[go: up one dir, main page]

CN118974059A - 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂 - Google Patents

囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂 Download PDF

Info

Publication number
CN118974059A
CN118974059A CN202380032421.XA CN202380032421A CN118974059A CN 118974059 A CN118974059 A CN 118974059A CN 202380032421 A CN202380032421 A CN 202380032421A CN 118974059 A CN118974059 A CN 118974059A
Authority
CN
China
Prior art keywords
optionally substituted
independently selected
compound
alkyl
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202380032421.XA
Other languages
English (en)
Inventor
J·J·克莱门斯
A·R·阿贝拉
B·C·布克赛尔
T·克里夫兰
T·R·库恩
M·加兰特
S·S·哈迪达鲁阿
P·格鲁腾休斯
Y·伊施哈拉
J·拉特鲁尔
J·麦卡特尼
M·T·米勒
P·帕拉塞利
Y·K·拉姆托胡尔
T·J·雷迪
W·舒尔茨贝查拉
C·斯图里诺
J·A·特兰
L·瓦尔迪兹
J·周
R·德
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Vertex Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Vertex Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vertex Pharmaceuticals Inc filed Critical Vertex Pharmaceuticals Inc
Publication of CN118974059A publication Critical patent/CN118974059A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4433—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/529—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/18—Bridged systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本公开提供了囊性纤维化跨膜传导调控因子(CFTR)的调节剂、含有至少一种此类调节剂的药物组合物、使用此类调节剂和药物组合物治疗囊性纤维化的方法以及用于制备此类调节剂的方法。

