疗患有病症的患者如人，所述病症包括但不限于本文描述的那些。
术语“生物活性剂”用于描述非根据本发明选择的化合物的可与本发明的化合物组合或交替使用以实现期望的治疗结果的剂。在一个实施方案中，本发明的化合物和生物活性剂以它们在交叠的时间段内具有体内活性的方式施用，例如，具有时间段交叠的Cmax、Tmax、AUC或其他药代动力学参数。在另一个实施方案中，将本发明的化合物和生物活性剂施用于有此需要的患者，它们不具有交叠的药代动力学参数，然而，一种对另一种的治疗功效具有治疗影响。
在该实施方案的一个方面，生物活性剂为免疫调节剂，包括但不限于检查点抑制剂，作为非限制性实例，包括PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、PD-L2抑制剂、CTLA-4抑制剂、LAG-3抑制剂、TIM-3抑制剂、T-细胞活化的V-结构域Ig抑制因子(VISTA)抑制剂、小分子、肽、核苷酸或其他抑制剂。在某些方面，免疫调节剂为抗体，如单克隆抗体。
通过与PD-1受体结合来阻断PD-1和PD-L1的相互作用、进而抑制免疫抑制的PD-1抑制剂包括例如纳武单抗(Opdivo)、派姆单抗(Keytruda)、匹地利珠单抗AMP-224(AstraZeneca and MedImmune)、PF-06801591(Pfizer)、MEDI0680(AstraZeneca)、PDR001(Novartis)、REGN2810(Regeneron)、SHR-12-1(Jiangsu Hengrui Medicine Company andIncyte Corporation)、TSR-042(Tesaro)和PD-L1/VISTA抑制剂CA-170(Curis Inc.)。通过与PD-L1受体结合来阻断PD-1和PD-L1的相互作用、进而抑制免疫抑制的PD-L1抑制剂包括例如阿替利珠单抗(Tecentriq)、度伐利尤单抗(AstraZeneca and MedImmune)、KN035(Alphamab)和BMS-936559(Bristol-Myers Squibb)。与CTLA-4结合并抑制免疫抑制的CTLA-4检查点抑制剂包括但不限于伊匹单抗、曲美木单抗(AstraZeneca and MedImmune)、AGEN1884和AGEN2041(Agenus)。LAG-3检查点抑制剂包括但不限于BMS-986016(Bristol-Myers Squibb)、GSK2831781(GlaxoSmithKline)、IMP321(Prima BioMed)、LAG525(Novartis)及PD-1和LAG-3双重抑制剂MGD013(MacroGenics)。TIM-3抑制剂的一个实例为TSR-022(Tesaro)。
在某些实施方案中，检查点抑制剂选自纳武单抗/派姆单抗/和匹地利珠单抗/CT-011、MPDL3280A/RG7446；MEDI4736；MSB0010718C；BMS936559，一种PDL2/lg融合蛋白如AMP 224，或者B7-H3(例如，MGA271)、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG 3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配体的抑制剂，或其组合。
在又一个实施方案中，本文描述的活性化合物之一可与有效量的雌激素抑制剂组合或交替地以有效量施用以治疗雌性生殖系统的异常组织如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌或子宫癌，所述雌激素抑制剂包括但不限于SERM(选择性雌激素受体调节剂)、SERD(选择性雌激素受体降解剂)、完全雌激素受体降解剂或者另一形式的部分或完全雌激素拮抗剂或激动剂。部分抗雌激素比如雷洛昔芬和他莫昔芬保留了一些雌激素样作用，包括对子宫生长的雌激素样刺激，以及在一些情况下，在乳腺癌进展过程中的雌激素样作用，其实际上刺激肿瘤生长。相反，氟维司群，一种完全抗雌激素，没有对子宫的雌激素样作用并且在他莫昔芬耐药性肿瘤中是有效的。
抗雌激素化合物的非限制性实例在以下中提供：转让给Astra Zeneca的WO 2014/19176；转让给Olema Pharmaceuticals的WO2013/090921、WO 2014/203129、WO 2014/203132和US2013/0178445；美国专利号9,078,871、8,853,423和8,703,810；以及US2015/0005286、WO 2014/205136和WO 2014/205138。
抗雌激素化合物的另外的非限制性实例包括：SERMS如双炔失碳酯、巴多昔芬、broparestriol、氯烯雌醚(chlorotrianisene)、柠檬酸克罗米芬、环芬尼、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和氟维司群；芳香酶抑制剂如氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、依西美坦、法倔唑、福美司坦和来曲唑；和抗促性腺激素如亮丙瑞林、西曲瑞克、烯丙雌醇、醋酸氯地孕酮、醋酸环丙孕酮、醋酸地马孕酮、地屈孕酮、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸诺美孕酮、醋酸炔诺酮、黄体酮和螺内酯。
可根据本发明使用的其他雌激素配体见述于美国专利号4,418,068、5,478,847、5,393,763和5,457,117；WO2011/156518；美国专利号8,455,534和8,299,112；美国专利号9,078,871、8,853,423、8,703,810；US2015/0005286；WO 2014/205138；US2016/0175289；US2015/0258080；WO 2014/191726；WO 2012/084711；WO 2002/013802；WO 2002/004418；WO2002/003992；WO 2002/003991；WO 2002/003990；WO 2002/003989；WO 2002/003988；WO2002/003986；WO 2002/003977；WO 2002/003976；WO 2002/003975；WO 2006/078834；US6821989；US2002/0128276；US 6777424；US2002/0016340；US 6326392；US 6756401；US2002/0013327；US 6512002；US 6632834；US2001/0056099；US 6583170；US 6479535；WO1999/024027；US 6005102；EP 0802184；US 5998402；US 5780497；US 5880137；WO 2012/048058和WO 2007/087684中。
在另一个实施方案中，本文描述的活性化合物可与有效量的雄激素(如睾酮)抑制剂组合或交替地以有效量施用以治疗雄性生殖系统的异常组织如前列腺癌或睾丸癌，所述雄激素抑制剂包括但不限于选择性雄激素受体调节剂、选择性雄激素受体降解剂、完全雄激素受体降解剂或者另一形式的部分或完全雄激素拮抗剂。在一个实施方案中，前列腺癌或睾丸癌是雄激素抗性的。
抗雄激素化合物的非限制性实例在WO 2011/156518及美国专利号8,455,534和8,299,112中有提供。抗雄激素化合物的另外的非限制性实例包括：恩杂鲁胺、阿帕鲁胺、醋酸环丙孕酮、醋酸氯地孕酮、螺内酯、烯睾丙内酯、屈螺酮、酮康唑、topilutamide、醋酸阿比特龙和西咪替丁。
在一个实施方案中，生物活性剂为ALK抑制剂。ALK抑制剂的实例包括但不限于克唑替尼、阿来替尼、色瑞替尼、TAE684(NVP-TAE684)、GSK1838705A、AZD3463、ASP3026、PF-06463922、恩曲替尼(RXDX-101)和AP26113。
在一个实施方案中，生物活性剂为EGFR抑制剂。EGFR抑制剂的实例包括厄洛替尼(Tarceva)、吉非替尼(Iressa)、阿法替尼(Gilotrif)、罗西替尼(CO-1686)、奥希替尼(Tagrisso)、奥莫替尼(Olita)、naquotinib(ASP8273)、纳扎替尼(EGF816)、PF-06747775(Pfizer)、埃克替尼(BPI-2009)、来那替尼(HKI-272；PB272)；艾维替尼(AC0010)、EAI045、他索替尼(TH-4000；PR-610)、PF-06459988(Pfizer)、tesevatinib(XL647；EXEL-7647；KD-019)、transtinib、WZ-3146、WZ8040、CNX-2006和达克替尼(PF-00299804；Pfizer)。
在一个实施方案中，生物活性剂为HER-2抑制剂。HER-2抑制剂的实例包括曲妥珠单抗、拉帕替尼、恩美曲妥珠单抗和帕妥珠单抗。
在一个实施方案中，生物活性剂为CD20抑制剂。CD20抑制剂的实例包括奥妥珠单抗、利妥昔单抗、奥法木单抗、替伊莫单抗、托西莫单抗和奥瑞珠单抗(ocrelizumab)。
在一个实施方案中，生物活性剂为JAK3抑制剂。JAK3抑制剂的实例包括托法替尼。
在一个实施方案中，生物活性剂为BCL-2抑制剂。BCL-2抑制剂的实例包括维奈托克(venetoclax)、ABT-199(4-[4-[[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基]哌嗪-l-基]-N-[[3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯基]磺酰]-2-[(lH-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基]苯甲酰胺)、ABT-737(4-[4-[[2-(4-氯苯基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-N-[4-[[(2R)-4-(二甲基氨基)-1-苯基磺酰丁烷-2-基]氨基]-3-硝基苯基]磺酰苯甲酰胺)(navitoclax)、ABT-263((R)-4-(4-((4'-氯-4,4-二甲基-3,4,5,6-四氢-[l,l'-联苯]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-((4-吗啉代-1-(苯硫基)丁烷-2-基)氨基)-3((三氟甲基)磺酰)苯基)磺酰)苯甲酰胺)、GX15-070(甲磺酸奥巴克拉(obatoclax mesylate)，(2Z)-2-[(5Z)-5-[(3,5-二甲基-lH-吡咯-2-基)亚甲基]-4-甲氧基吡咯-2-亚基]吲哚甲磺酸)))、2-甲氧基-抗霉素A3、YC137(4-(4,9-二氧代-4,9-二氢萘并[2,3-d]噻唑-2-基氨基)-苯基酯)、pogosin、2-氨基-6-溴-4-(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-4H-色烯-3-甲酸乙酯、尼洛替尼-d3、TW-37(N-[4-[[2-(1,1-二甲基乙基)苯基]磺酰]苯基]-2,3,4-三羟基-5-[[2-(1-甲基乙基)苯基]甲基]苯甲酰胺)、Apogossypolone(ApoG2)、HA14-1、AT101、sabutoclax、藤黄酸或G3139(Oblimersen)。
在一个实施方案中，生物活性剂为激酶抑制剂。在一个实施方案中，激酶抑制剂选自磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂、布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂、或脾酪氨酸激酶(Syk)抑制剂或其组合。
PI3激酶抑制剂的实例包括但不限于渥曼青霉素(Wortmannin)、脱甲绿胶霉素、哌立福新、艾代拉里斯(idelalisib)、Pictilisib、Palomid 529、ZSTK474、PWT33597、CUDC-907和AEZS-136、杜韦利西布(duvelisib)、GS-9820、BKM120、GDC-0032(Taselisib)(2-[4-[2-(2-异丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-基)-5,6-二氢咪唑并[1,2-d][1,4]苯并氧氮杂-9-基]吡唑-1-基]-2-甲基丙酰胺)、MLN-1117((2R)-1-苯氧基-2-丁烷基氢(S)-甲基膦酸酯；或甲基(氧代){[(2R)-l-苯氧基-2-丁烷基]氧基}鏻))、BYL-719((2S)-N1-[4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基乙基)-4-吡啶基]-2-噻唑基]-1,2-吡咯烷二甲酰胺)、GSK2126458(2,4-二氟-N-{2-(甲基氧基)-5-[4-(4-哒嗪基)-6-喹啉基]-3-吡啶基}苯磺酰胺)(omipalisib)、TGX-221((±)-7-甲基-2-(吗啉-4-基)-9-(l-苯基氨基乙基)-吡啶并[l,2-a]-嘧啶-4-酮)、GSK2636771(2-甲基-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苄基)-6-吗啉代-lH-苯并[d]咪唑-4-甲酸二盐酸盐)、KIN-193((R)-2-((l-(7-甲基-2-吗啉代-4-氧代-4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-9-基)乙基)氨基)苯甲酸)、TGR-1202/RP5264、GS-9820((S)-l-(4-((2-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-甲基-4-羟基丙烷-1-酮)、GS-1101(5-氟-3-苯基-2-([S)]-1-[9H-嘌呤-6-基氨基]-丙基)-3H-喹唑啉-4-酮)、AMG-319、GSK-2269557、SAR245409(N-(4-(N-(3-((3,5-二甲氧基苯基)氨基)喹喔啉-2-基)氨磺酰)苯基)-3-甲氧基-4-甲基苯甲酰胺)、BAY80-6946(2-氨基-N-(7-甲氧基-8-(3-吗啉代丙氧基)-2,3-二氢咪唑并[l,2-c]quinaz)、AS252424(5-[l-[5-(4-氟-2-羟基-苯基)-呋喃-2-基]-甲基-(Z)-亚基]-噻唑烷-2,4-二酮)、CZ 24832(5-(2-氨基-8-氟-[l,2,4]三唑并[l,5-a]吡啶-6-基)-N-叔-丁基吡啶-3-磺酰胺)、Buparlisib(5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺)、GDC-0941(2-(lH-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰)-l-哌嗪基]甲基]-4-(4-吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶)、GDC-0980((S)-1-(4-((2-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)哌嗪-l-基)-2-羟基丙烷-l-酮(也称为RG7422))、SF1126((8S,14S,17S)-14-(羧甲基)-8-(3-胍基丙基)-17-(羟甲基)-3,6,9,12,15-五氧代-1-(4-(4-氧代-8-苯基-4H-色烯-2-基)吗啉-4-鎓)-2-氧杂-7,10,13,16-四氮杂十八烷-18-酸酯)、PF-05212384(N-[4-[[4-(二甲基氨基)-1-哌啶基]羰基]苯基]-N'-[4-(4,6-二-4-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)苯基]脲)(gedatolisib)、LY3023414、BEZ235(2-甲基-2-{4-[3-甲基-2-氧代-8-(喹啉-3-基)-2,3-二氢-lH-咪唑并[4,5-c]喹啉-l-基]苯基}丙腈)(dactolisib)、XL-765(N-(3-(N-(3-(3,5-二甲氧基苯基氨基)喹喔啉-2-基)氨磺酰)苯基)-3-甲氧基-4-甲基苯甲酰胺)和GSK1059615(5-[[4-(4-吡啶基)-6-喹啉基]亚甲基]-2,4-噻唑烷二酮)、PX886([(3aR,6E,9S,9aR,10R,11aS)-6-[[双(丙-2-烯基)氨基]亚甲基]-5-羟基-9-(甲氧基甲基)-9a,11a-二甲基-l,4,7-三氧代-2,3,3a,9,10,ll-六氢茚并[4,5h]异色烯-10-基]乙酸酯(也称为sonolisib))、LY294002、AZD8186、PF-4989216、pilaralisib、GNE-317、PI-3065、PI-103、NU7441(KU-57788)、HS173、VS-5584(SB2343)、CZC24832、TG100-115、A66、YM201636、CAY10505、PIK-75、PIK-93、AS-605240、BGT226(NVP-BGT226)、AZD6482、voxtalisib、alpelisib、IC-87114、TGI100713、CH5132799、PKI-402、copanlisib(BAY 80-6946)、XL 147、PIK-90、PIK-293、PIK-294、3-MA(3-甲基腺嘌呤)、AS-252424、AS-604850、apitolisib(GDC-0980；RG7422)。
BTK抑制剂的实例包括伊布替尼(也称为PCI-32765)(ImbruvicaTM)(1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基-苯基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基]丙-2-烯-1-酮)、基于二苯胺基嘧啶的抑制剂如AVL-101和AVL-291/292(N-(3-((5-氟-2-((4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)苯基)丙烯酰胺)(Avila Therapeutics)(参见美国专利公开号2011/0117073，其全文并入本文)、达沙替尼([N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-(6-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基氨基)噻唑-5-甲酰胺]、LFM-A13(α-氰基-β-羟基-β-甲基-N-(2,5-二溴苯基)丙烯酰胺)、GDC-0834([R-N-(3-(6-(4-(1,4-二甲基-3-氧代哌嗪-2-基)苯基氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)-2-甲基苯基)-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-2-甲酰胺]、CGI-560 4-(叔-丁基)-N-(3-(8-(苯基氨基)咪唑并[1,2-a]吡嗪-6-基)苯基)苯甲酰胺、CGI-1746(4-(叔-丁基)-N-(2-甲基-3-(4-甲基-6-((4-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)苯基)苯甲酰胺)、CNX-774(4-(4-((4-((3-丙烯酰胺基苯基)氨基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)苯氧基)-N-甲基吡啶酰胺)、CTA056(7-苄基-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-2-(4-(吡啶-4-基)苯基)-1H-咪唑并[4,5-g]喹喔啉-6(5H)-酮)、GDC-0834((R)-N-(3-(6-((4-(1,4-二甲基-3-氧代哌嗪-2-基)苯基)氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)-2-甲基苯基)-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-2-甲酰胺)、GDC-0837((R)-N-(3-(6-((4-(1,4-二甲基-3-氧代哌嗪-2-基)苯基)氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)-2-甲基苯基)-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-2-甲酰胺)、HM-71224、ACP-196、ONO-4059(Ono Pharmaceuticals)、PRT062607(4-((3-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯基)氨基)-2-(((1R,2S)-2-氨基环己基)氨基)嘧啶-5-甲酰胺盐酸盐)、QL-47(1-(1-丙烯酰吲哚啉-6-基)-9-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[h][1,6]萘啶-2(1H)-酮)和RN486(6-环丙基-8-氟-2-(2-羟甲基-3-{1-甲基-5-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-吡啶-3-基}-苯基)-2H-异喹啉-1-酮)及能够抑制BTK活性的其他分子，例如，Akinleye etah,Journal of Hematology&Oncology,2013,6:59中公开的那些BTK抑制剂，其全部内容通过引用并入本文。
Syk抑制剂包括但不限于Cerdulatinib(4-(环丙基氨基)-2-((4-(4-(乙基磺酰)哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶-5-甲酰胺)、entospletinib(6-(1H-吲唑-6-基)-N-(4-吗啉代苯基)咪唑并[1,2-a]吡嗪-8-胺)、福坦替尼(fostamatinib)([6-({5-氟-2-[(3,4,5-三甲氧基苯基)氨基]-4-嘧啶基}氨基)-2,2-二甲基-3-氧代-2,3-二氢-4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-基]甲基二氢磷酸盐)、福坦替尼二钠盐((6-((5-氟-2-((3,4,5-三甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-2,2-二甲基-3-氧代-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4(3H)-基)甲基磷酸钠)、BAY 61-3606(2-(7-(3,4-二甲氧基苯基)-咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)-烟酰胺HCl)、RO9021(6-[(1R,2S)-2-氨基-环己基氨基]-4-(5,6-二甲基-吡啶-2-基氨基)-哒嗪-3-甲酸酰胺)、伊马替尼(Gleevac；4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-N-(4-甲基-3-{[4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)苯甲酰胺)、十字孢碱、GSK143(2-(((3R,4R)-3-氨基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-4-(对-甲苯基氨基)嘧啶-5-甲酰胺)、PP2(1-(叔-丁基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)、PRT-060318(2-(((1R,2S)-2-氨基环己基)氨基)-4-(间-甲苯基氨基)嘧啶-5-甲酰胺)、PRT-062607(4-((3-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯基)氨基)-2-(((1R,2S)-2-氨基环己基)氨基)嘧啶-5-甲酰胺盐酸盐)、R112(3,3'-((5-氟嘧啶-2,4-二基)双(氮烷二基))二酚)、R348(3-乙基-4-甲基吡啶)、R406(6-((5-氟-2-((3,4,5-三甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-2,2-二甲基-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-3(4H)-酮)、白皮杉醇(3-羟基白藜芦醇)、YM193306(参见Singh et al.Discovery andDevelopment of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643)、7-氮杂吲哚、白皮杉醇、ER-27319(参见Singh et al.Discovery and Developmentof Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、化合物D(参见Singh et al.Discovery and Development of SpleenTyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、PRT060318(参见Singh et al.Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、木犀草素(参见Singh et al.Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、芹菜素(参见Singh etal.Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、槲皮素(参见Singh et al.Discoveryand Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、漆黄素(参见Singh et al.Discovery and Development ofSpleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、杨梅素(参见Singh et al.Discovery and Development of Spleen TyrosineKinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)、桑黄素(参见Singh et al.Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)。
在一个实施方案中，生物活性剂为MEK抑制剂。MEK抑制剂是公知的并包括例如曲美替尼/GSKl120212(N-(3-{3-环丙基-5-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-l(2H-基}苯基)乙酰胺)、司美替尼(selumetinib)(6-(4-溴-2-氯苯胺基)-7-氟-N-(2-羟基乙氧基)-3-甲基苯并咪唑-5-甲酰胺)、pimasertib/AS703026/MSC 1935369((S)-N-(2,3-二羟基丙基)-3-((2-氟-4-碘苯基)氨基)异烟酰胺)、XL-518/GDC-0973(l-({3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]苯基}羰基)-3-[(2S)-哌啶-2-基]氮杂环丁烷-3-醇)、瑞法替尼(refametinib)/BAY869766/RDEAl 19(N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基氨基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羟基丙基)环丙烷-1-磺酰胺)、PD-0325901(N-[(2R)-2,3-二羟基丙氧基]-3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-苯甲酰胺)、TAK733((R)-3-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-5-(2-氟-4-碘苯基氨基)-8-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-4,7(3H,8H)-二酮)、MEK162/ARRY438162(5-[(4-溴-2-氟苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羟基乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺)、R05126766(3-[[3-氟-2-(甲基氨磺酰氨基)-4-吡啶基]甲基]-4-甲基-7-嘧啶-2-基氧基色烯-2-酮)、WX-554、R04987655/CH4987655(3,4-二氟-2-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-N-(2-羟基乙氧基)-5-((3-氧代-l,2-噁嗪烷-2-基)甲基)苯甲酰胺)或AZD8330(2-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-N-(2-羟基乙氧基)-1,5-二甲基-6-氧代-l,6-二氢吡啶-3-甲酰胺)、U0126-EtOH、PD184352(CI-1040)、GDC-0623、BI-847325、考比替尼、PD98059、BIX 02189、BIX 02188、比美替尼、SL-327、TAK-733、PD318088。
在一个实施方案中，生物活性剂为Raf抑制剂。Raf抑制剂是已知的并包括例如维罗非尼(Vemurafinib)(N-[3-[[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基]羰基]-2,4-二氟苯基]-1-丙烷磺酰胺)、甲苯磺酸索拉非尼(4-[4-[[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨甲酰基氨基]苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐)、AZ628(3-(2-氰基丙烷-2-基)-N-(4-甲基-3-(3-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基氨基)苯基)苯甲酰胺)、NVP-BHG712(4-甲基-3-(1-甲基-6-(吡啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基氨基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺)、RAF-265(1-甲基-5-[2-[5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]吡啶-4-基]氧基-N-[4-(三氟甲基)苯基]苯并咪唑-2-胺)、2-Bromoaldisine(2-溴-6,7-二氢-1H,5H-吡咯并[2,3-c]氮杂-4,8-二酮)、Raf激酶抑制剂IV(2-氯-5-(2-苯基-5-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)苯酚)、索拉非尼N-氧化物(4-[4-[[[[4-氯-3(三氟甲基)苯基]氨基]羰基]氨基]苯氧基]-N-甲基-2-吡啶甲酰胺1-氧化物)、PLX-4720、达拉非尼(GSK2118436)、GDC-0879、RAF265、AZ 628、SB590885、ZM336372、GW5074、TAK-632、CEP-32496、LY3009120和GX818(康奈非尼)。
在一个实施方案中，生物活性剂为AKT抑制剂，包括但不限于MK-2206、GSK690693、哌立福新、(KRX-0401)、GDC-0068、曲西立滨、AZD5363、和厚朴酚、PF-04691502和米替福新(一种FLT-3抑制剂)，包括但不限于P406、多韦替尼、奎扎替尼(AC220)、Amuvatinib(MP-470)、坦度替尼(MLN518)、ENMD-2076和KW-2449或其组合。
在一个实施方案中，生物活性剂为mTOR抑制剂。mTOR抑制剂的实例包括但不限于雷帕霉素及其类似物、依维莫司(Afinitor)、替西罗莫司、利达福莫司(ridaforolimus)、西罗莫司和地磷莫司(deforolimus)。MEK抑制剂的实例包括但不限于曲美替尼/GSKl120212(N-(3-{3-环丙基-5-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-l(2H-基}苯基)乙酰胺)、司美替尼(selumetinob)(6-(4-溴-2-氯苯胺基)-7-氟-N-(2-羟基乙氧基)-3-甲基苯并咪唑-5-甲酰胺)、pimasertib/AS703026/MSC1935369((S)-N-(2,3-二羟基丙基)-3-((2-氟-4-碘苯基)氨基)异烟酰胺)、XL-518/GDC-0973(l-({3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]苯基}羰基)-3-[(2S)-哌啶-2-基]氮杂环丁烷-3-醇)(考比替尼)、瑞法替尼(refametinib)/BAY869766/RDEAl19(N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基氨基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羟基丙基)环丙烷-1-磺酰胺)、PD-0325901(N-[(2R)-2,3-二羟基丙氧基]-3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-苯甲酰胺)、TAK733((R)-3-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-5-(2-氟-4-碘苯基氨基)-8-甲基吡啶并[2,3d]嘧啶-4,7(3H,8H)-二酮)、MEK162/ARRY438162(5-[(4-溴-2-氟苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羟基乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺)、R05126766(3-[[3-氟-2-(甲基氨磺酰氨基)-4-吡啶基]甲基]-4-甲基-7-嘧啶-2-基氧基色烯-2-酮)、WX-554、R04987655/CH4987655(3,4-二氟-2-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-N-(2-羟基乙氧基)-5-((3-氧代-l,2-噁嗪烷-2-基)甲基)苯甲酰胺)或AZD8330(2-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-N-(2-羟基乙氧基)-1,5-二甲基-6-氧代-l,6-二氢吡啶-3-甲酰胺)。
在一个实施方案中，生物活性剂为RAS抑制剂。RAS抑制剂的实例包括但不限于Reolysin和siG12D LODER。
在一个实施方案中，生物活性剂为HSP抑制剂。HSP抑制剂包括但不限于格尔德霉素或17-N-烯丙基氨基-17-脱甲氧格尔德霉素(17AAG)和Radicicol。
另外的生物活性化合物包括例如依维莫司、曲贝替定、abraxane、TLK 286、AV-299、DN-101、帕唑帕尼、GSK690693、RTA 744、ON 0910.Na、AZD 6244(ARRY-142886)、AMN-107、TKI-258、GSK461364、AZD 1152、enzastaurin、凡德他尼、ARQ-197、MK-0457、MLN8054、PHA-739358、R-763、AT-9263、FLT-3抑制剂、VEGFR抑制剂、aurora激酶抑制剂、PIK-1调节剂、HDAC抑制剂、c-MET抑制剂、PARP抑制剂、Cdk抑制剂、IGFR-TK抑制剂、抗-HGF抗体、局灶性粘附激酶抑制剂、Map激酶激酶(mek)抑制剂、VEGF trap抗体、培美曲塞、帕尼单抗、氨柔比星、奥戈伏单抗(oregovomab)、Lep-etu、诺拉曲塞、azd2171、巴他布林(batabulin)、atumumab、扎木单抗(zanolimumab)、edotecarin、汉防己甲素、；鲁比替康(rubitecan)、帕托珠利、奥利默森(oblimersen)、替西木单抗、伊匹单抗、棉子酚、Bio 111、131-I-TM-601、ALT-110、BIO 140、CC 8490、cilengitide、吉马替康、IL13-PE38QQR、INO 1001、IPdR1 KRX-0402、硫蒽酮(lucanthone)、LY317615、纽迪(neuradiab)、维特斯潘(vitespan)、Rta 744、Sdx 102、他仑帕奈(talampanel)、阿曲生坦(atrasentan)、Xr 311、罗咪酯肽(romidepsin)、ADS-100380、舒尼替尼、5-氟尿嘧啶、伏立诺他(vorinostat)、依托泊苷、吉西他滨、多柔比星、多柔比星脂质体、5′-脱氧-5-氟尿苷、长春新碱、替莫唑胺、ZK-304709、塞利西利；PD0325901、AZD-6244、卡培他滨、L-谷氨酸、N-[4-[2-(2-氨基-4,7-二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰]-二钠盐七水合物、喜树碱、PEG标记的伊立替康、他莫昔芬、柠檬酸托瑞米芬、阿那曲唑、依西美坦、来曲唑、DES(己烯雌酚)、雌二醇、雌激素、缀合雌激素、贝伐珠单抗、IMC-1C11、CHIR-258)；3-[5-(甲基磺酰哌啶甲基)-吲哚基-喹诺酮、瓦他拉尼(vatalanib)、AG-013736、AVE-0005、醋酸戈舍瑞林、醋酸亮丙瑞林、双羟萘酸曲普瑞林、醋酸甲羟孕酮、己酸羟孕酮、醋酸甲地孕酮、雷洛昔芬、比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特(nilutamide)、醋酸甲地孕酮、CP-724714；TAK-165、HKI-272、厄洛替尼、拉帕替尼、卡拉替尼(canertinib)、ABX-EGF抗体、爱必妥(erbitux)、EKB-569、PKI-166、GW-572016、Ionafarnib、BMS-214662、替吡法尼(tipifarnib)；阿米福汀(amifostine)、NVP-LAQ824、辛二酰苯胺异羟肟酸、丙戊酸、曲古抑菌素A、FK-228、SU11248、索拉非尼、KRN951、氨鲁米特、安吖啶、阿那格雷、L-天冬酰胺酶、卡介苗(BCG)、阿霉素、博来霉素、布舍瑞林、白消安、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、更生霉素、柔红霉素、己烯雌酚、表柔比星、氟达拉滨、氟氢可的松、氟甲睾酮、氟他胺、格列卫(gleevac)、吉西他滨、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、亮丙瑞林、左旋四咪唑、洛莫司汀、氮芥、美法仑、6-巯基嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特(nilutamide)、奥曲肽、奥沙利铂、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、叶吩姆钠(porfimer)、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链佐星、替尼泊苷、睾酮、沙利度胺、硫鸟嘌呤、噻替派、维甲酸、长春地辛、13-顺式-视黄酸、苯丙氨酸氮芥、尿嘧啶氮芥、雌氮芥、六甲蜜胺、氟尿苷、5-脱氧尿苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷、6-巯基嘌呤、脱氧助间型霉素、骨化三醇、戊柔比星、光神霉素、长春碱、长春瑞滨、拓扑替康、razoxin、马立马司他、COL-3、新伐司他、BMS-275291、角鲨胺、内皮抑素、SU5416、SU6668、EMD121974、白介素-12、IM862、血管抑素、vitaxin、屈洛昔芬、idoxyfene、螺内酯、非那雄胺、西咪替丁、曲妥珠单抗、白介素融合毒素(denileukin diftitox)、吉非替尼、硼替佐米(bortezimib)、紫杉醇、不含聚氧乙烯蓖麻油的紫杉醇、多西紫杉醇、埃坡霉素B、BMS-247550、BMS-310705、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、哌喷昔芬(pipendoxifene)、ERA-923、阿佐昔芬、氟维司群、阿考比芬、拉索昔芬、吲哚昔酚(idoxifene)、TSE-424、HMR-3339、ZK186619、拓扑替康、PTK787/ZK 222584、VX-745、PD184352、雷帕霉素、40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素、替西罗莫司(temsirolimus)、AP-23573、RAD001、ABT-578、BC-210、LY294002、LY292223、LY292696、LY293684、LY293646、渥曼青霉素、ZM336372、L-779,450、PEG-非格司亭、达贝泊汀(darbepoetin)、红细胞生成素、粒细胞集落刺激因子、唑来膦酸、强的松、西妥昔单抗、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、组氨瑞林、PEG化干扰素α-2a、干扰素α-2a、PEG化干扰素α-2b、干扰素α-2b、阿扎胞苷、PEG-L-天冬酰胺酶、来那度胺、吉妥单抗、氢化可的松、白介素-11、右雷佐生、阿仑单抗、全反式维甲酸、酮康唑、白介素-2、甲地孕酮、免疫球蛋白、氮芥、甲基强的松龙、替伊莫单抗(ibritgumomabtiuxetan)、雄激素、地西他滨、六甲蜜胺、蓓萨罗丁、托西莫单抗、三氧化二砷、可的松、editronate、米托坦、环孢霉素、柔红霉素脂质体、Edwina-天冬酰胺酶、锶89、卡索匹坦、奈妥匹坦、NK-1受体拮抗剂、帕洛诺司琼、阿瑞吡坦、苯海拉明、羟嗪、甲氧氯普胺、劳拉西泮、阿普唑仑、氟哌啶醇、氟哌利多、屈大麻酚、地塞米松、甲基强的松龙、普鲁氯嗪、格拉司琼、昂丹司琼、多拉司琼、托烷司琼、PEG非格司亭、红细胞生成素、依泊汀α、达贝泊汀α及其混合物。
在某些实施方案中，化合物与异环磷酰胺组合施用。
在一个实施方案中，生物活性剂选自但不限于甲磺酸伊马替尼达沙替尼尼洛替尼博舒替尼曲妥珠单抗曲妥珠单抗-DM1、帕妥珠单抗(PerjetaTM)、拉帕替尼吉非替尼厄洛替尼西妥昔单抗帕尼单抗凡德他尼维莫非尼伏立诺他罗米地辛贝沙罗汀阿利维甲酸维甲酸卡非佐米(KyprolisTM)、普拉曲沙贝伐珠单抗阿柏西普索拉非尼舒尼替尼帕唑帕尼瑞戈非尼和卡博替尼(CometriqTM)。
在某些方面，生物活性剂为抗炎剂、化学治疗剂、放射治疗剂、另外的治疗剂或免疫抑制剂。
合适的化学治疗生物活性剂包括但不限于放射性分子、毒素(也称为细胞毒素或细胞毒性剂)，其包括对细胞活力有害的任何剂，以及含有化学治疗化合物的脂质体或其他囊泡。一般的抗癌药物包括：长春新碱或长春新碱脂质体柔红霉素(柔红霉素或)或多柔比星阿糖胞苷(胞嘧啶阿拉伯糖苷、ara-C或)、L-天冬酰胺酶或PEG-L-天冬酰胺酶(培门冬酶或)、依托泊苷(VP-16)、替尼泊苷6-巯基嘌呤(6-MP或)、甲氨蝶呤、环磷酰胺泼尼松、地塞米松(地卡特隆)、伊马替尼达沙替尼尼洛替尼博舒替尼和普纳替尼(IclusigTM)。
另外的合适的化学治疗剂的实例包括但不限于1-去氢睾丸素、5-氟尿嘧啶达卡巴嗪、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、放线菌素D、阿霉素、阿地白介素、烷化剂、别嘌醇钠、六甲蜜胺、氨磷汀、阿那曲唑、安曲霉素(AMC))、抗有丝分裂剂、顺式-二氯二胺铂(II)(DDP)顺铂)、二氨基二氯铂、蒽环类药物、抗生素、抗代谢物、天冬酰胺酶、活BCG(膀胱内)、倍他米松磷酸钠和醋酸倍他米松、比卡鲁胺、硫酸博来霉素、白消安、甲酰四氢叶酸钙、卡奇霉素、卡培他滨、卡铂、洛莫司汀(CCNU)、卡莫司汀(BSNU)、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、秋水仙碱、缀合雌激素、环磷酰胺、Cyclothosphamide、阿糖胞苷、阿糖胞苷、细胞松弛素B、Cytoxan、达卡巴嗪、更生霉素、更生霉素(以前为放线菌素)、盐酸柔红霉素、柠檬酸柔红霉素(daunorucbicin citrate)、地尼白介素(denileukin diftitox)、右雷佐生、二溴甘露醇、二羟基炭疽菌素二酮、多西他赛、甲磺酸多拉司琼、盐酸多柔比星、屈大麻酚、大肠杆菌L-天冬酰胺酶、吐根素、依泊汀-α、欧文氏菌L-天冬酰胺酶、酯化雌激素、雌二醇、雌氮芥磷酸钠、溴化乙锭、乙炔雌二醇、依替膦酸盐、依托泊苷嗜橙菌因子、磷酸依托泊苷、非格司亭、氟尿苷、氟康唑、磷酸氟达拉宾、氟尿嘧啶、氟他胺、亚叶酸、盐酸吉西他滨、糖皮质激素、醋酸戈舍瑞林、短杆菌肽D、盐酸格拉司琼、羟基脲、盐酸伊达比星、异环磷酰胺、干扰素α-2b、盐酸伊立替康、来曲唑、甲酰四氢叶酸钙、醋酸亮丙瑞林、盐酸左旋咪唑、利多卡因、洛莫司汀、maytansinoid、盐酸氮芥、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、盐酸美法仑、巯基嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、甲睾酮、光辉霉素、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、醋酸奥曲肽、盐酸昂丹司琼、紫杉醇、帕米膦酸二钠、喷司他丁、盐酸毛果芸香碱、普利霉素、具有卡莫司汀植入物的聚苯丙生20、卟吩姆钠、普鲁卡因、盐酸甲基苄肼、普萘洛尔、利妥昔单抗、沙莫司亭、链脲佐菌素、他莫昔芬、紫杉醇、替尼泊苷、替尼泊苷(teniposide)、替尼泊苷(tenoposide)、睾内酯(testolactone)、丁卡因(tetracaine)、噻依派(thioepa)苯丁酸氮芥、硫鸟嘌呤、噻替派、盐酸拓扑替康、柠檬酸托瑞米芬、曲妥珠单抗、维甲酸、戊柔比星、硫酸长春碱、硫酸长春新碱和酒石酸长春瑞滨。
在一些实施方案中，本发明的化合物与化学治疗剂(例如，细胞毒性剂或可用于治疗癌症的其他化学化合物)组合施用。化学治疗剂的实例包括烷化剂、抗代谢物、叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物和相关抑制剂、长春花生物碱、表鬼臼毒素、抗生素、L-天冬酰胺酶、拓扑异构酶抑制剂、干扰素、铂配位络合物、蒽二酮取代脲、甲基肼衍生物、肾上腺皮质抑制剂、肾上腺皮质激素、黄体酮、雌激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素和促性腺激素释放激素类似物。还包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、亚叶酸钙(LV)、伊立替康、奥沙利铂、卡培他滨、紫杉醇和多西他赛。化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氯丙啶类如苯佐替哌、卡波醌、美妥替哌和乌瑞替哌(uredopa)；亚乙基亚胺类和甲基蜜胺类，包括六甲蜜胺、曲他胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；番荔枝内酯(尤其是布拉他辛和布拉他辛酮)；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康)；苔藓抑素；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；隐藻素类(特别是隐藻素1和隐藻素8)；多拉司他汀；倍癌霉素(duocarmycin)(包括合成类似物、KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；pancratistatin；葡枝珊瑚醇(sarcodictyin)；海绵抑素(spongistatin)；氮芥类如苯丁酸氮芥、萘氮芥、胆磷酰胺、雌氮芥、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、盐酸氧氮芥、美法仑、新氮芥、苯芥胆甾醇、松龙苯芥、曲磷胺、尿嘧啶氮芥；硝基脲类如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素类如烯二炔类抗生素(例如，加利车霉素，尤其是加利车霉素γll和加利车霉素ωll)(参见例如Agnew,Chem.Inti.EdEngl.33:183-186(1994))；蒽环类(dynemicin)，包括dynemicin A；双膦酸盐类，如氯膦酸盐；埃斯波霉素；以及新抑癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔类抗生素发色团)、阿克拉霉素、放线菌素、氨茴霉素(authramycin)、氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素C、carabicin、洋红霉素、嗜癌霉素、色霉素(chromomycinis)、放线菌素D、柔红霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、(多柔比星，包括吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-吡咯代多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素如丝裂霉素C、霉酚酸诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素、培洛霉素、potfiromycin、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑菌素、链脲霉素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他汀、佐柔比星；抗代谢物如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶酰三谷氨酸、三甲曲沙；嘌呤类似物如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、多西氟尿啶、依诺他滨、氟尿苷；雄激素类如卡鲁睾酮、羟甲雄酮丙酸酯、表硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺类如氨鲁米特、曼托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂如亚叶酸；醋葡内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基酮戊酸；恩尿嘧啶；氨苯吖啶；bestrabucil；比生群；依达曲沙；defofamine；地美可辛；地吖醌；依洛尼塞(elfomithine)；醋酸羟吡咔唑；epothilone；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；美登木素生物碱类如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇(mopidanmol)；二胺硝吖啶；喷司他丁；氮氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；多糖复合物(JHS NaturalProducts,Eugene,OR)；雷佐生；根霉素；西索菲兰；锗螺胺；细交链孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亚胺醌；2,2',2"-三氯三乙胺；单端孢菌素(尤其是T-2霉素、verracurin A、杆孢菌素A和蛇形菌素)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；阿糖胞苷("Ara-C")；环磷酰胺；噻替派；紫杉烷，例如，(紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,NJ)、紫杉醇的不含聚氧乙烯蓖麻油的白蛋白工程纳米颗粒制剂(American Pharmaceutical Partners,Schaumberg,IL)和多西他赛(Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；铂配位络合物如顺铂、奥沙利铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；诺安托；替尼泊甙；依达曲沙；柔红霉素；氨基蝶呤；希罗达；伊拜膦酸盐；伊立替康(例如，CPT-1 1)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇如视黄酸；卡培他滨；和上述任何物质的药学上可接受的盐、酸或衍生物。两种或多种化学治疗剂可以混合使用以与本发明的化合物组合施用。组合化学疗法的合适给药方案是本领域已知的。例如，组合给药方案见述于Saltz等人,Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.18:233a(1999)和Douillard等人,Lancet 355(9209):1041-1047(2000)中。
可与本文公开的化合物组合施用的另外的治疗剂可包括贝伐珠单抗、苏尼替尼、索拉非尼、2-甲氧基雌二醇或2ME2、finasunate、瓦他拉尼、凡德他尼、aflibercept、伏洛昔单抗、埃达组单抗(MEDI-522)、cilengitide、厄洛替尼、西妥昔单抗、帕尼单抗、吉非替尼、曲妥珠单抗、多韦替尼、芬妥木单抗、atacicept、利妥昔单抗、阿仑单抗、阿地白介素、阿替利珠单抗、托珠单抗、替西罗莫司、依维莫司、卢卡木单抗、达西组单抗、HLL1、huN901-DM1、atiprimod、那他珠单抗、硼替佐米、卡非佐米、马里佐米、坦螺旋霉素、甲磺酸沙奎那韦、利托那韦、甲磺酸奈非那韦、硫酸茚地那韦、贝利司他、帕比司他、马帕木单抗、来沙木单抗、度拉纳明、ABT-737、奥利默森、plitidepsin、talmapimod、P276-00、enzastaurin、tipifarnib、哌立福新、伊马替尼、达沙替尼、来那度胺、沙利度胺、辛伐他汀、塞来昔布、巴多昔芬、AZD4547、利妥木单抗、奥沙利铂(Eloxatin)、PD0332991、瑞博西尼(LEE011)、玻玛西尼(LY2835219)、HDM201、氟维司群(Faslodex)、依西美坦(Aromasin)、PIM447、鲁索替尼(INC424)、BGJ398、耐昔妥珠单抗、培美曲塞(Alimta)和雷莫芦单抗(IMC-1121B)。
在一个实施方案中，另外的治疗为单克隆抗体(MAb)。一些MAb会刺激免疫反应，从而破坏癌细胞。与B细胞自然产生的抗体类似，这些MAb可能会“包裹”癌细胞表面，从而引发免疫系统对其的破坏。例如，贝伐珠单抗靶向血管内皮生长因子(VEGF)，这是一种由肿瘤细胞和肿瘤微环境中的其他细胞分泌的蛋白质，其可促进肿瘤血管的发育。当与贝伐珠单抗结合时，VEGF不能与其细胞受体相互作用，从而阻止导致新血管生长的信号传导。类似地，西妥昔单抗和帕尼单抗靶向表皮生长因子受体(EGFR)，而曲妥珠单抗靶向人表皮生长因子受体2(HER-2)。与细胞表面生长因子受体结合的MAb会阻止靶向受体发送其正常生长促进信号。它们还可能引发细胞凋亡并激活免疫系统以破坏肿瘤细胞。
在本发明的一个方面，生物活性剂为免疫抑制剂。免疫抑制剂可为钙调神经磷酸酶抑制剂，例如，环孢素或子囊霉素，例如环孢素AFK506(他克莫司)、吡美莫司，mTOR抑制剂，例如，雷帕霉素或其衍生物，例如西罗莫司依维莫司替西罗莫司、佐他莫司、优美莫司-7、优美莫司-9，雷帕霉素类似物，例如利达福莫司、硫唑嘌呤、campath 1H，S1P受体调节剂，例如芬戈莫德或其类似物，抗IL-8抗体，霉酚酸或其盐，例如钠盐，或其前药，例如霉酚酸酯OKT3(ORTHOCLONE)、泼尼松、布喹那钠、OKT4、T10B9.A-3A、33B3.1、15-脱氧精胍菌素、曲培莫司、来氟米特CTLAI-Ig、抗-CD25、抗-IL2R、巴利昔单抗达利珠单抗咪唑立宾、甲氨蝶呤、地塞米松、ISAtx-247、SDZASM 981(吡美莫司、)、CTLA4lg(阿巴西普)、贝拉希普、LFA3lg、依那西普(由Immunex以出售)、阿达木单抗英夫利昔单抗抗-LFA-1抗体、那他珠单抗恩莫单抗、戈利木单抗、抗胸腺细胞免疫球蛋白、西利珠单抗、阿法西普、依法利珠单抗、颇得斯安、美沙拉嗪、阿肠克锭、磷酸可待因、扑炎痛(benorylate)、芬布芬、萘普生、双氯芬酸、依托度酸和吲哚美辛、阿司匹林和布洛芬。
在一些实施方案中，生物活性剂为治疗剂，其为用于癌症治疗中的生物制剂如细胞因子(例如，干扰素或白介素(例如，IL-2))。在一些实施方案中，所述生物制剂为抗血管生成剂，如抗-VEGF剂，例如贝伐珠单抗在一些实施方案中，所述生物制剂为基于免疫球蛋白的生物制剂，例如，激动靶标以刺激抗癌反应或拮抗对癌症重要的抗原的单克隆抗体(例如，人源化抗体、完全人抗体、Fc融合蛋白或其功能片段)。这样的剂包括(利妥昔单抗)；(达利珠单抗)；(巴利昔单抗)；(帕利珠单抗)；(英夫利昔单抗)；(曲妥珠单抗)；(吉妥珠单抗奥佐米星)；(阿仑单抗)；(替伊莫单抗)；(阿达木单抗)；(奥马珠单抗)；(托西莫单抗-l-131)；(依法利珠单抗)；(西妥昔单抗)；(贝伐珠单抗)；(那他珠单抗)；(托珠单抗)；(帕尼单抗)；(兰尼单抗)；(伊库珠单抗)；(赛妥珠单抗)；(戈利木单抗)；(卡那单抗)；(乌司奴单抗)；(奥法木单抗)；(地舒单抗)；(莫维组单抗)；(雷昔库单抗)；(贝利尤单抗)；(伊匹单抗)；(本妥昔单抗)；(帕妥珠单抗)；(恩美曲妥珠单抗)；和(奥妥珠单抗)。还包括抗体-药物缀合物。
组合疗法可包括为非药物治疗的治疗剂。例如，除了放射疗法、冷冻疗法、热疗和/或肿瘤组织的手术切除之外，还可以施用所述化合物。
在某些实施方案中，第一和第二治疗剂同时或以任一顺序依序施用。第一治疗剂可在第二治疗剂之前或之后即刻、至多1小时、至多2小时、至多3小时、至多4小时、至多5小时、至多6小时、至多7小时、至多8小时、至多9小时、至多10小时、至多11小时、至多12小时、至多13小时、至多14小时、至多16小时、至多17小时、至多18小时、至多19小时、至多20小时、至多21小时、至多22小时、至多23小时、至多24小时或至多1-7天、1-14天、1-21天或1-30天施用。
在某些实施方案中，第二治疗剂以与本发明的化合物不同的剂量日程施用。例如，第二治疗剂可具有每个治疗周期1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、或14天的治疗假期(treatment holiday)。在另一个实施方案中，第一治疗剂具有治疗假期。例如，第一治疗剂可具有每个治疗周期1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、或14天的治疗假期。在某些实施方案中，第一和第二治疗剂都具有治疗假期。
VIII.药物组合物
如本文所述的式I、式II、式III、式IV、式V或式VI的化合物可作为纯化学品施用，但更通常作为药物组合物施用，其包含对于需要这样的治疗以治疗本文描述的任何病症的患者、通常人而言有效的量。因此，本公开提供了药物组合物，其包含有效量的化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体，用于本文描述的任何用途。药物组合物可含有化合物或盐作为唯一的活性剂，或在替代的实施方案中，含有该化合物和至少一种另外的活性剂。
通常，本公开的组合物将通过任何接受的施用模式以治疗有效量施用。合适的剂量范围取决于众多因素如待治疗的疾病的严重程度、受试者的年龄和相对健康状况、所用化合物的效力、施用途径和形式、施用针对的适应症、以及相关医生的偏好和经验。治疗此类疾病的本领域普通技术人员将能够在没有过度实验的情况下并依赖于个人知识和本申请的公开内容来确定针对给定疾病的本公开组合物的治疗有效量。
在某些实施方案中，药物组合物呈在单位剂型中含有约0.1mg至约2000mg、约10mg至约1000mg、约100mg至约800mg、或约200mg至约600mg的活性化合物和任选地约0.1mg至约2000mg、约10mg至约1000mg、约100mg至约800mg、或约200mg至约600mg的另外的活性剂的剂型。实例有具有至少0.1、1、5、10、25、50、100、200、250、300、400、500、600、700或750mg的活性化合物或其盐的剂型。
在一个替代的实施方案中，可用低剂量疗法治疗患者。例如，药物组合物可呈含有约0.1μg至约2000μg、约10μg至约1000μg、约100μg至约800μg、或约200μg至约600μg活性化合物的剂型。实例有具有至少0.1、1、5、10、25、50、100、200、250、300、400、500、600、700或750mg的活性化合物或其盐的剂型。
在一些实施方案中，本文公开的或如所述使用的化合物每天一次(QD)、每天两次(BID)或每天三次(TID)施用。在一些实施方案中，本文公开的或如所述使用的化合物至少每天一次施用至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天、至少15天、至少16天、至少17天、至少18天、至少19天、至少20天、至少21天、至少22天、至少23天、至少24天、至少25天、至少26天、至少27天、至少28天、至少29天、至少30天、至少31天、至少35天、至少45天、至少60天、至少75天、至少90天、至少120天、至少150天、至少180天或更长时间。
在某些实施方案中，本发明的化合物每天一次、每天两次、每天三次或每天四次施用。
在某些实施方案中，本发明的化合物每天一次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天两次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天三次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天四次口服施用。
在某些实施方案中，本发明的化合物每天一次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天两次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天三次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天四次静脉内施用。
在一些实施方案中，本文公开的或如所述使用的化合物每天一次(QD)、每天两次(BID)或每天三次(TID)施用。在一些实施方案中，本文公开的或如所述使用的化合物至少每天一次施用至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天、至少15天、至少16天、至少17天、至少18天、至少19天、至少20天、至少21天、至少22天、至少23天、至少24天、至少25天、至少26天、至少27天、至少28天、至少29天、至少30天、至少31天、至少35天、至少45天、至少60天、至少75天、至少90天、至少120天、至少150天、至少180天或更长时间。
在某些实施方案中，本发明的化合物每天一次、每天两次、每天三次或每天四次施用。
在某些实施方案中，本发明的化合物每天一次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天两次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天三次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天四次口服施用。
在某些实施方案中，本发明的化合物每天一次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天两次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天三次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每天四次静脉内施用。
在一些实施方案中，本文公开的或如所述使用的化合物每周一次(QW)、每周两次(BIW)或每周三次(TIW)施用。在一些实施方案中，本文公开的或如所述使用的化合物至少每周一次施用至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天、至少15天、至少16天、至少17天、至少18天、至少19天、至少20天、至少21天、至少22天、至少23天、至少24天、至少25天、至少26天、至少27天、至少28天、至少29天、至少30天、至少31天、至少35天、至少45天、至少60天、至少75天、至少90天、至少120天、至少150天、至少180天或更长时间。
在某些实施方案中，本发明的化合物每周一次、每周两次、每周三次、每周四次、每周五次、每周六次或每周七次施用。
在某些实施方案中，本发明的化合物每周一次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每周两次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每周三次口服施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每周四次口服施用。
在某些实施方案中，本发明的化合物每周一次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每周两次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每周三次静脉内施用。在某些实施方案中，本发明的化合物每周四次静脉内施用。
在一些实施方案中，本发明的化合物的施用在治疗周期之间具有治疗假期。例如，化合物可具有每个治疗周期1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、或14天的治疗假期。
药物组合物还可包含一定摩尔比的活性化合物和另外的活性剂。例如，药物组合物可含有摩尔比为约0.5:1、约1:1、约2:1、约3:1或约1.5:1至约4:1的抗炎剂或免疫抑制剂。
这些组合物可含有任何量的达到所需结果的活性化合物，例如0.1至99重量％(wt.％)的化合物，通常至少约5重量％的化合物。一些实施方案含有约25重量％至约50重量％或约5重量％至约75重量％的化合物。
将药物或治疗有效量的组合物递送至患者。确切的有效量将随患者而异，并将取决于物种、年龄、受试者的体型和健康状况、所治疗的病患的性质和程度、治疗医师的建议以及选择施用的治疗剂或治疗剂组合。给定情况的有效量可通过常规实验确定。就本公开的目的而言，在至少一次给药中，治疗量可例如在约0.01mg/kg至约250mg/kg体重的范围内，更通常约0.1mg/kg至约10mg/kg。可以需要多少就向受试者施用多少次给药以减少和/或减轻考虑之中的病症的体征、症状或病因，或引起生物系统的任何其他所需改变。当需要时，可以制备具有适于活性成分的持续或受控释放施用的肠溶衣的制剂。
在某些实施方案中，剂量在约0.01-100mg/kg患者体重的范围内，例如约0.01mg/kg、约0.05mg/kg、约0.1mg/kg、约0.5mg/kg、约1mg/kg、约1.5mg/kg、约2mg/kg、约2.5mg/kg、约3mg/kg、约3.5mg/kg、约4mg/kg、约4.5mg/kg、约5mg/kg、约10mg/kg、约15mg/kg、约20mg/kg、约25mg/kg、约30mg/kg、约35mg/kg、约40mg/kg、约45mg/kg、约50mg/kg、约55mg/kg、约60mg/kg、约65mg/kg、约70mg/kg、约75mg/kg、约80mg/kg、约85mg/kg、约90mg/kg、约95mg/kg、或约100mg/kg。
药物制剂优选为单位剂型。在这样的剂型中，制剂被细分成含有适宜量的活性组分的单位剂量。单位剂型可以是包装的制剂，所述包装包含离散量的制剂，如包装在小瓶或安瓿中的片剂、胶囊和粉末。另外，单位剂型本身可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂，或者其可以是适宜量的任何这些的包装形式。
在某些实施方案中，化合物以药学上可接受的盐施用。药学上可接受的盐的非限制性实例包括：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一酸盐和戊酸盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙和镁以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺和乙胺。
因此，本公开的组合物可以药物制剂施用，包括适合于口服(包括含服和舌下)、直肠、鼻腔、局部、透皮、肺部、阴道或肠胃外(包括肌肉内、动脉内、鞘内、皮下和静脉内)、注射、吸入或喷雾、主动脉内、颅内、真皮下、腹膜内、皮下或通过含有常规药学上可接受的载体的其他施用手段的药物制剂。典型的施用方式为口服、局部或静脉内施用，使用方便的每日给药方案，该给药方案可根据痛苦程度进行调整。
取决于预期的施用模式，药物组合物可呈固体、半固体或液体剂型的形式，例如片剂、栓剂、丸剂、胶囊剂、散剂、液体剂、糖浆剂、混悬剂、乳膏剂、软膏剂、洗剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂、泡沫剂、或油剂、注射剂或输注溶液剂、透皮贴剂、皮下贴剂、吸入制剂、医疗器械、栓剂、含服或舌下制剂、肠胃外制剂或滴眼液等，优选呈适合单次施用精确剂量的单位剂型。
一些剂型，如片剂和胶囊剂，被细分成适当大小的单位剂量，其中含有适宜的量的活性组分，例如达到所需目的的有效量。组合物将包含有效量的所选药物与药学上可接受的载体的组合，另外，还可以包含其他药剂、佐剂、稀释剂、缓冲剂等。
载体包括赋形剂和稀释剂，并且必须具有足够高的纯度和足够低的毒性以使得其适合施用于被治疗的患者。载体可以是惰性的，也可以具有自身的药学益处。与化合物结合使用的载体的量足以为每单位剂量的化合物提供实际的量的施用材料。
载体的类别包括但不限于佐剂、粘结剂、缓冲剂、着色剂、稀释剂、崩解剂、赋形剂、乳化剂、调味剂、凝胶、助流剂、润滑剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂、增溶剂、压片剂、润湿剂或固化材料。
一些载体可能被列在不止一个类别中，例如植物油可在一些制剂中用作润滑剂，而在其他制剂中用作稀释剂。
示例性的药学上可接受的载体包括糖、淀粉、纤维素、粉状黄蓍胶、麦芽、明胶；滑石、凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇类、透皮促进剂和植物油。药物组合物中可包含任选的活性剂，其基本上不干扰本发明的化合物的活性。
一些赋形剂包括但不限于液体如水、盐水、甘油、聚乙二醇、透明质酸、乙醇等。根据治疗目标的需要，化合物可例如以固体、液体、喷雾干燥材料、微米颗粒、纳米颗粒、受控释放体系等的形式提供。适用于非液体制剂的赋形剂也是本领域技术人员已知的。药学上可接受的赋形剂和盐的详尽讨论可在Remington’s Pharmaceutical Sciences(第18版)(Easton,Pennsylvania:Mack Publishing Company,1990)中获得。
另外，辅助物质，如润湿剂或乳化剂、生物缓冲物质、表面活性剂等，可以存在于这样的媒介物中。生物缓冲剂可以是药理学上可接受的任何溶液，并且其为制剂提供所需的pH，即生理学上可接受的范围内的pH。缓冲溶液的实例包括盐水、磷酸盐缓冲盐水、Tris缓冲盐水、Hank’s缓冲盐水等。
对于固体组合物，常规的无毒固体载体包括例如药物级的甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等。可以液体药物施用的组合物可例如通过将如本文所述的活性化合物和任选的药物佐剂溶解、分散等在赋形剂例如水、盐水、右旋糖水溶液、甘油、乙醇等中从而形成溶液或悬浮液来制备。如果需要，待施用的药物组合物还可含有少量的无毒辅助物质，如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等，例如乙酸钠、失水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺乙酸钠、三乙醇胺油酸盐等。制备这样的剂型的实际方法对于本领域技术人员来说是已知的或将是显而易见的；例如，参见上面引用的Remington’sPharmaceutical Sciences。
在还另一个实施方案中，提供了渗透促进剂赋形剂的使用，所述渗透促进剂赋形剂包括聚合物如：聚阳离子(壳聚糖及其季铵衍生物、聚-L-精氨酸、胺化明胶)；聚阴离子(N-羧甲基壳聚糖、聚丙烯酸)；和硫醇化聚合物(羧甲基纤维素-半胱氨酸、聚卡波非-半胱氨酸、壳聚糖-硫代丁基脒、壳聚糖-巯基乙酸、壳聚糖-谷胱甘肽缀合物)。
在某些实施方案中，赋形剂选自丁基化羟基甲苯(BHT)、碳酸钙、磷酸氢钙、硬脂酸钙、交联甲羧纤维素、交联聚乙烯基吡咯烷酮、柠檬酸、交聚维酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘露糖醇、蛋氨酸、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚乙二醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚维酮、预糊化淀粉、对羟基苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧甲基纤维素钠、柠檬酸钠、羟基乙酸淀粉钠、山梨糖醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、蔗糖、滑石、二氧化钛、维生素A、维生素E、维生素C和木糖醇。
药物组合物/组合可配制用于口服施用。对于口服施用，组合物通常采用片剂、胶囊、软凝胶胶囊的形式，或者可为水性或非水性溶液、悬浮液或糖浆。片剂和胶囊是典型的口服施用形式。用于口服使用的片剂和胶囊可包含一种或多种常用的载体，如乳糖和玉米淀粉。通常还加入润滑剂，如硬脂酸镁。通常，本公开的组合物可与口服的、无毒的、药学上可接受的惰性载体如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、甘露糖醇、山梨糖醇等组合。此外，当需要或必要时，也可向混合物中引入合适的粘结剂、润滑剂、崩解剂和着色剂。合适的粘结剂包括淀粉、明胶、天然糖如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶如阿拉伯树胶、黄蓍胶或藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。
当使用液体悬浮液时，活性剂可与任何口服的、无毒的、药学上可接受的惰性载体如乙醇、甘油、水等以及与乳化剂和悬浮剂组合。如果需要，也可添加调味剂、着色剂和/或甜味剂。引入到本文的口服制剂中的其他任选组分包括但不限于防腐剂、悬浮剂、增稠剂等。
对于眼部递送，可根据需要施用化合物，例如经由玻璃体内、基质内、前房内、筋膜下、视网膜下、球后、球周、脉络膜上腔(suprachorodial)、结膜、结膜下、巩膜上、眼周、透巩膜、球后、后部巩膜旁(posterior juxtascleral)、角膜周围或泪管注射，或通过粘液、粘蛋白或粘膜屏障，以立即或受控释放方式或经由眼部装置。
肠胃外制剂可以常规形式制备，或者制备为液体溶液或悬浮液、适合在注射前溶解或悬浮在液体中的固体形式，或者制备为乳液。通常，根据本领域已知的技术使用合适的载体、分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制无菌可注射混悬剂。无菌可注射制剂也可以是在可接受的无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液。可采用的可接受的媒介物和溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。另外，通常采用无菌的非挥发性油、脂肪酯或多元醇作为溶剂或悬浮介质。另外，肠胃外施用可涉及缓慢释放或持续释放体系的使用以维持恒定的剂量水平。
肠胃外施用包括关节内、静脉内、肌肉内、真皮内、腹膜内和皮下途径，并且包括水性和非水性等渗无菌注射溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质，以及水性和非水性无菌混悬剂，其可包含悬浮剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂。经由某些肠胃外途径的施用可涉及通过针或导管向患者体内引入本公开的制剂，所述针或导管由无菌注射器或一些其他机械装置如连续输注系统推动。本公开提供的制剂可使用注射器、喷注器、泵或本领域公认的用于肠胃外施用的任何其他装置施用。
根据本公开的用于肠胃外施用的制剂包括无菌水性或非水性溶液、悬浮液或乳液。非水性溶剂或媒介物的实例有丙二醇、聚乙二醇、植物油(如橄榄油和玉米油)、明胶以及可注射的有机酯如油酸乙酯。这样的剂型还可含有佐剂如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。它们可通过例如通过细菌截留滤器(bacteria retaining filter)过滤、通过向组合物中引入灭菌剂、通过辐照组合物或通过加热组合物来灭菌。它们也可在临用前使用无菌水或一些其他无菌可注射介质制造。
无菌可注射溶液通过将所需量的一种或多种本公开的化合物根据需要与上面列举的各种其他成分一起引入到适宜的溶剂中并然后过滤灭菌来制备。通常，分散体通过将各种已灭菌的活性成分引入到含有基础分散介质和来自上文列举的那些的所需其他成分的无菌媒介物中来制备。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，典型的制备方法为真空干燥和冷冻干燥技术，所述技术从其先前经无菌过滤的溶液产生活性成分外加任何另外的所需成分的粉末。因此，例如，通过在按体积计10％的丙二醇和水中搅拌按重量计1.5％的活性成分来制备适合通过注射施用的肠胃外组合物。用氯化钠使溶液等渗并灭菌。
或者，本公开的药物组合物可以栓剂的形式施用以便直肠施用。栓剂可通过将剂与合适的无刺激赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下为固体但在直肠温度下为液体并因此会在直肠中熔化以释放药物。这样的材料包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
本公开的药物组合物也可通过鼻气雾剂或吸入施用。这样的组合物根据药物制剂领域公知的技术制备并且可制备为在盐水中的溶液，其采用苯甲醇或其他合适的防腐剂、吸收促进剂以提高生物利用度、推进剂如碳氟化合物或氮和/或其他常规的增溶或分散剂。
用于含服施用的制剂包括片剂、锭剂、凝胶等。或者，可使用本领域技术人员已知的透粘膜递送系统实现含服施用。本公开的化合物还可使用常规的透皮药物递送系统即透皮“贴剂”通过皮肤或粘膜组织递送，其中通常将剂含在用作药物递送装置的层合结构中以固定到体表。在这样的结构中，药物组合物通常含在上背衬层下面的层或“储库”中。层合装置可含有单个储库，或者其可含有多个储库。在一个实施方案中，储库包含药学上可接受的接触粘合剂材料的聚合物基质，其用于在药物递送期间将系统固定到皮肤上。合适的皮肤接触粘合剂材料的实例包括但不限于聚乙烯、聚硅氧烷、聚异丁烯、聚丙烯酸酯、聚氨酯等。
或者，含有药物的储库和皮肤接触粘合剂作为单独且不同的层存在，储库下面的粘合剂在这种情况下可以是如上所述的聚合物基质，或者可以是液体或凝胶储库，或者可以采取其他形式。这些层合物中充当装置的上表面的背衬层起到层合结构的主要结构元件的作用并为装置提供了很大的灵活性。为背衬层选择的材料应对活性剂和存在的任何其他材料基本上不可渗透。
本公开的组合物可配制用于气雾剂施用，特别是施用于呼吸道，包括鼻内施用。化合物可例如通常具有例如约5微米或更小的小粒度。这样的粒度可通过本领域已知的手段获得，例如通过微细化。活性成分与合适的推进剂如氯氟烃(CFC)如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体一起提供在加压包装中。气雾剂还可方便地含有表面活性剂如卵磷脂。药物的剂量可通过计量阀来控制。
或者，活性成分可以干粉的形式提供，例如化合物在合适的粉末基料如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷(PVP)中的粉末混合物。粉末载体将在鼻腔中形成凝胶。粉末组合物可以单位剂量形式存在，例如在例如明胶或泡罩包装的胶囊或药筒中，粉末可借助于吸入器自其施用。
适合于直肠施用的制剂通常以单位剂量栓剂存在。这些栓剂可通过将活性化合物与一种或多种常规的固体载体例如可可脂混合并然后将所得混合物成型来制备。
在某些实施方案中，药物组合物适合使用上文定义的施用模式局部施加到皮肤。
在某些实施方案中，药物组合物适合于透皮施用并可呈离散的贴剂，所述贴剂适于长时间与接受者的表皮保持密切接触。适合于透皮施用的制剂也可通过离子导入法递送(参见例如Pharmaceutical Research 3(6):318(1986))并且通常呈活性化合物的任选缓冲水溶液的形式。
在一个实施方案中，提供微针贴剂或装置来将药物递送穿过或进入生物组织、特别是皮肤。微针贴剂或装置允许以临床相关的速率递送药物穿过或进入皮肤或其他组织屏障，而对组织的损伤、疼痛或刺激最小或没有。
适合于施用到肺的制剂可通过广泛的被动呼吸驱动和主动功率驱动的单/多剂量干粉吸入器(DPI)来递送。最常用于呼吸递送的装置包括雾化器、计量吸入器和干粉吸入器。有若干类型的雾化器可供使用，包括喷射雾化器、超声雾化器和振动筛网雾化器。合适的肺递送装置的选择取决于参数如药物的性质及其配制、作用部位和肺的病理生理学。
许多用于药物递送的方法和装置是本领域已知的。非限制性实例见述于以下专利和专利申请(通过引用完全并入本文)中。实例有标题为“Ocular trocar assembly”的US8,192,408(Psivida Us,Inc.)；标题为“Transcleral delivery”的US 7,585,517(Macusight,Inc.)；标题为“Ophthalmic composition”的US 5,710,182和US 5,795,913(Santen OY)；标题为“Formulations for treating ocular diseases and conditions”的US 8,663,639、标题为“Formulations and methods for vascular permeability-related diseases or conditions”的US 8,486,960、标题为“Liquid formulations fortreatment of diseases or conditions”的US 8,367,097和US 8,927,005、标题为“Delivering substance and drug delivery system using the same”的US 7,455,855(Santen Pharmaceutical Co.,Ltd.)；标题为“Conformable Therapeutic Shield ForVision and Pain”的WO/2011/050365和标题为“Therapeutic Device for PainManagement and Vision”的WO/2009/145842(Forsight Labs,LLC)；标题为“Implantabletherapeutic device”的US 9,066,779和US 8,623,395、标题为“Ophthalmic Implant forDelivering Therapeutic Substances”的WO/2014/160884、标题为“Posterior segmentdrug delivery”的US 8,399,006、US 8,277,830、US 8,795,712、US 8,808,727、US 8,298,578和WO/2010/088548、标题为“Systems for Sustained Intraocular Delivery of LowSolubility Compounds from a Port Delivery System Implant”的WO/2014/152959和US20140276482、标题为“Injector apparatus and method for drug delivery”的US 8,905,963和US 9,033,911、标题为“Formulations and Methods for Increasing orReducing Mucus”的WO/2015/057554、标题为“Ocular insert apparatus and methods”的US 8,715,712和US 8,939,948、标题为“Insertion and Removal Methods and Apparatusfor Therapeutic Devices”的WO/2013/116061、标题为“Ophthalmic System forSustained Release of Drug to the Eye”的WO/2014/066775、标题为“ImplantableTherapeutic Device”的WO/2015/085234和WO/2012/019176、标题为“Methods andApparatus to determine Porous Structures for Drug Delivery”的WO/2012/065006、标题为“Anterior Segment Drug Delivery”的WO/2010/141729、标题为“CornealDenervation for Treatment of Ocular Pain”的WO/2011/050327、标题为“SmallMolecule Delivery with Implantable Therapeutic Device”的WO/2013/022801、标题为“Subconjunctival Implant for Posterior Segment Drug Delivery”的WO/2012/019047、标题为“Therapeutic Agent Formulations for Implanted Devices”的WO/2012/068549、标题为“Combined Delivery Methods and Apparatus”的WO/2012/019139、标题为“Ocular Insert Apparatus and Methods”的WO/2013/040426、标题为“InjectorApparatus and Method for Drug Delivery”的WO/2012/019136、标题为“Fluid ExchangeApparatus and Methods”的WO/2013/040247(ForSight Vision4,Inc.)；标题为“Inhalation Device with Feedback System”的US/2014/0352690、标题为“InhalationDevice for Use in Aerosol Therapy”的US 8,910,625和US/2015/0165137(VecturaGmbH)；标题为“Inhalers”的US 6,948,496、标题为“Powders comprising anti-adherentmaterials for use in dry powder inhalers”的US/2005/0152849、标题为“Carrierparticles for use in dry powder inhalers”的US 6,582,678、US 8,137,657、US/2003/0202944和US/2010/0330188、标题为“Method of producing particles for use in drypowder inhalers”的US 6,221,338、标题为“Powders”的US 6,989,155、标题为“Pharmaceutical compositions for treating premature ejaculation by pulmonaryinhalation”的US/2007/0043030、标题为“Inhaler”的US 7,845,349、标题为“Formulations for Use in Inhaler Devices”的US/2012/0114709和US 8,101,160、标题为“Compositions and Uses”的US/2013/0287854、标题为“Particles for Use in aPharmaceutical Composition”的US/2014/0037737和US 8,580,306、标题为“MixingChannel for an Inhalation Device”的US/2015/0174343、标题为“Method of makingparticles for use in a pharmaceutical composition”的US 7,744,855和US/2010/0285142、标题为“Pharmaceutical formulations for dry powder inhalers”的US 7,541,022、US/2009/0269412和US/2015/0050350(Vectura Limited)。
如何递送活性化合物的另外的非限制性实例在以下中提供：标题为“Intracameral Implant for Treatment of an Ocular Condition”的WO/2015/085251(Envisia Therapeutics,Inc.)；标题为“Engineered Aerosol Particles,andAssociated Methods”的WO/2011/008737、标题为“Geometrically Engineered Particlesand Methods for Modulating Macrophage or Immune Responses”的WO/2013/082111、标题为“Degradable compounds and methods of use thereof,particularly withparticle replication in non-wetting templates”的WO/2009/132265、标题为“Interventional drug delivery system and associated methods”的WO/2010/099321、标题为“Polymer particle composite having high fidelity order,size,and shapeparticles”的WO/2008/100304、标题为“Nanoparticle fabrication methods,systems,and materials”的WO/2007/024323(Liquidia Technologies,Inc.和University ofNorth Carolina at Chapel Hill)；标题为“Iontophoretic Delivery of a Controlled-Release Formulation in the Eye”的WO/2010/009087(Liquidia Technologies,Inc.和Eyegate Pharmaceuticals,Inc.)和标题为“Compositions and Methods forIntracellular Delivery and Release of Cargo”的WO/2009/132206、标题为“Nano-particles for cosmetic applications”的WO/2007/133808、标题为“Medical device,materials,and methods”的WO/2007/056561、标题为“Method for producing patternedmaterials”的WO/2010/065748、标题为“Nanostructured surfaces for biomedical/biomaterial applications and processes thereof”的WO/2007/081876(LiquidiaTechnologies,Inc.)。
药物递送装置和方法的另外的非限制性实例包括例如标题为“PharmaceuticalDosage Form For Oral Administration Of Tyrosine Kinase Inhibitor”的US20090203709(Abbott Laboratories)；标题为“Delivery of an active drug to theposterior part of the eye via subconjunctival or periocular delivery of aprodrug”的US20050009910、标题为“Biodegradable polymers for loweringintraocular pressure”的US20130071349、标题为“Tyrosine kinase microspheres”的US8,481,069、标题为“Method of making tyrosine kinase microspheres”的US 8,465,778、标题为“Sustained release intraocular implants containing tyrosine kinaseinhibitors and related methods”的US 8,409,607、标题为“Biodegradableintravitreal tyrosine kinase implants”的US 8,512,738和US2014/0031408、标题为“Microsphere Drug Delivery System for Sustained Intraocular Release”的US2014/0294986、标题为“Methods For Treating Retinopathy With Extended TherapeuticEffect”的US 8,911,768(Allergan,Inc.)；标题为“Preparation of injectablesuspensions having improved injectability”的US 6,495,164(Alkermes ControlledTherapeutics,Inc.)；标题为“Biodegradable Microcapsules Containing FillingMaterial”的WO 2014/047439(Akina,Inc.)；标题为“Compositions And Methods ForDrug Delivery”的WO 2010/132664(Baxter International Inc.Baxter HealthcareSA)；标题为“Polymeric nanoparticles with enhanced drugloading and methods ofuse thereof”的US20120052041(The Brigham and Women’s Hospital,Inc.)；标题为“Therapeutic Nanoparticles Comprising a Therapeutic Agent and Methods ofMaking and Using Same”的US20140178475、US20140248358和US20140249158(BINDTherapeutics,Inc.)；标题为“Polymer microparticles for drug delivery”的US 5,869,103(Danbiosyst UK Ltd.)；标题为“Pegylated Nanoparticles”的US 8628801(Universidad de Navarra)；标题为“Ocular drug delivery system”的US2014/0107025(Jade Therapeutics,LLC)；标题为“Agent delivering system comprised ofmicroparticle and biodegradable gel with an improved releasing profile andmethods of use thereof”的US 6,287,588、标题为“Bioactive agent deliveringsystem comprised of microparticles within a biodegradable to improve releaseprofiles”的US 6,589,549(Macromed,Inc.)；标题为“Nanoparticles andmicroparticles of non-linear hydrophilichydrophobic multiblock copolymers”的US 6,007,845和US 5,578,325(Massachusetts Institute of Technology)；标题为“Ophthalmic depot formulations for periocular or subconjunctivaladministration的US20040234611、US20080305172、US20120269894和US20130122064(Novartis Ag)；标题为“Block polymer”的US 6,413,539(Poly-Med,Inc.)；标题为“Delivery of an agent to ameliorate inflammation”的US20070071756(Peyman)；标题为“Injectable Depot Formulations And Methods For Providing Sustained ReleaseOf Poorly Soluble Drugs Comprising Nanoparticles”的US20080166411(Pfizer,Inc.)；标题为“Methods and compositions for enhanced delivery of bioactivemolecules”的US 6,706,289(PR Pharmaceuticals,Inc.)；和标题为“Microparticlecontaining matrices for drug delivery”的US 8,663,674(Surmodics)。
IX.一般合成
本文描述的化合物可通过本领域技术人员已知的方法制备。在一个非限制性实例中，所公开的化合物可使用以下方案制备。
为方便起见，可在没有立体化学的情况下绘制具有立体中心的本发明化合物。本领域技术人员应认识到纯对映异构体和非对映异构体可通过本领域已知的方法制备。获得光学活性材料的方法的实例至少包括以下：
i)晶体的物理分离——手动分离各个对映异构体的宏观晶体的技术。如果存在单独的对映异构体的晶体，即材料为聚块(conglomerate)并且晶体在视觉上不同，则可使用该技术；
ii)同时结晶——单独的对映异构体从外消旋物的溶液分别结晶的技术，仅当对映异构体为呈固态的聚块时才可能；
iii)酶拆分——通过对映异构体与酶的不同反应速率来部分或完全分离外消旋物的技术；
iv)酶促不对称合成——合成中的至少一个步骤使用酶促反应来获得对映异构体纯的所需对映异构体或所需对映异构体的富集合成前体的合成技术；
v)化学不对称合成——所需的对映异构体由非手性前体在产品中产生不对称性(即，手性)的条件下合成的合成技术，这可通过手性催化剂或手性助剂来实现；
vi)非对映异构体分离——外消旋化合物与对映异构体纯的试剂(手性助剂)反应而将单个对映异构体转化为非对映异构体的技术。得到的非对映异构体然后借助于其现在更明显的结构差异通过色谱法或结晶分离，随后除去手性助剂以获得所需的对映异构体；
vii)一级和二级不对称转化——来自外消旋物的非对映异构体快速平衡而在来自所需对映异构体的非对映异构体的溶液中产生数量上的优势，其中来自所需对映异构体的非对映异构体的优先结晶扰动该平衡使得最终原则上所有材料均从所需的对映异构体转化为结晶的非对映异构体。然后从非对映异构体释放所需的对映异构体；
viii)动力学拆分——该技术是指借助于对映异构体与手性非外消旋试剂或催化剂在动力学条件下的不同反应速率来实现外消旋物的部分或完全拆分(或部分拆分化合物的进一步拆分)；
ix)从非外消旋前体的对映特异性合成——所需的对映异构体从非手性起始材料获得并且其中在合成过程中立体化学完整性不受损害或仅受最小程度的损害的合成技术；
x)手性液相色谱法——借助于其与固定相的不同相互作用而在液体流动相中分离外消旋物的对映异构体的技术(包括小瓶手性HPLC)。固定相可由手性材料制成，或者流动相可含有另外的手性材料以激发不同的相互作用；
xi)手性气相色谱法——借助于其在气态流动相中与含有固定的非外消旋手性吸附剂相的柱子的不同相互作用来使外消旋物挥发并分离对映异构体的技术；
xii)用手性溶剂萃取——借助于一种对映异构体向特定手性溶剂中的优先溶解来分离对映异构体的技术；
xiii)跨手性膜转运——使外消旋物与薄膜屏障接触的技术。所述屏障通常分离两种可混溶的流体，其中一种含有外消旋物，而驱动力如浓度或压差使得优先转运穿过所述膜屏障。分离是由于膜的非外消旋手性性质而发生的，其仅允许外消旋物的一种对映异构体通过；
xiv)在一个实施方案中使用模拟移动床色谱法。市售的手性固定相种类繁多。
X.用于本发明的构件块的合成
4-(3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮的合成
步骤1：将无水磷酸三钾(2.74g，12.92mmol)在THF(150mL)和水(5mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫15分钟。然后，向反应混合物中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(3.0g，8.62mmol)和2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(3.78g，12.92mmol)并用氩气吹扫15分钟。向反应混合物中加入1310584-14-5(XPhos-Pd-G2)(338.60mg)，用氩气吹扫10分钟，并使其于70℃搅拌16小时。通过LCMS&TLC监测反应进度。反应完成后，残余物通过硅藻土过滤并通过柱色谱法纯化(反相，0.1％的甲酸/乙腈)，得到2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(41-1)(2.1g，4.24mmol，收率49.26％)，LC-MS(ES+):m/z 434.25[M+H]+
步骤2：向2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(41-1)(500mg，1.15mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(257.81mg，1.38mmol)在DCE(3ml)和MeOH(2ml)中的处于0℃的搅拌溶液中加入乙酸(32.99uL，576.76mmol)并继续于室温搅拌4小时。于0℃向反应混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠(488.96mg，2.31mmol)并继续于室温搅拌16小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物。用乙酸乙酯(50mL)稀释残余物并用水洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并真空浓缩。粗化合物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-50％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈无色固体的4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(41-3)(500mg)。LC-MS(ES+):m/z604.44[M+H]+
步骤3：向4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(41-3)(0.88g，1.46mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(2.25ml，29.15mmol)并将反应于70℃搅拌1小时。通过TLC和LCMS监测反应进度。反应完成后，反应混合物经由旋转蒸发干燥并与乙腈和甲苯共蒸馏。粗化合物加乙醚研磨，得到4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(1-4)(800mg，收率68.21％，纯度76％)。LC-MS(ES+):m/z 384.35[M+H]+
4-(3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮的合成(替代路线)
步骤-1：于0℃向4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛B2-1(15g，61.21mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(11.40g，61.21mmol)在干燥的二氯甲烷(350mL)中的搅拌溶液中加入乙酸(3.68g，61.21mmol，3.50mL)。反应混合物于0℃搅拌3小时。于0℃向反应混合物中一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠(25.95g，122.42mmol)。用时1小时使反应混合物缓慢温热至室温并于室温再搅拌9小时。反应完成后，用水(500mL)淬灭反应混合物并用DCM(2×500mL)萃取。合并有机层，用盐水(1×250mL)进一步洗涤并用无水Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，该粗产物通过柱色谱法用硅胶(100/200目)纯化并在30-40％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈浅黄色糊状固体的4-[(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(20.5g，48.38mmol，收率79.03％，纯度98.01％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ6.72(s,2H),3.82(s,6H),3.73(s,2H),3.55(s,4H),2.62(s,4H),1.44(s,9H)。LC-MS(ES+):m/z 415[M+H]+。
步骤-2：于室温在氩气氛下向4-[(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(15g，36.12mmol)在1,4-二噁烷(350mL)中的搅拌溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(13.76g，54.17mmol)，然后加入乙酸钾(10.63g，108.35mmol，6.77mL)。反应混合物用氩气反复脱气并在氩气氛下一次性加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(1.47g，1.81mmol)。反应混合物再次用氩气反复脱气并然后于100℃加热12小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(300mL)洗涤。浓缩滤液，用乙酸乙酯(500mL)溶解所得物质并用水(2×100mL)、盐水(1×100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物。该粗品通过柱色谱法用硅胶(100/200目)进一步纯化并在40-50％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈灰白色糊状固体的4-[[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(12g，25.69mmol，收率71.14％，纯度99％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.99(s,2H),3.85(s,6H),3.74(s,2H),3.39(t,J＝5.0Hz,4H),2.46(t,J＝5.0Hz,4H),1.43(s,9H),1.35(s,12H)。LC MS:硼酸：RT:1.26min＝381.41[M+H]+和硼酸酯：RT:1.75min＝463.48[M+H]+注：LCMS指示41％的硼酸物质和58％的硼酸酯物质。
步骤-3：向4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(1.0g，2.87mmol)在水(10mL)和THF(30mL)中的搅拌溶液中加入4-[[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯5(1.33g，2.87mmol)和K3PO4(1.52g，7.18mmol)。所得溶液用氮气脱气15分钟，然后加入XPhos-Pd-G2(112.98mg，143.60umol)。加入催化剂后，将反应混合物于80℃加热6小时，同时通过LCMS和TLC监测。通过硅藻土垫过滤反应，用EtOAc(50mL)洗涤，蒸发滤液，得到粗品。粗化合物通过(硅胶100-200目，60-70％的EtOAc/石油醚)纯化，得到呈灰白色固体的4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯7(0.75g，1.22mmol，收率42.58％，纯度98.44％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(s,1H),7.70(s,1H),7.31(d,J＝2Hz,2H),6.86(d,J＝2Hz,2H),6.61(s,2H),5.50(s,2H),4.15(s,2H),3.83(s,6H),3.78(s,3H),3.68(s,3H),3.58(m,4H),2.98–2.96(m,4H)1.44(s,9H)；LC-MS(ES+):m/z 604.44[M+H]+。
步骤-4：于0℃向4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.75g，1.24mmol)在CH2Cl2(2mL)中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷/HCl(0.4ml，12.4mmol)并将反应混合物于室温搅拌4小时，同时通过TLC监测。浓缩反应混合物，得到粗化合物。该粗化合物加乙醚(50×2)和正-戊烷(20×2)研磨，得到呈白色固体的4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮HCl盐(0.65g，1.19mmol，收率95.50％，纯度98.57％)。将其用于下一步而无需任何纯化。
步骤-5：将4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(1.63g，3.24mmol)在TFA(2.49mL，32.37mmol)中的搅拌溶液于70℃搅拌和加热4小时，同时通过TLC监测。完成后浓缩反应混合物，粗化合物加乙醚(100×2)研磨，得到呈白色固体的4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮TFA盐(1.6g，3.14mmol，收率96.95％，纯度97.57％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.77(s,1H),8.97(bs,2H)8.22(s,1H),7.63(s,1H),6.98(s,2H)4.25(bs,2H),3.94(s,6H),3.63(s,3H),3.39 -3.40(bs,8H)；LC-MS(ES+):m/z 384.28[M+H]+。
2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛的合成
于0℃向化合物2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(1.0g，2.31mmol)的搅拌溶液中加入TFA(2.63g，23.07mmol，1.78mL)并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过TLC监测反应的进度，完成后，浓缩反应混合物以提供粗化合物。该粗化合物使用0.1％的TFA和ACN通过反相纯化，得到呈棕色固体的2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.9g，1.90mmol，收率82.16％，纯度90％，061)。通过LCMS确认所需的化合物。),LC-MS(ES+):m/z 314.2[M+H]+
2-氯-6-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛的合成
步骤-1：向1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(4g，10.12mmol)和4-溴-2-氯-6-甲氧基-苯甲醛(2.27g，9.11mmol)在THF(20.00mL)中的搅拌溶液中加入乙酸钾(2.98g，30.36mmol，1.90mL)在水(7mL)中的溶液。然后，氩气吹扫20分钟，随后加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(413.22mg，506.00umol)并脱气。加热混合物至70℃并保持4小时。通过TLC监测反应。然后，用水稀释反应混合物并用乙酸乙酯萃取，用盐水溶液洗涤有机层，分离，用Na2SO4干燥，浓缩。粗产物通过Biotage使用50％的EA/PE纯化，得到2-氯-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(1.1g，2.51mmol，收率24.82％，浅黄色固体)，LC-MS(ES+):m/z 438.30[M+H]+
步骤-2：向化合物2-氯-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(0.25g，570.94umol)中加入三氟乙酸99％(2.96g，25.96mmol，2mL)。将反应混合物于70℃加热1小时。通过TLC和LCMS监测反应的完成。反应完成后，真空除去过量的TFA并用乙醚(2×5mL)洗涤粗产物，得到呈淡棕色固体的2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.21g，470.97umol，收率82.49％，纯度96.83％，061)。LC-MS(ES+):m/z 318.27[M+H]+
2-氯-6-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛的合成
向2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.3g，694.85umol，061)在1,4-二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中加入2-甲基丁-2-烯(389.85mg，5.56mmol)。然后向反应混合物中缓慢加入亚氯酸钠(314.22mg，3.47mmol)和磷酸二氢钠(1.67g，13.90mmol)的混合物并使其于室温搅拌1小时。完成后，直接减压蒸发反应物质。通过使用反相纯化该粗品。用30％的ACN/(1％的FA/水)洗脱所需产物，得到2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲酸(100mg，282.39umol，收率40.64％，纯度94.24％)，为淡棕色固体。LC-MS(ES+):m/z 334.32[M+H]+
2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸的合成
步骤-1：向4-溴-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(5g，18.59mmol)在1,4-二噁烷(120mL)中的溶液中加入双(频哪醇合)二硼(7.08g，27.88mmol)和乙酸钾(5.47g，55.76mmol)并用氩气脱气20分钟。最后，加入Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(0.758g，0.929mmol)，再次用氩气脱气10分钟并于90℃搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，通过硅藻土垫过滤反应物质。该粗品用水(200ml)淬灭并用EtOAc(2×200ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈棕色固体的粗化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(5g，收率51.07％，纯度60％)。LC-MS(ES+):m/z 233.94[M-H]-(硼酸物质)
步骤-2：向5-溴-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(3g，13.88mmol)在THF(80mL)中的搅拌溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(4.39g，13.88mmol)和溶解在水(20mL)中的K3PO4(4.72g，34.71mmol，2.02mL)。所得溶液用氩气脱气20分钟，然后加入XPhos-Pd-G2(0.544g，0.694mmol)，再次用氩气脱气10分钟并于75℃搅拌4小时，同时通过LCMS和TLC监测。通过硅藻土垫过滤反应混合物，用EtOAc(100mL)洗涤，蒸发滤液，得到粗品。该粗化合物通过(硅胶100-200目，60-70％的EtOAc/石油醚)纯化，得到呈淡黄色固体的2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛5(3.5g，收率74.14％，纯度95.67％)。LC-MS(ES+):m/z 326.30[M+H]+
步骤-3：于25℃向2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(3.5g，10.76mmol)在THF(130mL)中的搅拌溶液中加入2-甲基-2-丁烯(6.04g，86.08mmol，9.12mL)，然后加入溶解在水(70mL)中的亚氯酸钠(4.87g，53.80mmol)和磷酸二氢钠(25.82g，215.20mmol)，于室温搅拌3小时。通过TLC确认反应的完成。将反应混合物浓缩至一半的量，得到粗产物，该粗产物通过加甲醇研磨来纯化，然后用水洗涤，得到2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酸(2.3g，6.44mmol，收率59.87％，纯度95.58％)LC-MS(ES+):m/z 342.12[M+H]+
2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸的合成(替代路线)
步骤-1：于15℃在氮气氛下向B4-4(10g，35.1mmol，1当量)和B2Pin2(13.4g，52.6mmol，1.5当量)在N,N-二甲基甲酰胺(150mL)中的混合物中加入乙酸钾(17.2g，175mmol，5当量)、Pd(dppf)Cl2(2.57g，3.5mmol，0.1当量)。混合物于80℃搅拌15小时；在通过HPLC监测到反应完成后，将反应混合物冷却至室温；真空浓缩该混合物以除去部分溶剂；残余物在水(200mL)中稀释，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。合并有机层，用盐水(200mL)洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩，得到残余物；该残余物加石油醚(50V)研磨，过滤悬浮液并将滤饼真空干燥，得到呈白色固体的产物(8.5g，收率73％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.98(d,J＝7.8Hz,1H),7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.68(s,1H),1.29(s,12H)。
步骤-2：于10℃在氮气氛下向B4-5(5g，23.1mmol，1当量)和化合物-9(8.45g，25.5mmol，1.1当量)在二噁烷(60mL)中的混合物中加入水(20mL)、碳酸钠(6.13g，57.9mmol，2.5当量)、Pd(dppf)Cl2(847mg，1.16mmol，0.05当量)。混合物于80℃搅拌13小时。真空浓缩该混合物以除去二噁烷；然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取水相。用HCl(2N)将水相酸化至pH 5，沉淀出固体。过滤悬浮液，并真空干燥固体；该固体加乙酸乙酯(10mL)研磨，得到呈白色固体的产物(5.5g，收率67％)。1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.03(d,J＝7.9Hz,1H),7.50(s,1H),7.41(dd,J＝8.0,1.3Hz,1H),7.35(s,1H),3.60(s,3H),2.17(s,3H),2.13(s,3H)。
4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛的合成
于室温在氩气氛下向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(化合物-3)(3.98g，12.60mmol)在干燥的THF(80mL)中的搅拌溶液中加入4-溴-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮(3g，12.60mmol)，然后加入溶解在水(20mL)中的磷酸钾(K3PO4)(6.69g，31.51mmol)并将所得混合物用氩气吹扫至多30分钟。其后加入1310584-14-5(Xphoss Pd G2)(0.495g，0.63mmol)并将所得混合物加热以于75℃回流至多4小时。通过TLC监测反应的完成。完成后，使反应混合物至室温并用冰冷水(100mL)稀释，滤出所得固体并高真空干燥，得到粗品，该粗品加正戊烷(100mL)研磨，得到固体混合物，该固体混合物再次在甲醇(80mL)中回流并过滤，得到呈棕色固体的4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(2.5g，6.54mmol，收率51.36％，纯度92％)。LC-MS(ES+):m/z 349.51[M+H]+
