CN1190440C - 三唑并一依泊昔酮 - Google Patents

Abstract

本发明涉及4a或4b之依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物。

Description

三唑并-依泊昔酮

技术领域

本发明涉及依泊昔酮(epothilone)A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物。

背景技术

依泊昔酮是具有杀真菌和细胞毒性作用的大环内酯类化合物。对于具有相当或者更好活性的类似物或者衍生物仍有持续的需要，以将它们用作杀真菌药或者细胞生长繁殖抑制剂。

有关依泊昔酮的化学综述例如可参见：Nicolaou，Angew.Chem.Int.Ed.1998，Vol.37，2014-2045。

发明内容

本发明的目的在于提供该类型的依泊昔酮类似物或者衍生物。

因此，本发明涉及式4a或4b之依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物：

4a：R＝H，Z＝H、烷基、芳基、杂芳基

4b：R＝CH₃，Z＝H、烷基、芳基、杂芳基

其中：

R代表H、CH₃，

Z代表H、烷基、芳基、杂芳基。

根据本发明的三唑并噻唑依泊昔酮是非常有效的杀真菌药和高效力的细胞生长繁殖抑制剂，并具有有利的药理学性质。

烷基是指直链或支链C₁-C₆烷基，其可为单或者多取代的，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基和己基。取代基例如是C_1-6烷氧基、C_1-6酰基、羟基和卤素如溴、氯、氟和碘。

芳基是指单核或者多核芳香系统，其可为单或者多取代的，例如苯基、邻甲苯基、间甲苯基、对甲苯剂、邻二甲苯基、间二甲苯基、对二甲苯基、苄基、苯乙基和萘基。取代基例如是C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6酰基、羟基和卤素如溴、氯、氟和碘。

杂芳基是指单核或者多核杂芳香系统，其可为单或者多取代的，而且芳香核中可有一个或者多个选自于N、O和S的杂原子。杂芳基例如是呋喃基、吡喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基和吲哚基。取代基例如是C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6酰基、羟基和卤素如溴、氯、氟和碘。

本发明还涉及制备根据本发明之依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物的方法，包含一种或者多种所述类似物的杀真菌药物组合物及药物组合物，以及该类似物和包含该类似物的杀真菌药物组合物或者药物组合物在对抗真菌或者治疗可用细胞生长繁殖抑制剂治疗的疾病中的应用，所述疾病例如是肿瘤疾病如癌症或者细胞生长紊乱。

除活性成分外，杀真菌由药物组合物和药物组合物可包括常规载体、稀释剂或者赋形剂，例如稳定剂如UV吸收剂、抗氧剂和防腐剂。

附图说明

图1是制备根据本发明之依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物的合成路线图。

图2和图3是对根据本发明之依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物进行光解和环加成反应的路线图。

具体实施方式

以下将参考图1描述制备根据本发明之依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物的实施例，但是这些实施例仅是用于说明，而无限制本发明范围的目的。

在已公布的德国专利申请DE199 07 588以及已公布的国际专利申请WO 2000/050423中描述了C21改性的依泊昔酮的制备，即、式1、2和3的醛、酮和腙。在根据本发明的方法中，氧化闭环是在通式3a和3b的腙衍生物上借助于金属氧化物(优选NiO₂)、K₃[Fe(CN)₆]、四乙酸铅或者次氯酸钠进行的(参见：Houben-Weyl，Vol.E 14b，第4版，1999)。合成依泊昔酮A的三唑并噻唑类似物(式4a，Z＝H)：

将24.6mg(47.2μmol)的依泊昔酮A-21醛腙(式3a)溶解在1.5ml无水二氯甲烷中。在室温和搅拌下以15分钟的间隔添加三等份(每份42.8mg(472.2μmol))的过氧化镍。在Celite上过滤该混合物，并用二氯甲烷淋洗。合并的有机相浓缩，然后在高真空下干燥。用制备性HPLC纯制粗产物(流动相：乙腈/水38∶62；柱：Nucleosil 100 C18，7μm，21×250mm)。得到12.0mg(49％)的产物。

光谱数据与依泊昔酮A相同(参见DE 4138042 C2)，但有以下不同之处：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：d＝2.25(dt，2a-H)，2.57(dd，2b-H)，4.63(m，3-H)，5.02(dd，3-OH)，1.68(m，14a-H)，2.31(dt，14b-H)，5.53(d，15-H)，6.92(bs，17-H)，7.06(s，19-H)，7.84(s，21-H)，1.08(s，22-H)，1.55(s，23-H)

¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：d＝73.0(3-C)，54.7(4-C)，41.4(6-C)，71.4(7-C)，32.0(14-C)，74.9(15-C)，145.1(16-C)，109.2(17-C)，129.2(18-C)，115.5(19-C)，136.4(20-C)，124.8(21-C)，15.9(C-22)，23.3(23-C)，12.7(24-C)，18.1(27-C)

HRMS(DCI)：C₂₈H₃₇N₃O₆S[M+NH₄]⁺，计算：537.2747，实测：537.2721

合成依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物(式4b，Z＝H)：

将8.1mg(15.1μmol)的依泊昔酮B-21醛腙(式3b)溶解在1ml无水二氯甲烷中。在室温和搅拌下在15分钟时间内添加13.7mg(151.4μmol)的过氧化镍。在Celite上过滤该混合物，并用二氯甲烷洗涤。合并的有机相浓缩，然后在高真空下干燥。用制备性HPLC纯制粗产物(流动相：乙腈/水40∶60；柱：Nucleosil 100 C18，7μm，21×250mm)。得到4.7mg(58％)的产物。

光谱数据与依泊昔酮B相同(参见DE4138042 C2)，但有以下不同之处：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：d＝2.25(dt，2a-H)，2.59(dd，2b-H)，4.69(m，3-H)，5.02(dd，3-OH)，1.76(m，14a-H)，2.31(dt，14b-H)，5.53(d，15-H)，6.91(bs，17-H)，7.06(s，19-H)，7.85(s，21-H)，1.08(s，22-H)，1.56(s，23-H)

¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：d＝71.3(3-C)，54.9(4-C)，41.0(6-C)，72.4(7-C)，33.1(14-C)，75.2(15-C)，145.3(16-C)，108.9(17-C)，129.2(18-C)，115.5(19-C)，136.5(20-C)，124.9(21-C)，15.7(C-22)，23.2(23-C)，12.0(24-C)，18.1(27-C)

MS(ESI)：[M+H]⁺＝534

药理学活性式示于下表中。

使用恶性细胞培养物的生长试验

细胞系	来源	IC50(ng/ml)
				依泊昔酮A的三唑并衍生物	依泊昔酮B的三唑并衍生物
		L929	鼠(皮下脂肪组织)			10	1.0
K-562	人(白血病)			6	0.7
		U-937	人(淋巴瘤)			4	0.5

制备21-O-乙酰基-依泊昔酮E(5a，R′＝CH₃)

将2ml(35.0mmol)的冰乙酸添加至3.2mg(6.2mmol)三唑并-依泊昔酮A在250ml二氯甲烷中的溶液内，然后在室温下搅拌过夜。在反应混合物中添加水，然后用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相浓缩，然后在高真空下干燥。得到2.8mg(82％)的21-O-乙酰基-依泊昔酮E。

光谱数据与依泊昔酮A相同(参见DE 4138042 C2)，但有以下不同之处：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝6.60(bs，17-H)，7.14(s，19-H)，5.34(s，21-H₂)，2.14(s，2′-H₃)

¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：137.8(C-16)，119.6(C-17)，152.5(C-18)，118.0(C-19)，163.7(C-20)，62.5(C-21)，170.2(C-1′)，20.9(C-2′)

R_f(CH₂Cl₂/MeOH 95/5)：0.45

HRMS(EI)：C₂₈H₄₁NO₈S[M]⁺计算：551.2553，实测：551.2519

制备依泊昔酮E-21-O-(3′-甲氧基羰基)丙酸酯(5a，R′＝CH₃OOC-C₂)

将7.0mg(55.0mmol)的丙炔酸单甲基酯添加至5.1mg(9.8mmol)三唑并-依泊昔酮A在400ml二氯甲烷中的溶液内。反应混合物在室温下搅拌过夜，向其中添加水，然后用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相浓缩，然后在高真空下干燥。在PLC(CH₂Cl₂/甲醇95/5)纯制后得到3.6mg(59％)的依泊昔酮E-21-O-(3′-甲氧基羰基)丙酸酯。

光谱数据与依泊昔酮A相同(参见DE 4138042 C2)，但有以下不同之处：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝5.45(dd，15-H)，6.60(bs，17-H)，7.20(s，19-H)，5.49(bs，21-H₂)，3.85(s，5′-H₃)

¹³C-NMR(100MHz，CDCl₃)：76.5(C-15)，138.2(C-16)，119.5(C-17)，153.0(C-18)，118.8(C-19)，161.2(C-20)，64.2(C-21)，151.1(C-1′)，152.0(C-4′)，53.6(C-5′)