Description

囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂
本申请要求于2022年2月8日提交的美国临时申请第63/307,954号的权益，所述美国临时申请的内容通过引用整体并入。
本发明涉及囊性纤维化跨膜传导调控因子(CFTR)的调节剂、含有所述调节剂的药物组合物、使用此类调节剂和药物组合物治疗囊性纤维化和CFTR介导的病症的方法以及用于制备此类调节剂的方法。
囊性纤维化(CF)是隐性遗传疾病，在全球范围内大约有83,000名儿童及成人受其影响。尽管CF的治疗取得一定进展，但仍无法治愈。
在CF患者中，呼吸道上皮中内源性表达的CFTR的突变导致顶端阴离子分泌减少，从而使得离子和液体转运失衡。由此引起的阴离子转运减少导致肺中粘液累积增加，并且伴随微生物感染，最终导致CF患者死亡。除呼吸系统疾病之外，CF患者通常患有胃肠道问题和胰腺功能不全，如果不治疗，则会导致死亡。另外，大多数患有囊性纤维化的男性不育，并且患有囊性纤维化的女性的生育力降低。
CFTR基因的序列分析已揭露出多种致病性突变(《切割(Cutting)》,G.R.等人(1990)《自然(Nature)》346:366-369；Dean,M等人(1990)《细胞(Cell)》61:863:870；以及Kerem,B-S等人(1989)《科学(Science)》245:1073-1080；Kerem,B-S等人(1990)《美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)》87:8447-8451)。迄今为止，已识别出CF基因中超过2000个突变；目前，CFTR2数据库含有关于这些已识别突变中的至少322个的信息，有足够的证据将至少281个突变定义为致病性的。最普遍的致病性突变是位于CFTR氨基酸序列的508位处的苯丙氨酸缺失，并且通常称为F508del突变。此突变出现在许多囊性纤维化病例中，并且与严重疾病相关。
CFTR是在包含吸收性和分泌性上皮细胞的各种细胞类型中表达的cAMP/ATP介导的阴离子通道，其中所述CFTR调控跨膜的阴离子通量以及其它离子通道和蛋白质的活性。在上皮细胞中，CFTR的正常功能对于维持电解质在全身(包含呼吸和消化组织)的转运至关重要。CFTR由编码蛋白质的1480个氨基酸构成，所述蛋白质由跨膜结构域的串联重复序列构成，每个跨膜结构域含有六个跨膜螺旋和核苷酸结合结构域。两个跨膜结构域通过大的极性调控(R)结构域与多个磷酸化位点连接，这调控通道活性和细胞运输。
氯化物转运由存在于顶端膜上的ENaC(上皮钠通道)和CFTR以及在细胞的基底外侧表面上表达的Na+-K+-ATP酶泵和Cl-通道的协调活性进行。来自腔侧的氯化物的继发性主动转运致使胞内氯化物的积累，然后可以将其经由Cl-通道被动地离开细胞，从而致使媒介转运。Na+/2Cl-/K+共转运蛋白、Na+-K+-ATP酶泵和基底外侧表面上的基底外侧膜K+通道以及腔侧上的CFTR的布置协调氯化物的分泌。由于水自身可能无法主动转运，因此其跨上皮的流动取决于由钠和氯化物的大量流动所产生的微小跨上皮渗透梯度。
最近已识别出多种CFTR调节剂。这些调节剂可以表征为例如增效剂、校正剂、增效剂增强剂/共增效剂、扩增剂、通读剂和核酸疗法。增加在上皮细胞表面处的突变型和野生型CFTR的通道门控活性的CFTR调节剂被称为增效剂。校正剂改善了错误的蛋白质加工和由此产生的向上皮表面的运输。Ghelani和Schneider-Futschik(2020)《ACS药理学与转化科学(ACS Pharmacol.Transl.Sci.)》3:4-10。美国FDA批准了用于治疗囊性纤维化的三种CFTR校正剂。然而，使用一些CFTR校正剂的单一疗法尚未被发现足够有效，并且因此通常需要与增效剂的联合疗法来增强CFTR活性。目前只有一种CFTR增效剂被批准用于治疗囊性纤维化。因此，尽管囊性纤维化的治疗已通过这些新的小分子CFTR调节剂进行转化，但需要新的和更好的调节剂来预防疾病进展、降低囊性纤维化和其它CFTR介导的疾病的严重性以及治疗这些疾病的更严重形式。
本发明的一方面提供了新型化合物，其包含式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐。
例如，式I的化合物可以如下描绘：
并且包含其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-C(RX1)2-、-CO-、-Si(RZ3)2-和
环A是选自苯基和5至6元杂芳基的环基团，其中所述环基团任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代；
每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、-ORX2和-N(RX2)2的基团取代)、C3-C8环烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基；
每个RX2独立地选自H和C1-C6烷基；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-O-、-CO-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基和Q的基团取代)、C3-C8环烷基、C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、5至10元杂芳基、-ORY1、-CO2RY1、-CORY1、-CON(RY1)2和-N(RY1)2；
或两个RY一起形成π键，所述两个RY中的一个在一个原子上并且其中的第二个在邻近原子上；
每个RY1独立地选自氢和C1-C6烷基，或与同一个氮键合的两个RY1一起形成3至6元杂环基；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-5个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟代烷基、C1-C6氟代烷氧基和卤素的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H、C1-C4烷基(任选地被氧代取代)以及C3-C6环烷基；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基、
■5至10元杂芳基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个Q独立地选自：
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○卤素、
○氧代、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素和-OCF3的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、-NH2和-NHCOMe的基团取代)、
○C1-C6烷氧基、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和羟基的基团取代)、
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆卤素、
◆C3-C8环烷基(任选地被CF3取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、CF3、OCF3和C1-C6烷基的基团取代)以及
○C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个CF3基团取代)以及
○3至10元杂环基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)以及
○氧代；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基(任选地被选自羟基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基的基团取代)、-OR2、-N(R2)2、-CO2R2、-CO-N(R2)2、-CN、C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5至6元杂芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、3至6元杂环基、-B(OR2)2、-SO2R2、-SR2、-SOR2、-PO(OR2)2和-PO(R2)2；
每个R2独立地选自氢、C1-C6烷基(任选地被1-6个独立地选自卤素的基团取代)、C1-C6氟代烷基和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基和C1-C6氟代烷氧基的基团取代)；
Z选自
其中环C选自C6-C10芳基和5至10元杂芳基；
RZ1选自氢、-CN、C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、C1-C6氟代烷基、3至6元杂环基、C3-C6环烷基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基；
RZ2选自氢、卤素、羟基、NH2、NH(CO)(C1-C6烷基)以及C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C3-C10环烷基的基团取代)，
或RZ1和RZ2一起形成选自氧代和＝N-OH的基团；
每个RZ3独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基和C6-C10芳基；或两个RZ3一起形成3至6元杂环基；
n选自4、5、6、7和8；并且
m选自0、1、2和3。
在式I的一些实施例中，X为-C(RX1)2-。在式I的一些实施例中，-C(RX1)2-是选自以下的基团：
-CH2-、
在式I的一些实施例中，X为-CO-。
在式I的一些实施例中，X为在式I的一些实施例中，X是选自以下的基团：
在式I的一些实施例中，X为在式I的一些实施例中，环A是选自苯基、吡唑和噁二唑的环基团。
在式I的一些实施例中，X选自：
-CO-、-CH2-、
在式I的一些实施例中，每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基。在式I的一些实施例中，每个RX2独立地选自H和C1-C4烷基。在式I的一些实施例中，每个RX1独立地选自H、F、-CF3、-CH3、-OH、-OCH3和CN。
在式I的一些实施例中，每个Y独立地选自-C(RY)2-、-CO-、-NRYN-和
在式I的一些实施例中，每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基。在式I的一些实施例中，每个RY独立地选自H、-OH、-F和-CH3。
在式I的一些实施例中，每个RYN独立地选自：
■H、
■-CH2CF3、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○环丙基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环丁基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环己基、
○螺[2.2]戊烷、
○双环[4.1.0]庚烷、
○二螺[2.0.24.13]庚烷、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的苯基：F、Cl、Br、CN、甲基、丙基(任选地被一个羟基取代)、叔丁基、新戊基、-CHF2、-CF3、-C(CH3)2CF3、-OCH3、-O(2-丙基)、-OCHF2、-OCF3、-OCF2CHF2、-OCH2CF3、环丙基(任选地被一个CF3取代)、环丁基(任选地被1-2个选自氟代和甲基的基团取代)、螺[2.2]戊烷、双环[1.1.1]戊烷、双环[4.1.0]庚烷、二螺[2.0.24.13]庚烷、苯基、萘基以及
○萘基、
○2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃、
○2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯、
○四氢-2H-吡喃、
○任选地被一个选自甲基和丙基的基团取代的吡唑、
○任选地被一个选自甲基、叔丁基、CF3、-O(环丁基)、-OCHF2、任选地被一个CF3取代的环丙基、以及哌啶的基团取代的吡啶以及
○任选地被一个选自甲基和叔丁基的基团取代的嘧啶、
■任选地被1-2个选自甲基、叔丁基、环丙基和苯基(任选地被一个叔丁基取代)的基团取代的环丙基、
■任选地被1-3个选自氟代、甲基和苯基的基团取代的环丁基、
■环戊基、
■任选地被1-2个选自氟代、甲基、叔丁基、氰基、-CF3、-CH2NH2和-CH2NHAc的基团取代的环己基、
■任选地被一个选自氟代、甲基和叔丁基的基团取代的双环[1.1.1]戊烷、
■任选地被一个-OCH3基团取代的双环[2.2.1]庚烷、
■双环[2.2.2]辛烷、
■任选地被1-2个氟代基团取代的螺[3.3]庚烷、
■苯基、
■四氢-2H-吡喃、
■任选地被一个选自-COMe和-CO(环丙基)的基团取代的2-氮杂螺[3.3]庚烷、
■1,1-二氧化硫杂环丁烷、
■1,1-二氧化四氢-2H-噻喃、
■任选地被一个甲基取代的吡唑以及
■吡啶。
在式I的一些实施例中，每个RYN独立地选自：
H、-CH3、
在式I的一些实施例中，环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)。
在式I的一些实施例中，环B选自：
在式I的一些实施例中，每个R2为H。
在式I的一些实施例中，每个R1独立地选自C1-C6氟代烷基、N(R2)2和-CN。在式I的一些实施例中，每个R1独立地选自-CF3、-NH2和-CN。
在式I的一些实施例中，Z选自在式I的一些实施例中，Z选自：
在式I的一些实施例中，Z为其中环C选自C6-C10芳基。在式I的一些实施例中，基团：
选自：
在式I的一些实施例中，基团：
是
在式I的一些实施例中，Z为在式I的一些实施例中，Z为在式I的一些实施例中，Z为在式I的一些实施例中，Z为其中(R)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则(Cahn-Ingold-Prelog convention)下的中心碳原子的立体化学标示。在式I的一些实施例中，Z为其中(S)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。
在式I的一些实施例中，RZ1选自C1-C6氟代烷基。
在式I的一些实施例中，RZ2选自卤素和羟基。
在式I的一些实施例中，n选自5、6和7。
在式I的一些实施例中，m选自1和2。
在一些实施例中，式I的化合物可以被描绘为式I'：
并且包含其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-C(RX1)2-、-CO-、-Si(RZ3)2-和
环A是选自苯基和5至6元杂芳基的环基团，其中所述环基团任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代；
每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、-ORX2和-N(RX2)2的基团取代)、C3-C8环烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基；
每个RX2独立地选自H和C1-C6烷基；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-O-、-CO-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基和Q的基团取代)、C3-C8环烷基、C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、5至10元杂芳基、-ORY1、-CO2RY1、-CORY1、-CON(RY1)2和-N(RY1)2；
或两个RY一起形成π键，所述两个RY中的一个在一个原子上并且其中的第二个在邻近原子上；
每个RY1独立地选自氢和C1-C6烷基，或与同一个氮键合的两个RY1一起形成3至6元杂环基；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被C1-C6烷基取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H、C1-C4烷基(任选地被氧代取代)以及C3-C6环烷基；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基、
■5至10元杂芳基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个Q独立地选自：
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○卤素、
○氧代、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素和-OCF3的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、-NH2和-NHCOMe的基团取代)、
○C1-C6烷氧基、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和羟基的基团取代)、
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆卤素、
◆C3-C8环烷基(任选地被CF3取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、CF3、OCF3和C1-C6烷基的基团取代)以及
○C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个CF3基团取代)以及
○3至10元杂环基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)以及
○氧代；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基(任选地被选自羟基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基的基团取代)、-OR2、-N(R2)2、-CO2R2、-CO-N(R2)2、-CN、C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5至6元杂芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、3至6元杂环基、-B(OR2)2、-SO2R2、-SR2、-SOR2、-PO(OR2)2和-PO(R2)2；
每个R2独立地选自氢、C1-C6烷基(任选地被1-6个独立地选自卤素的基团取代)、C1-C6氟代烷基和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基和C1-C6氟代烷氧基的基团取代)；
Z选自
其中环C选自C6-C10芳基和5至10元杂芳基；
RZ1选自氢、-CN、C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、C1-C6氟代烷基、3至6元杂环基、C3-C6环烷基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基；
RZ2选自氢、卤素、羟基、NH2、NH(CO)(C1-C6烷基)以及C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C3-C10环烷基的基团取代)，
或RZ1和RZ2一起形成选自氧代和＝N-OH的基团；
每个RZ3独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基和C6-C10芳基；或两个RZ3一起形成3至6元杂环基；
n选自4、5、6、7和8；并且
m选自0、1、2和3。
在式I'的一些实施例中，X为-C(RX1)2-。在式I'的一些实施例中，-C(RX1)2-是选自以下的基团：
-CH2-、
在式I'的一些实施例中，X为-CO-。
在式I'的一些实施例中，X为在式I'的一些实施例中，X是选自以下的基团：
在式I'的一些实施例中，X为在式I'的一些实施例中，环A是选自苯基、吡唑和噁二唑的环基团。
在式I'的一些实施例中，X选自：
-CO-、-CH2-、
在式I'的一些实施例中，每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基。在式I'的一些实施例中，每个RX2独立地选自H和C1-C4烷基。在式I'的一些实施例中，每个RX1独立地选自H、F、-CF3、-CH3、-OH、-OCH3和CN。
在式I'的一些实施例中，每个Y独立地选自-C(RY)2-、-CO-、-NRYN-和
在式I'的一些实施例中，每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基。在式I'的一些实施例中，每个RY独立地选自H、-OH、-F和-CH3。
在式I'的一些实施例中，每个RYN独立地选自：
■H、
■-CH2CF3、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○环丙基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环丁基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环己基、
○螺[2.2]戊烷、
○双环[4.1.0]庚烷、
○二螺[2.0.24.13]庚烷、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的苯基：F、Cl、Br、CN、甲基、丙基(任选地被一个羟基取代)、叔丁基、新戊基、-CHF2、-CF3、-C(CH3)2CF3、-OCH3、-O(2-丙基)、-OCHF2、-OCF3、-OCF2CHF2、-OCH2CF3、环丙基(任选地被一个CF3取代)、环丁基(任选地被1-2个选自氟代和甲基的基团取代)、螺[2.2]戊烷、双环[1.1.1]戊烷、双环[4.1.0]庚烷、二螺[2.0.24.13]庚烷、苯基、萘基以及
○萘基、
○2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃、
○2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯、
○四氢-2H-吡喃、
○任选地被一个选自甲基和丙基的基团取代的吡唑、
○任选地被一个选自甲基、叔丁基、CF3、-O(环丁基)、-OCHF2、任选地被一个CF3取代的环丙基、以及哌啶的基团取代的吡啶以及
○任选地被一个选自甲基和叔丁基的基团取代的嘧啶、
■任选地被1-2个选自甲基、叔丁基、环丙基和苯基(任选地被一个叔丁基取代)的基团取代的环丙基、
■任选地被1-3个选自氟代、甲基和苯基的基团取代的环丁基、
■环戊基、
■任选地被1-2个选自氟代、甲基、叔丁基、氰基、-CF3、-CH2NH2和-CH2NHAc的基团取代的环己基、
■任选地被一个选自氟代、甲基和叔丁基的基团取代的双环[1.1.1]戊烷、
■任选地被一个-OCH3基团取代的双环[2.2.1]庚烷、
■双环[2.2.2]辛烷、
■任选地被1-2个氟代基团取代的螺[3.3]庚烷、
■苯基、
■四氢-2H-吡喃、
■任选地被一个选自-COMe和-CO(环丙基)的基团取代的2-氮杂螺[3.3]庚烷、
■1,1-二氧化硫杂环丁烷、
■1,1-二氧化四氢-2H-噻喃、
■任选地被一个甲基取代的吡唑以及
■吡啶。
在式I'的一些实施例中，每个RYN独立地选自：
H、-CH3、
在式I'的一些实施例中，环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)。
在式I'的一些实施例中，环B选自：
在式I'的一些实施例中，每个R2为H。
在式I'的一些实施例中，每个R1独立地选自C1-C6氟代烷基、N(R2)2和-CN。在式I'的一些实施例中，每个R1独立地选自-CF3、-NH2和-CN。
在式I'的一些实施例中，Z选自在式I'的一些实施例中，Z选自：
在式I'的一些实施例中，Z为其中环C选自C6-C10芳基。在式I'的一些实施例中，基团：
选自：
在式I'的一些实施例中，基团：
是
在式I'的一些实施例中，Z为在式I'的一些实施例中，Z为在式I'的一些实施例中，Z为在式I'的一些实施例中，Z为其中(R)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。在式I'的一些实施例中，Z为其中(S)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。
在式I'的一些实施例中，RZ1选自C1-C6氟代烷基。
在式I'的一些实施例中，RZ2选自卤素和羟基。
在式I'的一些实施例中，n选自5、6和7。
在式I'的一些实施例中，m选自1和2。
本发明的化合物也包含式Ia和Ib的化合物：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中所有变量如式I所定义的。
在式Ia和Ib的一些实施例中，化合物的部分由以下表示：是其中(R)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。在式I的一些实施例中，化合物的部分由以下表示：是其中(S)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。
本发明的化合物也包含式Ia'和Ib'的化合物：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中所有变量如式I所定义的。
在式Ia'和Ib'的一些实施例中，化合物的部分由以下表示：是其中(R)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。在式I的一些实施例中，化合物的部分由以下表示：是其中(S)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。
本发明的化合物还包含式IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物：
以及
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中所有变量如式I所定义的。
在式IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的一些实施例中，化合物的部分由以下表示：是其中(R)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。在式I”的一些实施例中，化合物的部分由以下表示：是其中(S)是指在卡恩-英格尔-普雷洛格规则下的中心碳原子的立体化学标示。
本发明的另一方面提供了药物组合物，其包括至少一种化合物，所述至少一种化合物选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体，所述组合物可以进一步包含至少一种另外的活性药物成分。因此，本发明的另一方面提供了治疗CFTR介导的疾病囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用以下中的至少一种：选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐的化合物；以及至少一种药学上可接受的载体，任选地作为包括至少一种另外的组分的药物组合物的一部分。
在某些实施例中，本发明的药物组合物包括至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐的化合物。在一些实施例中，包括至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐的化合物的组合物可以任选地进一步包括至少一种选自化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X、氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐的化合物。
本发明的另一方面提供了治疗CFTR介导的疾病囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用至少一种选自以下的化合物：本文所公开的新型化合物、其药学上可接受的盐以及前述中的任一项的氘化衍生物；以及任选地进一步施用一种或多种选自以下的另外的CFTR调节剂：(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺(化合物II)、N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺(化合物III)或N-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺(化合物III-d)、3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物IV)、N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺酰基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物V)、N-(苯磺酰基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物VI)、(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物VII)、(11R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物VIII)；N-(苯磺酰基)-6-(3-氟-5-异丁氧基-苯基)-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物IX)和N-[(6-氨基-2-吡啶基)磺酰基]-6-(3-氟-5-异丁氧基-苯基)-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物X)。
本发明的另一方面提供了治疗CFTR介导的疾病囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐的化合物，以及任选地进一步施用一种或多种选自以下的另外的CFTR调节剂：
公开于《囊性纤维化期刊(Journal of Cystic Fibrosis)》(2018),17(5),595-606，以及：
(奈索卡托(nesolicaftor)或PTI-428)，公开于WO 2016/105485。在一个实施例中，所述另外的CFTR调节剂是ASP-11。在一个实施例中，所述另外的CFTR调节剂包括PTI-428。
本发明的另一方面提供了治疗CFTR介导的疾病囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐的化合物，以及任选地进一步施用一种或多种选自以下的另外的CFTR调节剂：
(加利卡托(galicaftor)或ABBV-2222)，公开于美国专利申请公开第2016-0120841号；
公开于WO 2018/065921；
(波塞纳卡托(posenacaftor)或PTI-801)，公开于WO 2017/062581；ABBV-2851，公开于WO2017/009804；GLPG2737，公开于美国专利申请公开第2017-0101405号；ABBV-3748；ABBV-3903；以及ABBV-119。
定义
如本文所使用的，“化合物II”是指(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺，所述化合物可以用以下结构描绘：
化合物II可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物II以及制备和使用化合物II的方法公开于WO 2010/053471、WO 2011/119984、WO 2011/133751、WO 2011/133951和WO2015/160787中，各自通过引用并入本文。
如贯穿本公开所使用的，“化合物III”是指N-(5-羟基-2,4-二-叔丁基-苯基)-4-氧代-1H-喹啉-3-甲酰胺(也被称为N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺)，所述化合物通过以下结构描绘：
化合物III也可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物III以及制备和使用化合物III的方法公开于WO 2006/002421、WO 2007/079139、WO 2010/108162和WO 2010/019239，各自通过引用并入本文。
在一些实施例中，化合物III的氘化衍生物(化合物III-d)被用于本文所公开的组合物和方法中。化合物III-d的化学名称是N-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺，如以下结构所描绘的：
化合物III-d可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物III-d以及制备和使用化合物III-d的方法公开于WO 2012/158885、WO 2014/078842、WO 2019/109021和美国专利第8,865,902号，通过引用并入本文。
如本文所使用的，“化合物IV”是指3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸，所述化合物通过以下化学结构描绘：
化合物IV可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物IV以及制备和使用化合物IV的方法公开于WO 2007/056341、WO 2009/073757和WO 2009/076142，通过引用并入本文。
如本文所使用的，“化合物V”是指N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺酰基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺，所述化合物通过以下化学结构描绘：
化合物V可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物V以及制备和使用化合物V的方法公开于WO 2018/107100和WO 2019/113476，通过引用并入本文。
如本文所使用的，“化合物VI”是指N-(苯磺酰基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺，所述化合物通过以下化学结构描绘：
化合物VI可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物VI以及制备和使用化合物VI的方法公开于WO 2018/064632和WO 2019/113476，通过引用并入本文。
如本文所使用的，“化合物VII”是指(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮，所述化合物通过以下化学结构描绘：
化合物VII可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物VII以及制备和使用化合物VII的方法公开于WO 2019/161078、WO 2020/102346和PCT申请第PCT/US2020/046116号，通过引用并入本文。
如本文所使用的，“化合物VIII”是指(11R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，所述化合物通过以下化学结构描绘：
化合物VIII可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物VIII以及制备和使用化合物VIII的方法公开于WO 2020/206080，通过引用并入本文。
如本文所使用的，“化合物IX”是指N-(苯磺酰基)-6-(3-氟-5-异丁氧基-苯基)-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺，所述化合物通过以下化学结构描绘：
化合物IX可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物IX以及制备和使用化合物IX的方法公开于WO 2016/057572，通过引用并入本文。
如本文所使用的，“化合物X”是指N-[(6-氨基-2-吡啶基)磺酰基]-6-(3-氟-5-异丁氧基-苯基)-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺，所述化合物通过以下化学结构描绘：
化合物X可以呈药学上可接受的盐的形式。化合物X以及制备和使用化合物X的方法公开于WO 2016/057572，通过引用并入本文。
如本文所使用的，术语“烷基”是指含有碳原子(如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个碳原子)的饱和支链或非支链的脂肪族烃。烷基可以是经取代的或未经取代的。
如本文所使用的，术语“π键”是指由相邻原子的p轨道形成的共价键。在两个原子之间存在多个键(即双键或三键)的情况下存在π键。例如，碳碳双键由一个π键组成，并且碳碳三键由两个π键组成。
如本文所使用的，术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷基。
如本文所使用的，术语“氟代烷基”是指被一个或多个氟原子取代的烷基。在一些实施例中，氟代烷基被1-6个氟原子取代。在一些实施例中，氟代烷基是全氟化的。
如本文所使用的，术语“烷氧基”是指与氧原子共价键合的烷基或环烷基。烷氧基可以是经取代的或未经取代的。
如本文所使用的，术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷氧基。
如本文所使用的，术语“氟代烷氧基”是指被一个或多个氟原子取代的烷氧基。在一些实施例中，氟代烷氧基被1-6个氟原子取代。在一些实施例中，氟代烷氧基是全氟化的。
如本文所使用的，“环烷基”是指具有3至12个碳(如3-10个碳)的环状、双环、三环或多环非芳香族烃基。“环烷基”涵盖单环、双环、三环、桥连环、稠合环和螺环，包含单螺环和二螺环。环烷基的非限制性实例是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、金刚烷基、降莰基和二螺[2.0.2.1]庚烷。环烷基可以是经取代的或未经取代的。
如本文所使用的，术语“芳基”是源自芳香族环的官能团或取代基，并且涵盖单环芳香族环和双环、三环和稠合的环体系，其中所述体系中的至少一个环是芳香族的。芳基的非限制性实例包含苯基、萘基和1,2,3,4-四氢萘基。
如本文所使用的，术语“杂芳基环”和“杂芳基”是指包括至少一个环原子的芳香族环，所述环原子是如O、N或S等杂原子。杂芳基涵盖单环和双环、三环、桥连环、稠合环和螺环体系(包含单螺环和双螺环)，其中所述体系中的至少一个环是芳香族的。杂芳基环的非限制性实例包含吡啶、喹啉、吲哚和二氢吲哚。
如本文所使用的，术语“杂环基环”和“杂环基”是指在环中含有3至12个原子(如3-10个原子)的非芳香族烃，所述环包括至少一个环原子，所述环原子是如O、N、S或Si等杂原子并且可以包含一个或多个不饱和键。“杂环基”环涵盖单环、双环、三环、多环、桥连环、稠合环和螺环，包含单螺环和二螺环。
“经取代的”指示“经取代的”基团中的至少一个氢被取代基置换。除非另外指示，否则“任选地经取代”的基团可以在所述基团的每个可取代位置处具有合适的取代基，并且当任何给定结构中的多于一个位置可以被选自指定基团的多于一个取代基取代时，在每个位置处的取代基可以相同或不同。
用于氮的保护基的实例包含例如氨基甲酸叔丁酯(Boc)、苄基(Bn)、对甲氧基苄基(PMB)、四氢吡喃基(THP)、氨基甲酸9-芴基甲基酯(Fmoc)、氨基甲酸苄酯(Cbz)、氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、氨基甲酸2,2,2-三氯乙酯(Troc)、氨基甲酸2-三甲基硅烷基乙酯(Teoc)、氨基甲酸烯丙酯(Aloc或Alloc)、甲酰胺、乙酰胺、苯甲酰胺、烯丙胺、三氟乙酰胺、三苯甲胺、亚苄基胺和对甲苯磺酰胺。氮保护基的完整列表可见于Wuts,P.G.M.“《格林氏有机合成中的保护基团：第五版(Greene'sProtective Groups in Organic Synthesis:Fifth Edition)》”,2014,约翰·威利父子出版公司(John Wiley and Sons)。
如本文所使用的，“氘化衍生物”意指相同的化学结构，其中一个或多个氢原子被氘原子置换。
如本文所使用的，“CFTR”意指囊性纤维化跨膜传导调控因子。
如本文所使用的，术语“CFTR调节剂(CFTR modulator)”、“CFTR调节化合物”和“CFTR调节剂(CFTR-modulating agent)”可互换地指直接或间接增加CFTR的活性的化合物。由CFTR调节剂引起的活性增加包含但不限于校正、增效、稳定化和/或扩增CFTR的化合物。
如本文所使用的，术语“CFTR校正剂”是指促进CFTR的加工和运输以增加细胞表面处的CFTR的量的化合物。本文所公开的化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX和化合物X是CFTR校正剂。
如本文所使用的，术语“CFTR增效剂”是指增加位于细胞表面处的CFTR蛋白的通道活性，从而使离子转运增强的化合物。本文所公开的新型化合物是CFTR增效剂。本文所公开的化合物III和化合物III-d是CFTR增效剂。
如本文所使用的，术语“CFTR增效剂增强剂”、“CFTR增效增强剂”和“CFTR共增效剂”可互换使用，并且是指增强CFTR增效的化合物。
如本文所使用的，术语“活性药物成分”(“API”)或“治疗剂”是指生物活性化合物。
术语“患者”和“受试者”可互换使用，并且是指包含人的动物。
术语“有效剂量”和“有效量”在本文中可互换使用，并且是指产生施用化合物所期望的效应(例如，改善CF或CF的症状，或减轻CF或CF的症状的严重程度)的化合物的量。有效剂量的确切量将取决于治疗目的，并且将由本领域技术人员使用已知技术确定(参见例如，Lloyd(1999)《药物复合的艺术、科学和技术(The Art,Science and Technology ofPharmaceutical Compounding)》)。
如本文所使用的，术语“治疗(treatment)”、“治疗(treating)”等通常意指改善受试者的CF的一种或多种症状，或减轻CF或CF的一种或多种症状的严重程度。如本文所使用的，“治疗”包含但不限于以下：受试者的生长增加、体重增益增加、肺中粘液减少、胰腺和/或肝功能改善、胸部感染减轻和/或咳嗽或呼吸急促减轻。可以根据本领域已知的标准方法和技术容易地评估这些症状中任一者的改善或其严重程度的减轻。
如本文所使用的，当提及两种或更多种化合物、药剂或另外的活性药物成分时，术语“与…组合”意指在彼此之前、与其同时或在其之后向患者施用两种或更多种化合物、药剂或活性药物成分。
当与组合物或剂型的成分的剂量、量或重量百分比结合使用时，术语“约”和“大约”包含由本领域的普通技术人员所认定提供了与由指定剂量、量或重量百分比获得的药理学作用等效的药理学效应的指定剂量、量或重量百分比的值或所述剂量、量或重量百分比的范围。术语“约”和“大约”可以是指由本领域技术人员确定的特定值的可接受误差，其部分取决于如何测量或确定所述值。在一些实施例中，术语“约”和“大约”意指给定值或范围的15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％或0.5％以内。
如本文所使用的，术语“室温”或“环境温度”意指15℃至30℃。
应理解，本发明的某些化合物可以作为单独立体异构体或对映异构体和/或那些立体异构体或对映异构体的混合物存在。如本文所公开的化学结构中所使用的，与立体原子的“楔形”或“散列”键指示已知绝对立体化学的手性中心(即，一种立体异构体)。如本文所公开的化学结构中所使用的，与立体原子的“波浪”键指示未知绝对立体化学的手性中心(即，一种立体异构体)。如本文所公开的化学结构中所使用的，与双键碳的“波浪”键指示E/Z异构体的混合物。如本文所公开的化学结构中所使用的，与立体原子的(“直”)键指示其中存在混合物(例如，外消旋体或富集物)。如本文所使用的，与双键碳的两个(“直”)键指示双键具有如所绘制的E/Z立体化学。如本文所公开的化学结构中所使用的，(即，与基团“A”的“直”键垂直的“波浪”线)指示基团“A”是其附着点位于在“波浪”线处终止的键的末端处的取代基。
本文所公开的某些化合物可以作为互变异构体存在，并且两种互变异构形式都是预期的，即使仅描绘单一互变异构结构。例如，化合物A的描述应理解为包含其互变异构体化合物B，且反之亦然，以及其混合物：
如本文所使用的，“最低功能(MF)突变”是指与最低CFTR功能(极低至无功能CFTR蛋白)相关的CFTR基因突变，并且包含例如与CFTR通道打开和关闭能力的严重缺乏相关的突变，称为缺陷型通道门控或“门控突变”；与CFTR的细胞加工以及其向细胞表面的递送的严重缺乏相关的突变；与没有(或最少)CFTR合成相关的突变；以及与通道传导的严重缺陷相关的突变。
如本文所使用的，术语“药学上可接受的盐”是指本公开的化合物的盐形式，其中盐是无毒的。本公开的化合物的药学上可接受的盐包含衍生自合适的无机和有机酸和碱的盐。例如，化合物的“游离碱”形式不含离子键结的盐。
关于本发明的一种或多种化合物或式，短语“其氘化衍生物或药学上可接受的盐”与“其氘化衍生物或前述中的任一项的药学上可接受的盐”可互换使用。关于本发明的一种或多种化合物或式，短语“其药学上可接受的盐和氘化衍生物”与“其药学上可接受的盐和前述中的任一项的氘化衍生物”可互换使用。
本领域的普通技术人员将认识到，当公开“化合物或其药学上可接受的盐”的量时，化合物的药学上可接受的盐形式的量是等效于化合物的游离碱的浓度的量。应注意，本文的化合物或其药学上可接受的盐的公开量是基于其游离碱形式。
合适的药学上可接受的盐是例如S.M.Berge等人《药物科学杂志(J.Pharmaceutical Sciences)》,1977,66,1-19中所公开的药学上可接受的盐。
例如，所述文章的表1提供了以下药学上可接受的盐：
表1：
药学上可接受的酸加成盐的非限制性实例包含：用无机酸，如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸或高氯酸形成的盐；用有机酸，如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸形成的盐；以及通过使用本领域中使用的其它方法，如离子交换形成的盐。药学上可接受的盐的非限制性实例包含己二酸盐、褐藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐和戊酸盐。衍生自适当碱的药学上可接受的盐包含碱金属、碱土金属、铵和N+(C1-4烷基)4盐。本公开还设想本文所公开的化合物的任何碱性含氮基团的季铵化。碱金属盐和碱土金属盐的合适的非限制性实例包含钠、锂、钾、钙和镁。药学上可接受的盐的另外的非限制性实例包含铵、季铵以及使用抗衡离子，如卤化物、氢氧化物、羧酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、较低烷基磺酸盐和芳基磺酸盐形成的胺阳离子。药学上可接受的盐的其它合适的非限制性实例包含苯磺酸盐和葡糖胺盐。
具体实施方式
除了式I的化合物、其药学上可接受的盐以及那些化合物和盐的氘化衍生物，本发明提供了式I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐。
例如，在一些实施例中，式I的化合物选自式Ia和Ib中的任一者的化合物：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中所有变量如式I所定义的。
例如，在一些实施例中，式I的化合物选自式Ia'和Ib'中的任一者的化合物：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中所有变量如式I所定义的。
例如，在一些实施例中，式I的化合物选自式IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf中的任一者的化合物：
以及
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中所有变量如式I所定义的。
本文还公开了具有选自表7中所描绘的式中的任一者的式的化合物、其氘化衍生物以及那些化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐。
治疗方法
本文所公开的新型化合物中的任一者，如式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐可以作为CFTR调节剂，即，所述化合物调节体内的CFTR活性。编码CFTR的基因中的发生突变的个体可以受益于接受CFTR调节剂。CFTR突变可能影响CFTR量，即细胞表面处的CFTR通道的数量，或者所述突变可能影响CFTR功能，即每个通道打开和转运离子的功能性能力。影响CFTR量的突变包含导致合成缺陷(I类缺陷)的突变、导致加工和运输缺陷(II类缺陷)的突变、导致CFTR合成减少(V类缺陷)的突变以及降低CFTR的表面稳定性(VI类缺陷)的突变。影响CFTR功能的突变包含导致门控缺陷(III类缺陷)的突变和导致传导缺陷(IV类缺陷)的突变。一些CFTR突变表现出多种类别的特征。CFTR基因中的某些突变导致囊性纤维化。
因此，在一些实施例中，本发明提供了治疗患者的囊性纤维化、减轻囊性纤维化的严重程度或对症治疗囊性纤维化的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的本文所公开的新型化合物中的任一者，如式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐，单独或与另一种活性成分，如另一种CFTR调节剂组合。在一些实施例中，所述患者具有F508del/最小功能(MF)基因型、F508del/F508del基因型(对于F508del突变是纯合的)、F508del/门控基因型，或F508del/残余功能(RF)基因型。在一些实施例中，所述患者是杂合的并且具有一个F508del突变。在一些实施例中，所述患者对于F508del突变是纯合的。在一些实施例中，所述患者对于N1303K突变是纯合的。在一些实施例中，所述患者具有G551D突变。
在一些实施例中，每天施用1mg至1000mg的本文所公开的化合物、其氘化衍生物或所述化合物或所述氘化衍生物的药学上可接受的盐。
在一些实施例中，所述患者是杂合的，并且具有选自表2的一个等位基因上的F508del突变和另一个等位基因上的突变：
表2：CFTR突变
在一些实施例中，本公开还涉及使用前述化合物的经同位素标记的化合物或其药学上可接受的盐的治疗方法，其中此类化合物和盐的式和变量各自并且独立地如上文或上述任何其它实施例所描述的，条件是其中一个或多个原子已被一个或多个原子质量或质量数不同于通常天然存在(经同位素标记)的原子的原子质量或质量数的原子置换。可商购获得的并且适合于本公开的同位素的实例包含氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如分别为2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
经同位素标记的化合物和盐可以多种有益的方式使用。所述化合物和盐可以适用于药物和/或各种类型的测定，如底物组织分布测定。例如，经氚(3H)和/或碳-14(14C)标记的化合物因制备相对简单和可侦测性优良而特别可用于各种类型的测定，如底物组织分布测定。例如，经氘(2H)标记的化合物在治疗上可用并且相较于经非2H标记的化合物具有潜在的治疗优点。一般来说，相较于未经同位素标记的化合物和盐，经氘(2H)标记的化合物和盐可以由于以下所述的动力学同位素效应而具有较高的代谢稳定性。较高的代谢稳定性直接转化为增加的体内半衰期或较低的剂量，这可以是所期望的。通常可以通过进行本文中的合成方案和相关描述中、实例部分中和制备部分中所公开的程序，用容易获得的经同位素标记的反应物置换未经同位素标记的反应物来制备经同位素标记的化合物和盐。
在一些实施例中，经同位素标记的化合物和盐是经氘(2H)标记的化合物和盐。在一些具体实施例中，经同位素标记的化合物和盐是经氘(2H)标记的，其中一个或多个氢原子被氘置换。在化学结构中，氘表示为“2H”或“D”。
当发现和开发治疗剂时，本领域技术人员尝试优化药物动力学参数，同时保留期望的体外特性。可以合理地假设，药物动力学特性较差的许多化合物容易发生氧化代谢。
经氘(2H)标记的化合物和盐可以通过一级动力学同位素效应来调节化合物的氧化代谢。一级动力学同位素效应是由同位素核的交换引起的化学反应的速率的变化，这继而又由此同位素交换后形成共价键所必需的基态能量的变化引起。较重同位素的交换通常使化学键的基态能量降低，并且因此使限速键断裂减少。如果沿着多产物反应的坐标在鞍点区域中或附近发生键断裂，则产物分布比率可以显著改变。解释：如果氘在不可交换位置处与碳原子键合，则kM/kD＝2-7的速率差异是典型的。关于进一步讨论，参见S.L.Harbeson和R.D.Tung,药物发现和开发中的氘(Deuterium In Drug Discovery and Development),《药物化学年度报告(Ann.Rep.Med.Chem.)》2011,46,403-417，所述文献通过引用并入本文。
并入到本公开的经同位素标记的化合物和盐中的同位素(例如，氘)的浓度可以由同位素富集因子定义。如本文所使用的，术语“同位素富集因子”意指特定同位素的同位素丰度与天然丰度之间的比率。在一些实施例中，如果本公开的化合物中的取代基表示为氘，则此类化合物对于每个指定氘原子的同位素富集因子为至少3500(在每个指定氘原子处的52.5％氘并入)、至少4000(60％氘并入)、至少4500(67.5％氘并入)、至少5000(75％氘并入)、至少5500(82.5％氘并入)、至少6000(90％氘并入)、至少6333.3(95％氘并入)、至少6466.7(97％氘并入)、至少6600(99％氘并入)或至少6633.3(99.5％氘并入)。
组合疗法
本文所公开的一方面提供了使用本文所公开的新型化合物中的任一者，如式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及前述中的任一者的药学上可接受的盐与至少一种另外的活性药物成分组合治疗囊性纤维化和其它CFTR介导的疾病的方法。
因此，在一些实施例中，本发明提供了治疗患者的囊性纤维化、减轻囊性纤维化的严重程度或对症治疗囊性纤维化的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的本文所公开的新型化合物中的任一者，如式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、其氘化衍生物以及那些化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐，单独或与至少一种另外的活性药物成分，如CFTR调节剂组合。
在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分选自粘液溶解剂、支气管扩张剂、抗生素、抗感染剂和抗炎剂。
在一些实施例中，所述另外的治疗剂是抗生素。本文中可用的示例性抗生素包含妥布霉素(tobramycin)，包含妥布霉素吸入粉(TIP)；阿奇霉素(azithromycin)；氨曲南(aztreonam)，包含氨曲南的气雾化形式；阿米卡星(amikacin)，包含其脂质体调配物；环丙沙星(ciprofloxacin)，包含其适用于通过吸入施用的调配物；左氧氟沙星(levoflaxacin)，包含其气雾化调配物；以及两种抗生素，例如磷霉素(fosfomycin)和妥布霉素的组合。
在一些实施例中，另外的药剂是粘液溶解剂。本文中可用的示例性粘液溶解剂包含
在一些实施例中，另外的药剂是支气管扩张剂。示例性支气管扩张剂包含沙丁胺醇(albuterol)、硫酸异丙喘宁(metaprotenerol sulfate)、乙酸吡布特罗(pirbuterolacetate)、沙美特罗(salmeterol)或硫酸特曲布尔(tetrabuline sulfate)。
在一些实施例中，另外的药剂是抗炎剂，即可以减轻肺部炎症的药剂。本文中可用的示例性此类药剂包含布洛芬(ibuprofen)、二十二碳六烯酸(DHA)、西地那非(sildenafil)、吸入型谷胱甘肽(glutathione)、吡格列酮(pioglitazone)、羟氯喹或辛伐他汀(simavastatin)。
在一些实施例中，另外的药剂是营养剂。示例性营养剂包含胰脂肪酶(胰酶替代物)，包含或 (先前为)、或谷胱甘肽吸入剂。在一个实施例中，另外的营养剂是胰脂肪酶。
在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分选自CFTR调节剂。在一些实施例中，所述CFTR调节剂是CFTR校正剂。在一些实施例中，所述CFTR调节剂是CFTR增效剂增强剂/共增效剂(例如，ASP-11)。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR扩增剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR通读剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR核酸疗法。
在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是ENaC抑制剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是TMEM16A调节剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是GPR39激动剂。
在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分选自：(a)化合物II以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(b)化合物IV以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(c)化合物V以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(d)化合物VI以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(e)化合物VII以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；以及(f)化合物VIII以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐。因此，在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐；以及至少一种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括(a)至少一种选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐；(b)至少一种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV以及其药学上可接受的盐和氘化衍生物；以及(c)至少一种选自以下的化合物：化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括(a)至少一种选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐；(b)至少一种选自以下的化合物：化合物II以及其药学上可接受的盐和氘化衍生物；以及(c)至少一种选自以下的化合物：化合物VII以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐。
在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐；(b)至少一种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；以及(c)至少一种选自公开于以下的化合物的化合物：WO 2016/105485、美国专利申请公开第2016-0120841号、美国专利申请公开第2017-0101405号、第WO 2017/009804号、第WO 2018/065921号、第WO 2017/062581号；Phuan,P.-W.等人《囊性纤维化杂志(J.Cyst.Fibros.)》2018,17(5),595–606；Pedemonte,N.等人《科学进展(Sci.Adv.)》2020,6(8),论文9669；Phuan,P.-W.等人《科学报告(Sci.Rep.)》2019,9(1),17640；Bose,S.等人《囊性纤维化杂志》2020,19补刊1,S25–S32；Crawford,D.K.《药理学与实验治疗学杂志(J.Pharmacol.Exp.Ther.)》2020,374(2),264–272；Brasell,E.J.等人《公共科学图书馆期刊(PLoS One)》2019,14(12),e0223954；Smith,N.J,Solovay,C.F.,《药品专利分析(Pharm.Pat.Anal.)》2017,6(4),179-188；Kunzelmann,K.等人,《药理学前沿(Front.Pharmacol.)》2019,10,3；或Son,J.-H.等人,《欧洲药物化学杂志(Eur.J.of Med.Chem.)》2020,112888。
在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐；(b)至少一种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；以及(c)至少一种选自以下的化合物：PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837/ABBV-974、GLPG2451/ABBV-2451、QBW251(伊森卡托(Icenticaftor))、GLPG3067/ABBV-3067(纳沃卡托(Navocaftor))、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、阿米洛利(amiloride)、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037(VX-371)、P-1055(VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5Rx、BI 1265162、ARO-ENaC1001、ETD002和DS-1039。
在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐；(b)至少两种选自公开于以下的化合物的化合物：WO 2019/195739、WO 2019/200246、WO 2021/030555、WO 2021/030556、WO 2010/053471、WO 2011/119984、WO 2011/133751、WO 2011/133951、WO 2015/160787、WO 2007/056341、WO 2009/073757、WO2009/076142、WO 2018/107100、WO 2019/113476、WO 2018/064632、WO 2019/152940、WO 2016/057572、WO 2021/030554、WO 2020/206080、WO 2016/105485、美国专利申请公开第2016-0120841号、美国专利申请公开第2017-0101405号、第WO 2017/009804号、第WO 2018/065921号、第WO 2017/062581号；Phuan,P.-W.等人《囊性纤维化杂志》2018,17(5),595–606；Pedemonte,N.等人《科学进展》2020,6(8),论文9669；Phuan,P.-W.等人《科学报告》2019,9(1),17640；Bose,S.等人《囊性纤维化杂志》2020,19补刊1,S25–S32；Crawford,D.K.《药理学与实验治疗学杂志》2020,374(2),264–272；Brasell,E.J.等人《公共科学图书馆期刊》2019,14(12),e0223954；Smith,N.J,Solovay,C.F.,《药品专利分析》2017,6(4),179-188；Kunzelmann,K.等人,《药理学前沿》2019,10,3；或Son,J.-H.等人,《欧洲药物化学杂志》2020,112888。
在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐；以及(b)至少两种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X、PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837/ABBV-974、GLPG2451/ABBV-2451、QBW251(伊森卡托)、GLPG3067/ABBV-3067(纳沃卡托)、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、阿米洛利、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037(VX-371)、P-1055(VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5Rx、BI 1265162、ARO-ENaC1001、ETD002和DS-1039以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐。
在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物II以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物组合施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及那些化合物和氘化衍生物的药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物IV以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物组合施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及那些化合物和氘化衍生物的药学上可接受的盐的药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物V以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物组合施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及那些化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VI以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物组合施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VII以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物组合施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、那些化合物的氘化衍生物以及前述化合物和氘化衍生物中的任一者的药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VIII以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物组合施用。
式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其氘化衍生物和其药学上可接受的盐中的每一者独立地可以每天一次、每天两次或每天三次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物II以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物II以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物IV以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物IV以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物V以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物V以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VI以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VI以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VIII以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物与至少一种选自化合物VIII以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。
在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；至少一种选自化合物II、化合物IV以及其药学上可接受的盐的化合物；以及至少一种选自化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；至少一种选自化合物II、化合物IV以及其药学上可接受的盐的化合物；以及至少一种选自化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；至少一种选自化合物II以及其药学上可接受的盐的化合物；以及至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物每天一次施用。在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；至少一种选自化合物II以及其药学上可接受的盐的化合物；以及至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物每天两次施用。
式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其氘化衍生物和其药学上可接受的盐可以单个药物组合物或单独的药物组合物施用。此类药物组合物可以每天一次或每天多次，如每天两次施用。如本文所使用的，短语给定量的API(例如，化合物II、化合物VII或其药学上可接受的盐)每天一次或两次或每天施用意指所述给定量通过每天给药(可能每天一次或两次发生)来施用。
在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物以第一药物组合物施用；并且至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物以第二药物组合物施用。
在一些实施例中，至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物以第一药物组合物施用；至少一种选自化合物II以及其药学上可接受的盐的化合物以第二药物组合物施用；并且至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物以第三药物组合物施用。
本领域已知的任何合适的药物组合物可以被用做式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271、化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐。用于化合物II以及其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于WO 2011/119984和WO2014/014841中，通过引用并入本文。用于化合物III以及其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于WO 2007/134279、WO 2010/019239、WO 2011/019413、WO 2012/027731和WO 2013/130669，并且用于化合物III-d以及其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于US 8,865,902、US 9,181,192、US 9,512,079、WO 2017/053455和WO 2018/080591，这些专利中的所有专利均通过引用并入本文。用于化合物IV以及其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于WO 2010/037066、WO 2011/127421和WO 2014/071122中，通过引用并入本文。用于化合物V以及其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于WO 2019/152940中，通过引用并入本文。用于化合物VI以及其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于WO 2019/079760中，通过引用并入本文。
药物组合物
本发明的另一方面提供了一种药物组合物，其包括至少一种选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；以及至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本发明提供了一种药物组合物，其包括至少一种选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，与至少一种另外的活性药物成分组合。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR调节剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR校正剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR增效剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是增强CFTR增效的化合物，即，CFTR增效剂增强剂/共增效剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR扩增剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR通读剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是CFTR核酸疗法。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是ENaC抑制剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是TMEM16A调节剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是GPR39激动剂。在一些实施例中，所述药物组合物包括至少一种选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，以及至少两种另外的活性药物成分，所述另外的活性药物成分中的每一种是CFTR校正剂。在一些实施例中，所述药物组合物包括至少一种选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，以及至少两种另外的活性药物成分，所述另外的活性药物成分中的一种是CFTR校正剂，并且所述另外的活性药物成分中的一种是CFTR增效剂增强剂。
在一些实施例中，本发明提供了一种药物组合物，其包括(a)至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；(b)至少一种选自化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其药学上可接受的盐的化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本发明提供了一种药物组合物，其包括(a)至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；(b)至少一种选自化合物II以及其药学上可接受的盐的化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本发明提供了一种药物组合物，其包括(a)至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；(b)至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，其包括(a)至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；(b)至少一种选自化合物II、化合物IV以及其药学上可接受的盐的化合物；(c)至少一种选自化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其药学上可接受的盐的化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，其包括(a)至少一种选自式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐的化合物；(b)至少一种选自化合物II以及其药学上可接受的盐的化合物；(c)至少一种选自化合物VII以及其药学上可接受的盐的化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本文所提供的药物组合物包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(b)至少一种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其药学上可接受的盐和氘化衍生物；(c)至少一种选自公开于以下的化合物的化合物：WO 2016/105485、美国专利申请公开第2016-0120841号、美国专利申请公开第2017-0101405号、第WO 2017/009804号、第WO 2018/065921号、第WO 2017/062581号；Phuan,P.-W.等人《囊性纤维化杂志》2018,17(5),595–606；Pedemonte,N.等人《科学进展》2020,6(8),论文9669；Phuan,P.-W.等人《科学报告》2019,9(1),17640；Bose,S.等人《囊性纤维化杂志》2020,19补刊1,S25–S32；Crawford,D.K.《药理学与实验治疗学杂志》2020,374(2),264–272；Brasell,E.J.等人《公共科学图书馆期刊》2019,14(12),e0223954；Smith,N.J,Solovay,C.F.,《药品专利分析》2017,6(4),179-188；Kunzelmann,K.等人,《药理学前沿》2019,10,3；或Son,J.-H.等人,《欧洲药物化学杂志)》2020,112888；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本文所提供的药物组合物包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(b)至少一种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X以及其药学上可接受的盐和氘化衍生物；(c)至少一种选自以下的化合物：PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837/ABBV-974、GLPG2451/ABBV-2451、QBW251(伊森卡托)、GLPG3067/ABBV-3067(纳沃卡托)、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、阿米洛利、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037(VX-371)、P-1055(VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5Rx、BI 1265162、ARO-ENaC1001、ETD002和DS-1039；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本文所提供的药物组合物包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(b)至少两种选自公开于以下的化合物的化合物：WO 2019/195739、WO2019/200246、WO 2021/030555、WO 2021/030556、WO 2010/053471、WO 2011/119984、WO2011/133751、WO 2011/133951、WO 2015/160787、WO 2007/056341、WO 2009/073757、WO2009/076142、WO 2018/107100、WO 2019/113476、WO 2018/064632、WO 2019/152940、WO2016/057572、WO 2021/030554、WO 2020/206080、WO 2016/105485、美国专利申请公开第2016-0120841号、美国专利申请公开第2017-0101405号、第WO 2017/009804号、第WO 2018/065921号、第WO 2017/062581号；Phuan,P.-W.等人《囊性纤维化杂志》2018,17(5),595–606；Pedemonte,N.等人《科学进展》2020,6(8),论文9669；Phuan,P.-W.等人《科学报告》2019,9(1),17640；Bose,S.等人《囊性纤维化杂志》2020,19补刊1,S25–S32；Crawford,D.K.《药理学与实验治疗学杂志》2020,374(2),264–272；Brasell,E.J.等人《公共科学图书馆期刊》2019,14(12),e0223954；Smith,N.J,Solovay,C.F.,《药品专利分析》2017,6(4),179-188；Kunzelmann,K.等人,《药理学前沿》2019,10,3；或Son,J.-H.等人,《欧洲药物化学杂志)》2020,112888；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本文所提供的药物组合物包括(a)选自以下的化合物：式I、I'、Ia、Ib、Ia'、Ib'、IIa、IIb、IIc、IId、IIe和IIf的化合物、化合物1-271以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐；(b)至少两种选自以下的化合物：化合物II、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII、化合物IX、化合物X、PTI-428、ASP-11、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766、PTI-801、FDL-176、PTI-808、GLPG1837/ABBV-974、GLPG2451/ABBV-2451、QBW251(伊森卡托)、GLPG3067/ABBV-3067(纳沃卡托)、ABBV-191、ELX-02、MRT5005、Lunar-CF、RCT223、阿米洛利、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037(VX-371)、P-1055(VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5Rx、BI 1265162、ARO-ENaC1001、ETD002和DS-1039以及其药学上可接受的盐和氘化衍生物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
本文所公开的任何药物组合物可以包括至少一种药学上可接受的载体。在一些实施例中，所述至少一种药学上可接受的载体选自药学上可接受的媒剂和药学上可接受的佐剂。在一些实施例中，所述至少一种药学上可接受的选自药学上可接受的填充剂、崩解剂、表面活性剂、粘合剂、润滑剂。
本文所述的药物组合物可用于治疗囊性纤维化和其它CFTR介导的疾病。
如上所述，本文所公开的药物组合物可以任选地进一步包括至少一种药学上可接受的载体。所述至少一种药学上可接受的载体可以选自佐剂和媒剂。如本文所使用的，所述至少一种药学上可接受的载体包含适合于所需的特定剂型的任何和所有溶剂、稀释剂、其它液体媒剂、分散助剂、悬浮液助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、固体粘合剂和润滑剂。《雷明顿：药学的科学与实践(Remington:The Science and Practice ofPharmacy)》,第21版,2005,D.B.Troy编辑,费城的利平科特·威廉斯·威尔金斯出版公司(Lippincott Williams&Wilkins,Philadelphia)以及《药剂百科全书(Encyclopedia ofPharmaceutical Technology)》,J.Swarbrick和J.C.Boylan编辑,1988-1999,纽约的马赛尔德克出版社(Marcel Dekker,New York)公开了用于调配药物组合物的各种载体和用于制备其的已知技术。除非任何常规载体与本公开的化合物不相容，如通过产生任何不合需要的生物作用或另外以有害方式与药物组合物的任何其它组分相互作用，否则预期其使用在本公开的范围内。合适的药学上可接受的载体的非限制性实例包含但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(如人血清白蛋白)、缓冲物质(如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸和山梨酸钾)、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐和电解质(如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠和锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂、糖(如乳糖、葡萄糖和蔗糖)、淀粉(如玉米淀粉和马铃薯淀粉)、纤维素和其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素)、粉状黄蓍胶、麦芽、明胶、滑石、赋形剂(如可可脂和栓剂蜡)、油类(如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、二醇类(如丙二醇和聚乙二醇)、酯类(如油酸乙酯和月桂酸乙酯)、琼脂、缓冲剂(如氢氧化镁和氢氧化铝)、海藻酸、无热原质水、等渗盐水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)、乙醇、磷酸盐缓冲液、无毒相容润滑剂(如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)、着色剂、脱模剂、涂层剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。
非限制性示例性实施例
1.一种化合物，其选自式I的化合物：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-C(RX1)2-、-CO-、-Si(RZ3)2-和
环A是选自苯基和5至6元杂芳基的环基团，其中所述环基团任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代；
每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、-ORX2和-N(RX2)2的基团取代)、C3-C8环烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基；
每个RX2独立地选自H和C1-C6烷基；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-O-、-CO-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基和Q的基团取代)、C3-C8环烷基、C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、5至10元杂芳基、-ORY1、-CO2RY1、-CORY1、-CON(RY1)2和-N(RY1)2；
或两个RY一起形成π键，所述两个RY中的一个在一个原子上并且其中的第二个在邻近原子上；
每个RY1独立地选自氢和C1-C6烷基，或与同一个氮键合的两个RY1一起形成3至6元杂环基；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-5个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟代烷基、C1-C6氟代烷氧基和卤素的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H、C1-C4烷基(任选地被氧代取代)以及C3-C6环烷基；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基、
■5至10元杂芳基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个Q独立地选自：
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○卤素、
○氧代、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素和-OCF3的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、-NH2和-NHCOMe的基团取代)、
○C1-C6烷氧基、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和羟基的基团取代)、
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆卤素、
◆C3-C8环烷基(任选地被CF3取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、CF3、OCF3和C1-C6烷基的基团取代)以及
○C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个CF3基团取代)以及
○3至10元杂环基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)以及
○氧代；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基(任选地被选自羟基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基的基团取代)、-OR2、-N(R2)2、-CO2R2、-CO-N(R2)2、-CN、C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5至6元杂芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、3至6元杂环基、-B(OR2)2、-SO2R2、-SR2、-SOR2、-PO(OR2)2和-PO(R2)2；
每个R2独立地选自氢、C1-C6烷基(任选地被1-6个独立地选自卤素的基团取代)、C1-C6氟代烷基和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基和C1-C6氟代烷氧基的基团取代)；
Z选自
其中环C选自C6-C10芳基和5至10元杂芳基；
RZ1选自氢、-CN、C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、C1-C6氟代烷基、3至6元杂环基、C3-C6环烷基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基；
RZ2选自氢、卤素、羟基、NH2、NH(CO)(C1-C6烷基)以及C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C3-C10环烷基的基团取代)，
或RZ1和RZ2一起形成选自氧代和＝N-OH的基团；
每个RZ3独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基和C6-C10芳基；或两个RZ3一起形成3至6元杂环基；
n选自4、5、6、7和8；并且
m选自0、1、2和3。
1a.一种化合物，其选自式I'的化合物：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-C(RX1)2-、-CO-、-Si(RZ3)2-和
环A是选自苯基和5至6元杂芳基的环基团，其中所述环基团任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代；
每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、-ORX2和-N(RX2)2的基团取代)、C3-C8环烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基；
每个RX2独立地选自H和C1-C6烷基；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-O-、-CO-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基和Q的基团取代)、C3-C8环烷基、C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、5至10元杂芳基、-ORY1、
-CO2RY1、-CORY1、-CON(RY1)2和-N(RY1)2；
或两个RY一起形成π键，所述两个RY中的一个在一个原子上并且其中的第二个在邻近原子上；
每个RY1独立地选自氢和C1-C6烷基，或与同一个氮键合的两个RY1一起形成3至6元杂环基；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被C1-C6烷基取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至6元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H、C1-C4烷基(任选地被氧代取代)以及C3-C6环烷基；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基、
■5至10元杂芳基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个Q独立地选自：
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○卤素、
○氧代、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素和-OCF3的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、-NH2和-NHCOMe的基团取代)、
○C1-C6烷氧基、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和羟基的基团取代)、
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆卤素、
◆C3-C8环烷基(任选地被CF3取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、CF3、OCF3和C1-C6烷基的基团取代)以及
○C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个CF3基团取代)以及
○3至10元杂环基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)以及
○氧代；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基(任选地被选自羟基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基的基团取代)、-OR2、-N(R2)2、-CO2R2、-CO-N(R2)2、-CN、C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5至6元杂芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、3至6元杂环基、-B(OR2)2、-SO2R2、-SR2、-SOR2、-PO(OR2)2和-PO(R2)2；
每个R2独立地选自氢、C1-C6烷基(任选地被1-6个独立地选自卤素的基团取代)、C1-C6氟代烷基和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基和C1-C6氟代烷氧基的基团取代)；
Z选自
其中环C选自C6-C10芳基和5至10元杂芳基；
RZ1选自氢、-CN、C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、C1-C6氟代烷基、3至6元杂环基、C3-C6环烷基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基；
RZ2选自氢、卤素、羟基、NH2、NH(CO)(C1-C6烷基)以及C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C3-C10环烷基的基团取代)，
或RZ1和RZ2一起形成选自氧代和＝N-OH的基团；
每个RZ3独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基和C6-C10芳基；或两个RZ3一起形成3至6元杂环基；
n选自4、5、6、7和8；并且
m选自0、1、2和3。
2.根据实施例1或实施例1a所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环A是选自苯基、吡唑和噁二唑的环基团。
3.根据实施例1至2中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基。
4.根据实施例1至3中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RX2独立地选自H和C1-C4烷基。
5.根据实施例1至4中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RX1独立地选自H、F、-CF3、-CH3、-OH、-OCH3和CN。
6.根据实施例1至5中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中X选自：
-CO-、-CH2-、
7.根据实施例1至6中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个Y独立地选自-C(RY)2-、-CO-、-NRYN-和
8.根据实施例1至7中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基。
9.根据实施例1至8中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RY独立地选自H、-OH、-F和-CH3。
10.根据实施例1至9中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RYN独立地选自：
■H、
■-CH2CF3、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○环丙基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环丁基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环己基、
○螺[2.2]戊烷、
○双环[4.1.0]庚烷、
○二螺[2.0.24.13]庚烷、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的苯基：F、Cl、Br、CN、甲基、丙基(任选地被一个羟基取代)、叔丁基、新戊基、-CHF2、-CF3、-C(CH3)2CF3、-OCH3、-O(2-丙基)、-OCHF2、-OCF3、-OCF2CHF2、-OCH2CF3、环丙基(任选地被一个CF3取代)、环丁基(任选地被1-2个选自氟代和甲基的基团取代)、螺[2.2]戊烷、双环[1.1.1]戊烷、双环[4.1.0]庚烷、二螺[2.0.24.13]庚烷、苯基、萘基以及
○萘基、
○2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃、
○2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯、
○四氢-2H-吡喃、
○任选地被一个选自甲基和丙基的基团取代的吡唑、
○任选地被一个选自甲基、叔丁基、CF3、-O(环丁基)、-OCHF2、任选地被一个CF3取代的环丙基、以及哌啶的基团取代的吡啶以及
○任选地被一个选自甲基和叔丁基的基团取代的嘧啶、
■任选地被1-2个选自甲基、叔丁基、环丙基和苯基(任选地被一个叔丁基取代)的基团取代的环丙基、
■任选地被1-3个选自氟代、甲基和苯基的基团取代的环丁基、
■环戊基、
■任选地被1-2个选自氟代、甲基、叔丁基、氰基、-CF3、-CH2NH2和-CH2NHAc的基团取代的环己基、
■任选地被一个选自氟代、甲基和叔丁基的基团取代的双环[1.1.1]戊烷、
■任选地被一个-OCH3基团取代的双环[2.2.1]庚烷、
■双环[2.2.2]辛烷、
■任选地被1-2个氟代基团取代的螺[3.3]庚烷、
■苯基、
■四氢-2H-吡喃、
■任选地被一个选自-COMe和-CO(环丙基)的基团取代的2-氮杂螺[3.3]庚烷、
■1,1-二氧化硫杂环丁烷、
■1,1-二氧化四氢-2H-噻喃、
■任选地被一个甲基取代的吡唑以及
■吡啶。
11.根据实施例1至10中任一项所述的化合物，其中每个RYN独立地选自：
H、-CH3、
12.根据实施例1至11中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)。
13.根据实施例1至12中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环B选自：
14.根据实施例1至13中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个R2为H。
15.根据实施例1至14中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个R1独立地选自C1-C6氟代烷基、-N(R2)2和-CN。
16.根据实施例1至15中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个R1独立地选自-CF3、-NH2,和-CN。
17.根据实施例1至16中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中RZ1选自C1-C6氟代烷基。
18.根据实施例1至17中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中RZ2选自卤素和羟基。
19.根据实施例1至18中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中Z选自
20.根据实施例1至19中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中Z选自：
21.根据实施例1至20中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中n选自5、6和7。
22.根据实施例1至21中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中
X选自-CH2-和-CO-；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、卤素和C1-C6烷基；
每个RYN独立地选自：
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C4烷基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○C1-C6烷基、
○C1-C6氟代烷氧基以及
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
■任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C8环烷基，
环B选自C3-C8环烷基，
每个R1独立地选自C1-C6氟代烷基和-NH2；
Z选自
RZ1选自C1-C6氟代烷基；
RZ2为羟基；
n为6；并且
m为2。
23.根据实施例1至22中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个-C(RY)2-独立地选自：
-CH2-、
24.根据实施例1至23中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个其中每个-NRYN-独立地选自：
25.根据实施例1至24中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环B为
26.根据实施例1至25中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中-(Y)n-是选自以下的基团：
27.根据实施例1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式IA：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；
n选自5、6和7；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C4烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被C1-C6烷基取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至6元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H和C1-C4烷基(任选地被氧代取代)；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基、-N(R2)2和-CN；并且
每个R2独立地选自氢、C1-C3烷基以及C1-C6氟代烷基。
28.根据实施例1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式IA'：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；
n选自5、6和7；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C4烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被C1-C6烷基取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至6元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H和C1-C4烷基(任选地被氧代取代)；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基、-N(R2)2和-CN；并且
每个R2独立地选自氢、C1-C3烷基以及C1-C6氟代烷基。
29.根据实施例27或实施例28所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中n为6。
30.根据实施例1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式IB：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；并且
每个Y独立地选自-CH2-、-C(CH3)2-、-CH(CH3)-、-CF2-、环丁基和-NRYN-，其中每个RYN独立地选自：
■被苯基取代的C1-C4烷基，所述苯基任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6氟代烷氧基和C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基的基团取代)的基团取代，以及
■任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C8环烷基。
31.根据实施例1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式IB'：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；并且
每个Y独立地选自-CH2-、-C(CH3)2-、-CH(CH3)-、-CF2-、环丁基和-NRYN-，其中每个RYN独立地选自：
■被苯基取代的C1-C4烷基，所述苯基任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6氟代烷氧基和C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基的基团取代)的基团取代，以及
■任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C8环烷基。
32.根据实施例27至31中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中X为-CO-。
33.根据实施例27至31中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中X为-CH2-。
34.一种选自表7的化合物的化合物、其药学上可接受的盐以及前述中的任一者的氘化衍生物。
35.根据实施例1至31或实施例34中任一项所述的化合物，其中所述化合物选自：
36.一种药物组合物，其包括根据实施例1至35中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
37.根据实施例36所述的药物组合物，其进一步包括一种或多种另外的治疗剂。
38.根据实施例37所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括具有CFTR调节活性的化合物或其盐或氘化衍生物。
39.根据实施例37或实施例38所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR校正剂。
40.根据实施例37至39中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺(化合物II)：
41.根据实施例37至40中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物IV)：
42.根据实施例37至41中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺酰基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物V)：
43.根据实施例37至42中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括N-(苯磺酰基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物VI)：
44.根据实施例37至43中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物VII)：
45.根据实施例37至44中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括(11R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物VIII)：
46.根据实施例37至45中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括至少一种选自以下的化合物：PTI-428、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766和PTI-801。
47.根据实施例37至46中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR增效剂增强剂。
48.根据实施例37至47中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ASP-11。
49.根据实施例37至48中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR增效剂。
50.根据实施例37至49中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括选自以下的化合物：N-(5-羟基-2,4-二-叔丁基-苯基)-4-氧代-1H-喹啉-3-甲酰胺(化合物III)：
以及N-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺(化合物III-d)：
51.根据实施例37至50中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括至少一种选自以下的化合物：FDL-176、PTI-808、GLPG1837/ABBV-974、GLPG2451/ABBV-2451、QBW251(伊森卡托)、GLPG3067/ABBV-3067(纳沃卡托)和ABBV-191。
52.根据实施例37至51中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR扩增剂。
53.根据实施例37至52中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括PTI-428。
54.根据实施例37至53中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR通读剂。
55.根据实施例37至54中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ELX-02。
56.根据实施例37至55中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括核酸疗法。
57.根据实施例37至56中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括至少一种选自以下的药剂：MRT5005、Lunar-CF和RCT223。
58.根据实施例37至57中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ENaC抑制剂。
59.根据实施例37至58中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括阿米洛利、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037(VX-371)、P-1055(VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5Rx、BI 1265162和ARO-ENaC1001.。
60.根据实施例37至59中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括TMEM16A调节剂。
61.根据实施例37至60中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ETD002。
62.根据实施例37至61中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括GPR39激动剂。
63.根据实施例37至62中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括DS-1039。
64.一种治疗囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用有效量的根据实施例1至35中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物或根据实施例36至63中任一项所述的药物组合物。
65.根据实施例64所述的方法，其进一步包括施用一种或多种另外的治疗剂。
66.根据实施例65所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括具有CFTR调节活性的化合物或其盐或氘化衍生物。
67.根据实施例65或实施例66所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR校正剂。
68.根据实施例65至67中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括化合物II。
69.根据实施例65至68中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括化合物IV。
70.根据实施例65至69中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括化合物V。
71.根据实施例65至70中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括化合物VI。
72.根据实施例65至71中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括化合物VII。
73.根据实施例65至72中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括化合物VIII。
74.根据实施例65至73中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括至少一种选自以下的化合物：PTI-428、ABBV-2222、ABBV-2851、GLPG2737、ABBV-3221、ABBV-3748、ABBV-3903、ABBV-119、ABBV-2851、FDL-169、ARN5562、ARN21586、ARN22081、ARN22652、ARN23765、ARN23766和PTI-801。
75.根据实施例65至74中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR增效剂增强剂。
76.根据实施例65至75中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ASP-11。
77.根据实施例65至76中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR增效剂。
78.根据实施例65至77中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括选自化合物III和化合物III-d的化合物。
79.根据实施例65至78中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括至少一种选自以下的化合物：FDL-176、PTI-808、GLPG1837/ABBV-974、GLPG2451/ABBV-2451、QBW251(伊森卡托)、GLPG3067/ABBV-3067(纳沃卡托)和ABBV-191。
80.根据实施例65至79中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR扩增剂。
81.根据实施例65至80中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括PTI-428。
82.根据实施例65至81中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括CFTR通读剂。
83.根据实施例65至82中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ELX-02。
84.根据实施例65至83中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括核酸疗法。
85.根据实施例65至84中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括至少一种选自以下的药剂：MRT5005、Lunar-CF和RCT223。
86.根据实施例65至85中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ENaC抑制剂。
87.根据实施例65至86中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括阿米洛利、ETD001、CF552、GS-9411、GS-5737、P-1037(VX-371)、P-1055(VX-551)、AZD5634、SPX-101、Ionis-ENaC-2.5Rx、BI 1265162和ARO-ENaC1001。
88.根据实施例65至87中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括TMEM16A调节剂。
89.根据实施例65至88中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括ETD002。
90.根据实施例65至89中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括GPR39激动剂。
91.根据实施例65至90中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括DS-1039。
92.根据实施例1至35中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物或根据实施例36至63中任一项所述的药物组合物，其用于治疗囊性纤维化。
93.一种根据实施例1至35中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物或根据实施例36至63中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗囊性纤维化的药物中的用途。
实例
通用实验程序
缩写
AcOH：乙酸
Boc酸酐((Boc)2O)：二碳酸二叔丁酯
Boc：丁氧基羰基
BOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷酯
t-BuOH：叔丁醇
CDCl3：氯仿-d
CDI：1,1'-羰基二咪唑
CD3OD：甲基-d4乙醇-d
CH2Cl2：二氯甲烷
CH3CN：乙腈
CO2：二氧化碳
Cs2CO3：碳酸铯
CuI：碘化铜(I)
DCE：1,2-二氯乙烷
DCM：二氯甲烷
DIEA：(DIPEA；N,N-二异丙基乙胺)
DMAP：4-二甲基氨基吡啶
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
DMP：戴斯-马丁高碘烷(Dess-Martin Periodinane)
DMSO：二甲基亚砜
DMSO-d6：二甲基亚砜-d6
EDCI：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺
ESI-MS：电喷雾电离质谱法
Et2O：二乙醚
Et3N或TEA：三乙胺
EtOAc：乙酸乙酯
EtOH：乙醇
Et2O：二乙醚
ESI-MS：电喷雾电离质谱法
Grubbs催化剂第2代：[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)咪唑烷-2-基亚基]-二氯-[(2-异丙氧基苯基)亚甲基]钌
H2：氢
HATU：N-[(二甲基氨基)-1H-1,2,3-三唑并-[4,5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵N-氧化六氟磷酸
HCl：盐酸
HOBT：羟基苯并三唑
HPLC：高效液相色谱法
H2：氢
H2O2：过氧化氢
KHSO4：硫酸氢钾
KOH：氢氧化钾
K2CO3：碳酸钾
KMnO4：高锰酸钾
KHCO3：碳酸氢钾
LC：液相色谱法
LiAlH4：氢化铝锂
LiOH：氢氧化锂
MeMgCl:甲基氯化镁
MeTHF或2-MeTHF或2-Me-THF：2-甲基四氢呋喃
MeOH：甲醇
MTBE：甲基叔丁基醚
MgSO4：硫酸镁
MS：质谱法
n-Bu4NF·H2O：四正丁基氟化铵一水合物
Na：钠
NaH：氢化钠
NaHCO3：碳酸氢钠
NaOAc：乙酸钠
NaOH：氢氧化钠
Na2SO4：硫酸钠
NBS：N-溴代琥珀酰亚胺
NH3：氨
NH4Cl：氯化铵
NH4HCO3：碳酸氢铵
NMP：N-甲基-2-吡咯烷酮
NMR：核磁共振
N2：氮
Pd/C：钯碳
Pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd(dppf)Cl2：1,1'-双(二苯基膦)二茂铁氯化钯(II)
Pd(OAc)2：乙酸钯(II)
PhI(OAc)2：(二乙酸碘)苯
POCl3：氯化磷酰
PtO2：氧化铂
RT或rt：室温
SFC：超临界流体色谱法
硅种类Pd：钯硅
SiO2：硅胶
TBAF：四正丁基氟化铵
TBAI：四丁基碘化铵
TBDPS-Cl或TBDPSCl：叔丁基二苯基氯硅烷
TEA：三乙胺
TEMPO：2,2,6,6-四甲基哌啶基氧基
TFA：三氟乙酸
THF：四氢呋喃
Ti(OEt)4：乙氧基钛(IV)
TMEDA：四甲基乙二胺
TMSCF3：三氟甲基三甲基硅烷
p-TsCl或甲苯磺酰氯：对甲苯磺酰氯或4-甲苯磺酰氯
T3P：1-丙烷膦酸酐
UPLC：超高效液相色谱法
Xantphos：4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽
詹氏催化剂1B(Zhan catalyst-1B)：二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)
通用UPLC-MS/HPLC-MS/GC分析方法：
LC方法A：使用由沃特世公司(Waters)制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002350)，以及在3.0分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法B：使用Kinetex C18柱(4.6X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS。温度：45℃；流动：2.0毫升/分钟；运行时间：3分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
LC方法C：使用Kinetex极性C18柱(3.0X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.2毫升/分钟；运行时间：6分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续4.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持2.0分钟。
LC方法D：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002350)，以及在5.0分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法E：使用Kinetex极性C18柱(3.0X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.2毫升/分钟；运行时间：3分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
LC方法F：使用Kinetex C18柱(4.6X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：2.0毫升/分钟；运行时间：6分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续4.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持2.0分钟。
LC方法G：使用默克密理博(Merckmillipore)Chromolith SpeedROD C18柱(50x4.6mm)的分析反相HPLC-MS，以及在6分钟内从5％至100％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.1％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.1％三氟乙酸)。
LC方法H：使用由沃特世公司制备的沃特世Cortex C18柱(3.0X 50mm，2.7μm粒度)的分析反相HPLC-MS(pn：186007370)，温度：55℃；流动：1.2毫升/分钟；流动相A：水(+0.1％三氟乙酸)。流动相B：乙腈(+0.1％三氟乙酸)。梯度：在4分钟内5％至100％ B，以100％ B平衡持续0.5分钟，在1.5分钟内平衡到5％ B。
LC方法I：使用Kinetex极性C18柱(3.0X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.0毫升/分钟；运行时间：6分钟。流动相：初始98％水(+0.1％甲酸)和2％乙腈(+0.1％甲酸)保持0.5分钟，然后线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续3.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持2.5分钟。
LC方法J：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(50X 2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002350)，以及在3.0分钟内从30％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法K：使用Kinetex EVO C18柱(4.6X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：2.0毫升/分钟；运行时间：4分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持2.0分钟。
LC方法L：使用X-Terra MS C18柱(4.6X 150mm，5μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：40℃；流动：1.5毫升/分钟；运行时间：10分钟。流动相：初始95％水(+10mM碳酸氢铵)和5％乙腈线性梯度至95％乙腈持续6.5分钟，然后在95％乙腈下保持3.5分钟。
LC方法M：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002350)，以及在3.0分钟内从50％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法N：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(30×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002349)，以及在2.9分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+5mM氢氧化铵)。流动相B＝乙腈。流速＝1.5毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法O：使用Kinetex极性C18柱(3.0X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.2毫升/分钟；运行时间：4分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续3.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
LC方法P：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(100X 2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002352)，以及在13.5分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝0.8毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法Q：使用由菲罗门公司(Phenomenex)出售的Onyx整体C18柱(50X 4.6mm)的分析反相HPLC-MS(pn：CH0-7644)，以及在2.9分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝12毫升/分钟，进样体积＝50μL，并且柱温＝25℃。
LC方法R：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(30×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002349)，以及在1.0分钟内从30％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法S：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(30×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002349)，以及在1.0分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.5毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法T：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(30X 2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002349)，以及在1.0分钟内从50％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法U：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(30×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002349)，以及在1.0分钟内从75％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％三氟乙酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法V：使用Kinetex EVO C18柱(2.1X 50mm 2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.0毫升/分钟；运行时间：1.5分钟。流动相：初始98％的流动相A(水:乙腈中的10mM甲酸铵，95:5，pH9)和2％流动相B(乙腈)线性梯度至98％乙腈持续1.15分钟，然后在98％乙腈下保持0.2分钟，然后返回至98％水和10mM甲酸铵持续0.05分钟并且保持0.1分钟。
LC方法W：使用XBridge C18柱(3.0X 30mm，5μm粒度)的分析反相HPLC-MS；流动：2.0毫升/分钟；运行时间：3分钟。流动相：初始95％水(+10mM碳酸氢铵)和5％乙腈至5％水(+10mM碳酸氢铵)和95％乙腈持续2分钟，然后在95％乙腈和5％水(+10mM碳酸氢铵)下保持1分钟。
LC方法X：使用Kinetex极性C18柱(3.0X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.2毫升/分钟；运行时间：5分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续4.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
LC方法Y：使用Luna C18柱(3.0X 50mm，3μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.5毫升/分钟；运行时间：3.5分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续1.3分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持2.2分钟。
LC方法Z：使用Luna C18柱(3.0X 50mm，3μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.5毫升/分钟；运行时间：2.5分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续1.3分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持1.2分钟。
LC方法AA：使用SunFire C18柱(4.6X 75mm，3.5μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃；流动：1.5毫升/分钟；运行时间：6分钟。流动相：初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续4.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持2.0分钟。
LC方法BB：使用XBridge C18柱(4.6X 75mm，5μm粒度)的分析反相HPLC-MS；流动：1.5毫升/分钟；运行时间：6分钟。流动相：初始95％水(+10mM碳酸氢铵)和5％乙腈至5％水(+10mM碳酸氢铵)和95％乙腈持续3分钟，然后在95％乙腈和5％水(+10mM碳酸氢铵)下保持3分钟。
LC方法CC：使用菲罗门ZB-1MS柱(0.25X 30mm，0.25μm粒度)的分析GC；起始温度50℃，以20℃/分钟升温至300℃，并且保持5分钟。
LC方法DD：使用默克密理博Chromolith SpeedROD C18柱(50X 4.6mm)的分析反相HPLC-MS，以及在12分钟内5％至100％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.1％三氟乙酸)。流动相B＝乙腈(+0.1％三氟乙酸)。
LC方法EE：使用Kinetex EVO C18柱(4.6X 50mm，2.6μm粒度)的分析反相HPLC-MS，温度：45℃，流动：2.0毫升/分钟，运行时间：3分钟。流动相条件；初始95％水(+0.1％甲酸)和5％乙腈(+0.1％甲酸)线性梯度至95％乙腈(+0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(+0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
LC方法FF：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(50X 2.1mm，1.7μm颗粒)的分析反相UPLC(pn：186002350)，以及在4.5分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行(流动相A＝水(+0.05％CF3CO2H)，流动相B＝乙腈(0.035％ CF3CO2H)，流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃)。