2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛的合成
步骤-1：于室温在氩气氛下向4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲醛和4-溴-2-氯-6-甲氧基-苯甲醛(3.85g，15.43mmol)在1,4-二噁烷(40mL)中的搅拌溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(4.70g，18.52mmol)，然后加入乙酸钾(3.79g，38.58mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并在氩气氛下一次性加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(0.63g，0.77mmol)。反应混合物再次用氩气反复脱气并然后加热以于90℃回流4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(200mL)洗涤。浓缩滤液，得到残余物质。将该残余物质溶解在乙酸乙酯(200mL)中并用水(2×50mL)、盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100/200目)纯化并在30-40％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈淡黄色固体的2-氯-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(4g，收率83.04％，纯度95％)。LC-MS(ES+):m/z[M+H]+215.13(观察到相应的硼酸物质)
步骤-2：于室温向密封管中5-溴-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(1g，4.63mmol)和2-氯-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛2(2.06g，6.94mmol)在二噁烷(15mL)和水(5mL)中的搅拌混合物中加入磷酸三钾(2.46g，11.57mmol)并将所得混合物用氩气吹扫10分钟。向反应混合物中加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(0.18g，0.23mmol)，该反应混合物再次用氩气脱气5分钟并然后于80℃加热4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。从滤液分层出有机层并浓缩，得到粗品，该粗品通过柱色谱法使用硅胶(100/200目)纯化并在60％的EtOAc/石油醚下洗脱产物，得到2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(0.920g，收率61.76％，纯度95％)。LC-MS(ES+):m/z 306.31[M+H]+
2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸的合成
于0℃向2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛(500mg，1.64mmol)在THF(25mL)中的搅拌溶液中逐滴加入2-甲基-2-丁烯(917.50mg，13.08mmol)，然后一次性加入亚氯酸钠(739.48mg，8.18mmol)并逐滴加入溶解在水(20mL)中的磷酸二氢钠(3.92g，32.71mmol)。用时30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温再搅拌6小时。通过TLC确认反应的完成。浓缩反应混合物以获得粗产物，该粗产物通过加水/甲醇研磨来纯化并过滤沉淀出的固体，充分干燥，得到呈灰白色固体的2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸(400mg，收率70.90％，纯度93.26％)。LC-MS(ES+):m/z322.12[M+H]+
2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛的合成
于室温向密封管中4-溴-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮(1g，4.18mmol)在干燥的THF(40mL)中的搅拌溶液中加入2-氯-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(1.24g，4.18mmol)，然后在氩气氛下加入溶解在水(10mL)中的磷酸三钾(2.22g，10.46mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并向反应混合物中一次性加入Pd-Xphos-G2催化剂(0.16g，0.20mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于80℃加热4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。从滤液分层出有机层并浓缩得到粗品。该粗品通过柱色谱法使用0.1％的FA/水和乙腈作为洗脱剂梯度纯化，得到呈灰白色固体的2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(0.30g，收率21.46％，纯度85.97％)。LC-MS(ES+):m/z 329.17[M+H]+
2-氯-4-(7-氟-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)-6-甲氧基苯甲酸的合成
于0℃向2-氯-4-(7-氟-2-甲基-1-氧代-4-异喹啉基)-6-甲氧基-苯甲醛(0.17g，0.49mmol)在THF(25mL)中的搅拌溶液中加入2-甲基-2-丁烯(0.27g，3.93mmol)，然后逐滴加入亚氯酸钠(0.22g，2.46mmol)和溶解在水(10mL)中的磷酸二氢钠(1.18g，9.83mmol)。用时30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温搅拌12小时。通过TLC确认反应的完成。浓缩反应混合物至一半的量以获得粗产物，该粗产物通过加甲醇/水研磨来纯化，得到呈白色固体的2-氯-4-(7-氟-2-甲基-1-氧代-4-异喹啉基)-6-甲氧基-苯甲酸(0.12g，收率64.09％，纯度95％)。LC-MS(ES+):m/z 362.25[M+H]+
2-氟-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛的合成
步骤-1：于室温在氩气氛下向4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲醛(7g，30.04mmol)在1,4-二噁烷(300mL)中的搅拌溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(11.44g，45.06mmol)，然后加入乙酸钾(8.84g，5.63mL)。反应混合物用氩气反复脱气并在氩气氛下一次性加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(1.23g，1.50mmol)。将反应混合物再次用氩气反复脱气并然后加热以于90℃回流12小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(200mL)洗涤。浓缩滤液，得到残余物质。将该残余物质溶解在乙酸乙酯(300mL)中并用水(2×100mL)、盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。粗产物加戊烷(500mL)研磨，充分搅拌并通过硅藻土过滤。浓缩滤液，得到固体，将其加己烷(25mL)制成浆液，过滤，用己烷(10mL)洗涤，充分干燥，得到呈淡棕色固体的产物2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(4.1g，收率46.29％，纯度95％)。LC-MS(ES+):m/z199.17[M+H]+(观察到相应的硼酸物质)
步骤-2：于室温向密封管中5-溴-1,3,4-三甲基吡啶-2(1H)-酮(1g，4.63mmol)在干燥的THF(50mL)中的搅拌溶液中加入2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(1.30g，4.63mmol)，然后在氩气氛下加入溶解在水(15mL)中的磷酸三钾(2.46g，11.57mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并向反应混合物中一次性加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(0.18g，0.23mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于80℃加热4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。从滤液分层出有机层并浓缩得到粗品。该粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100/200目)纯化并在4-5％的MeOH/EtOAc下洗脱产物，得到呈灰白色固体的2-氟-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛(0.45g，收率32.40％，纯度96.40％)。LC-MS(ES+):m/z 290.52[M+H]+
2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛的合成
于室温向密封管中4-溴-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮(2g，8.37mmol)在干燥的THF(50mL)中的搅拌溶液中加入2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(2.34g，8.37mmol)，然后在氩气氛下加入溶解在水(15mL)中的磷酸三钾(4.44g，20.91mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并向反应混合物中一次性加入Pd-Xphos-G2催化剂(0.32g，0.41mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于80℃加热4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。从滤液分层出有机层并浓缩得到粗品。该粗品通过柱色谱法使用0.1％的FA/水和乙腈作为洗脱剂梯度纯化，得到呈灰白色固体的2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛7(1.90g，收率72.15％，纯度99.21％)。LC-MS(ES+):m/z 313.14[M+H]+
2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸的合成
于0℃向2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛7(0.40g，1.28mmol)在THF(15mL)中的搅拌溶液中加入2-甲基-2-丁烯(0.71g，10.25mmol)，然后加入溶解在水(10mL)中的亚氯酸钠(0.57g，6.40mmol)和磷酸二氢钠(3.07g，25.62mmol)。经30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温搅拌6小时。通过TLC确认反应的完成。浓缩反应混合物至一半的量以获得粗产物，该粗产物通过加甲醇/水研磨来纯化，得到呈灰白色固体的2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸(0.22g，收率50.46％，纯度96.44％)。LC-MS(ES+):m/z 329.22[M+H]+
2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛的合成
步骤-1：于室温在氩气氛下向4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(10g，40.80mmol)在1,4-二噁烷(300mL)中的搅拌溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(15.54g，61.21mmol)，然后加入乙酸钾(12.01g，122.41mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并在氩气氛下一次性加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(1.67g，2.04mmol)。将反应混合物再次用氩气反复脱气并然后在95℃回流下加热12小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(200mL)洗涤。浓缩滤液，得到残余物质。将该残余物质溶解在乙酸乙酯(500mL)中并用水(2×100mL)、盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100/200目)纯化并在30-40％的EtOAc/石油醚下洗脱产物，得到呈淡棕色固体的2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛2(7g，收率55.79％，纯度95％)。
步骤-2：于室温向密封管中5-溴-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(2g，9.26mmol)在干燥的THF(50mL)中的搅拌溶液中加入2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛2(2.70g，9.26mmol)，然后在氩气氛下加入溶解在水(15mL)中的磷酸三钾(4.91g，23.14mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并向反应混合物中一次性加入XPhos-PdG2催化剂(0.36g，0.46mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于80℃回流4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。从滤液分层出有机层并浓缩。所得粗产物通过反相柱色谱法使用0.1％的FA/水和乙腈作为洗脱剂梯度纯化，得到呈灰白色固体的2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(1.45g，4.63mmol，纯度96.22％)。LC-MS(ES+):m/z 302.27[M+H]+
2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸的合成
于0℃向2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛(1g，3.32mmol)在THF(50mL)中的搅拌溶液中逐滴加入2-甲基-2-丁烯(1.86g，26.55mmol)，然后加入在水(20mL)中的亚氯酸钠(1.50g，16.59mmol)和磷酸二氢钠(7.96g，66.37mmol)。用时30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温搅拌12小时。反应完成后，将反应混合物浓缩至总体积的1/4并过滤沉淀出的无色固体，用水(10mL)洗涤，充分干燥，得到呈白色固体的2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸(0.65g，收率59.90％，纯度97.04％)。LC-MS(ES+):m/z 318.32[M+H]+
2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛的合成
于室温向密封管中4-溴-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮(2g，8.37mmol)在干燥的THF(50mL)中的搅拌溶液中加入2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(2.44g，8.37mmol)，然后在氩气氛下加入溶解在水(20mL)中的磷酸三钾(4.44g，20.91mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并向反应混合物中一次性加入Pd-Xphos-G2催化剂(0.32g，0.41mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于80℃回流4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。从滤液分层出有机层并浓缩得到粗品。该粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100/200目)纯化并在4-5％的MeOH/EtOAc下洗脱产物，得到呈浅黄色固体的2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(1.8g，收率64.42％，纯度97.10％)。LC-MS(ES+):m/z 325.29[M+H]+
2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸的合成
于0℃向2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(0.35g，1.08mmol)在THF(25mL)中的搅拌溶液中逐滴加入2-甲基-2-丁烯(0.60g，8.64mmol)，然后加入在水(20mL)中的亚氯酸钠(0.48g，5.40mmol)和磷酸二氢钠(2.59g，21.60mmol)。用时30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温再搅拌12小时。反应完成后，将反应混合物浓缩至总体积的1/4并过滤沉淀出的无色固体，用水(10mL)洗涤并充分干燥，得到呈灰白色固体的2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸8(0.28g，收率62.95％，纯度82.64％)。LC-MS(ES+):m/z 341.29[M+H]+。
2-乙氧基-5-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛的合成
步骤-1：向4-溴-2-羟基-5-甲氧基-苯甲醛(505mg，2.19mmol)在DMF(4.89mL)中的溶液中加入粒状碳酸钾(906.24mg，6.56mmol，395.74uL)，然后于室温加入碘乙烷(340.90mg，2.19mmol，175.72uL)并在氩气氛下搅拌5小时。反应完成后，通过倒入到水(50mL)中来淬灭混合物，然后用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。用LiCl(5％w/v的水溶液，50mL)洗涤有机层，然后用盐水(50mL)、Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至4:6)纯化，得到呈白色固体的4-溴-2-乙氧基-5-甲氧基苯甲醛。产量-504mg，89％；LC-MS(ES+):m/z 260.0[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(112.96mg，154.38umol)、1-2 4-溴-2-乙氧基-5-甲氧基-苯甲醛(400mg，1.54mmol)、双(频哪醇合)二硼(470.44mg，1.85mmol)、乙酸钾(454.54mg，4.63mmol，289.52uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(5.89mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(134.62mg，386.63umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到呈位置异构体的混合物的2-乙氧基-5-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛。产量-599mg，82％；LC-MS(ES+):m/z 448.5[M+H]+。
4-(2,5-二氯-4-(哌嗪-1-羰基)苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮的合成
步骤-1：初始将4-溴-2,5-二氯-苯甲酸(609mg，2.26mmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(462.27mg，2.48mmol，45.96uL)、DIPEA(583.23mg，4.51mmol，786.02uL)和HATU(943.71mg，2.48mmol)装入到小瓶中。然后将反应物溶解在DMF(6.69mL)中并于室温搅拌过夜。反应完成后，用水淬灭混合物，然后用EA(3×10mL)萃取。用LiCl(5％w/v的水溶液，50mL)洗涤有机层，然后用盐水(50mL)、Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到呈白色固体的4-(4-溴-2,5-二氯苯甲酰)哌嗪-1-甲酸叔丁酯。产量-535mg，54％；LC-MS(ES+):m/z 339.0[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(79.83mg，109.1umol)、4-(4-溴-2,5-二氯-苯甲酰)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(478mg，1.09mmol)、双(频哪醇合)二硼(332.45mg，1.31mmol)、乙酸钾(321.21mg，3.27mmol)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(5.89mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(417.86mg，1.20mmol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到呈位置异构体的混合物的4-[2,5-二氯-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲酰]哌嗪-1-甲酸叔丁酯。产量-736mg，100％；LC-MS(ES+):m/z 626.5[M+H]+。
步骤-3：初始将4-[2,5-二氯-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲酰]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(736mg，1.17mmol)溶解在DCM(5.69mL)中，然后逐滴加入TFA(267.89mg，2.35mmol，181.01uL)，并让混合物于室温搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至干并与DCM(10mL×2)共蒸发，然后浓缩为TFA盐并在不经进一步纯化的情况下用于下一步。产量-752mg，100％；LC-MS(ES+):m/z 526.4[M+H]+。
4-(2-氯-5-甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮的合成
步骤-1：初始将4-溴-5-氯-2-甲氧基-苯甲醛(782mg，3.13mmol)和2哌嗪-1-甲酸叔丁酯(642.16mg，3.45mmol)装入到反应小瓶中并溶解在1,2-DCE(10.45mL)中，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠95％(1.99g，9.40mmol)。让反应混合物于室温搅拌并通过LCMS监测。反应完成后，将混合物浓缩至干并经由快速柱色谱法纯化(DCM:MeOH直至10％)，得到4-[(4-溴-5-氯-2-甲氧基-苯基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯。产量-1.01g，77％；LC-MS(ES+):m/z 421.3[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(127.78mg，174.63umol)、4-[(4-溴-5-氯-2-甲氧基-苯基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(733mg，1.75mmol)、双(频哪醇合)二硼(532.15mg，2.10mmol)、乙酸钾(514.16mg，5.24mmol，327.49uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(2.58mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(134.62mg，386.63umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到呈位置异构体的混合物的4-[[5-氯-2-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯。产量-751mg，71％；LC-MS(ES+):m/z 608.5[M+H]+。
步骤-3：初始将4-[[5-氯-2-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(751mg，1.23mmol)溶解在DCM(5.69mL)中，然后加入TFA(281.62mg，2.47mmol，190.28uL)，并让混合物搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至干并与DCM(10mL×2)共蒸发，然后浓缩为TFA盐并在不经进一步纯化的情况下用于下一步。产量-768mg，100％；LC-MS(ES+):m/z 508.5[M+H]+。
1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-4-(4-(哌嗪-1-基甲基)-3-(三氟甲氧基)苯基)-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮的合成
步骤-1：初始将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(761.58mg，4.09mmol，303.70uL)和4-溴-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(1000mg，3.72mmol)装入到反应小瓶中并溶解在1,2-DCE(6.88mL)中，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠95％(1.18g，5.58mmol)。让反应混合物于室温搅拌并通过LCMS监测。反应完成后，将混合物浓缩至干并经由快速柱色谱法纯化(己烷/EA直至50％)，得到4-[[4-溴-2-(三氟甲氧基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯。产量-1.60g，97％；LC-MS(ES+):m/z 441.3[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(131.93mg，180.30umol)、4-[[4-溴-2-(三氟甲氧基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(792mg，1.80mmol)、双(频哪醇合)二硼(549.42mg，2.16mmol)、乙酸钾(530.85mg，5.41mmol，338.12uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(2.58mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(134.62mg，386.63umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到呈位置异构体的混合物的4-[[4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]-2-(三氟甲氧基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯。产量-798mg，71％；LC-MS(ES+):m/z 628.6[M+H]+。
步骤-3：初始将4-[[4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]-2-(三氟甲氧基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(798mg，1.27mmol)溶解在DCM(5.69mL)中，然后加入TFA(2.90g，25.43mmol，1.96mL)，并让混合物搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至干并与DCM(10mL×2)共蒸发，然后浓缩为TFA盐并在不经进一步纯化的情况下用于下一步。产量-815mg，100％；LC-MS(ES+):m/z 528.6[M+H]+。
2-(2,2-二氟乙氧基)-5-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛的合成
步骤-1：向4-溴-2-羟基-5-甲氧基-苯甲醛(622mg，2.69mmol)在DMF(6.01mL)中的溶液中加入粒状碳酸钾(1.12g，8.08mmol，487.43uL)，然后于室温加入1,1-二氟-2-碘-乙烷(516.75mg，2.69mmol，237.04uL)并在氩气氛下加热至90℃搅拌48小时。反应完成后，通过倒入到水(50mL)中来淬灭混合物，然后用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。用LiCl(5％w/v的水溶液，50mL)洗涤有机层，然后用盐水(50mL)、Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至4:6)纯化，得到呈白色固体的4-溴-2-(2,2-二氟乙氧基)-5-甲氧基-苯甲醛。产量-349mg，44％；LC-MS(ES+):m/z 295.1[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(69.43mg，94.89umol)、4-溴-2-(2,2-二氟乙氧基)-5-甲氧基-苯甲醛(280mg，948.90umol)、双(频哪醇合)二硼(289.16mg，1.14mmol)、乙酸钾(279.38mg，2.85mmol，177.95uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(2.58mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(134.62mg，386.63umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到呈位置异构体的混合物的2-(2,2-二氟乙氧基)-5-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛。产量-462mg，100％；LC-MS(ES+):m/z 484.5[M+H]+。
2-异丙氧基-5-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛的合成
步骤-1：向4-溴-2-羟基-5-甲氧基-苯甲醛(556mg，2.41mmol)在DMF(5.34mL)中的溶液中加入粒状碳酸钾(997.77mg，7.22mmol，435.71uL)，然后于室温加入2-碘丙烷(409.08mg，2.41mmol，240.64uL)并在氩气氛下搅拌5小时。反应完成后，通过倒入到水(50mL)中来淬灭混合物，然后用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。用LiCl(5％w/v的水溶液，50mL)洗涤有机层，然后用盐水(50mL)、Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至4:6)纯化，得到呈白色固体的4-溴-2-异丙氧基-5-甲氧基-苯甲醛。产量573mg，87％；LC-MS(ES+):m/z 273.0[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(127.52mg，174.28umol)、4-溴-2-异丙氧基-5-甲氧基-苯甲醛(476mg，1.74mmol)、双(频哪醇合)二硼(531.08mg，2.09mmol)、乙酸钾(513.13mg，5.23mmol，326.83uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(2.58mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(134.62mg，386.63umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到呈位置异构体的混合物的2-异丙氧基-5-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛。产量-715mg，89％；LC-MS(ES+):m/z 462.9[M+H]+。
4-(6-氟-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)-2,6-二甲氧基苯甲醛的合成
步骤-1：初始将4-溴-6-氟-2H-异喹啉-1-酮(1000mg，4.13mmol)溶解在DMF(38.41mL)中并冷却至0℃，然后一次性加入氢化钠(198.29mg，8.26mmol)，并将混合物搅拌30分钟。然后逐滴加入碘甲烷(2.35g，16.53mmol，1.03mL)并让混合物于环境温度搅拌过夜。然后用冰水淬灭反应，滤出沉淀的产物并用大量的水、然后用己烷洗涤。干燥固体，得到4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛。产量-759mg，72％；LC-MS(ES+):m/z 256.0[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(59.71mg，81.61umol)、4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(200mg，816.09umol)、双(频哪醇合)二硼(248.68mg，979.31umol)、乙酸钾(240.28mg，2.45mmol，153.04uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(12.27mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-6-氟-2-甲基-异喹啉-1-酮(208.98mg，816.09umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到4-(6-氟-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)-2,6-二甲氧基苯甲醛。产量-74mg，26％；LC-MS(ES+):m/z 342.3[M+H]+。
2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)苯甲醛的合成
步骤-1：初始将4-溴-2H-异喹啉-1-酮(1030mg，4.13mmol)溶解在DMF(14.21mL)中并冷却至0℃，然后一次性加入氢化钠(221.1mg，9.21mmol)，并将混合物搅拌30分钟。然后逐滴加入碘甲烷(2.62g，18.42mmol，1.15mL)并让混合物于环境温度搅拌过夜。然后用冰水淬灭反应，滤出沉淀的产物并用大量的水、然后用己烷洗涤。干燥固体，得到4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛。产量-784mg，72％；LC-MS(ES+):m/z 238.0[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(59.71mg，81.61umol)、4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(200mg，816.09umol)、双(频哪醇合)二硼(248.68mg，979.31umol)、乙酸钾(240.28mg，2.45mmol，153.04uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(12.27mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-2-甲基-异喹啉-1-酮(194.30mg，816.09umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)苯甲醛。产量-63mg，24％；LC-MS(ES+):m/z 324.3[M+H]+。
4-(7-氯-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)-2,6-二甲氧基苯甲醛的合成
步骤-1：初始将4-溴-7-氯-2H-异喹啉-1-酮(916mg，3.54mmol)溶解在DMF(38.41mL)中并冷却至0℃，然后一次性加入氢化钠(170.07mg，7.09mmol)并将混合物搅拌30分钟。然后逐滴加入碘甲烷(2.01g，14.17mmol，882.39uL)并让混合物于环境温度搅拌过夜。然后用冰水淬灭反应，滤出沉淀的产物并用大量的水、然后用己烷洗涤。干燥固体，得到4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛。产量-1.01g，100％；LC-MS(ES+):m/z 274.0[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(59.71mg，81.61umol)、4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(200mg，816.09umol)、双(频哪醇合)二硼(248.68mg，979.31umol)、乙酸钾(240.28mg，2.45mmol，153.04uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(12.27mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-7-氯-2-甲基-异喹啉-1-酮(222.41mg，816.09umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到4-(7-氯-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)-2,6-二甲氧基苯甲醛。产量-75mg，26％；LC-MS(ES+):m/z 358.3[M+H]+。
2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛的合成
步骤-1：初始将5-溴-3,4-二甲基-1H-吡啶-2-酮(2g，9.90mmol)溶解在DMF(40.57mL)中并冷却至0℃，然后一次性加入氢化钠(475.09mg，19.80mmol)并将混合物搅拌30分钟。然后逐滴加入碘甲烷(5.62g，39.59mmol，2.46mL)并让混合物于环境温度搅拌过夜。然后用冰水淬灭反应并然后用乙酸乙酯(3×50mL)萃取混合物，合并有机层，用盐水(1×100mL)、Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)，得到4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛。产量-1.35g，63％；LC-MS(ES+):m/z215.9[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(59.71mg，81.61umol)、4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(200mg，816.09umol)、双(频哪醇合)二硼(248.68mg，979.31umol)、乙酸钾(240.28mg，2.45mmol，153.04uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(12.27mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入5-溴-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(176.34mg，816.09umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛。产量-245mg，99％；LC-MS(ES+):m/z 302.2[M+H]+。
4-(1,5-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,6-二甲氧基苯甲醛的合成
步骤-1：初始将5-溴-3-甲基-1H-吡啶-2-酮(1.050g，5.58mmol)溶解在DMF(17.22mL)中并冷却至0℃，然后一次性加入氢化钠(268.03mg，11.17mmol)，并将混合物搅拌30分钟。然后逐滴加入碘甲烷(3.17g，22.34mmol，1.39mL)并让混合物于环境温度搅拌过夜。然后用冰水淬灭反应并然后用乙酸乙酯(3×50mL)萃取混合物，合并有机层，用盐水(1×100mL)、Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)，得到4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛。产量-554mg，49％；LC-MS(ES+):m/z201.9[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(91.36mg，124.86umol)、4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(306mg，1.25mmol)、双(频哪醇合)二硼(380.49mg，1.50mmol)、乙酸钾(367.63mg，3.75mmol，234.16uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(12.27mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入5-溴-1,3-二甲基-吡啶-2-酮(252.28mg，1.25mmol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到4-(1,5-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,6-二甲氧基苯甲醛。产量-62mg，17％；LC-MS(ES+):m/z 288.2[M+H]+。
2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛的合成
步骤-1：初始将4-溴-2H-2,7-萘啶-1-酮(1g，4.44mmol)溶解在DMF(10.83mL)中并冷却至0℃，然后一次性加入氢化钠(213.27mg，8.89mmol)，并将混合物搅拌30分钟。然后逐滴加入碘甲烷(2.52g，17.77mmol，1.11mL)并使混合物于环境温度搅拌过夜。然后用冰水淬灭反应并然后用乙酸乙酯(3×50mL)萃取混合物，合并有机层，用盐水(1×100mL)、Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)，得到4-溴-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮。产量-811mg，76％；LC-MS(ES+):m/z 240.9[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(58.66mg，80.16umol)、4-溴-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮(191.65mg，801.64umol)、双(频哪醇合)二硼(244.28mg，961.97umol)、乙酸钾(236.02mg，2.40mmol，150.33uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(12.27mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-2-氯-6-甲氧基-苯甲醛(200mg，801.64umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛。产量-121mg，54％；LC-MS(ES+):m/z329.1[M+H]+。
2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸的合成
于0℃向2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(0.4g，1.22mmol)在THF(25mL)中的搅拌溶液中加入2-甲基-2-丁烯(0.68g，9.73mmol)，然后加入溶解在水(20mL)中的亚氯酸钠(0.55g，6.08mmol)和磷酸二氢钠(2.92g，24.33mmol)。经30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温搅拌12小时。通过TLC确认反应的完成。将反应混合物浓缩至一半的量，得到粗产物，该粗产物通过加甲醇研磨来纯化，然后用水洗涤，得到呈白色固体的2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸(0.35g，收率71.16％，纯度85.28％)。LC-MS(ES+):m/z 345.18[M+H]+。
4-(7-氟-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛的合成
步骤-1：初始将4-溴-7-氟-2H-异喹啉-1-酮(994mg，4.11mmol)溶解在DMF(38.41mL)中并冷却至0℃，然后一次性加入氢化钠(197.10mg，8.21mmol)，并将混合物搅拌30分钟。然后逐滴加入碘甲烷(2.33g，16.43mmol，1.02mL)并使混合物于环境温度搅拌过夜。然后用冰水淬灭反应，滤出沉淀的产物并用大量的水、然后用己烷洗涤。干燥固体，得到4-溴-7-氟-2-甲基-异喹啉-1-酮，产量-902mg,86％；LC-MS(ES+):m/z 256.0[M+H]+。
步骤-2：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(51.68mg，70.63umol)、4-溴-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(190mg，706.28umol)、双(频哪醇合)二硼(215.22mg，847.54umol)、乙酸钾(207.95mg，2.12mmol，132.45uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(12.27mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-7-氟-2-甲基-异喹啉-1-酮(180.86mg，706.28umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用DCM/乙酸乙酯洗涤。滤液用水(10mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法(己烷:乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到4-(7-氟-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛。产量-241mg，93％；LC-MS(ES+):m/z366.2[M+H]+。
5-甲氧基-1',4',5'-三甲基-6'-氧代-1',6'-二氢-[3,3'-联吡啶]-6-甲醛的合成
初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(135.45mg，185.12umol)、5-溴-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(400mg，1.85mmol)、双(频哪醇合)二硼(564.11mg，2.22mmol)、乙酸钾(545.05mg，5.55mmol，347.16uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(11.89mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入5-溴-3-甲氧基频哪醛(134.62mg，386.63umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用EA/DCM洗涤。然后用H2O(10mL)、接着盐水(25mL)洗涤滤液，然后用Na2SO4干燥，然后过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷/EA直至100％)，得到呈固体的产物3-甲氧基-5-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)吡啶-2-甲醛(202mg，741.83umol，收率40％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.33(s,1H),8.26(d,J＝1.7Hz,1H),7.25(d,J＝1.7Hz,1H),7.13(s,1H),3.98(s,3H),3.58(s,3H),2.18(s,3H),2.07(s,3H)。
4-(3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-2-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮的合成
步骤-1：向4-碘-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮(2.0g，6.99mmol)在DMF(15mL)和水(2mL)中的搅拌溶液中加入2-[[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]甲基-甲基-氨基]乙酸叔丁酯(3.53g，8.39mmol)和碳酸钠(1.85g，17.48mmol)。所得混合物用N2(g)脱气15分钟，加入Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(570.94mg，6.99mmol)并于100℃加热5小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物用乙酸乙酯稀释并通过硅藻土床过滤。用水洗涤有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到呈棕色胶状固体的4-[[2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1g，1.86mmol，收率53.21％，纯度92.15％)。将其用于下一步而无需进一步纯化。LC-MS(ES+):m/z 495.30[M+H]+
步骤-2：于0℃向4-[[2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.02mmol)在二噁烷中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(0.18ml，20.2mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时。完成后，浓缩反应混合物，粗化合物加乙醚研磨并干燥，得到呈灰白色固体的4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮.HCl(0.8g，1.62mmol，收率80.02％，纯度87.15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.74(bs,2H),9.54(s,1H),8.77.(d,J＝6Hz,1H),8.12(s,1H),7.90(d,J＝6Hz,1H),6.88(s,2H),4.49(s,2H),3.90(s,6H),3.62(s,3H),3.59-3.58(bs,4H),3.39(bs,4H)；LC-MS(ES+):m/z 395.35[M+H]+。
5-(3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-1,3,4-三甲基吡啶-2(1H)-酮的合成
步骤-1：于0℃向5-溴-3,4-二甲基吡啶-2-胺(0.6g，2.98mmol)在浓H2SO4(20mL)和水(60mL)中的混合物中加入亚硝酸钠(2.40g，34.81mmol)在水(20mL)中的溶液。让混合物平衡至室温并搅拌1小时。过滤沉淀物，用水洗涤并干燥，得到呈灰白色固体的5-溴-3,4-二甲基-1H-吡啶-2-酮(5g，24.50mmol，收率98.52％，纯度99％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ13.14(s,1H),7.47(s,1H),2.32(s,3H),2.18(s,3H)。
步骤-2：于0℃向5-溴-3,4-二甲基-1H-吡啶-2-酮(5g，24.75mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入氢化钠(在矿物油中的60％分散体)(0.680g，29.70mmol)并让在相同的温度下搅拌15分钟，然后缓慢加入碘甲烷(4.62mL，74.24mmol)。加入后让反应混合物于室温温热并搅拌3小时。用冰冷水(150mL)稀释反应物质，用CH2Cl2(200ml×3)萃取。再次用冰冷水(75mL×2)洗涤有机层并用Na2SO4干燥，浓缩，得到呈灰白色固体的5-溴-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(5.1g，23.37mmol，收率94.42％，纯度99％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.93(s,1H),3.40(s,3H),2.20(s,3H),2.05(s,3H)。LC-MS(ES+):m/z 214[M+H]+
步骤-3：向5-溴-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(1.5g，6.94mmol)在THF(80mL)和水(20mL)中的搅拌溶液中加入4-[[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.21g，6.94mmol)和磷酸三钾(3.68g，17.36mmol)。所得混合物用N2(g)脱气15分钟，加入Pd-Xphose-G2(273.10mg，0.034mmol)并于100℃加热4小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤。用(2×100mL)乙酸乙酯洗涤硅藻土床。减压浓缩反应混合物，粗品通过柱色谱法纯化(硅胶(230-400目)并用4％的EtOAc/MeOH洗脱产物)，得到呈棕色胶状半固体的4-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.07(s,1H),6.38(s,2H),3.81(s,6H),3.72(s,2H),3.57(s,3H),3.43(t,J＝5.0Hz,4H),2.51(t,J＝4.8Hz,4H),2.19(s,3H),2.07(s,3H),1.45(s,9H)。LC-MS(ES+):m/z472[M+H]+。
步骤-4：于0℃向4-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.35g，2.86mmol)9在二噁烷中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(2.09g，57.25mmol)并将反应混合物于室温搅拌1小时，同时通过TLC监测。浓缩反应混合物，粗化合物加乙醚研磨并干燥，得到呈白色固体的5-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮.HCl盐。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ11.25(bs,1H),9.72(d,J＝47.9Hz,1H),7.54(s,1H),6.68(s,2H),4.27(s,2H),3.87(s,6H),3.47(s,8H),3.39(s,3H),2.08(d,J＝8.8Hz,6H)。LC-MS(ES+):m/z 372[M+H]+。
5-(3,5-二甲氧基-4-(哌啶-4-亚基甲基)苯基)-1,3,4-三甲基吡啶-2(1H)-酮盐酸盐的合成
步骤-1：于室温在氩气氛下向4-[(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，1.70mmol)在1,4二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中加入双(频哪醇合)二硼(0.647g，2.55mmol)，然后加入乙酸钾(0.5g，5.09mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并在氩气氛下一次性加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(0.167g，0.204mmol)。反应混合物再次用氩气反复脱气并然后于80℃加热3小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(20mL)洗涤。浓缩滤液，用乙酸乙酯(50mL)溶解所得粗物质，用水(2×20mL)、然后盐水(1×20mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥，浓缩，得到呈半固体的4-[[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯2(0.7g，1.52mmol)。LC-MS(ES+):m/z360.2[M+H]+(M-100物质为占主导的脱-Boc物质)
步骤-2：于室温在氩气氛下向5-溴-1,3,4-三甲基吡啶-2(1H)-酮(1g，4.63mmol)在1,4二噁烷(20mL)和水(2mL)中的搅拌溶液中加入4-(2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)亚苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.19g，6.94mmol)，然后加入磷酸三钾(2.46g，11.57mmol)。反应混合物用氩气反复脱气并在氩气氛下一次性加入环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(0.189g，0.231mmol)。反应混合物再次用氩气反复脱气并然后在80℃回流下加热4小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(200mL)洗涤。浓缩滤液，得到残余物质。将该残余物质溶解在乙酸乙酯(100mL)中并用水(1×50mL)、盐水(1×25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗品通过反相((0.1％的FA/水)/ACN)纯化，得到呈棕色固体的4-(2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)亚苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，0.896mmol，收率19.37％，纯度84％)。LC-MS(ES+):m/z 469.71[M+H]+。
步骤-3：将4-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.07mmol)、4M的HCl/二噁烷(3mL)的溶液于室温搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测。2小时后，浓缩反应混合物至干。粗化合物加乙醚(2×20ml)研磨，得到呈灰白色固体的5-[3,5-二甲氧基-4-(4-亚哌啶基甲基)苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮.HCl盐(0.450g，1.03mmol，收率96.17％，纯度92.34％)。LC-MS(ES+):m/z 369.68[M+H]+
4-(3-氟-5-甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮的合成
步骤-1：向2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(0.5g，1.19mmol)在DCE(20ml)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(0.292g，3.56mmol)和乙酸(0.071g，1.19mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯2(0.243g，1.31mmol)并将反应混合物于室温搅拌3小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.26g，5.93mmol)。于室温继续搅拌2小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。2小时后，用水(30ml)淬灭反应混合物并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。该粗化合物加乙醚(2×20mL)研磨，得到呈黄色固体的4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯3(0.6g，收率78.63％，纯度92％)。LC-MS(ES+):m/z 592.17[M+H]+
步骤-2：将4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.01mmol)在4M的HCl/二噁烷(5mL)中的溶液于室温搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测。3小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物加乙醚(2×20mL)研磨，得到呈棕色固体的4-[3-氟-5-甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮.HCl(0.550g，收率82.17％，纯度80％)。LC-MS(ES+):m/z 492.17[M+H]+
步骤-3：将4-[3-氟-5-甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(1.2g，2.44mmol)在TFA(5.57g，48.82mmol，3.76mL)中的混合物于70℃加热2小时。通过TLC和LCMS监测反应。在起始材料消耗后，真空除去溶剂并与干燥的DCM共蒸馏。所得粗化合物用反相柱色谱法纯化，得到呈棕色固体的4-[3-氟-5-甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(1.1g，2.21mmol，收率90.58％，纯度97.58％，061)。LC-MS(ES+):m/z 372.1[M+H]+
3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的合成
让2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(673.69mg，1.60mmol)在TFA(14.80g，129.80mmol，10mL)中的溶液于70℃搅拌3小时。在起始材料消耗后，真空除去溶剂并与干燥的DCM共蒸馏。得到的粗化合物用乙醚洗涤，得到呈棕色固体的2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.5g，1.11mmol，收率69.16％，纯度66.62％)。LC-MS(ES+):m/z 302.27[M+H]+
3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的合成
步骤-1：于室温向4-溴-3-氟苯胺(3.07g，16.17mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(5.0g，16.17mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中加入在水(20mL)中的K2CO3(3.71g，26.84mmol)。反应混合物用Ar脱气20分钟，然后加入PdCl2(dppf)DCM(1.06g，1.29mmol)。所得反应混合物于90℃搅拌16小时。在反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，将反应混合物冷却至环境温度，用水(400mL)稀释并用EtOAc(2×250mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空蒸发。粗残余物通过使用快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度0-100％的EtOAc/石油醚)，得到所需的4-(4-氨基-2-氟苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(4.6g，15.58mmol，收率96.33％，纯度99％)。LC-MS(ES+):m/z 293.32[M+H]+
步骤-2：向溶解在EtOAc(48mL)中的4-(4-氨基-2-氟苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(4.6g，15.73mmol)中加入Pd/C(2.40g，22.51mmol)。将反应烧瓶抽空，通过使用氢气囊回填氢气并将反应在氢气氛下于室温搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。通过硅藻土床过滤反应混合物并用乙酸乙酯(2×30mL)洗涤。浓缩滤液，产生粗产物，该粗产物通过柱色谱法使用二氧化硅(230-400目大小)和0-100％的EtOAc/石油醚作为洗脱剂纯化，得到黄色的4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，14.22mmol，收率90.36％，纯度93％)。LC-MS(ES+):m/z 239.28[M+H]+
步骤-3：于室温向溶解在DMF(45mL)中的4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，15.29mmol)中加入NaHCO3(7.7g，91.72mmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(17.61g，91.72mmol)。所得反应混合物于70℃搅拌16小时。在反应完成(通过TLC监测)后，将反应混合物冷却至室温，用水稀释并用乙酸乙酯(2×500mL)萃取。合并有机萃取物，用Na2SO4干燥，过滤并真空蒸发。粗残余物通过使用快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度0-100％的EtOAc/石油醚)，得到所需的4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.3g，9.54mmol，收率62.44％，纯度68％)。LC-MS(ES-):m/z 404.23[M-H]-
步骤-4：于0℃向4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.3g，10.61mmol)在DCM(40mL)中的搅拌溶液中加入TFA(4.90mL，63.63mmol)。所得反应混合物于室温搅拌2小时。在反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，真空蒸发溶剂。向残余物中加入Et2O(2×30mL)以沉淀出呈固体的化合物7(4.1g，8.80mmol，收率82.97％，纯度90％，061)。真空过滤粗化合物，干燥并直接用于下一步而不进行进一步的纯化。LC-MS(ES+):m/z 306.21[M+H]+
3-((4-([4,4'-联哌啶]-1-基)-3-氯苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的合
步骤-1：向化合物4-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，3.73mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(1.21g，3.73mmol)并搅拌15分钟，然后加入2-氯-1-氟-4-硝基-苯(0.654g，3.73mmol)。让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。完成后，用冰片淬灭反应物质并过滤沉淀出的固体，得到呈黄色固体的4-[1-(2-氯-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4g，2.81mmol，收率75.34％，纯度85％)并用于下一步。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.10-1.40(m,4H),1.46-1.53(m,11H),1.72(d,J＝12.4Hz,2H),1.83(d,J＝12.8Hz,2H),2.6-2.8(m,4H),3.63(d,J＝12Hz,2H),4.14(bs,2H),7.01(d,J＝9.2Hz,1H),8.07(dd,J1＝2.8Hz,J2＝8.8Hz,1H),8.24(d,J＝2.8Hz,1H),LC-MS(ES+):m/z424.49[M+H]+
步骤-2：于0℃向4-[1-(2-氯-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.36mmol)在甲醇(5mL)、水(5mL)和THF(10mL)中的搅拌溶液中加入Zn粉(1.54g，23.59mmol)，然后在相同的温度下逐份加入NH4Cl(1.89g，35.38mmol)。加入后，将反应温热至室温并搅拌3小时，同时通过TLC监测。通过硅藻土过滤反应混合物并用甲醇(50mL)洗涤。浓缩滤液，用冰冷水(50mL)溶解残余物质并用DCM(2×100mL)萃取。合并有机层，用盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色粘稠液体的4-[1-(4-氨基-2-氯-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，1.83mmol，收率77.48％，纯度90％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.1-1.2(m,3H),1.2-1.35(m,2H),1.48(s,9H),1.48-1.50(m,1H),1.73(t,J＝12.4Hz,4H),2.531(t,J＝2Hz,2H),2.65(t,J＝12.4Hz,2H),3.26(d,J＝11.6Hz,2H),3.51(s,2H),4.05-4.2(m,2H),6.54(dd,J1＝2.4Hz,J2＝8.8Hz,1H),6.74(d,J＝2.8Hz,1H),6.87(d,J＝8.4Hz,1H)。
步骤-3：向4-[1-(4-氨基-2-氯-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.03mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(0.77g，4.06mmol)、NaHCO3(1.02g，12.18mmol)并于85℃搅拌4小时，同时通过LCMS和TLC监测。24小时后，用冰冷水(100ml)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。该粗化合物通过(硅胶100-200目，40％的石油醚/乙酸乙酯)柱色谱法纯化，得到呈淡绿色固体的4-[1-[2-氯-4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.35g，0.644mmol，收率31.74％，纯度93％)。1HNMR(400MHz,DMSO):δ0.9-1.5(m,18H),1.70(t,J＝12.8Hz,4H),1.80-1.95(m,1H),2.05-2.15(m,1H),2.40-2.50(m,1H),2.6-2.8(m,3H),3.1(d,J＝11.24Hz,2H),3.9-4.1(m,2H),4.25-4.35(m,1H),6.6(dd,J1＝2.8Hz,J2＝8.8Hz,1H),6.75(d,J＝2.8Hz,1H),6.94(d,J＝8.8Hz,1H),10.87(S,1H)。LC-MS(ES+):m/z 505.13[M+H]+
步骤-4：于0℃向4-[1-[2-氯-4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.15g，0.297mmol)在1,4-二噁烷(3mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/二噁烷(0.108g，2.97mmol)并于室温搅拌30分钟。浓缩反应混合物，残余物加乙醚(2×25mL)研磨并干燥沉淀出的固体，得到呈淡绿色固体的3-[3-氯-4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮HCl盐(0.12g，0.252mmol，收率85.13％，纯度93％)。1H NMR(400MHz,DMSO):δ1.2-1.45(m,5H),1.60(s,1H),1.70-1.80(m,5H),2.0-2.1(m,1H),2.5-2.9(m,6H),3.2-3.35(m,2H),3.5-3.65(m,3H),4.25-4.35(m,1H),6.94(d,J＝8.8Hz,1H),6.78(s,1H),7.05(bs,1H),8.35(bs,1H),8.61(bs,1H),10.87(s,1H)。LC-MS(ES+):m/z405.32[M+H]+
3-((4-(3,3-二氟-1-((4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的合成
步骤-1：于室温向化合物6-(叔-丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-3-甲酸(500mg，1.76mmol)和HATU(805.17mg，2.12mmol)在DMF(7mL)中的搅拌溶液中加入N-乙基二异丙胺(0.77ml，4.41mmol)并搅拌5分钟。加入N-甲氧基甲胺(206.56mg，2.12mmol)并继续于室温搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应的进度。用乙酸乙酯(50mL)稀释反应混合物并用水(2×30mL)、饱和氯化铵水溶液(2×30mL)和盐水(50mL)洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0至50％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈黄色半固体的3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5,7-二氢-4H-噻吩并[2,3-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯(520mg，收率88.49％，纯度98.02％)。LC-MS(ES+):m/z349.27[M+Na]+
步骤-2：在氩气氛下向3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5,7-二氢-4H-噻吩并[2,3-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯(0.520g，1.59mmol)在THF(10mL)中的处于-78℃的搅拌溶液中逐滴加入DIBAL-H(在己烷中的1M溶液，0.45mL 2.23mmol)。通过LCMS和TLC监测反应的进度。在于-78℃5小时后，粗品LCMS显示40％的产物形成。再次逐滴加入DIBAL-H在THF中的溶液(在己烷中的1M溶液，0.45mL 2.23mmol)。30分钟后，于-78℃用饱和氯化铵(20mL)淬灭反应并让反应混合物温热至室温。用水(30mL)和乙酸乙酯(75mL)洗涤有机层，其形成凝胶样悬浮体。通过硅藻土垫过滤有机层。用饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)和盐水(25mL)洗涤滤液，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-20％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈黄色半固体的3-甲酰基-5,7-二氢-4H-噻吩并[2,3-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯(0.366g，收率84.76％，纯度98.63％)。
步骤-3：向3-甲酰基-5,7-二氢-4H-噻吩并[2,3-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯(50mg，0.187mmol)和化合物3-((4-(3,3-二氟哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(98.16mg，0.224mmol)在溶剂二氯乙烷(2mL)和甲醇(2mL)的混合物中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(30.68mg，0.374mmol)并于室温搅拌10分钟。向反应混合物中加入乙酸(10.70μL，0.187mmol)和分子筛(50mg)并于70℃搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，加入SiliaBond氰基硼氢化物(50mg，0.187mmol)并于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物并通过过柱(Davisil二氧化硅，0至40％的乙酸乙酯/石油醚)纯化粗产物，得到呈绿色固体的3-[[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-3,3-二氟-1-哌啶基]甲基]-5,7-二氢-4H-噻吩并[2,3-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯(52mg，收率31.87％，纯度65.87％)。LC-MS(ES+):m/z 575.1[M+H]+
步骤-4：向3-[[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-3,3-二氟-1-哌啶基]甲基]-5,7-二氢-4H-噻吩并[2,3-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯(50mg，0.89mmol)在DCM(3mL)中的处于0℃的搅拌溶液中逐滴加入三氟乙酸(82.44uL，1.07mmol)并将反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，减压浓缩反应混合物，与乙腈(5mL×2)、甲苯(5mL×2)共蒸馏并加乙醚(5ml)研磨，得到呈绿色固体的3-[4-[3,3-二氟-1-(4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基甲基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2-酮(60mg，收率92.17％，纯度94.46％)。LC-MS(ES+):m/z 474.46[M+H]+
3-((3-氟-4-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的合成
步骤-1：向化合物4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶1(0.5g，2.55mmol)在乙腈(500mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(0.829g，2.55mmol)并搅拌15分钟，然后加入1,2-二氟-4-硝基-苯(0.243g，1.53mmol)。让反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测。完成后，用水(200ml)稀释反应混合物，用乙酸乙酯(2×200ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，用50％的石油醚/乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到呈黄色固体的1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶(0.250g，0.739mmol，收率29.06％，纯度99.28％)。1HNMR(400MHz,DMSO):δ1.25-1.20(m,8H),1.43(bs,2H),1.79 -1.73(m,4H),2.73(t,J＝12.0Hz,2H),2.90(t,J＝12.4Hz,2H),3.16(d,J＝12.0Hz,2H),3.68(d,J＝12.4Hz,2H),7.17-7.12(m,1H),7.98-7.96(m,1H),8.38(s,1H)。LC-MS(ES+):m/z 336.80[M+H]+
步骤-2：向1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶(0.25g，0.745mmol)在THF(20mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.226g，2.24mmol)，然后加入叔-丁氧基羰基叔-丁基碳酸酯(0.325g，1.49mmol)并让于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。完成后，用水(50ml)稀释反应混合物，用10％的MeOH:DCM(2×100ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，用40％的石油醚/乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到呈黄色固体的4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.2g，444.06umol，收率59.58％，纯度96.70％)。1HNMR(400MHz,DMSO):δ1.29-1.11(m,2H),1.40-1.38(m,8H),1.45(s,9H),1.70 -1.63(m,2H),1.90-1.79(m,2H),2.67(t,J＝12.0Hz,2H),2.85(t,J＝12Hz,2H),3.70(d,J＝12.8Hz,2H),4.07(bs,2H),6.89(t,J＝8.8Hz,2H),7.90-7.96(m,1H),7.97-7.94(m,1H)。LC-MS(ES+):m/z 358.80[M+Na]+
步骤-3：向4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.2g，0.459mmol)在EtOAc(10mL)和甲醇(10mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(146.61mg，1.38mmol)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌2小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤并浓缩滤液。粗化合物通过(硅胶230-400目，洗脱剂40％的石油醚/乙酸乙酯)柱色谱法纯化，得到呈黄色固体的4-[2-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.150g，0.322mmol，收率70.24％，纯度87.20％)；LC-MS(ES+):m/z 406.78[M+H]+
步骤-4：向4-[2-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.48mmol)在DMF(50mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(0.852g，4.44mmol，NaHCO3(1.24g，14.79mmol)并将反应混合物于80℃搅拌46小时，同时通过TLC和LCMS监测。用冰冷水(100mL)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，用50-60％的石油醚/乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到呈棕色固体的4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯((0.2g，收率23.57％，纯度90.09％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ0.98-0.92(m,2H),1.34-1.24(m,7H),1.38(s,11H),1.69-1.61(m,4H),1.86-1.82(m,1H),2.10-2.05(m,1H),2.74-2.51(m,5H),3.09(d,J＝10Hz,2H),4.23(d,J＝4.4Hz,2H),4.31-4.21(m,1H),5.76(d,J＝8Hz,1H),6.41-6.38(m,1H),6.51-6.46(m,1H),6.81(t,J＝18.8Hz,1H),10.97(s,1H),LC-MS(ES+):m/z 517.83[M+H]+
步骤-5：于0℃向化合物4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.2g，387.11mmol)在1,4-二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入4M的HCL/二噁烷(0.141g，3.87mmol)并将反应混合物于室温搅拌5小时，同时通过TLC监测。完成后，减压浓缩反应混合物，粗化合物加醚研磨，得到呈灰白色固体的3-[3-氟-4-[4-[2-(4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.HCl盐(0.190g，收率97.50％，纯度89.99％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.31-1.28(m,7H),1.68-1.49(m,3H),1.84-1.77(m,7H),2.29-2.21(m,1H),2.67-2.53(m,1H),2.81-2.78(m,3H),3.23-3.20(m,1H),3.51-3.49(m,4H),4.44-4.40(m,1H),6.59-6.57(m,2H),6.71-6.67(m,1H),7.69(bs,1H),8.71-8.69(s,1H),8.93(d,J＝8.8Hz,1H),10.84(s,1H LC-MS(ES+):m/z 417.50[M+H]+
3-((4-(4-((4,4-二氟-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮234-1的合成：
步骤-1：于0℃将亚硝酸钠(19.88g，288.14mmol，9.16mL)在水(400mL)中的水溶液逐滴加到B33-1(51g，360.18mmol，44.35mL)在浓盐酸(36-38％)(13.13g，360.18mmol，16.42mL)和水(400mL)中的搅拌悬浮液中。混合物于相同的温度下搅拌15分钟，然后于0℃逐滴加入碘化钾(53.81g，324.16mmol)在水(400mL)中的水溶液。反应混合物于环境温度搅拌16小时，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，使用二氯甲烷(3×100mL)进行萃取；合并萃取物，依次用水(100mL)、5％的硫代硫酸钠(2×50mL)和水(50mL)洗涤。用无水Na2SO4干燥，过滤并真空蒸发，得到粗残余物。该残余物通过快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；100％的石油醚)，得到呈棕色油的所需化合物1-氯-2-碘-3-甲基-苯B33-2(51.10g，184.18mmol，收率51.14％，纯度91％)。
步骤-2：向化合物2-2(11.9g，47.13mmol)和化合物B33-3(9.57g，47.13mmol，6.06mL)在DMSO(25mL)中的溶液中加入铜粉(8.39g，131.97mmol)；并将所得反应混合物于55℃搅拌16小时。反应完成(通过TLC监测)后，将其冷却至室温并向其中加入饱和NH4Cl溶液(40mL)。使用EtOAc(3×50mL)进行萃取；合并有机层，用1.0N HCl溶液(30mL)、水(50mL×3)、盐水(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度：0-10％的EtOAc/石油醚)，得到呈无色油的所需化合物2-(2-氯-6-甲基-苯基)-2,2-二氟-乙酸乙酯B33-4(8.25g，31.19mmol，收率66.17％，纯度94％)。
步骤-3：向化合物B33-4(8.2g，32.98mmol)和NBS(6.16g，34.63mmol，2.93mL)在四氯化碳(82mL)中的搅拌溶液中加入过氧化苯甲酰(0.798g，3.30mmol)并将反应混合物于80℃搅拌6小时，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成(TLC和LCMS)后，将其冷却至室温并滤出观察到的残余物。真空浓缩滤液，得到呈浅黄色油的粗化合物2-[2-(溴甲基)-6-氯-苯基]-2,2-二氟-乙酸乙酯B33-5(11.08g，13.87mmol，收率42.06％，纯度41％)，其不经任何纯化直接用于下一步。
步骤-4：向化合物B33-5(11.0g，33.58mmol)在DMF(75mL)中的搅拌溶液中加入叠氮化钠(4.37g，67.17mmol，2.36mL)并将所得反应混合物于室温搅拌16小时。反应完成(TLC)后，将其用EtOAc(200mL)稀释并用饱和NaHCO3溶液(50ml)、水(3×75mL)、盐水(75mL)洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物通过快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度0-6％的EtOAc/石油醚)，得到呈无色油的所需化合物2-[2-(叠氮基甲基)-6-氯-苯基]-2,2-二氟-乙酸乙酯B33-6(4.03g，11.39mmol，收率33.93％，纯度82％)。
步骤-5：向化合物B33-6(4.0g，13.81mmol)在甲醇(40mL)中的搅拌溶液中加入PtO2(0.400g，1.76mmol)并将反应混合物于氢气氛(1个大气压)下搅拌12小时。反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，通过硅藻土床滤出催化剂并用DCM(20mL)和甲醇(20mL)洗涤。真空浓缩滤液，粗残余物使用快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度0-20％的EtOAc/DCM)，得到呈灰白色固体的所需化合物5-氯-4,4-二氟-1,2-二氢异喹啉-3-酮B33-7(2.20g，7.28mmol，收率52.71％，纯度72％)。LC-MS(ES+):m/z 218.20[M+H]+
步骤-6：于0℃向化合物B33-7(2.20g，10.11mmol)在THF(35mL)中的搅拌溶液中加入BH3.THF络合物溶液(1.0M，在THF中，55.61mL)并将所得反应混合物回流4小时。让反应混合物冷却至室温并于0℃逐滴加入盐酸(1.0M，40.44mL)来淬灭。所得反应混合物再次回流4小时。然后让其冷却至室温并真空浓缩。向残余物中加入水(25mL)并用Et2O(2×80mL)洗涤。使用1N NaOH溶液(pH:10)碱化水层并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈灰白色固体的所需化合物5-氯-4,4-二氟-2,3-二氢-1H-异喹啉B33-8(1.94g，8.47mmol，收率83.79％，纯度89％)。其不经任何纯化直接用于下一步。LC-MS(ES+):m/z 204.17[M+H]+
步骤-7：向化合物B33-8(1.9g，9.33mmol)在乙腈(25mL)中的溶液中加入DIPEA(6.03g，46.66mmol，8.13mL)并将其冷却至0℃。然后向其中逐滴加入Cbz-Cl(3.18g，18.66mmol，2.65mL)并让反应混合物温热至室温，用时12小时。反应完成(通过TLC监测)后，真空除去ACN并用EtOAc(60mL)稀释残余物。用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物使用快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度0-15％的EtOAc/石油醚)，得到呈浅黄色油的所需化合物5-氯-4,4-二氟-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸苄酯B33-9(2.48g，6.38mmol，收率68.32％，纯度87％)。
步骤-8：向化合物B33-9(2.4g，7.11mmol)和4-((4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)亚甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.53g，7.82mmol)在THF(16mL)中的搅拌溶液中加入K3PO4的水溶液(3.32g，15.63mmol，在4mL水中)并用氩气吹扫15分钟。然后向其中加入XPhos-Pd-G2(0.671g，0.852mmol)并将所得反应混合物再次用氩气吹扫15分钟。然后将其于100℃在密封管中搅拌16小时。反应完成(TLC和LCMS)后，将其冷却至室温并向其中加入水(30mL)。使用EtOAc(3×50mL)进行萃取；合并有机层，用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空蒸发。粗残余物使用快速柱色谱法纯化(二氧化硅230-400目；梯度0-10％的EtOAc/石油醚)，得到呈黄色油的所需产物5-[(1-叔-丁氧基羰基-4-亚哌啶基)甲基]-4,4-二氟-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸苄酯B33-11(1.7g，3.34mmol，收率47.03％，纯度98％)；LC-MS(ES+):m/z 521.46[M+Na]+
步骤-9：于0℃向化合物B33-11(1.7g，3.41mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/1,4-二噁烷(4M，13.60mL)。所得反应混合物于0℃搅拌15分钟，然后再于室温搅拌2小时。完成反应(通过TLC和LCMS监测)后，真空蒸发挥发物并向残余物中加入Et2O(20mL)。将其搅拌15分钟，过滤并干燥，得到所需化合物4,4-二氟-5-(4-亚哌啶基甲基)-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸苄酯B33-12(HCl盐)(1.25g，2.82mmol，收率82.61％，纯度98％)；LC-MS(ES+):m/z 399.46[M+H]+,421.42[M+Na]+
步骤-10：向化合物B33-12(1.25g，2.87mmol)和1,2-二氟-4-硝基苯(0.594g，3.74mmol，0.41mL)在DMF(12mL)中的搅拌悬浮液中加入碳酸铯(2.81g，8.62mmol)并将反应混合物于75℃搅拌5小时。反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，将其冷却至室温并向其中加入饱和NH4Cl溶液(30mL)。使用Et2O(3×25mL)进行萃取；合并有机层，用水(2×40mL)、盐水(1×10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物通过快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度：0-15％的EtOAc/石油醚)，得到呈黄色固体的所需化合物4,4-二氟-5-[[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸苄酯B33-14(1.3g，2.39mmol，收率83.30％，纯度99％)。LC-MS(ES+):m/z 538.23[M+H]+,560.12[M+Na]+
步骤-11：向化合物B33-14(1.3g，2.42mmol)在MeOH(14mL)中的搅拌溶液中加入NH4Cl水溶液(1.29g，24.18mmol，在6mL水中)和Zn(1.58g，24.18mmol)。然后将反应混合物于70℃搅拌2小时。反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，通过硅藻土床过滤热悬浮液并用甲醇(2×30mL)洗涤。真空蒸发滤液并向残余物中加入水(25mL)。使用EtOAc(3×30mL)进行萃取；合并有机层，用盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物使用快速柱色谱法纯化(硅胶230-400；梯度0-40％的EtOAc/石油醚)，得到呈棕色油的所需化合物5-[[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-4,4-二氟-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸苄酯B33-15(0.8g，1.53mmol，收率63.22％，纯度97％)。LC-MS(ES+):m/z 508.30[M+H]+,530.27[M+Na]+
步骤-12：向化合物B33-15(0.79g，1.56mmol)在DMF(8mL)中的搅拌溶液中加入NaHCO3(0.784g，9.34mmol)和化合物3-溴哌啶-2,6-二酮(1.34g，7.00mmol)。然后将反应混合物于80℃搅拌16小时。反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，将其冷却至室温并向其中加入水(20mL)。过滤沉淀的固体，用水(5mL×2)洗涤并真空干燥。粗固体使用快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度0-50％的EtOAc/石油醚)，得到呈深蓝色固体的所需产物5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-亚哌啶基]甲基]-4,4-二氟-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸苄酯B33-17(0.665g，1.01mmol，收率64.92％，纯度94％)。LC-MS(ES+):m/z619.36[M+H]+
步骤-13：向化合物B33-17(0.650g，1.05mmol)在EtOAc(10mL)中的溶液中加入10％的Pd/C(0.650g，6.11mmol)并将所得反应混合物在钢制反应釜中于氢气氛(50psi)下搅拌16小时。反应完成(TLC和LCMS)后，通过硅藻土滤出催化剂并用EtOAc(10mL×3)洗涤。真空浓缩滤液，得到呈淡绿色固体的所需产物3-[4-[4-[(4,4-二氟-2,3-二氢-1H-异喹啉-5-基)甲基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮234-1(0.455g，0.888mmol，收率84.56％，纯度95％)，其不经任何纯化直接用于下一步。LCMS(ES+):m/z；487.30[M+H]+
3-((3,5-二氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的合成：
步骤-1：将4-溴-3-(三氟甲基)苯胺(1g，4.17mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.93g，6.25mmol)在二噁烷(40mL)中的搅拌溶液用氮气脱气并吹扫10分钟。向反应混合物中加入溶解在水(10mL)中的磷酸钾(2.65g，12.50mmol)。反应混合物用氮气脱气并吹扫10分钟。在氮气氛下向反应混合物中加入PdCl2(dppf)(0.3g，0.41mmol)。反应混合物于90℃搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，减压除去溶剂。粗品用乙酸乙酯(200ml)和水(100ml)萃取。用盐水溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物用柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-15％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈黄色固体的4-[4-氨基-2-(三氟甲基)苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸丁酯(1.2g，收率75.12％，纯度93.42％)。LCMS(ES+):m/z；311.24[M+H]+
步骤-2：在氮气下对4-(4-氨基-2,6-二氟-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.87mmol)在甲醇(50mL)中的搅拌溶液脱气。向反应混合物中加入10％钯碳(1.2g，3.87mmol)，将反应混合物再次脱气并将反应混合物于70psi的氢气压力下于室温搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用过量量的甲醇和DCM洗涤。减压浓缩滤液，得到呈浅棕色固体的4-(4-氨基-2,6-二氟-苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，收率69.55％，纯度84％)。LCMS(ES+):m/z；213.19[M-Boc]+(在LCMS中，观察到脱-boc物质)
步骤-3：向4-(4-氨基-2,6-二氟-苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，3.20mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(0.403g，4.80mmol)，然后加入3-溴哌啶-2,6-二酮(0.799g，4.16mmol)并将反应混合物于65℃搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，用冰冷水(100ml)淬灭反应并用乙酸乙酯(50ml×2)萃取化合物。有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗品通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-40％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈浅绿色固体的4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2,6-二氟-苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.27g，收率19.42％，纯度97.5％)。LCMS(ES-):m/z；422.45[M-H]-
步骤-4：于0℃向4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2,6-二氟-苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.27g，0.637mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(0.49ml，6.38mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，减压浓缩反应混合物。粗产物与乙腈(25ml)和甲苯(25ml)共蒸馏并加乙醚(2×25mL)研磨，得到呈胶状液体的3-[3,5-二氟-4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.26g，收率69.53％，纯度94.02％)。LCMS(ES+):m/z；324.22[M+H]+
XI.代表性化合物的合成
化合物1的合成
步骤-1：向3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮1-1(2g，3.88mmol)和N-乙基-N-异丙基-丙烷-2-胺(3.51g，4.73mL，27.16mmol)在乙腈(40mL)中的搅拌溶液中加入2-溴乙酸叔丁酯(756.90mg，569.10uL，3.88mmol)并将反应混合物在密封管中于70℃加热16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，减压浓缩反应混合物，残余物用EtOAc(200mL)稀释并用饱和NaHCO3水溶液(3×100mL)稀释。有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗化合物，该粗化合物加乙醚研磨并干燥，得到呈淡棕色固体的2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酸叔丁酯(0.95g，2.27mmol，收率58.54％，纯度96％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.93(bs,1H),7.09(d,J＝8.4Hz,2H),6.63(d,J＝8.4Hz,2H),4.65(bs,1H),4.10-4.00(m,1H),3.16(s,2H),3.10-3.00(m,2H),2.90-2.80(m,1H),2.80-2.70(m,1H),2.60-2.50(m,1H),2.45-2.35(m,1H),2.35-2.20(m,2H),1.95-1.60(m,5H),1.50(s.9H)；LC-MS(ES+):m/z 402.67[M+H]+。
步骤-2：于0℃向2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酸叔丁酯3(0.95g，2.37mmol)在DCM(10mL)中的溶液中逐滴加入2,2,2-三氟乙酸(2.70g，1.82mL，23.66mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过LC-MS监测反应的进度。反应完成后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物。该粗化合物加乙醚研磨并真空干燥，得到呈棕色胶状固体的2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酸1-3(1.3g，3.39mmol，收率143.16％，纯度90％)，为TFA盐。LC-MS(ES+):m/z[M+H]+346.37。
步骤-3：向4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮5(0.5g，817.67umol)和2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酸1-3(375.65mg，817.67umol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙烷-2-胺(845.43mg，6.54mmol，1.14mL)并将反应混合物于室温搅拌5分钟。向反应混合物中加入PyBOP(510.61mg，981.21umol)并继续搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，使用genevac蒸发DMF，得到粗化合物。该粗产物通过制备HPLC纯化，得到呈浅绿色TFA盐的3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.253g，294.49umol，收率36.02％，纯度96.01％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.5(bs,1H),10.78(s,1H),9.78(bs,1H),9.58(bs,1H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.10-6.90(m,4H),6.64(d,J＝8.8Hz,2H),4.50-4.20(m,6H),3.97(s,6H),3.90-3.80(m,2H),3.64(s,3H),3.40-3.00(m,9H),2.80-2.70(m,1H),2.70-2.60(m,1H),2.20-2.10(m,1H),2.00-1.80(m,5H)；LC-MS(ES+):m/z 711.49[M+H]+。
化合物2和化合物3的合成
程序：化合物1的两种对映异构体通过SFC通过手性分离来分离。
制备SFC条件柱子/尺寸：
Chiralpak AS-H(30*250)mm，
5u％CO2:60％％共溶剂:40％(0.2％的7M甲醇氨/(甲醇:乙腈(1:1)))
总流量：120.0g/min
背压：100巴温度：35℃UV：220nm
使用碱性条件进行SFC分离，收集的级分用酸性(TFA)缓冲液中和。蒸发级分并对残余物进行制备纯化以除去盐。16.5mg化合物2(第一洗脱峰)和12.1mg化合物3(第二洗脱峰)。
化合物2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.78(s,1H),9.79(ds,2H),8.22(s,1H),7.66(s,1H),7.22-6.95(m,4H),6.65(d,J＝8.4Hz,1H),5.77(bs,1H),4.29(m,6H),3.97(s,6H),3.85(m,1H),3.63(m,3H),3.53-3.09(m,2H),3.25(m,8H),2.74(m,2H),2.61(m,1H),2.12(m,1H),1.93(m,5H)；LC-MS(ES+):m/z 711.57[M+H]+
化合物3
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.33(s,1H),10.78(s,1H),9.61(ds,2H),8.21(s,1H),7.66(s,1H),7.21-6.95(m,4H),6.64(d,J＝8.4Hz,1H),5.76(bs,1H),4.29(m,6H),3.97(s,6H),3.85(m,1H),3.64(m,3H),3.51-3.08(m,2H),3.25(m,8H),2.74(m,2H),2.61(m,1H),2.12(m,1H),1.93(m,5H)；LC-MS(ES+):m/z 711.41[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物4。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.82(s,1H),9.68(bs,1H),8.97(bd,J＝3.2Hz,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),6.98(m,4H),6.65(d,J＝8.0Hz,2H),5.69(s,1H),4.44-4.22(m,3H),3.99(m,12H),3.63(s,3H),3.58(m,1H),3.36(m,3H),3.09(m,4H),2.74-2.61(m,3H),2.11-2.08(m,3H),1.92-1.86(m,7H)；LC-MS(ES+):m/z751.56[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物5。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.30(s,1H),10.78(s,1H),9.74(bs,1H),9.37(d,J＝6.5Hz,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.08(s,4H),6.64(d,J＝8.4Hz,2H),4.49-4.08(m,8H),3.96(s,7H),3.63(s,3H),3.53-3.49(m,2H),3.33-3.16(m,3H),2.74-2.57(m,3H),2.08-2.07(m,1H),1.92-1.85(m,5H).LC-MS(ES+):m/z 697.46[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物6。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.27(s,1H),10.78(s,1H),9.66(bs,1H),9.13(bs,1H),8.70(d,J＝11.1Hz,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.08-6.90(m,4H),6.65(d,J＝8.5Hz,1H),4.30-4.20(m,3H),3.96(s,6H),3.95-3.85(m,3H),3.63(s,3H),3.60-3.00(m,8H),2.80-2.60(m,3H),2.10-1.65(m,10H).；LCMS:LC-MS(ES+):m/z725.56[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物7。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.80(s,1H),9.62(bs,2H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.00(s,2H),6.97(t,J＝9.5Hz,1H),6.51-6.46(m,2H),6.10(bs,1H),4.51-4.31(m,6H),3.96(s,6H),3.64(s,3H),3.49-2.91(m,11H),2.77-2.56(m,2H),2.08-1.84(m,6H).LCMS:[M+H]+729.51。
按化合物1的合成制备化合物8。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.38(bs,1H),10.83(s,1H),9.56(bs,1H),8.23(s,1H),7.64(s,1H),7.02(m,4H),7.16(m,2H),6.64(d,J＝8.4Hz,1H),4.45(m,1H),4.37(m,3H),4.10(m,2H),3.97(s,6H),3.62(s,3H),3.46(m,6H),3.16(m,6H),2.74(m,1H),2.61(m,1H),2.12-2.07(m,2H),1.89-1.83(m,2H).LC-MS(ES+):m/z747.49[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物9。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.57(s,1H),8.23(s,1H),7.70(s,1H),7.34–7.16(m,2H),7.01(dd,J＝33.5,8.3Hz,2H),6.65(dd,J＝8.3,4.7Hz,2H),4.63–4.18(m,5H),4.01(s,3H),3.63(s,3H),3.56–2.98(m,6H),2.89–2.56(m,3H),2.54(s,7H),2.22–1.74(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 699.1[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物10。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.91(s,1H),9.65(ds,2H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.28-6.95(m,4H),6.64(d,J＝8.4Hz,1H),4.51(bd,1H),4.41-4.24(s,5H),3.96(s,6H),3.63(m,5H),3.37(bs,2H),3.19(m,3H),2.77(m,3H),2.61(m,1H),2.37(m,2H),2.07-1.79(m,6H),1.56(m,2H)；LC-MS(ES+):m/z 745.52[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物11。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.26(s,1H),10.80(s,1H),9.71(bs,1H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.26-6.97(m,6H),6.12(bs,1H),4.51-4.31(m,5H),3.97(s,6H),3.64(s,3H),3.52-3.02(m,13H),2.79-2.62(m,2H),2.09-1.86(m,6H).LC-MS(ES+):m/z761.34[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物12。