R_f(CH₂Cl₂/MeOH 95/5)：0.32

MS(DCI)：[M+NH₄]⁺＝637

三唑并-依泊昔酮A光解形成21-O-甲基-依泊昔酮A(5a，Nu-H＝CH₃OH)

9.7mg(18.7mmol)的三唑并-依泊昔酮A溶解在1ml甲醇中，然后在冷却(浴温0℃)下暴露于光4小时，其中使用汞蒸汽灯(DEMA公司制造，HPK-125)。除去溶剂，然后通过制备性HPLC(CH₃CN/H₂O40/60)分离反应混合物。分离出2.1mg(24％)的21-甲氧基-依泊昔酮A。

光谱数据与依泊昔酮A相同(参见DE 4138042 C2)，但有以下不同之处：

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝6.61(bs，17-H)，7.13(s，19-H)，4.71(s，21-H₂)，3.49(s，1′-H₃)

¹³C-NMR(75MHz，CDCl₃)：137.5(C-16)，120.0(C-17)，152.2(C-18)，117.3(C-19)，167.8(C-20)，71.5(C-21)，59.1(C-1′)

R_f(CH₂Cl₂/MeOH 95/5)：0.33

HRMS(EI)：C₂₇H₄₁NO₇S[M]⁺计算：523.2604，实测：523.2609丙炔酸二甲酯和三唑并依泊昔酮A的1，3-双极性环加成形成吡唑衍生物6a

将1.8mg(3.5mmol)的三唑并-依泊昔酮A溶解在200ml二氯甲烷中。在4小时内，添加三等份丙炔酸二甲酯，每份为4.3ml(34.7mmol)，并在室温下搅拌。略微浓缩反应混合物，然后通过PLC(CH₂Cl₂/甲醇95/5)进行分离。得到2.0mg(87％)的环加成产物。

光谱数据与依泊昔酮A相同(参见DE 4138042 C2)，但有以下不同之处：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝5.49(dd，15-H)，6.63(bs，17-H)，7.29(s，19-H)，3.97(s，4′-H₃)，3.95(s，′-H₃)

R_f(CH₂Cl₂/MeOH 95/5)：0.17

HRMS(EI)：C₃₂H₄₃N₃O₁₀S[M+H]⁺计算：662.2742，实测：662.2778

Claims (9)

1、式4a或4b之依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物：

4a：R＝H，Z＝H、烷基、芳基、杂芳基

4b：R＝CH₃，Z＝H、烷基、芳基、杂芳基其中：R代表H或CH₃，Z代表H、烷基、芳基或杂芳基；其中所述烷基是直链或支链C₁-C₆烷

基，其可为单或者多取代的；所述芳基是苯基、邻甲苯基、间甲苯

基、对甲苯剂、邻二甲苯基、间二甲苯基、对二甲苯基、苄基、苯

乙基或者萘基，它们任选被C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6酰基、羟

基或卤素取代；而所述杂芳基是呋喃基、吡喃基、吡咯基、咪唑基、

吡唑基、吡啶基或者吲哚基，它们任选被C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、

C_1-6酰基、羟基或卤素取代。

2、如权利要求1所述的依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑衍生物，其中所述烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基或己基，它们任选被C_1-6烷氧基、C_1-6酰基、羟基或卤素取代。

3、如权利要求1或2所述的依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑衍生物，其中所述卤素是溴、氯、氟或碘。

4、制备如前述任一权利要求所述的依泊昔酮A和依泊昔酮B的三唑并噻唑衍生物的方法，其中氧化闭环是在通式3a和3b的依泊昔酮A和依泊昔酮B的腙衍生物上借助于金属氧化物、K₃[Fe(CN)₆]、四乙酸铅或者次氯酸钠进行的：

3a：R＝H，Z＝H、烷基、芳基、杂芳基

3b：R＝CH₃，Z＝H、烷基、芳基、杂芳基其中R和Z与权利要求1中的定义相同。

5、如权利要求4所述的方法，其中金属氧化物是NiO₂。

6、药物组合物，其包含一种或者多种如权利要求1-3之一所述的依泊昔酮A或依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物以及药物学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

7、如权利要求6所述的药物组合物，其是用于治疗肿瘤疾病和细胞生长紊乱。

8、如权利要求7所述的药物组合物，其中所述肿瘤疾病是癌症。

9、杀真菌药物组合物，其包含或者由一种或者多种如权利要求1-3之一所述的依泊昔酮A或依泊昔酮B的三唑并噻唑类似物以及药物学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂组成。