LC方法GG：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(30X 2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002349)，以及在1.0分钟内从50％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％甲酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％甲酸)。流速＝1.5毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法HH：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(30×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002349)，以及在1.0分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％甲酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％甲酸)。流速＝1.5毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法II：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(50X 2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002350)，以及在2.9分钟内从30％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％甲酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％甲酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法JJ：使用由沃特世公司制备的Acquity UPLC-MS BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm粒度)的分析反相UPLC-MS(pn：186002350)，以及在2.9分钟内从1％至99％流动相B的双梯度运行。流动相A＝水(+0.05％甲酸)。流动相B＝乙腈(+0.035％甲酸)。流速＝1.2毫升/分钟，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
共同中间体的制备
中间体1：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：3-(二苯亚甲基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
将3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(47.3g，197.43mmol)、二苯基甲胺(47g，259.33mmol)、Xantphos(9.07g，15.675mmol)和碳酸铯(131g，402.06mmol)于二噁烷(800mL)中的混合物通过氮气鼓泡脱气30分钟。加入Pd(OAc)2(3.52g，15.679mmol)，并且将系统用氮气吹扫三次。将反应混合物在100℃下加热18小时。将反应冷却至室温，并在硅藻土垫上过滤。将饼用乙酸乙酯洗涤，并且将溶剂在减压下蒸发，以得到呈黄色固体的3-(二苯亚甲基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(90g，84％)。ESI-MS m/z计算值384.10855，实验值385.1(M+1)+；保留时间：2.24分钟(LC方法B)。
步骤2：3-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向3-(二苯甲基亚基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(65g，124.30mmol)于甲醇(200mL)中的悬浮液中加入HCl(甲醇中的3M)(146mL的3M，438mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1.5小时，然后在减压下除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(2L)和二氯甲烷(500mL)中。将有机相用5％碳酸氢钠水溶液(3X 500mL)和盐水(2X 500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下去除溶剂。将残余物用庚烷(2X 50mL)研磨，并丢弃母液。将获得的固体用二氯甲烷和庚烷的混合物(1:1，40mL)研磨，并过滤以得到呈黄色固体的3-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(25.25g，91％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.24(s,1H),7.28(s,1H),5.98(br.s,2H),4.00(s,3H)。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-63.23(s,3F)ppm。ESI-MSm/z计算值220.046，实验值221.1(M+1)+；保留时间：1.62分钟(LC方法E)。
步骤3：3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下向3-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(18.75g，80.91mmol)于乙腈(300mL)中的溶液中按份加入N-溴代琥珀酰亚胺(18.7g，105.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌过夜。加入乙酸乙酯(1000mL)。将有机层用经乙酸乙酯(2X 200mL)反萃取的10％硫代硫酸钠溶液(3X 200mL)洗涤。将合并的有机萃取物用饱和的碳酸氢钠溶液(3X 200mL)、盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥，并且在真空中浓缩，以提供3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(25.46g，98％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)ppm 7.37(s,1H),6.01(br.s.,2H),3.93-4.03(m,3H)ppm。19FNMR(282MHz,CDCl3)ppm-64.2(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值297.9565，实验值299.0(M+1)+；保留时间：2.55分钟(LC方法F)。
步骤4：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
将3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(5g，15.549mmol)、(Boc)2O(11g，11.579mL，50.402mmol)、DMAP(310mg，2.5375mmol)和CH2Cl2(150mL)的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩，并通过硅胶色谱法(0-15％乙酸乙酯/庚烷)进行纯化，得到呈浅黄色固体的3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(6.73g，87％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)ppm 7.85(s,1H),3.96(s,3H),1.42(s,18H)ppm。19FNMR(282MHz,CDCl3)ppm-63.9(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值498.06134，保留时间：2.34分钟(LC方法B)。
中间体2：6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(247g，494.7mmol)于THF(1.0L)中的混合物中加入LiOH(47.2g，1.971mol)于水(500mL)中的溶液。将混合物在环境温度下搅拌18小时，得到黄色浆液。将混合物用冰浴冷却，并且用HCl(1000mL的2M，2mol)缓慢酸化，保持反应温度<15℃。将混合物用庚烷(1.5L)稀释，混合并分离有机相。将水相用庚烷(500mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将粗油溶解于庚烷(600mL)中，接种并在环境温度下搅拌18小时，得到稠密浆液。将浆液用冷庚烷(500mL)稀释，并且使用中等玻璃料收集沉淀。将滤饼用冷庚烷洗涤并空气干燥1小时，然后在45℃下在真空中干燥48小时，以得到6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(158.3g，83％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.38(s,1H),9.01(s,1H),1.50(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值383.99326，实验值330.9(M+1)+；保留时间：2.55分钟(LC方法FF)。
中间体3：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(盐酸盐)的制备
步骤1：2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯
在-78℃下在1.5小时的时段(内温-72℃至-76℃)向3,3,3-三氟-2-氧代-丙酸乙酯(25.15g，147.87mmol)于Et2O(270mL)中的溶液中逐滴加入THF中的溴(丁-3-烯基)镁(190mL的0.817M，155.23mmol)。将混合物在-78℃下搅拌20分钟。移除干冰-丙酮浴。在1小时内将混合物缓慢温热至5℃，加入到1N HCl水溶液(170mL)和碎冰(150g)的混合物中(pH＝4)。将两层分离。将有机层浓缩，并且将残余物与水相合并，并且用乙酸乙酯(2X 150mL)萃取。将合并的有机相用5％ NaHCO3水溶液(50mL)和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥。将混合物过滤并且浓缩，并用THF(2X 40mL)共蒸发，以得到呈无色油的2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(37.44g，96％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.77(m,1H),5.15-4.93(m,2H),4.49-4.28(m,2H),3.88(s,1H),2.35-2.19(m,1H),2.17-1.89(m,3H),1.34(t,J＝7.0Hz,3H)ppm。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-78.74(s,3F)ppm。
步骤2：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯
在0℃下向2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.29g，87.6％纯度，94.070mmol)于DMF(120mL)中的溶液按份加入NaH(60％于矿物油中，5.64g，141.01mmol)。将混合物在0℃下搅拌10分钟。加入苄基溴(24.13g，141.08mmol)和四丁基碘化铵(8.68g，23.500mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。加入NH4Cl(3g，0.6当量)。将混合物搅拌10分钟。加入30mL乙酸乙酯，然后是冰水(400g)。将混合物用CH2Cl2萃取并且将合并的有机层浓缩。通过硅胶色谱法(0-20％ CH2Cl2/庚烷)纯化，得到呈粉色油的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(26.05g，88％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ1.34(t,J＝7.2Hz,3H),2.00-2.19(m,3H),2.22-2.38(m,1H),4.33(q,J＝7.2Hz,2H),4.64(d,J＝10.6Hz,1H),4.84(d,J＝10.9Hz,1H),4.91-5.11(m,2H),5.62-5.90(m,1H),7.36(s,5H)ppm。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-70.5(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值316.12863，实验值317.1(M+1)+；保留时间：2.47分钟(LC方法B)。
步骤3：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸
将氢氧化钠(7.86g，196.51mmol)于水(60mL)中的溶液加入到2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.86g，78.593mmol)于甲醇(210mL)中的溶液中。将反应在50℃下加热过夜。将反应浓缩以去除甲醇，用水(150mL)稀释，并将羧酸钠盐用庚烷(1X 100mL)洗涤。用3N HCl水溶液将水溶液酸化至pH＝2。将羧酸用二氯甲烷(3X 100mL)萃取并经硫酸钠干燥。将溶液过滤并且浓缩，以得到呈淡黄色油的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(22.57g，97％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ14.31(br.s.,1H),7.55-7.20(m,5H),5.93-5.70(m,1H),5.17-4.91(m,2H),4.85-4.68(m,1H),4.67-4.55(m,1H),2.32-1.94(m,4H)ppm。19FNMR(282MHz,DMSO-d6)δ-70.29(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值288.09732，实验值287.1(M-1)；保留时间：3.1分钟(LC方法C)。
步骤4：N-[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯
向2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(21.92g，92.4％纯度，70.263mmol)于DMF(130mL)中的溶液中加入HATU(37.2g，97.836mmol)和Et3N(15g，148.24mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后加入N-氨基氨基甲酸叔丁酯(12.2g，92.312mmol)。将混合物在25℃下搅拌过夜并在40℃下搅拌1小时。将混合物用冰水(500g)稀释，并用CH2Cl2萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶色谱法(0％至30％乙酸乙酯/庚烷)进行纯化，得到呈白色固体的N-[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(26.08g，92％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ1.46(s,9H),2.10-2.31(m,3H),2.34-2.51(m,1H),4.60-4.72(m,1H),4.73-4.86(m,1H),4.95-5.19(m,2H),5.83(m,1H),6.28(br.s.,1H),7.30-7.51(m,5H),8.34(d,J＝2.6Hz,1H)ppm。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-73.6(s,3F)ppm。
步骤5：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(盐酸盐)
向N-[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(43.12g，107.2mmol)于CH2Cl2(200mL)中的溶液中加入HCl(100mL的4M，400mmol)，并且将混合物在环境温度下搅拌7小时。将溶剂在真空去除，从庚烷中提取残余物2次，并且使用高真空在真空中将所得固体干燥20小时，得到2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(盐酸盐)(35g，96％)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ9.92(s,2H),7.41-7.31(m,2H),7.30-7.24(m,2H),7.24-7.16(m,1H),5.72-5.57(m,1H),5.02-4.87(m,2H),4.71(d,J＝10.9Hz,1H),4.62(d,J＝11.0Hz,1H),3.70(s,2H),2.34-1.85(m,4H)ppm。ESI-MS m/z计算值302.1242，实验值303.2(M+1)+；保留时间：1.5分钟(LC方法A)。
中间体4：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的制备
步骤1：N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在环境温度下向6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(239.2g，621.1mmol)和2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(盐酸盐)(230.1g，761.2mmol)于乙酸乙酯(2.2L)中的混合物中加入吡啶(200mL，2.473mol)，得到沉淀。向混合物中加入1-丙烷膦酸酐(500g的50％w/w，785.7mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌12小时。通过缓慢加入水(2L)中的NaOH(149g的50％w/w，1.863mol)淬灭反应，并将混合物搅拌15分钟。分离有机相，并用乙酸乙酯(1L)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。在去除一半溶剂之后，将有机相用HCl水溶液(1000mL的1M，1mol)洗涤2次。将有机相经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗产物在温庚烷(2.5L)和MTBE(0.25L)中浆化，并且将混合物在环境温度下搅拌12小时，得到浅黄色浆液。过滤浆液，并将所得滤饼用1L 10％ MTBE/庚烷洗涤2次。将米白色固体空气干燥2小时，然后在40℃下在真空中干燥20小时，得到N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(379.9g，91％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),10.92(s,1H),10.35(s,1H),9.15(s,1H),7.50(d,J＝7.4Hz,2H),7.36(m,3H),5.87(m,1H),5.09(d,J＝16.9Hz,1H),5.02(d,J＝10.1Hz,1H),4.84(q,J＝11.4Hz,2H),2.35-2.12(m,4H),1.49(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值668.1069，实验值670.9(M+1)+；保留时间：3.5分钟(LC方法D)。
步骤2：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(102g，150.8mmol)溶解于无水乙腈(1000mL)中，并且加入DIEA(92mL，528.2mmol)。将所得的橙色溶液加热至70℃(内部温度)，从而制备澄清黄色溶液。然后将对甲苯磺酰氯(37.4g，196.2mmol)以12.47g的3等份间隔10分钟加入，并且然后加热反应另外30分钟。将反应冷却至室温，并且将乙腈在减压下浓缩。向混合物中加入1000mL MTBE，然后加入800mL水，并将混合物搅拌，并且将层分离。将有机层用柠檬酸(36.3g，188.9mmol)于700mL水中的溶液洗涤，然后用400mL饱和NaHCO3洗涤，然后用300mL盐水洗涤。然后将有机层经无水MgSO4干燥、过滤并且在减压下浓缩。将材料通过使用15％至50％的8％乙酸乙酯/己烷与己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(91.7g，93％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.18(s,1H),9.35(s,1H),7.55-7.47(m,2H),7.45-7.37(m,2H),7.36-7.28(m,1H),5.83-5.68(m,1H),5.10-4.93(m,2H),4.82(d,J＝10.5Hz,1H),4.69(d,J＝10.5Hz,1H),2.59-2.13(m,4H),1.56(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值650.0963，实验值651.0(M+1)+；保留时间：3.81分钟(LC方法D)。
中间体5：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸的制备
步骤1：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(R)-4-喹啉基-[(2S,4S)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇
向设置为20℃的经N2吹扫的带夹套反应器中加入乙酸异丙酯(IPAC，100L，0.173M，20Vol)，随后加入先前熔化的用少量反应溶剂制成浆液的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(5.00kg，17.345mol)和辛可尼丁(cinchonidine)(2.553kg，8.67mol)。将反应器设定为在1小时内将内部温度升温到80℃，其中固体在加热到设定温度后进入溶液中，然后将溶液保持在温度至少10分钟，然后冷却至70℃，保持并且用手性盐(50g、1.0重量％)进行接种。将混合物搅拌10分钟，然后在4小时内降温到20℃内部温度，然后在20℃下保持过夜。将混合物过滤，滤饼用乙酸异丙酯(10.0L、2.0vol)洗涤，并在真空下干燥。然后将滤饼在真空(50℃,真空)中干燥以得到4.7kg盐。通过用一部分乙酸异丙酯(94L、20vol，基于当前盐重量计)制成浆液将所得固体盐返回到反应器中，并泵送到反应器中并搅拌。然后将混合物加热到内部80℃，搅拌热浆液至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃,然后在20℃下搅拌过夜。然后将材料过滤，并将饼用乙酸异丙酯(9.4L、2.0vol)洗涤，拉干，将饼舀出并在真空(50℃,真空)中干燥以得到3.1kg的固体。将固体(3.1kg)和乙酸异丙酯(62L，基于盐固体重量计20vol)浆化并加入到反应器中，在N2吹扫下搅拌并加热到80℃，并保持在温度下至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃，然后搅拌过夜。将混合物过滤，将饼用乙酸异丙酯(6.2L，2vol)洗涤，拉干，舀出并在真空(50℃,真空)中干燥以得到2.25kg的固体盐。将固体(2.25kg)和乙酸异丙酯(45L，基于盐固体重量计20vol)浆化并加入到反应器中，在N2吹扫下搅拌并加热到80℃，保持在温度至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃，然后搅拌过夜。将混合物过滤，将饼用乙酸异丙酯(4.5L，2vol)洗涤，拉干，舀出并在真空(50℃)中干燥以得到呈米白色至棕褐色固体的(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(R)-4-喹啉基-[(2S,4S)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇(1.886kg，>98.0％ee)。通过使用菲罗门Lux i-Amylose-3柱(3μm，150X 4.6mm)和在20分钟内30％至70％流动相B的双等度梯度运行的安捷伦公司(Agilent)1200HPLC仪器来确定手性纯度(流动相A＝H2O(0.1％ CF3CO2H)，流动相B＝MeOH(0.1％CF3CO2H)，流速＝1.0毫升/分钟，进样体积＝2μL，并且柱温＝30℃，样品浓度：60％乙腈/40％水中的1mg/mL)。
步骤2：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸
将(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(R)-4-喹啉基-[(2S,4S)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇(50g，87.931mmol)于乙酸乙酯(500mL)中的悬浮液用盐酸水溶液(200mL的1M，200mmol)处理。在室温下搅拌15分钟后，将两相分离。将水相用乙酸乙酯(200mL)萃取两次。将合并的有机层用1N HCl(100mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将材料在高真空下干燥过夜以得到呈淡棕色油的(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(26.18g，96％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.46-7.31(m,5H),5.88-5.73(m,1H),5.15-4.99(m,2H),4.88(d,J＝10.3Hz,1H),4.70(d,J＝10.3Hz,1H),2.37-2.12(m,4H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-71.63(br s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值288.0973，实验值287.0(M-1)-；保留时间：2.15分钟(LC方法B)。
中间体6：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼的制备
步骤1：N-[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯
向(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(365g，1.266mol)于DMF(2L)中的溶液中加入HATU(612g，1.610mol)和DIEA(450mL，2.584mol)，并将混合物在环境温度下搅拌10分钟。向混合物中加入N-氨基氨基甲酸叔丁酯(200g，1.513mol)(加入后轻微放热)，并将混合物在环境温度下搅拌16小时。将反应倒入冰水(5L)中。通过过滤收集所得的沉淀物并用水洗涤。将固体溶解在乙酸乙酯(2L)中，并且用盐水洗涤。将有机相经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将油用乙酸乙酯(500mL)稀释，随后用庚烷(3L)稀释，并在环境温度下搅拌若干小时，得到稠密浆液。将浆液用另外的庚烷稀释并过滤以收集绒毛状白色固体(343g)。将滤液浓缩并且通过硅胶色谱法(0-40％乙酸乙酯/己烷)进行纯化，得到N-[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(464g，91％，与来自结晶的产物合并)。ESI-MS m/z计算值402.17664，实验值303.0(M+1-Boc)+；保留时间：2.68分钟(LC方法D)。
步骤2：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼
向N-[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(464g，1.153mol)于二氯甲烷(1.25L)中的溶液中并且加入HCl(925mL的4M，3.700mol)，并将混合物在环境温度下搅拌20小时。将混合物在真空中浓缩，去除大部分DCM。将混合物用乙酸异丙酯(1L)稀释，并用1L的冰水中的NaOH(140g的50％w/w,1.750mol)碱化至pH＝6。将有机相分离并用1L盐水洗涤，并将合并的水相用乙酸异丙酯(1L)萃取。将合并的有机相经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到暗黄色油。(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(358g，定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(s,1H),7.44-7.29(m,5H),5.81(m,J＝16.8,10.1,6.4Hz,1H),5.13-4.93(m,2H),4.75(dd,J＝10.5,1.5Hz,1H),4.61(d,J＝10.5Hz,1H),3.78(s,2H),2.43(m,J＝14.3,11.0,5.9Hz,1H),2.26-1.95(m,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值302.1242，实验值303.0(M+1)+；保留时间：2.0分钟(LC方法D)。
中间体7：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的制备
步骤1：N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在环境温度下向6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(304g，789.3mmol)和(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(270g，893.2mmol)于乙酸乙酯(2.25L)中的混合物中加入DIEA(425mL，2.440mol)。使用冰水浴向混合物中缓慢加入T3P(622g的50％w/w，977.4mmol)以保持温度<35℃(温度升高至34℃)，并将反应混合物在环境温度下搅拌18小时。加入另外的DIEA(100mL，574.1mmol)和T3P(95g，298.6mmol)，并且在环境温度下搅拌2天。仍然观察到起始材料，并且加入另外的T3P(252g，792mmol)并搅拌5天。用缓慢加入水(2.5L)淬灭反应，并将混合物搅拌30分钟。将有机相分离，并将水相用乙酸乙酯(2L)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗产物溶解在MTBE(300mL)中，并且用庚烷(3L)稀释，将混合物在环境温度下搅拌12小时，得到浅黄色浆液。将浆液过滤，并将所得固体空气干燥2小时，然后在40℃下在真空下干燥48小时。将滤液在真空下浓缩，并且通过硅胶色谱法(0-20％乙酸乙酯/己烷)纯化，并且与从结晶获得的材料合并，得到N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(433g，82％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.07(s,1H),10.91(s,1H),10.32(s,1H),9.15(s,1H),7.53-7.45(m,2H),7.45-7.28(m,3H),5.87(m,J＝17.0,10.2,5.1Hz,1H),5.09(m,J＝17.1,1.3Hz,1H),5.02(dd,J＝10.3,1.9Hz,1H),4.84(q,J＝11.3Hz,2H),2.37-2.13(m,4H),1.49(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值668.1069，实验值669.0(M+1)+；保留时间：3.55分钟(LC方法FF)。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在氮气下向N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(240g，358.5mmol)于无水乙腈(1.5L)中的溶液中加入DIEA(230mL，1.320mol)，并且将橙色溶液加热至70℃。在1小时内向混合物中加入3等份的对甲苯磺酰氯(80.5g，422.2mmol)。将混合物在70℃下搅拌9小时，然后加入另外的对甲苯磺酰氯(6.5g，34.09mmol)。将混合物搅拌共24小时，然后允许其冷却到环境温度。将乙腈在真空中去除，得到深橙色油，将其用乙酸乙酯(1.5L)和水(1.5L)稀释。将有机相分离并用500mL的1M HCl、500mL的盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(0-20％乙酸乙酯/己烷)的纯化得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200g，86％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.11(s,1H),9.10(s,1H),7.55-7.48(m,2H),7.47-7.28(m,3H),5.87(m,J＝16.7,10.2,6.4Hz,1H),5.11(m,J＝17.2,1.7Hz,1H),5.01(m,J＝10.2,1.5Hz,1H),4.74(d,J＝10.6Hz,1H),4.65(d,J＝10.6Hz,1H),2.55-2.42(m,2H),2.30(m,J＝11.3,10.3,6.9Hz,2H),1.52(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值650.0963，实验值650.0(M+1)+；保留时间：3.78分钟(LC方法FF)。
中间体8：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(1-乙氧基乙烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向配备有磁性搅拌棒的经烘箱干燥的3颈烧瓶(1L)中加入3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(10g，20.03mmol)和PdCl2(PPh3)2(1.4g，1.995mmol)。将烧瓶抽真空，并且用氮气填充三次。在惰性气氛下通过隔膜注射二噁烷(200mL)中的三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(7.6g，21.04mmol)。在75℃下将混合物搅拌14小时。将混合物冷却到室温，通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤并浓缩。通过硅胶色谱法(15:85乙酸乙酯:己烷)的纯化得到3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(1-乙氧基乙烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(8.6g，88％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.89(s,1H),4.78(d,J＝2.7Hz,1H),4.52(d,J＝2.8Hz,1H),3.97-3.92(m,5H),1.42-1.36(m,21H)ppm。ESI-MSm/z计算值490.1927，实验值491.2(M+1)+；保留时间：1.52分钟(LC方法J)。
步骤2：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(2-溴乙酰)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(1-乙氧基乙烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(8.5g，17.33mmol)于THF(100mL)和水(20mL)中的溶液中加入1-溴吡咯烷-2,5-二酮(3.4g，19.10mmol)。在室温下将反应混合物搅拌2小时。将反应通过NaHCO3溶液淬灭，通过二氯甲烷(3x 100mL)萃取，用盐水洗涤，将有机层合并，经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过硅胶色谱法(15:85乙酸乙酯:己烷)的纯化得到3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(2-溴乙酰)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(8.0g，85％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.04(s,1H),4.74(s,2H),3.99(s,3H),1.43(s,18H)ppm。ESI-MS m/z计算值540.0719，实验值542.0(M+1)+；保留时间：0.7分钟(LC方法M)。
步骤3：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向经烘箱干燥的250mL烧瓶中加入3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(2-溴乙酰)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(8g，14.78mmol)和烯丙基(三丁基)锡烷(5.2g，15.70mmol)以及苯(100mL)。然后，加入2-[(E)-(1-氰基-1-甲基-乙基)偶氮]-2-甲基-丙腈(2.5g，15.22mmol)，并且将烧瓶抽真空，并且用氮气填充3次。将混合物在70℃下搅拌15小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩至干燥。通过硅胶色谱法(0-15％乙酸乙酯/己烷)的纯化得到3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(5.7g，77％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.98(s,1H),5.89(m,1H),5.10(m,J＝17.1,1.6Hz,1H),5.02(m,J＝10.2,1.4Hz,1H),3.98(s,3H),3.26(t,J＝7.4Hz,2H),2.60-2.44(m,2H),1.43(s,18H)ppm。ESI-MS m/z计算值502.1927，实验值503.2(M+1)+；保留时间：1.58分钟(LC方法J)。
中间体9：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(4.1g，8.160mmol)于THF(50mL)中的溶液中加入MeOH(40mL)和水(30mL)。将LiOH(587mg，24.51mmol)分三份加入到混合物中(每次约196mg，其中间隔5分钟)。将混合物在60℃下搅拌1小时。在减压下去除THF和甲醇，并且然后加入22mL HCl(10％，约25mmol)，并且将有机化合物通过乙酸乙酯(3x 100mL)萃取。将有机相合并，用盐水(50mL)洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶色谱法(0％至50％乙酸乙酯/己烷)的纯化得到3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.4g，76％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.86(bs,1H),10.40(s,1H),9.46(s,1H),6.32-5.67(m,1H),5.34-4.77(m,2H),3.16(t,J＝7.3Hz,2H),2.83-2.29(m,2H),1.56(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值388.1246，实验值389.0(M+1)+；保留时间：1.45分钟(LC方法J)。
中间体10：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
将3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.21g，4.3982mmol)溶解于乙酸乙酯(55mL)中，并且用硅胶(18.5g，307.90mmol)处理。将反应在80℃下搅拌过夜。将反应过滤并浓缩以得到呈黄色固体的3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.98g，定量)。ESI-MS m/z计算值402.1403，实验值403.2(M+1)+；保留时间：2.42分钟(LC方法B)。
中间体11：6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备
步骤1：6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(5.18g，7.9522mmol)于MeOH(200mL)中的溶液中加入TEA(2.5410g，3.5mL，25.111mmol)。将反应用氮气吹扫5分钟，并且然后向反应混合物中加入Pd(dppf)Cl2(604.1mg，0.8091mmol)。然后将反应在80℃下在50psi的一氧化碳下搅拌6小时。将反应冷却至室温，并且然后在真空下去除MeOH。将残余物用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)稀释。将两层分离，并且将水层用乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。通过硅胶色谱法(0至20％乙酸乙酯/己烷)的纯化得到呈浅黄色半固体的6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.10g，62％)。ESI-MS m/z计算值630.1913，实验值631.5(M+1)+；保留时间：3.94分钟(LC方法G)。
步骤2：6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
向6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(3.10g，4.9165mmol)于THF(38mL)和DI水(12mL)的溶剂混合物中的溶液中加入LiOH(水(1))(1.06g，25.260mmol)。反应混合物变为黄色。将反应在室温下搅拌24小时。将反应混合物使用1M HCl水溶液酸化至pH 5，并且用水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)稀释。将两层分离，并且将乙酸乙酯层用DI H2O(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过硅胶色谱法(用0.3％乙酸缓冲的0％至5％甲醇/二氯甲烷)的纯化得到呈白色泡沫状固体的6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.22g，36％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),9.12(s,1H),7.57-7.48(m,2H),7.43-7.36(m,2H),7.37-7.31(m,1H),5.95-5.81(m,1H),5.18-5.07(m,1H),5.07-4.95(m,1H),4.74-4.59(m,2H),2.58-2.50(m,2H),2.48-2.40(m,1H),2.38-2.22(m,2H),1.53(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值616.17566，实验值617.2(M+1)+；保留时间：3.49分钟(LC方法G)。
中间体12：6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备
在-78C下向乙醚(45mL)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(3.08g，4.728mmol)加入n-BuLi(4.2mL的2.5M，10.5mmol)作为己烷中的溶液，并且将混合物在-78C下搅拌15分钟，然后加热到0C持续5秒，并且加入小片固体CO2。将混合物在0C下搅拌15分钟。将混合物用柠檬酸(15mL的1M，15mmol)稀释至pH 4，并加入乙酸乙酯。将有机层分离，并且用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并蒸发。通过硅胶色谱法(5-50％溶液(10％ MeOH/乙酸乙酯)/己烷)的纯化得到6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.67g，53％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.45(s,1H),9.61(s,1H),7.48-7.28(m,5H),5.78(m,J＝16.7,10.2,6.4Hz,1H),5.07(m,J＝17.1,1.6Hz,1H),5.00(d,J＝1.5Hz,1H),4.84(d,J＝11.0Hz,1H),4.69(d,J＝11.0Hz,1H),2.65-2.44(m,2H),2.43-2.33(m,1H),2.32-2.14(m,1H),1.59(s,9H)ppm；19FNMR(376MHz,氯仿-d)δ-61.10,-72.83ppm。ESI-MS m/z计算值616.17566，实验值617.2(M+1)+；保留时间：0.42分钟(LC方法T)。
中间体13：2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰肼(盐酸盐)的制备
步骤1：2-羟基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯
在-78℃下在3小时的时间段内向3,3,3-三氟-2-氧代-丙酸乙酯(30g，176.38mmol)于二乙醚(300mL)中的溶液中逐滴加入烯丙基(溴)镁(185mL的1M，185mmol)(内部温度：-74℃–-76℃)。将混合物在-78℃下搅拌45分钟。移除干冰-丙酮浴。在1小时的时间段内使混合物温热至约10℃，并且加入到1N HCl水溶液(210mL)和碎冰(400g)的混合物(pH 4)中。将混合物用乙酸乙酯萃取，用5％ NaHCO3水溶液、盐水洗涤，并且经无水Na2SO4干燥。将混合物过滤，浓缩并与己烷共蒸发以得到呈浅黄色油的2-羟基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(42.2g，90％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.33(t,J＝7.1Hz,3H),2.60-2.79(m,2H),3.84(br.s.,1H),4.24-4.48(m,2H),5.09-5.33(m,2H),5.59-5.82(m,1H)ppm。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-78.5(s,3F)ppm。
步骤2：2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯
在0℃下向2-羟基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(18.56g，83.105mmol)于DMF(100mL)中的溶液中加入NaH(5.3g，60％w/w，132.51mmol)。将反应搅拌15分钟，并且加入苄基溴(21.14g，15mL，121.12mol)和四丁基碘化铵(8.5g，23.012mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将反应用水(300mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3X 300mL)萃取，之后用盐水(500mL)洗涤，并经硫酸钠干燥。通过硅胶色谱法(20％至60％二氯甲烷/己烷)进行纯化，得到呈无色油的2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(22.01g，70％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.55-7.25(m,5H),6.00-5.80(m,1H),5.30-5.10(m,2H),4.86(d,J＝10.5Hz,1H),4.68(d,J＝10.5Hz,1H),4.33(q,J＝7.0Hz,2H),2.81(d,J＝7.0Hz,2H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值302.113，实验值303.5(M+1)+；保留时间：4.14分钟(LC方法G)。
步骤3：2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸
向2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸乙酯(28.99g，95.902mmol)于甲醇(150mL)中的溶液中加入NaOH(7.6714g，191.80mmol)于水(50mL)中的溶液。将反应混合物在40℃下搅拌3小时。将反应混合物在真空下浓缩，将残余物用水(200mL)稀释，并用二乙醚(200mL)洗涤。将水层用浓HCl酸化至pH 1，并用二乙醚(3X 200mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并且在真空下浓缩，以得到呈浅黄色液体的2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸(28.04g，99％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.55-7.28(m,5H),5.97-5.69(m,1H),5.33-5.17(m,2H),4.95-4.66(m,2H),2.91(d,J＝7.1Hz,2H)ppm。
步骤4：N-[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯
向2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酸(300g，1.094mol)于DMF(2L)中的溶液中加入HATU(530g，1.394mol)和DIEA(400mL，2.296mol)，并且将混合物在环境温度下搅拌10分钟。向混合物加入N-氨基氨基甲酸叔丁酯(152g，1.150mol)，并且将混合物在环境温度下搅拌36小时。将反应用冷水(4L)淬灭，并将混合物用乙酸乙酯(2L)萃取2次。将有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(0％至40％乙酸乙酯/己烷)进行的纯化得到呈缓慢结晶成米白色固体的油的N-[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(386.49g，91％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.00(d,J＝37.9Hz,1H),8.93(s,1H),7.46-7.39(m,2H),7.38-7.29(m,3H),6.01-5.64(m,1H),5.32(d,J＝17.1Hz,1H),5.17(d,J＝10.1Hz,1H),4.77(s,2H),2.96(m,2H),1.39(d,J＝17.3Hz,9H)ppm。ESI-MSm/z计算值388.16098，实验值389.0(M+1)+；保留时间：2.51分钟(LC方法D)。
步骤5：2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰肼(盐酸盐)
向N-[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(98.5g，240.94mmol)于二氯甲烷(400mL)中的溶液中加入二噁烷中的HCl(200mL的4M，800mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时，浓缩并且与二氯甲烷和己烷共蒸发，以得到呈米白色固体的2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰肼(盐酸盐)(81.15g，97％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.07(s,1H),7.70–7.16(m,5H),5.87–5.61(m,1H),5.45–5.09(m,2H),4.79(s,2H),3.6–3.4(m,2H),3.23–3.07(m,1H),3.04–2.87(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值288.10855，实验值289.2(M+1)+；保留时间：2.0分钟(LC方法H)。
中间体14：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的制备
步骤1：N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在环境温度下向6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(53g，137.6mmol)和2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰肼(盐酸盐)(55g，169.4mmol)于乙酸乙酯(500mL)中的混合物中加入吡啶(44mL，544mmol)。向混合物中加入T3P(111g的50％w/w，174.4mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌12小时。将反应通过缓慢加入水(500mL)中的NaOH(35g的50％w/w，437.5mmol)淬灭，并将混合物搅拌15分钟。将有机相分离，并用乙酸乙酯(500mL)萃取水相。将合并的有机相用HCl(250mL的1M，250mmol)、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(0％至20％乙酸乙酯/己烷)进行纯化，得到呈淡粉色固体的N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(66g，73％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.11(s,1H),10.91(s,1H),10.40(s,1H),9.16(s,1H),7.47(d,J＝6.9Hz,2H),7.42-7.29(m,3H),5.91(m,J＝17.1,10.6,7.1Hz,1H),5.37(dd,J＝17.2,1.9Hz,1H),5.22(dd,J＝10.4,1.8Hz,1H),4.85(d,J＝2.1Hz,2H),3.20-2.91(m,2H),1.50(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值654.09125，实验值657.0(M+1)+；保留时间：3.49分钟(LC方法FF)。
步骤2：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在50℃下将N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.15g，3.2641mmol)和DIEA(1.12g，1.5mL，8.6117mmol)于乙腈(43mL)中的溶液加热，然后在50℃下按份加入对甲苯磺酰氯(765mg，4.0127mmol)。将所得混合物在70℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却，用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)碱化，并用乙酸乙酯(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(0％至10％乙酸乙酯/庚烷)进行的纯化得到呈黄色稠油的N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.7g，80％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.18(br.s,1H),9.33(br.s,1H),7.53-7.27(m,5H),6.00-5.83(m,1H),5.32-5.13(m,2H),4.86-4.76(m,1H),4.73-4.64(m,1H),3.27-3.11(m,2H),1.55(s,9H)ppm。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-63.78(s,3F),-72.93(s,3F)ppm。保留时间：2.7分钟(LC方法O)。
中间体15：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的制备
步骤1：N-[2-[[[(2S)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将外消旋N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(24.5g，37.38mmol)通过制备型手性SFC通过将500μL注射物的32mg/mL溶液注射到ChiralPak IC(250x 21.2mm)，在40℃下以70毫升/分钟用8％ MeOH(20mM NH3)和92％CO2进行洗脱的5μm柱上进行纯化。第一洗脱对映异构体-1(在室温下4.17分钟处的峰1)以得到N-[2-[[[(2S)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(11.73g，96％)1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ10.59(s,1H),9.83(s,1H),9.28(s,1H),9.02(d,J＝29.6Hz,1H),7.48-7.33(m,5H),5.96-5.77(m,1H),5.41(d,J＝1.6Hz,1H),5.36-5.29(m,1H),4.86(s,2H),3.19(dd,J＝15.5,5.9Hz,1H),3.03(dd,J＝15.5,7.8Hz,1H),1.53(s,9H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-63.89,-73.76ppm。ESI-MS m/z计算值654.09125，实验值655.3(M+1)+；保留时间：0.53分钟(LC方法T)。
稍后的洗脱对映异构体2(在室温下6.63分钟处的峰2)以得到N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(11.62g，95％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.59(s,1H),9.74(s,1H),9.28(s,1H),9.06(s,1H),7.39(d,J＝4.4Hz,5H),6.02-5.79(m,1H),5.44-5.36(m,1H),5.34(dd,J＝10.3,1.3Hz,1H),4.91-4.81(m,2H),3.19(dd,J＝15.4,5.8Hz,1H),3.03(dd,J＝15.5,7.8Hz,1H),1.53(s,9H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-63.89,-73.76ppm。ESI-MS m/z计算值654.09125，实验值657.2(M+1)+；保留时间：0.53分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在氮气下将N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体2；24.97g，38.10mmol)溶解于无水乙腈(200mL)中，得到澄清黄色溶液。加入DIEA(19.91mL，114.3mmol)，并且溶液变成橙色。将溶液加热到70℃，然后以30分钟间隔以3份加入p-TsCl(7.99g，41.91mmol)，并加热约3小时。将反应混合物冷却至室温，并且在45℃下通过旋转蒸发将大部分MeCN蒸发。加入145mL MTBE，随后加入柠檬酸(11.0g，57.25mmol)于250mL水中的溶液，搅拌，然后加入73mL己烷。将层分离，并且用MTBE萃取水层。将有机层合并，经MgSO4干燥，在45℃下在旋转蒸发器上浓缩。通过硅胶色谱法(15％至80％的10％乙酸乙酯/己烷溶液/己烷)进行的纯化得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(20.47g，84％)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ10.18(s,1H),9.34(s,1H),7.48(d,J＝7.1Hz,2H),7.39(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(t,J＝7.3Hz,1H),6.00-5.81(m,1H),5.25(d,J＝17.1,1.6Hz,1H),5.20(d,J＝10.1,1.5Hz,1H),4.82(d,J＝10.6Hz,1H),4.70(d,J＝10.6Hz,1H),3.30-3.09(m,2H),1.56(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值636.0807，实验值637.3(M+1)+；保留时间：3.81分钟(LC方法FF)。
中间体16：6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备
在-78℃下向N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(570mg，0.8943mmol)于乙醚(12mL)中的溶液中加入n-BuLi(830μL的2.5M，2.075mmol)，并且将混合物在-78℃下搅拌15分钟，然后在5秒内加热到0℃，并且加入小片固体CO2。将混合物在0℃下搅拌15分钟。将混合物用乙酸乙酯稀释，并且加入2.8mL的1M柠檬酸，用纸将pH改变为4。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。通过硅胶色谱法(10-20％乙酸乙酯/己烷)的纯化得到6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(326mg，54％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.38(s,1H),9.55(s,1H),7.33(s,5H),5.90(s,1H),5.31-5.11(m,2H),4.88-4.76(m,1H),4.68(s,1H),3.21(d,J＝7.6Hz,2H),1.58(s,9H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-61.04,-73.19ppm。ESI-MS m/z计算值602.16003，实验值603.1(M+1)+；保留时间：0.8分钟(LC方法S)。
中间体17：6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备
在-78℃下向乙醚(89mL)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(4.7g，7.005mmol)加入n-BuLi(6.2mL的2.5M，15.50mmol)，并且将混合物在-78℃下搅拌20分钟，然后在5秒内加热到0℃，并且加入小片固体CO2。将混合物在0℃下搅拌15分钟。将混合物用柠檬酸(22mL的1M，22mmol)作为水中的溶液稀释，用纸将pH改变为4，并加入乙酸乙酯。将有机层分离，并且用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并蒸发。通过硅胶色谱法(5％至50％的10％MeOH/乙酸乙酯和己烷溶液)的纯化得到6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.1g，50％)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ10.43(s,1H),9.61(s,1H),7.42-7.31(m,4H),7.30-7.26(m,1H),5.94(m,J＝17.1,7.2Hz,1H),5.33-5.20(m,2H),4.84(d,J＝11.0Hz,1H),4.71(d,J＝11.0Hz,1H),3.24(m,J＝15.2,7.0Hz,2H),1.59(s,9H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-61.10,-73.16ppm。ESI-MS m/z计算值602.16003，实验值603.2(M+1)+；保留时间：0.4分钟(LC方法T)。
中间体18：2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰肼的制备
步骤1：6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-羟基-2-(三氟甲基)己酸乙酯
在氮气下向配备有回流冷凝器的干250-mL三颈烧瓶装入镁(2.2g，83.584mmol)、碘(5mg，0.0197mmol)。将混合物在搅拌下在55℃下整齐加热。在20分钟内逐滴加入2-(4-溴丁基)-1,3-二氧戊环(14.35g，68.634mmol)于THF(115mL)中的溶液，使得反应混合物连续沸腾。加入后，将暗反应混合物在78℃下加热1小时，并且冷却至室温。在20分钟的时间段内在-78℃下将所得溴-[4-(1,3-二氧戊环-2-基)丁基]镁(THF中)(115mL的0.6M，69mmol)缓慢逐滴加入到3,3,3-三氟-2-氧代-丙酸乙酯(11.547g，9mL，67.889mmol)于二乙醚(120mL)中的溶液中。将混合物在-78℃下搅拌20分钟。移除干冰-丙酮浴。在20分钟内将反应混合物缓慢温热至10℃，加入到1N盐酸水溶液(100mL)和碎冰(60g)的混合物中。将两层分离。将有机层浓缩，并且将残余物与水相合并，并且用乙酸乙酯(3X 100mL)萃取。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。将混合物过滤并浓缩以得到呈黄色油的6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-羟基-2-(三氟甲基)己酸乙酯(21.52g，93％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.87-4.81(m,1H),4.57(br s,1H),4.43-4.29(m,2H),3.99-3.93(m,2H),3.88-3.82(m,2H),2.03-1.95(m,1H),1.92-1.82(m,1H),1.71-1.62(m,2H),1.61-1.52(m,1H),1.51-1.37(m,3H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-78.66(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值300.11847，实验值323.2(M+23)+；保留时间：1.71分钟(LC方法Z)。
步骤2：2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酸乙酯
在0℃下向6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-羟基-2-(三氟甲基)己酸乙酯(21.5g，63.010mmol)于DMF(90mL)中的溶液中分份加入NaH(4.6g，115.01mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。逐滴加入溴甲基苯(21.139g，14.7mL，123.60mmol)，然后加入四丁基碘化铵(4.2g，11.371mmol)。将混合物缓慢温热至室温，并在室温下搅拌过夜。加入氯化铵(2.9g，54.215mmol)。将混合物在室温下搅拌10分钟。加入水(500mL)，随后加入MTBE和庚烷2:1的混合物(200mL)。将两层分离，并且将水相用MTBE和庚烷的混合物(2:1，2X 200mL)萃取。将合并的有机层用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥。将混合物过滤，并且在减压下浓缩。通过使用0％至30％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到呈无色油的2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酸乙酯(18.4g，58％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.46-7.29(m,5H),4.87-4.77(m,2H),4.69-4.60(m,1H),4.33(m,2H),3.98-3.91(m,2H),3.87-3.79(m,2H),2.05-1.96(m,2H),1.71-1.54(m,3H),1.50-1.37(m,3H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-70.53(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值390.1654，实验值413.2(M+23)+；保留时间：2.02分钟(LC方法Z)。
步骤3：2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酸
将氢氧化钠(7.5g，187.51mmol)于水(75mL)中的溶液加入到2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酸乙酯(28.9g，74.028mmol)于甲醇(230mL)中的溶液中。将反应在50℃下加热6小时。将反应浓缩以去除甲醇。将粗材料在水(300mL)中稀释，并将羧酸钠盐用庚烷(100mL)和MTBE(100mL)洗涤。用3N HCl水溶液将水溶液酸化至pH＝2。将羧酸用二氯甲烷(4X 200mL)萃取并经硫酸钠干燥。将溶液过滤并浓缩以得到呈澄清油的2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酸(27.75g，96％)，其在静置时变为固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.64(br s,1H),7.45-7.30(m,5H),4.91-4.80(m,2H),4.77-4.64(m,1H),4.02-3.92(m,2H),3.90-3.79(m,2H),2.22-2.01(m,2H),1.74-1.65(m,2H),1.64-1.55(m,1H),1.54-1.34(m,3H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-71.58(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值362.1341，实验值361.1(M-1)+；保留时间：4.29分钟(LC方法AA)。
步骤4：2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰肼
向2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酸(16.7g，46.089mmol)于DMF(175mL)中的溶液中加入三乙胺(20.546g，28.3mL，203.04mmol)和HATU(53.4g，140.44mmol)。将混合物搅拌10分钟。然后加入肼(水(1))(92.880g，90mL，1.8554mol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用水(1L)稀释，并用乙酸乙酯(3X 300mL)萃取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(300mL)、水(300mL)和盐水(300mL)洗涤。将有机层在减压下通过蒸发浓缩。通过使用20％至80％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到呈橙色油的2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰肼(9.3g，48％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(br s,1H),7.45-7.30(m,5H),4.85(t,J＝4.6Hz,1H),4.75(d,J＝10.1Hz,1H),4.61(d,J＝10.4Hz,1H),4.02-3.92(m,2H),3.91-3.77(m,4H),2.40-2.26(m,1H),2.19-2.06(m,1H),1.75-1.64(m,2H),1.61-1.40(m,3H),1.38-1.30(m,1H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-73.87(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值376.16098，实验值377.2(M+1)+；保留时间：1.68分钟(LC方法Z)。
中间体19：6-[5-[1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：N-[2-[[[2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在环境温度下向6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(11.2g，29.08mmol)和2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰肼(12.0g，31.88mmol)于乙酸乙酯(140mL)中的混合物中加入吡啶(9.5mL，117.5mmol)。向此溶液中加入T3P(24mL的50％w/w，37.71mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌16小时。将反应通过缓慢加入水(120mL)中的NaOH(50％于水中)(7.3mL的50％w/v，91.26mmol)淬灭，并将混合物在冰浴中搅拌5分钟，并且然后在室温下搅拌1小时。将有机相分离，并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机相用HCl(50mL的1M)、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。通过使用0％至25％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[2-[[[2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(16.4g，76％)。ESI-MS m/z计算值742.1437，实验值645.2(M+1)+；保留时间：0.43分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[2-[5-[1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在50℃下向N-[2-[[[2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.298g，3.0908mmol)和DIEA(1.2020g，1.62mL，9.3003mmol)于乙腈(37mL)中的溶液加入对甲苯磺酰氯(707mg，3.7084mmol)。在70℃下将反应搅拌2小时。将反应冷却至室温，并且然后用乙酸乙酯(150mL)稀释。将有机溶液用饱和氯化铵(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈黄色泡沫的N-[2-[5-[1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.026g，87％)。ESI-MS m/z计算值724.1331，实验值725.3(M+1)+；保留时间：4.33分钟(LC方法G)。
步骤3：6-[5-[1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向N-[2-[5-[1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.925g，2.5473mmol)于甲醇(50mL)中的溶液中加入TEA(798.60mg，1.1mL，7.8921mmol)。将反应用氩气吹扫2分钟。将Pd(dppf)Cl2(186mg，0.2542mmol)加入到反应混合物中。然后将反应在80℃下在50psi一氧化碳下搅拌6小时。将反应冷却至室温，并且然后在真空下去除甲醇。将残余物用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯(2X50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色泡沫的6-[5-[1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.678g，93％)：ESI-MS m/z计算值704.2281，实验值705.5(M+1)+；保留时间：4.13分钟(LC方法G)。
步骤4：6-[5-[1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向圆底烧瓶中装入乙酸(40mL)中的6-[5-[1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.661g，2.2041mmol)。将水(10mL)加入到反应混合物中。将反应在60℃下搅拌3小时。将反应冷却至室温。在真空下去除乙酸。将残余物用乙酸乙酯(150mL)稀释。将有机溶液用饱和碳酸氢钠(2X 50mL)和盐水(50mL)洗涤。将乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至30％丙酮/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色泡沫的6-[5-[1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.382g，89％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.34(s,1H),9.66(t,J＝1.4,1.4Hz,1H),9.16(s,1H),7.53–7.43(m,2H),7.43–7.27(m,3H),4.71(d,J＝10.6Hz,1H),4.62(d,J＝10.6Hz,1H),3.97(s,3H),2.48–2.32(m,2H),1.68–1.59(m,2H),1.57–1.45(m,13H)ppm。ESI-MS m/z计算值660.20184，实验值661.3(M+1)+；保留时间：3.62分钟(LC方法H)。
中间体20：6-[5-[(1R)-1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在40℃下将外消旋N-[2-[[[2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(16.4g，22mmol)通过使用ChiralPak IC柱(250X 21.2mm；5μm)的制备型手性SFC进行纯化。流动相为以70毫升/分钟流动的11％ MeOH(w/20mM NH3)，89％ CO2。甲醇(不含改性剂)中的样品的浓度为40mg/mL，进样体积400μL，出口压力为122巴，以得到对映异构体1，首先进行洗脱，N-[2-[[[(2S)-2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(6.77g，82％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.61(s,1H),9.84(s,1H),9.28(s,1H),9.01(s,1H),7.50-7.30(m,5H),4.93-4.81(m,2H),4.72(d,J＝10.5Hz,1H),4.03-3.90(m,2H),3.90-3.63(m,2H),2.49-2.29(m,1H),2.26-2.10(m,1H),1.71(p,J＝5.7,4.7Hz,2H),1.63-1.47(m,13H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-63.88,-73.71ppm。ESI-MS m/z计算值742.1437，实验值645.2(M+1)+；保留时间：0.44分钟(LC方法T)。
继续洗脱得到第二洗脱对映异构体2：N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(6.83g，83％)。ESI-MS m/z计算值742.1437，实验值645.2(M+1)+；保留时间：0.44分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)己酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体2)(2.97g，3.995mmol)于乙腈(50mL)中的溶液中加入对甲苯磺酰氯(936mg，4.910mmol)和DIEA(2mL，11.48mmol)。将所得混合物在70℃下加热80分钟，然后用乙醚(300mL)稀释，并且用水(500mL)、1MNaHCO3(2X 250mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.56g，88％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.19(s,1H),9.34(s,1H),7.49(d,J＝7.5Hz,2H),7.39(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(t,J＝7.3Hz,1H),4.86-4.75(m,2H),4.67(d,J＝10.6Hz,1H),4.00-3.90(m,2H),3.84-3.74(m,2H),2.52-2.28(m,2H),1.67(m,J＝7.6,7.1,4.7Hz,3H),1.56(s,9H),1.49(m,J＝7.6,5.8,3.1Hz,3H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-63.74,-72.67ppm。ESI-MS m/z计算值724.1331，实验值725.2(M+1)+；保留时间：0.67分钟(LC方法T)。
步骤3：6-[5-[(1R)-1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在不锈钢帕尔(Parr)反应容器中，将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.47g，3.405mmol)、三乙胺(1.42mL，10.19mmol)和Pd(dppf)Cl2(249mg，0.3403mmol)于甲醇(25mL)中的混合物通过鼓泡N2进行脱气1分钟。将容器密封并且置于100psi CO下，然后在80℃下搅拌80分钟。然后将混合物冷却至室温，过滤，用乙酸乙酯稀释，并且用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。通过使用5％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到6-[5-[(1R)-1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.03g，85％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.40(s,1H),9.40(s,1H),7.46(d,J＝7.1Hz,2H),7.40-7.34(m,2H),7.33-7.28(m,1H),4.92-4.76(m,2H),4.68(d,J＝10.6Hz,1H),4.02(s,3H),3.96-3.90(m,2H),3.85-3.76(m,2H),2.53-2.30(m,2H),1.67(m,J＝7.7,7.0,4.8Hz,3H),1.57(s,9H),1.53-1.41(m,3H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.75,-72.62ppm。ESI-MS m/z计算值704.2281，实验值705.2(M+1)+；保留时间：0.58分钟(LC方法T)。
步骤4：6-[5-[(1R)-1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在70℃下将6-[5-[(1R)-1-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.03g，2.881mmol)、乙酸(40mL)和水(10mL)的混合物搅拌2小时，然后冷却至室温，并且用200mL乙醚稀释。将有机溶液用水(2X 200mL)、1M NaHCO3(2X 150mL)洗涤，然后干燥(MgSO4)并蒸发。通过使用5％至40％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到6-[5-[(1R)-1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.644g，78％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.38(s,1H),9.74(d,J＝1.3Hz,1H),9.41(s,1H),7.45(d,J＝7.5Hz,2H),7.42-7.28(m,3H),4.81(d,J＝10.6Hz,1H),4.69(d,J＝10.6Hz,1H),4.02(s,3H),2.50-2.30(m,4H),1.77-1.61(m,2H),1.58(s,9H),1.52-1.40(m,2H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.77,-72.56ppm。ESI-MS m/z计算值660.20184，实验值661.2(M+1)+；保留时间：0.43分钟(LC方法T)。
中间体21：6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-羟基-2-(三氟甲基)戊酸乙酯
在-78℃下在20分钟的时间段内向3,3,3-三氟-2-氧代-丙酸乙酯(7.6980g，6mL，45.259mmol)于二乙醚(75mL)中的溶液中逐滴加入氯-[3-(1,3-二氧戊环-2-基)丙基]镁(52mL的0.92M，47.84mmol)。将混合物在-78℃下搅拌20分钟。移除干冰-丙酮浴。将反应混合物缓慢温热至10℃持续20分钟，然后加入到1N盐酸水溶液(200mL)和碎冰(50g)的混合物中。将两层分离，并将剩余水相用乙酸乙酯(3X 100mL)萃取。将有机层合并，用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。将混合物过滤并浓缩以得到呈无色油的5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-羟基-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(13.9g，97％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.90-4.82(m,1H),4.46-4.30(m,2H),4.01-3.92(m,2H),3.90-3.80(m,3H),2.12-2.02(m,1H),1.99-1.86(m,1H),1.77-1.58(m,3H),1.39-1.32(m,3H),1.31-1.23(m,1H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-78.65(s,3F)ppm。
步骤2：2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酸乙酯
在0℃下向5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-羟基-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(1.7g，4.9293mmol)于DMF(7mL)中的溶液中分份加入NaH(352mg，8.8008mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。逐滴加入溴甲基苯(1.5818g，1.1mL，9.2485mmol)，然后加入四丁基碘化铵(318mg，0.8609mmol)。将混合物缓慢温热至室温，并在室温下搅拌过夜。加入氯化铵(218mg，4.0754mmol)。将混合物在室温下搅拌10分钟。加入水(200mL)，随后加入MTBE和庚烷的混合物(2:1，100mL)。将两层分离，并且将水相用MTBE和庚烷的混合物(2:1，2X 100mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥。将混合物过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至30％乙酸乙酯/庚烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈无色油的2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(1.6g，78％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48-7.30(m,5H),4.89-4.79(m,2H),4.72-4.61(m,1H),4.42-4.29(m,2H),4.01-3.93(m,2H),3.89-3.80(m,2H),2.15-1.99(m,2H),1.77-1.63(m,3H),1.56-1.46(m,1H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-70.46(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值376.1498，实验值399.2(M+23)+；保留时间：1.98分钟(LC方法Z)。
步骤3：2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酸
将氢氧化钠(12.2g，305.02mmol)于水(120mL)中的溶液加入到2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酸乙酯(45.2g，120.10mmol)于甲醇(360mL)中的溶液中。将反应在50℃下加热过夜。将反应浓缩以去除甲醇。将粗材料在水(500mL)中稀释，并将羧酸钠盐用庚烷(200mL)和MTBE(200mL)洗涤。将水溶液用3N盐酸水溶液酸化至pH＝2。将羧酸用二氯甲烷(4X 200mL)萃取并经硫酸钠干燥。将溶液过滤并浓缩以得到呈黄色油的2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酸(43.2g，定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.94(br s,1H),7.51-7.29(m,5H),4.94-4.80(m,2H),4.70(d,J＝10.4Hz,1H),4.04-3.92(m,2H),3.90-3.77(m,2H),2.29-2.08(m,2H),1.80-1.64(m,3H),1.62-1.46(m,1H)ppm。19FNMR(377MHz,CDCl3)δ-71.58(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值348.1185，实验值347.2(M-1)-；保留时间：4.19分钟(LC方法AA)。
步骤4：2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰肼
向2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酸(6.004g，16.375mmol)于DMF(60mL)中的溶液中加入HATU(8.735g，22.973mmol)和三乙胺(3.6300g，5mL，35.873mmol)。将混合物搅拌10分钟。将水合肼(16.512g，16mL，329.84mmol)加入到反应混合物中。在室温下将反应搅拌1.5小时。将反应用水(200mL)和乙酸乙酯(200mL)稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯(2X 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3X 100mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至10％甲醇/DCM梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈橙色油的2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰肼(6.075g，97％)。ESI-MS m/z计算值362.1453，实验值363.3(M+1)+；保留时间：2.33分钟(LC方法G)。
步骤5：N-[2-[[[2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在环境温度下向6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(9.62g，24.98mmol)和2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰肼(10g，27.60mmol)于乙酸乙酯(100mL)中的混合物中加入吡啶(8.2mL，101.4mmol)，得到沉淀物。向混合物中加入T3P(20.6mL的50％w/v，32.37mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌5小时。将反应通过缓慢加入水(100mL)中的NaOH(50％于水中)(6.3mL的50％w/v，78.76mmol)淬灭，并将混合物搅拌1小时。将有机相分离，并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机相用HCl(40mL的1M)、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在20分钟内将残余物通过使用5％至30％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[2-[[[2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(10.92g，60％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.60(s,1H),9.84(s,1H),9.28(s,1H),8.99(s,1H),7.47-7.33(m,5H),4.90(t,J＝4.5Hz,1H),4.84(d,J＝10.4Hz,1H),4.75(d,J＝10.5Hz,1H),4.04-3.92(m,2H),3.88-3.79(m,2H),2.39(m,J＝16.6,11.2,5.7Hz,1H),2.28(m,J＝14.9,11.2,4.9Hz,1H),1.91-1.58(m,4H),1.52(s,9H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-63.88,-73.65ppm。ESI-MS m/z计算值728.12805，实验值631.0(M+1)+；保留时间：0.41分钟(LC方法T)。
步骤6：N-[2-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[2-[[[2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(10.92g，14.97mmol)于乙腈(200mL)中的溶液中加入对甲苯磺酰氯(3.5g，18.36mmol)和DIEA(7.5mL，43.06mmol)。将所得混合物在70℃下加热80分钟，然后用乙醚(300mL)稀释，并且用水(500mL)、1M NaHCO3(2X300mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。在15分钟内将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[2-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(9.67g，91％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.19(s,1H),9.34(s,1H),7.49(d,J＝7.5Hz,2H),7.39(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(t,J＝7.4Hz,1H),4.86(t,J＝4.1Hz,1H),4.80(d,J＝10.6Hz,1H),4.68(d,J＝10.6Hz,1H),3.99-3.89(m,2H),3.87-3.73(m,2H),2.71-2.34(m,2H),1.73(m,4H),1.56(s,9H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-63.74,-72.61ppm。ESI-MS m/z计算值710.1175，实验值713.2(M+1)+；保留时间：0.52分钟(LC方法T)。
步骤7：6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在450mL不锈钢帕尔反应容器中，将N-[2-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(9.67g，13.59mmol)、三乙胺(6mL，43.05mmol)和PdCl2(dppf)(500mg，0.6833mmol)于甲醇(70mL)和乙酸乙酯(30mL)中的混合物通过鼓泡N2进行脱气1分钟。将容器密封并且置于100psi CO下，然后在80℃下搅拌1小时。将混合物冷却至室温，并且加入PdCl2(dppf)(500mg，0.6833mmol)，置于100psi CO下，然后在80℃下搅拌3小时。然后将混合物冷却至室温，过滤，用乙酸乙酯稀释，并且用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。在15分钟内将残余物通过使用5％至30％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(8.26g，88％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.40(s,1H),9.40(s,1H),7.50-7.43(m,2H),7.41-7.34(m,2H),7.31(d,J＝7.3Hz,1H),4.85(t,J＝4.2Hz,1H),4.82(d,J＝10.6Hz,1H),4.68(d,J＝10.6Hz,1H),4.01(s,3H),3.98-3.88(m,2H),3.87-3.76(m,2H),2.56-2.39(m,2H),1.83-1.68(m,4H),1.57(s,9H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.76,-72.56ppm。ESI-MS m/z计算值690.21246，实验值691.3(M+1)+；保留时间：0.44分钟(LC方法T)。
步骤8：6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向圆底烧瓶中装入乙酸(55mL)中的6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.308g，3.3421mmol)。将水(14mL)加入到反应混合物中。将反应在60℃下搅拌3小时。将反应冷却至室温。在真空下去除乙酸。将残余物用乙酸乙酯(100mL)稀释。将有机溶液用饱和碳酸氢钠(2X 20mL)和盐水(20mL)洗涤。将乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色泡沫的6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.564g，72％)。ESI-MS m/z计算值646.1862，实验值647.4(M+1)+；保留时间：3.94分钟(LC方法G)。
中间体22：5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[2,2,2-三氟-1-[2-氟-5-(3-氧代丙基)苯基]-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：3-(3-溴-4-氟-苯基)丙酸
将三乙胺(16.6mL)置于圆底烧瓶中，并用冰水浴短暂冷却。以小份加入甲酸(11.2mL)。将混合物在室温下搅拌25分钟，并且加入DMF(75mL)。加入3-溴-4-氟-苯甲醛(20g，98.518mmol)，随后加入2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(14.2g，98.526mmol)。将混合物在100℃下加热16小时。然后将其冷却至室温，并倒入冰水(500mL)中。将混合物用二氯甲烷(2X 300mL)萃取。将合并的有机层用10％ NaOH水溶液(2X 200mL)萃取。将合并的碱性水溶液用浓HCl酸化至pH＝2。然后将所得混合物用乙酸乙酯(3X 150mL)萃取。将合并的有机层用水(200mL)、盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，以得到呈白色固体的3-(3-溴-4-氟-苯基)丙酸(23.2g，86％)。ESI-MS m/z计算值245.9692，实验值247.3(M+1)+；保留时间：3.09分钟(LC方法G)。
步骤2：3-(3-溴-4-氟-苯基)丙-1-醇
将3-(3-溴-4-氟-苯基)丙酸(23.2g，84.514mmol)溶解于THF(150mL)中，并将溶液在冰水浴中冷却。逐滴加入二甲基硫化硼烷复合物(28mL的10M，280mmol)。然后将混合物加热回流20小时。将其冷却至室温，并置于冰水浴中。逐滴加入MeOH以淬灭所有未反应的硼烷，并且在真空下浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯(200mL)中，并用HCl水溶液(80mL，3N)、NaOH水溶液(80mL，3N)、盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩，以得到呈无色油的3-(3-溴-4-氟-苯基)丙-1-醇(21.3g，97％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.39(dd,J＝6.6,2.3Hz,1H),7.15–7.06(m,1H),7.06–6.96(m,1H),3.66(t,J＝6.6Hz,2H),2.73–2.60(m,2H),1.91–1.80(m,2H),1.32(s,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值231.9899，实验值233.2(M+1)+；保留时间：3.16分钟(LC方法G)。
步骤3：3-(3-溴-4-氟-苯基)丙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷
在室温下向3-(3-溴-4-氟-苯基)丙-1-醇(10g，38.614mmol)于DMF(100mL)中的溶液中加入咪唑(3.2g，47.005mmol)，随后分份加入叔丁基-氯-二甲基-硅烷(6.8g，45.116mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时，并用乙酸乙酯(200mL)稀释，随后用水(300mL)稀释。将有机层分离并用水(3X 100mL)、盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的3-(3-溴-4-氟-苯基)丙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(12.52g，89％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.38(dd,J＝6.6,2.2Hz,1H),7.08(m,1H),7.02(t,J＝8.4,8.4Hz,1H),3.61(t,J＝6.1,6.1Hz,2H),2.69–2.60(m,2H),1.86–1.73(m,2H),0.91(s,9H),0.05(s,6H)ppm。ESI-MS m/z计算值346.0764，实验值347.3(M+1)+；保留时间：5.08分钟(LC方法G)。
步骤4：1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-乙酮
向3-(3-溴-4-氟-苯基)丙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(9.4g，25.710mmol)于THF(120mL)中的冷却(干冰-丙酮浴)溶液中加入己烷中的n-BuLi(11.5mL的2.5M，28.750mmol)，并且在N2球下搅拌25分钟。然后在5分钟内逐滴加入THF(10mL)中的2,2,2-三氟乙酸乙酯(7.1460g，6mL，50.297mmol)。将混合物在此温度下搅拌15分钟，并且去除冷浴。加入水(约40mL)，并用乙酸乙酯(60mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-乙酮(7.6g，73％)。ESI-MS m/z计算值364.1482，实验值365.5(M+1)+；保留时间：4.96分钟(LC方法G)。
步骤5：N-[6-溴-2-[5-[1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在室温下在10分钟内向1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-乙酮(1.38g，3.4079mmol)于DCM(8mL)中的溶液中逐滴加入DCM(8mL)中的(N-异氰亚氨基)三苯基膦(1.03g，3.4071mmol)。将棕色溶液在室温下搅拌过夜并浓缩。将残余物通过使用0％至15％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的N-[6-溴-2-[5-[1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(870mg，47％)。ESI-MS m/z计算值772.1527，实验值673.4(M-100)+；保留时间：5.22分钟(LC方法G)。
步骤6：5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在室温下向N-[6-溴-2-[5-[1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(3.2g，3.7228mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中加入TEA(1.0890g，1.5mL，10.762mmol)，随后加入Pd(dppf)Cl2(150mg，0.2050mmol)。将混合物用N2吹扫15分钟。然后将其密封并在80℃温度下经受约100psi CO持续6小时。冷却至室温后，将混合物转移到烧瓶中并浓缩。将残余物通过使用0％至15％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.8g，58％)。ESI-MS m/z计算值752.2476，实验值753.6(M+1)+；保留时间：5.07分钟(LC方法G)。
步骤7：5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[2,2,2-三氟-1-[2-氟-5-(3-羟丙基)苯基]-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在室温下向5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[1-[5-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷]氧基丙基]-2-氟-苯基]-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.8g，2.1521mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入THF中的四丁基氟化铵(20mL的1M，20mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。加入另外的THF中的四丁基氟化铵(4mL的1M，4mmol)，并将混合物搅拌另外一小时。然后将其用乙酸乙酯(50mL)稀释，并且用水(3X50mL)洗涤。将有机层用盐水进一步洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩，以得到呈白色固体的5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[2,2,2-三氟-1-[2-氟-5-(3-羟丙基)苯基]-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.4g，97％)。ESI-MS m/z计算值638.1611，实验值639.6(M+1)+；保留时间：4.04分钟(LC方法G)。
步骤8：5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[2,2,2-三氟-1-[2-氟-5-(3-氧代丙基)苯基]-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
在室温下向5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[2,2,2-三氟-1-[2-氟-5-(3-羟丙基)苯基]-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(300mg，0.4464mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入一整份的戴斯-马丁高碘烷(248mg，0.5847mmol)。将混合物在室温下搅拌3小时。加入NaS2O3(10ml NaHCO3中的1g)。10分钟后，加入DCM(20mL)和NaHCO3(10mL)，并将有机层分离。将有机层经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用0％至50％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[2,2,2-三氟-1-[2-氟-5-(3-氧代丙基)苯基]-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(288mg，96％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ10.52–10.19(m,1H),9.93–9.68(m,1H),9.36(d,J＝4.1Hz,1H),7.71(d,J＝7.3Hz,1H),7.41–7.12(m,1H),7.08–6.77(m,1H),6.15(s,1H),4.01–3.70(m,3H),3.07–2.91(m,2H),2.91–2.73(m,2H),1.71–1.36(m,7H)ppm。ESI-MS m/z计算值636.1455，实验值637.4(M+1)+；保留时间：4.09分钟(LC方法G)。
中间体23：6-[5-[1-苄氧基-2,2,2-三氟-1-(3-氧代丙氧基甲基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：2-(三氟甲基)丙-2-烯酰氯
在0℃下将草酰氯(1.8188g，1.25mL，14.33mmol)加入到2-(三氟甲基)丙-2-烯酸(2.0g，14.279mmol)和DMF(103.84mg，0.11mL，1.4206mmol)于DCM(20mL)中的搅拌溶液中。将黄色溶液在室温下搅拌1小时。这提供了用于进一步步骤的2-(三氟甲基)丙-2-烯酰氯的储备溶液(20mL，0.7M)。
步骤2：2-(三氟甲基)丙-2-烯酸苄酯
在-40℃下将2-(三氟甲基)丙-2-烯酰氯(3mL的0.7M，2.1mmol)，随后三乙胺(217.8mg，0.3mL，2.1524mmol)加入到苯甲醇(209mg，0.2mL，1.9327mmol)于DCM(6mL)中的无色溶液中。将白色悬浮液在-40℃下搅拌1小时，并且然后在0℃下搅拌1小时。将无色溶液用饱和NH4Cl水溶液(20mL)淬灭，用DCM(3X 10mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥，在真空下浓缩，以得到呈白色固体的2-(三氟甲基)丙-2-烯酸苄酯(429mg，96％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.44-7.33(m,5H),6.76(q,J＝1.6Hz,1H),6.46(d,J＝1.2Hz,1H),5.31(s,2H)ppm。19FNMR(377MHz,CDCl3)δ-65.58(s,3F)ppm。
步骤3：2-(三氟甲基)环氧乙烷-2-甲酸苄酯
将2-(三氟甲基)丙-2-烯酸苄酯(50.45g，214.79mmol)溶解在二噁烷(1000mL)和水(200mL)的混合溶剂中。将混合物在冰水浴中冷却。在剧烈搅拌下，加入NaHCO3(91.2g，1.0856mol)，然后在80分钟内分份加入过氧单硫酸钾(135.5g)。在室温下将混合物在相同温度下搅拌120分钟。加入水(300mL)和乙酸乙酯(300mL)，并且分离各层。将有机层用盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用5％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈无色油的2-(三氟甲基)环氧乙烷-2-甲酸苄酯(57.49g，98％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.62–7.28(m,5H),5.33(d,J＝12.3Hz,1H),5.28(d,J＝12.2Hz,1H),3.30–3.18(m,2H)ppm。
步骤4：2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-2-羟基-丙酸苄酯
向2-(三氟甲基)环氧乙烷-2-甲酸苄酯(3.9g，15.842mmol)于乙酸乙酯(16mL)中的溶液中加入3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙-1-醇(11.6g，36.885mmol)，随后加入三氟甲磺酸镁(5.8g，17.988mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，过滤。将滤液在真空下浓缩，并且通过使用0％至15％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-2-羟基-丙酸苄酯(5.633g，62％)。ESI-MS m/z计算值560.2206，实验值561.3(M+1)+；保留时间：4.48分钟(LC方法G)。
步骤5：2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酸苄酯
在0℃下向2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-2-羟基-丙酸苄酯(5.633g，9.5444mmol)于无水DMF(55mL)中的溶液中加入矿物油中的NaH(572.1mg，60％w/w，14.304mmol)。将反应在相同温度下搅拌20分钟，然后向反应混合物加入溴甲基苯(2.2987g，1.55mL，13.44mmol)和四丁基碘化铵(352.5mg，0.9543mmol)。将反应缓慢升温至室温并搅拌过夜。将反应用饱和氯化铵(100mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3X 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2X 100mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至20％二乙醚/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈澄清液体的2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酸苄酯(4.8g，77％)。ESI-MS m/z计算值650.2675，实验值651.6(M+1)+；保留时间：4.75分钟(LC方法G)。
步骤6：2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酸
向2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酸苄酯(4.62g，6.744mmol)于1,4-二噁烷(65mL)中的溶液中加入NaOH(20.3mL的2M，40.6mmol)，并且在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用HCl水溶液(1N)酸化至约pH 3。将水溶液用乙酸乙酯(3X 150mL)萃取。将合并的乙酸乙酯层用水(2X 150mL)、盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至15％甲醇/DCM梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈浅黄色稠油的2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酸(3.63g，96％)。ESI-MS m/z计算值560.2206，实验值561.2(M+1)+；保留时间：4.39分钟(LC方法G)。
步骤7：2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酰肼
在环境温度下向2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酸(3.6g，5.1366mmol)于DMF(50mL)中的溶液中加入HATU(2.92g，7.6796mmol)和DIEA(2.0034g，2.7mL，15.501mmol)。将反应在室温下搅拌10分钟。将肼(3.2672g，3.2mL，101.96mmol)加入到反应混合物中。将反应搅拌4小时。将水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)加入到反应混合物中。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯(2X 100mL)萃取。将合并的乙酸乙酯层用盐水(3X 100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用50％至80％二乙醚/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈浅粉色油的2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酰肼(2.71g，87％)。ESI-MS m/z计算值574.2475，实验值575.4(M+1)+；保留时间：4.19分钟(LC方法G)。
步骤8：N-[2-[[[2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向烧瓶中装入乙酸乙酯(50mL)中的2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酰肼(2.57g，4.4719mmol)和6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.87g，4.8555mmol)。然后，将吡啶(1.7604g，1.8mL，22.255mmol)和乙酸乙酯中的T3P(3.5758g，6.69mL的50％w/w，5.6191mmol)加入到反应混合物中。将反应在50℃下搅拌2小时。将反应用饱和氯化铵水溶液(200mL)和乙酸乙酯(150mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(2X 150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至20％丙酮/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色泡沫状固体的N-[2-[[[2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(3.49g，83％)。ESI-MS m/z计算值940.2302，实验值941.6(M+1)+；保留时间：4.94分钟(LC方法G)。
步骤9：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[2-[[[2-苄氧基-2-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-3,3,3-三氟-丙酰]氨基]氨基甲酰]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(3.49g，3.3350mmol)和DIEA(1.9663g，2.65mL，15.214mmol)于乙腈(50mL)中的溶液中加入TsCl(794.8mg，4.1690mmol)。将反应在70℃下搅拌2小时。在真空下去除溶剂，并且将残余物直接装载到柱上，并且通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈浅黄色硅胶的N-[2-[5-[1-苄氧基-1-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.98g，95％)。ESI-MS m/z计算值922.2196，实验值923.7(M+1)+；保留时间：5.08分钟(LC方法G)。
步骤10：6-[5-[1-苄氧基-1-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向N-[2-[5-[1-苄氧基-1-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.93g，3.1716mmol)于甲醇(35mL)中的溶液中加入TEA(3.2670g，4.5mL，32.286mmol)。将溶液用氮气吹扫5分钟。加入Pd(dppf)Cl2(465.2mg，0.6358mmol)。将高压釜密封并在75psi的一氧化碳下在80℃下加热5小时。将挥发物在真空下去除。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈浅黄色硅胶的6-[5-[1-苄氧基-1-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.59g，90％)。ESI-MS m/z计算值902.3146，实验值903.8(M+1)+；保留时间：4.86分钟(LC方法G)。
步骤11：6-[5-[1-苄氧基-2,2,2-三氟-1-(3-羟基丙氧基甲基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在室温下向6-[5-[1-苄氧基-1-[3-[叔丁基(二苯基)硅烷]氧基丙氧基甲基]-2,2,2-三氟-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.55g，2.8241mmol)于无水THF(70mL)中的溶液中加入THF中的四丁基氟化铵(7.1mL的1M，7.1mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应用水(150mL)和乙酸乙酯(150mL)稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯(2X 150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(250mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色粘性固体的6-[5-[1-苄氧基-2,2,2-三氟-1-(3-羟基丙氧基甲基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.783g，95％)。ESI-MS m/z计算值664.1968，实验值665.1(M+1)+；保留时间：3.91分钟(LC方法G)。
步骤12：6-[5-[1-苄氧基-2,2,2-三氟-1-(3-氧代丙氧基甲基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下向6-[5-[1-苄氧基-2,2,2-三氟-1-(3-羟基丙氧基甲基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.75g，2.6334mmol)于DCM(65mL)中的溶液中加入DMP(1.1g，2.5935mmol)。将反应在0℃下搅拌0.5小时，然后升温至室温，并且搅拌过夜。向反应加入饱和Na2S2O3(170mL)和饱和NaHCO3(130mL)，用DCM(3X150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈粘性米白色固体的6-[5-[1-苄氧基-2,2,2-三氟-1-(3-氧代丙氧基甲基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.696g，92％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.31(s,1H),9.63(s,1H),9.17(s,1H),7.45(dd,J＝8.0,1.7Hz,2H),7.41–7.32(m,3H),4.72(dd,J＝17.2,10.4Hz,2H),4.39(q,J＝11.7,11.7,11.7Hz,2H),3.97(s,3H),3.93(m,2H),2.68(m,2H),1.53(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值662.1811，实验值663.4(M+1)+；保留时间：3.42分钟(LC方法H)。
中间体24：6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：1-氧代-5-(三氟甲基)吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯
在0℃下将脲过氧化氢(62.7g，646.53mmol)分份加入到5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(40g，191.09mmol)于1,2-二氯乙烷(300mL)中的搅拌溶液中。然后在-10℃的温度下在30分钟内加入三氟乙酸酐(107.70g，72mL，507.65mmol)，伴冷浴(CO2/丙酮浴)。然后将反应混合物在0℃的温度下搅拌另外30分钟，并且然后在环境温度下搅拌1小时。然后将反应混合物倒入冷冰水(600mL)中。将混合物用二氯甲烷(300mL)稀释，并且然后将层分离。将水相用二氯甲烷(2X 200mL)萃取。将合并的有机相用水(2X 300mL)和盐水(1X 200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到呈浅黄色固体的1-氧代-5-(三氟甲基)吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(47.6g，90％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.89(s,1H),8.02-7.90(m,1H),7.86-7.72(m,1H),3.89(s,3H)ppm。19F NMR(282MHz,DMSO-d6)δ-62.00(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值221.02998，实验值222.1(M+1)+；保留时间：1.24分钟(LC方法E)。
步骤2：6-羟基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下将三氟乙酸酐(291.62g，193mL，1.3885mol)逐滴加入到1-氧代-5-(三氟甲基)吡啶-1-鎓-2-甲酸甲酯(51.058g，230.66mmol)于DMF(305mL)中的混合物中。然后将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在减压下浓缩以去除过量的三氟乙酸。将残余的DMF溶液逐滴投入0℃经冷却并搅拌的水体积(1L)中。通过过滤收集沉淀的固体，并且然后用水(300mL)洗涤。将固体在真空下干燥，以得到呈白色固体的6-羟基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(45.24g，86％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.90(d,J＝7.2Hz,1H),7.03(d,J＝7.2Hz,1H),4.02(s,3H)ppm。在NMR中未观察到一个可交换的质子。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-66.39(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值221.03，实验值222.1(M+1)+；保留时间：1.43分钟(LC方法E)。
步骤3：6-羟基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向6-羟基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(33.04g，149.41mmol)于硫酸(200mL的18.4M，3.68mol)中的冰冷溶液中逐滴加入硝酸(13mL的15.8M，205.4mmol)。5分钟后，移除冰浴，并将反应混合物在38℃下搅拌过夜。反应未完成，在室温下逐滴加入硝酸(3mL的15.8M，47.4mmol)，并将反应在38℃下加热4.5小时。将反应缓慢投入到冰冷的水(900mL)上，并将混合物在0℃下冷却15分钟。然后通过过滤分离所得固体，并且用水(600mL)洗涤。将固体在真空下干燥过夜，以得到呈白色固体的6-羟基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(39.49g，99％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),3.95(s,3H)ppm。在NMR中未观察到一个可交换的质子。19F NMR(282MHz,DMSO-d6)δ-64.56(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值266.0151，实验值267.1(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法E)。
步骤4：6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
将6-羟基-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(10g，37.575mmol)和二氯磷酸苯酯(48.008g，34mL，227.55mmol)的混合物在170℃下加热90分钟。冷却至室温后，将混合物用乙酸乙酯(400mL)稀释，并用盐水(2X 200mL)洗涤。将有机相在无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶色谱法(0％至15％乙酸乙酯/庚烷)进行的纯化得到呈黄色固体的6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(5.45g，50％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.75(s,1H),4.07(s,3H)ppm。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-64.12(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值283.9812，实验值285.0(M+1)+；保留时间：1.95分钟(LC方法E)。
伯胺的代表性制备：
方法1：[5-[1-(三氟甲基)环丙基]-2-吡啶基]甲胺(二盐酸盐)
步骤1：5-[1-(三氟甲基)环丙基]吡啶-2-甲腈
将二氰锌(65mg，0.55mmol)、Pd(dppf)Cl2(20mg，0.027mmol)和锌粉(4mg，0.061mmol)称重装入配有搅拌棒的螺旋盖小瓶中。然后将小瓶加盖，并用氮气吹扫。通过注射器加入DMF(2.5mL)和2-氯-5-[1-(三氟甲基)环丙基]吡啶(200mg，0.90mmol)，并将反应加热至150℃持续90分钟。然后将反应混合物冷却至室温，并在30mL水与30mL乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯萃取。将合并的有机物用盐水洗涤，并经硫酸钠干燥，然后浓缩。将所得粗材料通过使用0％至10％甲醇/DCM梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到5-[1-(三氟甲基)环丙基]吡啶-2-甲腈(118mg，62％)。ESI-MS m/z计算值212.05614，实验值213.1(M+1)+；保留时间：0.55分钟(LC方法S)。
步骤2：N-[[5-[1-(三氟甲基)环丙基]-2-吡啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
在经氮气冲洗的圆底烧瓶中将5-[1-(三氟甲基)环丙基]吡啶-2-甲腈(118mg，0.6mmol)溶解于THF(4mL)中，并且在冰浴中冷却至0℃。将THF中的LAH(680μL的2M，1.36mmol)逐滴加入到反应混合物中，并在加入完成后在0℃下继续搅拌一小时。将反应混合物用5mL二乙醚稀释，然后通过依次加入0.1mL水、0.1mL 15％ NaOH水溶液和0.3mL水淬灭。然后将反应混合物温热到室温并搅拌30分钟。加入硫酸钠，并且将反应混合物过滤。将滤液浓缩以得到呈浅黄色固体的[5-[1-(三氟甲基)环丙基]-2-吡啶基]甲胺。ESI-MS m/z计算值216.08743，实验值217.1(M+1)+；保留时间：0.33分钟(LC方法T)。
将残余物溶解于甲醇(3mL)中，并加入二碳酸二叔丁酯(140mg，0.6415mmol)和三乙胺(250μL，1.794mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟，然后通过旋转蒸发浓缩。将残余物通过使用0％至100％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[[5-[1-(三氟甲基)环丙基]-2-吡啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(65mg，23％)。ESI-MS m/z计算值316.13986，实验值317.3(M+1)+；保留时间：0.53分钟(LC方法T)。
步骤3：[5-[1-(三氟甲基)环丙基]-2-吡啶基]甲胺(二盐酸盐)
将N-[[5-[1-(三氟甲基)环丙基]-2-吡啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(65mg，0.21mmol)与HCl(1mL，4M，4mmol)合并作为二噁烷和DCM(1mL)的溶液，并且在室温下搅拌一小时。然后将反应混合物蒸发至干燥。加入二氯甲烷和己烷，并且第二次蒸发反应以得到[5-[1-(三氟甲基)环丙基]-2-吡啶基]甲胺(二盐酸盐)(60mg，定量)。ESI-MS m/z计算值216.08743，实验值217.1(M+1)+；保留时间：0.32分钟(LC方法T)。
方法2：[3-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲氧基]苯基]甲胺(盐酸盐)
步骤1：3-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲氧基]苄腈
将3-羟基苄腈(200mg，1.68mmol)与11mL THF中的[1-(三氟甲基)环丙基]甲醇(240mg，1.713mmol)和三苯基膦(530mg，2.02mmol)合并。将反应混合物在冰浴中冷却到0℃，并逐滴加入偶氮二甲酸二异丙酯(450μL，470mg，2.32mmol)。在15分钟后，将反应温热至室温，并在室温下继续搅拌16小时。然后将反应混合物温热至50℃持续另外2小时。在冷却至室温之后，通过旋转蒸发去除溶剂。将所得残余物溶解于50mL乙酸乙酯中，并且用1MNaOH水溶液洗涤。然后将有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且浓缩。将粗材料通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到3-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲氧基]苄腈。ESI-MS m/z计算值241.0714，实验值242.0(M+1)+；保留时间：0.66分钟(LC方法T)。
步骤2：[3-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲氧基]苯基]甲胺(盐酸盐)