LC-MS(ES+):m/z 715.7[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物13。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.82(s,1H),9.71(ds,2H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.00(m,4H),6.65(d,J＝8.4Hz,1H),4.91-4.76(m,1H),4.52-4.25(m,6H),3.98(s,6H),3.73(m,9H),3.07(m,2H),2.73-2.61(m,3H),2.18-1.86(m,8H)；LC-MS(ES+):m/z 723.50[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物14。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.82(s,1H),9.71(ds,2H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.21-6.95(m,4H),6.51(d,J＝8.4Hz,1H),4.91-4.76(m,1H),4.52-4.25(m,6H),4.07(s,6H),3.70(m,9H),3.07(m,2H),2.78-2.60(m,3H),2.18-1.86(m,8H)；LC-MS(ES+):m/z 723.36[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物15。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.44(s,1H),8.69(d,J＝5.6Hz,1H),8.18(s,1H),7.82(s,1H),7.55(d,J＝5.3Hz,1H),6.92(d,J＝8.5Hz,2H),6.72(s,2H),6.57(d,J＝8.6Hz,2H),5.61(d,J＝7.4Hz,1H),4.35-4.22(m,1H),3.81(s,6H),3.61(s,2H),3.58(s,3H),3.52(bs,4H),3.12(s,2H),2.86(d,J＝10.9Hz,1H),2.58-2.51(m,2H),2.49-2.30(m,5H),2.09-2.02(m,3H),1.89-1.71(m,1H),1.69-1.66(m,2H),1.53-1.49(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 722.2[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物16。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.84(s,1H),9.71(s,2H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.32-7.19(m,4H),6.97(s,2H),4.49-4.31(m,5H),3.97(s,6H),3.84-3.82(m,1H),3.64(s,3H),3.53-3.48(m,5H),3.35-3.08(m,6H),2.87-2.84(m,1H),2.70-2.63(m,1H),2.49-2.47(m,1H),2.19-2.16(m,1H),2.01-1.89(m,4H).LC-MS(ES+):m/z 696.54[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物17。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.82(s,1H),9.73(bs,2H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.00(s,2H),6.44(m,3H),4.36-4.27(m,6H),3.97(s,6H),3.63(s,3H),3.53-3.46(m,4H),3.19-307(m,8H),2.73(m,1H),2.60(m,1H),2.36-2.27(m,2H),2.08-2.05(m,1H),1.92-1.86(m,3H)；LC-MS(ES+):m/z747.39[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物18。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.82(s,1H),9.63(bs,2H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.20-6.94(m,5H),6.33(bs,1H),4.44-4.31(m,6H),3.98(s,6H),3.81(m,2H),3.634(s,3H),3.17-3.95(m,10H),2.79-2.70(m,1H),2.62(m,1H),2.10-2.08(m,3H),1.96-1.92(m,1H),1.85(m,2H)；LC-MS(ES+):m/z 779.40[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物19。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.59(s,1H),7.72(s,2H),7.37(s,1H),7.25(s,1H),7.01(dd,J＝33.6,8.1Hz,3H),6.65(d,J＝8.2Hz,2H),4.60–4.15(m,8H),3.89(s,4H),3.74–3.43(m,6H),3.44–2.98(m,4H),2.92–2.54(m,2H),2.20–1.77(m,8H)。LC-MS(ES+):m/z 715.6[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物20。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.59(s,1H),8.11(s,1H),7.81(s,2H),7.67(d,J＝5.3Hz,2H),7.01(dd,J＝34.3,8.2Hz,2H),6.65(d,J＝8.1Hz,2H),4.55–4.03(m,4H),3.62(s,8H),3.41–2.81(m,7H),2.82–2.51(m,3H),2.09(dt,J＝13.7,4.7Hz,1H),2.04–1.69(m,7H)。LC-MS(ES+):m/z 735.7[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物21。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.93(s,1H),9.85(bs,1H),9.61(bs,1H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.26(dd,J＝8.8Hz,2H),6.99(d,J＝8.0Hz,4H),5.17(m,1H),4.41(m,5H),3.97(s,6H),3.64(s,3H),3.46-3.08(m,11H),2.79-2.58(m,3H),2.20-1.90(m,6H)；LC-MS(ES+):m/z 712.58[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物22。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.58(s,1H),7.70(s,1H),7.32(d,J＝10.7Hz,2H),7.13(s,1H),6.98(d,J＝8.3Hz,2H),6.65(d,J＝8.3Hz,2H),4.60–4.20(m,8H),4.13(q,J＝6.9Hz,2H),3.76(s,3H),3.60(s,3H),3.28(s,8H),3.10(s,2H),2.82–2.57(m,2H),2.17–1.78(m,7H),1.39(t,J＝6.9Hz,3H)。LC-MS(ES+):m/z 725.8.[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物23。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.38(bs,1H),10.83(s,1H),9.62(bs,1H),8.23(s,1H),7.70(s,1H),7.27(m,3H),6.97(m,2H),6.34(bs,1H),4.50-4.31(m,3H),4.19(s,4H),3.62(s,3H),3.54-3.15(m,13H),2.94(m,1H),2.79-2.70(m,1H),2.67-2.55(m,1H),2.15-2.05(m,3H),1.95-1.81(m,3H).LC-MS(ES+):m/z767.59[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物24。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.32(s,1H),10.80(s,1H),9.61(s,1H),8.23(s,1H),7.70(s,1H),7.25-6.97(m,3H),6.74(d,J＝2.1Hz,1H),6.68-6.65(m,1H),6.12(bs,1H),4.37-4.32(m,5H),4.15(s,3H),3.63(s,3H),3.55-3.07(m,12H),2.74-2.56(m,2H),2.07-1.91(m 6H).LC-MS(ES+):m/z 733.54[M+H]+
按化合物1的合成制备化合物25。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.55(s,1H),7.73(s,1H),7.28(d,J＝49.1Hz,3H),7.01(dd,J＝33.6,8.2Hz,2H),6.64(d,J＝8.2Hz,2H),6.44(t,J＝54.9Hz,1H),4.57–4.18(m,7H),3.77(s,3H),3.59(s,3H),3.27(s,9H),3.09(s,2H),2.85–2.55(m,4H),2.14–1.74(m,7H)。LC-MS(ES+):m/z 761.8[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物26。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.62(s,1H),7.67(s,1H),7.32(s,2H),7.14(s,1H),7.01(dd,J＝32.8,8.2Hz,2H),6.65(d,J＝8.0Hz,2H),4.69(p,J＝6.0Hz,1H),4.50–4.15(m,6H),3.75(s,4H),3.55(d,J＝35.9Hz,8H),3.43–2.92(m,4H),2.82–2.53(m,4H),2.15–1.72(m,7H),1.31(d,J＝6.0Hz,6H)。LC-MS(ES+):m/z739.8[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物27。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),10.10(s,1H),9.63(s,1H),8.41(dd,J＝8.9,6.0Hz,1H),7.65(s,1H),7.43(td,J＝8.6,2.5Hz,1H),7.30(dd,J＝10.6,2.5Hz,1H),7.02(dd,J＝33.6,8.2Hz,2H),6.87(s,2H),6.65(d,J＝8.1Hz,2H),4.32(q,J＝17.4,11.3Hz,6H),3.90(s,6H),3.56(d,J＝25.4Hz,8H),3.38–2.96(m,5H),2.88–2.52(m,2H),2.17–1.71(m,7H)。LC-MS(ES+):m/z 739.8[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物28。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),10.16(s,1H),9.64(s,1H),8.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.79–7.63(m,2H),7.58(d,J＝4.4Hz,2H),7.02(dd,J＝33.8,8.1Hz,2H),6.86(s,2H),6.65(d,J＝8.1Hz,2H),4.68–4.10(m,6H),3.89(s,6H),3.60(s,3H),3.54(d,J＝12.1Hz,4H),3.37–2.93(m,5H),2.83–2.52(m,3H),2.17–1.71(m,7H).LC-MS(ES+):m/z:721.8[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物29。
1H NMR(400MHz,DMSO--d6)δ10.77(s,1H),10.03(s,1H),9.61(s,1H),8.29(d,J＝2.4Hz,1H),7.77(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.68(d,J＝8.8Hz,1H),7.63(s,1H),7.01(dd,J＝33.4,8.2Hz,2H),6.86(s,2H),6.65(d,J＝8.0Hz,2H),4.33(q,J＝21.3,11.1Hz,8H),3.89(s,5H),3.61(s,3H),3.54(d,J＝12.3Hz,5H),3.38–2.91(m,4H),2.82–2.52(m,2H),2.19–1.66(m,7H).LC-MS(ES+):m/z:755.8[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物30。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),10.10(s,1H),9.63(s,1H),7.52(s,1H),7.01(dd,J＝33.3,8.2Hz,2H),6.78–6.58(m,4H),4.65–4.16(m,6H),3.87(s,6H),3.64–3.33(m,7H),3.31–2.94(m,4H),2.84–2.53(m,4H),2.08(d,J＝7.7Hz,7H),2.03–1.77(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 699.7[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物31。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.97(s,1H),9.60(s,1H),8.16(d,J＝2.6Hz,1H),7.97–7.75(m,1H),7.17–6.88(m,4H),6.65(d,J＝8.3Hz,2H),4.59–4.17(m,7H),3.94(s,6H),3.82(d,J＝8.0Hz,0H),3.55(s,3H),3.49(d,J＝21.2Hz,5H),3.32–2.94(m,3H),2.81–2.51(m,4H),2.11(s,4H),2.04–1.77(m,5H)。LC-MS(ES+):m/z685.7[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物32。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.34(s,1H),10.78(s,1H),10.05(m,2H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.22(m,4H),6.71(m,2H),5.80(bs,0.6H),4.52-4.22(m,8H),3.97(m,8H),3.64(s,3H),3.48(m,4H),3.20-3.05(m,4H),2.78-699(m,1H),2.67(m,1H),2.10-2.05(m,1H),1.92-1.86(m,1H)；LC-MS(ES+):m/z 683.31[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物33。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.26(s,1H),10.79(s,1H),9.84(s,1H),8.23(s,1H),7.69(s,1H),7.27-6.94(m,4H),6.64(d,J＝8.3Hz,2H),5.81(s,1H),4.62-4.28(m,6H),4.02(s,3H),3.61(s,3H),3.45-3.03(m,11H),2.89-2.52(m,2H),2.12-2.06(m,2H),1.92-1.83(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 735.60[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物34。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.33(s,1H),10.79(s,1H),9.58(s,1H),8.21(s,1H),7.70(s,1H),7.47(s,1H),7.35(s,1H),7.02(d,J＝8.4Hz,2H),6.64(d,J＝8.6Hz,2H),4.46-4.41(m,2H),4.32-4.28(m,1H),4.19-4.03(m,5H),3.62(s,3H),3.45-3.10(m,13H),3.07-2.57(m,2H),2.12-2.07(m,2H),1.91-1.83(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z751.56[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物35。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.34(s,1H),10.79(s,1H),9.55(bs,1H),8.23(s,1H),7.70(s,1H),7.26(m,4H),6.79(d,J＝8.8Hz,2H),4.86-4.82(m,1H),4.42(m,4H),4.01(s,3H),3.63(s,3H),3.36-3.06(m,12H),2.88-2.80(m,1H),2.72(m,4H),2.58(m,1H),2.35(m,1H),2.00-1.84(m,5H)；LC-MS(ES+):m/z 713.63[M+H]+。
按化合物1的合成制备化合物36。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.50(s,1H),8.01(dd,J＝9.4,2.9Hz,1H),7.79(d,J＝7.9Hz,1H),7.71–7.40(m,6H),7.01(dd,J＝35.4,8.2Hz,2H),6.65(d,J＝8.0Hz,2H),4.51–4.20(m,4H),3.59(s,3H),3.55(d,J＝15.9Hz,6H),3.38–3.23(m,1H),3.08(d,J＝10.6Hz,2H),2.80–2.53(m,5H),2.18–1.68(m,7H)。LC-MS(ES+):m/z 763.8[M+H]+。
化合物37的合成：
步骤-1：于0℃向3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮1-1(0.400g，1.394mmol)在THF(8mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.141g，1.394mmol)，然后加入氯乙酰氯(0.176g，1.394mmol)并将反应混合物于室温搅拌1小时，同时通过LCMS和TLC监测。1小时后，用冰冷水(10ml)淬灭反应并用EtOAc(3×10mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到3-[4-[1-(2-氯乙酰基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.160g，0.440mmol，收率50.68％，纯度89.44％)。LC-MS(ES+):m/z 364.23(M+H)+
步骤-2：向4-(3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮.TFA盐(0.120g，0.196mmol)在乙腈(6mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.20g，1.564mmol)和3-((4-(1-(2-氯乙酰基)哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮37-2(0.113g，0.131mmol)，并将反应混合物于70℃回流16小时，同时通过LCMS监测。16小时后，减压蒸发溶剂并通过制备-HPLC纯化粗化合物，得到呈灰白色固体的3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐(0.017g，0.020mmol，收率10.31％，纯度98.19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝14.3(s,1H),12.0(bs,1H),10.8(s,1H),8.21(s,1H),7.55(s,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,2H),6.84(s,2H),6.61(d,J＝8.4Hz,2H),5.67(d,J＝7.6Hz,1H),4.50-4.44(m,1H),4.28(m,1H),4.14-4.12(m,1H),3.85(s,6H),3.60(s,3H),3.50(s,2H),3.22-3.19(m,1H),3.00-2.97(m,1H),2.70-2.69(m,1H),2.50-2.48(m,8H),2.10-2.07(m,1H),1.89(s,4H),1.75-1.73(m,2H),1.55-1.48(m,1H),1.33-1.13(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 711.2(M+H)+
按化合物37的合成制备化合物38。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.77(s,1H),8.21(s,1H),7.63(s,1H),7.08(m,4H),6.61(d,J＝8.4Hz,2H),6.65(bs,1H),5.69(s,1H),4.44-4.00(m,10H),3.95(s,6H),3.63(s,3H),3.17(m,1H),2.75-2.60(m,5H),1.52-1.36(m,2H),1.24(bm,5H).LC-MS(ES+):m/z 697.2[M+H]+
按化合物37的合成制备化合物39。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.82(s,1H),9.73(bs,1H),8.77(bs,1H),8.21(s,1H),7.64(s,1H),6.97(m,4H),6.64(d,J＝8.4Hz,2H),5.44(bd,J＝6.4Hz,1H),4.44(m,6H),3.97(s,6H),3.86(m,1H),3.64(s,3H),3.29-3.08(m,10H),2.84-2.73(m,2H),2.54(m,1H),2.10-1.97(m,6H)；LC-MS(ES+):m/z 725.56[M+H]+
按化合物37的合成制备化合物40。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.77(s,1H),9.74(bs,1H),8.22(s,1H),7.63(s,1H),7.01-6.93(m,4H),6.61(d,J＝8.6Hz,2H),4.52(d,J＝12.0Hz,1H),4.28-4.24(m,3H),3.94(s,7H),3.63(s,3H),3.57-2.89(m,11H),2.73-2.59(m,4H),2.49-2.41(m,2H),2.07-2.02(m,1H),1.88-1.71(m,5H),152-1.42(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 739.55[M+H]+。
化合物41的合成
步骤-1：向2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯甲醛(500mg，1.15mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(257.81mg，1.38mmol)在DCE(3ml)和MeOH(2ml)中的处于0℃的搅拌溶液中加入乙酸(32.99uL，576.76mmol)并继续于室温搅拌4小时。于0℃向反应混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠(488.96mg，2.31mmol)并继续于室温搅拌16小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物。用乙酸乙酯(50mL)稀释残余物并用水洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并真空浓缩。粗化合物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-50％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈无色固体的4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg)。化合物与页码(page number)上的真实化合物的TLC相匹配
步骤-2：向4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.88g，1.46mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(2.25ml，29.15mmol)并将反应混合物于70℃搅拌1小时。通过TLC和LCMS监测反应进度。反应完成后，在旋转蒸发器上干燥反应混合物并与乙腈和甲苯共蒸馏。粗化合物加乙醚研磨，得到4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(800mg，收率68.21％，纯度76％)。LC-MS(ES+):m/z 384.35[M+H]+
步骤-3：向4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(100mg，0.179mmol)和2-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]乙酸(50.41mg，0.179mmol)在DMF(2mL)中的搅拌溶液中加入N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.03ml，0.179mmol)并将反应混合物于室温搅拌5分钟。向反应混合物中加入PyBOP(93.61mg，0.179mmol)并于室温搅拌16小时。通过LCMS监测反应进度。反应完成后，使用genvac蒸发DMF，残余物通过制备HPLC纯化，得到呈浅绿色固体的3-[4-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(53mg，收率38.49％，纯度99.24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 14.22(s,1H),10.80(s,1H),9.41(s,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.08(s,2H),6.91(m,J＝8.8Hz,1H),6.48(m,2H),6.08(bs,1H),4.41-4.30(m,4H),4.15(bd,1H),3.97(s,6H),3.63(s,3H),3.46-3.05(m,4H),3.17-3.048(m,4H),2.75-2.60(m,1H),2.60(m,1H),2.11-2.07(m,1H),1.90-1.86(m,1H)；LC-MS(ES+):m/z 646.42[M+H]+
化合物42的合成
步骤-1：向3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.8g，1.55mmol)在DMF(8mL)中的搅拌溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(1.62ml，9.31mmol)，然后加入2-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)乙酸(377.64mg，1.55mmol)并搅拌5分钟。向反应混合物中加入PyBOP(1.05g，2.02mmol)并于室温搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，用水(50ml)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤并减压浓缩。粗产物用乙醚(30mL×2)洗涤，得到为TFA盐的4-[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.92g，收率78.50％，纯度83％)。LC-MS(ES+):m/z 513.42[M+H]+
步骤-2：向4-[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25g，0.487mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(0.37ml，4.88mmol)。反应混合物于室温搅拌12小时。通过TLC和LCMS检查反应的进度。反应完成后，减压浓缩反应混合物。粗品与乙腈(20ml)和甲苯(20ml)共蒸馏并加乙醚(25ml×2)研磨，得到为TFA盐的3-[4-[1-[2-(4-哌啶基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.18g，收率52.38％，纯度90.9％)。
步骤-3：向3-[4-[1-[2-(4-哌啶基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮2(0.5g，1.21mmol)在ACN(10ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.05g)、乙酸(0.073g，1.21mmol)和无水乙酸钠(0.1g，2.63mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛1(0.380g，1.21mmol)并将反应混合物于70℃加热3小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(0.352g，6.05mmol)。于室温继续搅拌6小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。6小时后，过滤反应物质，浓缩并通过制备-HPLC纯化，得到呈黄色固体的3-[4-[1-[2-[1-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐(0.917g，收率9.07％，纯度98.73％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.17(s,1H),10.77(s,1H),8.78(bs,1H),8.22(bs,1H),7.65(s,1H),7.21(m,4H),6.63(d,J＝8.4Hz,2H),5.57(bs,0.3H),4.55(m,1H),4.27-4.19(m,3H),3.93(m,7H),3.63(s,3H),3.44(m,2H),3.11-3.06(m,4H),2.73-2.66(m,1H),2.59(m,1H),2.33-2.29(m,2H),2.09-2.06(m,1H),1.95-1.73(m,7H),1.46-1.35(m,4H),LC-MS(ES+):m/z710.4[M+H]+
按化合物42的合成制备化合物43。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.77(s,1H),8.91(s,1H),8.21(s,1H),7.71(s,1H),7.45(d,J＝1.4Hz,1H),7.33(d,J＝1.2Hz,1H),6.96-6.94(m,2H),6.63-6.60(m,2H),4.52-4.24(m,4H),3.97(s,3H),3.95-3.92(m,1H),3.62(s,3H),3.48-3.45(m,2H),3.36-3.22(m,3H),3.06-2.60(m,4H),2.34-2.28(m,2H),2.09-1.74(m,7H),1.52-1.49(m,4H),LC-MS(ES+):m/z 714.56[M+H]+。
按化合物42的合成制备化合物44。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.49(s,1H),8.94(s,1H),8.77(d,J＝5.7Hz,1H),7.97(s,1H),7.55(d,J＝6.2Hz,1H),7.33(d,J＝1.4Hz,1H),7.27(s,1H),6.96(d,J＝7.6Hz,2H),6.62(d,J＝8.8Hz,2H),4.55-4.52(m,1H),4.42(d,J＝4.2Hz,2H),4.28-4.24(m,1H),3.96(s,3H),3.61(s,3H),3.49(d,J＝11.1Hz,2H),3.29-3.20(m,3H),3.09-3.06(m,1H),2.73-2.50(m,3H),2.33-2.29(m,2H),2.08-2.07(m,1H),1.93-1.72(m,7H),1.50-1.45(m,4H).LC-MS(ES+):m/z 725.56[M+H]+。
按化合物42的合成制备化合物45。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.26(s,1H),10.78(s,1H),8.90(bs,1H),8.21(s,1H),7.71(s,1H),7.45(s,1H),7.33(s,1H),7.21(s,1H),7.00-6.95(m,2H),6.64-6.62(m,2H),5.83(bs,1H),4.62-4.27(m,5H),4.02(s,3H),3.62(s,3H),3.45-3.16(m,6H),2.73-2.67(m,2H),2.60-2.55(m,2H)2.35-2.32(m,1H),2.10-1.47(m,9H)。LC-MS(ES+):m/z 750.60[M+H]+。
化合物46的合成：
步骤-1：向4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(5.0g，20.40mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中依次加入2-甲基丁-2-烯(11.45g，163.22mmol)、亚氯酸钠(9.23g，102.01mmol)和在水(10ml)中的磷酸二氢钠(48.96g，408.05mmol)，用时5分钟，并让于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测反应。减压蒸发反应物质并通过酸碱后处理进行纯化，得到呈灰白色固体的4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲酸46-2(4.5g，16.75mmol，收率82.09％，纯度97.17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 12.89(bs,1H),6.91(s,2H),3.77(s,6H)LC-MS(ES+):m/z 261.12[M+H]+。
步骤-2：向4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲酸46-2(4.5g，17.24mmol)在DMF(14mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(6.68g，51.71mmol)和HATU(13.11g，34.47mmol)并搅拌15分钟。于室温加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.85g，20.68mmol)在DMF(1mL)中的溶液并搅拌16小时，同时通过TLC监测反应。用冰冷水(100ml)淬灭反应混合物，过滤沉淀的固体并通过正相柱色谱法进一步纯化[硅胶100-200目，10-20％的石油醚/乙酸乙酯]，得到呈白色固体的4-(4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯46-3(5.0g，9.92mmol，收率57.58％，纯度85.21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):d 6.72(s,2H),3.79(s,6H)3.78-3.75(m,2H)3.50-3.40(m,2H)3.37-3.34(m,2H)3.21-3.18(m,2H)1.46(s,9H)LC-MS(ES+):m/z 431.22[M+H]+。
步骤-3：向4-(4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯3(5.0g，11.65mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入双(频哪醇酯基)二硼烷(Bis(pinacolate)diborane，2.96g，11.65mmol)和乙酸钾(3.43g，34.94mmol)。所得溶液用N2脱气15分钟并加入Pd(dppf)Cl2.DCM(0.951g，1.16mmol)。将反应混合物于90℃加热6小时，同时通过TLC监测反应。通过硅藻土床过滤反应混合物，用乙酸乙酯(300ml×2)洗涤并浓缩滤液。反应混合物用水(400mL)稀释并用乙酸乙酯(4×250mL)萃取。合并有机萃取物并用无水Na2SO4干燥，减压蒸发，得到呈黑色胶状半固体的4-[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯46-4(5.0g，5.46mmol，收率46.86％，纯度52％)。将其用于下一步而无需进一步纯化。LC-MS：硼酸：RT:1.51min＝395.28[M+H]+和硼酸酯：RT:2.15min＝477.39[M+H]+
注：粗品LCMS指示16％的硼酸物质和22％的硼酸酯物质。
步骤-4：向4-溴-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(2.0g，5.74mmol)在THF(30mL)和水(5mL)中的搅拌溶液中加入4-[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯46-4(4.10g，8.62mmol)和K3PO4(3.66g，17.23mmol)。通过吹扫N2(g)15分钟对所得反应混合物脱气并加入Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.526g，0.68mmol)。将反应混合物于90℃搅拌5小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。通过硅藻土床过滤反应混合物并用乙酸乙酯(150ml×2)洗涤，浓缩滤液并使用水(100ml×1)和乙酸乙酯(150ml×2)后处理。用Na2SO4干燥有机层，浓缩并通过反相C18柱使用0.1％的FA/H2O:ACN纯化，得到呈灰白色固体的4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯46-5(1.8g，2.23mmol，收率38.89％，纯度82.37％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):d7.87(s,1H),7.45(d,J＝8.8Hz,2H)6.97(s,1H),6.68(s,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,2H)6.66(s,2H)5.93(s,2H)3.87(s,6H)3.83-3.80(m,1H)3.76(s,3H)3.68(s,3H)3.53-3.51(m,2H,)3.42-3.39(m,2H)3.30-3.27(m,2H),1.47(s,9H)LC-MS(ES+):m/z 618.63[M+H]+。
步骤-5：于0℃向4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯5(1.0g，1.62mmol)在1,4-二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(0.1ml，1.62mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时。反应完成后，浓缩反应混合物，得到呈棕色固体的粗化合物4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-羰基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮46-6HCl盐(1.0g，1.57mmol，收率97.13％，纯度87.12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.31(s,2H)8.17(s,1H)7.64(s,1H)7.29 -7.20(m,2H)6.98–6.87(m,4H)5.87(s,2H)3.88–3.85(m 8H),3.71(s,3H),3.64(s,3H),3.40–3.35(m,4H),3.12(bs,2H),2.98(bs,2H)。LC-MS(ES+):m/z 518.38[M+H]+
步骤6：于0℃将4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-羰基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮6(1.0g，1.80mmol，021)溶解在TFA(1.39ml，18.05mmol)中并然后于70℃加热3小时，同时通过TLC监测反应。完成后，浓缩反应混合物，得到粗化合物，该粗化合物用乙醚(20ml×2)洗涤并干燥，得到呈灰白色固体的4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-羰基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮7TFA盐(1.0g，1.69mmol，收率93.68％，纯度86.48％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.24(s,1H)7.60(s,1H)6.92(s,2H)3.86-3.87(m,8H)3.62(s,3H)3.40-3.42(bs,2H)3.15-3.17(bs,2H)3.029-3.053bs,2H)LC-MS(ES+):m/z 398.41[M+H]+
步骤-7：向2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酸8(0.5g，1.09mmol)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.703g，5.44mmol)、HATU(0.827g，2.18mmol)并搅拌15分钟，然后加入4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-羰基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮7(0.432g，0.845mmol)在DMF(2.0mL)中的溶液。将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。用冰冷水(100ml)淬灭反应混合物，过滤沉淀的固体并减压浓缩。通过制备-HPLC纯化，得到呈灰白色固体的3-[4-[1-[2-[4-[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲酰基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(236mg，274.14umol，收率25.19％，纯度97.44％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.28(s,1H),10.78(s,1H),9.48(s,1H),8.25(s,1H),7.62(d,J＝4.2Hz,1H),7.09-6.95(m,4H),6.64(d,J＝8.5Hz,2H),4.24-4.20(m,3H),3.87(s,6H),3.73–3.48(m,11H),3.28–3.15(m,4H),2.74-2.65(m,3H),2.19–2.15(m,1H),1.98-1.90(m,5H)。LC-MS(ES+):m/z 725.56[M+H]+
按化合物46的合成制备化合物47。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.78(s,1H),9.49(s,1H),8.26(s,1H),7.67(d,J＝4.6Hz,1H),7.22-6.96(m,4H),6.65(d,J＝8.5Hz,2H),4.49-4.26(m,3H),3.94(d,J＝3.4Hz,3H),3.52-3.28(m,14H),3.09(bs,2H),2.74-2.60(m,2H),2.08-1.85(m,6H).LC-MS(ES+):m/z 713.47[M+H]+。
按化合物46的合成制备化合物48。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.50(s,1H),7.83(s,1H),7.69(d,J＝11.6Hz,2H),7.40(s,1H),6.97(d,J＝8.1Hz,2H),6.65(d,J＝8.2Hz,2H),4.52–4.20(m,3H),4.00(s,1H),3.56(d,J＝21.5Hz,7H),3.32(d,J＝23.0Hz,1H),3.23–3.03(m,3H),2.84(s,1H),2.94–2.54(m,4H),2.37(d,J＝37.0Hz,2H),2.20–1.60(m,8H)。LC-MS(ES+):m/z733.6[M+H]+。
化合物49的合成
步骤-1：向2-(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)乙酸(2.12g，8.72mmol)在ACN(30mL)中的搅拌溶液中加入粒状碳酸钾(1.81g，13.08mmol)并于室温搅拌15分钟。向反应混合物中加入溴甲基苯(1.24mL，10.47mmol)并继续于80℃搅拌12小时。反应完成后，真空蒸发挥发物，粗化合物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-8％的甲醇/DCM)，得到4-(2-苄氧基-2-氧代-乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，收率77.36％，纯度90％)。通过HNMR确认化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 7.40-7.26(m,5H),5.11(s,2H),4.06(bs,2H)；2.70(t,J＝12Hz,2H),2.29(d,J＝6.8Hz,2H),1.96-1.92(m,1H),1.69-1.65(bd,J＝13.6Hz,2H),1.46(s,9H),1.21-1.11(m,2H)。
步骤-2：向4-(3-苄氧基-2-氧代-丙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，7.20mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/二噁烷(7.20mmol，20mL)并将反应混合物于室温搅拌3小时。反应完成后，减压蒸发挥发物，与甲苯(15ml×2)共蒸馏并加乙醚(15mL)研磨，得到为HCl盐的1-苄氧基-3-(4-哌啶基)丙烷-2-酮(2g，收率97.94％，纯度0％)。通过HNMR确认化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):d 8.94(bs,1H),8.67(bs,1H),7.40-7.31(m,5H),5.10(s,2H),3.22(bd,J＝12.4Hz,2H),2.89(q,J＝12.0Hz,22.8Hz,2H),2.37(d,J＝7.2Hz,2H),2.03-1.95(m,1H),1.79(bd,2H),1.44-1.33(m,2H)。
步骤-3：向1-氟-4-硝基-苯(645.08mg，4.57mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入碳酸钾(1.90g，13.72mmol)并于室温搅拌15分钟。向反应混合物中加入2-(4-哌啶基)乙酸苄酯HCl盐(1.4g，4.57mmol)并继续于65℃搅拌12小时。反应完成后，减压蒸发挥发物，通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-8％的甲醇/DCM)粗化合物，得到2-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]乙酸苄酯(800mg，收率48.82％，纯度98.88％)。LC-MS(ES+):m/z 355.36[M+H]+
步骤-4：向2-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]乙酸苄酯(1.4g，3.95mmol)在THF(42mL):水(14mL)中的搅拌溶液中逐份加入锌(2.07g，31.60mmol)并继续于室温搅拌12小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并减压浓缩滤液。残余物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，70％的EtOAc/石油醚)，得到2-[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]乙酸苄酯(1g，收率76.86％，纯度98.5％)。LC-MS(ES-):m/z 323.27[M-H]-。
步骤-5：向2-[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]乙酸苄酯(1.2g，3.70mmol)在DMF(12mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(621.47mg，7.40mmol)并于室温搅拌15分钟。向反应混合物中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(852.29mg，4.44mmol)并继续于65℃搅拌12小时。通过TLC/LCMS监测反应进度。反应完成后，真空蒸发挥发物，通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-8％的甲醇/DCM)粗化合物，得到2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]乙酸苄酯(800mg，收率49.16％，纯度99％)。LC-MS(ES+):m/z 436.60[M+H]+
步骤-6：将2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]乙酸苄酯(150mg，0.344mmol)在THF(4mL)中的搅拌溶液在氮气下脱气10分钟，然后加入10％钯碳(73.31mg，0.688mmol)。将反应混合物于室温在氢气下(气球压力下)搅拌16小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物。减压浓缩滤液，得到2-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)乙酸(100mg，收率71.45％)。该化合物不经进一步纯化即用于下一步。
步骤-7：向4-[3-氟-5-甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(105.4mg，0.217mmol)和2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]乙酸(75mg，0.217mmol)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(0.23ml，1.30mmol)并将反应混合物于室温搅拌5分钟。向反应混合物中加入PyBOP(146.90mg，282.29umol)并继续搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，使用genevac蒸发DMF，残余物通过制备HPLC纯化，得到呈浅黄色固体TFA盐的3-[4-[4-[2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(38mg，收率21.21％，纯度98.53％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ14.37(s,1H),10.82(s,1H),9.99(s,1H),8.23(bs,1H),7.70(s,1H),7.39(bs,2H),7.26(m,2H),6.76(d,J＝8.8Hz,2H),6.37(s,1H),4.39(m,3H),4.02(s,3H),3.63(s,3H),3.40(m,4H),3.17(m,8H),2.74(m,1H),2.61(m,1H),2.40(bs,2H),2.10-2.07(m,2H),1.99-1.90(m,3H),1.61(m,2H)；LC-MS(ES+):m/z699.34[M+H]+
按化合物49的合成制备化合物50。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.38(bs,1H),10.83(s,2H),9.59(bs,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.46(bd,J＝7.6Hz,2H),6.98(s,2H),6.78(d,J＝8.8Hz,2H),6.34(bs,1H),4.44-4.29(m,4H),3.96(s,7H),3.63-3.41(m,10H),3.19-3.02(m,3H),2.75-2.67(m,1H),2.61-2.55(m,1H),2.40-2.32(bm,2H),2.11-2.19(m,5H),1.62(bs,2H).LC-MS(ES+):m/z 711.39[M+H]+。
按化合物49的合成制备化合物51。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.39(s,1H),10.83(s,1H),8.11(s,1H),7.81(s,2H),7.67(s,2H),7.39(s,2H),6.76(d,J＝8.9Hz,2H),6.37(bs,1H),4.39-3.90(m,7H),3.62(s,3H),3.47-2.57(m,10H),2.39(bs,2H),2.10-1.90(m,5H),1.61-1.50(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 735.48[M+H]+
化合物52的合成
于0℃向4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.101g，0.26mmol)在DMF中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.187g，1.45mmol)并将反应搅拌15分钟。15分钟后，在相同的温度下加入2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]乙酸(0.100g，0.24mmol)，然后加入PyBOP(163mg，0.52mmol)。将反应混合物缓慢温热至室温并搅拌12小时，同时通过TLC和LCMS监测。在Genvaccum下浓缩反应混合物，得到粗产物。该粗产物通过制备HPLC纯化，得到呈浅棕色固体的产物3-[4-[4-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(0.100g，0.11mmol，收率42.77％，纯度99.59％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.34(s,1H),10.78(s,1H),9.40(s,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.30(d,J＝8.6Hz,2H),6.98(s,2H),6.88-6.85(m,2H),6.11(s,1H),4.41–4.29(m,J＝7.0Hz,5H),3.97(s,6H),3.63(s,3H),3.40 -3.38(m,3H),3.16(d,J＝8.1Hz,1H),3.03(d,J＝9.0Hz,2H),2.77 -2.58(m,6H),2.35(t,J＝5.0Hz,2H),2.08 -2.05(m,1H),1.92-1.72(m,4H),1.40–1.29(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 779.50[M+H]+
按化合物52的合成制备化合物53。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.40(s,1H),10.79(s,1H),9.52(s,1H),7.72(s,1H),7.47(d,J＝1.2Hz,1H),7.35(s,1H),7.30(d,J＝8.6Hz,1H),6.91-6.87(m,2H),6.14(bs,1H),4.51-4.02(m,5H),3.89(s,3H),3.61(s,3H),3.44-3.15(m,6H),2.80-2.56(m,6H),2.36-2.32(m,2H),2.08-2.05(m,1H),1.92-1.71(m,4H),1.31-1.28(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 783.57[M+H]+
按化合物52的合成制备化合物54。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.49(s,1H),8.75(d,J＝5.8Hz,1H),7.93(s,1H),7.62(d,J＝5.7Hz,1H),7.30(d,J＝8.6Hz,1H),6.90–6.86(m,4H),4.43-4.32(m,4H),4.14–4.09(m,1H),3.91(s,6H),3.62(s,3H),3.40(bs,2H),3.18-3.03(m,5H),2.79 -2.66(m,6H),2.35–2.33(m,2H),2.12-1.27(m,7H).m/z 790.25[M+H]+。
化合物54的两种对映异构体通过SFC通过手性分离来分离。
在SFC分离过程中，将级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环；因为SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用。对获得的级分再次进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件柱子/尺寸：
Chiralpak–AD-H(30*250)mm，
5u％CO2:50％％共溶剂:50％(0.2％7M的甲醇氨/ACN:MEOH)
总流量：120.0g/min
背压：100巴温度：30℃UV：220nm溶解度：MeOH
制备-HPLC条件柱子/尺寸：
流动相(A)：0.05％ TFA/H2O流动相(B)：100％乙腈
流速：18ml/min
柱子：X-SELECT C18 5μm(19*250)
梯度时间％B：0/10，5/10，10/45，13/45
化合物55
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.48(s,1H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),7.91(s,1H),7.59(d,J＝5.7Hz,1H),7.30(d,J＝8.7Hz,1H),6.89-6.86(m,4H),6.14(bs,1H),4.33-4.30(m,5H),3.91(s,6H),3.61(s,3H),3.40(bs,3H),3.33-3.03(m,3H),2.78-2.61(m,6H),2.34-2.33(m,2H),2.08-2.05(m,1H),1.92-1.70(m,4H),1.31-1.28(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 790.49[M+H]+,[α]25 D:+19.44。
化合物56
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.48(s,1H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),7.91(s,1H),7.59(d,J＝5.6Hz,1H),7.30(d,J＝8.6Hz,1H),6.91-6.86(m,4H),6.14(bs,1H),4.33-4.30(m,5H),3.91(s,6H),3.61(s,3H),3.40(bs,3H),3.33-3.03(m,3H),2.78-2.61(m,6H),2.34-2.33(m,2H),2.08-2.05(m,1H),1.92-1.70(m,4H),1.31-1.28(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 790.52[M+H]+,[α]25 D:-32.26。
按化合物52的合成制备化合物57。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.78(s,1H),9.20(s,1H),8.24(s,1H),7.66(s,1H),7.28(d,J＝9.6Hz,1H),7.09(m,1H),6.84(s,1H),6.88(d,J＝5.2Hz,2H),4.38-4.32(m,3H),3.97(s,6H),3.63(m,3H),3.30-3.07(m,5H),2.78-2.69(m,7H),2.32-2.30(m,2H),2.07(m,1H),1.90(m,2H),1.70-1.68(m,2H),1.54(m,3H),1.53(m,3H),1.23(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 807.55[M+H]+。
按化合物52的合成制备化合物58。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ14.30(bs,1H)；10.79(s,1H)；8.84(bs,1H)；8.22(s,1H)；7.65(s,1H)；7.32(d,J＝8.4Hz,1H)；6.87-6.98(m,3H)；6.15(bs,1H)；4.86-5.00(m,1H)；4.15-4.70(m,4H)；3.90-4.10(m,1H)；3.97and 3.98(s,total 6H)；3.64(s,3H)；3.60-3.80(m,1H)；3.10-3.24(m,2H)；2.60-2.90(m,6H)；2.3-2.40(m,2H)；2.04-2.14(m,1H)；1.68-1.98(m,4H)；0.7-1-1.40(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 805.74[M+H]+
按化合物52的合成制备化合物59。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.78(s,1H),9.44(s,1H),8.71(d,J＝5.3Hz,1H),7.85(s,1H),7.56(d,J＝5.6Hz,1H),7.31(d,J＝8.6Hz,1H),6.90-6.87(m,2H),6.70(d,J＝2.4Hz,2H),6.15(d,J＝7.8Hz,1H),4.37-4.24(m,1H),3.90(s,2H),3.80(d,J＝2.0Hz,6H),3.59(bs,2H),3.43(s,3H),3.32(s,2H),2.77-2.56(m,8H),2.33-2.22(m,2H),2.07-2.06(m,1H),1.91-1.67(m,4H),1.29-1.24(m,2H),0.61-0.48(m,4H).LC-MS(ES+):m/z 816.50[M+H]+
按化合物52的合成制备化合物60。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ0.44-0.70(m,4H)；1.20-1.38(m,2H)；1.64-1.74(m,2H)；1.76-1.94(m,2H)；2.05(s,3H)；2.07(s,3H)；2.07-2.08(m,1H)；2.19-2.36(m,2H)；2.52-2.75(m,8H)；3.41(s,2H)；3.45(s,3H)；3.58-3.66(m,2H)；3.76(s,3H)；3.77(s,3H)；3.88(s,2H)；3.34-3.42(m,1H)；6.15(d,J＝8.0Hz,1H)；6.50(s,1H)；6.51(s,1H)；6.84-6.91(m,2H)；7.31(d,J＝8.4Hz,1H)；7.49(s,1H)；10.78(s,1H),LC-MS(ES+):m/z 793.52[M+H]+
按化合物52的合成制备化合物61。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.36(s,1H),7.52(s,1H),7.30(d,J＝8.7Hz,1H),6.90–6.86(m,2H),6.69(s,2H),6.09(s,1H),4.41-4.35(m,2H),4.28(d,J＝2.2Hz,2H),4.12(d,J＝14.7Hz,1H),3.88(s,6H),3.47(s,3H),3.41–3.35(m,3H),3.08(t,J＝29.9Hz,1H),3.02(d,J＝8.9Hz,2H),2.79–2.59(m,6H),2.34(t,J＝6.1Hz,2H),2.07(d,J＝6.4Hz,7H),1.94 -1.90(m,1H),1.81-1.27(m,4H).LC-MS(ES+):m/z 767.24[M+H]+
按化合物52的合成制备化合物62。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.45(bs,1H),8.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.74(t,J＝7.2Hz,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.60(t,J＝6.0Hz,2H),7.31(d,J＝8.0Hz,1H),6.90(m,4H),6.16(bs,1H),4.45-4.32(m,4H),4.15(bd,1H),3.90(s,6H),3.59(s,3H),3.17-3.03(m,6H),2.77-2.59(m,6H),2.36-2.33(m,2H),2.09-2.05(m,1H),1.94-1.70(m,4H),1.31-1.22(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 789.59[M+H]+。
化合物63的合成
步骤-1：向3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(0.352g，1.66mmol)在DCE:MeOH(10:10ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.5g)和乙酸(0.1g，1.66mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(63-1，0.500g，1.66mmol)并将反应混合物于70℃加热3小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(0.481g，8.30mmol)。于室温继续搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。16小时后，过滤反应物质，浓缩并通过反相柱色谱法纯化(使用C-18柱和0.1％的FA/水:MeCN)，得到呈浅黄色半固体的8-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯3(0.6g，1.03mmol，收率62.35％，纯度85.8％)。LC-MS(ES+):m/z 398.36.[M+H]+
步骤-2：将8-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯63-2(0.450g，904.30mmol)在4M的HCl/二噁烷(3mL)中的溶液于室温搅拌1小时，同时通过TLC和LCMS监测。1小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物加乙醚(2×20ml)研磨，得到呈棕色固体的5-[4-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基甲基)-3,5-二甲氧基-苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮.HCl盐63-3(0.400g，0.832mmol，收率91.95％，纯度90.21％)。LC-MS(ES+):m/z 398.34[M+H]+。
步骤-3：于0℃向5-[4-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基甲基)-3,5-二甲氧基-苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮.HCl盐(0.1g，0.230mmol)在干燥的DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.089g，0.230mmol)，然后加入PyBOP(0.144g，0.276mmol)和2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]乙酸(0.095g，0.230mmol)，并将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过LCMS监测反应。16小时后，使用genvac蒸发大多数DMF，粗化合物通过制备-HPLC纯化，得到呈棕色固体的3-[4-[4-[2-[8-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基]-2-氧代-乙基]-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐化合物63(0.071g，0.078mmol，收率33.97％，纯度99.6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.34(s,1H),7.53(s,1H),7.30(d,J＝8.6Hz,1H),6.90-6.87(m,1H),6.71(s,2H),4.39-4.35(m,1H),4.30-4.27(m,1H),4.13(bs,2H),4.05(bs,2H),3.98-3.95(m,1H),3.90(s,6H),3.61-3.56(m,1H),3.48(s,3H),3.14-3.10(m,1H),2.78-2.64(m,6H),2.33-2.27(m,4H),2.08(d,J＝8.9Hz,7H),1.94-1.69(m,6H),1.31-1.29(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 793.44[M+H]+。
按化合物63的合成制备化合物64。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.37(s,1H),8.37(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.75(ddd,J＝8.4,6.9,1.5Hz,1H),7.67(d,J＝7.9Hz,1H),7.60(s,1H),7.64–7.55(m,1H),7.31(d,J＝8.5Hz,1H),6.94–6.84(m,4H),4.42–4.27(m,2H),4.20(t,J＝4.5Hz,2H),4.10(s,2H),3.99(d,J＝12.8Hz,1H),3.93(s,6H),3.63(d,J＝13.0Hz,1H),3.61(s,3H),2.90(s,1H),2.77(dd,J＝13.2,7.1Hz,3H),2.74(s,1H),2.73–2.67(m,1H),2.63(d,J＝14.9Hz,1H),2.59–2.52(m,1H),2.37–2.26(m,2H),2.07(t,J＝6.7Hz,1H),1.99–1.86(m,1H),1.72(d,J＝12.1Hz,4H),1.35–1.21(m,4H)；LC-MS(ES+):m/z815[M+H]+
按化合物63的合成制备化合物65。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.39(s,1H),7.53(s,1H),7.30(bs,1H),6.70(s,2H),6.59-6.48(m,2H),4.30-3.95(m,7H),3.89(s,8H),3.62-3.59(m,1H),3.48(s,3H),3.15-3.11(m,3H),2.73-2.55(m,2H),2.49-2.40(m,1H),2.33-2.30(m,3H),2.08(d,J＝8.6Hz,7H),1.94-1.71(m,6H),1.49(bs,2H)。LC-MS(ES+):m/z 743.58[M+H]+
按化合物63的合成制备化合物66。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.29(s,1H),10.80(s,1H),9.59(s,1H),8.21(s,1H),7.72(s,1H),7.47(s,1H),7.35(s,1H),6.58-6.47(m,2H),4.46(bs,3H),4.32-4.12(m,4H),4.03(s,3H),3.62(s,3H),3.39-3.01(m,8H),2.78-2.67(m,1H),2.60-2.56(m,1H),2.37-2.33(m,3H),2.08-2.06(m,1H),1.91-185(m,4H),1.51-147(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z733.54[M+H]+
按化合物63的合成制备化合物67。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.34-1.42(m,2H)；1.70-1.90(m,4H)；2.05-2.10(m,1H)；2.30-2.40(m,2H)；2.55-2.60(m,1H)；2.66-2.74(m,1H)；2.98-3.30(m,10H)；3.63(s,3H)；3.97(s,6H)；4.08-4.14(m,1H)；4.26-4.32(m,3H)；4.40-4.45(m,1H)；6.59(dd,J1＝2.4Hz,J2＝8.8Hz,1H)；6.74(d,J＝2.0Hz,1H)；6.94-7.09(m,1H)；6.98(s,2H)；7.65(s,1H)；8.23(s,1H)；9.42(bs,1H)；10.77(s,1H)；14.60(bs,1H)。LC-MS(ES+):m/z；745.56[M+H]+
化合物68的合成：
步骤-1：于-78℃向双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(60mL，60.23mmol)在THF(10mL)中的处于惰性气氛下的搅拌溶液中逐滴加入乙酸乙酯(2.65g，30.11mmol，2.94mL)。将反应混合物搅拌30分钟。向反应混合物中加入在THF(20mL)中的4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(6g，30.11mmol)。反应混合物于-78℃搅拌2小时。通过TLC监测反应进度。反应完成后，用水(20ml)稀释反应混合物并用CH2Cl2(2×20mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，收率46.8％)。化合物TLC与页面NBK0308-149上的先前批次的真实化合物相匹配。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 4.21(q,J＝7.2Hz,14.8Hz,2H),3.82(bs,2H),3.58(s,1H),3.20(bt,2H),2.46(s,2H),1.71(m,2H),1.52(m,2H),1.45(s,9H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤-2：向4-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，15.66mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/二噁烷(15.66mmol，25mL)并将反应混合物于室温搅拌3小时。反应完成后，减压蒸发挥发物，与甲苯(30ml×2)共蒸馏并加乙醚(30mL)研磨，得到为HCl盐的3-[4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(140mg，收率71.94％，纯度90％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d5.07(s,1H),4.8(q,J＝6.8Hz,14.0Hz,2H),3.05(m,4H),2.51(s,1H),1.89(m,4H),1.21(t,J＝6.8Hz,3H)。
步骤-3：向2-(4-羟基-4-哌啶基)乙酸乙酯(2.67g，11.96mmol)在DMF(30mL)中的处于室温的溶液中加入碳酸氢钠(1.00g，11.96mmol)并将反应混合物于70℃搅拌16小时。通过TLC监测反应进度。反应完成后，将反应混合物倒入冰冷水中，得到固体。过滤固体并干燥，其不经进一步纯化即用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)8.38(m,2H),7.53(d,J＝9.6Hz,1H),4.75(s,1H),4.09(q,J＝6.8Hz,14.0Hz,2H),3.32-3.19(m,2H),3.14(m,2H),2.49(s,1H),1.83-1.71(m,4H),1.21(t,J＝6.8Hz,3H)。LC-MS(ES+):m/z 363.30[M+H]+
步骤-4：向2-[4-羟基-1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]乙酸乙酯(2g，5.31mmol)在甲醇(10mL)和水(4mL)中的处于室温的溶液中加入氢氧化钠颗粒(0.21g，5.31mmol)并将混合物于75℃加热1小时。反应完成后，真空蒸发溶剂，残余物用水(2mL)稀释并用2N HCl酸化，得到固体。过滤固体并干燥，得到2-[4-羟基-1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]乙酸(1.2g，收率62.89％，纯度97％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 8.36(m,2H),7.52(d,J＝9.6Hz,1H),3.27-3.21(m,2H),3.14-3.11(m,2H),2.25(s,2H),1.67(s,4H)；LC-MS(ES+):m/z 349.27[M+H]+
步骤-5：向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.2g，6.44mmol)和2-[4-羟基-1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]乙酸(2.24g，6.44mmol)在DMF(15mL)中的搅拌溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(4.49mL，25.77mmol)并将反应混合物于室温搅拌5分钟。向反应混合物中加入HATU(2.45g，6.44mmol)并继续搅拌16小时。通过TLC监测反应进度。反应完成后，用水(50ml)稀释反应混合物，用EtOAc(2×100mL)萃取并用盐水洗涤。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗化合物首先通过柱色谱法纯化(Davisil硅胶，10-60％的EtOAC/石油醚)，得到4-[2-[4-羟基-1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]乙烯基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.3g，收率38.28％，纯度98％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 8.38(m,2H),7.53(d,J＝9.6Hz,1H),4.95(s,1H),3.54-3.44(m,4H),3.33-3.21(m,4H),3.15-3.12 9m,2H),2.56(s,2H),1.80-1.72(m,4H),1.41(s,9H)；LC-MS(ES+):m/z 517.24[M+H]+
步骤-6：向4-[2-[4-羟基-1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.2g，2.32mmol)在甲醇(20mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd/C(247.24mg，2.32mmol)并将反应混合物在H2气氛(气球压力)下于室温搅拌16小时。通过TLC/LCMS监测反应进展。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并真空浓缩滤液。将残余物溶解在乙酸乙酯(50mL)中并用水(20mL)洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并真空浓缩。粗品用于下一步而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d7.24(d,J＝8.8Hz,1H),6.80-6.75(m,2H),5.80(s,2H),4.84(s,1H),3.54-3.46(m,4H),3.35-3.22(m,2H),3.30-3.28(m,2H),2.92(m,2H),2.58-2.51(m,4H),1.63(m,4H),1.41(s,9H)；LCMS:487.86[M+H]+
步骤-7：于70℃向4-[2-[1-[4-氨基-2-(三氟甲基)苯基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1g，2.06mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(777.00mg，9.25mmol)，保持64小时。通过LCMS和TLC监测反应的进展，完成后，用冰水淬灭反应混合物并过滤固体。粗固体通过柱色谱法纯化(Davisil硅胶，10-60％的乙酸乙酯/石油醚)，得到4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-(三氟甲基)苯基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(550mg，收率40.30％，纯度90％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)10.78(s,1H)7.39(d,J＝8.8Hz,1H),6.91-6.87(m,2H),6.16(d,J＝8.0Hz,1H),4.84(s,1H),4.38-4.35(m,1H),3.54(s,2H),3.52(s,2H),3.38(m,2H),2.96-2.92(m,2H),2.74-2.70(m,1H),2.60-2.55(m,3H),2.53(s,2H),2.09-2.06(m,1H),1.92-1.89(m,1H),1.67-1.61(m,4H),1.41(s,9H)。
步骤-8：向4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-(三氟甲基)苯基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，250.99umol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(193.37uL，2.51mmol)并将反应混合物于室温搅拌3小时。反应完成后，减压蒸发挥发物，与甲苯(15ml×2)共蒸馏并加乙醚(15ml×2)研磨，得到为TFA盐的3-[4-[4-羟基-4-(2-氧代-2-哌嗪-1-基-乙基)-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(150mg，收率97.73％，纯度99.30)。LC-MS(ES+):m/z 498.30[M+H]+
步骤-9：向2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(75mg，0.175mmol)和3-[4-[4-羟基-4-(2-氧代-2-哌嗪-1-基-乙基)-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(140.08mg，0.229mmol)在甲醇/DCE(4ml:4ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.1g)、乙酸(10.54mg，0.175mmol)和乙酸钠(43.19mg，0.526mmol)。反应混合物于75℃搅拌4小时。将反应混合物冷却至0℃，于0℃向反应混合物中加入SiliaBond氰基硼氢化物(200mg，0.175mmol)并于室温继续搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并真空浓缩滤液。粗化合物通过RP-制备HPLC纯化，得到为甲酸盐并呈灰白色固体的3-[4-[4-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]-4-羟基-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(24mg，收率16.03％，纯度98.59％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)d 14.22(s,1H),10.78(s,1H),8.39(s,1H),8.22(s,1H),7.56(s,1H),7.31(d,J＝8.8Hz,1H),6.90(m,4H),6.15(d,J＝8.8Hz,1H),4.96(s,1H)4.36(m,1H),3.86(s,6H),3.61(s,3H),3.56(s,1H),3.51(m,6H),2.93(m,2H),2.78-2.69(m,1H),2.60(m,3H),2.43(bs,2H),2.36(bs,2H),2.10-2.07(m,1H),1.95-1.84(m,1H),1.67(m,4H)。LC-MS(ES+):m/z 795.54[M+H]+
化合物69的合成：
步骤-1：于室温向2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酸(0.2g，0.348mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙烷-2-胺(0.48mL，2.79mmol)和3-氨基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(71.46mg，0.383mmol)。于室温向反应混合物中加入HATU(265.23mg，0.697mmol)并搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，用EtOAc(200mL)稀释反应混合物并用冰冷水(3×100mL)、然后用饱和盐水溶液洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3-[[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.125g，收率65.59％，纯度94％)粗产物，该粗产物不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS(ES+):m/z 514.53[M+H]+
步骤-2：于0℃向3-[[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.125g，0.243mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入2,2,2-三氟乙酸(0.18ml，2.43mmol)并于室温搅拌4小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物。该粗产物加乙醚研磨，得到为棕色固体TFA盐的2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-N-[吡咯烷-3-基]乙酰胺(0.110g，收率83.1％，纯度97.8％)。
步骤-3：于0℃向2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(100.0mg，0.184mmol)和2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-N-[吡咯烷-3-基]乙酰胺(118.51mg，0.184mmol)在甲醇(1mL)和DCE(1mL)中的溶液中加入乙酸(0.2mL)并将反应混合物于室温搅拌16小时。然后于0℃向反应混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠(78.30mg，0.369mmol)并于室温搅拌48小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，减压蒸发反应混合物，得到粗化合物。所得粗产物通过制备HPLC纯化，得到为TFA盐棕色固体的N-[1-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]吡咯烷-3-基]-2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(32mg，收率20.78％，纯度98.93％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.82(s,1H),9.81(m,2H),9.10(dd,J＝6.0Hz,5.6Hz,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),6.98(m,4H),6.65(d,J＝8.4Hz,2H),5.76(s,0.5H),4.55-4.26(m,4H),3.96(m,8H),3.63(s,3H),3.53(m,4H),3.17(bm,4H),2.74-2.67(m,1H),2.63-2.56(m,2H),2.30-1.85(m,8H)；LC-MS(ES+):m/z 711.53[M+H]+
化合物70的合成
步骤-1：向化合物4-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯70-1(0.5g，1.86mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(0.6g，1.86mmol)并搅拌15分钟，然后加入1-氟-4-硝基-苯70-2(0.263g，1.86mmol)。让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。完成后，用冰片淬灭反应物质并过滤沉淀的固体，得到呈黄色半固体的4-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯70-3(0.55g，收率71.97％，纯度95％)，其原样用于下一步。LC-MS(ES+):m/z[M+H]+390.23。
步骤-2：向4-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯70-3(0.55g，1.41mmol)在甲醇(10mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(0.525g，4.94mmol)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤并浓缩滤液，得到呈黄色固体的4-[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯70-4(0.5g，收率91.60％，纯度93％)。这不经任何纯化即用于下一步。LC-MS(ES+):m/z[M+H]+360.13
步骤-3：向4-[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯70-4(0.5g，1.39mmol)在DMF(15mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮70-5(0.385g，2.01mmol)、NaHCO3(0.280g，3.34mmol)并于50℃搅拌24小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。24小时后，用冰冷水(100mL)淬灭反应。过滤所得固体并与甲苯共蒸馏，得到呈紫色固体的4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯70-6(0.4g，收率37.64％，纯度74％)。LC-MS(ES+):m/z 471.42[M+H]+
步骤-4：于0℃向4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯70-6(0.4g，0.849mmol)在CH2Cl2(2mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(0.969mg，8.50mmol)并将反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。在消耗起始材料后，减压浓缩反应混合物，残余物加乙醚(2×50mL)研磨，并干燥沉淀出的固体，得到呈绿色固体的3-[4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐70-7(0.27g，收率51.79％，纯度79％)。LC-MS(ES+):m/z 371.40[M+H]+
步骤-5：向3-[4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮70-7(0.236g，0.638mmol)在二氯乙烷(5mL):甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入乙酸(0.019g，0.319mmol)和无水乙酸钠(0.052g，0.638mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，加入2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛70-8(0.1g，0.319mmol)并让回流3小时。3小时后，将反应物质冷却至室温，加入SiliaBond氰基硼氢化物(0.166g，3.87mmol)并让于室温搅拌16小时，同时通过LCMS监测。完成后，减压蒸发反应混合物并通过制备HPLC纯化，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[1-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐化合物70(0.029g，收率11.66％，纯度97.99％))。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.17(s,1H),10.77(s,1H),8.92(bs,1H),8.22(bs,1H),7.65(s,1H),7.37(bs,2H),6.98(s,2H),6.75(s,2H),6.37(bs,1H),4.36-4.21(m,3H),3.96(s,6H),3.63(s,3H),3.49-3.35(m,6H),3.03-3.01(m,2H),2.74-2.60(m,2H),2.10-2.04(m,1H),1.91-1.86(m,5H),1.50-1.44(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 668.46[M+H]+
按化合物70的合成制备化合物71。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.36(s,1H),10.83(s,1H),9.13(bs,1H),8.22(s,1H),7.72(s,1H),7.41(d,J＝1.2Hz,1H),7.35(bs,3H),6.79-6.75(m,2H),6.39(bs,1H),4.40-4.38(m,3H),4.02(s,3H),3.62(s,3H),3.53-3.51(m,6H),3.31-3.16(m,2H),
2.77-2.67(m,1H),2.61-2.58(m,1H),2.08-2.06(m,1H),1.93-1.87(m,5H),1.56-1.49(m,6H).LC-MS(ES+):m/z 672.48[M+H]+
按化合物70的合成制备化合物72。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),9.47(s,1H),9.17(s,1H),8.77(d,J＝5.7Hz,1H),7.94(s,1H),7.54(d,J＝5.6Hz,1H),7.36-7.27(m,5H),6.77(d,J＝8.8Hz,1H),6.32(bs,1H),4.52-4.38(m,3H),3.94(s,3H),3.62(s,3H),3.55-3.46(m,6H),3.20-3.17(m,2H),2.79-2.57(m,2H),2.08-1.90(m,6H),1.57-1.49(m,6H).LC-MS(ES+):m/z 683.56[M+H]+
73的合成：
步骤-1：向化合物4-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯70-1(1g，3.73mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(1.21g，3.73mmol)并搅拌15分钟，然后加入1,2-二氟-4-硝基-苯73-2(0.592g，3.73mmol)。让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。完成后，用冰片淬灭反应物质并过滤沉淀的固体，得到呈黄色固体的4-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯73-3(1.4g，2.78mmol，收率74.69％，纯度81％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.1-1.25(m,2H),1.25-1.35(m,2H),1.35-1.50(m,11H),1.70(d,J＝12.4Hz,2H),1.82(d,J＝12.8Hz,2H),2.65(t,J＝11.2Hz,2H),2.82(t,J＝12.4Hz,2H),3.74(d,J＝12.4Hz,2H),4.14(bs,2H),6.89(t,J＝8.8Hz,1H),7.89(dd,J1＝2.8Hz,J2＝13.2Hz,1H),7.96(dd,J1＝2.8Hz,J2＝9.0Hz,1H)。LC-MS(ES+):m/z 408.22[M+H]+
步骤-2：向4-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯73-3(1.4g，3.44mmol)在甲醇(15mL)和乙醇(15mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(1.46g，13.74mmol)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌4小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤并浓缩滤液，得到呈浅粉色固体的4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯73-4(1.2g，3.05mmol，收率88.82％，纯度96％)。将其用于下一步而无需任何纯化。LC-MS(ES+):m/z 378.60[M+H]+
步骤-3：向4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯73-4(0.6g，1.59mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(0.61g，3.18mmol)、NaHCO3(0.801g，9.54mmol)并于85℃搅拌24小时，同时通过LCMS和TLC监测。24小时后，用冰冷水(100ml)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过(硅胶100-200目，洗脱剂50％的石油醚/乙酸乙酯)柱色谱法纯化，得到呈浅棕色固体的4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯6(0.25g，486.09mmol，收率30.58％，纯度95％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ0.95-1.2(m,2H),1.39(s,9H),1.2-1.45(m,4H),1.69(t,J＝12Hz,4H),1.8-1.9(m,1H),2.05-2.15(m,1H),2.45-2.51(m,1H),2.51-2.53(m,5H),3.14(d,J＝11.6Hz,2H),3.97(d,J＝12Hz,2H),4.2-4.3(m,1H),6.42(dd,J1＝2.4Hz,J2＝8.4Hz 1H),6.49(dd,J1＝2.8Hz,J2＝14.8Hz 1H),6.83(t,J＝9.2Hz,1H),7.94(s,1H),10.87(s,1H)。LC-MS(ES+):m/z489.73[M+H]+
步骤-4：于0℃向4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯73-6(0.25g，0.51mmol)在CH2Cl2(2mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(1.2ml，15.35mmol)并于室温搅拌30分钟。浓缩反应混合物，残余物加乙醚(2×50mL)研磨，并干燥沉淀出的固体，得到呈浅绿色固体的3-[3-氟-4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA 73-7(0.1g，199.00mmol，收率38.89％，纯度90％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.20-1.5(m,6H),1.70-1.95(m,5H),2.00-2.15(m,1H),2.55-2.65(m,1H),2.89-2.68(m,5H),3.30(d,J＝11.6Hz,4H),4.25-4.35(m,1H),6.48(d,J＝8.4Hz,1H),6.57(d,J＝14.8Hz,1H),7.04(bs,1H),8.20-8.35(m,1H),8.55(d,J＝8.8Hz,1H),8.14(s,1H),10.87(s,1H)。LC-MS(ES+):m/z 389.38[M+H]+
步骤-5：向3-[3-氟-4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮7(0.1g，0.257mmol)在DCE(5mL)和甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.1g，0.257mmol)、乙酸(0.023g，0.386mmol)和无水乙酸钠(0.042g，0.514mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，加入2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.081g，0.257mmol)并让回流3小时。3小时后，将RM冷却至室温，加入Silia bond氰基硼氢化物(0.1g，0.257mmol)并让于室温搅拌17小时，同时通过LCMS监测。完成后，减压蒸发反应混合物并通过制备HPLC纯化，得到呈灰白色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA(0.056g，67.75mol，收率26.32％，纯度96.26％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ14.32(s,1H),10.80(s,1H),9.07(bs,1H),8.22(s,1H),7.71(s,1H),7.46(d,J＝1.4Hz,1H),7.34(s,1H),6.57-6.54(m,2H),4.44-4.39(m,3H),4.02(s,3H),3.62(s,3H),3.52–3.49(m,2H),3.27–3.15(m,6H),2.75 -2.66(m,2H),2.57(d,J＝10.2Hz,1H),2.09-2.07(m,1H),1.89–1.74(m,5H),1.53-1.46(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 690.53[M+H]+。
按化合物73的合成制备化合物74
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),8.95(s,1H),7.57(s,1H),7.28(t,J＝9.2Hz,1H),(7.15(s,1H),7.08(s,1H),6.65-6.55(m,2H),4.47-4.28(m,3H),3.93(s,3H),3.47(s,3H),3.28-3.15(m,8H),2.77-2.58(m,2H),2.07(d,J＝5.3Hz,7H),1.89-1.73(m,5H),1.53-1.24(m,6H).LC-MS(ES+):m/z 678.53[M+H]+
按化合物73的合成制备化合物75
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.26(s,1H),10.77(s,1H),8.93(s,1H),8.22(s,1H),7.71(s,1H),7.46(d,J＝1.0Hz,1H),7.34(s,1H),7.02(t,J＝28.0Hz,1H),6.75(d,J＝2.4Hz,1H),6.60(q,J＝3.6Hz,1H),4.39(d,J＝4.0Hz,2H),4.31-4.29(m,1H),4.02(s,3H),3.62(s,3H),3.50–2.98(m,8H),2.75–2.62(m,1H),2.10-2.06(m,2H),1.93-1.80(m,5H),1.54–1.50(m,5H),1.34(bs,1H).LC-MS(ES-):m/z704.42[M-H]–
按化合物73的合成制备化合物76
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.87(s,1H),7.57(s,1H),7.15(s,1H),7.08(s,1H),6.94(d,J＝9.4Hz,1H),6.60(d,J＝2Hz,1H)6.59(dd,J＝2Hz,8.4Hz,1H),4.46-4.36(m,2H),4.30-4.26(m,1H),3.93(s,3H),3.47(s,5H),3.27-3.15(m,6H),2.78-2.63(m,2H),2.07(d,J＝5.2Hz,7H),1.93-1.91(m,3H),1.80(d,J＝11.6Hz,2H),1.48-1.26(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 694.45[M+H]+
按化合物73的合成制备化合物77
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.44(s,1H),8.73(d,J＝5.6Hz,1H),7.92(s,1H),7.53(d,J＝5.6Hz,1H),7.14(d,J＝1.3Hz,1H),7.08(s,1H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(d,J＝2.5Hz,1H),6.60-6.57(m,1H),5.82(d,J＝7.8Hz,1H),4.28-4.24(m,1H),3.86(s,3H),3.59(s,5H),3.08(d,J＝10.6Hz,2H),2.89(d,J＝10.8Hz,2H),2.74-2.61(m,2H),2.48-2.45(m,2H),2.11-2.06(m,3H),1.74-1.64(m,4H),1.31-1.12(m,7H),LC-MS(ES+):m/z 717.19[M+H]+
按化合物73的合成制备化合物78
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.48(s,1H),9.16(s,1H),8.78(s,1H),7.95(s,1H),7.55(d,J＝5.4Hz,1H),7.33(s,1H),7.27(s,1H),6.56(d,J＝14.7Hz,1H),6.48(d,J＝7.1Hz,1H),4.51-4.30(m,3H),3.96(s,3H),3.61(s,3H),3.24-3.19(m,6H),2.77-2.55(m,4H),2.08-2.05(m,1H),1.91-1.74(m,5H),1.55-1.22(m,6H).LC-MS(ES+):m/z 701.16[M+H]+
按化合物73的合成制备化合物79
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),10.02(s,1H),9.48(s,1H),8.76(d,J＝5.7Hz,1H),8.03–7.85(m,2H),7.75–7.55(m,2H),7.49(d,J＝5.8Hz,1H),7.16(s,1H),6.71–6.38(m,2H),4.46(s,2H),4.34(dd,J＝11.7,4.8Hz,1H),3.61(s,3H),3.48(d,J＝11.3Hz,2H),3.39(d,J＝10.3Hz,2H),3.08(s,3H),2.84–2.52(m,2H),2.20–2.02(m,1H),2.02–1.70(m,5H),1.70–1.16(m,7H)。LC-MS(ES+):m/z 721.6[M+H]+
按化合物73的合成制备化合物80
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.92(s,1H),7.79(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(s,1H),7.47(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),7.41(p,J＝1.8Hz,1H),7.20(s,1H),6.62(dd,J＝15.0,2.5Hz,1H),6.58–6.36(m,1H),4.55–4.29(m,3H),3.45(d,J＝17.2Hz,7H),3.07(s,4H),2.85–2.52(m,2H),2.05(d,J＝5.1Hz,7H),1.99–1.76(m,4H),1.67–1.14(m,7H)。LC-MS(ES+):m/z 698.6
按化合物73的合成制备化合物81
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.98(s,1H),8.62(dd,J＝2.3,0.8Hz,1H),7.90(dd,J＝8.0,2.3Hz,1H),7.60(t,J＝4.1Hz,2H),7.20(s,1H),6.62(dd,J＝14.9,2.5Hz,1H),6.53(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.50(s,2H),4.36(dd,J＝11.6,4.8Hz,1H),3.47(s,6H),3.06(s,4H),2.87–2.54(m,2H),2.05(d,J＝11.3Hz,7H),1.88(ddd,J＝20.0,13.6,8.5Hz,5H),1.54(s,5H),1.41(s,2H)。LC-MS(ES+):m/z:615.5[M+H]+。
按化合物73的合成制备化合物82。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),9.85(s,1H),8.18(d,J＝1.7Hz,1H),7.74–7.51(m,2H),7.24(s,1H),6.64(dd,J＝15.0,2.5Hz,1H),6.55(dd,J＝9.1,2.4Hz,1H),4.47(s,2H),4.37(dd,J＝11.8,4.9Hz,1H),3.92(s,3H),3.57(d,J＝11.3Hz,2H),3.50–3.29(m,5H),3.14(d,J＝18.3Hz,3H),2.88–2.54(m,2H),2.07(s,7H),1.89(ddd,J＝16.8,12.7,6.3Hz,5H),1.58(s,4H),1.42(s,3H)。LC-MS(ES+):645.6[M+H]+。
化合物83的合成：
步骤-1：向化合物4-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯70-1(2g，7.45mmol)在DMF(15mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(2.43g，7.45mmol)并搅拌15分钟，然后加入1-氟-4-硝基-2-(三氟甲基)苯83-2(0.247g，7.45mmol)。让反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测。完成后，用冰片淬灭反应物质并过滤沉淀的固体，得到呈黄色半固体的4-[1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯83-3(2.8g，4.28mmol，收率82％，纯度98％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝2.4Hz,1H),8.29(dd,J1＝2.8Hz,J2＝9.2Hz,1H),7.21(d,J＝9.2Hz,1H),4.14(bs,2H),3.43(d,J＝12.4Hz,2H),2.82(t,J＝11.6Hz,2H),2.66(t,J＝11.6Hz,2H),1.81(d,J＝12.4Hz,2H),1.72(d,J＝12Hz,2H),1.44–1.46(m,11H),1.28(m,4H)LC-MS(ES+):m/z 458.31[M+H]+
步骤-2：向4-[1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯83-3(2.5g，5.46mmol)在甲醇(10mL)和乙醇(10mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(2.33g，21.86mmol)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤并浓缩滤液，得到呈黄色固体的4-[1-[4-氨基-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯83-4(2g，4.67mmol，收率85.61％，纯度99％)。这不经任何纯化即用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.18(d,J＝8.8Hz,1H),6.79(d,J＝2.8Hz,1H),6.75(dd,J1＝2.4Hz,J2＝8.4Hz,1H),5.29(bs,2H),3.96(d,J＝11.6Hz,2H),2.79(d,J＝11.2Hz,2H),2.67–2.56(m,2H),1.68 -1.65(m,4H),1.39(s,9H),1.29(d,4H),1.29–1.19(m,4H),LC-MS(ES+):m/z 428.37[M+H]+
步骤-3：向1'-(4-氨基-2-(三氟甲基)苯基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯83-4(2g，4.68mmol)在DMF(40mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(2.69g，14.04mmol)、NaHCO3(5.38g，28.07mmol)并于100℃搅拌48小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。48小时后，用冰冷水(100mL)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过(硅胶100-200目，并用50％的乙酸乙酯/石油醚-纯乙酸乙酯洗脱产物)柱色谱法纯化，得到呈紫色固体的1'-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-(三氟甲基)苯基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯83-6(0.65g，1.17mmol，收率25.02％，纯度84.14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),7.26(d,J＝8.6Hz,1H),6.88(q,J＝6.3Hz,1H),6.15(d,J＝7.9Hz,1H),4.44-4.37(m,1H),3.95–4.1(m,3H),3.31-254(m,11H),2.07–1.99(m,1H),1.90-1.6(m,7H),1.26–1.14(m,7H),1.08–1.00(m,3H)。LC-MS(ES+):m/z 539.98[M+H]+
步骤-4：于0℃向4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-(三氟甲基)苯基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯83-6(0.65g，1.21mmol)中加入4M的HCl/二噁烷(10ml，24.14mmol)并将反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。在消耗起始材料后，减压浓缩反应混合物，残余物加乙醚(2×50mL)研磨，并干燥沉淀出的固体，得到呈棕色固体的3-[4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮.HCl盐7(0.7g)。将其用于下一步而无需任何纯化。LC-MS(ES+):m/z 439.33[M+H]+
步骤-5：向3-[4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮83-7(0.073g，0.167mmol)在二氯乙烷(5mL):甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.1g)、乙酸(0.011g，0.167mmol)和无水乙酸钠(0.027g，0.334mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛83-8(0.063g，0.193mmol)并让回流3小时。3小时后，将反应物质冷却至室温，加入SiliaBond氰基硼氢化物(0.048g，0.835mmol)并让于室温搅拌16小时，同时通过LCMS监测。完成后，减压蒸发反应混合物并通过制备HPLC纯化，得到呈白色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐(21mg，0.023mmol，收率13.97％，纯度96.33％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.48(s,1H),9.09(bs,1H),8.77(d,J＝5.3Hz,1H),7.97(s,1H),7.56(d,J＝5.7Hz,1H),7.33–7.22(m,3H),6.91–6.86(m,2H),4.42-4.34(m,3H),3.96(s,3H),3.62(s,3H),3.52(d,J＝11.9Hz,2H),3.30-3.15(m,2H),2.89–2.60(m,6H),2.08–2.05(m,1H),1.92-1.89(m,3H),1.70–1.23(m,8H)。LC-MS(ES+):m/z 751.59[M+H]+。
按化合物83的合成制备化合物84。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),11.90(s,1H),10.78(s,1H),9.10(s,1H),8.20(s,1H),7.70(s,1H),7.25-7.20(m,2H),6.90-6.85(m,2H),6.16(d,J＝7.6Hz,1H),4.62-4.27(m,5H),4.39-4.33(m,2H),3.99(s,3H),3.62-3.44(m,3H),3.02-2.99(m,2H),2.82-2.60(m,4H),2.09-2.04(m,1H)1.93-1.87(m,5H),1.75-1.69(m,2H),1.47-1.42(bs,2H),1.26-1.15(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 724.64[M+H]+。
按化合物83的合成制备化合物85。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),7.57(s,1H),7.27(d,J＝8.6Hz,1H),6.95(d,J＝1.6Hz,1H),6.90-6.84(m,3H),6.14(d,J＝8.0Hz,1H),4.38-4.33(m,1H),3.82(s,3H),3.54(s,2H),3.45(s,3H),2.86-2.82(m,4H),2.73-2.57(m,4H),2.05(s,9H),1.93-1.89(m,1H),1.70-1.62(m,4H),1.24-1.07(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 728.57[M+H]+
按化合物83的合成制备化合物86。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.21(s,1H),7.56(s,1H),7.26(d,J＝8.7Hz,1H),6.90-6.84(m,2H),6.75-6.713(m,2H),6.14(d,J＝7.9Hz,1H),4.36-4.34(m,1H),3.82(s,3H),3.49(s,2H),3.45(s,3H),2.86-2.54(m,8H),2.07(s,7H),1.96-1.85(m,3H),1.65(t,J＝14.6Hz,4H),1.22-1.01(m,6H).LC-MS(ES+):m/z 712.74[M+H]+。
按化合物83的合成制备化合物87。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.48(s,1H),9.25(s,1H),8.76(d,J＝6Hz,1H),7.97(s,1H),7.60(d,J＝5.6Hz,1H),7.26(d,J＝8.8Hz,1H),7.13-7.11(m,2H),6.91-6.86(m,2H),6.19(bs,1H),4.42-4.38(m,3H),3.95(s,3H),3.61(s,3H),3.50-3.47(m,2H),3.09-3.06(m,2H),2.89-2.61(m,6H),2.11-2.07(m,1H),1.92-1.69(m,5H),1.45-1.40(m,3H),1.32-1.11(m,3H)。LC-MS(ES+):m/z 735.29.[M+H]+
化合物88的合成
步骤-1：向4-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.61mmol)和5-氟-2-硝基-吡啶(0.37g，2.61mmol)在DMF(7mL)中的溶液中加入碳酸氢钠(0.44g，5.22mmol)并将反应混合物于60℃搅拌8小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，用冷水稀释反应混合物并用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目，20-40％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈黄色固体的4-[1-(6-硝基-3-吡啶基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.63g，1.61mmol，收率61.79％，纯度99.88％)。LC-MS(ES+):m/z 413.25[M+Na]+
步骤-2：向4-[1-(6-硝基-3-吡啶基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.63g，1.61mmol)在水(2mL)和THF(8mL)中的溶液中加入锌(844.01mg，12.91mmol)和氯化铵(690.43mg，12.91mmol)。反应混合物于25℃搅拌4小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并真空浓缩滤液。粗产物用水(100mL)稀释并用DCM(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈橙色固体的4-[1-(6-氨基-3-吡啶基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.53g，收率90.85％，纯度99.7％)。LC-MS(ES+):m/z 361.38[M+H]+
步骤-3：向4-[1-(6-氨基-3-吡啶基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.52g，1.44mmol)在DMF(7mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(1.21g，14.42mmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(1.38g，7.21mmol)。反应混合物于70℃搅拌48小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，用冷水(100mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目，20-40％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈浅绿色固体的4-[1-[6-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-3-吡啶基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25g，收率31.75％，86.39％)。LC-MS(ES+):m/z472.32[M+H]+
步骤-4：向4-[1-[6-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-3-吡啶基]-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.23g，0.954mmol)在二噁烷(4mL)中的悬浮液中加入4M的HCl/二噁烷(1mL)溶液和甲醇(0.5mL)(加入甲醇是出于溶解度目的)并将反应混合物于25℃搅拌2小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空除去溶剂，产物加乙醚(5ml×2)研磨，得到为HCl盐并呈灰白色固体的3-[[5-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮(0.20g，收率99.48％，纯度98.96％)。LC-MS(ES+):m/z 372.32[M+H]+
步骤-5：向2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(55mg，0.180mmol)和3-[[5-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮(73.38mg，0.180mmol)在DCE(4mL)和甲醇(4mL)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(44.27mg，0.540mmol)、分子筛(300mg，0.180mmol)和乙酸(16.20mg，0.270mmol)。反应混合物于70℃搅拌5小时。将反应混合物冷却至室温并加入Si-CBH(60mg)。反应混合物于25℃搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，过滤反应混合物，残余物用甲醇洗涤。真空浓缩有机层，粗产物通过RP-制备-HPLC纯化，得到为TFA盐并呈浅黄色固体的3-[[5-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]-2-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮(33.4mg，收率30.34％，纯度99.39％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),8.99(bs,1H),7.86(bs,1H), 7.56(s,2H), 7.22(m,3H),4.67 (bm,1H), 4.37(bs,2H),3.92(s,3H),3.52(s,3H),3.19(m, 6H), 2.73-2.59 (m,4H),2.11(m,8H),1.89-1.75(m,4H),1.52-1.24(m,6H).LC-MS(ES+):m/z 661.59[M+H]+。
按化合物88的合成制备化合物89。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),9.48(s,1H),9.04(bs,1H),8.77(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(bs,2H),7.54(bd,1H),7.33(d,J＝1.2Hz,1H),7.27(s,1H),7.02(bs,1H),4.68(bs,1H),4.42(bd,J＝2.0Hz,2H),3.95(s,3H),3.61(s,3H),3.54-3.51(m,4H),3.32-3.16(m,2H),2.77-2.61(m,4H),2.11(m,2H),1.92-1.77(bd,J＝12.8Hz,2H),1.80(bs,J＝11.6Hz,2H),1.54-1.32(m,6H)；LC-MS(ES+):m/z 684.58[M+H]+
按化合物88的合成制备化合物90。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δδ11.00(s,1H),10.67(s,1H),8.25(s,1H),8.13–7.89(m,2H),7.58(s,2H),7.46(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),7.39(p,J＝1.8Hz,1H),7.02(d,J＝9.6Hz,1H),4.81(d,J＝6.6Hz,0H),4.38(d,J＝4.1Hz,2H),3.55(d,J＝11.2Hz,2H),3.46(s,3H),3.40(d,J＝11.4Hz,2H),3.02(d,J＝11.4Hz,2H),2.91–2.53(m,4H),2.19–1.97(m,8H),1.89(d,J＝13.1Hz,2H),1.79(d,J＝12.5Hz,2H),1.70–1.51(m,2H),1.42(s,2H),1.26(d,J＝22.9Hz,2H)。LC-MS(ES+):m/z 681.6[M+H]+。
化合物91的合成
步骤1：初始将4-溴-2-(三氟甲氧基)苯甲酸(5g，17.54mmol)和N-甲氧基甲胺(1.71g，17.54mmol，021)悬浮在DMF(49.31mL)中，然后于室温依次加入DIPEA(6.80g，52.63mmol，9.17mL)和HATU(6.67g，17.54mmol)并将混合物搅拌48小时。反应完成后，混合物用H2O(25mL)稀释并用EA(50mL×3)萃取，然后用LiCl(5％水溶液，2×50mL)、盐水(1×25mL)洗涤并用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷/EA直至50％)，得到呈固体的4-溴-N-甲氧基-N-甲基-2-(三氟甲氧基)苯甲酰胺。产量5.14g，89％；LC-MS(ES+):m/z 328.1[M+H]+。
步骤2：初始于氩气氛下将4-溴-N-甲氧基-N-甲基-2-(三氟甲氧基)苯甲酰胺(2.65g，8.07mmol)溶解在醚(7.14mL)中并冷却至0℃。然后逐滴加入甲基溴化镁(3M，在Et2O中，4.03mL)，让混合物温热至室温并搅拌48小时。反应完成后，加入饱和氯化铵(10mL)并用EA萃取混合物，然后用盐水和Na2SO4干燥，过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷/EA直至50％)，得到呈固体的1-[4-溴-2-(三氟甲氧基)苯基]乙酮。产量-1.988g，87％；LC-MS(ES+):m/z 284.0[M+H]+。
步骤3：初始将环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(51.70mg，70.66umol)、1-[4-溴-2-(三氟甲氧基)苯基]乙酮(200mg，706.61umol)、双(频哪醇合)二硼(215.32mg，847.93umol)、乙酸钾(208.04mg，2.12mmol，132.51uL)装入到MW小瓶(2-5mL)中，在氩气氛下悬浮于1,4-二噁烷(8.39mL)中，并在MW中于140℃加热40分钟。然后在氩气下向悬浮液中加入4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(134.62mg，386.63umol)以及碳酸钾(2M，2当量)并于120℃重新加热30分钟，然后通过LCMS检查。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用EA/DCM洗涤。然后将滤液浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷/EA直至100％)，得到5-[4-乙酰基-3-(三氟甲氧基)苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(181mg，533.44umol，收率75.49％)。LC-MS(ES+):m/z 340.3[M+H]+。
步骤4：初始将5-[4-乙酰基-3-(三氟甲氧基)苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮(45mg，132.62umol)、异丙醇钛(IV)97+％(113.08mg，397.87umol，118.41uL)和3-[3-氟-4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(91.79mg，198.93umol，022)装入到反应小瓶中并溶解在1,2-DCE(2.99mL)中，然后一次性加入TEA(46.97mg，464.18umol，64.70uL)并让混合物于85℃搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至残余物，经由反相快速柱色谱法纯化(水/MeCN 1:0至1:1，0.1％ TFA)并冻干，得到为TFA盐的产物化合物91。产量-42mg，36％；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.78(s,1H),7.89(d,J＝8.2Hz,1H),7.58(s,1H),7.52(dd,J＝8.1,1.8Hz,1H),7.42(t,J＝1.8Hz,1H),7.13(s,0H),6.70–6.56(m,1H),6.51(d,J＝8.9Hz,1H),4.74(s,1H),4.33(dd,J＝11.8,4.8Hz,1H),3.79(d,J＝11.5Hz,1H),3.47(s,3H),3.36(s,2H),3.21(d,J＝11.4Hz,1H),3.12–2.87(m,2H),2.82–2.52(m,3H),2.06(s,6H),2.01–1.08(m,17H)。LC-MS(ES+):m/z712.7[M+H]+。
按化合物91的合成制备化合物92。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.72(s,1H),9.48(s,1H),8.77(d,J＝5.7Hz,1H),8.03–7.92(m,2H),7.71(dd,J＝8.2,1.8Hz,1H),7.61(t,J＝1.8Hz,1H),7.50(d,J＝5.8Hz,1H),7.09(d,J＝18.7Hz,1H),6.58(d,J＝14.9Hz,1H),6.49(d,J＝8.7Hz,1H),4.80(s,1H),4.31(dd,J＝11.3,4.7Hz,1H),3.81(d,J＝11.8Hz,1H),3.61(s,3H),3.30(t,J＝13.5Hz,4H),3.03(s,1H),2.90–2.54(m,2H),2.12–2.02(m,1H),2.02–0.98(m,16H)。LC-MS(ES+):m/z 735.7[M+H]+。
按化合物91的合成制备化合物93。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.70(s,1H),8.14–7.87(m,2H),7.82–7.49(m,5H),7.06(s,1H),6.53(dd,J＝35.1,11.9Hz,2H),4.79(d,J＝7.5Hz,1H),4.31(dd,J＝11.7,4.8Hz,1H),3.81(d,J＝11.6Hz,1H),3.59(s,3H),3.29(d,J＝12.2Hz,3H),3.04(d,J＝11.2Hz,1H),2.96–2.52(m,5H),2.16–1.61(m,9H),1.61–1.16(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 752.7[M+H]+。
化合物94的合成：
步骤-1：于0℃向4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯94-1(1g，4.97mmol)在CH2Cl2(30mL)中的溶液中加入吡啶(0.629g，7.95mmol)，然后缓慢加入三光气(634.00mg，2.14mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液，10分钟加完。让RM于室温搅拌1小时，同时通过TLC监测。蒸发反应混合物，得到呈黄色半固体的4-氯羰基氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯94-2(1.2g，收率77.84％，基于TLC的纯度85％)。将其用于下一步而无需进一步纯化。
步骤-2：将3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.400g，1.39mmol)在干燥的ACN(40mL)中的溶液冷却至0℃并加入DIPEA(0.540g，4.18mmol)。10分钟后，于0℃加入4-氯羰基氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯94-2(0.367g，1.39mmol)在干燥的ACN(10ml)中的溶液并在加入后让RM于室温搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测。用H2O(50ml)淬灭反应物质并用CH2Cl2(2×70ml)萃取。用盐水(25ml)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并减压蒸发，粗残余物加醚(20ml)研磨，得到呈黄色固体的(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸酯94-4(500mg，收率59.33％，纯度85％)。LC-MS(ES+):m/z514.40[M+H]+514.4
步骤-3：于0℃向(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸酯94-4(0.5g，0.972mmol)在干燥的CH2Cl2(2mL)中的溶液中加入TFA(1.1.g，8.53mmol)。反应混合物缓慢温热至室温并让搅拌2小时，同时通过TLC监测反应。减压除去大多数溶剂，粗化合物通过反相柱色谱法纯化(C18/30g柱子，使用0.1％的甲酸/MeCN:H2O)，得到呈蓝色固体的4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸4-哌啶酯TFA盐94-5(150mg，收率27.75％，纯度95％)。LC-MS(ES+):m/z415.46[M+H]+
步骤-4：向4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸4-哌啶酯94-5(0.1g，0.241mmol)在ACN(20ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.05g)、乙酸(0.022g，0.362mmol)和无水乙酸钠(0.040g，0.482mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.076g，0.241mmol)并将反应混合物于70℃加热3小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(0.070g，1.21mmol)。于室温继续搅拌6小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。6小时后，通过硅藻土床过滤反应物质并浓缩滤液，粗残余物通过制备-HPLC纯化，得到呈灰白色固体的[1-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸酯.TFA盐化合物94(0.010g，收率5.00％，纯度99.56％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.14(s,1H),10.77(s,1H),9.03(d,J＝43.3Hz,1H),8.23(d,J＝3.9Hz,1H),7.63(d,J＝12.8Hz,1H),6.98-6.91(m,4H),6.61-6.59(m,2H),5.88(bs,1H),4.97(bs,1H),4.81-4.79(m,1H),4.30-4.24(m,3H),4.19-3.99(m,2H),3.96(d,J＝3.0Hz,6H),3.62(d,J＝8.3Hz,2H),3.43-3.34(m,2H),3.23-3.20(m,2H),2.99-2.55(m,4H),2.07-1.98(m,4H),1.86-1.84(m,2H),1.72-1.69(m,2H),1.49-1.41(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 712.40[M+H]+。
化合物95的合成：
步骤-1：向5-甲酰基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯95-1(1g，3.83mmol)在甲醇(20mL)中的搅拌溶液中加入硼氢化钠(144.77mg，3.83mmol)并于室温继续搅拌2小时。反应完成(根据TLC)后，真空蒸发挥发物，将残余物溶解在乙酸乙酯(50mL)中并用水(20mL×3)洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并真空浓缩，得到呈灰白色固体的5-(羟甲基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯95-2(1g，92％)。将化合物2用于下一步而无需进一步纯化。1HNMR(400MHz,CDCl3)d 7.24-7.18(m,2H),7.08(d,J＝8.4Hz,1H),4.70(d,J＝3.6Hz,2H),4.59(s,2H),3.68(t,J＝5.6Hz,2H),2.88(t,J＝6.0Hz,2H),1.48(s,9H)。LC-MS(ES+):m/z286.23[M+Na]+
步骤-2：向5-(羟基甲基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯95-2(1g，3.80mmol)在THF(20mL)中的处于0℃的搅拌溶液中加入三苯基膦(2.99g，11.39mmol)，然后逐滴加入在THF(20mL)中的N-溴琥珀酰亚胺(2.70g，15.19mmol，1.29mL)。反应完成(根据TLC)后，用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。粗化合物通过快速柱色谱法纯化(硅胶100-200目，10-20％的石油醚/乙酸乙酯)，得到呈黄色固体的纯5-(溴甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯95-3(800mg，96％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 7.22-7.15(m,2H),7.09(d,J＝7.6Hz,1H),4.58(s,2H),4.49(s,2H),3.72(t,J＝5.6Hz,2H),2.92(t,J＝5.6Hz,2H),1.49(s,9H)。LC-MS(ES+):m/z 286.23[M+H-Boc]+
步骤-3：向3-((4-(3,3-二氟哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(175mg，0.541mmol)在ACN(10ml)中的搅拌溶液中加入DIPEA(104.93mg，0.841mmol，0.14mL)并于室温搅拌15分钟。向反应混合物中加入5-(溴甲基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(211.88mg，0.649mmol)并于80℃继续搅拌3小时，同时通过LCMS监测反应。真空蒸发挥发物，粗化合物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-8％的甲醇/DCM)，得到呈灰色固体的5-[[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-3,3-二氟-1-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯95-5(170mg，54.13％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 10.80(s,1H),7.16(m,2H),7.10(m,1H),7.01(d,J＝8.4Hz,2H),6.63(d,J＝8.4Hz,2H),5.80(d,J＝7.2Hz,1H),4.50(s,2H),4.32-4.26(m,1H),3.59(m,4H),3.05(m,5H),2.78(m,1H),2.59(m,1H),2.45(m,1H),2.19(t,1H),2.11(m,1H),1.98(m,2H),1.72(m,1H),1.43(s,9H)。LC-MS(ES+):m/z 269.51[M+H]+
步骤-4：向5-((4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)-3,3-二氟哌啶-1-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯95-5(150mg，0.263mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(300.77mg，2.64mmol)并于室温搅拌3小时。反应完成(根据LCMS)后，真空蒸发挥发物，残余物与甲苯(10mL×2)共蒸馏并加乙醚研磨，得到呈灰白色固体的3-[4-[3,3-二氟-1-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮95-6(170mg，78.37％)。LC-MS(ES+):m/z 469.46[M+H]+
步骤-5：向3-((4-(3,3-二氟-1-((1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)甲基)哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮95-6(100mg，0.234mmol)和2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛95-7(163.63mg，0.281mmol)在DCE:MeOH(3mL，1:1)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(38.39mg，0.468mmol)和乙酸(14.05mg，0.234mmol，13.38uL)并将反应混合物于75℃搅拌4小时。4小时后，将反应混合物冷却至0℃，加入Siliabond氰基硼氢化物(200mg，234.01umol)并于室温继续搅拌12小时。反应完成(根据LCMS)后，真空蒸发挥发物。粗化合物通过制备HPLC纯化，得到呈灰白色固体的3-[4-[1-[[2-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮化合物95(52mg，23.89％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ14.30(s,1H),10.78(s,1H),9.63(s,1H),8.25(s,1H),7.66(s,1H),7.30(m,2H),7.21(m,6H),6.62(d,J＝8.8Hz,2H),4.46(bs,2H),4.38(bd,J＝4.2Hz,2H),4.28(m,1H),3.96(s,6H),3.63(bs,5H),3.49(s,1H),3.11-2.93(m,6H),2.72(m,1H),2.58(t,1H),2.28(bs,1H),2.04(m,2H),1.88(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z766.3[M+H]+
按化合物95的合成制备化合物96。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.96(s,1H),9.50(d,J＝16.1Hz,2H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),7.91(s,1H),7.58(dd,J＝10.0,6.6Hz,2H),7.48–7.30(m,2H),7.02–6.78(m,4H),6.63(d,J＝8.2Hz,2H),4.70–4.09(m,8H),3.89(s,6H),3.74(s,1H),3.62(s,3H),3.58–3.46(m,1H),3.45–3.07(m,4H),2.82–2.53(m,2H),2.16–2.01(m,1H),1.87(d,J＝13.6Hz,6H)；LC-MS(ES+):m/z 741.8[M+H]+。
按化合物95的合成制备化合物97。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),10.08(s,1H),9.69(s,1H),8.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.69(dq,J＝18.3,8.9,8.4Hz,3H),7.61–7.53(m,3H),7.53–7.29(m,3H),6.94(d,J＝8.1Hz,2H),6.87(s,2H),6.62(dd,J＝11.3,7.7Hz,2H),4.65–4.30(m,6H),4.27(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),3.88(s,6H),3.79–3.68(m,1H),3.60(s,3H),3.50(s,2H),3.39(d,J＝11.1Hz,0H),3.25(dd,J＝22.5,13.8Hz,1H),2.63(ddt,J＝46.4,17.6,4.9Hz,3H),2.08(dt,J＝13.7,4.7Hz,1H),2.01–1.70(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 740.8[M+H]+。
按化合物95的合成制备化合物98。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.84(s,1H),9.43(s,1H),8.24(s,1H),7.66(s,1H),7.56(d,J＝7.6Hz,1H),7.46–7.29(m,2H),7.00(s,2H),6.94(d,J＝8.1Hz,2H),6.63(d,J＝8.1Hz,2H),4.61–4.15(m,8H),3.95(s,6H),3.73(s,1H),3.64(s,3H),3.50(d,J＝11.2Hz,2H),3.39(d,J＝11.7Hz,1H),3.23(d,J＝27.3Hz,4H),2.83–2.53(m,2H),2.18–2.02(m,1H),1.99–1.65(m,5H)。LC-MS(ES+):m/z 730.8[M+H]+。
按化合物95的合成制备化合物99。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.85(s,1H),9.48(s,1H),8.77(d,J＝5.7Hz,1H),7.97(s,1H),7.57(d,J＝5.7Hz,1H),7.34-7.21(m,5H),6.99(d,J＝8.2Hz,2H),6.62(d,J＝8.6Hz,2H),4.62(s,2H),4.55(s,2H),4.29(q,J＝5.4Hz,1H),4.01–3.98(m,2H),3.95(s,3H),3.62(s,6H),3.24-3.10(m,6H),2.78-2.72(m,1H),2.65-2.57(m,1H),2.12-1.93(m,4H)。LC-MS(ES+):m/z 781.51[M+H]+
按化合物95的合成制备化合物100。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.78(s,1H),9.82(s,1H),8.23(s,1H),7.73(s,1H),7.47(d,J＝1.1Hz,1H),7.35-7.28(m,3H),7.23-7.21(m,1H),6.98(d,J＝7.7Hz,2H),6.62(d,J＝8.6Hz,2H),5.55(bs,1H),4.55(s,4H),4.35-4.26(m,1H),4.02(s,3H),3.83-3.78(m,1H),3.63(s,6H),3.33-2.70(m,6H),2.69-2.54(m,2H),2.39-1.75(m,5H).LC-MS(ES+):m/z 770.59[M+H]+。
按化合物95的合成制备化合物101。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),8.14(s,1H),7.99–7.84(m,2H),7.72(d,J＝11.1Hz,2H),7.27(ddt,J＝31.1,16.0,7.6Hz,7H),7.12(d,J＝7.7Hz,2H),6.99(d,J＝8.2Hz,2H),6.63(d,J＝8.3Hz,2H),4.60(s,2H),4.49(s,3H),4.29(t,J＝4.9Hz,2H),3.64(s,3H),3.41(d,J＝6.9Hz,2H),3.23(s,1H),2.94(t,J＝6.4Hz,3H),2.85–2.53(m,2H),2.14–1.62(m,3H)。LC-MS(ES+):m/z 790.7[M+H]+。
按化合物95的合成制备化合物102。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.27(s,1H),10.78(s,1H),10.03(bs,1H),9.35(bs,1H),8.24(s,1H),7.66(s,1H),7.22(m,4H),6.64(d,J＝8.4Hz,2H),6.41(d,J＝2.8Hz,1H),6.15(s,1H),5.67(s,0.33H),4.43-414(m,10H),3.97(s,6H),3.64(s,3H),3.44(m,4H),3.04(s,2H),2.73-2.67(m,1H),2.60(m,1H),2.10-2.06(m,1H),1.97-1.75(m,5H)；LC-MS(ES-):m/z 717.58[M-H]-。
按化合物95的合成制备化合物103。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ14.28(s,1H),10.78(s,1H),9.77(s,1H),8.25(s,1H),7.66(s,1H),7.46(bs,1H),7.09(m,5H),6.63(d,J＝8.4Hz,2H),4.55(m,1H),4.42(m,4H),4.31(m,1H),3.96(s,6H),3.70(m,5H),3.51(m,2H),3.01(m,6H),2.73(m,1H),2.60(m,1H),2.11(m,2H),1.89(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 772.1[M+H]+
化合物104的合成：
步骤-1：于0℃向5-甲酰基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(4g，15.31mmol)在甲醇(60mL)中的搅拌溶液中加入硼氢化钠(868.66mg，22.96mmol)并将混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测反应。反应完成(根据TLC)后，除去溶剂，残余物加水(30mL)研磨并干燥，得到呈无色固体的5-(羟基甲基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯104-2。化合物104-2不经进一步纯化即用于下一步。
步骤-2：向5-(羟基甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯104-2(3.7g，14.05mmol)在THF(60mL)中的处于-10℃的搅拌溶液中加入三苯基膦(11.06g，42.15mmol)并搅拌10分钟。向反应混合物中逐滴加入在THF(30mL)中的NBS(10.00g，56.20mmol)并于室温继续搅拌3小时，同时通过TLC监测反应。反应完成后，用碳酸氢钠水溶液(100mL)淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。收集的有机层用水(100mL)洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤并真空浓缩。粗产物通过过柱纯化(硅胶100-200目，10％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈无色固体的5-(溴甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯104-3(2.5g，收率54.54％)。
步骤-3：向5-(溴甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯104-3(2.4g，7.36mmol)在DCM(100mL)中的处于0℃的搅拌溶液中加入三苯基膦(2.12g，8.09mmol)并于室温继续搅拌16小时。反应完成后，真空蒸发溶剂。残余物加乙醚(50mL)研磨，得到固体。过滤固体并且不经进一步纯化即用于下一步。
步骤-4：向哌啶-4-酮104-5(2.40g，17.72mmol，021)在DMF(25mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(3.13g，37.21mmol)，然后加入1-氟-4-硝基-苯104-6(2.5g，17.72mmol)并将反应混合物于80℃搅拌12小时，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，用冷水(100mL)淬灭反应混合物并搅拌30分钟，得到黄色固体。过滤固体，用水洗涤并干燥，得到呈黄色固体的所需产物1-(4-硝基苯基)哌啶-4-酮104-7(2g，收率41.15％，纯度80.29％)。LC-MS(ES+):m/z 221.18(M+H)+
步骤-5：向1-(4-硝基苯基)哌啶-4-酮104-7(0.7g，3.18mmol)和((2-(叔丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)甲基)三苯基溴化鏻104-4(1.87g，3.18mmol)在DCM(10mL)中的处于0℃的搅拌溶液中加入叔丁醇钾(0.713g，6.36mmol)并于室温继续搅拌16小时，同时通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空蒸发溶剂，残余物用乙酸乙酯(50mL)稀释并用水(50mL)洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到粗品。该粗产物通过过柱纯化(Davisil二氧化硅，0-30％的乙酸乙酯/石油醚)，得到5-[[1-(4-硝基苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.6g，收率41.74％，纯度99.4％)。LC-MS(ES+):m/z 472.35(M+Na)+
步骤-6：将5-[[1-(4-硝基苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯104-8(650mg，1.45mmol)在甲醇(10mL)和乙酸乙酯(10mL)中的悬浮液于氮气氛下脱气5分钟。向反应混合物中加入10％钯碳(153.87mg，1.45mmol)并于H2气氛(气球)下搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用MeOH洗涤。减压蒸发滤液并通过过柱(Davisil二氧化硅，0-40％的乙酸乙酯/石油醚)纯化粗产物，得到5-[[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯104-9(500mg，收率78.75％，纯度96％)。LC-MS(ES+):m/z 422.51(M+H)+
步骤-7：向5-[[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯104-9(400mg，0.948mmol)在DMF(6mL)中的搅拌溶液中加入NaHCO3(239.12mg，2.85mmol)并于60℃继续搅拌24小时。反应完成后，用乙酸乙酯(25mL)稀释反应混合物，通过硅藻土床过滤并用乙酸乙酯(10mL)洗涤。用盐水(40mL)洗涤滤液。用Na2SO4干燥有机层并浓缩，得到粗品。该粗品通过过柱(davisil二氧化硅，40％的乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(350mg，收率68.56％，纯度99％)。LC-MS(ES+):m/z 533.64(M+H)+
步骤-8：于0℃向5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯104-11(130mg，0.244mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(0.19mL，2.44mmol)并将反应混合物于室温搅拌3小时。反应完成后，减压蒸发挥发物，与甲苯(15ml×2)共蒸馏并加乙醚(15mL)研磨，得到3-[4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮104-12(140mg，收率85.10％，纯度98％)。LC-MS(ES+):m/z 433.25(M+H)+
步骤-9：将2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(60mg，0.191mmol)、3-[4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(126.51mg，0.191mmol)、无水乙酸钠(47.13mg，0.574mmol)的搅拌溶液于75℃搅拌4小时。向反应混合物中加入SiliaBond氰基硼氢化物(CBH)(150mg)并于室温继续搅拌12小时。反应完成后，真空蒸发挥发物，粗化合物通过制备HPLC纯化，得到呈绿黄色固体的3-[4-[4-[[2-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]甲基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA(85mg，收率50.74％，纯度96.47％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.82(s,2H),9.64(s,1H),8.24(s,1H),7.66(s,1H),7.34(m,8H),6.77(d,J＝8.8Hz,2H),6.37(s,1H),4.45(m,5H),3.96(s,6H),3.88(s,8H),3.17(m,3H),2.78(m,1H),2.59(m,3H),2.09(m,1H),1.94(m,4H),1.67(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 730.69(M+H)+
化合物105的合成
步骤-1：向哌啶-4-酮(HCl盐)(1.87g，13.79mmol)在DMF(15mL)中的搅拌溶液中加入碳酸钾(6.52g，47.14mmol)并搅拌10分钟。向该溶液中加入1,2-二氟-4-硝基-苯(2.5g，15.71mmol)并将反应混合物于80℃搅拌12小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，用冰冷水淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(100×2)萃取。收集有机层，用盐水溶液(100mL×2)洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并真空浓缩。粗物质通过柱色谱法纯化(Devisil二氧化硅，5-15％的EtOAc/石油醚)，得到1-(2-氟-4-硝基-苯基)哌啶-4-酮105-3(2g，收率44.31％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 8.03-8.00(m,1H),7.98(dd,J＝2.8Hz,1H),7.00(t,J＝8.8Hz,1H),3.67(t,J＝6.4Hz,4H),2.67(t,J＝6.0Hz,4H)。LC-MS(ES+):m/z 239.1[M+H]+
步骤-2：于0℃向1-(2-氟-4-硝基-苯基)哌啶-4-酮105-3(0.5g，2.10mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入(2-(叔丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)甲基)三苯基溴化鏻(1.24g，2.10mmol)，然后加入叔丁醇钾(0.47g，4.20mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空除去溶剂。向残余物中加水并用乙酸乙酯萃取粗产物。用硫酸钠干燥有机层，过滤并真空浓缩。粗品用柱色谱法纯化(Devisil二氧化硅，5-30％的EtOAc/石油醚)，得到呈黄色固体的5-[[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯105-4(0.53g，收率52.07％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)d 7.99-9.96(m,1H),7.93(dd,J＝2.8Hz,12.8Hz,1H),7.17(d,J＝8.0Hz,1H),7.04(t,J＝7.6Hz,2H),6.93(t,J＝8.8Hz,1H),6.32(s,1H),4.59(s,2H),3.66(m,2H),3.44(t,J＝5.6Hz,2H),3.29(t,J＝5.6Hz,2H),2.75(t,J＝5.6Hz,2H),2.57(t,J＝5.2Hz,2H),2.48(t,J＝5.2Hz,2H),1.49(s,9H)；LC-MS(ES+):m/z 490.28[M+H]+
步骤-3：对5-[[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯105-4(0.53g，1.13mmol)在甲醇(5mL)和乙酸乙酯(5ml)中的搅拌混合物脱气10分钟，然后加入钯碳(10％)(0.53g，1.13mmol)。再次对反应混合物脱气并于室温在氢气下(气球压力下)充气搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用甲醇和乙酸乙酯洗涤。真空除去滤液，得到呈无色胶状固体的5-[[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯105-5(0.29g，收率49.10％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 7.14(t,J＝7.2Hz,1H),7.02(m,2H),6.80(t,J＝9.2Hz,1H),6.43-6.36(m,2H),4.57(s,2H),3.65(bs,2H),3.51(bs,2H),3.26(bd,J＝12.0Hz,2H),2.82(bt,J＝5.6Hz,2H),2.59-2.49(m,4H),1.72(d,J＝10.0Hz,2H),1.49(s,9H)；LC-MS(ES+):m/z 440.28[M+H]+
步骤-4：向5-[[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯105-5(0.3g，0.63mmol)在DMF(4.5mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(0.23g，2.73mmol)。反应混合物于室温搅拌10分钟。向反应混合物中加入3-溴哌啶-2,6-二酮7(0.262g，1.36mmol)并在密封管中于65℃搅拌24小时。再次向反应混合物中加入1当量的3-溴哌啶-2,6-二酮6(0.128g，0.63mmol)并在密封管中于65℃搅拌24小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，用冰水淬灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到粗品。该粗品通过柱色谱法纯化，得到呈灰白色固体的5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯105-7(0.28g，收率73.02％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 7.88(bs,1H),7.14(t,J＝7.2Hz,1H),7.02(m,2H),6.88(t,J＝10.0Hz,1H),6.44-6.38(m,2H),4.57(s,2H),4.01(m,1H),3.65(bs,2H),3.27(bd,J＝11.2Hz,2H),2.96(s,1H),2.85(s,1H),2.88-2.78(m,3H),2.69-2.50(m,5H),1.73(d,2H),1.49(s,9H)；LC-MS(ES+):m/z 551.82[M+H]+
步骤-5：于室温向5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯105-7(0.14g，254.24umol)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(144.95mg，1.27mmol，97.94μL)。反应混合物于室温搅拌3小时。通过LCMS监测反应进度。反应完成后，真空除去溶剂。粗品与甲苯和乙腈共蒸馏并干燥，得到为TFA盐并呈绿色固体的3-[3-氟-4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮105-8(0.115g，收率63.98％)。LC-MS(ES+):m/z 451.41[M+H]+
步骤-6：向2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛9(60mg，0.138mmol)和3-[3-氟-4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮105-8(113mg，0.166mmol)在甲醇(3mL)和DCE(3mL)中的搅拌溶液中加入乙酸(8.35mg，0.138mmol)和无水乙酸钠(34.20mg，0.417mmol)并将反应混合物于75℃搅拌4小时。于0℃向反应混合物中加入SiliaBond氰基硼氢化物(CBH)(200mg)并于室温继续搅拌12小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空蒸发挥发物，粗化合物通过制备-HPLC纯化，得到为TFA盐并呈灰白色固体的3-[4-[4-[[2-[[2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]甲基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(66.8mg，收率54.91％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.26(s,1H),10.79(s,1H),9.79(s,1H),8.23(s,1H),7.73(s,1H),7.47(d,J＝1.2Hz,1H),7.35(s,1H),7.19-7.09(m,3H),6.97(bs,1H),6.56(d,J＝14.8Hz,1H),6.45(d,J＝7.6Hz,1H),4.55(d,J＝10.4Hz,4H),4.29(m,1H),4.01(s,3H),3.78(m,2H),3.63(s,5H),3.22-3.09(m,4H),2.72-2.67(m,3H),2.59(m,3H),2.08(m,1H),1.88(m,1H),1.69(m,5H)；LC-MS(ES+):m/z 752.61[M+H]+
按化合物105的合成制备化合物106。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.34(s,1H),10.79(s,1H),9.58(bs,1H),8.24(s,1H),7.66(s,1H),7.26-6.96(m,6H),6.56(d,J＝14.8Hz,1H),6.46(d,J＝8.8Hz,1H),4.44(d,J＝4.4Hz,2H),4.39(d,J＝4.0Hz,2H),4.30(m,1H),3.95(s,6H),3.63(s,3H),3.36-3.04(m,8H),2.75-2.67(m,1H),2.59(m,3H),2.09(m,1H),1.91-1.89(m,1H),1.75-1.50(m,5H)；LC-MS(ES+):m/z 748.62[M+H]+
按化合物105的合成制备化合物107。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 10.76(s,1H),9.44(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),8.25(s,1H),7.55(d,J＝5.6Hz,1H),7.17(s,1H),7.13(s,1H),7.06(t,J＝7.2Hz,1H),6.92(d,J＝7.2Hz,1H),6.89(d,J＝7.6Hz,1H),6.81(t,J＝9.2Hz,1H),6.50(dd,J＝2.4Hz,14.8Hz,1H),6.40(dd,J＝8.8Hz,1H),5.77(d,J＝7.6Hz,1H),4.26(m,1H),3.89(s,3H),3.78(s,2H),3.67(s,2H),3.59(s,3H),3.09(d,J＝10.8Hz,2H),2.79-2.67(m,5H),2.80(m,1H),2.47(m,4H),2.07(m,1H),1.88-1.75(m,1H),1.63-1.52(m,3H),1.38(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 763.40[M+H]+
按化合物105的合成制备化合物108。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.59(s,1H),7.54(s,1H),7.35–7.13(m,3H),7.08(d,J＝7.4Hz,1H),6.93–6.82(m,2H),6.69(s,2H),4.53–4.27(m,5H),3.87(s,6H),3.74–3.61(m,1H),3.48(s,4H),3.20–2.93(m,2H),2.86–2.66(m,3H),2.57(d,J＝15.6Hz,4H),2.08(d,J＝9.3Hz,8H),1.89(qd,J＝12.3,4.8Hz,1H),1.61(dd,J＝20.0,12.3Hz,3H),1.44–1.19(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 786.8[M+H]+。
按化合物105的合成制备化合物109。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 10.78(s,1H),9.44(s,1H),7.58(s,1H),7.26-6.96(m,6H),6.55(bd,J＝14.8Hz,1H),6.45(bd,J＝7.6Hz,1H),4.53(m,3H),4.28(bd,J＝6.8Hz,1H),3.92(s,3H),3.47(m,7H),3.47-3.06(m,4H),2.76-2.67(m,1H),2.59(m,3H),2.08(d,6H),2.08(m,1H),1.90-1.85(m,1H),1.72-1.64(m,3H),1.49(bs,2H).LC-MS(ES+):m/z740.54[M+H]+
化合物110的合成：
步骤-1：在惰性气氛下向110-2(190.70mg，0.747mmol)和1-1(0.3g，0.747mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.8mL)，然后加入PyBOP(0.7785g，1.50mmol)。然后让反应混合物搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS分析监测。反应完成后，用H2O(20mL)淬灭并用EtOAc(2×20mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，并减压蒸发。粗品用乙醚洗涤，得到呈淡绿色固体的化合物110-3(0.050g，纯度89.5％)。LC-MS(ES+):m/z 525.39[M+H]+
步骤-2：在惰性气氛下向110-3(50mg，0.095mmol)在DCM(1mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.5mL)。然后，将反应混合物搅拌2小时，同时通过TLC监测。反应完成后，减压蒸发溶剂，所得固体与甲苯共蒸馏，然后用乙醚洗涤，得到呈棕色固体的化合物110-4TFA盐(0.043g，收率66.19％，纯度79％，061)，其原样用于下一步。LC-MS(ES+):m/z 425.49[M+H]+
步骤-3：向110-4(43mg，0.007mmol，061)在DCE(5mL)和甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(13.10mg，0.159mmol)、乙酸(0.01mL)并搅拌5分钟。然后，加入分子筛(50mg)，接着加入化合物-5(37.5mg，0.119.76mmol)并让于70℃加热4小时，然后冷却至室温，加入Si-CBH(86mg)并继续搅拌16小时，同时通过LCMS监测。完成后，通过硅藻土垫过滤反应混合物，用DCM洗涤，并减压浓缩滤液。粗品通过制备-HPLC纯化，得到呈棕色固体的3-[4-[1-[(3aR,6aS)-2-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-3,3a,4,5,6,6a-六氢-1H-环戊[c]吡咯-5-羰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(10.6mg，收率15.72％，纯度99％，061)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝14.3(s,1H),10.76(s,1H),9.83(s,2H),9.47(s,1H),8.22(s,1H),7.62(d,J＝4.4Hz,1H),6.96-6.92(m,4H),6.61-6.59(m,2H),4.61-4.49(m,1H),4.32-4.28(m,2H),4.25-4.24(m,1H),3.96(m,6H),3.62-3.61(m,3H),3.37-3.25(m,2H),3.16-3.13(m,2H),3.09-2.96(m,2H),2.79-2.77(m,2H),2.67-2.60(m,3H),2.07-2.00(m,4H),1.90-1.61(m,4H),1.54-1.02(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 722.58[M+H]+。
化合物111的合成
步骤-1：向化合物哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.27g，26.85mmol)在DMF(50mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(25.95g，40.27mmol)并搅拌15分钟，然后加入1,2-二氟-4-硝基-苯(5g，26.85mmol)。将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测。完成后，用冰片淬灭反应物质并过滤沉淀的固体，真空干燥，得到呈黄色固体的4-(2-氟-4-硝基-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯111-3(8.2g，收率92.01％，纯度98％)。LC-MS(ES+):m/z326.14[M+H]+
步骤-2：向4-(2-氟-4-硝基-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯111-3(5g，15.37mmol)在甲醇(120mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(1.847g，15.37mmol)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌5小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤并浓缩滤液，得到呈黄色固体的4-(4-氨基-2-氟-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯111-4(3.9g，纯度80％)。LC-MS(ES+):m/z 296.17[M+H]+
步骤-3：向4-(4-氨基-2-氟-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯111-4(4.5g，15.24mmol)在DMF(30mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮111-5(8.78g，45.71mmol)、NaHCO3(12.80g，152.36mmol)并于85℃搅拌48小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。48小时后，用冰冷水(250ml)淬灭反应并用EtOAc(3×250mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩。粗化合物通过(硅胶100-200目，并用50％的乙酸乙酯/石油醚-纯乙酸乙酯洗脱产物)柱色谱法纯化，得到呈紫色固体的4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯111-6(3.5g，收率56.52％)。LC-MS(ES+):m/z 407.20[M+H]+
步骤-4：向化合物-6(2g，4.92mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1.5mL)并将反应混合物于28℃搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS分析监测。反应完成后，减压浓缩反应物质。所得固体与甲苯共蒸馏并用乙醚洗涤固体，干燥，得到呈淡色固体的(1.3g，收率55％)。LC-MS(ES+):m/z 307.54[M+H]+
步骤-5：在惰性气氛下向化合物-7(1.3g，4.24mmol)在ACN(15mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(5.17mL)，然后加入化合物-8(0.823g，4.24mmol)。然后让反应混合物于70℃搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS分析监测。反应完成后，减压浓缩，用H2O(20mL)淬灭并用EtOAc(2×20mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，并减压蒸发。粗品通过柱色谱法(davisil)使用0-50％的EA/PE纯化，得到呈灰白色固体的化合物111-9(0.61，纯度97％)。LC-MS(ES+):m/z 421.60[M+H]+
步骤-6：在惰性气氛下向111-9(0.6g，1.43mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.5mL)。然后，将反应混合物于40℃搅拌3小时，同时通过TLC监测。反应完成后，减压蒸发溶剂，所得固体与甲苯共蒸馏，然后用乙醚洗涤，得到呈淡绿色固体的化合物111-10(0.45g，收率52.74％，纯度80％，061)，其原样用于下一步。LC-MS(ES+):m/z 365.35[M+H]+
步骤-7：在惰性气氛下向111-10(0.45g，1.24mmol)和化合物-11在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(1.5mL)。然后，加入pyBOP(0.64g，1.24mmol)，将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测。反应完成后，用冰水淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用盐水溶液洗涤有机层，合并有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，粗品通过柱色谱法使用(100-200目硅胶)纯化，得到呈淡黄色固体的111-12(0.6g，收率77.99％，纯度90％)。LC-MS(ES+):m/z 559.55[M-H]+
步骤-8：向111-12(0.4g，0.713mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.27mL)并将反应混合物于28℃搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，将反应混合物浓缩至干并与甲苯(2×20mL)共蒸馏，最后用乙醚洗涤，得到呈淡绿色固体的111-13(0.25g，收率54.28％，纯度89％，061)。LC-MS(ES+):m/z 461.53[M-H]+
步骤-9：向111-13(0.15g，0.269mmol)在DCE(5mL)和甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(44mg，0.539mmol)、乙酸(0.01mL)并搅拌5分钟。然后，加入2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(84mg，0.269mmol)并让于70℃加热4小时，然后冷却至室温，加入SBCBH(0.15mg)并继续搅拌16小时。反应完成(根据LCMS)后，通过硅藻土垫过滤反应混合物，用DCM洗涤，并减压浓缩滤液。粗品通过制备HPLC纯化，得到3-[4-[4-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-2,2-二甲基-哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(20mg，收率8.48％，纯度99.63％，061)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝14.3(s,1H),10.76(s,1H),9.78(s,2H),8.24(s,1H),7.65(s,1H),7.21-7.00(m,1H),6.89-6.85(m,1H),6.55(d,J＝2Hz,1H),6.50(d,J＝8.4Hz,1H),4.29-4.25(m,5H),3.97(s,6H),3.63(s,3H),3.57-3.24(m,6H),3.29-3.08(m,8H),2.69-2.66(m,1H),2.59-2.54(m,1H),2.08-2.07(m,1H),1.88-1.84(m,1H),1.61-1.49(m,6H)。LC-MS(ES+):m/z 758.58[M+H]+
化合物112的合成：
步骤-1：于0℃向4-(甲基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯112-1(1g，4.67mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液中逐滴加入吡啶(0.553g，7.00mmol)并搅拌10分钟。在相同的温度下缓慢加入三光气(0.692g，2.33mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液并搅拌1小时，同时通过TLC监测反应。蒸发反应混合物，得到呈黄色半固体的4-[氯羰基(甲基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯112-2(1g，2.71mmol，收率58.08％，纯度75％)。将其用于下一步而无需进一步纯化。
步骤-2：将3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮1-1(0.5g，1.74mmol)在DCM(20mL)中的溶液冷却至0℃并加入DIPEA(0.674g，5.22mmol)。10分钟后，于0℃加入4-[氯羰基(甲基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯112-2(0.481g，1.74mmol)在干燥的CH2Cl2中的溶液并于室温搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。用H2O(10ml)淬灭反应物质并用CH2Cl2(2×50ml)萃取。用盐水(25ml)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并减压蒸发，得到呈黄色固体的4-[[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-羰基]-甲基-氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯112-4(0.6g，0.796mmol，收率65.5％，纯度98.46％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 10.87(s,1H),6.95(d,J＝8.4Hz,2H),6.60(d,J＝8.4Hz,2H),5.65(d,J＝7.6Hz,1H),4.27-4.23(m,1H),4.03–4.00(m,2H),3.59-3.57(m,3H),3.39(dd,2H),2.76-2.73(m,6H),2.67(s,3H),2.13-2.10(m,1H),2.09-1.88(m,1H),1.71-1.68(d,2H),1.58-1.52(m,6H),1.40(s,9H)。LC-MS(ES+):m/z528.39[M+H]+
步骤-3：于0℃向4-[[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-羰基]-甲基-氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯112-4(0.45g，0.852mmol)在干燥的CH2Cl2(2mL)中的溶液中加入TFA(0.972.g，8.53mmol)。将反应混合物缓慢温热至室温并让搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。减压除去大多数溶剂并与干燥的CH2Cl2共蒸馏。粗化合物通过反相柱色谱法纯化(MeCN在0.1％的甲酸中)，得到呈棕色固体的4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-N-甲基-N-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酰胺.TFA盐112-5(0.15g，0.268mmol，收率31.52％，纯度97.06％)。LC-MS(ES+):m/z 428.39[M+H]+
步骤-4：向4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-N-甲基-N-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酰胺112-5(0.1g，0.233mmol)的搅拌溶液中加入分子筛(0.05g)、AcOH(0.014g，0.233mmol)和无水乙酸钠(0.057g，0.701mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛6(0.070g，0.233mmol)并将反应混合物于70℃加热4小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(67.78mg,1.17mmol)。于室温继续搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。16小时后，过滤反应物质，浓缩并通过制备-HPLC纯化，得到呈灰白色固体、为TFA盐的4-[4[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-N-[1-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]-N-甲基-哌啶-1-甲酰胺化合物112(35.8mg，0.42mmol，收率18.11％，纯度97.84％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.34(s,1H),10.77(s,1H),9.16(s,1H),8.24(s,1H),7.70(s,1H),7.26–7.22(m,2H),6.95(d,J＝8.5Hz,2H),6.61(d,J＝8.5Hz,2H),4.28–4.25(m,3H),4.02(s,3H),3.79(t,J＝11.5Hz,1H),3.62 -3.59(m,5H),3.26–3.23(m,5H),2.82 -2.73(m,6H),2.63 -2.61(m,1H),2.11-2.00(m,3H),1.88 -1.80(m,3H),1.70(d,J＝11.2Hz,2H),1.51(q,J＝11.1Hz,2H)。LC-MS(ES+):m/z 713.51[M+H]+
按化合物112的合成制备化合物113。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.59(s,1H),8.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.87(d,J＝8.0Hz,1H),7.81–7.68(m,1H),7.68–7.45(m,5H),6.96(d,J＝8.2Hz,2H),6.62(d,J＝8.2Hz,2H),4.46(s,2H),4.26(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.83(d,J＝12.7Hz,1H),3.59(s,5H),3.49(d,J＝11.2Hz,2H),3.28(s,2H),2.74(d,J＝25.1Hz,6H),2.57(dd,J＝17.8,4.5Hz,2H),2.28–1.95(m,3H),1.86(dd,J＝12.3,4.3Hz,3H),1.71(d,J＝12.4Hz,2H),1.60–1.40(m,2H)。LC-MS(ES+):m/z 759.7[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物114。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.55(s,1H),8.01(dd,J＝9.4,2.8Hz,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),7.77–7.51(m,5H),6.96(d,J＝8.2Hz,2H),6.62(d,J＝8.3Hz,2H),4.46(s,2H),4.26(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.79(d,J＝13.0Hz,1H),3.60(s,5H),3.48(d,J＝11.4Hz,2H),3.27(s,2H),2.74(d,J＝24.6Hz,6H),2.57(dd,J＝17.6,4.3Hz,2H),2.19–1.95(m,3H),1.86(dd,J＝12.7,3.8Hz,3H),1.71(d,J＝12.5Hz,2H),1.51(q,J＝12.4,12.0Hz,2H)。LC-MS(ES+):m/z 777.8.[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物115。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.49(s,1H),9.07(s,1H),8.77(d,J＝5.8Hz,1H),7.98(s,1H),7.57(d,J＝5.8Hz,1H),7.33(d,J＝1.5Hz,1H),7.27(d,J＝1.6Hz,1H),6.96(d,J＝8.5Hz,2H),6.62(d,J＝8.4Hz,2H),4.43(d,J＝4.1Hz,2H),4.27(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.96(s,3H),3.82(d,J＝12.1Hz,1H),3.69–3.48(m,8H),3.36(p,J＝11.5Hz,2H),2.86–2.55(m,8H),2.09(dd,J＝13.1,4.1Hz,2H),1.99–1.77(m,3H),1.71(d,J＝12.4Hz,2H),1.52(q,J＝12.1Hz,2H)。LC-MS(ES+):m/z 740.8[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物116。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.53(s,1H),8.12(s,1H),7.85(d,J＝1.9Hz,2H),7.70(d,J＝11.1Hz,2H),6.95(d,J＝8.3Hz,2H),6.62(d,J＝8.3Hz,2H),4.43(s,2H),4.26(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.90–3.72(m,1H),3.62(s,6H),3.46(d,J＝11.5Hz,2H),3.26(s,2H),2.89–2.64(m,7H),2.64–2.53(m,1H),2.20–1.92(m,3H),1.87(tt,J＝13.1,5.3Hz,3H),1.70(d,J＝12.4Hz,2H),1.51(td,J＝13.8,10.2Hz,2H)。LC-MS(ES+):m/z749.8[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物117。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.78(s,1H),8.91(s,1H),8.21(s,1H),7.71(s,1H),7.46(s,1H),7.35(s,1H),6.95(d,J＝7.6Hz,2H),7.09(s,1H),6.61(d,J＝7.6Hz,2H),4.40-4.39(m,2H),4.28-4.24(m,1H),3.97(s,6H),3.49-3.33(m,9H),2.77-2.70(m,6H),2.69-2.60(m,1H),2.11-2.06(m,2H),1.88-1.87(m,3H),1.72-1.69(m,2H),1.55-1.50(m,2H),1.54(m,3H),1.27-1.22(m,2H).LC-MS(ES+):m/z 729.59[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物118。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.36(s,1H),10.80(s,1H),9.03(s,1H),8.22(s,1H),7.72(s,1H),7.47(d,J＝7.2Hz,1H),7.36(d,J＝6.0Hz,1H),7.24(bs,1H),6.55(d,J＝14.7Hz,1H),6.46(d,J＝8.2Hz,1H),4.58-4.51(m,1H),4.40(bs,2H),4.29(d,J＝7.6Hz,1H),4.04(d,J＝3.6Hz,3H),3.62(s,3H),3.40-2.55(m,14H),2.18-2.00(m,3H),1.88-1.66(m,7H).LCMS(ES+):m/z；747.31[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物119。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.34(bs,1H),8.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.77(t,J＝7.2Hz,1H),7.66-7.58(m,3H),7.11(d,J＝7.2Hz,2H),6.97(d,J＝8.4Hz,2H),6.62(d,J＝8.8Hz,2H),5.68(bs,1H),4.50-4.24(m,3H),3.95(s,3H),3.81(m,1H),3.63-3.49(m,5H),3.52(m,2H),3.17(m,2H),2.83-2.69(m,6H),2.60(m,2H),2.11-2.01(m,3H),1.88-1.82(m,3H),1.72-1.69(m,2H),1.56-1.50(m,2H).LCMS(ES+):m/z；723.57[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物120。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ14.28(bs,1H),10.91(s,1H),8.92(bs,1H),8.21(s,1H),7.71(s,1H),7.46(d,J＝1.2Hz,1H),7.35(s,1H),7.17(d,J＝8.8Hz,2H),6.95(d,J＝8.8Hz,2H),5.17(q,J＝5.2Hz,10.8Hz,1H),4.40(d,J＝4.0Hz,2H),4.03(s,3H),3.82(t,J＝11.2Hz,1H),3.62(m,4H),3.42(m,4H),2.85(m,8H),2.18(m,4H),1.83(dd,J＝10.4Hz,4H),1.56(m,2H)。LCMS(ES+):m/z；730.6[M+H]+
按化合物112的合成制备化合物121。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),8.93(s,1H),8.44–8.27(m,1H),7.86–7.67(m,1H),7.67–7.53(m,2H),7.28(dd,J＝20.6,1.5Hz,2H),7.07–6.83(m,2H),6.62(d,J＝8.2Hz,2H),4.43(d,J＝4.6Hz,2H),4.26(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.96(s,3H),3.82(d,J＝8.2Hz,1H),3.70–3.48(m,6H),3.38(q,J＝11.9Hz,2H),2.93–2.65(m,6H),2.60(s,1H),2.54(s,4H),2.08(tt,J＝11.9,5.8Hz,2H),1.85(td,J＝12.4,4.4Hz,3H),1.75–1.65(m,2H),1.52(dd,J＝12.2,3.7Hz,2H)。LCMS(ES+):m/z；739.1[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物122。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.56(s,1H),9.48(s,1H),8.76(d,J＝5.7Hz,1H),7.94(s,1H),7.89(d,J＝8.0Hz,1H),7.68(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),7.61(t,J＝1.8Hz,1H),7.46(d,J＝5.7Hz,1H),6.99–6.86(m,2H),6.61(d,J＝8.5Hz,2H),4.46(s,2H),4.26(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.80(d,J＝11.0Hz,1H),3.61(s,5H),3.48(d,J＝11.5Hz,2H),3.27(s,2H),2.88–2.54(m,7H),2.12–1.95(m,3H),1.88(td,J＝12.5,4.5Hz,3H),1.71(d,J＝12.5Hz,2H),1.52(q,J＝13.0,11.4Hz,2H),1.24(s,1H)。LCMS(ES+):m/z；760.7[M+H]+。
按化合物112的合成制备化合物123。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.38-1.48(m,1H)；1.56-1.90(m,5H)；2.05-2.18(m,2H)；2.52-2.62(m,2H)；2.68-2.78(m,2H)；2.84-2.90(m,1H)；2.87(s,3H)；2.96-3.04(m,1H)；3.10-3.20(m,1H)；3.60-3.90(m,9H)；4.20-4.40(m,2H)；6.62(d,J＝8.4Hz,2H)；6.96(d,J＝8.4Hz,2H)；7.43(s,1H)；7.50-7.67(m,4H)；7.72(d,J＝8.0Hz,1H)；8.00(dd,J1＝2.8Hz,J2＝9.2Hz,1H)；10.78(s,1H).LCMS(ES+):m/z；813.26[M+H]+
按化合物112的合成制备化合物124。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.38-1.48(m,1H)；1.56-1.90(m,5H)；2.05-2.20(m,2H)；2.52-2.80(m,3H)；2.82-2.92(m,1H)；2.85(s,3H)；3.10-3.20(m,1H)；3.35-3.75(m,4H)；3.61(s,3H)；3.89(s,3H)；3.90-4.70(m,6H)；6.61(d,J＝8.4Hz,2H)；6.95(d,J＝8.4Hz,2H)；7.01-7.04(m,2H)；7.63(d,J＝6.0Hz,1H)；7.98(s,1H)；8.75(d,J＝6.0Hz,1H)；9.48(s,1H)；10.77(s,1H)。LCMS(ES+):m/z；760.51(M+H)+
按化合物112的合成制备化合物125。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.38-1.48(m,1H)；1.58-1.78(m,4H)；1.80-2.15(m,3H)；2.30-2.42(m,1H)；2.50-2.62(m,3H)；2.66-2.76(m,3H)；2.76(s,3H)；2.95-3.10(m,2H)；3.52-3.70(m,2H)；3.59(s,3H)；3.76(s,2H)；3.88(s,3H)；4.12-4.30(m,2H)；5.67(d,J＝7.6Hz,1H)；6.61(d,J＝8.8Hz,2H)；6.95(d,J＝8.4Hz,2H)；7.12(d,J＝1.2Hz,1H)；7.18(d,J＝1.2Hz,1H)；7.54(d,J＝5.6Hz,1H)；7.94(s,1H)；8.74(d,J＝5.6Hz,1H)；9.44(s,1H)；10.76(s,1H)。LCMS(ES+):m/z 776.51[M+H]+
化合物126的合成：
向化合物112-5(87.53mg，0.18mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙烷-2-胺(178.29uL，1.02mmol)，然后加入HATU(155.68mg，0.41mmol)。10分钟后，向上述反应混合物中加入在DMF中的2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲酸(0.08g，0.2mmol)并将其于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。反应完成后，将反应混合物倒到冰冷水混合物上，并过滤所得固体。粗混合物通过制备HPLC纯化，得到呈棕色固体的N-[1-[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酰基]-4-哌啶基]-4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-N-甲基-哌啶-1-甲酰胺(20.6mg，收率11.09％，纯度95.69％，061)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.46(bs,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),7.99(s,1H),7.61(d,J＝3.2Hz,1H),7.23-7.17(m,2H),6.96(d,J＝8Hz,2H),6.61(d,J＝8.4Hz,2H),4.62-4.61(m,1H),4.28-4.24(s,1H),3.88(s,3H),3.77(m,2H),3.60-3.56(m,5H),3.45-3.16(m,2H),2.73-2.67(m,7H),2.66-2.51(m,1H),2.10-2.08(m,1H),1.75-1.71(m,1H),1.68-1.50(m,8H)。LCMS(ES+):m/z754.59[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物127。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.35(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.82–7.62(m,2H),7.56(dt,J＝17.4,6.4Hz,5H),6.97(d,J＝8.2Hz,2H),6.63(d,J＝8.3Hz,2H),4.65(d,J＝12.7Hz,1H),4.27(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),3.83(s,1H),3.58(s,5H),3.48(d,J＝13.2Hz,1H),3.17(d,J＝14.1Hz,1H),2.93–2.63(m,8H),2.57(dt,J＝24.1,5.1Hz,1H),2.49(d,J＝2.1Hz,3H),2.08(dq,J＝8.8,5.4,4.9Hz,1H),1.97–1.40(m,7H)。LCMS(ES+):m/z 773.8[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物128。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.41(dd,J＝8.9,6.0Hz,1H),7.72(s,1H),7.64–7.50(m,3H),7.43(td,J＝8.6,2.5Hz,1H),7.23(dd,J＝10.5,2.5Hz,1H),6.97(d,J＝8.2Hz,2H),6.63(d,J＝8.3Hz,2H),4.65(d,J＝12.7Hz,1H),4.27(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),3.82(s,1H),3.57(s,6H),3.54–3.45(m,1H),3.16(d,J＝13.5Hz,1H),2.97–2.53(m,10H),2.16–2.04(m,1H),1.97–1.36(m,8H)。LCMS(ES+):m/z 791.9[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物129。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),7.69–7.28(m,4H),6.97(d,J＝8.3Hz,2H),6.63(d,J＝8.2Hz,2H),4.63(d,J＝12.7Hz,1H),4.27(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.80(s,1H),3.60(d,J＝12.6Hz,2H),3.46(s,3H),3.40(d,J＝13.3Hz,1H),3.13(d,J＝11.1Hz,1H),2.90–2.53(m,9H),2.05(d,J＝5.7Hz,7H),1.94–1.40(m,10H)。LCMS(ES+):m/z 751.7[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物130。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.14(s,1H),7.78(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.67(d,J＝4.8Hz,3H),6.97(d,J＝8.4Hz,2H),6.64(s,2H),4.64(d,J＝12.7Hz,1H),4.27(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),3.80(d,J＝9.4Hz,1H),3.61(s,5H),3.45(d,J＝13.2Hz,1H),3.15(d,J＝12.9Hz,1H),2.96–2.51(m,10H),2.16–2.02(m,1H),1.95–1.35(m,10H)。LCMS(ES+):m/z 763.8[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物131。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.00(dd,J＝9.3,2.5Hz,1H),7.67–7.61(m,3H),7.60–7.55(m,2H),7.53(s,1H),6.97(d,J＝8.5Hz,2H),6.65–6.60(m,2H),4.65(d,J＝13.0Hz,1H),4.27(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),3.83(s,0H),3.62(s,1H),3.59(s,4H),3.47(d,J＝12.9Hz,1H),3.26–3.09(m,1H),2.90–2.65(m,7H),2.62–2.53(m,1H),2.14–2.05(m,1H),1.93–1.80(m,1H),1.79–1.45(m,8H),1.28–1.20(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 791.284[M+H]+
按化合物126的合成制备化合物132。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.47(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),8.00(s,1H),7.64(d,J＝5.6Hz 1H),7.04(d,J＝6.4Hz,2H),6.96(d,J＝8.4Hz 2H),6.61(d,J＝8.4Hz,2H),4.63(m,2H),4.28-4.24(m,1H),3.90(s,3H),3.86(m,1H),3.60(m,6H),3.15(m,1H),2.82-2.71(m,4H),2.58-2.55(m,1H),2.11-2.07(m,1H),1.87-1.84(m,1H),1.71-1.51(m,4H),1.51-1.22(m,6H)。LCMS(ES+):m/z 738.64[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物133。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),7.60(s,1H),7.00(dd,J＝24.7,8.8Hz,4H),6.62(d,J＝8.2Hz,2H),4.62(d,J＝12.9Hz,1H),4.27(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),3.81(t,J＝15.5Hz,5H),3.60(d,J＝12.6Hz,2H),3.45(s,3H),3.33(s,1H),3.11(d,J＝5.1Hz,1H),2.86–2.59(m,9H),2.06(d,J＝6.0Hz,6H),1.99–1.79(m,1H),1.79–1.38(m,8H),1.33–1.16(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 731.1[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物134。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.30(s,1H),10.77(s,1H),8.27(s,1H),7.67(s,1H),7.17-6.94(m,4H),6.62(d,J＝8.5Hz,1H),4.63(d,J＝12.6Hz,1H),4.29-4.25(m,1H),3.94(d,J＝15.5Hz,3H),3.78-3.56(m,8H),3.44-3.11(m,1H),2.88-2.67(m,7H),2.60-2.55(m,1H),2.07-2.06(m,1H),LCMS(ES+):m/z 727.67[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物135。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),8.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.81–7.63(m,1H),7.63–7.50(m,1H),7.03–6.90(m,2H),6.77(d,J＝6.9Hz,1H),6.62(dd,J＝7.2,5.1Hz,2H),4.63(d,J＝12.6Hz,1H),4.26(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),3.79(d,J＝17.9Hz,7H),3.55(d,J＝27.7Hz,13H),2.95–2.54(m,9H),2.09(dt,J＝8.8,4.8Hz,1H),1.86(qd,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.69(d,J＝9.4Hz,3H),1.62–1.39(m,3H)。LCMS(ES+):m/z 749.1[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物136。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),8.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.83–7.69(m,1H),7.67–7.54(m,3H),7.26–7.10(m,2H),6.96(d,J＝8.2Hz,2H),6.61(d,J＝8.2Hz,2H),4.64(d,J＝13.2Hz,1H),4.26(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.98–3.74(m,4H),3.58(s,5H),3.39(d,J＝12.4Hz,1H),3.14(t,J＝11.8Hz,1H),2.98–2.55(m,11H),2.19–2.02(m,1H),2.02–1.79(m,1H),1.79–1.39(m,7H)。LCMS(ES+):m/z 753.1[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物137。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),8.00–7.14(m,3H),6.96(d,J＝8.2Hz,2H),6.63(d,J＝8.5Hz,2H),4.27(dd,J＝11.3,4.8Hz,1H),3.98(s,1H),3.58(d,J＝12.4Hz,2H),3.46(d,J＝5.5Hz,3H),3.42–3.08(m,1H),2.98–2.52(m,9H),2.45–2.17(m,1H),2.18–1.98(m,7H),1.98–1.71(m,2H),1.71–1.40(m,5H),1.42–0.91(m,3H),0.52(d,J＝45.0Hz,4H)。LCMS(ES+):m/z 777.7[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物138。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.49(s,1H),8.75(d,J＝5.8Hz,1H),8.02(s,1H),7.85–7.38(m,5H),6.99(t,J＝8.8Hz,1H),6.62–6.29(m,2H),4.65(d,J＝12.8Hz,1H),4.30(dd,J＝11.5,4.8Hz,1H),3.80(d,J＝15.8Hz,1H),3.61(s,5H),3.47(d,J＝13.1Hz,1H),3.17(d,J＝13.4Hz,1H),2.96–2.53(m,10H),2.17–2.01(m,1H),1.96–1.14(m,8H)。LCMS(ES+):m/z 792.8[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物139。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),8.35(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.82–7.68(m,1H),7.65(s,1H),7.56(dt,J＝17.0,6.6Hz,4H),6.99(t,J＝8.8Hz,1H),6.52–6.37(m,2H),4.65(d,J＝12.7Hz,1H),4.31(dd,J＝11.5,4.8Hz,1H),3.82(s,1H),3.58(s,8H),3.48(d,J＝13.1Hz,1H),3.17(d,J＝13.8Hz,1H),2.91–2.65(m,6H),2.57(dt,J＝17.6,4.4Hz,1H),2.17–1.99(m,1H),1.87(dt,J＝12.2,6.0Hz,2H),1.83–1.49(m,8H)。LCMS(ES+):m/z791.8[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物140。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.71(s,1H),7.53(s,1H),6.93(dt,J＝11.4,8.1Hz,3H),6.51–6.33(m,2H),4.55(d,J＝12.6Hz,1H),4.24(dd,J＝11.5,4.8Hz,1H),3.77(d,J＝15.6Hz,4H),3.54(d,J＝12.7Hz,2H),3.39(s,3H),3.26(s,1H),3.04(dd,J＝13.7,9.0Hz,1H),2.85–2.56(m,8H),2.56–2.47(m,1H),1.99(d,J＝6.0Hz,8H),1.80(dt,J＝12.3,6.1Hz,1H),1.59(dd,J＝32.3,19.9Hz,8H)。LCMS(ES+):m/z 749.8[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物141。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),8.00(dd,J＝9.3,2.5Hz,1H),7.81–7.43(m,7H),6.99(t,J＝8.8Hz,1H),6.53–6.35(m,2H),4.65(d,J＝12.6Hz,1H),4.30(dd,J＝11.5,4.8Hz,1H),3.82(s,1H),3.58(s,5H),3.47(d,J＝13.1Hz,1H),3.17(d,J＝13.3Hz,1H),2.93–2.62(m,7H),2.57(dt,J＝17.4,4.2Hz,1H),2.16–2.02(m,1H),1.93–1.39(m,10H),1.74-1.51(m,9H)。LCMS(ES+):m/z 809.7[M+H]+
按化合物126的合成制备化合物142。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.50(s,1H),8.75(d,J＝5.9Hz,1H),8.06(d,J＝1.7Hz,1H),7.69(dd,J＝5.9,2.0Hz,1H),7.29–7.15(m,2H),6.99(t,J＝8.8Hz,1H),6.53–6.38(m,2H),4.64(d,J＝12.7Hz,1H),4.30(dd,J＝11.6,4.8Hz,1H),3.87(d,J＝15.5Hz,4H),3.61(s,4H),3.40(s,1H),3.14(t,J＝11.7Hz,1H),2.92–2.62(m,9H),2.61–2.53(m,1H),2.18–1.98(m,1H),1.86(qd,J＝12.3,4.6Hz,1H),1.80–1.45(m,9H)。LCMS(ES+):m/z 772.7[M+H]+。
按化合物126的合成制备化合物143。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),7.60(s,1H),7.51–7.46(m,1H),7.44–7.35(m,2H),6.99(t,J＝8.8Hz,1H),6.49–6.40(m,2H),6.01(s,1H),4.63(d,J＝12.6Hz,1H),4.30(dd,J＝11.5,4.8Hz,1H),3.80(s,1H),3.61(d,J＝12.7Hz,2H),3.53(s,1H),3.46(s,3H),3.40(d,J＝13.2Hz,1H),3.13(s,1H),2.88–2.73(m,3H),2.70(ddd,J＝14.3,9.3,4.4Hz,4H),2.57(dt,J＝17.4,4.2Hz,1H),2.05(d,J＝5.6Hz,7H),1.87(tt,J＝12.2,6.2Hz,1H),1.74(s,1H),1.70–1.45(m,7H)。LCMS(ES+):m/z 769.7[M+H]+。
按化合物91的合成制备化合物144。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.48(s,2H),8.77(d,J＝5.8Hz,1H),7.97(d,J＝10.1Hz,2H),7.71(dd,J＝8.1,1.7Hz,1H),7.62(t,J＝1.7Hz,1H),7.50(d,J＝5.8Hz,1H),6.96(t,J＝8.8Hz,1H),6.55–6.39(m,2H),4.81(s,1H),4.30(dd,J＝11.6,4.8Hz,1H),3.80(d,J＝12.0Hz,2H),3.61(s,5H),3.26(s,2H),2.98(s,1H),2.88–2.53(m,10H),2.20–1.76(m,4H),1.76–1.37(m,7H)。LCMS(ES+):m/z 792.7[M+H]+。
化合物145的合成：
步骤-1：于0℃向4-[3-氟-5-甲氧基-4-(4-哌啶基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮.HCl(0.5g，1.02mmol)在ACN(30mL)中的搅拌溶液中加入TEA(0.309g，3.06mmol)并将反应混合物搅拌5分钟。向反应混合物中加入4-(氯羰基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯5(0.267g，1.02mmol)并将反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测。2小时后，用水(30ml)淬灭反应混合物并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过反相(0.1％的FA(/水)/ACN)纯化，得到呈棕色固体的4-[[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌啶-1-羰基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯145-6(0.340g，收率37.45％，纯度80.48％)。LCMS(ES+):m/z 718.87[M+H]+
步骤-2：将4-[[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌啶-1-羰基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯145-6(0.340g，0.474mmol)在4M的HCl/二噁烷(5mL)中的溶液于室温搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，将反应混合物浓缩至干。所得固体加乙醚(2×20mL)研磨，得到呈白色固体的4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-N-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酰胺.HCl 145-7(0.250g，收率72.54％，纯度89.89％)。LCMS(ES+):m/z 618.55[M+H]+
步骤5：向4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-N-(4-哌啶基)哌嗪-1-甲酰胺145-7(0.400g，0.648mmol)在DMF(2mL)中的搅拌溶液中加入碳酸钾(0.269g，1.95mmol)，然后加入1-氟-4-硝基-苯(0.091g，0.648mol)，并于80℃搅拌6小时，同时通过LCMS和TLC监测。完成后，用冰冷水淬灭反应混合物并过滤所得固体，真空干燥，得到呈黄色固体的4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-N-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]哌嗪-1-甲酰胺145-9(0.450g，收率79.82％，纯度85％)。LCMS(ES+):m/z 739.66[M+H]+。
步骤6：对4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-N-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]哌嗪-1-甲酰胺145-9(0.45mg，0.609mmol)在MeOH(5mL)中的搅拌溶液脱气10分钟，然后加入10％的Pd/C(0.4g)。再次对反应混合物脱气并于室温在氢气(气球)压力下搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。反应完成后，通过硅藻土垫过滤反应混合物并用甲醇(20ml)洗涤。真空除去滤液，得到呈黄色固体的N-[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]-4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酰胺145-10(0.2g，收率43.52％，纯度93.93％)。LCMS(ES+):m/z 709.31[M+H]+
步骤-7：向N-[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]-4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酰胺145-10(0.2g，0.282mmol)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入NaHCO3(0.071g，0.846mmol)，然后加入3-溴哌啶-2,6-二酮11(0.270g，1.41mmol)并于70℃搅拌44h，同时通过LCMS和TLC监测。44小时后，将反应混合物倒到冰冷水(20mL)上并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈灰色固体的N-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]-4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酰胺145-12(0.2g，收率74.10％，纯度85.72％)。LCMS(ES+):m/z 820.06[M+H]+。
步骤-8：将N-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]-4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酰胺145-12(0.15g，0.183mmol)在TFA(2mL)中的溶液于70℃加热2小时，同时通过TLC和LCMS监测。2小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物通过制备-HPLC纯化，得到呈灰白色固体的N-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]-4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酰胺.TFA化合物-145(0.019g，收率12.41％，纯度97.22％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.34(s,1H),10.82(m,2H),9.88(s,1H),8.23(s,1H),7.70(s,1H),7.41-6.97(m,4H),6.87-6.35(m,2H),4.40-4.35(m,3H),4.10-3.79(s,8H),3.62(s,3H),3.18-3.09(m,8H),2.74-2.67(m,1H),2.61-2.60(m,1H),2.10-1.88(m,6H)。LCMS(ES+):m/z 700.61[M+H]+。
化合物146的合成：
步骤-1：向哌啶-4-酮(1.5g，15.13mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入碳酸钾(4.18g，30.26mmol)和1-氟-4-硝基-苯(2.14g，15.13mmol)并于80℃搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测。16小时后，用冰冷水淬灭反应并过滤固体沉淀物，真空干燥，得到呈黄色固体的1-(4-硝基苯基)哌啶-4-酮146-3(0.85g，收率22.96％，纯度90％)。
步骤-2：向1-(4-硝基苯基)哌啶-4-酮146-3(1.5g，6.81mmol)在甲醇(20mL)中的搅拌溶液中加入硼氢化钠(0.644g，17.03mmol)并让于室温搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测。3小时后，用饱和NH4Cl溶液(15ml)淬灭反应物质，并用CH2Cl2(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色固体的1-(4-硝基苯基)哌啶-4-醇146-4(1.5g，收率77.88％，纯度78.59％)。LCMS(ES+):m/z 223.28[M+H]+。
步骤3：于0℃在N2气氛下向1-(4-硝基苯基)哌啶-4-醇146-4(1.5g，6.75mmol)在CH2Cl2(6mL)中的搅拌溶液中加入吡啶(0.800g，10.12mmol)。10分钟后，向反应混合物中加入三光气(1.00g，3.37mmol)在CH2Cl2(4mL)中的溶液并于室温搅拌1小时，同时通过TLC监测。1小时后，将反应物质浓缩至干，得到为浅黄色胶状粗化合物的[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]氯甲酸酯146-5(1.5g，3.95mmol，收率58.55％，纯度75％)。
步骤-4：于0℃在N2气氛下向哌嗪-1-甲酸叔丁酯146-6(1.47g，7.90mmol)在干燥的CH2Cl2(15ml)中的溶液中加入DIPEA(0.680g，5.27mmol)。10分钟后，于0℃向反应混合物中加入[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]氯甲酸酯146-5(1.5g，5.27mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液并于室温搅拌1小时，同时通过TLC监测。1小时后，用冷水(20ml)淬灭反应混合物并用CH2Cl2(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色固体的1-(叔丁基)4-(1-(4-硝基苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1,4-二甲酸酯146-7(1.7g，3.01mmol，收率57.08％，纯度76.87％)。LCMS(ES+):m/z 435.21[M+H]+。
步骤5：对1-(叔丁基)4-(1-(4-硝基苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1,4-二甲酸酯(1.7g，3.91mmol)在MeOH:乙醇(5mL:5mL)中的搅拌混合物脱气10分钟，然后加入10％的Pd/C(2g)。再次对反应混合物脱气并于室温在氢气(气球)压力下搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测。反应完成后，通过硅藻土垫过滤反应混合物并用甲醇(20ml)洗涤。真空除去滤液，得到呈黄色固体的1-(1-(4-氨基苯基)哌啶-4-基)4-(叔丁基)哌嗪-1,4-二甲酸酯146-8(1.5g，3.34mmol，收率85.30％，纯度90％)。1H-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ6.73(d,J＝6.8MHz,2H),6.53(d,J＝7.2MHz,2H),4.98(bs,2H),3.32(m,6H),3.13 -3.10(m,4H),2.86-2.84(m,2H),1.91-1.85(m,2H),1.65-1.60(m,2H)
步骤6：向1-(1-(4-氨基苯基)哌啶-4-基)4-(叔丁基)哌嗪-1,4-二甲酸酯146-8(0.5g，1.24mmol)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮9(0.712g，3.71mmol)、NaHCO3(0.519g，6.18mmol)并于80℃搅拌3小时，同时通过LCMS和TLC监测。3小时后，用冰冷水(20mL)淬灭反应并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈灰白色固体的1-(叔丁基)4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1,4-二甲酸酯146-10(0.450g，0.702mmol，收率56.80％，纯度80.45％)。LCMS(ES+):m/z 516.81[M+H]+。
步骤-7：于0℃向1-(叔丁基)4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1,4-二甲酸酯146-10(0.5g，0.969mmol)在CH2Cl2(2mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(1.11g，9.70mmol)并于室温搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测。2小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物通过反相柱色谱法纯化，得到呈绿色固体的[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]哌嗪-1-甲酸酯.TFA盐146-11(0.15g，收率26.29％，纯度90％)。1H-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ10.8(s,1H),8.90(m,3H),7.33(1H),6.75(m,2H),4.95-4.85(m,1H),4.45-4.35(m,3H),4.10-3.90(m,1H),3.50-3.34(m,8H),3.16-3.13(m,5H),2.74-2.60(m,2H),2.58-2.50(m,2H)。