如方法1，步骤2中所述由3-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲氧基]苄腈进行制备：分离的[3-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲氧基]苯基]甲胺(盐酸盐)。ESI-MS m/z计算值245.10275，实验值246.2(M+1)+；保留时间：0.4分钟(LC方法T)。
方法3：[3-(3,3-二氟环丁基)苯基]甲胺(盐酸盐)
步骤1：1-氯-3-(3,3-二氟环丁基)苯
在经氮气吹扫的圆底烧瓶中将3-(3-氯苯基)环丁酮(500mg，2.768mmol)溶解在DCM(25mL)中。将反应烧瓶置于水浴中，并逐滴加入二乙基三氟化氨基硫(1.5mL，11.35mmol)。在室温下继续搅拌24小时，然后将反应置于冰水浴中，并用100mL饱和碳酸氢钠水溶液淬灭(首先逐滴加入)。将反应混合物用乙酸乙酯萃取3X 50mL。将有机物合并，用盐水洗涤，并且经硫酸钠干燥，然后过滤并浓缩。将所得粗材料通过使用1％至30％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法纯化，以得到呈无色油的1-氯-3-(3,3-二氟环丁基)苯(530mg，76％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.28-7.24(m,1H),7.24-7.19(m,2H),7.11(d,J＝7.4Hz,1H),3.37(pd,J＝9.2,2.4Hz,1H),3.01(tdd,J＝13.8,8.7,4.6Hz,2H),2.66(m,2H)ppm。
步骤2：3-(3,3-二氟环丁基)苄腈
将Pd[P(tBu)3]2(18mg，0.03522mmol)与锌(8mg，0.1223mmol)和二氰锌(42mg，0.3576mmol)合并，然后用氮气吹扫。通过注射器加入1-氯-3-(3,3-二氟环丁基)苯(150mg，0.5922mmol)作为二甲基乙酰胺(2mL)中的溶液。将反应在90℃下加热4小时。加入另外份的Pd[P(tBu)3]2(18mg，0.03522mmol)，并且用氮气重新吹扫反应小瓶，并且将反应温度增加至115℃持续另外4小时。将反应冷却并通过硅藻土过滤，并且将滤液用乙酸乙酯稀释。将滤液用15mL水洗涤，并将水层用乙酸乙酯(2X 10mL)萃取。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗材料通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法纯化，以得到呈无色油的3-(3,3-二氟环丁基)苄腈(50mg，44％)。ESI-MS m/z计算值193.07031，实验值194.1(M+1)+；保留时间：0.59分钟(LC方法T)。
步骤3：[3-(3,3-二氟环丁基)苯基]甲胺(盐酸盐)
在经氮气吹扫的圆底烧瓶中将3-(3,3-二氟环丁基)苄腈(50mg，0.2588mmol)在THF(3mL)中搅拌，并且在冰浴中冷却至0℃。通过注射器逐滴加入THF中的LAH(200μL的2M，0.4mmol)。去除冰浴，并在室温下进行搅拌持续所指示的时间。然后将反应混合物在冰浴中再次冷却至0℃，并且缓慢逐滴加入0.2mL的水，随后加入0.2mL的15％ NaOH水溶液，并且最后加入0.6mL水。然后将反应混合物温热到室温并搅拌3小时。停止搅拌并加入硫酸钠。将反应混合物过滤并浓缩，然后将产物悬浮于10mL二氯甲烷中，并加入二噁烷中的HCl(250μL的4M，1mmol)。然后将混合物通过旋转蒸发进行浓缩，然后加入二氯甲烷和己烷，并且第二次浓缩产物以得到白色固体[3-(3,3-二氟环丁基)苯基]甲胺(盐酸盐)(54mg，89％)。ESI-MSm/z计算值197.10161，实验值198.1(M+1)+；保留时间：0.34分钟(LC方法T)。
方法4：(3-环丁基苯基)甲胺(盐酸盐)
步骤1：N-[(3-环丁基苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯
将作为THF中的溶液的N-[(3-溴苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.4mmol)、溴(环丁基)锌(8mL的0.5M，4mmol)和DMF(8mL)中的Pd(PPh3)4(162mg，0.14mmol)的混合物用N2鼓泡1分钟，并且然后在100℃下加热1小时，然后将混合物用乙醚稀释，并且用1M HCl、盐水洗涤，并且干燥(MgSO4)。过滤黄色固体。蒸发滤液。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[(3-环丁基苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(66mg，18％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.30-7.21(m,1H),7.16-7.05(m,3H),4.79(s,1H),4.30(d,J＝5.9Hz,2H),3.53(p,J＝8.7Hz,1H),2.33(m,J＝10.3,8.0,2.4Hz,2H),2.14(pd,J＝9.5,8.6,1.8Hz,2H),2.07-1.94(m,1H),1.90-1.77(m,1H),1.47(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值261.17288，实验值523.3(M+M+1)+；保留时间：0.68分钟(LC方法T)。
步骤2：(3-环丁基苯基)甲胺(盐酸盐)
将作为二噁烷中的溶液的N-[(3-环丁基苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(66mg，0.25mmol)和HCl(500μL的4M，2mmol)的溶液在室温下搅拌30分钟，并且然后将溶剂蒸发。将残余物在乙酸乙酯中悬浮并蒸发，以得到呈白色固体的(3-环丁基苯基)甲胺(盐酸盐)(46mg，92％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,3H),7.40(s,1H),7.33(t,J＝7.4Hz,1H),7.29(d,J＝7.4Hz,1H),7.23(d,J＝7.3Hz,1H),3.99(s,2H),3.63-3.46(m,1H),2.30(qt,J＝7.7,2.4Hz,2H),2.11(pd,J＝9.5,8.7,1.8Hz,2H),2.04-1.90(m,1H),1.88-1.72(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值161.12045，实验值162.2(M+1)+；保留时间：0.33分钟(LC方法T)。
方法5：[3-甲氧基-4-(三氟甲基)苯基]甲胺(盐酸盐)
如方法1，步骤2和3中所述由3-甲氧基-4-(三氟甲基)苄腈进行制备。分离的[3-甲氧基-4-(三氟甲基)苯基]甲胺(盐酸盐)。ESI-MS m/z计算值205.07144，实验值206.1(M+1)+；保留时间：0.34分钟(LC方法T)。
方法6：(3-环丙基苯基)甲胺(盐酸盐)
步骤1：N-[(3-环丙基苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(3-溴苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(305mg，1.07mmol)、环丙基硼酸(128mg，1.49mmol)、K3PO4(792mg，3.73mmol)和三环己基膦(57.5mg，0.205mmol)于甲苯(6mL)和水(305μL)中的混合物脱气，然后用氮气冲洗10分钟，之后加入乙酸钯(II)(24mg，0.11mmol)。将混合物在100℃下加热1小时，并且然后冷却到室温。加入水(10mL)，并且将混合物用乙酸乙酯(2X 15mL)萃取，并且将合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，并蒸发。将残余物通过使用0％至15％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈黄色油的N-[(3-环丙基苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，76％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.08-6.87(m,3H),4.91(s,1H),4.25(d,J＝5.9Hz,2H),1.92-1.79(m,1H),1.45(s,9H),0.98-0.88(m,2H),0.67(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值247.15723，保留时间：0.68分钟(LC方法T)。
步骤2：(3-环丙基苯基)甲胺(盐酸盐)
向N-[(3-环丙基苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.3437mmol)于DCM(500μL)中的溶液中加入1,4-二噁烷中的4M HCl(500μL的4M，2mmol)，并且在室温下搅拌25分钟。蒸发溶剂以得到呈白色固体的(3-环丙基苯基)甲胺(盐酸盐)(69mg，定量)：ESI-MS m/z计算值147.1048，实验值149.17(M+1)+；保留时间：0.3分钟(LC方法T)。
制备仲胺的通用方法
方法7
步骤1：将伯胺(2当量)与如DIEA、TEA、Cs2CO3等碱(1当量)于DMF(20至25体积当量)中的混合物在室温下搅拌30分钟，并且然后加入4-溴丁-1-烯或4-碘丁-1-烯(1当量)，并且将混合物在室温下搅拌约24小时。然后将混合物过滤，并用乙酸乙酯洗涤沉淀物。将滤液用乙酸乙酯稀释并用1M NaOH洗涤，分配并用乙酸乙酯(3倍)萃取有机层。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。通过硅胶色谱法或反相HPLC进行的纯化得到所需的N-丁-3-烯基仲胺作为主要产物，通常伴随少量的不需要的叔胺作为副产物。
方法8
步骤1：将伯胺(1当量)和4-碘丁-1-烯(1当量)在THF(20至25体积当量)中的混合物在80℃下搅拌约1至2小时，以提供所需的仲胺以及不期望的叔胺副产物。将混合物冷却至室温，并且加入TEA(3当量)和二碳酸二叔丁酯(1.2当量)。将混合物在室温下搅拌约2小时，然后用乙醚稀释，用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过硅胶色谱法或反相HPLC进行纯化，以得到所需经N-boc保护的N-丁-3-烯基胺。
步骤2：将经Boc保护的伯胺(1当量)和HCl(二噁烷中的4M溶液，20当量)的混合物在室温下搅拌约16小时，然后将溶剂蒸发以得到所需的N-丁-3-烯基仲胺作为盐酸盐。
方法9
步骤1：向醛(1当量)、丁-3-烯-1-胺(1.2当量)和乙酸(0.1当量)于1,2-二氯乙烷(约30体积当量)中的混合物中加入干燥分子筛，并将混合物在室温下搅拌约1小时。加入合适的还原剂，如三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠(1.5当量)，并将所得混合物在室温下搅拌过夜。反应完成后，将反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，通过硅藻土过滤，并且用二氯甲烷萃取。将有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法或反相HPLC进行的纯化得到所需的N-丁-3-烯基仲胺。
方法10
步骤1：将经特氟龙(Teflon)封盖的小瓶中的如碳酸钾、碳酸铯、氟化铯或乙酸铯等碱(1.2当量)和碘化铜(1当量)于甲苯(2体积当量)中的经搅拌的悬浮液通过将氮气鼓泡通过混合物来脱气5分钟，并且然后密封。在氮气气氛下，加入卤化物(1当量)和丁-3-烯-1-胺(2当量)，随后加入脱气的DMF(5体积当量)，并将所得混合物密封并在90℃下加热过夜。将混合物冷却至室温并用氯化铵(加入氢氧化铵，直到蓝色持续)稀释，然后用乙酸乙酯萃取。将有机馏分用盐水洗涤一次，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成棕色糖浆，将其通过硅胶色谱法或反相HPLC进行纯化，得到所需N-丁-3-烯基仲胺。
方法11
步骤1：在室温下向胺(盐酸盐)(1当量)和NEt3(3当量)于THF(20体积当量)中的混合物中加入二碳酸二叔丁酯(1.1当量)。将混合物在室温下搅拌约1至2小时，然后用乙醚稀释，用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过硅胶色谱法纯化，以得到经单-Boc保护的胺。
步骤2：向经单-Boc保护的胺(1当量)于DMF(10体积当量)中的(冰浴中冷却的)溶液中加入如[双(三甲基硅烷基)氨基]钠等碱(2当量)。在0℃下搅拌5分钟后，逐滴加入3-溴-1-丙烯(3当量)。将温度温热到室温，并在此温度下搅拌约1至2小时。然后，将混合物用1M NH4Cl和乙醚稀释，并且丢弃水层。将有机层用水然后是盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过硅胶色谱法或反相HPLC纯化，以得到经Boc保护的烯丙基胺。
步骤3：在室温下将经Boc保护的烯丙基胺(1当量)和HCl(10当量，4M，二噁烷中)的混合物搅拌约2小时，然后将溶剂蒸发，并且将残余物与THF共蒸发，以得到经取代的N-烯丙基-胺的盐酸盐。
方法12
步骤1：向酸(1当量)和丁-3-烯-1-胺(1.1当量)于DMF(12体积当量)中的溶液加入DIEA(2.5当量)和HATU(1.2当量)。将所得混合物在室温下搅拌2至3小时。此后，将其用1NHCl溶液淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物用H2O和饱和NaCl水溶液洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤，并且在真空中蒸发。通过使用乙酸乙酯和己烷的硅胶色谱法进行的纯化得到所需的酰胺。
步骤2：将酰胺(1当量)溶解在二乙醚(15至20体积当量)中，并且冷却至0℃。加入LiAlH4的THF溶液(1至2当量)，并且将所得混合物在室温下搅拌约2小时。将混合物缓慢倒入冷水中，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物用H2O、1N NaOH溶液、2O和饱和NaCl水溶液洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤，并且在真空中蒸发。通过硅胶色谱法或反相制备型色谱法进行的纯化根据纯化方法得到呈游离碱或盐的仲胺。
最终化合物的制备
实例1：17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(化合物1)、17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(对映异构体1)(化合物2)和17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(对映异构体2)(化合物3)的制备
步骤1：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向配备有磁性搅拌棒并且配有特氟龙隔膜的经烘箱干燥的螺旋盖试管中装入N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(300mg，0.534mmol)和干THF(2mL)。加入溴(戊-4-烯基)锌(2.7mL的0.5M，1.35mmol)，并将容器抽真空并用氩气回填(重复此过程总共3次)。将溶液在冰浴中冷却至0℃，并且快速加入Pd(OAc)2(6mg，0.027mmol)和C-phos(23.4mg，0.054mmol)。移除冰浴，并将反应在25℃下搅拌过夜。将反应混合物通过加入饱和氯化铵水溶液进行淬灭，并且用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并且在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈无色油的N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(120mg，35％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.56(s,9H),1.86-1.96(m,2H),2.14-2.29(m,3H),2.30-2.54(m,3H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),4.69(d,J＝10.6,1H),4.83(d,J＝10.6,1H),4.96-5.08(m,4H),5.70-5.89(m,2H),7.30-7.39(m,3H),7.43-7.47(m,2H),9.1(s,1H),10.08(s,1H)ppm。19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-72.83(s,3F),-61.41(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值640.2484，保留时间：3.13分钟(LC方法K)。
步骤2：N-[6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
将N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(455mg，0.7103mmol)溶解于甲苯(270mL)中。将烧瓶抽真空并用氮气回填(3个循环)，并且然后通过用氮气吹扫来进一步脱气30分钟。在室温下加入亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(133mg，0.1563mmol)，并且将混合物在100℃下搅拌过夜。将黑色反应混合物从热油浴移开，并使其冷却至室温。在0℃下加入二(乙二醇)乙烯基醚(387.20mg，0.4mL，2.9298mmol)，并将混合物在室温下搅拌10分钟，并且在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈无色油的N-[6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(243mg，39％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.55(s,9H),1.80-2.20(m,2H),2.20-2.40(m,2H),2.40-2.70(m,4H),2.90-3.20(m,2H),4.88(s,2H),5.40-5.60(m,2H),7.20-7.40(m,5H),9.13(s,1H),9.51(s,1H)ppm。19FNMR(282MHz,CDCl3)δ-74.62(s,3F),-62.72(s,3F)ppm。
步骤3：N-[6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在室温下将N-[6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(470mg，0.5371mmol)、Silicat Pd(959mg，0.24mmol/g，0.2302mmol)和甲醇(15mL)的混合物用氢气球吹扫来氢化过夜。将混合物用乙酸乙酯(30mL)稀释，通过硅藻土垫过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(280mg，98％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)ppm 1.25-1.65(s,16H),1.65-1.90(m,3H),2.05-2.25(m,2H),2.83-3.11(m,2H),7.70(s,1H),8.80(s,1H)ppm。19FNMR(282MHz,DMSO-d6)ppm-78.2(s,3F),-61.4(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值524.18585，实验值525.2(M+1)+；保留时间：4.4分钟(LC方法C)。
步骤4：17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(化合物1)
在室温下将TFA(4.44g，3mL，38.94mmol)加入到N-[6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(270mg，0.5148mmol)于二氯甲烷(9mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物在减压下浓缩，并且将残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中，用5％NaHCO3水溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(150mg，68％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)ppm 1.25-1.65(m,7H),1.70-1.85(m,3H),2.10-2.20(m,2H),2.67-2.98(m,2H),6.73(s,2H),7.61(s,1H),7.68(s,1H)ppm。19F NMR(282MHz,DMSO-d6)ppm-78.1(s,3F),-61.5(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值424.1334，实验值425.1(M+1)+；保留时间：3.72分钟(LC方法C)。
步骤5：17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(对映异构体1)(化合物2)和17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(对映异构体2)(化合物3)
将外消旋17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(142mg，0.3336mmol)通过使用菲罗门LUX-4柱(250X 10mm，5μm粒度)、14％ MeOH(不含改性剂)和86％ CO2作为使用流速70毫升/分钟以及进样体积为甲醇(不含改性剂)中的约23mg/ml的梯度的手性SFC进行纯化，得到第一洗脱对映异构体17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(对映异构体1)(35mg，48％)。ESI-MSm/z计算值424.1334，实验值425.1(M+1)+；保留时间：2.95分钟。稍后的洗脱对映异构体得到17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(对映异构体2)(47mg，65％)。ESI-MS m/z计算值424.1334，实验值425.1(M+1)+；保留时间：2.95分钟(LC方法FF)。
实例2：21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(对映异构体1)(化合物4)和21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(对映异构体2)(化合物5)的制备
步骤1：6-(2-烯丙基苯基)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
部分1：在250-mL密封小瓶中，将3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.0g，2.003mmol)和2-(2-烯丙基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷(783mg，3.207mmol)在DMSO(10mL)中合并。向混合物中加入Pd(dppf)Cl2(211mg，0.2884mmol)和碳酸钾(1.4g，10.13mmol)，并且将氮气鼓泡通过悬浮液1分钟。将反应加盖并在100℃下加热20小时。将混合物冷却到室温，用盐水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得棕色油通过使用100％己烷至50％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，得到呈棕色油的6-(2-烯丙基苯基)-3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯，ESI-MS m/z计算值536.21344，实验值537.2(M+1)+；保留时间：1.77分钟(LC方法J)。
部分2：将残余物溶解于THF(10mL)中，加入MeOH(10mL)和水(10mL)，随后加入氢氧化锂(340mg，8.102mmol)。将混合物搅拌并且在60℃下加热3小时。在减压下去除THF和甲醇，并且加入10mL HCl(10％)(pH约3)。将混合物用乙酸乙酯(2X 50mL)萃取，将合并的有机物经硫酸钠干燥，并且在真空中浓缩以得到呈棕褐色固体的6-(2-烯丙基苯基)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(785mg，93％)，ESI-MS m/z计算值422.14536，实验值423.2(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法J)。
步骤2：N-[6-(2-烯丙基苯基)-2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向6-(2-烯丙基苯基)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(438mg，1.037mmol)于NMP(6mL)中的溶液中加入2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(330mg，1.092mmol)、DIEA(600μL，3.445mmol)，随后加入HATU(475mg，1.249mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应用乙酸乙酯稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层用10％柠檬酸溶液进一步洗涤，随后用盐水洗涤。将有机物分离，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过使用100％己烷至60％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法(80克柱)进行纯化(以18％乙酸乙酯洗脱产物)，以得到呈白色泡沫的N-[6-(2-烯丙基苯基)-2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(609mg，83％)，ESI-MS m/z计算值706.259，实验值707.2(M+1)+；保留时间：1.86分钟(LC方法M)。
步骤3：N-[6-(2-烯丙基苯基)-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[6-(2-烯丙基苯基)-2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(605mg，0.8561mmol)和DIEA(500μL，2.871mmol)于乙腈(19mL)中的溶液加热至50℃，然后将对甲苯磺酰氯(250mg，1.311mmol)分1份加入。将所得混合物在70℃下加热2小时。将反应混合物冷却并且用饱和碳酸氢钠溶液(20mL)淬灭，并搅拌15分钟。将有机材料用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过使用100％己烷至50％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法(80克柱)进行纯化，以得到棕褐色残余物，将其在高真空泵下放置18小时，得到呈无色油的N-[6-(2-烯丙基苯基)-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(574mg，97％)。ESI-MS m/z计算值688.2484，实验值689.2(M+1)+；保留时间：2.14分钟(LC方法M)。
步骤4：N-[6-(苄氧基)-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,9,12,14,16,18,20-九烯-21-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在500mL圆底烧瓶中，将N-[6-(2-烯丙基苯基)-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(574mg，0.8335mmol)于1,2-二氯乙烷(145mL)中的脱气溶液在氮气气氛下加热至50℃。然后，在10分钟内分两份加入二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(98mg，0.1336mmol)。将所得混合物在70℃下加热2小时。加入另一份的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(98mg，0.1336mmol)，并且将混合物在70℃下加热另外1小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩。将残余物通过使用100％己烷至40％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法(80克柱)纯化(产物在15％乙酸乙酯下洗脱)，以得到浅粉色残余物。通过使用100％己烷至20％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法(40克柱)进行的第二纯化得到淡粉色油，将其在高真空泵下放置18小时，以得到泡沫N-[6-(苄氧基)-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,9,12,14,16,18,20-九烯-21-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(189mg，34％)。ESI-MS m/z计算值660.2171，实验值661.2(M+1)+；保留时间：2.0分钟(LC方法M)。
步骤5：N-[6-羟基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-21-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-(苄氧基)-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,9,12,14,16,18,20-九烯-21-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(178mg，0.2694mmol)于乙酸(2mL)和乙酸乙酯(8mL)中的溶液中加入Pd/C(60mg的10％w/w，0.05638mmol)。将混合物放入帕尔振荡器中，并在真空下脱气并用氮气填充三次。然后，去除所有氮气，并且将反应器用氢气加压至60psi。将混合物振荡14小时。在那之后，对反应器进行减压，并加入另外的Pd/C(180mg的10％w/w，0.16mmol)，并用氢气将反应器加压至60psi。将混合物振荡3小时。将反应器减压，并加入另外的Pd/C(300mg的10％w/w，0.28mmol)，并用氢气将反应器加压至60psi。将混合物振荡2小时。将反应过滤并在真空下浓缩。将残余物通过使用100％己烷至60％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法(24克柱)进行纯化(产物在20％乙酸乙酯下洗脱)，得到呈米白色固体的N-[6-羟基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-21-基]氨基甲酸叔丁酯(112.8mg，73％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),8.94(s,1H),7.76(s,1H),7.44-7.38(m,2H),7.30(m,1H),2.42-1.94(m,6H),1.68(dd,J＝16.0,6.5Hz,1H),1.51(s,9H),1.31(d,J＝22.3Hz,2H),1.23(s,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值572.18585，实验值573.1(M+1)+；保留时间：1.48分钟(LC方法M)。
步骤6：21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇
将N-[6-羟基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-21-基]氨基甲酸叔丁酯(110mg，0.1921mmol)溶解于二氯甲烷(2mL)中，并且向混合物加入TFA(1000μL，12.98mmol)，并且在室温下搅拌2小时。将混合物蒸发，并且将残余物通过使用100％己烷至60％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法(12克柱)纯化(产物在30％乙酸乙酯下洗脱)。在15分钟内将材料通过使用1％至99％乙腈/水(+5mM HCl)梯度的反相HPLC进一步纯化，得到呈白色固体的21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(19.7mg，22％)。ESI-MS m/z计算值472.1334，实验值473.2(M+1)+；保留时间：1.48分钟(LC方法J)。
步骤7：21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(对映异构体1)(化合物4)和21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(对映异构体2)(化合物5)
将外消旋21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(19.6mg，0.04149mmol)通过使用Chiral Pak AS柱(250X 10mm，5μm粒度)、10％MeOH(不含改性剂)和90％ CO2作为使用流速70毫升/分钟以及进样体积为约23mg/ml/甲醇(不含改性剂)的梯度的手性SFC进行纯化，得到白色固体和第一洗脱对映异构体21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(对映异构体1)(4.7mg，47％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.77(s,1H),7.39(d,J＝7.7Hz,1H),7.34(d,J＝4.1Hz,2H),7.21(m,1H),2.51-2.39(m,1H),2.35(q,J＝6.9Hz,1H),2.23-2.07(m,2H),1.75(m,1H),1.72-1.51(m,2H),1.49-1.12(m,2H),0.98-0.74(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值472.1334，实验值473.2(M+1)+；保留时间：2.05分钟(LC方法A)。在15分钟内将稍后的洗脱对映异构体通过使用1％至99％乙腈/水(+5mM HCl)梯度的反相制备型HPLC进一步纯化，得到呈白色固体的21-氨基-6,19-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,22-三氮杂四环[16.3.1.12,5.012,17]二十三碳-1(22),2,4,12,14,16,18,20-八烯-6-醇(对映异构体2)(4.6mg，46％)ESI-MS m/z计算值472.1334，实验值473.2(M+1)+；保留时间：2.05分钟(LC方法A)。
实例3：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物6)的制备
步骤1：N-甲氧基-N-甲基-戊-4-烯酰胺
将羰基二咪唑(142g，875.7mmol)在氮气下在冰水浴中加入到戊-4-烯酸(71.5mL，700.6mmol)于二氯甲烷(2.45L)中的溶液中(在34分钟内发生气体逸出)。1小时后，在3分钟内加入N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(168g，1.722mol)，并且然后搅拌16小时，使冰水浴最终达到室温。加入柠檬酸(169g，879.6mmol)于1L冰水中的溶液；将混合物的温度降到15℃。将各层分离，将有机相用HCl(700mL的0.25M，175mmol)洗涤，然后用200mL水中的碳酸钾(24.3g，175.8mmol)洗涤，并最终用盐水洗涤。将有机相用硫酸镁干燥，过滤并且通过在42℃和15托下旋转蒸发进行浓缩，然后溶解在MTBE中，并且再次浓缩，得到90.88克的极淡黄色液体，将其蒸馏(产物在145℃的浴温下蒸馏，缸口温度为80℃)，得到N-甲氧基-N-甲基-戊-4-烯酰胺(81.0g，81％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.94-5.79(m,1H),5.13-5.03(m,1H),5.03-4.95(m,1H),3.69(s,3H),3.19(s,3H),2.60-2.47(m,2H),2.44-2.34(m,2H)ppm。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在室温下在氮气下将NaH(3.76g，94.01mmol)悬浮于THF(250mL)中。加入N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(51.0g，78.29mmol)于THF(750mL)中的溶液，然后在37℃下加热2小时。冷却至-78℃，2分钟内n-BuLi(38.8mL的2.5M，97mmol)，保持温度低于-65℃。加入N-甲氧基-N-甲基-戊-4-烯酰胺(14.0g，97.78mmol)于THF(38mL)中的溶液。在-78℃下搅拌5分钟，然后将反应混合物置于室温水浴中，直到内部温度达到0℃，然后在用乙酸(22.3mL，392.1mmol)淬灭之前维持0℃持续5分钟，然后小心且缓慢地加入40mL水(气体逸出)。在38℃下通过旋转蒸发来蒸发大部分溶剂。加入750mL己烷，然后用500mL水洗涤。将各层分离，将有机相用100mL盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并在47℃下通过旋转蒸发浓缩，得到52.1g粗红色油。通过硅胶色谱法(柱体积＝4.8L，流速＝900毫升/分钟)进行纯化。己烷被用作“A”溶剂。将1.6L的乙酸乙酯与18.4L的己烷混合，以制备20L的8％乙酸乙酯/己烷，并将其用作“B”溶剂。将52.1g粗产物溶解于150mL的己烷中，并且运行100％己烷持续10分钟，然后编程初始梯度以在107分钟内运行10％至25％的溶剂B(20柱体积，以18％洗脱所需产物)，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(22.15g，43％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.33(s,1H),9.42(s,1H),7.43-7.37(m,2H),7.37-7.24(m,3H),5.95-5.71(m,2H),5.12-5.02(m,2H),5.02-4.95(m,2H),4.85(d,J＝10.8Hz,1H),4.70(d,J＝10.8Hz,1H),3.23(t,J＝7.3Hz,2H),2.60-2.19(m,6H),1.58(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值654.22766，实验值655.1(M+1)+；保留时间：3.84分钟(LC方法FF)。
步骤3：N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在12L烧瓶中将氮气鼓泡到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(36.0g，53.76mmol)于甲苯(4930mL)中的溶液中持续30分钟。加入二氯-[(2-异丙氧基苯基)亚甲基]钌；三环己基膦(3.31g，5.511mmol)，在将其加热到108℃的目标温度时将氮气直接鼓泡到混合物中，但当温度达到50℃时，停止氮气鼓泡。达到108℃后将混合物搅拌229分钟，然后加入二氯-[(2-异丙氧基苯基)亚甲基]钌；三环己基膦(1.62g，2.697mmol)，并且在108℃下继续搅拌17小时40分钟。冷却至55℃，加入2-磺酰基吡啶-3-甲酸(3.76g，24.23mmol)，随后加入三乙胺(3.38mL，24.25mmol)，然后在55℃下加热并搅拌3.5小时。在45℃下将混合物通过旋转蒸发浓缩至约750mL的体积，然后在室温下静置过夜。滤出不溶性沉淀物，并用己烷充分冲洗沉淀物(所需产物可溶于纯己烷中)。在45℃下通过旋转蒸发去除所有溶剂。加入700mL的己烷，并在45℃下涡旋以帮助溶解所需产物。冷却至室温，加入500mL的饱和碳酸氢钠/H2O 1:1，并且搅拌10分钟，然后过滤并且用己烷充分冲洗。将滤液的层分离，将有机相用硫酸镁干燥，过滤并在48℃下浓缩，得到31.95g粗深色残余物。将31.95g粗产物溶解于100mL MeOH中，并在(帮助溶解所必需的)40℃浴中加热，然后加入25mL的DMSO以帮助将材料在室温下溶解。将溶液负载于1.9kg C18反相柱上(柱体积＝1656mL，流速＝260毫升/分钟)。在96分钟内运行65％至93％乙腈/H2O的梯度(15柱体积)，然后维持93％乙腈/H2O作为等压洗脱液持续约10分钟，然后增加到100％乙腈(140分钟后，流速增加到450毫升/分钟以充分洗脱低聚物副产物)，得到N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(17.35g，50％)。ESI-MS m/z计算值626.1964，实验值627.1(M+1)+；保留时间：3.67分钟(LC方法FF)。
步骤4：N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
(在合并以进行纯化前分两批、两个单独的罐进行本程序。)
反应器1：将N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(2.0g，3.160mmol)溶解于乙酸(40mL)中(在500mL烧瓶中)，用氮气冲洗，用Pd/C(882mg的10％w/w作为50％亲水材料，0.414mmol)进行处理，然后在室温下在氢气下搅拌5小时15分钟。将烧瓶抽真空，用氮气回填，重复多次，然后使反应混合物静置不搅拌过夜。分析显示反应仍持续过夜。将混合物放回氢气气氛下35分钟，然后抽真空并用氮气回填多次。将混合物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤硅藻土，并将滤液在45℃下通过旋转蒸发进行浓缩，以得到粗材料，将其与在纯化之前从反应器2获得的材料合并。
反应器2：将N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(15.6g，24.65mmol)溶解于乙酸(300mL)中(在5L烧瓶中)，用氮气冲洗，用Pd/C(6.88g的10％w/w作为50％亲水材料，3.24mmol)进行处理，然后在室温下在氢气下搅拌5.5小时。将烧瓶抽真空，并用氮气回填。将混合物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤硅藻土，并将滤液在45℃下通过旋转蒸发进行浓缩，以得到14.85g粗材料，将其加入到来自反应器1的粗材料并一起纯化。将经合并的粗材料溶解于45mL MeOH中。将溶液负载于1.9kg反相C18柱上(柱体积＝1656mL，流速＝260毫升/分钟)。在128分钟内运行50％至100％乙腈/H2O的梯度(20柱体积)。产物以81％乙腈开始洗脱，因此梯度保持在81％乙腈，直到产物完成洗脱，得到11.72g存在残余MTBE的标题化合物。将此材料溶解于少量二氯甲烷中，然后加入庚烷，并且在47℃下再次浓缩以去除残留的MTBE，得到N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(11.17g，75％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),9.08(s,1H),7.73(s,1H),3.00(m,J＝11.0,4.7Hz,1H),2.75(m,J＝11.1,5.1Hz,1H),2.27-2.13(m,2H),2.12-1.97(m,1H),1.85-1.71(m,1H),1.71-1.43(m,15H)ppm。ESI-MS m/z计算值538.1651，实验值539.1(M+1)+；保留时间：3.28分钟(LC方法FF)。
步骤5：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物6)
在5℃下在冷水浴中在3分钟内将TFA(32mL，415.4mmol)加入到N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(12.11g，22.49mmol)于二氯甲烷(75mL)中的溶液中。移除冷水浴，并将混合物在室温下搅拌2小时15分钟(26分钟后温度达到15℃)。将反应混合物倒入碳酸氢钾(63.1g，630.3mmol)于500mL水和300mL乙酸乙酯中的0℃溶液中。将层分离，并将有机层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，过滤然后浓缩。将残余物溶解于沸腾二氯甲烷中，然后加入100mL庚烷，得到悬浮液。在真空下将二氯甲烷从悬浮液中蒸发出，然后通过过滤收集产物，并用室温庚烷充分冲洗。在40℃下在三天内将固体用氮气流在真空下干燥，得到(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(9.75g，96.8％ee)。将此材料通过使用菲罗门Lux-2柱(250X 21.2mm，5μm粒度)以及16％甲醇(20mM NH3)和84％二氧化碳以70毫升/分钟的流动相(进样体积＝甲醇中的650μL的32mg/mL溶液)的SFC色谱法进一步纯化，得到第一对映异构体以进行洗脱，(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(8.80g，90％，>98％ee)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(s,1H),7.77-7.37(m,3H),2.99-2.84(m,1H),2.77-2.62(m,1H),2.28-2.10(m,2H),2.10-1.94(m,1H),1.85-1.70(m,1H),1.70-1.40(m,6H)ppm。ESI-MS m/z计算值438.11267，实验值439.1(M+1)+；保留时间：1.76分钟(LC方法A)。
实例4：(6S)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物7)的制备
步骤1：N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.1g，5.408mmol)于NMP(20mL)中的溶液中加入DIEA(2.0g，15.47mmol)，随后加入HATU(3.1g，8.153mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2.5小时。将混合物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3X 50mL)萃取。将有机相合并，并且经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(3.1g，85％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.81(s,1H),9.87(d,J＝5.2Hz,1H),9.36(s,1H),9.08(d,J＝5.2Hz,1H),7.62-7.35(m,5H),5.87(m,2H),5.27-4.96(m,4H),4.87(d,J＝10.5Hz,1H),4.74(d,J＝10.5Hz,1H),3.17(t,J＝7.2Hz,2H),2.53-244(m,3H),2.41-2.15(m,3H),1.54(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值672.2383，实验值673.4(M+1)+；保留时间：1.65分钟(LC方法M)。
步骤2：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(565mg，0.84mmol)和DIEA(271mg，2.097mmol)于乙腈(30mL)中的溶液加热至50℃，然后加入对甲苯磺酰氯(192mg，1.007mmol)。将所得混合物加热至70℃，并且在90分钟后，将反应混合物冷却并且用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭，并且然后用乙酸乙酯(3X 20mL)萃取。将有机层合并，并且然后用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩成稠油，将其通过用10％乙酸乙酯/己烷洗脱的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(405mg，74％)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ10.34(s,1H),9.43(s,1H),7.46-7.38(m,2H),7.36-7.21(m,3H),5.83(m,2H),5.07(m,2H),4.99(m,2H),4.86(d,J＝10.8Hz,1H),4.70(d,J＝10.8Hz,1H),3.23(t,J＝7.3Hz,2H),2.70-2.47(m,4H),2.45-2.21(m,2H),1.58(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值654.22766，实验值655.2(M+1)+；保留时间：2.05分钟(LC方法M)。
步骤3：N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在三颈1L烧瓶中，将[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(85.6mg，0.1500mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(200mL)中，并且将氮气鼓泡到溶液中并加热至60℃。在一小时内将N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.25g，1.91mmol)于1,2-二氯乙烷(200mL)中的溶液逐滴加入到催化剂溶液中。将混合物在75℃下加热6小时。使反应混合物冷却至室温，并将溶剂蒸发。将残余物通过使用己烷和乙酸乙酯(85:15)的硅胶色谱法进行纯化，并且通过使用50％乙腈/水至100％乙腈的梯度的反相色谱法进一步纯化，得到N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(815mg，68％)。ESI-MS m/z计算值626.1964，实验值627.0(M+1)+；保留时间：1.74分钟(LC方法M)。
步骤4：N-[6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在帕尔反应器中在氮气下向N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(220mg，0.3511mmol)于乙酸(5mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(34mg，10％w/w，50％湿，0.03195mmol)。用氮气填充帕尔反应器，并且抽真空3次。最后，将反应器抽真空并填充至多100psi的氢气。在室温下将反应搅拌15小时。将反应器抽真空并用氮气填充，并且将混合物通过硅藻土垫过滤。蒸发溶剂，并将残余物溶解于二氯甲烷(2mL)中，并加入氯铬酸吡啶鎓(75.7mg，0.3512mmol)和76mg硅藻土，并将混合物搅拌2小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并用乙酸乙酯(10mL)洗涤。蒸发溶剂，并且将残余物通过使用80:20的己烷:EtOAc的硅胶色谱法纯化，以得到N-[6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(140mg，74％)。ESI-MS m/z计算值538.1651，实验值539.0(M+1)+；保留时间：1.72分钟(LC方法J)。
步骤5：(6S)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物7)
在室温下向N-[6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.09286mmol)于CH2Cl2(3mL)中的搅拌溶液中加入TFA(2.22g，19.47mmol)，并且将混合物搅拌45分钟。将混合物倒入饱和NaHCO3溶液(5mL)中，并且用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用85:15己烷:乙酸乙酯的混合物的硅胶色谱法进行纯化。将所得残余物通过使用ChiralCel OZ柱(250X 10mm，5μm粒度)、15％ MeOH(不含改性剂)和85％ CO2作为使用流速10毫升/分钟以及进样体积为约24mg/ml/甲醇(不含改性剂)的梯度的手性SFC进一步纯化，得到呈白色固体以及第二洗脱对映异构体(峰2)(6S)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(13mg，63％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.86(s,1H),7.24(s,2H),6.51(s,1H),3.04(m,1H),2.74(m,1H),2.46-2.29(m,2H),2.26-2.07(m,1H),1.82(m,3H),1.66(m,4H)ppm。ESI-MS m/z计算值438.11267，实验值439.1(M+1)+；保留时间：1.21分钟(LC方法J)。
实例5：17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物8)、17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物9)、17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物10)和17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物11)的制备
步骤1：N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(315mg，0.5028mmol)于乙酸乙酯(3mL)中的溶液中加入Pd/C(26.8mg的10％w/w，0.02518mmol)，并且将混合物抽真空并用氮气填充3次。最后，将烧瓶抽真空并通过橡胶隔膜和氢气球填充氢气。将混合物剧烈搅拌45分钟，并且通过硅藻土过滤。蒸发溶剂，并且将残余物通过使用85:15己烷/乙酸乙酯的硅胶色谱法纯化，得到N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(245mg，78％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.88(s,1H),9.37(s,1H),7.30-7.14(m,5H),4.87(d,J＝11.3Hz,1H),4.79(d,J＝11.3Hz,1H),3.06(m,1H),2.80(m,1H),2.53(m,1H),2.23(m,1H),2.12(m,1H),1.94(m,1H),1.88-1.73(m,2H),1.66(m,3H),1.58(s,9H),0.93-0.78(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值628.21204，实验值629.3(M+1)+；保留时间：1.89分钟(LC方法J)。
步骤2：N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)和N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)
在室温下向N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(147mg，0.2339mmol)于MeOH(5mL)中的搅拌溶液中加入硼氢化钠(17.7mg，0.4678mmol)，并且将其搅拌15分钟。将非对映产物通过使用50％水/乙腈至100％乙腈的流动梯度的反相色谱法进行分离，得到第一非对映异构体对以共洗脱，N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(67mg，91％)。ESI-MS m/z计算值630.22766，实验值631.5(M+1)+；保留时间：2.14分钟(LC方法J)。
待共洗脱的第二非对映异构体对分离为N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(64mg，87％)。ESI-MS m/z计算值630.22766，实验值631.3(M+1)+；保留时间：2.21分钟(LC方法J)。
步骤3：N-[6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)
在氮气下向N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(40mg，0.06343mmol)于乙酸(4mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(4.8mg，10％w/w，0.004510mmol)。将烧瓶抽真空并填充氮气三次，并且最后通过橡胶隔膜用两个氢气球填充氢气。将混合物在室温下搅拌12小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，并用乙酸乙酯洗涤。蒸发溶剂，并且将残余物通过使用50％乙腈/水至100％乙腈的流动梯度的反相色谱法进行纯化，以得到N-[6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(21mg，61％)。ESI-MS m/z计算值540.1807，实验值541.0(M+1)+；保留时间：1.48分钟(LC方法J)。
步骤4：17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物8)和17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物9)
在室温下向N-[6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(23mg，0.04256mmol)于二氯甲烷(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1.48g，12.98mmol)，并且将混合物搅拌15分钟。然后缓慢加入饱和NaHCO3溶液(2mL)，并将产物用二氯甲烷(3X 5mL)萃取。将合并的有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤，在真空下浓缩，并且通过使用50％乙腈/水至100％乙腈的流动梯度的反相色谱法进行纯化。将对映异构体通过使用ChiralCel OJ-3柱(250X 10mm，5μm)、10％ MeOH(20mM NH3)和90％ CO2作为具有约22mg/ml/甲醇(不含改性剂)的进样体积的梯度的手性SFC进行分离，得到第一洗脱对映异构体17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(3.1mg，32％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.76(s,1H),6.51(d,J＝70.1Hz,2H),4.94(t,J＝8.1Hz,1H),4.12(d,J＝7.4Hz,1H),2.58-2.29(m,2H),2.28-2.14(m,1H),1.87-1.52(m,9H),1.40(bs,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值440.1283，实验值441.0(M+1)+；保留时间：0.73分钟(LC方法J)。
得到稍后的洗脱对映异构体17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(3mg，31％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.76(s,1H),6.51(d,J＝70.1Hz,2H),4.94(t,J＝8.1Hz,1H),4.12(d,J＝7.4Hz,1H),2.58-2.29(m,2H),2.28-2.14(m,1H),1.87-1.52(m,9H),1.40(bs,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值440.1283，实验值441.0(M+1)+；保留时间：0.73分钟(LC方法J)。
步骤5：N-[6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)
在氮气下向N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(40mg，0.06343mmol)于乙酸(4mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(4.8mg，10％w/w，0.004510mmol)。将烧瓶抽真空并填充氮气三次，并且最后将其通过橡胶隔膜用两个氢气球加盖，从而产生氢气气氛。将混合物在室温下搅拌12小时。将混合物用氮气吹扫，然后通过用乙酸乙酯洗脱的硅藻土垫过滤。蒸发滤液，并且将所得残余物通过用50％乙腈/水至100％乙腈的梯度洗脱的反相色谱法进行纯化，得到N-[6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(23mg，67％)。ESI-MS m/z计算值540.1807，实验值541.0(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法J)。
步骤6：17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物10)和17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物11)
在室温下向N-[6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(20mg，0.03701mmol)于二氯甲烷(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1.48g，12.98mmol)，并且将混合物搅拌15分钟。然后缓慢加入饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)，并将所得混合物用二氯甲烷(3X 5mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将残余物通过用50％乙腈/水至100％乙腈的梯度洗脱的反相色谱法纯化。将此材料通过使用ChiralCel AD-3柱(250X 10mm，5μm粒度)、15％ MeOH(20mM NH3)和85％ CO2流动相的手性SFC进一步纯化，得到呈白色固体以及待洗脱的第一对映异构体17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(3.2mg，38％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.76(s,1H),6.59(s,2H),6.47(s,1H),5.03(t,J＝7.7Hz,1H),4.10(d,J＝7.1Hz,1H),2.37-2.28(m,3H),1.96-1.67(m,4H),1.65-1.53(m,5H)ppm。ESI-MS m/z计算值440.1283，实验值441.1(M+1)+；保留时间：6.94分钟(LC方法P)。
得到稍后的洗脱对映异构体17-氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(2.5mg，30％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.76(s,1H),6.59(s,2H),6.47(s,1H),5.03(t,J＝7.7Hz,1H),4.10(d,J＝7.1Hz,1H),2.37-2.28(m,3H),1.96-1.67(m,4H),1.65-1.53(m,5H)ppm。ESI-MS m/z计算值440.1283，实验值441.1(M+1)+；保留时间：6.94分钟(LC方法P)。
实例6：17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物12)和17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物13)的制备
步骤1：N-[6-苄氧基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)
在惰性气氛下在0℃(冰浴)下向N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(55mg，0.08722mmol)于THF(4mL)中的搅拌溶液中加入叔丁醇钾(47mg的25％w/w，0.1047mmol，2-甲基四氢呋喃中的2M溶液)。将混合物搅拌5分钟，并且然后通过注射器经由橡胶隔膜加入碘代甲基(14.9mg，0.105mmol)。将混合物搅拌另外30分钟。在0℃下通过加入10mL水淬灭反应，并用二乙醚(3X 20mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并且通过用85:15己烷/乙酸乙酯洗脱的硅胶色谱法纯化，得到N-[6-苄氧基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(21mg，37％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(s,1H),8.98(s,1H),7.61-7.08(m,5H),5.04-4.52(m,3H),3.35(s,3H),2.78-2.50(m,1H),2.38-2.09(m,2H),1.89(t,J＝12.0Hz,1H),1.78-1.64(m,3H),1.52(m,14H)ppm。ESI-MS m/z计算值644.24335，实验值645.4(M+1)+；保留时间：2.09分钟(LC方法M)。
步骤2：N-[6-羟基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)
在帕尔反应器中在氮气下向N-[6-苄氧基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(27mg，0.04189mmol)于乙酸(4mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(11.8mg，10％w/w，50％湿，0.005544mmol)。设置帕尔反应器，并用氮气填充并抽真空3次。最后，将反应器抽真空并填充至多100psi的氢气。将反应在室温下搅拌15小时。将反应器抽真空并用氮气填充，并且将混合物通过硅藻土垫过滤，并用乙酸乙酯(10mL)洗涤。蒸发滤液，并且将残余物通过用50％乙腈/水至100％乙腈的梯度洗脱的反相色谱法进行纯化，得到N-[6-羟基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(17mg，73％)。ESI-MS m/z计算值554.1964，实验值555.0(M+1)+；保留时间：1.93分钟(LC方法J)。
步骤3：17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物12)和17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物13)
向N-[6-羟基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(17mg，0.03066mmol)于二氯甲烷(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1mL，12.98mmol)，并且将混合物搅拌25分钟。在那之后，将混合物在冰浴中冷却，并且缓慢加入2mL的饱和碳酸氢钠水溶液。将产物用二氯甲烷(2X 5mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，然后在7分钟内通过用50％乙腈/水至100％乙腈的梯度洗脱的反相色谱法纯化，然后在100％乙腈下洗脱5分钟，得到非对映异构体的混合物。将此材料通过使用ChiralPak AS柱(250X 10mm，5μm粒度)以及8％甲醇(20mM NH3)和92％二氧化碳以10毫升/分钟的流动相(进样体积＝90:10甲醇/DMSO中的70μL的约24mg/mL溶液)的手性SFC色谱法进一步纯化，得到呈白色固体以及待洗脱的第一对映异构体17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(4.9mg，69％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.74(s,1H),7.58(s,1H),6.91(s,2H),4.50(d,J＝8.6Hz,1H),3.29(s,3H),2.16(m,3H),1.83(dd,J＝14.1,10.2Hz,1H),1.64-1.37(m,8H)ppm。ESI-MS m/z计算值454.14395，实验值455.0(M+1)+；保留时间：1.28分钟(LC方法J)。
得到稍后的洗脱对映异构体17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(4.7mg，66％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.74(s,1H),7.58(s,1H),6.91(s,2H),4.50(d,J＝8.6Hz,1H),3.29(s,3H),2.16(m,3H),1.83(dd,J＝14.1,10.2Hz,1H),1.64-1.37(m,8H)ppm。ESI-MS m/z计算值454.14395，实验值455.0(M+1)+；保留时间：1.28分钟(LC方法J)。
实例7：17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物14)和17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物15)的制备
步骤1：N-[6-苄氧基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)
在惰性气氛下在0℃(冰浴)下向N-[6-苄氧基-13-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(60mg，0.09515mmol)于THF(4mL)中的搅拌溶液中加入叔丁醇钾(51.3mg的25％w/w，0.1143mmol)(2-甲基四氢呋喃中的2M溶液)。将混合物搅拌5分钟，并且然后通过注射器经由橡胶隔膜缓慢加入THF(1mL)中的碘甲烷(16.2mg，0.1141mmol)。将混合物在室温下搅拌另外的30分钟。接下来，将反应混合物冷却并在0℃下通过加入10mL水淬灭，并且然后将混合物用二乙醚(3X 20mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，然后通过用85:15己烷/乙酸乙酯洗脱的硅胶色谱法纯化，得到N-[6-苄氧基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(34mg，55％)。ESI-MS m/z计算值644.24335，实验值645.0(M+1)+；保留时间：2.03分钟(LC方法M)。
步骤2：N-[6-羟基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)
在高压帕尔反应器中在氮气气氛下向N-[6-苄氧基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(28mg，0.04344mmol)于乙酸(2mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(8.5mg，10％w/w，50％湿，0.003947mmol)。将反应器抽真空并填充氮气三次，并且最终填充氢气至100psi的压力，并且在室温下搅拌16小时。然后将帕尔反应器减压并用氮气填充。将混合物通过用乙酸乙酯洗脱的硅藻土垫过滤。蒸发滤液，并且将所得残余物通过用50％乙腈/水至100％乙腈的梯度洗脱的反相色谱法进行纯化，得到N-[6-羟基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(20mg，83％)。ESI-MS m/z计算值554.1964，实验值555.0(M+1)+；保留时间：2.04分钟(LC方法J)。
步骤3：17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物14)和17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物15)
向N-[6-羟基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(14mg，0.02525mmol)于二氯甲烷(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1mL，12.98mmol)，并且将混合物在室温下搅拌25分钟。在那之后，将混合物在冰浴中冷却，并缓慢加入2mL饱和碳酸氢钠水溶液。将产物用二氯甲烷(2X 5mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，然后在7分钟内通过用50％乙腈/水至100％乙腈的梯度洗脱的反相色谱法纯化，然后在100％乙腈下洗脱5分钟，得到非对映异构体的混合物。将此材料通过使用ChiralPakIG柱(250X 10mm，5μm粒度)以及22％甲醇(20mM NH3)和78％二氧化碳以10毫升/分钟的流动相(进样体积＝甲醇中的70μL的约20mg/mL溶液)的SFC色谱法进一步纯化，得到呈白色固体以及待洗脱的第一对映异构体17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(2mg，34％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.74(s,1H),7.65(d,J＝12.7Hz,1H),6.91(s,2H),4.54(d,J＝7.7Hz,1H),3.30(s,3H),2.30-2.02(m,3H),1.85-1.70(m,2H),1.66-1.32(m,7H)ppm。ESI-MS m/z计算值454.14395，实验值455.0(M+1)+；保留时间：1.39分钟(LC方法J)。
得到稍后的洗脱对映异构体17-氨基-13-甲氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(2mg，34％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.74(s,1H),7.65(d,J＝12.7Hz,1H),6.91(s,2H),4.54(d,J＝7.7Hz,1H),3.30(s,3H),2.30-2.02(m,3H),1.85-1.70(m,2H),1.66-1.32(m,7H)ppm。ESI-MS m/z计算值454.14395，实验值455.0(M+1)+；保留时间：1.39分钟(LC方法J)。
实例8：17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物16)、17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物17)、17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物18)和17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物19)的制备
步骤1：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-羟基-1-亚甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向配备有磁性搅拌棒的经烘箱干燥的烧瓶(250mL)中加入3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.9g，3.806mmol)、5-三丁基甲锡烷基己-5-烯-1-醇(1.64g，4.214mmol)、PdCl2(PPh3)2(267mg，0.3804mmol)、CuI(108.8mg，0.5713mmol)和CsF(144.5mg，0.9513mmol)。将烧瓶抽真空，并且用氮气填充3次。接下来，在惰性气氛下通过隔膜注射DMF(100mL)。将混合物在80℃下加热7小时。将混合物冷却至室温，并通过硅藻土垫过滤，并且用乙酸乙酯洗涤。将大多数有机溶剂蒸发，并且将残余物通过使用85:15的己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法纯化，得到3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-羟基-1-亚甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.3g，66％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(s,1H),5.42(d,J＝1.6Hz,1H),5.17(s,1H),3.95(s,3H),3.66(t,J＝6.2Hz,2H),2.55(t,J＝7.4Hz,2H),1.74-1.62(m,3H),1.62-1.49(m,2H),1.43(s,18H)ppm。ESI-MSm/z计算值518.224，实验值519.3(M+1)+；保留时间：1.34分钟(LC方法J)。
步骤2：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-羟基-1-甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-羟基-1-亚甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(400mg，0.7714mmol)于MeOH(5mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(49mg，10％w/w，0.02321mmol，50％湿)。将烧瓶抽真空并填充氮气，并且最后将其通过经由橡胶隔膜使用两个氢气球填充氢气。将反应混合物搅拌2小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，并且用MeOH(10mL)洗涤。将溶剂蒸发，并且通过使用80:20的己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法纯化，得到3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-羟基-1-甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(350mg，87％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(s,1H),3.94(s,3H),3.58(m,2H),3.28(q,J＝7.0Hz,1H),2.42-1.93(m,1H),1.69-1.61(m,1H),1.57-1.49(m,2H),1.45(s,1H),1.41(s,18H),1.37-1.32(m,1H),1.29(d,J＝6.7Hz,3H),1.16-0.99(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值520.2396，实验值521.1(M+1)+；保留时间：1.41分钟(LC方法J)。
步骤3：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-碘代-1-甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在氮气下将3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-羟基-1-甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(380mg，0.73mmol)、咪唑(99.4mg，1.46mmol)和PPh3(210.7mg，0.8033mmol)溶解于2-甲基四氢呋喃(10mL)中。将分子碘(203.9mg，0.8034mmol)溶解于0.5mL的2-甲基四氢呋喃中并在15分钟内逐滴加入。将反应在室温下搅拌90分钟。将反应混合物过滤，并用乙酸乙酯洗涤，并且将溶剂蒸发。将残余物通过使用85:15的己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法纯化，得到3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-碘代-1-甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(345mg，75％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.76(s,1H),3.94(s,3H),3.27(m,1H),3.12(m,2H),1.98(m,1H),1.78(m,2H),1.65(m,1H),1.41(s,18H),1.35(m,1H),1.30(d,J＝6.6Hz,3H),1.17-1.05(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值630.14136，实验值631.0(M+1)+；保留时间：1.52分钟(LC方法J)。
步骤4：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
在0℃下在惰性气氛下向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(5-碘代-1-甲基-苯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(400mg，0.6345mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中加入叔丁醇钠(305mg，3.174mmol)。使反应混合物达到室温，并且搅拌3小时，并且然后在50℃下加热1小时。将混合物冷却至室温，并且加入HCl水溶液(5％的15mL)，并将有机化合物用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，浓缩，并且将残余物通过使用85:15的己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法纯化，得到3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(150mg，61％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.11(s,1H),9.25(s,1H),5.72(m,1H),5.13-4.76(m,2H),3.28(q,J＝6.7Hz,1H),2.25-1.99(m,1H),1.89(tdd,J＝14.7,7.8,4.5Hz,2H),1.78-1.68(m,1H),1.54(s,9H),1.28(d,J＝6.7Hz,4H)ppm。ESI-MSm/z计算值388.16098，实验值389.0(M+1)+；保留时间：1.25分钟(LC方法M)。
步骤5：N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(230mg，0.5922mmol)和2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(盐酸盐)(197mg，0.5815mmol)于NMP(7mL)中的溶液中加入DIEA(115mg，0.8898mmol)，随后加入HATU(338mg，0.8889mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将混合物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3X 50mL)萃取。将有机相合并，并且经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过使用0％至15％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(280mg，70％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.51(s,1H),10.11(dd,J＝13.8,5.6Hz,1H),9.13(d,J＝7.5Hz,2H),7.61-7.22(m,5H),5.98-5.81(m,1H),5.80-5.62(m,1H),5.21-5.00(m,2H),5.01-4.79(m,3H),4.74(d,J＝10.6Hz,1H),3.28-3.20(m,1H),2.51-2.44(m,1H),2.32-2.21(m,3H),2.10-1.97(m,1H),1.95-1.84(m,2H),1.75-1.68(m,1H),1.53(s,9H),1.26(dd,J＝6.7,3.6Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值672.27466，实验值673.3(M+1)+；保留时间：1.9分钟(LC方法M)。
步骤6：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(280mg，0.4163mmol)和DIEA(134.5mg，1.041mmol)于CH3CN(20mL)中的溶液加热至50℃。然后加入p-TsCl(95.3mg，0.4999mmol)，并且将混合物在70℃下加热90分钟。将反应混合物冷却，用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3X 30mL)萃取。将有机层合并，并且用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并且将溶剂蒸发。通过使用0％至5％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(225mg，83％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.05(d,J＝2.7Hz,1H),9.17(s,1H),7.58-7.41(m,2H),7.39-7.20(m,3H),5.89-5.58(m,2H),5.05(m,1H),5.00-4.78(m,4H),4.71(dd,J＝10.7,7.1Hz,1H),3.46-3.20(m,1H),2.61-2.35(m,3H),2.33-2.19(m,1H),2.11-2.00(m,2H),1.85(m,1H),1.76-1.65(m,1H),1.56(s,9H),1.28(dd,J＝6.6,3.0Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值654.2641，实验值655.0(M+1)+；保留时间：1.19分钟(LC方法M)。
步骤7：N-[6-苄氧基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在三颈500mL烧瓶中，将[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(19.2mg，0.03365mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(70mL)中，并且通过长针将氮气鼓泡到溶液中，并且将烧瓶加热至60℃。在60℃下在45分钟内使用滴定漏斗缓慢逐滴加入N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220mg，0.3361mmol)于1,2-二氯乙烷(70mL)中的溶液。将反应混合物在75℃下搅拌7小时。使反应混合物冷却至室温，并将溶剂蒸发。通过使用95:5的己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[6-苄氧基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(60mg，28％)。ESI-MS m/z计算值626.2328，实验值627.0(M+1)+；保留时间：1.21分钟和1.25分钟(LC方法M)。
步骤8：N-[6-羟基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在高压反应器中向N-[6-苄氧基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(58mg，0.09256mmol)于乙酸(3mL)中的搅拌溶液中加入Pd/C(50mg，0.02349mmol，50％湿，10％w/w)，并且用氮气填充并抽真空三次。将反应器填充有至多250psi的氢气并搅拌20小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤，并且将溶剂蒸发。通过使用85:15的己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[6-羟基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(37mg，74％)。ESI-MS m/z计算值538.2015，实验值539.1(M+1)+；保留时间：1.82分钟和1.86分钟(LC方法M)。
步骤9：17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1)和17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2)
向N-[6-羟基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(36mg，0.06685mmol)于二氯甲烷(2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(2mL，25.96mmol)，并且将混合物在室温下搅拌25分钟。将溶剂蒸发，并且通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到第一洗脱非对映异构体对17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1)(13mg，89％)。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.3(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法J)。
得到稍后的洗脱非对映异构体对17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2)(11mg，75％)。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.1(M+1)+；保留时间：1.77分钟(LC方法J)。
步骤10：17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物16)和17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物17)
将17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1)(12mg，0.02737mmol)通过使用ChiralPak IC柱(250X 10mm，5μm粒度)、9％甲醇(20mM NH3)和91％二氧化碳的具有5.0分钟内10毫升/分钟的流速(进样体积为甲醇中的70μL的约21mg/mL溶液)的流动相的手性SFC进行纯化，得到呈无色固体和待洗脱的第一对映异构体17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(3mg，49％)。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.2(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法J)。
待洗脱的第二对映异构体分离为无色固体17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(2.6mg，42％)。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.2(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法J)。
步骤11：17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物18)和17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物19)
将17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2)(11mg，0.02509mmol)通过使用ChiralPak IC柱(250x 10mm 5μm粒度)、9％甲醇(20mM NH3)和91％二氧化碳的5.0分钟内10毫升/分钟(进样体积为甲醇中的70μL的约21mg/mL溶液)的流动相的手性SFC进行纯化，得到呈无色固体和待洗脱的第一对映异构体17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(3mg，53％)。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.2(M+1)+；保留时间：1.77分钟(LC方法J)。
待洗脱的第二对映异构体分离为无色固体17-氨基-13-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(2.6mg，46％)。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.1(M+1)+；保留时间：1.77分钟(LC方法J)。
实例9：1-[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]乙酮(对映异构体1)(化合物20)和1-[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]乙酮(对映异构体2)(化合物21)的制备
步骤1：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-甲酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下向乙醚(2.2mL)中的N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(147mg，0.2191mmol)加入n-BuLi(210μL的2.5M，0.525mmol)，并且将混合物在-78℃下搅拌15分钟，然后加入经预干燥(分子筛)的DMF(220μL的3M，0.66mmol)作为任一者中的溶液。将混合物在-78℃下搅拌15分钟，并且然后在0℃下搅拌15分钟，用乙醚和1M NH4Cl稀释并且分份。将有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-甲酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(52mg，40％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.52(s,1H),10.12(t,J＝1.0Hz,1H),9.48(s,1H),7.49-7.42(m,2H),7.36(m,2H),7.32-7.27(m,1H),6.05-5.85(m,1H),5.27(m,1H),5.21(dd,J＝10.2,1.4Hz,1H),4.85(d,J＝10.6Hz,1H),4.72(d,J＝10.7Hz,1H),3.22(m,2H),1.58(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值586.1651，实验值587.2(M+1)+；保留时间：0.51分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(丁-3-烯基氨基)甲基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-甲酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(59mg，0.1006mmol)于二氯甲烷(1.2mL)中的溶液中加入乙酸(100μL的2M，0.2mmol)作为THF中的溶液，随后加入丁-3-烯-1-胺(14mg，0.1968mmol)。将此混合物在室温下搅拌15分钟，并且然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(43mg，0.2029mmol)。在室温下搅拌30分钟后，将所述混合物用乙醚稀释，用1MNaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)、过滤并蒸发以得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(丁-3-烯基氨基)甲基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(63mg，98％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.13(s,1H),9.25(s,1H),7.42-7.38(m,2H),7.34(m,2H),7.31-7.27(m,1H),5.93(m,1H),5.78(m,1H),5.26(dd,J＝17.1,1.5Hz,1H),5.21(dd,J＝10.2,1.4Hz,1H),5.07(m,1H),5.03-4.98(m,1H),4.84(d,J＝10.8Hz,1H),4.69(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝1.2Hz,2H),3.23(q,J＝7.4,6.6Hz,2H),2.75(t,J＝6.8Hz,2H),2.28(qt,J＝6.9,1.4Hz,2H),1.72(s,1H),1.56(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值641.24365，实验值642.3(M+1)+；保留时间：0.67分钟(LC方法T)。
步骤3：N-[6-[[乙酰(丁-3-烯基)氨基]甲基]-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将DMF(500μL)加入到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(丁-3-烯基氨基)甲基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(34mg，0.05299mmol)和HATU(40mg，0.1052mmol)，并且然后加入DIEA(37μL，0.2124mmol)和乙酸(THF中的53μL的2M，0.106mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后用乙醚稀释。将所得溶液用水洗涤，然后用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发，以得到N-[6-[[乙酰(丁-3-烯基)氨基]甲基]-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(30.8mg，85％)。ESI-MS m/z计算值683.2542，实验值684.3(M+1)+；保留时间：0.54分钟(LC方法T)。
步骤4：N-[12-乙酰-6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
向具有用120℃加热碗进行加热的亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(5.8mg，0.0068mmol)和甲苯(2.35mL)的25mL三颈烧瓶加入N-[6-[[乙酰(丁-3-烯基)氨基]甲基]-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(31mg，0.045mmol)于甲苯(2.35mL)中的溶液，并且将混合物在120℃下加热1小时。然后，将亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(4mg，0.0047mmol)于甲苯(0.5mL)中的溶液逐滴加入到在125℃热碗中搅拌的反应混合物中，并且在120℃下将混合物加热另外30分钟。将溶剂蒸发，并且将残余物通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法纯化，以得到N-[12-乙酰-6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(13mg，44％)。ESI-MS m/z计算值655.22296，实验值656.3(M+1)+；保留时间：0.44分钟(LC方法T)。
步骤5：1-[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]乙酮(对映异构体1)(化合物20)和1-[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]乙酮(对映异构体2)(化合物21)
部分1：在不锈钢容器中在200psi氢气下在室温下将N-[12-乙酰-6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(13mg，0.01983mmol)、10％钯碳(6mg，0.005638mmol)和乙酸(300μL)的混合物搅拌21小时，然后将混合物过滤。蒸发滤液，以得到中间体N-[12-乙酰-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(14.7mg，定量)。ESI-MS m/z计算值567.19165，实验值568.2(M+1)+；保留时间：0.7分钟(LC方法T)。
部分2：将来自部分1的残余物溶解于TFA(0.3mL)、三异丙基硅烷(14μL，0.06834mmol)和水(15μL)中，并在室温下搅拌1小时。将溶剂蒸发，并且将残余物溶解于乙酸乙酯，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发，以得到粗材料，将其通过使用10％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法纯化，得到外消旋预期产物。
部分3：部分2的外消旋产物通过使用由手性技术公司(Chiral Technologies)出售的IC柱(250X 10mm，5μm粒度)(pn：83445)，用以10毫升/分钟的16％流动相B/流动相A(流动相A＝CO2，流动相B＝甲醇(+20mM NH3)，柱温＝40℃)的等度梯度进行洗脱的正常相SFC-MS方法分离成单个对映异构体。
待洗脱的第一对映异构体为1-[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]乙酮(对映异构体1)(2.2mg，47％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.48-7.37(m,1H),5.96-5.66(m,2H),5.03-4.38(m,2H),3.96-3.25(m,3H),2.44-2.17(m,2H),2.17-1.73(m,4H),1.61(s,1H),1.48-1.14(m,2H),0.96-0.73(m,2H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-61.47,-61.78,-78.89,-79.25ppm。ESI-MS m/z计算值467.13922，实验值468.1(M+1)+；保留时间：1.11分钟(LC方法Q)。
待洗脱的第二对映异构体为1-[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]乙酮(对映异构体2)(2.4mg，52％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.50-7.35(m,1H),5.90-5.62(m,2H),4.91-4.39(m,2H),3.96-3.23(m,3H),2.41-2.20(m,2H),2.16-1.72(m,4H),1.70-1.60(m,1H),1.46-1.18(m,2H),0.99-0.79(m,2H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-61.47,-61.78,-78.88,-79.25ppm。ESI-MS m/z计算值467.13922，实验值468.1(M+1)+；保留时间：1.11分钟(LC方法Q)。
实例10：[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-环丁基-甲酮(对映异构体1)(化合物22)和[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-环丁基-甲酮(对映异构体2)(化合物23)的制备
步骤1：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[[丁-3-烯基(环丁烷羰基)氨基]甲基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将DMF(500μL)加入到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(丁-3-烯基氨基)甲基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(34mg，0.05299mmol)和HATU(40mg，0.1052mmol)，并且然后加入DIEA(37μL，0.2124mmol)和环丁烷甲酸(11mg，0.1099mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后用乙醚稀释，用水和1MNaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[[丁-3-烯基(环丁烷羰基)氨基]甲基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32mg，83％)。ESI-MS m/z计算值723.2855，实验值724.2(M+1)+；保留时间：0.63分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[6-苄氧基-12-(环丁烷羰基)-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
向具有用120℃加热碗进行加热的亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(5.8mg，0.006832mmol)和甲苯(2.35mL)的25mL三颈烧瓶加入N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[[丁-3-烯基(环丁烷羰基)氨基]甲基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32mg，0.04422mmol)于甲苯(2.35mL)中的溶液，并且将混合物在120℃下加热40分钟。将溶剂蒸发，并且将残余物通过使用0％至25％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法纯化，以得到N-[6-苄氧基-12-(环丁烷羰基)-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(14.5mg，46％)。ESI-MSm/z计算值695.2542，实验值696.3(M+1)+；保留时间：0.56分钟(LC方法T)。
步骤3：[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-环丁基-甲酮(对映异构体1)(化合物22)和[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-环丁基-甲酮(对映异构体2)(化合物23)
部分1：在不锈钢容器中在200psi氢气下在室温下将N-[6-苄氧基-12-(环丁烷羰基)-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(14.5mg，0.02084mmol)、10％钯碳(7mg，0.006578mmol)和乙酸(290μL)的混合物搅拌21小时。然后将混合物过滤，并且蒸发滤液，以得到中间体N-[12-(环丁烷羰基)-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(13.5mg，定量)。ESI-MS m/z计算值607.22296，实验值608.2(M+1)+；保留时间：0.78分钟(LC方法T)。
部分2：将来自部分1的残余物溶解于TFA(0.3mL)、三异丙基硅烷(15μL，0.07322mmol)和水(15μL)中，并在室温下搅拌1小时。将溶剂蒸发，并且将残余物溶解于乙酸乙酯，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将所得残余物通过使用10％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到外消旋预期产物。
部分3：将来自部分2的残余物通过使用由手性技术公司出售的IC柱(250X 10mm，5μm粒度)(pn：83445)，用以10毫升/分钟的16％流动相B/流动相A(流动相A＝CO2，流动相B＝MeOH(+20mM NH3)，柱温＝40℃)的等度梯度进行洗脱的正常相SFC-MS方法分离成单个对映异构体。待洗脱的第一对映异构体分离为[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-环丁基-甲酮(对映异构体1)(3.1mg，59％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.49-7.35(m,1H),5.92-5.61(m,2H),4.90-4.38(m,2H),3.93-2.86(m,4H),2.46-2.17(m,4H),2.15-2.06(m,2H),1.89(m,6H),1.44-1.14(m,1H),0.96-0.78(m,1H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-61.40,-61.86,-78.85,-79.38ppm。ESI-MS m/z计算值507.1705，实验值508.1(M+1)+；保留时间：1.35分钟(LC方法Q)。
待洗脱的第二对映异构体分离为[17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]-环丁基-甲酮(对映异构体2)(2.6mg，49％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.48-7.33(m,1H),5.89-5.58(m,2H),4.86-4.42(m,2H),3.94-2.87(m,4H),2.44-2.18(m,4H),2.16-2.03(m,2H),2.01-1.69(m,6H),1.44-1.28(m,1H),0.98-0.79(m,1H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-61.40,-61.86,-78.84,-79.38ppm。ESI-MS m/z计算值507.1705，实验值508.1(M+1)+；保留时间：1.35分钟(LC方法Q)。
实例11：20-氨基-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,12,15,17,19-七烯-6-醇(盐酸盐)的制备
步骤1：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(1-甲基吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在微波小瓶中向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1g，2.003mmol)于DMA(10mL)中的溶液中加入1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)吡唑(684mg，3.287mmol)，并且用氮气吹扫5分钟。然后加入Pd(dppf)Cl2(174mg，0.2131mmol)，随后加入碳酸钾(3.2mL的2M，6.4mmol)。将微波小瓶加盖并在微波合成器中在100℃下加热30分钟。将反应混合物冷却至室温并加入水。将混合物用乙酸乙酯萃取，并且将合并的有机层用盐水洗涤。将有机物分离，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将所得棕色残余物通过使用100％己烷至100％乙酸乙酯梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈浅棕色固体的3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(1-甲基吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(762mg，76％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.84(d,J＝2.3Hz,1H),6.70(d,J＝2.2Hz,1H),3.94(s,3H),3.88(s,3H),1.35(s,18H)ppm。ESI-MS m/z计算值500.18826，实验值501.2(M+1)+；保留时间：0.47分钟(LC方法R)。
步骤2：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(4-碘代-1-甲基-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-(1-甲基吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(500mg，0.9991mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入TFA(250μL，3.245mmol)，随后加入N-碘代琥珀酰亚胺(200mg，0.8890mmol)。在将反应混合物在23℃下搅拌2小时后，将混合物用二氯甲烷稀释，用水、NaHCO3水溶液和硫代硫酸钠水溶液洗涤。将有机层干燥并浓缩。将所得棕色残余物通过使用100％己烷至100％乙酸乙酯梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈棕色固体的3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(4-碘代-1-甲基-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(423mg，80％)。ESI-MS m/z计算值526.0325，实验值527.0(M+1)+；保留时间：0.56分钟(LC方法R)。
步骤3：6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
在微波小瓶中向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(4-碘代-1-甲基-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(423mg，0.8038mmol)于DMA(5mL)中的溶液中加入2-烯丙基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷(230μL，1.226mmol)，并且用氮气吹扫5分钟。然后加入Pd(dppf)Cl2(71mg，0.08694mmol)，随后加入碳酸钾(1.3mL的2M，2.600mmol)。将微波小瓶加盖并在微波合成器中在100℃下加热30分钟。将反应混合物冷却至室温，并且通过硅藻土过滤，然后将硅藻土用乙酸乙酯洗涤。将滤液用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得棕色残余物通过使用100％己烷至100％乙酸乙酯梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈浅棕色固体的6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(296mg，86％)。ESI-MS m/z计算值426.1515，实验值427.2(M+1)+；保留时间：0.53分钟(LC方法R)。所述产物污染有不可分割的副产物3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(4-碘代-1-甲基-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸；ESI-MS m/z计算值512.01685，实验值512.94(M+1)+；保留时间：0.51分钟(LC方法R)。
步骤4：N-[6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(280mg，0.6567mmol)[包含不可分割的副产物3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(4-碘代-1-甲基-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸]于DMF(5mL)中的溶液中加入2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(盐酸盐)(192mg，0.5668mmol)、DIEA(350μL，2.009mmol)，然后加入HATU(301mg，0.7916mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。向混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机物用盐水洗涤，并且经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将所得棕色残余物通过使用100％己烷至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈淡黄色稠油的N-[6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(117mg，25％)。ESI-MSm/z计算值710.26514，实验值711.26(M+1)+；保留时间：0.57分钟(LC方法T)。
步骤5：N-[6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(117mg，0.1646mmol)于CH3CN(10mL)中的溶液中加入DIEA(100μL，0.5741mmol)，并且加热至70℃，然后分3份加入4-甲基苯磺酰氯(45mg，0.2360mmol)(在10分钟间隔内每份85mg)。将所得混合物在70℃下加热16小时。将反应混合物冷却并且用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，将溶剂蒸发。将所得棕色残余物通过使用100％己烷至30％乙酸乙酯梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(78mg，68％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.16(s,1H),9.36(s,1H),7.38(dd,J＝6.7,3.0Hz,2H),7.27-7.23(m,4H),5.86(m,1H),5.73(m,1H),5.04-4.89(m,3H),4.89-4.80(m,2H),4.67(d,J＝10.6Hz,1H),3.93(s,3H),3.36(dd,J＝6.5,1.7Hz,2H),2.54-2.41(m,2H),2.36-2.29(m,1H),2.25-2.14(m,1H),1.57(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值692.2546，实验值693.3(M+1)+；保留时间：0.69分钟(LC方法T)。
步骤6：N-[6-(卞氧基)-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,12,15,17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在30分钟内在N2流鼓泡通过溶液下向二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(13mg，0.03042mmol)于1,2-二氯乙烷(15mL)中的脱气溶液中缓慢逐滴加入N-[6-(4-烯丙基-1-甲基-吡唑-3-基)-2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(78mg，0.1126mmol)于1,2-二氯乙烷(15mL)中的脱气溶液，并且将反应混合物在60℃下加热5小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压下通过浓缩去除溶剂。将所得棕色残余物通过使用100％己烷至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[6-(卞氧基)-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,12,15,17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(26mg，35％)。ESI-MS m/z计算值664.22327，实验值665.2(M+1)+；保留时间：0.6分钟(LC方法T)。
步骤7：N-[6-羟基-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,12,15,17,19-七烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯
在配备有使用3向接头的H2球的圆底烧瓶中，向N-[6-(卞氧基)-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,9,12,15,17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(26mg，0.03912mmol)于乙酸(5mL)中的溶液中加入Pd/C(16mg的10％w/w，50％湿，0.01503mmol)。使混合物经受真空并且用氮气回填三次，然后再次经受真空。用氢气填充烧瓶，然后将混合物搅拌15小时。然后使混合物经受真空并用氮气回填三次，然后用乙酸乙酯稀释，并且经硅藻土过滤。将滤液浓缩并且在高真空下干燥以得到N-[6-羟基-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,12,15,17,19-七烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(20mg，89％)。ESI-MS m/z计算值576.19196，实验值577.1(M+1)+；保留时间：0.42分钟(LC方法T)。
步骤8：20-氨基-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,12,15,17,19-七烯-6-醇(盐酸盐)(化合物24)
将N-[6-羟基-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,12,15,17,19-七烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(20mg)溶解于TFA(100μL，1.298mmol)和二氯甲烷(400μL)的预制溶液中，并且将反应在室温下搅拌约1小时。将溶剂去除，并且将残余物溶解于DMSO(1mL)中，并且在15分钟内将混合物通过使用30％至99％乙腈/水(+5mM HCl)流动梯度的反相HPLC进行纯化，得到呈无色固体以及作为外消旋混合物的20-氨基-14-甲基-6,18-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.012,16]二十二碳-1(21),2,4,12,15,17,19-七烯-6-醇(盐酸盐)(1mg，5％)。ESI-MS m/z计算值476.13956，实验值477.1(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法J)。
实例12：17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物25)、17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物26)、17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物27)和17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物28)的制备
步骤1：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(三氟甲基)-6-[1-(三氟甲基)-1-三甲基硅烷基氧基-戊-4-烯基]吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(500mg，0.9951mmol)于THF(5mL)中的搅拌溶液中加入三甲基(三氟甲基)硅烷(1.2g，8.439mmol)。然后加入四丁基氟化铵(50μL的1M，0.05mmol，THF中的1M溶液)。将反应混合物缓慢温热至室温并搅拌15小时。在此之后，加入5mL的水，并用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将有机相合并，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。在6分钟内将残余物通过使用40％乙腈/水至100％乙腈的流动梯度的反相色谱法进行纯化，得到3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(三氟甲基)-6-[1-(三氟甲基)-1-三甲基硅烷基氧基-戊-4-烯基]吡啶-2-甲酸甲酯(265mg，41％)。ESI-MS m/z计算值644.2352，实验值645.3(M+1)+；保留时间：1.98分钟(LC方法M)。
步骤2：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(三氟甲基)-6-[1-(三氟甲基)-1-三甲基硅烷基氧基-戊-4-烯基]吡啶-2-甲酸甲酯(265mg，0.4111mmol)于THF(4mL)、H2O(1mL)和乙腈(2mL)中的搅拌溶液中分两份加入LiOH(30mg，1.253mmol)(彼此间隔5分钟)。50分钟后，将有机溶剂蒸发，加入5mL的HCl(10％)，并用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将有机相合并，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在7分钟内将残余物通过使用30％乙腈/水至100％乙腈的流动梯度的反相色谱法进行纯化，得到3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(131mg，70％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.14(s,1H),9.52(d,J＝3.0Hz,1H),7.21(bd,J＝7.5,4.4Hz,1H),6.03-5.42(m,1H),5.21-4.70(m,2H),3.29(s,1H),2.53-2.45(m,1H),2.25-2.06(m,2H),1.97-1.88(m,1H),1.56(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值458.12766，实验值459.1(M+1)+；保留时间：1.48分钟(LC方法J)。
步骤3：N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(110mg，0.2400mmol)和2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(盐酸盐)(89.5mg，0.2642mmol)于NMP(5mL)中的溶液中加入DIEA(93mg，0.7196mmol)，随后加入HATU(137mg，0.3603mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将混合物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3X 50mL)萃取。将有机相合并，并且经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过使用0％至15％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(150mg，84％)。ESI-MS m/z计算值742.2413，实验值743.2(M+1)+；保留时间：1.59分钟(LC方法M)。
步骤4：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(240mg，0.3232mmol)和DIEA(104.5mg，0.8086mmol)于乙腈(5mL)中的溶液加热至50℃，然后加入p-TsCl(92.5mg，0.4852mmol)。将所得混合物在70℃下加热2小时并冷却至室温。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3X 20mL)萃取。将有机层合并，并且用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并且将溶剂蒸发。通过使用90:10己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(145mg，62％)。ESI-MS m/z计算值724.2307，实验值725.2(M+1)+；保留时间：1.93分钟(LC方法M)。
步骤5：N-[6-苄氧基-13-羟基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在90℃下向N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[1-羟基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(280mg，0.3864mmol)于甲苯(100mL)中的溶液中加入[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(32mg，0.05609mmol)，同时通过橡胶隔膜在溶液中鼓泡氮气。将混合物在110℃下加热3小时。将溶剂蒸发，并且将残余物通过使用90:10己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法进行纯化，得到产物的两个单独的异构混合物：N-[6-苄氧基-13-羟基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(异构体1，31mg，12％，ESI-MSm/z计算值696.1994，实验值697.3(M+1)+；保留时间：1.58分钟(LC方法M)以及异构体2，30mg，11％，ESI-MS m/z计算值696.1994，实验值697.2(M+1)+；保留时间：1.66分钟(LC方法M))。由于化合物的规模和一些杂质，将两种异构体混合并进入下一步。
步骤6：17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1)和17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2)
将N-[6-苄氧基-13-羟基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(61mg，0.08757mmol)溶解于乙酸(2mL)，并且转移到高压反应器中。接下来，加入Pd/C(19mg，10％w/w，0.008927mmol，50％湿)，并且将帕尔反应器抽真空并填充氮气3次，并且最终填充至多150psi的氢气。14小时后，将反应器减压并通过硅藻土垫过滤，并用10mL的乙酸乙酯洗涤。去除溶剂，并且将残余物溶解于二氯甲烷(2mL)、TFA(2mL，25.96mmol)，并且搅拌15分钟。加入饱和NaHCO3溶液(5mL)，并且用二氯甲烷(3X 10mL)萃取。将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。在10分钟内将残余物通过使用20％乙腈/水至80％乙腈的流动梯度的反相色谱法进行纯化，得到第一洗脱非对映异构体对17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1)(16mg，36％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.92(s,1H),6.76(s,2H),6.53(s,1H),2.98(m,1H),2.82(s,1H),2.37-2.15(m,2H),2.01-1.80(m,3H),1.71-1.42(m,5H),1.37-1.28(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值508.1157，实验值509.1(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法J)。
得到稍后的洗脱非对映异构体对17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2)(15mg，34％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.93(s,1H),6.78(s,2H),6.44(s,1H),3.16-2.87(m,1H),2.80(s,1H),2.54-2.10(m,2H),1.94-1.79(m,1H),1.72-1.59(m,3H),1.54-1.44(m,5H)ppm。ESI-MS m/z计算值508.1157，实验值509.1(M+1)+；保留时间：1.11分钟(LC方法J)。
步骤7：17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(化合物25)和17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(化合物26)
将17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1)(15mg，0.02951mmol)通过使用ChiralCel OJ-3柱(250X 10mm，5μm粒度)以及16％甲醇(20mM NH3)和84％二氧化碳的以8分钟内10毫升/分钟的流速(进样体积＝70μL，甲醇中的约20mg/mL溶液)的流动相的SFC色谱法进行纯化，得到呈白色固体和待洗脱的第一对映异构体17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体1)(5.6mg，74％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.92(s,1H),6.76(s,2H),6.53(s,1H),2.98(m,1H),2.82(s,1H),2.37-2.15(m,2H),2.01-1.80(m,3H),1.71-1.42(m,5H),1.37-1.28(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值508.1157，实验值509.1(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法J)。
第二洗脱对映异构体分离为白色固体17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对1，对映异构体2)(1.9mg，25％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.92(s,1H),6.76(s,2H),6.53(s,1H),2.98(m,1H),2.82(s,1H),2.37-2.15(m,2H),2.01-1.80(m,3H),1.71-1.42(m,5H),1.37-1.28(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值508.1157，实验值509.1(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法J)。
步骤8：17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(化合物27)和17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(化合物28)
将17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2)(14mg，0.02754mmol)通过使用ChiralCel OJ-3柱(250X 10mm，5μm粒度)以及16％甲醇(20mM NH3)和84％二氧化碳的以8分钟内10毫升/分钟的流速(进样体积＝70μL，甲醇中的约20mg/mL溶液)的流动相的SFC色谱法进行纯化，得到呈白色固体和待洗脱的第一对映异构体17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体3)(6.1mg，85％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.93(s,1H),6.78(s,2H),6.44(s,1H),3.16-2.87(m,1H),2.80(s,1H),2.54-2.10(m,2H),1.94-1.79(m,1H),1.72-1.59(m,3H),1.54-1.44(m,5H)ppm。ESI-MS m/z计算值508.1157，实验值509.1(M+1)+；保留时间：1.11分钟(LC方法J)。