步骤-8：向[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]哌嗪-1-甲酸酯146-11(0.100g，0.240mmol)在ACN(10ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.05g)、乙酸(0.014g，0.240mmol)和无水乙酸钠(0.059g，0.722mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛112-6(0.072g，0.240mmol)并将反应混合物于70℃加热3小时，然后将其于室温冷却并加入SiliaBond氰基硼氢化物(0.069g，1.20mmol)。于室温继续搅拌12小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。12小时后，过滤反应物质，浓缩并通过制备-HPLC纯化，得到[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸酯.TFA盐化合物146(0.036g，收率18.10％，纯度97.51％)。1H-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ14.38(s,1H),10.78(s,1H),9.87(s,1H),8.23(s,1H),7.71(s,1H),7.35-7.22(m,4H),6.776(d,J＝9.2Hz,2H),4.94-4.85(m,1H),4.30(s,3H),4.01(s,3H),3.62(s,3H),3.52-3.16(m,12H),2.75-2.70(m,1H),2.61-2.60(m,1H),2.18-2.06(m,6H)。LCMS(ES+):m/z 701.54[M+H]+。
化合物147的合成：
步骤-1：向化合物4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶147-1(0.5g，2.55mmol)在乙腈(500mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(0.829g，2.55mmol)并搅拌15分钟，然后加入1-氟-4-硝基-苯(0.179g，1.27mmol)。让反应混合物于70℃回流2小时，同时通过TLC监测。完成后，用水(200ml)稀释反应混合物，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，用50％的石油醚/乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到呈黄色固体的1-(4-硝基苯基)-4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶147-3(0.32g，0.957mmol，收率37.61％，纯度95％)。
步骤-2：向在THF(10mL)中的1-(4-硝基苯基)-4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶147-3(0.32g，1.01mmol)中加入三乙胺(0.306g，3.02mmol)，然后加入叔丁氧基羰基叔丁基碳酸酯(0.330g，1.51mmol)并让于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。完成后，用水(50ml)稀释反应混合物，用10％的MeOH:DCM(2×100ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，用40％的石油醚/乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到呈黄色固体的4-[2-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯147-4(0.240g，0.563mmol，收率55.88％，纯度98％)。LCMS(ES+):m/z 358.80[M+Na]+
步骤-3：向4-[2-[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯147-4(0.24g，0.574mmol)在EtOAc(10mL)和甲醇(10mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(0.244g,2.30mmol)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌2小时，同时通过LCMS和TLC监测。通过硅藻土床过滤反应混合物并浓缩滤液。粗化合物通过(硅胶100-200目，洗脱剂40％的石油醚/乙酸乙酯)柱色谱法纯化，得到呈无色固体的4-[2-[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯147-5(0.23g，0.540mmol，收率93.96％，纯度91％)。LCMS(ES+):m/z388.49[M+H]+。
步骤-4：向4-(2-(1-(4-氨基苯基)哌啶-4-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯147-5(0.230g，0.593mmol)在DMF(25mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(0.341g，1.78mmol)、NaHCO3(0.299g，3.56mmol)并将反应混合物于50℃搅拌24小时，同时通过TLC和LCMS监测。用冰冷水(100mL)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，用50-60％的石油醚/乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到呈棕色固体的4-(2-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯147-6(0.25g，0.451mmol，收率76.03％，纯度90％)。
步骤-5：于0℃向4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯147-6(0.23g，0.461mmol)在CH2Cl2(2ml)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(1.05g，9.22mmol)并将反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。完成后，减压浓缩反应混合物，粗化合物加醚研磨，得到呈灰白色固体的3-[4-[4-[2-(4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐147-7(0.2g，0.347mmol，收率50.93％，纯度89％)。LCMS(ES+):m/z 399.30[M+H]+。
步骤-6：向3-[4-[4-[2-(4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮147-7(0.132g，0.331mmol)在甲醇(5mL)和DCE(5mL)中的搅拌溶液中加入分子筛(0.1g)、AcOH(0.019g，0.331mmol)和无水乙酸钠(0.054g，0.663mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，加入2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛147-8(0.1g，0.331mmol)并将反应混合物于70℃加热3小时。将反应混合物冷却至室温，加入Siliabond氰基硼氢化物(0.1g，1.659mmol)并搅拌16小时，同时通过LCMS监测。通过硅藻土床过滤反应物质，真空浓缩滤液，并通过制备HPLC纯化，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[2-[1-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-哌啶基]乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐化合物147(0.04g，收率14.48％，纯度95.86％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.32(s,1H),10.82(s,2H),9.28(s,1H),8.23(s,1H),7.70(s,1H),7.37-7.22(m,4H),6.76(d,J＝8.8Hz,2H),6.38(bs,1H),4.38(bs,1H),4.28(bs,2H),4.01(s,3H),3.62(s,3H),3.51-3.45(m,6H),3.04-3.02(m,2H),2.74-2.60(m,2H),2.08-2.06(m,1H),1.93-1.85(m,5H)1.52-1.25(m,10H)。LCMS(ES+):m/z 684.57[M+H]+。
按化合物147的合成制备化合物148。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.45(bs,1H),10.80(s,1H),8.92(bs,1H),8.21(s,1H),7.71(s,1H),7.45(s,1H),7.34(s,1H),6.58-6.45(m,2H),4.49-4.37(m,3H),3.98(s,3H),3.63(s,3H),3.46-3.12(m,8H),2.76-2.56(m,2H),2.11-2.09(m,1H),1.98-1.86(m,5H),1.57-1.28(m,10H).LCMS(ES+):m/z 718.53[M+H]+。
按化合物147的合成制备化合物149
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.47(s,1H),8.98(s,1H),8.76(d,J＝5.7Hz,1H),7.95(s,1H),7.54(d,J＝5.7Hz,1H),7.32(d,J＝1.5Hz,1H),7.29–7.19(m,2H),7.03–6.82(m,2H),4.53–4.28(m,3H),3.95(s,3H),3.61(s,3H),3.48(d,J＝11.8Hz,2H),3.18(q,J＝11.4,10.9Hz,2H),2.86–2.53(m,6H),2.07(dt,J＝8.8,4.3Hz,1H),1.97–1.82(m,3H),1.68(d,J＝11.4Hz,2H),1.58–1.35(m,2H),1.25(s,8H)。LCMS(ES+):m/z 779.7[M+H]+。
按化合物147的合成制备化合物150
1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.77(s,1H),9.44(s,1H),8.73(d,J＝5.6Hz,1H),7.92(s,1H),7.53(d,J＝5.6Hz,1H),7.13(d,J＝1.0Hz,1H),7.07(s,1H),6.81(t,J＝9.3Hz,1H),6.51-6.47(m,1H),6.40(d,J＝8.7Hz,1H),5.77(d,J＝7.6Hz,1H),4.26-4.24(m,1H),3.85(s,3H),3.59(s,5H),3.09(d,J＝10.3Hz,2H),2.83(d,J＝11.0Hz,2H),2.71-2.66(m,1H),2.58-2.49(m,2H),2.07(t,J＝11.1Hz,3H),1.84-1.82(m,1H),1.67-1.59(m,4H),1.15-1.05(m,11H).LCMS(ES+):m/z 729.5[M+H]+。
化合物151的合成：
步骤-1：于-78℃向TMS-乙炔(12.63g，128.6mmol)在THF(250mL)中的搅拌溶液中加入正-丁基锂(2.5M，在己烷中)(51.4mL，128.6mmol)并于-78℃搅拌30分钟。然后于-78℃向其中逐滴加入4-氧代哌啶-1-甲酸苄酯(25g，107.2mmol)在THF(50mL)中的溶液并在相同的温度下搅拌1小时。然后用时16小时让反应混合物温热至室温，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，加入饱和氯化铵溶液(50mL)将其淬灭并使用EtOAc(2×100mL)进行萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。
步骤-2：于0℃向4-羟基-4-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)哌啶-1-甲酸苄酯151-2(50.0g，150.8mmol)在THF(400mL)中的搅拌溶液中加入TBAF(1M，在THF中)(150.8mL，150.8mmol)并用时15分钟将反应混合物温热至室温，同时通过TLC监测反应的进度。完成后，向其中加入饱和氯化铵溶液(100mL)并使用乙酸乙酯(2×100mL)进行萃取。合并有机层，然后用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。
步骤-3：将4-乙炔基-4-羟基-哌啶-1-甲酸苄酯151-3(15.0g，57.8mmol)和4-(三氟甲基磺酰氧基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯151-4(19.17g，57.8mmol)在THF(150mL)中的溶液用氩气吹扫10分钟，然后加入Pd(PPh3)2Cl2(2.03g，2.89mmol)、三乙胺(105.3g，1040mmol)和CuI(1.10g，5.78mmol)。然后将反应混合物于70℃搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应的进度。完成后，将其冷却至环境温度并向其中加入水(100mL)。使用乙酸乙酯(2×50mL)进行萃取，合并有机萃取物，用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(使用230-400目硅胶，乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈灰白色固体的所需化合物4-[2-(1-苄氧基羰基-4-羟基-4-哌啶基)乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯151-5(38g，86.3mmol，收率89％，纯度99％)。LCMS(ES+):m/z 463.3[M+Na]+。
步骤-4：向4-[2-(1-苄氧基羰基-4-羟基-4-哌啶基)乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯151-5(10g，22.7mmol)在MeOH(100mL)中的搅拌溶液中加入10％的Pd/C(5g)并将反应混合物于H2气氛(60psi压力)下搅拌48小时，同时通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土滤出催化剂并用MeOH(50mL×2)洗涤。合并有机层，减压蒸发，得到呈黄色稠油的粗化合物4-[2-(4-羟基-4-哌啶基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯151-6(7.0g，22.4mmol，定量收率，纯度82％)。
步骤-5：于-10℃向4-[2-(4-羟基-4-哌啶基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯151-6(6.5g，20.81mmol)和吡啶(3.29g，41.62mmol)在DCM(65mL)中的搅拌溶液中逐滴加入氯甲酸苄酯(50％，在甲苯中)(5.32g，31.21mmol)并用时3小时让反应混合物温热至室温。完成起始材料的消耗(如由LCMS所指示)后，减压除去挥发物并将残余物溶解在THF(25mL)中。然后向其中加入1N NaOH水溶液(60mL)并将反应混合物于室温搅拌1小时。然后使用乙酸乙酯(2×50mL)进行萃取，合并有机层，用盐水溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目硅胶，使用乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈稠油的4-[2-(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)乙基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸苄酯(3.8g，8.40mmol，收率40.9％，纯度98％)。
步骤-6：于-20℃向4-[2-(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)乙基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸苄酯151-7(4.7g，10.52mmol)在DCM(50mL)中的搅拌溶液中加入DAST(2.54g，15.79mmol)并将反应混合物在相同的温度下搅拌15分钟，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，加入饱和碳酸氢钠溶液(40mL)将其淬灭并使用DCM(2×50mL)进行萃取。合并有机萃取物，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。所得粗品通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目硅胶，使用乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈淡黄色液体的所需化合物4-[2-(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)乙基]-4-氟-哌啶-1-甲酸苄酯151-8(3.7g，7.17mmol，收率78％，纯度86％)。
步骤-7：于0℃向4-[2-(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)乙基]-4-氟-哌啶-1-甲酸苄酯151-8(3.7g，8.25mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/1,4-二噁烷溶液(18.5mL)并用时2小时让反应混合物温热至室温，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，减压蒸发挥发物并向残余物中加入乙醚(20mL)。将其搅拌15分钟，过滤所得固体，用乙醚(5mL×2)洗涤并干燥，得到呈白色固体的所需化合物4-氟-4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶-1-甲酸苄酯151-9(3.2g HCl盐，8.06mmol，定量收率，纯度97％)。LCMS(ES+):m/z349.44[M+H]+。
步骤-8：向4-氟-4-[2-(4-哌啶基)乙基]哌啶-1-甲酸苄酯151-9(3.7g，9.61mmol)在乙腈(30mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(8.27mL，48.0mmol)并搅拌15分钟，然后加入1,2-二氟-4-硝基-苯151-10(1.68g，26.85mmol)。将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测反应的进度。完成后，向其中加入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)并使用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取。合并有机萃取物，用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。所得粗品通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目，使用乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈黄色固体的所需化合物4-氟-4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸苄酯151-11(3.4g，6.76mmol，收率73％，纯度97％)。LCMS(ES+):m/z 488.45[M+H]+。
步骤-9：于室温向4-氟-4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸酯151-11(3.4g，6.97mmol)在MeOH(22mL)中的搅拌溶液中加入锌粉(5.93g，90.65mmol)和氯化铵水溶液(5.60g，104.55mmol，在10mL水中)。将反应混合物于70℃搅拌3.5小时，同时通过LCMS和TLC监测反应的进度。完成后，将其冷却至室温并通过硅藻土床滤出锌粉。将其用MeOH(10mL×2)洗涤并减压蒸发滤液。向残余物中加入水(30mL)并使用EtOAc(30mL×2)进行萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗品通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目硅胶，使用乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈淡棕色固体的所需化合物4-[2-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]乙基]-4-氟-哌啶-1-甲酸苄酯151-12(2.8g，5.94mmol，收率85.12％，纯度97％)。
步骤-10：向4-[2-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]乙基]-4-氟-哌啶-1-甲酸苄酯151-12(2.8g，6.12mmol)在DMF(28mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(3.08g，36.72mmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(7.05g，36.72mmol)。将反应混合物在密封管中于70℃搅拌16小时，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，将其冷却至室温并向其中加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)。使用乙酸乙酯(3×70mL)进行萃取，合并有机层，用水(50mL×2)、盐水(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。粗化合物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目硅胶，使用乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈紫色固体的所需化合物4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]乙基]-4-氟-哌啶-1-甲酸苄酯151-14(2.46g，4.15mmol，收率67.86％，纯度96％)。LCMS(ES+):m/z 435.34[M+H]+。
步骤-11：向4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]乙基]-4-氟-哌啶-1-甲酸苄酯(0.58g，1.02mmol)在EtOAc(4mL)和THF(2mL)中的搅拌溶液中加入10％的Pd/C(108mg)；并将反应混合物在氢气氛(气囊)下搅拌48小时。反应完成(如由LCMS所指示)后，通过硅藻土滤出催化剂并用EtOAc(10mL×2)洗涤。减压浓缩滤液并干燥残余物，得到呈棕色稠油的粗产物3-[3-氟-4-[4-[2-(4-氟-4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(435mg，0.821mmol，收率80.48％，纯度82％)。LCMS(ES+):m/z 435.34[M+H]+。
步骤-12：向3-[3-氟-4-[4-[2-(4-氟-4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.479g，1.1mmol)在MeOH(12mL)和DCE(12mL)中的搅拌溶液中加入NaOAc(0.272g，3.31mmol)、MS(0.35g)和AcOH(0.132g，2.2mmol)。然后向其中加入2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.35g，1.1mmol)并将反应物质于80℃搅拌3小时。然后将其冷却至0℃并然后向其中加入Si-CNBH3(0.347g，5.5mmol)。反应混合物于室温搅拌16小时。然后将其通过硅藻土垫过滤并用DCE-MeOH(1:1；3×5mL)洗涤。减压浓缩滤液。所得粗品通过制备HPLC纯化，得到所需化合物3-[4-[4-[2-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-氟-4-哌啶基]乙基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(TFA盐)(63mg，0.073mmol，收率6.60％，纯度98.34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.28-1.48(m,5H)；1.60-2.10(m,10H)；2.55-2.80(m,2H)；3.10-3.45(m,8H)；3.62(s,3H)；4.03(s,3H)；4.25-4.32(m,1H)；4.45-4.60(m,2H)；6.40-6.60(m,2H)；6.80-7.10(m,1H)；7.35(s,1H)；7.47(s,1H)；7.72(s,1H)；8.21(s,1H)；9.12&9.32(two bs,1H)；10.80(s,1H)；14.35(bs,1H)。LCMS(ES+):m/z 736.53(M+H)+。
按化合物151的合成制备化合物152
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.80-1.40(m,6H)；1.50-1.90(m,10H)；2.04-2.10(m,1H)；2.30-2.42(m,2H)；2.52-2.60(m,1H)；2.62-2.78(m,3H)；3.05-3.12(m,2H)；3.59(s,3H)；3.64(s,2H)；3.86(s,3H)；4.20-4.30(m,1H)；5.76(d,J＝7.6Hz,1H)；6.40(dd,J1＝2.0Hz,J2＝8.8Hz,1H)；6.49(dd,J1＝2.0Hz,J2＝15.2Hz,1H)；6.81(t,J＝9.2Hz,1H)；7.09(s,1H)；7.14(s,1H)；7.52(d,J＝5.6Hz,1H)；7.92(s,1H)；8.73(d,J＝5.6Hz,1H)；9.44(s,1H)；10.78(s,1H).LCMS(ES+):m/z 747.35[M+H]+。
按化合物147的合成制备化合物153
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),7.56(s,1H),6.96(d,J＝1.4Hz,1H),6.89(d,J＝1.2Hz,1H),6.81(t,J＝9.4Hz,1H),6.51-6.47(m,1H),6.41-6.39(m,1H),5.77(d,J＝7.7Hz,1H),4.38-4.24(m,1H),3.82(s,3H),3.59(s,2H),3.45(s,3H),3.09(d,J＝10.5Hz,2H),2.72-2.57(m,6H),2.37-2.32(m,2H),2.08(s,7H),1.90-1.89(m,1H),1.84-1.54(m,8H),1.31-1.16(m,5H).LCMS(ES+):m/z 724.20[M+H]+。
化合物154的合成：
步骤-1：于-78℃向双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(1.68g，10.04mmol，11mL)在THF(5mL)中的处于惰性气氛下的搅拌溶液中逐滴加入乙酸乙酯(1.33g，15.06mmol，1.47mL)。将反应混合物搅拌30分钟。向反应混合物中加入在THF(5mL)中的4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，10.04mmol)。反应混合物于-78℃搅拌1小时。通过TLC监测反应的进度；反应完成后，用水(20ml)稀释反应混合物并用CH2Cl2(2×20mL)萃取。合并有机萃取物，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到呈无色油的4-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.96mmol，收率69.34％)。
步骤-2：向4-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，3.48mmol)在MeOH:H2O(4:1，20mL)中的处于0℃的搅拌溶液中加入氢氧化钠(139.19mg，3.48mmol，65.35uL)。将反应混合物温热至室温并搅拌1小时。通过TLC监测反应的进度；反应完成后，减压除去溶剂。用水(50mL)稀释残余物并用乙醚(2×50mL)萃取。用浓HCl(pH～3-4)酸化水层并用DCM(50mL×3)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到呈无色油的2-(1-叔-丁氧基羰基-4-羟基-4-哌啶基)乙酸(800mg，2.78mmol，收率79.79％，纯度90％)。
步骤-3：向2-(1-叔-丁氧基羰基-4-羟基-4-哌啶基)乙酸(250mg，964.14umol)的搅拌溶液中加入二异丙基乙胺(747.65mg，5.78mmol，1.01mL)并将反应混合物于室温搅拌10分钟。向反应混合物中加入HATU(476.57mg，1.25mmol)并于室温继续搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物倒入到冰水中并用乙酸乙酯萃取，用硫酸钠干燥有机层并真空浓缩。粗品通过柱色谱法使用2％的MeOH/DCM纯化，得到4-[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(380mg，718.83umol，收率74.56％)。LCMS(ES+):m/z 529.52[M+H]+。
步骤-4：向4-[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，283.75umol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(323.53mg，2.84mmol，218.60uL)并将反应混合物于室温搅拌1小时。反应完成后，真空蒸发挥发物，粗品与甲苯共蒸馏并加乙醚研磨，得到3-[4-[1-[2-(4-羟基-4-哌啶基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(140mg，174.85umol，收率61.62％，纯度82％)。LCMS(ES+):m/z 529.52[M+H]+。
步骤-5：向2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(59.56mg，197.68umol)的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(48.65mg，593.05umol，31.80uL)和乙酸(11.87mg，197.68umol，11.31uL)并将反应混合物于75℃搅拌4小时。向反应混合物中加入SiliaBond氰基硼氢化物(CBH)(200mg，197.68umol)并于室温继续搅拌16小时。反应完成后，真空蒸发挥发物，粗化合物通过制备HPLC纯化，得到3-[4-[1-[2-[1-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(20.4mg，24.12umol，收率12.20％，纯度97.89％)。LCMS(ES+):m/z 714.56[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.40-1.60(m,3H),1.70-2.00(m,7H),2.05-2.15(m,1H),2.55-2.65(m,4H),2.65-2.80(m,2H),3.00-3.40(m,5H),3.62(s,3H),4.05(s,3H),4.20-4.35(m,3H),4.40-4.60(m,2H),6.55-6.65(m,2H),6.90-7.00(m,2H),7.20-7.30(m,2H),7.71(s,1H),8.25(s,1H),9.31(s,1H),10.85(s,1H),14.25(bs,1H)。
化合物155的合成：
步骤-1：于0℃向4-溴-2,6-二甲氧基-苯甲醛(5g，20.49mmol)在甲醇(70mL)中的搅拌溶液中逐份加入硼氢化钠(1.16g，38.03mmol)并让反应混合物于室温搅拌1小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用H2O(100ml)稀释反应混合物并用EtOAc(2×100mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，并减压蒸发溶剂。粗化合物通过柱色谱法纯化(100-200目硅胶，20％的EtOAc/石油醚)，得到呈白色固体的(4-溴-2,6-二甲氧基苯基)甲醇(4.95g，收率88.37％，纯度90％)。
步骤-2：于0℃向(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)甲醇(4.95g，20.03mmol)在DCM(50mL)中的搅拌溶液中缓慢加入亚硫酰氯(4.76g，40.06mmol)，然后让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。完成后，减压除去溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈白色固体的5-溴-2-(氯甲基)-1,3-二甲氧基苯(4.9g，收率92.1％，纯度95％)。
步骤-3：于室温向5-溴-2-(氯甲基)-1,3-二甲氧基-苯(4.9g，18.45mmol)在DCM(50mL)中的搅拌溶液中加入三苯基膦(5.8g，22.14mmol)并在相同的温度下继续搅拌16小时，同时通过TLC监测反应。完成后，过滤沉淀的固体并加20％的EtOAc/石油醚研磨，得到呈白色固体的(4-溴-2,6-二甲氧基苄基)三苯基氯化鏻(8.0g，收率82.3％，纯度90％)。
步骤-4：向(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)甲基-三苯基-氯化鏻(3.0g，7.6mmol)在IPA(30mL)中的搅拌溶液中加入粒状碳酸钾(1.18g，8.55mmol)，然后加入4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.7g，8.55mmol)并然后让反应混合物于70℃搅拌16小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用H2O(100mL)稀释反应混合物并用EtOAc(2×100mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，并减压蒸发溶剂。粗化合物通过柱色谱法纯化(100-200目硅胶，用10％的EtOAc/石油醚作为洗脱剂)，得到呈胶状固体的4-[(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，收率42.6％，纯度90％)。
步骤-5：向4-[(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.43mmol)、双(频哪醇合)二硼(0.9235g，3.64mmol)和乙酸钾(0.714g，7.27mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的(经用氩气)脱气溶液中加入Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(0.2368g，0.29mmol)并于80℃搅拌4小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。4小时后，用水(100ml)淬灭反应物质并用EtOAc(2×100ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈棕色胶状固体的粗化合物4-[[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，收率52.6％，纯度59％)。LCMS(ES+):m/z 459.27[M+H]+。(硼酸酯)LCMS(ES+):m/z 360.31[M+H]+。
步骤-6：使用氩气对4-[[2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.39mmol)、4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.832g，2.39mmol)和无水磷酸三钾(1.01g，4.78mmol)在THF(18mL)、水(2mL)中的混合物脱气30分钟，然后加入X-phos-Pd-G2(0.094g，0.1197mmol)。将RM于80℃搅拌4小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。用硅藻土床过滤反应物质并用EtOAc彻底洗涤床。合并滤液，用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。粗化合物通过柱色谱法纯化(Devisil二氧化硅，80％的EtOAc/石油醚)，得到呈淡黄色固体的4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，纯度82％)。LCMS(ES+):m/z601.21[M+H]+。
步骤-7：于室温向钢制反应釜中4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]亚甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.2g，0.33mmol)在甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(0.2g)并填充H2气(100PSI)，让反应混合物搅拌20小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，用硅藻土床过滤反应物质并用EtOAc(10mL)和MeOH(10mL)彻底洗涤床。蒸发合并的滤液，粗品加乙醚研磨，得到呈白色固体的4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.170g，纯度92.38％)。LCMS(ES+):m/z603.09[M+H]+。
步骤-8：于室温向4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.17g，0.28mmol)在DCM(0.5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(1.27g，11.2mmol)，用时2小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，蒸发溶剂，向粗品中再次加入新鲜的三氟乙酸(2.96g，25.96mmol，2mL)并让反应混合物于50℃搅拌3小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，蒸发溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈棕色固体的4-[3,5-二甲氧基-4-(4-哌啶基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮TFA盐(0.150g，纯度68.01％，062)。LCMS(ES+):m/z 383.41[M+H]+。
步骤-9：于0℃向4-[3,5-二甲氧基-4-[[1-(2,2,2-三氟乙酰基)-4-哌啶基]甲基]苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.075g，0.106mmol)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.1522g，1.18mmol)，接着加入2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]乙酸(0.0608g，0.106mmol)和PyBOP(0.153g，0.294mmol)，然后让反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，通过GENVAC蒸发溶剂，粗样品通过制备HPLC纯化，得到呈淡棕色固体的3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.0243g，收率26.42％，纯度95.09％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.23(s,1H),10.78(s,1H),9.38(s,1H),8.21(s,1H),7.24(s,1H),6.99(d,J＝8.6Hz,2H),6.86(s,2H),6.65(d,J＝8.6Hz,2H),5.58(bs,1H),4.34-4.26(m,4H),3.87(s,6H),3.61(s,3H),3.11-2.98(m,6H),2.74-2.56(m,6H),2.09-2.07(m,1H),1.93-1.82(m,6H),1.63(d,J＝11.2Hz,2H),1.31-1.19(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 710.36[M+H]+。
化合物156的合成
步骤-1：于0℃向4-溴-2-氟-6-甲氧基-苯甲醛(5g，42.92mmol)在甲醇(60mL)中的搅拌溶液中逐份加入硼氢化钠(2.46g，32.51mmol)并让反应混合物于室温搅拌1小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用H2O(100mL)稀释反应混合物并用EtOAc(2×150mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，并减压蒸发溶剂。粗化合物通过柱色谱法纯化(100-200目硅胶，20％的EtOAc/石油醚)，得到呈白色固体的(4-溴-2-氟-6-甲氧基-苯基)甲醇(9.5g，纯度95％)。
步骤-2：于0℃向(4-溴-2-氟-6-甲氧基-苯基)甲醇(9.5g，40.42mmol)在DCM(30mL)中的搅拌溶液中缓慢加入亚硫酰氯(15.69g，131.88mmol)，然后让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测反应。完成后，减压除去溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈白色固体的5-溴-2-(氯甲基)-1-氟-3-甲氧基-苯(9.0g，纯度95％)。
步骤-3：于室温向5-溴-2-(氯甲基)-1-氟-3-甲氧基-苯(9.0g，35.5mmol)在DCM(50mL)中的搅拌溶液中加入三苯基膦(13.97g，53.25mmol)并在相同的温度下继续搅拌16小时，同时通过TLC监测反应。完成后，过滤沉淀的固体并加20％的EtOAc/石油醚研磨，得到呈白色固体的((4-溴-2-氟-6-甲氧基-苯基)甲基-三苯基-鏻(15g，收率81.9％，纯度95％)。
步骤-4：向(4-溴-2-氟-6-甲氧基-苯基)甲基-三苯基-鏻(11g，22.32mmol)在IPA(30mL)中的搅拌溶液中加入碳酸钾(4.42g，31.98mmol)，然后加入4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.37g，31.98mmol)并然后让反应混合物于70℃搅拌16小时，同时通过TLC监测。完成后，用H2O(100mL)稀释反应混合物并用EtOAc(2×150mL)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，并减压蒸发。粗化合物通过柱色谱法纯化(100-200目硅胶，用10％的EtOAc/石油醚作为洗脱剂)，得到呈白色固体的4-[(4-溴-2-氟-6-甲氧基-苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，收率43.64％，纯度90％)。LCMS(ES+):m/z 400[M+H]+。
步骤-5：向4-[(4-溴-2-氟-6-甲氧基-苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，9.99mmol)、双(频哪醇合)二硼(3.82g，15.03mmol)和乙酸钾(2.95g，30.06mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的(经用氩气)脱气溶液中加入Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(0.98g，1.20mmol)并于80℃搅拌4小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。4小时后，用水(200ml)淬灭反应物质并用EtOAc(2×200ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈棕色胶状固体的粗化合物4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(6g，纯度47％)。
步骤-6：使用氩气对4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，2.68mmol)、4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.93g，2.41mmol)和无水磷酸三钾(1.14g，5.36mmol)在THF(18mL)、水(2mL)中的混合物脱气30分钟，然后加入X-phos-Pd-G2(0.0526g，0.067mmol)。将RM于80℃搅拌4小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。用硅藻土床过滤反应物质并用EtOAc彻底洗涤床。合并滤液，用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。粗化合物通过柱色谱法纯化(Devisil二氧化硅，80％的EtOAc/石油醚)，得到呈灰白色固体的4-(2-氟-6-甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)亚苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，收率38％，纯度64％)。LCMS(ES+):m/z589.32[M+H]+。
步骤-7：向4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.02mmol)在甲醇(5mL)和EtOAc(5mL)中的搅拌溶液中加入10％的Pd/C(0.6g)，使用氢气球囊保持氢气并让反应混合物于50℃搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，用硅藻土床过滤反应物质并用EtOAc和MeOH彻底洗涤床。蒸发合并的滤液，粗品通过柱色谱法纯化(Devisil硅胶，50％的EtOAc/石油醚)，得到呈白色固体的4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，纯度92.7％)。LCMS(ES+):m/z 591.29[M+H]+。
步骤-8：于0℃向4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，0.507mmol)中加入4.0M的HCl/1,4-二噁烷(2mL)，然后让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，蒸发溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈棕色固体的4-[3-氟-5-甲氧基-4-(4-哌啶基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮盐酸盐(0.25g，收率86.92％，纯度99.5％，021)。LCMS(ES+):m/z 491.77[M+H]+。
步骤-9：向4-[3-氟-5-甲氧基-4-(4-哌啶基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮盐酸盐(0.2g，0.355mmol，021)在CH3CN(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.3165g，2.45mmol)，接着加入2-溴乙酸叔丁酯(79.80mg，0.409mmol)，然后让反应混合物回流4小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用水(50ml)淬灭反应物质并用EtOAc(2×50ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩。粗品通过柱色谱法纯化(Devisil二氧化硅，70％的EtOAc/石油醚)，得到呈胶状固体的2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-1-哌啶基]乙酸叔丁酯(0.2g，纯度48.4％)。LCMS(ES+):m/z 605.95[M+H]+。
步骤-10：向2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-1-哌啶基]乙酸叔丁酯(0.1g，0.165mmol)的悬浮液中加入三乙基硅烷(57.69mg，0.496mmol)，接着加入TFA(0.377g，3.31mmol)，让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。随着TLC指示叔丁基裂解，真空除去TFA并再次加入新鲜的TFA(0.377g，3.31mmol)，让反应混合物于50℃搅拌4小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，除去TFA，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈棕色固体的2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-1-哌啶基]乙酸.TFA盐(0.05g，收率35.46％，纯度77％)。LCMS(ES+):m/z 429.33[M+H]+。
步骤-11：于0℃向2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-1-哌啶基]乙酸TFA盐(0.05g，0.076mmol，062)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.090g，0.696mmol)、3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(0.046.80g，0.116mmol，061)，然后加入PyBOP(91.17g，0.1752mol)，并让反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，使用GENVAC除去溶剂，粗品通过制备-HPLC纯化，得到呈棕色固体的3-[4-[1-[2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-1-哌啶基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(0.0395g，纯度98.09％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.04(s,1H),10.77(s,1H),9.30(s,1H),8.20(s,1H),7.59(s,1H),7.09-7.07(m,2H),6.96-6.93(m,2H),6.64-6.60(m,2H),4.46-4.16(m,4H),4.01(s,3H),3.71-3.66(m,1H),3.61(s,3H),3.48(d,J＝10.5Hz,2H),3.39-2.89(m,4H),2.73-2.59(m,5H),2.07-2.06(m,1H),1.88-1.39(m,10H)。LCMS(ES-):m/z 696.51[M-H]-。
化合物157的合成：
步骤1：于0℃向4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.350g，0.594mmol)中加入4.0M的HCl/1,4-二噁烷(2mL)，并让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测反应。完成后，蒸发溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈淡棕色固体的4-[3-氟-5-甲氧基-4-(4-亚哌啶基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮盐酸盐(0.35g，纯度99％)。LCMS(ES+):m/z 489.69[M+H]+。
步骤-2：向4-[3-氟-5-甲氧基-4-(4-亚哌啶基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮盐酸盐(0.350g，0.623mmol)在CH3CN(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.5560g，4.30mmol)，接着加入2-溴乙酸叔丁酯(0.154g，0.788mmol)，然后让反应混合物回流4小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用水(50ml)淬灭反应物质并用EtOAc(2×75ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩。粗品通过柱色谱法纯化(Devisil二氧化硅，70％的EtOAc/石油醚)，得到呈白色固体的2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]亚甲基]-1-哌啶基]乙酸叔丁酯(0.3g，纯度90％)。
步骤-3：向2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]亚甲基]-1-哌啶基]乙酸叔丁酯(0.2g，0.332mmol)在DCM(0.5mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.756g，6.63mmol)并继续搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，真空除去TFA并再次加入TFA(0.7559g，6.63mmol)，让反应混合物于40℃搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，真空除去TFA，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈棕色固体的2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-1-哌啶基]乙酸TFA盐(0.05g，收率35.46％，纯度77％)。LCMS(ES+):m/z427.28[M+H]+。
步骤-4：于0℃向2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]亚甲基]-1-哌啶基]乙酸(0.120g，0.183mmol，062)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.2171g，1.68mmol)、3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.1122g，0.279mmol，061)，然后加入PyBOP(0.2185g，0.419mmol)，并让反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过LCMS监测。在使用GENVAC蒸发溶剂后，粗品通过制备HPLC纯化，得到呈棕色固体的3-[4-[1-[2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]亚甲基]-1-哌啶基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(0.0317g，纯度98.17％，061)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.24(s,1H),10.78(s,1H),9.79(s,1H),8.23(s,1H),7.63(s,1H),7.10-6.94(m,4H),6.64-6.61(m,2H),6.15(s,1H),4.53-4.26(m,4H),3.93(s,3H),3.73-3.69(m,2H),3.61(s,3H),3.43-3.01(m,5H),2.78-2.54(m,5H),2.50-2.33(m,2H),2.09-2.07(m,1H),1.88-1.79(m,3H),1.58-1.45(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 696.58[M+H]+。
化合物158的合成
步骤-1：对4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.24mmol)在乙醇(3mL)中的搅拌混合物脱气10分钟，然后加入湿的10％钯碳((1g)。将反应混合物在氢气球压力下于室温搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用乙醇洗涤。真空除去滤液，得到呈棕色半固体的4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯158-4(0.6g，收率56.74％，纯度57％)。LCMS指示硼酸酯物质@RT:2.97min LCMS(ES+):m/z 450[M+H]+(M+Na物质占主导)和硼酸物质@RT:1.66min LCMS(ES+):m/z 268[M+H]+.(M-100物质占主导)。
步骤-2：向4-溴-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮158-5(0.5g，2.09mmol)在THF(5mL)和水(1mL)中的搅拌溶液中加入4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯158-4(0.1g，2.09mmol)和磷酸三钾(1.1g，5.23mmol)。所得混合物用N2脱气15分钟，加入Pd-Xphos-G2(0.082g，0.105mmol)并于100℃加热4小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤。用(2×50mL)乙酸乙酯洗涤硅藻土床。减压浓缩反应混合物，得到呈棕色固体的4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.100mg，0.058mmol，收率27.56％，纯度27.76％)。LCMS(ES+):m/z 482.52[M+H]+。
步骤-3：将4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.04mmol)在4M的二噁烷HCl(1.5ml)中的溶液于室温搅拌1小时，同时通过TLC和LCMS监测。1小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物通过反相(使用C18柱和0.1％的甲酸/MeCN:H2O缓冲液)柱色谱法纯化，得到呈黄色固体的4-[3-氟-5-甲氧基-4-(4-哌啶基甲基)苯基]-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮HCl(0.4g，0.948mmol，收率91.26％，纯度99％)。LCMS(ES+):m/z 382.28[M+H]+。
步骤-4：于0℃在N2下向4-[3-氟-5-甲氧基-4-(4-哌啶基甲基)苯基]-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮盐酸盐158-7(0.1g，0.262mmol)在干燥的DMF(2mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.102g，0.787mmol)和2-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)乙酸158-8(0.096g，0.262mmol)。让反应混合物于室温温热并加入PyBop(0.164g，0.315mmol)，在加入PyBop后，将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。减压浓缩反应混合物，得到粗产物。该粗品通过制备HPLC纯化，得到呈黄色固体的3-[3-氟-4-[4-[2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐化合物158(0.114g，0.134mmol，收率51.10％，纯度98.81％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.47(s,1H),8.73(d,J＝5.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.60(d,J＝5.8Hz,1H),6.96-6.91(m,3H),6.64-6.53(m,J＝15.8Hz,2H),4.37(bs,2H),3.87(s,5H),3.60(s,3H),3.37(s,4H),2.96(t,J＝12.1Hz,1H),2.76-2.59(m,4H),2.33(d,J＝1.7Hz,2H),2.08-2.04(m,1H),1.95-1.80(m,5H),1.67-1.58(m,4H),1.18-1.05(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 727.31[M+H]+。
按化合物158的合成制备化合物159
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.82(s,1H),10.78(s,1H),8.20(s,1H),7.53(s,1H),7.40(d,J＝8.4Hz,2H),6.84(s,1H),6.76(d,J＝8.8Hz,2H),6.35(bs,1H),4.41-4.33(m,2H),3.86(s,6H),3.61(m,7H),2.97-2.74(m,1H),2.73-2.70(m,1H),2.67-2.56(m,3H),2.49(m,2H),2.10-2.01(m,2H),1.93-1.87(m,3H),1.85-1.70(m,1H),1.62-1.50(m,4H),1.19-1.03(m,3H).LCMS(ES+):m/z 710.65[M+H]+。
按化合物158的合成制备化合物160
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)14.26(s,1H),10.78(s,1H),8.20(s,1H),7.53(s,1H),7.30(d,J＝8.6Hz,1H),6.91-6.84(m,4H),6.15(bs,1H),4.39-4.326(m,2H),3.84(s,7H),3.61(s,3H),2.92-254(m,10H),2.33-2.26(m,2H),2.07-2.04(m,1H),1.91-1.68(m,5H),1.61-1.50(m,2H),1.29-0.98(m,4H).LCMS(ES+):m/z 779.07[M+H]+。
化合物161的合成
步骤-1：使用加料漏斗向KOH(1.25g，22.37mmol)在甲醇(50mL)中的搅拌溶液中逐滴加入在甲醇(15ml)中的5-溴-1-氯-3-氟-2-碘-苯161-1(5g，14.91mmol)并回流36小时，同时通过TLC监测反应。将反应物质浓缩至干，用水(100ml)淬灭残余物并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。用盐水(50mL)洗涤有机层，用无水Na2SO4干燥并减压浓缩。粗化合物加正-戊烷(2×50mL)研磨，得到呈无色固体的5-溴-1-氯-2-碘-3-甲氧基-苯(3.1g，收率53.87％，纯度95％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.26(d,J＝2Hz,1H),6.81(d,J＝2Hz,1H),3.89(s,3H)。
步骤-2：在配备有氩气球和隔膜的洁净的250mL RM烧瓶中加入5-溴-1-氯-2-碘-3-甲氧基-苯161-2(5g，14.39mmol)、4-[(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.65g，14.39mmol)并溶解在甲苯:二噁烷(1:1)(各20mL)中。加入K2CO3(5.97g，43.18mmol)在水(10ml)中的水溶液并使用氩气对RM脱气30分钟，然后加入Pd(dppf)Cl2.DCM(587.72mg，0.720mmol)。然后将RM于90℃搅拌4小时，同时通过TLC监测反应。用硅藻土床过滤反应混合物并用EtOAc彻底洗涤床。合并滤液，用盐水(50ml)洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。粗化合物通过(硅胶100-200目，并用10％的乙酸乙酯/石油醚-纯乙酸乙酯洗脱产物)柱快速色谱法纯化，得到呈胶状液体的4-[(4-溴-2-氯-6-甲氧基-苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯161-4(2.2g，收率33.01％，纯度90％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.18(d,J＝1.6Hz,1H),6.91(d,J＝2Hz,1H),5.91(s,1H),3.79(s,3H),3.52(t,J＝5.6Hz,2H),3.38(t,J＝5.6Hz,2H),2.36(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(t,J＝5.6Hz,2H),1.47(s,9H)LCMS(ES+):m/z 416.74[M+H]+.(-100片段占主导)。
步骤-3：向4-[(4-溴-2-氯-6-甲氧基-苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯161-4(1g，2.40mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(0.731g，2.88mmol)和乙酸钾(0.518g，5.28mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的脱气(经用氩气脱气)溶液中加入Pd(dppf)Cl2.DCM(0.050g，0.060mmol)并于80℃搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。3小时后，用水(5ml)淬灭反应物质并用EtOAc(2×10ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈棕色半固体的粗品4-[[2-氯-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯161-6(0.8g，收率50.32％，纯度70％)。LCMS(ES+):m/z 463.81[M+H]+。
步骤-4：使用氩气对4-[[2-氯-6-甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯161-6(0.8g，1.72mmol)、4-碘-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮(0.494g，1.72mmol)和乙酸钾(0.423g，4.31mmol)在甲苯(10mL):THF(10mL):水(2mL)中的混合物脱气30分钟，然后加入Pd(dppf)Cl2.DCM(0.070g，0.086mmol)。将RM于90℃搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。用硅藻土床过滤反应物质并用EtOAc彻底洗涤床。合并滤液，用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。粗化合物通过反相柱色谱法纯化((0.1％的甲酸/水)/ACN)，得到呈棕色固体的4-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯161-8(0.30g，收率27.35％，纯度90.00％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.70(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),7.43(d,J＝5.6Hz,1H),7.29(s,1H),7.06(d,J＝1.2Hz 1H),6.78(d,J＝1.2Hz 1H),6.06(s,1H),3.78(s,3H),3.65(s,3H),3.56(t,J＝5.6Hz,2H),3.44(t,J＝5.6Hz,2H),2.42(t,J＝5.6Hz,2H),2.08(t,J＝5.6Hz,2H),1.47(m,9H))LCMS(ES+):m/z 496.24[M+H]+。
步骤-5：于0℃向4-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯161-8(0.300g，0.604mmol)在CH2Cl2(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.23ml，3.02mmol)并将反应于室温搅拌1小时。减压蒸发溶剂并与干燥的CH2Cl2(3×20ml)共蒸馏，得到粗化合物。该粗化合物加乙醚研磨，得到呈棕色固体的4-[3-氯-5-甲氧基-4-(4-亚哌啶基甲基)苯基]-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮.TFA盐9(0.2g，收率59.66％，纯度92％)。LCMS(ES+):m/z 396.32[M+H]+。
步骤6：于0℃向4-[3-氯-5-甲氧基-4-(4-亚哌啶基甲基)苯基]-2-甲基-2,7-萘啶-1-酮161-9(0.350g，0.884mmol)在干燥的DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.343g，2.65mmol)并将反应混合物搅拌5分钟。向反应混合物中加入2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]乙酸(0.321g，0.884mmol)并将反应混合物再搅拌15分钟。加入PyBOP(0.552g，1.06mmol)并于室温继续搅拌16小时。16小时后，使用genvac蒸发大多数DMF，粗化合物通过制备-HPLC纯化，得到呈浅黄色固体的3-[4-[4-[2-[4-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]亚甲基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐化合物161(0.528g，收率69.35％，纯度99.34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),9.47(s,1H),8.74(d,J＝5.7Hz,1H),7.99(d,J＝1.2Hz,1H),7.64-7.60(m,1H),7.31(bs,1H),7.58(t,J＝6.3Hz,1H),7.19-7.10(m,2H),6.61-6.56(m,2H),6.09-6.06(m,1H),4.49-4.39(m,1H),3.83(s,3H),3.61-3.53(m,5H),3.50-343(m,6H),2.76-2.65(m,1H),2.60-2.55(m,1H),2.42-2.33(m,4H),2.07-1.89(m,7H),1.62-1.51(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 741.23[M+H]+。
按化合物161的合成制备化合物162
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),7.53(s,1H),6.66-6.63(m,2H),6.54(d,J＝2.0Hz,2H),5.96(d,J＝5.5Hz,2H),4.38(d,J＝7.0Hz,1H),3.76(d,J＝2.3Hz,6H),3.56-3.45(m,11H),2.73-2.67(m,1H),2.60-2.56(m,1H),2.36-2.27(m,3H),2.07-1.92(m,14H),1.60(bs,2H)。LCMS(ES+):m/z 714.43[M+H]+。
按化合物158的合成制备化合物163
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(s,1H),7.58(s,1H),7.34(bs,1H),6.98(d,J＝2.5Hz,1H),7.91(s,1H),6.68-6.56(m,2H),6.04(d,J＝5.2Hz,1H),4.40-4.37(m,1H),3.80(d,J＝2.5Hz,3H),3.58-3.45(m,11H),2.73-2.56(m,2H),2.41-2.32(m,3H),2.07-1.93(m,14H),1.63(bs,2H)。LCMS(ES+):m/z 718.09[M+H]+。
164的合成：
步骤-1：于0℃向氢化钠(在矿物油中的60％分散体)(1.95g，84.71mmol)在DMF(60mL)中的搅拌溶液中加入丙二酸二乙酯(8.14g，50.82mmol，7.68mL)并将反应混合物搅拌1.5小时。于0℃向反应混合物中加入1,2,3-三氟-5-硝基-苯(3g，16.94mmol)在DMF(10mL)中的溶液并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。完成后，用冰淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤有机层并用硫酸钠干燥。真空浓缩有机层。粗产物通过Davisil二氧化硅柱色谱法使用10％的乙酸乙酯/石油醚纯化，得到所需产物2-(2,6-二氟-4-硝基苯基)丙二酸二乙酯(3.5g，9.93mmol，收率58.61％)。LCMS(ES+):m/z 318.41[M+H]+。
步骤-2：向2-(2,6-二氟-4-硝基-苯基)丙二酸二乙酯(1.7g，5.36mmol)在乙酸(17mL)中的搅拌溶液中加入硫酸(6.37mL)，然后加入水(4.25mL)，并将反应混合物于100℃搅拌12小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物。将残余物溶解在乙酸乙酯(150mL)中并用水(20mL)洗涤。用硫酸钠干燥有机层并真空浓缩。将粗残余物溶解在乙醚中并用石油醚结晶出。过滤所得固体并用正-戊烷(2×10mL)洗涤，得到2-(2,6-二氟-4-硝基苯基)乙酸(0.8g，3.62mmol，收率67.60％)。
步骤-3：向2-(2,6-二氟-4-硝基-苯基)乙酸(0.8g，3.68mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(823.49mg，4.42mmol)在DMF(8mL)中的搅拌溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(2.86g，22.11mmol，3.85mL)并将反应混合物搅拌5分钟。向反应混合物中加入PyBOP(2.49g，4.79mmol)并于室温继续搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。完成后，用乙酸乙酯(2×75mL)萃取反应混合物并用水(50mL)洗涤。用盐水溶液(50mL)洗涤有机层，用硫酸钠干燥并真空浓缩。粗残余物使用柱色谱法(Davisil二氧化硅)使用5％的MeOH/DCM作为洗脱剂纯化，得到4-[2-(2,6-二氟-4-硝基-苯基)乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.8g，1.76mmol，收率47.89％，纯度85％)，LCMS(ES-):m/z 384.29[M-H]-
步骤-4：向4-[2-(2,6-二氟-4-硝基-苯基)乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.08mmol)在THF(12mL)中的搅拌溶液中加入锌粉(1.09g，16.61mmol)，然后加入氯化铵(888.37mg，16.61mmol)在水(6mL)中的溶液。反应混合物于室温搅拌4小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用乙酸乙酯(100mL)洗涤。用盐水溶液(50mL)洗涤有机层，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到4-[2-(4-氨基-2,6-二氟-苯基)乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.7g，866.68umol，收率41.75％，纯度44％)。粗产物原样用于下一步LCMS(ES+):m/z 356.37[M+H]+。
步骤-5：向4-[2-(4-氨基-2,6-二氟-苯基)乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.25mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(283.67mg，3.38mmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(518.69mg，2.70mmol)。反应混合物于70℃搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。完成后，将反应混合物倒入水(50mL)中并用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤有机层，用硫酸钠干燥并真空浓缩。粗残余物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0-60％的乙酸乙酯/石油醚)，得到4-[2-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2,6-二氟-苯基]乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.070g，91.31umol，收率4.06％)。LCMS(ES+):m/z467.09[M+H]+。
步骤-6：向4-[2-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2,6-二氟-苯基]乙酰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.07g，150.06umol)在DCM(3mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(171.10mg，1.50mmol)。反应混合物于室温搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物。粗残余物与甲苯和乙腈共蒸馏并干燥，得到为TFA盐的3-[3,5-二氟-4-(2-氧代-2-哌嗪-1-基-乙基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.08g，91.52umol，收率60.99％)。LCMS(ES+):m/z 367.20[M+H]+
步骤-7：向2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.05g，120.40umol)和3-[3,5-二氟-4-(2-氧代-2-哌嗪-1-基-乙基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(71.56mg，120.40umol)在乙腈中的搅拌溶液中加入乙酸(7.23mg，120.40umol，6.89uL)和乙酸钠(29.63mg，361.19umol，19.37uL)并将反应混合物于75℃搅拌4小时。于0℃向反应混合物中加入SiliaBond氰基硼氢化物(200mg，120.40umol)并于室温继续搅拌2小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。完成后，真空蒸发挥发物，粗化合物通过制备-HPLC纯化，得到为TFA盐的3-[3,5-二氟-4-[2-[4-[[2-氟-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(24mg，31.21umol，收率25.92％，纯度99.57％)。LCMS(ES-):m/z 650.35[M-H]-。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.85-1.95(m,1H),2.05-2.15(m,1H),2.55-2.65(m,1H),2.70-2.80(m,1H),3.00-3.40(m,8H),3.63(s,3H),4.02(s,3H),4.20-4.60(m,5H),6.35(d,J＝10.8Hz,2H),7.20-7.30(m,2H),7.72(s,1H),8.24(s,1H),9.87(bs,1H),10.85(s,1H),14.25(bs,1H)。
化合物165的合成：
步骤-1：向4-(4-氨基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(10g，36.18mmol)在DMF(50mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(18.24g，217.10mmol)，然后加入4-溴哌啶-2,6-二酮(7.64g，39.80mmol)。让反应混合物于60℃加热16小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用水(100mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并减压除去溶剂。粗产物通过柱色谱法纯化(硅胶，230-400目，30％的EtOAc/石油醚)，得到呈灰色固体的4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(9g，收率59.06％，纯度92％)。LCMS(ES+):m/z 388.34[M+H]+。
步骤-2：向4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，12.90mmol)在DCM(15mL)中的搅拌溶液中加入TFA(14.71g，129.04mmol)并让反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测反应。完成后，减压蒸发溶剂。所得粗品通过反相柱色谱法使用(C18/100g柱子，使用0.1的甲酸/MeCN:H2O)纯化，得到呈灰色固体的3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(3g，收率47.50％，纯度82％，061)。LCMS(ES+):m/z 288.33[M+H]+。
步骤-3：向4-((4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(0.6g，2.09mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(1.62g，12.53mmol)并于室温搅拌5分钟，然后加入化合物164-5(0.454g，2.51mmol)和HATU(1.59g，4.18mmol)。加入后，让反应混合物于室温搅拌4小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，减压蒸发溶剂。所得粗品通过柱色谱法纯化(硅胶230-300目，并用50％的EtOAc/石油醚洗脱产物)，得到呈白色固体的4-((4-(1-(2-(4-硝基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(0.350g，收率33.49％，纯度90％)。LCMS(ES+):m/z 451.61[M+H]+。
步骤-4：向4-((4-(1-(2-(4-硝基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(0.350g，0.077mmol)在乙醇(10mL)和甲醇(5mL)混合物中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(0.300g，2.82mmol)并让于室温在氢气(气球压力)下搅拌3小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用硅藻土床过滤反应混合物并用甲醇彻底洗涤床。减压浓缩合并的滤液，得到为黑色粘性化合物的4-[4-[1-[2-(4-氨基苯基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.150g，收率371.90％，纯度81％)；LCMS(ES+):m/z 421.19[M+H]+。
步骤-5：向3-[4-[1-[2-(4-氨基苯基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.150g，0.356mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(0.081g，0.995mmol)，然后加入乙酸(0.019g，0.331mmol)、分子筛(0.050g)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(42-5，0.103g，0.331mmol)并让反应混合物于70℃搅拌3小时，然后让RM于室温冷却，加入Si-CBH(0.096g，1.66mmol)并继续搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。完成后，用硅藻土床过滤RM，用乙腈洗涤床并浓缩溶剂。粗残余物通过制备-HPLC纯化，得到呈灰白色固体的3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基氨基]苯基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐(0.046g，收率16.58％，纯度99.51％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.44(bs,1H),10.77(s,1H),8.20(s,1H),7.58(s,1H),7.11-7.09(m,2H),6.92-6.89(m,6H),6.60(d,J＝8.5Hz,2H),4.51(d,J＝12.5Hz,1H),4.29-4.24(m,3H),4.07-4.03(m,1H),4.01(s,6H),3.81-3.61(m,5H),3.01(t,J＝12.3Hz,1H),2.73-2.67(m,1H),2.59-2.52(m,3H),2.11-2.06(m,1H),1.87-1.83(m,1H),1.68(t,J＝12.8Hz,2H),1.35-1.32(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 718.13[M+H]+
化合物166的合成
步骤-1：向3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮1-1(1g，3.48mmol)在DMF(20mL)中的冷却至0℃的溶液中加入DIPEA(1.35g，10.44mmol)、HATU(2.00g，5.22mmol)并搅拌10分钟。向反应混合物中加入3-硝基苯甲酸166-1(639.73mg，3.83mmol)并于室温搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应完成后，向反应混合物中加入冰冷水。滤出固体并加乙醚研磨。倾析出乙醚并真空干燥所得残余物，得到呈浅黄色固体的3-[4-[1-(3-硝基苯甲酰基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮166-4(0.4g，收率23.17％，纯度88％)。LCMS(ES+):m/z 437.70[M+H]+。
步骤-3：向3-[4-[1-(3-硝基苯甲酰基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮166-4(0.4g，0.916mmol)在甲醇(10mL)和乙醇(10mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(0.48g，4.582mmol)。将反应烧瓶抽空，通过使用氢气囊回填氢气并将反应在氢气氛下于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。用硅藻土床过滤反应混合物，真空浓缩，与甲苯共蒸馏并干燥，得到呈白色固体的3-[4-[1-(3-氨基苯甲酰基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮166-5(0.35g，收率93.95％，纯度85％)。LCMS:[M+H]+407.36。
步骤-4：向3-[4-[1-(3-氨基苯甲酰基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮5(0.1g，0.246mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌溶液中加入分子筛(50mg)、乙酸(0.014g，0.246mmol)和无水乙酸钠(0.060g，0.738mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛166-6(0.077g，0.246mmol)并于80℃搅拌5小时。将反应混合物冷却至室温，加入Silia Bond氰基硼氢化物(0.071g，1.23mmol)并让于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。通过硅藻土床过滤反应物质，减压浓缩并通过制备-HPLC纯化，得到呈灰白色固体的3-[4-[1-[3-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基氨基]苯甲酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮化合物166(13.4mg，16.14umol，收率6.56％，纯度98.51％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δ10.77(s,1H),8.19(s,1H),7.55(s,1H),7.06(m,J＝19.3Hz,1H),6.88(s,1H),6.76(t,J＝10.4Hz,1H),6.59(q,J＝9.6Hz,1H),4.58(s,1H),4.25(m,J＝7.1Hz,1H),3.90(s,1H),3.60(s,1H),3.12(d,J＝40.4Hz,1H),2.69(m,J＝7.1Hz,1H),2.09(m,J＝3.4Hz,1H),1.78(m,J＝10.7Hz,1H),1.49(s,1H)。LCMS(ES-):m/z 702.46[M-H]–。
化合物167的合成
步骤-1：于室温在氩气氛下向1-溴-4-硝基苯(3g，14.85mmol)在1,4-二噁烷(150mL)中的搅拌溶液中加入双(频哪醇合)二硼(5.66g，22.28mmol)，然后加入乙酸钾(4.37g，44.55mmol)。用氩气对反应混合物反复脱气并在氩气氛下一次性加入Pd(dppf)Cl2.dcm(0.36g，0.44mmol)。反应混合物再次用氩气反复脱气并然后在85℃回流下加热3小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(200mL)洗涤。浓缩滤液，得到残余物质。将残余物质溶解在乙酸乙酯(250mL)中，用水(1×100mL)、盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。该粗品加己烷(100mL)研磨，倾析出有机层并浓缩有机层，得到呈黄色固体的4,4,5,5-四甲基-2-(4-硝基苯基)-1,3,2-二氧杂硼戊环167-2(2.5g，收率63.28％，纯度93.63％)。LCMS(ES-):m/z[M-H]-166.12(硼酸物质)。
步骤-2：于室温在氩气氛下向4,4,5,5-四甲基-2-(4-硝基苯基)-1,3,2-二氧杂硼戊环167-2(0.5g，2.01mmol)在1,2-二甲氧基乙烷(25mL)中的搅拌溶液中加入2-(4-溴苯基)乙酸苄酯(0.612g，2.01mmol)，然后加入溶解在水(5mL)中的碳酸钾(0.83g，6.02mmol)。用氩气对反应混合物反复脱气并在氩气氛下一次性加入Pd(PPh3)4(0.11g，0.1mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于90℃回流3小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(50mL)洗涤。浓缩滤液，得到残余物质。将残余物质溶解在乙酸乙酯(100mL)中，用水(1×50mL)、盐水(1×25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗化合物。该粗品通过柱色谱法在硅胶(230/400目)上纯化并在6-8％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈白色固体的2-[4-(4-硝基苯基)苯基]乙酸苄酯167-3(0.15g，收率20.44％，纯度95％)。
步骤-3：于0℃向2-(4'-硝基-[1,1'-联苯]-4-基)乙酸苄酯167-3(0.1g，0.28mmol)在干燥的THF(12mL)中的搅拌溶液中加入锌(0.18g，2.8mmol)，然后于0℃逐滴加入在水(4mL)中的氯化铵(0.30g，5.6mmol)。将反应混合物于室温搅拌30分钟。向反应混合物中加入甲醇(6mL)，反应于室温继续2小时，同时通过TLC监测。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物并用THF(50mL)洗涤。浓缩滤液，将残余物质溶解在乙酸乙酯(100mL)中并用水(2×50mL)、盐水(1×25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈橙色固体的2-(4'-氨基-[1,1'-联苯]-4-基)乙酸苄酯167-4(0.09g，收率86.42％，纯度87.73％)。LCMS(ES+):m/z 318.28[M+H]+
步骤-4：于室温向2-[4-(4-氨基苯基)苯基]乙酸苄酯167-4(0.130g，0.4mmol)在干燥的DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(0.201g，2.4mmol)，然后在密封管中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(0.314g，1.6mmol)。将反应混合物于70℃加热12小时。反应完成后，浓缩反应混合物，得到粗化合物。该粗品通过柱色谱法在硅胶(100/200目)上纯化并在40-50％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈浅绿色固体的2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]苯基]乙酸苄酯6(0.120g，收率66.01％，纯度96.55％)。LCMS(ES+):m/z 429.30[M+H]+
步骤-5：于室温向2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]苯基]乙酸苄酯167-5(0.120g，0.28mmol)在THF(10mL)和甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(0.029g，0.28mmol)。对反应混合物脱气并于室温在H2气球压力下搅拌2小时，同时通过TLC监测。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物并用甲醇(50mL)洗涤。浓缩滤液，如此获得的残余物质加戊烷(10mL)研磨并沉淀出固体。倾析出上清有机层，充分干燥固化产物，得到呈灰白色固体的2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]苯基]乙酸167-7(0.09g，收率91.15％，纯度95.97％)。LCMS(ES+):m/z 339.28[M+H]+
步骤-6：于室温在N2气氛下向4-[3,5-二甲氧基-4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.10g，0.2mmol)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.13g，1.0mmol)。反应混合物于室温搅拌30分钟。该反应混合物的pH是碱性的。将反应混合物冷却至0℃并向反应混合物中加入2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]苯基]乙酸167-7(0.068g，0.20mmol)，然后加入PyBop(0.13g，0.26mmol)。用时30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温搅拌12小时，同时通过TLC和LC-MS监测反应。反应完成后，在Genevaccum下浓缩反应混合物，得到粗化合物。该粗品通过制备HPLC纯化，得到呈浅绿色固体的3-[4-[4-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基]苯基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA化合物167(0.08g，收率47.88％，纯度98.40％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ14.25(s,1H),10.81(s,1H),9.41(s,1H),8.23(s,1H),7.64(s,1H),7.50(d,J＝8.3Hz,2H),7.40(d,J＝8.7Hz,2H),7.23(d,J＝8.3Hz,2H),6.97(s,2H),6.74(d,J＝8.7Hz,2H),4.44-4.36(m,2H),4.28(bs,2H),4.16(d,J＝14.1Hz,1H),3.95(s,6H),3.83-3.72(m,2H),3.63(s,3H),3.49-3.33(m,3H),3.07-3.05(m,3H),2.80-2.73(m,1H),2.67-2.57(m,1H),2.15-2.07(m,1H),1.93-1.89(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 704.56[M+H]+
化合物168的合成
步骤-1：于0℃向155-10(0.4g，0.663mmol)中加入4.0M的HCl/1,4-二噁烷(2mL)，然后让反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，减压蒸发溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈棕色固体的4-[3,5-二甲氧基-4-(4-哌啶基甲基)苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.35g，收率89.61％，纯度91.6％)。LCMS(ES+):m/z 503.95[M+H]+。
步骤-2：向155-11(0.35g，0.694mmol，021)在CH3CN(10mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.87mL，4.85mmol)，接着加入155-12(104mg，0.833mmol)，然后让反应混合物于70℃搅拌3小时，同时通过TLC监测反应。完成后，用水(50ml)淬灭反应物质并用10％的MeOH/DCM(2×50ml)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩。粗品通过柱色谱法纯化(devisil二氧化硅，5％的MeOH/DCM)，得到呈白色固体的4-[4-[[1-(2-羟基乙基)-4-哌啶基]甲基]-3,5-二甲氧基-苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.25g，收率68.32％)。LCMS(ES+):m/z 547.96[M+H]+。
步骤-3：向155-13(0.3g，0.548mmol)的悬浮液中加入TEA(0.15mL，1.097mmol)，然后加入甲烷磺酰氯(0.063g，0.548mmol)并让反应混合物于室温搅拌4小时，同时通过TLC监测。反应完成(根据TLC和LCMS)后，蒸发溶剂，粗品与甲苯共蒸馏并用乙醚洗涤，得到2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-1-哌啶基]乙基甲烷磺酸酯(0.2g，纯度54％)。LCMS(ES+):m/z 625.15[M+H]+。
步骤-4：于室温向155-15(0.13g，0.319mmol)在ACN(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.29g，2.25mmol)，接着加入1-1(0.2g，0.32mmol)，在密封管中让反应混合物搅拌16小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，减压除去溶剂，所得粗品用水稀释并用10％的MeOH/DCM萃取。有机层用盐水溶液洗涤。粗品通过Biotage使用5％的MeOH/DCM纯化，得到呈棕色固体的155-16(0.15g，纯度89％)。LCMS:[M-H]-816.2。
步骤-5：向3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]-1-哌啶基]乙基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.120g，0.147mmol)在DCM(1mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1mL)并将反应混合物于50℃加热6小时，同时通过TLC和LCMS监测反应。完成后，减压除去溶剂，粗品通过制备-HPLC纯化，得到呈淡棕色固体的3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-1-哌啶基]乙基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(50.3mg，纯度93.35％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝14.2(s,1H),10.78(s,1H),9.47-9.25(m,2H),8.19(s,1H),7.21-6.95(m,2H),6.87(s,2H),6.64(d,J＝8Hz,2H),4.30-4.26(m,1H),3.87(s,6H),3.61(m,3H),3.51(m,8H),3.06(m,4H),2.78-2.73(m,1H),2.62-2.60(m,4H),2.11-2.07(m,1H),1.92-1.80(m,8H),1.49-1.46(m,2H)LCMS:[M+H]+696.66。
化合物169的合成：
步骤-1：于室温向1-叔-丁氧基羰基哌啶-4-甲酸(2.0g，8.7mmol)在DCE(20mL)中的搅拌溶液中加入T3P(50％，在EtOAc中)(16.6mL，26.1mmol)和DIPEA(5.6g，43.5mmol，7.44mL)。将反应混合物搅拌15分钟，然后加入2-氟-4-硝基-苯胺(1.6g，10.4mmol)。然后将反应混合物于80℃搅拌16小时。然后将其冷却至室温并减压除去挥发物。向残余物中加入饱和NaHCO3溶液(30mL)并使用EtOAc(30mL×3)进行萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目大小，0-100％的EtOAc/石油醚梯度洗脱)，得到呈灰白色固体的所需化合物4-[(2-氟-4-硝基-苯基)氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.8g，7.62mmol，收率88％)。
步骤-2：向4-[(2-氟-4-硝基-苯基)氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，6.8mol)在MeOH(70mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(0.5g)并在氢气氛(氢气球)中将反应混合物于室温搅拌6小时。反应完成(如由TLC所指示)后，通过硅藻土滤出催化剂并用MeOH洗涤。减压浓缩滤液，残余物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目大小，0-100％的EtOAc-石油醚梯度洗脱)，得到为白色固体产物的4-[(4-氨基-2-氟-苯基)氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.9g，5.6mmol，收率82.3％)。LCMS(ES-):m/z 336.45[M-H]-。
步骤-3：向在(7mL)中的169-4(0.5g，1.5mmol)中加入碳酸氢钠(0.74g，9.0mmol)和化合物3-溴哌啶-2,6-二酮(0.86g，4.5mmol)。反应混合物于70℃搅拌16小时。反应完成(如由TLC所指示)后，将其冷却至室温并向其中加入水(20mL)。使用EtOAc(20mL×3)进行萃取；合并有机层，用水(30mL×3)、盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目，0-100％的EtOAc-石油醚梯度洗脱)，得到呈白色固体的所需化合物4-[[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，0.9mmol，收率60％)。LCMS(ES+):m/z471.39[M+Na]+。
步骤-4：于0℃向4-[[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.170g，0.4mmol)在DCM(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.45g，4.0mmol)并用时2小时让反应混合物温热至室温。反应完成(如由TLC所指示)后，减压除去挥发物并向残余物中加入Et2O(5mL)。过滤观察到的固体并干燥，得到呈白色固体的所需化合物N-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌啶-4-甲酰胺(TFA盐，0.11g，0.23mmol，收率60％)。LCMS(ES+):m/z 349.32[M+H]+。
步骤-5：向N-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌啶-4-甲酰胺(40mg，0.086mmol)在ACN(1.0mL)中的搅拌溶液中加入乙酸钠(28mg，0.34mmol)、分子筛(50mg)和AcOH(6.9mg，0.115mmol)。将所得混合物搅拌10分钟，然后向其中加入2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(50mg，0.115mmol)。然后将反应混合物于80℃搅拌4小时，随后将其冷却至0℃。然后向其中加入Si-CNBH3(50mg)并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。然后将其通过硅藻土过滤并用THF(5mL×2)洗涤。然后减压浓缩滤液并通过制备-HPLC纯化残余物，得到呈灰白色固体的所需化合物1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-N-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌啶-4-甲酰胺(13.2mg，0.017mmol，收率15％，纯度97.46％)。LCMS(ES+):m/z 650.0[M+H]+；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.80-2.20(m,6H)；2.58-2.80(m,3H)；3.20-3.30(m,2H)；3.50-3.60(m,2H)；3.63(s,3H)；4.02(s,3H)；4.30-4.38(m,1H)；4.40-4.50(m,2H)；6.12(bs,1H)；6.45(d,J＝8.8Hz,1H)；6.53(d,J＝13.6Hz,1H)；7.21-7.26(m,1H)；7.34(s,1H)；7.45(s,1H)；7.72(s,1H)；8.22(s,1H)；8.98(bs,1H)；9.41(s,1H)；10.80(s,1H)；14.40(bs,1H)。
化合物170的合成：
步骤-1：于室温向哌啶-4-甲酸苄酯(HCl盐)(1.4g，5.474mmol)在DMF(15ml)中的搅拌溶液中加入1-氟-4-硝基-苯(1.16g，8.221mmol)和Cs2CO3(5.35g，16.420mmol)。将反应混合物于70℃搅拌6小时。反应完成(由如TLC所指示)后，将反应混合物冷却至环境温度并向其中加入水(30mL)。使用EtOAc(2×50mL)进行萃取；合并有机层，用水(50mL×2)、盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。所得粗品通过硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到1-(4-硝基苯基)哌啶-4-甲酸苄酯(1.6g，4.7mmol，收率86.02％)。
步骤-2：于室温向1-(4-硝基苯基)哌啶-4-甲酸苄酯(1.5g，4.406mmol)在EtOH(15mL)中的搅拌溶液中加入氯化亚锡二水合物(2.09g，11.022mmol)并将反应物质于70℃搅拌4小时。反应完成后，将其冷却至环境温度并减压除去EtOH。向残余物中加入饱和碳酸氢钠溶液(30mL)并使用EtOAc(3×30mL)进行萃取。合并有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。所得粗品通过硅胶柱色谱法纯化(Davisil，乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到1-(4-氨基苯基)哌啶-4-甲酸苄酯(0.9g，2.89mmol，收率66.176％，纯度70％)。LCMS(ES+):m/z 311.26[M+H]+。
步骤-3：向1-(4-氨基苯基)哌啶-4-甲酸苄酯(900mg，2.90mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入无水NaHCO3(1.46g，17.378mmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(3.34g，17.394mmol)。然后将反应混合物于70℃搅拌16小时。反应完成后，将其冷却至室温并向其中加入冰冷水(30mL)。过滤所得固体，用水洗涤并干燥。通过硅胶柱色谱法纯化(使用230-400目硅胶，0-100％的EtOAc/石油醚梯度洗脱)，得到呈灰白色固体的1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-4-甲酸苄酯(0.35g，0.830mmol，收率28.68％，纯度92％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+422.51
步骤-4：向1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-4-甲酸苄酯(0.35g，830.39mmol)在MeOH(3mL)和THF(3mL)中的搅拌溶液中加入10％钯碳(120mg)并在氢气氛下将反应混合物于室温搅拌2小时。反应完成(如由TLC所指示)后，通过硅藻土滤出催化剂并用THF(5mL×2)洗涤。减压浓缩滤液，得到呈棕色稠油的所需化合物1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-4-甲酸(0.25g，0.754mmol，收率91％，纯度65.7％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+332.28。
步骤-5：向6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.190g，0.765mmol)在ACN(9mL)中的搅拌溶液中加入NaOAc(0.188g，2.291mmol)、MS(0.2g)和AcOH(0.212g，3.530mmol)。然后向其中加入2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.240g，0.766mmol)并将反应物质于70℃搅拌16小时。然后将其冷却至0℃并然后向其中加入Si-CNBH3(0.240g，3.819mmol)。反应混合物于室温搅拌12小时。然后将其通过硅藻土垫过滤并用10％的MeOH/DCM(3×20mL)洗涤。减压浓缩滤液并向残余物中加入饱和NaHCO3溶液(30mL)。使用EtOAc(30mL×3)进行萃取；合并有机层，用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得残余物通过柱色谱法(230-400目硅胶，0-100％的EtOAc/石油醚梯度洗脱)，得到呈白色固体的6-[[2-羟基-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.35g，0.659mmol，收率83.95％)，LCMS(ES-):m/z 544.43[M-H]-
步骤-6：于0℃向6-[[2-羟基-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.35g，0.641mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入4M的HCl/二噁烷(0.8mL，3.21mmol)。将反应物质于室温搅拌3小时。反应完成后，减压除去挥发物，残余物用乙醚(3mL×2)洗涤，得到为白色固体产物的所需化合物4-[3-羟基-5-甲氧基-4-[(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基氨基)甲基]苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.15g HCl盐，337.64mmol，收率48％，纯度78.99％)。LCMS(ES+):m/z 446.31[M+H]+
步骤-7：向4-[3,5-二甲氧基-4-[(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基氨基)甲基]苯基]-6-甲基-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(80.0mg，0.166mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入DIPEA(107mg，0.827mmol)和1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-4-甲酸(95mg，0.286mmol)。将其搅拌15分钟，然后加入PyBOP(0.172g，0.330mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时。反应完成后，将其冷却至0℃并向其中加入饱和NaHCO3溶液(10mL)。过滤如此获得的固体，用水(1mL×2)洗涤并干燥。然后通过制备HPLC纯化其，得到呈淡棕色固体的3-((4-(4-96-((2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1-吡唑并(3,4)吡啶-4-基)苄基)氨基)1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羰基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(40.7mg，0.0497mmol，收率30.4％)。LCMS(ES+):m/z 759.65[M+H]+,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.20(bs,1H)；10.78(bs,1H)；8.19(bs,1H)；7.55(s,1H)；6.92-6.80(m,3H)；6.78-6.70(m,2H)；6.64-6.48(m,4H)；5.40-5.34(m,1H)；5.30-5.20(m,1H)；4.55-4.42(m,2H)；4.22-4.12(m,3H)；3.91(s,6H)；3.72-3.58(m,2H)；3.61(s,3H)；3.46-3.36(m,2H)；2.70-2.50(m,7H)；2.14-2.06(m,1H)；1.90-1.78(m,1H)；1.74-1.60(m,4H)。
化合物171的合成：
步骤-1：向5-氨基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.5g，2.01mmol)和1-(4-硝基苯基)哌啶-4-酮(443.43mg，2.01mmol)在DCE(5mL)和甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入乙酸(0.17mL，3.02mmol)和分子筛(450mg)。将反应混合物加热至70℃，保持5小时。将反应混合物冷却至25℃并加入Si-CBH(0.45g)。反应混合物于25℃搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，过滤反应混合物并用甲醇(2×50mL)和乙酸乙酯(2×50mL)彻底洗涤固体。合并有机溶剂，真空浓缩。粗产物通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目，10-20％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈浅黄色固体的5-[[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.58g，收率51.10％，纯度80.28％)。LCMS(ES+):m/z 475.36[M+Na]+
步骤-2：在氮气下对5-[[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.5g，1.10mmol)在甲醇(20mL)中的搅拌溶液脱气10分钟，然后加入钯碳(10％)(0.5g，4.70mmol)。将反应混合物于室温在氢气下(气球压力下)搅拌4小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用甲醇(2×25ml)洗涤。合并有机层，真空浓缩，得到呈棕色固体的5-[[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.437g，收率91.21％，纯度97.44％)。胺产物不经任何进一步的纯化即用于进一步的反应。LCMS(ES+):m/z 423.33[M+H]+
步骤-3：在密封管中向5-[[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.3g，0.71mmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(136.32mg，1.06mmol)在DMF(6mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(179mg，2.13mmol)。反应混合物于70℃搅拌22小时。通过TLC监测反应进度。反应完成后，用冷水稀释反应混合物并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物通过柱色谱法纯化，得到呈深棕色固体的5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.379g，收率97.76％，纯度97.73％)。LCMS(ES+):m/z534.48[M+H]+