将第二洗脱对映异构体分离为白色固体17-氨基-6,13,15-三(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6,13-二醇(非对映异构体对2，对映异构体4)(5.2mg，73％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.93(s,1H),6.78(s,2H),6.44(s,1H),3.16-2.87(m,1H),2.80(s,1H),2.54-2.10(m,2H),1.94-1.79(m,1H),1.72-1.59(m,3H),1.54-1.44(m,5H)ppm。ESI-MS m/z计算值508.1157，实验值509.1(M+1)+；保留时间：1.11分钟(LC方法J)。
实例13：(6R)-17-氨基-13-叔丁氧基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(E/Z异构体1)(盐酸盐)(化合物29)和(6R)-17-氨基-13-叔丁氧基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(E/Z异构体2)(盐酸盐)(化合物30)的制备
步骤1：N-[(6R)-13-叔丁氧基亚氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z异构体1)和N-[(6R)-13-叔丁氧基亚氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z异构体2)
向N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(27mg，0.05014mmol)于EtOH(1mL)、乙酸(1mL)中的溶液中加入O-叔丁基羟基胺(盐酸盐)(38mg，0.3026mmol)，随后加入NaOAc(42mg，0.5120mmol)。将反应混合物在80℃下加热过夜。加入无水硫酸镁，并将反应在80℃下加热另外6小，在约60％转化率时停止反应。将反应混合物过滤，并将滤液浓缩。在15分钟内将残余物通过使用50％至99％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相HPLC进行纯化，得到呈米白色固体和待洗脱的第一对映异构体N-[(6R)-13-叔丁氧基亚氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z异构体1)(8.4mg，55％)。ESI-MS m/z计算值609.2386，实验值610.2(M+1)+；保留时间：1.76分钟(LC方法M))。
待洗脱的第二对映异构体分离为米白色固体N-[(6R)-13-叔丁氧基亚氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z异构体2)(6.7mg，44％)。ESI-MS m/z计算值609.2386，实验值610.2(M+1)+；保留时间：1.96分钟(LC方法M))。
步骤2：(6R)-17-氨基-13-叔丁氧基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(E/Z异构体1)(盐酸盐)(化合物29)
将N-[(6R)-13-叔丁氧基亚氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z异构体1)(8.4mg，0.01378mmol)溶解于TFA(100μL，1.298mmol)和二氯甲烷(400μL)(1:4TFA/二氯甲烷的预制溶液)中，并且将反应在室温下搅拌约1小时。将溶剂去除，并且在15分钟内将残余物通过使用30％至99％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相HPLC进行纯化，得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-13-叔丁氧基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(E/Z异构体1)(盐酸盐)(3.9mg，52％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.71(s,1H),7.65(s,1H),6.90(s,2H),2.45(s,2H),2.17(s,2H),1.67(s,2H),1.57(s,2H),1.41(s,4H),1.16(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值509.18616，实验值510.1(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法J)。
步骤3：(6R)-17-氨基-13-叔丁氧基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(E/Z异构体2)(盐酸盐)(化合物30)
将N-[(6R)-13-叔丁氧基亚氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z异构体2)(6.7mg，0.01099mmol)溶解于TFA(100μL，1.298mmol)和二氯甲烷(400μL)(1:4TFA/二氯甲烷的预制溶液)中，并且将反应在室温下搅拌约1小时。将溶剂去除，并且在15分钟内将残余物通过使用30％至99％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相HPLC进行纯化，得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-13-叔丁氧基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(E/Z异构体2)(盐酸盐)(2mg，27％)。ESI-MS m/z计算值509.18616，实验值510.1(M+1)+；保留时间：1.93分钟(LC方法M))。
实例14：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮肟(顺式或反式肟)(化合物31)的制备
步骤1：N-[(6R)-6-苄氧基-13-羟基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
向N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(150mg，0.2394mmol)于EtOH(3mL)中的溶液中加入羟基胺(盐酸盐)(50mg，0.7195mmol)，随后加入NaOAc(98mg，1.195mmol)。将反应混合物在80℃下加热过夜。将反应过滤，并将滤液浓缩，然后通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[(6R)-6-苄氧基-13-羟基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(125mg，81％)。ESI-MS m/z计算值641.2073，实验值462.2(M+1)+；保留时间：0.95分钟(LC方法T)。
步骤2：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮肟(顺式或反式肟)(化合物31)
部分1：向N-[(6R)-6-苄氧基-13-羟基亚氨基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(30mg，0.04676mmol)于MeOH(450μL)中的溶液中加入Pd/C(20mg的10％w/w，0.01879mmol)。将混合物在氢气气氛，200psi下搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯充分洗涤，并且然后浓缩以得到25mg黄色残余物，将其直接用于部分2。
部分2：将部分1中获得的黄色残余物(20mg)于TFA(250μL)中的溶液中在室温下搅拌5分钟。将反应混合物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯充分洗涤，并且然后浓缩。用MeOH稀释，并且通过使用30％至99％乙腈和水(+0.05mM HCl)的反相色谱法进行纯化，得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮肟(顺式或反式肟)(5mg，30％，2个步骤)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.66(s,1H),2.82(m,1H),2.61(m,1H),2.23(t,J＝7.8Hz,2H),2.12-2.02(m,1H),1.79(m,3H),1.61(m,4H)ppm。ESI-MS m/z计算值453.12357，实验值454.17(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)。
实例15：20-氨基-6,18-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(21),2,4,13,15,17,19-七烯-6-醇(对映异构体1)(化合物32)和20-氨基-6,18-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(21),2,4,13,15,17,19-七烯-6-醇(对映异构体2)(化合物33)的制备
步骤1：戊-4-烯酰肼
向戊-4-烯酸(1g，9.988mmol)和N-氨基氨基甲酸叔丁酯(6.6g，49.94mmol)于乙酸乙酯(45mL)中的搅拌溶液中加入T3P(31.8g的50％w/w，49.97mmol)，随后加入吡啶(15.8g，199.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。然后，缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液，直到未观察到气泡形成。将有机化合物用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取，并将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过使用75:25己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法进行的纯化得到淡黄色油。接下来，将化合物溶解于二氯甲烷(15mL)中并冷却于冰浴中，并且缓慢加入TFA(10mL，129.8mmol)，并使反应混合物温热至室温，并且搅拌另外1小时。在此之后，将饱和碳酸氢钠溶液加入到混合物中(pH＝7)。将化合物用乙酸乙酯(4X 15mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩以得到戊-4-烯酰肼(418mg，37％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39(bs,1H),5.86-5.75(m,1H),5.39-4.80(m,2H),3.95(bs,2H),2.58-2.35(m,2H),2.33-2.03(m,2H)ppm。
步骤2：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(戊-4-烯酰基氨基)氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(205mg，0.3325mmol)和戊-4-烯酰肼(45.6mg，0.3995mmol)于NMP(10mL)中的溶液中加入DIEA(129mg，0.9981mmol)，随后加入HATU(190mg，0.4997mmol)。将反应混合物在室温下搅拌35分钟。将混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将有机相合并，并且经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。在10分钟内将残余物通过使用30％至95％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(戊-4-烯酰基氨基)氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(122mg，51％)。ESI-MS m/z计算值712.2444，实验值713.3(M+1)+；保留时间：1.31分钟(LC方法M)。
步骤3：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(5-丁-3-烯基-1,3,4-噁二唑-2-基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(戊-4-烯酰基氨基)氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.1824mmol)和DIEA(59mg，0.4565mmol)于乙腈(5mL)中的溶液加热至50℃，然后加入4-甲基苯磺酰氯(52.2mg，0.2738mmol)。将所得混合物在70℃下加热100分钟，将反应混合物冷却，并且用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。通过使用80:20己烷和乙酸乙酯的硅胶色谱法进行的纯化得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(5-丁-3-烯基-1,3,4-噁二唑-2-基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(86mg，68％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.45(s,1H),9.53(s,1H),7.53-7.41(m,2H),7.38-7.27(m,3H),5.88(m,1H),5.76(m,1H),5.20-4.92(m,4H),4.84(d,J＝10.6Hz,1H),4.70(d,J＝10.5Hz,1H),3.08(t,J＝7.5Hz,2H),2.72-2.57(m,2H),2.56-2.45(m,2H),2.42-2.31(m,1H),2.26-2.17(m,1H),1.59(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值694.2338，实验值695.0(M+1)+；保留时间：1.69分钟(LC方法M)。
步骤4：N-[12-羟基-12,20-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(20),2,4,13,15,17(21),18-七烯-18-基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(5-丁-3-烯基-1,3,4-噁二唑-2-基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(98mg，0.1411mmol)于1,2-二氯乙烷(25mL)中的搅拌溶液加热直至70℃，并且加入二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(15.5mg，0.02112mmol)。将反应混合物在85℃下加热1.5小时，冷却至室温，并且将溶剂蒸发。通过使用15:85乙酸乙酯和己烷的硅胶色谱法进行的纯化得到所需的大环化化合物。将残余物溶解于乙酸(3mL)中，转移到高压反应器中，并加入Pd/C(20mg，10％w/w，0.009397mmol，50％湿)。将反应器抽真空并填充氮气三次，最终抽真空并填充H2至多60psi。将混合物搅拌6小时，并且然后减压。通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤，并且将溶剂蒸发。在12分钟内通过使用20％至90％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相色谱法进行的纯化得到N-[12-羟基-12,20-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(20),2,4,13,15,17(21),18-七烯-18-基]氨基甲酸叔丁酯(30mg，37％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.70(s,1H),9.45(s,1H),4.04(bs,1H),3.21(m,1H),2.98(m,1H),2.46(m,1H),2.28(m,1H),2.13-1.69(m,6H),1.59(s,9H),153-1.39(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值578.17126，实验值579.1(M+1)+；保留时间：1.55分钟(LC方法J)。
步骤5：20-氨基-6,18-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(21),2,4,13,15,17,19-七烯-6-醇(对映异构体1)(化合物32)和20-氨基-6,18-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(21),2,4,13,15,17,19-七烯-6-醇(对映异构体2)(化合物33)
在室温下向N-[12-羟基-12,20-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(20),2,4,13,15,17(21),18-七烯-18-基]氨基甲酸叔丁酯(30mg，0.05186mmol)于二氯甲烷(1.5mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1.5mL，19.47mmol)，并且将混合物搅拌35分钟。将溶剂在减压下蒸发。通过使用ChiralCel OZ-3柱(250X 10mm，5μm粒度)的手性SFC和具有18％甲醇(20mM NH3)82％二氧化碳的以10分钟内10毫升/分钟的流速的流动相的双梯度运行进行的纯化得到待洗脱的第一对映异构体20-氨基-6,18-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(21),2,4,13,15,17,19-七烯-6-醇(对映异构体1)(10mg，40％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.96(s,1H),7.16(s,2H),6.54(s,1H),3.21-3.07(m,1H),3.04-2.96(m,1H),2.42(m,1H),2.29(m,1H),2.02-1.90(m,1H),1.90-1.73(m,4H),1.71-1.48(m,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值478.1188，实验值479.0(M+1)+；保留时间：0.8分钟(LC方法J)。
得到稍后的洗脱对映异构体20-氨基-6,18-双(三氟甲基)-22,23-二氧杂-3,4,14,15,21-五氮杂四环[15.3.1.12,5.113,16]二十三碳-1(21),2,4,13,15,17,19-七烯-6-醇(对映异构体2)(10mg，40％)。1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δ7.96(s,1H),7.16(s,2H),6.54(s,1H),3.21-3.07(m,1H),3.04-2.96(m,1H),2.42(m,1H),2.29(m,J＝14.1,11.8,5.3Hz,1H),2.02-1.90(m,1H),1.90-1.73(m,4H),1.71-1.48(m,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值478.1188，实验值479.0(M+1)+；保留时间：0.8分钟(LC方法J)。
实例16：17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮(对映异构体1)(化合物34)和17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮(对映异构体2)(化合物35)的制备
步骤1：N-[6-苄氧基-9-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[6-苄氧基-10-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(位置异构混合物)
在0℃下向N-[6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(850mg，1.316mmol)于THF(15mL)中的溶液中逐滴加入二甲基硫化硼烷复合物(995μL的2M，1.99mmol)，并且在0℃下搅拌15分钟。使反应温热至室温并且搅拌1小时。在用NaOH水溶液(6mL的1M，6mmol)淬灭之前将反应冷却至0℃，随后加入过氧化氢(7mL的30％w/v，61.74mmol)。将此混合物在室温下搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯(2X 80mL)萃取。将有机层合并，用盐水(80mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用100％己烷至80％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法(80克柱)进行纯化(产物在30％至40％乙酸乙酯下洗脱)，以得到呈白色固体的由以下组成的两个位置异构产物的未经分离的混合物：N-[6-苄氧基-9-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(425mg，50％)，ESI-MS m/z计算值644.207，实验值645.2(M+1)+；保留时间：1.73分钟(LC方法J)和N-[6-苄氧基-10-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(325mg，38％)。ESI-MS m/z计算值644.207，实验值645.2(M+1)+；保留时间：1.73分钟(LC方法J)，将其直接用于接下来的步骤。基于来自HPLC的两个产物峰的比率来估计产率。
步骤2：N-[6-苄氧基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[6-苄氧基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在室温下向含有N-[6-苄氧基-9-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(425mg，0.6594mmol)和N-[6-苄氧基-10-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(325mg，0.5042mmol)于二氯甲烷(22mL)中的位置异构混合物的溶液加入戴斯-马丁高碘烷(500mg，1.179mmol)。15分钟后，加入另外的戴斯-马丁高碘烷(500mg，1.179mmol)，并且搅拌另外30分钟。将反应用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，然后用二氯甲烷(50mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。然后将所获得的粗材料通过使用100％己烷至70％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法(40克柱)进行纯化(产物在30％乙酸乙酯下洗脱)，以得到待洗脱的第一位置异构体N-[6-苄氧基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(290mg，69％)。ESI-MS m/z计算值642.1913，实验值643.2(M+1)+；保留时间：1.91分钟。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.97(s,1H),9.10(s,1H),7.35(d,J＝4.3Hz,4H),7.29(m,1H),4.72(d,J＝10.8Hz,1H),4.64(d,J＝10.8Hz,1H),3.29-3.13(m,2H),2.89(m,1H),2.78-2.69(m,2H),2.69-2.58(m,3H),2.10-2.00(m,1H),1.99-1.88(m,1H),1.53(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值642.1913，实验值643.2(M+1)+；保留时间：1.91分钟(LC方法J)。
稍后的洗脱和极性位置异构体得到N-[6-苄氧基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(114mg，35％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.93(s,1H),9.14(s,1H),7.38-7.27(m,5H),4.79-4.68(m,2H),3.25(t,J＝7.4Hz,2H),3.09-2.95(m,2H),2.59(m,2H),2.46(d,J＝4.8Hz,1H),2.26(m,1H),2.05-1.85(m,2H),1.54(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值642.1913，实验值643.2(M+1)+；保留时间：1.86分钟(LC方法J)。
步骤3：N-[6-羟基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在250mL圆底烧瓶中，将N-[6-苄氧基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(236mg，0.3673mmol)于乙酸乙酯(12mL)和乙酸(3mL)中的溶液用氮气吹扫。然后，加入Pd/C(118mg的10％w/w，0.1109mmol)。将混合物用氮气脱气，然后通过填充有氢气的气球进行吹扫。使混合物在1atm的氢气下(使烧瓶配备有氢气球)搅拌5小时。将反应用氮气吹扫，然后过滤，并将材料用二氯甲烷和己烷稀释，然后浓缩。将残余物通过使用100％己烷至90％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法(40克柱)进行纯化(产物在30％乙酸乙酯下洗脱)，以得到呈白色固体的N-[6-羟基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，64％)。ESI-MS m/z计算值552.14435，实验值553.2(M+1)+；保留时间：1.99分钟。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.92(s,1H),9.08(s,1H),7.86(s,1H),3.22(m,1H),3.10(m,1H),2.83-2.66(m,3H),2.61(m,2H),2.35(m,1H),2.00(s,1H),1.95-1.87(m,1H),1.53(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值552.14435，实验值553.2(M+1)+；保留时间：1.99分钟(LC方法A)。
步骤4：17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮
将N-[6-羟基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.2353mmol)溶解于二氯甲烷(3mL)中，并且向混合物中加入TFA(750μL，9.735mmol)，并且在室温下搅拌。90分钟后，将混合物蒸发至干燥，然后用乙醚稀释并再次浓缩。然后将粗材料在真空下放置2小时，以得到呈白色固体的17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮(105mg，99％)。ESI-MS m/z计算值452.09192，实验值453.2(M+1)+；保留时间：1.41分钟(LC方法A)。
步骤5：17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮(对映异构体1)(化合物34)和17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮(对映异构体2)(化合物35)
将17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮通过使用ChiralPak AD柱(250X21.2mm，5μm粒度)以及5％至80％甲醇(20mM NH3)和二氧化碳的流动相的手性SFC进行纯化，得到呈白色固体和待洗脱的第一对映异构体17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮(对映异构体1)(46.9mg，88％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.79(d,J＝10.8Hz,2H),7.60(s,2H),3.19-3.07(m,2H),2.86-2.67(m,2H),2.67-2.52(m,3H),2.36(m,1H),2.06-1.87(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值452.09192，实验值453.2(M+1)+；保留时间：1.41分钟(LC方法A)。
稍后的洗脱对映异构体分离为呈白色固体的17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9,13-二酮(对映异构体2)(46mg，87％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.79(d,J＝12.9Hz,2H),7.59(s,2H),3.18-3.06(m,2H),2.79(m,1H),2.74-2.67(m,1H),2.67-2.56(m,2H),2.56-2.52(m,1H),2.36(m,1H),2.03-1.88(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值452.09192，实验值453.2(M+1)+；保留时间：1.41分钟(LC方法A)。
实例17：17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10,13-二酮(对映异构体1)(化合物36)和17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10,13-二酮(对映异构体2)(化合物37)的制备
步骤1：N-[6-羟基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-苄氧基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.1089mmol)于乙酸(1.89mL)中的溶液中加入Pd/C(46.36mg的10％w/w，0.04356mmol)。将混合物在氢气气氛下使用帕尔振荡器以150psi搅拌6小时。将反应混合物通过硅塞过滤，用乙酸乙酯充分洗涤，并且然后浓缩至白色残余物，在20分钟内将其通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[6-羟基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(20mg，33％)。ESI-MS m/z计算值552.14435，实验值553.34(M+1)+；保留时间：0.32分钟(LC方法T)。
步骤2：17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10,13-二酮(对映异构体1)(化合物36)和17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10,13-二酮(对映异构体2)(化合物37)
将N-[6-羟基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(20mg，0.0362mmol)溶解于二氯甲烷(410.4μL)中，并且向混合物中加入TFA(167.2μL，2.17mmol)，并且在室温下搅拌2小时。将反应浓缩，并且然后通过使用1％至99％乙腈/水(+5mM HCl)梯度的反相色谱法进行纯化。在14.5分钟内将所得材料通过使用由手性技术公司出售的IG柱(250X 21.2mm，5μm粒度)以及5％至15％甲醇(20mM NH3)和二氧化碳的流动相的手性SFC进一步纯化，得到呈白色固体以及待洗脱的第一对映异构体17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10,13-二酮(对映异构体1)(5mg，60％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(s,1H),6.27(s,2H),3.94(s,1H),3.58-3.45(m,2H),3.03-2.85(m,2H),2.73(m,1H),2.46-2.32(m,3H),2.12(m,1H),1.78(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值452.09192，实验值453.26(M+1)+；保留时间：1.37分钟(LC方法A)。
稍后的洗脱对映异构体分离为呈白色固体的17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10,13-二酮(对映异构体2)(5mg，60％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(s,1H),6.27(s,2H),4.41(s,1H),3.59-3.43(m,2H),3.03-2.86(m,2H),2.76-2.69(m,1H),2.48-2.31(m,3H),2.18-2.07(m,1H),1.78(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值452.09192，实验值453.24(M+1)+；保留时间：1.37分钟(LC方法A)。
实例18：(6R)-17-氨基-10,10-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物38)和(6S)-17-氨基-10,10-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物39)的制备
步骤1：N-[6-苄氧基-10,10-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在氮气下向玻璃小瓶中的N-[6-苄氧基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(114mg，0.1774mmol)于1,2-二氯乙烷(354.8μL)中的溶液中加入双(2-甲氧基乙基)三氟化氨基硫(392.5μL的50％w/w，0.8870mmol)。将反应在50℃下搅拌7小时。用饱和NaHCO3水溶液淬灭，并且用二氯甲烷(2X 15mL)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，经NaSO4干燥，过滤并浓缩。通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[6-苄氧基-10,10-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(40mg，34％)。ESI-MS m/z计算值664.1932，实验值665.42(M+1)+；保留时间：0.61分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[10,10-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-苄氧基-10,10-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(55mg，0.08276mmol)于乙酸(1.485mL)中的溶液中加入Pd/C(35.23mg的10％w/w，0.0331mmol)。将混合物在氢气气氛下使用帕尔振荡器以150psi搅拌6小时。将反应混合物通过硅塞过滤，用乙酸乙酯充分洗涤，并且然后浓缩，在20分钟内将其通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[10,10-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(18mg，76％)。ESI-MS m/z计算值574.14624，实验值575.35(M+1)+；保留时间：0.38分钟(LC方法T)。
步骤3：(6R)-17-氨基-10,10-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物38)和(6S)-17-氨基-10,10-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物39)
将N-[10,10-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(27mg，0.047mmol)溶解于二氯甲烷(554.0μL)中，并且向混合物中加入TFA(217.1μL，2.818mmol)，并且在室温下搅拌2小时。将反应浓缩，并且然后通过使用1％至99％乙腈/水(+5mM HCl)的反相色谱法进行纯化。在14.5分钟内将所得材料通过使用由手性技术公司出售的IG柱(250X 21.2mm，5μm粒度)以及5％至15％甲醇(20mM NH3)和二氧化碳的流动相的手性SFC进一步纯化，得到呈白色固体以及待洗脱的第一对映异构体(6R)-17-氨基-10,10-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(1.5mg，11％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.58(s,1H),6.23(s,2H),3.65(s,1H),3.27(m,1H),3.09-2.98(m,1H),2.92-2.78(m,1H),2.66-2.32(m,3H),2.32-1.97(m,3H),1.85(t,J＝10.0Hz,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值474.0938，实验值475.3(M+1)+；保留时间：1.66分钟(LC方法A)。
稍后的洗脱对映异构体得到为呈白色固体的(6S)-17-氨基-10,10-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(1.5mg，11％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58(s,1H),6.25(s,2H),4.41(s,1H),3.32-3.21(m,1H),3.10-2.98(m,1H),2.84(s,1H),2.59-2.33(m,3H),2.27-2.01(m,3H),1.85(dd,J＝12.9,6.7Hz,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值474.0938，实验值475.3(M+1)+；保留时间：1.66分钟(LC方法A)。
实例19：(6R)-17-氨基-9,9-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物40)和(6S)-17-氨基-9,9-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物41)的制备
步骤1：N-[6-苄氧基-9,9-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-苄氧基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(295mg，0.4591mmol)于1,2-二氯乙烷(5.5mL)中的溶液中缓慢加入二乙基三氟化氨基硫(2.2mL，16.65mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后将混合物加热至85℃持续5小时。将所得混合物在0℃下用饱和NaHCO3水溶液(2mL)缓慢淬灭。将混合物用DCM稀释，用水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在15分钟内将残余物通过使用30％至99％乙腈和水(+5mM HCl)的反相色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[6-苄氧基-9,9-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(44.1mg，14％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.81(s,1H),9.39(s,1H),7.30-7.20(m,5H),4.94(d,J＝11.3Hz,1H),4.84(d,J＝11.4Hz,1H),3.19(m,1H),2.73(m,2H),2.52(m,2H),2.34(d,J＝11.8Hz,2H),2.17(q,J＝10.9,8.2Hz,3H),1.59(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值664.1932，实验值665.2(M+1)+；保留时间：2.065分钟(LC方法J)。
步骤2：N-[9,9-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在压力反应器中，将N-[6-苄氧基-9,9-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(35mg，0.05267mmol)于乙酸(550μL)和乙酸乙酯(550μL)中的溶液用氮气吹扫。然后，加入Pd/C(56.5mg的10％w/w，0.05309mmol)。将混合物用氮气脱气，然后用氢气填充，并在180psi下搅拌4小时。将反应通过硅藻土塞过滤，并用过量的乙腈和乙酸乙酯洗涤，并且浓缩。将残余物通过使用100％己烷至60％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法(12克柱)进行纯化(产物在30％乙酸乙酯下洗脱)，并且在高真空泵下放置2小时，以得到呈白色固体的N-[9,9-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(2mg，7％)。ESI-MS m/z计算值574.14624，实验值575.2(M+1)+；保留时间：1.56分钟(LC方法J)和N-[9,9-二氟-6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(26mg，86％)。ESI-MS m/z计算值576.16187，实验值577.2(M+1)+；保留时间：1.28分钟(LC方法J)，污染有少量的N-[9,9-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯。
在室温下向N-[9,9-二氟-6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(30mg，0.05204mmol，污染有少量的N-[9,9-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯)于二氯甲烷(2.5mL)中的溶液中加入DMP(65mg，0.1533mmol)。30分钟后，加入另外的DMP(65mg，0.1533mmol)，并且搅拌另外2.5小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，并且用二氯甲烷(50mL)萃取。将经合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用100％己烷至70％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法(24克柱)进行纯化(产物在30％乙酸乙酯下洗脱)，得到呈白色固体的N-[9,9-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(28.5mg，95％)。ESI-MS m/z计算值574.14624，实验值575.2(M+1)+；保留时间：1.56分钟(LC方法J)。
步骤3：(6R)-17-氨基-9,9-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物40)和(6S)-17-氨基-9,9-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物41)
向N-[9,9-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(28.5mg，0.04962mmol)于二氯甲烷(750μL)中的溶液中加入TFA(250μL，3.245mmol)，并且在室温下搅拌60分钟。将混合物蒸发至干燥，然后用乙醚稀释并浓缩。在14.5分钟内将残余物通过使用由手性技术公司出售的IG柱(250X 21.2mm，5μm粒度)以及5％至15％甲醇(20mM NH3)和二氧化碳的流动相的手性SFC进行纯化，得到待洗脱的第一对映异构体，在15分钟内将其通过使用1％至99％乙腈和水(+5mM HCl)的反相色谱法重新纯化，得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-9,9-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(7.8mg，77％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55(s,1H),6.20(s,2H),3.79(s,1H),3.14(m,1H),2.85-2.73(m,1H),2.59-2.50(m,1H),2.46(d,J＝11.4Hz,1H),2.41(d,J＝12.6Hz,2H),2.26-2.16(m,2H),2.15(s,1H),2.12-2.07(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值474.0938，实验值475.1(M+1)+；保留时间：1.66分钟(LC方法A)。
在15分钟内将稍后的洗脱峰通过使用1％至99％乙腈和水(+5mM HCl)的反相色谱法进行纯化，得到呈白色固体的(6S)-17-氨基-9,9-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(7.8mg，77％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55(s,1H),6.19(s,2H),3.76(s,1H),3.14(m,1H),2.79(m,1H),2.57-2.48(m,1H),2.48-2.44(m,1H),2.44-2.34(m,2H),2.26-2.16(m,2H),2.14(d,J＝7.1Hz,1H),2.13-2.08(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值474.0938，实验值475.2(M+1)+；保留时间：1.66分钟(LC方法A)。
实例20：(6R)-17-氨基-13,13-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10-酮(化合物42)的制备
步骤1：N-[(6R)-6-苄氧基-9,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[(6R)-6-苄氧基-10,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在0℃下向N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,9,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(3.38g，5.395mmol)于THF(25mL)中的溶液中逐滴加入二甲基硫化硼烷溶液(THF中的8.10mL的2M，16.2mmol)，并且使所得混合物在0℃下搅拌15分钟。接下来，使反应温热至室温并进一步搅拌30分钟，直至UPLC显示消耗了起始材料。在用NaOH水溶液(10.79mL的2M，21.58mmol)淬灭之前，将反应冷却至0℃，随后加入过氧化氢(18.35g，161.8mmol)。在用乙酸乙酯(2X 50mL)萃取之前，使所得混合物在室温下搅拌30分钟。将有机层合并，用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体以及非对映异构体和位置异构体的混合物的N-[(6R)-6-苄氧基-9,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯与N-[(6R)-6-苄氧基-10,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯相混合(1.175g，67％)。ESI-MS m/z计算值646.2226，实验值647.27(M+1)+；保留时间：0.31分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[(6R)-6-苄氧基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[(6R)-6-苄氧基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
向位置异构体/非对映异构体的混合物的N-[(6R)-6-苄氧基-10,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯与N-[(6R)-6-苄氧基-9,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(2.35g，3.635mmol)于二氯甲烷(44mL)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(4.623g，10.9mmol)。将反应搅拌30分钟，然后用饱和NaHCO3水溶液淬灭，并且用二氯甲烷(2X 50mL)萃取。将有机层合并，并用盐水洗涤，经NaSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到待洗脱的第一位置异构体N-[(6R)-6-苄氧基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，47％)。ESI-MS m/z计算值642.1913，实验值643.29(M+1)+；保留时间：0.59分钟(LC方法T)。
待洗脱的第二位置异构体分离为N-[(6R)-6-苄氧基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(583mg，25％)。ESI-MS m/z计算值642.1913，实验值643.29(M+1)+；保留时间：0.57分钟(LC方法T)。
步骤3：N-[(6R)-6-苄氧基-13,13-二氟-10-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在氮气下向含有N-[(6R)-6-苄氧基-10,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(350mg，0.5447mmol)于1,2-二氯乙烷(1.09mL)中的溶液的玻璃密封小瓶中加入双(2-甲氧基乙基)三氟化氨基硫(THF中的2.41mL的50％w/v，5.447mmol)。将反应在50℃下搅拌6小时，然后用饱和NaHCO3水溶液淬灭，并且用二氯甲烷(2X 25mL)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，经NaSO4干燥，过滤并浓缩，然后通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的N-[(6R)-6-苄氧基-13,13-二氟-10-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(165mg)，其污染有位置异构产物，并且直接被用于下一步。ESI-MS m/z计算值664.1932，实验值665.22(M+1)+；保留时间：0.65分钟(LC方法T)。
步骤4：(6R)-17-氨基-13,13-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10-酮(化合物42)
部分1：向污染有位置异构产物(如以上步骤中所述)的N-[(6R)-6-苄氧基-13,13-二氟-10-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(165mg)于乙酸(4.455mL)中的溶液中加入10％ Pd/C(105.7mg，0.09932mmol)。将混合物在氢气气氛下使用帕尔振荡器以150psi搅拌6小时。将反应混合物通过硅塞过滤，用乙酸乙酯充分洗涤，并且然后将滤液浓缩至白色残余物，在20分钟内将其通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅色谱法进行纯化，以获得位置异构预期产物和一些过度还原的副产物的粗混合物。将此混合物向前携带到下一部分。
部分2：向在二氯甲烷(1.107mL)中的第1部分中获得的混合物(80mg)中加入戴斯-马丁高碘烷(76mg，0.1792mmol)，并且将所得混合物搅拌15分钟。将反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，然后用二氯甲烷(2X 25mL)萃取。将有机层合并，并且用盐水洗涤，经NaSO4干燥，过滤并浓缩，然后通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到产物的位置异构混合物，将其直接用于下一部分。
部分3：向第2部分中获得的混合物中加入TFA(563μL，7.308mmol)，并使所得溶液在室温下搅拌2小时。将反应浓缩，然后通过使用1％至99％乙腈/水梯度的反相HPLC进行纯化。将由此纯化中分离的次要位置异构体的部分合并，并且用饱和NaHCO3水溶液洗涤，然后用盐水洗涤，经NaSO4干燥，过滤并且然后浓缩，以得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-13,13-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-10-酮(6mg，2％，2个步骤)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.51(s,1H),5.96(s,2H),3.94(s,1H),3.39-3.22(m,1H),2.95-2.82(m,1H),2.79-2.68(m,1H),2.62(m,1H),2.54(d,J＝10.7Hz,1H),2.32-2.19(m,3H),2.06-1.98(m,1H),1.71-1.60(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值474.0938，实验值475.04(M+1)+；保留时间：0.65分钟(LC方法S)。
实例21：(6R)-17-氨基-13,13-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-酮(化合物43)的制备
步骤1：N-[(6R)-6-苄氧基-13,13-二氟-9-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在20mL密封小瓶中，在室温下将N-[(6R)-6-苄氧基-9,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(1.02g，1.587mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(9mL)中。向搅拌溶液中缓慢加入二乙基三氟化氨基硫(6.75mL，51.09mmol)，使其在室温下搅拌另外15分钟。然后，将混合物加盖并在喷砂罩后面加热至85℃持续5小时。将所得混合物在0℃下通过加入饱和NaHCO3水溶液(20mL)缓慢淬灭。将混合物用二氯甲烷稀释，用水洗涤，并且经硫酸钠干燥，然后过滤并浓缩。将粗滤液通过使用100％己烷至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈棕褐色固体的含有杂质的产物。将混合物通过使用C18柱和30％至99％乙腈/水(+5mM HCl)梯度的反相制备型色谱法进一步纯化，以得到呈白色固体的N-[(6R)-6-苄氧基-13,13-二氟-9-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(150mg)，其污染有位置异构产物。ESI-MS m/z计算值664.1932，实验值665.2(M+1)+；保留时间：2.08分钟(LC方法J)。此材料被直接用于随后步骤。
步骤2：(6R)-17-氨基-13,13-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-酮(化合物43)
部分1：在压力反应器中，将N-[(6R)-6-苄氧基-13,13-二氟-9-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(150mg)(其污染有如步骤1中所述的位置异构产物)于乙酸(2.5mL)和乙酸乙酯(2.5mL)中的溶液用氮气吹扫。然后加入10％ Pd/C(235mg，0.2208mmol)。将混合物用氮气脱气，然后用氢气填充，并在180psi下搅拌4小时。将混合物用氮气脱气，然后用氢气填充，并在180psi下搅拌另外2小时。将反应过滤，用过量的乙腈和乙酸乙酯洗涤硅藻土塞，并将滤液浓缩。然后将所获得的粗残余物通过使用100％己烷至60％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法纯化，以得到位置异构预期产物和一些过度还原的副产物的粗混合物(108mg)。将此混合物向前携带到下一部分。
部分2：向在部分1中获得的产物的混合物(108mg)在二氯甲烷(2.5mL)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(150mg，0.3537mmol)。15分钟之后，将反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，然后用二氯甲烷(50mL)萃取。将有机二氯甲烷层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。然后将粗滤液通过使用100％己烷至65％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的产物的位置异构混合物，将其直接用于下一部分。
部分3：向部分2中获得的混合物中加入TFA(500μL，6.49mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌60分钟。将混合物蒸发至干燥，然后用乙醚稀释并浓缩。然后将所获得的粗材料通过使用100％二氯甲烷至15％甲醇/二氯甲烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，并且浓缩。将所分离的混合物通过使用C18柱和1％至99％乙腈/水(+5mM HCl)梯度的反相制备型色谱法进一步纯化，以得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-13,13-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-9-酮(4.8mg，7％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.89(s,1H),7.82(s,1H),7.36(s,2H),3.22-3.15(m,1H),2.86-2.80(m,1H),2.80-2.76(m,1H),2.40(m,4H),2.28(m,1H),1.78-1.70(m,1H),1.61(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值474.0938，实验值475.2(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)。
实例22：(6R)-17-氨基-8,8-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物44)的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-己-5-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下向乙醚(19mL)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.2g，1.883mmol)中加入n-BuLi(1.66mL的2.5M，4.15mmol)作为己烷中的溶液。在-78℃下搅拌5分钟后，加入更多的n-BuLi(90μL的2.5M，0.225mmol)作为己烷中的溶液。在-78℃下搅拌另外15分钟后，逐滴加入N-甲氧基-N-甲基-己-5-烯酰胺(416mg，2.646mmol)于乙醚(6mL)中的溶液。将混合物在-78℃下搅拌15分钟，并且然后在0℃下搅拌15分钟。然后，将混合物用水(10mL)和乙醚中的1M NH4Cl稀释，然后分份。将有机层分离，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在18分钟内将残余物通过使用0％至30％的己烷溶液(10％乙酸乙酯/己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-己-5-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(575mg，47％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.32(s,1H),9.41(s,1H),7.44-7.28(m,5H),5.94(m,J＝17.1,7.3Hz,1H),5.79(m,J＝16.9,10.1,6.7Hz,1H),5.27(dd,J＝17.2,1.6Hz,1H),5.21(dd,J＝10.2,1.4Hz,1H),5.02(dd,J＝17.1,1.8Hz,1H),4.97(dd,J＝10.4,1.8Hz,1H),4.85(d,J＝10.8Hz,1H),4.71(d,J＝10.9Hz,1H),3.35-3.16(m,2H),3.13(t,J＝7.3Hz,2H),2.14(q,J＝7.2Hz,2H),1.85(p,J＝7.3Hz,2H),1.58(s,9H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-59.95(d,J＝1.7Hz),-73.15ppm。ESI-MS m/z计算值654.22766，实验值655.2(M+1)+；保留时间：0.63分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在5分钟内将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-己-5-烯酰基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(215mg，0.2792mmol)于甲苯(14mL)中的溶液逐滴加入到[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(24mg，0.04207mmol)于具有鼓泡到其中的慢氮气流的甲苯(14mL)中的经120℃预热的溶液。继续氮气鼓泡，将混合物在120℃下搅拌1小时，然后加入另外的催化剂[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(10mg，0.01753mmol)作为甲苯(1mL)中的溶液，并且将混合物在120℃下搅拌另外30分钟。然后将溶剂蒸发，并且在25分钟内将残余物通过使用0％至50％的己烷溶液(10％乙酸乙酯/己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[(6R,8Z)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(24mg，14％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.97(s,1H),9.37(s,1H),7.38-7.27(m,5H),5.66-5.52(m,2H),5.00(t,J＝11.0Hz,2H),3.24(s,1H),3.14(q,J＝8.9,7.2Hz,1H),3.03(m,J＝13.9,7.2Hz,1H),2.87(m,J＝12.8,6.6Hz,1H),2.73(s,1H),2.49(s,1H),2.21-2.06(m,1H),1.98(m,J＝13.2,6.8Hz,1H),1.57(s,9H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.52,-74.54ppm。ESI-MS m/z计算值626.1964，实验值627.2(M+1)+；保留时间：0.56分钟(LC方法T)。
继续洗脱，得到N-[(6R,8E)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(73mg，42％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.01(s,1H),9.38(s,1H),7.33-7.19(m,4H),7.18-7.05(m,1H),6.14-5.98(m,1H),5.83(m,J＝14.8,8.9,5.2Hz,1H),4.91(d,J＝11.7Hz,1H),4.61(d,J＝11.7Hz,1H),3.32-3.15(m,2H),2.89(m,J＝11.0,5.7Hz,1H),2.81(dd,J＝14.6,8.9Hz,1H),2.38-2.15(m,2H),2.03-1.83(m,2H),1.58(s,9H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.84,-74.54ppm。ESI-MS m/z计算值626.1964，实验值627.2(M+1)+；保留时间：0.56分钟(LC方法T)。
将所获得的顺式和反式产物合并以得到N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)，将其直接用于下一步骤。
步骤3：N-[(6R)-6-苄氧基-8,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
部分1：在0℃下向N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(400mg，0.6384mmol)于THF(12mL)中的溶液中逐滴加入二甲基硫化硼烷溶液(THF中的500μL的2M，1mmol)，并且将混合物在0℃下搅拌15分钟。使反应温热至室温并且搅拌1小时。加入了另外的二甲基硫化硼烷溶液(THF中的500μL的2M，1mmol)，并在室温下多搅拌30分钟。在用NaOH(2.95mL的1M，2.95mmol)淬灭之前，将反应冷却至0℃，随后加入过氧化氢(2.55mL的30％w/v，22.49mmol)。使混合物在室温下搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯(2X80mL)萃取。将有机层合并，用盐水(80mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。然后将粗材料通过使用100％己烷至80％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的包含异构体的混合物的中间体产物。
部分2：向部分1获得的混合物在二氯甲烷(5.5mL)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(290mg，0.6837mmol)。15分钟后，加入更多戴斯-马丁高碘烷(290mg，0.6837mmol)，并且搅拌另外15分钟。将反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，并且用二氯甲烷(50mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。然后将粗材料通过使用100％己烷至65％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的两种位置异构产物的混合物。使用正常相SFC-MS方法(由手性技术公司出售的IC柱，250X 21.2mm，5μm粒度以及在14.5分钟内5％至15％流动相B的双梯度运行(流动相A＝CO2，流动相B＝MeOH(+20mM NH3)，柱温＝40℃)进行进一步纯化。待洗脱的第二位置异构体(主要产物)分离为呈白色固体的N-[(6R)-6-苄氧基-8,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(210mg，51％，2个步骤)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ9.92(s,1H),9.39(s,1H),7.42-7.35(m,2H),7.35-7.25(m,3H),5.04(d,J＝10.6Hz,1H),4.85(d,J＝10.6Hz,1H),3.58(d,J＝17.0Hz,1H),3.36-3.22(m,2H),3.05(m,1H),2.74-2.63(m,1H),2.54(m,1H),2.20(m,1H),2.03-1.84(m,2H),1.65(m,1H),1.57(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值642.1913，实验值643.2(M+1)+；保留时间：1.99分钟(LC方法J)。
步骤4：N-[(6R)-6-苄氧基-8,8-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在20-mL微波小瓶中，在室温下将N-[(6R)-6-苄氧基-8,13-二氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(90mg，0.1401mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(2.25mL)中。向搅拌溶液中缓慢加入二乙基三氟化氨基硫(900μL，6.812mmol)，使混合物在室温下搅拌另外15分钟。然后，将混合物加盖并在喷砂罩后面加热至80℃持续16小时。将所得混合物在0℃下用饱和NaHCO3水溶液(20mL)缓慢淬灭。将混合物用二氯甲烷稀释，并且用水洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗材料通过使用经30％至99％乙腈/5mM HCl水溶液的梯度洗脱的C18柱的反相制备型色谱法进行纯化，以得到呈浅黄色固体的N-[(6R)-6-苄氧基-8,8-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(19mg，20％)。ESI-MS m/z计算值664.1932，实验值665.2(M+1)+；保留时间：2.27分钟(LC方法J)。
步骤5：N-[(6R)-8,8-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在压力反应器中，将N-[(6R)-6-苄氧基-8,8-二氟-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(56mg，0.08427mmol)于乙酸(1mL)和乙酸乙酯(1mL)中的溶液用氮气吹扫。然后加入10％ Pd/C(95mg，0.08927mmol)。将混合物用氮气脱气，然后用氢气填充，并在180psi下搅拌4小时。将混合物用氮气脱气，然后用氢气填充，并在180psi下搅拌另外2小时。将反应过滤，并且然后用过量的乙腈和乙酸乙酯洗涤硅藻土塞，并且将有机滤液浓缩。然后将粗材料通过使用100％己烷至60％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，然后在高真空泵下放置2小时，以得到呈白色固体的N-[(6R)-8,8-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(28mg，58％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.94(s,1H),9.43(s,1H),5.99(s,1H),3.56(d,J＝17.3Hz,1H),3.16-3.07(m,2H),2.86-2.71(m,1H),2.66(dd,J＝18.7,7.0Hz,1H),2.26(t,J＝13.3Hz,1H),2.08(m,1H),1.90-1.77(m,2H),1.56(s,9H),1.45(s,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值574.14624，实验值575.2(M+1)+；保留时间：1.77分钟(LC方法J)。
步骤6：(6R)-17-氨基-8,8-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物44)
将N-[(6R)-8,8-二氟-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(24mg，0.04178mmol)溶解于二氯甲烷(1mL)中，并且向混合物中加入TFA(200μL，2.596mmol)，并且然后将混合物在室温下搅拌。3小时后，将混合物蒸发至干燥，然后用乙醚稀释并再次浓缩。将所分离的残余物通过使用C18柱和1％至99％乙腈/5mM HCl水溶液的梯度的反相制备型色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-8,8-二氟-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(5.3mg，26％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.57(s,1H),6.15(s,2H),6.04(s,1H),3.57(d,J＝17.2Hz,1H),3.19–3.08(m,2H),2.85–2.72(m,1H),2.67(dd,J＝19.0,7.2Hz,1H),2.28(t,J＝13.2Hz,1H),2.17–2.03(m,1H),1.94–1.76(m,2H),1.44(q,J＝6.6Hz,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值474.0938，实验值475.2(M+1)+；保留时间：1.74分钟(LC方法A)。
实例23：(6R)-17-氨基-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物45)的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下向N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.952g，2.997mmol)于二乙醚(30mL)中的溶液中逐滴加入正丁基锂(己烷中的2.8mL的2.5M，7mmol)，从而使反应温度低于-70℃。将混合物在-78℃下搅拌15分钟，然后加入N-甲氧基-N,2,2-三甲基-戊-4-烯酰胺(1.7g，9.928mmol)于二乙醚(3mL)中的溶液。将混合物在-78℃下搅拌10分钟，然后在0℃下搅拌60分钟。然后将反应通过加入25mL的饱和NH4Cl水溶液来淬灭。将有机相分离，并将水相用乙酸乙酯萃取，然后将合并的有机相经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗产物通过用50％至100％乙腈/水的梯度洗脱的反相C18色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.0g，49％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.18(s,1H),9.15(s,1H),7.39-7.28(m,5H),5.91-5.67(m,2H),5.13-5.05(m,1H),5.04-4.96(m,3H),4.82-4.57(m,2H),2.60(d,J＝7.4Hz,2H),2.44(s,1H),2.37-2.22(m,3H),1.54(s,9H),1.25(s,6H)ppm；19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-58.27,-72.93ppm。ESI-MS m/z计算值682.259，实验值683.4(M+1)+；保留时间：4.11分钟(LC方法FF)。
步骤2：N-[(6R,9Z)-6-苄氧基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在20分钟内将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.37g，2.007mmol)于甲苯(85mL)中的溶液逐滴加入到[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(100mg，0.1753mmol)于具有鼓泡到其中的慢氮气流的甲苯(85mL)中的经120℃预热的溶液。继续氮气鼓泡，将混合物在120℃下搅拌1小时，然后加入另外的催化剂[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(35mg，0.06135mmol)作为甲苯(1mL)中的溶液，并且将混合物在120℃下搅拌50分钟。通过将混合物冷却至约55℃以及加入2-磺酰基吡啶-3-甲酸(145mg，0.9344mmol)，随后加入Et3N(140μL，1.004mmol)来使反应淬灭。将混合物搅拌过夜，然后经硅藻土过滤，并将溶剂在真空中去除。将粗产物通过用50％至100％乙腈/水的梯度洗脱的反相色谱法进行纯化，得到N-[(6R,9Z)-6-苄氧基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(1g，76％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.69(d,J＝45.8Hz,1H),9.06(d,J＝13.4Hz,1H),7.41-7.26(m,5H),5.73(m,J＝17.8,16.4,7.2Hz,1H),5.55(m,J＝28.2,14.1,6.9Hz,1H),4.79-4.67(m,2H),3.32(s,2H),3.17-2.97(m,1H),2.70-2.53(m,1H),2.40-2.26(m,2H),1.54(d,J＝3.3Hz,9H),1.25-1.18(m,6H)ppm；19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-58.51,-58.93,-74.23,-74.31ppm。ESI-MS m/z计算值654.22766，实验值655.4(M+1)+；保留时间：3.96分钟(LC方法FF)。
步骤3：(6R)-17-氨基-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物45)
在150psi氢气下在室温下将N-[(6R,9Z)-6-苄氧基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(401mg，0.6126mmol)、10％钯碳(130mg，0.1222mmol)和乙酸(4mL)的混合物搅拌13小时，然后将混合物过滤并蒸发滤液。将残余物溶解于乙酸乙酯，并且用1MNaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发。将残余物溶解到二氯甲烷(4mL)中，并加入戴斯-马丁高碘烷(26mg，0.0613mmol)。在室温下将混合物搅拌15分钟，然后加入甲醇(1mL)，并且将混合物用二氯甲烷稀释，并且用1M Na2S2O3洗涤，然后经1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[(6R)-6-羟基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(263mg，76％)。ESI-MS m/z计算值566.1964，实验值567.2(M+1)+；保留时间：0.42分钟。将此材料N-[(6R)-6-羟基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(210mg，0.37mmol)溶解于TFA(2mL)和水(100μL)中，并且在室温下搅拌15分钟。然后将溶剂蒸发，并且将残余物溶解于乙酸乙酯中，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用5％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到(6R)-17-氨基-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(166mg，58％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.45(s,1H),5.84(s,2H),4.02(s,1H),2.49-2.39(m,1H),2.39-2.29(m,1H),2.21(m,J＝14.5,10.0,5.7Hz,1H),1.85(m,J＝12.4,4.5Hz,2H),1.77-1.65(m,1H),1.62-1.43(m,3H),1.37-1.29(m,1H),1.27(s,3H),1.19(s,3H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.21,-79.44ppm。ESI-MSm/z计算值466.14395，实验值467.1(M+1)+；保留时间：1.54分钟(LC方法Q)。
实例24：(6S)-17-氨基-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物46)的制备
步骤1：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(415mg，0.6371mmol)于二乙醚(6mL)中的溶液在干冰/丙酮浴中冷却至-78℃。然后，缓慢加入己烷中的n-BuLi(586μL的2.5M，1.465mmol)，并且使混合物在此温度下搅拌15分钟。然后，将N-甲氧基-N,2,2-三甲基-戊-4-烯酰胺(136mg，0.7942mmol)溶解于二乙醚(4mL)中，并且通过注射器加入到反应混合物中。将混合物在此温度下搅拌15分钟，并且然后去除干冰浴，并使反应搅拌另外10分钟。通过加入10mL稀乙酸(10％)淬灭反应，并将有机物用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤，并将溶剂在真空下蒸发。将残余物通过使用30％乙腈/水至100％水的梯度的C18反相色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119mg，27％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.22(s,1H),9.36(s,1H),7.59-6.65(m,5H),5.97-5.48(m,2H),5.21-4.97(m,4H),4.84(d,J＝10.8Hz,1H),4.68(d,J＝10.8Hz,1H),2.72-2.57(m,2H),2.55-2.44(m,2H),2.42-2.35(m,1H),2.32-2.19(m,1H),1.58(s,9H),1.30(s,6H)ppm。ESI-MS m/z计算值682.259，实验值683.3(M+1)+；保留时间：2.05分钟(LC方法M)。
步骤2：N-[6-苄氧基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
将[1,3-双-(2-甲苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(2-异丙氧基亚苄基)钌(II)(22.1mg，0.03874mmol)于甲苯(50mL)中的溶液用氮气鼓泡，并且加热至70至75℃。接下来，在此温度下，在40分钟内逐滴加入N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220mg，0.3223mmol)于甲苯(30mL)中的溶液，同时所达到的温度增加至105℃。然后将混合物在此温度下搅拌90分钟，并且每30分钟将溶液用氮气吹泡2分钟。当所有起始材料转化为所需产物时，将反应混合物冷却至40℃，并且将溶剂在减压下蒸发，然后将残余物通过使用30％乙腈/水至100％水的梯度的C18反相色谱法进行纯化，得到N-[6-苄氧基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(160mg，76％)。ESI-MS m/z计算值654.22766，实验值655.1(M+1)+；保留时间：2.09分钟(LC方法M)。
步骤3：N-[6-羟基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在高压反应器中在氮气下向N-[6-苄氧基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(150mg，0.2291mmol)于MeOH(2mL)和乙酸(2mL)中的溶液中加入10％ Pd/C(49mg，0.02293mmol，50％湿)。将反应器密封、抽真空并用氮气填充3次。然后将反应器抽真空并且填充至多120psi的氢气。将混合物搅拌过夜，然后减压，并通过用二氯甲烷和MeOH洗涤的硅藻土垫过滤。将残余物通过使用30％乙腈/水至100％水的梯度的C18反相色谱法进行纯化，得到N-[6-羟基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(46mg，35％)。ESI-MS m/z计算值566.1964，实验值567.2(M+1)+；保留时间：1.96分钟(LC方法J)。反应还产生大量过还原产物(M+2)。
步骤4：(6S)-17-氨基-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物46)
向N-[6-羟基-12,12-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，0.1412mmol)于二氯甲烷(3mL)中的搅拌溶液中加入TFA(2mL，25.96mmol)，并且将混合物在室温下搅拌35分钟。将溶剂蒸发，并且将残余物通过使用30％乙腈/水至90％水的梯度的C18反相色谱法进行纯化，得到纯目标外消旋产物。在10分钟内将此外消旋材料使用利用经12％甲醇(+20mM NH3)/CO2洗脱的由手性技术公司出售的ChiralPak IG柱(250X 21.2mm，5μm粒度)的正常相SFC-MS方法分离成单个对映异构体。待洗脱的第二对映异构体分离为(6S)-17-氨基-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(15mg，23％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.45(s,1H),5.85(s,2H),4.16(bs,1H),2.49-2.30(m,2H),2.25-214(m,1H),1.88-1.81(m,2H),1.75-1.45(m,5H),1.27(s,3H),1.19(s,3H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.21,-79.45ppm；ESI-MS m/z计算值466.14395，实验值467.1(M+1)+；保留时间：1.33分钟(LC方法J)。
实例25：(6R)-17-氨基-6-羟基-11,11-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物47)的制备
步骤1：N-甲氧基-N,3,3-三甲基-己-5-烯酰胺
在0℃下在氮气下在冰浴中向羰基二咪唑(7g，43.17mmol)于二氯甲烷(200mL)中的经氮气吹扫的溶液中加入3,3-二甲基己-5-烯酸(5g，35.16mmol)。在温热至室温时搅拌。16小时后，加入N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(8.75g，89.7mmol)。然后，将搅拌混合物冷却至0℃并缓慢加入吡啶(7.5mL，92.73mmol)，并在加入完成后将混合物搅拌5分钟，然后去除冰水浴并将溶液搅拌过夜。通过旋转蒸发去除二氯甲烷，然后向残余物中加入1:1二乙醚/二氯甲烷，并且用饱和盐水水溶液(1倍)萃取。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩成棕褐色油，将其通过使用100％二氯甲烷至10％甲醇/二氯甲烷的浅梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈无色油的N-甲氧基-N,3,3-三甲基-己-5-烯酰胺(5.6g，86％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.08–5.62(m,1H),5.10–4.95(m,2H),3.66(s,3H),3.17(s,3H),2.32(s,2H),2.14(dd,J＝7.6,1.4Hz,2H),1.03(s,6H)ppm。ESI-MS m/z计算值185.14159，实验值186.2(M+1)+；保留时间：1.59分钟(LC方法A)。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(3,3-二甲基己-5-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下向乙醚(4mL)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(300mg，0.4519mmol)中加入n-BuLi(400μL的2.5M，1mmol)作为己烷中的溶液。在-78℃下搅拌15分钟后，通过筒状针逐滴加入N-甲氧基-N-,3,3-三甲基-己-5-烯酰胺(109mg，0.5884mmol)于乙醚(1.4mL)中的溶液。将混合物在-78℃下搅拌23分钟，并且然后在0℃下搅拌15分钟。然后，将混合物用水(2mL)中的1M NH4Cl稀释，将层分离。将有机层用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在15分钟内将残余物通过使用0％至30％的己烷溶液(10％乙酸乙酯/己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(3,3-二甲基己-5-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(106mg，34％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.30(s,1H),9.41(s,1H),7.45-7.26(m,5H),6.07-5.74(m,2H),5.39-5.17(m,2H),5.09-4.94(m,2H),4.86(d,J＝10.8Hz,1H),4.71(d,J＝10.9Hz,1H),3.33-3.16(m,2H),3.08(d,J＝2.0Hz,2H),2.14(m,J＝7.5,1.2Hz,2H),1.58(s,9H),1.04(s,6H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-59.71,-73.14ppm。ESI-MS m/z计算值682.259，实验值683.3(M+1)+；保留时间：0.7分钟(LC方法T)。
步骤3：N-[(6R)-6-苄氧基-11,11-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(3,3-二甲基己-5-烯酰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(407mg，0.5962mmol)和亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(76mg，0.08952mmol)于甲苯(60mL)中的溶液在120℃下加热30分钟。然后加入亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(25mg，0.02945mmol)，并且将溶液在120℃下搅拌50分钟。然后加入另外的亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(25mg，0.02945mmol)，并且将溶液在120℃下搅拌30分钟。然后加入另外的亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(25mg，0.02945mmol)，并且将溶液在120℃下搅拌30分钟。然后加入更多的亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(25mg，0.02945mmol)，并且将溶液在120℃下搅拌30分钟。然后加入另外的亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(25mg，0.02945mmol)，并且将溶液在120℃下搅拌20分钟。将溶剂蒸发，并且使残余物经受使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶柱色谱法，以得到经部分纯化的材料。将此材料溶解于1mL甲醇中，并且经受使用经70％至99％乙腈/5mMHCl水溶液的梯度洗脱的Luna75X 30mm C18柱(5μm粒度)的制备型HPLC，得到N-[(6R)-6-苄氧基-11,11-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(21mg，5％)。ESI-MS m/z计算值654.22766，实验值655.3(M+1)+；保留时间：0.62分钟(LC方法T)。
步骤4：N-[(6R)-6-羟基-11,11-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
在250mL圆底烧瓶中，将N-[(6R)-6-苄氧基-11,11-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(23mg，0.03514mmol)于乙酸乙酯(1mL)中的溶液用氮气吹扫。然后，加入Pd/C(38mg的10％w/w，0.03571mmol)。将混合物用氮气脱气，然后用含有氢气的气球填充，并在1atm压力下搅拌4小时。将混合物过滤，用过量的乙酸乙酯洗涤硅藻土塞，并且然后将滤液浓缩。将粗材料通过使用C18柱和30％至99％乙腈/5mM HCl的梯度的反相制备型色谱法进行纯化，以得到呈米白色泡沫的N-[(6R)-6-羟基-11,11-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(12.3mg，62％)。ESI-MS m/z计算值566.1964，实验值567.2(M+1)+；保留时间：2.01分钟(LC方法J)。
步骤5：(6R)-17-氨基-6-羟基-11,11-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物47)
将N-[(6R)-6-羟基-11,11-二甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(12.3mg，0.02171mmol)溶解于二氯甲烷(750μL)中，并且向混合物中加入TFA(100μL，1.298mmol)，并且然后将反应在室温下搅拌45分钟。将混合物蒸发至干燥，然后用乙醚稀释并重新浓缩。将所分离的残余物通过使用经1％至99％乙腈/5mM HCl水溶液洗脱的C18柱的反相制备型色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-6-羟基-11,11-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(7.5mg，73％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.46(s,1H),6.11(s,2H),3.71(d,J＝1.5Hz,1H),3.17(d,J＝12.0Hz,1H),2.59(d,J＝12.0Hz,1H),2.35(dd,J＝14.8,8.0Hz,1H),2.24(d,J＝15.0Hz,1H),1.82-1.65(m,4H),1.53-1.44(m,1H),1.28(dd,J＝11.6,6.7Hz,1H),1.03(d,J＝11.1Hz,6H)ppm。ESI-MS m/z计算值466.14395，实验值467.2(M+1)+；保留时间：1.98分钟(LC方法A)。
实例26：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-环丁烷]-13-酮(化合物48)的制备
步骤1：1-丁-3-烯基-N-甲氧基-N-甲基-环丁烷甲酰胺
在室温下向1-丁-3-烯基环丁烷甲酸(2.78g，16.23mmol)于DCM(50mL)中的混合物中缓慢加入固体羰基二咪唑(3.24g，19.98mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟，并且然后加入N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(3.24g，33.22mmol)，并将混合物在室温下搅拌13小时。将浆液用100mL水和100mL 1M HCl稀释，分份，并且将有机层用盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用5％至75％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到1-丁-3-烯基-N-甲氧基-N-甲基-环丁烷甲酰胺(1.336g，42％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.93-5.66(m,1H),5.02(m,J＝17.2,1.6Hz,1H),4.98-4.87(m,1H),3.64(s,3H),3.16(s,3H),2.61-2.41(m,2H),2.06-1.85(m,7H),1.82-1.69(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值197.14159，实验值198.2(M+1)+；保留时间：0.5分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-丁-3-烯基环丁烷羰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下向乙醚(5mL)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(515mg，0.808mmol)中加入n-BuLi(669μL的2.5M，1.672mmol)作为己烷中的溶液。在-78℃下搅拌另外10分钟后，通过筒状针逐滴加入1-丁-3-烯基-N-甲氧基-N-甲基-环丁烷甲酰胺(207mg，1.049mmol)于乙醚(2.5mL)中的溶液。将混合物在-78℃下搅拌15分钟，并且在0℃下搅拌15分钟。然后，将混合物用水(2mL)和乙醚中的1M NH4Cl稀释，然后分份。将有机层分离，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用5％至20％的己烷溶液(20％乙酸乙酯/己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-丁-3-烯基环丁烷羰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(127mg，21％)。ESI-MS m/z计算值694.259，实验值695.4(M+1)+；保留时间：0.69分钟(LC方法T)。
步骤3：N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-12,1'-环丁烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在100mL的3颈烧瓶中，将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-丁-3-烯基环丁烷羰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(127mg，0.1737mmol)和亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(22mg，0.02591mmol)于甲苯(20mL)中的氮气持续鼓泡通过溶液的溶液在120℃下加热30分钟。然后将溶剂蒸发。将残余物通过使用0％至20％的己烷溶液(20％乙酸乙酯/己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-12,1'-环丁烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(77mg，66％)。ESI-MS m/z计算值666.22766，实验值667.3(M+1)+；保留时间：0.63分钟(LC方法T)。
步骤4：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-环丁烷]-13-酮(化合物48)
部分1：在200psi氢气下在室温下将N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-12,1'-环丁烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(77mg，0.1155mmol)、10％钯碳(28mg，0.02631mmol)和乙酸(800μL)的混合物搅拌13小时，然后将混合物过滤并蒸发挥发物。将残余物溶解于乙酸(800μL)中，加入到10％钯碳(22mg，0.02067mmol)中，并在室温下在200psi氢气下搅拌8小时，然后将混合物过滤并蒸发滤液。将残余物溶解于乙酸乙酯中，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发，以得到61mg(95％纯，87％产率)的酮，N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丁烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯，其含有通过对醇进行UPLC得到的3％杂质N-[(6R)-6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丁烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯。
部分2：将61mg的95％纯度的N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丁烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯溶解于DCM(1mL)中，并且加入戴斯-马丁高碘烷(9mg，0.02122mmol)。在室温下将混合物搅拌20分钟，然后加入甲醇(1mL)，并且将混合物用DCM稀释，并且用1M Na2S2O3、1M NaHCO3洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丁烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(54mg，77％)。ESI-MS m/z计算值578.1964，实验值579.2(M+1)+；保留时间：0.44分钟(LC方法T)。
部分3：将部分2的产物、TFA(500μL)和水(25μL)的混合物在室温下搅拌20分钟，然后蒸发溶剂。将残余物溶解于乙酸乙酯，用1MNaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用5％至40％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-环丁烷]-13-酮(32mg，58％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.50(d,J＝0.7Hz,1H),5.97(s,2H),3.63(s,1H),2.58-2.33(m,5H),2.30-2.15(m,2H),2.13-2.01(m,1H),1.96-1.72(m,6H),1.69-1.57(m,1H),1.48(dd,J＝13.7,10.3Hz,1H)ppm；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.65,-79.76ppm。ESI-MS m/z计算值478.14395，实验值479.2(M+1)+；保留时间：1.56分钟(LC方法Q)。
实例27：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-环丙烷]-13-酮(化合物49)的制备
步骤1：1-丁-3-烯基-N-甲氧基-N-甲基-环丙烷甲酰胺
在室温下向1-丁-3-烯基环丙烷甲酸(1.21g，8.459mmol)于二氯甲烷(25mL)中的混合物中缓慢加入固体羰基二咪唑(1.69g，10.42mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟，并且然后加入N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(1.69g，17.33mmol)，并将混合物在室温下搅拌13小时。将浆液通过旋转蒸发浓缩，用乙醚和1M HCl(50mL，50mmol)稀释，分份，并且然后将有机层用水和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用5％至60％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到1-丁-3-烯基-N-甲氧基-N-甲基-环丙烷甲酰胺(970mg，63％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.82(m,J＝16.9,10.2,6.6Hz,1H),5.06-4.98(m,1H),4.96-4.82(m,1H),3.72(s,3H),3.23(s,3H),2.26-2.12(m,2H),1.76-1.63(m,2H),1.08-0.94(m,2H),0.63-0.53(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值183.12593，实验值184.2(M+1)+；保留时间：0.41分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-丁-3-烯基环丙烷羰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下向乙醚(3.8mL)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(252mg，0.3954mmol)中加入n-BuLi(330μL的2.5M，0.825mmol)作为己烷中的溶液。在-78℃下搅拌另外10分钟后，通过筒状针逐滴加入1-丁-3-烯基-N-甲氧基-N-甲基-环丙烷甲酰胺(145mg，0.7913mmol)于乙醚(1.3mL)中的溶液。将混合物在-78℃下搅拌15分钟，并且在0℃下搅拌15分钟。然后，将混合物用水(2mL)和乙醚中的1M NH4Cl稀释，并且分份。将有机层分离，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用5％至20％的己烷溶液(20％乙酸乙酯/己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-丁-3-烯基环丙烷羰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，37％)。ESI-MS m/z计算值680.24335，实验值681.3(M+1)+；保留时间：0.62分钟(LC方法T)。
步骤3：N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在100mL的3颈烧瓶中，将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-丁-3-烯基环丙烷羰基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(166mg，0.2439mmol)和亚苄基[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基]二氯(三环己基膦)钌(31mg，0.03651mmol)于甲苯(28mL)中的氮气持续鼓泡通过溶液的溶液在120℃下加热30分钟。然后将溶剂蒸发。将残余物通过使用0％至30％的己烷溶液(20％乙酸乙酯/己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(110mg，69％)。ESI-MS m/z计算值652.21204，实验值653.4(M+1)+；保留时间：0.58分钟(LC方法T)。
步骤4：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-环丙烷]-13-酮(化合物49)
部分1：在200psi氢气下在室温下将N-[(6R)-6-苄氧基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(110mg，0.1686mmol)、10％钯碳(41mg，0.03853mmol)和乙酸(2.2mL)的混合物搅拌16小时，然后将混合物过滤并蒸发滤液。将残余物溶解于乙酸乙酯中，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发，以得到94mg(90％纯，89％产率)的酮，N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯，其含有通过对醇进行UPLC得到的1％杂质N-[(6R)-6,13-二羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯。
部分2：将部分1获得的94mg的90％纯的酮N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯溶解于二氯甲烷(1.5mL)中，并且加入戴斯-马丁高碘烷(10mg，0.02358mmol)。将混合物在室温下搅拌20分钟，并且然后加入更多戴斯-马丁高碘烷(10mg，0.02358mmol)。在室温下将混合物搅拌15分钟，并且然后加入甲醇(1mL)，并且将混合物用二氯甲烷稀释，并且用1M Na2S2O3洗涤，随后用1M NaHCO3洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(71mg，75％)。ESI-MS m/z计算值564.1807，实验值565.2(M+1)+；保留时间：0.8分钟(LC方法S)。
部分3：将部分2获得的材料N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-12,1'-环丙烷]-17-基]氨基甲酸叔丁酯(71mg，0.13mmol)溶解于TFA(1.5mL)和水(75μL)中，并且在室温下搅拌20分钟。将溶剂蒸发，并且将残余物溶解于乙酸乙酯中，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用5％至40％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)螺[19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12,1'-环丙烷]-13-酮(51.5mg，87％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.80-7.64(m,1H),2.36(m,J＝13.6,7.5,5.7Hz,1H),2.29-2.12(m,2H),2.07-1.94(m,1H),1.84-1.72(m,1H),1.72-1.60(m,2H),1.48-1.37(m,2H),1.35-1.19(m,2H),1.12(m,J＝11.6,5.9,5.2Hz,1H),0.92(m,J＝9.0,6.5,3.5Hz,1H),0.84(m,J＝9.2,6.6,3.1Hz,1H)ppm；19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ-61.40,-80.93ppm。ESI-MS m/z计算值464.1283，实验值465.2(M+1)+；保留时间：1.46分钟(LC方法Q)。
实例28：(6R)-17-氨基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(化合物50)的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向配备有磁性搅拌棒并且配有特氟龙隔膜的干燥的螺旋盖试管中装入N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(500mg，0.7676mmol)、乙酸钯(9mg，0.0401mmol)、2-二环己基膦-2',6'-双(N,N-二甲基氨基)联苯(34mg，0.0779mmol)和干燥THF(0.5mL)。将容器抽真空并用氮气回填(此过程重复共计3次)。将溶液在冰浴中冷却至0℃，并加入溴(2,2-二甲基戊-4-烯基)锌(THF中的4.6mL的0.5M，2.3mmol)的溶液。移除冰浴，并将反应在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物通过在0℃下加入饱和氯化铵水溶液(5mL)淬灭，并用乙酸乙酯(40mL)萃取。将有机层用盐水(5mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(499mg，95％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.04(s,1H),9.20(s,1H),7.44-7.28(m,5H),6.03-5.88(m,1H),5.78(m,1H),5.12-4.94(m,4H),4.86(d,J＝10.8Hz,1H),4.72(d,J＝10.8Hz,1H),2.88(s,2H),2.60-2.15(m,6H),1.58(s,9H),1.00(d,J＝2.9Hz,6H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-59.75(s,3F),-72.85(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值668.2797，实验值669.3(M+1)+；保留时间：5.66分钟(LC方法BB)。
步骤2：N-[(6R)-6-苄氧基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在配备有氮气进口和回流冷凝器的500mL的三颈烧瓶中，将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2,2-二甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(499mg，0.7269mmol)于1,2-二氯乙烷(250mL)中的溶液通过用氮气鼓泡通过溶液来脱气18至19个小时。加入第一份的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(33mg，0.045mmol)，然后温度增加至60℃。35分钟后，加入第二份的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(32mg，0.0436mmol)，并且使反应在60℃下搅拌。在2.5小时的总反应时间后，将烧瓶冷却至室温，并且将催化剂用DMSO(8滴)淬灭，并且将反应在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色泡沫状固体的N-[(6R)-6-苄氧基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(339mg，71％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.42(s,1H),9.13(s,1H),7.43-7.17(m,5H),5.79-5.50(m,2H),4.99-4.80(m,2H),3.07(dd,J＝14.8,7.7Hz,1H),2.91(s,2H),2.80-2.60(m,2H),2.59-2.36(m,2H),2.29-2.16(m,1H),1.57(s,9H),1.04(d,J＝4.9Hz,6H)ppm。19FNMR(377MHz,CDCl3)δ-61.32(s,3F),-74.63(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值640.2484，实验值641.3(M+1)+；保留时间：5.35分钟(LC方法BB)。
步骤3：N-[(6R)-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(6R)-6-苄氧基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(339mg，0.5186mmol)于甲醇(10mL)中的溶液吹扫三次(真空然后氮气气氛)。加入钯碳(177mg，10％w/w，0.1663mmol，50％湿)并在氢气气氛下吹扫两次，之后使反应在一种氢气气氛下搅拌过夜。在氮气气氛下再一次吹扫，然后将反应混合物经短硅藻土垫过滤，并用甲醇洗涤。将滤液在减压下浓缩，并转移到具有DCM的较小烧瓶中。在浓缩后，观察到一些痕量的Pd/C。将产物在DCM中稀释，并且用(注射器上的)尼龙0.45微米过滤器过滤，浓缩并且在高真空下干燥过夜，以得到呈白色固体的N-[(6R)-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(275mg，96％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.21(s,1H),9.11(s,1H),3.60(brs,1H),2.96-2.73(m,2H),2.39(m,1H),2.31-2.16(m,1H),1.99-1.85(m,1H),1.84-1.67(m,2H),1.57(s,9H),1.50(m,1H),1.47-1.33(m,3H),1.16(m,1H),1.02(s,3H),0.78(s,3H)ppm。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-59.63(s,3F),-79.76(s,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值552.2171，实验值553.2(M+1)+；保留时间：2.8分钟(LC方法E)。此粗材料被用于以下步骤，而无需进一步纯化。
步骤4：(6R)-17-氨基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(化合物50)
向N-[(6R)-6-羟基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(275mg，0.4977mmol)于二氯甲烷(4mL)中的溶液中加入三氟乙酸(5.92g，4mL，51.919mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。然后将混合物用二氯甲烷(10mL)稀释，然后通过在减压下蒸发进行浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(50mL)中，用饱和碳酸氢钠水溶液(3X10 mL)和盐水(1X15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤并通过在减压下蒸发进行浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶柱色谱法进行纯化。将产物溶解于少量乙腈和水中，并且冷冻干燥过夜，以得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-12,12-二甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(149mg，66％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(s,1H),5.45(br.s.,2H),3.60(s,1H),2.88-2.64(m,2H),2.46-2.32(m,1H),2.30-2.14(m,1H),1.99-1.85(m,1H),1.84-1.66(m,2H),1.63-1.48(m,2H),1.47-1.35(m,2H),1.23-1.10(m,1H),1.01(s,3H),0.77(s,3H)ppm。19FNMR(377MHz,CDCl3)δ-59.94(s,3F),-79ppm。
实例29：17-氨基-11-苄基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(化合物51)的制备
步骤1：2-[6-甲氧基羰基-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丙二酸O1-叔丁基O3-乙酯
在室温下向6-氯-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(10g，35.140mmol)和K2CO3(9.8g，70.909mmol)于DMF(35mL)中的溶液中加入丙二酸O3-叔丁基O1-乙酯(7.2562g，7.3mL，38.551mmol)。加入丙二酸叔丁基乙酯后，溶液在5分钟内变色(由淡黄色变为浓暗红色)。将反应在室温下搅拌12小时，然后用H2O(100mL)淬灭，并且加入饱和NH4Cl水溶液，直至达到pH＝7，然后将混合物用乙酸乙酯(300mL)萃取，用盐水(2X 90mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩。将粗残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷(含0.1％乙酸改性剂的己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈金黄色油的2-[6-甲氧基羰基-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丙二酸O1-叔丁基O3-乙酯(16g，99％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.69(s,1H),5.17(s,1H),4.37-4.19(m,2H),4.01(s,3H),1.47(s,9H),1.31-1.24(m,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值436.1094，实验值437.2(M+1)+；保留时间：6.09分钟(LC方法DD)。
步骤2：6-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在室温下向2-[6-甲氧基羰基-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丙二酸O1-叔丁基O3-乙酯(15.33g，35.133mmol)于DCM(61mL)中的溶液中缓慢加入TFA(75.48g，51mL，661.97mmol)。将反应混合物冷却至0℃，并且缓慢加入饱和NaHCO3水溶液(50mL，直至pH＝8至9)，然后将混合物用DCM(600mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将琥珀色残余物通过使用0％至25％乙酸乙酯/己烷(用0.1％乙酸改性的己烷)的梯度的硅胶色谱法进行纯化，并将含有产物的部分结晶，并且过滤以得到4.15g纯产物。将上清液在真空中浓缩，以得到另外3.52g的6-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(7.67g，64％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.95(s,1H),4.24–4.20(m,2H),4.13(q,J＝7.1Hz,2H),3.97(s,3H),1.17(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值336.0569，实验值337.1(M+1)+；保留时间：4.92分钟(LC方法DD)。
步骤3：6-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
在室温下向6-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1g，2.9445mmol)于THF(3mL)和水(1mL)中的溶液中加入一水氢氧化锂(1.24g，29.549mmol)，然后搅拌45分钟。将反应通过倒入饱和NH4Cl中(100mL，加入后pH＝7，注意：酸性淬灭对此反应至关重要，因为在未进行此酸性淬灭时观察到多种主要副产物)进行淬灭，然后用HCl酸化(直到pH＝1)，并且用乙酸乙酯(2X 50mL)萃取。然后将有机溶液经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到呈淡黄色固体的6-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(948mg，99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.90(s,1H),4.20(d,J＝1.3Hz,2H),4.13(q,J＝7.1Hz,2H),3.41(s,1H),1.17(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值322.0413，实验值323.3(M+1)+；保留时间：3.43分钟(LC方法DD)。
步骤4：2-[6-[[[2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰]氨基]氨基甲酰]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯
向6-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(948mg，2.9423mmol)和2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰肼(1.066g，2.942mmol)于乙酸乙酯(8mL)中的溶液中加入乙酸乙酯中的T3P(2.62g，50％w/w，4.1172mmol)中，随后加入吡啶(1.0758g，1.1mL，13.601mmol)，并将混合物在室温下搅拌。将反应用饱和NH4Cl(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3X 30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将白色残余物通过使用20％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-[6-[[[2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰]氨基]氨基甲酰]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯(1.96g，98％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),10.44(s,1H),8.97(s,1H),7.51–7.44(m,2H),7.42–7.35(m,2H),7.35–7.29(m,1H),4.84–4.72(m,3H),4.21(d,J＝1.4Hz,2H),4.14(q,J＝7.1Hz,2H),3.90–3.82(m,2H),3.79–3.71(m,2H),2.30–2.19(m,1H),2.19–2.08(m,1H),1.69–1.59(m,2H),1.56–1.45(m,2H),1.18(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值666.176，实验值667.4(M+1)+；保留时间：6.07分钟(LC方法DD)。
步骤5：2-[6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯
向2-[6-[[[2-苄氧基-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2-(三氟甲基)戊酰]氨基]氨基甲酰]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯(5.02g，7.5316mmol)和TsCl(1.7g，8.9170mmol)于CH3CN(75mL)中的溶液中加入DIEA(2.968g，4mL，22.964mmol)，并且将混合物在室温下搅拌25分钟。将反应用乙酸乙酯(250mL)稀释，并且用饱和NH4Cl水溶液(3x50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过使用0％至25％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈金色油的2-[6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯(3.7g，72％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.13(s,1H),7.43–7.29(m,5H),4.81(t,J＝4.5Hz,1H),4.72(d,J＝10.8Hz,1H),4.60(d,J＝10.8Hz,1H),4.28(d,J＝1.2Hz,2H),4.13(q,J＝7.1Hz,2H),3.90–3.81(m,2H),3.81–3.71(m,2H),2.56–2.51(m,1H),2.48–2.42(m,1H),1.73–1.65(m,2H),1.65–1.51(m,2H),1.17(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值648.1655，实验值649.6(M+1)+；保留时间：6.73分钟(LC方法DD)。
步骤6：2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯
向2-[6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯(3.5g，5.397mmol)于乙酸(35mL)中的溶液中加入铁粉(3.25g，58.197mmol)，并且将混合物在50℃下搅拌3小时。在1小时内使反应缓慢冷却至室温。然后将反应通过缓慢倒入到含有冰冷饱和NaHCO3水溶液(pH＝8)的超大烧杯中来淬灭，然后用乙酸乙酯(3X 500mL)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到呈黏性棕褐色固体的2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯(3.12g，89％)。ESI-MS m/z计算值618.1913，实验值619.4(M+1)+；保留时间：7.17分钟(LC方法DD)。
步骤7：2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(锂盐)
向粗2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸乙酯(350mg，0.5659mmol)于THF(3mL)、MeOH(2mL)和水(2mL)中的溶液中加入一水氢氧化锂(240mg，5.7192mmol)，并且将混合物置于42℃油浴下并搅拌。40分钟后，向反应加入饱和NH4Cl水溶液(17mL，pH＝7至8)。将溶剂在减压下去除，并且将水溶液用DCM(3X 50mL)萃取。将合并的有机物经Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩，以得到呈米白色固体的2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(锂盐)(277mg，79％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.54(s,1H),7.44–7.27(m,5H),6.12(d,J＝3.8Hz,2H),4.93(t,J＝4.1,4.1Hz,1H),4.79–4.68(m,2H),4.03–3.99(m,2H),4.00–3.90(m,2H),3.89–3.82(m,2H),2.50–2.35(m,2H),1.89–1.73(m,3H),1.73–1.63(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值590.16，实验值591.1(M+1)+；保留时间：5.61分钟(LC方法DD)。
步骤8：2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸
向粗2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(三氟甲基)丁基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(锂盐)(160mg，0.2678mmol)于HCl(4.3mL的3M，12.9mmol)中的悬浮液中加入乙酸(8mL)，并且将混合物在室温下搅拌25分钟。然后将反应用乙酸乙酯(50mL)稀释，并且倒入冷饱和NaHCO3水溶液中(约25mL，直到pH＝6)，将有机物分离，并且用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并且在25℃下在真空中浓缩(注意：醛在较高浓度和/或在存在酸的情况下显得不稳定)，以得到2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(148mg，定量)。ESI-MS m/z计算值546.1338，实验值547.5(M+1)+；保留时间：5.63分钟(LC方法DD)。将黄色含油残余物直接用于下一步，而无需进一步纯化。
步骤9：2-[5-氨基-6-[5-[5-(苄氨基)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸
在0℃下向苄胺(441.45mg，0.45mL，4.1198mmol)于甲醇(1.3mL)中的溶液中加入乙酸(0.3mL)和氰基硼氢化钠(101mg，1.6072mmol)和THF(2mL)。在0℃下在5分钟内逐滴加入2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(220mg，0.4026mmol)于MeOH(5.3mL)中的溶液中。使反应搅拌30分钟，然后用饱和NaHCO3水溶液(100mL)缓慢淬灭，并且用MeOH(200mL)稀释，然后在室温下搅拌12小时，并且然后在真空中浓缩。将水溶液悬浮液物用乙酸乙酯(120mL)和水(30mL)稀释，并且将层分离。将有机物用0.1M HCl洗涤(直到pH＝1)，然后用盐水(30mL)和水(50mL)的混合物洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到呈黄橙色泡沫的2-[5-氨基-6-[5-[5-(苄氨基)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(246mg，67％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),7.79(s,1H),7.57–7.26(m,10H),7.14(s,2H),4.72–4.58(m,2H),4.10(s,2H),3.82(s,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),2.43–2.37(m,2H),1.78–1.64(m,2H),1.56(s,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值637.2124，实验值638.5(M+1)+；保留时间：5.11分钟(LC方法DD)。
步骤10：17-氨基-11-苄基-6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮
在室温下向DIEA(140.98mg，0.19mL，1.0908mmol)于乙酸乙酯(1.66mL)中的溶液中加入乙酸乙酯中的T3P(175mg，50％w/w，0.275mmol)。在室温下将含有乙酸乙酯(3.3mL)和NMP(0.83mL)中的粗2-[5-氨基-6-[5-[5-(苄氨基)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(166mg，0.1823mmol，70％纯度)的单独的烧瓶缓慢加入(25分钟逐滴加入)到含有T3P-DIEA的烧瓶中。将反应在室温下搅拌1.5小时，然后加入另外的T3P(60mg，50％w/w，0.0943mmol)，并且将所得混合物搅拌30分钟。将反应用乙酸乙酯(50mL)稀释，然后用水(50mL)、0.1M HCl(50mL，直至pH＝1)、饱和NaHCO3水溶液(20mL，直至pH＝8)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并且在真空中浓缩。将残余物通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷(含有0.5％ Et3N的己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到17-氨基-11-苄基-6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(52mg，66％)。ESI-MS m/z计算值619.2018，实验值620.7(M+1)+；保留时间：6.9分钟(LC方法DD)。
步骤11：17-氨基-11-苄基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(化合物51)