步骤-4：向5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]氨基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(0.150g，0.281mmol)在DCM(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.22mL，2.81mmol)。反应混合物于室温搅拌3小时。通过LCMS监测反应进度。反应完成后，减压干燥反应混合物并与甲苯(10ml)共蒸馏。粗化合物加乙醚(10ml×2)研磨，得到呈深灰色固体的3-[4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基氨基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.12g，211.00umol，收率75.07％，纯度96.28％)。LCMS(ES+):m/z 434.40[M+H]+
步骤-5：向2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(60mg，138.97umol)和3-[4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基氨基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(76.10mg，138.97umol)在甲醇(2mL)和1,2-二氯乙烷(2mL)中的搅拌溶液中加入乙酸(11.92uL，208.45umol)、无水乙酸钠(34.20mg，416.91umol，22.35uL)和分子筛(2g，138.97umol)并让反应混合物于70℃搅拌5小时。将反应混合物冷却至25℃并加入Si-CBH(60mg)。此外，反应混合物于25℃搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，过滤反应混合物并用甲醇(2×5mL)和乙酸乙酯(2×5mL)彻底洗涤固体。合并有机溶剂，真空浓缩。粗产物通过RP-制备HPLC纯化，得到呈淡灰色固体的产物3-[4-[4-[[2-[[2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]氨基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(43.8mg，收率35.68％，纯度96.14)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 14.28(s,1H),11.12(bs,0.7H),10.83(s,1H),9.81(bs,1H),8.23(bs,1H),7.73(s,1H),7.46(m,4H),7.17(m,1H),6.79(d,J＝8.4Hz,2H),6.71(d,J＝8.0Hz,1H),6.54(d,J＝7.6Hz,1H),6.35(bs,1H),4.95(bs,1H),4.54(bs,2H),4.40(m,3H),4.00(s,3H),3.77(m,10H),2.17(bm,2H),2.75(m,1H),2.67(m,1H),2.17(bm,2H),2.11-2.07(m,1H),1.97-1.88(m,3H)。LCMS(ES+):m/z 735.48[M+H]+
化合物172的合成
步骤-1：向化合物哌嗪-1-甲酸叔丁酯(85.40g，536.82mmol)在DMF(500mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(262.4g，805.4mmol)并搅拌15分钟，然后加入1,2-二氟-4-硝基-苯(100g，536.82mmol)。将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测。完成后，用冰片淬灭反应物质并过滤沉淀的固体，真空干燥，得到呈黄色固体的4-(2-氟-4-硝基-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯172-3(152g，收率88.85％，纯度97.94％)。
步骤-2：向4-(2-氟-4-硝基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯172-3(10g，325.33mmol)在20ml二噁烷中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(30ml)并将反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。将溶剂减压蒸发至干，粗固体加乙醚(75ml)和正-戊烷(100ml)研磨，得到1-(2-氟-4-硝基苯基)哌嗪172-4的HCl盐(36.0g，136.2mmol，收率88.62％，纯度99％)。LCMS(ES+):m/z 226.10[M+H]+
步骤-3：向1-(2-氟-4-硝基-苯基)哌嗪172-4(8.0g，35.52mmol)在甲苯(200ml)和ACN(100ml)中的搅拌溶液中加入NaOAc(7.28g，88.80mmol)，然后加入AcOH(8ml)和分子筛(10g)，并搅拌15分钟。15分钟后，加入3,3-二氟-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(11.49g，48.84mmol，使用前与甲苯共蒸馏)并让反应混合物回流12小时，同时通过LCMS和TLC监测。完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土床过滤。将滤液真空浓缩至干，得到粗残余物3,3-二氟-4-(4-(2-氟-4-硝基苯基)哌嗪-1-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸酯172-6(12.2g，纯度98.89％)，其不经任何纯化即用于下一步。LCMS(ES+):m/z 443.75[M+H]+
步骤-4：将化合物172-6(8g，18.08mmol)溶解在甲醇(20mL)、DCE(20mL)和AcOH(2ml)的混合物中，让搅拌15分钟，然后加入氰基硼氢化物(5.68g，90.41mmol)。加入后，将反应混合物于室温搅拌24小时，同时通过LCMS和TLC监测。通过硅藻土床过滤反应混合物并真空浓缩滤液。粗化合物通过(硅胶100-200目，并用30％的乙酸乙酯/石油醚-纯乙酸乙酯洗脱产物)柱色谱法纯化，得到3,3-二氟-4-[4-(2-氟-4-硝基-苯基)哌嗪-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯172-7(7.2g，15.39mmol，收率85.11％，纯度98％)。LCMS(ES+):m/z 445.35[M+H]+
步骤-5：于室温向3,3-二氟-4-(4-(2-氟-4-硝基苯基)哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯172-7(5g，11.25mmol)在乙酸乙酯(100mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(3.59g，33.75mmol)。将反应混合物于室温在H2气球压力下搅拌12小时并通过TLC监测。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物并用乙酸乙酯(200mL)洗涤。浓缩滤液，得到粗产物，该粗产物加戊烷研磨，倾析出有机层并过滤固化的产物，充分干燥，得到呈浅粉色固体的4-[4-(4-氨基-2-氟-苯基)哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯172-8(3g，收率61.48％，纯度95.56％)。LCMS(ES+):m/z 415.56[M+H]+
步骤-6：于室温向密封管中4-[4-(4-氨基-2-氟-苯基)哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯172-8(5g，12.06mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(6.95g，36.19mmol)，然后加入碳酸氢钠(6.08g，72.38mmol)并让反应混合物于90℃搅拌12小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(200mL)稀释并通过硅藻土过滤。用水(2×100mL)、盐水(1×25mL)洗涤滤液，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100/200目)纯化并在2-3％的MeOH/DCM)下洗脱产物，得到呈紫色固体的(4-(4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌嗪-1-基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯172-9(4.2g，收率56.31％，纯度91.08％)。LCMS(ES+):m/z 526.48[M+H]+
步骤-7：于0℃向4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯172-9(7g，13.32mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/二噁烷(30.35mL，665.95mmol，30.35mL)。将反应混合物于0℃搅拌30分钟，缓慢温热至室温并于室温搅拌6小时。反应完成后，浓缩反应混合物，残余物质加乙醚(3×100mL)研磨，充分干燥沉淀出的固体，得到呈浅蓝色固体的3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮172-10，为HCl盐(5.54g，收率90.05％，纯度91.71％)。LCMS(ES+):m/z 426.22[M+H]+
步骤8：向3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮HCl 172-10(5.65g，12.23mmol)在DCE:MeOH(60:60ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(3g)、乙酸(0.797g，13.27mmol)和乙酸钠(3.27g，39.82mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛172-11(4g，13.27mmol)并将反应混合物于70℃加热5小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(3.85g，66.37mmol)。于室温继续搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。16小时后，通过硅藻土过滤反应物质，浓缩并通过(Devisil硅胶，并用1％至5％的MeOH/CH2Cl2洗脱产物)柱快速色谱法纯化，得到化合物，将该化合物溶解在干燥的DCM(10ml)中并于0℃加入TFA(5ml)，将其搅拌30分钟。30分钟后，浓缩反应粗品至干，用乙醚(3×20ml)洗涤所得粗品，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[1-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA化合物172(3.21g，3.83mmol，收率28.85％，纯度98.40％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.97(s,1H),7.52(s,1H),6.84(t,J＝9.3Hz,1H),6.66(s,2H),6.51(d,J＝15.0Hz,1H),6.42(d,J＝8.5Hz,1H),4.28-4.24(m,3H),3.86(s,7H),3.47(s,6H),2.90(bs,9H),2.76-2.68(m,1H),2.53-2.54(m,1H),2.08(d,J＝10.7Hz,9H),1.91-1.87(m,1H)。LCMS(ES+):m/z711.20[M+H]+
化合物177的合成
向3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮HCl盐172-10(4.22g，9.13mmol)在DCE:MeOH(60:60ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(4g)、乙酸(0.822g，13.69mmol)和乙酸钠(1.50g，18.25mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛177-1(3g，9.13mmol)并将反应混合物于70℃加热5小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(2.64g，45.63mmol)。于室温继续搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。16小时后，通过硅藻土过滤反应物质，浓缩并通过制备HPLC纯化粗化合物，得到呈淡黄色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(1.50g，收率8.85％，纯度97.72％)化合物177。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.48(s,1H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),7.99(s,1H),7.60(d,J＝5.8Hz,1H),7.22(s,1H),7.16(s,1H),6.89(t,J＝9.1Hz,1H),6.54(d,J＝14.9Hz,1H),6.45(d,J＝8.7Hz,1H),4.30-4.24(m,1H),3.94(s,2H),3.90(s,3H),3.61(s,4H),3.27-3.08(m,10H),2.72-2.67(m,1H),2.59-2.58(m,3H),2.08-2.05(m,2H),1.89-1.83(m,2H),LCMS(ES+):m/z738.33[M+H]+。
制备性HPLC条件：
柱子/尺寸：XSELECT C18(19*150*5um))流动相A：0.1％TFA/水流动相B：乙腈(org)梯度(时间/％B)：0/5,3/5,10/20,14.35/20,16.36/95,19/95,19.1/5,22/5流速：18ml/min
按化合物177的合成制备化合物182。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.34(s,1H),10.78(s,1H),8.24(s,1H),7.64(s,1H),6.97(s,2H),6.85(t,J＝9.2Hz,1H)6.53-6.49(m,1H),6.42(d,J＝8.5Hz,1H),4.28-4.24(m,3H),3.95(s,6H),3.63(s,3H),3.31-2.90(m,13H),2.73-2.67(m,1H),2.59-2.53(m,1H),2.08-2.05(m,3H),1.90-1.81(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 723.1[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物183。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),8.22(s,1H),7.66(s,1H),7.35(s,1H),7.25(s,1H),7.22(s,1H),6.88(t,J＝9.2Hz,1H),6.55-6.50(m,1H),6.45(d,J＝8.6Hz,1H),4.28-4.26(m,1H),3.96(s,7H),3.61(s,3H),3.26-3.07(m,11H),2.77-2.67(m,1H),2.59-2.56(m,1H),2.08-2.05(m,2H),1.90-1.83(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 727.07[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物184。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.49(s,1H),8.76(d,J＝5.8Hz,1H),7.92(s,1H),7.65(d,J＝5.7Hz,1H),6.89-6.83(m,3H),6.54-6.42(m,2H),4.30-4.26(m,3H),3.89(s,7H),3.78-3.62(m,1H),3.67(s,3H),3.55-3.37(m,3H),2.94(bs,8H),2.77-2.72(m,1H),2.57(t,J＝8.8Hz,1H),2.18-2.05(m,3H),1.94-1.87(m,1H)。LCMS(ES+):m/z734.12[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物185。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.45(s,1H),8.73(d,J＝5.6Hz,1H),7.90(s,1H),7.59(d,J＝5.6Hz,1H),7.32(d,J＝8.6Hz,1H),6.91-6.84(m,J＝5.6Hz,2H),6.75(s,2H),6.17(d,J＝7.9Hz,1H),4.38-4.34(m,1H),3.82(s,6H),3.67(s,2H),3.60(s,3H),2.98-2.95(m,2H),2.78-2.54(m,11H),2.34-2.33(m,1H),2.17(t,J＝9.9Hz,1H),2.09-2.05(m,1H),1.91-1.70(m,3H)LCMS(ES+):m/z 784.02[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物186。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.48(s,1H),8.75(d,J＝5.8Hz,1H),7.98(s,1H),7.59(d,J＝5.7Hz,1H),7.22(s,1H),7.16(s,1H),6.98(d,J＝8.7Hz,1H),6.77(d,J＝2.5Hz,1H),6.62-6.61(m,1H),5.91(bs,1H),4.31-4.29(m,1H),3.90(s,3H),3.61(s,3H),3.54-2.51(m,17H),2.33-2.03(m,2H),1.92-1.83(m,2H)LCMS(ES+):m/z754.12[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物187。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),10.04(s,1H),7.52(s,1H),6.96(d,J＝8.7Hz,1H),6.75(d,J＝2.4Hz,1H),6.67(s,2H),6.62-6.57(m,1H),4.31-4.20(m,3H),3.86(s,7H),3.47(s,3H),3.35(bs,3H),2.87-2.67(m,11H),2.08(d,J＝11.2Hz,9H),1.81-1.85(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 727.56[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物188。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),10.04(s,1H),7.52(s,1H),6.96(d,J＝8.7Hz,1H),6.75(d,J＝2.4Hz,1H),6.67(s,2H),6.62-6.57(m,1H),4.31-4.20(m,3H),3.86(s,7H),3.47(s,3H),3.35(bs,3H),2.87-2.67(m,11H),2.08(d,J＝11.2Hz,9H),1.81-1.85(m,1H)。LCMS(ES+):m/z750.05[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物189。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.48(s,1H),8.76(d,J＝5.8Hz,1H),7.96(s,1H),7.62(d,J＝5.7Hz,1H),7.09-7.01(m,3H),6.87(t,J＝9.0Hz 1H),6.55-6.51(m,1H),6.45-6.42(m,1H),4.28-4.25(m,1H),3.91(s,5H),3.61(s,3H),3.39-2.55(m,15H),2.08-2.05(m,2H),1.91-1.82(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 722.12[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物190。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),7.57(s,1H),7.03-6.94(m,2H),6.88(t,J＝9.0Hz,1H),6.54-6.51(m,1H),6.44-6.43(m,1H),4.29-4.25(m,1H),4.12-3.90(m,4H),3.86(s,3H),3.46(s,3H),3.28-2.58(m,13H),2.06(d,J＝3.2Hz,8H),1.88-1.84(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 715.31[M+H]+。
按化合物177的合成制备化合物191。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),7.56(s,1H),6.90-6.83(m,3H),6.55-6.51(m,1H),6.45-6.43(m,1H),4.29-4.25(m,1H),3.87(s,2H),3.46(s,3H),3.28-2.59(m,16H),2.07(d,J＝7.8Hz,8H),1.90-1.82(m,2H)LCMS(ES+):m/z 699.17[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物192。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),8.35(d,J＝7.4Hz,1H),7.75-7.72(m,1H),7.61-7.56(m,3H),7.19-7.14(m,2H),6.88(t,J＝9.2Hz,1H),6.56-6.52(m,1H),6.46-6.42(m,1H),5.93(s,1H),4.28-4.24(m,1H),3.89(s,5H),3.58(s,3H),3.51-2.60(m,15H),2.08-2.04(m,2H),1.91-1.84(m,2H)。LCMS(ES+):m/z737.32[M+H]+10.79(s,1H),8.35(d,J＝7.4Hz,1H),7.75-7.72(m,1H),7.61-7.56(m,3H),7.19-7.14(m,2H),6.88(t,J＝9.2Hz,1H),6.56-6.52(m,1H),6.46-6.42(m,1H),5.93(s,1H),4.28-4.24(m,1H),3.89(s,5H),3.58(s,3H),3.51-2.60(m,15H),2.08-2.04(m,2H),1.91-1.84(m,2H).LCMS:[M+H]+737.32
按化合物177的合成制备化合物193。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.53(s,1H),8.76(d,J＝6.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.63–7.52(m,2H),7.50(p,J＝1.6Hz,1H),6.92(t,J＝9.3Hz,1H),6.56(dd,J＝15.0,2.5Hz,1H),6.46(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),4.29(dd,J＝11.5,4.8Hz,1H),3.83(s,3H),3.62(s,3H),3.34(d,J＝50.7Hz,5H),3.17(s,4H),3.04(d,J＝11.4Hz,1H),2.84–2.52(m,4H),2.38(t,J＝11.7Hz,1H),2.26(s,1H),2.16–2.00(m,1H),1.88(td,J＝14.7,12.1,7.2Hz,2H)。LCMS(ES+):m/z 758.32[M+H]+。
按化合物177的合成制备化合物194。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.07(s,1H),9.48(s,1H),8.75(d,J＝5.8Hz,1H),8.29(s,1H),7.98(s,1H),7.59(d,J＝5.7Hz,1H),7.35(s,1H),7.22(s,1H),7.16(s,1H),7.08(d,J＝10.1Hz,1H),4.65-4.62(m,1H),3.89(s,5H),3.61(s,3H),3.50-3.01(m,12H),2.77-2.62(m,3H),2.13-2.07(m,2H),1.93-1.87(m,2H).LCMS(ES+):m/z721.24[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物195。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),8.29(s,1H),7.91(d,J＝8.3Hz,1H),7.52(s,1H),7.33(s,1H),7.07(d,J＝9.4Hz,1H),6.67(s,2H),4.68-4.64(m,1H),4.21(bs,2H),3.86(s,8H),3.47(s,4H),3.30(bs,3H),3.05(bs,4H),2.88(bs,4H),2.70-2.67(m,2H),2.14-2.07(m,10H).LCMS(ES+):m/z 694.36[M+H]+
按化合物177的合成制备化合物196。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.07(s,1H),8.30(bs,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,1H),7.57(s,1H),7.34(s,1H),7.08-6.97(m,3H),4.67-4.65(m,1H),3.86(s,5H),3.47(s,3H),3.28-2.98(m,12H),2.72-2.67(m,2H),2.13-2.10(m,2H),2.06(d,J＝2.8Hz,6H),1.94-1.87(m,2H).LCMS(ES+):m/z 698.22[M+H]+。
化合物172的四种立体异构体的合成
172-7-峰-1和172-7-峰-2的合成：
通过SFC分离20g化合物-7，得到8.5g 172-7-峰-1(SFC期间的第一洗脱峰)和8.5g172-7-峰-2(SFC期间的第二洗脱峰)
制备SFC条件：
柱子/尺寸：Chiralpak-IC(30x250)mm,5μ
％CO2：70％
％共溶剂：30％(MeOH)
总流量：100.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV:220nm
仪器详细信息：品牌/型号：SFC-200
化合物173和化合物174的合成：
步骤-1：使用氮气对3,3-二氟-4-[4-(2-氟-4-硝基-苯基)哌嗪-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯172-7-峰-1(4.5g，10.12mmol)在乙酸乙酯(40mL)中的溶液脱气10分钟并加入湿的10％钯碳(2.15g)。使用氢气再次对反应混合物脱气并让在氢气下(气球压力下)于室温搅拌24小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用乙酸乙酯(200ml)洗涤。真空除去滤液，得到粗化合物，该粗化合物通过(使用100-200目硅胶并在45％的EtOAc/石油醚中洗脱产物化合物)柱色谱法纯化，得到呈黄色固体的4-(4-(4-氨基-2-氟苯基)哌嗪-1-基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯173-2(3.5g，8.44mmol，收率83.40％，纯度97％)。LCMS(ES+):m/z 415.43[M+H]+
步骤-2：向4-(4-(4-氨基-2-氟苯基)哌嗪-1-基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯173-2(5g，12.06mmol)在DMF(30mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮3(6.95g，36.19mmol)、NaHCO3(10.13g，120.6mmol)并于85℃搅拌28小时，同时通过LCMS和TLC监测。16小时后，用冰冷水(100ml)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。该粗化合物通过(硅胶100-200目，40％的乙酸乙酯/石油醚)柱色谱法纯化，得到呈紫色固体的4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，8.47mmol，收率70.19％，纯度98.89％)。LCMS(ES+):m/z 526.72[M+H]+。
步骤-3：向4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯173-4(2.0g，3.81mmol)在二噁烷(5ml)中的溶液中加入4M的HCl/二噁烷(10mL)，于室温搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测。2小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物加乙醚(2×40ml)研磨，得到呈蓝色固体的3-[4-[4-[3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮173-5(1.6g，3.36mmol，收率88.29％，纯度97％)。LCMS(ES+):m/z 426.26[M+H]+
步骤-4：向3-((4-(4-(3,3-二氟哌啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮HCl 173-5(1.6g，3.76mmol)在DCE:MeOH(20:20ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(1.6g)、乙酸(2ml)和无水乙酸钠(0.616g，7.52mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(1.13g，3.76mmol)并将反应混合物于80℃加热5小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(1.12g，19.50mmol)。于室温继续搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。16小时后，通过硅藻土过滤反应物质，浓缩并纯化(使用Devisil二氧化硅并用5％的MeOH/CH2Cl2洗脱产物)，得到呈灰白色固体、为游离碱的3-[4-[4-[-1-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.9g，1.20mmol，收率31.99％，纯度95％)。LCMS(ES+):m/z 711.50[M+H]+。于0℃向3-[4-[4-[1-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(1g，1.41mmol)游离碱在干燥的DCM(6mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.160g)并让于室温搅拌1小时。1小时后，将反应物质浓缩至干并加乙醚(3×20ml)研磨，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[1-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐173-6(1.0g，1.15mmol，收率81.87％，纯度95％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+711.50
SFC分离程序：通过SFC分离3.2g 173-6，得到单一立体异构体。在SFC分离过程中，将化合物173和化合物174的级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环。由于SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用，故对化合物173和化合物174的所得级分进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件柱子/尺寸：
柱子/尺寸：Chiralpak-AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：60％
％共溶剂：40％(0.2％的7M甲醇氨/(乙腈:甲醇(1:1)))
总流量：110.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV：220nm
溶解度：甲醇
制备性-HPLC方法：
柱子/尺寸：XTERRA C18(19*150,5um)流动相A：0.05％TFA/水流动相B：100％乙腈梯度(时间/％B)0/5,5/5,12/30,16/30,16.1/100,18/100,18.1/5,21/5流速：17ml/min溶解度：WATE+CAN
(注：SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物173而第二洗脱峰归属为化合物174)。
从172-7-峰-2开始，按化合物173和化合物174的合成制备化合物175和化合物176。
SFC分离程序：通过SFC分离3.6g 175-1(非对映异构体混合物)，得到单一立体异构体。在SFC分离过程中，将化合物175和化合物176的级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环。由于SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用，故对化合物175和化合物176的所得级分进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件：
柱子/尺寸：Chiralpak AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：60％
％共溶剂：40％(0.2％7M的甲醇氨/ACN:MEOH)
总流量：110.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV:220nm
仪器详细信息：品牌/型号：SFC-150-I
制备-HPLC条件：
流动相(A)：0.1％ TFA/H2O流动相(B)：100％乙腈
流速：18ml/min
柱子：SUNFIRE C18,5μm(19x150mm)
(注：SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物175而第二洗脱峰归属为化合物176)
化合物179和化合物180的合成：
步骤-1：向3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.HCl173-5(1.41g，3.04mmol)在DCE:MeOH(30:30ml)中的搅拌溶液中加入分子筛(1g)、乙酸(0.273g，4.56mmol)和乙酸钠(0.499g，6.08mmol)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(1g，3.04mmol)并将反应混合物于70℃加热5小时，然后将其于室温冷却并加入Silia Bond氰基硼氢化物(0.881g，15.21mmol)。于室温继续搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。16小时后，通过硅藻土过滤反应物质，浓缩并通过(使用Devisil二氧化硅并用5％的MeOH/CH2Cl2洗脱产物)纯化，得到呈绿色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮游离碱(0.9g，0.978mmol，收率32.18％，纯度80.29％)。于0℃向3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮游离碱(3g，4.06mmol)在干燥的CH2Cl2(10mL)中的搅拌溶液中加入TFA(2mL)并让于室温搅拌1小时。1小时后，将反应物质浓缩至干并加乙醚(2×100ml)研磨，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA 178-2(3.4g，3.34mmol，收率82.13％，纯度83.66％)。LCMS(ES+):m/z 738.45[M+H]+
178-2的SFC分离
通过SFC分离3.4g 178-2，得到单一立体异构体。在SFC分离过程中，将化合物178和化合物179的级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环。由于SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用，故对化合物178和化合物179的所得级分再次进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件柱子/尺寸：
柱子/尺寸：Chiiralpak-AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：55％
％共溶剂：45％(0.2％7M甲醇氨/ACN:MEOH)(70:30)
总流量：100.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV：254nm
溶解度：MeOH+CAN
制备-HPLC方法：
柱子/尺寸：XSELECT-C18(150*19*5μ)
流动相A：0.05％ TFA/水(AQ)
流动相B：ACN(ORG)
(注：SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物178而第二洗脱峰归属为化合物179)。
从172-7-峰-2开始，按化合物178和化合物179的合成制备化合物180和化合物181。
180-3的SFC分离
通过SFC分离2.9g 180-3，得到单一立体异构体。在SFC分离过程中，将化合物180和化合物181的级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环。由于SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用，故同样对化合物180和化合物181的所得级分进行制备HPLC纯化以除去盐。对化合物180和化合物181的所得级分再次进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件柱子/尺寸：
柱子/尺寸：Chiiralpak-AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：55％
％共溶剂：45％(0.2％7M甲醇氨/ACN:MEOH)(70:30)
总流量：100.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV：254nm
制备-HPLC方法：
流动相(A)：0.05％ TFA/水
流动相(B)：100％乙腈
流速：17ml/min
柱子：X-SELECT C18 5μm(19x250mm)
梯度时间％B：0/10,2/10,2.5/10,15.6/39,15.7/95,18.5/95,18.6/95,21/10
(SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物180而第二洗脱峰归属为化合物181)。
化合物197的合成
步骤-1：于0℃向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，16.17mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入TFA(20mL)，然后让反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。反应完成后，将反应混合物减压蒸发至干，粗混合物与甲苯(50mL)共蒸馏，得到呈无色液体的4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(5g)。
步骤-2：在氮气氛下向197-2(2g，6.19mmol)在DMF(15mL)中的搅拌溶液中加入CsCO3(6.05g，18.57mmol)。然后，通过注射器加入1,2-二氟-4-硝基苯(1.18g，7.43mmol，820.61uL)并将其于室温搅拌6小时。反应完成(根据TLC)后，用冰冷水淬灭反应混合物，过滤所得沉淀并完全干燥，得到呈黄色固体的1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(2g，5.17mmol，收率83.52％，纯度90％)。
步骤-3：对3,3-二氟-4-(((三氟甲基)磺酰)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(1g，2.72mmol)和197-4(947.96mg，2.72mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的搅拌溶液吹扫氩气20分钟。然后，向上述混合物中加入在水(5mL)中的碳酸钠(721.43mg，6.81mmol)并再次继续吹扫10分钟。最后，加入Pd(dppf)Cl2(0.1g，136.13umol)并脱气。将混合物加热至55℃并保持2小时。通过TLC监测反应，反应完成(根据TLC)后，将其冷却至室温，用乙酸乙酯(50mL)稀释，并用水和盐水溶液洗涤有机层。减压浓缩。粗产物通过Biotage使用0-20％纯化，得到呈黄色固体的3,3-二氟-4-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-2,6-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.74g，收率52.57％，纯度85％)。LCMS(ES+):m/z 440.30[M+H]+
步骤-4：将化合物197-6(0.7g，1.59mmol)加在乙酸乙酯(20mL)中并加入10％钯碳(678.10mg)。在氢气(气球压力)下将反应混合物搅拌12小时，同时通过TLC监测。反应完成后，通过硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯洗涤。用盐水溶液洗涤有机层，减压浓缩。粗产物通过Biotage使用0-40％的EA/PE纯化，得到呈灰白色固体的4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，收率60.73％，纯度80％)。LCMS(ES+):m/z414.76[M+H]+。
步骤-5：在密封管中将197-7(0.5g，1.21mmol)加在DMF(7mL)中，加入碳酸氢钠(609.5mg，7.26mmol)，然后一下加入全部197-8(696.57mg，3.63mmol)。加热反应混合物至80℃并保持16小时，同时通过TLC和LCMS监测。反应完成后，用冰-水混合物淬灭反应混合物，经过硅藻土垫，并用水和乙酸乙酯(25mL)洗涤。分离出有机层，用盐水溶液洗涤并用Na2SO4干燥，减压浓缩。粗产物通过biotage使用0-50％的EA/PE纯化，得到呈浅绿色固体的4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.41g，收率52.35％，纯度81％)。LCMS(ES+):m/z525.92[M+H]+。
步骤-6：在氮气氛下通过注射器向197-9(0.4g，0.76mmol)在1,4-二噁烷(3mL)中的处于0℃的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(4M，1.91mL)。然后，反应混合物于室温搅拌3小时。通过TLC监测反应，完成后，将其减压浓缩至干。用乙醚洗涤所得固体，得到呈浅绿色固体的3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.35g，759.35umol，收率99.58％，021)。LCMS(ES+):m/z 425.41[M+H]+
步骤-7：将197-10(0.125g，0.245mmol)加在DCE(5mL)和甲醇(5mL)混合物中并加入无水乙酸钠(0.06g，0.738mmol)，然后加入乙酸(0.045g，0.738mmol)和分子筛(0.1g)，搅拌10分钟。然后，向上述混合物中加入化合物2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛(0.075g，245.29mmol)并加热混合物至75℃保持5小时。然后，冷却至室温并加入Siliabond氰基硼氢化物(0.125g)。将其于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS分析监测。反应完成后，将其通过硅藻土垫过滤，用甲醇洗涤，然后减压浓缩至干。粗混合物通过制备纯化来纯化，得到呈灰白色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(92.9mg，收率44.26％，纯度96.8)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),7.57(s,1H),7.04-7.99(m,3H),6.58-6.50(m,2H),4.31(bs,1H),3.97(s,3H),3.82-3.50(m,4H),3.46(s,3H),3.30-3.09(m,6H),2.77-2.58(m,2H),2.06(d,J＝4.0Hz,7H),1.89-1.75(m,9H)。LCMS(ES+):m/z 714.08[M+H]+。
按化合物197的合成制备化合物198
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),10.00(s,1H),7.52(s,1H),6.68(s,2H),7.09(bs,1H),6.56(d,J＝14.6Hz,1H),6.47(d,J＝8.7Hz,1H),4.31-4.29(m,3H),3.87(s,6H),3.47-3.01(m,11H),2.77-2.54(m,2H),2.08(d,J＝12.0Hz,9H),1.88-1.53(m,7H)。LCMS(ES+):m/z 710.13[M+H]+
按化合物197的合成制备化合物199。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.44(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),8.34(s,1H),7.94(s,1H),7.54(d,J＝5.6Hz,1H),7.14(d,J＝23.9Hz,2H),6.82(t,J＝9.3Hz,1H),6.49(d,J＝14.8Hz,1H),6.41(d,J＝8.5Hz,1H),5.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.30-4.20(m,1H),3.87(s,3H),3.70(s,2H),3.59(s,3H),3.17-2.54(m,6H),2.42-2.33(m,4H),2.22-2.16(m,1H),2.08-2.04(m,1H),1.84-1.38(m,8H)。LCMS(ES+):m/z 737.07[M+H]+
按化合物197的合成制备化合物200。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.45(s,1H),8.74(d,J＝5.4Hz,1H),8.51(s,1H),7.94(s,1H),7.54(d,J＝5.6Hz,1H),7.17(d,J＝1.2Hz,1H),7.11(s,1H),6.93(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(d,J＝2.5Hz,1H),6.59(q,J＝3.8Hz,1H),5.83(d,J＝7.8Hz,1H),4.35-4.22(m,1H),3.87(s,3H),3.71(s,2H),3.59(s,3H),3.10-2.92(m,4H),2.73-2.56(m,4H),2.44-2.33(m,1H),2.20(t,J＝11.2Hz,1H),2.07-2.05(m,1H),1.86-1.67(m,7H),1.42-1.40(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 753.12[M+H]+
化合物201的合成：
步骤-1：在氩气下于室温向悬浮在ACN(24mL)和甲苯(24mL)中的3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(1.0g，2.38mmol，061)中加入TEA(0.361g，3.568mmol，0.5mL)。将所得反应混合物搅拌5分钟以确认反应的pH变为碱性(8至9)。进一步向反应混合物中加入3,3-二氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.12g，4.761mmol)和AcOH(0.429g，7.144mmol，0.4mL)。将所得反应混合物搅拌5-10分钟以确认反应的pH变为酸性(4至5)。接下来，向反应混合物中加入分子筛(1.0g)并将反应混合物于110℃回流16小时。反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，让反应混合物冷却至室温并真空蒸发溶剂。向残余物中加入饱和NaHCO3(aq.)溶液以调节pH至8-9。在EtOAc(3×30mL)中萃取产物。合并有机层，用盐水(15mL)洗涤，用Na2SO4干燥并真空浓缩，得到呈绿蓝色油的化合物201-1(1.8g，2.07mmol，收率86.67％，纯度60％)。粗产物直接用于下一步而不进一步纯化。LCMS(ES+):m/z 523.32[M+H]+
步骤-2：向具有溶解在EtOAc(30mL)中的化合物201-1(2.0g，3.8273mmol)的钢制反应釜压力反应器中装入Pd/C(0.407g，3.8273mmol)并将所得反应混合物在氢气氛(100psi)下搅拌48小时。反应完成(TLC和LCMS)后，通过硅藻土床过滤反应混合物，用EtOAc(2×35mL)洗涤，并真空浓缩滤液。粗残余物通过使用快速柱色谱法纯化(硅胶230-400目；梯度0-100％的EtOAc/石油醚)，得到呈固体的所需化合物201-2(0.750g，1.39mmol，收率36.24％，纯度97％)。LCMS(ES+):m/z 525.57[M+H]+
步骤-3：于0℃向在DCM(6mL)中的化合物201-2(1.03g，1.963mmol)中加入TFA(12.20g，106.95mmol，8.24mL)。将所得反应混合物于0℃搅拌15分钟，然后于室温搅拌2小时。反应完成(通过TLC和LCMS监测)后，真空蒸发溶剂。向残余物中加入Et2O(2×30mL)以沉淀出呈灰白色固体的化合物201-3(1.10g，1.86mmol，收率94.67％，纯度91％，061)。真空过滤粗化合物，干燥并直接用于下一步而不经任何纯化。LCMS(ES+):m/z 425.48[M+H]+
步骤-4：于室温在氩气氛下向化合物201-3(0.460g，0.8542mmol，061)在DCE(4mL)和MeOH(4mL)中的搅拌溶液中加入NaOAc(0.210g，2.56mmol)、AcOH(0.128g，2.131mmol，0.122mL)和分子筛(0.460g)。将反应混合物于室温搅拌15分钟，然后加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(0.308g，0.9368mmol)。将所得反应混合物于80℃加热4小时，然后冷却至0℃并加入SiCNBH3(0.800g，4.266mmol)。将所得反应混合物于室温再搅拌12小时。反应完成(通过LCMS监测)后，通过硅藻土床过滤反应混合物，用EtOAc(2×10mL)和THF(2×10mL)洗涤。真空蒸发滤液，得到粗残余物。粗残余物通过使用反相色谱法纯化，得到为TFA盐(黄色固体)的所需化合物201。向固体中加入饱和NaHCO3溶液(直至溶液的pH变为碱性)并在DCM(3×20mL)中萃取产物。合并有机层，用Na2SO4干燥并真空浓缩，得到呈淡绿色固体的所需产物化合物201(138mg，186.57umol，纯度99.67％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.78(s,1H)；9.45(s,1H)；8.74(d,J＝5.6Hz,1H)；7.94(s,1H)；7.54(d,J＝5.6Hz,1H)；7.17(d,J＝1.2Hz,1H)；7.11(s,1H)；6.98(t,J＝8.8Hz,1H)；6.48-6.40(m,2H)；5.98(d,J＝7.6Hz,1H)；4.34-4.26(m,1H)；3.87(s,3H)；3.72(s,2H)；3.59(s,3H)；3.16-2.90(m,4H)；2.90-2.50(m,6H)；2.48-2.24(m,2H)；2.12-2.02(m,1H)；1.90-1.70(m,3H)；1.66-1.50(m,4H)LCMS(ES+):m/z 737.16[M+H]+。
按化合物201的合成制备化合物202。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.80-2.10(m,7H)；2.22-2.48(m,2H)；2.54-2.80(m,2H)；2.90-3.40(m,6H)；3.58(s,3H)；3.81(s,3H)；3.88(s,3H)；3.90-4.10(m,2H)；4.28-4.36(m,1H)；6.00-6.20(m,1H)；6.42-6.52(m,2H)；6.90-6.99(m,1H)；7.13(s,1H)；7.17(s,1H)；7.55-7.65(m,3H)；7.71-7.78(m,1H)；8.35(d,J＝7.6Hz,1H)；9.88(bs,1H)；10.80(s,1H)。LCMS(ES+):m/z 734.47[M-H]-
化合物203的合成：
通过SFC分离4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，得到1-2-峰-1(SFC过程中的第一洗脱峰)和1-2-峰-2(SFC分离过程中的第二洗脱峰)
SFC方法：制备SFC条件柱子/尺寸Chiralpak AD-H(30x250mm),5μ％CO2:60％％共溶剂:40％(IPA)总流量：100.0g/min背压：100巴温度：35℃UV:240nm
步骤-1：于0℃向1-2-峰-2 4-[4-[[2,6-二氧代-3-哌啶基]氨基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.22g，0.567mmol)中加入4.0M的HCl/1,4-二噁烷(3mL)，然后让反应混合物于室温搅拌4小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，减压蒸发溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈棕色固体的3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.25g，纯度99.77％)。LCMS(ES+):m/z 288.41[M+H]+
步骤-2：于0℃向3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.250g，0.772mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.6754g，5.23mmol)、2-(1-叔-丁氧基羰基-3,3-二氟-4-哌啶基)乙酸(0.218g，0.783mmol)，接着加入HATU(0.6623g，1.74mmol)，然后让反应混合物于室温搅拌6小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，在GENVAC下蒸发溶剂并通过柱色谱法(Devisil二氧化硅，使用80％的EtOAc:石油醚)纯化粗品，得到呈棕色粘性固体的4-[2-[4-[4-[[2,6-二氧代-3-哌啶基]氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，纯度55.3％)，LCMS(ES+):m/z 549.24[M+H]+
步骤-3：于0℃向4-[2-[4-[4-[[2,6-二氧代-3-哌啶基]氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，0.546mmol)中加入4.0M的HCl/1,4-二噁烷(4mL)，然后让反应混合物于室温搅拌4小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，真空蒸发溶剂，粗品与甲苯共蒸馏，得到呈棕色胶状固体的3-[4-[1-[2-(3,3-二氟-4-哌啶基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.3g，纯度78.94％)。LCMS(ES+):m/z449.32[M+H]+
步骤-4：向3-[4-[1-[2-(3,3-二氟-4-哌啶基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮盐酸盐(0.108g，242.35mmol)在DCE(5mL):MeOH(5mL)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(0.0542g，0.66mmol)、4Ao分子筛(0.100g)，然后加入2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.070g，0.220mmol)和乙酸(0.0132g，0.220mmol)并将所得溶液搅拌10分钟。让反应混合物于70℃搅拌3小时，然后让RM降至室温，加入Si-CBH(0.07g)并继续搅拌16小时，同时通过LCMS监测反应。完成后，用MeOH稀释反应物质并经硅藻土床过滤，用甲醇彻底洗涤床，浓缩并通过制备-HPLC纯化粗品，得到呈淡棕色固体的3-[4-[1-[2-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(0.0335g，收率16.93％，纯度96.24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.44(bs,1H),10.77(s,1H),8.22(s,1H),7.69(s,1H),7.40(s,1H),7.29(s,1H),6.95(d,J＝8.5Hz,2H),6.61(d,J＝8.4Hz,2H),4.53(bs,1H),4.29-4.25(m,3H),3.97(s,6H),3.62(s,3H),3.22-3.03(m,3H),2.76-2.58(m,6H),2.49-2.33(m,1H),2.11-2.05(m,2H),1.86-1.73(m,1H),1.53-1.48(m,2H),1.35-1.24(m,3H),LCMS(ES+):m/z[M+H]+750.56。
按化合物203的合成制备化合物204，但从1-2-峰-1开始。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.80(s,1H),8.21(s,1H),7.68(s,1H),7.40(s,1H),7.21(s,1H),7.09(s,1H),6.95(d,J＝8.4Hz,2H),6.61(d,J＝8.0Hz,2H),4.52-4.51(m,1H),4.28-4.22(m,3H),3.97(s,6H),3.61(m,4H),3.16-3.10(m,3H),2.76-2.70(m,6H),2.32(m,1H),2.11-2.06(m,2H),1.87-1.86(m,1H),1.75-1.73(m,2H),1.52-1.49(m,2H).LCMS(ES+):m/z[M+H]+750.60。
化合物205的合成
步骤-1：于室温在氩气氛下向1-溴-4-硝基-苯(3g，14.85mmol，1.54mL)在1,4-二噁烷(25mL)和水(25ml)中的搅拌溶液中加入4-[(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.24g，19.31mmol)，然后加入碳酸钾(5.13g，37.13mmol，2.24mL)。用氩气对反应混合物反复脱气并在氩气氛下一次性加入Pd(PPh3)4(0.7g，0.594mmol)。将反应混合物于85℃加热16小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(300mL)洗涤。浓缩滤液，用乙酸乙酯(500mL)溶解所得粗物质并用水(2×100mL)、然后盐水(1×100mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。浓缩有机层并通过柱色谱法(硅胶100/200目并在40-50％的EtoAc:石油醚下洗脱产物)纯化粗品，得到4-[(4-硝基苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，收率81.22％，纯度96％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ8.19-8.17(m,2H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),6.40(s,1H),3.54(t,J＝5.6Hz,2H),3.43(t,J＝5.6Hz,2H),2.46(t,J＝6Hz,2H),2.38(t,J＝6Hz,2H),1.48(s,9H)LCMS(ES+):m/z 319.17[M+H]+
步骤-2：向4-[(4-硝基苯基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.56mmol)在甲醇(10mL)和乙醇(10mL)中的搅拌溶液中加入10％的湿Pd-C(6g)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌16小时，同时通过TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤并浓缩滤液，得到4-[(4-氨基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，收率74％，纯度80％)。这不经任何纯化即用于下一步。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ6.789(d,J＝8Hz,2H),6.48-6.45(m,2H),4.80(s,2H),3.90-3.88(m,2H),2.67-2.62(m,2H),2.30(d,J＝6.8Hz,2H),1.59-1.52(m,5H),1.48(s,9H)LCMS(ES+):m/z 291.44[M+H]+
步骤-3：向4-[(4-氨基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，12.05mmol)在DCM(40mL)和吡啶(0.7g，9.64mmol)中处于氮气氛下在-10℃的搅拌溶液中逐滴加入在二氯甲烷(10ml)中的氯甲酸苄酯(0.7g，8.44mmol)，10分钟加完。加入后，让反应混合物于环境温度温热并搅拌2小时，同时通过LCMS和TLC监测。用冰冷水(1×200ml)淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。分离有机相，用盐水(50ml)洗涤，用Na2SO4干燥并减压蒸发，得到4-(4(苄氧基)羰基)氨基)苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。LCMS(ES+):m/z 447.32[M+Na]+
步骤-4：于0℃向4-[[4-(苄氧基羰基氨基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，11.78mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(10ml)并将反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过LCMS和TLC监测。完成后，浓缩反应混合物，粗化合物加乙醚研磨并干燥，得到呈白色固体的N-[4-(4-哌啶基甲基)苯基]碳酸苄酯(4g，收率90.35％，96％)。LCMS(ES+):m/z 325.18[M+H]+
步骤-5：向化合物N-[4-(4-哌啶基甲基)苯基]氨基甲酸苄酯(2g，6.16mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(4.02g，12.33mmol)并搅拌15分钟，然后加入1-氟-4-硝基-苯(1.04g，7.40mmol)。让反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测。完成后，用冰片淬灭反应物质并过滤沉淀的固体，得到N-[4-[[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]甲基]苯基]氨基甲酸苄酯(2.5g，收率72.82％，纯度80％)。LCMS(ES+):m/z446.30[M+H]+
步骤-6：向N-[4-[[1-(4-硝基苯基)-4-哌啶基]甲基]苯基]氨基甲酸苄酯(2.5g，5.61mmol)在THF:水(40mL)中的溶液中加入锌粉(3.67g，56.12mmol)和NH4Cl(4.50g，84.17mmol)。将反应混合物于室温搅拌2小时。TLC和LCMS显示反应完成。通过硅藻土床过滤反应混合物并用乙酸乙酯和THF混合物(1:1)(100ml)洗涤床。浓缩滤液，得到粗产物N-[4-[[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]甲基]苯基]氨基甲酸苄酯(2.2g，4.24mmol，收率75.48％，纯度80％)。LCMS(ES+):m/z 416.23[M+H]+
步骤-7：向3-溴哌啶-2,6-二酮(2g，10.59mmol)和N-[4-[[1-(4-氨基苯基)-4-哌啶基]甲基]苯基]氨基甲酸苄酯(2.8g，14.457mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(2.42g，28.915mmol)并于80℃搅拌24小时。将反应混合物冷却至环境温度，用水(100mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并有机萃取物，用盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗品通过柱色谱法纯化(100-200目硅胶，用50-80％梯度的乙酸乙酯/石油醚洗脱所需产物)，得到N-[4-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]甲基]苯基]氨基甲酸苄酯(1.47g，收率46.92％，纯度89％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.78(S,1H),9.65(s,1H),7.54-7.31(m,7H),7.08(d,J＝3.6Hz,2H),6.72(d,J＝8.8Hz,2H),6.58(d,J＝8.8Hz,2H),5.34(d,J＝7.2Hz,1H)(5.14(s,2H),4.19-4.15(m,1H),2.73-2.69(m,1H),2.55-2.50(m,1H),2.48-2.42(m,4H),2.11-2.06(m,1H),1.83-1.80(m,1H),1.63-152(m,3H),1.31-1.22(m,4H).LCMS(ES+):m/z 527.26[M+H]+
步骤-8：于室温向N-[4-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-4-哌啶基]甲基]苯基]氨基甲酸苄酯(0.5g，0.950mmol)在甲醇(10mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(0.5g)。加入后，将反应在H2气氛下搅拌1小时，同时通过TLC监测。减压蒸发挥发物。所得残余物与甲苯(5mL)共蒸发，然后加醚研磨。倾析出醚层并真空干燥所得残余物，得到3-[4-[4-[(4-氨基苯基)甲基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.22g，收率53.13％，纯度90％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.8(s,1H),6.81(d,J＝8.4Hz,2H),6.72(d,J＝8.8Hz,2H),6.58(d,J＝9.2Hz,2H),6.48(d,J＝8.4Hz,2H),5.33(d,J＝7.2Hz,1H),4.80(s,2H),4.30-4.19(m,1H),2.59-2.53(m,2H),2.45-2.42(m,1H),2.42-2.34(m,4H),2.11-2.06(m,1H),1.83-1.80(m,1H),1.63-161(m,2H),1.49-1.44(m,1H),1.28-1.23(m,3H)。LCMS(ES+):m/z 393.33[M+H]+
步骤-9：向3-[4-[4-[(4-氨基苯基)甲基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮HCl盐(0.1g，0.233Mmol)和2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛.TFA(0.1g，0.233mmol，061)在甲醇(5mL)和DCE(5mL)中的搅拌溶液中加入乙酸钠(0.06g，0.702mmol)和0.5ml乙酸。加入后，让反应混合物于80℃搅拌5小时。然后于室温冷却，加入Si-CBH(0.115g，1.86mmol)并让于室温搅拌15小时，同时通过LCMS监测。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应物质并真空浓缩。粗残余物通过制备-HPLC纯化，得到3-[4-[4-[[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基氨基]苯基]甲基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(71mg，收率35.51％，纯度94.09％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.43(bs,1H),10.82(s,1H),10.69(s,1H),8.19(s,1H),7.56(s,2H),7.36(d,J＝7.3Hz,2H),6.97(d,J＝5.4Hz,2H),6.88(s,2H),6.75(d,J＝8.7Hz,4H),6.35(s,1H),4.38(d,J＝7.5Hz,1H),4.20(s,2H),3.90(s,6),3.61(s,3H),2.79-2.67(m,1H),3.48-3.39(m,4H),2.61-2.56m,1H),2.53-2.49(m,2H),2.09-2.05(m,1H),1.92-1.82(m,4H),1.69-1.49(m,2H),LCMS(ES+):m/z690.45[M+H]+
化合物206的合成：
步骤-1：将4-(4-硝基苯基)哌啶(1.7g，7.0mmol)、叔丁醇钠(1.58g，16.48mmol)和6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(2.31g，7.41mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的溶液用氩气吹扫10分钟，然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.905g，0.98mmol)和xanthphos(0.238g，0.412mmol)。然后将反应混合物于80℃搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测反应的进度。完成后，将其冷却至环境温度并向其中加入水(50mL)。使用乙酸乙酯(2×50mL)进行萃取，合并有机萃取物，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(使用230-400目硅胶，乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈灰白色固体的所需化合物6-[4-(4-硝基苯基)-1-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯206-4(0.57g，1.3mmol，收率17.50％，纯度94％)。LCMS(ES+):m/z438.1[M+H]+
步骤-2：向6-[4-(4-硝基苯基)-1-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯206-4(0.570g，1.30mmol)在甲醇(10mL)中的搅拌溶液中加入10％ Pd/C(130mg)；并将反应混合物在氢气氛(气囊)下搅拌16小时。反应完成(如由LCMS所指示)后，通过硅藻土滤出催化剂并用甲醇(20mL×2)洗涤。减压浓缩滤液，残余物通过硅胶柱色谱法纯化(使用230-400目硅胶，乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈棕色稠油的所需化合物6-[4-(4-氨基苯基)-1-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯206-5(0.420g，1.031mmol，收率79％，纯度81％)。LCMS(ES+):m/z 408.1[M+H]+
步骤-4：向6-[4-(4-氨基苯基)-1-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯206-5(0.420g，1.03mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(0.520g，6.18mmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(0.520g，6.18mmol)。将反应混合物在密封管中于70℃搅拌16小时，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，将其冷却至室温并向其中加入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)。使用乙酸乙酯(3×25mL)进行萃取，合并有机层，用水(20mL×2)、盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。粗化合物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目硅胶，使用乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈紫色固体的所需化合物6-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯206-7(0.300g，0.58mmol，收率45％，纯度79.5％)。LCMS(ES+):m/z 519.1[M+H]+
步骤-5：于0℃向6-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯206-7(0.3g，0.578mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入TFA(66mg，0.578mmol)并用时2小时让反应混合物温热至室温，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，减压蒸发挥发物并向残余物中加入乙醚(5mL)。将其搅拌15分钟，过滤所得固体，用乙醚(5mL×2)洗涤并干燥，得到呈灰白色固体的所需化合物3-[4-[1-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮206-8(TFA盐)(0.280g，0.526mmol，收率90％，纯度85.4％)。LCMS(ES+):m/z 419.1[M+H]+
步骤-6：向3-[4-[1-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮206-8(58.76mg，210mmol)在DCE(5mL)和甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入NaOAc(23.04mg，280.81mmol)、MS(100mg)和AcOH(8.43mg，140.41mmol)。然后向其中加入3,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯甲醛(0.09g，165mmol)并将反应混合物于70℃搅拌16小时。然后将其冷却至0℃并向其中加入Si-CNBH3(49.11mg，702.03mmol)。反应混合物于室温搅拌4小时。然后将其通过硅藻土垫过滤并用DCE-MeOH(1:1；3×5mL)洗涤。减压浓缩滤液。所得粗品通过制备HPLC纯化，得到呈淡黄色固体的所需化合物3-[4-[1-[2-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(TFA盐)化合物204(40mg，0.05mmol，收率42％，纯度96.05％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.60-1.72(m,2H)；1.78-1.92(m,3H)；2.06-2.12(m,1H)；2.55-2.65(m,2H)；2.68-2.82(m,3H)；3.04-3.10(m,2H)；3.62(s,3H)；3.58-3.70(m,2H)；3.78-3.86(m,2H)；3.95(s,6H)；4.22-4.40(m,5H)；6.62(d,J＝8.4Hz,2H)；6.84(s,1H)；6.91-7.20(m,7H),7.66(s,1H),8.25(s,1H)；9.50(bs,1H),10.80(s,1H)；14.30(bs,1H)。LCMS(ES+):m/z 716.51[M+H]+
化合物207的合成：
步骤-1：于-78℃向1-苄氧基-4-溴-苯(5g，19.00mmol)在干燥的THF(40mL)中的搅拌溶液中逐滴加入正-丁基锂(在THF中的2.5M溶液)(8.36mL)。将反应混合物于-78℃搅拌30分钟。用时1小时将反应混合物缓慢温热至-30℃。再次将反应混合物冷却至-78℃并逐滴加入在干燥的THF(20mL)中的4-溴-2,6-二甲氧基苯甲醛(4.66g，19.00mmol)。用时3小时将反应混合物缓慢温热至0℃，同时通过TLC监测反应。反应完成后，用冰冷的饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并有机层，用水(1×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗品通过柱色谱法在硅胶(100/200目)上纯化并在30％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈浅棕色固体的(4-苄氧基苯基)-(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)甲醇207-3(4g，收率46.58％，纯度95％)。
步骤-2：于-60℃在N2气氛下向(4-苄氧基苯基)-(4-溴-2,6-二甲氧基-苯基)甲醇207-3(1.60g，3.73mmol)在干燥的DCM(80mL)中的搅拌溶液中加入三乙基硅烷(2.17g，18.63mmol，2.98mL)。于-60℃向反应混合物中逐滴加入在干燥的DCM(10mL)中的TFA(2.12g，18.63mmol，1.44mL)。用时3小时将反应缓慢温热至0℃，同时通过TLC监测。完成后，用过量的DCM(200mL)稀释反应混合物并用冰冷的饱和碳酸钠(100mL)淬灭，用DCM(2×100mL)萃取。合并有机层，用水(1×100mL)、然后用盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗产物加戊烷(2×50mL)进一步研磨并过滤沉淀出的固体，得到呈白色固体的2-[(4-苄氧基苯基)甲基]-5-溴-1,3-二甲氧基-苯207-4(1.20g，收率77.90％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+413.08
步骤-3：于室温在氩气氛下向2-[(4-苄氧基苯基)甲基]-5-溴-1,3-二甲氧基-苯207-4(1.2g，2.90mmol)在1,4-二噁烷(40mL)中的搅拌溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(1.1g，4.3mmol)，然后加入乙酸钾(0.85g，8.71mmol)。用氩气对反应混合物反复脱气并在氩气氛下一次性加入Pd(dppf)Cl2.dcm(0.12g，0.14mmol)。反应混合物再次用氩气反复脱气并然后在100℃回流下加热12小时。完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(200mL)洗涤。浓缩滤液，将残余物质溶解在乙酸乙酯(100mL)并用水(1×50mL)、盐水(1×25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗品通过柱色谱法在硅胶(100/200目)上纯化并在5％的EtOAc/石油醚下洗脱产物，得到呈浅棕色糊状固体的2-[4-[(4-苄氧基苯基)甲基]-3,5-二甲氧基-苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环207-5(1.3g，收率77.81％，纯度80％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+461.1
步骤-4：于室温向4-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(1.35g，3.88mmol)在干燥的THF(100mL)中的搅拌溶液中加入2-(4-(4-(苄氧基)苄基)-3,5-二甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环207-5(1.78g，3.88mmol)，然后加入溶解在水(20mL)中的无水磷酸三钾(1.65g，7.75mmol)。用氩气对反应混合物反复脱气并在氩气氛下一次性加入Xphos-Pd-G2催化剂(1310584-14-5)(0.15g，0.19mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于80℃回流12小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(50mL)洗涤。从滤液分层出有机层并浓缩。所得粗产物通过柱色谱法在硅胶(230/400目)上纯化并在50-60％的EtOAc/石油醚下洗脱产物，得到呈浅黄色固体的4-(4-(4-(苄氧基)苄基)-3,5-二甲氧基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-6(1.25g，收率50.90％，纯度95％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+602.21
步骤-5：于室温向4-[4-[(4-苄氧基苯基)甲基]-3,5-二甲氧基-苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-6(1.60g，2.66mmol)在干燥的THF(80mL)和甲醇(20mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(0.28g，2.66mmol)。将反应混合物于室温在H2气氛下搅拌12小时。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物并用甲醇(100mL)洗涤。浓缩滤液，残余物质加戊烷(2×50mL)研磨，倾析出有机层并充分干燥沉淀出的固体，得到呈灰白色固体的产物4-[4-[(4-羟基苯基)甲基]-3,5-二甲氧基-苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-7(1.20g，收率83.80％，纯度95％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+512.1
步骤-6：于0℃向4-(4-(4-羟基苄基)-3,5-二甲氧基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-7(1.2g，2.35mmol)在DCM(100mL)中的搅拌溶液中逐滴加入三乙胺(0.71g，7.04mmol)，然后在N2气氛下逐滴加入三氟甲磺酸酐(0.69g，2.46mmol)。将反应混合物于0℃再搅拌2小时。通过TLC确认反应的完成。用冰冷的饱和NaHCO3溶液(100mL)淬灭反应混合物并用DCM(2×100mL)萃取。合并有机层，用盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗产物通过柱色谱法在硅胶(100/200目)上纯化并在50％的EtOAc/石油醚下洗脱产物，得到呈白色固体的4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)苯基三氟甲磺酸酯207-8(1.30g，收率83.19％，纯度96.62％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+644.59
步骤-7：于室温向密封管中4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)苯基三氟甲磺酸酯207-8(0.65g，1.01mmol)在干燥的1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中加入三丁基(乙烯基)锡烷(0.96g，3.03mmol)，然后加入无水氯化锂(0.42g，10.10mmol)。用氩气对反应混合物反复脱气并在氩气氛下加入Pd(Ph3)4(0.058g，0.05mmol)。反应混合物再次用氩气脱气并然后于110℃加热12小时，同时通过TLC监测。完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。浓缩有机层，所得粗产物通过柱色谱法在硅胶(100/200目)上纯化并在70-80％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈白色固体的4-(3,5-二甲氧基-4-(4-乙烯基苄基)苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-9(0.35g，收率64.20％，纯度96.63％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+522.47
步骤-8：于-60℃在N2气氛下向4-(3,5-二甲氧基-4-(4-乙烯基苄基)苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-9(0.25g，0.47mmol)在THF(20mL)中的搅拌溶液中逐滴加入硼烷-四氢呋喃络合物(1M，在THF中)(0.20g，2.40mmol)。将反应混合物缓慢温热至室温并于室温搅拌16小时，同时通过TLC监测反应。在起始材料消耗后，将反应混合物冷却至0℃。在此温度下向反应混合物中依次加入过氧化氢35％(0.16g，4.79mmol)和溶解在水(1mL)中的氢氧化钠(0.19g，4.79mmol)。将反应混合物于0℃搅拌30分钟，温热至室温并再搅拌2小时。通过TLC确认反应的完成。用冰冷水(50mL)淬灭反应混合物并用EtOAc(2×50mL)萃取。合并有机层，用盐水(1×25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗产物通过柱色谱法在硅胶(230/400目)上纯化并在60-70％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈白色固体的4-(4-(4-(2-羟基乙基)苄基)-3,5-二甲氧基苯基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-10(0.16g，收率61.86％，纯度98.59％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+540.21
步骤-9：于0℃在N2气氛下向4-[4-[[4-(2-羟基乙基)苯基]甲基]-3,5-二甲氧基-苯基]-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮207-10(0.12g，0.22mmol)在DCM(25mL)中的搅拌溶液中一次性加入Dess Martin-DMP(0.94g，2.22mmol)。将反应混合物于室温搅拌3天，同时通过TLC和LC-MS监测反应。反应完成后，用冰冷的饱和碳酸氢钠溶液(50mL)淬灭反应混合物并用DCM(2×25mL)萃取。合并有机层，用盐水(1×25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。该粗产物通过柱色谱法在硅胶(230/400目)上纯化并在60-70％的EtOAc/己烷下洗脱产物，得到呈白色固体的2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]苯基]乙醛207-11(0.065g，收率48.93％，纯度90％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+538.21
步骤-10：于0℃向2-(4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)苯基)乙醛207-11(0.06g，0.12mmol)在干燥的二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中逐滴加入2-甲基-2-丁烯(0.067g，0.96mmol)，然后加入在水(5mL)中的亚氯酸钠(0.054g，0.60mmol)和磷酸二氢钠(0.29g，2.42mmol)。用时30分钟将反应混合物缓慢温热至室温并于室温再搅拌2小时，同时通过TLC监测反应。完成后，原样浓缩反应混合物，得到2-(4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)苯基)乙酸207-12(0.25g，纯度74％))并原样用于下一步而不进行进一步的纯化。LCMS(ES+):m/z[M+H]+554.18
步骤-11：于0℃在N2气氛下向3-((4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮1-3(0.035g，0.10mmol)在干燥的DMF(6mL)中的搅拌溶液中逐滴加入DIPEA(0.056g，0.43mmol)。用时15分钟将反应混合物温热至室温。反应的pH是碱性的。于室温向反应混合物中加入2-(4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)苯基)乙酸207-12(0.04g，0.25g粗品，0.072mol)，然后加入PyBop(0.048g，0.093mmol)，并让反应于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，浓缩反应混合物以产生粗产物并通过反相柱色谱法(C18/30g)使用0.1％的甲酸/水和乙腈作为流动相来纯化，得到呈浅黄色固体的3-((4-(1-(2-(4-(2,6-二甲氧基-4-(1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苄基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮207-13(0.043g，收率57.23％，纯度79.14％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+823.43
步骤-12：向3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6-甲基-7-氧代-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基]苯基]甲基]苯基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮207-13(0.043g，0.052mmol)的悬浮液中加入TFA(0.59g，5.23mmol)并将反应混合物于50℃在N2气氛下加热5小时，同时通过TLC和LC-MS监测反应。完成后，浓缩反应混合物以产生粗品，该粗品通过制备HPLC纯化，得到呈灰白色固体的3-[4-[1-[2-[4-[[2,6-二甲氧基-4-(6-甲基-7-氧代-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)苯基]甲基]苯基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA化合物207(0.0102g，收率23.85％，纯度99.78％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.17(s,1H),10.76(s,1H),8.21(s,1H),7.54(s,1H),7.21(s,1H),7.14-7.06(m,4H),6.89(d,J＝8.4Hz,2H),6.86(s,2H),6.60(d,J＝8.4Hz,2H),5.56(s,1H),4.50(d,J＝12.1Hz,1H),4.28-4.24(m,1H),4.02(d,J＝12.7Hz,1H),3.88-3.84(m,8H),3.63(s,5H),3.03-3.01(m,1H),2.97-2.54(m,4H),2.11-2.06(m,1H),1.85-1.83(m,1H),1.70-1.65(m,2H),1.35-1.31(m,2H)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+703.30
化合物208的合成：
向3-[3-氟-4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮HCl 73-7(0.096g，0.248mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA并搅拌15分钟，然后加入2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酸(0.080g，0.248mmol)和PyBOP(0.194g，0.372mmol)。让反应混合物搅拌16小时，同时通过LCMS监测。反应完成后，减压蒸发DMF，残余物通过制备HPLC纯化，得到3-[4-[4-[1-[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐化合物208(0.028g，收率13.65％，纯度97.74％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),7.59(s,1H),7.20(bs,1H),7.03-7.01(m,1H),6.98(s,1H),6.62(d,J＝14.0Hz,1H),6.53(d,J＝5.2Hz,1H),4.58(d,J＝10.4Hz,1H),4.35(d,J＝7.2Hz,1H)3.82-3.81(m,4H),3.78(m,3H),3.46(s,3H),3.30-3.03(m,1H),3.03-3.00(m,1H),2.76-2.73(m,2H),2.60-2.59(m,1H),2.06(d,J＝4.9Hz,7H),1.90-1.83(m,4H),1.68-1.42(m,5H),1.15-1.12(m,2H)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+692.59
按化合物208的合成制备化合物209。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),9.47(s,1H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),7.98(s,1H),7.60(d,J＝5.8Hz,1H),7.22-7.17(m,3H),6.60(d,J＝14.1Hz,1H),6.51(d,J＝8.2Hz,1H),4.60(d,J＝11.5Hz,1H),4.34(d,J＝7.1Hz,1H),3.85(d,J＝6.3Hz,3H),3.60(s,3H),3.40-3.38(m,5H),3.07-2.65(m,3H),2.58-2.56(m,1H),2.07-2.00(m,1H),1.90-1.84(m,4H),1.70-1.67(m,1H),1.51-1.15(m,6H)LCMS(ES+):m/z[M+H]+715.52
按化合物208的合成制备化合物210。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),8.35(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.81–7.69(m,1H),7.71–7.48(m,7H),6.76–6.41(m,2H),4.62(d,J＝12.7Hz,1H),4.35(d,J＝10.9Hz,1H),3.58(s,3H),3.46(t,J＝8.6Hz,2H),3.07(s,2H),2.85–2.53(m,4H),2.18–2.01(m,1H),1.96–1.76(m,6H),1.71(s,1H),1.42(d,J＝40.7Hz,4H),1.16(d,J＝12.1Hz,2H)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+734.9。
按化合物208的合成制备化合物211。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.50(s,1H),8.76(s,1H),8.14–7.98(m,1H),7.75–7.45(m,5H),7.29(s,1H),6.65(dd,J＝15.1,2.5Hz,1H),6.56(d,J＝8.8Hz,1H),4.62(d,J＝12.6Hz,1H),4.38(dd,J＝11.8,4.8Hz,1H),3.61(s,3H),3.46(d,J＝12.1Hz,3H),3.25(s,2H),3.07(q,J＝9.3,6.5Hz,1H),2.86–2.54(m,3H),2.08(td,J＝7.0,5.7,3.8Hz,1H),1.89(tt,J＝12.6,5.7Hz,4H),1.62(d,J＝13.7Hz,2H),1.46(s,2H),1.19(d,J＝34.2Hz,3H)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+735.7。
化合物212、化合物213和化合物214的合成
向3-[3-氟-4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮73-7(0.921g，2.17mmol)在DMF(10mL)中的搅拌混合物中加入DIPEA(1.51mL)，然后加入2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酸(0.740g，2.17mmol)并于室温搅拌5分钟。向上述反应混合物中加入PyBOP(1.69g，3.25mmol)并搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，将反应混合物倒到冰片上，得到固体。过滤固体，得到粗品。该粗品通过(硅胶davisil，洗脱剂6％的甲醇/CH2Cl2)柱色谱法纯化，得到呈黄色固体的3-[3-氟-4-[4-[1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮化合物212游离碱(0.9g，收率55.40％，纯度95％)。于0℃向3-[3-氟-4-[4-[1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮化合物212游离碱(0.9g，1.26mmol)在干燥的DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.7mL)并让于室温搅拌1小时。1小时后，将反应物质浓缩至干并加乙醚(2×30ml)研磨，得到呈淡绿色固体的3-[3-氟-4-[4-[1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(1g，收率90.49％，纯度94.49％)化合物212TFA盐。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.75(s,1H),7.53(s,1H),7.48–7.38(m,2H),7.37–7.27(m,2H),7.19(s,1H),6.57(d,J＝14.8Hz,1H),6.48(d,J＝8.9Hz,1H),4.53(d,J＝12.6Hz,1H),4.30(dd,J＝11.8,4.9Hz,1H),3.39(s,3H),3.33(d,J＝14.2Hz,2H),2.98(s,1H),2.73–2.60(m,2H),2.51(dt,J＝17.5,4.2Hz,1H),1.98(d,J＝6.9Hz,7H),1.90–1.75(m,4H),1.62(s,1H),1.53(s,3H),1.36(s,3H),1.17(s,1H),1.10–1.03(m,2H)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+712.7。
化合物212-TFA盐的SFC分离：
程序：通过SFC分离2.4g化合物212TFA盐，得到单一对映异构体。在SFC分离过程中，将化合物213和化合物214的级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环，因为SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用。因此对化合物213和化合物214的所得级分再次进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件柱子/尺寸：
柱子/尺寸：Chiralpak-AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：50％
％共溶剂：50％(0.2％7M的甲醇氨/MEOH)
总流量：120.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV：220nm
溶解度：MEOH
制备-HPLC方法：
流动相(A)：0.1％ TFA/H2O流动相(B)：100％乙腈流速：18ml/min柱子：SUNFIRE-C18,5μm(19x150mm)梯度时间％B：0/10,1/10，10/30，12.5/30，13.5/80，16/80，16.1/100，18/100，18.1/10，20/10。
按化合物212的合成制备化合物215。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.47(s,1H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),7.99(s,1H),7.63(d,J＝5.7Hz,1H),7.39-7.03(m,3H),6.63-6.52(m,2H),4.60(d,J＝12.6Hz,1H),4.35(d,J＝8.3Hz,1H),3.87(d,J＝7.9Hz,3H),3.61(s,8H),3.17-3.02(m,1H),2.77-2.54(m,3H),2.07-2.06(m,1H),1.88-1.70(m,4H),1.55-1.11(m,7H),LCMS(ES+):m/z[M+H]+699.56
按化合物212的合成制备化合物216。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ14.45(bs,1H),10.81(s,1H),8.23(s,1H),7.66(s,1H),7.33-7.31(m,1H),7.25(s,2H),6.59(d,J＝13.2Hz,1H),6.51(bs,1H),4.59(d,J＝10.8Hz,1H),4.41-4.37(m,1H),3.91(d,J＝6.2Hz,3H),3.61(s,3H),3.53(bs,1H),3.42(bs,3H),3.04(t,J＝14.7Hz,1H),3.80-3.60(m,3H)12.3Hz,1H),2.11-2.07(m,1H),1.95-1.67(m,4H),1.75-1.48(m,5H),1.39-1.17(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 704.42[M+H]+。
按化合物212的合成制备化合物217。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.19(t,J＝2.3Hz,1H),10.83(s,1H),7.52(s,1H),7.35(t,J＝2.9Hz,2H),7.11(d,J＝7.3Hz,1H),6.89(d,J＝7.3Hz,1H),6.63(d,J＝15.0Hz,1H),6.54(d,J＝8.9Hz,1H),6.21(dd,J＝3.2,1.9Hz,1H),4.37(dd,J＝11.1,4.8Hz,1H),3.46(s,5H),3.24–2.82(m,3H),2.80–2.53(m,2H),2.07(s,4H),1.94–1.80(m,6H),1.75(s,2H),1.59(s,2H),1.42(s,4H),1.23(s,4H)。LCMS(ES+):m/z 667.5[M+H]+。
化合物218的合成：
步骤-1：向化合物[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯(1g，3.73mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入无水碳酸钾99％(1.03g，7.45mmol)并搅拌15分钟，然后加入2-氟-5-硝基吡啶(529.40mg，3.73mmol)并将反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。反应完成后，用水(150ml)稀释并用乙酸乙酯(75mL×3)萃取。用Na2SO4干燥有机层并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，用90％的乙酸乙酯/石油醚作为洗脱剂)，得到呈白色固体的分离的1'-(5-硝基吡啶-2-基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯(1g，收率68.05％，纯度99％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(d,J＝2.4Hz,1H),8.17(dd,J1＝9.6Hz,J2＝2.8Hz,1H),6.56(d,J＝9.2Hz,1H),4.57(d,J＝12.8Hz,2H),4.12(bs,2H),2.98-2.91(m,2H),2.64(t,J＝12Hz,2H),1.85(d,J＝12.8Hz,2H),1.68(d,J＝12.4Hz,2H),1.44(s,10H),1.31-1.20(m,5H),LCMS(ES+):m/z 335.27[M+H-56]+
步骤-2：向1'-(5-硝基吡啶-2-基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯(1g，2.56mmol)在甲醇(20mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％Pd/C(1.09g，10.24mmol)并将反应混合物在H2气球压力下搅拌4小时，同时通过LCMS和TLC监测。反应混合物通过硅藻土床过滤并减压浓缩滤液，得到呈黑色固体的1'-(5-氨基吡啶-2-基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯(0.65g，收率66.89％，纯度95％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.79(d,J＝2.8Hz,1H),6.96(dd,J1＝8.8Hz,J2＝2.8Hz,1H),6.59(d,J＝8.8Hz,1H),4.08(bs,2H),3.27(bs,2H),2.62(t,J＝10.4Hz,4H),1.79-1.64(m,5H),1.47(s,9H),1.35-1.25(m,7H),LCMS(ES+):m/z 361.40[M+H]+
步骤-3：向密封管中1'-(5-氨基吡啶-2-基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯(0.65g，1.80mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入NaHCO3(908.83mg，10.82mmol)，然后加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.04g，5.41mmol)，并让于80℃搅拌48小时，同时通过LCMS和TLC监测。48小时后，用冰冷水(100ml)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过正相柱色谱法纯化(硅胶100-200目，并用50％的乙酸乙酯/石油醚-纯乙酸乙酯洗脱产物)，得到呈紫色固体的1'-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯(0.5g，954.22umol，收率52.9％，纯度90％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),7.68(d,J＝2.8Hz,1H),7.02(dd,J1＝8.8Hz,J2＝2.8Hz,1H),6.67(d,J＝8.8Hz,1H),5.35(d,J＝7.6Hz,1H),4.20-4.17(m,1H),4.16-3.95(m,4H),2.71-2.54(m,4H),2.12-2.07(m,1H),1.89-1.74(m,1H),1.71-1.64(m,4H),1.37(s,9H),1.95-0.98(m,7H),LCMS(ES+):m/z 472.39[M+H]+
步骤-4：于0℃向化合物1'-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)-[4,4'-联哌啶]-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.06mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(10mL)并将反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，浓缩反应混合物，得到粗化合物。用乙醚洗涤该粗化合物并真空干燥，得到呈棕色固体的3-((6-([4,4'-联哌啶]-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮HCl盐(0.49g，收率87.23％，纯度77％)并通过LCMS确认所需的化合物。LCMS(ES+):m/z 371.48[M+H]+
步骤-5：向3-[[6-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮盐酸盐(115mg，0.31mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙烷-2-胺(240mg，1.86mmol)并搅拌10分钟，然后加入2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酸(0.1g，0.31mmol)和HATU(176mg，0.46mmol)。加入后，将反应混合物搅拌16小时，同时通过LCMS监测。完成后，真空除去DMF，粗化合物通过制备-HPLC纯化，得到呈淡棕色固体的3-[[6-[4-[1-[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮TFA盐(25mg，收率10％，纯度98.72％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),7.63(d,J＝9.6Hz,1H),7.55(s,1H),7.31-7.29(m,2H),7.03(d,J＝6.8Hz,1H)6.96(s,1H),4.57(d,J＝7.7Hz,1H),4.32(s,1H),4.00(s,2H),3.81(d,J＝7.7Hz,3H),3.45(s,4H),3.11-2.88(m,3H),2.74-2.62(m,3H),2.06(d,J＝3.7Hz,7H),1.93-1.64(m,5H),1.49-1.22(m,7H)。LCMS(ES+):m/z 675.41[M+H]+
按化合物218的合成制备化合物219。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.07(s,1H),10.85(s,1H),9.46(s,1H),8.75(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.57(d,J＝5.6Hz,2H),7.32(s,2H),7.21-7.15(m,2H),6.20(s,1H),4.58(bs,1H),4.32-4.28(m,2H),3.96(d,J＝9.6Hz,2H),3.85(d,J＝7.3Hz,3H),3.60(s,1H),3.49-3.35(m,1H),3.05-3.02(m,3H),2.76-2.61(m,3H),2.15-2.11(m,1H),1.95-1.66(5H),1.51-1.48(bs,2H),1.23-1.15(m,4H)。LCMS(ES+):m/z 798.18[M+H]+
按化合物218的合成制备化合物220。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.25(bs,1H),10.86(s,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.60(s,1H),7.33-7.22(m,4H),6.20(bs,1H),4.57(bs,1H),4.35-4.31(m,1H),3.99(bs,2H),3.91(d,J＝7.4Hz,3H),3.61(s,3H),3.47-3.36(m,1H),3.17-2.89(m,3H),2.75-2.63(m,3H),2.12-2.07(m,1H),1.93-1.80(m,4H),1.67-164(,1H),1.41-1.11(m,6H),LCMS(ES+):m/z M+H]+687.38
按化合物218的合成制备化合物221。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d 12.73(bs,1H),10.74(s,1H),9.45(s,1H),8.75(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.63(s,1H),7.56(d,J＝5.6Hz,1H),7.24(m,3H),6.57(d,J＝8.8Hz,1H),6.43(bs,1H),4.66(m,2H),3.86(d,3H),3.59(s,3H),3.39(m,3H),3.05(t,J＝12.8Hz,1H),2.78-2.67(m,2H),2.55(m,2H),2.49(m,1H),2.10(m,1H),2.07(m,1H),1.83-1.76(m,4H),1.43-1.12(m,6H).LCMS(ES+):m/z 698.45[M+H]+
按化合物218的合成制备化合物222。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),8.44(bs,1H),8.23(s,1H),7.66(m,2H),7.33(d,J＝6.8Hz,1H),7.24-7.19(m,2H),6.54(d,J＝8.8Hz,1H),6.39(d,J＝7.6Hz,1H),6.15(d,J＝8.0Hz,1H),4.64-4.56(m,2H),3.92(d,3H),3.61(s,3H),3.38(m,3H),3.01(t,1H),2.75-2.68(m,2H),2.54(m,1H),2.49(m,2H),2.10-2.07(m,1H),2.03-1.92(m,1H),1.82-1.65(m,4H),1.39-1.11(m,6H)。LCMS(ES+):m/z 687.45[M+H]+。
按化合物218的合成制备化合物223。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),7.61(d,J＝8.6Hz,1H),7.54(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(td,J＝11.1,10.2,5.4Hz,3H),6.93(t,J＝9.4Hz,1H),6.55(dd,J＝15.0,2.5Hz,1H),6.45(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),4.87–4.58(m,1H),4.29(dd,J＝11.6,4.8Hz,1H),3.46(s,5H),3.27(t,J＝12.8Hz,1H),3.05(s,9H),2.83–2.53(m,2H),2.05(d,J＝3.2Hz,8H),1.93–1.66(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 749.6[M+H]+。
按化合物218的合成制备化合物224。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.46(s,1H),8.75(d,J＝5.6Hz,1H),8.00-7.98(m,1H),7.64-7.60(m,1H),7.24-7.18(m,2H),6.88-6.84(m,1H),6.52(d,J＝15.6Hz,1H),6.43(d,J＝8.4Hz,1H),4.75-4.70(m,1H),4.30-4.26(m,1H),3.97(s,3H),3.60(s,3H),3.50-3.47(m,2H),3.30-3.20(m,2H),3.16-2.93(m,6H),2.75-2.60(m,2H),2.10-2.06(m,2H),1.90-1.75(m,4H).LCMS(ES+):m/z 752.45[M+H]+。
按化合物218的合成制备化合物225。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.49(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),7.98(d,J＝7.5Hz,1H),7.69(t,J＝6Hz,1H),6.91(t,J＝8.4Hz,1H),6.82-6.79(m,2H),6.55(d,J＝2Hz,1H),6.51-6.44(m,1H),4.77-4.73(m,1H),4.28-4.25(m,1H),3.82-3.78(m,6H),3.62(s,3H),3.58-3.49(m,2H),3.25-2.92(m,10H),2.73-2.67(m,1H),2.59-2.55(m,1H),2.10-2.06(m,1H),1.91-1.83(m,3H).LCMS(ES+):m/z 748.48[M+H]+
按化合物218的合成制备化合物226。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.48(s,1H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),8.01(d,J＝8.1Hz,1H),7.68-7.65(m,1H),7.09-7.03(m,3H),6.90(t,J＝8.4Hz,1H),6.53(d,J＝15.1Hz,1H),6.44(d,J＝8.7Hz,1H),4.82-4.76(m,1H),4.28-4.24(m,1H),3.87(s,3H),3.61(s,3H),3.36-3.17(m,2H),2.97(bs,10H),2.77-2.55(m,2H),2.10-2.04(m,2H),1.88-1.74(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 736.46[M+H]+
按化合物218的合成制备化合物227。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.51(s,1H),8.77(d,J＝5.9Hz,1H),8.06(d,J＝7.9Hz,1H),7.79–7.49(m,4H),7.28–6.84(m,1H),6.65–6.40(m,2H),4.90–4.58(m,1H),4.29(dd,J＝11.5,4.8Hz,1H),3.62(s,4H),3.31(t,J＝13.4Hz,1H),3.09(d,J＝19.5Hz,10H),2.83–2.53(m,2H),2.21–1.95(m,2H),1.86(qd,J＝12.3,4.8Hz,2H),1.44–1.06(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 772.5[M+H]+。
按化合物218的合成制备化合物228。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.46(s,1H),8.75(t,J＝5.2Hz,1H),7.96(s,1H),7.57(t,J＝5.6Hz,1H),7.23-6.95(m,4H),6.66(d,J＝8.1Hz,2H),5.86(s,1H),4.66(s,1H),4.31-4.28(m,1H),3.87(d,J＝14.7Hz,3H),3.60(s,3H),3.49-3.30(m,6H),3.10-2.86(m,2H),2.77-2.58(m,3H),2.18-1.56(m,8H),LCMS(ES+):m/z 733.57[M+H]+
按化合物218的合成制备化合物229。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),7.59(s,1H),7.04-6.96(m,4H),6.66(d,J＝8.0Hz,2H),5.89(s,1H),4.67(d,J＝13.2Hz,1H),4.31-4.01(m,1H),3.86-3.81(m,4H),3.51-3.46(m,6H),3.09-3.06(m,4H),2.84-2.55(m,3H),2.07(d,J＝6.3Hz,11H),1.91-1.86(m,1H),1.57(bs,2H)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+710.06
化合物230的合成：
步骤-1：于室温向4-溴-3-氟苯酚230-1(10g，52.36mmol)在DMF(80mL)中的搅拌溶液中加入碳酸钾(14.47g，104.71mmol)和苄基溴(9.85g，57.59mmol)，并将反应混合物于室温搅拌20分钟，然后于70℃搅拌40分钟。通过TLC/LCMS监测反应进度。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并向反应混合物中加入水(200mL)。用乙酸乙酯(200mL×2)萃取粗化合物。合并有机层，用水(200mL)、然后用盐水(200mL)洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤并真空浓缩，得到呈棕色液体的产物4-(苄氧基)-1-溴-2-氟苯230-2(14.5g，收率88.20％，纯度89.53％)。
步骤-2：在微波小瓶中，用氩气对叔丁醇钠(0.855g，8.89mmol)在溶剂THF(10mL)和甲苯(10mL)的混合物中的搅拌溶液吹扫5分钟。向该溶液中加入4-(苄氧基)-1-溴-2-氟苯(1g，3.56mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.861g，4.62mmol)并用氩气吹扫10分钟。向反应混合物中加入XPhos Pd G2(0.280g，0.355mmol)并在微波条件下于100℃辐照30分钟。通过LCMS和TLC监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物并通过柱色谱法(Davisil二氧化硅，0-8％的乙酸乙酯和石油醚作为洗脱剂)纯化粗化合物，得到呈黄色固体的4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.18mmol，收率33.28％，纯度91.51％)。反应分3批进行，每批1g，得到1.5g纯的4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯。LCMS(ES+):m/z 387.28[M+H]+
步骤-3：于0℃向4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.8g，7.25mmol)在DCM(30mL)中的搅拌溶液中加入TFA(9.91g，86.94mmol，6.70mL)并将反应混合物于室温搅拌2小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物并与乙腈(5mL×2)、甲苯(5mL×2)共蒸馏，得到呈棕色固体的1-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪TFA(2.4g，收率78.00％，纯度94.27％)。LCMS(ES+):m/z 287.43[M+H]+
步骤-4：向连接了Dean Stark装置的两颈100mL圆底烧瓶中1-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪TFA(2.5g，6.24mmol)在溶剂甲苯(25mL)和乙腈(13mL)的混合物中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(2.05g，24.98mmol)并于室温搅拌10分钟。向反应混合物中加入3,3-二氟-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.76g，7.49mmol)、乙酸(1.87mL，31.22mmol)和分子筛(0.5g)并于120℃搅拌8小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应，用乙酸乙酯(25mL×2)和乙腈(25mL×2)洗涤。真空浓缩有机层，粗物质通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0至30％的乙酸乙酯和石油醚作为洗脱剂)，得到呈黄色固体的4-[4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-基]-3,3-二氟-2,6-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，收率58.84％，纯度74.30％)。在LCMS(ES+)中发现形成的主要产物具有大量烯胺产物：m/z526.26[M+Na]+
步骤-5：将4-[4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-基]-3,3-二氟-2,6-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，4.96mmol)在乙醇(20mL)和THF(20mL)中的搅拌溶液用氮气吹扫10分钟。向反应混合物中加入钯碳(10重量％)(3g，4.96mmol)并将反应混合物在氢气氛下(气球压力下)于室温搅拌6小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物，并用THF(25mL×2)、乙酸乙酯(25mL×2)洗涤。收集有机层，浓缩，提供呈棕色固体的粗品3,3-二氟-4-[4-(2-氟-4-羟基-苯基)哌嗪-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.77g，收率71.19％，纯度82.96％)。化合物不经进一步纯化即用于下一步。LCMS(ES+):m/z416.78[M+H]+
步骤-6：向3,3-二氟-4-[4-(2-氟-4-羟基-苯基)哌嗪-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.77g，4.26mmol)在THF(80mL)中的搅拌溶液中加入氢化钠(在矿物油中的60％分散体)(0.098g，4.26mmol)并于70℃搅拌30分钟。于70℃向反应混合物中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(0.818g，4.26mmol)在THF(5mL)中的溶液并于70℃继续搅拌3小时。通过LCMS和TLC监测反应的进度。反应完成后，用冰冷水(100mL)淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(3×70mL)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗物质通过柱色谱法纯化(Davisili二氧化硅，0至60％的EtOAc/石油醚)，得到呈灰白色固体的4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氧基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.890g，收率38.64％，纯度97.39％)。LCMS(ES+):m/z 527.94[M+H]+
步骤-7：于0℃向4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氧基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.890g，1.69mmol)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(1.23g，33.81mmol，1.54mL)并将反应混合物于室温搅拌2.5小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物并加乙醚(25mL×2)研磨，得到呈棕色固体的1-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪HCl(0.860g，收率94.74％，纯度98.15％)。LCMS(ES+):m/z 427.31[M+H]+
步骤-8：向3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯氧基]哌啶-2,6-二酮(0.2g，0.432mmol)和2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(0.15g，0.456mmol)在溶剂甲醇(20mL)和二氯乙烷(20mL)的混合物中的搅拌溶液中加入乙酸钠(0.071g，0.864mmol)并于室温搅拌10分钟。向反应混合物中加入乙酸(0.026g，0.432mmol，25μL)和分子筛(0.2g)并于70℃搅拌5小时。将反应混合物冷却至室温，于室温向反应混合物中加入SiliaBond氰基硼氢化物(0.25g)并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用二氯乙烷和甲醇的混合物(25mL×2)洗涤硅藻土床。真空浓缩滤液并通过制备HPLC纯化粗化合物，得到呈棕色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯氧基]哌啶-2,6-二酮(113.21mg，收率29.19％，纯度95.06％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.48(s,1H),8.76(d,J＝6.0Hz,1H),7.99(s,1H),7.61(d,J＝6.0Hz,1H),7.22(s,1H),7.16(s,1H),7.02-6.92(m,2H),6.81(bd,J＝8.8Hz,1H),5.16(m,1H),3.89(m,5H),3.621(s,3H),3.55-3.08(m,12H),2.73-2.54(m,3H),2.21-2.09(m,3H),1.89(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 739.19[M+H]+。
制备HPLC方法：
柱子：X select C18 5μm(19x250mm)
流动相(A)：0.05％ TFA/水，流动相(B)：乙腈，
梯度时间％B：0/10,2.5/15,26/33.1,26.10/100,28.10/100,28.20/10,30.20/10
流速：17ml/min
化合物231的合成：
步骤-1：于0℃向6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.5g，7.07mmol)和三乙胺(2.15g，21.22mmol，2.96mL)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中逐滴加入氯甲酸苄酯(1.81g，10.61mmol)并于室温搅拌12小时。通过LCMS/TLC监测反应的进度。反应完成后，通过加入冰冷的饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)来淬灭反应并用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，20％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈无色固体的6-溴-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(2g，收率79.55％，纯度97.4％)。LCMS(ES+):m/z 347.18[M+H]+
步骤-2：将6-溴-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(1.5g，4.33mmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.01g，6.50mmol)在水(15mL)和1,4-二噁烷(60mL)的混合物中的搅拌溶液用氩气吹扫5分钟。向反应混合物中加入碳酸钾(1.80g，13.00mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(500.65mg，0.433mmol)并用氩气再次吹扫10分钟。将反应混合物于80℃搅拌12小时。通过LCMS和TLC监测反应的进度。反应完成后，用水(50mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(30ml×2)萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，30％的乙酸乙酯/石油醚)，得到呈无色固体的6-(1-叔-丁氧基羰基-3,4-二氢-2H-吡啶-5-基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(1.5g，收率75.56％，纯度97.9％)。LCMS(ES+):m/z 471.42[M+Na]+
步骤-3：于0℃向6-(1-叔-丁氧基羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(1.5g，3.34mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/二噁烷(0.91mL，20.06mmol)并于室温搅拌3小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，减压除去挥发物。残余物与甲苯(20mL×2次)共蒸发并加乙醚(20mL×2)研磨，得到呈白色固体的6-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯.HCl(1.25g，收率89.35％，纯度92％)。LCMS(ES+):m/z 349.30[M+H]+
步骤-4：向密封管中6-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯HCl(1.3g，3.38mmol)和1-氟-4-硝基-2-(三氟甲基)苯(706.23mg，3.38mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(851.20mg，10.13mmol)并于75℃搅拌16小时。通过LCMS和TLC监测反应的进度。反应完成后，将混合物冷却至室温并加入冰冷水。粗化合物用乙酸乙酯萃取并通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目，30％的乙酸乙酯/石油醚作为洗脱剂)，得到呈黄色固体的6-[1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(1.0g，收率53.65％，纯度97.4％)。LCMS(ES+):m/z 538.30[M+H]+
步骤-5：向6-[1-[4-硝基-2-(三氟甲基)苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(1.0g，1.86mmol)和锌(973.19mg，14.88mmol)在水(3mL)和THF(12mL)的混合物中的搅拌溶液中加入氯化铵(796.11mg，14.88mmol)并于25℃搅拌3小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物并通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，使用20％的乙酸乙酯/石油醚作为洗脱剂)，得到呈淡黄色固体的6-[1-[4-氨基-2-(三氟甲基)苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(0.8g，收率83.62％，纯度98.7％)。LCMS(ES+):m/z 508.25[M+H]+
步骤-6：向6-[1-[4-氨基-2-(三氟甲基)苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(0.8g，1.58mmol)和碳酸氢钠(397.24mg，4.73mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(453.97mg，2.36mmol)并在密封管中于60℃搅拌3天。通过LCMS监测反应的进度。将反应混合物倒入在分液漏斗中的冰冷水(80mL)中并用乙酸乙酯(25mL×2)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，30％的乙酸乙酯/石油醚作为洗脱剂)，得到呈固体的6-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-(三氟甲基)苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(0.3g，收率25.01％，纯度81.3％)。LCMS(ES+):m/z619.64[M+H]+
步骤-7：将6-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-(三氟甲基)苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(0.3g，0.484mmol)在乙酸乙酯(3mL)和THF(3mL)的混合物中的搅拌溶液用氮气脱气10分钟，然后加入10％钯碳(206.43mg，1.94mmol)。将反应混合物于室温在氢气下(气球压力下)于25℃搅拌12小时。通过LCMS和TLC监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物并用乙醇(10ml)和乙酸乙酯(20ml)洗涤。减压浓缩滤液，得到呈淡棕色半固体的3-[4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.180g，收率66.99％，纯度87.8％)。LCMS(ES+):m/z 487.32[M+H]+
步骤8：向3-[4-[4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(75.01mg，0.154mmol)和2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(0.050g，0.154mmol)在1,2-二氯乙烷(3mL)和甲醇(3mL)的混合物中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(37.94mg，0.462mmol)、乙酸(27.77mg，0.462mmol)和分子筛(70mg)并于75℃搅拌5小时。将反应混合物冷却至0℃，向反应混合物中加入Si-CBH(89.36mg，1.54mmol)并于25℃搅拌12小时。通过LCMS监测反应的进度。反应混合物通过硅藻土床过滤并减压浓缩滤液。残余物通过制备HPLC纯化，得到呈棕色半固体的3-[4-[4-[2-[[2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基]-1-哌啶基]-3-(三氟甲基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA(18.7mg，收率12.71％，纯度95.26％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)d 10.79(s,1H),9.55(bd,2H),8.76(bs,1H),7.92(s,1H),7.62(d,J＝6.0Hz,1H),7.35(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(m,3H),6.96(m,4H),6.20(bs,1H),4.41(m,5H),3.89(s,6H),3.62(m,4H),3.17-3.14(s,2H),2.92-2.80(m,4H),3.74(m,1H),2.62(m,2H),2.07(m,2H),1.92(m,1H),1.79(m,4H)。LCMS(ES+):m/z 795.67[M+H]+
化合物232的合成：
步骤-1：于0℃向3-[4-(4-哌啶基)苯胺基]哌啶-2,6-二酮(盐酸盐)(0.1g，0.3088mmol)在DMF(1.0mL)中的搅拌溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙烷-2-胺(199.56mg，1.54mmol，268.95uL)，然后在相同的温度下向反应混合物中加入2-(1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶基)乙酸(75.13mg，0.3088mmol)。然后于0℃向其中加入N,N,N',N'-四甲基-1-(3-氧桥-2,3-二氢三唑并[4,5-b]吡啶-3-鎓-1-基)甲烷二胺六氟磷酸盐(177.07mg，0.463mmol)并将反应混合物于室温搅拌2小时。向其中加入饱和NaHCO3溶液(10mL)并使用EtOAc(2×20mL)进行萃取。合并有机层，用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目大小，0-100％的EtOAc/石油醚梯度洗脱)，得到所需产物4-[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.093g，0.1814mmol，收率58.86％)。LCMS(ES-):m/z 511.2[M–H]-
步骤-2：于0℃向4-[2-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代-乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.0938g，0.1814mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中加入HCl/二噁烷的4M溶液(6.46mL)并将反应混合物搅拌1小时。反应完成后，减压除去挥发物并向残余物中加入Et2O(3mL)。将其搅拌15分钟，通过过滤收集观察到的固体并干燥，得到呈淡棕色固体的所需化合物3-[4-[1-[2-(4-哌啶基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(盐酸盐)(0.090g，0.200mmol，定量收率，纯度97％)。LCMS(ES+):m/z 413.1[M+H]+
步骤-3：于0℃向3-[4-[1-[2-(4-哌啶基)乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(80.43mg，0.179mmol，021)在DMF(1.2mL)中的处于室温的搅拌溶液中加入DIPEA(115.76mg，0.8975mmol，156.00uL)。在于0℃搅拌5分钟后，向其中加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸(0.070g，0.179mmol)和HATU(102.17mg，0.268mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时。反应物质直接减压蒸发，所得残余物通过反相纯化使用乙腈和水(甲酸作为缓冲剂)来纯化。所得残余物(108mg)通过制备HPLC进一步纯化，得到呈绿色固体的标题化合物3-[4-[1-[2-[1-[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酰基]-4-哌啶基]乙酰基]-4-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮(28mg，0.0379mmol，收率94.42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.10-1.50(m,6H)；1.60-1.90(m,4H)；1.95-2.15(m,2H)；2.25-2.40(m,2H)；2.55-2.90(m,4H)；3.00-3.10(m,2H)；3.38-3.42(m,1H)；3.60(s,3H)；3,84&3.86(two s,3H)；3.95-4.05(m,1H)；4.22-4.30(m,1H)；4.48-4.60(m,2H)；5.67(d,J＝8.4Hz,1H)；6.61(d,J＝6.4Hz,2H)；6.95(d,J＝6.0Hz,2H)；7.16(s,1H)；7.20(dd,J1＝1.2Hz,J2＝6.0Hz,1H)；7.56(d,J＝5.6Hz,1H)；7.95(s,1H)；8.74(d,J＝5.6Hz,1H)；9.45(s,1H)；10.78(s,1H)。LCMS(ES+):m/z 739.59(M+H)+。
按化合物232的合成制备化合物233。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.08-1.22(m,2H)；1.28-1.60(m,2H)；1.62-1.90(m,6H)；1.95-2.12(m,2H)；2.25-2.35(m,2H)；2.50-2.60(m,2H)；2.66-2.74(m,2H)；2.98-3.10(m,2H)；3.22-3.32(m,1H)；3.61(s,3H)；3.80-4.10(m,4H)；4.22-4.30(m,1H)；4.45-4.60(m,2H)；6.58-6.64(m,2H)；6.90-6.98(m,2H)；7.21(s,1H)；7.32(d,J＝6.0Hz,1H)；7.66(s,1H)；8.23(s,1H)；10.80(s,1H)；14.30(bs,1H)。LCMS(ES+):m/z 728.59[M+H]+
化合物234的合成：
向化合物236-1(0.3g，0.62mmol)和化合物2,6-二甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸(0.211g，0.62mmol)在DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.4g，3.1mmol)；并将反应混合物搅拌15分钟。然后向其中加入PyBOP(0.745g，1.24mmol)并将反应混合物于80℃搅拌4小时。反应完成(如由LCMS所指示)后，将其冷却至室温并向其中加入饱和NaHCO3溶液(15mL)。过滤所得固体，用水(3mL×2)洗涤并干燥。然后将其通过制备HPLC纯化，得到呈白色固体的所需化合物化合物234(TFA盐)(0.160g，172.68μmol，收率24.13％，纯度99.60％)。
制备HPLC条件：
柱子/尺寸：SUNFIRE-C18(150*19*5μ)
流动相A：0.1％的TFA/水
流动相B：乙腈(ORG)
梯度(时间/％B)：0/10,3/10,10/25,18/25,18.1/100,24/100,24.1/10,26/10
流速：16ml/min
LCMS(ES+):m/z 809.48[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.80(s,1H)；9.48(d,J＝4.8Hz,1H)；8.75(t,J＝5.2Hz,1H)；7.97(d,J＝22.0Hz,1H)；7.68(t,J＝6.8Hz,1H)；7.46(dt,J1＝7.6Hz,J2＝33.6Hz,7.6Hz,1H)；7.35-7.05(m,3H)；6.84(s,1H)；6.78(s,1H)；6.68-6.45(m,2H)；4.94(s,1H)；4.53(s,1H)；4.48-4.28(m,2H)；4.00-3.88(m,1H)；3.79(s,3H)；3.50-3.20(m,10H)；2.90-2.50(m,4H)；2.12-2.00(m,1H)；1.95-1.40(m,6H)。
按化合物234的合成制备化合物235。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.49(s,1H),8.77(m,1H),8.01(s,1H),7.66(m,1H),7.25-6.92(m,6H),6.65-6.53(m,2H),4.85-4.77(m,1H),4.40(m,2H),3.96(m,1H),3.83(s,3H),3.71(s,1H)3.62(s,3H),3.50-3.39(m,5H),2.92-2.81(m,2H),2.73-2.55(m,3H),2.07-2.05(m,1H),1.90-1.59(m,6H)；LCMS(ES+):m/z 777.47[M+H]+
按化合物234的合成制备化合物236。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.70-2.15(m,4H)；2.50-2.60(m,1H)；2.66-2.78(m,1H)；2.90-3.30(m,8H)；3.62(s,3H)；3.86(s,3H)；3.87(s,3H)；4.34-4.42(m,1H)；4.42-4.48(m,1H)；4.84-4.94(m,1H)；6.60-6.65(m,2H)；6.96-7.30(m,7H)；7.62-7.65(m,1H)；8.00(d,J＝4.0Hz,1H)；8.72-8.80(s,1H)；9.48(d,J＝1.6Hz,1H)；10.78(s,1H)。LCMS(ES+):m/z 795.20[M+H]+
按化合物234的合成制备化合物237。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.64(bs,1H),9.48(s,1H),8.76(d,J＝5.6Hz,1H),7.94(s,1H),7.63(d,J＝5.6Hz,1H),7.26(m,3H),7.11(d,J＝6.8Hz,1H),6.91(m,4H),6.15(bs,1H),4.45-4.34(m,5H),3.90(s,6H),3.73-3.70(m,1H),3.63(s,3H),3.47(m,1H),3.12(m,2H),2.81-2.63(m,3H),2.61-2.54(m,5H),2.07-2.04(m,1H),1.91(m,1H),1.66-1.58(m,3H),1.37(m,2H).LCMS(ES+):m/z 809.48[M+H]+。
按化合物234的合成制备化合物238。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),7.58(d,J＝6.4Hz,1H),7.23(m,4H),6.91-6.79(m,2H),6.64(d,J＝24.0Hz,2H),6.15(d,J＝8.0Hz,1H),4.77(s,1H),4.36-4.31(m,2H),3.85(t,1H),3.76(s,4H),3.59(s,2H),3.47(m,3H),3.43(m,1H),2.84-2.53(m,10H),2.10-2.06(m,7H),1.90-1.87(m,1H),1.59(m,3H),1.35(m,2H).LCMS(ES+):m/z800.24[M+H]+。
化合物239的合成：
步骤-1：于0℃向5-溴-8-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉(3g，13.04mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中依次加入吡啶(0.721g，9.13mmol)和氯甲酸苄酯(1.78g，10.43mmol)并让于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。反应完成后，将反应混合物倒到冷碳酸氢钠溶液(50mL)上并分离有机层。用DCM(100mL×2)萃取水层。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并在旋转蒸发器上浓缩，得到粗产物。所得粗品通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目)，用石油醚:乙酸乙酯0-7％梯度洗脱，得到呈无色液体的5-溴-8-氟-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯2(2.8g，收率56.01％，纯度94.96％)。LCMS(ES+):m/z 364.15[M+H]+
步骤-2：于室温在氩气氛下向5-溴-8-氟-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸苄酯2(2.8g，7.69mmol)在1,4-二噁烷(50mL)和水(10mL)中的搅拌溶液中加入4-[(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.48g，7.69mmol)，然后加入碳酸钾(2.66g，19.22mmol)。用氩气对反应混合物反复脱气并在氩气氛下一次性加入Pd(PPh3)4(355.35mg，0.307mmol)。将反应混合物于80℃加热5小时，同时通过LCMS和TLC监测。完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土床过滤并用乙酸乙酯(100mL)洗涤。浓缩滤液，用乙酸乙酯(100mL)溶解所得粗物质并用水(2×50mL)、然后盐水(1×50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物。该粗品通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目并在8-10％的EtOAc:石油醚下洗脱产物)，得到呈棕色胶状固体的5-((1-(叔-丁氧基羰基)哌啶-4-亚基)甲基)-8-氟-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸苄酯239-4(2g，收率48.72％，纯度90％)。LCMS(ES+):m/z[M+Na]+503(M-100片段占主导)。
步骤-3：向5-[(1-叔-丁氧基羰基-4-亚哌啶基)甲基]-8-氟-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯239-4(2g，4.16mmol)在1,4-二噁烷(1mL)中的处于0℃的搅拌溶液中加入4M的HCl/二噁烷(1.52g，41.62mmol)并让于室温搅拌20分钟，同时通过TLC监测反应。反应完成后，减压蒸发挥发物。将固体与甲苯(10mL)共蒸发，然后加乙醚(20mL×2)研磨。倾析出乙醚并将所得固体真空干燥，得到呈灰白色固体的8-氟-5-(4-亚哌啶基甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯.HCl盐239-5(1.7g，收率88.18％，纯度96.62％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+381.62
步骤-4：向化合物8-氟-5-(4-亚哌啶基甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(1.8g，4.73mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(3.08g，9.46mmol)并让搅拌15分钟，然后加入1,2-二氟-4-硝基-苯(0.752g，4.73mmol)。让反应混合物于室温搅拌4小时，同时通过TLC监测。反应完成后，向反应混合物中加入冰冷水并用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗品通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目，0-7％的EtOAc:石油醚梯度溶剂)，得到呈黄色胶状液体的8-氟-5-[[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯239-7(1.3g，收率49.71％，纯度94％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+381.62
步骤-5：向8-氟-5-[[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯239-7(1.3g，2.50mmol)在甲醇(5mL)、THF(5mL)和水(10mL)中的搅拌溶液中加入锌粉(1.64g，25.02mmol)。将反应混合物于0℃冷却，逐份加入氯化铵(2.01g，37.53mmol)，并于室温搅拌2小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，用硅藻土床过滤反应混合物并浓缩滤液，粗化合物通过柱色谱法使用(硅胶100-200目，0-20％的EtOAc:石油醚梯度溶剂)纯化，得到呈黄色固体的5-[[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-8-氟-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯(1g，1.94mmol，收率77.55％，纯度95％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+490.52。
步骤-6：向5-[[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-亚哌啶基]甲基]-8-氟-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯239-8(1g，2.04mmol))在DMF(30mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(注意：其分三批加入，每批4eq，每24小时后加入一批)(4.71g，24.51mmol)、NaHCO3(2.06g，24.51mmol)并于90℃搅拌72小时，同时通过LCMS和TLC监测反应。72小时后，用冰冷水(100ml)淬灭反应并用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗化合物并通过(硅胶100-200目，并用乙酸乙酯/石油醚0-50％梯度洗脱来洗脱产物)柱色谱法纯化，得到呈蓝色固体的5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-亚哌啶基]甲基]-8-氟-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯239-10(0.85g，收率63.04％，纯度91％)。LCMS(ES+):m/z 601.62[M+H]+。
步骤-7：向5-[[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-亚哌啶基]甲基]-8-氟-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯239-10(0.1g，0.166mmol)在二噁烷(15mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(88.59mg，0.832mmol)。在压力为80psi的钢制反应釜中将反应混合物在氢气氛下于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用乙酸乙酯和THF混合物(1:1)(20mL)洗涤。浓缩滤液，得到粗产物，该粗产物加乙醚(5mL×2)研磨。倾析出乙醚并干燥，得到呈灰白色固体的3-((3-氟-4-(4-((8-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)甲基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮239-11(0.07g，0.109mmol，收率62.51％，纯度88.9％)。LCMS(ES+):m/z469.36[M+H]+
步骤-8：在N2下向3-[3-氟-4-[4-[(8-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)甲基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮239-11(0.08g，0.170mmol)在干燥的DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙烷-2-胺(66.20mg，0.512mmol)并让于室温温热。加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸(58.86mg，0.170mmol)和PyBOP(106.62mg，0.204mmol)并将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，减压浓缩反应混合物，得到粗残余物并将其通过制备HPLC纯化，得到呈棕色固体的3-[4-[4-[[2-[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酰基]-8-氟-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]甲基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐化合物239(43mg，0.0460mmol，收率26.95％，纯度97.31％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.47(s,1H),8.76(t,J＝5.8Hz,1H),8.01(d,J＝12.6Hz,1H),7.60(q,J1＝8.8Hz,J2＝5.4Hz,1H),7.26-6.96(m,6H),6.58-6.49(m,2H),4.84(q,J＝19.5Hz,2H),4.40-4.32(m,2H),4.03-3.98(m,2H),3.86(s,3H),3.61(s,3H),3.54-3.42(m,8H),3.17-2.67(m,5H),2.07-2.05(m,1H),1.97-1.85(m,2H)LCMS(ES+):m/z795.54[M+H]+
按化合物239的合成制备化合物240。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.31(s,1H),10.79(s,1H),8.25(d,J＝7.8Hz,1H),7.38-6.95(m,5H),6.67-6.40(m,2H),7.04(m,J＝8.1Hz,1H),6.51(d,J＝38.6Hz,1H),4.82(q,J＝20.7Hz,1H),4.38(s,1H),4.28(bs,1H),3.99-3.77(m,10H),3.49-3.16(m,4H),2.90-2.57(m,4H),2.09-2.04(m,1H),1.88-1.47(m,6H).LCMS(ES+):m/z 784.58[M+H]+
化合物241的合成：
步骤-1：于0℃向4-[2-(1-苄氧基羰基-4-羟基-4-哌啶基)乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯151-5(5g，11.35mmol)在CH2Cl2(30mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(25.88g，227.00mmol)并于室温搅拌1小时，同时通过TLC和LCMS监测。1小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物加乙醚(2×40ml)研磨，得到呈棕色固体的4-羟基-4-[2-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙炔基]哌啶-1-甲酸苄酯TFA盐241-2(5g，8.80mol，收率77.55％，纯度80％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+341.32。
步骤-2：向4-羟基-4-[2-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙炔基]哌啶-1-甲酸苄酯241-2(8g，23.50mmol)在DMF(40mL)中的搅拌溶液中加入1,2-二氟-4-硝基-苯(3.36g，21.15mmol)、碳酸铯(30.63g，94.00mmol)并于室温搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测。16小时后，用冰冷水(100mL)淬灭反应并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过(硅胶100-200目，40％的乙酸乙酯/石油醚)柱色谱法纯化，得到呈浅黄色半固体的4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸苄酯241-4(4g，7.26mmol，收率30.88％，纯度87％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+480.24。
步骤-3：于0℃向4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸苄酯241-4(4g，8.34mmol)在CH2Cl2(40mL)中的搅拌溶液中加入Et3N(2.53g，25.03mmol)、甲基磺酰氯(0.955g，8.34mmol)并于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。16小时后，用饱和NaHCO3溶液(30ml)淬灭反应混合物并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗品，该粗品通过(硅胶100-200目，20％的乙酸乙酯/石油醚)柱色谱法纯化，得到呈黄色固体的4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苄酯241-5(2.5g，3.95mmol，收率47.41％，纯度73％)。LCMS(ES+):m/z[M+H]+462.19。
步骤-4：于室温向4-[2-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苄酯241-5(2.5g，5.42mmol)在THF(20mL)和水(10mL)中的搅拌溶液中一次性加入锌粉(2.83g，43.34mmol)，然后于室温逐份加入氯化铵(2.32g，43.34mmol)。将反应混合物于室温搅拌5小时，同时通过TLC监测。5小时后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用甲醇(20mL)洗涤。浓缩滤液，用冰冷水(50mL)溶解残余物质并用EtOAc(2×100mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗化合物，该粗化合物通过(硅胶100-200目，20％的乙酸乙酯/石油醚)柱色谱法纯化，得到呈黄色半固体的4-[2-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苄酯241-6(1.2g，2.36mmol，收率43.64％，纯度85％)。LCMS(ES+):m/z 432.24[M+H]+。
步骤-5：向4-[2-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苄酯241-6(1.1g，2.55mmol)在DMF(8mL)中的搅拌溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮7(1.47g，7.65mmol)、NaHCO3(0.856g，10.2mmol)并于80℃搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测。16小时后，用冰冷水(20ml)淬灭反应并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物。粗化合物通过(硅胶100-200目，20％的乙酸乙酯/石油醚)柱色谱法纯化，得到呈棕色半固体的4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苄酯241-8(1.1g，1.68mmol，收率66.01％，纯度83％)。LCMS(ES+):m/z 543.66[M+H]+。
步骤-6：对4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]乙炔基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苄酯241-8(0.5g，0.921mmol)在甲醇(7mL)和乙酸乙酯(7mL)中的搅拌混合物脱气10分钟，然后加入碳载氢氧化钯(20重量％)50％水(0.129g，0.921mmol)和HCl(0.034g，0.921mmol)。再次对反应混合物脱气并于室温在氢气压力(@90Psi)下在钢制反应釜中搅拌16小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用甲醇(20ml)洗涤。真空除去滤液，得到呈灰色固体的3-[3-氟-4-[4-[2-(4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮241-9(0.3g，0.518mmol，收率56.28％，纯度72％)。LCMS(ES+):m/z 417.82[M+H]+。
步骤-7：于0℃向3-[3-氟-4-[4-[2-(4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮241-9(0.7g，1.68mmol)在THF(10mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.260g，2.02mmol)和DMAP(0.002g，0.017mmol)及二碳酸二叔丁酯(0.55g，2.52mmol)并让于室温搅拌16小时，同时通过LCMS和TLC监测。16小时后，用(20ml)稀释反应物质并用乙酸乙酯(3×30ml)萃取，合并有机层，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗化合物，该粗化合物通过(硅胶230-400目，30％的乙酸乙酯/石油醚)柱色谱法纯化，得到呈灰色固体的4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯241-10(0.200g，0.340mmol，收率20.27％，纯度88％)。LCMS(ES+):m/z 517.32[M+H]+。
步骤-8：于0℃向4-[2-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯241-10(0.700g，1.35mmol)在1,4-二噁烷(2ml)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/1,4-二噁烷(3mL)并于室温搅拌，同时通过TLC和LCMS监测。2小时后将反应混合物浓缩至干。粗化合物加乙醚(2×20ml)研磨，得到呈灰色固体的3-[3-fluoro-4-[4-[2-(4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.HCl盐241-11(0.200g，0.393mmol，收率29.00％，纯度89％)。LCMS(ES+):m/z 417.44[M+H]+
步骤-9：于0℃向3-[3-氟4-[4-[2-(4-哌啶基)乙基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮.HCl 241-11(0.100mg，0.240mmol)在干燥的DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.109g，0.840mmol)并将反应混合物搅拌5分钟。向反应混合物中加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酸(0.083g，0.240mmol)并将反应混合物再搅拌5分钟。加入PyBOP(0.125g，0.240mmol)并将反应混合物于50℃搅拌3小时，同时通过LCMS监测反应。3小时后，使用genvac蒸发大多数DMF，粗化合物通过制备-HPLC纯化，得到呈浅粉色固体的3-[4-[4-[2-[1-[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲酰基]-4-哌啶基]乙基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮TFA盐化合物241(0.0658g，0.082mol，纯度92.9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.45(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.56(d,J＝5.4Hz,1H),7.18(t,J＝9.6Hz,2H),6.82(t,J＝9.3Hz,1H),6.48(d,J＝14.9Hz,1H),6.40(d,J＝8.6Hz,1H),5.76(d,J＝7.4Hz,1H),4.53(t,J＝10.5Hz,1H),4.20(s,1H),3.85(d,J＝6.0Hz,3H),3.60(s,3H),3.10-2.98(m,3H),2.75-2.67(m,2H),2.55-2.54(m,3H),2.10-2.04(m,1H),1.80-1.64(m,5H),1.49-0.90(m,11H)。LCMS(ES+):m/z 743.48[M+H]+
按化合物241的合成制备化合物242。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.45(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.56(d,J＝5.6Hz,1H),7.27(d,J＝8.7Hz,1H),7.18-7.14(m,1H),6.91-6.86(m,2H),6.15(d,J＝7.9Hz,1H),4.53(t,J＝11.5Hz,1H),4.37-4.35(m,1H),3.85(d,J＝5.4Hz,3H),3.60(s,3H),3.02-2.56(m,7H),2.08-2.05(m,1H),1.91-1.50(m,6H),1.27(bs,1H),1.24-1.06(m,10H).LCMS(ES+):m/z 793.39[M+H]+
按化合物234的合成制备化合物243。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),7.59(s,1H),7.02-6.96(m,3H),6.55-6.49(m,2H),4.51(t,J＝11.5Hz,1H),4.31(bs,1H),3.81(d,J＝5.6Hz,3H),3.45(s,8H),2.98-2.67(m,4H),2.06(d,J＝4.2Hz,7H),1.90-1.01(m,15H).LCMS(ES+):m/z720.50[M+H]+
化合物244的合成：
步骤1：初始将1,2-二氟-4-硝基-苯(2.24g，14.07mmol，1.55mL)溶解在DMF(68.77mL)中，然后于室温加入碳酸铯(4.58g，14.07mmol)，接着加入4-羟基-4-(4-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，14.07mmol)，并将混合物搅拌3小时。反应完成后，向混合物中加入H2O(100mL)，形成黄色沉淀。烧瓶用冰水冷却20分钟，然后滤出沉淀物并用大量水、然后己烷洗涤。干燥黄色粉末并在不进一步纯化的情况下进行下一步。产量-5.03g，84％；LCMS(ES+):m/z 424.3[M+H]+
步骤2：初始将4-[1-(2-氟-4-硝基-苯)-4-哌啶基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(684mg，1.62mmol)溶解在DCM(7.82mL)中并冷却至0℃，然后逐滴加入DAST(312.42mg，1.94mmol，256.09μL)并继续搅拌15分钟，然后将混合物温热至室温。搅拌1小时后，用碳酸氢钠饱和溶液淬灭混合物，然后用EA(20mL×2)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，然后过滤并浓缩至残余物，该残余物经由快速柱色谱法纯化(己烷/EA直至80％)，得到呈固体的产物。产量-221mg，32％；LCMS(ES+):m/z 426.4[M+H]+。
步骤3：初始将4-氟-4-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(204mg，479.47μmol)溶解在EA(1.82mL)和甲醇(1.82mL)中，然后加入干的10％钯碳(487型)(51.03mg，479.47μmol)。用H2气球吹扫气氛并让混合物于室温搅拌16小时。反应完成后，通过硅藻土垫过滤混合物并用EA/MeOH洗涤。浓缩滤液，得到呈灰白色固体的产物，其不经进一步纯化即用于下一步中。产量-154mg，81％；LCMS(ES+):m/z396.4。[M+H]+
步骤4：初始将3-溴哌啶-2,6-二酮(100.01mg，520.88μmol)和4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-4-氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(103mg，260.44μmol)溶解在MeCN(5.18mL)中，然后一次性加入碳酸氢钠(65.64mg，781.32μmol，30.39μL)并将混合物加热至85℃，搅拌16小时。反应完成后，浓缩混合物至残余物并经由快速柱色谱法纯化(DCM/MeOH直至15％)，得到呈灰白色固体的产物。产量-104mg，78％；LCMS(ES+):m/z 507.4[M+H]+。
步骤5：最开始于室温将4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]-4-氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(104mg，205.30μmol)悬浮在HCl(4M，1.03mL)中并搅拌2小时，经由LCMS监测。反应完成后，浓缩混合物至粗固体，将该粗固体重悬于甲苯中，浓缩至干，然后重悬于己烷中，并最后浓缩成HCl盐，该HCl盐不经进一步纯化即用于后续步骤。产量-90mg，100％；LCMS(ES+):m/z 407.3[M+H]+。
步骤6：于室温向溶解在1,2-DCE(0.1M)中的2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛(31.58mg，97.08μmol)和244-6(43mg，97.08μmol)的混合物中加入三乙胺(19.65mg，194.16μmol，27.06μL)，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(30.86mg，145.62μmol)，然后于室温或85℃搅拌2-16小时。反应完成后，浓缩混合物至残余物，经由反相快速柱色谱法纯化(水/MeCN 1:0至1:1，0.1％ TFA)并冻干，得到为TFA盐的化合物244(27mg，收率31.8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.94(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.58(s,1H),7.48(dd,J＝7.9,1.7Hz,1H),7.42(q,J＝1.8Hz,1H),6.98(d,J＝10.8Hz,1H),6.55(dd,J＝14.8,2.5Hz,1H),6.47(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),4.51(s,2H),4.30(dd,J＝11.6,4.8Hz,1H),3.47(s,3H),3.40(d,J＝11.2Hz,2H),3.28(d,J＝13.9Hz,6H),2.97–2.52(m,4H),2.05(d,J＝6.3Hz,10H),2.00–1.41(m,5H)。LCMS(ES+):m/z 716.6[M+H]+。
按化合物244的合成制备化合物245。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.38(d,J＝74.0Hz,1H),7.58(s,1H),7.16(d,J＝1.5Hz,1H),7.09(d,J＝1.6Hz,1H),6.98(s,1H),6.55(d,J＝14.9Hz,1H),6.49–6.32(m,1H),4.47(s,2H),4.29(dd,J＝11.6,4.7Hz,1H),3.93(s,3H),3.47(s,5H),3.31(d,J＝17.0Hz,5H),2.95–2.52(m,3H),2.07(d,J＝5.8Hz,10H),1.92–1.19(m,7H)。LCMS(ES+):m/z 696.5[M+H]+。
按化合物151的合成制备化合物246。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.44(s,1H),8.73(d,J＝5.2Hz,1H),7.92(s,1H),7.52(d,J＝5.6Hz,1H),7.11(d,J＝24Hz,2H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(s,1H),6.58(d,J＝8.8Hz,1H),5.82(d,J＝7.6Hz,1H),4.30-4.20(m,1H),3.86(s,3H),3.61(d,J＝18.4Hz,5H),3.04(d,J＝10Hz,2H),2.69-2.58(m,4H),2.37-2.32(m,4H),2.08-2.04(m,1H),1.87-1.62(m,10H),1.42-1.26(m,4H)。LCMS(ES+):m/z763.13[M+H]+。
按化合物244的合成制备化合物247。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.70-1.90(m,3H)；2.00-2.10(m,1H)；2.24-2.34(m,1H)；2.38-2.44(m,1H)；2.55-2.60(m,1H)；2.66-3.04(m,12H)；3.59(s,3H)；3.69(s,2H)；3.87(s,3H)；4.26-4.36(m,1H)；6.25(d,J＝7.6Hz,1H)；6.32(d,J＝12Hz,1H)；7.11(s,1H)；7.17(s,1H)；7.54(d,J＝5.6Hz,1H)；7.94(s,1H)；8.74(d,J＝5.6Hz,1H)；9.45(s,1H)；10.80(s,1H).LCMS(ES+):m/z 756.12[M+H]+。
按化合物244的合成制备化合物248。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),7.57(s,1H),7.03-6.90(m,3H),6.70(d,J＝15.6Hz,1H),6.55(d,J＝8.8Hz,1H),4.83-4.78(m,1H),3.86(s,5H),3.45(s,3H),3.27-3.05(m,11H),2.86-2.77(m,1H),2.69(s,3H),2.56(s,3H),2.32-2.28(m,1H),2.08-2.05(m,7H),1.86-1.83(m,2H).LCMS(ES+):m/z 729.38[M+H]+。
按化合物105的合成、然后进行SFC分离来制备化合物249和化合物250。
制备SFC条件柱子/尺寸：
柱子/尺寸：Chiralpak-ASH(30*250)mm
5u％CO2:60％％共溶剂:40％(0.2％7M的甲醇氨/ACN:MeOH)
总流量：100.0g/min
背压：100巴温度：30℃UV：220nm溶解度：甲醇
化合物249异构体1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.78(s,1H),9.71(s,1H),7.57(s,1H),7.26-7.20(m,1H),7.18-7.12(m,2H),7.08-6.95(m,2H),6.82(bs,1H),6.53(d,J＝14.4Hz,1H),6.41(d,J＝8Hz,1H),4.53-4.47(m,4H),4.26(m,1H),3.91(s,3H),3.72(s,2H),3.47(s,3H),3.16-3.08(m,6H),2.71-2.58(m,4H),2.08(s,3H),2.06(s,3H),1.86–1.60(m,4H),1.50-1.41(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 740.05[M+H]+。
化合物250异构体2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.78(s,1H),9.85(s,1H),7.57(s,1H),7.25-7.22(m,1H),7.18-7.12(m,2H),7.10-7.08(m,2H),6.96(bs,1H),6.52(d,J＝14.4Hz,1H),6.43(d,J＝8Hz,1H),4.53-4.51(m,4H),4.27(m,1H),3.91(s,3H),3.60(s,2H),3.47(s,3H),3.29-3.06(m,6H),2.76-2.58(m,4H),2.08(s,3H),2.06(s,3H),1.90–1.81(m,4H),1.70-1.67(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 740.35[M+H]+。
化合物251的合成：
步骤-1：于室温向化合物4-溴-3-氟苯酚(10g，52.36mmol)在DMF(80mL)中的搅拌溶液中加入粒状碳酸钾(14.47g，104.71mmol，6.32mL)和苄基溴(9.85g，57.59mmol)，并将所得反应混合物于室温搅拌20分钟，然后于70℃搅拌40分钟。将反应混合物冷却至室温，然后向反应混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取所得溶液。用水、然后用饱和盐水洗涤有机层。用无水硫酸钠干燥有机层并真空浓缩，得到棕色液体产物4-苄氧基-1-溴-2-氟-苯(14.5g，收率88％)。
步骤-2：在微波小瓶中，用氩气对叔丁醇钠(0.855g，8.89mmol)在溶剂THF(10mL)和甲苯(10mL)的混合物中的搅拌溶液吹扫5分钟。向该溶液中加入化合物4-(苄氧基)-1-溴-2-氟苯(1g，3.56mmol)和化合物3(0.861g，4.62mmol)并用氩气吹扫10分钟。向该反应混合物中加入XPhos Pd G2(0.280g，0.355mmol)并于100℃用微波辐照30分钟。通过LCMS和TLC监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物并通过柱色谱法(Davisil二氧化硅，0至8％的乙酸乙酯和石油醚作为洗脱剂)纯化粗化合物，得到黄色纯净的固体产物4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.18mmol，收率33％)。在微波中以1g规模的4-苄氧基-1-溴-2-氟-苯将相同的反应再重复五次，得到2.5g纯净产物。
步骤-3：于0℃向化合物4-苄氧基-1-溴-2-氟-苯(2.8g，7.25mmol)在DCM(30mL)中的搅拌溶液中加入TFA(9.91g，86.94mmol，6.70mL)并将反应混合物于室温搅拌2小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物并与乙腈(5mL×2)、甲苯(5mL×2)共蒸馏，得到棕色固体产物1-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪(2.4g，5.65mmol，收率78％)
步骤-4：在连接了Dean Stark装置的两颈100mL圆底烧瓶中，向化合物1-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪(2.5g，6.24mmol)在溶剂甲苯(25mL)和乙腈(13mL)的混合物中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(2.05g，24.98mmol，1.34mL)并于室温搅拌10分钟。向该溶液中加入化合物3,3-二氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.76g，7.49mmol)、乙酸(1.87g，31.22mmol，1.8mL)和分子筛(500mg)，然后于120℃加热8小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应，用乙酸乙酯(25mL×2)和乙腈(25mL×2)洗涤。然后真空浓缩有机层，粗物质通过柱色谱法纯化(Davisil二氧化硅，0至30％的乙酸乙酯和石油醚作为洗脱剂)，得到黄色固体产物4-[4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，收率59％)。
步骤-5：将4-[4-(4-苄氧基-2-氟-苯基)哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，4.96mmol)在乙醇(8mL)和THF(4mL)中的搅拌溶液用氮气吹扫10分钟。向该溶液中加入载量为10重量％的钯碳(3g，4.96mmol)并将反应混合物在氢气氛(充满氢气的橡胶气囊)下于室温搅拌6小时。通过TLC和LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物，用THF(25mL×2)、乙酸乙酯(25mL×2)洗涤，并浓缩有机层，得到棕色粗产物3,3-二氟-4-[4-(2-氟-4-羟基-苯基)哌嗪-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.77g，收率71％)。
步骤-6：向化合物3,3-二氟-4-[4-(2-氟-4-羟基-苯基)哌嗪-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯在THF(80mL)中的搅拌溶液中加入氢化钠(在油分散体中)在矿物油中的60％分散体(0.098g，4.26mmol)并于70℃搅拌30分钟。于70℃向该溶液中逐滴加入溶解在THF(5mL)中的化合物3-溴哌啶-2,6-二酮(0.818g，4.26mmol)并于70℃继续搅拌3小时。通过LCMS和TLC监测反应的进度。反应完成后，用冰水(100mL)淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(3×70mL)萃取，合并有机层并用硫酸钠干燥。真空浓缩有机层，粗物质通过柱色谱法纯化(Davisili二氧化硅，0至60％的EtOAc:石油醚)，得到灰白色固体产物4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氧基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.890g，收率39％)。
步骤-7：于0℃向化合物4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氧基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.890g，1.69mmol)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中加入4M的二噁烷HCl(1.23g，33.81mmol，1.54mL)并将反应混合物于室温搅拌2.5小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，真空浓缩反应混合物并加乙醚研磨，得到棕色固体产物3-(4-(4-(3,3-二氟哌啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)哌啶-2,6-二酮(0.860g，收率95％)。
步骤-8：向化合物3-(4-(4-(3,3-二氟哌啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)哌啶-2,6-二酮(0.430g，0.929mmol)和化合物A(307.92mg，1.02mmol)在溶剂甲醇(15mL)和二氯乙烷(15mL)的混合物中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(152.41mg，1.86mmol)并于室温搅拌10分钟。向该溶液中加入乙酸(55.78mg，0.929mmol，53.13uL)和分子筛(0.430g)并于70℃搅拌5小时。此外，于室温向反应混合物中加入Si-CBN(0.430g)并将反应混合物于室温搅拌16小时。通过LCMS监测反应的进度。反应完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物并用二氯乙烷和甲醇的混合物(25mL×2)洗涤硅藻土床。真空浓缩滤液，粗化合物通过制备HPLC纯化，得到灰白色固体化合物251 3-[4-[4-[1-[[2,6-二甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯氧基]哌啶-2,6-二酮(331.87mg，收率43％)。
制备性HPLC方法：
柱子/尺寸：SUNFIRE C18(19*250mm)，
流动相A：0.1％ TFA/水，流动相B：MeCN(100％)
梯度(时间/％B)：0/10,3/10,10/30,14/30,15/95,20/95,20.10/10,22/10，
流速：18ml/min。
溶解度：水+THF+CAN
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.92(s,1H),7.52(s,1H),6.99-6.89(m,2H),6.79-6.76(m,1H),6.76(s,2H),5.15-5.11(m,1H),4.69(bs,2H),3.86(s,7H),3.47(s,6H),2.95-2.57(m,11H),2.19-2.09(m,10H)。LCMS(ES+):m/z 712.49[M+H]+
化合物252的合成
初始将3-[3-氟-4-[4-(4-哌啶基)-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮盐酸盐(96.77mg，227.73μmol)、4-[1-氧代-2-(三氘代甲基)-2,7-萘啶-4-基]-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(80mg，227.73μmol)和TEA(46.09mg，455.46μmol，63.48μL)装入到反应小瓶中并溶解在1,2-DCE(2.99mL)中，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠95％(72.40mg，341.59μmol)并让混合物搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至干，然后经由Isco RP FCC纯化(0.1％TFA/水/MeCN)，得到产物化合物252 3-[3-氟-4-[4-[1-[[4-[1-氧代-2-(三氘代甲基)-2,7-萘啶-4-基]-2-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-4-哌啶基]-1-哌啶基]苯胺基]哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐(32.3mg，36.63μmol，收率16％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),10.04(s,1H),9.49(s,1H),8.76(d,J＝5.8Hz,1H),7.99(s,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.65(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),7.60(q,J＝1.8Hz,1H),7.51(d,J＝5.8Hz,1H),7.23(s,1H),6.63(dd,J＝15.0,2.4Hz,1H),6.54(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),4.46(s,2H),4.36(dd,J＝11.8,4.8Hz,1H),3.57–3.36(m,4H),3.10(s,4H),2.73(ddd,J＝17.5,12.3,5.4Hz,1H),2.64–2.54(m,1H),2.19–2.00(m,1H),2.00–1.74(m,6H),1.52(d,J＝40.0Hz,5H)。LCMS(ES+):m/z 724.5[M+H]+。
化合物253的合成
初始将3-[[5-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-2-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐(130mg，248.82μmol)、4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醛(86.66mg，248.82μmol)和TEA(50.36mg，497.64μmol，69.36μL)装入到反应小瓶中并溶解在1,2-DCE(2.99mL)中，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠95％(79.10mg，373.23μmol)并让混合物搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至干并经由Isco RP FCC纯化(0.1％ TFA/水/MeCN)，得到产物化合物253 3-[[5-[4-[3,3-二氟-1-[[4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)-2-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-2-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐(39mg，43.35μmol，收率18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),9.50(s,1H),8.75(d,J＝5.9Hz,1H),8.46(s,1H),7.98(d,J＝16.3Hz,2H),7.73(d,J＝7.9Hz,1H),7.56(dd,J＝7.9,1.7Hz,1H),7.53–7.44(m,2H),7.38(d,J＝2.7Hz,1H),7.12(d,J＝9.7Hz,1H),4.69(dd,J＝11.9,5.8Hz,1H),3.82(s,2H),3.61(s,3H),3.38(d,J＝36.2Hz,2H),3.14(d,J＝20.7Hz,7H),3.02(d,J＝11.2Hz,1H),2.81–2.52(m,3H),2.37(t,J＝11.3Hz,1H),2.22–1.97(m,3H),1.90(q,J＝12.1,10.9Hz,1H)。LCMS(ES+):m/z741.5(M+H)+。
化合物254的合成
步骤-1：于室温向4-[4-(4-氨基-2-氟-苯基)哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.41mmol)在二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中加入2,6-二苄氧基-3-碘-吡啶(1.21g，2.90mmol)和叔丁醇钠(347.81mg，3.62mmol)。将反应混合物用氩气吹扫20分钟，加入t-Bu-XPhos-Pd-G3(191.57mg，241.28umol)并加热至90℃保持6小时。通过TLC监测反应。将反应混合物冷却至环境温度，用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。所得粗品通过柱色谱法在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/己烷0-15％梯度洗脱，得到呈浅棕色胶状固体的4-[4-[4-[(2,6-二苄氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，1.69mmol，收率70％)。LCMS(ES+):m/z 704.09[M+H]+
步骤-2：向4-(4-(4-((2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌嗪-1-基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，2.27mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入氢化钠(在油分散体中)在矿物油中的60％分散体(120.21mg，5.23mmol)，于室温搅拌10分钟。将反应混合物冷却至0℃，加入碘甲烷(742.17mg，5.23mmol)并于室温搅拌1小时，同时通过TLC监测。用饱和NH4Cl淬灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗品通过柱色谱法纯化(100-200目二氧化硅，0-15％的EtOAc:石油醚溶剂梯度)，得到呈浅棕色胶状固体的4-(4-(4-((2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)(甲基)氨基)-2-氟苯基)哌嗪-1-基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，2.02mmol，收率89％)。LCMS(ES+):m/z 718.41[M+H]+
步骤-3：于室温向4-(4-(4-((2,6-双(苄氧基)哌啶-3-基)(甲基)氨基)-2-氟苯基)哌嗪-1-基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，1.66mmol)在乙酸乙酯(25mL)和乙醇(25mL)中的搅拌溶液中加入湿的10％钯碳(1.23g，11.60mmol)。将反应混合物于室温在H2气球压力下搅拌12小时。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物并用乙酸乙酯(50mL)洗涤。浓缩滤液，得到粗产物。该粗产物加戊烷/乙醚研磨，得到呈浅绿色固体的4-(4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)(甲基)氨基)-2-氟苯基)哌嗪-1-基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.58g，999.65μmol，收率60％)。LCMS(ES+):m/z 540.75[M+H]+
步骤-4：于0℃向4-[4-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)-甲基-氨基]-2-氟-苯基]哌嗪-1-基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.58g，1.07mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中加入4M HCl/二噁烷(1.96g，53.74mmol)。将反应混合物于0℃搅拌30分钟，缓慢温热至室温并于室温搅拌3小时。反应完成后，浓缩反应混合物，粗品加乙醚(3×30mL)研磨，得到固体沉淀。过滤固体沉淀并真空干燥，得到呈白色固体的3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-N-甲基-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.50g，966.52μmol，收率90％，纯度92％)。LCMS(ES+):m/z 440.35[M+H]+
步骤-5：于室温在N2气氛下向3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-N-甲基-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(250.45mg，526.24μmol)在甲醇(20mL)和1,2-二氯乙烷(20mL)中的搅拌溶液中加入分子筛(250mg，2.63mmol)、乙酸钠(86.34mg，1.05mmol，56.43μL)，然后加入乙酸(158.01mg，2.63mmol，150.48μL)。将反应混合物于室温搅拌10分钟并向其中加入2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯甲醛(110.34mg，335.65umol)。将反应混合物于90℃搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温并向其中加入Si-CBH(184.97mg，4.21mmol)。反应混合物于室温搅拌12小时。反应完成后，通过硅藻土过滤反应混合物，用DCM(50mL)洗涤。减压浓缩滤液，得到粗产物。该粗产物通过制备HPLC纯化，得到呈灰白色固体的化合物254 3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(2-甲基-1-氧代-2,7-萘啶-4-基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-N-甲基-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(76.6mg，96.27μmol，收率29％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),9.44(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),7.94(s,1H),7.54(d,J＝5.6Hz,1H),7.14(d,J＝23.3Hz,2H),6.88-6.85(t,J＝9.2Hz,1H),6.68-6.51(m,2H),4.81-4.62(m,1H),3.87(s,3H),3.72(s,2H),3.59(s,3H),3.01-2.79(m,11H),2.67(s,3H),2.55-2.50(m,2H),2.49-2.42(m,1H),2.39-2.31(m,2H),1.86-1.75(m,3H)。.LCMS(ES+):m/z 752.43[M+H]+
按化合物244的合成制备化合物255。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),9.47(s,1H),8.71(d,J＝5.6Hz,1H),7.90(s,1H),7.60(s,1H),7.19(s,1H),7.10-7.07(m,1H),6.89(t,J＝9.2Hz,1H),6.53(d,J＝15.2Hz,1H),6.45(d,J＝8.8Hz,1H),4.29-4.25(m,1H),3.83(s,5H),3.60(s,3H),3.42-3.05(m,11H),2.77-2.55(m,4H),2.18-1.94(m,4H).LCMS(ES+):m/z 738.35[M+H]+。
峰-1-Int-256-7和峰-2-Int-256-7-D1-D4的合成：
化合物256和化合物267的合成
步骤-1：于0℃向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，16.17mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入TFA(20mL)，然后让反应混合物于室温搅拌2小时，同时通过TLC监测。反应完成后，将反应混合物减压蒸发至干，粗混合物与甲苯(50mL)共蒸馏，得到呈无色液体的4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(5g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.80(s,2H),6.36(t,J＝1.6Hz,1H),3.63(s,2H),3.15-3.10(m,2H),2.28-2.25(m,2H),1.21(s,12H)
步骤-2：在氮气氛下向化合物-2(2g，6.19mmol)在DMF(15mL)中的搅拌溶液中加入CsCO3(6.05g，18.57mmol)。通过注射器在反应混合物中加入化合物-3(1.18g，7.43mmol，820.61μL)。反应混合物于室温搅拌6小时。反应完成(根据TLC)后，用冰冷水淬灭反应混合物，过滤所得沉淀并完全干燥，得到呈黄色固体的1-(2-氟-4-硝基-苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(2g，5.17mmol，收率84％，纯度90％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.98-7.94(d,1H),7.91-7.87(d,1H),6.89-6.84(t,J-8.8Hz,1H),6.56(m,1H),3.92-3.90(m,2H),3.48-3.45(t,J-5.6Hz,2H),2.44-2.41(m,2H),1.28(s,12H)。
步骤-3：向化合物-5(1g，2.72mmol)和化合物-4(947.96mg，2.72mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的搅拌溶液中吹扫氩气20分钟。然后，向上述混合物中加入在水(5mL)中的碳酸钠(721.43mg，6.81mmol)并再次继续吹扫10分钟。最后，加入Pd(dppf)Cl2(0.1g，136.13μmol)并脱气。将混合物加热至55℃并保持2小时。通过TLC监测反应。完成后，将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(50mL)稀释，并用水和盐水溶液洗涤有机层。将其减压浓缩，得到粗品。该粗产物通过biotage使用0-20％纯化，得到呈黄色固体的3,3-二氟-4-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-2,6-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.74g，收率53％，纯度85％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.02-8.00(m,1H),7.99-7.91(m,1H),6.93-6.89(t,J-8.8Hz,1H),6.17(m,1H),4.13(m,2H),3.97(m,2H),3.89-3.83(t,J-11.6Hz,2H),3.60-3.57(t,J-5.6Hz,2H),2.47(m,2H),1.49(s,9H)。
步骤-4：在氮气氛下向3,3-二氟-4-[1-(2-氟-4-硝基-苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基]-2,6-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，10.24mmol)在乙酸乙酯(50mL)和甲醇(25.00mL)混合物中的搅拌溶液中加入10％钯碳(2.18g，20.48mmol)。然后，于28℃保持氢气(气球压力)16小时，同时通过TLC监测。反应完成后，将其通过硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯洗涤。减压浓缩滤液至干。粗混合物通过硅胶柱色谱法(100-200)使用0-35％的EA/PE纯化，得到呈浅棕色固体的4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.1g，6.60mmol，收率64％，纯度88％)。LCMS[M+H+]414.76。
Int-256-7的SFC分离以得到峰-1-Int-256-7和峰-2-Int-256-7：
通过SFC分离0.1g 4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯Int-256-7，得到呈浅棕色固体的(4S)-4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯峰-1-Int-256-7(0.042g，101.37μmol，收率41.92％，纯度99.8％，000)和(4R)-4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯峰-2-Int-256-7(0.043g，103.68μmol，收率42.87％，纯度99.7％)。
制备SFC条件：
柱子/尺寸：Chromega Chiral CCO(30x250)mm,5μ
％CO2：60％
％共溶剂：40％(ACN:IPA(1:1))
总流量：100.0g/min
背压：100巴
温度：300℃
UV：254nm
步骤-5：将4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯峰-1-Int-7(0.8g，1.93mmol)加在DMF(10mL)中并加入碳酸氢钠(975.22mg，11.61mmol)。反应混合物用氮气吹扫10分钟。然后，加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.11g，5.80mmol)，将混合物加热至80℃并保持16小时，同时通过TLC和LCMS分析监测。反应完成后，用冰冷水将其淬灭，通过硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯洗涤。分离有机层，用盐水溶液洗涤，用Na2SO4干燥。将其减压浓缩，得到粗产物。该粗产物通过biotage使用0-40％的EA/PE纯化，得到呈浅绿色固体的4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.65g，1.21mmol，收率62％)，LCMS(ES+):m/z 525.84[M+H]+
步骤-6：在氮气氛下于0℃将4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.65g，1.24mmol)加在1,4-二噁烷(2mL)中，加入4M的HCl/二噁烷(903.57mg，24.78mmol，1.13mL)。将反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。反应完成后，将其减压浓缩至干。用乙醚洗涤所得固体并真空干燥，得到呈浅绿色固体的3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.55g，收率72％)。LCMS(ES+):m/z 425.22[M+H]+。
步骤-7：向3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(542.69mg，1.18mmol，021)在DCE(5mL)和甲醇(5mL)中的搅拌溶液中加入无水乙酸钠(241.47mg，2.94mmol，157.82μL)。向反应混合物中加入乙酸(68.35uL，2.94mmol，1)和分子筛(0.3g，981.18μmol)并让搅拌10分钟。然后，加入2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(0.3g，981.18μmol，000)并加热混合物至75℃保持5小时。然后，将反应混合物冷却至室温并加入Si-CBH(586.35mg，9.81mmol)。将其于室温搅拌16小时。通过TLC和LCMS分析监测反应。反应完成后，将其通过硅藻土垫过滤，用甲醇洗涤，然后浓缩至干。粗混合物通过柱色谱法使用0-10％的MeOH/DCM纯化，得到呈浅绿色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮化合物256-12-非对映异构体混合物-1-游离碱(0.35g，收率33.46％，纯度67％)。
步骤-8：于0℃向3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.35g，490.05μmol，000)在DCM(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(2.79g，24.50mmol，1.89mL)。将反应混合物于室温搅拌2小时。然后，将其减压浓缩，所得残余物用乙醚洗涤(2次)，得到呈浅绿色固体的N-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯基]-N-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-2,2,2-三氟-乙酰胺化合物256-13-非对映异构体混合物-1-TFA盐(0.36g，268.76μmol，收率54.84％，纯度69％)。
化合物256-13-非对映异构体混合物-1-TFA盐的SFC分离以得到化合物256和化合物257：
程序：
通过SFC分离0.350g TFA盐(化合物256-13-非对映混合物-1)，得到单一立体异构体。
在SFC分离过程中，将级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环；因为SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用。因此，对获得的级分再次进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件：
柱子/尺寸：Chiralpak-AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：60％
％共溶剂：40％(0.2％7M的甲醇氨/ACN:MeOH(1:1))
总流量：100.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV：250nm
溶解度：MeOH+MeCN
注射次数：12
总纯化时间：2.5小时
仪器详细信息：品牌/型号：SFC-150-I
制备条件：
流动相A-0.05％的TFA/水
流动相B-乙腈
柱子-x select-C18
(注：SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物256而第二洗脱峰归属为化合物257)
化合物258和化合物259的合成
步骤-9：将4-[1-(4-氨基-2-氟-苯基)-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯峰-2-Int-256-7(780.00mg，1.89mmol)加在DMF(10mL)中并加入碳酸氢钠(950.84mg，11.32mmol)，氮气吹扫10分钟。然后，加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.09g，5.66mmol)，将混合物加热至80℃并保持16小时，同时通过TLC和LCMS分析监测。反应完成后，用冰冷水将其淬灭，通过硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯洗涤。分离有机层，用盐水溶液洗涤，用Na2SO4干燥。减压浓缩。粗产物通过biotage使用0-40％的EA/PE纯化，得到呈浅绿色固体的4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.58g，884.53μmol，收率47％)。LCMS(ES+):m/z 525.5[M+H]+。
步骤-10：在氮气氛下于0℃将4-[1-[4-[(2,6-二氧代-3-哌啶基)氨基]-2-氟-苯基]-4-哌啶基]-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.58g，1.11mmol，000)加在1,4-二噁烷(2mL)中，加入4M的HCl/二噁烷(2mL)。将反应混合物于室温搅拌3小时，同时通过TLC监测。反应完成后，将其减压浓缩至干。用乙醚洗涤所得固体并真空干燥，得到呈浅绿色固体的3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮盐酸盐(0.5g，收率79％)。LCMS(ES+):m/z 425.41[M+H]+。
步骤-11：向2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲醛(0.3g，981.18μmol，000)在DCE(5mL)和甲醇(5mL)中的搅拌混合物中加入乙酸(176.76mg，2.94mmol，168.35μL)、无水乙酸钠(241.47mg，2.94mmol，157.82uL)和分子筛(0.3g，981.18μmol)并将所得溶液于室温搅拌10分钟。其后，加入3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(542.69mg，1.18mmol，021)并将所得混合物加热以于70℃回流4小时。其后将RM冷却至室温，加入Si-CBH(568.71mg，9.81mmol)并让于室温搅拌16小时。通过TLC和LCMS分析监测反应。完成后，通过硅藻土床过滤所得物质并用甲醇(100mL)洗涤，得到粗物质，该粗物质通过柱色谱法纯化(使用2.5％的甲醇/DCM)，得到呈棕色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮化合物256-16-非对映异构体混合物-2-游离碱(0.260g，305.79μmol，收率31％)。
步骤-12：于0℃向3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(0.250g，350.03μmol，000)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸(296.00mg，2.60mmol，0.2mL)。将反应混合物于室温搅拌2小时。通过TLC监测反应。完成后，高真空浓缩所得混合物，得到粗品，该粗品加乙醚研磨，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[1-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-1-哌啶基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮非对映异构体混合物-2-TFA盐(0.290g，329.13umol，收率94％)。
化合物256-17-非对映异构体混合物-2-TFA盐的SFC分离以得到化合物258和化合物259
通过SFC分离0.290g TFA盐(化合物256-17-非对映混合物-2)，得到单一立体异构体。
在SFC分离过程中，将级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环。由于SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用，故对所得级分再次进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件
柱子/尺寸：Chiralpak-AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：60％
％共溶剂：40％(0.2％7M的甲醇氨/ACN:MEOH)
总流量：100.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV:250nm
溶解度：MEOH+CAN
注射次数：12
总纯化时间：2.5小时
仪器详细信息：品牌/型号：SFC-150-I
化合物256-17-峰-2-D3和D4的制备条件
流动相A：0.05％的TFA/水(水溶液)
流动相B：乙腈
柱子/尺寸：SUNFIRE-C18(19*150*5um)
流速：15ml/min
溶解度：MEOH+水
(注：SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物258而第二洗脱峰归属为化合物259)
化合物260的合成
初始将3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮盐酸盐(84.82mg，183.62μmol)、3-甲氧基-5-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)吡啶-2-甲醛(50mg，183.62μmol)和TEA(37.16mg，367.24μmol，51.19μL)装入到反应小瓶中并溶解在1,2-DCE(13.65mL)中，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠95％(58.38mg，275.43μmol)并让混合物搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至干并经由Isco RP FCC纯化(0.1％ TFA/水/MeCN)，得到产物化合物260 3-[4-[4-[3,3-二氟-1-[[3-甲氧基-5-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)-2-吡啶基]甲基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐(103mg，122.96μmol，收率＝66.97％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),8.18(d,J＝1.7Hz,1H),7.73–7.40(m,2H),6.92(t,J＝9.3Hz,1H),6.55(dd,J＝15.0,2.5Hz,1H),6.45(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),4.50–4.18(m,3H),3.91(s,3H),3.74(d,J＝9.4Hz,1H),3.48(s,4H),3.08–2.89(m,7H),2.81–2.66(m,1H),2.57(dt,J＝17.5,4.3Hz,1H),2.50(p,J＝1.8Hz,5H),2.07(s,9H),1.97–1.76(m,1H)。LCMS(ES+):m/z 682.5(M+H)+。
化合物261的合成
初始将3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮盐酸盐(83.18mg，180.09μmol)、3-甲氧基-5-(2-甲基-1-氧代-4-异喹啉基)吡啶-2-甲醛(53mg，180.09μmol)和TEA(36.45mg，360.17μmol，50.20μL)装入到反应小瓶中并溶解在1,2-DCE(13.65mL)中，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠95％(57.25mg，270.13μmol)并让混合物搅拌过夜。反应完成后，将混合物浓缩至干，然后经由Isco RP FCC纯化(0.1％ TFA/水/MeCN)，得到产物3-[4-[4-[3,3-二氟-1-[[3-甲氧基-5-(2-甲基-1-氧代-4-异喹啉基)-2-吡啶基]甲基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐(76mg，88.29μmol，收率49％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),8.36(dd,J＝8.3,1.4Hz,1H),8.32(d,J＝1.7Hz,1H),7.75(ddd,J＝8.5,7.1,1.5Hz,1H),7.70–7.64(m,2H),7.64–7.53(m,2H),6.89(t,J＝9.3Hz,1H),6.54(dd,J＝15.0,2.5Hz,1H),6.44(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),4.54–4.17(m,3H),3.94(s,3H),3.77(s,1H),3.60(s,3H),3.48(s,1H),3.01(s,5H),2.73(ddd,J＝17.4,12.1,5.4Hz,1H),2.57(dt,J＝17.5,4.3Hz,1H),2.50(p,J＝1.8Hz,7H),2.25–2.02(m,3H),1.87(td,J＝12.2,4.6Hz,1H)。LCMS(ES+):m/z 704.5(M+H)+。
按化合物177的合成制备化合物262。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.32-1.48(m,2H)；1.50-1.60(m,1H)；1.62-1.82(m,5H)；1.90-2.24(m,3H)；2.30-2.50(m,3H)；2.56-2.58(m,1H)；2.66-2.80(m,1H)；2.90-3.10(m,2H)；3.36-3.42(m,2H)；3.59(s,3H)；3.72(s,2H)；3.87(s,3H)；4.60-4.70(m,1H)；6.39(d,J＝7.6Hz,1H)；6.53(d,J＝9.2Hz,1H)；7.11(s,1H)；7.17(s,1H)；7.17-7.22(m,1H)；7.54(d,J＝5.6Hz,1H)；7.63(d,J＝2.4Hz,1H)；7.94(s,1H)；8.74(d,J＝5.6Hz,1H)；9.44(s,1H)；10.73(s,1H).LCMS:m/z:720.37[M+H]+
按化合物151的合成制备化合物263
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.20-1.38(m,5H)；1.50-1.78(m,8H)；1.80-1.91(m,1H)；2.05(s,6H)；2.05-2.10(m,1H)；2.30-2.40(m,2H)；2.52-2.72(m,6H)；3.00-3.10(m,2H)；3.45(s,3H)；3.59(s,2H)；3.82(s,3H)；4.25-4.32(m,1H)；5.82(d,J＝7.6Hz,1H)；6.59(dd,J1＝2.4Hz,J2＝8.8Hz,1H)；6.74(d,J＝2.8Hz,1H)；6.89-6.96(m,3H)；7.56(s,1H)；10.76(s,1H).LCMS:m/z:740.37[M+H]+
化合物264
步骤-1：在约10℃向264-1(1.5g，7.07mmol)在ACN(15mL)中的溶液中加入DIPEA(4.57g，35.36mmol)，然后加入氯甲酸苄酯(50％，在甲苯中)(2.41g，14.15mmol)。让反应混合物于室温搅拌5小时。反应完成后，减压除去挥发物并向残余物中加入水(50mL)。使用EtOAc(3×50mL)进行萃取；合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(230-400目硅胶，乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈淡黄色液体的所需化合物5-溴-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯264-2(2.0g，5.78mmol，收率82％)。LCMS(ES+):m/z 346.24[M+H]+
步骤-2：将5-溴-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯264-1(0.7g，2.02mmol)、264-3(653.53mg，2.02mmol)和磷酸钾(0.944g，4.45mmol)在THF(8mL)和水(2mL)中的溶液用氩气吹扫10分钟，然后加入XPhos-Pd-G2(0.159g，0.202mmol)。然后将反应混合物于90℃搅拌16小时。通过TLC监测反应的进度。完成后，将其冷却至环境温度并向其中加入水(20mL)。使用EtOAc(3×30mL)进行萃取；合并有机萃取物，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(使用230-400目硅胶，乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈黄色固体的化合物5-[(1-叔-丁氧基羰基-4-亚哌啶基)甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸苄酯264-4(0.650g，1.26mmol，收率63％)。LCMS(ES+):m/z363.42(脱-boc物质)[M+H]+
步骤-3：向5-[(1-叔-丁氧基羰基-4-亚哌啶基)甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸酯264-4(0.650g，1.41mmol)在EtOAc(10mL)中的搅拌溶液中加入10％ Pd/C(0.600g，5.64mmol)并将所得反应混合物在氢气氛(100psi，在钢制反应器中)于室温搅拌24小时。通过TLC监测反应的进度。反应完成后，滤出催化剂并用20％的MeOH/DCM(3×10mL)洗涤。减压蒸发滤液，得到呈棕色液体的4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯264-5(0.4g，0.883mmol，收率63％)。LCMS(ES+):m/z 331.29[M+H]+
步骤-4：向4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯264-5(0.4g，1.21mmol)和2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲醛264-6(0.370g，1.21mmol)在MeOH(3mL)和DCE(3mL)中的搅拌溶液中加入乙酸钠(0.297g，3.63mmol)、乙酸(181.72mg，3.03mmol)和MS(0.3g)。将其于75℃搅拌5小时。然后将其冷却至0℃并向其中加入SiBH3CN(0.432g，6.05mmol)。反应混合物于室温搅拌16小时。然后将其通过硅藻土垫过滤并用DCE-MeOH(1:1；3×15mL)洗涤。减压浓缩滤液。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(使用230-400目硅胶和乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到呈淡黄色固体的4-[[2-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯264-7(0.6g，0.628mmol，收率52％)。LCMS(ES+):m/z 620.95[M+H]+
步骤-5：于0℃向4-[[2-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯264-7(0.6g，967.40μmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中加入4M的HCl/二噁烷(6mL)并用时2小时让反应混合物温热至室温，同时通过TLC监测反应的进度。反应完成后，减压除去挥发物，所得固体用乙醚(5mL×2)洗涤并干燥，得到呈黄色固体的5-[3-氯-5-甲氧基-4-[[5-(4-哌啶基甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮264-8(0.6g，HCl盐，0.754mmol，收率78％)。LCMS:[M+H]+520.41
步骤-6：于室温向5-[3-氯-5-甲氧基-4-[[5-(4-哌啶基甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮264-8(0.6g，1.08mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.139g，1.08mmol)和5-氟-2-硝基-吡啶(0.168g，1.19mmol)。将反应混合物于60℃搅拌5小时。完成后，将其冷却至室温并向其中加入水(20mL)。使用EtOAc(25mL×2)进行萃取；合并有机层，用盐水溶液(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(230-400硅胶，乙酸乙酯/石油醚0-100％梯度洗脱)，得到化合物5-[3-氯-5-甲氧基-4-[[5-[[1-(6-硝基-3-吡啶基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮264-10(0.4g，0.541mmol，收率50％)。LCMS(ES+):m/z 642.92[M+H]+
步骤-7：向5-[3-氯-5-甲氧基-4-[[5-[[1-(6-硝基-3-吡啶基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮264-10(0.4g，0.622mmol)在MeOH(8mL)中的搅拌溶液中加入氯化铵(0.333g，6.23mmol，在2mL水中)的水溶液和锌粉(0.407g，6.23mmol)。将反应混合物于75℃搅拌5小时，同时通过TLC监测反应进度。完成后，将其冷却至室温，通过硅藻土床过滤并用MeOH(5mL×2)洗涤。减压浓缩滤液并向残余物中加入水(20mL)。使用EtOAc(25mL×2)进行萃取；合并有机层，用盐水溶液(25mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(在230-400二氧化硅上，使用0-10％的甲醇/DCM作为洗脱剂)，得到5-[4-[[5-[[1-(6-氨基-3-吡啶基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]-3-氯-5-甲氧基-苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮264-11(0.350g，0.491，收率79％)。LCMS(ES+):m/z 612.43[M+H]+
步骤-8：向5-[4-[[5-[[1-(6-氨基-3-吡啶基)-4-哌啶基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]-3-氯-5-甲氧基-苯基]-1,3,4-三甲基-吡啶-2-酮264-11(0.350g，0.571mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(0.480g，5.72mmol)和264-12(1.10g，5.72mmol)。将反应混合物于75℃搅拌24小时，同时通过TLC监测反应进度。反应完成后，将其冷却至室温并向其中加入饱和碳酸氢钠溶液(15mL)。使用EtOAc(3×300mL)进行萃取；合并有机层，用水(30mL×2)、盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过反相制备HPLC纯化，得到3-[[5-[4-[[2-[[2-氯-6-甲氧基-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯基]甲基]-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-基]甲基]-1-哌啶基]-2-吡啶基]氨基]哌啶-2,6-二酮化合物264(0.052g，0.061mmol，收率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.32-1.50(m,2H)；1.60-1.80(m,3H)；2.06(s,3H)；2.08(s,3H)；2.00-2.15(m,2H)；2.50-2.74(m,6H)；3.00-3.20(m,2H)；3.47(s,3H)；3.30-3.50(m,4H)；3.92(s,3H)；4.48-4.72(m,5H)；6.96-7.30(m,6H)；7.45-7.60(m,2H)；7.80-7.90(m,1H)；9.82(s,1H)；10.99(s,1H)。LCMS:m/z；723.40(M+H)+
化合物265的合成