在氮气气氛下向17-氨基-11-苄基-6-苄氧基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(32mg，0.0491mmol)于EtOH(2mL)中的溶液中加入10％ Pd/C(16mg，0.015mmol)，并且在0℃下搅拌10分钟。将反应抽真空并用氢气回填3次，并且在室温下在1atm的氢气下搅拌。将反应在30℃下搅拌24小时，然后用EtOH(1mL)稀释，并且通过填充硅藻土过滤，用EtOH(3X 1mL)洗涤。将滤液在真空中浓缩以得到呈淡黄色固体的17-氨基-11-苄基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(24.8mg，92％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.74(s,1H),7.59(d,J＝37.2Hz,1H),7.40–7.13(m,5H),6.81(d,J＝9.2Hz,2H),4.77–4.10(m,3H),3.96(dd,J＝16.4,7.6Hz,1H),3.56(dd,J＝16.3,8.5Hz,1H),2.66–2.56(m,1H),2.30–2.15(m,1H),2.14–1.98(m,2H),1.96–1.80(m,2H),1.73–1.45(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值529.1549，实验值530.2(M+1)+；保留时间：2.53分钟(LC方法H)。
实例30：17-氨基-6-羟基-11-异丙基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(化合物52)的制备
步骤1：2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-(异丙基氨基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸
在0℃下向丙-2-胺(242.9mg，0.35mL，4.1093mmol)于甲醇(1.3mL)和THF(2mL)中的溶液中加入乙酸(0.3mL)和氰基硼氢化钠(101mg，1.6072mmol)。在0℃下在5分钟内逐滴加入2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(220mg，0.4026mmol)于MeOH(5.3mL)中的溶液。使反应搅拌30分钟，然后用饱和NaHCO3水溶液(100mL)缓慢淬灭，并且用MeOH(200mL)稀释，并且在室温下搅拌12小时，然后在真空中浓缩。将水溶液悬浮液物用乙酸乙酯(120mL)和水(30mL)稀释，并且将层分离。将有机物用0.1M HCl洗涤(直到pH＝1)，然后用盐水(30mL)和水(50mL)的混合物洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到呈淡黄色固体的2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-(异丙基氨基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(237mg，90％)。ESI-MS m/z计算值589.2124，实验值590.2(M+1)+；保留时间：4.71分钟。将产物直接用于下一步，而无需进一步纯化(LC方法DD)。
步骤2：17-氨基-6-苄氧基-11-异丙基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮
在室温下向DIEA(222.6mg，0.3mL，1.7223mmol)于乙酸乙酯(2.37mL)中的溶液中加入乙酸乙酯中的T3P(359mg，50％w/w，0.5641mmol)。在室温下将含有乙酸乙酯(4.74mL)和NMP(1.185mL)中的粗2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-(异丙基氨基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(237mg，0.2814mmol，70％纯度)的单独的烧瓶缓慢加入(25分钟逐滴加入)到含有T3P-DIEA的烧瓶中。将反应在室温下搅拌2小时，并且然后用乙酸乙酯(50mL)稀释，用水(50mL)、0.1M HCl(50mL，直至pH＝1)、饱和NaHCO3水溶液(20mL，直至pH＝8)和盐水洗涤。然后将有机物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷(含有0.5％Et3N的己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化以得到产物和经混合的产物部分。将混合的产物部分合并，并且通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷(含有0.5％ Et3N的己烷)梯度的硅胶色谱法重新纯化，在将其与来自第一次纯化的产物合并时，得到呈无色玻璃固体的17-氨基-6-苄氧基-11-异丙基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(25.9mg，23％)。ESI-MS m/z计算值571.2018，实验值572.4(M+1)+；保留时间：6.53分钟(LC方法DD)。
步骤3：17-氨基-6-羟基-11-异丙基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(化合物52)
在氮气下向17-氨基-6-苄氧基-11-异丙基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(25.9mg，0.0431mmol)于EtOH(1.5mL)中的溶液中加入10％ Pd/C(14mg，0.0132mmol)，并且将混合物在0℃下搅拌10分钟。将反应抽真空并用氢气回填3次，并且在30℃下在1atm的氢气下搅拌17小时。然后将反应用EtOH(1mL)稀释，并且通过填充硅藻土过滤，用EtOH(3X 1mL)洗涤，并且将滤液在真空下浓缩，以得到呈淡黄色固体和异构体构象异构体的混合物的17-氨基-6-羟基-11-异丙基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(20mg，92％)。ESI-MS m/z计算值481.1549，实验值482.5(M+1)+；保留时间：2.21分钟(LC方法DD)。
实例31：17-氨基-6-羟基-11-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(化合物53)的制备
步骤1：2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-(甲基氨基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸
在0℃下向THF中的甲胺(2mL的2M，4mmol)于甲醇(1.3mL)中的溶液中加入乙酸(0.3mL)和氰基硼氢化钠(101mg，1.6072mmol)。在0℃下在5分钟内逐滴加入2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(220mg，0.4026mmol)于甲醇(5.3mL)中的溶液中。使反应搅拌30分钟，然后用饱和NaHCO3水溶液(100mL)缓慢淬灭，并且用MeOH(200mL)稀释，然后在室温下搅拌12小时，并且在真空中浓缩。将水溶液悬浮液物用乙酸乙酯(120mL)和水(30mL)稀释，并且将层分离。将有机物用0.1M HCl洗涤(直到pH＝1)，然后用盐水(30mL)和水(50mL)的混合物洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到黄色固体的2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-(甲基氨基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(226mg，90％)。ESI-MS m/z计算值561.1811，实验值562.2(M+1)+；保留时间：4.5分钟(LC方法DD)。将产物直接用于下一步，而无需进一步纯化。
步骤2：17-氨基-6-苄氧基-11-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮
在室温下向DIEA(222.6mg，0.3mL，1.7223mmol)于乙酸乙酯(2.26mL)中的溶液中加入乙酸乙酯中的T3P(359mg，50％w/w，0.5641mmol)。在室温下将粗2-[5-氨基-6-[5-[1-苄氧基-5-(甲基氨基)-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酸(226mg，0.2818mmol，70％纯度)于乙酸乙酯(4.5mL)和NMP(1.13mL)中的单独溶液缓慢加入(25分钟逐滴加入)到含有T3P-DIEA的烧瓶中。将反应在室温下搅拌5小时，然后用乙酸乙酯(50mL)稀释，用水(50mL)、0.1M HCl(50mL，直至pH＝1)、饱和NaHCO3水溶液(20mL，直至pH＝＝8)和盐水洗涤。将有机溶液经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷(含有0.5％ Et3N的己烷)梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到17-氨基-6-苄氧基-11-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(48.4mg，45％)。ESI-MS m/z计算值543.1705，实验值544.3(M+1)+；保留时间：5.87分钟(LC方法DD)。
步骤3：17-氨基-6-羟基-11-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(化合物53)
在氮气下向17-氨基-6-苄氧基-11-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(46mg，0.0804mmol)于EtOH(2.8mL)中的溶液中加入10％ Pd/C(26mg，0.0244mmol)，并且将混合物在0℃下搅拌10分钟。将反应抽真空并用氢气回填3次，并且在室温下在1atm的氢气下搅拌。20小时后，将反应用EtOH(1mL)稀释，并且通过填充硅藻土过滤，用EtOH(3X 1mL)洗涤，并且将滤液在真空下浓缩，以得到呈淡黄色固体的17-氨基-6-羟基-11-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,11,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-酮(22.6mg，59％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.74(s,1H),7.55(d,J＝30.9Hz,1H),6.82–6.69(m,2H),4.26–4.12(m,2H),3.50(dd,J＝16.5,9.5Hz,1H),2.90(d,J＝76.0Hz,3H),2.65–2.54(m,1H),2.26–1.44(m,6H)ppm。ESI-MS m/z计算值453.1236，实验值454.3(M+1)+；保留时间：2.03分钟(LC方法H)。
实例32：(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(化合物54)、(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体1)(化合物55)和(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体2)(化合物56)的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向配备有磁性搅拌棒并且配有特氟龙隔膜的干燥的螺旋盖试管中装入N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(500mg，0.7676mmol)、乙酸钯(9mg，0.0401mmol)、2-二环己基膦-2',6'-双(N,N-二甲基氨基)联苯(34mg，0.0779mmol)和干燥THF(0.5mL)。将容器抽真空并用氮气回填(此过程重复共计3次)。将溶液在冰浴中冷却至0℃，并加入溴(2-甲基戊-4-烯基)锌(THF中的4.6mL的0.5M，2.3mmol)。移除冰浴，并将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物通过在0℃下加入饱和氯化铵水溶液(5mL)淬灭，并用乙酸乙酯(80mL)萃取。将有机层用盐水(5mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(468mg，79％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.98(s,1H),8.95(s,1H),7.55-7.23(m,5H),5.96-5.65(m,2H),5.19-4.90(m,4H),4.82-4.60(m,2H),2.93(dd,J＝14.9,6.4Hz,1H),2.73(dd,J＝14.3,7.5Hz,1H),2.58-2.52(m,1H),2.44(br.s.,1H),2.39-2.21(m,3H),2.20-2.09(m,1H),2.06-1.94(m,1H),1.51(s,9H),0.89(t,J＝6.4Hz,3H)ppm。19F NMR(377MHz,DMSO-d6)δ-59.77(s,3F),-72.96(d,J＝15.0Hz,3F)ppm。ESI-MS m/z计算值654.2641，实验值655.3(M+1)+；保留时间：5.38分钟(LC方法W)。
步骤2：N-[(6R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在配备有氮气进口和回流冷凝器的500mL的三颈烧瓶中，将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(2-甲基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(468mg，0.6077mmol)于1,2-二氯乙烷(250mL)中的溶液通过用氮气鼓泡通过溶液来脱气18至19个小时。在温度增加至60℃后，加入第一份的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(28mg，0.0382mmol)。40分钟后，加入第二份的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(27mg，0.0368mmol)，并且使反应在60℃下搅拌。在4小时的总反应时间后，将烧瓶冷却至室温，将催化剂用八滴DMSO淬灭，并且将反应在减压下浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到426mg的呈黄色油的N-[(6R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)。通过LCMS得到的此材料含有显著杂质，并且被直接用于以下步骤，而无需进一步纯化。
步骤3：N-[(6R)-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(6R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(426mg)于甲醇(12mL)中的溶液吹扫三次(真空然后氮气气氛)。加入钯碳(10％w/w，50％湿，207mg，0.0973mmol)，在氢气气氛下吹扫两次，之后使反应在一种氢气气氛下搅拌过夜。在氮气气氛下再一次吹扫，然后将反应混合物经用甲醇洗涤的短硅藻土垫过滤，并且将滤液浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/庚烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色油的N-[(6R)-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(288mg，两个步骤内88％)。ESI-MS m/z计算值538.2015，实验值539.2(M+1)+；保留时间：4.65分钟(LC方法BB)。
步骤4：(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(化合物54)
向N-[(6R)-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(201mg，0.3733mmol)于二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入三氟乙酸(4.44g，3mL，38.94mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。然后将混合物用二氯甲烷(10mL)稀释，然后通过在减压下蒸发进行浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(3X 10mL)和盐水(1X 15mL)洗涤。然后将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并通过在减压下蒸发进行浓缩。将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度的硅胶色谱法进行纯化。将所获得的残余物通过使用0％至5％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度的第二硅胶色谱法纯化进一步纯化。将所获得的残余物通过使用0％至95％乙腈/0.1％NH4HCO3水溶液梯度的反相C18制备型HPLC进一步纯化。将经纯化的产物冻干，以得到呈白色固体的非对映混合物(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(62mg，38％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(s,1H),5.53(br.s.,2H),3.73(br.s.,1H),3.05-2.83(m,1H),2.76-2.56(m,1H),2.55-2.16(m,3H),2.15-1.84(m,2H),1.82-1.65(m,1H),1.57-1.39(m,3H),1.13-1.04(m,3H),1.03-0.93(m,1H),0.81-0.65(m,1H)ppm。在1H NMR中观察到两个非对映异构体。19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-62.25(s,3F(次要非对映异构体)),-62.64(s,3F(主要非对映异构体)),-78.02(s,3F(次要非对映异构体)),-80.68(s,3F(主要非对映异构体))ppm。ESI-MS m/z计算值438.149，实验值439.2(M+1)+；保留时间：3.59分钟(LC方法C)。
步骤5：(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体1)(化合物55)和(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体2)(化合物56)
将(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(45mg，0.1027mmol)的非对映混合物通过使用50℃下的菲罗门LUX-4柱(250X 10mm，5μm)(流动相为以10毫升/分钟流动的12％MeOH(+20mM NH3)、88％ CO2，样品的浓度为甲醇中的20.3mg/mL(无改性剂)，进样体积＝70μL，并且出口压力为130巴，检测波长为224nm)的SFC分离为单独的非对映异构体，以得到待洗脱的第一峰和白色固体(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体1)(15mg，67％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.68(s,1H),7.62(s,1H),6.72(s,2H),2.83(d,J＝17.0Hz,1H),2.58(dd,J＝17.1,10.3Hz,2H),2.36(d,J＝12.0Hz,1H),2.24(m,J＝14.1,6.8Hz,1H),2.14-1.97(m,2H),1.60(d,J＝6.0Hz,3H),1.43(d,J＝6.5Hz,2H),1.00(d,J＝6.8Hz,3H),0.82-0.67(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.4(M+1)+；保留时间：2.21分钟(LC方法A)。
待洗脱的第二非对映异构体分离为呈白色固体的(6R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(非对映异构体2)(2.2mg，10％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.37(s,1H),5.53(s,2H),3.72(s,1H),2.90(m,J＝16.7,1.8Hz,1H),2.67(dd,J＝16.7,10.5Hz,1H),2.38-2.18(m,3H),2.04-1.87(m,2H),1.68(d,J＝5.3Hz,1H),1.53-1.45(m,3H),1.26(p,J＝5.4Hz,1H),1.07(d,J＝6.9Hz,3H),1.03-0.94(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值438.14905，实验值439.4(M+1)+；保留时间：2.18分钟(LC方法A)。
实例33：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮(对映异构体1)(化合物57)和20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮(对映异构体2)(化合物58)的制备
步骤1：N-[6-戊-4-烯酰基-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(300mg，0.7725mmol)和2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)乙酮(256mg，0.8050mmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中一起加入(异氰亚氨基)三苯基膦(248mg，0.8204mmol)。在室温下将混合物搅拌15分钟。在20分钟内将材料通过使用50％至99％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相HPLC进行纯化，以得到N-[6-戊-4-烯酰基-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(146mg，37％)。ESI-MS m/z计算值730.0523，实验值731.0(M+1)+；保留时间：0.58分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[8-氟-6-羟基-16-氧代-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
向N-[6-戊-4-烯酰基-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(427mg，0.5846mmol)于乙腈(100mL)中的搅拌溶液中加入乙酸钯(II)(21mg，0.09354mmol)，随后加入三邻甲苯基磷(57mg，0.1873mmol)和三乙胺(600μL，4.305mmol)，并且将溶液用N2鼓泡1分钟，然后在80℃下加热16小时。将混合物冷却至室温，通过硅藻土过滤并浓缩。将所得深棕色残余物通过使用100％己烷至100％乙酸乙酯的浅梯度的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到N-[8-氟-6-羟基-16-氧代-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(170mg，48％)。ESI-MS m/z计算值602.14，实验值603.3(M+1)+；保留时间：1.59分钟和1.75分钟(具有相同质量的两个峰，LC方法J)
步骤3：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮
在配备有使用3向接头的H2气球的圆底烧瓶中，向N-[8-氟-6-羟基-16-氧代-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(52mg，0.08631mmol)于乙醇(5mL)中的溶液中加入Pd/C(32mg的10％w/w，0.03007mmol)。经受真空并且用氮气回填三次，然后经受真空。用氢气填充烧瓶，然后将混合物搅拌15小时。使烧瓶经受真空并用氮气回填三次，然后用乙酸乙酯稀释，并且经硅藻土过滤。浓缩滤液，并将残余物溶解在TFA(200μL，3.245mmol)和二氯甲烷(600μL)的预制溶液中。将反应搅拌约1小时，并且将溶剂蒸发。在15分钟内将所得残余物溶解于1mL的DMSO中，并且通过使用30％至99％乙腈/水(+5mMHCl)梯度的反相HPLC纯化，得到呈白色固体的外消旋20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮(19.7mg，45％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.01(dd,J＝7.7,2.2Hz,1H),7.67(s,1H),7.30(m,1H),7.12-6.97(m,1H),2.91-2.77(m,4H),1.98-1.85(m,2H),1.75(p,J＝8.2Hz,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值504.10324，实验值505.0(M+1)+；保留时间：1.21分钟(LC方法J)。
步骤4：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮(对映异构体1)(化合物57)和20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮(对映异构体2)(化合物58)
将20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮的外消旋混合物(18mg，0.03569mmol)通过使用ChiralPak AD柱(250X 10mm，5μm粒度)以及10％甲醇(20mM NH3)和90％二氧化碳的以10毫升/分钟流速(进样体积＝甲醇(20mM NH3)中的70μL的约22mg/mL溶液)的流动相的手性SFC进行纯化，得到呈白色固体和待洗脱的第一对映异构体20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮(对映异构体1)(4.7mg，52％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.90-8.70(m,1H),7.94(d,J＝7.5Hz,1H),7.77(s,1H),7.69-7.43(m,2H),7.33(t,J＝5.7Hz,1H),7.14(dd,J＝12.3,8.3Hz,1H),2.84(m,2H),2.66(m,1H),2.57(s,1H),1.81(m,2H),1.72(q,J＝7.0,6.5Hz,1H),1.57(d,J＝13.2Hz,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值504.10324，实验值505.0(M+1)+；保留时间：1.21分钟(LC方法J)。
第二洗脱对映异构体分离为呈白色固体的20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-16-酮(对映异构体2)(4.7mg，52％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.78(s,1H),7.93(d,J＝7.4Hz,1H),7.77(s,1H),7.58(s,2H),7.34(t,J＝5.6Hz,1H),7.20-7.08(m,1H),2.84(m,2H),2.72-2.62(m,1H),2.57(s,1H),1.82(m,2H),1.72(s,1H),1.58(s,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值504.10324，实验值505.0(M+1)+；保留时间：1.21分钟(LC方法J)。
实例34：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-16-酮(盐酸盐)(外消旋异构体1)(化合物59)和20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-16-酮(盐酸盐)(外消旋异构体2)(化合物60)的制备
步骤1：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-16-酮(盐酸盐)(外消旋异构体1)(化合物59)和20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-16-酮(盐酸盐)(外消旋异构体2)(化合物60)
将N-[(8-氟-6-羟基-16-氧代-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(50mg，0.08299mmol)溶解在TFA(100μL，1.298mmol)和二氯甲烷(400μL)的预制溶液中，并且将反应在室温下搅拌约1小时。去除溶剂，并且将残余物溶解于DMSO(1mL)中。在30分钟内通过使用30％至99％乙腈/水(+5mM HCl)梯度的反相HPLC纯化，得到呈白色固体和待洗脱的第一对映异构体20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-16-酮(盐酸盐)(外消旋异构体1)(11.9mg，53％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.85(s,1H),7.56-7.35(m,3H),7.34-7.20(m,2H),7.01-6.89(m,1H),6.16(d,J＝16.1Hz,1H),2.90-2.82(m,1H),2.78-2.73(m,1H),2.59-2.47(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值502.0876，实验值502.9(M+1)+；保留时间：2.35分钟(LC方法Q)。
稍后的洗脱对映异构体分离为呈白色固体的20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-16-酮(盐酸盐)(外消旋异构体2)(8.1mg，36％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(d,J＝21.7Hz,1H),8.59(s,0.5H),8.08(s,0.5H),7.82(d,J＝4.7Hz,1H),7.38-7.16(m,3H),6.64(dd,J＝7.5,5.1Hz,0.5H),6.61-6.49(m,1H),5.81(d,J＝11.1Hz,0.5H),2.93-2.82(m,2H),2.79-2.67(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值502.0876，实验值503.0(M+1)+；保留时间：2.59分钟(LC方法FF)。
实例35：20-氨基-8-氟-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-6-醇(盐酸盐)(非对映异构体对1)(化合物61)和20-氨基-8-氟-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-6-醇(盐酸盐)(非对映异构体对2)(化合物62)的制备
步骤1：将N-[6-(1-羟基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)和N-[6-(1-羟基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)
在0℃下向N-[6-戊-4-烯酰基-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(140mg，0.1917mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中加入硼氢化钠(11mg，0.2908mmol)，并且将反应搅拌30分钟。将反应用几滴乙酸淬灭，并且通过惠特曼(Whatman)滤盘(puradisc 25TF)过滤，并且在15分钟内将滤液通过使用50％至99％乙腈和水(+0.05mM HCl)的梯度的反相色谱法进行纯化，得到呈无色固体和第一洗脱非对映异构体对N-[6-(1-羟基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(58mg，83％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.09(s,1H),9.17(s,1H),9.01(s,1H),8.18(dd,J＝7.1,2.3Hz,1H),7.96(m,1H),7.14(dd,J＝11.4,8.6Hz,1H),5.79-5.69(m,1H),5.35(d,J＝27.7Hz,1H),5.08-4.89(m,2H),4.82(s,1H),2.12(m,1H),1.97(m,1H),1.89-1.75(m,2H),1.53(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值732.06793，实验值732.9(M+1)+；保留时间：1.34分钟(LC方法M)。
第二洗脱非对映异构体对分离为无色固体N-[6-(1-羟基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(52mg，74％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),9.20(s,1H),9.00(s,1H),8.19(dd,J＝7.1,2.3Hz,1H),7.96(m,1H),7.11(dd,J＝11.5,8.6Hz,1H),5.68(m,1H),5.39(s,1H),4.93-4.84(m,2H),4.80(d,J＝6.4Hz,1H),2.05(m,1H),1.89(q,J＝7.4Hz,1H),1.80(t,J＝6.9Hz,2H),1.53(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值732.06793，实验值733.0(M+1)+；保留时间：1.37分钟(LC方法M)。
步骤2：N-[6-(1-甲氧基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)
在惰性气氛下在0℃(冰浴)下向N-[6-(1-羟基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(55mg，0.07510mmol)于2-甲基四氢呋喃(2mL)中的搅拌溶液中加入t-BuOK(50μL，0.3832mmol)(2-甲基四氢呋喃中的2M溶液)。将混合物搅拌5分钟，并且然后通过注射器经由橡胶隔膜加入碘代甲基(10μL，0.1606mmol)。将混合物搅拌另外30分钟。将反应在冰浴中再次冷却，并且加入更多试剂t-BuOK(50μL，0.3832mmol)、碘代甲基(10μL，0.1606mmol)。40分钟后，在0℃下将反应通过加入10mL水淬灭，并用二乙醚(3X20mL)萃取。将有机层合并，经Na2SO4干燥，浓缩，并且通过使用100％己烷至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[6-(1-甲氧基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(47mg，84％)。ESI-MS m/z计算值746.0836，实验值747.3(M+1)+；保留时间：1.73分钟(LC方法M)。
步骤3：N-[8-氟-6-羟基-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1，E/Z混合物)
向N-[6-(1-甲氧基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(47mg，0.06297mmol)于乙腈(10mL)中的搅拌溶液中加入乙酸钯(II)(3mg，0.01336mmol)，随后加入三邻甲苯基磷(8mg，0.02628mmol)和三乙胺(60μL，0.4305mmol)，并且将溶液用N2鼓泡2分钟，然后在80℃下加热16小时。将混合物冷却至室温，浓缩至约5mL体积，并通过硅藻土过滤，并将滤液浓缩。将所得棕色残余物通过使用100％己烷至50％乙酸乙酯/己烷的浅梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到N-[8-氟-6-羟基-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1，E/Z混合物)(24mg，62％)。ESI-MS m/z计算值618.1713，实验值619.2(M+1)+；保留时间：1.41、1.28、1.35和1.44分钟(LC方法M)。多个异构产物：大环中的烯烃处的E/Z异构体以及非对映异构体；将混合物直接用于下一步。
步骤4：20-氨基-8-氟-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-6-醇(盐酸盐)(非对映异构体对1)(化合物61)
在配备有使用3向接头的H2气球的圆底烧瓶中，向N-[8-氟-6-羟基-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1，E/Z混合物(24mg，0.0388mmol)于乙醇(2mL)中的溶液中加入Pd/C(6mg的10％w/w，0.005638mmol)。经受真空并且用氮气回填三次，然后经受真空。用氢气填充烧瓶，然后将混合物搅拌15小时。经受真空并且用氮气回填三次，然后用乙酸乙酯稀释，并经硅藻土过滤。将滤液浓缩，并且将所得残余物溶解于TFA(100μL，1.298mmol)和二氯甲烷(300μL)的预制溶液中，并且将反应在室温下搅拌约1小时。去除溶剂，并且溶解于DMSO(1mL)中。将残余物通过使用30％至99％乙腈/水(+5mM HCl)梯度的反相色谱法纯化，得到呈白色固体的20-氨基-8-氟-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-6-醇(盐酸盐)(非对映异构体对1)(3.4mg，14％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(d,J＝91.7Hz,1H),7.71(d,J＝11.3Hz,1H),7.61-7.37(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.22-7.11(m,1H),6.99(s,1H),6.72(s,1H),4.57-4.38(m,1H),3.21(d,J＝6.1Hz,3H),2.87-2.76(m,1H),2.76-2.65(m,1H),1.98(m,1H),1.83(s,1H),1.63(dd,J＝16.8,10.4Hz,2H),1.48(d,J＝11.5Hz,1H),1.27-1.14(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值520.1345，实验值521.1(M+1)+；保留时间：1.41分钟(LC方法J)。
步骤5：20-氨基-8-氟-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-6-醇(盐酸盐)(非对映异构体对2)(化合物62)
将N-[6-(1-羟基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(55mg，0.07510mmol)通过本实例的步骤2-4进行，类似于非对映异构体对1，得到白色固体，20-氨基-8-氟-16-甲氧基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-八烯-6-醇(盐酸盐)(非对映异构体对2)(3.1mg，14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(s,1H),7.69(s,1H),7.37-7.30(m,2H),7.19(dd,J＝12.3,8.3Hz,1H),7.02(s,2H),4.58-4.47(m,1H),3.06(s,3H),2.74-2.65(m,2H),1.89(m,1H),1.55-1.35(m,4H),1.29-1.18(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值520.1345，实验值521.2(M+1)+；保留时间：1.45分钟(LC方法J)。
实例36：20-氨基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对1)(化合物63)和20-氨基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2)(化合物64)的制备
步骤1：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-羟基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下在冰浴中向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-戊-4-烯酰基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(1.1g，2.734mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中逐滴加入硼氢化钠(51.7mg，1.367mmol)(注：加入大于0.5当量的NaBH4或一次性全部加入将使酯还原为对应的醇)。将反应混合物搅拌15分钟，并且通过5％ HCl水溶液淬灭，并用乙酸乙酯(3X 15mL)萃取。将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤，并且通过使用80:20己烷/乙酸乙酯的硅胶色谱法进行纯化，得到3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-羟基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(640mg，58％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.14(s,1H),9.22(s,1H),5.83(m,1H),5.05(dd,J＝17.1,1.8Hz,1H),4.98(dd,J＝10.0,1.9Hz,2H),4.01(s,3H),3.41(bs,1H),2.38-2.21(m,2H),1.85-1.76(m,1H),1.70-1.58(m,1H),1.54(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值404.1559，实验值405.1(M+1)+；保留时间：1.46分钟(LC方法J)。
步骤2：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-甲基磺酰氧基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在室温下向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-羟基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(580mg，1.434mmol)于二氯甲烷(15mL)中的搅拌溶液中加入DIEA(556mg，4.302mmol)。在15分钟后，在惰性气氛下通过橡胶隔膜逐滴加入甲烷磺酰氯(231mg，2.017mmol)。将反应混合物在室温下搅拌，并通过UPLC监测其进展。2小时后，将反应混合物用饱和NaHCO3溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3X 30mL)萃取。将有机相合并，经Na2SO4干燥，浓缩，并且通过使用75:25己烷/乙酸乙酯的硅胶色谱法进行纯化，得到3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-甲基磺酰氧基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(385mg，56％)。ESI-MS m/z计算值482.13345，实验值483.1(M+1)+；保留时间：1.51分钟(LC方法J)。
步骤3：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-甲基磺酰氧基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(385mg，0.7980mmol)于乙腈(15mL)中的搅拌溶液中加入四丁基氰化铵(430mg，1.522mmol)。将反应混合物加热至70℃持续75分钟，然后冷却，并且用饱和NaHCO3水溶液淬灭，然后用乙酸乙酯(3X 20mL)萃取。将有机相合并，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。在10分钟内将残余物通过使用30％至95％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相色谱法进行纯化，得到3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(140mg，42％)。ESI-MS m/z计算值413.15625，实验值414.1(M+1)+；保留时间：1.61分钟(LC方法J)。
步骤4：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
在环境温度下向3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(2.648g，6.4056mmol)于THF(24mL)和水(8mL)中的溶液中加入LiOH(777mg，32.445mmol)。将反应混合物搅拌1小时。将反应用饱和氯化铵(50mL)稀释，并用1N HCl将pH调节至5。将水溶液用乙酸乙酯(3X 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈澄清凝胶的3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.572g，定量)。ESI-MS m/z计算值399.1406，实验值400.2(M+1)+；保留时间：3.56分钟(LC方法G)。
步骤5：N-[2-[5-[1-(3-溴苯基)-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(180mg，0.4507mmol)和1-(3-溴苯基)-2,2,2-三氟-乙酮(285mg，1.126mmol)溶解于DMF(9mL)中，并且加热到45℃。然后加入(异氰亚氨基)三苯基膦(341mg，1.128mmol)，并且将混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入水(10mL)，并且用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。在12分钟内将残余物通过使用30％至100％乙腈/水(+5mM HCl)的梯度的反相色谱法进行纯化，得到立体异构体的混合物N-[2-[5-[1-(3-溴苯基)-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(159mg，52％)。ESI-MS m/z计算值675.0916，实验值678.1(M+1)+；保留时间：1.55分钟(LC方法M)。
步骤6：N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[2-[5-[1-(3-溴苯基)-2,2,2-三氟-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(121mg，0.1789mmol)于乙腈(7mL)中的搅拌溶液中加入乙酸钯(12.1mg，0.05390mmol)，随后加入三邻甲苯基磷(33.7mg，0.1107mmol)和三乙胺(56mg，0.5534mmol)，并且将溶液用N2鼓泡1分钟，然后密封，并且在125℃下在微波炉中加热2小时。将混合物冷却至室温，并通过用乙酸乙酯洗涤的硅藻土垫过滤。蒸发滤液，并且将残余物通过使用75:25己烷/乙酸乙酯的硅胶色谱法进行纯化，得到所需产物作为非对映异构体的混合物以及E/Z异构体。未经进一步纯化，将残余物溶解于MeOH(3mL)中并转移到高压反应器中，然后加入10％ Pd/C(19mg，0.01785mmol)。将反应器密封，用氮气填充并抽真空三次。最后，将反应器抽真空，并且然后填充至多60psi的H2。将混合物在室温下搅拌6小时。将反应器减压，并且将混合物通过用甲醇洗涤的硅藻土垫过滤。蒸发滤液，并且然后将残余物在10分钟内通过使用35％至90％乙腈/水(+5mMHCl)的梯度的反相色谱法进行纯化，得到非对映异构体的混合物N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(31mg，29％)。ESI-MS m/z计算值597.1811，实验值598.1(M+1)+；保留时间：1.79分钟和1.84分钟(LC方法J)。
步骤7：20-氨基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对1)(化合物63)和20-氨基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2)(化合物64)
向N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(14mg，0.02343mmol)于二氯甲烷(1mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1mL，12.98mmol)，并且将混合物搅拌40分钟。蒸发溶剂，并且将残余物通过使用30％至100％乙腈/水(+5mMHCl)的梯度的反相色谱法进行纯化，得到第一洗脱非对映异构体对20-氨基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对1)(5mg，41％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝1.9Hz,1H),7.76(m,1H),7.45-7.33(m,2H),7.32-7.19(m,1H),5.98(bs,2H),4.63(bs,1H),4.31(dd,J＝7.1,2.4Hz,1H),2.94(m,1H),2.74(m,1H),2.48-2.33(m,1H),2.33-2.25(m,1H),1.98-1.80(m,2H),1.81-1.68(m,1H),1.53-1.40(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值497.12863，实验值498.1(M+1)+；保留时间：1.27分钟(LC方法J)。
得到稍后的洗脱非对映异构体对20-氨基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2)(2.5mg，21％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.86(s,1H),7.74(d,J＝7.8Hz,1H),7.45-7.34(m,2H),7.28(d,J＝17.1Hz,1H),5.99(bs,2H),4.56(bs,1H),4.38(dd,J＝5.8,2.7Hz,1H),3.06(m,1H),2.80(m,1H),2.66-2.46(m,1H),2.21-2.04(m,2H),2.02-1.97(m,1H),1.81(tdd,J＝17.4,8.5,4.3Hz,1H),1.70-1.61(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值497.12863，实验值498.1(M+1)+；保留时间：1.31分钟(LC方法J)。
实例37：19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(对映异构体1)(化合物65)和19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(对映异构体2)(化合物66)的制备
步骤1：N-[6-(1-氰基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-羟基-1-(3-碘代苯基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向小瓶中装入DCM(10mL)中的2,2,2-三氟-1-(3-碘代苯基)乙酮(1.078g，3.5931mmol)。将(N-异氰亚氨基)三苯基膦(1.146g，3.6013mmol)加入到反应混合物中。将反应在室温下搅拌5分钟，之后加入3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.2g，3.0048mmol)于DCM(4.7mL)中的溶液。将反应在室温下搅拌1小时。然后将反应在真空下浓缩，并且通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈米白色固体的N-[6-(1-氰基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-羟基-1-(3-碘代苯基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.21g，50％)。ESI-MS m/z计算值723.0777，实验值724.1(M+1)+；保留时间：4.19分钟(LC方法G)。
步骤2：N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.1^{2,5}.1^{7,11}]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(异构体的混合物)
向N-[6-(1-氰基戊-4-烯基)-2-[5-[2,2,2-三氟-1-羟基-1-(3-碘代苯基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(34mg，0.0470mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中加入三邻甲苯基膦(3mg，0.0099mmol)和TEA(23.958mg，0.033mL，0.2368mmol)。将反应用氩气吹扫5分钟。将Pd(OAc)2(1mg，0.0045mmol)加入到反应混合物中。将反应用氩气吹扫另外2分钟。将小瓶密封并加热至80℃过夜。将反应混合物在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈橙色固体的作为复合物混合物的N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.1^{2,5}.1^{7,11}]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(异构体的混合物)(26mg，93％)。ESI-MS m/z计算值595.1654，实验值596.4(M+1)+；保留时间：3.84分钟(LC方法G)。
步骤3：N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)、N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)和N-[15-氰基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.1^{2,5}.1^{7,11}]二十二碳-1(20),2,4,7,9,11(21),16,18-八烯-19-基]氨基甲酸叔丁酯(单个非对映异构体对)
向N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.1^{2,5}.1^{7,11}]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),12,17,19-九烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(异构体的混合物)(623mg，1.0043mmol)于甲醇(50mL)中的溶液中加入10％Pd/C(200mg，0.1879mmol)。将反应在1atm的H2下氢化持续16小时。将催化剂通过硅藻土垫过滤去除。将滤液浓缩，并且将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化以得到三种峰以进行洗脱：
峰1：N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)，ESI-MS m/z计算值597.1811，实验值598.1(M+1)+；保留时间：6.99分钟和7.16分钟(LC方法DD)。
峰2：N-[16-氰基-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)，ESI-MS m/z计算值597.1811，实验值598.3(M+1)+；保留时间：6.98分钟和6.89分钟(LC方法DD)。
峰3：N-[15-氰基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.1^{2,5}.1^{7,11}]二十二碳-1(20),2,4,7,9,11(21),16,18-八烯-19-基]氨基甲酸叔丁酯(单个非对映异构体对)，ESI-MS m/z计算值597.1811，实验值598.1(M+1)+；保留时间：6.91分钟(LC方法DD)。
步骤4：19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(单个非对映异构体对)
向N-[15-氰基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.1^{2,5}.1^{7,11}]二十二碳-1(20),2,4,7,9,11(21),16,18-八烯-19-基]氨基甲酸叔丁酯(单个非对映异构体对)(108mg，0.1789mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入二噁烷中的4M HCl(10mL的4M，40mmol)。在室温下将反应搅拌16小时。将反应用饱和碳酸氢钠(50mL)和乙酸乙酯(50mL)稀释。将两层分离，并将水层用乙酸乙酯(2X 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至100％乙腈/水(+0.1％ TFA)的反相HPLC进行纯化。将纯部分合并，并用饱和NaHCO3(30mL)中和。将溶液用乙酸乙酯(3X 30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩，以得到呈白色固体的19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(单个非对映异构体对)(67.2mg，71％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.52(s,1H),7.74(s,1H),7.71(s,1H),7.63(m,1H),7.37(t,J＝7.7,7.7Hz,1H),7.31(m,1H),6.89(s,2H),4.63(d,J＝5.9Hz,1H),2.84–2.72(m,1H),2.44–2.32(m,1H),1.96–1.87(m,1H),1.84–1.70(m,2H),1.23(d,J＝6.8Hz,3H)ppm。ESI-MS m/z计算值497.1286，实验值498.4(M+1)+；保留时间：2.81分钟(LC方法H)。
步骤5：19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(对映异构体1)(化合物65)和19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(对映异构体2)(化合物66)
将19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(单个非对映异构体对)(62.6mg，0.1259mmol)使用使用由菲罗门公司出售的LUX-4柱(250X21.2mm，5μm粒度)(pn：00G-4491-P0-AX)以及以14.5分钟内40毫升/分钟流速的20％至30％MeOH(+20mM NH3)/CO2的双梯度运行的正常相SFC-MS方法分离，得到呈白色固体和待洗脱的第一产物19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(对映异构体1)(9.1mg，26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(s,1H),7.75(s,1H),7.72(s,1H),7.64(d,J＝7.8Hz,1H),7.37(t,J＝7.6Hz,1H),7.31(d,J＝7.5Hz,1H),6.90(s,2H),4.63(d,J＝5.5Hz,1H),2.79(p,J＝6.7Hz,1H),2.39(q,J＝11.7Hz,1H),1.91(d,J＝13.1Hz,1H),1.79(t,J＝11.0Hz,2H),1.24(d,J＝6.9Hz,3H)ppm。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-58.76,-75.92ppm。ESI-MS m/z计算值497.12863，实验值498.0(M+1)+；保留时间：2.58分钟(LC方法D)。
待洗脱的第二产物分离为呈白色固体的19-氨基-6-羟基-12-甲基-6,17-双(三氟甲基)-22-氧杂-3,4,20-三氮杂四环[14.3.1.12,5.17,11]二十二碳-1(19),2,4,7(21),8,10,16(20),17-八烯-15-甲腈(对映异构体2)(8.5mg，24％)。ESI-MS m/z计算值497.12863，实验值498.0(M+1)+；保留时间：2.58分钟(LC方法D)。
实例38：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2，对映异构体1)(化合物67)、20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2，对映异构体2)(化合物68)和20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对1)(化合物69)的制备
将N-[16-氰基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)和N-[16-氰基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)使用3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-(1-氰基戊-4-烯基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(510mg，1.277mmol)和2,2,2-三氟-1-(2-氟-5-碘代-苯基)乙酮(1.01g，3.176mmol)以与实例36中的步骤5和6中所描述的程序类似的方式制备。
步骤1：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2，对映异构体1)(化合物67)和20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2，对映异构体2)(化合物68)
将二氯甲烷(2mL)中的N-[16-氰基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对2)(15mg，0.02437mmol)用TFA(1.5mL，19.47mmol)与实例36的步骤7中所描述的程序类似地进行处理。将残余物通过使用由手性技术公司出售的IG柱(250X 21.2mm，5μm粒度)以及以14.5分钟内40毫升/分钟流速的50％至80％ MeOH(20mM NH3)和CO2的双梯度运行的正常相手性SFC进行纯化，得到呈白色固体和第一洗脱对映异构体的20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2，对映异构体1)(3.6mg，28％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37(d,J＝5.1Hz,2H),7.33-7.20(m,1H),7.12-6.98(m,1H),6.00(s,2H),5.04(s,1H),4.33(dd,J＝5.5,2.4Hz,1H),2.74(m,1H),2.07-1.93(m,1H),1.92-1.80(m,2H),1.76-156(m,4H)ppm。ESI-MS m/z计算值515.1192，实验值516.1(M+1)+；保留时间：1.31分钟(LC方法J)。
稍后的洗脱对映异构体分离为呈白色固体的20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对2，对映异构体2)(1.8mg，14％)。(ESI-MS m/z计算值515.1192，实验值516.1(M+1)+；保留时间：1.31分钟(LC方法J))。
步骤2：20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对1)(化合物69)
将二氯甲烷(1.5mL)中的N-[16-氰基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-20-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体对1)(7mg，0.0114mmol)用TFA(1mL，12.5mmol)与实例36的步骤7中所描述的程序类似地进行处理，得到呈白色固体的20-氨基-8-氟-6-羟基-6,18-双(三氟甲基)-23-氧杂-3,4,21-三氮杂四环[15.3.1.12,5.17,11]二十三碳-1(21),2,4,7,9,11(22),17,19-八烯-16-甲腈(非对映异构体对1)(2.5mg，41.81％)。ESI-MSm/z计算值515.1192，实验值516.0(M+1)+；保留时间：1.27分钟(LC方法J))。
实例39：17-氨基-6-氟-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体1)(化合物70)和17-氨基-6-氟-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体2)(化合物71)的制备
步骤1：17-氨基-6-氟-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体1)(化合物70)和17-氨基-6-氟-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体2)(化合物71)
将(6S)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(10mg，0.02281mmol)于二氯甲烷(1.5mL)中的搅拌溶液在冰浴中冷却至0℃，然后向溶液逐滴加入双(2-甲氧基乙基)三氟化氨基硫(20.19mg的50％w/w，0.04563mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌15分钟。然后将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，并且用二氯甲烷(2X 15mL)萃取。将有机层合并，并用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩成白色固体。使混合物经受使用OD柱(250X 20mm；5μm)以及以70毫升/分钟的流速的12％ MeOH(+20mM氨)、88％ CO2的SFC分离以得到待洗脱的第一产物17-氨基-6-氟-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体1)(3mg，30％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.63(s,1H),2.88(m,1H),2.75(m,1H),2.45(m,2H),2.12-1.96(m,1H),1.80(q,J＝6.0,5.5Hz,1H),1.75-1.46(m,5H)ppm。一个质子被溶剂峰遮蔽。ESI-MS m/z计算值440.10834，实验值441.3(M+1)+；保留时间：2.04分钟(LC方法JJ)。
待洗脱的第二产物分离为17-氨基-6-氟-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体2)(3mg，30％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.74(d,J＝6.3Hz,1H),3.37(d,J＝3.7Hz,1H),3.06-2.77(m,2H),2.68-2.34(m,2H),2.14(s,1H),1.97-1.58(m,6H)ppm。ESI-MS m/z计算值440.10834，实验值441.2(M+1)+；保留时间：2.04分钟(LC方法JJ)。
方法13：通过关环复分解途径进行的最终产物合成
步骤1：酰胺偶联
向6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸、6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸或6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1当量)于DMF或THF(20体积当量)中的溶液中加入经N-取代的丁烯基胺(3当量)、如HATU等偶联剂(2至5当量)或T3P(乙酸乙酯中的5至10当量的50％w/w溶液)，并且然后加入如Et3N(5至10当量)或DIEA(5至10当量)等碱。将混合物在室温下搅拌，并通过LCMS监测反应进程。起始材料被消耗后，将反应混合物用二乙醚或乙酸乙酯稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用乙酸乙酯和己烷的硅胶色谱法纯化，得到所需的双烯烃酰胺产物。
步骤2：大环化
向持续有氮气鼓泡通过溶液的双颈烧瓶中加入1,2-二氯乙烷(200至2500体积当量)中的双烯烃(1当量)，并且将溶液加热至50至60℃。然后通过注射器加入1,2-二氯乙烷(约60体积当量)中的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(约0.25至0.4当量)，并且将混合物在50至70℃下搅拌若干小时，同时并通过LCMS监测反应进程。在消耗大部分起始材料之后，将反应混合物在减压下蒸发。将残余物通过使用乙酸乙酯和己烷的硅胶色谱法纯化，得到大环化产物作为E/Z混合物，将其直接用于下一反应。
步骤3：氢化
向大环的E/Z混合物(1当量)于乙酸(约25体积当量)中的溶液中加入Pd/C(约0.5当量的10％w/w)。使混合物在不锈钢压力容器中经受200psi氢气气氛，同时通过LCMS监测烯烃氢化和脱酶两者的反应进展。反应完成后，将混合物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯充分洗涤，并且然后将滤液浓缩。将残余物通过使用乙腈和水(+5mM HCl)的反相色谱法纯化，得到所需产物。
步骤4：去除Boc基团
向含Boc的大环(1当量)于如DCM或水(约20体积当量)中的溶剂中的溶液中加入TFA(约20–200当量)和三异丙基硅烷(2当量)，并将所得混合物在室温下搅拌若干小时，同时通过LCMS监测反应进展。起始材料被消耗后，将溶剂蒸发，并且将残余物溶解于DCM中，并且用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到所需最终产物，如果需要的话，将其通过使用乙腈和水以及HCl改性剂的C18反相HPLC进一步纯化。
步骤5：手性分离
将外消旋化合物通过使用合适的手性柱和流动相的手性SFC纯化，如表4中所示，得到第一洗脱对映异构体，对映异构体1和稍后的洗脱对映异构体，对映异构体2。
通过方法13进行的最终化合物的代表性合成(关环复分解途径)：
实例40：17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体1)(化合物72)和17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体2)(化合物73)的制备
步骤1：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(甲基)氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将DMF(3mL)加入到6-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(147mg，0.2440mmol)、N-甲基丁-3-烯-1-胺(盐酸盐)(91mg，0.7483mmol)和HATU(182mg，0.4787mmol)，并且然后加入DIEA(255μL，1.464mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后用乙醚稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在15分钟内将残余物通过使用0％至10％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(甲基)氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(111mg，68％)。ESI-MS m/z计算值669.2386，实验值670.2(M+1)+；保留时间：0.87分钟(LC方法S)。
步骤2：N-[6-苄氧基-12-甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
向持续有氮气鼓泡通过溶液的双颈烧瓶中加入1,2-二氯乙烷(25mL)中的N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[丁-3-烯基(甲基)氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(108mg，0.1613mmol)，并且将溶液加热至50℃。然后通过注射器加入1,2-二氯乙烷(5mL)中的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(30mg，0.04mmol)，并且将混合物在70℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下蒸发，并且通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的N-[6-苄氧基-12-甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(83mg，80％)。ESI-MS m/z计算值641.2073，实验值642.3(M+1)+；保留时间：0.79分钟(LC方法R)。
步骤3：N-[6-羟基-12-甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-苄氧基-12-甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(80mg，0.1247mmol)于乙酸(2.16mL)中的溶液中加入Pd/C(53mg的10％w/w，0.05mmol)。将混合物在200psi氢气气氛下在不锈钢压力容器中搅拌16小时。将反应混合物经二氧化硅塞过滤，用乙酸乙酯充分洗涤，并且然后将滤液浓缩，以得到呈白色固体的N-[6-羟基-12-甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，87％)。ESI-MS m/z计算值553.17596，实验值554.3(M+1)+；保留时间：0.54分钟(LC方法R)。
步骤4：17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮
将N-[6-羟基-12-甲基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.108mmol)溶解于DCM(1mL)中，并且向混合物中加入TFA(417μL，5.41mmol)，并且将混合物在室温下搅拌2小时。将溶剂蒸发，然后将残余物溶解于DCM中，并且用饱和NaHCO3水溶液洗涤。将有机层浓缩以得到呈白色固体的外消旋17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮，将其直接用于下一步。
步骤5：17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体1)(化合物72)和17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体2)(化合物73)
将外消旋17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮通过使用AS-3柱(250X21.2mm，5μm粒度)以及MeOH(+5mM NH3)/CO2的梯度的手性SFC进行纯化，得到呈白色固体和第一洗脱对映异构体的17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体1)(12mg，49％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.44(s,1H),5.92(s,2H),4.16(s,1H),3.22(m,1H),3.06(s,3H),2.95(m,1H),2.42(m,1H),2.37-2.27(m,1H),2.22(m,1H),1.91-1.77(m,1H),1.73-1.59(m,2H),1.23-1.14(m,1H),0.76(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值453.12357，实验值454.4(M+1)+；保留时间：1.57分钟(LC方法A)。
稍后的洗脱对映异构体分离为呈白色固体的17-氨基-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(对映异构体2)(15mg，61％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.44(s,1H),5.94(s,2H),4.32(s,1H),3.21(m,1H),3.06(s,3H),2.96(m,1H),2.48-2.37(m,1H),2.36-2.27(m,1H),2.22(m,1H),1.94-1.78(m,1H),1.65(q,J＝5.7,4.8Hz,2H),1.24-1.14(m,1H),0.78(m,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值453.12357，实验值454.2(M+1)+；保留时间：1.56分钟(LC方法A)。
表3：由方法13制备并且与实例40所描述的代表性程序类似的最终实例
表4：特征数据和手性SFC条件(如果需要的话)用于通过方法13制备的最终化合物
实例155：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物188)的制备
步骤1：(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物188)在室温下将(6R)-17-氨基-6-羟基-12-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(42.6mg，0.07614mmol)、TFA(1mL)、水(50μL)和三异丙基硅烷(50μL，0.2441mmol)搅拌5小时，然后将溶剂蒸发。将残余物溶解于乙酸乙酯中，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在15分钟内将残余物通过使用10％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(30.8mg，92％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(s,1H),7.54(d,J＝6.7Hz,1H),6.10-5.72(m,2H),3.70(d,J＝2.5Hz,1H),3.56-3.03(m,2H),2.53-2.20(m,2H),2.05(s,1H),1.79(m,3H),1.42(dd,J＝13.5,7.7Hz,1H),1.18(m,1H)ppm。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-60.28,-60.50,-78.44,-80.03ppm。ESI-MS m/z计算值439.1079，实验值440.0(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法Q)。
实例156：(6S)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物189)的制备
步骤1：(6S)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物189)使(6S)-17-氨基-6-羟基-12-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(41mg，0.07328mmol)经受与实例155所描述的类似程序以得到(6S)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(30.5mg，95％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(s,1H),7.58-7.52(m,1H),6.12-5.66(m,2H),3.78-3.71(m,1H),3.56-3.04(m,2H),2.52-2.20(m,2H),2.12-1.99(m,1H),1.96-1.64(m,3H),1.42(dd,J＝13.8,7.9Hz,1H),1.22-1.13(m,1H)ppm。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-60.28,-60.50,-78.44,-80.03ppm。ESI-MS m/z计算值439.1079，实验值440.1(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法Q)。
实例157：(6R)-12-(2-乙酰-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物190)的制备
步骤1：(6R)-12-(2-乙酰-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物190)
将HATU(19mg，0.04997mmol)、DIEA(17μL，0.0976mmol)和乙酸(THF中的25μL的2M溶液，0.05mmol)溶解于DMF(0.166mL)中。将此溶液的一部分(51μL)加入到(6R)-17-氨基-12-(2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(盐酸盐)(9mg，0.01684mmol)于DMF(90μL)中的混合物中。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后用乙醚稀释，用水(2倍)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在20分钟内将残余物通过使用5％至100％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(6R)-12-(2-乙酰-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-17-氨基-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(4.2mg，41％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.62(s,1H),4.40-4.24(m,1H),4.22(s,1H),4.10(s,1H),3.98(s,1H),3.85(s,1H),3.08(m,2H),2.63-2.51(m,2H),2.49-2.38(m,1H),2.27(d,J＝14.5Hz,2H),2.16(s,1H),1.78-1.74(m,3H),1.69(s,2H),1.58(s,2H),1.09(m,1H),0.87-0.73(m,1H)ppm；19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ-61.78(d,J＝5.6Hz),-81.13ppm。ESI-MS m/z计算值576.19196，实验值577.3(M+1)+；保留时间：1.01分钟(LC方法Q)。
实例158：(6R)-17-氨基-12-[2-(环丙烷羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基]-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物191)的制备
步骤1：(6R)-17-氨基-12-[2-(环丙烷羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基]-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物191)将HATU(19mg，0.04997mmol)、DIEA(17μL，0.0976mmol)和环丙烷甲酸(4μL，0.05018mmol)溶解于DMF(0.127mL)中。将此溶液的一部分(51μL)加入到(6R)-17-氨基-12-(2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(盐酸盐)(9mg，0.01684mmol)于DMF(90μL)中的混合物中。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后用乙醚稀释，用水(2倍)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在20分钟内将残余物通过使用5％至100％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-12-[2-(环丙烷羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基]-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(5.8mg，57％)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.74(s,1H),4.46(s,1H),4.44-4.35(m,1H),4.33(s,1H),4.11(s,1H),3.98(s,1H),3.25-3.11(m,2H),2.67(m,2H),2.60-2.48(m,1H),2.41(s,2H),2.27(s,1H),1.82(s,2H),1.75-1.67(m,1H),1.58(m,1H),1.26-1.16(m,1H),1.00-0.76(m,6H)ppm；19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ-61.77(d,J＝6.2Hz),-81.15ppm；ESI-MS m/z计算值602.20764，实验值603.3(M+1)+；保留时间：1.18分钟(LC方法Q)。
实例159：(6R)-17-氨基-6-羟基-12-[反式-4-(氨基甲基)环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(盐酸盐)(化合物192)和反式-4-[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]环己烷-1-甲腈(化合物193)的制备
步骤1：N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-12-[反式-4-(氨基甲基)环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯、N-[(6R)-6-(苄氧基)-13-氧代-12-[反式-4-氰基环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-12-[反式-4-氰基环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(6R)-6-(苄氧基)-13-氧代-12-[(1r,4r)-4-氰基环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,8,14,16-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(20.6mg，0.02804mmol)(使用方法13的步骤1和2由6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸和反式-4-[(丁-3-烯-1-基)氨基]环己烷-1-甲腈(盐酸盐)(通过方法8制备)制备)和Pd/C(9mg的10％w/w，0.008457mmol)于乙酸(450μL)中的混合物在室温下在200psi H2下在不锈钢压力容器中搅拌14小时。然后将混合物过滤并且将滤液蒸发以得到N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-12-[反式-4-(氨基甲基)环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(ESI-MS m/z计算值650.26514，实验值651.0(M+1)+；保留时间：0.56分钟(LC方法T))、N-[(6R)-6-(苄氧基)-13-氧代-12-[反式-4-氰基环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(保留时间：0.74分钟(LC方法T))和N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-12-[反式-4-氰基环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯的混合物(ESI-MS m/z计算值646.2338，实验值647.0(M+1)+；保留时间：0.72分钟(LC方法T))。此混合物被直接用于下一步。
步骤2：(6R)-17-氨基-6-羟基-12-[反式-4-(氨基甲基)环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(盐酸盐)(化合物192)和反式-4-[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]环己烷-1-甲腈(化合物193)
将N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-12-[反式-4-(氨基甲基)环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯、N-[(6R)-6-(苄氧基)-13-氧代-12-[反式-4-氰基环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[(6R)-6-羟基-13-氧代-12-[反式-4-氰基环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯的粗混合物在室温下在TFA(300μL)、水(15μL)和三异丙基硅烷(15μL，0.07322mmol)的混合物中搅拌30分钟，并且然后将溶剂蒸发。将残余物溶解于乙酸乙酯，并且用1M NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。使残余物经受用1％至80％乙腈/5mM HCl水溶液的以14分钟内50毫升/分钟通过Luna 5μM C18 75X 30mm柱的梯度洗脱的制备型HPLC，以得到待洗脱的第一非对映异构体和白色固体(6R)-17-氨基-6-羟基-12-[反式-4-(氨基甲基)环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(盐酸盐)(4.7mg，29％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.75(s,1H),4.08-3.93(m,1H),3.26-2.99(m,2H),2.86(d,J＝6.9Hz,2H),2.47(s,2H),2.31-2.19(m,1H),2.10-1.81(m,8H),1.77-1.57(m,2H),1.34-1.23(m,2H),1.15-1.05(m,1H),0.88-0.73(m,1H)ppm；19FNMR(376MHz,甲醇-d4)δ-61.68,-81.20ppm；ESI-MS m/z计算值550.2127，实验值551.2(M+1)+；保留时间：0.82分钟(LC方法Q)。
将待洗脱的第二非对映异构体浓缩以得到呈白色固体的反式-4-[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]环己烷-1-甲腈(3.6mg，24％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.75(s,1H),4.05-3.93(m,1H),3.22-3.02(m,2H),2.66(m,1H),2.52-2.39(m,2H),2.30-2.22(m,3H),2.09-1.96(m,3H),1.90(d,J＝12.7Hz,2H),1.81-1.64(m,4H),1.16-1.01(m,1H),0.94-0.69(m,1H)ppm；19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ-61.67,-81.28ppm；ESI-MSm/z计算值546.1814，实验值547.2(M+1)+；保留时间：1.21分钟(LC方法Q)。
实例160：N-[[4-[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]反式环己基]甲基]乙酰胺(化合物194)的制备
步骤1：N-[[4-[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]反式环己基]甲基]乙酰胺(化合物194)
将HATU(19mg，0.05mmol)、DIEA(24μL，0.14mmol)和乙酸(THF中的25μL的2M溶液，0.05mmol)溶解于0.106mL的DMF中。将此溶液的一部分(0.014mL，乙酸的0.0041mmol)加入到DMF(48μL)中的(6R)-17-氨基-6-羟基-12-[反式-4-(氨基甲基)环己基]-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(盐酸盐)(2.4mg，0.0041mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后用乙醚稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。在20分钟内将残余物通过使用10％至100％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，得到呈白色固体的N-[[4-[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]反式环己基]甲基]乙酰胺(1.2mg，50％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.62(s,1H),3.97(dd,J＝22.4,7.6Hz,1H),3.11-2.99(m,1H),2.95(d,J＝6.8Hz,2H),2.35(s,2H),2.20-2.12(m,1H),1.85(s,3H),1.83-1.69(m,6H),1.64-1.52(m,1H),1.46-1.21(m,2H),1.10-0.96(m,4H),0.90-0.74(m,1H),0.66(s,1H)ppm；19F NMR(376MHz,CD3OD)δ-61.70,-81.25ppm。ESI-MS m/z计算值592.22327，实验值593.2(M+1)+；保留时间：1.08分钟(LC方法Q)。
实例161：(6R)-17-氨基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物195)的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基-丁-3-烯基-氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向6-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(53mg，0.08797mmol)和N-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]丁-3-烯-1-胺(25mg，0.08797mmol)(由方法12制备)于DMF(1mL)中的溶液中加入DIEA(108.3mg，0.838mmol)，随后加入HATU(159.2mg，0.4187mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟，然后用乙醚稀释，用水(2倍)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物通过使用0％至25％乙酸乙酯/己烷梯度的硅色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基-丁-3-烯基-氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(51mg，71％)。ESI-MS m/z计算值811.31683，实验值812.32(M+1)+；保留时间：0.87分钟(LC方法T)。
步骤2：N-[(6R)-6-苄氧基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
向具有氮气鼓泡其中的一颈烧瓶中加入1,2-二氯乙烷(100mL)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基-丁-3-烯基-氨基甲酰]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(40mg，0.04927mmol)，并且将混合物加热至60℃。然后通过注射器加入1,2-二氯乙烷(2.5mL)中的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(11.25mg，0.01533mmol)，并且将所得混合物加热至60℃并且搅拌45分钟。将反应混合物在减压下浓缩，并且通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的N-[(6R)-6-苄氧基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(34.1mg，88％)。ESI-MS m/z计算值783.2855，实验值784.23(M+1)+；保留时间：0.87分钟(LC方法T)。
步骤3：(6R)-17-氨基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(化合物195)
部分1：将N-[(6R)-6-苄氧基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(40mg，0.05104mmol)和Pd/C(5.432mg的10％w/w，0.005104mmol)于乙酸乙酯(2mL)中的混合物在大气压下在氢气球下在室温下搅拌。一小时后，加入另外的Pd/C(大约4.052mg的10％w/w，0.003808mmol)，并将反应混合物在相同条件下搅拌另外一小时。然后将混合物过滤，并且将滤液蒸发，以得到粗N-[(6R)-6-苄氧基-12-[[4-(3-甲基环丁基)苯基]甲基]-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(20mg，50％)(ESI-MS m/z计算值787.31683，实验值788.41(M+1)+；保留时间：2.21分钟(LC方法A))。此材料污染有N-[(6R)-6-苄氧基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(10mg，25％)(ESI-MS m/z计算值785.3012，实验值788.41(M+1)+；保留时间：2.21分钟(LC方法A))。此粗材料直接用于下一部分，而无需进一步纯化。
部分2：将部分1中获得的N-[(6R)-6-苄氧基-12-[[4-(3-甲基环丁基)苯基]甲基]-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(20mg，0.0254mmol)和N-[(6R)-6-苄氧基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(10mg，0.01273mmol)的混合物在室温下在TFA(1mL)中搅拌16小时，并且然后将溶剂蒸发。将残余物溶解于甲醇中并且过滤，然后通过制备型HPLC进行纯化，以得到呈白色固体的(6R)-17-氨基-12-[[4-(1-二环[1.1.1]戊基)苯基]甲基]-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(7mg，46％)。ESI-MS m/z计算值595.2018，实验值596.21(M+1)+；保留时间：2.14分钟(LC方法A)。
实例162：17-氨基-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-15-甲腈(对映异构体1)(化合物196)和17-氨基-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-15-甲腈(对映异构体2)(化合物197)的制备
步骤1：3-氨基-5,6-二溴-吡啶-2-甲酸甲酯
向3-氨基-5-溴-吡啶-2-甲酸甲酯(3.15g，13.63mmol)于乙腈(272.6mL)中的溶液中加入1-溴吡咯烷-2,5-二酮(2.668g，14.99mmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，并从热甲苯重结晶产物，以得到呈淡橙色固体的3-氨基-5,6-二溴-吡啶-2-甲酸甲酯(4.1g，9 7％)。ESI-MS m/z计算值307.8796，实验值310.86(M+1)+；保留时间：0.49分钟(LC方法S)。
步骤2：5,6-二溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸甲酯
5,6-二溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸甲酯使用与方法11的步骤1类似的程序由3-氨基-5,6-二溴-吡啶-2-甲酸甲酯制备。
步骤3：5-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-乙炔基-吡啶-2-甲酸甲酯
向微波小瓶中加入5,6-二溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸甲酯(500mg，1.219mmol)、PdCl2(PPh3)2(42.78mg，0.06095mmol)和CuI(23.22mg，0.1219mmol)。将小瓶密封并用氮气吹扫。加入乙炔基(三甲基)硅烷(119.7mg，1.219mmol)和Et3N(3.398mL，24.38mmol)于二噁烷(4.064mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌16小时。将混合物通过硅藻土过滤，浓缩，并且用乙酸乙酯(2X 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解于THF(2.5mL)中，冷却至0℃，并加入四丁基氟化铵(1.1mL的1M，1.1mmol)作为THF中的溶液。移除冰浴，并且将混合物搅拌10分钟。将混合物浓缩并且通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化以得到呈白色固体的5-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-乙炔基-吡啶-2-甲酸甲酯(130mg，30％)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.06(s,1H),8.77(s,1H),4.67(s,1H),3.87(s,3H),1.49(s,9H)ppm。ESI-MS m/z计算值354.0215，实验值355.03(M+1)+；保留时间：0.54分钟(LC方法R)。
步骤4：3-溴-5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-甲氧基羰基-吡啶-2-甲酸
向圆底烧瓶中加入5-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-6-乙炔基-吡啶-2-甲酸甲酯(131mg，0.3688mmol)、过氧单硫酸钾(225.6mg，0.3688mmol)、NaHCO3(77.45mg，0.9220mmol)和钌碳(7.455mg，0.0037mmol，5％w/w)。向反应混合物中加入MeCN(1.048mL)和水(1.048mL)的1:1混合物，并在室温下搅拌3小时。然后加入更多的过氧单硫酸钾(225.6mg，0.3688mmol)，并且将混合物搅拌另外2小时。将混合物通过用乙酸乙酯洗涤的硅藻土过滤。将滤液用柠檬酸(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(2X 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到3-溴-5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-甲氧基羰基-吡啶-2-甲酸(138.4mg，定量)：ESI-MS m/z计算值374.01135，实验值376.94(M+1)+；保留时间：0.37分钟(LC方法R)。
步骤5：5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸甲酯
向3-溴-5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-甲氧基羰基-吡啶-2-甲酸(130mg，0.3465mmol)于DMF(1.494mL)中的溶液中加入N-丁-3-烯基-3,3-二氟环丁烷胺(117.6mg，0.4159mmol)和DIEA(361.1μL，2.073mmol)，随后加入HATU(262.6mg，0.6906mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟。加入水，并且用乙酸乙酯(2X 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸甲酯(96mg，53％)。ESI-MS m/z计算值517.1024，实验值519.07(M+1)+；保留时间：0.61分钟(LC方法R)。
步骤6：5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸
向5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸甲酯(96mg，0.19mmol)于THF(960μL)中的溶液中加入甲醇(960μL)和水(480μL)。加入氢氧化锂(84.94mg，3.547mmol)，并将混合物在60℃下加热1小时。在减压下去除THF和甲醇。加入1M HCl溶液，直至呈酸性，然后将水层用乙酸乙酯(3X 75mL)萃取。将有机相合并，用盐水(75mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到呈白色固体的5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸(93mg，定量：ESI-MS m/z计算值503.08673，实验值504.12(M+1)+；保留时间：0.56分钟(LC方法R)。
步骤7：N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
向5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-甲酸(93mg，0.1844mmol)于DMF(1.19mL)中的溶液中加入2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰肼(盐酸盐)(60.72mg，0.187mmol)、DIEA(97.55μL，0.56mmol)，随后加入HATU(84.14mg，0.2213mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。将反应用乙酸乙酯(3X 20mL)萃取。将有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。然后将残余物通过使用0％至70％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法(12克柱)进行纯化，以得到N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(105mg，74％)。ESI-MS m/z计算值773.18475，实验值774.25(M+1)+；保留时间：0.8分钟(LC方法R)。
步骤8：N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[[[2-苄氧基-2-(三氟甲基)戊-4-烯酰基]氨基]氨基甲酰]-5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(105mg，0.1356mmol)和DIEA(82.08μL，0.4712mmol)于乙腈(2.4mL)中的溶液加热至60℃，然后加入对甲苯磺酰氯(31.02mg，0.1627mmol)。将所得混合物在60℃下加热30分钟。冷却后，加入饱和碳酸氢钠(25mL)，并将混合物用乙酸乙酯(3X 25mL)萃取。将有机物分离，经硫酸钠干燥并蒸发。然后将粗材料通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法(12克柱)进行纯化，以得到呈白色固体的N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(75mg，73％)：ESI-MS m/z计算值755.1742，实验值756.21(M+1)+；保留时间：0.72分钟(LC方法T)。
步骤9：N-[6-苄氧基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
向经氮气吹扫的烧瓶中加入1,2-二氯乙烷(17.36mL)中的N-[2-[5-[1-苄氧基-1-(三氟甲基)丁-3-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-溴-6-[丁-3-烯基-(3,3-二氟环丁基)氨基甲酰]-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(75mg，0.09913mmol)，并且将其加热至60℃。然后通过注射器加入1,2-二氯乙烷(2mL)中的二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基][[5-[(二甲基氨基)磺酰]-2-(1-甲基乙氧基-O)苯基]亚甲基-C]钌(II)(18.18mg，0.02478mmol)，并且将溶液加热至60℃并且搅拌45分钟。将反应混合物浓缩，并且通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的N-[6-苄氧基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(65mg，90％)：ESI-MS m/z计算值727.1429，实验值728.2(M+1)+；保留时间：0.67分钟(LC方法T)。
步骤10：N-[6-苄氧基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
在氮气气氛下向N-[6-苄氧基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,8,14(18),15-六烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(60mg，0.08236mmol)于乙酸乙酯(4.154mL)中的溶液中加入铑铝(16.63mg的5％w/w，0.00808mmol)。将反应置于氢气气氛下，并且在室温下搅拌4小时，然后经硅藻土过滤并浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的N-[6-苄氧基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(40mg，66％)：1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ9.77(s,1H),9.27(s,1H),7.34-7.24(m,5H),4.94-4.73(m,2H),4.38-4.19(m,1H),3.22(t,J＝8.0Hz,2H),3.00(m,4H),2.55(m,J＝13.8,8.2,4.5Hz,1H),2.21(m,J＝13.8,5.6Hz,1H),2.04(s,2H),1.84(m,J＝12.6,6.0,5.4Hz,1H),1.72(m,J＝9.3,5.1Hz,1H),1.62(s,1H),1.56(s,10H)ppm。ESI-MS m/z计算值729.1585，实验值730.1(M+1)+；保留时间：0.66分钟(LC方法T)。
步骤11：17-氨基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-13-酮
将TFA(800μL)加入到N-[6-苄氧基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯(42mg，0.05749mmol)中，并且在室温下搅拌过夜。将混合物浓缩后，将残余物溶解于DCM中，并且用饱和NaHCO3水溶液洗涤，然后用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过使用0％至40％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行的纯化得到呈白色固体的17-氨基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-13-酮(29mg，93％)：ESI-MS m/z计算值539.05914，实验值540.0(M+1)+；保留时间：0.37分钟(LC方法R)。
步骤12：17-氨基-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-15-甲腈(对映异构体1)(化合物196)和17-氨基-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-15-甲腈(对映异构体2)(化合物197)
在微波小瓶中，将17-氨基-15-溴-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(17),2,4,14(18),15-五烯-13-酮(10mg，0.01851mmol)溶解于DMF(200μL)中，并且向混合物中加入二氰基锌(3.252mg，0.02769mmol)，随后加入四(三苯基膦)钯(0)(1mg，0.87μmol)。将混合物用氮气吹扫，并在微波合成器中在105℃下加热48小时。将混合物冷却至室温，通过硅藻土过滤，并用乙酸乙酯(3X 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。使用具有使用14.5分钟内5％至15％的MeOH(+20mM NH3)/CO2的双梯度运行的IG柱(250X 21.2mm，5mm粒度，由手性技术公司出售)的正常相SFC-MS方法进行的纯化得到第一洗脱液17-氨基-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-15-甲腈(对映异构体1)(4mg，44％)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.57(s,1H),6.09(s,2H),4.42(m,1H),3.47(m,J＝15.3,12.3,3.6Hz,1H),3.18(m,J＝14.8,13.0,5.3Hz,1H),3.10-2.86(m,4H),2.48(m,J＝13.9,8.5,4.8Hz,2H),2.29(m,J＝15.0,7.6,4.8Hz,1H),1.78(q,J＝6.4,4.9Hz,3H),1.34(m,J＝11.9,9.5,5.4Hz,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值486.1439，实验值487.18(M+1)+；保留时间：1.44分钟(LC方法A)。
得到第二洗脱液17-氨基-12-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-13-氧代-6-(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-15-甲腈(对映异构体2)(4mg，44％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.57(s,1H),6.10(s,2H),4.43(m,J＝8.7,3.7Hz,1H),3.57-3.37(m,1H),3.29-3.12(m,1H),3.02(m,J＝15.0,6.9,6.3,4.1Hz,3H),2.48(m,J＝13.9,8.6,5.0Hz,2H),2.29(m,J＝10.3,7.7,3.8Hz,1H),1.92-1.69(m,3H),1.42-1.27(m,2H),1.01-0.80(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值486.1439，实验值487.18(M+1)+；保留时间：1.43分钟(LC方法N)。
方法14：通过大环原子化途径进行的最终产物合成
步骤1：还原胺化
将适当的醛(例如，6-[5-[1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯、6-[5-[(1R)-1-苄氧基-6-氧代-1-(三氟甲基)己基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯、6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯、5-(叔丁氧基羰基氨基)-6-[5-[2,2,2-三氟-1-[2-氟-5-(3-氧代丙基)苯基]-1-羟基-乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯或6-[5-[1-苄氧基-2,2,2-三氟-1-(3-氧代丙氧基甲基)乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯)(1当量)与异丙胺(约5当量)在二氯甲烷或MeOH-乙酸混合物(2至5体积当量)中合并，并且在室温下搅拌约30分钟。然后加入还原剂、三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠(约5当量)，并将反应混合物在室温下搅拌另外30至60分钟。通过LCMS监测反应进展。反应完成后，将反应用乙酸乙酯稀释，并且用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。将有机溶液经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过使用乙酸乙酯/己烷或DCM/MeOH的硅胶色谱法纯化以得到所需仲胺。
步骤2：皂化
将氨基酯中间体(1当量)溶解于二噁烷/水中或MeOH/THF/水中(5至10体积当量)，并加入LiOH或NaOH(约5当量)。在室温下将反应混合物搅拌几小时过夜。通过LCMS监测反应进展。反应完成后，用乙酸乙酯和饱和氯化铵水溶液稀释。用1N HCl将水pH调整至约5。将所得两个层分离，并且用乙酸乙酯萃取水层。将合并的有机层用1N HCl和盐水洗涤，然后在真空下浓缩以得到所需酸。
步骤3：大环原子化
向氨基酸(1当量)于DMF(300至500体积当量)中的溶液中加入DIEA(约5当量)，然后加入HATU(约1.5当量)。将反应混合物在室温下搅拌几个小时，同时通过LCMS监测反应进展。反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯和水稀释。将两个层分离，并且将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将残余物通过使用乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法纯化，得到所需大环。
步骤4：氢化
使用乙酸乙酯、乙醇或甲醇(10至50体积当量)中的10％ Pd/C(0.2至0.5当量)进行大环(1当量)的脱苄基，同时在氢气球(1个气体气氛)下搅拌12至24小时。通过硅藻土垫滤出催化剂。将滤液在真空下浓缩以得到所需醇。
步骤5：N-Boc脱保护
将经N-Boc保护的大环(1当量)溶解于DCM或水(约20体积当量)中，并且向混合物中加入TFA(约20当量)，并且将混合物在室温下搅拌数小时，同时通过LCMS监测反应进展。在起始材料被消耗后，将溶剂蒸发，并且将残余物溶解于DCM中，然后用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到所需产物。
步骤6：手性分离
将外消旋化合物通过使用合适的手性柱和流动相的手性SFC纯化，如表6中所示，得到第一洗脱对映异构体，对映异构体1和稍后的洗脱对映异构体，对映异构体2。
通过方法14进行的最终化合物的代表性合成(大环原子化途径)：
实例163：16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(对映异构体1)(化合物198)和16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(对映异构体2)(化合物199)的制备
步骤1：6-[5-[1-苄氧基-5-[(3,3-二氟环丁基)氨基]-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下向3,3-二氟环丁烷胺(盐酸盐)(832mg，5.6795mmol)于甲醇(4.5mL)和乙酸(0.5mL)的溶剂混合物中的溶液中加入氰基三硼氢化钠(140mg，2.2278mmol)。在0℃下逐滴加入6-[5-[1-苄氧基-5-氧代-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(382mg，0.5613mmol)于甲醇(1.8mL)和乙酸(0.2mL)中的溶液。将反应在相同温度下搅拌10分钟，然后升高到室温并且搅拌1小时。将反应用乙酸乙酯(100mL)稀释，并且用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)和盐水(20mL)洗涤。将有机溶液经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过使用0至70％乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈黄色凝胶的6-[5-[1-苄氧基-5-[(3,3-二氟环丁基)氨基]-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(347mg，83％)。ESI-MS m/z计算值737.246，实验值738.5(M+1)+；保留时间：3.69分钟(LC方法G)。
步骤2：6-[5-[1-苄氧基-5-[(3,3-二氟环丁基)氨基]-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
向6-[5-[1-苄氧基-5-[(3,3-二氟环丁基)氨基]-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(347mg，0.4657mmol)于二噁烷(3mL)和水(3mL)的溶液中加入LiOH(69mg，2.8812mmol)。在室温下将反应混合物搅拌3小时。将反应用乙酸乙酯(50mL)与饱和氯化铵水溶液(30mL)稀释。用1N HCl将水pH调整至5。将两层分离，并且将水层用乙酸乙酯(2X 50mL)萃取。用1N HCl(2X 20mL)和盐水(50mL)洗涤合并的有机层，然后在真空下浓缩，以得到呈澄清凝胶的6-[5-[1-苄氧基-5-[(3,3-二氟环丁基)氨基]-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(362mg，91％)。ESI-MS m/z计算值723.2303，实验值724.5(M+1)+；保留时间：3.24分钟(LC方法G)。
步骤3：N-[6-苄氧基-11-(3,3-二氟环丁基)-12-氧代-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(16),2,4,13(17),14-五烯-16-基]氨基甲酸叔丁酯
向圆底烧瓶中装入6-[5-[1-苄氧基-5-[(3,3-二氟环丁基)氨基]-1-(三氟甲基)戊基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-5-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(342mg，0.4005mmol)于DMF(150mL)中的溶液。将DIEA(259.70mg，0.35mL，2.0094mmol)加入到反应混合物中，随后加入HATU(229mg，0.6023mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将反应用乙酸乙酯(150mL)和水(150mL)稀释。将两层分离，并且将水层用乙酸乙酯(2X 150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3X 100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至20％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈白色泡沫的N-[6-苄氧基-11-(3,3-二氟环丁基)-12-氧代-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(16),2,4,13(17),14-五烯-16-基]氨基甲酸叔丁酯(93mg，33％)。ESI-MS m/z计算值705.2197，实验值706.3(M+1)+；保留时间：4.09分钟(LC方法G)。
步骤4：N-[11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-12-氧代-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(16),2,4,13(17),14-五烯-16-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-苄氧基-11-(3,3-二氟环丁基)-12-氧代-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(16),2,4,13(17),14-五烯-16-基]氨基甲酸叔丁酯(93mg，0.1318mmol)于乙酸乙酯(10mL)中的溶液中加入10％ Pd/C(70mg，10％w/w，0.0658mmol)。将反应在1大气压的氢气下搅拌24小时。通过硅藻土垫滤出催化剂。将滤液在真空下浓缩，以得到呈澄清凝胶的N-[11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-12-氧代-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(16),2,4,13(17),14-五烯-16-基]氨基甲酸叔丁酯(82mg，定量)。ESI-MS m/z计算值615.1728，实验值616.4(M+1)+；保留时间：3.61分钟(LC方法G)。
步骤5：16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮
在0℃下向N-[11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-12-氧代-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(16),2,4,13(17),14-五烯-16-基]氨基甲酸叔丁酯(82mg，0.1332mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(3.7g，2.5mL，32.45mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠(50mL)稀释，从而使水相达到pH＝7。将两层分离，并且将有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过使用0％至50％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(27.9mg，39％)：1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.76(s,1H),7.59(s,1H),7.06(s,2H),4.22–4.11(m,1H),3.61–3.39(m,1H),3.24–3.13(m,1H),3.12–2.84(m,4H),2.40–2.24(m,2H),2.19–2.07(m,1H),2.05–1.94(m,1H),1.58–1.22(m,2H)ppm。ESI-MS m/z计算值515.1204，实验值516.1(M+1)+；保留时间：2.48分钟(LC方法H)。
步骤6：16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(对映异构体1)(化合物198)和16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(对映异构体2)(化合物199)
将16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(28mg，0.05433mmol)以6mg/mL溶解于乙腈中，并且通过具有200μL注射物的制备型SFC通过经21.2X250mm AD柱，5μm粒度洗脱5mM NH3/甲醇与CO2梯度(以60毫升/分钟在10分钟内10％至60％)的制备型SFC纯化，得到待洗脱的第一产物和白色固体16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(对映异构体1)(7mg，25％)1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.71(s,1H),4.27(m,J＝8.5,3.4Hz,1H),3.59(s,1H),3.25(s,1H),3.11-3.02(m,1H),2.96(m,J＝15.0,7.5Hz,2H),2.48(d,J＝46.1Hz,2H),2.16(s,2H),1.57(d,J＝20.4Hz,1H),1.33(s,2H)ppm；19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ-61.55,-81.07,-84.99(d,J＝199.0Hz),-102.39(d,J＝198.5Hz)ppm。ESI-MS m/z计算值515.12036，实验值516.1(M+1)+；保留时间：1.24分钟(LC方法Q)。
继续洗脱得到16-氨基-11-(3,3-二氟环丁基)-6-羟基-6,14-双(三氟甲基)-18-氧杂-3,4,11,17-四氮杂三环[11.3.1.12,5]十八碳-1(17),2,4,13,15-五烯-12-酮(对映异构体2)(7.5mg，27％)1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.71(s,1H),4.37-4.21(m,1H),3.59(s,1H),3.25(s,1H),3.00(m,3H),2.53(s,1H),2.42(s,1H),2.16(s,2H),1.57(d,J＝22.8Hz,1H),1.31(d,J＝18.4Hz,2H)ppm；19FNMR(376MHz,甲醇-d4)δ-61.55,-81.09,-84.99(d,J＝198.5Hz),-102.39(d,J＝199.0Hz)ppm；UV/visλ最大值230,281,356nm；ESI-MS m/z计算值515.12036，实验值516.1(M+1)+；保留时间：1.25分钟(LC方法Q)。
表5：由方法14制备并且遵循代表性实例163所描述的程序的最终实例
表6：特征数据和手性SFC条件(如果需要的话)用于由方法14制备的最终化合物
实例235：3-[[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]甲基]苄腈(化合物271)的制备
步骤1：3-[[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]甲基]苄腈(化合物271)
向DMF(200μL)中的(6R)-17-氨基-12-[(3-溴苯基)甲基]-6-羟基-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-13-酮(12mg，0.02mmol)加入氰化锌(2.7mg，0.023mmol)，随后加入Pd(PPh3)4(2.7mg，0.0023mmol)。将反应混合物在氮气下在90℃下搅拌5小时，然后冷却并用乙酸乙酯稀释并用水分配。将水层用乙酸乙酯(2X 100mL)萃取，并且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过使用0％至30％乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶色谱法进行的纯化得到呈白色固体的3-[[(6R)-17-氨基-6-羟基-13-氧代-6,15-双(三氟甲基)-19-氧杂-3,4,12,18-四氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-12-基]甲基]苄腈(5mg，41％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.76(s,1H),7.67(dd,J＝15.8,8.1Hz,3H),7.53(t,J＝7.7Hz,1H),5.05(d,J＝15.5Hz,1H),4.64(d,J＝15.4Hz,1H),3.26(d,J＝3.6Hz,1H),3.09(m,1H),2.52-2.38(m,2H),2.30-2.17(m,1H),1.97(d,J＝5.5Hz,1H),1.80(m,1H),1.72-1.58(m,1H),1.17(m,1H),0.91(dd,J＝13.9,9.2Hz,1H)ppm。ESI-MS m/z计算值554.1501，实验值555.1(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法N)。
实例236：生物活性测定
CFTR介导的短路电流的尤斯室测定
使用衍生自CF受试者的F508del和最小功能CFTR突变(F508del/MF-HBE)杂合的人支气管上皮(HBE)细胞进行尤斯室实验，并且如先前所述(Neuberger T,Burton B,ClarkH,Van Goor F；《分子生物学方法(Methods Mol Biol)》2011:741:39-54)进行培养。在四天之后，移除顶端培养基，并且在使用前在空气液体界面生长细胞>14天。这产生有纤毛的完全分化的柱状细胞的单层，所述细胞的特征是人支气管气道上皮的特征。
为了分离CFTR介导的短路(ISC)电流，将在SnapwellTM细胞培养插片上生长的F508del/MF-HBE放置在尤斯室中，并且在37℃下在电压钳记录条件(Vhold＝0mV)下测量经上皮ISC。基底侧溶液含有(以mM为单位的)145NaCl、0.83K2HPO4、3.3KH2PO4、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖，10HEPES(用NaOH将pH调整至7.4)，并且顶端溶液含有(以mM为单位的)145个葡萄糖酸钠、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖，10HEPES(用NaOH将pH调整至7.4)以及30μM阿米洛利(amiloride)以阻断上皮钠通道。将佛司可林(forskolin)(20μM)加入到顶端表面以活化CFTR，随后顶端加入由BPO、GlyH-101和CFTR抑制剂172(各自以20μM最终测定浓度)组成的CFTR抑制剂混合物以特异性分离CFTR电流。根据抑制后对稳态电流的佛司可林峰响应确定每种条件下的CFTR介导的ISC(μA/cm2)。
增效剂化合物的鉴定
在尤斯室研究中如上所述确定了CFTR增效剂化合物对CFTR介导的ISC的活性。在37℃下并且在存在20％人血清的情况下将F508del/MF-HBE细胞培养物用以一定浓度范围的增效剂化合物与10μM的(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮相组合进行温育持续18–24小时。将增效剂化合物的浓度和在18-24小时温育期间使用的(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮在贯穿CFTR-介导的ISC的尤斯室测量期间保持恒定，以确保贯穿整个实验都存在化合物。将假定的F508del增效剂的功效和效力与已知增效剂依伐卡托(ivacaftor)(N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺)的功效和效力进行比较。
下表表示了使用此实例中所描述的测定产生的本发明的代表性化合物的CFTR调节活性(EC50：+++为<500μM；++为500nM–1μM；+为>1μM；并且ND为“在此测定中未确定”)。
表7：生物活性
其它实施例
前述论述仅公开并描述了本公开的示例性实施例。所属领域的技术人员将从此类论述以及从附图和权利要求书中容易地认识到，在不脱离如以下权利要求书中限定的本公开的精神和范围的情况下，可在其中进行各种改变、修改和变化。