步骤-1：用加料漏斗向5-溴-3,4-二甲基-1H-吡啶-2-酮(1g，4.95mmol)在DMF(15mL)中的搅拌溶液中逐滴加入(E)-1-溴丁-2-烯(668.17mg，4.95mmol，506.19uL)并将反应混合物于0℃搅拌。然后向反应混合物中缓慢加入氢化钠(在油分散体中)在矿物油中的60％分散体(227.57mg，9.90mmol)并于室温搅拌12小时，同时通过TLC和LCMS监测。反应完成后，用水稀释反应物质，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗化合物，该粗化合物通过硅胶柱色谱法使用60％的乙酸乙酯/石油醚纯化，得到呈棕色固体的5-溴-1-[(E)-丁-2-烯基]-3,4-二甲基-吡啶-2-酮(0.7g，2.46mmol，收率50％)。
步骤-2：在密封管中，将5-溴-1-[(E)-丁-2-烯基]-3,4-二甲基-吡啶-2-酮(0.5g，1.95mmol)加在干燥的THF(25mL)中。于室温向反应混合物中加入2,6-二甲氧基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯甲醛(570.27mg，1.95mmol)和在水(5mL)中的磷酸三钾(621.54mg，2.93mmol)。将反应混合物用氩气吹扫10分钟，然后向其中加入XPhos-Pd-G2(76.79mg，97.60umol)。反应混合物再次用氩气脱气并于85℃搅拌5小时，同时通过TLC和LCMS监测。完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。减压蒸馏合并的有机层。所得粗产物通过反相柱色谱法使用0.1％的FA/水和乙腈作为洗脱剂梯度纯化，得到呈棕色固体的4-[1-[(E)-丁-2-烯基]-4,5-二甲基-6-氧代-3-吡啶基]-2,6-二甲氧基-苯甲醛(0.35g，973.93μmol，收率50％)。LCMS(ES+):m/z 342.34[M+H]+
步骤-3：向3-[4-[4-(3,3-二氟-4-哌啶基)哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(124.62mg，269.79μmol，021)在DCE(10mL)和甲醇(10mL)中的搅拌溶液中加入分子筛(100mg)、无水乙酸钠(48.06mg，585.82μmol，31.41μL)和乙酸(52.77mg，878.73μmol，50.26μL)。将所得溶液搅拌10分钟，然后加入4-[1-[(E)-丁-2-烯基]-4,5-二甲基-6-氧代-3-吡啶基]-2,6-二甲氧基-苯甲醛(0.1g，292.91μmol，000)并将反应混合物于70℃加热5小时。随后，将反应混合物冷却至室温，加入Si-CBH(110.04mg，585.82μmol)并将反应于室温搅拌8小时。通过LCMS和TLC监测反应进度。完成后，通过硅藻土床过滤反应混合物，得到粗品。该粗品通过制备-HPLC纯化，得到呈灰色固体的3-[4-[4-[1-[[4-[1-[(E)-丁-2-烯基]-4,5-二甲基-6-氧代-3-吡啶基]-2,6-二甲氧基-苯基]甲基]-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮(23mg，25.74μmol，收率9％)。LCMS(ES+):m/z 751.46[M+H]+1HNMR(401MHz,DMSO)δ10.77(s,1H),7.42(s,1H),6.84-6.80(t,J＝9.2Hz,1H),6.61-6.40(m,4H),5.83-5.50(m,3H),4.59-4.46(m,2H),4.25(d,J＝7.2Hz,1H),3.82(s,8H),2.85-2.57(m,14H),2.54-2.50(m,1H),2.07-1.80(m,10H),1.79-1.64(m,3H)。
按化合物265的合成制备化合物266
1H NMR(401MHz,DMSO):δ1H NMR(401MHz,DMSO)δ10.78(s,1H),9.46(s,1H),8.75(d,J＝5.6Hz,1H),7.91-7.88(m,1H),7.57(d,J＝5.6Hz,1H),7.21-6.96(m,3H),6.90-6.858(t,J＝9.2Hz,1H),6.55-6.43(m,2H),5.81-5.65(m,3H),4.71-4.59(m,2H),4.29-4.25(m,1H),3.89(s,3H),3.27-2.88(m,15H),2.77-2.59(m,2H),2.09-2.05(m,2H),1.90-1.80(m,2H),1.78-1.65(m,3H)。LCMS(ES+):m/z 778.35[M+H]+
化合物267和化合物268的合成方案
步骤-1：于0℃在N2下向3-[4-[4-[(4S)-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.HCl 267-2(0.676g，1.47mmol)在干燥的DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(1.14g，8.79mmol)和2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸267-1(0.5g，1.47mmol)。让反应混合物于室温温热并加入PyBOP(1.14g，2.20mmol)，在加入PyBOP后，将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。用冰片淬灭反应混合物，得到固体。过滤固体，得到粗产物。该粗品通过(Devisil硅胶，用3％至5％的MeOH/CH2Cl2洗脱产物)柱快速色谱法纯化，得到呈棕色固体的3-[4-[4-[(4S)-3,3-二氟-1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮267-3-非对映异构体混合物-1-游离碱(0.450g，0.437mmol，收率35％，纯度84.92％)。LCMS(ES+):m/z 749.74[M+H]+
步骤-2：于0℃向3-[4-[4-[(4R)-3,3-二氟-1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮267-3-非对映异构体混合物-1-游离碱(0.45g，0.601mmol)在干燥的CH2Cl2(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.5mL)并让于室温搅拌1小时。1小时后，将反应物质浓缩至干并加乙醚(2×100ml)研磨，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[(4R)-3,3-二氟-1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.267-4-非对映异构体混合物-1-TFA盐(0.5g，收率84％，纯度87.14％)。
267-4-非对映异构体混合物-1-TFA盐的SFC分离以得到化合物267和化合物268
通过SFC分离0.5g 267-4-非对映混合物-1，得到单一立体异构体。
在SFC分离过程中，将级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环。由于SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用，故对所得级分再次进行制备HPLC纯化以除去盐。
制备SFC条件：
柱子/尺寸：Chiralpak AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：50％
％共溶剂：50％(0.2％7MM的甲醇氨/甲醇)
总流量：120.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV：220nm
溶解度：MeOH
制备HPLC条件：
柱子/尺寸：SUNFIRE C18(19*150mm)
流动相A：0.05％的TFA/水
流动相B：乙腈
梯度(时间/％B)：0/10,3/10,10/35,15/35
流速：17ml/min
溶解度：THF+CAN
(注：SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物267而第二洗脱峰归属为化合物268)
267-4-峰-1-D1-手性HPLC RT：17.457min
267-4-峰-1-D2-手性HPLC RT：14.018min
化合物269和化合物270的合成方案
步骤-1：于0℃在N2下向3-[4-[4-[(4S)-3,3-二氟-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.HCl盐(0.6g，1.30mmol)在干燥的DMF(3mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(0.504g，3.90mmol)和2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)苯甲酸(0.443g，1.30mmol)。让反应混合物于室温温热并加入PyBOP(0.811g，1.56mmol)，在加入PyBOP后，将反应混合物于室温搅拌16小时，同时通过TLC和LCMS监测。减压浓缩反应混合物，得到粗产物。该粗品通过(Devisil硅胶，用1％至5％的MeOH/CH2Cl2洗脱产物)柱快速色谱法纯化，得到呈棕色固体的3-[4-[4-[(4S)-3,3-二氟-1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮269-3-非对映异构体混合物-2-游离碱(0.450g，0.437mmol，收率34％，纯度72.70％)。LCMS(ES+):m/z 749.70[M+H]+。
步骤-2：于0℃向3-[4-[4-[(4S)-3,3-二氟-1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮269-3-非对映异构体混合物-2-游离碱(0.45g，0.601mmol)在干燥的CH2Cl2(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(0.5mL)并让于室温搅拌1小时。1小时后，将反应物质浓缩至干并加乙醚(2×100ml)研磨，得到呈淡绿色固体的3-[4-[4-[(4S)-3,3-二氟-1-[2-(三氟甲氧基)-4-(1,4,5-三甲基-6-氧代-3-吡啶基)苯甲酰基]-4-哌啶基]哌嗪-1-基]-3-氟-苯胺基]哌啶-2,6-二酮.TFA盐269-4-非对映异构体混合物-2-TFA盐(0.5g，0.438mmol，收率73％，纯度75.65％)。LCMS(ES+):m/z 749.46[M+H]+
269-4-非对映异构体混合物-2-TFA盐的SFC分离以得到化合物269和化合物270
通过SFC分离269-4-非对映混合物-2-TFA盐，得到单一立体异构体。
在SFC分离过程中，将级分收集在TFA缓冲液中以避免戊二酰亚胺开环；因为SFC分离方法涉及碱性添加剂的使用，故对化合物269和化合物270的所得级分再次进行制备-HPLC纯化以除去盐。
(注：SFC分离过程中的第一洗脱峰归属为化合物269而第二洗脱峰归属为化合物270。
制备SFC条件：
柱子/尺寸：Chiralpak AS-H(30x250)mm,5μ
％CO2：50％
％共溶剂：50％(0.2％7M的甲醇氨/甲醇
总流量：120.0g/min
背压：100巴
温度：30℃
UV：220nm
溶解度：MeOH
制备HPLC条件：
柱子/尺寸：SUNFIRE C18(19*150*5μ)
流动相A：0.05％的TFA/水(PH)
流动相B：乙腈
梯度(时间/％B)：0/10,5/10,10/50,13/50,13.1/98,17/98,17.1/10,20/10流速：18ml/min
溶解度：ACN++水
按化合物49的合成制备化合物271
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):1H NMR(401MHz,DMSO)δ10.80(s,1H),9.62(s,1H),9.48(s,1H),8.78(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.53(d,J＝5.6Hz,1H),7.36(s 1H),7.29(s,1H),6.58-6.49(m,3H),4.37-3.98(m,10H),3.62(s,4H),3.40-3.15(m,5H),2.84-2.60(m,2H),2.40-2.30(m,2H),2.07-1.85(m,9H),1.78-1.47(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 770.45[M+H]+
按化合物49的合成制备化合物272
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.03(s,1H),9.41(s,1H),7.91(s,1H),7.52(m,2H),7.00(s,1H)6.70-6.69(m,2H),4.66(s,1H),4.29(s,1H),4.26-3.89(m,14H),3.6-3.47(m,6H),3.14-3.11(m,1H),2.77-2.60(m,2H),2.50-2.30(m,4H),2.26-2.07(m,7H),1.96-1.67(m,5H),1.34-1.23(m,2H)。LCMS(ES+):m/z 726.32[M+H]+
按化合物262的合成制备化合物273
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.30-1.42(m,2H)；1.50-1.80(m,6H)；1.90-2.20(m,3H)；2.05(s,6H)；2.30-2.60(m,4H)；2.64-3.05(m,3H)；3.36-3.42(m,2H)；3.45(s,3H)；3.65(s,2H)；3.84(s,3H)；4.60-4.70(m,1H)；6.39(d,J＝7.6Hz,1H)；6.53(d,J＝8.8Hz,1H)；6.92(s,1H)；6.98(s,1H)；7.20(dd,J1＝2.8Hz,J2＝8.8Hz,1H)；7.58(s,1H)；7.62(d,J＝2.4Hz,1H)；10.73(s,1H)。LCMS(ES+)m/z:697.17[M+H]+
按的合成制备化合物274
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.50-1.90(m,6H)；2.00-2.18(m,5H)；2.52-2.62(m,1H)；2.66-2.90(m,3H)；3.22-3.42(m,4H)；2.46-3.56(m,2H)；3.62(s,3H)；3.97(s,3H)；4.24-4.32(m,1H)；4.49-4.55(m,2H)；6.46(d,J＝8.8Hz,1H)；6.54(d,J＝14.8Hz,1H)；6.96(bs,1H)；7.28(s,1H)；7.35(s,1H)；7.55(d,J＝6.0Hz,1H)；7.96(s,1H)；8.77(d,J＝6.0Hz,1H)；9.23(bs,1H)；9.48(s,1H)；10.79(s,1H).LCMS(ES+):m/z 719.11[M+H]+
按化合物244的合成制备化合物275
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.45(s,1H),8.74(d,J＝6Hz,1H),7.95(s,1H),7.57(d,J＝5.6Hz,1H),7.22-7.18(m,2H),6.85-6.80(m,1H),6.52-6.40(m,2H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.51(d,J＝11.6Hz,1H),4.26-4.23(m,1H),3.86-3.85(d,J＝3.6Hz,3H),3.59(s,3H),3.19-3.00(m,5H),2.72-2.54(m,4H),2.10-2.05(m,1H),1.92-1.60(m,10H).LCMS(ES+):m/z 733.15[M+H]+XII.数据
表1.BRD9降解数据。
在表1中，<100nM＝+++，100-500nM＝++，500-800nM＝+表2
在表2中，<100nM＝+++，100-500nM＝++，500-800nM＝+
实施例1.HiBIT配体置换测定
使用HiBit方法在BRD9降解测定中测试选定的化合物。表1和2中给出了每种蛋白质的DC50值。
材料
无酚红和胎牛血清(FBS)的杜氏改良Eagle培养基(DMEM)购自Gibco(GrandIsland,NY,USA)。 HiBiT裂解测定系统购自Promega(Madison,WI,USA)。293T.166(BRD9-HiBiT)细胞系，其经由CRISPR内源表达带有HiBiT融合标签的BRD9并异位表达LgBiT标签，购自Promega(Madison,WI,USA)。293T.167(BRD7-HiBiT)细胞系，其经由CRISPR内源表达带有HiBiT融合标签的BRD7并异位表达LgBiT标签，购自Promega(Madison,WI,USA)。293T.92(BRD4-HiBiT)细胞系，其经由CRISPR内源表达带有HiBiT融合标签的BRD4并异位表达LgBiT标签，在内部生成。细胞培养烧瓶和384孔微孔板得自VWR(Radnor,PA,USA)。
BRD9降解分析
使用 HiBiT裂解测定试剂盒，基于发光信号的定量来测定BRD9降解。将测试化合物以10μΜ的最高浓度添加到384孔板中，含11个点，一式两份进行半对数滴定。将293T.166细胞以每孔10,000个细胞的细胞密度加到384孔板中。将板在37℃和5％ C02下保持2小时。分别用293T.167细胞和293T.92细胞类似地测定BRD7和BRD4降解。在不存在测试化合物的情况下处理的细胞为阴性对照，而无 HiBiT裂解试剂的细胞为阳性对照。孵育2小时后，向细胞中加入 HiBiT裂解测定试剂。在EnVisionTM多标记读取器(PerkinElmer,Santa Clara,CA,USA)上获得发光。
还使用该测定来产生图2和图11中示出的数据。
实施例2.化合物172的药理学和化学性质
生物化学和体外药理学
体外DMPK和安全药理学
体内DMPK
实施例3.化合物176的药理学和化学性质体外DMPK和安全药理学
体内DMPK
实施例4：化合物172的异种移植研究
图1为用化合物172治疗后的肿瘤体积图，证明了在滑膜肉瘤异种移植模型Yamato-SS中的强作用。Yamato-SS细胞在体外维持到指数生长期并皮下接种到BALB/c裸小鼠中右腹处以便肿瘤发展。在适宜的肿瘤体积下开始化合物172的治疗。用40mg/kg PO QD的化合物172治疗小鼠，并使用卡尺每周两次测量肿瘤体积(x-轴)。x-轴为以天为单位量度的治疗开始后时间，y-轴为以mm3为单位量度的肿瘤体积。
实施例5：显示通过化合物172的剂量反应降解的蛋白质印迹
图3为蛋白质印迹，其经由蛋白质印迹示意了在Yamato-SS细胞(一种源自滑膜肉瘤的人细胞系(Stem Cells 2010；28:1119-1131))中在化合物172作用下对BRD9而非含溴结构域的蛋白质BRD4和BRD7特异性的剂量反应降解。收集治疗后的细胞，在补充有2×蛋白酶体/蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液中裂解，并通过PierceTM BCA蛋白质测定试剂盒测定蛋白质浓度。将样品稀释至适宜的浓度并在蛋白质印迹中运行。
图12为蛋白质印迹，示出了在Yamato-SS细胞中以10mg/ml和75mg/ml使用化合物172时的剂量依赖性体内BRD9降解而非BRD7。Yamato-SS细胞在体外维持到指数生长期并皮下接种到BALB/c裸小鼠中右腹处以便肿瘤发展。以10或75mg/kg PO的单剂量化合物172治疗小鼠。在指定的时间点收集肿瘤并快速冷冻直至裂解。使用冷冻研磨仪于50Hz将肿瘤在含有2×蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液中研磨和裂解5分钟。通过PierceTM BCA蛋白质测定试剂盒确定蛋白质浓度。将样品稀释至适宜的浓度并在蛋白质印迹中运行。
图13为蛋白质印迹，示出了在ASKA-SS细胞中以10mg/ml和75mg/ml使用化合物172时的剂量依赖性体内BRD9降解。ASKA-SS细胞在体外维持到指数生长期并皮下接种到BALB/c裸小鼠中右腹处以便肿瘤发展。以10或75mg/kg PO的单剂量化合物172治疗小鼠。在指定的时间点收集肿瘤并快速冷冻直至裂解。使用冷冻研磨仪于50Hz将肿瘤在含有2×蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液中研磨和裂解5分钟。通过PierceTM BCA蛋白质测定试剂盒确定蛋白质浓度。将样品稀释至适宜的浓度并在蛋白质印迹中运行。
实施例6：汇合扰动
图4、图16和图17为示意由不同浓度的化合物172和化合物176引起的汇合的线图。x-轴为以天为单位量度的时间，y轴为以对照的百分数量度的汇合。化合物在10nM、32nM、100nM、316nM、1000nM和104nM的浓度下以单剂量孵育。将这些化合物在Yamato(SS18-SSX融合；BAF扰动)细胞和SW982(BAF野生型)细胞中进行测试。剂量反应清晰可见。
将化合物172在DMSO中连续稀释并通过Echo声学液体处理器将200nL分配到96孔经组织培养处理的板中。对Yamato细胞计数并用补充有10％热灭活FBS的DMEM培养基调节至11,000个细胞/mL。将200ul细胞悬液分配到每个孔中。用透气膜密封板并通过IncuCyteS3在温度和湿度受控的孵育箱(37℃，5％ CO2)中以6小时的间隔在20天的时间段内测量汇合。使用Incucyte软件进行分析并将数据导出到GraphPad Prism以便可视化。
将化合物176和比较物BRD9抑制剂在DMSO中连续稀释并通过Echo声学液体处理器将200nL分配到96孔经组织培养处理的板中。对Yamato细胞计数并用补充有10％热灭活FBS的DMEM培养基调节至11,000个细胞/mL。将200ul细胞悬液分配到每个孔中。用透气膜密封板并通过IncuCyte S3在温度和湿度受控的孵育箱(37℃，5％CO2)中以6小时的间隔在20天的时间段内测量汇合。使用Incucyte软件进行分析并将数据导出到GraphPad Prism以便可视化。
将化合物176和比较物BRD9抑制剂在DMSO中连续稀释并通过Echo声学液体处理器将200nL分配到96孔经组织培养处理的板中。对SW982细胞计数并用补充有10％热灭活FBS的DMEM培养基调节至700个细胞/mL。将200ul细胞悬液分配到每个孔中。用透气膜密封板并通过IncuCyte S3在温度和湿度受控的孵育箱(37℃，5％ CO2)中以6小时的间隔在20天的时间段内测量汇合。使用Incucyte软件进行分析并将数据导出到GraphPad Prism以便可视化。
实施例7：化合物172的药效学
图5和图6为示出化合物172在Yamato和Aska癌细胞中的浓度随时间的变化的浓度-时间图。x-轴为以小时为单位量度的时间，y-轴为对血浆以ng/mL和对肿瘤以ng/g为单位量度的血浆浓度。在4、24和36小时时测定肿瘤和动物异种移植宿主的化合物172浓度。图14以图形形式示出了该数据。
实施例8：Yamato-SS异种移植研究
图7为示出在用化合物172治疗后肿瘤体积的剂量依赖性反应的图，证明了其在滑膜肉瘤异种移植模型Yamato-SS中的剂量依赖性功效。Yamato-SS细胞在体外维持到指数生长期并皮下接种到BALB/c裸小鼠中右腹处。在适宜的肿瘤体积下开始化合物172的治疗。将小鼠随机分组，用6、17或50mg/kg PO QD的化合物172治疗，并使用卡尺每周两次测量肿瘤体积(x-轴)。x-轴为以天为单位量度的治疗开始后时间，y-轴为以mm3为单位量度的肿瘤体积。
图8为示出图7中的小鼠在治疗过程中的体重(BW)变化百分数的图。基于分组第一天的动物体重计算BW变化。数据点代表BW的组平均变化百分数。误差棒代表平均值的标准误差(SEM)。x-轴为以天为单位量度的时间，y-轴为以百分数量度的体重变化。
实施例9：患者来源的异种移植模型
图1为展示在滑膜肉瘤患者来源的异种移植(PDX)模型(SA13412)中化合物172的功效的图。x-轴为以天为单位量度的治疗开始后天数，y-轴为以mm3为单位量度的肿瘤体积。每天一次经口给予小鼠40mg/kg的化合物172。甚至在治疗20天后也没有明显的肿瘤生长。
图9为示出图1中的小鼠在治疗过程中的体重(BW)变化百分数的图。基于分组第一天的动物体重计算BW变化。数据点代表BW的组平均变化百分数。误差棒代表平均值的标准误差(SEM)。x-轴为以天为单位量度的时间，y-轴为以百分数量度的体重变化。
实施例10：经预测的人PK/PD
图10A和10B为展示化合物172的临床前缩放(scaling)剂量预测模型的图，用于预计人的未结合清除率、半衰期和体积减小值。每个图的x-轴为以kg为单位量度的体重。左上的y-轴为以mL/hr为单位量度的清除率；右上的y-轴为以mL/hr为单位量度的未结合清除率；左下的y-轴为以mL为单位量度的体积，右下的y-轴为以mL为单位量度的未结合体积。
实施例11：αBRD9降解
图15为蛋白质印迹，展示了不同浓度的化合物176的跨代表性细胞环境的内源性剂量降解。左上代表恶性人横纹肌样肿瘤(A204)，右上代表人滑膜肉瘤(HS-SY-II)，左下代表人软组织肉瘤(SW982，BAF野生型)，右下代表滑膜肉瘤(Yamato SS)，全部经由蛋白质印迹。这些图表明，化合物176在预测恶性横纹肌样肿瘤、滑膜肉瘤和软组织肉瘤的活性的癌症模型中具有剂量依赖性的αBRD9降解。
将细胞以500,000个细胞/孔铺板在6孔板中并让粘附16小时。用在DMSO中连续稀释的化合物176处理每个细胞系6小时。收集细胞沉淀物，在存在蛋白酶抑制剂的情况下用RIPA裂解缓冲液裂解，并在4-12％的丙烯酰胺凝胶上于150V运行45分钟。将蛋白质转移到硝酸纤维素膜并与针对BRD9的抗体(1:1000；Cell Signaling Technology，#71232)或粘着斑蛋白(1:10,000；EMD，05-386)一起在搅动下于4℃孵育过夜。印迹用tris-缓冲盐水+0.05％的吐温-20洗涤三次并与宿主导向的荧光偶联抗体一起于室温孵育1小时。将印迹洗涤三次并在LiCor Odyssey CLx上成像。
实施例12：滑膜肉瘤CDX(Yamato-SS)实验
图18为示意在滑膜肉瘤CDX(Yamato-SS)模型中不同浓度(PO QD)的化合物176的药代动力学(PK)的图。x轴为以小时为单位量度的时间，y轴为以纳克/毫升(ng/mL)为单位量度的肿瘤PK。以3mg/kg、12mg/kg或50mg/kg每天一次经口给予化合物176并在1小时、4小时、12小时和24小时时进行测量。
图21为用化合物176治疗后的肿瘤体积图，证明了在滑膜肉瘤异种移植模型Yamato-SS中的强作用。Yamato-SS细胞在体外维持到指数生长期并皮下接种到BALB/c裸小鼠中右腹处以便肿瘤发展。在适宜的肿瘤体积下开始化合物176的治疗。如所指示用化合物176治疗小鼠，并使用卡尺每周两次测量肿瘤体积(x-轴)。x-轴为以天为单位量度的治疗开始后时间，y-轴为以mm3为单位量度的肿瘤体积。
图22为展示在滑膜肉瘤CDX(Yamato-SS)模型中化合物176的耐受性的图。x轴为以天为单位量度的治疗，y轴为以百分数量度的体重变化。
实施例13：显示通过化合物172的剂量反应降解的蛋白质印迹
图19为蛋白质印迹，示出了在向Yamato-SS细胞中给予后1、4、12、24、48小时时收集的3、12或50mg/ml的化合物176的时间依赖性体内BRD9降解。Yamato-SS在体外维持到指数生长期并皮下接种到BALB/c裸小鼠中右腹处。以3、12或50mg/kg PO的单剂量化合物176治疗小鼠。在指定的时间点收集肿瘤并快速冷冻直至裂解。使用冷冻研磨仪于50Hz将肿瘤在含有2×蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液中研磨和裂解5分钟。通过PierceTM BCA蛋白质测定试剂盒确定蛋白质浓度。将样品稀释至适宜的浓度并在蛋白质印迹中运行。
图20为反映来自图19的定量条带的直方图。x轴为以小时为单位量度的时间，y轴为以百分数量度的按媒介物和粘着斑蛋白归一化的剩余BRD9。
实施例14：滑膜肉瘤PDX(SA13412)实验
图23为展示在滑膜肉瘤PDX模型(SA13412)中不同浓度的化合物176的功效的图。x轴为以天为单位量度的治疗，y轴为以立方毫米(mm3)为单位量度的肿瘤体积+SEM。以50mg/kg每天一次、25mg/kg每天两次和16.6mg/kg每天三次给予化合物176。
图24为展示在滑膜肉瘤PDX模型(SA13412)中不同浓度的化合物176的耐受性的图。x轴为以天为单位量度的治疗，y轴为以百分数量度的体重变化。平均观察到小于15％的体重减轻。
本说明书中引用的所有出版物和专利申请通过引用并入本文，犹如每个单独的出版物或专利申请被具体地和单独地指出通过引用并入。
尽管出于清楚理解的目的已通过示意和实例的方式详细地描述了前述发明，但对于本领域普通技术人员显而易见的是，根据本发明的教导，可在不脱离本发明的精神或范围的情况下对其作某些改变和修改，本发明的精神和范围如附随的权利要求所限定。另外，本领域技术人员应认识或者能够使用不超过常规的实验确定本文所述具体实施方案和方法的许多等同物。这样的等同物旨在涵盖在本申请的范围中。

Claims (182)

1.一种选自式I、式II、式III、式IV、式V和式VI的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中
每个a独立地为0、1或2；
每个y独立地为0、1或2；
X3、X4、X5和X6选自N、CH和CR3，其中X3、X4、X5和X6中不超过3个为N；
X7为N或CH；
X8和X9在每次出现时各自独立地选自N和CH；其中X8或X9中的至少一个为CH；
X12为具有1、2或3个独立地选自N、O和S的原子的5-元杂芳基基团，其中X12任选被1、2或3个独立地选自R3的基团所取代；
X17为芳基、杂芳基、双环或环烷基，其各自任选被1、2、3或4个独立地选自R3的取代基所取代；
Q1在每次出现时独立地选自NH、N(烷基)、N(卤代烷基)、CH2、O和S；其中如果X7为N，则Q1为CH2；
R在每次出现时独立地选自氢、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷基、氟、氯、溴、碘、CH2F、CHF2、CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2Br、CHBr2和CBr3；
R1为氢、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基或环烷基；
R3在每次出现时独立地选自氢、羟基、烷氧基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、环烷基、氟、氯、溴和碘；
B选自B1和B2；
B1选自：
B2选自：
X10为C(R7)2、C(O)或O；
X11为杂环、杂芳基、芳基、环烷基或双环，X11基团中的每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代；
或者X10和X11一起形成
X13、X14、X15和X16独立地选自N、CH和CR4，其中X13、X14、X15和X16中不超过3个为N；
每个R4独立地选自氢、芳基、杂芳基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷基、氟、氯、溴和碘；
其中相邻碳原子上的两个R4基团可任选地结合形成稠合环，其中所述稠合环任选被1、2或3个R取代基所取代，因此，的非限制性实例包括其中两个R4基团结合形成吡咯；
R5为氢、C1-C4烷基、烯丙基、巴豆基、烯基、炔基、卤代烷基或环烷基；
每个R6独立地选自氢、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、氟、氯、溴和碘；
每个R7独立地为氢或C1-C4烷基；
R8为氢、C1-C4烷基、烯丙基、巴豆基、烯基、炔基、卤代烷基或环烷基；且
L为二价连接基团。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中L为具有下式的接头：
其中，
X1和X2在每次出现时独立地选自键、杂环、NR2、C(R2)2、O、C(O)和S；
R2在每次出现时独立地选自氢、烷基、脂族、杂脂族、杂环、芳基、杂芳基、-C(O)H、-C(O)OH、-C(O)烷基、-C(O)O烷基、-C(O)(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、-C(O)O(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、烯烃和炔烃；
R20、R21、R22、R23和R24在每次出现时独立地选自键、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR2-、-NR2C(O)-、-O-、-S-、-NR2-、-C(R40R40)-、-P(O)(OR26)O-、-P(O)(OR26)-、双环、烯烃、炔烃、卤代烷基、烷氧基、芳基、杂环、脂族、杂脂族、杂芳基、乳酸、乙醇酸和碳环；其每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R40的取代基所取代；
R26在每次出现时独立地选自氢、烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、烯烃、炔烃、芳基、杂芳基、杂环、脂族和杂脂族；且
R40在每次出现时独立地选自氢、烷基、烯烃、炔烃、氟、溴、氯、羟基、烷氧基、叠氮化物、氨基、氰基、-NH(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)2、-NHSO2(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)SO2烷基、-NHSO2(芳基、杂芳基或杂环)、-N(烷基)SO2(芳基、杂芳基或杂环)、-NHSO2烯基、-N(烷基)SO2烯基、-NHSO2炔基、-N(烷基)SO2炔基、卤代烷基、脂族、杂脂族、芳基、杂芳基、杂环和环烷基。
3.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物具有式：
4.根据权利要求3所述的化合物，其中X8为N并且X9为CH。
5.根据权利要求3所述的化合物，其中X8为CH并且X9为N。
6.根据权利要求3所述的化合物，其中X8为CH并且X9为CH。
7.根据权利要求3-6中任一项所述的化合物，其中为
8.根据权利要求3-6中任一项所述的化合物，其中为
9.根据权利要求3-6中任一项所述的化合物，其中为
10.根据权利要求3-9中任一项所述的化合物，其中为
11.根据权利要求3-11中任一项所述的化合物，其中R为C1-C4卤代烷基、C1-C4烷基、氟、氯或溴。
12.根据权利要求3-11中任一项所述的化合物，其中R为氟。
13.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物具有式：
14.根据权利要求13所述的化合物，其中X17为任选被1、2、3或4个独立地选自R3的取代基所取代的芳基基团。
15.根据权利要求14所述的化合物，其中X17为苯基。
16.根据权利要求13所述的化合物，其中X17为杂芳基基团或环烷基基团；其每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R3的取代基所取代。
17.根据权利要求3-16中任一项所述的化合物，其中Q1为NH并且X7为CH。
18.根据权利要求3-16中任一项所述的化合物，其中Q1为O并且X7为CH。
19.根据权利要求3-16中任一项所述的化合物，其中Q1为N(CH3)并且X7为CH。
20.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物具有式：
21.根据权利要求3-20中任一项所述的化合物，其中X3为CR3。
22.根据权利要求3-20中任一项所述的化合物，其中X3为N。
23.根据权利要求3-20中任一项所述的化合物，其中X3为CH。
24.根据权利要求3-20中任一项所述的化合物，其中X3为CF。
25.根据权利要求3-20中任一项所述的化合物，其中X3为C(CF3)。
26.根据权利要求3-20中任一项所述的化合物，其中X3为C(Cl)。
27.根据权利要求3-26中任一项所述的化合物，其中X5为CR3。
28.根据权利要求3-26中任一项所述的化合物，其中X5为N。
29.根据权利要求3-26中任一项所述的化合物，其中X5为CH。
30.根据权利要求3-26中任一项所述的化合物，其中X5为CF。
31.根据权利要求3-26中任一项所述的化合物，其中X5为C(CF3)。
32.根据权利要求3-26中任一项所述的化合物，其中X5为C(Cl)。
33.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物具有式：
34.根据权利要求33所述的化合物，其中R1为氢。
35.根据权利要求33所述的化合物，其中R1为CH3。
36.根据权利要求3-35中任一项所述的化合物，其中X4为CR3。
37.根据权利要求3-35中任一项所述的化合物，其中X4为N。
38.根据权利要求3-35中任一项所述的化合物，其中X4为CH。
39.根据权利要求3-35中任一项所述的化合物，其中X4为CF。
40.根据权利要求3-35中任一项所述的化合物，其中X4为C(CF3)。
41.根据权利要求3-35中任一项所述的化合物，其中X4为C(Cl)。
42.根据权利要求3-41中任一项所述的化合物，其中X6为CR3。
43.根据权利要求3-41中任一项所述的化合物，其中X6为CH。
44.根据权利要求3-41中任一项所述的化合物，其中X6为CF。
45.根据权利要求3-41中任一项所述的化合物，其中X6为C(CF3)。
46.根据权利要求3-41中任一项所述的化合物，其中X6为C(Cl)。
47.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物具有式：
48.根据权利要求47所述的化合物，其中Q1为NH并且X7为CH。
49.根据权利要求47所述的化合物，其中Q1为O并且X7为CH。
50.根据权利要求47所述的化合物，其中Q1为N(CH3)并且X7为CH。
51.根据权利要求47-50中任一项所述的化合物，其中X12为具有1、2或3个独立地选自N的原子的5-元杂芳基基团，其中X12任选被1、2或3个独立地选自R3的基团所取代。
52.根据权利要求47-50中任一项所述的化合物，其中X12为呋喃，其中X12任选被1、2或3个独立地选自R3的基团所取代。
53.根据权利要求3-55中任一项所述的化合物，其中B为B1。
54.根据权利要求53所述的化合物，其中B1为
55.根据权利要求54所述的化合物，其中R5为氢。
56.根据权利要求54所述的化合物，其中R5为甲基。
57.根据权利要求53所述的化合物，其中B1为
58.根据权利要求53所述的化合物，其中B1为
59.根据权利要求53所述的化合物，其中B1为
60.根据权利要求3-52中任一项所述的化合物，其中B为B2。
61.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物具有式：
62.根据权利要求61所述的化合物，其中Q1为NH并且X7为CH。
63.根据权利要求61所述的化合物，其中Q1为O并且X7为CH。
64.根据权利要求61所述的化合物，其中Q1为N(CH3)并且X7为CH。
65.根据权利要求61-64中任一项所述的化合物，其中X3为CR3。
66.根据权利要求61-64中任一项所述的化合物，其中X3为N。
67.根据权利要求61-64中任一项所述的化合物，其中X3为CH。
68.根据权利要求61-64中任一项所述的化合物，其中X3为CF。
69.根据权利要求61-64中任一项所述的化合物，其中X3为C(CF3)。
70.根据权利要求61-64中任一项所述的化合物，其中X3为C(Cl)。
71.根据权利要求61-70中任一项所述的化合物，其中X5为CR3。
72.根据权利要求61-70中任一项所述的化合物，其中X5为N。
73.根据权利要求61-70中任一项所述的化合物，其中X5为CH。
74.根据权利要求61-70中任一项所述的化合物，其中X5为CF。
75.根据权利要求61-70中任一项所述的化合物，其中X5为C(CF3)。
76.根据权利要求61-70中任一项所述的化合物，其中X5为C(Cl)。
77.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X4为CR3。
78.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X4为N。
79.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X4为CH。
80.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X4为CF。
81.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X4为C(CF3)。
82.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X4为C(Cl)。
83.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X6为CR3。
84.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X6为CH。
85.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X6为CF。
86.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X6为C(CF3)。
87.根据权利要求61-76中任一项所述的化合物，其中X6为C(Cl)。
88.根据权利要求60-87中任一项所述的化合物，其中B2为
89.根据权利要求88所述的化合物，其中R5为氢。
90.根据权利要求88所述的化合物，其中R5为甲基。
91.根据权利要求60-87中任一项所述的化合物，其中B2为
92.根据权利要求60-87中任一项所述的化合物，其中B2为
93.根据权利要求60-87中任一项所述的化合物，其中B2为
94.根据权利要求60-93中任一项所述的化合物，其中X11为杂环，每一个X11基团任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代。
95.根据权利要求60-93中任一项所述的化合物，其中X11为双环，每一个X11基团任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代。
96.根据权利要求60-93中任一项所述的化合物，其中X11为杂芳基、芳基或环烷基，每一个X11基团任选被1、2、3或4个独立地选自R3的基团所取代。
97.根据权利要求60-93中任一项所述的化合物，其中X11选自：
98.根据权利要求60-93中任一项所述的化合物，其中X11选自：
99.根据权利要求60-93中任一项所述的化合物，其中X10和X11一起形成
100.根据权利要求60-93中任一项所述的化合物，其中X10和X11一起形成
101.根据权利要求3-98中任一项所述的化合物，其中X10为C(R7)2。
102.根据权利要求3-98中任一项所述的化合物，其中X10为CH2。
103.根据权利要求3-98中任一项所述的化合物，其中X10为C(O)。
104.根据权利要求3-98中任一项所述的化合物，其中X10为O。
105.根据权利要求3-104中任一项所述的化合物，其中X13为CR3。
106.根据权利要求3-104中任一项所述的化合物，其中X13为N。
107.根据权利要求3-104中任一项所述的化合物，其中X13为CH。
108.根据权利要求3-104中任一项所述的化合物，其中X13为CF。
109.根据权利要求3-104中任一项所述的化合物，其中X13为C(CF3)。
110.根据权利要求3-104中任一项所述的化合物，其中X13为C(Cl)。
111.根据权利要求3-110中任一项所述的化合物，其中X14为CR3。
112.根据权利要求3-110中任一项所述的化合物，其中X14为N。
113.根据权利要求3-110中任一项所述的化合物，其中X14为CH。
114.根据权利要求3-110中任一项所述的化合物，其中X14为CF。
115.根据权利要求3-110中任一项所述的化合物，其中X14为C(CF3)。
116.根据权利要求3-110中任一项所述的化合物，其中X14为C(Cl)。
117.根据权利要求3-116中任一项所述的化合物，其中X15为CR3。
118.根据权利要求3-116中任一项所述的化合物，其中X15为N。
119.根据权利要求3-116中任一项所述的化合物，其中X15为CH。
120.根据权利要求3-116中任一项所述的化合物，其中X15为CF。
121.根据权利要求3-116中任一项所述的化合物，其中X15为C(CF3)。
122.根据权利要求3-116中任一项所述的化合物，其中X15为C(Cl)。
123.根据权利要求3-122中任一项所述的化合物，其中X16为CR3。
124.根据权利要求3-122中任一项所述的化合物，其中X16为CH。
125.根据权利要求3-122中任一项所述的化合物，其中X16为CF。
126.根据权利要求3-122中任一项所述的化合物，其中X16为C(CF3)。
127.根据权利要求3-122中任一项所述的化合物，其中X16为C(Cl)。
128.根据权利要求3-127中任一项所述的化合物，其中R8为氢。
129.根据权利要求3-127中任一项所述的化合物，其中R8为甲基。
130.根据权利要求3-129中任一项所述的化合物，其中L为具有下式的接头：
其中，
X1和X2在每次出现时独立地选自键、杂环、NR2、C(R2)2、O、C(O)和S；
R2在每次出现时独立地选自氢、烷基、脂族、杂脂族、杂环、芳基、杂芳基、-C(O)H、-C(O)OH、-C(O)烷基、-C(O)O烷基、-C(O)(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、-C(O)O(脂族、芳基、杂脂族或杂芳基)、烯烃和炔烃；
R20、R21、R22、R23和R24在每次出现时独立地选自键、烷基、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-SO2-、-S(O)-、-C(S)-、-C(O)NR2-、-NR2C(O)-、-O-、-S-、-NR2-、-C(R40R40)-、-P(O)(OR26)O-、-P(O)(OR26)-、烯烃、炔烃、卤代烷基、烷氧基、芳基、杂环、脂族、杂脂族、杂芳基、乳酸、乙醇酸和碳环；其每一个任选被1、2、3或4个独立地选自R40的取代基所取代；
R26在每次出现时独立地选自氢、烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、烯烃、炔烃、芳基、杂芳基、杂环、脂族和杂脂族；并且
R40在每次出现时独立地选自氢、烷基、烯烃、炔烃、氟、溴、氯、羟基、烷氧基、叠氮化物、氨基、氰基、-NH(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)2、-NHSO2(脂族，包括烷基)、-N(脂族，包括烷基)SO2烷基、-NHSO2(芳基、杂芳基或杂环)、-N(烷基)SO2(芳基、杂芳基或杂环)、-NHSO2烯基、-N(烷基)SO2烯基、-NHSO2炔基、-N(烷基)SO2炔基、卤代烷基、脂族、杂脂族、芳基、杂芳基、杂环和环烷基。
131.根据权利要求130所述的化合物，其中L为具有下式的接头：
132.根据权利要求130或131所述的化合物，其中X1为键。
133.根据权利要求130或131所述的化合物，其中X1为杂环。
134.根据权利要求130或131所述的化合物，其中X1为NR2。
135.根据权利要求130或131所述的化合物，其中X1为C(O)。
136.根据权利要求130-135中任一项所述的化合物，其中X2为键。
137.根据权利要求130-135中任一项所述的化合物，其中X2为杂环。
138.根据权利要求130-135中任一项所述的化合物，其中X2为NR2。
139.根据权利要求130-135中任一项所述的化合物，其中X2为C(O)。
140.根据权利要求130-139中任一项所述的化合物，其中R20为键。
141.根据权利要求130-139中任一项所述的化合物，其中R20为CH2。
142.根据权利要求130-139中任一项所述的化合物，其中R20为杂环。
143.根据权利要求130-139中任一项所述的化合物，其中R20为芳基。
144.根据权利要求130-139中任一项所述的化合物，其中R20为苯基。
145.根据权利要求130-139中任一项所述的化合物，其中R20为双环。
146.根据权利要求130-145中任一项所述的化合物，其中R21为键。
147.根据权利要求130-145中任一项所述的化合物，其中R21为CH2。
148.根据权利要求130-145中任一项所述的化合物，其中R21为杂环。
149.根据权利要求130-145中任一项所述的化合物，其中R21为芳基。
150.根据权利要求130-145中任一项所述的化合物，其中R21为苯基。
151.根据权利要求130-145中任一项所述的化合物，其中R21为双环。
152.根据权利要求130所述的化合物，其中L为具有下式的接头：
153.根据权利要求130-152中任一项所述的化合物，其中R22为键。
154.根据权利要求130-152中任一项所述的化合物，其中R22为CH2。
155.根据权利要求130-152中任一项所述的化合物，其中R22为杂环。
156.根据权利要求130-152中任一项所述的化合物，其中R22为芳基。
157.根据权利要求130-152中任一项所述的化合物，其中R22为苯基。
158.根据权利要求130-152中任一项所述的化合物，其中R22为双环。
159.根据权利要求130所述的化合物，其中L为具有下式的接头：
160.根据权利要求130-159中任一项所述的化合物，其中R23为键。
161.根据权利要求130-159中任一项所述的化合物，其中R23为CH2。
162.根据权利要求130-159中任一项所述的化合物，其中R23为杂环。
163.根据权利要求130-159中任一项所述的化合物，其中R23为芳基。
164.根据权利要求130-159中任一项所述的化合物，其中R23为苯基。
165.根据权利要求130-159中任一项所述的化合物，其中R23为双环。
166.根据权利要求130所述的化合物，其中L为具有下式的接头：
167.根据权利要求130-166中任一项所述的化合物，其中R24为键。
168.根据权利要求130-166中任一项所述的化合物，其中R24为CH2。
169.根据权利要求130-166中任一项所述的化合物，其中R24为杂环。
170.根据权利要求130-166中任一项所述的化合物，其中R24为芳基。
171.根据权利要求130-166中任一项所述的化合物，其中R24为苯基。
172.根据权利要求130-166中任一项所述的化合物，其中R24为双环。
173.根据权利要求130-166中任一项所述的化合物，其中R24为C(O)。
174.根据权利要求3-173中任一项所述的化合物，其中L选自：
175.选自表1的化合物或其药学上可接受的盐。
176.选自表2的化合物或其药学上可接受的盐。
177.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-176中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
178.一种治疗由BRD9介导的病症的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的根据权利要求1-176中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其任选地在药物组合物中。
179.根据权利要求178所述的方法，其中所述患者为人。
180.任选地在药物组合物中的根据权利要求1-176中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用于BRD9介导的病症的治疗。
181.任选地在药物组合物中的根据权利要求1-176中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在BRD9介导的病症的治疗中的用途。
182.任选地在药物组合物中的根据权利要求1-176中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗BRD9介导的病症的药剂中的用途。
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Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109641874A (zh) 2016-05-10 2019-04-16 C4医药公司 用于靶蛋白降解的c3-碳连接的戊二酰亚胺降解决定子体
EP3641762B1 (en) 2017-06-20 2026-02-18 C4 Therapeutics, Inc. N/o-linked degrons and degronimers for protein degradation
WO2019043208A1 (en) 2017-09-04 2019-03-07 F. Hoffmann-La Roche Ag DIHYDROQUINOLINONES
EP3679026A1 (en) 2017-09-04 2020-07-15 C4 Therapeutics, Inc. Glutarimide
CN112236172A (zh) 2018-01-30 2021-01-15 福宏治疗公司 用于治疗病症的方法和化合物
US12384776B2 (en) 2019-01-29 2025-08-12 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
US20230066136A1 (en) 2019-01-29 2023-03-02 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
EP3917517A4 (en) 2019-01-29 2023-01-25 Foghorn Therapeutics Inc. CONNECTIONS AND USES THEREOF
JP2022523073A (ja) 2019-01-29 2022-04-21 フォグホーン セラピューティクス インコーポレイテッド 化合物及びその使用
US12528825B2 (en) 2020-01-29 2026-01-20 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
KR20220133259A (ko) 2020-01-29 2022-10-04 포그혼 쎄라퓨틱스 인크. 화합물 및 이의 용도
BR112022017393A2 (pt) * 2020-03-05 2022-10-18 C4 Therapeutics Inc Composto, composição farmacêutica, método para tratar um transtorno mediado por brd9, e, uso de um composto
US11787800B2 (en) 2020-07-29 2023-10-17 Foghorn Therapeutics Inc. BRD9 degraders and uses thereof
WO2023283263A1 (en) 2021-07-06 2023-01-12 Foghorn Therapeutics Inc. Citrate salt, pharmaceutical compositions, and methods of making and using the same
CN115806547A (zh) * 2021-09-09 2023-03-17 C4医药公司 选择的用于brd9的靶向降解的化合物
CN118339151A (zh) * 2021-12-15 2024-07-12 西藏海思科制药有限公司 一种抑制或降解brd9的化合物及其组合物和药学上的应用
AU2022424178A1 (en) 2021-12-30 2024-07-11 Beone Medicines I Gmbh Degradation of bruton's tyrosine kinase (btk) by conjugation of btk inhibitors with e3 ligase ligand and methods of use
TW202333695A (zh) * 2022-01-27 2023-09-01 大陸商四川海思科製藥有限公司 含氮雜芳環化合物及其組合物和藥學上的應用
WO2023143384A1 (zh) * 2022-01-27 2023-08-03 四川海思科制药有限公司 一种抑制或降解hpk1激酶的化合物及其在医药中的用途
US20250255857A1 (en) * 2022-04-11 2025-08-14 Foghorn Therapeutics Inc. Methods of treating androgen receptor-independent prostate cancer
WO2023244764A1 (en) * 2022-06-15 2023-12-21 C4 Therapeutics, Inc. Compounds for the targeted degradation of smarca2
CN119384408A (zh) 2022-06-16 2025-01-28 安菲斯塔治疗有限责任公司 用于靶向蛋白降解的双功能分子
CA3267147A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Amphista Therapeutics Limited COMPOUNDS FOR THE TARGETED DEGRADATION OF A PROTEIN
WO2024073507A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Theseus Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic compounds and uses thereof
CN117624187B (zh) * 2022-11-17 2025-11-04 杭州阿诺生物医药科技有限公司 一种高效的hpk1降解剂化合物及其制备方法和应用
WO2024163751A1 (en) * 2023-02-01 2024-08-08 Foghorn Therapeutics Inc. Formulations for treating cancer
AU2024281173A1 (en) 2023-05-31 2025-12-04 Beone Medicines I Gmbh Compounds for the degradation of egfr kinase
TW202502345A (zh) 2023-06-08 2025-01-16 美商林伯士瓦吉特公司 Wrn抑制劑
AU2024310341A1 (en) 2023-06-30 2026-02-12 Merck Patent Gmbh Heterobifunctional compounds for the degradation of kras protein
AU2024306706A1 (en) 2023-06-30 2026-02-12 Merck Patent Gmbh Heterobifunctional compounds for the degradation of kras
WO2025015152A1 (en) * 2023-07-12 2025-01-16 Foghorn Therapeutics Inc. Methods of treating hematologic cancer
WO2025024521A1 (en) 2023-07-25 2025-01-30 Monte Rosa Therapeutics, Inc. Substituted piperidinediones for targeted protein degradation
WO2025129116A1 (en) * 2023-12-14 2025-06-19 C4 Therapeutics, Inc. Compounds for the targeted degradation of smarca2
GB202319256D0 (en) 2023-12-15 2024-01-31 Amphista Therapeutics Ltd Novel compounds for targeted protein degradation

Family Cites Families (223)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4418068A (en) 1981-04-03 1983-11-29 Eli Lilly And Company Antiestrogenic and antiandrugenic benzothiophenes
TW366342B (en) 1992-07-28 1999-08-11 Lilly Co Eli The use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in inhibiting bone loss
US5565215A (en) 1993-07-23 1996-10-15 Massachusettes Institute Of Technology Biodegradable injectable particles for imaging
GB9322014D0 (en) 1993-10-26 1993-12-15 Co Ordinated Drug Dev Improvements in and relating to carrier particles for use in dry powder inhalers
US5478847A (en) 1994-03-02 1995-12-26 Eli Lilly And Company Methods of use for inhibiting bone loss and lowering serum cholesterol
SE9401109D0 (sv) 1994-03-31 1994-03-31 Leiras Oy Opthalmic composition II
SE9401108D0 (sv) 1994-03-31 1994-03-31 Leiras Oy Ophthalmic composition I
GB9412273D0 (en) 1994-06-18 1994-08-10 Univ Nottingham Administration means
US6007845A (en) 1994-07-22 1999-12-28 Massachusetts Institute Of Technology Nanoparticles and microparticles of non-linear hydrophilic-hydrophobic multiblock copolymers
GB9501841D0 (en) 1995-01-31 1995-03-22 Co Ordinated Drug Dev Improvements in and relating to carrier particles for use in dry powder inhalers
US6413539B1 (en) 1996-10-31 2002-07-02 Poly-Med, Inc. Hydrogel-forming, self-solvating absorbable polyester copolymers, and methods for use thereof
GB9515182D0 (en) 1995-07-24 1995-09-20 Co Ordinated Drug Dev Improvements in and relating to powders for use in dry powder inhalers
US5780497A (en) 1996-04-19 1998-07-14 American Home Products Corporation 2-phenyl-1- 4-(amino-1-yl-alk-1-ynyl)-benzyl!-1H-indol-5-ols as estrogenic agents
US5998402A (en) 1996-04-19 1999-12-07 American Home Products Corporation 2-phenyl-1-[4-(2-aminoethoxy)-benzyl]-indoles as estrogenic agents
TW397821B (en) 1996-04-19 2000-07-11 American Home Produits Corp 3-[4-(2-phenyl-indole-1-ylmethyl)-phenyl]-acrylamides and 2-phenyl-1-[4-(amino-1-yl-alk-1-ynyl)-benzyl]-1H-indol-5-ol as well as pharmaceutical compositions of estrogenic agents thereof
US5880137A (en) 1996-04-19 1999-03-09 American Home Products Corporation 2-phenyl-1- 4-(amino-1-yl-alk-1-ynyl)-benzyl!-1H-indol-5-ols as estrogenic agents
US5635517B1 (en) 1996-07-24 1999-06-29 Celgene Corp Method of reducing TNFalpha levels with amino substituted 2-(2,6-dioxopiperidin-3-YL)-1-oxo-and 1,3-dioxoisoindolines
US6005102A (en) 1997-10-15 1999-12-21 American Home Products Corporation Aryloxy-alkyl-dialkylamines
UA68365C2 (en) 1997-11-06 2004-08-16 Wyeth Corp Peroral contraception by combination of anti-estrogen and progestin
US6326392B1 (en) 1997-11-06 2001-12-04 American Home Products Corporation Anti-estrogen plus progestin containing oral contraceptives
US6479535B1 (en) 1998-05-15 2002-11-12 Wyeth 2-phenyl-1-[4-(2-aminoethoxy)-benzyl]-indole and estrogen formulations
US6583170B1 (en) 1998-05-15 2003-06-24 Wyeth 2-Phenyl-1-[4-(amino-1-yl-alk-1-ynyl)-benzyl]-1H-indol-5-ol and estrogen formulations
GB9827145D0 (en) 1998-12-09 1999-02-03 Co Ordinated Drug Dev Improvements in or relating to powders
US6306663B1 (en) 1999-02-12 2001-10-23 Proteinex, Inc. Controlling protein levels in eucaryotic organisms
US6287588B1 (en) 1999-04-29 2001-09-11 Macromed, Inc. Agent delivering system comprised of microparticle and biodegradable gel with an improved releasing profile and methods of use thereof
CO5271697A1 (es) 2000-01-12 2003-04-30 Pfizer Prod Inc Composiciones y procedimientos para el tratamiento de afecciones que responden a un aumento de testosterona
CO5271709A1 (es) 2000-01-12 2003-04-30 Pfizer Prod Inc Composiciones y procedimientos para el y tratamiento de afecciones que responden a estrogenos
CO5271696A1 (es) 2000-01-12 2003-04-30 Pfizer Prod Inc Procedimiento para reducir la morbilidad y el riesgo de mortalidad
CO5251465A1 (es) 2000-01-26 2003-02-28 Pfizer Prod Inc Composiciones y procedimientos para tratar la osteoporosis y reducir el colesterol
KR100777195B1 (ko) 2000-04-03 2007-11-19 산텐 세이야꾸 가부시키가이샤 송달성 물질 및 이를 이용한 약물 송달 시스템
GB0009469D0 (en) 2000-04-17 2000-06-07 Vectura Ltd Improvements in or relating to formalities for use in inhaler devices
GB0009468D0 (en) 2000-04-17 2000-06-07 Vectura Ltd Improvements in or relating to formulations for use in inhaler devices
US20020013327A1 (en) 2000-04-18 2002-01-31 Lee Andrew G. Compositions and methods for treating female sexual dysfunction
US6589549B2 (en) 2000-04-27 2003-07-08 Macromed, Incorporated Bioactive agent delivering system comprised of microparticles within a biodegradable to improve release profiles
US6495164B1 (en) 2000-05-25 2002-12-17 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. I Preparation of injectable suspensions having improved injectability
EP2266549B1 (en) 2000-06-27 2019-08-07 Vectura Limited Method of making particles for use in a pharmaceutical composition
AR030064A1 (es) 2000-07-06 2003-08-13 Wyeth Corp Metodos para inhibir los efectos uterotroficos de los agentes estrogenicos
WO2002003991A2 (en) 2000-07-06 2002-01-17 Wyeth Use of substituted indole compounds for increasing nitric oxide synthase activity
US20020016318A1 (en) 2000-07-06 2002-02-07 American Home Products Corporation Methods of treating breast disorders
WO2002003990A2 (en) 2000-07-06 2002-01-17 Wyeth Use of substituted insole compounds for treating excessive intraocular pressure
AU2001271785A1 (en) 2000-07-06 2002-01-21 American Home Products Corporation Combinations of statins, estrogenic agents and optionally estrogens
CN1452497A (zh) 2000-07-06 2003-10-29 惠氏公司 Ssri和雌激素制剂的联合药物形式
US6358991B2 (en) 2000-07-06 2002-03-19 American Home Products Corporation Methods of treating neuropeptide Y-related conditions
BR0112364A (pt) 2000-07-06 2003-07-29 Wyeth Corp Combinações de bisfosfonatos, agentes estrogênicos e opcionalmente estrogênios
WO2002003992A2 (en) 2000-07-06 2002-01-17 Wyeth Use of substituted indole compounds for treating prosthesis-related bone degeneration
AU2001271781A1 (en) 2000-07-06 2002-01-21 Wyeth Use of substituted indole compounds for treating sphincter incontinence
GB2364919A (en) 2000-07-21 2002-02-13 Cambridge Consultants Inhalers
EP1177787A3 (en) 2000-07-28 2003-09-10 Pfizer Products Inc. Use of an estrogen agonist/antagonist for treating cataracts
PT1318837E (pt) 2000-08-11 2004-12-31 Wyeth Corp Metodo de tratamenton de carcinoma positivo a receptor de estrogenio
EP1192945A3 (en) 2000-09-21 2004-03-03 Pfizer Products Inc. Use of an estrogen agonist/antagonist for treating osteoarthritis
IL145838A (en) 2000-10-16 2008-11-03 Pfizer Prod Inc Use of an estrogen agonist/antagonist for the manufacture of a medicament for treating vaginitis
AU2000202A (en) 2000-10-31 2002-05-15 Pr Pharmaceuticals Inc Methods and compositions for enhanced delivery of bioactive molecules
AU2002220857A1 (en) 2000-11-30 2002-06-11 Vectura Limited Particles for use in a pharmaceutical composition
AU781168B2 (en) 2001-01-26 2005-05-12 Pfizer Products Inc. Method of treating certain cancers using an estrogen agonist/antagonist
GB0122318D0 (en) 2001-09-14 2001-11-07 Novartis Ag Organic compounds
US20050009910A1 (en) 2003-07-10 2005-01-13 Allergan, Inc. Delivery of an active drug to the posterior part of the eye via subconjunctival or periocular delivery of a prodrug
NZ545484A (en) 2003-09-15 2009-09-25 Vectura Ltd Pharmaceutical compositions for treating premature ejaculation by pulmonary inhalation
CN1882338A (zh) 2003-09-18 2006-12-20 马库赛特公司 经巩膜递送
WO2007024323A2 (en) 2005-06-17 2007-03-01 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nanoparticle fabrication methods, systems, and materials
GB0407627D0 (en) 2004-04-02 2004-05-05 Vectura Ltd Corkscrew pump
ES2246694B1 (es) 2004-04-29 2007-05-01 Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A. Nanoparticulas pegiladas.
BRPI0510485A (pt) 2004-04-30 2007-11-13 Allergan Inc implantes inibidores de tirosina cinase intravìtreos biodegradáveis
US7771742B2 (en) 2004-04-30 2010-08-10 Allergan, Inc. Sustained release intraocular implants containing tyrosine kinase inhibitors and related methods
US20050244469A1 (en) 2004-04-30 2005-11-03 Allergan, Inc. Extended therapeutic effect ocular implant treatments
WO2006078834A1 (en) 2005-01-21 2006-07-27 Janssen Pharmaceutica N.V. Novel heterocyclic benzo[c]chromene derivatives useful as modulators of the estrogen receptors
US8663639B2 (en) 2005-02-09 2014-03-04 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Formulations for treating ocular diseases and conditions
HUE027352T2 (en) 2005-02-09 2016-09-28 Santen Pharmaceutical Co Ltd Liquid formulations for the treatment of diseases or conditions
US20070071756A1 (en) 2005-09-26 2007-03-29 Peyman Gholam A Delivery of an agent to ameliorate inflammation
WO2007056561A2 (en) 2005-11-09 2007-05-18 Liquidia Technologies, Inc. Medical device, materials, and methods
US8944804B2 (en) 2006-01-04 2015-02-03 Liquidia Technologies, Inc. Nanostructured surfaces for biomedical/biomaterial applications and processes thereof
EP1986603A2 (en) 2006-01-13 2008-11-05 SurModics, Inc. Microparticle containing matrices for drug delivery
EP1984333B1 (en) 2006-02-03 2012-04-25 Bionomics Limited Substituted benzofurans, benzothiophenes, benzoselenophenes and indoles and their use as tubulin polymerisation inhibitors
AU2007230964B2 (en) 2006-03-23 2012-07-19 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Formulations and methods for vascular permeability-related diseases or conditions
US20080166411A1 (en) 2006-04-10 2008-07-10 Pfizer Inc Injectable Depot Formulations And Methods For Providing Sustained Release Of Poorly Soluble Drugs Comprising Nanoparticles
US20100003291A1 (en) 2006-05-15 2010-01-07 Liquidia Technologies, Inc. Nano-particles for cosmetic applications
US20100216928A1 (en) 2006-11-15 2010-08-26 The University of North Carolona at Chapel Hill Polymer particle composite having high fidelity order, size, and shape particles
US20090203709A1 (en) 2008-02-07 2009-08-13 Abbott Laboratories Pharmaceutical Dosage Form For Oral Administration Of Tyrosine Kinase Inhibitor
KR101683042B1 (ko) 2008-04-04 2016-12-06 포사이트 비젼4, 인크. 통증 관리 및 시력을 위한 치료 장치
WO2009132265A2 (en) 2008-04-25 2009-10-29 The University Of North Carolina At Chapel Hill Degradable compounds and methods of use thereof, particularly with particle replication in non-wetting templates
WO2009132206A1 (en) 2008-04-25 2009-10-29 Liquidia Technologies, Inc. Compositions and methods for intracellular delivery and release of cargo
WO2010009087A1 (en) 2008-07-15 2010-01-21 Eyegate Pharmaceuticals, Inc. Iontophoretic delivery of a controlled-release formulation in the eye
EP2370998B1 (en) 2008-12-05 2019-06-05 Liquidia Technologies, Inc. Method for producing patterned materials
PL2391419T3 (pl) 2009-01-29 2019-12-31 Forsight Vision4, Inc. Dostarczanie leku do tylnego odcinka
US8623395B2 (en) 2010-01-29 2014-01-07 Forsight Vision4, Inc. Implantable therapeutic device
US20120052041A1 (en) 2009-02-04 2012-03-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Polymeric nanoparticles with enhanced drug-loading and methods of use thereof
US8192408B2 (en) 2009-02-10 2012-06-05 Psivida Us, Inc. Ocular trocar assembly
ES2655714T3 (es) 2009-02-26 2018-02-21 The University Of North Carolina At Chapel Hill Sistema intervencionista de administración de fármacos
US10952965B2 (en) 2009-05-15 2021-03-23 Baxter International Inc. Compositions and methods for drug delivery
EP4108216A1 (en) 2009-06-03 2022-12-28 Forsight Vision5, Inc. Anterior segment drug delivery
EP2454011A2 (en) 2009-07-13 2012-05-23 The University of North Carolina At Chapel Hill Engineered aerosol particles, and associated methods
NZ620174A (en) 2009-09-16 2016-08-26 Celgene Avilomics Res Inc Protein kinase conjugates and inhibitors
ES2649890T3 (es) 2009-10-23 2018-01-16 Nexisvision, Inc. Enervación corneal para el tratamiento de dolor ocular
US9498385B2 (en) 2009-10-23 2016-11-22 Nexisvision, Inc. Conformable therapeutic shield for vision and pain
US10166142B2 (en) 2010-01-29 2019-01-01 Forsight Vision4, Inc. Small molecule delivery with implantable therapeutic device
WO2011109384A2 (en) 2010-03-02 2011-09-09 Allergan, Inc. Biodegradable polymers for lowering intraocular pressure
HUE033581T2 (hu) 2010-06-10 2017-12-28 Seragon Pharmaceuticals Inc Ösztrogén receptor modulátorok és alkalmazásaik
WO2011159769A2 (en) 2010-06-17 2011-12-22 Aragon Pharmaceuticals, Inc. Indane estrogen receptor modulators and uses thereof
EP2600876B1 (en) 2010-08-05 2015-04-29 Forsight Vision4, Inc. Combined drug delivery methods and apparatus
AU2011285637B2 (en) 2010-08-05 2014-10-30 Forsight Vision4, Inc. Subconjunctival implant for posterior segment drug delivery
CA2807535C (en) 2010-08-05 2019-03-19 Forsight Vision4, Inc. Injector apparatus and method for drug delivery
CN103209664A (zh) 2010-08-05 2013-07-17 弗赛特影像4股份有限公司 可植入的治疗装置
GB2483736B (en) 2010-09-16 2012-08-29 Aragon Pharmaceuticals Inc Estrogen receptor modulators and uses thereof
WO2012048058A2 (en) 2010-10-06 2012-04-12 J-Pharma Co., Ltd. Developing potent urate transporter inhibitors: compounds designed for their uricosuric action
US20140033800A1 (en) 2010-11-11 2014-02-06 Forsight Vision4, Inc. Methods and apparatus to determine diffusion properties of porous structures for drug delivery
TW201304822A (zh) 2010-11-15 2013-02-01 Vectura Ltd 組成物及用途
US20140031769A1 (en) 2010-11-19 2014-01-30 Forsight Vision4, Inc. Therapeutic agent formulations for implanted devices
CA2823837A1 (en) 2010-12-07 2012-06-14 Yale University Small-molecule hydrophobic tagging of fusion proteins and induced degradation of same
JP5886873B2 (ja) 2010-12-24 2016-03-16 メルク・シャープ・エンド・ドーム・ベー・フェー Ｎ置換アゼチジン誘導体
KR102071083B1 (ko) 2011-09-14 2020-01-29 포사이트 비젼5, 인크. 안내 삽입물 장치 및 방법
LT2755600T (lt) 2011-09-16 2021-04-26 Forsight Vision4, Inc. Skysčio pakeitimo aparatas
WO2013082111A2 (en) 2011-11-29 2013-06-06 The University Of North Carolina At Chapel Hill Geometrically engineered particles and methods for modulating macrophage or immune responses
CA2857057A1 (en) 2011-12-14 2013-06-20 Seragon Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated estrogen receptor modulators and uses thereof
SG11201402564QA (en) 2011-12-16 2014-09-26 Olema Pharmaceuticals Inc Novel benzopyran compounds, compositions and uses thereof
ES2711330T3 (es) 2011-12-27 2019-05-03 Vectura Gmbh Dispositivo de inhalación con sistema de retroalimentación
WO2013097052A1 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Abbott Laboratories Bromodomain inhibitors
WO2013106643A2 (en) 2012-01-12 2013-07-18 Yale University Compounds & methods for the enhanced degradation of targeted proteins & other polypeptides by an e3 ubiquitin ligase
US10010448B2 (en) 2012-02-03 2018-07-03 Forsight Vision4, Inc. Insertion and removal methods and apparatus for therapeutic devices
EP3146990B1 (en) 2012-03-09 2019-01-30 Vectura GmbH Mixing channel for an inhalation device and inhalation device
US20140107025A1 (en) 2012-04-16 2014-04-17 Jade Therapeutics, Llc Ocular drug delivery system
WO2014019176A1 (zh) 2012-08-01 2014-02-06 华为技术有限公司 用于同步的方法、装置及系统
MX363147B (es) 2012-09-17 2019-03-11 Pfizer Inc Star Nanoparticulas terapeuticas que comprenden un agente terapeutico y metodos para realizarlas y usarlas.
WO2014047439A1 (en) 2012-09-20 2014-03-27 Akina, Inc. Biodegradable microcapsules containing filling material
PL2724741T3 (pl) 2012-10-26 2017-11-30 Vectura Gmbh Urządzenie inhalacyjne do stosowania w terapii aerozolowej
PT2911623T (pt) 2012-10-26 2019-11-21 Forsight Vision5 Inc Sistema oftálmico para libertação prolongada de fármaco no olho
PL2759534T3 (pl) 2013-01-25 2015-08-31 Uhde Inventa Fischer Gmbh Dodatki będące 4-N-(di-podstawionymi) pochodnymi aminopiperydyny do mas do formowania z poliamidów i ich zastosowanie
US10723753B2 (en) 2013-03-13 2020-07-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Ras inhibitors and uses thereof
WO2014152959A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Forsight Vision4, Inc. Systems for sustained intraocular delivery of low solubility compounds from a port delivery system implant
WO2014160884A1 (en) 2013-03-28 2014-10-02 Forsight Vision4, Inc. Ophthalmic implant for delivering therapeutic substances
WO2014165308A2 (en) 2013-04-01 2014-10-09 Allergan, Inc. Microsphere drug delivery system for sustained intraocular release
PE20160874A1 (es) 2013-05-28 2016-09-04 Astrazeneca Ab Compuestos quimicos
WO2014205138A1 (en) 2013-06-19 2014-12-24 Seragon Pharmaceuticals, Inc. Estrogen receptor modulator and uses thereof
WO2014203129A1 (en) 2013-06-19 2014-12-24 Olema Pharmaceuticals, Inc. Combinations of benzopyran compounds, compositions and uses thereof
MX2015016171A (es) 2013-06-19 2016-08-08 Seragon Pharmaceuticals Inc Moduladores del receptor de estrogeno de azetidina y usos de los mismos.
WO2014203132A1 (en) 2013-06-19 2014-12-24 Olema Pharmaceuticals, Inc. Substituted benzopyran compounds, compositions and uses thereof
AU2014334636A1 (en) 2013-10-15 2016-06-02 Forsight Vision5, Inc. Formulations and methods for increasing or reducing mucus
WO2015085251A1 (en) 2013-12-06 2015-06-11 Envisia Therapeutics Inc. Intracameral implant for treatment of an ocular condition
WO2015085234A1 (en) 2013-12-06 2015-06-11 Forsight Vision4, Inc. Implantable therapeutic devices
AU2015228859A1 (en) 2014-03-13 2016-07-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic combinations with estrogen receptor modulators
RU2020139890A (ru) 2014-04-14 2022-01-18 Арвинас Оперэйшнз, Инк. Имидные модуляторы протеолиза и способы их применения
US20160058872A1 (en) 2014-04-14 2016-03-03 Arvinas, Inc. Imide-based modulators of proteolysis and associated methods of use
US20160022642A1 (en) 2014-07-25 2016-01-28 Yale University Compounds Useful for Promoting Protein Degradation and Methods Using Same
US10071164B2 (en) 2014-08-11 2018-09-11 Yale University Estrogen-related receptor alpha based protac compounds and associated methods of use
WO2016065139A1 (en) 2014-10-24 2016-04-28 Fl Therapeutics Llc 3-substituted piperidine-2, 6-diones and non-covalent complexes with albumin
WO2016077375A1 (en) 2014-11-10 2016-05-19 Genentech, Inc. Bromodomain inhibitors and uses thereof
MA40943A (fr) 2014-11-10 2017-09-19 Constellation Pharmaceuticals Inc Pyrrolopyridines substituées utilisées en tant qu'inhibiteurs de bromodomaines
IL311006A (en) 2014-12-18 2024-04-01 Hoffmann La Roche Tetrahydro-pyrido[3, 4-b]indole estrogen receptor modulators and their uses
CN107257800B (zh) 2014-12-23 2020-06-30 达纳-法伯癌症研究所股份有限公司 通过双功能分子诱导靶蛋白降解的方法
US9694084B2 (en) 2014-12-23 2017-07-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce targeted protein degradation through bifunctional molecules
KR20230119040A (ko) 2015-01-20 2023-08-14 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 안드로겐 수용체의 표적화된 분해를 위한 화합물 및방법
US11319318B2 (en) 2015-03-05 2022-05-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pyridinones and isoquinolinones as inhibitors of the bromodomain BRD9
EP4414369A3 (en) 2015-03-18 2024-10-16 Arvinas, Inc. Compounds and methods for the enhanced degradation of targeted proteins
CA2988414C (en) 2015-06-04 2023-09-26 Arvinas, Inc. Imide-based modulators of proteolysis and associated methods of use
EP3302482A4 (en) 2015-06-05 2018-12-19 Arvinas, Inc. Tank-binding kinase-1 protacs and associated methods of use
WO2017007612A1 (en) 2015-07-07 2017-01-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce targeted protein degradation through bifunctional molecules
AU2016291578C1 (en) 2015-07-10 2021-07-15 Arvinas Operations, Inc. MDM2-based modulators of proteolysis and associated methods of use
AU2016294450A1 (en) 2015-07-13 2017-12-07 Arvinas Operations, Inc. Alanine-based modulators of proteolysis and associated methods of use
WO2017024317A2 (en) 2015-08-06 2017-02-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce targeted protein degradation through bifunctional molecules
EP3337476A4 (en) 2015-08-19 2019-09-04 Arvinas, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of bromodomain-containing proteins
GB201516243D0 (en) 2015-09-14 2015-10-28 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compounds
CA3002709A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Yale University Proteolysis targeting chimera compounds and methods of preparing and using same
WO2017161119A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, Inc. Small molecules against cereblon to enhance effector t cell function
US20170281784A1 (en) 2016-04-05 2017-10-05 Arvinas, Inc. Protein-protein interaction inducing technology
KR102387316B1 (ko) 2016-04-06 2022-04-15 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 미시간 Mdm2 단백질 분해제
CA3020541A1 (en) 2016-04-12 2017-10-19 The Regents Of The University Of Michigan Bet protein degraders
EP3454862B1 (en) 2016-05-10 2024-09-11 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic degronimers for target protein degradation
CN109641874A (zh) 2016-05-10 2019-04-16 C4医药公司 用于靶蛋白降解的c3-碳连接的戊二酰亚胺降解决定子体
WO2017197051A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Amine-linked c3-glutarimide degronimers for target protein degradation
WO2017197055A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Heterocyclic degronimers for target protein degradation
WO2017197056A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Bromodomain targeting degronimers for target protein degradation
WO2017201069A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Biotheryx, Inc. Oxoindoline derivatives as protein function modulators
WO2017223452A1 (en) 2016-06-23 2017-12-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Degradation of bromodomain-containing protein 9 (brd9) by conjugation of brd9 inhibitors with e3 ligase ligand and methods of use
ES2857743T3 (es) 2016-09-13 2021-09-29 Univ Michigan Regents 1,4-diazepinas fusionadas como degradadores de proteína BET
CA3036834A1 (en) 2016-09-13 2018-03-22 The Regents Of The University Of Michigan Fused 1,4-oxazepines as bet protein degraders
WO2018053354A1 (en) 2016-09-15 2018-03-22 Arvinas, Inc. Indole derivatives as estrogen receptor degraders
KR102173463B1 (ko) 2016-10-11 2020-11-04 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 안드로겐 수용체의 표적 분해용 화합물 및 방법
EP3535265A4 (en) 2016-11-01 2020-07-08 Arvinas, Inc. PROTACS TARGETING ON TAU PROTEIN AND RELATED METHODS FOR USE
HUE064609T2 (hu) 2016-12-01 2024-04-28 Arvinas Operations Inc Tetrahidronaftalin és tetrahidroizokinolin származékok mint ösztrogénreceptor-lebontó anyagok
KR20190093205A (ko) 2016-12-21 2019-08-08 바이오테릭스, 인코포레이티드 단백질 표적화에 사용하기 위한 티에노피롤 유도체, 조성물, 방법 및 이의 용도
EP3559002A4 (en) 2016-12-23 2021-02-17 Arvinas Operations, Inc. CHEMERICAL MOLECULES TARGETING EGFR PROTEOLYSIS AND RELATED METHODS OF USE
US10806737B2 (en) 2016-12-23 2020-10-20 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of fetal liver kinase polypeptides
US10723717B2 (en) 2016-12-23 2020-07-28 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of rapidly accelerated fibrosarcoma polypeptides
US11191741B2 (en) 2016-12-24 2021-12-07 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of enhancer of zeste homolog 2 polypeptide
EP3565761A1 (en) 2017-01-06 2019-11-13 Kellogg Company Packaging station and method of operating a packaging station
CA3049912A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Arvinas Operations, Inc. Modulators of estrogen receptor proteolysis and associated methods of use
JP2020506922A (ja) 2017-01-31 2020-03-05 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッドＡｒｖｉｎａｓ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ， Ｉｎｃ． セレブロンリガンド、およびセレブロンリガンドを含有する二官能性化合物
EP3634960A1 (en) 2017-06-09 2020-04-15 Arvinas Operations, Inc. Modulators of proteolysis and associated methods of use
EP3641762B1 (en) 2017-06-20 2026-02-18 C4 Therapeutics, Inc. N/o-linked degrons and degronimers for protein degradation
AU2018306606B2 (en) 2017-07-28 2021-04-22 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of Androgen Receptor
CN118206529A (zh) 2017-09-04 2024-06-18 C4医药公司 二氢苯并咪唑酮
WO2019043208A1 (en) 2017-09-04 2019-03-07 F. Hoffmann-La Roche Ag DIHYDROQUINOLINONES
EP3679026A1 (en) 2017-09-04 2020-07-15 C4 Therapeutics, Inc. Glutarimide
IL273432B (en) 2017-09-22 2022-09-01 Kymera Therapeutics Inc Protein compounds and their uses
CN111372585A (zh) 2017-11-16 2020-07-03 C4医药公司 用于靶蛋白降解的降解剂和降解决定子
US11065231B2 (en) 2017-11-17 2021-07-20 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of interleukin-1 receptor- associated kinase 4 polypeptides
EP3728251A1 (en) 2017-12-18 2020-10-28 F. Hoffmann-La Roche AG Bifunctional inhibitors with egfr having a e3 ubiquitin ligase moiety
CN112236172A (zh) 2018-01-30 2021-01-15 福宏治疗公司 用于治疗病症的方法和化合物
TW201945357A (zh) 2018-02-05 2019-12-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 化合物
WO2019191112A1 (en) 2018-03-26 2019-10-03 C4 Therapeutics, Inc. Cereblon binders for the degradation of ikaros
EP3774789B1 (en) 2018-04-01 2025-03-05 Arvinas Operations, Inc. Brm targeting compounds and associated methods of use
IL302595A (en) 2018-04-13 2023-07-01 Arvinas Operations Inc Servalon ligands and bifunctional compounds containing them
CN119751456A (zh) 2018-04-16 2025-04-04 C4医药公司 螺环化合物
EP3578561A1 (en) 2018-06-04 2019-12-11 F. Hoffmann-La Roche AG Spiro compounds
US20210260171A1 (en) 2018-06-21 2021-08-26 Foghorn Therapeutics Inc. Methods of treating disorders
US20210251988A1 (en) 2018-06-21 2021-08-19 Foghorn Therapeutics Inc. Methods of treating disorders
WO2020051235A1 (en) 2018-09-04 2020-03-12 C4 Therapeutics, Inc. Compounds for the degradation of brd9 or mth1
WO2020106915A1 (en) 2018-11-21 2020-05-28 Foghorn Therapeutics Inc. Methods of treating cancers
WO2020132561A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 C4 Therapeutics, Inc. Targeted protein degradation
US12384776B2 (en) 2019-01-29 2025-08-12 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
JP2022523073A (ja) 2019-01-29 2022-04-21 フォグホーン セラピューティクス インコーポレイテッド 化合物及びその使用
US20230066136A1 (en) 2019-01-29 2023-03-02 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
WO2020160193A2 (en) 2019-01-29 2020-08-06 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
US20220143183A1 (en) 2019-02-23 2022-05-12 New York University Photoswitchable protacs and synthesis and uses thereof
ES2995214T3 (en) 2019-03-06 2025-02-07 C4 Therapeutics Inc Heterocyclic compounds for medical treatment
SG11202109024YA (en) 2019-04-12 2021-09-29 C4 Therapeutics Inc Tricyclic degraders of ikaros and aiolos
US20220289711A1 (en) 2019-07-31 2022-09-15 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
US20220387602A1 (en) 2019-09-16 2022-12-08 Novartis Ag Bifunctional degraders and their methods of use
JOP20220069A1 (ar) 2019-09-16 2023-01-30 Novartis Ag عوامل محللة لـ brd9 ثنائية الوظيفة وطرق لاستخدامها
JP7757284B2 (ja) 2019-12-20 2025-10-21 シーフォー セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｅｇｆｒの分解のためのイソインドリノン及びインダゾール化合物
US12528825B2 (en) 2020-01-29 2026-01-20 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
BR112022017393A2 (pt) * 2020-03-05 2022-10-18 C4 Therapeutics Inc Composto, composição farmacêutica, método para tratar um transtorno mediado por brd9, e, uso de um composto
CN115996719A (zh) 2020-06-19 2023-04-21 C4医药公司 Braf降解剂
CA3188313A1 (en) 2020-08-05 2022-02-10 C4 Therapeutics, Inc. Compounds for targeted degradation of ret
KR20230049678A (ko) 2020-08-07 2023-04-13 씨4 테라퓨틱스, 인코포레이티드 이카로스 또는 아이올로스에 의해 매개되는 장애를 위한 유리한 요법

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