Claims (47)

1.一种化合物，其选自式I的化合物：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-C(RX1)2-、-CO-、-Si(RZ3)2-和
环A是选自苯基和5至6元杂芳基的环基团，其中所述环基团任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代；
每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、-ORX2和-N(RX2)2的基团取代)、C3-C8环烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基；
每个RX2独立地选自H和C1-C6烷基；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-O-、-CO-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基和Q的基团取代)、C3-C8环烷基、C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、5至10元杂芳基、-ORY1、-CO2RY1、-CORY1、-CON(RY1)2和-N(RY1)2；
或两个RY一起形成π键，所述两个RY中的一个在一个原子上并且其中的第二个在邻近原子上；
每个RY1独立地选自氢和C1-C6烷基，或与同一个氮键合的两个RY1一起形成3至6元杂环基；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-5个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟代烷基、C1-C6氟代烷氧基和卤素的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H、C1-C4烷基(任选地被氧代取代)以及C3-C6环烷基；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基、
■5至10元杂芳基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个Q独立地选自：
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○卤素、
○氧代、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素和-OCF3的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、-NH2和-NHCOMe的基团取代)、
○C1-C6烷氧基、
○C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)以及
○C3-C8环烷基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素、
○CN、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和羟基的基团取代)、
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆卤素、
◆C3-C8环烷基(任选地被CF3取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、CF3、OCF3和C1-C6烷基的基团取代)以及
○C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素、
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个CF3基团取代)以及
○3至10元杂环基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)以及
○氧代；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基(任选地被选自羟基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基的基团取代)、-OR2、-N(R2)2、-CO2R2、-CO-N(R2)2、-CN、C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5至6元杂芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、3至6元杂环基、-B(OR2)2、-SO2R2、-SR2、-SOR2、-PO(OR2)2和-PO(R2)2；
每个R2独立地选自氢、C1-C6烷基(任选地被1-6个独立地选自卤素的基团取代)、C1-C6氟代烷基和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基和C1-C6氟代烷氧基的基团取代)；
Z选自
其中环C选自C6-C10芳基和5至10元杂芳基；
RZ1选自氢、-CN、C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、C1-C6氟代烷基、3至6元杂环基、C3-C6环烷基、C6-C10芳基和5至6元杂芳基；
RZ2选自氢、卤素、羟基、NH2、NH(CO)(C1-C6烷基)以及C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C3-C10环烷基的基团取代)，
或RZ1和RZ2一起形成选自氧代和＝N-OH的基团；
每个RZ3独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基和C6-C10芳基；或两个RZ3一起形成3至6元杂环基；
n选自4、5、6、7和8；并且
m选自0、1、2和3。
2.根据权利要求1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环A是选自苯基、吡唑和噁二唑的环基团。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RX1独立地选自H、C1-C6烷基、卤素、氰基、-ORX2和C1-C6氟代烷基。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RX2独立地选自H和C1-C4烷基。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RX1独立地选自H、F、-CF3、-CH3、-OH、-OCH3和CN。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中X选自：
-CO-、-CH2-、
7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个Y独立地选自-C(RY)2-、-CO-、-NRYN-和
8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RY独立地选自H、-OH、-F和-CH3。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个RYN独立地选自：
■H、
■-CH2CF3、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○氧代、
○环丙基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环丁基、
○任选地被1-2个氟代基团取代的环己基、
○螺[2.2]戊烷、
○双环[4.1.0]庚烷、
○二螺[2.0.24.13]庚烷、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的苯基：F、Cl、Br、CN、甲基、丙基(任选地被一个羟基取代)、叔丁基、新戊基、-CHF2、-CF3、-C(CH3)2CF3、-OCH3、-O(2-丙基)、-OCHF2、-OCF3、-OCF2CHF2、-OCH2CF3、环丙基(任选地被一个CF3取代)、环丁基(任选地被1-2个选自氟代和甲基的基团取代)、螺[2.2]戊烷、双环[1.1.1]戊烷、双环[4.1.0]庚烷、二螺[2.0.24.13]庚烷、苯基、萘基以及
○萘基、
○2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃、
○2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯、
○四氢-2H-吡喃、
○任选地被一个选自甲基和丙基的基团取代的吡唑、
○任选地被一个选自甲基、叔丁基、CF3、-O(环丁基)、-OCHF2、任选地被一个CF3取代的环丙基、以及哌啶的基团取代的吡啶以及
○任选地被一个选自甲基和叔丁基的基团取代的嘧啶、
■任选地被1-2个选自甲基、叔丁基、环丙基和苯基(任选地被一个叔丁基取代)的基团取代的环丙基、
■任选地被1-3个选自氟代、甲基和苯基的基团取代的环丁基、
■环戊基、
■任选地被1-2个选自氟代、甲基、叔丁基、氰基、-CF3、-CH2NH2和-CH2NHAc的基团取代的环己基、
■任选地被一个选自氟代、甲基和叔丁基的基团取代的双环[1.1.1]戊烷、
■任选地被一个-OCH3基团取代的双环[2.2.1]庚烷、
■双环[2.2.2]辛烷、
■任选地被1-2个氟代基团取代的螺[3.3]庚烷、
■苯基、
■四氢-2H-吡喃、
■任选地被一个选自-COMe和-CO(环丙基)的基团取代的2-氮杂螺[3.3]庚烷、
■1,1-二氧化硫杂环丁烷、
■1,1-二氧化四氢-2H-噻喃、
■任选地被一个甲基取代的吡唑以及
■吡啶。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中每个RYN独立地选自：
H、-CH3、
12.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环B选自：
14.根据权利要求1至13中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个R2为H。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个R1独立地选自C1-C6氟代烷基、-N(R2)2和-CN。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个R1独立地选自-CF3、-NH2和-CN。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中RZ1选自C1-C6氟代烷基。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中RZ2选自卤素和羟基。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中Z选自
20.根据权利要求1至19中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中Z选自：
21.根据权利要求1至20中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中n选自5、6和7。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中
X选自-CH2-和-CO-；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、卤素和C1-C6烷基；
每个RYN独立地选自：
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C4烷基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○C1-C6烷基、
○C1-C6氟代烷氧基以及
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
■任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C8环烷基，环B选自C3-C8环烷基，
每个R1独立地选自C1-C6氟代烷基和-NH2；
Z选自
RZ1选自C1-C6氟代烷基；
RZ2为羟基；
n为6；并且
m为2。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个-C(RY)2-独立地选自：
-CH2-、
24.根据权利要求1至23中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个其中每个-NRYN-独立地选自：
25.根据权利要求1至24中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环B为
26.根据权利要求1至25中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中-(Y)n-是选自以下的基团：
27.根据权利要求1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式Ia：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；
n选自5、6和7；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-NRYN-、和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C4烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被C1-C6烷基取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至6元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H和C1-C4烷基(任选地被氧代取代)；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基、-N(R2)2和-CN；并且
每个R2独立地选自氢、C1-C3烷基以及C1-C6氟代烷基。
28.根据权利要求1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式Ia'：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；
n选自5、6和7；
每个Y独立地选自-C(RY)2-、-NRYN-和
每个RY独立地选自氢、羟基、卤素和C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)；
每个RYN独立地选自：
■H、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C4烷基：
○氧代、
○C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素、
◆氰基、
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个羟基取代)、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6烷氧基(任选地被C3-C8环烷基取代，所述环烷基任选地被C1-C6氟代烷基取代)、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟代烷基的基团取代)以及
◆苯基(任选地被C1-C6烷基取代)、
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至6元杂芳基：
◆卤素、
◆C1-C6烷基、
◆C1-C6氟代烷基、
◆C1-C6氟代烷氧基、
◆-O(0-1)(C3-C8环烷基)(任选地被C1-C6氟代烷基取代)以及
◆3至12元杂环基以及
○3至12元杂环基(任选地被1-3个选自卤素和C1-C6烷基的基团取代)、
■C1-C6氟代烷基、
■C6-C10芳基、
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C8环烷基：
○卤素、
○氰基、
○任选地被1-3个选自-N(RYN1)2的基团取代的C1-C4烷基、
○C1-C6氟代烷基、
○C1-C6烷氧基、
○C3-C8环烷基以及
○苯基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)、
■任选地被1-3个选自氧代和C1-C4烷基(任选地被1-2个选自氧代和C3-C8环烷基的基团取代)的基团取代的3至12元杂环基、
■5至6元杂芳基(任选地被1-3个选自C1-C6烷基的基团取代)以及
■CO2RYN1，
每个RYN1独立地选自H和C1-C4烷基(任选地被氧代取代)；
环B选自：
■C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代)、
■C3-C8环烷基以及
■3至6元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)；
每个R1独立地选自卤素、C1-C6氟代烷基、C1-C6烷基、-N(R2)2和-CN；并且
每个R2独立地选自氢、C1-C3烷基以及C1-C6氟代烷基。
29.根据权利要求27或权利要求28所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中n为6。
30.根据权利要求1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式Ib：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；并且
每个Y独立地选自-CH2-、-C(CH3)2-、-CH(CH3)-、-CF2-、环丁基和-NRYN-，其中每个RYN独立地选自：
■被苯基取代的C1-C4烷基，所述苯基任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6氟代烷氧基和C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基的基团取代)的基团取代，以及
■任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C8环烷基。
31.根据权利要求1所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中所述化合物选自式Ib'：
以及其氘化衍生物和药学上可接受的盐，其中：
X选自-CH2-和-CO-；并且
每个Y独立地选自-CH2-、-C(CH3)2-、-CH(CH3)-、-CF2-、环丁基和-NRYN-，其中每个RYN独立地选自：
■被苯基取代的C1-C4烷基，所述苯基任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基、C1-C6氟代烷氧基和C3-C8环烷基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟代烷基的基团取代)的基团取代，以及
■任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C8环烷基。
32.根据权利要求27至31中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中X为-CO-。
33.根据权利要求27至31中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中X为-CH2-。
34.一种选自表7的化合物的化合物、其药学上可接受的盐以及前述中的任一者的氘化衍生物。
35.根据权利要求1至31或权利要求34中任一项所述的化合物，其中所述化合物选自：
36.一种药物组合物，其包括根据权利要求1至35中任一项所述的化合物、氘化衍生物或药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
37.根据权利要求36所述的药物组合物，其进一步包括一种或多种另外的治疗剂。
38.根据权利要求37所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括具有CFTR调节活性的化合物或其盐或氘化衍生物。
39.根据权利要求37或权利要求38所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括选自以下的一种或多种化合物：
(a)(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺(化合物II)：
(b)3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰氨基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(化合物IV)：
(c)N-(1,3-二甲基吡唑-4-基)磺酰基-6-[3-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基-丙氧基)吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物V)：
(d)N-(苯磺酰基)-6-[3-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙氧基]吡唑-1-基]-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺(化合物VI)：
(e)(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮(化合物VII)：
以及
(f)(11R)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物VIII)：
40.根据权利要求37至39中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括选自以下的化合物：N-(5-羟基-2,4-二-叔丁基-苯基)-4-氧代-1H-喹啉-3-甲酰胺(化合物III)：
以及N-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺(化合物III-d)：
41.一种治疗囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用有效量的根据权利要求1至35中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物或根据权利要求36至40中任一项所述的药物组合物。
42.根据权利要求41所述的方法，其进一步包括施用一种或多种另外的治疗剂。
43.根据权利要求42所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括具有CFTR调节活性的化合物或其盐或氘化衍生物。
44.根据权利要求42或权利要求43所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括选自以下的一种或多种化合物：
(a)化合物II、
(b)化合物IV、
(c)化合物V、
(d)化合物VI、
(e)化合物VII以及
(f)化合物VIII。
45.根据权利要求42至44中任一项所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂包括选自化合物III和化合物III-d的化合物。
46.根据权利要求1至35中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物或根据权利要求36至40中任一项所述的药物组合物，其用于治疗囊性纤维化。
47.一种根据权利要求1至35中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物或根据权利要求36至40中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗囊性纤维化的药物中的用途。
CN202380032421.XA 2022-02-08 2023-02-07 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂 Pending CN118974059A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202263307954P 2022-02-08 2022-02-08
US63/307954 2022-02-08
PCT/US2023/012546 WO2023154291A1 (en) 2022-02-08 2023-02-07 Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN118974059A true CN118974059A (zh) 2024-11-15

Family

ID=85511112

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202380032421.XA Pending CN118974059A (zh) 2022-02-08 2023-02-07 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20250122218A1 (zh)
EP (1) EP4476230A1 (zh)
JP (1) JP2025505643A (zh)
CN (1) CN118974059A (zh)
AU (1) AU2023218262A1 (zh)
CA (1) CA3251045A1 (zh)
WO (1) WO2023154291A1 (zh)

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7495103B2 (en) 2004-06-24 2009-02-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
DK2395002T3 (da) 2005-11-08 2014-09-08 Vertex Pharma Farmaceutisk sammensætning indeholdende en heterocyclisk modulator af ATP-bindende kassettetransportører
CA2635581C (en) 2005-12-28 2017-02-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of n-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
AU2007249269A1 (en) 2006-05-12 2007-11-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions of N-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl)-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
MX2010006183A (es) 2007-12-07 2010-10-15 Vertex Pharma Procesos para producir acidos cicloalquilcarboxamido-piridin benzoicos.
SG186638A1 (en) 2007-12-07 2013-01-30 Vertex Pharma Solid forms of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3] dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl) benzoic acid
US20100074949A1 (en) 2008-08-13 2010-03-25 William Rowe Pharmaceutical composition and administration thereof
HRP20180328T1 (hr) 2008-08-13 2018-04-20 Vertex Pharmaceuticals Inc. FARMACEUTSKI PRIPRAVAK N-[2,4-bis(1,1-DIMETILETIL)-5-HIDROKSIFENIL]-1,4-DIHIDRO-4-OKSOKINOLIN-3-KARBOKSAMIDA I NJEGOVO DAVANJE
MX2011003249A (es) 2008-09-29 2011-05-19 Vertex Pharma Unidades de dosificacion del acido 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1 ,3]dioxol-5-il)ciclopropancarboxamido)-3-metilpiridin-2-il)benzoi co.
HRP20150288T1 (hr) 2008-11-06 2015-04-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulatori atp-vezujuä†ih kasetnih transportera
SMT201700593T1 (it) 2009-03-20 2018-03-08 Vertex Pharma Procedimento per preparare modulatori di regolatore di conduttanza transmembrana di fibrosi cistica
CN106083832A (zh) 2010-03-25 2016-11-09 弗特克斯药品有限公司 (r)‑1(2,2‑二氟苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯‑5‑基)‑n‑(1‑(2,3‑二羟基丙基)‑6‑氟‑2‑(1‑羟基‑2‑甲基丙‑2‑基)‑1h‑吲哚‑5‑基)环丙烷甲酰胺的固体形式
AU2011237368B2 (en) 2010-04-09 2015-07-23 Ekso Bionics Exoskeleton load handling system and method of use
MX2012012204A (es) 2010-04-22 2012-12-05 Vertex Pharma Proceso para producir compuestos de cicloalquilcarboxamido-indol.
WO2011133951A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions and administrations thereof
CA2809263A1 (en) 2010-08-27 2012-03-01 Eleni Dokou Pharmaceutical composition and administrations thereof
HUE047354T2 (hu) 2011-05-18 2020-04-28 Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd Ivacaftor deuterizált származékai
EP2709986B1 (en) 2011-05-18 2017-03-22 Concert Pharmaceuticals Inc. Deuterated derivatives of ivacaftor
CN103946221B (zh) * 2011-09-16 2016-08-03 诺华股份有限公司 用于治疗囊性纤维化的杂环化合物
JP2015511583A (ja) 2012-02-27 2015-04-20 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ 薬学的組成物およびその投与
HK1209318A1 (zh) 2012-07-16 2016-04-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated (r)-1-(2，2-二氟苯[d][1，3]二惡茂-5-基)-n-(1-(2，3-二羥基)-6-氟代-2-(1-羥基-2-甲基丙烷-2-基)-1氫-吲哚-5-基)環丙烷甲酰胺的藥劑學組合物和其應用
SMT201800590T1 (it) 2012-11-02 2019-01-11 Vertex Pharma Composizioni farmaceutiche per il trattamento di malattie mediate da cftr
MY183582A (en) 2012-11-19 2021-02-26 Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd Deuterated cftr potentiators
DK3925607T3 (da) 2014-04-15 2023-08-21 Vertex Pharma Farmaceutiske sammensætninger til behandlingen af cystisk fibrosetransmembrankonduktansregulator-medierede sygdomme
KR102336926B1 (ko) 2014-10-06 2021-12-08 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 낭성 섬유증 막횡단 전도도 조절자의 조정제
SG11201703391VA (en) 2014-10-31 2017-05-30 Abbvie S À R L Substituted chromanes and method of use
MA41253A (fr) 2014-12-23 2017-10-31 Proteostasis Therapeutics Inc Composés, compositions et procédés pour augmenter l'activité du cftr
US9840513B2 (en) 2015-07-16 2017-12-12 Abbvie S.Á.R.L. Substituted tricyclics and method of use
MX388470B (es) 2015-09-21 2025-03-20 Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd Administración de potenciadores de regulador de la conductancia transmembrana de fibrosis quística (cftr) deuterados.
BR112018007021B1 (pt) 2015-10-06 2024-01-09 Proteostasis Therapeutics, Inc Composto, composição compreendendo os ditos compostos e uso dos mesmos para tratar fibrose cística
RU2724345C2 (ru) 2015-10-09 2020-06-23 Галапагос Нв N-СУЛЬФОНИЛИРОВАННЫЕ ПИРАЗОЛО[3,4-b]ПИРИДИН-6-КАРБОКСАМИДЫ И СПОСОБ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
UA124708C2 (uk) 2016-09-30 2021-11-03 Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед Модулятор муковісцидозного регулятора трансмембранної провідності, фармацевтичні композиції, способи лікування та спосіб отримання модулятора
US10399940B2 (en) 2016-10-07 2019-09-03 Abbvie S.Á.R.L. Substituted pyrrolidines and methods of use
AU2017352206B2 (en) 2016-10-27 2022-03-03 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited Methods of treatment with deuterated CFTR potentiators
AU2017371200B2 (en) 2016-12-09 2021-05-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator
US10654829B2 (en) 2017-10-19 2020-05-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms and compositions of CFTR modulators
WO2019109021A1 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
US11465985B2 (en) 2017-12-08 2022-10-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
TWI810243B (zh) 2018-02-05 2023-08-01 美商維泰克斯製藥公司 用於治療囊腫纖化症之醫藥組合物
RS64018B1 (sr) 2018-02-15 2023-03-31 Vertex Pharma Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade
WO2019195739A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Alexander Russell Abela Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
US11414439B2 (en) 2018-04-13 2022-08-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator
BR112021009145A2 (pt) 2018-11-14 2021-08-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated métodos de tratamento para fibrose cística
TWI848092B (zh) 2019-04-03 2024-07-11 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白調節劑
TWI899097B (zh) 2019-08-14 2025-10-01 美商維泰克斯製藥公司 製備cftr調節劑之方法
TWI867024B (zh) 2019-08-14 2024-12-21 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
JP7684279B2 (ja) 2019-08-14 2025-05-27 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子モジュレーター
CR20230120A (es) * 2020-08-07 2023-09-01 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
MX2023005721A (es) * 2020-11-18 2023-07-25 Vertex Pharma Macrociclos que contienen un anillo de 1,3,4-oxadiazol para su uso como moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quistica.

Also Published As

Publication number Publication date
CA3251045A1 (en) 2023-08-17
AU2023218262A1 (en) 2024-08-22
WO2023154291A1 (en) 2023-08-17
JP2025505643A (ja) 2025-02-28
US20250122218A1 (en) 2025-04-17
EP4476230A1 (en) 2024-12-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102482271B1 (ko) 낭포성 섬유증 막관통 전도성 조절인자의 조절제로서의 매크로사이클, 그의 약제학적 조성물, 낭포성 섬유증의 치료에서의 그의 용도, 및 그의 제조 방법
CN116601158B (zh) 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂
TWI867024B (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
EP4225764A1 (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
JP2023549547A (ja) 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子のモジュレーターとして使用するための１，３，４－オキサジアゾール環を含有する大環状化合物
TW202229300A (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
WO2022076625A1 (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
CN113045569B (zh) 用作ret激酶抑制剂的化合物及其应用
JP2024501282A (ja) イミダゾ［１，２－ａ］ピリジニル誘導体と疾患の治療におけるその使用
CN118974059A (zh) 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂
CN116354932A (zh) 嘧啶衍生物及其制备方法和用途
TWI912411B (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
US12324802B2 (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
TW202517241A (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
EA049998B1 (ru) Макроциклы, содержащие 1,3,4-оксадиазольное кольцо для применения в качестве модуляторов регулятора трансмембранной проводимости при муковисцидозе

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination